第一篇：北大醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室開展線粒體基因相關(guān)疾病的基因診斷

北大醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室開展線粒體基因相關(guān)疾病的基因診斷

中心實(shí)驗(yàn)室在與小兒科和神經(jīng)科多年合作研究基礎(chǔ)上，經(jīng)2000年~2003年對(duì)本院兒科門診和病房、神經(jīng)科門診、北京兒童醫(yī)院、北京協(xié)和醫(yī)院和天津兒童醫(yī)院等單位的病人進(jìn)行基因診斷研究的基礎(chǔ)上，正式開展以下基因診斷和產(chǎn)前基因診斷項(xiàng)目（已于2001年底得到改革辦批準(zhǔn)上報(bào)衛(wèi)生局，按100元/人份收費(fèi)。在此試運(yùn)行期間我室不直接接待病人，而由合作的臨床科室采血，由衛(wèi)生員轉(zhuǎn)送標(biāo)本）。

本室負(fù)責(zé)人：戚豫，研究員、博士生導(dǎo)師；專業(yè)方向：神經(jīng)遺傳病 實(shí)驗(yàn)人員：張英、王松濤、鈕淑蘭

報(bào)告和咨詢醫(yī)師：馬祎楠（66551122-2045）

基因診斷實(shí)驗(yàn)室：科研樓五層26、37號(hào)

病種：在臨床表現(xiàn)典型、有母系家族史和血乳酸/丙酮酸陽性的情況下可選擇以下檢查： 1.MELAS、（mtDNA3243位點(diǎn)）

2.母系遺傳糖尿病（mtDNA3243位點(diǎn)）3.MERRF（mtDNA8344位點(diǎn)）

4.Leigh綜合征（mtDNA8993位點(diǎn)）

5.LHON（Leber病，mtDNA11778位點(diǎn)）

6.藥物性耳聾（氨基糖甙類抗生素引發(fā)，mtDNA1555位點(diǎn)）

取血要求：

3~5 ml抗凝全血（除肝素外的所有抗凝劑均可）

填寫申請(qǐng)單，并提供主訴和診斷依據(jù)（如生化、眼底、影象和最小運(yùn)動(dòng)量試驗(yàn)結(jié)果）

收標(biāo)本時(shí)間：周一~周五全天8:00~16:00 收標(biāo)本地點(diǎn)：北京大學(xué)第一醫(yī)院（北大醫(yī)院）門診部（位于平安大街廠橋路口南側(cè)）科研樓一層26、21和25號(hào)房間。

報(bào)告周期：一周出口頭報(bào)告，正式報(bào)告10天（帶圖片）。聯(lián)系電話：66551122-轉(zhuǎn)分機(jī) 聯(lián)系人：王松濤（分機(jī)2044），馬祎楠（2045）；張英/鈕淑蘭（分機(jī)2656/2752/2748）

第二篇：臨床基因擴(kuò)增(PCR)診斷實(shí)驗(yàn)室工作規(guī)范(試行)

附件

2臨床基因擴(kuò)增（PCR）診斷實(shí)驗(yàn)室工作規(guī)范（試行）

為使基因擴(kuò)增診斷技術(shù)規(guī)范有效的用于臨床，保證檢測(cè)質(zhì)量，更好地為臨床疾病的診療服務(wù)，特制定本規(guī)范。

1．臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室的設(shè)置：和儀器設(shè)備

臨床PCR實(shí)驗(yàn)室應(yīng)分為四個(gè)隔開的工作區(qū)域，每一區(qū)域都應(yīng)有專用的儀器設(shè)備。即1）試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)；2）標(biāo)本制備區(qū)；3）擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)和的擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。如使用擴(kuò)增和產(chǎn)物檢測(cè)同時(shí)完成的熒光定量PCR方法或全自動(dòng)分析儀如Cobas－T（Anplicor）等，則3）和4）兩個(gè)區(qū)可合并。

與上述特定實(shí)驗(yàn)區(qū)有關(guān)的各個(gè)房間必須有明確的標(biāo)記，以避免不同工作區(qū)內(nèi)的設(shè)備物品如加樣器、試劑等的移出或不同的工作區(qū)間發(fā)生混淆。進(jìn)入各個(gè)工作區(qū)必須遵循一嚴(yán)格的）順序，只能按單一方向進(jìn)行，即從試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)～標(biāo)本制備區(qū)～擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)～擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。不同的工作區(qū)必須使用不同的工作服，可以不同的顏色來區(qū)別。此外，當(dāng)工作人員離開各工作區(qū)時(shí)，不得將各區(qū)特定的工作服帶出。

1．l．試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)

本區(qū)用于貯存溶液的制條、溶液的分裝和主反應(yīng)混合液的制各。本區(qū)儀器設(shè)備配置：（l）4 冰箱和一20 冰柜；（2）混勻器；（3）微量加樣器若干支（覆蓋1～1000pl）；（5）專用工作服和工作鞋；（6）專用辦公用品；（7）消耗品： 一次性手套、一次性吸水紙、耐高壓處理的離。心管和加樣器吸頭（帶濾心）；（8）可移動(dòng)紫外燈（近工作臺(tái)面）。

1．2．標(biāo)本制備區(qū)

標(biāo)本貯存、核酸提取及貯存均在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行。RNA測(cè)定時(shí)的單鍵。cDNA合成也在本區(qū)進(jìn)行。本區(qū)儀器設(shè)備自己置：（l）4冰箱、－20 或-70 冰柜三（2）高達(dá)臺(tái)式冷凍離心機(jī)；（3）混勻器；（4）水浴箱或加熱模塊；（5）微量如排器若干支（覆蓋l～1000μl）；（6）專用工作服和工作鞋；（7）專用辦公用品；（8）消耗品：一次性手套、一次性吸水紙、耐高壓處理的部心管和加樣器吸頭（帶濾心）；（9）可移動(dòng)紫外燈（近工作臺(tái)面）；（10）超凈工作臺(tái)；（11）超聲波水浴（處理大分子DNA適用）。

1．3．?dāng)U增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)

模板材料（來自標(biāo)本制備區(qū)）和主反應(yīng)混合液（來自試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)）的加入以及擴(kuò)增反應(yīng)等專門在本二．作區(qū)內(nèi)近行。本區(qū)儀器設(shè)備自己置：（l）核酸擴(kuò)增僅三（2）微量加樣器（覆蓋1～1000 μl）；（3）專用工作服和工作鞋；（4）專用辦公用品；（5）消耗品：一次性手套、一次性吸水紙、高壓處理的部心管和加樣器吸頭（帶濾心）；（6）可移動(dòng)紫外燈（近工作臺(tái)面）。

1．4.擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)

本區(qū)面積應(yīng)為6～8m。擴(kuò)增嚴(yán)物的分析在本區(qū)進(jìn)行。本區(qū)儀器設(shè)備配置：視檢測(cè)方法不同而定，如為PCR�ELISA，則需（l）微量加樣器若干支（覆蓋l～2s（2）酶標(biāo)權(quán)、洗報(bào)機(jī)和恒溫箱;（3）專用工作服和工作鞋；（4）專用辦么，用品；（5）消耗品：～次性手套、一次性吸水紙、加樣器吸頭（帶濾心）；（6）可移動(dòng)紫外燈（近工作臺(tái)面）。

