第一篇：枸杞中黃酮類化合物提取與分離純化工藝的研究進(jìn)展?（范文）

龍?jiān)雌诳W(wǎng) http://004km.cn 枸杞中黃酮類化合物提取與分離純化工藝的研究進(jìn)展

作者：于惠 康磊等

來(lái)源：《安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)》2015年第05期

摘要近幾年，隨著枸杞的化學(xué)成分和藥理作用的廣泛研究，枸杞總黃酮因具明顯的抗氧化、清除自由基、提高免疫力等活性而逐漸成為研究熱點(diǎn)，因此人們采用多種方法對(duì)枸杞黃酮進(jìn)行提取分離。在此從枸杞黃酮的提取和分離提純兩方面進(jìn)行總結(jié)，為今后的分離提純提供參考依據(jù)。

關(guān)鍵詞 枸杞；黃酮；提??；分離純化；研究進(jìn)展

中圖分類號(hào) S567；TS225.1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 0517-6611（2015）05-062-03 Research Progress of Separation and Extraction Flavones in Lycium barbarum YU Hui1，2，KANG Lei1，2，ZHANG Rui1，2 et al（1.State Key Testing Laboratory of Coal Chemical，Yinchuan，Ningxia 750002； 2.Chemical Laboratory Center of Ningxia Baota，Yinchuan，Ningxia 750002）

Abstract In recent years，the chemical composition and pharmacological function of Lycium barbarum has been extensively studied，the total flavones in Lycium barbarum has been gradually become a hot topic because of significant antioxidation，removal of the free radicals，enhancing immunity and other activities.Thus，many researchers used variety methods to separate and extract the total flavones from Lycium barbarum.The separation and extraction of total flavones from Lycium barbarum were summarized，providing a reference for separation and purification in future.Key words Lycium barbarum； Flavones； Extraction； Separation and purification； Research progress 基金項(xiàng)目 寧夏自然科學(xué)基金項(xiàng)目（NZ13255）。

作者簡(jiǎn)介 于惠（1986-），女，遼寧凌源人，工程師，碩士，從事分離型功能高分子材料研究。

收稿日期 20141226

龍?jiān)雌诳W(wǎng) http://004km.cn 枸杞（Lycium Barbarum）為茄科枸杞屬，多年生落葉小灌木植物，是我國(guó)傳統(tǒng)的藥食兩用同源植物之一[1]。枸杞的藥用部位較多，明朝李時(shí)珍《本草綱目》記載：“春采枸杞葉，名天精草；夏采花，名長(zhǎng)生草；秋采子，名枸杞子；冬采根，名地骨皮”。枸杞子為枸杞的成熟干燥果實(shí)，其活性成分主要包括色素類、多糖類、黃酮類化合物、多種氨基酸、維生素及微量元素[2]。枸杞子具有滋補(bǔ)肝腎、益精明目之功效，現(xiàn)代臨床上廣泛用于調(diào)節(jié)免疫功能[3]、抗氧化[4]、抗輻射[5]、抗腫瘤[6]、清除自由基[7]、促進(jìn)益生菌細(xì)胞生長(zhǎng)及抗衰老[8]等。枸杞葉，又名天精草，為茄科植物枸杞或?qū)幭蔫坭降哪矍o葉，功能補(bǔ)肝益腎、生津止渴、虛勞發(fā)熱。枸杞葉中的活性成分與枸杞子類似，其蛋白質(zhì)含量極其豐富，另外據(jù)報(bào)道枸杞葉中含有豐富的有機(jī)鍺，具有增強(qiáng)免疫力、延緩衰老的功效[9]。枸杞根皮，又稱為地骨皮，為茄科、枸杞屬植物枸杞的根皮，可入藥，具有清熱、涼血、降壓、清肺降火等功效。我國(guó)枸杞有7個(gè)種3個(gè)變種，其中以寧夏地區(qū)生產(chǎn)的寧夏枸杞（Lycium Barbarum L.）最為著名[10]，青海、甘肅等地的枸杞品質(zhì)也很高。近幾年，枸杞的化學(xué)成分和藥理作用被廣泛的研究，作為枸杞中重要的活性物質(zhì)之一，枸杞總黃酮因具明顯的抗氧化、清除自由基、降血脂、降血糖、治療心腦血管疾病、抗腫瘤、抗衰老、提高免疫力等活性而逐漸成為研究熱點(diǎn)[11-12]。

枸杞中黃酮類化合物的提純，主要包括以下兩方面：一方面是提取，基于植物不同部位所含黃酮類化合物的結(jié)合狀態(tài)不同，如在花、果、葉中以甙為主要存在形式，在木質(zhì)部分以甙元為主要存在形式，需要根據(jù)被提取物的類型和理化性質(zhì)選擇合適的提取溶劑和提取方法；另一方面是分離純化，目的是盡可能充分將黃酮類化合物與其他成分分開(kāi)，并進(jìn)一步分離得到黃酮類成分單體。筆者在此對(duì)近年來(lái)枸杞中黃酮類化合物的提取與分離純化工藝的研究進(jìn)展進(jìn)行了系統(tǒng)總結(jié)。1 提取方法 1.1 有機(jī)溶劑提取法

