第一篇：魔芋組培良種擴(kuò)繁技術(shù)研究及推廣應(yīng)用工作報(bào)告

魔芋組培良種擴(kuò)繁技術(shù)研究及推廣應(yīng)用

工

作

報(bào)

告

1、項(xiàng)目背景

魔芋是21世紀(jì)的朝陽(yáng)產(chǎn)業(yè)，魔芋產(chǎn)品市場(chǎng)短期內(nèi)始終處于供不應(yīng)求狀態(tài)。恩施自治州依靠得天獨(dú)厚的自然條件、區(qū)位優(yōu)勢(shì)、政策支持和廉價(jià)的勞力、土地資源，給魔芋產(chǎn)業(yè)發(fā)展帶來(lái)了千載難逢的大好機(jī)遇。

魔芋作為無(wú)性繁殖作物，長(zhǎng)期種植必然導(dǎo)致種性退化、抗性下降、病害逐年加重，并成為制約魔芋種植業(yè)乃至整個(gè)產(chǎn)業(yè)發(fā)展的瓶頸，一般年份減產(chǎn)二、三成，嚴(yán)重年份減產(chǎn)60%以上，甚至絕收。為了有效遏止病害發(fā)生，保障魔芋產(chǎn)業(yè)持續(xù)發(fā)展，最根本最有效的措施和辦法是選育新品種，并通過(guò)組織培養(yǎng)脫去自帶病原，實(shí)現(xiàn)種芋的提純復(fù)壯，從而增強(qiáng)抗性、提高產(chǎn)量和繁殖系數(shù)來(lái)滿足生產(chǎn)發(fā)展的需要。

恩施自治州農(nóng)科院選出育省審命名的清江花魔芋及配套組培技術(shù)已經(jīng)研究成熟，為了完善新品種三級(jí)繁育體系（育種單位組培原原種，科研開(kāi)發(fā)單位生產(chǎn)原種，縣級(jí)農(nóng)業(yè)部門(mén)或魔芋企業(yè)生產(chǎn)良種），加速組培良種推廣步伐，我們?cè)诙魇┲蒉r(nóng) 1 科院及建始金璐、農(nóng)泰、花果山公司等魔芋企業(yè)支持下，于2007年-2009年開(kāi)展了魔芋培良種擴(kuò)繁技術(shù)研究及推廣應(yīng)用。

2、研究?jī)?nèi)容

為了探索魔芋組培良種擴(kuò)繁技術(shù)，2008-2009年開(kāi)展了不同栽培方式、不同栽培密度、不同覆蓋方式、不同商品肥料、高科技產(chǎn)品應(yīng)用試驗(yàn)，為組培良種推廣提供了科學(xué)依據(jù)。

2007年以來(lái)依托魔芋企業(yè)，組織農(nóng)戶示范推廣組培良種1000畝，示范推廣的同時(shí)又開(kāi)展了組培良種與常規(guī)自留種對(duì)比示范研究。

3、研究結(jié)果

3.1 組培良種栽培方式上應(yīng)以間套栽培為主，采用玉米間套比單作（魔芋凈作）軟腐病發(fā)生及損失下降80%，單產(chǎn)增14%左右，繁殖系數(shù)高1倍多，純收入（含玉米項(xiàng)）畝增1300多元。

3.2 目前25克左右大小組培原種的最佳種植密度是8000-10000株/畝。

3.3 組培良種采用稻草及玉米秸桿覆蓋壟面軟腐病發(fā)生損失下降近40%以上，單產(chǎn)增10%以上。

3.4 組培良種所用商品肥料主選40%沃夫特硫型控釋復(fù) 2 合肥以替代目前生產(chǎn)上大面積推廣的40%煙草復(fù)合肥（含氯1.5%），畝增魔芋200多公斤，增幅20%以上。

3.5 組培良種使用高科技產(chǎn)品防病、增產(chǎn)效果更突出，供試中的保水劑、液態(tài)地膜防病效果高于60%，增產(chǎn)幅度20%以上，值得大力推廣，抗蒸騰劑、松土精增產(chǎn)10%以上，也具應(yīng)用價(jià)值。

3.6 組培良種與常規(guī)自留種對(duì)比示范，軟腐病下降85%以上，單產(chǎn)增2100多公斤，農(nóng)戶大面積推廣平均增產(chǎn)也達(dá)到1520公斤，在除去多投入的種芋成本后畝純?cè)霎a(chǎn)值還有3800多元。

4、創(chuàng)新點(diǎn)

4.1 優(yōu)良品種應(yīng)用高科技產(chǎn)品提高了科技含量。4.2 本項(xiàng)研究技術(shù)實(shí)用性好，可操作性強(qiáng)，生產(chǎn)上推廣易收到立竿見(jiàn)影效果。

5、推廣應(yīng)用成果

2007年以來(lái)已在花坪、紅巖、官店鄉(xiāng)（鎮(zhèn)）推廣應(yīng)用組培良種1000畝。

6、效益分析 6.1 經(jīng)濟(jì)效益

推廣組培良種生產(chǎn)種芋經(jīng)濟(jì)效益突出，平均每畝增加產(chǎn)種 3 量1520kg，除去生產(chǎn)成本后還有純?cè)霎a(chǎn)值3840元，全縣所推廣示范的1000畝組培良種就為芋農(nóng)增收384萬(wàn)元。建始縣魔芋種植8萬(wàn)畝，其中基地種芋面積2萬(wàn)畝，如果按照1/6比例建組培良種擴(kuò)繁基地3300畝以滿足基地種芋用種需求，可為農(nóng)民（含種芋生產(chǎn)者）直接增收1267萬(wàn)元。

6.2 社會(huì)效益

組培良種擴(kuò)繁技術(shù)研究及推廣應(yīng)用，加速了種芋基地良種更新?lián)Q代，充分發(fā)揮了良種的增產(chǎn)作用，確保了魔芋產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展，使農(nóng)民能穩(wěn)定增收，企業(yè)能持續(xù)增效，財(cái)政能不斷增長(zhǎng)，社會(huì)效益十分明顯。

6.3 生態(tài)效益

推廣應(yīng)用組增良種及配套技術(shù)，不僅能解決種性退化、減輕病害發(fā)生損失、提高魔芋產(chǎn)量和產(chǎn)品質(zhì)量，而且還能改良土壤、改善農(nóng)田生態(tài)、提高土壤肥力和生產(chǎn)能力、提高土肥水資源利用率、減少資源浪費(fèi)，生態(tài)效益極其良好。

