第一篇:實(shí)驗(yàn)六ABO血型鑒定、血涂片的制作與血細(xì)胞顯微觀察(精)
實(shí)驗(yàn)六:ABO血型鑒定、血涂片的制作與血細(xì)胞顯微觀察
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?了解 ABO 和 Rh 血型分類系統(tǒng)的背景知識(shí)和遺傳學(xué)原理 2.掌握微量采血及血涂片的制作方法
3.學(xué)習(xí)使用光學(xué)顯微鏡觀察和區(qū)分紅細(xì)胞與各種白細(xì)胞
二、實(shí)驗(yàn)材料
1.實(shí)驗(yàn)材料 :醫(yī)用采血針、酒精棉球、載玻片、血推片、消毒牙簽 2.實(shí)驗(yàn)試劑: 瑞氏染液、抗 B 血清、抗 A 血清、生理鹽水、蒸餾水 3.儀器設(shè)備: Motic 光學(xué)顯微鏡
三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和方法 ABO 血型鑒定
1.1 取一塊清潔玻片,用記號(hào)筆標(biāo)上記號(hào)。
1.2 用小滴管吸 A 型標(biāo)準(zhǔn)血清(抗 B)一滴加入左側(cè),用另一小滴管吸 B 型標(biāo)準(zhǔn)血清(抗 A)一滴加入右側(cè)
1.3 以穿刺法自左手無(wú)名指指尖取血,在玻片的每側(cè)各放入一小滴血,用牙簽攪拌,使每側(cè)抗血清和血液混和。每邊用一支牙簽,切勿混用。
1.4 靜置室溫下 10—15min 后,觀察有無(wú)凝集現(xiàn)象,并據(jù)此判斷血型。2 血涂片的制作及血細(xì)胞觀察
2.1 取末捎血一滴置于玻片的一端 , 左手持載玻片 , 右手以邊緣平滑的推片的一端從血滴前方后移接觸血滴,血滴即沿推片散開。然后便推片與載片夾角保持 30-45 度平穩(wěn)地向前移動(dòng) , 載片上保留下一薄層血膜
2.2 血涂片制成后可手持玻片在空氣中揮動(dòng) , 使血膜迅速干燥 , 以免血細(xì)胞皺縮.2.3 用蠟筆在血膜兩側(cè)劃線 , 以防染液溢出 , 然后將血膜平放在染色架上.加瑞氏
染液 2-3 滴 , 使覆蓋整個(gè)血膜 , 固定 0.5-1.0 分鐘.滴加等量或稍多的新鮮蒸餾水 , 與染料混勻染色 5-10 分鐘.2.4 用清水沖去染液 , 待自然干燥后或用吸水紙吸干 , 即可置血涂片于顯微鏡下進(jìn)行鏡檢。
2.5 白細(xì)胞分類計(jì)數(shù): 選擇涂片的體尾交界處染色良好的區(qū)域 , 在油鏡下計(jì)數(shù) 100 個(gè)紅細(xì)胞 , 按其形態(tài)特征進(jìn)行分類計(jì)數(shù) , 求出各類細(xì)胞所占比值。
注:
1.瑞氏染液 : 瑞氏染料 1g 加甲醇(AR)600ML。將瑞氏染料放在清潔干燥乳缽中 , 加少量甲醇 , 充分研磨使染料溶解.將已完全溶解的部分倒入棕色試劑瓶中 , 未溶解部分再加少量甲醇研磨 , 直至染料完全溶解于甲醇為止.新配制的染料偏堿 , 須在室溫和 37℃ 下一定時(shí)間待染料成熟 , 主要美藍(lán)逐漸增多為天青 B 后才能使用.貯存時(shí)間越久染色效果越好 , 因此 ,Deamgilliland 等采用吸光度比值(rA)作為瑞氏染料的質(zhì)量規(guī)格.rA 測(cè)定方法如下 : 取瑞氏染液 15-25ul(視染液濃度而定)加甲醇 10ml 稀釋 , 混勻后以甲醇為空白管分別以波長(zhǎng) 650nm,525nm 比色 ,rA=A650/A525。因?yàn)槊浪{(lán)吸收峰為波長(zhǎng) 650nm, 伊紅吸收峰波長(zhǎng)為 525nm, 天青 B 吸收峰也為 650nm, 但吸光度 A 約為美藍(lán)的一半.所以新配制染料的 RA 接近2, 隨著美藍(lán)逐漸氧化為天青 B,RA 也相應(yīng)下降 ,RA 下降達(dá) 1.3±0.1 即可使用.