2．臨床基因擴(kuò)增診斷實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量保證

臨床基因擴(kuò)增診斷實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量保證涉及到整個(gè)基因擴(kuò)增檢測(cè)的所有階段，即測(cè)定分析前的標(biāo)本來集處理、測(cè)定中的核酸提取、擴(kuò)增和產(chǎn)物分析以及測(cè)定后的結(jié)果報(bào)告等。

2．1．標(biāo)本的采集

常用于基因擴(kuò)增檢測(cè)的臨床標(biāo)本包括EDTA或拘檬酸鈉抗凝全血或骨髓、血清或血漿．痰、腦普液、尿及分泌物等。采樣容器最好是密閉的一次性的，如真空系血管。一次性塑料容器使用時(shí)無需進(jìn)一步預(yù)處理。當(dāng)使用非密鬧采樣系統(tǒng)時(shí)，如尿、分泌物和骨髓的采禪，必須注意防止來自來樣者的皮屑或分泌物的污染。采樣者采樣時(shí)起碼要談．一次性手套?？芍貜?fù)使用的玻璃器〔應(yīng)高壓處理，因?yàn)椴Ａ鳎ǔ：胁灰资Щ畹腁NA酶。RNA酶的主要來源是實(shí)驗(yàn)人員的手。最好是熱滅菌，250 烘烤 4小時(shí)以上可使RNA酶永久性失活。全血和骨髓標(biāo)本必須進(jìn)行抗凝處理。通常EDTA和拘檬酸鹽是首選的抗凝劑。不能使用肝素抗凝，因?yàn)楦嗡厥荰aq酶的強(qiáng)抑制劑，而且在其后的核酸提取步驟中很難去除肝素。臨床用于RNA（如HCV RNA）測(cè)定的血標(biāo)本最好進(jìn)行抗凝處理，并盡快（3小時(shí)以內(nèi)）分離血漿，以避免RNA的降解。如未作抗凝處理，則物血后，必須在1小時(shí)內(nèi)分離血清。

2．2．標(biāo)本的穩(wěn)定化處

DNA分析，標(biāo)本采集后一般不需要特殊的穩(wěn)定化處理，但標(biāo)本應(yīng)及時(shí)送到實(shí)驗(yàn)室。由于RNA易于降解，因此用于RNA測(cè)定的標(biāo)本的穩(wěn)定化處理有時(shí)是必不可少的，Chaotropic物質(zhì)[特別是異硫氨酸抓鹽（Guanidine thiocyanate，GITC）]可使DNAse和RNAse立即失活。在采集標(biāo)本時(shí)，可將標(biāo)本材料如血清或血漿加入含有GITC的試劑管中進(jìn)行穩(wěn)定化處理。GITC可使RNAse不可逆失活的適合濃度為5mol/L。如果GITC濃度小于 4mol／L；RNA會(huì)很快降解。在適當(dāng)?shù)姆€(wěn)定化處理后，標(biāo)本一般不需要冷藏即可郵寄。如果溫度低于室溫，GITC即會(huì)結(jié)晶，所以在加入標(biāo)本前應(yīng)使之完全溶解。如標(biāo)本不能及時(shí)送到實(shí)驗(yàn)室，最好選用 GITC處理方法以穩(wěn)定標(biāo)本。

2．3標(biāo)本的運(yùn)送

標(biāo)本來集后應(yīng)盡快送至實(shí)驗(yàn)室，經(jīng)過適當(dāng)穩(wěn)定化處理的標(biāo)本可在常溫下通過郵寄運(yùn)送。如用于 DNA提取的含 EDTA的全血標(biāo)本及用于 RNA提取的經(jīng) GITC 穩(wěn)定化處理的標(biāo)本。是否冷藏取決于標(biāo)本的用途，較長時(shí)間在室溫貯存會(huì)導(dǎo)致靈敏度大大降低。通常應(yīng)采用不易破碎的容器裝載標(biāo)本。用于RNA檢測(cè)的標(biāo)本，如果在未經(jīng)穩(wěn)定化處理，則必須速凍后，放在干冰中運(yùn)送。

2．4．標(biāo)本的貯存

臨床體液標(biāo)本如血清／血漿等可于-70 下長時(shí)間貯存。用于DNA測(cè)定的核酸樣本應(yīng)在 10mmol／L Tris，lmmol／L EDTA緩沖液（pH 7．5－8．0）中 4 保存。用于RNA測(cè)定的核酸樣本應(yīng)在緩沖液中一80 C或液氮中貯存。用乙醇沉淀的核酸樣本貯存在一20OC即可。用 GIT（：穩(wěn)定化處理的 RNA標(biāo)本在室溫可保存 7天，如貯存時(shí)間較長，則RNA測(cè)定敏感性略有下降。

2．5．標(biāo)本的處理（核酸提?。?/p>

核酸提取是決定擴(kuò)增檢測(cè)成敗的關(guān)鍵性步驟。通常，核酸制備質(zhì)量不高是由于抑制物去除不完全所致。抑制物可能來源于標(biāo)本本身（如血紅素及其前體或降解產(chǎn)物）或核酸提取過程中確．留的有機(jī)溶劑（如酚、氯份等），這些物質(zhì)對(duì)其后的酶反應(yīng)步驟具有強(qiáng)烈的抑制作用，從而影響靶核酸的擴(kuò)增測(cè)定。如在 HBVDNA PCR測(cè)定中。采用對(duì)血清杯水煮沸裂解以釋放DNA的方法時(shí)，肉眼觀察不明顯的溶血也會(huì)對(duì)擴(kuò)增測(cè)定有很強(qiáng)的抑制作用，應(yīng)使用正規(guī)的核酸提取方法（如經(jīng)典的酚一氯份提取方法、硅吸附法等）。當(dāng)標(biāo)本為疾時(shí)，則必須先進(jìn)行液化處理。再提取核酸。需注意的是；液化時(shí)不能加熱，液化時(shí)間不能過長。此外，當(dāng)靶核酸為 RNA時(shí)，降解是一個(gè)主要問題。RT－PCR測(cè)定失敗的常見原因是標(biāo)本在運(yùn)送前來經(jīng)充分的穩(wěn)定化處理．及核酸提取試劑的RNase的污染。對(duì)于前者，要核查測(cè)定分析前的步驟，如果沒．現(xiàn)RNA降解的證據(jù)。實(shí)驗(yàn)室則應(yīng)拒絕接受標(biāo)本，要求重新采取標(biāo)本，并對(duì)運(yùn)送者給以詳細(xì)的指導(dǎo)。對(duì)于后者，建議常規(guī)使用高質(zhì)量的商品核酸提取試劑。