有機(jī)溶劑提取法是國(guó)內(nèi)外使用最為廣泛的一種提取方法，主要以乙醇、甲醇、石油醚等有機(jī)溶劑作為提取溶劑，在索氏提取器中進(jìn)行抽提。通常采用乙醇作為提取溶劑，提取的過(guò)程中，乙醇的濃度對(duì)黃酮類化合物的提取存在影響。高濃度的醇（90%～95%）適用于提取黃酮甙元類化合物，而低濃度的醇（60%～70%）更適合提取黃酮甙類化合物[13]。該方法操作簡(jiǎn)單、成本低，易于大規(guī)模生產(chǎn)，但工藝繁瑣，雜質(zhì)含量也較高，回收率低。李銘芳等采用70%的乙醇為溶劑回流提取寧夏枸杞中的總黃酮，通過(guò)正交試驗(yàn)，研究發(fā)現(xiàn)最優(yōu)提取條件為提取溫度70 ℃、提取時(shí)間2.0 h、固液比為1∶20[14]。劉蘭英等以70%乙醇對(duì)枸杞葉進(jìn)行回流提取，并通過(guò)正交試驗(yàn)確定了提取工藝條件為70%乙醇、料液比1∶

8、提取時(shí)間3 h、提取3～8 nm碎粒，黃酮得率為3.72%[15]。1.2 超聲輔助提取法

超聲波的作用機(jī)理是在被提取樣品和溶劑之間產(chǎn)生聲波空化效應(yīng)[16]，破壞植物細(xì)胞并加速溶劑分子之間的運(yùn)動(dòng)，使植物細(xì)胞中的有效成分較易溶解于溶劑中，加速了植物有效成分的龍?jiān)雌诳W(wǎng) http://004km.cn 浸出提取。另一方面，超聲提取過(guò)程中的空化作用還會(huì)增大樣品與提取溶劑之間的接觸面積，從而提高植物中活性成分從固相轉(zhuǎn)移到液相的傳質(zhì)速率[17]。因此，對(duì)植物有效成分采用超聲提取，可以在很大程度上加快提取速度，縮短了提取時(shí)間，進(jìn)而提高了天然產(chǎn)物中活性成分的提取速率和提取量。該方法節(jié)省提取時(shí)間、提高提取效率、試驗(yàn)設(shè)備簡(jiǎn)單、操作方便，在工業(yè)生產(chǎn)中具有較為廣闊的應(yīng)用前景。王漢卿等通過(guò)正交試驗(yàn)優(yōu)選出超聲輔助提取枸杞葉總黃酮的最佳工藝條件為乙醇體積分?jǐn)?shù) 65%、乙醇用量 1∶60、超聲提取時(shí)間 35 min、超聲溫度 70 ℃；利用優(yōu)選出的最佳超聲提取工藝測(cè)定比較不同采收期枸杞葉中的總黃酮含量，結(jié)果為5月中旬含量最高[18]。孫化鵬等通過(guò)正交試驗(yàn)法優(yōu)選出超聲輔助提取枸杞葉總黃酮的最佳工藝條件為乙醇濃度75%、乙醇用量1∶40、超聲提取時(shí)間30 min、超聲提取溫度50 ℃[19]。1.3 微波輔助萃取法

微波萃取又稱微波輔助萃?。∕iacrowaveassisted extraction，MAE），是利用微波的熱效應(yīng)對(duì)樣品及其有機(jī)溶劑進(jìn)行加熱，從而將目標(biāo)組分從樣品基體中分離出來(lái)的一種新型高效分離技術(shù)。微波萃取過(guò)程是高頻電磁波穿透萃取介質(zhì)到達(dá)物料內(nèi)部，微波能轉(zhuǎn)化為熱能，物料內(nèi)部的溫度迅速上升，使物料內(nèi)部的壓力超過(guò)細(xì)胞壁膨脹所能承受的壓力，導(dǎo)致細(xì)胞膨脹破裂，從而促使有效成分自由流出，并溶解于萃取介質(zhì)中[20]。微波加熱不同于傳統(tǒng)的加熱模式，即熱量由外向內(nèi)傳遞，而是直接作用于內(nèi)部和外部的介質(zhì)分子，使整個(gè)物料同時(shí)被加熱，即“體加熱過(guò)程”，從而可克服傳統(tǒng)的傳導(dǎo)式加熱方式所存在的升溫較慢的缺陷。同時(shí)，微波所產(chǎn)生的電磁場(chǎng)可加速被萃取組分的分子由固體內(nèi)部向固液界面擴(kuò)散的速率，從而使萃取速率提高數(shù)倍，并能降低萃取溫度，最大限度地保證萃取物的質(zhì)量[21]。