二OO九年十二月

第二篇：金線蓮組培快繁技術(shù)研究

金線蓮組培快繁技術(shù)研究

【摘要】目的建立金線蓮快繁體系。方法以莖段為外植體，開(kāi)展了莖段不同部位、培養(yǎng)基、激素、有機(jī)物和活性炭對(duì)不定芽增殖、幼苗生長(zhǎng)的影響研究，并進(jìn)行了移栽試驗(yàn)。結(jié)果外植體以不含頂芽和長(zhǎng)根的中間段莖節(jié)為好；不定芽增殖最佳培養(yǎng)基配方為MS（或B5）+BA3.0 mg/L +NAA0.5～1.0 mg/L，兩個(gè)月增殖倍數(shù)達(dá)5.0以上；壯苗最適培養(yǎng)基為1/2MS＋NAA3.0 mg/L＋6-BA 0.5 mg/L＋香蕉提取物20%（或椰子汁20%）；試管苗移栽適宜的基質(zhì)為菜園土1份＋2～3 mm粗砂2份（或1份）＋木屑1份（或2份），3個(gè)月成活率均達(dá)100%，且生長(zhǎng)良好。結(jié)論采用上述方法，能實(shí)現(xiàn)金線蓮幼苗的快速繁殖。

【關(guān)鍵詞】金線蓮； 快速繁殖； 增殖； 生長(zhǎng)； 移栽

金線蓮Anoectochilus roxburghii（wall.）lindl為蘭科開(kāi)唇蘭屬多年生草本，別名金蠶、金線蘭、金線虎頭蕉等，是我國(guó)傳統(tǒng)珍貴藥材，素有“金草”“神藥”“烏人參”等美稱(chēng)，在民間應(yīng)用范圍較廣，廣泛應(yīng)用于風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、高血壓病、糖尿病、腎病等疑難雜癥的治療和強(qiáng)身健體、病后體虛恢復(fù)等方面，在浙江、福建、臺(tái)灣等省和東南亞地區(qū)被視為珍稀名貴藥材，特別在臺(tái)灣省更是備受青睞，被稱(chēng)為“藥中之王”［1，2］。

金線蓮種子微小，由未成熟的胚及數(shù)層種皮細(xì)胞構(gòu)成，自然萌發(fā)率和繁殖率低，目前市場(chǎng)上貨源主要來(lái)自于野生采挖，產(chǎn)品一直處于供不應(yīng)求的狀況。近年來(lái)，隨著對(duì)其藥效學(xué)和臨床應(yīng)用研究的深入，對(duì)金線蓮藥用價(jià)值的認(rèn)識(shí)進(jìn)一步提高，其市場(chǎng)貨源緊缺的狀況更為嚴(yán)峻，野生資源也不斷遭到破壞性采挖，以致于處于瀕臨滅絕之地。本研究旨在采用組織培養(yǎng)技術(shù)，解決金線蓮種苗來(lái)源，加快人工栽培，以保護(hù)金線蓮野生資源、穩(wěn)定市場(chǎng)供應(yīng)。現(xiàn)將有關(guān)實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下。

1材料與方法

1.1材料無(wú)菌繁殖體系的建立為浙江金線蓮野生種源，其它實(shí)驗(yàn)為繼代培養(yǎng)的不定芽及無(wú)根幼苗莖段。

1.2無(wú)菌繁殖體系的建立 取生長(zhǎng)健壯、無(wú)病蟲(chóng)害的植株，去葉后放入低濃度的洗衣粉水中漂洗3～5 min，然后用流水沖洗30 min。在超靜工作臺(tái)前，用75% 酒精濕潤(rùn)5～6 s，放入0.1%的HgCl溶液滅菌12～13 min，用無(wú)菌水沖洗5～6次。將消毒好的莖按上段（具莖尖）、中段和下段（匍匐莖段）切成長(zhǎng)約1.5～2 cm，帶有1～2個(gè)節(jié)間的小段，分別接種于MS+6－BA 4.0 mg/L +NAA 0.4 mg/L 培養(yǎng)基上，pH5.6，蔗糖2.5%，瓊脂0.7%。培養(yǎng)條件為：溫度(25±2）℃，光照時(shí)間12 h/d，光照強(qiáng)度1 500～2 000 lx。

1.3不定芽誘導(dǎo)

1.3.1基本培養(yǎng)基對(duì)不定芽誘導(dǎo)的影響 采用單因素實(shí)驗(yàn)，培養(yǎng)基選用MS

（Murashige-Skoog）［3］，1/2MS（大量元素減半，其他成分不變），VW(Vacin & Went)，B5（Gamborg·Miller & Ojima）和KC(Knudson C)等5種，分別添加6－BA 4.0mg/L，NAA 1.0 mg/L。

1.3.2激素對(duì)不定芽誘導(dǎo)的影響 以MS為基本培養(yǎng)基，添加不同種類(lèi)及濃度的細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素。

上述實(shí)驗(yàn)選取無(wú)菌健壯植株，切取長(zhǎng)約1～1.5 cm，帶有一個(gè)節(jié)間的莖中段，每處理接10個(gè)莖節(jié)，重復(fù)3次。培養(yǎng)期間定時(shí)觀察不定芽生長(zhǎng)情況，培養(yǎng)60 d后統(tǒng)計(jì)不定芽數(shù)。其它條件同實(shí)驗(yàn)“1.2”項(xiàng)。

1.4壯苗培養(yǎng)

1.4.1激素對(duì)幼苗生長(zhǎng)和發(fā)根的影響 以1/2MS為基本培養(yǎng)基，NAA設(shè)1～5 mg/L 5個(gè)處理，6－BA設(shè)0.5，1.0和1.5 mg/L 3個(gè)處理，共15個(gè)處理。

1.4.2添加物對(duì)幼苗生長(zhǎng)和發(fā)根的影響以1/2MS＋NAA 2.0 mg/L＋6－BA 0.5 mg/L為基本培養(yǎng)，考察馬鈴薯提取物、香蕉提取物、蘋(píng)果提取物、椰子汁等4種天然有機(jī)物和活性炭對(duì)金線蓮幼苗生長(zhǎng)的影響。