瑞氏染料在貯存過程中必須塞嚴(yán) , 以防甲醇揮發(fā)和氧化為甲酸.有人主張配方中加入 30ml 甘油 , 防止甲酸揮發(fā) , 并可使細(xì)胞染色清晰.甲醇必須純凈 , 如甲醇中丙酮含量過多 , 染色偏酸 , 使細(xì)胞著色不良.2.磷酸鹽緩沖液(PH6.4-6.8):磷酸二氫鉀 0.3g 加磷酸氫二鈉 0.2g 再加蒸餾水至 1000ml, 配制成磷酸鹽緩沖液調(diào)整 PH, 如無(wú)緩沖液可用新鮮蒸餾水代替.3.白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)正常參考值 細(xì)胞類別 成人
桿狀核 0.01-0.05 分葉核 0.50-0.70
嗜酸性粒細(xì)胞 0.005-0.05 嗜堿性粒細(xì)胞 0-0.01 淋巴細(xì)胞 0.20-0.40 單核細(xì)胞 0.03-0.08
四、注意事項(xiàng)
1)玻片的清洗:新玻片常有游離堿質(zhì) , 因此應(yīng)用清洗液或 10% 鹽酸浸泡 24 小時(shí) , 然后再?gòu)氐浊逑?。用過的玻片可放入適量肥皂水或合成洗滌劑的清水中煮沸 20 分鐘 , 再用熱水將肥皂和血膜洗去 , 用自來(lái)水反復(fù)沖洗 , 必要時(shí)再置 95% 乙醇中浸泡 1 小時(shí) , 然后擦干或烤干備用。使用玻片時(shí)只能手持玻片邊緣 , 切勿觸及玻片表面;, 以保持玻片清潔 , 干燥 , 中性、無(wú)油膩。
2)細(xì)胞染色對(duì)氫離子濃度十分敏感 , 在染色過程中玻片必須化學(xué)清潔 , 配制瑞氏染液必須用優(yōu)質(zhì)甲醇 , 稀釋染液必須用緩沖液 , 沖洗用水應(yīng)近中性 , 否則各種細(xì)胞染色反應(yīng)異常 , 致使細(xì)胞的識(shí)別困難 , 甚至造成錯(cuò)誤。
3)一張良好的血片 , 要求厚薄適宜 , 頭體尾分明 , 分布均勻 , 邊緣整齊 , 兩側(cè)留有空隙。血片制好后最好立即固定染色 , 以免細(xì)胞溶解和發(fā)生退行性變。
4)血膜未干透 , 細(xì)胞尚未牢固附在玻片上 , 在染色過程中容易脫落 , 因此血膜必需充分干燥.5)染色時(shí)間與染液濃度 , 室溫高低 , 細(xì)胞多少有關(guān).染液越淡 , 室溫越低 , 細(xì)胞越多 , 所需染色時(shí)間越長(zhǎng)或應(yīng)適當(dāng)增加染液量 , 因此染色時(shí)間應(yīng)視具體情況而定.特別是更換新染料時(shí)必須經(jīng)試染 , 摸索最佳染色條件.6)染液不可過少 , 以防蒸發(fā)干燥染料沉著于血片上難沖洗干凈.7)沖洗時(shí)應(yīng)用流水將染液沖去.不能先倒掉染液 , 以免染料沉著于血片上.8)染色過深可用甲醇或酒精適當(dāng)脫色 , 最好不復(fù)染 , 必須復(fù)染時(shí) , 可將染液先稀釋好再?gòu)?fù)染.9)染色時(shí)應(yīng)注意保護(hù)血膜尾部細(xì)胞 , 不能劃掉.因?yàn)轶w積較大細(xì)胞常在此處出現(xiàn).染色結(jié)果 : 在正常情況下血膜外觀為粉紅色 , 在顯微鏡下紅細(xì)胞呈肉紅色;白細(xì)胞胞漿能顯示各種細(xì)胞的特有色彩 , 細(xì)胞核染紫紅色 , 染色質(zhì)清楚 , 粗細(xì)松緊可辨。染色結(jié)果偏酸 , 則紅細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞顆粒偏紅 , 白細(xì)胞核呈淺藍(lán)色或不著色;染色結(jié)果偏堿 , 則所有細(xì)胞染成灰藍(lán)色 , 顆粒深暗,嗜酸性顆??扇境砂岛稚?, 甚至紫黑色或藍(lán)色。嗜中性顆粒偏粗 , 偏堿(紫黑色).血片原處呈綠色.五、思考題
(1)如何區(qū)別血液的凝集和凝固?其機(jī)理有何差別?
(2)根據(jù)你的血型,判斷你能接受何種血型并且能夠給何種血型供血?