2．6靶核酸的逆轉(zhuǎn)錄和擴(kuò)增

2．6.l靶RNA的逆轉(zhuǎn)錄

cDNA合成為RT-PCR中的第一個(gè)酶反應(yīng)步驟，所產(chǎn)生的 cDNA為靶RNA的反向互補(bǔ)鏈。為后面擴(kuò)增的模板。下述因素通常影響cDNA合成的效率：

l）RT活性的降低或完全缺乏。必須排除由于酶質(zhì)量不高、試劑降解或加樣錯(cuò)誤而引起的 cDNA合成不充分。

2）RT或熱穩(wěn)定聚合酶的抑制物（如酚、血紅素）。當(dāng)RNA明顯為完整而沒有擴(kuò)增時(shí)，應(yīng)懷疑有此類抑制物。

3）RNA的降解。

2．6．2影響擴(kuò)增的因素

有多種因素可引起PCR的假陽性或假陰性結(jié)果，如抑制劑或酶活性喪失（見上）、遲大溫度不對(duì)、晚十十濃度不佳、患者標(biāo)本或試劑受污染等。反應(yīng)孔中熱傳導(dǎo)的均一性極為重要，循環(huán)儀的溫度控制和加熱塊中熱傳導(dǎo)的一致性必須有常規(guī)的檢查以避免假陰性結(jié)果。

2．7污染

在實(shí)際工作中，常見有以下幾種污染類型：PCR片段的污染（產(chǎn)物污染）三天然基因組DNA的污染；試劑污染（貯存液或工作液）：以及交及污染（如氣溶膠從一個(gè)陽性標(biāo)本擴(kuò)散到原本陰性的標(biāo)本）。對(duì)于所有的擴(kuò)增技術(shù)，由于圍繞實(shí)驗(yàn)室來尋找污染源不僅耗時(shí)而且還很繁瑣，所以防止污染重在預(yù)防。一旦發(fā)生了污染，實(shí)驗(yàn)就必須停止，直到發(fā)現(xiàn)了污染源為止。如果沒有例外，實(shí)驗(yàn)結(jié)果必須作廢，即使平行的污染質(zhì)控中僅有一管顯示出有PCR片段污染。

2．7．l．測(cè)定分析前的污染源。

測(cè)定分析前實(shí)驗(yàn)材料的污染主要來自非病人標(biāo)本來源的核酸。

2．7．2．測(cè)定分析階段的污染源。

通常，測(cè)定分析階段的每一步都可能發(fā)生對(duì)樣本的污染。反應(yīng)混合液的任何成分及核酸的制備和反應(yīng)建立階段所涉及到的實(shí)驗(yàn)設(shè)備的任何部位都是可能的污染源。如受污染的試劑（例如今血清白蛋白，明腋成礦物油）；商品酶制劑；消耗品（如反應(yīng)管，吸頭）和實(shí)驗(yàn)設(shè)備（如加樣器、離心機(jī)）。污染的來源之一是許多樣本在同時(shí)制備時(shí)的交及污染，但最主要的污染來源為以前擴(kuò)增產(chǎn)生的特異產(chǎn)物DNA片段。在前面三個(gè)工作區(qū)中，不當(dāng)?shù)膶?shí)驗(yàn)操作

會(huì)引起所使用的試劑、消耗品或?qū)嶒?yàn)設(shè)備的污染。而在產(chǎn)物分析區(qū)，當(dāng)吸取PCR產(chǎn)物用于檢測(cè)時(shí)，非常容易引起污染，因此必須制定并嚴(yán)格執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)操作程序。

2．7．3．污染的避免。

要避免污染，首先應(yīng)是預(yù)防而不是排除污染，前面所述工作區(qū)的嚴(yán)格劃分的目的正是為了預(yù)防污染。為避免以前測(cè)定中所產(chǎn)生的擴(kuò)增產(chǎn)物的污染，可設(shè)法將其破壞掉。如在擴(kuò)增反應(yīng)中用dUTP取代部分dTTP：從而產(chǎn)生的特異擴(kuò)增片段含有尿嘧啶，這樣擴(kuò)增前在反應(yīng)混合液中加入尿嘧啶糖激酶（UNG），可破壞來自以前測(cè)定的擴(kuò)增產(chǎn)物，從而避免其對(duì)將要進(jìn)行的擴(kuò)增測(cè)定的污染。另外一種方法是持續(xù)的長波紫外燈照射，通過異補(bǔ)骨脂素光化；單產(chǎn)生DNA加合物，由于DNA加合物對(duì)擴(kuò)增沒有反應(yīng)但又不妨礙PCR后雜交過程，所以這些方法也能防止污染。由于上面提到的方法會(huì)給人一種假的安全感，所以不能以其來替代嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)室設(shè)置和管理，尤其是這些方法不能防止外來非擴(kuò)增的天然 DNA的污染。

2．7．4．去除污染的措施。

工作完后必須定期采取有效的去污染措施，結(jié)合各種不同的方法可達(dá)到最佳效果。去污染措施包括但不僅限下面幾種：用100ml／L次氨酸鈉清潔表面；試驗(yàn)了后長時(shí)間的紫外照射實(shí)驗(yàn)操作臺(tái)和其他表面；實(shí)驗(yàn)設(shè)備如加樣器的高壓消毒。

2．8．?dāng)U增產(chǎn)物的分析

擴(kuò)增產(chǎn)物的測(cè)定有各種方法。如電泳、限制性酶切、斑點(diǎn)印跡、雜交、測(cè)序、分光光度法定量等。但臨床PCR測(cè)定項(xiàng)目基本上都使用探針雜交方法。

2．8．l．與雜交檢測(cè)有關(guān)的干擾。

雜交結(jié)果不充分的原因可能是基因探針不合適、標(biāo)記方法不對(duì)、對(duì)探針的標(biāo)記不夠、雜交或洗滌方法不合適。最常使用的基因探針有：DNA片段、合成的尊核普酸和體外的轉(zhuǎn)錄本（反義 RNA探針）。探針的標(biāo)記物常用的有生物素、地高辛、熒光景和同位素等。在擴(kuò)增后的雜交檢測(cè)中，應(yīng)該嚴(yán)格遵守商品試劑盒確定的雜交程序和雜交條件。溫度太低或離子強(qiáng)度太高都會(huì)降低雜交的嚴(yán)格性。還會(huì)給檢測(cè)信號(hào)的特異性帶來負(fù)面影響。相反，提高潤度和／或降低離子強(qiáng)度會(huì)增加雜交的嚴(yán)格性。因此，嚴(yán)密控制溫度和試劑是避免假陽性和假陰性結(jié)果的先決條件，要注意的是，溫度和離子強(qiáng)度不能同時(shí)改變。

2．9．質(zhì)量控制

如上所述，應(yīng)該開展各種質(zhì)控來評(píng)價(jià)測(cè)定分析當(dāng)中各步驟的質(zhì)量，如RNA的完整性、對(duì)擴(kuò)增是否合適和敏感。

2．9．1．室內(nèi)質(zhì)量控制

必須對(duì)DNA和RNA分析的各步進(jìn)行質(zhì)量控制，以避免假陽性和假陰性，保證測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性。由于PCR測(cè)定的高敏感性，所以試劑的生產(chǎn)、實(shí)驗(yàn)材料的準(zhǔn)備、PCR本身和實(shí)驗(yàn)中的每一步都要求有質(zhì)控。擴(kuò)增反應(yīng)前后的酶反應(yīng)各步也應(yīng)有質(zhì)控，只不過在質(zhì)控細(xì)節(jié)上稍有不同。

