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      實驗室年終小結(jié)(五篇范文)

      時間:2019-05-12 12:35:09下載本文作者:會員上傳
      簡介:寫寫幫文庫小編為你整理了多篇相關(guān)的《實驗室年終小結(jié)》,但愿對你工作學(xué)習(xí)有幫助,當(dāng)然你在寫寫幫文庫還可以找到更多《實驗室年終小結(jié)》。

      第一篇:實驗室年終小結(jié)

      轉(zhuǎn)眼已經(jīng)走過20***年。這一年是我人生旅途中的重要一程,透視過去的一年在領(lǐng)導(dǎo)的幫助、同事們的關(guān)心、配合下,微生物實驗室的這一塊工作取得了一些成績。在某些方面可以說上了一個新臺階,作為微生物實驗室的化驗員來說,也在從思想到行動,從理論到實踐的一些方面較好地完成了自己的任務(wù)。努力做到了使實驗緊密結(jié)合,不斷提高了自己諸多方面的素質(zhì)?,F(xiàn)將本年度實驗室工作總結(jié)思想政治表現(xiàn)、品德素質(zhì)修養(yǎng)及職業(yè)道德。能夠認(rèn)真貫徹黨的基本路線方針政策,利用電視、電腦、報紙、雜志等媒體關(guān)注國內(nèi)國際形勢,學(xué)習(xí)黨的基本知識和有關(guān)政治思想文件、書籍,深刻領(lǐng)會胡總書記的講話精神,并把它作為思想的綱領(lǐng),行動的指南;遵紀(jì)守法,認(rèn)真學(xué)習(xí)法律知識;愛崗敬業(yè),具有強(qiáng)烈的責(zé)任感和事業(yè)心,積極主動認(rèn)真的學(xué)習(xí)專業(yè)知識,工作態(tài)度端正,認(rèn)真負(fù)責(zé)。專業(yè)知識、工作能力和具體工作。

      在化驗室工作期間1化驗工作精細(xì)瑣碎,但為了搞好工作,我不怕麻煩,向領(lǐng)導(dǎo)請教、向同事學(xué)習(xí)、自己摸索實踐,認(rèn)真學(xué)習(xí)相關(guān)業(yè)務(wù)知識,不斷提高自己的理論水平和綜合素質(zhì)。提高了工作能力,在具體的工作中鍛煉成了一個熟練的化驗員,能夠熟練圓滿地完成化驗工作,受到了領(lǐng)導(dǎo)職工的好評和。

      在這一年,我本著“把工作做的更好”這樣一個目標(biāo),開拓創(chuàng)新意識,積極圓滿的完成了以下本職工作:

      (1)虛心學(xué)習(xí),勤于實際操作,深刻學(xué)習(xí)國標(biāo),理論接合實踐,能熟練操做所有化驗項目并報證結(jié)果的準(zhǔn)確性。

      (2)協(xié)助化驗室主管做好了各類文件資料的登記、上報、下發(fā)等工作,并把原來沒有具體整理的文件按類別整理好放入貼好標(biāo)簽的文件夾內(nèi),給大家查閱文件提供了很大方便,收到了很好的效果

      (3)協(xié)助化驗室主管做好關(guān)于化驗室認(rèn)證的相關(guān)工作。

      (4)認(rèn)真、按時、高效率地做好各級領(lǐng)導(dǎo)交辦的其它工作。

      同時,我還積極配合其他同事做好工作,并在其他同事有事時能夠頂崗。

      3、工作態(tài)度和勤奮敬業(yè)方面。熱愛自己的本職工作,能夠正確認(rèn)真的對待每一項工作,工作投入,熱心為大家服務(wù),認(rèn)真遵守勞動紀(jì)律,保證按時出勤,出勤率高,沒有請假缺崗現(xiàn)象,有效利用工作時間,堅守崗位,需要加班完成工作按時加班加點,保證工作能按時完成。在作風(fēng)上,能遵章守紀(jì)、團(tuán)結(jié)同事、務(wù)真求實、樂觀上進(jìn),始終保持嚴(yán)謹(jǐn)認(rèn)真的工作態(tài)度和一絲不茍的工作作風(fēng),勤勤懇懇,任勞任怨。在生活中發(fā)揚(yáng)艱苦樸素、勤儉耐勞、樂于助人的優(yōu)良傳統(tǒng),始終做到老老實實做人,勤勤懇懇做事,勤勞簡樸的生活。

      4、工作質(zhì)量成績、效益和貢獻(xiàn)。在開展工作之前做好個人工作計劃,有主次的先后及時的完成各項工作,達(dá)到預(yù)期的效果,保質(zhì)保量的完成工作,工作效率高,同時在工作中學(xué)習(xí)了很多東西,也鍛煉了自己,經(jīng)過不懈的努力,使工作水平有了長足的進(jìn)步,開創(chuàng)了工作的新局面,為化驗中心的工作做出了應(yīng)有的貢獻(xiàn)。

      總結(jié)一年的工作,盡管有了一定的進(jìn)步和成績,但在一些方面還存在著不足。比如有創(chuàng)造性的工作思路還不是很多,個別工作做的還不夠完善,這有待于在今后的工作中加以改進(jìn)。以后在化驗中心,我將認(rèn)真學(xué)習(xí)各項政策規(guī)章制度,努力使思想覺悟和工作效率全面進(jìn)入一個新水平,本站現(xiàn)在正在建設(shè)中,新的起點意味著新的機(jī)遇新的挑戰(zhàn),可以預(yù)料我們的工作將更加繁重,要求也更高,需掌握的知識更高更廣。為此,我將更加勤奮的工作,刻苦的學(xué)習(xí),努力提高文化素質(zhì)和各種工作技能,為中心的發(fā)展做出更大的貢獻(xiàn)。一定努力打開一個工作新局面。

      實驗室工作是培養(yǎng)學(xué)生素質(zhì)的一個重要方面,因此,抓好實驗工作管理,以實驗為突破口,通過實驗激發(fā)學(xué)生興趣,提高學(xué)生素質(zhì),是我校整個教學(xué)工作計劃中的重要一環(huán),真正體現(xiàn)管理為教學(xué)服務(wù)的宗旨。現(xiàn)特將本學(xué)期的實驗室管理工作總結(jié)如下:

      1、努力做好實驗室的管理工作

      由于學(xué)校重視實驗管理工作,因此每學(xué)期學(xué)校計劃與總結(jié)都有實驗室工作內(nèi)容,每學(xué)期我都先制定實驗室工作計劃,以便于合理安排實驗室工作。讓實驗室有條不紊地運(yùn)作起來,充分發(fā)揮它潛在的功能。

      2、實驗室工作規(guī)范化

      學(xué)校制定了一整套實驗管理規(guī)則。如實驗教師崗位職責(zé)、學(xué)生實驗守則、儀器管理制度、安全衛(wèi)生制度、賠償制度、危險品管理制度并張貼在墻,所有的自然、科學(xué)教師實驗教師在實施過程中都能嚴(yán)格按以上的制度執(zhí)行。教學(xué)儀器使用時都有嚴(yán)格的借還登記。

      3、儀器管理有序化

      為使儀器管理更加有序,我們本學(xué)期建立了儀器總帳、分類帳、低值易耗品帳、儀器出借領(lǐng)用登記帳。實驗儀器和添置的新設(shè)備及時分門別類入帳,儀器柜按數(shù)學(xué)、自然、玻璃儀器、自制教具等定柜、定位分為十三個柜,有序地擺放好。每個櫥都有反映內(nèi)容的目錄卡,帳物相符、物卡相符、帳物卡相符。

      4、教學(xué)儀器維護(hù)、保養(yǎng)經(jīng)?;?/p>

      根據(jù)儀器不同的要求做好通風(fēng)、防塵、防潮、防銹、防腐蝕工作,對損壞的儀器及時維修及時做好損壞維修記錄使實驗儀器經(jīng)常處理可用狀態(tài)。

      5、實驗教學(xué)與研究方面 為提高實驗室的使用率,學(xué)期初實驗員及實驗教師都擬訂好科學(xué)教學(xué)實驗計劃,編排好實驗課程總表,備好實驗器材。凡教學(xué)大綱與教材規(guī)定做的演示與分組實驗,我們都想辦法給學(xué)生開出。分組實驗的材料有四個來源:

      1、儀器室的儀器

      2、自制自購分組實驗材料及演示教具。

      3、發(fā)動學(xué)生平時注意收集各利廢舊物品。實驗教學(xué)做到規(guī)范化,每次演示與分組實驗都預(yù)先寫好實驗通知單,課堂上的演示、分組實驗有儀器配備、使用情況、過程等整體效果記錄。實驗完畢后的儀器進(jìn)行全面的驗查后整理收放原處,以便下次使用。以保證儀器設(shè)備的充分使用,體現(xiàn)管理為教學(xué)服務(wù),為師生服務(wù)。實驗教師活動納入學(xué)校教研活動中,有專門的自然教研計劃與總結(jié)。從分組實驗的實際情況來看,學(xué)生基本上能掌握實驗基礎(chǔ)及技能,儀器選取,材料或藥物選取,操作程序都較正確合理,操作較規(guī)范熟練,實驗效果良好,取得了較好效果。

      實驗室技術(shù)負(fù)責(zé)人工作總結(jié)

      隨著國家認(rèn)證實驗室評審的日益臨近,我們的實驗室管理、設(shè)備、技術(shù)能力、質(zhì)量意識不斷提高。本質(zhì)量檢測中心質(zhì)量體系運(yùn)行已有一年多時間,為了驗證我們的檢測活動及結(jié)果是否符合體系的要求,同時保證本中心的質(zhì)量方針、目標(biāo)、質(zhì)量體系的適用性、有效性,并得到持續(xù)改進(jìn),現(xiàn)將工作情況匯報如下。

      一.組織貫徹執(zhí)行國家有關(guān)檢測、檢驗的法令、法規(guī)、技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)范。