與其他的提取方法相比較，微波輔助萃取具有如下優(yōu)點(diǎn)：①選擇性好。由于樣品中各組分對(duì)微波的吸收能力存在差異，從而導(dǎo)致其溫度不同，致使各組分從基體中分離的速度也存在差異。因此，微波萃取能對(duì)萃取體系中的不同組分進(jìn)行選擇性加熱，可以使目標(biāo)組分直接從基體中分離。②熱效率較高。微波加熱是內(nèi)外同時(shí)加熱的模式，由微波能量直接轉(zhuǎn)化為熱能，沒(méi)有熱傳遞造成的溫度梯度和熱量損失，因而加熱均勻，熱效率較高。③質(zhì)量穩(wěn)定?？梢栽谳^低的溫度下完成萃取，有效地保護(hù)了被提取物的有效成分。④操作簡(jiǎn)單。微波萃取無(wú)需干燥等預(yù)處理，簡(jiǎn)化了工藝，減少了投資。

巨敏等以枸杞為原料，用乙醇作為提取劑，采用微波提取法對(duì)枸杞中總黃酮進(jìn)行提取，以二次同歸正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)對(duì)結(jié)果進(jìn)行優(yōu)化分析，得出的最佳條件為乙醇濃度68.3%、微波時(shí)間100 s、微波溫度73 ℃、微波功率300 W、液料比14.7∶1.0（ml/g），在最佳條件下，總黃酮的提取率為19.52 mg/g[22]。孫波等以蘆丁為對(duì)照品，采用單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)時(shí)影響枸杞總黃酮提取率的因素進(jìn)行了考察，并優(yōu)選出最佳提取工藝為乙醇濃度70%、料液比1∶30（g/ml）、微波輻射功率400 W、溫度120 ℃、提取時(shí)間8 min，在此條件下枸杞總黃酮的含量為18.3 mg/g[23]。1.4 磁場(chǎng)強(qiáng)化萃取法

龍?jiān)雌诳W(wǎng) http://004km.cn 磁場(chǎng)強(qiáng)化萃取是一種借助外加磁場(chǎng)以強(qiáng)化化工分離過(guò)程的新技術(shù)，被稱為“綠色分離技術(shù)”，它可以利用磁場(chǎng)產(chǎn)生的特殊能量來(lái)改變抗磁性物質(zhì)的微觀結(jié)構(gòu)，使其理化性質(zhì)發(fā)生變化[24]，同時(shí)通過(guò)影響反應(yīng)速率來(lái)起到強(qiáng)化萃取的作用。周蕓等以新鮮枸杞為原料，采用磁場(chǎng)強(qiáng)化萃取法提取枸杞黃酮，通過(guò)正交試驗(yàn)，得出優(yōu)化磁場(chǎng)處理的最佳條件為：在磁感應(yīng)強(qiáng)度 640 mT、磁化時(shí)間 40 min、磁化溫度 65 ℃、浸提回流時(shí)間 60 min 的條件下，枸杞黃酮的提取率可達(dá)290.81 mg/100g[25]。李冰等發(fā)明一種利用磁性吸附樹(shù)脂及外加磁場(chǎng)分離純化葛根黃酮的方法，具體的工藝流程如圖1所示。首先，將葛根粉碎置于微波萃取罐中，加入95%乙醇，微波萃取除去雜質(zhì)后得葛根黃酮提取液；其次，將磁性吸附樹(shù)脂裝入樹(shù)脂柱，置于可調(diào)磁場(chǎng)中，將葛根黃酮提取液流過(guò)樹(shù)脂柱，收集解吸液，濃縮干燥后得葛根黃酮產(chǎn)品[26]。1.5 高壓均質(zhì)提取法

高壓均質(zhì)提取法是指利用柱塞泵將被分離物保持在一定的壓力條件下，液料高速流過(guò)一個(gè)狹窄的縫隙時(shí)而受到強(qiáng)大的剪切力，同時(shí)還有液料與金屬環(huán)接觸產(chǎn)生的碰撞力以及由于靜壓驟降和驟升而產(chǎn)生的孔爆發(fā)力等綜合力的作用，使原料中不透明、粒徑較大的懸濁液轉(zhuǎn)化成穩(wěn)定細(xì)小的懸濁液的過(guò)程[13]。高壓均質(zhì)提取法可以將樣品中的組成結(jié)構(gòu)破粹到納米級(jí)，利于目標(biāo)成分的溶出，大大提高了樣品的提取率。同時(shí)，操作時(shí)溫度較低，因此對(duì)樣品的破壞力較小，可以保持樣品原有的性質(zhì)。因此，該方法將在天然活性成分的提取方面展現(xiàn)越來(lái)越重要的作用[27]。

劉增根等考察了高壓均質(zhì)提取柴達(dá)木枸杞葉有效成分的最佳工藝及對(duì)有效成分進(jìn)行了純化，發(fā)現(xiàn)高壓均質(zhì)提取柴達(dá)木枸杞葉總黃酮的最佳工藝條件為乙醇體積分?jǐn)?shù) 80%、料液比 1∶

10、均質(zhì)壓力 60 MPa、提取時(shí)間 30 min，在該條件下，提取物中蘆丁質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 10.53%，總黃酮質(zhì)量分?jǐn)?shù)為32.61%[28]。2 分離純化方法