2．9．1．1．與實(shí)驗(yàn)材料的準(zhǔn)備有關(guān)的質(zhì)控。

對(duì)DNA提取試劑的效果最常用球脂糖凝膠電冰來檢測(cè)?？芍崛〉腄NA是否發(fā)生降解。用常規(guī)的手工提取方法制備的DNA的平均長度一般為～100kb，用適合PCR的DNA

提取試劑盒制備的DNA的長度平均范圍為30�40kb。然而；明顯出現(xiàn)降解的DNA（在1和10kb的低分子量范圍內(nèi)）在經(jīng)瓊脂糖凝膠電冰分離和用溴化乙錠染色后也可見有強(qiáng)的熒光信號(hào)。用對(duì)甲基化不敏感的限制性內(nèi)切酶（如EcoRI）消化DNA，然后電泳分離，能夠?qū)γ富钚缘囊种苿┻M(jìn)行質(zhì)控（在抑制劑存在的情況下，高分子量的片段不被酶切）。潛在的抑制劑的存在通常用260nm和280nm的分光光度測(cè)定來估計(jì)，好的 DNA提取物，A260/A280 比值應(yīng)該在 1． 75--2．0之間；否則，污染（殘留的蛋白或酚）可能會(huì)很高。僅用光度計(jì)比色方法不能對(duì)DNA的完整性下結(jié)論。

最快的對(duì)總RNA提取質(zhì)量控制的方法是在非變性條件下作瓊脂糖凝膠電冰，這一點(diǎn)跟DNA分離相同，然而，如果對(duì)結(jié)果產(chǎn)生懷疑，就應(yīng)該在變性的條件下作瓊脂糖凝膠電泳以檢測(cè)RNA的完整性。在理想情況下，三種主要的核糖體RNA(28S、18s和 5S）在凝膠上出現(xiàn)的帶相對(duì)較窄。如發(fā)生RNA的降解。則帶被拖向低分子量或出現(xiàn)帶的缺失。測(cè)定核糖體RNA帶的密度指數(shù)可作為對(duì)RNA制備的質(zhì)量評(píng)價(jià)的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)；對(duì)向低分子量拖尾的、不對(duì)稱性的峰的評(píng)估也是RNA完整性的合適的指標(biāo)。另外，瓊脂糖凝膠電泳能顯示出在RNA的制備中被DNA污染的程度。由于這些原因，單獨(dú)的光電比色不能對(duì)RNA的完整性下結(jié)論。

2．9．1．2．對(duì)cDNA合成和擴(kuò)增的質(zhì)控。

本部分包括陽性質(zhì)控和陰性質(zhì)控。

2．．9．l．2．l．cDNA的合成。

對(duì)CDNA合成的效率進(jìn)行監(jiān)控的關(guān)鍵性的質(zhì)控是使用一個(gè)內(nèi)反應(yīng)質(zhì)控。cDNA的合成可以從存在子每一個(gè)RNA提取物中的cRNA 轉(zhuǎn)錄本開始(即普遍表達(dá)的mRNA，如核糖體蛋白轉(zhuǎn)錄本這一類的所謂的管家基因），也可從在制備時(shí)加入樣本中的作為內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)的 RNA開始。cDNA合成的內(nèi)質(zhì)控是能夠產(chǎn)生確定產(chǎn)物的陽性質(zhì)控；如果擴(kuò)增不成功，質(zhì)控就顯示出有RNA的降解、cDNA合成的過程中錯(cuò)誤啟動(dòng)或酶活性喪失。

加入確定量的擴(kuò)增質(zhì)控物可以檢測(cè)RT�PCR的靈敏度。對(duì)于RT－PCR方法 所必須的污染質(zhì)控為無逆轉(zhuǎn)錄靶RNA的陰性質(zhì)控。

2．9．1．2．2．PCR反應(yīng)。

內(nèi)反應(yīng)質(zhì)控是陽性質(zhì)控?？墒褂脤?duì)有機(jī)體存活所必須的靶基因作質(zhì)按，這些基因至少以豐臺(tái)子狀態(tài)存在，因?yàn)槿绻蚪M缺失這些基因，將使有機(jī)體致死（所謂的致死因子），一個(gè)比較好的例子就是維生素D血漿結(jié)合蛋白的基因；在世界范圍內(nèi)的許多種族已發(fā)現(xiàn)其廣泛的多態(tài)性，并且還沒有發(fā)現(xiàn)基因活性的同源性丟失，因此，通過PCR共同擴(kuò)增這種基因的一個(gè)片段，在所有患者中均可獲得成功，并且也會(huì)證明擴(kuò)增反應(yīng)是成功的。

在測(cè)定血清／血漿病原體核酸如HBV DNA、HCV RNA等時(shí)，應(yīng)使用已知的弱陽性血清／血漿作為質(zhì)控樣本，與持測(cè)臨床標(biāo)本等同處理提取核酸及擴(kuò)增，以判斷擴(kuò)增檢測(cè)的有效性。

使用這些外加弱陽性質(zhì)控不但可檢測(cè)擴(kuò)增反應(yīng)液的質(zhì)量，還可獲得有關(guān)PCR檢測(cè)下限和特異性的信息。這些質(zhì)控必須使用與診斷實(shí)驗(yàn)（即患者的標(biāo)本）所使用的相同的主反應(yīng)混合液。如果懷疑方法的檢測(cè)下限不足以檢測(cè)出產(chǎn)物時(shí)，則每一個(gè)反應(yīng)管都必須加擴(kuò)增質(zhì)控。

外加陰性質(zhì)控（污染質(zhì)控）在每一個(gè)PCR實(shí)驗(yàn)中都必須設(shè)有，應(yīng)該包括幾種陰性質(zhì)控。通常，這些質(zhì)控是民來指明PCR過程中污染出現(xiàn)的階段。包括在樣品制備的整個(gè)過程中所帶的空白反應(yīng)管、含有樣品制備時(shí)所用的所有反應(yīng)液但不含可擴(kuò)增的模板（所謂的模擬制備）的反應(yīng)管等。模擬質(zhì)援可以評(píng)估PCR實(shí)驗(yàn)的綜合質(zhì)量。

此外，為對(duì)吸樣過程進(jìn)行質(zhì)控，可以水質(zhì)控樣本來代替核酸樣本加入至反應(yīng)管，反應(yīng)管中含所有的反應(yīng)成分。實(shí)際工作中僅通過水樣本來檢測(cè)污染是否存在的方法是不可取的，因?yàn)樗荒馨l(fā)現(xiàn)樣本處理過程中的污染源，水僅可作為擴(kuò)增試劑的質(zhì)控。

在擴(kuò)增靶RNA的PCR實(shí)驗(yàn)中，應(yīng)做省略逆轉(zhuǎn)錄的污染質(zhì)控，通過這種方法，可發(fā)現(xiàn)以前擴(kuò)增的DNA片段所引起的污染。