      通過上網(wǎng)跟蹤查詢,購買最新版本的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)等渠道,不斷更新中心現(xiàn)有的標(biāo)準(zhǔn)資料,并通過外來文件確認(rèn)表及文件定期審查表和文件清單的形式不斷更新。隨著我們質(zhì)量檢測中心的核心標(biāo)準(zhǔn)之一GB/T 3098.1-2010頒布實施,不僅我們的人員需要進(jìn)一步培訓(xùn),我們的體系同時做出了重大的修訂,對于文件定期審查表、外來文件確認(rèn)表的升級,對于新版標(biāo)準(zhǔn)中提出的新的要求進(jìn)行重新學(xué)習(xí)、評估質(zhì)量檢測中心在新版標(biāo)準(zhǔn)下的檢測能力,重新進(jìn)行了抗拉強(qiáng)度和脫碳試驗兩個檢測方法的確認(rèn),對本質(zhì)量檢測中心經(jīng)過嚴(yán)格能力評估以后,認(rèn)為符合新版國家標(biāo)準(zhǔn)的檢測要求。同時又進(jìn)行了合同的評審等等,使得我們質(zhì)量檢測中心能夠迅速適應(yīng)新版標(biāo)準(zhǔn),使用新版標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢測工作。結(jié)果證實我中心采用的標(biāo)準(zhǔn)是持續(xù)和有效的。

      二、作業(yè)指導(dǎo)書的組織制定和批準(zhǔn)

      今年上半年本質(zhì)量檢測中心購入了一臺新型金屬分析光電直讀光譜儀,以替換先前使用的直讀光譜儀,由光譜操作員和本人編制批準(zhǔn)了新型金屬分析光電直讀光譜儀的操作規(guī)程。由于GB/T 3098.1-2010的頒布,使得本質(zhì)量檢測中心的抗拉強(qiáng)度和脫碳試驗這兩個檢測項目發(fā)生了部分變更,又重新對這兩個試驗項目的檢測細(xì)則進(jìn)行了審核,并修改了局部內(nèi)容。

      三、儀器配置工作

      所有檢測儀器均已由第三方計量機(jī)構(gòu)進(jìn)行檢定和校準(zhǔn),并按規(guī)定程序完成金相顯微鏡、影像投影儀、數(shù)顯卡尺、數(shù)顯高度尺、數(shù)顯千分尺、直讀光譜儀等設(shè)備的期間核查,確保設(shè)備在有效期內(nèi)能正常使用。所有的檢測室均配備空調(diào)系統(tǒng)和溫濕度計,每天填寫溫濕度值。經(jīng)檢查表明符合《設(shè)施環(huán)境條件控制程序》的要求,資源配制方面比較合理,完全符合本檢測中心檢測方面的要求。鑒于本質(zhì)量檢測中心的300KN萬能試驗機(jī)年代較為久遠(yuǎn),雖然運(yùn)行正常,但有故障隱患,為了保證檢測工作不受檢測設(shè)備可能的故障影響,今年又添置了一臺新的300KN微機(jī)控制電液伺服萬能試驗機(jī)。而為了完善鋼結(jié)構(gòu)連接副的檢測工作,又配置了一臺10000NM的高強(qiáng)度螺栓軸力扭矩檢測儀。

      四、檢測人員的培訓(xùn)情況

      今年我們又進(jìn)行了ISO17025體系標(biāo)準(zhǔn)及管理文件再次培訓(xùn),進(jìn)一步提高了質(zhì)量檢測中心工作人員對國家認(rèn)證實驗室體系的了解,和以GB/T 3098.1-2010新版標(biāo)準(zhǔn)為主題的內(nèi)部集體培訓(xùn),重點是新舊標(biāo)準(zhǔn)之間的差別,涉及試驗項目、試驗方法、材料等大量內(nèi)容,通過講座和內(nèi)部的筆試考核,使我們的檢測人員能夠?qū)倚掳鏄?biāo)準(zhǔn)貫徹落實;以及磁粉探傷二級、長度計量工這兩個外部培訓(xùn),提高個人的工作技能。

      五、設(shè)備的使用管理監(jiān)督

      完成監(jiān)測儀器與采樣設(shè)備周期檢定或校準(zhǔn)計劃、保證檢測結(jié)果的質(zhì)量計劃、期間核查計劃的實施和審核工作;做好檢測設(shè)備操作人員的資質(zhì)審核,對合格的檢測人員進(jìn)行儀器使用授權(quán);加強(qiáng)對結(jié)果有重要影響的儀器設(shè)備管理,監(jiān)督設(shè)備責(zé)任人定期進(jìn)行保養(yǎng)、維護(hù)和檢查,以保證檢測設(shè)備符合規(guī)定的要求。設(shè)備操作人員每天填寫設(shè)備使用記錄,監(jiān)控設(shè)備的正常運(yùn)行。

      六、能力驗證

      在能力驗證方面,今年我們又進(jìn)行了維氏硬度HV5和直讀光譜儀的不銹鋼元素分析這兩個國際比對試驗,評價結(jié)果均為滿意。同時為了保證我們質(zhì)量檢測中心檢測設(shè)備的檢測結(jié)果,我們又實施了一系列的質(zhì)量監(jiān)控計劃,確保我們的檢測結(jié)果準(zhǔn)確,設(shè)備狀態(tài)良好,能滿足檢測工作的需要。

      七、對不符合工作的評價 今年下半年在檢測工作監(jiān)督中,發(fā)現(xiàn)兩個不符合項,在監(jiān)督周勇的中性鹽霧試驗中發(fā)現(xiàn)《鹽霧腐蝕試驗氯化鈉溶液配制記錄》沒有配置人員簽名;收到監(jiān)督記錄后,要求對《鹽霧腐蝕試驗氯化鈉溶液配制記錄》表單進(jìn)行修改,增加配置人員欄及確認(rèn)人員欄,從制度上杜絕此類事件的連續(xù)發(fā)生;在監(jiān)督抗拉強(qiáng)度試驗中發(fā)現(xiàn)萬能試驗機(jī)的4個固定的地腳螺栓有1個出現(xiàn)松動現(xiàn)象。收到監(jiān)督記錄之后,即排查其他需地面固定的設(shè)備地腳螺栓是否有松動現(xiàn)象,同時對萬能試驗機(jī)的四個地腳螺栓全部給予更換,隨即對更換地腳螺栓前后的數(shù)據(jù)進(jìn)行比對,沒有發(fā)現(xiàn)明顯異常。

      八、存在的不足

      本質(zhì)量檢測中心對于不確定度的測量還存在明顯不足,在國內(nèi)不確定度的評定雖然尚未完全普及,但在國外已經(jīng)相當(dāng)普遍,隨著全球化的不斷深入,不確定度的評定必然成為每個實驗室的基本要求,本實驗室雖然在今年進(jìn)行了小范圍的不確定度的培訓(xùn),但是在這方面還是相差甚遠(yuǎn),需要進(jìn)一步加強(qiáng),不僅通過內(nèi)部培訓(xùn),有必要還可以進(jìn)行外部培訓(xùn)。

      本年度本質(zhì)量檢測中心未發(fā)生一起質(zhì)量檢測事故,證明我們的檢測技術(shù)能力還是基本能滿足當(dāng)前檢測需求的。以上是我在20XX年的主要工作總結(jié),由于水平有限,在工作中難免存在不足之處,但是我將正視困難,團(tuán)結(jié)同志,改進(jìn)不足,力爭使質(zhì)量檢測中心的技術(shù)管理工作更上一層樓

      轉(zhuǎn)眼已經(jīng)走過2011年,這一年是我人生旅途中的重要一程,透視過去的一年在領(lǐng)導(dǎo)的幫助、同事們的關(guān)心、配合下,四樓實驗室的這一塊工作取得了一些成績。在某些方面可以說上了一個新臺階。作為實驗員來說,也在從思想到行動,從理論到實踐的一些方面較好地完成了自己的任務(wù)。努力做到了理論與實驗緊密結(jié)合,不斷提高了自己諸多方面的素質(zhì)?,F(xiàn)將本年度工作總結(jié)如下:

      1、思想政治表現(xiàn)、品德素質(zhì)修養(yǎng)及職業(yè)道德方面

      認(rèn)真貫徹黨的基本路線方針政策,利用電視、電腦、報紙、雜志等媒體關(guān)注國內(nèi)國際形勢,學(xué)習(xí)黨的基本知識和有關(guān)文件、書籍,深刻領(lǐng)會胡總書記的講話精神,并把它作為思想的綱領(lǐng),行動的指南;愛崗敬業(yè),具有強(qiáng)烈的責(zé)任感和事業(yè)心,積極主動認(rèn)真的學(xué)習(xí)專業(yè)知識,工作態(tài)度端正,認(rèn)真負(fù)責(zé)。

      2、專業(yè)知識、工作能力和具體工作方面

      實驗室工作精細(xì)瑣碎,但為了搞好工作,我不怕麻煩,向領(lǐng)導(dǎo)請教、向同事學(xué)習(xí)、自己摸索實踐,認(rèn)真學(xué)習(xí)相關(guān)業(yè)務(wù)知識,不斷提高自己的理論水平和綜合素質(zhì)。在具體的工作中鍛煉成了一個合格的實驗員,能夠熟練圓滿地完成實驗室工作。

      在這一年,我本著“把工作做的更好”這樣一個目標(biāo),開拓創(chuàng)新意識,積極圓滿的完成了以下本職工作:

      (1)虛心學(xué)習(xí),勤于實際操作,深刻領(lǐng)會實驗要領(lǐng),理論結(jié)合實踐,能熟練操做所有實驗并確保實驗的精確性。

      (2)協(xié)助任課教師做好了實驗課程的各類工作,并及時整理實驗內(nèi)容,不斷總結(jié)實驗過程中存在的問題和不足,為以后實驗的更好開展提供了理論依據(jù),收到了較好的效果。(3)修理維護(hù)示波器、萬用表等各類儀器達(dá)80余次,確保了實驗?zāi)茼樌M(jìn)行。

      (4)參照其他高校的實驗室開放細(xì)則,制定了高職學(xué)院電子電工類實驗室開放制度,給同學(xué)們提供了課余時間鍛煉、提高自己動手能力的平臺。

      (5)結(jié)合四樓實驗室儀器不足的特點,編寫了示波器、萬用表的使用大全,涵蓋了在各類實驗中這些儀表的各種用法,既避免了因操作不當(dāng)給儀表帶來的損害,又提高了同學(xué)們對儀表的使用效率。

      3、工作態(tài)度和勤奮敬業(yè)方面

      熱愛自己的本職工作,能夠正確認(rèn)真的對待每一項工作,工作投入,熱心為大家服務(wù),認(rèn)真遵守勞動紀(jì)律,保證按時出勤,有效利用工作時間,堅守崗位,保證工作能按時完成。在作風(fēng)上,能遵章守紀(jì)、團(tuán)結(jié)同事、務(wù)真求實、樂觀上進(jìn),始終保持嚴(yán)謹(jǐn)認(rèn)真的工作態(tài)度和一絲不茍的工作作風(fēng),勤勤懇懇,任勞任怨。在生活中發(fā)揚(yáng)艱苦樸素、樂于助人的優(yōu)良傳統(tǒng),做到老老實實做人,勤勤懇懇做事。

