第一篇：阿司匹林抗栓外的心血管保護(hù)作用機(jī)制

目前，阿司匹林已廣泛用于心腦血管疾病的二級預(yù)防，尤其對于急性冠狀動脈綜合征和急性缺血性卒中的治療則更被認(rèn)為是不可或缺的有效預(yù)防血栓形成的重要措施。毫無疑問，二級預(yù)防主要針對臨床上已有冠心病和缺血性卒中等心腦血管疾病患者，而阿司匹林抗血小板并進(jìn)而預(yù)防動脈粥樣硬化（AS）病變相關(guān)血栓形成和栓塞的作用則成為有效預(yù)防心腦血管事件發(fā)生最重要的藥理學(xué)機(jī)制。

與二級預(yù)防不同，一級預(yù)防針對暴露于危險因素的高危人群，但其尚未發(fā)展成為冠心病和缺血性卒中，此時應(yīng)用阿司匹林主要是為了預(yù)防和延緩AS的發(fā)生，而不是針對血栓相關(guān)事件的防治。然而，由于阿司匹林二級預(yù)防中卓有成效的抗栓作用，致使人們對其一級預(yù)防獲益機(jī)制產(chǎn)生了模糊的認(rèn)識，甚至錯誤地認(rèn)為阿司匹林僅有抗栓作用。正是基于上述理論上的認(rèn)識不足，才導(dǎo)致出現(xiàn)阿司匹林使用嚴(yán)重不足的臨床實踐現(xiàn)狀。我國有關(guān)一級預(yù)防用藥調(diào)查結(jié)果表明，對于有適應(yīng)證的人群，阿司匹林一級預(yù)防的覆蓋率僅為14%左右。實際上，多個一級預(yù)防的大規(guī)模臨床試驗證據(jù)反復(fù)證明，阿司匹林與安慰劑比較，能顯著減少冠心病和卒中的發(fā)生。鑒于此，有必要詳細(xì)闡述阿司匹林抗栓外的心血管保護(hù)作用機(jī)制，以期為心血管病一級預(yù)防的臨床實踐中正確使用阿司匹林提供必要的理論依據(jù)。

一、阿司匹林抗栓外的心血管保護(hù)作用機(jī)制

1.抗炎和穩(wěn)定斑塊作用：炎癥是具有血管系統(tǒng)的生物體對損傷因子所發(fā)生的防御性反應(yīng)?？梢?，血管壁是炎癥反應(yīng)的主要場所，沒有血管則無炎癥可談。AS的本質(zhì)是血管性病變，由多種致AS因子，包括高血壓、高血脂、高血糖和吸煙等首先損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞并使其細(xì)胞因子和炎性因子表達(dá)上調(diào)，進(jìn)而誘導(dǎo)血管平滑肌細(xì)胞遷移、增殖并合成與分泌細(xì)胞因子和炎性因子，同時這些細(xì)胞因子和炎性因子趨化炎性細(xì)胞向血管壁聚集并分泌更多的細(xì)胞因子和炎性因子導(dǎo)致血管壁發(fā)生慢性炎癥反應(yīng)，其結(jié)果是AS病變的形成與發(fā)展。眾所周知，阿司匹林是有效的環(huán)氧化酶（COX）抑制劑，既能抑制血小板上的COX1而發(fā)揮抗血小板作用，又能抑制血管壁內(nèi)皮細(xì)胞上COX2的活性而顯著減少其介導(dǎo)的前列腺素的合成與分泌，并因此而顯著抑制炎癥反應(yīng)。