上述每種培養(yǎng)基均接入經(jīng)增殖培養(yǎng)高約3 cm，具3～4節(jié)間、有1～2片的無(wú)根幼苗，每處理接種接無(wú)根幼苗10株，重復(fù)3次。培養(yǎng)后每隔15 d觀察生長(zhǎng)情況1次，至3個(gè)月考察每株凈增加的葉片數(shù)、重量及發(fā)根數(shù)，并進(jìn)行數(shù)理統(tǒng)計(jì)分析。

1.5移栽選苗高約6～8 cm，莖基直徑約2 mm，叢生根有2～3條的試管苗，煉苗4 d后，洗凈附著在植株上的培養(yǎng)基，并晾干洗滌水后移人直徑為15 cm，裝有不同基質(zhì)的土盆中，考察不同基質(zhì)對(duì)金線蓮試管苗成活率的影響。移栽前，實(shí)驗(yàn)基質(zhì)均用45%多菌靈可濕性粉劑800倍溶液澆透消毒。實(shí)驗(yàn)條件為遮蔭度80%的蔭棚，保持空氣相對(duì)濕度的80%～90%。如發(fā)現(xiàn)有病死植株，及時(shí)拔除。每處理5盆，每盆種5株，重復(fù)3次，移栽3個(gè)月后考察成活株數(shù)，并進(jìn)行數(shù)理統(tǒng)計(jì)分析。

2結(jié)果

2.1無(wú)菌繁殖體系的建立實(shí)驗(yàn)表明，外植體莖段的分化程度對(duì)誘導(dǎo)結(jié)果存在一定的影響。從表1可知，上、中段莖均能萌動(dòng)生長(zhǎng)。上段莖因有頂芽的存在，頂端優(yōu)勢(shì)表現(xiàn)較為強(qiáng)烈，因而以生長(zhǎng)為主，不定芽發(fā)生較少，平均芽增殖數(shù)為0.6個(gè)；中段莖不定芽發(fā)生快、量大、長(zhǎng)勢(shì)好，平均芽增殖數(shù)為4.05個(gè)，并形成多枝叢生狀。下段莖由于組織相對(duì)老化，雖有不定芽發(fā)生，但發(fā)生量與生長(zhǎng)勢(shì)均較弱。這和陳自力［4］報(bào)道的結(jié)果一致。

從實(shí)驗(yàn)中觀察到，不定芽的產(chǎn)生以側(cè)芽萌生為主。一般在培養(yǎng)15～20 d后，莖節(jié)上潛伏的葉腋芽萌動(dòng)膨大，芽叢在節(jié)的四周萌出，起初為白色略帶黃色，隨著培養(yǎng)時(shí)間加長(zhǎng)，芽不斷伸展，逐漸轉(zhuǎn)為黃綠色，形成主芽。葉腋芽是單生的，極個(gè)別節(jié)上能對(duì)生兩個(gè)腋芽，未發(fā)現(xiàn)莖部或切口處長(zhǎng)出不定芽。培養(yǎng)30 d左右，主芽基部的節(jié)再生側(cè)芽(稱(chēng)一級(jí)側(cè)芽)，45 d左右一級(jí)側(cè)芽節(jié)上又可發(fā)生二級(jí)側(cè)芽，隨著芽的生長(zhǎng)、出現(xiàn)葉片，節(jié)處毛并產(chǎn)生根，外被濃密的白色絨毛，從而形成完整小植株。培養(yǎng)3個(gè)月后每天觀察，側(cè)芽分生組織的增殖，一般只出現(xiàn)主芽和一二級(jí)側(cè)芽或苗；培養(yǎng)5個(gè)月以上，主芽、側(cè)芽較高，葉片較多、大，只有少數(shù)出現(xiàn)三級(jí)側(cè)芽或苗。這種腋芽萌生的增殖形成了主軸分枝型的芽苗，隨培養(yǎng)時(shí)間或繼代繁殖代數(shù)的增加，或激素的作用，芽或苗因節(jié)間短，多數(shù)為形成似不定芽或叢生苗。培養(yǎng)過(guò)程中，未見(jiàn)愈傷組織，也沒(méi)有發(fā)現(xiàn)有原球莖和類(lèi)原球莖產(chǎn)生。

表1金線蓮莖段外植體不定芽誘導(dǎo)（略）

2.2不定芽誘導(dǎo)

2.2.1基本培養(yǎng)基對(duì)不定芽誘導(dǎo)的影響 以金線蓮的莖節(jié)段作為外植體，腋芽能快速萌發(fā)出不定芽體。經(jīng)60 d的培養(yǎng)，增殖倍數(shù)可達(dá)3.1～5.4倍。但基本培養(yǎng)基對(duì)不定芽的誘導(dǎo)具有明顯的影響，MS，B5培養(yǎng)基不定芽增殖率分別為5.4倍與5.2倍，比其它培養(yǎng)基增加23.8%～74.2%。

表2基本培養(yǎng)基對(duì)金線蓮不定芽誘導(dǎo)的影響（略）

經(jīng)LSR差異顯著性測(cè)定，MS，B5培養(yǎng)基之間無(wú)明顯差異，與1/2MS，KC和VW之間存在極顯著差異，且MS，B5培養(yǎng)基上誘導(dǎo)產(chǎn)生的不定芽色綠、粗壯（見(jiàn)表2），表明MS，B5培養(yǎng)基適合作為金線蓮莖段不定芽誘導(dǎo)的基本培養(yǎng)基［5］。

2.2.2激素對(duì)不定芽誘導(dǎo)的影響激素種類(lèi)、水平與配比對(duì)組織培養(yǎng)快速繁殖在效率存在明顯的影響，6-BA、KT和NAA是3種常用生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，其添加量對(duì)金線蓮不定芽增殖的影響很大。結(jié)果見(jiàn)表3。從表3可知，同為細(xì)胞分裂素的6-BA，KT在相同的添加量下對(duì)不定芽的增殖效果差異極顯著，6-BA比KT的增殖率提高46.0%和55.0%，表明6-BA比KT更適合金線蓮莖節(jié)不定芽的誘導(dǎo)。