      4、工作質(zhì)量成績、效益和貢獻(xiàn)方面

      在開展工作之前做好個人工作計劃,有主次及時的完成各項工作,達(dá)到了預(yù)期的效果,保質(zhì)保量的完成工作,同時在工作中學(xué)習(xí)了很多東西,也鍛煉了自己,經(jīng)過不懈的努力,使工作水平有了長足的進(jìn)步,為實驗中心的工作做出了應(yīng)有的貢獻(xiàn)。

      總結(jié)一年的工作,盡管有了一定的進(jìn)步和成績,但在一些方面還存在著不足。比如有創(chuàng)造性的工作思路還不是很多,個別工作做的還不夠完善;性格太直,說話不講方式,對別人的包容還不夠,在這里也向被我無意傷害的人真誠的說聲對不起,這些都有待于在今后的工作中加以改進(jìn)。以后在實驗中心,我將認(rèn)真學(xué)習(xí)各項政策規(guī)章制度,努力使自己的思想覺悟和工作效率全面提升到一個新層次。新的起點意味著新的機(jī)遇新的挑戰(zhàn),可以預(yù)料我們的工作將更加繁重,要求也更高,需掌握的知識更多。為此,我將更加勤奮的工作,刻苦的學(xué)習(xí),努力提高文化素質(zhì)和各種工作技能,為高職學(xué)院的發(fā)展做出更大的貢獻(xiàn)。

      第二篇:實驗室生活小結(jié)

      平時在實驗室最常聽到的一句話就是“今天某某試驗沒做好是為什么?今天某某試驗沒出結(jié)果是什么原因?今天某某試驗為什么會是這樣的呢?” 等等。然后仔細(xì)一查找原因,往往是由于操作上面的不認(rèn)真,或是一些小小的細(xì)節(jié)沒有注意到。以下是集各路朋友的一些經(jīng)驗,與大家分享:

      1跑page膠的時候,小電壓跑會避免高電壓產(chǎn)生的熱量爾導(dǎo)致的膠層變形。低電壓泳道會比大電壓泳道跑的直一些,且分離效果更高,有利于分子量相差不大的蛋白分離。

      2.提取質(zhì)粒的時候,最后一步的酒精揮發(fā)很關(guān)鍵,基本上是其后續(xù)的酶切反應(yīng)的決定性因素。所以這一步盡量揮發(fā)長一點時間,最好是空調(diào)吹熱風(fēng),或是37度溫箱放長一點的時間,我試過室溫過夜,酶切很好。3.做WESTERN BLOT 的時候,大家往往會摸索一抗、二抗的濃度,封閉時間,曝光時間等等,而每次變換其中的一個條件就需要從新跑膠、轉(zhuǎn)膜,甚至重新提蛋白,這樣會浪費大量的時間。其實完全沒有必要這樣。一次轉(zhuǎn)膜后,將PVDF膜晾干,裁減成小塊,保存起來,用的時候取出一塊,沒有任何影響。這對于摸索條件的戰(zhàn)友來說,節(jié)約了大量的時間。4.有關(guān)緩沖液和培養(yǎng)基配置

      1)將緩沖液配方中的成分分別以10-100倍配成母液儲存,需要的時候只需將相應(yīng)的母液混合,補(bǔ)加水稀釋即可

      2)配培養(yǎng)基時通常會忘記各成分的量,如配LB時的三個成分不記得到底哪個是5g,哪個要10個,因此可以在常用的試劑瓶的標(biāo)簽上注明所需的量,如配LB時,在NaCl瓶外注明10g/L, yeast 5 g/L, tryton 10 g/L等,很方便,不需要每次配之前臨時翻書 5.有關(guān)PCR主反應(yīng)液配置: 在做克隆鑒定的時候經(jīng)常需要在酶切鑒定前進(jìn)行PCR鑒定,每次配置PCR反應(yīng)液很繁瑣,可以將其配置類似kit的形式,按你需要的反應(yīng)體系列表,然后放大100倍配置100×主反應(yīng)液(100次反應(yīng)),其中含buffer,Mg2+,dNTPs,但不含引物和Taq酶,然后可以10×分裝或一管儲存在-20度,在需要的時候拿出融開,然后按所需的PCR反應(yīng)個數(shù)吸取相應(yīng)的倍數(shù),再補(bǔ)加相應(yīng)反應(yīng)倍數(shù)的Taq和引物,混勻后分裝,這樣做的好處如下:

      1)可極大的節(jié)省寶貴的時間,可早點收工,看球 2)避免每次反應(yīng)加樣不均的可能 3)大大減少PCR假陽性的產(chǎn)生 6.有關(guān)酶切反應(yīng)液的配置: 在做酶切時,也可以象PCR一樣配置主反應(yīng)液,每次反應(yīng)前先列好反應(yīng)的體系,算好需要的反應(yīng)數(shù),然后按所需反應(yīng)的體系按所需反應(yīng)數(shù)放大,加入buffer、酶、水,質(zhì)粒欄空缺,然后混合后按除質(zhì)粒DNA的體積分裝,然后再在每管中加入相應(yīng)體積的質(zhì)粒DNA酶切,這樣做的好處如下,特別是當(dāng)同時有10幾個陽性克隆需要鑒定時尤為明顯: 1)各反應(yīng)成分均一

      2)可大大減少限制型內(nèi)切酶的使用 3)節(jié)省時間

      7.有關(guān)SDS-PAGE:

      1)可將SDS-PAGE的積層膠,分離膠預(yù)先配好大體積如100ml儲存在4度冰箱(注:10%AP,TEMED不加,切記?。。?,每次配置時只需吸取相應(yīng)體積的預(yù)制膠加入AP,TEMED即可,沒必要每次制膠時候翻分子克隆,特別方便,而且,這樣的預(yù)制膠可儲存半年以上,不失為偷懶的絕佳方法;更關(guān)鍵的是可大大減少與丙稀酰胺的接觸,因此大大減少中毒的機(jī)會。

      2)電泳時雖然小電泳分離效果要好一些,但2小時以上的等待的時間實在是痛苦,因此可以提高電泳至150V,但需要將整個電泳槽放在放滿冰水的臉盆里散熱,這樣跑出來的膠分離效果絲毫不比低電壓來的差,關(guān)鍵是時間大大節(jié)省,不需1h即可看結(jié)果了

      8.實驗中小竅門我想能夠分成兩類:一類是“非常規(guī)”操作;一類是常規(guī)操作過程中一些省時省事手段。前一類,我舉個例子:有時候第一天涂的轉(zhuǎn)化平板、次日早晨轉(zhuǎn)化子可能長成的菌落比較大(1~2毫米以上,BL21就長得快),下一步轉(zhuǎn)化子做質(zhì)粒鑒定。這個情況下可以直接挑取一塊菌苔(勿帶出培養(yǎng)基),50微升酚/氯仿懸浮菌體,放置兩分鐘,加40微升TE抽提,上層TE吸出后再氯仿抽提一次,吸取上層TE即是質(zhì)粒提取液。提取的質(zhì)??梢灾苯佑糜陔娪竞兔盖?。這樣操作,可以省去轉(zhuǎn)接液體試管的培養(yǎng)步驟,至少節(jié)省6~8小時的時間。但是,要在各步驟都控制得很好的情況下才能保證提取和酶切的效果,不同的實驗室或者操作者未必能夠很方便地重復(fù)----其實,其它的一些“小竅門”也是如此。

      后一類的小竅門則在實驗室中無處不在。如:平行作不同樣本的PCR,模板DNA加量一樣,配置PCR體系可以一起配制后分裝----這點做過試驗的都知道,但是配制的時候配制量可以比預(yù)期分裝量稍多一點(如用100微升則配110微升),這樣可以避免有時候分裝不夠的尷尬,因為不同特別是大小不同的槍,會有誤差。再比如:樓上有站友說的sds-page膠預(yù)配(APS和TEMED、或者后者先不加)的問題,實際上時間放置過長肯定影響效果,如果要在一天內(nèi)連續(xù)地跑兩次板,何嘗不可?又比如,配sds-page膠的時候,上層膠和下層膠可以只用一個大槍頭:先取膠,次取水,取6.8的tris后再取8.8的tris,省時省料。20021108站友開的這個帖子很好,在上上層樓的帖子說得也有道理。但我想,“竅門”和“偷懶”不應(yīng)該是因果關(guān)系。其實,不管是那一類的小竅門,都是在充分地理解實驗各步驟的原理、經(jīng)過多次試驗積累、再加上一點點思索然后嘗試的結(jié)果。知其然知其所以然和勤于思考敢于探索,是根本。否則,別人的小竅門對你也未必能夠有用。才進(jìn)實驗室的新手,務(wù)必要先練好規(guī)范扎實的操作,然后才能弄“竅門”。本末倒置,貽害無窮。

      9.我一直是把SDS-PAGE的積層膠,分離膠預(yù)先配成mixture,APS制膠時加入,半年內(nèi)使用,絕對沒有問題,我保證。

      10.做SDS-PAGE的時候,除了蛋白量上樣一致,最好體積也一致,這樣跑出來的膠各個泳道之間的band能做到一樣寬,方便后面的比較,特別是WB。做法就是拿1X的上樣緩沖補(bǔ)全要加的樣做到體積一致,否則跑出來會有的寬有的窄,特別是上樣體積相差較大的。

      11.在把蛋白膠做成干膠時,很多時候會因為有氣泡使膠裂掉,我的經(jīng)驗是在做膠時加上層膜前在膠上多加些水就不容易進(jìn)氣泡了,還有就是高溫烘膠,我喜歡放到60度烘箱里烘,這樣水分蒸發(fā)速度快,即使有一些小的氣泡也不會有影響,呵呵,這是經(jīng)驗之談,我從來都沒失手過,大家可以試試