AS病變最嚴(yán)重的臨床后果為急性冠狀動脈綜合征，即由于斑塊不穩(wěn)定及破裂引起血小板黏附、激活并形成白血栓，進(jìn)而激活凝血系統(tǒng)形成大的紅血栓堵塞血管腔而出現(xiàn)急性心肌損傷和壞死的臨床表現(xiàn)。從發(fā)病機(jī)制上分析，斑塊不穩(wěn)定和破裂發(fā)生于前，而血栓形成繼發(fā)于后。若能有效地穩(wěn)定斑塊，則將大大地減少急性冠狀動脈綜合征的發(fā)生。新近研究表明，血小板即為一種炎癥細(xì)胞，通過釋放細(xì)胞因子與炎性因子誘導(dǎo)單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞、粒細(xì)胞分泌炎性因子并作用于血小板表面的炎性因子受體，導(dǎo)致血小板合成與分泌更多的細(xì)胞因子和炎性因子?，F(xiàn)認(rèn)為，血小板與炎性細(xì)胞分泌炎性介質(zhì)間的惡性循環(huán)是不穩(wěn)定斑塊形成的重要機(jī)制。有多個研究證據(jù)表明，阿司匹林通過減少斑塊內(nèi)巨噬細(xì)胞和泡沫細(xì)胞的數(shù)量、增加巨噬細(xì)胞過氧化物酶體增殖物激活受體（PPARα/γ）表達(dá)抑制NF-κB使基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）合成減少、增加基質(zhì)金屬蛋白酶抑制物（TIMP-

1、-2）的表達(dá)抑制MMP-

1、-

2、-9的活性和誘導(dǎo)花生四烯酸代謝產(chǎn)物脂氧素表達(dá)并抑制T淋巴細(xì)胞合成與分泌IFNγ進(jìn)而調(diào)節(jié)細(xì)胞增生與細(xì)胞凋亡、基質(zhì)合成與基質(zhì)降解間的平衡而穩(wěn)定斑塊。

2.抗氧化作用：眾多證據(jù)顯示.氧化應(yīng)激反應(yīng)直接參與AS的發(fā)生與發(fā)展，尤其與不穩(wěn)定心絞痛、心肌梗死和心源性猝死的關(guān)系更為密切。以往研究表明，阿司匹林通過抑制COX2減少前列腺素的合成與作為羥自由基和超氧陰離子的清道夫而抗氧化應(yīng)激反應(yīng)。新近研究結(jié)果進(jìn)一步顯示，除上述抗氧化作用機(jī)制外，阿司匹林顯著上調(diào)內(nèi)皮細(xì)胞鐵蛋白的表達(dá)，減少細(xì)

胞內(nèi)游離鐵離子的含量，因此抑制游離鐵離子加強(qiáng)的氧化應(yīng)激反應(yīng)過程?？梢姡⑺酒チ滞ㄟ^幾個不同的機(jī)制途徑發(fā)揮抗氧化作用。

3.保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞和抑制平滑肌細(xì)胞增生：內(nèi)皮細(xì)胞損傷是AS發(fā)生的始動環(huán)節(jié)，而血管壁平滑肌細(xì)胞向內(nèi)膜遷移并增殖則為AS的主要的病理過程。有效預(yù)防內(nèi)皮細(xì)胞受損和抑制平滑肌細(xì)胞增殖則成為抗AS的有效手段。動物實驗研究表明，阿司匹林抑制大鼠內(nèi)皮細(xì)胞TNFα、細(xì)胞黏附因子-1（ICAM-1）表達(dá)和降低血漿丙二醛（MDA）濃度的同時，提高內(nèi)皮一氧化氮（NO）的合成和恢復(fù)受損內(nèi)皮對乙酰膽堿誘導(dǎo)的血管舒張反應(yīng)。亦有更直接的證據(jù)表明，靜脈注射阿司匹林1g/min可改善動脈粥樣硬化病人冠狀動脈的內(nèi)皮功能。除改善內(nèi)皮功能外，阿司匹林能顯著抑制培養(yǎng)的人大隱靜脈平滑肌細(xì)胞的增殖，若從培養(yǎng)基中去除阿司匹林則細(xì)胞恢復(fù)其原有的增殖能力。