2．9．l．3．對(duì)測(cè)定結(jié)果評(píng)價(jià)的質(zhì)控．

2．9．1．3．1．板上來交和膜上斑點(diǎn)印跡雜交的質(zhì)控。

在板上雜交和斑點(diǎn)雜交時(shí)，陽性和陰性質(zhì)控應(yīng)該在同一板或膜上與病人標(biāo)本平行進(jìn)行分析，這可排除不同反應(yīng)中使用了不同雜交條件而造成的對(duì)結(jié)果的錯(cuò)誤解釋。

2． 9． 2．室間質(zhì)量評(píng)價(jià)能力驗(yàn)證，proficiency testing）

所有開展臨床基因擴(kuò)增檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)室都應(yīng)參加由衛(wèi)生部臨床控驗(yàn)中心組織的全國臨床基因擴(kuò)增項(xiàng)目的空間質(zhì)量評(píng)價(jià)，并作為開展臨床基因擴(kuò)增診斷的依據(jù)之一。

本工作規(guī)范自公布之日起實(shí)施。

衛(wèi)生部醫(yī)政司

第三篇：魯溪中心衛(wèi)生院開展平安醫(yī)院創(chuàng)建活動(dòng)實(shí)施方案

魯溪中心衛(wèi)生院

關(guān)于開展“平安醫(yī)院”建設(shè)的實(shí)施方案

為深入貫徹落實(shí)武寧縣衛(wèi)生局下發(fā)的《關(guān)于開展創(chuàng)建

“平安醫(yī)院”活動(dòng)的意見》精神，進(jìn)一步優(yōu)化醫(yī)療服務(wù)環(huán)境，構(gòu)建和諧醫(yī)患關(guān)系，我院開展創(chuàng)建“平安醫(yī)院”活動(dòng)，并制定本實(shí)施方案。

一、總體目標(biāo)

通過開展創(chuàng)建平安單位活動(dòng)，使醫(yī)療執(zhí)業(yè)環(huán)境明顯改

善，醫(yī)院安全狀況明顯好轉(zhuǎn)，醫(yī)療服務(wù)質(zhì)量明顯提高，醫(yī)院內(nèi)部醫(yī)患糾紛、刑事案件、治安事件和安全隱患明顯減少，醫(yī)院治安防控能力明顯提升，醫(yī)患關(guān)系更加和諧，醫(yī)患糾紛調(diào)處機(jī)制逐步完善，為人民群眾創(chuàng)造安全有序的診療環(huán)境，促進(jìn)全鎮(zhèn)衛(wèi)生事業(yè)持續(xù)健康發(fā)展。

二、創(chuàng)建內(nèi)容

1．切實(shí)改善醫(yī)療服務(wù)。進(jìn)一步樹立全心全意為病人服

務(wù)的思想，堅(jiān)持“以病人為中心”的服務(wù)理念，不斷提高醫(yī)療服務(wù)水平。醫(yī)院要建立醫(yī)務(wù)人員醫(yī)德誠信檔案，做到嚴(yán)格考核，強(qiáng)化獎(jiǎng)懲措施，切實(shí)抓好行風(fēng)建設(shè)。要?jiǎng)?chuàng)新服務(wù)流程，優(yōu)化診療環(huán)境，為患者提供及時(shí)、方便、安全、有效和人性化的醫(yī)療服務(wù)。

2．不斷規(guī)范醫(yī)療行為。嚴(yán)格遵守國家法律法規(guī)，自覺

規(guī)范執(zhí)業(yè)行為，不超范圍開展醫(yī)療項(xiàng)目，不聘用非衛(wèi)技人員

從事診療活動(dòng)，不刊發(fā)違法違規(guī)醫(yī)療廣告，不雇傭“醫(yī)托”，努力提高醫(yī)療服務(wù)質(zhì)量和醫(yī)療技術(shù)水平，保障醫(yī)療安全。

3．依法妥善處理醫(yī)患糾紛。加強(qiáng)醫(yī)療事故防范，避免

醫(yī)療差錯(cuò)，堅(jiān)持預(yù)防在先、發(fā)現(xiàn)在早、處置在小的原則，建立健全醫(yī)患糾紛預(yù)防處置、情況研判機(jī)制，周密落實(shí)相關(guān)防控措施，加強(qiáng)醫(yī)患溝通，注重溝通效果。依據(jù)有關(guān)法律法規(guī)，把醫(yī)患糾紛處置納入法制化、規(guī)范化軌道，維護(hù)醫(yī)患雙方的合法權(quán)益。積極推行醫(yī)療責(zé)任保險(xiǎn)制度，把醫(yī)療責(zé)任保險(xiǎn)與醫(yī)患糾紛調(diào)處有機(jī)結(jié)合起來。強(qiáng)化治安管理，運(yùn)用綜合手段，防止因醫(yī)患糾紛引發(fā)群體性事件和惡性事件，嚴(yán)肅依法查處和打擊嚴(yán)重影響醫(yī)療秩序、危害醫(yī)務(wù)人員人身安全的違法犯罪行為。

4．不斷強(qiáng)化單位內(nèi)部治安管理。醫(yī)院要全面執(zhí)行省衛(wèi)

生廳制定的《醫(yī)院安全保衛(wèi)工作規(guī)范》，定期組織安全工作重點(diǎn)崗位工作人員學(xué)習(xí)培訓(xùn)，落實(shí)各項(xiàng)內(nèi)部安全保衛(wèi)措施。建立健全治保會(huì)、護(hù)院隊(duì)、義務(wù)消防隊(duì)等群防群治組織，加強(qiáng)醫(yī)院內(nèi)部技防設(shè)施建設(shè)。落實(shí)安全生產(chǎn)責(zé)任制，開展經(jīng)常性安全檢查，加強(qiáng)消防安全工作，及時(shí)消除內(nèi)部安全隱患。制定和完善防恐怖、防破壞、防災(zāi)害事故、防群體性事件等應(yīng)急處置預(yù)案，并定期組織演練；加強(qiáng)醫(yī)院內(nèi)部重要部位和重點(diǎn)科室、部門的安全管理，特別要加強(qiáng)對(duì)各類毒、菌種和放射源及麻醉藥品的管理，嚴(yán)防發(fā)生流失事件。發(fā)現(xiàn)問題并采取措施加以解決。

5．認(rèn)真治理單位環(huán)境。經(jīng)常分析醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)及周邊地區(qū)不安全因素，加強(qiáng)巡邏守護(hù)，嚴(yán)密防范侵害醫(yī)療衛(wèi)生工作人員、患者及其家屬人身財(cái)產(chǎn)安全的案件發(fā)生。

6．進(jìn)一步改進(jìn)涉醫(yī)新聞宣傳工作。新聞媒體要把握正確的輿論導(dǎo)向，堅(jiān)持正面宣傳為主，大力宣傳醫(yī)療衛(wèi)生工作者為維護(hù)人民群眾身體健康和生命安全作出的不懈努力和無私奉獻(xiàn)精神。