      12.做大腸表達(dá)時確定蛋白是否表達(dá)一般要煮樣做誘前誘后檢測,但很多時候煮出來的很黏影響跑膠效果.我發(fā)現(xiàn)如果現(xiàn)用8M Urea重懸細(xì)菌再煮效果會有極大改善.注:不能用Gu-HCl代替 13.我也推薦幾個偷懶的方法 做SDS-PAGE跑膠通常都是現(xiàn)配現(xiàn)用,但配膠要>1h,所以如果想第二天睡個懶覺而又不耽誤跑膠可以于前一天晚上做好濃縮膠和分離膠,待凝聚后不要拔下梳子,把含膠玻璃板從制膠槽取下,用保鮮膜包上,注意玻璃板上下兩邊緣會有氣體,所以需要加一點電泳緩沖液以避免膠內(nèi)水分蒸發(fā).然后放4度過夜.第二天直接拔下梳子行后續(xù).國外好多公司出售腳既是如此,可以保存上星期.2 配置分離膠或者非變性膠時因膠凝時收縮可導(dǎo)致加樣孔變淺.可以將加剩的膠放入4度以降低凝聚速度,而將凝膠放入37度促聚,并隨時用4度加剩的膠補(bǔ)充下降的膠面.另外將膠橫放與水平面成~10度角也可以減少收縮的影響.3 推薦一個節(jié)約抗體/時間的做法: 同時跑2塊膠,同時轉(zhuǎn)膜,然后兩塊膜背靠背放入同一封口膜同時封閉,同時一抗二抗(最好是用轉(zhuǎn)輪,這樣效果好.如果是搖床,隔一段時間幫它們翻個身以保證兩張膜的正面都有機(jī)會與液體充分接觸.一起洗膜(可以稍微加強(qiáng)洗膜也可以不做.我最多一張盤子里放4張膜而沒有影響洗膜).可分別或同時壓片.這樣就可以節(jié)約一半抗體和接近一半時間而不會影響結(jié)果.或者另外一個就是孵育后的抗體不要扔,好的抗體可以反復(fù)做好幾張膜呢.但每次都會減弱,效果不如上面一種方法.14.做western blotting 轉(zhuǎn)膜時,膠放在轉(zhuǎn)膜緩沖液中一段時間,待膠在含有甲醇的緩沖夜中縮小的差不多后裝好轉(zhuǎn)膜裝置,我的經(jīng)驗是把膜印在膠上直接在膜上畫出預(yù)染maker條帶,方便的很。因為很多時候跑電泳時膠上的預(yù)染maker很清楚,等轉(zhuǎn)膜后就不是分辨的很清楚了。不過要注意畫好預(yù)染maker后就不要使膠和膜發(fā)生對位移動了,以防m(xù)aker失去參照價值。

      15.超濾最合適用于蛋白的濃縮,更換緩沖液和除鹽,對于按照分子量進(jìn)行初分離的效果不是很好,理論和現(xiàn)實是有很大差別的^_^ 16.關(guān)于Western Blot 1)器具的清潔非常重要,開始做前,為了安全,尤其是裝膠的厚薄玻璃板,可以先用中性洗滌劑和自來水反復(fù)沖洗,確保無洗滌殘液后用蒸餾水沖洗2-3遍,然后用去離子水沖洗一遍。最后用95%酒精再擦一遍后晾干備用。

      2)配膠最好現(xiàn)用現(xiàn)配,先配下層膠(分離膠),后配上層膠(濃縮膠或積層膠),而且在臨灌膠前加APS并迅速混勻,即用移液槍抽吸與注入1-2次即可。

      17跑蛋白page的時候,一開始用加樣針,太麻煩,發(fā)現(xiàn)用20ul槍+普通小白槍頭點,非常省事。另外,點樣時有可能看不清孔在哪,看遠(yuǎn)離你的那面膠,孔有反光的。點樣也點你對面的那塊膠,省的總低頭,干咱這行的容易得頸椎呀,愛惜自己。

      18.垂直電泳時,可在電泳糟中放入青霉素小瓶等,可自然使液面提高而不影響電泳,又很節(jié)約電泳緩沖液。

      19.我們有時要沉淀東西時,由于沉淀量很少,離心完之后不知道到底有沒沉淀下來東西,由于量很少,不好觀察,所以離心時建議按特定的方向放置離心管,這樣你就可以在離心之前確定沉淀該沉淀到管子的大致部位,這樣離心后就可直接觀察那有沒有沉淀,避免滿管子找,另外看沉淀時可以對光看,這樣就是顆粒狀的細(xì)小沉淀也能看見的。

      20.大家都知道PMSF有劇毒,以前都是知道濃度和要配的體積的基礎(chǔ)上,算出要稱多少毫克的PMSF,其實也可以先稱PMSF,稱多少算多少,再調(diào)整異丙醇的體積,到達(dá)你所要的濃度。這樣就避免了你長時間和它接觸。

      21.跑好SDS-PAGE膠的一些體會。

      1.清洗好玻璃板,不要偷懶,很多時候跑完電泳撬膠時會因為玻璃板不干凈膠粘在板上把膠撬破。2.配膠時不要反復(fù)用槍混,稍微搖混就可以了,用槍混多次會導(dǎo)致膠凝不好影響電泳圖的分辨率。3.AP分裝成500微升一管保存放-20度,避免AP用太久失效。

      4.倒膠時把玻璃板中的水用濾紙盡量吸干,因為微量的水存在會影響配的膠濃度。5.盡量不用過夜放室溫或者四度的膠,也回影響膠 的分離效果。

      6.電泳完撬膠時根本不需要用撬膠板,在一平皿里裝好水,把有膠一面的放在水中晃動幾次膠很容易就脫落下來,一點沒有問題,方便的很。

      7.點樣時樣品別忘了離心這步,因為上樣含有固體沉淀會影響電泳圖分辨效果。8.盡量在冰浴狀態(tài)下跑。

      22.做 2-DE 做的比較多,總結(jié)了幾個小竅門:

      1.一向電泳時,鹽離子容易聚在 膠槽的兩側(cè).剪一小段IPG膠條放在兩側(cè),構(gòu)成鹽橋,電壓就容易上去了.避免一向電泳不好影響最后實驗

      結(jié)果.

      2. SDS-PAGE時,在灌膠之前,一般大家都會用凡士林封底, 在SDS-PAGE 電泳之前又必須把凡士林搽干凈,很是麻煩,我的經(jīng)驗是:不用凡士林,取少量未加Ap的分離膠,按比例加2倍量的Ap,然后灌入板間,等上幾分鐘,待膠凝固后就可以接著灌分離膠了.方面,效果好!23.蛋白質(zhì)純化時,蛋白質(zhì)降解可能與超聲破菌保持冰浴有關(guān),之前建議加pmsf,建議在上柱子洗脫的時候也加pmsf(蛋白降解抑制劑),一定要用之前再加。

      24.做透析的時候,拿一個5ml的槍頭或者是其他類似的東西,剪短,穿過個塑料泡沫之類的面積比燒杯大東西,然后把透析帶一端扎緊,另一端開口綁緊在5ml槍頭下端,扎緊得那端也可以彎過來綁成u字型。這樣就可以用1ml的槍穿過5ml的槍頭的孔,另一只手調(diào)整透析帶,來加樣取樣,省去了總綁透析帶的麻煩,對同一個蛋白大量多次透析非常方便 25.第一次發(fā)貼說一下自己的小經(jīng)驗,希望版主能給我一分,每次看到好東西因為沒分都沒法下,好羨慕有分的人啊。當(dāng)然也不能不勞而獲,說一下自己的實驗技巧給大家分享。

      1.配SDS-PAGE膠時,用槍頭混勻比較麻煩,而且費時費力,效果也不好。可以剪一小段夾文件的那種曲針做轉(zhuǎn)子放到配膠的小燒杯里,在磁力攪拌器上邊攪邊加入各溶液,這樣加完也就混勻了,直接灌膠即可。2.上面的站友也說過,上樣用黃槍頭就行,我也一直在用,根本不用注射器,方便的很,建議大家也試試。3.電泳后考馬斯亮藍(lán)染色一般要1h到2h,脫色也要2h左右,麻煩的很。現(xiàn)在給大家說一個簡單的方法,是我從一個師姐那里學(xué)到的。

      加入染色液后,先放入微波爐里加熱5-10秒,使染色液微熱即可(千萬不要加熱太久,否則冰醋酸就揮發(fā)了)。然后放水平搖床上搖20分鐘,最多半小時就染好了。

      脫色也很簡單,不用脫色液,直接用去離子水,放微波爐里煮沸5分鐘左右,然后將水倒掉,再換上新的去離子水煮,這樣反復(fù)幾次,就可以了。效果可能比正常的脫色稍差一點點,不如那樣清楚,只要電泳時比平時多上1/5的樣品就可以了,關(guān)鍵是這樣省時省材料(用不著含甲醇和冰醋酸的脫色液)。方便快捷!放心,反復(fù)煮膠不會把膠煮壞的。

      26.我也說說我的小經(jīng)驗??赡艽蠹叶贾溃垊e笑話我。

      1、配膠時一定要掌握好時間,不要因為過度趕時間,而造成以后的條帶粗大,壓不成條帶,且消耗很多試劑和時間。

      2、加樣時,沖洗加樣器可用雙蒸水,用電泳液會使加樣器中有很多的泡沫?;蛟S是因為SDS的原因吧?