6-BA的濃度也影響不定芽誘導(dǎo)效果。在添加量小于4.0 mg/L的情況下，隨濃度的提高，不定芽增殖率明顯上升，添加量為4.0 mg/L的不定芽增殖率比2.0，1.0 mg/L分別提高22.1%和47.6%。當(dāng)6-BA添加量達(dá)到6.0 mg/L時(shí)，其增殖率還出現(xiàn)下降趨勢(shì)，表明本實(shí)驗(yàn)條件下6-BA添加的適宜量為4.0 mg/L。

表3激素對(duì)金線蓮不定芽誘導(dǎo)的影響（略）

生長(zhǎng)素NAA對(duì)金線蓮不定芽的誘導(dǎo)與生長(zhǎng)具有明顯的促進(jìn)作用。從表3可以看出，添加了NAA的培養(yǎng)基不定芽增殖量與生長(zhǎng)明顯較不添加的好，芽體粗壯、色濃綠，其中添加0.5 mg/L的表現(xiàn)最好，添加1.0 mg/L的其次，但二者間差異未達(dá)到顯著水平；與其它不添加NAA的相比差異達(dá)極顯著水平。表明在本試驗(yàn)條件下NAA適宜添加的量為0.5～1.0 mg/L。

2.3壯苗培養(yǎng)

2.3.1激素對(duì)幼苗生長(zhǎng)的影響在金線蓮壯苗培養(yǎng)中，NAA較6-BA對(duì)促進(jìn)幼苗生長(zhǎng)的影響更為明顯。結(jié)果見(jiàn)表4。NAA濃度低于3 mg/L時(shí)，對(duì)幼苗生長(zhǎng)有促進(jìn)作用，隨濃度的增加，葉片凈增量、發(fā)根數(shù)和鮮重凈增量明顯增加，當(dāng)濃度達(dá)到4.0 mg/L時(shí)，葉片凈增量、發(fā)根數(shù)和鮮重凈增量增加不明顯。6-BA在0.5 mg/L情況下，比不加的具有一定的促進(jìn)作用，但未達(dá)顯著水平；在濃度為1.0 mg/L，1.5 mg/L情況下，葉片凈增量、發(fā)根數(shù)和鮮重凈增量反而減少，但在幼苗基部觀察到叢生狀不定芽的產(chǎn)生，表明6-BA在濃度高于1.0 mg/L情況下，有利于金線蓮不定芽的生成，對(duì)幼苗生長(zhǎng)不利。

從表4也可以看出，處理9、10號(hào)在發(fā)根數(shù)、鮮生凈增量方面較其它處理明顯提高，達(dá)極顯著差異；在葉片凈增量方面，除與處理13、14號(hào)無(wú)明顯差異外，與其它處理之間的差異達(dá)極顯著水平，表明在金線蓮壯苗培養(yǎng)中，NAA適宜添加的量為3.0～4.0 mg/L，6-BA 添加量為0.5 mg/L或不加。

表4激素對(duì)金線蓮幼苗生長(zhǎng)的影響（略）

2.3.2活性炭與有機(jī)添加物對(duì)幼苗生長(zhǎng)的影響結(jié)果見(jiàn)表5。從表5可知，不同的添加物對(duì)金線蓮幼苗生長(zhǎng)的影響表現(xiàn)不一，香蕉、椰子汁對(duì)促進(jìn)幼苗生長(zhǎng)最為有利，葉片凈增量、發(fā)根數(shù)和鮮重凈增量均高于其它處理，二者間無(wú)明顯差異；馬鈴薯對(duì)幼苗生長(zhǎng)不利，與其它處理相比均存在極顯著差異水平?；钚蕴繉?duì)金線蓮幼苗生長(zhǎng)具有一定的促進(jìn)作用，在添加0.3%情況下，葉片凈增量、發(fā)根數(shù)和鮮重凈增量與對(duì)照相比均顯著提高，差異達(dá)極顯著水平；但與香蕉、椰子汁處理相比，其促進(jìn)幼苗生長(zhǎng)的作用不如前二者，除發(fā)根數(shù)無(wú)差異外，葉凈增量與香蕉、椰子汁處理差異達(dá)顯著水平，鮮重凈增量差異達(dá)極顯著水平。同時(shí)觀察到活性炭、香蕉和椰子汁新發(fā)根潔白、粗壯。試驗(yàn)結(jié)果表明添加20%香蕉和椰子汁最適宜金線蓮幼苗的生長(zhǎng)。

表5添加物對(duì)金線蓮幼苗生長(zhǎng)的影響（略）

2.4移栽金線蓮試管苗移栽3個(gè)月后的植株成活情況見(jiàn)表6。從表6中可以看出，處理7和處理9保持100%的成活率，處理3和處理8的植株成活率也在93%以上，處理1的成活率最低，僅為56%。經(jīng)LSR差異顯著性測(cè)定，處理3、7、8、9號(hào)之間無(wú)明顯差異，與處理5、6號(hào)差異達(dá)顯著水平、與處理1、2、4號(hào)差異達(dá)極顯著水平。表明在菜園土中加

入粗砂、木屑能明顯提高金線蓮試管苗移栽的成活率，適宜添加的比例為1份菜園土中加入粗砂2份、木屑1份或粗砂1份、木屑2份，要求充分混勻。

表6種植基質(zhì)對(duì)金線蓮試管苗移栽成活率的影響（略）

3小結(jié)

金線蓮不同部位的莖間對(duì)不定芽的誘導(dǎo)結(jié)果存在明顯的差異，以不含頂芽和長(zhǎng)根的中間段莖節(jié)為好，不定芽增殖率達(dá)4倍以上。

采用金線蓮中間莖節(jié)作外植體誘導(dǎo)不定芽萌發(fā)時(shí)，適宜的培養(yǎng)基為MS或B5＋6-BA 4.0 mg/L＋NAA 0.5 mg/L～1.0 mg/L，蔗糖濃度為2.5%。

適宜的壯苗培養(yǎng)基為1/2MS＋NAA 3.0 mg/L＋6-BA 0.5 mg/L＋香蕉提取物20%（或椰子汁20%），蔗糖濃度為3.0%。3.4 試管苗在充分混勻的1份菜園土＋2份粗砂（2～3 mm）＋1份木屑，或1份菜園土＋粗砂1份＋木屑2份的基質(zhì)中生長(zhǎng)良好，3個(gè)月后成活率達(dá)100%。

【參考文獻(xiàn)】

［1］ 鐘岑生.金線蓮的藥用價(jià)值與開(kāi)發(fā)［J］.廣西農(nóng)業(yè)科學(xué),1997,34(2):102.［2］ 許文江,陳 裕，林坤瑞.藥用野生金線蓮植物資源的研究［J］.福建熱作科技, 2000,25(4):9.［3］ 吳殿星，胡繁榮.植物組織培養(yǎng)［M］.上海:上海交通大學(xué)出版社,2004:20.［4］ 陳自力.花葉開(kāi)唇蘭組織培養(yǎng)快速繁殖的研究［J］.林業(yè)勘察設(shè)計(jì), 2003,23(2):46.［5］ 高 燕,白燕冰,趙云翔.金線蓮組織培養(yǎng)幾種培養(yǎng)基的篩選［J］.熱帶農(nóng)業(yè)科技, 2004,27(3):12.