二、阿司匹林抗腫瘤與心血管保護(hù)機(jī)制的聯(lián)系

新近公布的研究結(jié)果顯示，阿司匹林可以使直腸癌、結(jié)腸癌、乳腺癌、前列腺癌、食道癌、胃癌和胰腺癌等的發(fā)病率和病死率分別下降25%～50%不等。其可能的機(jī)制為抑制COX2活性、抑制NF-κB和調(diào)整DNA錯配，尤以抑制和調(diào)整COX2活性最為重要。與其他非甾體消炎藥不同，阿司匹林在抑制COX2活性從而減少前列腺素合成的同時，還能激活該酶的另一功能，合成脂氧素。業(yè)已證明脂氧素是強(qiáng)有力的炎癥反應(yīng)剎車信號（brakingsignal）和細(xì)胞增殖抑制因子。不難發(fā)現(xiàn)，腫瘤與AS疾病存在多個層面的密切關(guān)聯(lián)，如發(fā)病年齡有重疊、致病的環(huán)境和遺傳因素重疊，發(fā)病的分子機(jī)制類似和某些治療措施可共適等。鑒于上述結(jié)果，阿司匹林的抗腫瘤作用對于其心血管病一級預(yù)防獲益與出血風(fēng)險權(quán)重的天平，無疑在獲益的一邊又添了一枚砝碼。一級預(yù)防過程中阿司匹林既抗AS又抗腫瘤，可謂有“一石二鳥”之用。

三、明確機(jī)制，循證實踐

綜上所述，阿司匹林二級預(yù)防，尤其對于急性冠狀動脈綜合征和急性缺血性卒中后心腦血管事件的預(yù)防機(jī)制主要源于其抗栓作用，當(dāng)然并不能除外其抗炎、穩(wěn)定斑塊和調(diào)節(jié)細(xì)胞行為等抗栓外的作用。一級預(yù)防的獲益機(jī)制則可能主要源于阿司匹林的抗栓外作用，阿司匹林減少一級預(yù)防人群冠心病和卒中發(fā)病率的結(jié)果便是上述機(jī)制使然的有力證據(jù)。

第二篇：談丹蔞片對大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及機(jī)制論文

再灌注治療能快速打開堵塞血管、恢復(fù)冠脈血供，是治療冠心病急性心肌梗死的重要手段，據(jù)統(tǒng)計我國2013 年冠狀動脈經(jīng)皮介入術(shù)(percutaneouscoronary intervention，PCI)的病例數(shù)超過40 萬例，位居世界第2 位。但再灌注治療只是一種局部治療，并不能終止冠心病的病理發(fā)展進(jìn)程，加之治療后出現(xiàn)的一系列心肌缺血再灌注損傷(myocardialischemia reperfusion injury，MIRI)，嚴(yán)重制約了冠心病的治療效果。有研究證實，急性心肌梗死(acutemyocardial infarction，AMI)患者即使接受最佳的再灌注治療，仍有10% ～ 30%出現(xiàn)MIRI，MIRI 被認(rèn)為是導(dǎo)致心梗后心力衰竭發(fā)生率高達(dá)25% 及年死亡率達(dá)10% 的主要原因，因此防治MIRI 是臨床亟需解決的問題。動物實驗發(fā)現(xiàn)內(nèi)皮功能障礙、脂質(zhì)氧化損傷、炎癥反應(yīng)、鈣超載及能量代謝等在MIRI的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。

MIRI 目前臨床尚缺乏有效的干預(yù)藥物，中醫(yī)藥具有作用通路廣泛、作用靶點多樣的特點，在臨床應(yīng)用中具有獨到的優(yōu)勢。丹蔞片是痰瘀同治的上市藥物，臨床用于治療各類冠心病心絞痛，臨床療效良好，目前關(guān)于丹蔞片的實驗研究大都針對心肌梗死后對心臟的保護(hù)作用，而對MIRI 后心臟保護(hù)作用的研究鮮有報道。課題組前期實驗研究發(fā)現(xiàn)，丹蔞片能降低大鼠心肌缺血程度，增加離子轉(zhuǎn)運(yùn)通道相關(guān)酶活性，減少短暫心肌缺血再灌注誘導(dǎo)的致命性及非致命性室顫發(fā)生率、室性心動過速及室性早搏的發(fā)生頻率及持續(xù)時間。在此基礎(chǔ)上，為闡明丹蔞片對已有心肌不可逆壞死的心肌缺血再灌注治療后的心臟保護(hù)作用，本研究觀察其對大鼠心肌壞死程度及心臟射血分?jǐn)?shù)的影響，并從內(nèi)皮功能保護(hù)、抑制脂質(zhì)過氧化及細(xì)胞凋亡方面探討其作用機(jī)制，為擴(kuò)大丹蔞片的臨床應(yīng)用范圍提供數(shù)據(jù)支撐。材料