      3、對于大分子蛋白質(zhì),轉(zhuǎn)膜過夜更好。濾紙的張數(shù)可以適當(dāng)減少。

      4、在跑樣時同時加入MARKER有助于正確識別所需的蛋白位置,減少NC膜的消耗。

      5、一抗、二抗的濃度不要太高。

      6、做ECL顯影時,根據(jù)熒光的亮度調(diào)整時間。泡完顯影液,膠片應(yīng)用水洗一下,以減少定影液變黃。

      7、和有經(jīng)驗的同學(xué)交流,也是非常重要的。知識的交流絕對有助于試驗的成功。這是我目前的一點拙見。

      27.推薦一個省質(zhì)粒試劑盒硅膠柱與溶液的方法:

      所有試劑使用手提質(zhì)粒自己配置的溶液

      一、溶液

      二、溶液三(代替試劑盒的solution1、2、3),然后一比一的與飽和碘化鉀或碘化鈉(代替結(jié)合緩沖液)混合,就可以讓質(zhì)粒在硅膠上結(jié)合,而試劑盒的硅膠柱可以重復(fù)使用,沒有試劑盒溶液量的限制,只要是一樣的質(zhì)粒我想提幾管就提多少。

      順便說一句硅膠柱也可以用自己買的硅膠粉末代替,離心后倒掉硅膠柱上面的上清就可以,用起來不象柱子方便。效果比手提的要好要快。

      28.做WB時,樣品比較多, 又怕放時間長了對蛋白樣品不好,而且確定以后肯定要做某個抗體,只是一時沒有決定.那么你可以選擇先做SDS-PAGE,并轉(zhuǎn)膜.然后把PVDF膜涼干, 放四度保存.以后拿出來封閉后,加抗體就行了.蛋白在膜上,且已經(jīng)分離, 比保存在BUFFER里面的蛋白肯定更可靠。呵呵

      29.今天作his純化的時候,又琢磨了一個竅門,與大家分享。我得樣品比較多,幾百ml,而柱子不夠大,只有10幾ml,跑來跑去的上樣,還總得記著,太麻煩了。于是,我就刷干凈了一個燒杯,裝了我的樣品,找了一個細(xì)膠皮管,當(dāng)連通器,就像魚缸換水一樣,用5ml槍在一頭一吸,液體流出來,放到純化柱里,調(diào)好燒杯的位置,兩個液面一樣平了,呵呵,上了好幾個小時了,沒有問題,現(xiàn)在調(diào)低速度,過夜上樣:)30.能導(dǎo)致PAGE膠不凝的原因主要有三個:

      1、配膠中用到的主要試劑的配置。

      主要就是30%的丙稀酰胺的配置。粉末狀的丙稀酰胺和甲叉丙稀酰胺使用不應(yīng)該超過一年,因為丙稀酰胺會吸潮水解,這樣以來丙烯酸的含量就會加大,從而導(dǎo)致page膠不凝。

      2、溫度。

      溫度高時凝固快,但是亦不宜過高,因為溫度變化會影響交連物的孔徑大小。所以溫度在25度最為合適。

      3、氧氣。

      氧氣是凝固的終止劑,所以不能讓膠中出現(xiàn)氣泡。雖然都是些看起來聽低級的錯誤,但是不注意還是會犯。31.我做2維蛋白電泳,也有些心得:

      1、向電泳玻璃板內(nèi)加入膠條時,先在縫隙中加入配好的溴芬蘭緩沖液,要加滿,再將膠條貼后面玻璃板壁用薄塑料片將膠條緩緩?fù)葡轮聊z上緣,這樣可以很好的避免膠條下形成空氣泡。

      2、能做出好的圖譜已經(jīng)很不容易了,如果在掃圖時撕破實在可惜,所以掃圖要小心,將凝膠轉(zhuǎn)移到掃描儀時可以用塑料隔片在下面托著,同時保持有些水,這樣就安全多了。32.湊個熱鬧說兩句吧

      1、sds-page膠如果配好裝好倒入內(nèi)槽液以后,發(fā)現(xiàn)內(nèi)槽液稍有滲漏,可以把外槽液多加一些,加滿,加到與內(nèi)槽液相齊,這樣就可以繼續(xù)正常跑膠,不用浪費已經(jīng)加進(jìn)去的內(nèi)槽液

      2、至于染色脫色的問題,我們這里一直是染色:加熱半分鐘,搖20分鐘;如果染液不是新配的,就加熱半分鐘搖十分鐘,涼透了再重復(fù)一次即可 脫色也一直是用去離子水煮兩三次即可

      3、不知道大家都是怎么做酶切的,我的體會是,酶切質(zhì)粒時,兩個酶分別單酶切比直接雙酶切效果要好很多。我有一次雙酶切兩次都沒連出來,后來分步單酶切,連接效率幾乎100%。

      可以第一個酶切完后直接把體系熱失活,(根據(jù)酶說明書上一般是65度20min)然后直接向里面補(bǔ)第二個酶

      或者第一個切完后用氯仿抽提,把蛋白提出

      或者中間做一次回收,這個就要考慮回收效率和損失的問題了,但是這樣除蛋白最徹底 前兩個方法我們這都是有人做過的,已經(jīng)都很好用了

      33.俺也來說說關(guān)于Bradford法蛋白濃度定量和DTNB法巰基濃度定量的一點體會:

      我是做蛋白修飾巰基后,通過這兩種方法的定量來間接反應(yīng)修飾的程度。一路摸索過來,也有半年有余;最大的體會就是不要急于求成,直接實驗,首先檢測修飾體系是否對方法有影響,修飾基團(tuán)是否會在595nm和412nm下有特定的吸收,修飾后修飾試劑本身是否會有變化,對蛋白整體結(jié)構(gòu)造成影響,其次再談具體修飾比例和程度。對于巰基濃度測定方法,有四種(Anal Biochem.1998 Dec 1;265(1):8-14),而DTNB本身雖然靈敏度不高,但是重復(fù)性和抗干擾是最佳的了。

      34.考馬斯亮藍(lán)染色后的脫色,如在脫色液中加數(shù)張捏成條狀的Kimwipes紙(國外實驗室常用,相當(dāng)我們的擦鏡紙,全棉纖維制造),由于染料吸附到紙纖維上,脫色加速。待紙著色較深時,更換新紙條,不用換液。我想脫脂棉或紗布也是一樣的。但濾紙等可能不行,會溶掉。

      半貼壁細(xì)胞如SP/0或雜交瘤細(xì)胞傳代時,不用吹打或刮落。先將上清吸出,適當(dāng)拍打培養(yǎng)瓶(當(dāng)然是塑料瓶,玻璃瓶拍碎了別找我),即可見貼壁細(xì)胞脫落,加培養(yǎng)基混懸即可。注意,過力拍打培養(yǎng)瓶會裂,特別是瓶頸。

      35.一向電泳時,鹽離子容易聚在 膠槽的兩側(cè).剪一小段IPG膠條放在兩側(cè),構(gòu)成鹽橋,電壓就容易上去了.避免一向電泳不好影響最后實驗結(jié)果. 36.我也推薦幾條:

      1、關(guān)于20021108戰(zhàn)友的說法,我覺得我們制備好了一批感受態(tài),最好馬上轉(zhuǎn)化一種已知質(zhì)粒,與此同時,取一點感受態(tài)接種到含抗性的固/液體培養(yǎng)基培養(yǎng)來做對照。這樣第二天即可以知道這批感受態(tài)是否還有外源質(zhì)粒,又可以知道這批感受態(tài)轉(zhuǎn)化效率的高低。如果合格,那以后就可以放心使用!因為我也曾經(jīng)遇到其實是因為感受態(tài)不好而導(dǎo)致試驗不成功,但是當(dāng)時不知道,結(jié)果費時費力。

      2、做克隆挑斑時,我們可以在將沾有菌體的牙簽丟到試管前,在一塊相應(yīng)抗性的平板上點一下,標(biāo)注清楚,培養(yǎng)時間稍長一點,待長成較大菌落后收取。以后需要哪一個菌,就在平板上挑取。這樣既方便快捷,又可以保證菌的一致。

      3、抽提質(zhì)粒時,加入Sloution II和III后要求輕柔混勻。我個人覺得不用這樣,只要不是非常劇烈,可以快速混勻。尤其可以運(yùn)用在一次抽提多管質(zhì)粒的時候,這樣可以快速,而且效果一點也不差。

      4、抽提質(zhì)粒時,用無水乙醇沉淀的時間可以由實驗操作者來決定,如果時間充??梢?0min,否則8-10min也可以。至于溫度,個人覺得-20度好于常溫。如果加入可醋酸鈉,會較容易形成鹽類雜質(zhì),所以時間短一些更好!

      今天想到這些,先寫到這里,以后想到了在上來與大家分享。希望我的小經(jīng)驗對大家有所幫助!37.首先聲明:實驗中的一些技巧要用在首先對基本的操作有深刻了解的基礎(chǔ)上,在力求省時、省力、節(jié)約成本等的同時,實驗的準(zhǔn)確性是最重要的。

      對大多數(shù)做蛋白的戰(zhàn)友們來說,培養(yǎng)細(xì)胞應(yīng)該是不陌生的,我這里談一個培養(yǎng)細(xì)胞的小技巧,大家知道,對于一定的空間(如某種尺寸的細(xì)胞培養(yǎng)瓶)來說,細(xì)胞數(shù)目太多或者太少都不利于其生長,太多了就要消化,太少了要換一個小點兒的培養(yǎng)瓶,我的做法是:如果細(xì)胞數(shù)目太少,可以不必去找小一點兒的培養(yǎng)瓶,可把原來的培養(yǎng)瓶由原來的平放改為豎著放,這樣底部的空間就小了,有利于細(xì)胞的生長,當(dāng)細(xì)胞數(shù)目增加到一定程度的時候還可以在平過來,避免了來回?fù)Q培養(yǎng)瓶而增加污染的機(jī)會(對沒有小培養(yǎng)瓶的更實用)。

      個人體會,僅供參考。

      38.說說關(guān)于SDS-PAGE的幾個小經(jīng)驗

      1、做好膠后,把所有的加樣孔都加上樣,這樣可以防止邊緣的樣品脫尾。

      2、高電壓/高電流電泳時,可以把電泳槽放到4度冰箱中進(jìn)行電泳,省時省力,1hr搞定。

      3、膠考染時間40min,放在凝膠搖床上(沒有膠床可以放到28度普通搖床上,但要控制好搖床速度)緩緩搖動,使染色均勻,同時可提高檢測的靈敏度,根據(jù)我的經(jīng)驗可以達(dá)到銀染的級別,就是脫色時間比較長,一般需要脫色2-3d,夏天的時候要勤換脫色液,防止變臭哦

      39.質(zhì)粒小提如果是用作鑒定或酶切,不必進(jìn)行酚仿抽提,將溶液1.2.3 離心后的清液移入一個新的1.5ml離心管中,再次離心3-5分鐘,小心取出上清液后,直接沉淀,不必?fù)?dān)心DNA切不開,我已經(jīng)這樣使用一年多,沒出過什么問題。當(dāng)然這樣的質(zhì)粒不很干凈,但是做鑒定足夠了。尤其是實驗室女同胞們,可以減少酚仿的侵害,而且節(jié)省時間。

      分子生物學(xué)當(dāng)中的經(jīng)驗教訓(xùn)及技巧[copy](2009-03-23 15:02:08)大家平時做實驗,肯定都有很多小的技巧,在書上都看不到的,也沒有系統(tǒng)的整理,但是確實能夠起到很好的作用,不妨在這里與大家分享一下。

      任何專業(yè)任何點滴的東西都行,也許就對別人有一點好處哦!舉個例子:

      我在用酶標(biāo)板加樣的時候,蛋白樣品常常會產(chǎn)生很多氣泡,如果做熒光實驗,由于靈敏度非常高,一點點微小的氣泡都會影響很大,常常又不可能加消泡劑,我就用衛(wèi)生紙,撕下來一下條,搓成小針,碰一碰氣泡就破了,很好使:)