(3)O 型血人又被稱為“萬(wàn)能供血者”,試根據(jù) ABO 血型分型作出你對(duì)這一說(shuō)法的理解(4)試根據(jù)父母的血型,寫出后代的可能血型:
第二篇:血涂片制作和白細(xì)胞分類/ABO血型鑒定
姓名:
學(xué)號(hào):
實(shí)驗(yàn)報(bào)告
說(shuō)明:
1、實(shí)驗(yàn)報(bào)告務(wù)必獨(dú)完成,對(duì)抄襲者將按不及格處理;
2、實(shí)驗(yàn)報(bào)告的格式請(qǐng)按下面的各項(xiàng)要求來(lái)填寫,不要改動(dòng);
3、正文字體統(tǒng)一用“仿宋-GB2312”、,小四號(hào),單倍行距,小標(biāo)題加黑;
4、下面的“替換這里”字體底紋在完成后去除;
5、實(shí)驗(yàn)報(bào)告按時(shí)上傳,上傳時(shí)文件名統(tǒng)一按照網(wǎng)上說(shuō)明來(lái)命名; 實(shí)驗(yàn)名稱:血涂片制作和白細(xì)胞分類/ABO血型鑒定
同組姓名: 實(shí)驗(yàn)日期:4.13 室 溫: 氣 壓: 成 績(jī): 教 師:
一、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
(一)觀察到的紅細(xì)胞、白細(xì)胞
(1)單核細(xì)胞
(2)淋巴細(xì)胞
(3)嗜中性細(xì)胞
(4)嗜酸性細(xì)胞
(二)ABO血型鑒定結(jié)果
將本人血液加入到抗A凝集素和抗B凝集素中后均不發(fā)生凝集反應(yīng),加入到抗B凝集素中后顏色為血液原來(lái)的鮮紅顏色;加到抗A凝集素后顏色變深但無(wú)凝血反應(yīng)。
二、分析與討論
(1)紅細(xì)胞、白細(xì)胞的觀察
血液由血漿和血細(xì)胞組成,而血細(xì)胞主要包括紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板。其中紅細(xì)胞數(shù)量最多,約占全血體積的45%,成熟紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核,呈中央凹的圓盤狀。在油鏡下觀察紅細(xì)胞,首先在數(shù)量上它占絕對(duì)優(yōu)勢(shì),分布均勻,其次呈紅色的圓形或橢球形。圖片中數(shù)量最多的紅色圓球形細(xì)胞便是紅細(xì)胞。而白細(xì)胞和血小板所占體積不足1%。對(duì)白細(xì)胞進(jìn)行瑞氏染色后根據(jù)細(xì)胞的染色特征,可將其分為兩大類:1.顆粒白細(xì)胞:嗜中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞;2.無(wú)顆粒細(xì)胞:淋巴細(xì)胞核單核細(xì)胞。其中嗜中性粒細(xì)胞細(xì)胞大小約10-12μm,核多分葉2-5葉或不分葉為桿狀,顆粒細(xì)小,紫紅色,約占白細(xì)胞的50%-70%;嗜酸性粒細(xì)胞細(xì)胞大小約10-15μm,核常分為2葉,顆粒粗大,分布均勻,桔紅色,約占白細(xì)胞的0.5%-3%;嗜堿性粒細(xì)胞10-12μm核常呈S形(十分肥大)或不規(guī)則顆粒大小不等,分布不勻, 紫藍(lán)色,約占白細(xì)胞的 0%-1%,數(shù)量極少,因此找到它需要運(yùn)氣、知識(shí)和眼力;淋巴細(xì)胞分大中小6-12μm以6-8μm居多,核圓或隨圓形,很少,天藍(lán)色,約占白細(xì)胞的20%-30%;單核細(xì)胞染色質(zhì)致密,深紫色,大小約14-20μm,腎形或馬蹄形,胞質(zhì)多常染成淺灰藍(lán)色,染色質(zhì)疏松,著色較淺約占白細(xì)胞的3%-8%。白細(xì)胞的數(shù)量隨不同的生理狀態(tài)會(huì)有較大的波動(dòng),在實(shí)驗(yàn)觀察中,以嗜中性粒細(xì)胞數(shù)最多,其次為淋巴細(xì)胞,單核細(xì)胞和嗜酸性細(xì)胞均只發(fā)現(xiàn)一個(gè)而嗜堿性細(xì)胞沒發(fā)現(xiàn)。在觀察白細(xì)胞類型時(shí),首先觀察是否存在顆粒,若無(wú)顆粒主要根據(jù)核質(zhì)比,大的為淋巴細(xì)胞和核的形狀馬蹄型為單核細(xì)胞;若有顆粒則根據(jù)核的分葉數(shù)、形狀;顆粒大小、顏色、以及顏色深淺綜合來(lái)判斷嗜中性粒細(xì)胞(核分多葉、細(xì)小的紫色顆粒、顏色深)、嗜酸性粒細(xì)胞(核分兩葉、顆粒明顯較嗜中性粒細(xì)胞粗大且顆粒呈桔紅色,顯微鏡下看上去亮晶晶的)和嗜堿性粒細(xì)胞(沒觀察到)。
(2)ABO血型鑒定
人類紅細(xì)胞膜上存在不同的特異糖蛋白抗原—凝集原,也存在于其它血細(xì)胞和一般組織細(xì)胞上,而血漿中存在著不與自身凝集原發(fā)生反應(yīng)的凝集素,凝集原會(huì)與相應(yīng)的凝集素發(fā)生凝集反應(yīng),使紅細(xì)胞凝集成團(tuán),不能分開,紅細(xì)胞破裂產(chǎn)生溶血。因此可用標(biāo)準(zhǔn)血清鑒定未知血型。在白瓷板上滴加抗A和抗B凝集素,然后加入本人血液,若與抗A凝集素反應(yīng)產(chǎn)生沉淀而與抗B凝集素不反應(yīng)則血型為A型;若與抗B凝集素反應(yīng)產(chǎn)生沉淀而與抗A凝集素不反應(yīng)則血型為B型;若均與抗A、抗B凝集素發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生沉淀則血型為AB型;若均不與抗A、抗B凝集素反應(yīng)則血型為O型。實(shí)際實(shí)驗(yàn)中,在加入本人血液后,血液與抗A、抗B凝集素反應(yīng)均無(wú)沉淀,但加入到抗A凝集素中后呈深色,而加到抗B凝集素中呈鮮紅色。理論上不發(fā)生反應(yīng)應(yīng)呈鮮紅色,顏色變深可能與pH值有關(guān)。