1.1 動物清潔級雄性健康Wistar 大鼠80 只，體重(300 ± 20)g，購自北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司，合格證號SCXK(京)2012-0001，在中國中醫(yī)科學(xué)院廣安門醫(yī)院動物中心適應(yīng)性喂養(yǎng)3 d。

1.2 藥品及試劑丹蔞片(吉林康乃爾藥業(yè)有限公司，國藥準(zhǔn)字Z20050244);羧甲基纖維素鈉，2，3，5-氯化三苯基四氮唑(TTC)，伊文思藍(lán)，水合氯醛(國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號分別為20081023，20140507，20140228，20130201);乳酸脫氫酶(LDH)試劑盒，肌酸激酶同工酶(CK-MB)試劑盒(貝克曼庫爾特實驗系統(tǒng)有限公司，批號分別為AUZ1443，OSR61155);大鼠內(nèi)皮素(ET)試劑盒(北京北方生物技術(shù)研究所，批號S20083014);大鼠一氧化氮(NO)，丙二醛(MDA)及髓過氧化物酶(MPO)試劑盒(南京建成生物工程研究所，批號分別為A012，A003-1，A044);Protease inhibitorcocktail(Roche 公司，批號11684817910);蛋白免疫印跡法(Western blot)抗體含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-3，B 細(xì)胞淋巴瘤-2(Bcl-2)及Bcl-2相關(guān)X 蛋白(Bax)(CST 公司，批號分別為12768，2772，2870);β-肌動蛋白(β-actin)抗體(中杉金橋公司，批號TA-09);DNA 斷裂的原位末端標(biāo)記法(TUNEL)反應(yīng)液(Roche 公司，貨號11684817910)。

1.3 主要儀器RM6240BD 型多通道生理信號采集處理系統(tǒng)，HX-300 型小動物呼吸機(jī)(成都泰萌科技有限公司);Pro Sound 5000 SSD-SV B 型超聲儀(日本Aloka 株式會社ALOKA 醫(yī)用儀器有限公司);AU640 型全自動生化分析儀(美國Olympus 公司);Image Pro Plus 6.0 圖像分析系統(tǒng)軟件(美國Media Cybernetics 公司);UV-2000 型紫外分光光度計(上海尤尼柯公司);TGL-16 型臺式高速冷凍離心機(jī)(長沙湘儀離心機(jī)儀器有限公司);SPR-960 型全自動酶標(biāo)儀(美國Thermo 科技公司);VE186 型小型高通量垂直電泳槽VE180 及轉(zhuǎn)移電泳槽(上海天能公司)。方法

2.1 分組及給藥大鼠按體重隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、丹蔞片組，假手術(shù)組22 只，模型組30 只，丹蔞片組28 只，預(yù)防性給藥7 d，然后進(jìn)行造模手術(shù)。其中假手術(shù)及模型組均以0.5%的羧甲基纖維素鈉灌胃，根據(jù)文獻(xiàn)丹蔞片給藥劑量選擇0.9 g·kg-1，丹蔞片研碎后溶于0.5%羧甲基纖維素鈉制成混懸液，灌胃體積為10 mL·kg-1。

2.2 模型建立以10% 水合氯醛腹腔注射麻醉，經(jīng)口腔行氣管插管，連接小動物呼吸機(jī)，呼吸頻率約70 次/min，潮氣量7 ～ 8 mL，呼吸比1 ∶ 3，連接多通道生理信號采集系統(tǒng)，描記術(shù)前Ⅱ?qū)?lián)心電圖。于左側(cè)第3 或第3 肋間切口，鈍性分離皮下組織及肌肉，打開心包膜，在左心耳下緣距肺動脈弓根部2 mm處結(jié)扎(3 /8 圓針)，進(jìn)針深度約1 mm，寬度約2 mm，在冠脈前降支面置硅膠管連同冠脈用4 號醫(yī)用縫合線一起結(jié)扎。50 min 后，剪去結(jié)扎線，連同硅膠管一同取出，進(jìn)行再灌注。假手術(shù)組只在相應(yīng)部位穿線不結(jié)扎。關(guān)閉胸腔，逐層縫合肌肉、皮膚，術(shù)后腹腔注射青霉素10 萬單位預(yù)防感染。結(jié)扎成功標(biāo)志: 結(jié)扎下方心肌顏色變灰白，同時心電圖ST 段進(jìn)行性抬高甚至弓背向上(較正常至少抬高2 mm)。復(fù)灌成功標(biāo)志: 心臟顏色由灰白逐漸恢復(fù)正常，或30 min 內(nèi)心電圖ST 下降至少50%。造模前心率<350 次/min 者，未到規(guī)定時間死亡者及造模不成功者予以剔除。