      1、酶切或者PCR體系混合好以后,大家都會用手指輕彈EP管的底部來混勻溶液,常常出現(xiàn)很多氣泡。這時候輕彈液面上方的管壁,消除氣泡就輕而易舉了。千萬別彈液面下方的,氣泡會越來越多。

      2、CR不要一次做太多樣品 有時候機(jī)器不穩(wěn)定 影響結(jié)果

      3、用衛(wèi)生紙是一個,我覺得最好的是用接種針燒熱了之后去戳一下,防止被衛(wèi)生紙污染哈 建議瞬間離心一下是最好的,不但消除氣泡,還有將管壁上的液體離下來,否則可能不夠分裝

      4、衛(wèi)生紙主要成分是纖維素,一般并不會污染樣品,除非你做分析實驗,之所以用衛(wèi)生紙是因為它會吸水,減少水的表面張力,很容易就讓氣泡破裂了

      5、磁珠回收時,不要貪多,收集上層即可,太過影響DNA的純度和質(zhì)量,對鏈接、轉(zhuǎn)化有影像。

      6、各種buffer都要完全融化后才能用,而且不管什么藥品,如果只剩下最后一點底子了,最好放棄,因為可能會影響你的實驗

      7、動手前,一定要思路清晰,盡量把要做的事情列出來

      8、做前一定要在筆記上寫上1、2、3.....,在按照筆記一步一步做,否則容易出錯。

      9、要加的酶阿,dNTP,水啊之類的能分裝的話最好分裝好一點,萬一污染的話就全完了

      10、實驗前,列個表單,列明關(guān)鍵點.避免出錯.這樣費一點時間是值得的.不要太相信自己的記憶.孤風(fēng)逐日:任何試劑反復(fù)凍融對其效率都有很大地影響。所以買來的試劑第一次使用時要注意按每次實驗用量分裝保存。提取的模板或純化的樣品也最好分裝保存,以備不測。

      很多個人經(jīng)驗在個板塊相關(guān)分析中都有一些提及,只要多加留意就可以學(xué)到很多高手的不傳經(jīng)驗。

      11、同時做很多管PCR時的加樣技巧 例如,需要做n管PCR:

      1.如果用同一對引物擴(kuò)不同的模板,可以先按照事先確定的比例,按照n+2的量把水,反應(yīng)緩沖液,dNTP,鎂鹽,引物和Tag酶先加到一個大管里面,混勻后就是“預(yù)混合液”了,然后把“預(yù)混合液”分裝到做PCR用的小管里面,通常我會分裝n+1管,最后向前n管里面入模板,混勻,最后一管不加模板而是加入和模板等量的無菌水,作為對照,以檢查加樣過程中是否引入了污染,接下來就可以進(jìn)行PCR反應(yīng)。2.如果用不同的引物擴(kuò)同一模板(不做多重PCR),則將第1點的引物和模板次序調(diào)換即可。3.同理,如果用不同的引物分別擴(kuò)不同的模板,則將引物和模板留在最后分裝后再分別加入。

      這樣做的優(yōu)點:可以大量減少取樣次數(shù),減少了不同PCR管之間的誤差(這一點對于熒光定量PCR尤其重要);節(jié)省時間。

      缺點:如果在制備預(yù)混合液時的任何一步引入了污染則會導(dǎo)致這一批次的所有PCR反應(yīng)都被污染,所以我每次都做一個陰性對照(用無菌水替換模板),以檢測是否被污染。

      12、如果遇到試驗有很多步,只是自己看protocol做,沒有人帶而且是第一次,我建議確立好步驟,然后每做一步的時候只注重眼前這一步,認(rèn)真的做,不出錯。這樣每一步都只是關(guān)心眼下,可以集中精力,并且每一步都保證無誤,最后結(jié)果應(yīng)該不會太壞,而且即使出了問題,可以排除操作的因素。

      13、跑PAGE膠染色的技巧吧:

      其實是我自己的親身體會,大家都知道如果嚴(yán)格按照protocol上的去做不但浪費藥品,也浪費時間,程序還繁瑣,當(dāng)然代價也高些。

      1、如果你跑的是小板的(SSR之類的分析足夠),那么先找來4個1升左右的空塑料瓶,洗干凈(我用的是上海國藥的裝尿素瓶,帶蓋的),用來分別裝銀染要用的固定液、染色液(硝酸銀)、顯影液、純水,在每個上面分別寫上名字,以免弄錯,每次回收這些溶液后,把蓋子擰緊,以阻止一些揮發(fā)或分解吧,延長使用“壽命”。

      2、一般的書上都說顯影液只能用一次,其實完全不至,我一般都是至少用2次,根本一點問題都沒有。還有固定液和染色液也可以適當(dāng)多用幾次,只要能然出來就行。

      3、有的時候?qū)嶒炇矣贸兯畇o多,也so浪費,或是一時半會制不出來,而染色要用怎么辦呢,我無意中就用蒸餾水代替,什么問題都沒有,根本沒啥差別,甚至于后來我壓根都不用蒸餾水了,干脆改自來水,也沒啥問題,完全可行,不信大家可以試試,呵呵,雖然說是可能某些地方不是很合理,但對一般像做分子標(biāo)記之類的根本沒啥影響,替老板能省就省點吧,大家都不容易,哈哈!還有我忘了說了,以前經(jīng)常跑完膠后來不及染色就得回寢室了,怎么辦呢,不用熬夜,就把膠剝離下來泡在固定液里,第二天早上再來接著下面的步驟一點問題都沒有,就是可能膠尺寸會有些變化,但絕對不影響你的結(jié)果。

      最后一個就是讀帶問題,我見過別人好多種方法,但我自己“發(fā)明”了一種實用、準(zhǔn)確的:

      找一塊大點的普通玻璃板(我當(dāng)時用的是跑大垂直板膠的),帶上手套(保護(hù)好自己,雖然聚合后毒性小,但還是有的),快速把膠撈出來,放在玻璃板上,再迅速把玻璃翻個面,平放在觀片燈上,只要你速度快,膠是不會掉下來的,會緊緊貼在玻璃上的,最好玻璃板和管片燈的平面有點空隙,否則膠粘住觀片燈表面就會把燈面弄臟,膠也可能會掉,一切弄好后,你就可以直接那筆在玻璃的這個干凈面上一清二楚的讀帶,直接可以往上面寫帶型,然后為了以后檢查用,最好用數(shù)碼相機(jī)快速拍照保存,不但膠上的帶可以看清,你在玻璃上寫的帶型數(shù)字也是非常清楚的,當(dāng)然讀完的膠就可以立即扔掉,沒必要保存

      14、做實驗時,認(rèn)真做好記錄,寫好實驗結(jié)果,過一段時間再去看看,溫故而知新

      15、有些時候做完PCR,由于條帶很淡,但你想回收.不妨將有目的條帶的膠切下來.放到-20度凍一會,拿出吸它的液體作摸板,再擴(kuò)增效果很好!

      16、做轉(zhuǎn)染,我養(yǎng)過四五種細(xì)胞,都做了轉(zhuǎn)染,但每種的轉(zhuǎn)染率都不一樣,本人當(dāng)時就吃了這個虧,提醒大家,誰做轉(zhuǎn)染事前先查一下要轉(zhuǎn)的細(xì)胞轉(zhuǎn)然率怎么樣。

      還有就是我在用脂質(zhì)體2000做轉(zhuǎn)染時,一次發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染6小時后的液體打到其他細(xì)胞里仍可以轉(zhuǎn)進(jìn)去,所以為了提高轉(zhuǎn)染率,我以后在6小時的時候都沒有把轉(zhuǎn)染液體打出去,只是又加了含血清的培養(yǎng)基。但有一個問題就是,不打出去的話,細(xì)胞會死很多,這個也與養(yǎng)的細(xì)胞種類,狀態(tài)都有關(guān)。PCR預(yù)混:預(yù)混一般根據(jù)樣品的多少,一般我在預(yù)混的時候大概每個樣品管中預(yù)計損失0。5-0。6微升,這樣計算需要的總的預(yù)混液數(shù)量,比較合適。

      18、做實驗前 一定先寫出步驟和列出實驗所需要的試劑和器材,下面看看哪些是要購買的,哪些是需要清洗的,哪些是要前處理的如過濾、高壓。

      定試劑一定要打提前量,不好買的試劑一定要在3周左右前訂購,如在SIGMA訂貨。實驗的時候一定要坐好標(biāo)記!什么時間,多少濃度,如PH值,是否過濾了,做完實驗有寫離心或過濾的殘液,先不要丟棄,萬一實驗失敗,還要重復(fù)的。實驗中的每個環(huán)節(jié)都很重要 忽略任何一個都可能導(dǎo)致實驗的失敗

      每個人在實驗中都有自己的一些好的細(xì)小的習(xí)慣

      例如tip頭吸完后馬上從移液器上取下來,以免忙亂的時候又以同一tip汲取另一種試劑 用完量桶或者燒杯后,及時清洗,并放入烘箱。不管大小實驗,做完后都要認(rèn)真做記錄。

      一個槍頭如果可以連續(xù)吸兩次的話,也不能吸,主要是第二次吸時不準(zhǔn),同時也不能完全打出來。做完實驗擦干桌子,一切東西歸位,有些東西可以回收的就回收,很多實驗室的槍頭是回收的 實驗前認(rèn)真設(shè)計,作實驗時不胡思亂想,嘰嘰喳喳,做完后在海闊天空,認(rèn)真分析試驗數(shù)據(jù)

      做之前認(rèn)真設(shè)計,做時就不要老是想著結(jié)果,平心靜氣,注意細(xì)節(jié),認(rèn)真記錄,因為失敗是常事,不要回過頭不知道該從哪里找原因。

      每次的實驗結(jié)束,要及時做好記錄,不要等。好記性不如爛筆頭,這雖然是俗語,但是不要放棄筆的重要性!