第三篇：組培與快繁實(shí)習(xí)報(bào)告——西北農(nóng)林科技大學(xué)生物技術(shù)

一、時(shí)間：2008年10月14日——2008年10月15日

二、地點(diǎn)：陜西省眉縣湯峪太白山森林公園北10公里（西寶高速太白山站南3公里處）

三、基地指導(dǎo)老師：

四、學(xué)校指導(dǎo)老師：

五、西部蘭花生態(tài)園實(shí)習(xí)基地簡(jiǎn)介 “西部蘭花”生態(tài)園位于陜西省眉縣境內(nèi)，是在陜西省苗木繁育中心的基礎(chǔ)上建成的，總面積4080畝?，F(xiàn)擁有水上娛樂(lè)垂釣園、高科奇觀園、珍稀樹(shù)種觀賞園、百果采摘園、花卉盆景園、疏林休閑娛樂(lè)園和科普教育基地7個(gè)園區(qū)39個(gè)觀光景點(diǎn)。擁有各類(lèi)自動(dòng)控溫40000余平方米，國(guó)內(nèi)一流植物組培樓2300平方米，科研培訓(xùn)樓3000平方米，年可“克隆”植物6000萬(wàn)株；育苗生產(chǎn)線1500平方米，氣調(diào)冷庫(kù)2000平方米，水上垂釣娛樂(lè)園350000平方米；目前已引進(jìn)繁育世界各國(guó)名優(yōu)樹(shù)種420多種2100萬(wàn)株；蝴蝶蘭、大花蕙蘭、紅掌等世界名貴花卉160余種在園內(nèi)安家落戶。580余種世界名優(yōu)花卉苗木品種使園內(nèi)四季常青、三季有花；草地水塘與亭臺(tái)軒榭等建筑小品相映成趣，將生態(tài)園裝扮得清新秀麗、質(zhì)樸自然，被譽(yù)為中國(guó)西部農(nóng)業(yè)的綠色明珠。中心為陜西省唯一的“全國(guó)花卉生產(chǎn)示范基地”和“全國(guó)特色種苗基地”，是“全國(guó)無(wú)檢疫對(duì)象苗圃”、“全國(guó)農(nóng)業(yè)生態(tài)旅游示范點(diǎn)”、“國(guó)家級(jí)引智示范推廣基地”和園林綠化二級(jí)資質(zhì)企業(yè)。是集觀光旅游、科普教育、苗木花卉生產(chǎn)示范為一體的高科技林業(yè)生態(tài)園。

六、實(shí)習(xí)內(nèi)容

（一）1.時(shí)間：2008年10月14日上午

2.地點(diǎn)：西部蘭花生態(tài)園1號(hào)、2號(hào)、3號(hào)、4號(hào)、5號(hào)溫室3.基地指導(dǎo)老師：

4.學(xué)校指導(dǎo)老師：5.實(shí)習(xí)內(nèi)容1）1號(hào)溫室2）2號(hào)、3號(hào)溫室2號(hào)、3號(hào)溫室為紅掌引進(jìn)及工廠化生產(chǎn)溫室，位于工廠化育苗分區(qū)中部，為V96文絡(luò)型8連棟溫室，面積6500m2，內(nèi)有降溫、加溫、外遮陽(yáng)、微霧環(huán)繞風(fēng)機(jī)、滴灌、施肥、水處理系統(tǒng)，配有移動(dòng)式苗床，計(jì)算機(jī)控制。主要用于名貴花卉生產(chǎn)。紅掌的管理：紅掌性喜溫暖、潮濕和半陰的環(huán)境，喜陽(yáng)光而忌陽(yáng)光直射，不耐寒，喜肥而忌鹽堿。澆水是pH值控制在5.2至6.1之間最好?；ㄅc葉數(shù)量的差別最重要的因素是光照。溫度紅掌生長(zhǎng)最適宜溫度為20℃至28℃，最低不低于15℃，最高不超過(guò)30℃。在高溫季節(jié)，通過(guò)開(kāi)啟濕簾及通風(fēng)設(shè)備來(lái)降低室內(nèi)溫度。濕度紅掌工廠化生產(chǎn)，關(guān)鍵是保持相對(duì)高的空氣濕度，一定的濕度有利于紅掌生長(zhǎng)。

3）4號(hào)、5號(hào)溫室4、5號(hào)溫室，總面積4500平方米，圓拱形雙層充氣膜連棟溫室，覆蓋材料為以色列進(jìn)口薄膜，整個(gè)溫室有六大系統(tǒng)組成：溫室主體，外遮陽(yáng)系統(tǒng)，溫簾風(fēng)扇降溫水處理系統(tǒng)，供暖系統(tǒng)，補(bǔ)光系統(tǒng)。該溫室主要用于生產(chǎn)紅掌、鳳梨等高檔花卉。