2.1 大孔吸附樹(shù)脂吸附分離法

大孔吸附樹(shù)脂（Macroporous Adsorption Resin，MAR）是由功能單體、交聯(lián)劑等可聚合成分與致孔劑、分散劑等添加劑經(jīng)懸浮或反相懸浮聚合制備而成的一類球狀的多孔高分子吸附分離材料，其內(nèi)部存在大大小小、形狀各異、相互貫通的孔穴，即使在干燥狀態(tài)下，其內(nèi)部均具有較高的孔隙率，且存在大孔結(jié)構(gòu)（一般在100～1 000 nm）。MAR不同于離子交換樹(shù)脂，其本身不含可交換性功能基，它的吸附性主要依靠范德華力（包含色散力、定向力和誘導(dǎo)力等）和氫鍵的作用，同時(shí)，網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)和很高的比表面積又賦予其良好的吸附性能和篩分性能，因此，MAR是一類不同于離子交換樹(shù)脂的、集吸附和篩分性能為一體的分離型功能高分子材料。目前，國(guó)內(nèi)外MAR的生產(chǎn)廠家主要有美國(guó)RohmHass、日本三菱化成公司、天津南開(kāi)大學(xué)化工廠、華北制藥廠樹(shù)脂分廠、西安藍(lán)曉科技有限公司、西安藍(lán)深特種樹(shù)脂有限公司、滄州寶恩化工有限公司、天津海光化工有限公司等，部分廠家產(chǎn)品的性能如表1～3所示[29-30]。

龍?jiān)雌诳W(wǎng) http://004km.cn 目前，MAR主用于皂苷類、黃酮及其苷類、蒽醌及其苷類、酚酸類、色素類及生物堿類等的分離純化。利用MAR分離純化中草藥中的有效成分，有以下幾點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：首先，由于MAR獨(dú)特的吸附性和篩分性，利用MAR分離純化了多種單味中草藥的有效成分，這為其他中草藥的提取研究奠定了基礎(chǔ)；其次，不斷有新的MAR問(wèn)世，這為中草藥有效成分的分離富集提供了可供選擇的保障。

胡曉蓮等通過(guò)優(yōu)選MAR，并考察其工藝參數(shù)，篩選合適的吸附樹(shù)脂DA201，最佳的工藝條件為上樣量10柱床體積（BV）、上樣液濃度15 mg/ml、上樣液流速1 BV/h，上樣液pH=3，解吸洗脫劑乙醇濃度為40%、乙醇用量8 BV，富集純化總黃酮得率75.85%，總黃酮純度35.70%[31]。何彥峰等通過(guò)比較11種MAR的靜態(tài)吸附解吸性能，篩選出適合純化柴達(dá)木枸杞總黃酮的樹(shù)脂類型HPD400；并進(jìn)行動(dòng)態(tài)吸附解吸試驗(yàn)，利用單因素和響應(yīng)面法優(yōu)化MAR純化柴達(dá)木枸杞總黃酮，得到的的最佳工藝條為：以16.0 ml pH為4.0的柴達(dá)木枸杞總黃酮粗提液上柱，流速1.0 ml/min，充分吸附后用3 BV去離子水洗柱，然后用23.0 ml 80%乙醇溶液以流速1.0 ml/min進(jìn)行解吸，枸杞黃酮的平均回收率為89.92%，含量為27.62%，約為純化前總黃酮含量的5倍左右[32]。2.2 高效液相色譜法（HPLC）

高效液相色譜法（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）又稱“高壓液相色譜”，以液體為流動(dòng)相，采用高壓輸液系統(tǒng)，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動(dòng)相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內(nèi)各成分被分離后，進(jìn)入檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)試樣的分析。HPLC具有高壓、高效、高速、高靈敏度及應(yīng)用范圍廣的特點(diǎn)。

董靜洲等對(duì)寧夏枸杞果實(shí)黃酮提取液進(jìn)行色譜柱分離，檢測(cè)波長(zhǎng)為259 nm，流動(dòng)相 A為1.0%乙酸，流動(dòng)相 B為甲醇，流速為1.0 ml/min；并對(duì)我國(guó)寧夏枸杞六大產(chǎn)區(qū)的枸杞果實(shí)總黃酮提取液進(jìn)行了 HPLC 分離和 HPLC 指紋圖譜比較[33]。張自萍等以10個(gè)寧夏不同產(chǎn)地的寧夏枸杞主栽品種“寧杞I號(hào)”樣品建立枸杞黃酮類化合物指紋圖譜共有模式，采用“中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)”軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，對(duì)15個(gè)不同來(lái)源的枸杞樣品進(jìn)行了分析[34]。

安徽農(nóng)業(yè)科學(xué) 2015年 3 展望

近幾年，隨著人們對(duì)枸杞黃酮的化學(xué)成分和藥理作用不斷深入研究，使枸杞黃酮愈來(lái)愈受到人們的重視。因此，通過(guò)不斷地探索枸杞黃酮提取和分離純化工藝研究的新方法，仍將是提純枸杞黃酮的熱點(diǎn)研究方向。