      加入試劑之前,把它混勻一下,以免放置時間長了濃度不均

      做完實驗,清理實驗臺,以便下次能夠更快、更好,更方便的繼續(xù)工作!藥品歸位,儀器歸位!做實驗一定要有計劃,最好在有部分實驗數(shù)據(jù)出來時,就著手寫文章,這個不是為了出文章,而是在寫文章的時候,可以清晰自己的思路,知道后面該先做什么,該重點做什么.不然有時候辛苦半死,數(shù)據(jù)太分散,不能說明問題.不輕易用別人的東西,用時先打招呼,記錄要詳細(xì),配液體時要記錄試劑的批號等? 所有的東西都要即時標(biāo)記好,日期,藥品名稱,濃度,等

      移液槍用完之后要歸到最大計量的位置,防止久而久之彈簧失去彈性。

      不用酶標(biāo)槍時不要一直拿在手里,不可以倒過來(特別是里面還有液體的時候)不要一直說話、聊天~~ 筆記要全~要多全有多全~ 還有一點很關(guān)鍵,筆記要放好,最近我的筆記掉了~哭死 最后,做完實驗要洗手~ 離開實驗室前或進(jìn)入實驗室前注意水,電是否安全

      試驗之前看資料的時候,最好規(guī)類存放,看過后記下重點內(nèi)容,并將出處標(biāo)明,以免日后找不到 一定要記著關(guān)水浴箱,切記切記。

      第三篇:實驗室實習(xí)小結(jié)

      本人有幸到南京大學(xué)田大成教授的GATTACA實驗室做畢業(yè)設(shè)計,在此期間,感受到了實驗室全體成員的熱心幫助和關(guān)懷,也感受到了他們一絲不茍的精神和樂于助人的品質(zhì),這些給我的啟發(fā)頗深。

      到實驗室后,我是做抗病基因RPP8方面的研究的,在導(dǎo)師、師姐和師兄的指導(dǎo)下,我做了一些筆記,并學(xué)會了如何操作PCR儀及電泳的整個流程。在丁靜師姐的指導(dǎo)下,我學(xué)會了如何設(shè)計引物,MEGA的使用以及如何更方便的查閱文獻(xiàn)等等。

      在試驗過程中,我深深明白了認(rèn)真仔細(xì)的重要性,在跑電泳過程中,我竟然有兩次都忘了加MARKER,致使試驗的進(jìn)程受到了一定的影響,后悔頗深。其次我也認(rèn)識到做實驗要有耐心,實驗室中的一個女孩姚永芳在做擬南芥的染色試驗,她每天要種數(shù)萬顆擬南芥種子,工作量很大,很艱難,在實驗室人手緊張情況下,她每天仍能在無菌室堅持一絲不茍工作,這份耐心,這份精神,這份責(zé)任實在令人欽佩,給我生動的上了一課。

      作為一名畢業(yè)在即的大學(xué)生,敢于接受挑戰(zhàn)應(yīng)作為一種基本的素質(zhì)。通過實習(xí),我找出了自己更多的不足和差距所在。回想這次實驗室的實習(xí),感慨頗多,深知“理論是灰色的,生活之樹常青”,只有將理論付諸于實踐才能實現(xiàn)理論自身的價值,也只有將理論付諸于實踐才能使理論得以檢驗。

      我發(fā)現(xiàn),無論處于怎樣的環(huán)境,第一,手腳要勤快,在工作中勤于動手慢慢琢磨,不斷學(xué)習(xí)不斷積累,第二,要懂得熱心幫助他人。初來匝道,不管是不是自己的份內(nèi)之事,都應(yīng)該用心去完成,也許自己累點,但你會收獲很多,無論是知識與經(jīng)驗還是別人的稱贊與認(rèn)可。第三,要懂得多學(xué)多問,學(xué)問學(xué)問,無問不成學(xué)。知識和經(jīng)驗的收獲可以說與勤學(xué)好問是成正比的,要記住知識總是垂青那些善于提問的人。第四,善于思考,真正消化知識。有知到識,永遠(yuǎn)不是那么簡單的事,當(dāng)你真正學(xué)會去思考時,他人的知識才能變成你自己的東西。第五,前人鋪路,后人修路。墨守陳規(guī)永遠(yuǎn)不會有新的建樹,前人的道路固然重要,但是學(xué)會另辟蹊徑更為重要。第六,要學(xué)會獨立而不孤立。學(xué)會獨立思考,但在這同時要記住與他人的交流也是非常重要的。第七,認(rèn)真仔細(xì)地做好筆記,不要當(dāng)你真正用到它時才知它的重要所在。

      在以后,不管面對什么困難,都要有自信。社會經(jīng)驗缺乏,學(xué)歷不足等種種

      原因會使自己缺乏自信。但自信不是麻木的自夸,我們要相信自己,動力才會源源不斷。其實有誰一生下來就什么都會的,只有自信,才能克服心理障礙,那一切就變得容易解決了。

      總之,這幾個月的實驗室實習(xí)讓我有了深刻感觸,其中的經(jīng)驗收獲與不足都是我日后學(xué)習(xí)工作的借鑒,這不僅是一次實踐,還是一次人生經(jīng)歷,是一生寶貴的財富。在今后我將繼續(xù)揚(yáng)長補(bǔ)短,磨練自己的同時不斷提高自己,為塑造全面發(fā)展的自我而努力,使未來的道路能夠越走越寬!

      在中藥資源工程學(xué)實驗室實習(xí)的這段時間,我負(fù)責(zé)的主要是研究各種藥物在體內(nèi)外腫瘤細(xì)胞抑制作用的實驗。在導(dǎo)師、師姐和師兄的指導(dǎo)下,我做了一些筆記,學(xué)到了許多課外知識和基本的技術(shù)操作,令我受益匪淺。

      在體外實驗過程中,我發(fā)現(xiàn)要做好實驗,首先要細(xì)心。對于剛來實驗室的我,就要學(xué)會多問,多記,多背。細(xì)胞是很容易被染菌的,它需要一個獨立的細(xì)胞培養(yǎng)室。細(xì)胞在培養(yǎng)過程中,要放到37℃的CO2培養(yǎng)箱中,在對細(xì)胞進(jìn)行復(fù)蘇、傳代、換液、種板給藥及凍存時

      要放到已紫外照射,通風(fēng)過的超凈工作臺上操作,在細(xì)胞需要離心時還要密封蓋子。另外,每次在打開放有細(xì)胞的瓶管蓋子時,注意還要在酒精燈上烘烤。作為實驗人員,還要準(zhǔn)備消毒的手套及白大褂。

      其次,做細(xì)胞實驗還要有耐心。在超凈工作臺上操作之前,我們還要認(rèn)真準(zhǔn)備好實驗儀器和培養(yǎng)用液。實驗儀器包括塑料器皿和玻璃器皿,使用過的塑料器皿如96孔板,離心管要先進(jìn)行清水沖洗,再放入洗潔液中浸泡過夜后拿出沖洗15遍,烘干,隨后放于三蒸水中浸潤再烘干,最后放于高壓蒸氣鍋中滅菌烘干備用。而玻璃器皿如培養(yǎng)瓶還需要在洗潔液中浸泡清洗烘干后,在酸酐溶液中浸泡清洗。配制培養(yǎng)用液時也一樣要小心謹(jǐn)慎,配制過程中的儀器也要進(jìn)行清洗消毒滅菌,如胰酶液還要放在超凈工作臺上操作。另外,在做實驗時還要注意,其中的培養(yǎng)液因細(xì)胞而異,如C6細(xì)胞用DMEM培養(yǎng)液,而SGC細(xì)胞用的則是Rpml1640培養(yǎng)液。其中在配制和滅菌消毒過程中的三蒸水,是通過蒸餾水凈化過來的,使用時最好用新鮮配制的。

      實習(xí)這段期間,在實驗室,我是由體外的細(xì)胞開始操作的。研究

      藥物抑瘤作用的大小是通過將細(xì)胞在96孔板上種板、給藥、觀察,接著用酶標(biāo)儀觀察實驗結(jié)果,處理了數(shù)據(jù)而來得。做過細(xì)胞實驗才知道,對于細(xì)胞,每一步都是至關(guān)重要的。一開始因為自己的不熟練又擔(dān)心細(xì)胞染菌、加錯藥,總是步驟出錯或因槍頭使量控制不好,結(jié)果總是以失敗告終。后來才發(fā)現(xiàn),其實操作規(guī)范的話是不大可能染菌的,操作的時候動作越快,效果越好。比如消化完的細(xì)胞,就是要靠快速的吹打、吸取,才能保證轉(zhuǎn)移的量盡量多。一般而言,桌上一共也就幾管子的溶液,不大可能加錯藥的。再后來數(shù)據(jù)終于能穩(wěn)定,但是因為不同的藥物針對的腫瘤細(xì)胞不同,使得結(jié)果一直不理想。正所謂熟能生巧,我相信堅持總能看到勝利的果實。在這些天里,也讓我明白了做實驗只有認(rèn)真鉆研及學(xué)習(xí),才能不斷開拓視野,增強(qiáng)自己的實踐操作技能,才能為以后的工作存儲更多的能力。

      在體內(nèi)實驗過程中,實驗對象是小鼠,對此,不僅要細(xì)心、膽子大,還要不怕臟。對于小鼠的培養(yǎng),對其需要每天進(jìn)行喂食、換水,一周內(nèi)還要換兩次墊料,盡量使它們處于最好的生活狀態(tài)以便觀察結(jié)果。在對小鼠接種給藥時,要學(xué)會如何有技巧地抓小鼠,以防被抓傷及在對小老鼠注射及灌胃時能正確、迅速。

      經(jīng)過這次的實習(xí),還讓我對二甲基亞砜即DMSO有了更深一步的認(rèn)識,通過導(dǎo)師和師姐們,知道它不僅是一種萬能溶劑,也是一種滲透性保護(hù)劑,能夠降低細(xì)胞冰點,減少冰晶的形成,減輕自由基對細(xì)胞損害,改變生物膜對電解質(zhì)、藥物、毒物和代謝產(chǎn)物的通透性。二甲基亞砜還具有一定的毒性,所以我們都要小心使用。

      作為一名畢業(yè)在即的大學(xué)生,敢于接受挑戰(zhàn)應(yīng)作為一種基本的素質(zhì)。通過實習(xí),我找出了自己更多的不足和差距所在。回想這次實驗室的實習(xí),感慨頗多,深知“理論是灰色的,生活之樹常青”,只有將理論付諸于實踐才能實現(xiàn)理論自身的價值,也只有將理論付諸于實踐才能使理論得以檢驗。

      我發(fā)現(xiàn),無論處于怎樣的環(huán)境,第一,手腳要勤快,在工作中勤于動手慢慢琢磨,不斷學(xué)習(xí)不斷積累,第二,要懂得熱心幫助他人。初來匝道,不管是不是自己的份內(nèi)之事,都應(yīng)該用心去完成,也許自己累點,但你會收獲很多,無論是知識與經(jīng)驗還是別人的稱贊與認(rèn)可。