4）進(jìn)入溫室前消毒操作規(guī)范每次進(jìn)入溫室前，需將腳在門(mén)口消毒墊上來(lái)回擦拭數(shù)次，將手在消毒盆中清洗干凈；不要用手隨意觸摸在溫室內(nèi)用手觸摸花株及設(shè)施，以防花株感染病菌；不要把雜物丟棄在溫室內(nèi)；不要在溫室內(nèi)吃東西；不要把其他植物及其他外來(lái)物品帶進(jìn)溫室。5）參觀花卉的生產(chǎn)參觀的主要花卉有：粉冠軍、白冠軍、鳳梨、紅掌、西部神龜、維它、改良紅皇后、茱萸、紫背、白玉子等花卉。了解其生產(chǎn)條件，包括消毒、控溫、施肥、澆水要求。6）實(shí)習(xí)操作內(nèi)容：紅掌的移苗，修剪，搬運(yùn)原產(chǎn)于南美洲熱帶雨林潮濕、半陰的溝谷地帶，通過(guò)引種改良和用光、溫、水調(diào)節(jié)系統(tǒng)的大棚栽培，現(xiàn)在歐洲、亞洲、非洲皆有廣泛栽培。植物界 被子植物門(mén) 單子葉植物綱 天南星科Araceae，花燭屬Anthurium。生長(zhǎng)習(xí)性：紅掌為多年生常綠草本花卉。性喜溫?zé)岫酀穸峙潘己玫沫h(huán)境，怕干旱和強(qiáng)光暴曬。紅掌盆栽材料常見(jiàn)的有四種：組培苗、切株、穴盤(pán)苗和盆栽苗。

主要內(nèi)容：將一批已經(jīng)開(kāi)花的紅掌，從移苗床上移到另一個(gè)已經(jīng)消毒的移苗床上；將一批較小的紅掌根據(jù)其生長(zhǎng)進(jìn)行篩選分成不同的批次。消毒：配置一定濃度的高錳酸鉀消毒液，噴灑到空苗床上。注意不要噴灑到臨近的紅掌的葉面上。移苗：用盆搬移紅掌，搬移時(shí)要小心，注意不要傷害到紅掌的花、葉。篩選：根據(jù)紅掌的長(zhǎng)勢(shì)，將其長(zhǎng)勢(shì)相同移到一個(gè)移動(dòng)苗床上，以便于管理。

鳳梨習(xí)性：喜溫暖濕潤(rùn)和陽(yáng)光充足的環(huán)境。喜疏松、透氣性佳、排水良好、微酸性土壤。栽培管理：夏季適溫為25～30℃，冬季適溫為15～18℃，最低溫度不能低于12℃。氣溫高時(shí)，可給植株噴水。柔和的陽(yáng)光使葉片更加美麗。生長(zhǎng)季節(jié)可大量澆水，同時(shí)在蓮座葉筒中灌些水。每次澆水后，待盆土較干時(shí)再澆第二次，不可過(guò)量。冬天盆土應(yīng)稍干一些。5～9月生長(zhǎng)旺盛期，每?jī)芍苁┮淮畏?。除此之外，還應(yīng)增施磷鉀肥兩次。

小組工作：為紅掌換盆，并添加培養(yǎng)基質(zhì)（肥料土壤）

（二）科研部實(shí)習(xí)科研部主要是用于苗木的引種、實(shí)驗(yàn)、推廣?，F(xiàn)建有櫻桃園、核桃園、杏園、李子等示范園。

1.時(shí)間：2008年10月27日上午 2.地點(diǎn)：西部蘭花生態(tài)園1號(hào)、2號(hào)、3號(hào)、4號(hào)、5號(hào)溫室3.基地指導(dǎo)老師：

4.學(xué)校指導(dǎo)老師：

5.實(shí)習(xí)內(nèi)容（1）櫻桃園實(shí)習(xí)

該園種有7個(gè)品種的櫻桃，主要用于對(duì)引種的櫻桃的生長(zhǎng)、結(jié)實(shí)等性狀的記錄，以便于進(jìn)行推廣。為提高光合利用率，合理利用空間，在櫻桃園中套種了植株小、快速生長(zhǎng)期與櫻桃不能競(jìng)爭(zhēng)、根系不發(fā)達(dá)、有經(jīng)濟(jì)性作用的植物，如該園種植的是白菜、蘿卜等蔬菜。為防止地表水分蒸發(fā)，在櫻桃樹(shù)附近種植了三葉草，一方面用于固氮，另一方面可以作為綠肥使用。

櫻桃園中有引種三年的植株，還有引種7年的植株。櫻桃樹(shù)三年長(zhǎng)成，第四年開(kāi)始結(jié)果。樹(shù)形的管理要求是：主干分型，水平面擺布。在防治病蟲(chóng)害方面，主要采取噴藥、樹(shù)干涂白。春季可以采取摘取蟲(chóng)害的葉片，防治蟲(chóng)卵。在蚜蟲(chóng)發(fā)生的主要時(shí)期噴灑農(nóng)藥，進(jìn)行化學(xué)防治預(yù)防。

2、修剪a.修剪應(yīng)注意事宜 櫻桃的枝分為發(fā)育枝和結(jié)果枝兩類(lèi)，幼樹(shù)上發(fā)育枝較多，其前端葉芽延伸生長(zhǎng)，擴(kuò)大樹(shù)冠，下部腋芽抽生結(jié)果枝。進(jìn)入結(jié)果期后，大部分一年生枝頂芽為葉芽外，腋芽多為花芽，稱(chēng)為結(jié)果枝。結(jié)果枝依長(zhǎng)度分為長(zhǎng)果枝（15～20厘米）、中果枝（5～15厘米）、短果枝（5厘米左右）、花簇狀果枝（1～2厘米）。從結(jié)果能力看，長(zhǎng)果枝座果力較差，一般在40%左右；中果枝結(jié)果能力因品種而不同；短果枝座果率高，果實(shí)品質(zhì)亦佳；花簇狀果枝是盛果期旺樹(shù)上的主要結(jié)果枝，座果率能達(dá)80%左右。果實(shí)品質(zhì)最佳，而且壽命長(zhǎng)，可連續(xù)結(jié)果10～20年。結(jié)果枝和花簇狀果枝是產(chǎn)量形成的基礎(chǔ)。中國(guó)櫻桃、酸櫻桃在初果期，長(zhǎng)、中果枝的比例大，而在盛果期則短果枝和花簇狀果枝為主。

c.結(jié)果樹(shù)的修剪 常在采果后進(jìn)行夏季修剪。采用疏剪去除過(guò)密過(guò)強(qiáng)、擾亂樹(shù)冠的多年生大枝，進(jìn)行樹(shù)冠結(jié)構(gòu)調(diào)整，促進(jìn)花芽形成。在疏除大枝時(shí)，注意傷口要小，要平，以利盡快愈和。疏除一年生枝時(shí)，可先在其基部腋花芽以上剪截，待結(jié)果光禿后，再疏除。冬季修剪時(shí)，應(yīng)注意對(duì)骨干枝先端和短果枝的2～3年生枝段進(jìn)行適當(dāng)回縮，以刺激營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)和新果枝的不斷形成，防止結(jié)果部位外移和樹(shù)冠內(nèi)部光禿。