2.3 標(biāo)本采集及指標(biāo)檢測

2.3.1 再灌注2 h 心肌酶、內(nèi)皮功能檢測每組取6 只大鼠，采集血清，以全自動生化分析儀檢測LDH及CK-MB，以放射免疫法檢測血清ET-1，紫外分光光度計檢測血清NO 水平，紫外分光光度計檢測心肌MDA，MPO 水平。

2.3.2 心肌梗死面積測定未取血大鼠于再灌注48 h 時處死，術(shù)前與取材前B 超檢測心臟射血分?jǐn)?shù)，從大鼠左肺靜脈注射0.5%依文思藍(lán)約1.5 mL，待大鼠口唇爪甲變藍(lán)后摘取心臟，以冰鹽水沖洗，擦干，置于-20 ℃凍存20 min 后，沿結(jié)扎線以下切成等厚的4 ～ 5 片，放入1% TTC 溶液中，37 ℃ 孵育15 ～ 20 min，流水沖洗。非缺血區(qū)呈藍(lán)色，缺血未梗死區(qū)呈磚紅色，缺血區(qū)(area at risk，AAR)為灰白區(qū)與磚紅色區(qū)域之和，梗死區(qū)(area of necrosis，AN)呈灰白色，放置于10%甲醛中室溫固定24 h。然后用L2035AW Pioneer 數(shù)碼照相機(jī)進(jìn)行圖像采集，以Version 6.0 Media Cybernetics Image-Pro Plus 圖像分析軟件分別計算出梗死區(qū)、占缺血區(qū)面積的比例，缺血區(qū)占左室面積的比例。

2.3.3 Western blot 法檢測心肌Caspase-3，Bax 及Bcl-2 蛋白表達(dá)每組取6 只大鼠分別檢測心肌Caspase-3，Bax 及Bcl-2 蛋白表達(dá)。根據(jù)試劑說明書提取蛋白，BCA 法檢測組織蛋白濃度，調(diào)整蛋白濃度，上樣，根據(jù)蛋白目的分子量設(shè)定電泳條件，轉(zhuǎn)膜，封閉，經(jīng)一抗(1 ∶ 1 000)，二抗孵育，顯色曝光，將顯色后的圖片掃描后，使用Gel Image system ver.4.00軟件(上海天能科技有限公司)對圖像進(jìn)行灰度分析。以目的蛋白灰度值/β-actin 灰度值表示目的蛋白相對表達(dá)量。

2.3.4 TUNEL 法檢測細(xì)胞凋亡每組取6 只大鼠做心臟石蠟切片，脫水，蛋白酶K 中孵育后避光條件下加稀釋液，TUNEL 反應(yīng)液，37 ℃放置1 h 轉(zhuǎn)化converter-POD(POD)，37 ℃ 烤箱中放置30 min，取出沖洗后加DAB，經(jīng)蘇木素復(fù)染，梯度酒精脫水，二甲苯溶液透明，封片。于光學(xué)顯微鏡下觀察，其中正常心肌細(xì)胞核呈藍(lán)色，凋亡細(xì)胞核呈現(xiàn)出深淺不一的棕褐色。每張切片于凋亡細(xì)胞分布相同區(qū)域隨機(jī)選取5 個高倍視野，計算平均每個視野中的凋亡細(xì)胞數(shù)占總細(xì)胞數(shù)的百分比，即為凋亡指數(shù)。

2.4 統(tǒng)計學(xué)處理

采用SPSS 17.0 統(tǒng)計軟件。計量資料結(jié)果以珋x ± s 表示，多組間比較采用單因素方差分析，P < 0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果