      第三,要懂得多學(xué)多問,學(xué)問學(xué)問,無問不成學(xué)。知識和經(jīng)驗的收獲可以說與勤學(xué)好問是成正比的,要記住知識總是垂青那些善于提問的人。第四,善于思考,真正消化知識。有知到識,永遠(yuǎn)不是那么簡單的事,當(dāng)你真正學(xué)會去思考時,他人的知識才能變成你自己的東西。第五,前人鋪路,后人修路。墨守陳規(guī)永遠(yuǎn)不會有新的建樹,前人的道路固然重要,但是學(xué)會另辟蹊徑更為重要。第六,要學(xué)會獨立而不孤立。學(xué)會獨立思考,但在這同時要記住與他人的交流也是非常重要的。第七,認(rèn)真仔細(xì)地做好筆記,不要當(dāng)你真正用到它時才知它的重要所在。

      在以后,不管面對什么困難,都要有自信。社會經(jīng)驗缺乏,學(xué)歷不足等種種原因會使自己缺乏自信。但自信不是麻木的自夸,我們要相信自己,動力才會源源不斷。其實有誰一生下來就什么都會的,只有自信,才能克服心理障礙,那一切就變得容易解決了。

      總之,這幾個月的實驗室實習(xí)讓我有了深刻感觸,其中的經(jīng)驗收獲與不足都是我日后學(xué)習(xí)工作的借鑒,這不僅是一次實踐,還是一次人生經(jīng)歷,是一生寶貴的財富。在今后我將繼續(xù)揚(yáng)長補(bǔ)短,磨練自己的同時不斷提高自己,為塑造全面發(fā)展的自我而努力,使未來的道路能夠越走越寬!

      第四篇:實驗室實習(xí)小結(jié)

      實習(xí)小結(jié)(11.3-11.14)

      這兩周我們的實習(xí)腳步來到了實驗室,第一天,付青松經(jīng)理先簡單的給我們做了一些介紹和安全教育。然后我們被安排到靜態(tài)點爆實驗室進(jìn)行學(xué)習(xí),來到點爆試驗室先對我們介紹了一下試驗設(shè)備,靜態(tài)點爆實驗室的主要設(shè)備有:1)步入式環(huán)境箱,溫度范圍是-65 ℃~+180 ℃,此設(shè)備能保證溫度一致性,波動度未正負(fù)2K,升溫速率未3K/分鐘。2)離位點爆試驗,3)安全帶預(yù)拉緊試驗系統(tǒng),4)影響分析系統(tǒng)。5)跌落塔實驗,主要用于驗證各種氣囊。6)發(fā)生器密閉容器試驗,7)靜態(tài)點爆試驗,8)線性沖擊機(jī)和軀干模塊發(fā)射器,主要用于進(jìn)行向汽車的零部件發(fā)射沖擊模塊的沖擊試驗,并同時滿足自由線路沖擊和導(dǎo)向沖擊試驗要求。整個系統(tǒng)主要由以下部分組成:主系統(tǒng)——軀干沖擊工裝,線性導(dǎo)向沖擊模塊工裝,支撐結(jié)構(gòu),驅(qū)動發(fā)射系統(tǒng),控制電柜。速度測量裝置,軀干模塊。9)翻門點爆環(huán)境試驗箱,溫度控制范圍:-50°C ~+110°C,試驗過程是在箱門上加緊試驗工裝,當(dāng)溫度達(dá)到制定溫度時,箱門動作,在8秒內(nèi)打開,氣囊被展開,高速攝錄記錄氣囊展開的過程。在點爆實驗室的一周主要跟隨實驗室人員學(xué)習(xí)氣囊點爆的相關(guān)內(nèi)容,并觀察試驗后的樣件狀態(tài)。

      后來我們又來到了臺車實驗室,在臺車實驗室我們主要了解臺車實驗室主要做的是座椅試驗、安全帶試驗和系統(tǒng)試驗(正面碰撞、側(cè)面碰撞和角度碰撞)。

      對于現(xiàn)場實驗室工作人員以及一個試驗的流程一般是從接受委托單(包含其他公司產(chǎn)品試驗委托)開始,后面的步驟是安裝Buck(車身)相機(jī)支架、擬合坡形后等待工程師確認(rèn)、聯(lián)系工程師領(lǐng)零件、聯(lián)系項目工程師確認(rèn)試驗信息、組裝零件、按照試驗信息調(diào)整零件、檢查臺車內(nèi)無工具和零件、調(diào)試假人位置、安裝相機(jī)和調(diào)試、調(diào)試前假人上裝和拍照、試驗系統(tǒng)設(shè)置。通常在這過程中,該實驗室的工作人員對于內(nèi)部可控的程序中,第一次調(diào)試假人位置這一步驟所花費的時間較長,需要進(jìn)行相關(guān)分析及改善。

      最后我們來到了物理實驗室和環(huán)境實驗室,王純經(jīng)理帶我們參觀并詳細(xì)講解了實驗室的情況,并為我們講解了試驗委托的流程,和在委托試驗的過程中需要注意的一些的情況。物理實驗室主要從事SW、AB、SB的光學(xué)、力學(xué)性能的分析,關(guān)于SW試驗主要有:扭轉(zhuǎn)強(qiáng)度、彎曲強(qiáng)度、扭轉(zhuǎn)疲勞、觸點疲勞、輪轂緊固性能、輪轂縮回性能、肖氏L硬度; SB試驗主要有:靜態(tài)強(qiáng)度、傾斜鎖止、拉出卷收力試驗、帶扣鎖啟力、車感帶感試驗、六工位卷收器疲勞循環(huán)試驗機(jī);其它試驗:燃燒特性、鏡面光澤、色差測定、大眾氣味、粉塵試驗。

      物理實驗室中的扭轉(zhuǎn)強(qiáng)度、彎曲強(qiáng)度較容易搞混淆。扭轉(zhuǎn)強(qiáng)度是通過固定輪緣,然后通過電機(jī)帶動花鍵進(jìn)行扭轉(zhuǎn),此試驗的奇瑞標(biāo)準(zhǔn):20Nm的預(yù)載荷、然后250Nm扭矩30s,要求彈性變形≤3°,永久變形≤0.5°。大眾標(biāo)準(zhǔn):在5s內(nèi)從載荷從50Nm加載到250Nm,要求彈性變形≤3°。彎曲強(qiáng)度是將SW按45°方向固定,然后在垂直方向施加標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的向上與向下的力,記錄變形情況,標(biāo)準(zhǔn)要求:在500N下,彈性變形≤7.5%,塑性變形≤0.5%。而在700N下,彈性變形≤10%,塑性變形≤0.7%。扭轉(zhuǎn)強(qiáng)度主要測試角度的變形,而彎曲強(qiáng)度主要測試的是位移的變形量。

      環(huán)境試驗室主要是模擬各種環(huán)境(包括溫度、濕度、鹽分、粉塵、震動等)測定SW、SB、AB等性能。環(huán)境室設(shè)備包括:(1)光照箱,主要用于測定SW、AB、儀表板等,測試溫度15℃~80℃,濕度10RH%~80RH%;(2)熱沖擊箱,測試溫度50℃~220℃,-75℃~70℃,主要測試SW、AB的熱沖擊試驗;(3)鹽霧箱,測試溫度21℃~50℃,4)振動臺,主要用于測試SW、手球、AB、SB;(5)中元電磁振動臺,ACT2000-R0400L,上下振動;(6)Weiss大環(huán)境箱;(7)WSZ615三綜合試驗臺,銀河儀器。

      在實驗室的兩周實習(xí)雖然很快就結(jié)束了,但是這兩周的實習(xí)使我們受益匪淺,學(xué)習(xí)到了很多試驗的標(biāo)準(zhǔn),也了解了很多試驗的流程,這對于我們以后作試驗是有很大的幫助的。

      2014隋建峰

      年11月18日

      第五篇:實驗室工作小結(jié)

      實驗室工作總結(jié)

      在上級部門和學(xué)校領(lǐng)導(dǎo)的指導(dǎo)下,本學(xué)期的教育教學(xué)工作已經(jīng)過半。現(xiàn)將本學(xué)期前一階段的實驗室工作做如下總結(jié):

      1、實驗室和儀器室的管理工作方面

      根據(jù)學(xué)校工作的相關(guān)安排,實驗室管理和使用已經(jīng)達(dá)到規(guī)范化,所有的實驗學(xué)科教學(xué)均在實驗室完成。在教學(xué)中,能做的實驗必須做,條件不具備的實驗,教師通過自制簡易教具也盡可能做,使學(xué)校的實驗室充分發(fā)揮了其自身作用。儀器室管理方面,每周對實驗器材進(jìn)行一次清理,出現(xiàn)損壞及時查明原因并按規(guī)定進(jìn)行賠償和維修。對損壞的物品及時報損并入帳,做到帳上日清月結(jié),使教學(xué)儀器的使用監(jiān)督常規(guī)化,對所缺物品及時和學(xué)校及相關(guān)部門聯(lián)系,通過匹配和購進(jìn)保證了實驗教學(xué)的正常開展。

      2、儀器借用和管理方面:

      儀器借用是保證實驗教學(xué)開展的前提,本學(xué)期,通過學(xué)校會議及教研會議,要求教師只要學(xué)校有的都盡可能借用。在借用過程中,按著實驗通知單內(nèi)容對教師借出的儀器及時進(jìn)行登記,根據(jù)教學(xué)中的使用情況,督促教師及時歸還。完善相關(guān)的借用手續(xù),對于人為損壞的,及時報告學(xué)校并按規(guī)定進(jìn)行賠償,并做到全天候向師生開放。

      3、實驗教學(xué)開課情況:

      化學(xué)演示實驗開了8個.物理演示實驗開了7個.生物演示實驗開了5個.4、存在的問題及設(shè)想

      在本學(xué)期前一階段的實驗教學(xué)中,雖然取得了一定的成績,但也存在著不少問題,主要表現(xiàn)在儀器借用還不充分,還有待加強(qiáng);儀器維修作為實驗室管理人員來說還需要加強(qiáng)學(xué)習(xí).總之,實驗室工作還有不盡人意的地方,在今后的工作中,要注意查缺補(bǔ)漏、規(guī)范管理、積極宣傳、提高自身的服務(wù)意識,讓我校的實驗教學(xué)再上一個新臺階。

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