d.衰老樹(shù)的修剪 主要任務(wù)是及時(shí)更新復(fù)壯、利用生長(zhǎng)勢(shì)強(qiáng)的徒長(zhǎng)枝來(lái)形成新的樹(shù)冠。對(duì)骨干枝先衰弱而無(wú)結(jié)果能力的，要及時(shí)回縮。利用隱芽回縮更新時(shí)，中國(guó)櫻桃的隱芽壽命約5～10年。為了回縮有枝更新，回縮處最好有生長(zhǎng)較正常的小分枝，這對(duì)樹(shù)體損傷較小?；乜s修剪后發(fā)出的徒長(zhǎng)枝，選擇方向、位置、長(zhǎng)勢(shì)適當(dāng)、向外開(kāi)展的枝來(lái)培養(yǎng)新主枝、側(cè)枝。過(guò)多的應(yīng)疏除，余者短截，促發(fā)分枝，然后緩放，使其形成結(jié)果枝組。大枝更新時(shí)，亦應(yīng)在采果后進(jìn)行，以免引起傷口流膠 病蟲(chóng)防治 危害櫻桃樹(shù)的主要病蟲(chóng)害有桑白蚧、刺蛾、桃紅頸天牛、蘋(píng)果透翅蛾、金緣吉丁蟲(chóng)、金龜子、梨小食心蟲(chóng)和炭疽病、櫻桃葉斑病、細(xì)菌性穿孔病、流膠病、根頸腐爛病等，應(yīng)采取綜合措施加以防治。在冬季修剪時(shí)，剪除并燒毀病蟲(chóng)枝，同時(shí)在落葉期噴布波美5度石硫合劑一次；在春梢葉片停長(zhǎng)前，噴40%樂(lè)果1200倍液加70%甲基托布津800倍液一次；7～8月噴50%馬拉松乳劑1000倍液加65%代森鋅400～500倍液一次

2）核桃園實(shí)習(xí)核桃園基因庫(kù)，占地面積十畝，搜集保存優(yōu)良核桃品種資源的基因庫(kù)，可為試驗(yàn)示范、推廣、是優(yōu)良種質(zhì)資源，現(xiàn)有遼、遼

3、香菱、林

1、林

2、商洛1號(hào)、商洛2號(hào)、商洛3號(hào)、綠波、魯光、靈石8號(hào)、晉龍、美國(guó)黑核桃等26個(gè)品種。該核桃園用于選育新品種、優(yōu)良新品種，有目的的做雜交。

嫁接 嫁接在3月下旬至4月上旬進(jìn)行。首先采集接穗，3月中旬在芽即將萌動(dòng)時(shí)，采集生長(zhǎng)健壯、無(wú)病蟲(chóng)害的1年生枝作接穗，采后分品種進(jìn)行濕沙貯藏，4月上旬待核桃砧木芽萌動(dòng)開(kāi)始嫁接。砧木要求粗度在1．5cm左右，距地面l0cm處進(jìn)行嫁接。核桃嫁接時(shí)有傷流，不易成活，嫁接前12小時(shí)內(nèi)必須在根際部刻傷至木質(zhì)部“放水”，再行劈接或插皮接，接后用塑料條綁緊傷口，接穗上端用漆涂抹防止水分蒸發(fā)。成活后及時(shí)除萌松綁，松綁時(shí)間以新稍生長(zhǎng)20cm以上時(shí)進(jìn)行為宜。待嫁接苗長(zhǎng)至40cm左右時(shí)，用小竹桿或木棍固定，以防風(fēng)折。效率最高、成活率最高的嫁接方法為“方塊芽接”。嫁接時(shí)間華北地區(qū)5月20日至6月20日；選取接穗，用嫁接刀切割成長(zhǎng)3~4公分、寬0.8公分左右的方塊，掰下，然后在地面以上30公分左右當(dāng)年生莖切除與芽片相當(dāng)表皮，并向下切割出放水口；將芽片放入切口，盡量保持下部和一側(cè)緊密結(jié)合；用薄膜嚴(yán)密包扎，露出芽；接口以上留3片復(fù)葉剪砧；以后隨時(shí)抹除萌芽，促使嫁接芽萌發(fā)；嫁接芽15公分時(shí)，去掉幫條。成活率一般達(dá)到80%以上。

3）李子園實(shí)習(xí)實(shí)習(xí)項(xiàng)目：李子的修剪

技術(shù)要領(lǐng)：幼樹(shù)及初結(jié)果樹(shù)的冬季修剪：此期修剪應(yīng)兼顧整形和結(jié)果兩個(gè)方面，對(duì)主、側(cè)枝延長(zhǎng)枝要輕剪長(zhǎng)放，一般留全枝長(zhǎng)的2/3進(jìn)行短截。疏除密擠枝、多杈枝、重疊枝和強(qiáng)旺枝，并控制競(jìng)爭(zhēng)枝、直立旺枝的生長(zhǎng)。對(duì)生長(zhǎng)中庸、角度比較開(kāi)張的發(fā)育枝應(yīng)緩放，促其萌發(fā)中短枝，增加結(jié)果枝的數(shù)量，成花或結(jié)果后及時(shí)回縮培養(yǎng)成結(jié)果枝組。中、短枝角度大，成花容易，要盡量予以保留，以利結(jié)果。對(duì)生長(zhǎng)較弱的幼樹(shù)宜適當(dāng)短截，疏除過(guò)密、細(xì)弱枝，多保留健壯枝，拉平直立旺枝作為輔養(yǎng)枝，以促發(fā)粗壯的中、短果枝。