參考文獻(xiàn) [1]

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第二篇：2011(第三屆)醫(yī)藥化工分離純化技術(shù)發(fā)展與工藝優(yōu)化研討會(huì)盛大開(kāi)幕

2011（第三屆）醫(yī)藥化工分離純化技術(shù)發(fā)展與工藝優(yōu)化研討會(huì)盛大開(kāi)幕

2011年10月25日由中國(guó)醫(yī)藥化工網(wǎng)和北京中企縱橫科技有限公司主辦的2011（第三屆）醫(yī)藥化工分離純化技術(shù)發(fā)展與工藝優(yōu)化研討會(huì)在杭州孔雀大廈大酒店四層藍(lán)孔雀廳隆重召開(kāi)。中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)研究總院副院長(zhǎng)、研究員，上海交通大學(xué)藥學(xué)院副院長(zhǎng)，本屆大會(huì)主席陳代杰研究員擔(dān)任大會(huì)主持人。會(huì)議共有參會(huì)用戶100人左右，中國(guó)色譜網(wǎng)（www.sepu.net）作為本屆大會(huì)支持單位、合作媒體，參加了會(huì)議。

大會(huì)開(kāi)幕式

本屆大會(huì)主席張玉奎院士

本屆大會(huì)主席陳代杰研究員

中國(guó)醫(yī)藥化工網(wǎng)執(zhí)行副總經(jīng)理蘇沛先生

大會(huì)開(kāi)幕式由中國(guó)醫(yī)藥化工網(wǎng)技術(shù)總監(jiān)張明女士（教授級(jí)高級(jí)工程師）主持。中國(guó)科學(xué)院院士，中國(guó)分析測(cè)試協(xié)會(huì)副理事長(zhǎng)，中國(guó)化學(xué)會(huì)色譜專業(yè)委員會(huì)主任，大連化學(xué)物理研究所研究員，本屆大會(huì)主席張玉奎院士；中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)研究總院副院長(zhǎng)、研究員，上海交通大學(xué)藥學(xué)院副院長(zhǎng)，本屆大會(huì)主席陳代杰研究員；中國(guó)醫(yī)藥化工網(wǎng)執(zhí)行副總經(jīng)理蘇沛先生分別在開(kāi)幕式上致辭。

格林蘭生化設(shè)備有限公司

環(huán)球分析測(cè)試儀器有限公司

梅特勒-托利多自動(dòng)

天津博納艾杰爾科技有限公司

力揚(yáng)企業(yè)有限公司

本屆大會(huì)共有參展企業(yè)6家，分別是：天津博納艾杰爾科技有限公司、梅特勒托利多、環(huán)球分析測(cè)試儀器有限公司、格林蘭生化設(shè)備有限公司、力揚(yáng)企業(yè)有限公司等。

大會(huì)共安排15場(chǎng)報(bào)告，其中專家報(bào)告7場(chǎng)，企業(yè)報(bào)告8場(chǎng)。與會(huì)代表們聆聽(tīng)了來(lái)自各地的業(yè)內(nèi)最著名的研究院所、大專院校與優(yōu)秀企業(yè)的十?dāng)?shù)位權(quán)威專家的精彩報(bào)告，還與專家及業(yè)內(nèi)同仁進(jìn)行了零距離咨詢與交流。這對(duì)于在制藥企業(yè)中從事分離純化和分析檢測(cè)技術(shù)工作的實(shí)驗(yàn)室和車間技術(shù)人員也是一次難得的高水平的培訓(xùn)機(jī)會(huì)。http://www.sepu.net/Article/66209-1.shtml

第三篇：應(yīng)用大孔吸附樹(shù)脂分離純化工藝生產(chǎn)的保健食品申報(bào)與審評(píng)規(guī)定(試

【發(fā)布單位】國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局 【發(fā)布文號(hào)】國(guó)食藥監(jiān)注[2005]202號(hào) 【發(fā)布日期】2005-05-20 【生效日期】2005-07-01 【失效日期】 【所屬類別】政策參考

【文件來(lái)源】國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局

應(yīng)用大孔吸附樹(shù)脂分離純化工藝生產(chǎn)的保健食品申報(bào)與審評(píng)規(guī)定（試行）

(國(guó)食藥監(jiān)注[2005]202號(hào))