三、結(jié)論
(1)本人找到了紅細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞。
(2)本人的血型為o型,是萬(wàn)能供血者,可以幫助更多的人。
第三篇:用顯微鏡觀察人血細(xì)胞涂片的實(shí)驗(yàn)教案
用顯微鏡觀察人血細(xì)胞涂片的實(shí)驗(yàn)教案
教師:李蕓
教學(xué)目標(biāo) 1.知識(shí)目標(biāo):
1)學(xué)會(huì)用顯微鏡觀察人血的永久涂片和臨時(shí)裝片。2)通過觀察人血的永久涂片和臨時(shí)裝片、認(rèn)識(shí)紅細(xì)胞和白細(xì)胞 2.能力目標(biāo):
1)通過教師導(dǎo)學(xué)培養(yǎng)學(xué)生動(dòng)手觀察能力。
2)通過觀察實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)學(xué)生發(fā)現(xiàn)問題和解決問題的能力。3)通過看血常規(guī)化驗(yàn)單,培養(yǎng)學(xué)生的綜合分析能力及理論聯(lián)系實(shí)際的能力。
3.情感態(tài)度與價(jià)值觀目標(biāo):
1)通過對(duì)血液成分及各部分功能的認(rèn)識(shí),形成正確的血液觀。2)培養(yǎng)學(xué)生樂于探索生命的奧秘的精神和實(shí)事求是的科學(xué)態(tài)度。教學(xué)重點(diǎn)與難點(diǎn)
1.教學(xué)重點(diǎn):使用顯微鏡觀察人血的永久涂片和臨時(shí)裝片,掌握血液的組成成分。
2.教學(xué)難點(diǎn):使用顯微鏡觀察人血的永久涂片和臨時(shí)裝片,掌握血液的組成成分。
教學(xué)準(zhǔn)備:人血的永久涂片,顯微鏡 教學(xué)課時(shí):1課時(shí) 教學(xué)過程
一、情境導(dǎo)入
首先,播放有關(guān)血液的圖片,利用圖像激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)興趣,對(duì)所學(xué)內(nèi)容初步感知。緊接著教師通過提問,溫故顯微鏡的使用方法引新,導(dǎo)出本節(jié)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮蛯?shí)驗(yàn)器材,進(jìn)一步提出實(shí)驗(yàn)要求。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
(一)觀察:將人血的永久涂片放在低倍顯微鏡下進(jìn)行觀察。討論:A.你所觀察的人血永久涂片中數(shù)量最多的是哪種細(xì)胞? B.你是如何分辨紅細(xì)胞和白細(xì)胞的?(可從數(shù)量,形態(tài)結(jié)構(gòu)等方面考慮)
C.在普通光學(xué)顯微鏡下能不能直接找到血小板?猜一猜這是什么原因?
進(jìn)行思路引導(dǎo):
血液的其他組成部分又分別起什么作用?血細(xì)胞很“微小”,用什么來(lái)“明察秋毫”?(學(xué)生表達(dá)出“顯微鏡”一詞),簡(jiǎn)單回顧顯微鏡使用步驟后,我巡視、指導(dǎo)學(xué)生進(jìn)行分組實(shí)驗(yàn)(培養(yǎng)自主學(xué)習(xí)、局部合作的精神)。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,學(xué)生描述觀察結(jié)果(我通過幻燈片展示人血涂片,引導(dǎo)學(xué)生進(jìn)一步明辨紅細(xì)胞和白細(xì)胞,并解釋血小板在光學(xué)顯微鏡下看不見的原因)
1.紅細(xì)胞
展示電鏡下的紅細(xì)胞圖片并指導(dǎo)學(xué)生閱讀課本相應(yīng)內(nèi)容,找出紅細(xì)胞的形態(tài)特點(diǎn)及功能。之后通過發(fā)問:“紅細(xì)胞為什么能運(yùn)輸氧?”引導(dǎo)學(xué)生描述血紅蛋白的特性。2.白細(xì)胞
播放白細(xì)胞吞噬細(xì)菌的視頻錄像,引導(dǎo)學(xué)生歸納出白細(xì)胞的特點(diǎn)和功能(充分利用多媒體課件揭示抽象的生理過程)
3.血小板
幻燈片顯示思考題提問:有時(shí)不小心,皮膚劃破了,流出血來(lái),但過不久,在傷口處的血就凝固了,還把傷口堵住了,血就不流了。這是為什么?然后我引導(dǎo)學(xué)生在閱讀課本相應(yīng)內(nèi)容的基礎(chǔ)上總結(jié)出血小板的特點(diǎn)和功能。(2)制作和觀察人血臨時(shí)裝片
實(shí)驗(yàn)的操作步驟
A、用消毒棉簽給被采血者左手無(wú)名指尖消毒。(4人小組合作)B、用一次性取血刺針迅速有利的刺入已消毒指尖2mm深后并彈出。C、用一次性取血吸管在傷口處采血0.05ml,然后用消毒棉簽止血保護(hù)。
D、將采集的血液分別釋入到二片清潔的載玻片中央,做成臨時(shí)裝片并觀察。
課堂總結(jié):本節(jié)課你學(xué)到了什么?