三、工作要求

1．加強(qiáng)組織領(lǐng)導(dǎo)。醫(yī)院成立由院長任組長，班子成員任副組長，組織開展創(chuàng)建活動(dòng)，在醫(yī)院設(shè)辦公室，負(fù)責(zé)日常工作，按照“誰主管、誰負(fù)責(zé)”的原則，明確單位責(zé)任領(lǐng)導(dǎo)，確保落實(shí)到位。

2．建立健全制度。建立健全領(lǐng)導(dǎo)責(zé)任制和崗位制作制，落實(shí)創(chuàng)建“平安單位”的組織機(jī)構(gòu)、人員、經(jīng)費(fèi)，把創(chuàng)建“平安單位”工作列入重要議事日程。強(qiáng)化為民服務(wù)的宗旨，加強(qiáng)對(duì)醫(yī)護(hù)人員、職工的醫(yī)德醫(yī)風(fēng)、職業(yè)道德教育，加強(qiáng)業(yè)務(wù)培訓(xùn)，提高醫(yī)療技術(shù)水平和服務(wù)質(zhì)量；加強(qiáng)內(nèi)部的治安防范和病房、門診的安全管理，加快報(bào)警監(jiān)控系統(tǒng)的建設(shè)，提高技防水平；健全值班、巡邏和門衛(wèi)制度，落實(shí)重點(diǎn)要害部位的人防、物防、技防措施；加強(qiáng)消防安全工作，落實(shí)防火安全檢查、整改、監(jiān)督機(jī)制；加強(qiáng)易燃易爆物品、毒麻藥品、精神藥品和放射性物品的管理，杜絕各類責(zé)任事故的發(fā)生。建立健全矛盾糾紛調(diào)處、內(nèi)部管理、突發(fā)事件防控應(yīng)急機(jī)制和檢查監(jiān)督機(jī)制，扎實(shí)做好“平安單位”建設(shè)工作。

3．廣泛宣傳發(fā)動(dòng)。單位要充分利用各種宣傳渠道，采取靈活多樣的形式，廣泛宣傳創(chuàng)建“平安單位”活動(dòng)的意義、任務(wù)和要求，營造人人參與的良好氛圍。努力做到干部職工對(duì)創(chuàng)建“平安單位”的知曉率不低于95%。宣傳創(chuàng)建工作的經(jīng)驗(yàn)、做法，推動(dòng)創(chuàng)建“平安單位”工作的順利開展。

4．嚴(yán)格督查考核。醫(yī)院創(chuàng)建活動(dòng)領(lǐng)導(dǎo)小組加強(qiáng)對(duì)我單位創(chuàng)建工作進(jìn)行不定期督查，定期組織開展考評(píng)工作，并實(shí)行動(dòng)態(tài)管理。對(duì)認(rèn)真開展“平安單位”建設(shè)，工作卓有成效的先進(jìn)個(gè)人給予表彰獎(jiǎng)勵(lì)。對(duì)工作不力，發(fā)生重大案件、事故的及時(shí)給予通報(bào)，根據(jù)情節(jié)輕重，依法依規(guī)追究有關(guān)領(lǐng)導(dǎo)和責(zé)任人的責(zé)任。

六、活動(dòng)步驟

開展創(chuàng)建“平安醫(yī)院”活動(dòng)分三個(gè)階段進(jìn)行：

1、第一階段：動(dòng)員部署，制訂方案（2013年4月）。成立創(chuàng)建“平安醫(yī)院”活動(dòng)領(lǐng)導(dǎo)小組，制定活動(dòng)方案，明確創(chuàng)建活動(dòng)總體目標(biāo)、主要任務(wù)及工作要求等，對(duì)全院平安醫(yī)院創(chuàng)建活動(dòng)進(jìn)行全面部署。

2、第二階段：全面啟動(dòng)，具體落實(shí)（2013年5月—11月）。按照我院方案的要求，結(jié)合縣衛(wèi)生局下創(chuàng)建“平安醫(yī)院”考核標(biāo)準(zhǔn)，逐條對(duì)照，分工落實(shí)，查找薄弱環(huán)節(jié)，積極整改，推動(dòng)創(chuàng)建工作。

3、第三階段：自查考核，總結(jié)驗(yàn)收（2013年12月）。由領(lǐng)導(dǎo)小組組長牽頭，副組長及成員各負(fù)其職，對(duì)分管工作進(jìn)行自查考核，形成書面報(bào)告，衛(wèi)生院辦公室對(duì)全院平安醫(yī)院創(chuàng)建工作進(jìn)行總結(jié)，做好迎接上級(jí)有關(guān)部門的考評(píng)驗(yàn)收。

七、工作措施

“平安醫(yī)院”建設(shè)是新形勢(shì)下加強(qiáng)社會(huì)治安綜合治理工作的重要部分。開展創(chuàng)建“平安醫(yī)院”活動(dòng)要結(jié)合醫(yī)院管理年活動(dòng)建設(shè)的要求，按照本實(shí)施方案開展“平安醫(yī)院”工作。

1、加強(qiáng)領(lǐng)導(dǎo)，明確職責(zé)。各科室要在醫(yī)院創(chuàng)建“平安醫(yī)院”活動(dòng)領(lǐng)導(dǎo)小組的統(tǒng)一領(lǐng)導(dǎo)下，認(rèn)真履行職責(zé)，分工協(xié)作，相互配合，齊抓共管。

2、加強(qiáng)監(jiān)督，落實(shí)整改。領(lǐng)導(dǎo)小組副組長要對(duì)分管的業(yè)務(wù)部門開展創(chuàng)建“平安醫(yī)院”活動(dòng)的工作情況進(jìn)行檢查指導(dǎo)，對(duì)薄弱環(huán)節(jié)、工作不力、管理混亂的，提出整改措施，對(duì)發(fā)生重大醫(yī)療差錯(cuò)事故引起醫(yī)療糾紛、重大刑事案件及治安案件、重大消防安全隱患、重大安全生產(chǎn)事故等的科室和個(gè)人，要提交領(lǐng)導(dǎo)小組研究追究有關(guān)責(zé)任人的責(zé)任。

3、總結(jié)經(jīng)驗(yàn)，持續(xù)改進(jìn)。各科室要加強(qiáng)聯(lián)系，及時(shí)總結(jié)推廣典型經(jīng)驗(yàn)，查找薄弱環(huán)節(jié)，持續(xù)改進(jìn)，做到創(chuàng)建“平安醫(yī)院”活動(dòng)與開展醫(yī)院管理活動(dòng)一起部署、一起檢查、一起落實(shí)、一起考評(píng)、一起總結(jié)，使創(chuàng)建“平安醫(yī)院”活動(dòng)取得實(shí)實(shí)在在的效果。

魯溪中心衛(wèi)生院

附：

魯溪中心衛(wèi)生院成立創(chuàng)建“平安醫(yī)院”活動(dòng)領(lǐng)

導(dǎo)小組

各科室：

為貫徹落實(shí)武寧縣衛(wèi)生局《衛(wèi)生系統(tǒng)創(chuàng)“平安醫(yī)院”工作實(shí)施方案》的要求，深入開展醫(yī)院“平安醫(yī)院”建設(shè)工作，進(jìn)一步完善我院“平安醫(yī)院”建設(shè)工作機(jī)制，全面推進(jìn)治安防控體系建設(shè)，切實(shí)維護(hù)了醫(yī)院治安安全、醫(yī)療安全、護(hù)理安全、黨風(fēng)廉政建設(shè)，保持了醫(yī)院的穩(wěn)步發(fā)展。特成立創(chuàng)建“平安醫(yī)院”活動(dòng)領(lǐng)導(dǎo)小組。