根據(jù)《保健食品注冊(cè)管理辦法（試行）》，為規(guī)范、統(tǒng)一營(yíng)養(yǎng)素補(bǔ)充劑等申報(bào)與審評(píng)行為，我局制定了《營(yíng)養(yǎng)素補(bǔ)充劑申報(bào)與審評(píng)規(guī)定（試行）》、《真菌類保健食品申報(bào)與審評(píng)規(guī)定（試行）》、《益生菌類保健食品申報(bào)與審評(píng)規(guī)定（試行）》、《核酸類保健食品申報(bào)與審評(píng)規(guī)定（試行）》、《野生動(dòng)植物類保健食品申報(bào)與審評(píng)規(guī)定（試行）》、《氨基酸螯合物等保健食品申報(bào)與審評(píng)規(guī)定（試行）》、《應(yīng)用大孔吸附樹(shù)脂分離純化工藝生產(chǎn)的保健食品申報(bào)與審評(píng)規(guī)定（試行）》、《保健食品申報(bào)與審評(píng)補(bǔ)充規(guī)定（試行）》8個(gè)與保健食品申報(bào)與審批相關(guān)的規(guī)定。上述規(guī)定于2005年7月1日起正式實(shí)施，現(xiàn)予以通告。

國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局

二○○五年五月二十日

應(yīng)用大孔吸附樹(shù)脂分離純化工藝生產(chǎn)的保健食品申報(bào)與審評(píng)規(guī)定（試行）

第一條第一條 為規(guī)范應(yīng)用大孔吸附樹(shù)脂分離純化工藝生產(chǎn)的保健食品審評(píng)工作，確保保健食品的食用安全，根據(jù)《 中華人民共和國(guó)食品衛(wèi)生法》和《 保健食品注冊(cè)管理辦法（試行）》，制定本規(guī)定。

第二條第二條 應(yīng)用大孔吸附樹(shù)脂分離純化工藝生產(chǎn)的保健食品是指產(chǎn)品生產(chǎn)過(guò)程中及原料生產(chǎn)過(guò)程中應(yīng)用了大孔吸附樹(shù)脂分離純化工藝的保健食品。

第三條第三條 申請(qǐng)應(yīng)用大孔吸附樹(shù)脂分離純化工藝生產(chǎn)的保健食品除按照保健食品注冊(cè)管理的有關(guān)規(guī)定提交資料外，還應(yīng)提供以下資料：

（一）大孔吸附樹(shù)脂的相關(guān)資料

1、大孔吸附樹(shù)脂規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)。標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容應(yīng)包括大孔吸附樹(shù)脂名稱、牌（型）號(hào)、結(jié)構(gòu)、合成原料（主要原料、交聯(lián)劑、致孔劑、分散劑等名稱和規(guī)格）、外觀、極性和粒徑范圍、含水量、濕密度、干密度、比表面積、孔徑、孔隙率、孔容等，并提供大孔吸附樹(shù)脂標(biāo)準(zhǔn)級(jí)別等。

2、大孔吸附樹(shù)脂使用說(shuō)明書(shū)。使用說(shuō)明書(shū)的內(nèi)容應(yīng)包括：

（1）大孔吸附樹(shù)脂性能簡(jiǎn)介、適用范圍、主要原料和添加劑種類與名稱；

（2）殘留物（包括未聚單體、交聯(lián)劑、主要添加劑）及其殘留量檢測(cè)方法和限量標(biāo)準(zhǔn)及依據(jù)；

（3）使用方法和注意事項(xiàng)，包括新大孔吸附樹(shù)脂的預(yù)處理方法、再生處理方法和操作注意事項(xiàng)、貯存條件等，以及可能出現(xiàn)異常情況的處理方法。

3、生產(chǎn)批號(hào)、生產(chǎn)時(shí)間、產(chǎn)品檢驗(yàn)報(bào)告書(shū)。

4、相關(guān)證明文件。大孔吸附樹(shù)脂生產(chǎn)企業(yè)的企業(yè)名稱、地址、電話、營(yíng)業(yè)執(zhí)照及相關(guān)生產(chǎn)許可證件的復(fù)印件等。

（二）應(yīng)用大孔吸附樹(shù)脂進(jìn)行分離純化的制備工藝研究資料

1、制備工藝中應(yīng)用大孔吸附樹(shù)脂進(jìn)行分離純化的目的與依據(jù)。詳細(xì)說(shuō)明應(yīng)用大孔吸附樹(shù)脂進(jìn)行分離、純化的目的和必要性，并提供相關(guān)研究或文獻(xiàn)資料。

2、大孔吸附樹(shù)脂的預(yù)處理方法和合格標(biāo)準(zhǔn)。預(yù)處理方法包括考察預(yù)處理溶劑的種類、用量、浸泡時(shí)間、流速、溫度、pH值等工藝參數(shù)和操作規(guī)程。

3、生產(chǎn)工藝的研究資料。大孔吸附樹(shù)脂型號(hào)的選擇、比上柱量、比吸附量、比洗脫量、樹(shù)脂柱的徑-高比、提取液的適宜上柱溫度、pH及流速、解吸附溶劑及其條件的選擇、解吸附終點(diǎn)判定方法等研究資料，并將上述資料作為該產(chǎn)品的生產(chǎn)工藝的一部分。

4、大孔吸附樹(shù)脂再生方法的確定。大孔吸附樹(shù)脂經(jīng)使用后，吸附能力下降，應(yīng)進(jìn)行再生處理。根據(jù)功效成分和大孔吸附樹(shù)脂的理化性質(zhì)，制訂大孔吸附樹(shù)脂再生處理方法及其合格標(biāo)準(zhǔn)，申請(qǐng)人應(yīng)制定相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)、操作規(guī)程并列入企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的附錄。