第四篇:血型鑒定與交叉配血制度
血型鑒定與交叉配血制度
1.病人急需鑒定血型或交叉配合時(shí),醫(yī)生應(yīng)在檢驗(yàn)單上注明“急”字,并注明時(shí)間到分。
2.血型鑒定包括ABO血型和Rh(D)血型,兩人核對(duì)操作,正反定型相符,方可報(bào)告。
3.交叉配血試驗(yàn)的血樣標(biāo)本必須是輸血前3天之內(nèi)的。
4.輸血科工作人員必須認(rèn)真核對(duì)申請(qǐng)單、受血者和供血者的血樣,復(fù)查受血者和供血者ABO血型,Rh(D)血型,正確無(wú)誤后再進(jìn)行交叉配血。5.凡輸注全血、濃縮RBC、洗滌RBC、冰凍RBC、濃縮WBC、濃縮血小板、機(jī)采血小板,都應(yīng)做交叉配血試驗(yàn),輸注血漿(普通漿、冰凍血漿)也應(yīng)做次側(cè)配血試驗(yàn)。
6.血庫(kù)必須嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)規(guī)程操作,認(rèn)真仔細(xì)做好交叉配血試驗(yàn),兩人核對(duì)操作相符,方可報(bào)告,并詳細(xì)填寫好“交叉配血報(bào)告單”,報(bào)告單上必須雙人簽名,時(shí)間精確到分鐘。
7.交叉配血合格后,受血者與供血者的血樣及主側(cè)、次側(cè)管均應(yīng)放入2~6℃專用冰箱內(nèi)至少保存7天,以備對(duì)輸血不良反應(yīng)追查原因。
8.對(duì)于手術(shù)上或其他急診大輸血時(shí),輸血科應(yīng)先交叉配合1~2袋血并及時(shí)送往病室或手術(shù)室,然后再交叉配合剩下的血液。
第五篇:實(shí)驗(yàn)三 根莖葉顯微觀察與徒手切片
實(shí)驗(yàn)三 根莖葉顯微觀察與徒手切片
一、目的要求
1、學(xué)習(xí)植物的徒手切片技術(shù)
2、了解植物細(xì)胞的多樣性,積累植物組織的知識(shí),建立組織與功能協(xié)調(diào)一致的概念。
二、基本原理
根莖葉是植物的營(yíng)養(yǎng)器官,都是由各種細(xì)胞和組織組成的。通過切片,我們可以在不同的切片中分別看到保護(hù)組織、機(jī)械組織、營(yíng)養(yǎng)組織、輸導(dǎo)組織、分生組織等。
徒手切片法是指手拿刀片把植物新鮮材料切成薄片,制成臨時(shí)的水裝片用于觀察的植物組織制片技術(shù)之一。所作的切片通常不經(jīng)染色或經(jīng)簡(jiǎn)單染色,也可以通過脫水與染色制成永久制片。徒手切片的優(yōu)點(diǎn)是簡(jiǎn)單、方便,不要復(fù)雜的設(shè)備,不經(jīng)化學(xué)藥物的處理,基本上保留了植物活體的狀態(tài)。其操作要點(diǎn)是:在培養(yǎng)皿中放入清水。用左手大拇指、食指、中指等拿住材料,拇指略低于食指,且拇指要伸直呈反彎狀態(tài),中指等在下部穩(wěn)定材料。材料切面要高于拇指,但略低于食指,雙面刀片放在食指上,只有給它略加一個(gè)向下的力時(shí),刀刃才能接觸到材料。右手用食指和大拇指捏住雙面刀片的一角,留出所有的刀刃部分,使刀刃近手指的一端首選接觸到材料,然后讓刀刃在材料上斜切下去,如果把材料切面看作是一個(gè)長(zhǎng)方形的活,那么刀刃在材料上拉的是長(zhǎng)方形的一條對(duì)角線,即從左前方向右后方拉切,注意不是垂直切向材料,一片,一片??,輕松、快速地切,估計(jì)有滿意的了,再一起放入盛有清水的培養(yǎng)皿中,挑選最薄的一片,裝片觀察。不要試圖每一片都很薄,也不要追求切片形狀的完整。其次,一定要注意,切片時(shí)不論是站著還是坐著,都要挺胸、放松地進(jìn)行,是整個(gè)手臂在用力,也就是你在切片時(shí),是肩關(guān)節(jié)在動(dòng),而不是肘關(guān)節(jié),更不是腕關(guān)節(jié)。另外,切片時(shí)水是潤(rùn)滑劑,你的手指上、材料上、刀片上隨時(shí)都應(yīng)該有水。
三、實(shí)驗(yàn)材料、試劑與儀器設(shè)備