組長：李賢才

副組長：冷緒石、柯美滾、瞿世強(qiáng)

成員：鄒王軍、周慶輝、夏幼林、柯善女、戴李樺

結(jié)合醫(yī)院實(shí)際，扎實(shí)開展“平安醫(yī)院”建設(shè)，確保廣大職工的生命和財(cái)產(chǎn)安全，確保正常的醫(yī)療秩序，確保醫(yī)院的穩(wěn)定，為醫(yī)院的改革發(fā)展創(chuàng)造良好的環(huán)境，為“平安醫(yī)院”建設(shè)做出貢獻(xiàn)。

二0一四年二月二十四

第四篇：南江鎮(zhèn)中心衛(wèi)生院開展醫(yī)院管理年活動(dòng)工作總結(jié)

平江縣南江鎮(zhèn)中心衛(wèi)生院

開展醫(yī)院管理年活動(dòng)工作匯報(bào)

各位領(lǐng)導(dǎo)、各位專家：

自2009年以來，我院緊緊圍繞醫(yī)院管理年所強(qiáng)調(diào)的“強(qiáng)化醫(yī)院管理，誠信服務(wù)百姓，樹立科學(xué)發(fā)展觀，構(gòu)建和諧醫(yī)院”這一工作主線，積極開展了“以病人為中心，以提高醫(yī)療服務(wù)質(zhì)量為主題”的醫(yī)院管理年活動(dòng)，結(jié)合等級(jí)醫(yī)院管理，按照平江縣衛(wèi)生局每年制定的《責(zé)任目標(biāo)》，針對(duì)醫(yī)院管理和發(fā)展過程中存在的突出問題，積極采取行之有效的措施，狠抓落實(shí)。現(xiàn)就目前主要工作情況匯報(bào)如下，不足之處，敬請(qǐng)批評(píng)指正。

一、醫(yī)院基本情況，我院始建于1954年，是湘北地區(qū)唯一一所綜合性醫(yī)院，于1996年晉級(jí)為“一級(jí)甲等”醫(yī)院。現(xiàn)設(shè)置開放病床99張，設(shè)有6個(gè)臨床科室，4個(gè)醫(yī)技科室，5個(gè)護(hù)理組，下設(shè),1個(gè)基藥配送站和2個(gè)社區(qū)服務(wù)站?，F(xiàn)有正式職工人，衛(wèi)生技術(shù)人員人，其中高級(jí)職稱人，中級(jí)職稱人，護(hù)理人員人，大專以上學(xué)歷人。能夠按照“一級(jí)甲等”醫(yī)院的標(biāo)準(zhǔn)開展各種醫(yī)療技術(shù)項(xiàng)目。全年門診人次人左右，住院病人人左右。能夠開展本地區(qū)內(nèi)、外、婦、兒、口腔、五官等科室的常見病、多發(fā)病、疑難病癥的診治、危重癥的搶救工作，開展雙向轉(zhuǎn)診，提供住院、急診24小時(shí)服務(wù)，門診8小時(shí)服務(wù)，負(fù)責(zé)全鎮(zhèn)突發(fā)災(zāi)害事件的院內(nèi)外急救，有健全的應(yīng)急方案。

二、統(tǒng)一思想，落實(shí)責(zé)任：

一、思想重視，思路清晰，目標(biāo)明確：醫(yī)院管理年活動(dòng)自2009年在我院開展以來，全院上下高度重視，積極行動(dòng)，得到了縣衛(wèi)生局的精心指導(dǎo)與大力支持，在2009年縣局組織的檢查考評(píng)中我院的工作得到了上級(jí)領(lǐng)導(dǎo)的認(rèn)可。經(jīng)過活動(dòng)的開展，我院門、急診及住院患者明顯增加，社會(huì)反映日趨良好，兩個(gè)效益獲得同步增長。我院深刻認(rèn)識(shí)到深化醫(yī)院管理年活動(dòng)是一個(gè)契機(jī)，是一支推進(jìn)醫(yī)院內(nèi)部改革，促進(jìn)醫(yī)院健康協(xié)調(diào)發(fā)展，樹立醫(yī)療機(jī)構(gòu)嶄新形象的強(qiáng)心劑，必須堅(jiān)持不懈地把這項(xiàng)工作做好、做扎實(shí)。今年以來，多次召開專題會(huì)議，針對(duì)我院在合理收費(fèi)、合理用藥、合理檢查，醫(yī)療質(zhì)量監(jiān)控，醫(yī)療安全、服務(wù)流程及院務(wù)公開等方面存在的問題進(jìn)行研究，確定整改方案，并結(jié)合行風(fēng)評(píng)議提出醫(yī)院今年的工作重點(diǎn)。就是要正確認(rèn)識(shí)醫(yī)院的發(fā)展定位，充分考慮到職工群眾就醫(yī)的經(jīng)濟(jì)承受力，在緩解群眾“看病難、看病貴”的問題上多想辦法、多下功夫。圍繞這一目標(biāo)，醫(yī)院在提高醫(yī)療質(zhì)量，改善服務(wù)態(tài)度，控制醫(yī)藥費(fèi)用，減輕患者負(fù)擔(dān)，加強(qiáng)醫(yī)患溝通，構(gòu)建和諧醫(yī)患關(guān)系方面做了大量工作。

（一）：調(diào)整決策思路，把醫(yī)院各項(xiàng)工作切實(shí)轉(zhuǎn)移到加強(qiáng)管理、落實(shí)規(guī)章制度、依法執(zhí)業(yè)的規(guī)范化軌道上來；

（二）：把落實(shí)“三合理”為群眾減負(fù)與行風(fēng)建設(shè)、職業(yè)道德建設(shè)緊密相結(jié)合，引導(dǎo)廣大員工樹立正確的人生觀、價(jià)值觀和從業(yè)觀，強(qiáng)化辦院宗旨和社會(huì)責(zé)任；

（三）：突出質(zhì)量監(jiān)控，重視醫(yī)療安全，完善綜合考評(píng)，修訂獎(jiǎng)金分配方案；

（四）：加大院務(wù)公開和群眾監(jiān)督的力度，落實(shí)“社會(huì)服務(wù)承諾”，主

動(dòng)接受社會(huì)的監(jiān)督。

二、強(qiáng)化領(lǐng)導(dǎo)，落實(shí)責(zé)任，夯實(shí)基礎(chǔ)：進(jìn)一步明確了“醫(yī)院管理年”活動(dòng)領(lǐng)導(dǎo)小組的職責(zé)，與科室簽訂了目標(biāo)責(zé)任書，并將管理年活動(dòng)與評(píng)優(yōu)評(píng)先掛鉤，確保了活動(dòng)成效。同時(shí)，院領(lǐng)導(dǎo)經(jīng)常帶領(lǐng)相關(guān)職能科室深入臨床一線檢查督辦管理年工作落實(shí)情況，現(xiàn)場解決問題。按照省廳鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院管理年活動(dòng)考核評(píng)分細(xì)則要求，組織了兩次規(guī)模較大的自查自糾考核。同時(shí)按照上級(jí)衛(wèi)生主管部門“進(jìn)一步深化醫(yī)院管理年活動(dòng)”的要求，在原有工作的基礎(chǔ)上重新作了部署，對(duì)相關(guān)科室提出了詳盡的整改實(shí)施意見，并由分管院長督辦，確保落實(shí)到位。