3.1 丹蔞片對再灌注2 h 心肌酶的影響與假手術(shù)比較，模型組及丹蔞片組LDH 及CK-MB 均顯著升高(P < 0.01);與模型組比較，丹蔞片組LDH 及CK-MB 均明顯降低(P < 0.05)。

3.2 丹蔞片對再灌注2 h 內(nèi)皮功能的影響與假手術(shù)比較，模型組血清ET-1 顯著上升(P < 0.01)，NO 明顯下降(P < 0.05);與模型比較，丹蔞片組ET-1 明顯下降(P < 0.05)，而NO 明顯上升(P<0.05)。

3.3 丹蔞片對再灌注2 h 心肌組織氧化損傷的影響與假手術(shù)組比較，模型組MDA 及MPO 均顯著升高(P < 0.01);與模型組比較，丹蔞片組MDA 及MPO 明顯降低(P < 0.05)。

3.4 丹蔞片對再灌注48 h 心臟射血分?jǐn)?shù)及心肌梗死面積的影響與假手術(shù)組比較，模型組及丹蔞片組大鼠EF 值顯著下降(P < 0.01);與模型組比較，丹蔞片組大鼠EF 值明顯上升(P < 0.05)。假手術(shù)組無心肌梗死;與模型組比較，丹蔞片組心梗/缺血面積比率顯著下降(P < 0.01)。

3.5 丹蔞片對再灌注48 h 心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)影響與假手術(shù)比較，各組心肌凋亡指數(shù)均有顯著升高(P < 0.01);與模型組比較，丹蔞片能顯著降低心肌凋亡指數(shù)(P < 0.01)。

3.6 丹蔞片對再灌注48 h 心肌Caspase-3，Bax 及Bcl-2 的蛋白表達(dá)的影響與假手術(shù)比較，模型組及丹蔞片組Caspase-3 表達(dá)明顯升高(P < 0.05，P<0.01);與模型比較，丹蔞片組Caspase-3 表達(dá)顯著降低(P < 0.01)。與假手術(shù)比較，模型組及丹蔞片組Bax 表達(dá)明顯升高(P < 0.05，P < 0.01);與模型比較，丹蔞片組Bax 表達(dá)顯著降低(P < 0.01)。與假手術(shù)比較，模型組及丹蔞片組Bcl-2 表達(dá)顯著降低4 討論MIRI 在臨床可表現(xiàn)為再灌注心律失常，心肌無復(fù)流現(xiàn)象及心肌頓抑等，此類患者預(yù)后不良，心力衰竭、心源性猝死等發(fā)生機(jī)率較高。其發(fā)生機(jī)制復(fù)雜，至今還未完全明確，綜合以前研究結(jié)果認(rèn)為，氧自由基損傷、炎癥反應(yīng)、內(nèi)皮功能障礙、鈣超載等在MIRI 過程中相互影響，對心肌造成巨大損害。其中內(nèi)皮功能障礙是動脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展的始動環(huán)節(jié)，更是貫穿心肌缺血及再灌注損傷的全過程。內(nèi)皮損傷后其分泌功能障礙，擴(kuò)血管物質(zhì)NO 減少，破壞了與縮血管物質(zhì)ET 間的動態(tài)平衡，一方面內(nèi)皮損傷促進(jìn)血管收縮心肌缺血進(jìn)一步加重;另一方面造成內(nèi)皮細(xì)胞的屏障作用破壞，為中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞及炎性細(xì)胞物質(zhì)的浸潤提供了場所，間接加重炎癥反應(yīng)。此外MIRI 發(fā)生時，缺血區(qū)心肌神經(jīng)末梢釋放大量兒茶酚胺，被單胺氧化酶分解后產(chǎn)生大量氧自由基(OFR)，超過機(jī)體的清除能力，引發(fā)鏈?zhǔn)街|(zhì)過氧化反應(yīng)，損傷細(xì)胞膜、細(xì)胞器乃至細(xì)胞內(nèi)核酸，進(jìn)而導(dǎo)致細(xì)胞凋亡甚至壞死，OFR對組織的損傷要遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于缺血本身造成的損傷。心肌細(xì)胞凋亡是MIRI 的最終環(huán)節(jié)，心肌缺血20 ～30 min 即可發(fā)生壞死并且具有不可再生的特性，故壞死周圍的瀕死心肌是臨床治療上爭取的對象，阻止壞死周邊心肌細(xì)胞凋亡成為治療MIRI 的關(guān)鍵病理基礎(chǔ)，文中提到的氧自由基、炎癥因子、鈣超載等共同對心肌細(xì)胞造成損傷導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。Bax 和Bcl-2 是一對調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡的基因，Bax 促進(jìn)細(xì)胞凋亡而Bcl-2 可抑制細(xì)胞凋亡，激活下一級Caspases酶系引起細(xì)胞的凋亡。其中Caspase-3 是細(xì)胞凋亡的主要執(zhí)行者，活化后可分解細(xì)胞內(nèi)的重要蛋白及底物，進(jìn)而導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。