生物顯微鏡、載玻片、蓋玻片、雙面刀片、培養(yǎng)皿、滴管、吸水紙、毛筆,根莖葉結(jié)構(gòu)的相關(guān)切片、鳶尾Iris tectorum的根、某種合適的雙子葉植物的根、蠶豆Vicia faba的莖、蠶豆的葉、南瓜Cucurbita moschata莖、大葉黃楊 Euonymus japonicus的嫩莖、芹菜Apium graveoiens的葉柄、海桐Pittos-porum tobira或大葉黃楊的葉、小麥Triticum aestivum或其他禾本科小草的葉、蘿卜的肉質(zhì)直根,清水、I2-KI水溶液、0.1%番紅染液
四、實(shí)驗(yàn)步驟(一)根的顯微結(jié)構(gòu)
1、根尖的內(nèi)部結(jié)構(gòu)
取玉米或洋蔥根尖縱切永久制片,置于顯微鏡下,由根的最先端逐漸向上觀察根尖的各區(qū),注意各區(qū)細(xì)胞的特點(diǎn)。
①根冠 在根尖的最先端,由薄壁細(xì)胞組成,像一個(gè)套在分生區(qū)前面的帽子,在根冠的外側(cè),可見到某些正在脫落的細(xì)胞。
②分生區(qū) 根冠之內(nèi),緊接根冠的一段區(qū)域。由排列緊密的等徑細(xì)胞組成,其細(xì)胞壁薄、核大、細(xì)胞質(zhì)濃厚。細(xì)胞分裂能力強(qiáng),??梢砸姷秸谟薪z分裂的細(xì)胞。
③伸長(zhǎng)區(qū) 位于分生區(qū)的上方,從靠近分生區(qū)略微伸長(zhǎng)的細(xì)胞到接近成熟區(qū)的長(zhǎng)形細(xì)胞,細(xì)胞逐漸伸長(zhǎng)并液泡化,向成熟區(qū)過渡。伸長(zhǎng)區(qū)的細(xì)胞仍具有分裂的能力,邊分裂,邊分化,可以見到正在分裂的細(xì)胞,并有了初步的組織分化。在伸長(zhǎng)區(qū)如何區(qū)分原表皮、基本分生組織和原形成層?在制片上??梢姷綄挻蟮某纱L(zhǎng)細(xì)胞,想想這些細(xì)胞將來(lái)分化成根的什么結(jié)構(gòu)? ④成熟區(qū)(根毛區(qū))位于伸長(zhǎng)區(qū)上方,表面密生根毛的區(qū)域。在根毛區(qū)細(xì)胞分裂停止,分化成各種成熟組織時(shí),可見到成熟的環(huán)紋、螺紋導(dǎo)管。注意根毛的起源以及結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。
2、單子葉植物根的結(jié)構(gòu)
取鳶尾根2-5cm進(jìn)行徒手橫切(此根有一定的硬度,且較細(xì),橫切面一般低于1mm2,不適于初學(xué)切片,可以在芹菜葉柄和蠶豆莖切片之后再切此片),并制成臨時(shí)裝片,不染色或用0.1%番紅染色后在顯微鏡下觀察,由外向內(nèi)分為表皮、皮層和維管柱三部分: ①表皮 根的最外層細(xì)胞,排列整齊,有根毛。
②皮層 外皮層細(xì)胞1-2層,細(xì)胞小,排列整齊。在較老的根中,外皮層細(xì)胞壁增厚,木質(zhì)化或栓質(zhì)化。內(nèi)皮層細(xì)胞幼時(shí)與一般雙子葉植物結(jié)構(gòu)差不多,有凱氏帶加厚。隨著發(fā)育的進(jìn)行,內(nèi)皮層細(xì)胞出現(xiàn)五面加厚,并栓質(zhì)化,僅外切向面為薄的,在橫切面上呈馬蹄形。注意內(nèi)皮層通道細(xì)胞的位置。
③維管柱 由中柱鞘、初生木質(zhì)部和初生韌皮部組成。中柱鞘為緊貼內(nèi)皮層的一層薄壁細(xì)胞。初生木質(zhì)部和初生韌皮部相間排列,木質(zhì)部脊數(shù)目較多,為多原型。維管柱中央是薄壁細(xì)胞組成的髓。
3、雙子葉植物根的結(jié)構(gòu)
⑴取蠶豆或向日葵幼根永久制片,也可以取其幼根的成熟區(qū)做徒手切片,置于顯微鏡下,由外向內(nèi)觀察雙子葉植物根的初生結(jié)構(gòu)。①表皮 幼根的最外層細(xì)胞,是徑向扁平、排列整齊的一層細(xì)胞,外壁具有角質(zhì)膜,有些細(xì)胞向外突起形成根毛。