盛果期樹(shù)的冬季修剪：主要任務(wù)是調(diào)整生長(zhǎng)和結(jié)果的關(guān)系，維持樹(shù)勢(shì)，延長(zhǎng)盛果期結(jié)果的年限。修剪時(shí)可根據(jù)枝條長(zhǎng)勢(shì)、樹(shù)冠各部位的空間情況，適當(dāng)疏密、截弱，以保持穩(wěn)定的結(jié)果部位和生長(zhǎng)勢(shì)。對(duì)各級(jí)延長(zhǎng)枝，一般進(jìn)行中度短截(剪去當(dāng)年生枝的1/3～2/3)，使其繼續(xù)抽生健壯新梢。對(duì)衰弱的主枝、側(cè)枝、多年生輔養(yǎng)枝、結(jié)果枝組、下垂枝，在有強(qiáng)壯枝的部位進(jìn)行回縮更新或抬高角度，使其恢復(fù)生長(zhǎng)勢(shì)。對(duì)樹(shù)冠下部及內(nèi)膛枝，要注意及時(shí)更新復(fù)壯，使其不斷產(chǎn)生新的健壯結(jié)果枝。樹(shù)冠上部和外圍的過(guò)密枝、強(qiáng)旺枝，要進(jìn)行回縮或疏除，以改善內(nèi)膛光照。杏樹(shù)成枝力弱，對(duì)各部位的結(jié)果枝組、長(zhǎng)果枝和長(zhǎng)勢(shì)中庸的發(fā)育枝，只要不過(guò)密，一般不要疏除，可短截促發(fā)少量長(zhǎng)枝，使中下部抽生中短枝交替結(jié)果。

衰老期樹(shù)的冬季修剪：衰老期杏樹(shù)各延長(zhǎng)枝生長(zhǎng)變?nèi)?，新梢短，骨干枝開(kāi)始下垂，樹(shù)冠內(nèi)部開(kāi)始光禿，幾乎只在樹(shù)冠表面結(jié)果，產(chǎn)量降低。修剪的主要任務(wù)是更新骨干枝和枝組，增強(qiáng)樹(shù)勢(shì)，延長(zhǎng)經(jīng)濟(jì)結(jié)果年限。要利用中下部角度小、生長(zhǎng)健壯的背上枝換頭。或在比較直立的枝段回縮，促使隱芽萌發(fā)更新。對(duì)位置適當(dāng)?shù)耐介L(zhǎng)枝，要利用其培養(yǎng)為骨干枝和結(jié)果枝組。對(duì)結(jié)果枝組和結(jié)果枝，本著去弱留強(qiáng)的原則，選留壯枝、壯芽進(jìn)行更新修剪。樹(shù)勢(shì)極度衰弱、更新難以奏效的，要加強(qiáng)肥水管理，對(duì)主側(cè)枝及大枝組在10～15年生部位進(jìn)行全樹(shù)大更新，一次完成，當(dāng)年可萌發(fā)大量新梢，通過(guò)夏季抹芽、摘心和冬季整形修剪，第2年即可開(kāi)花結(jié)果，恢復(fù)一定的產(chǎn)量。

（三）生產(chǎn)實(shí)習(xí)1.時(shí)間：2008年10月27日上午2.地點(diǎn)：西部蘭花生態(tài)園1號(hào)、2號(hào)、3號(hào)、4號(hào)、5號(hào)溫室3.基地指導(dǎo)老師：4.學(xué)校指導(dǎo)老師：5.實(shí)習(xí)內(nèi)容

1）樹(shù)的造型主要用于樹(shù)的造型的是：橡樹(shù)、黃金槐、大荔花、紅玉蘭、接骨木。

2）紅葉李的扦插 技術(shù)要領(lǐng)： 苗圃地選擇和整地苗圃地應(yīng)選擇排灌和交通運(yùn)輸方便的地方，土層要求為深厚、肥沃、疏松的沙壤土。整地前，每畝地均勻撒施1至1．5噸腐熟農(nóng)家肥，并用50％多菌靈1500克撒于土中，進(jìn)行土壤殺菌消毒；再用4000克50％鋅硫磷顆粒劑撒施殺滅地下害蟲(chóng)。然后深耕、細(xì)耙、整平土地，清除雜草廢農(nóng)膜等雜物，做畦。畦長(zhǎng)根據(jù)圃地而定，畦寬1米；畦與畦之間留溝，溝寬0．3米，深0．2米。做好后稍加鎮(zhèn)壓，將畦面中耕耙平，準(zhǔn)備扦插。

提高紫葉李扦插繁殖成活率。一定要在小雪節(jié)氣前后挑選插條，插條長(zhǎng)度應(yīng)在18厘米以內(nèi)，頂芽上保留2厘米的保護(hù)層。之后于清水中泡12小時(shí)，用沙土混合，在深度不超過(guò)70厘米的地窖中儲(chǔ)藏。儲(chǔ)藏時(shí)注意讓插條下部朝上，防止水分、養(yǎng)分流失。使用生根劑會(huì)導(dǎo)致插條中毒，成活率大幅降低，一般在20％以下。

扦插時(shí)間最好在驚蟄前后，早了生長(zhǎng)慢，成活率低；晚了插條高度不一致。為了保證溫度，苗床上要鋪一層地膜。扦插前，先用手指或木棍把薄膜捅破，以防直接扦插脫落的薄膜包裹插條底部。扦插時(shí)，插條要垂直苗床插入，不能傾斜。扦插之后澆第一遍水，然后注意培土，盡量保證所有插條第一個(gè)芽都剛剛露出苗床。春季地下害蟲(chóng)非常多，可用3911防治，每畝地用藥1至2公斤，兌水后隨第二遍水澆施。

6.參觀苗木花卉溫室繁殖示范區(qū)

該區(qū)位于推廣區(qū)中部，占地面積12畝。主要設(shè)施有：三連棟噴霧大棚6座，3240平方米，鋼架保溫育苗溫室一座，700平方米。日光溫室4座，1060平方米。利用三種不同形式的溫室設(shè)施，采用林業(yè)科技手段，對(duì)中心培育、引進(jìn)的觀花、觀葉、觀果的珍貴種苗進(jìn)行繁殖，示范栽培。

（四）組培部實(shí)習(xí)1.參觀組培部的設(shè)置

配藥室；灌裝室；中轉(zhuǎn)儲(chǔ)藏室；接種室；培養(yǎng)室；蝴蝶蘭培養(yǎng)室。

2.蝴蝶蘭的接種、培養(yǎng) 1）超凈工作臺(tái)的紫外消毒20min2）超凈工作臺(tái)用酒精噴霧消毒，擦拭。擦拭從里往外，從上往下。超凈工作臺(tái)側(cè)壁用從里往外擦拭。

3）剪刀、鑷子