本研究發(fā)現(xiàn)，丹蔞片在再灌注損傷發(fā)生的早期能促進(jìn)MIRI 后內(nèi)皮細(xì)胞NO 的釋放，抑制縮血管物質(zhì)的釋放，修復(fù)受損的內(nèi)皮分泌功能。MDA 反應(yīng)體內(nèi)自由基的多少，MPO 反應(yīng)體內(nèi)中性粒細(xì)胞的活動程度，丹蔞片能抑制心肌組織中MDA 及MPO 生成，改善自由基及炎癥細(xì)胞對心肌的損傷。此外，丹蔞片在減少心肌梗死面積的同時還能有效阻止MIRI后心臟射血分?jǐn)?shù)的下降趨勢。有臨床研究證實，低EF 值冠心病患者在冠脈旁路移植術(shù)前，應(yīng)用主動脈內(nèi)球囊反搏術(shù)可改善心功能后，能減少術(shù)后心梗、低心排血量等嚴(yán)重并發(fā)癥的發(fā)生并能降低圍術(shù)期病死率。另對擇期PCI 的患者進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，白細(xì)胞計數(shù)，C 反應(yīng)蛋白(CRP)升高與EF 值降低有關(guān)，提示丹蔞片改善心臟EF 值可能與降低炎癥反應(yīng)的作用有關(guān)。本研究結(jié)果顯示，丹蔞片可抑制心肌促凋亡蛋白Bax，Caspases-3 的表達(dá)，提高抑制凋亡基因蛋白Bcl-2 的表達(dá)，丹蔞片可能通過抑制細(xì)胞凋亡保護(hù)梗死區(qū)周圍的心肌，從而降低心肌梗死區(qū)與缺血區(qū)比例，保護(hù)再灌注損傷的心臟。現(xiàn)代藥理研究表明，丹蔞片成分中黃芪、丹參、葛根、川芎等諸多藥物提取物均有廣泛的心血管效應(yīng)，采用生物信息學(xué)方法推測它們可能通過環(huán)加氧酶2，瘦素蛋白，一氧化氮合酶3 及低密度脂蛋白受體起作用，但尚缺乏相關(guān)實驗驗證，這些已知化學(xué)成分協(xié)同作用于心血管系統(tǒng)，從多途徑、多靶點發(fā)揮MIRI 后對心臟的保護(hù)作用。

丹蔞片具有活血化痰、寬胸通陽之效，在臨床應(yīng)用中對穩(wěn)定型心絞痛、支架植入術(shù)后患者及非血運(yùn)重建急性冠脈綜合征患者均有確切的療效，亦有臨床研究表明丹蔞片具有一定的降血脂和穩(wěn)定斑塊作用，加之其降血壓和減慢心率的作用共同組成緩解臨床癥狀的基礎(chǔ)。MIRI 是一個復(fù)雜的病理過程，心肌細(xì)胞壞死及凋亡是心肌組織學(xué)損害的最終結(jié)果，該過程有大量信號通路參與，損害通路和救助通路交織成網(wǎng)狀。本實驗探索了丹蔞片治療MIRI 機(jī)制，至于其對信號通路及其相關(guān)調(diào)控蛋白基因的影響有待于進(jìn)一步研究，明確其作用機(jī)制，為丹蔞片防治MIRI 提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和實驗支撐。