②皮層 表皮之內(nèi)的多層薄壁細(xì)胞。緊接表皮之下的是一層排列緊密的薄壁細(xì)胞叫外皮層,皮層的最內(nèi)層細(xì)胞稱為內(nèi)皮層,也是一層排列緊密的細(xì)胞。在其徑向壁和上、下壁上常有局部木質(zhì)或栓質(zhì)的加厚,彼此聯(lián)結(jié)成環(huán)帶狀,這就是凱氏帶。由于在徑向壁上觀察凱氏帶僅為一個(gè)小點(diǎn),亦稱為凱氏點(diǎn)。想想外皮層的作用是什么?凱氏帶在根中的作用是什么? ③維管柱 幼根的中央部分是維管柱,由中柱鞘、初生木質(zhì)部和初生韌皮部構(gòu)成。中柱鞘是中柱的最外層,緊接內(nèi)皮層,是1~2層排列整齊而緊密的薄壁細(xì)胞,在根的進(jìn)一步發(fā)育過程中有著重要作用。初生木質(zhì)部位于維管柱的中央,呈星芒狀,主要由導(dǎo)管和管胞組成,這些管狀分子的孔徑大小不同,觀察不同孔徑管狀分子的分布規(guī)律,找出原生木質(zhì)部和后生木質(zhì)部的位置,想想根的初生木質(zhì)部屬于何種發(fā)育方式?觀察木質(zhì)部脊的數(shù)目想想雙子葉植物常為幾原型?初生韌皮部位于初生木質(zhì)部?jī)蓚€(gè)輻射角之間,由篩管和伴胞構(gòu)成。在初生木質(zhì)部和初生韌皮部之間,有1~2層薄壁細(xì)胞,想想其來(lái)源如何?在蠶豆幼根的中心部分,有一群薄壁細(xì)胞,如何解釋這個(gè)現(xiàn)象? ⑵取毛茛根橫切永久制片置于顯微鏡下,同樣從外向內(nèi)觀察,注意其與蠶豆或向日葵根的區(qū)別。特別注意內(nèi)皮層細(xì)胞壁的加厚情況,其細(xì)胞壁為全面加厚。內(nèi)皮層中不加厚的細(xì)胞是通道細(xì)胞,根的物質(zhì)交換通過內(nèi)皮層的通道細(xì)胞進(jìn)入維管柱。
⑶形成層的發(fā)生 取蠶豆根橫切永久制片,觀察形成層的發(fā)生。首先在初生木質(zhì)部和初生韌皮部之間出現(xiàn)形成層,呈圓弧型(觀察其數(shù)目與木質(zhì)部脊的數(shù)目是否一致,想想它們起源于什么細(xì)胞?),以后這些圓弧型的形成層向兩側(cè)擴(kuò)展,同時(shí)在木質(zhì)部脊的中柱鞘細(xì)胞,也恢復(fù)分裂的能力,兩者互相連接形成一個(gè)波浪狀的形成層環(huán),其形狀與木質(zhì)部脊相似。形成層細(xì)胞進(jìn)行切向分裂,在初生木質(zhì)部和初生韌皮部之間的形成層細(xì)胞分裂較多,最終形成層環(huán)呈圓形。
⑷根的次生結(jié)構(gòu) 取棉老根橫切永久制片,在顯微鏡下由外向內(nèi)進(jìn)行觀察,分別為周皮、次生韌皮部、形成層、次生木質(zhì)部和初生木質(zhì)部。(二)莖的顯微結(jié)構(gòu)
1、莖的頂端分生組織
取丁香或大葉黃楊莖尖縱切制片,置于顯微鏡下,從莖尖的最先端往后觀察。頂端分生組織明顯地分成原體與原套兩部分,注意原體和原套的特點(diǎn),以及識(shí)別莖尖的芽原基和葉原基。在原分生組織之下是已開始分化的初生分生組織,原表皮是最外面的一層細(xì)胞,原形成層為細(xì)胞質(zhì)濃厚并縱向伸長(zhǎng)的細(xì)胞,縱切面上分布在器官的兩側(cè)。基本分生組織細(xì)胞近乎等徑,分布在器官的中央以及原表皮和原形成層之間。
2、莖的初生結(jié)構(gòu)
⑴雙子葉植物莖的初生結(jié)構(gòu)
觀察向日葵幼莖橫切永久制片,由外向內(nèi)分辨表皮、皮層和維管柱。①表皮 表皮細(xì)胞一層,排列緊密,外壁具有角質(zhì)層。細(xì)胞具核,但缺少葉綠體。有些表皮細(xì)胞形成表皮毛(有單細(xì)胞毛和多細(xì)胞毛)。表皮細(xì)胞中??梢姷絻蓚€(gè)較小的細(xì)胞和兩個(gè)細(xì)胞之間的縫隙,這就是保衛(wèi)細(xì)胞和氣孔,氣孔之下是孔下室。②皮層 表皮以內(nèi)、維管柱以外的細(xì)胞。緊接表皮之下是幾層厚角組織,細(xì)胞相對(duì)較小。其內(nèi)是數(shù)層薄壁細(xì)胞,薄壁細(xì)胞中散布有小型的分泌腔。③維管柱 維管束在莖的橫切面上排成一環(huán),將皮層和髓分隔開。韌皮部在維管束外方,木質(zhì)部在內(nèi)方,兩者之間是束中形成層(無(wú)限維管束)。髓在莖的中央,由薄壁組織構(gòu)成,細(xì)胞排列疏松,有貯藏的功能,常可見到含有晶體或單寧的細(xì)胞。在維管束之間的薄壁組織是髓射線,連接皮層和髓,想想它的作用是什么?觀察時(shí)注意比較莖的初生韌皮部和初生木質(zhì)部的組成成分與發(fā)育方式、束中形成層來(lái)源與根有什么異同。