（三）使用以大孔吸附樹(shù)脂分離純化工藝制造的原料生產(chǎn)的保健食品，申請(qǐng)時(shí)還應(yīng)提供原料生產(chǎn)企業(yè)的詳細(xì)資料，原料的制備工藝和詳細(xì)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，包括原料中大孔吸附樹(shù)脂殘留物的標(biāo)準(zhǔn)和檢測(cè)報(bào)告。申請(qǐng)人應(yīng)提供由國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局確定的檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)出具的該原料大孔吸附樹(shù)脂殘留物的檢驗(yàn)報(bào)告。

（四）大孔吸附樹(shù)脂及其純化工藝等安全性評(píng)價(jià)資料

第四條應(yīng)用苯乙烯骨架型樹(shù)脂分離純化工藝的保健食品應(yīng)符合以下要求：

（一）大孔吸附樹(shù)脂應(yīng)用前應(yīng)進(jìn)行預(yù)處理，預(yù)處理以后的大孔吸附樹(shù)脂中的有機(jī)殘留物應(yīng)控制在安全范圍內(nèi)，對(duì)苯乙烯骨架型樹(shù)脂要求苯的殘留量小于2mg/kg、二乙烯苯小于20 mg/kg。對(duì)其它類型的大孔吸附樹(shù)脂，根據(jù)具體情況確定限量標(biāo)準(zhǔn)。

（二）一般情況下,不得使用再生后的比吸附量仍下降達(dá)30%以上時(shí)的大孔吸附樹(shù)脂。

（三）應(yīng)用以大孔吸附樹(shù)脂分離純化工藝生產(chǎn)保健食品原料的生產(chǎn)企業(yè)，應(yīng)當(dāng)對(duì)原料的大孔吸附樹(shù)脂殘留物進(jìn)行檢驗(yàn)或復(fù)核。對(duì)用苯乙烯骨架型樹(shù)脂制備的原料中二乙烯苯含量要求為小于50μg/kg，并將此列入企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。如果原料質(zhì)量達(dá)到上述標(biāo)準(zhǔn)的，可以免測(cè)該保健食品終產(chǎn)品的大孔吸附樹(shù)脂殘留物的含量。

（四）建立樹(shù)脂殘留物的檢測(cè)方法和標(biāo)準(zhǔn)，并列入企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。

（五）對(duì)保健食品生產(chǎn)過(guò)程中應(yīng)用苯乙烯骨架型樹(shù)脂分離純化工藝的保健食品，其產(chǎn)品中二乙烯苯含量要求為小于50 μg/kg。

第五條第五條 其它類型的大孔吸附樹(shù)脂參照苯乙烯骨架型并結(jié)合具體品種制定相應(yīng)的殘留物及殘留標(biāo)準(zhǔn)等內(nèi)容。

第六條第六條 原則上不得以多個(gè)動(dòng)植物原料混合后再應(yīng)用大孔吸附樹(shù)脂純化工藝生產(chǎn)保健食品。

第七條第七條 必要時(shí)，國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局可對(duì)大孔吸附樹(shù)脂生產(chǎn)企業(yè)和應(yīng)用大孔吸附樹(shù)脂生產(chǎn)保健食品所用原料的企業(yè)進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)核查。

第八條第八條 本規(guī)定由國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局負(fù)責(zé)解釋。

第九條第九條 本規(guī)定自二○○五年七月一日起實(shí)施。以往發(fā)布有關(guān)規(guī)定與本規(guī)定不一致的，以本規(guī)定為準(zhǔn)。