三、科學(xué)管理，依法規(guī)范執(zhí)業(yè)

一、健全并落實(shí)各項(xiàng)醫(yī)療規(guī)章制度和崗位職責(zé)，充分發(fā)揮其權(quán)威性和穩(wěn)定性。醫(yī)院對(duì)現(xiàn)有規(guī)章制度，特別是對(duì)醫(yī)療、護(hù)理、財(cái)務(wù)、物價(jià)的規(guī)章制度進(jìn)行了全面的清理、補(bǔ)充和修善，確保各項(xiàng)工作，特別是醫(yī)療活動(dòng)的每一個(gè)環(huán)節(jié)有法可依，規(guī)范有序。針對(duì)去年管理年活動(dòng)檢查中發(fā)現(xiàn)的問題，我院在核心制度的執(zhí)行方面進(jìn)行了適當(dāng)調(diào)整。嚴(yán)格要求對(duì)重要手術(shù)、疑難病例和死亡病例開展討論及交接班進(jìn)行記錄，并按照省衛(wèi)生廳《醫(yī)療文書書寫規(guī)定》的要求，對(duì)手術(shù)記錄、術(shù)前討論記錄、疑難病例討論記錄、死亡病例討論記錄、知情同意書、病危通知等一系列文書進(jìn)行了重新設(shè)計(jì)和完善。定期或不定期組織職能科室深入臨床科室檢查，針對(duì)體現(xiàn)醫(yī)療質(zhì)量和醫(yī)療安全最敏感的環(huán)節(jié)，如：首診負(fù)責(zé)制度、三級(jí)醫(yī)師查房制度、會(huì)診制度、死亡病例討論制度、病歷書寫基本規(guī)范與管理制度等核心制度加大了貫徹檢查力

度，尤其是對(duì)運(yùn)行病歷的實(shí)時(shí)監(jiān)控采取了有力的管理辦法，并將檢查結(jié)果在院周會(huì)上進(jìn)行反饋。新的《處方管理辦法》和《醫(yī)師考核管理辦法》下發(fā)后，有關(guān)職能科室迅速行動(dòng)，重新修訂和完善了原有院內(nèi)相關(guān)制度，組織職工學(xué)習(xí)。嚴(yán)格按照要求授予臨床醫(yī)務(wù)人員開具處方的權(quán)力，未取得醫(yī)師資格證書和執(zhí)業(yè)證書兩證的醫(yī)務(wù)人員嚴(yán)禁開具處方，試用期和進(jìn)修實(shí)習(xí)醫(yī)師不得開具處方。加強(qiáng)處方規(guī)范化管理，要求在處方中使用藥品通用名，禁止使用商品名。嚴(yán)格執(zhí)行《抗菌藥物臨床應(yīng)用指導(dǎo)原則》。醫(yī)務(wù)科室抽調(diào)專門人員對(duì)門診處方進(jìn)行分析，并將結(jié)果在院周會(huì)上通報(bào)，要求科室限期整改。

二、貫徹落實(shí)醫(yī)師定期考核管理辦法。組織全員醫(yī)務(wù)人員認(rèn)真學(xué)習(xí)衛(wèi)生部下發(fā)的《關(guān)于<醫(yī)師定期考核管理辦法>的通知》，使臨床醫(yī)務(wù)人員了解有關(guān)考核方式、管理方法、考核程序、考核內(nèi)容及考核結(jié)果對(duì)執(zhí)業(yè)活動(dòng)的影響，充分理解醫(yī)師考核的目的和意義。

三、組織人員對(duì)醫(yī)療服務(wù)秩序進(jìn)行自查自糾，嚴(yán)格自律。本院無科室對(duì)外出租、承包或合作合資辦科室等項(xiàng)目；重新規(guī)范了科室名稱及各類標(biāo)識(shí)、標(biāo)牌；規(guī)范了執(zhí)業(yè)醫(yī)師執(zhí)業(yè)范圍等。

四、在組織職工認(rèn)真學(xué)習(xí)各項(xiàng)醫(yī)療衛(wèi)生管理法律、法規(guī)及診療護(hù)理規(guī)范的同時(shí)，為各科室及個(gè)人下達(dá)了自學(xué)計(jì)劃，使職工法律、法規(guī)學(xué)習(xí)率達(dá)到100%，確保了學(xué)習(xí)效果，醫(yī)護(hù)人員依法執(zhí)業(yè)、規(guī)范行醫(yī)意識(shí)不斷增強(qiáng)。

通過醫(yī)院管理年活動(dòng)的開展我院無論是社會(huì)效益還是經(jīng)濟(jì)效益都得到了提高。對(duì)照省廳考核標(biāo)準(zhǔn)我們也覺得工作差距很大，我想通過今天各位領(lǐng)導(dǎo)專家的檢查指導(dǎo)后，針對(duì)存在問題制定整改措施，把各

項(xiàng)工作落實(shí)到位。我院也會(huì)繼續(xù)以醫(yī)院管理年活動(dòng)為契機(jī)，對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)搞好各項(xiàng)工作。使醫(yī)院的管理水平與醫(yī)療質(zhì)量上一新臺(tái)階！

第五篇：院感科對(duì)靜配中心人員開展醫(yī)院感染知識(shí)培訓(xùn)

院感科對(duì)靜配中心人員開展醫(yī)院感染知識(shí)培訓(xùn)

靜脈用藥調(diào)配中心是由我院藥師和護(hù)理專業(yè)技術(shù)人員組成的新科室，為了提高靜脈輸液成品質(zhì)量，促進(jìn)臨床靜脈用藥的安全、有效，增強(qiáng)工作人員職業(yè)防護(hù)意識(shí)，醫(yī)院感染管理科于2014年4月24日9:30在靜脈用藥調(diào)配中心辦公室組織了《靜配中心醫(yī)院感染知識(shí)》的培訓(xùn)講座。

院感科**主任用淺顯易懂的語言，結(jié)合生動(dòng)、形象的幻燈圖片，從工作環(huán)境、手衛(wèi)生、無菌要求、職業(yè)防護(hù)、職業(yè)暴露、醫(yī)療廢物管理等方面一一進(jìn)行了詳細(xì)地講解。

通過培訓(xùn)，加深了靜配中心工作人員對(duì)本科室醫(yī)院感染知識(shí)的理解；增強(qiáng)了大家的自我防護(hù)意識(shí)；為保障藥品配置質(zhì)量，提高靜脈用藥安全，全面提升醫(yī)療質(zhì)量和醫(yī)療安全起到了重要作用。

院感科