本內(nèi)容來(lái)源于政府官方網(wǎng)站，如需引用，請(qǐng)以正式文件為準(zhǔn)。

第四篇：粗提技術(shù)論文：壇紫菜R-藻紅蛋白的分離純化工藝與分析鑒定

粗提技術(shù)論文：壇紫菜R-藻紅蛋白的分離純化工藝與分析鑒定

【中文摘要】藻紅蛋白作為壇紫菜中的一種重要生理活性物質(zhì),已廣泛應(yīng)用到食品、輕工業(yè)、化妝和醫(yī)藥等行業(yè),具有很高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。目前藻紅蛋白主要是從紅藻中分離提取獲得,現(xiàn)已報(bào)道的分離純化工藝多為破壁粗提,鹽析沉淀粗分離再結(jié)合多步色譜層析純化獲得,這種工藝存在多種問(wèn)題,比如細(xì)胞破碎不充分,提取效率較低、鹽析沉淀操作步驟繁瑣、多步柱層析成本較高等等,使得藻紅蛋白生產(chǎn)難以工業(yè)化,高純度藻紅蛋白價(jià)格十分昂貴,極大限制了藻紅蛋白的廣泛應(yīng)用。故本文針對(duì)壇紫菜R-藻紅蛋白分離純化存在的一系列問(wèn)題,對(duì)比了多種破壁粗提技術(shù)并加以條件優(yōu)化,結(jié)合兩步色譜層析,建立了壇紫菜R-藻紅蛋白分離純化新工藝,為藻紅蛋白大規(guī)模開(kāi)發(fā)和利用提供了理論基礎(chǔ)和科學(xué)依據(jù)。(1)壇紫菜R-藻紅蛋白是胞內(nèi)蛋白,破壁技術(shù)作為藻紅蛋白提純的第一步直接關(guān)系到原料的利用率和藻紅蛋白的生產(chǎn)成本,具有十分重要的意義。故本研究比較了4種具有大規(guī)模提取應(yīng)用前景的粗提技術(shù)——溶脹法、化學(xué)處理法、超聲波法和攪切法對(duì)壇紫菜R-藻紅蛋白的提取效果,以R-藻紅蛋白提取得率、純度和提取時(shí)間為參數(shù),確定攪切法為最佳粗提技術(shù),并對(duì)這種方法的物料比、攪切轉(zhuǎn)速和攪切時(shí)間進(jìn)行了優(yōu)化,結(jié)果表明當(dāng)物料比為1：...【英文摘要】As an important physiological active substance of Porphyra haitanensis, R-phycoerythrin is widespread applied

in food, cosmetics and pharmaceutical industry with a very high economic value.At present phycoerythrin is mainly separated from the red algae.There are many reports of the separation and purification about it at home and abroad.Conventional protein purification procedures involve three steps:pretreatment of the sample to allow the intracellular material to become liberated, making a crude extract...【關(guān)鍵詞】粗提技術(shù) 離子交換色譜 凝膠過(guò)濾色譜 壇紫菜R-藻紅蛋白 分離純化

【英文關(guān)鍵詞】Extraction and Purification Ion Exchange Chromatography Gel Filtration R-phycoerythrin Analysis 【目錄】壇紫菜R-藻紅蛋白的分離純化工藝與分析鑒定4-611-1212-17Abstract6-7

目錄8-11

引言

摘要1 文獻(xiàn)綜述12-241.1 藻紅蛋白的概論

12-13

1.1.2 藻紅1.1.1 藻紅蛋白與藻膽蛋白

13-15蛋白的結(jié)構(gòu)與組成15-16

1.1.3 藻紅蛋白的分類

16-17

1.2 藻紅蛋1.1.4 藻紅蛋白的理化性質(zhì)白的應(yīng)用17-1917-1818

1.2.1 在免疫熒光技術(shù)方面的應(yīng)用1.2.2 在食品行業(yè)和精細(xì)化工方面的應(yīng)用1.2.3 在醫(yī)藥保健藥物開(kāi)發(fā)方面的應(yīng)用18-19

1.3.1 破壁粗提

1.4 藻紅蛋白的分離純

1.3 藻紅蛋白的提取與粗分離19-2119-201.3.2 粗制方法20-21

化21-22221.4.1 吸附層析21-221.4.2 離子交換層析1.4.3 凝膠柱層析221.5 本文研究?jī)?nèi)容及技術(shù)路線22-2424-362424-252525-2729-3235-3636-553637-382 壇紫菜R-藻紅蛋白的粗提技術(shù)的比較2.1 材料與方法24-25

2.1.1 材料與試劑2.1.3 細(xì)胞破碎方法2.1.2 儀器及設(shè)備242.1.4 壇紫菜R-藻紅蛋白得率和純度的計(jì)算2.2 結(jié)果與討論25-352.2.2 化學(xué)處理法27-292.2.4 攪切法32-35

2.2.1 溶脹法

2.2.3 超聲破碎法2.3 本章小結(jié)3 壇紫菜R-藻紅蛋白的分離純化工藝的建立3.1 材料與方法36-383.1.2 儀器與裝置36-373.2 結(jié)果與討論38-53

3.1.1 材料與試劑3.1.3 實(shí)驗(yàn)方法3.2.1 離子交換介質(zhì)種

3.2.3 類的選擇39-40起始緩沖液pH的優(yōu)化44-47化47-48

3.2.2 緩沖液種類的選擇40-4242-44

3.2.4 洗脫液鹽濃度的優(yōu)化

3.2.6 洗脫流速的優(yōu)

3.2.8 不3.2.5 上樣體積的優(yōu)化473.2.7 離子交換層析的放大48-49

49-50

3.2.9 凝膠過(guò)濾層析同孔徑超濾膜的選擇50-533.3 本章小結(jié)53-554 壇紫菜R-藻紅蛋白的分

4.1.1 材料與試析鑒定55-65劑5555-58

4.1 材料與方法55-584.1.2 儀器與設(shè)備554.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果58-63

4.1.3 實(shí)驗(yàn)方法4.2.1 紫外可見(jiàn)吸收光譜

分析58-604.2.2 熒光光譜分析60-62

62-63

4.2.3 Native

結(jié)論和SDS-PAGE電泳分析與展望65-67

4.3 本章小結(jié)63-65

參考文獻(xiàn)67-71

致謝72-73

攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文情況71-72