⑵單子葉植物莖的初生結(jié)構(gòu)
取玉米或小麥莖橫切永久制片進(jìn)行觀察。注意單子葉植物莖與雙子葉植物莖的區(qū)別。①表皮 莖的最外層細(xì)胞,排列整齊,外壁具有較厚的角質(zhì)膜。氣孔的兩邊除了兩個(gè)較小的保衛(wèi)細(xì)胞外,還有兩個(gè)稍大的副衛(wèi)細(xì)胞。②維管束 玉米莖中維管束散生分布??拷吘壊糠志S管束小、數(shù)日較多,在莖中部的維管束大,但數(shù)目較少。由于維管束的散生分布,因此沒有皮層和髓的界限。仔細(xì)觀察一個(gè)維管束,其外圍有一圈厚壁細(xì)胞組成的維管束鞘,鞘內(nèi)只有外方的初生韌皮部和內(nèi)方的初生木質(zhì)部,兩者間沒有形成層(有限維管束)。在初生韌皮部最外方的原生韌皮部有時(shí)被擠毀,失去了輸導(dǎo)的功能,內(nèi)側(cè)的后生韌皮部由排列規(guī)則的篩管和伴胞組成。初生木質(zhì)部由3-4個(gè)導(dǎo)管組成,在橫切面上呈V形。V形的底部是原生木質(zhì)部,由1-3個(gè)較小孔徑的導(dǎo)管和薄壁細(xì)胞組成。常由于莖的伸長(zhǎng)將導(dǎo)管拉破,在V形底部形成一個(gè)空腔(氣腔或胞間道)。V形上半部?jī)蓚?cè)各有一個(gè)孔徑較大的導(dǎo)管,是后生木質(zhì)部,這兩個(gè)大導(dǎo)管之間有一些管胞分布。在小麥莖中維管束呈兩輪分布,外輪維管束小,分布在厚壁組織細(xì)胞中,與含有葉綠體的同化組織相間排列。內(nèi)輪維管束大,分布在薄壁細(xì)胞中。維管束的結(jié)構(gòu)與玉米相似。③基本組織 表皮和維管束之間的所有細(xì)胞稱之為基本組織(因沒有皮層和髓的界限)。玉米中,靠近表皮的數(shù)層細(xì)胞體積小,排列緊密,細(xì)胞壁增厚并木質(zhì)化,是厚壁組織,稱外皮層。維管束之間的細(xì)胞為薄壁細(xì)胞,細(xì)胞較大,排列疏松,有胞間隙。越靠近中央,細(xì)胞的個(gè)體越大。小麥中,靠近表皮有數(shù)層厚壁細(xì)胞,除有維管束分布外,還有與其相間排列的成群同化組織。厚壁細(xì)胞之內(nèi)是較大的薄壁細(xì)胞。在小麥莖干的中央形成髓腔。
3、莖的次生結(jié)構(gòu)
⑴雙子葉植物草本莖的次生結(jié)構(gòu) 取向日葵老莖橫切永久制片,觀察莖的次生結(jié)構(gòu)。向日葵莖次生生長(zhǎng)的變化主要表現(xiàn)在維管柱。在初生韌皮部的外方,出現(xiàn)成堆的厚壁細(xì)胞,為韌皮纖維。束中形成層細(xì)胞有3-5層,向外分裂形成韌皮部的各種細(xì)胞,向內(nèi)分裂分化出本質(zhì)部的細(xì)胞。還可觀察到由部分束間形成層活動(dòng)形成的小型維管束。
⑵雙子葉植物木本莖的次生結(jié)構(gòu) 取椴樹(3-4年生)莖橫切永久制片,由外向內(nèi)依次觀察雙子葉植物木本莖的次生結(jié)構(gòu)。
①表皮 基本脫落,留下部分殘片。
②周皮 觀察木栓層、木栓形成層和栓內(nèi)層三部分所組成的周皮,并注意各層細(xì)胞特點(diǎn)。注意周皮是否有皮孔形成及皮孔的結(jié)構(gòu)如何?試想木栓形成層的來(lái)源。
③皮層 在周皮和維管柱之間所保留的數(shù)層厚角組織和薄壁組織。
④韌皮部 主要是次生韌皮部。形狀呈梯形,與喇叭口狀的韌皮射線在圓周方向相間排列。韌皮纖維與韌皮部的其他成員沿半徑方向相間排列。注意識(shí)別篩管、伴胞和韌皮薄壁細(xì)胞。初生韌皮部?jī)H在最外側(cè)留下韌皮纖維(亦稱中柱鞘纖維)。
⑤形成層 理論上為一層細(xì)胞,但觀察時(shí)可見到3~5層細(xì)胞,試想這是為什么? ⑥木質(zhì)部 主要是次生木質(zhì)部,在靠近髓的部分有幾束初生木質(zhì)部。注意年輪和年輪線,并分辨早材和晚材。
⑦髓 位于莖的中心,多為薄壁細(xì)胞,雜有少數(shù)石細(xì)胞。外圍是一圈小型細(xì)胞,稱環(huán)髓帶。髓細(xì)胞除含有淀粉外,還包含有一些異細(xì)胞,在這些異細(xì)胞中,可見到簇晶、單寧和粘液。
⑧髓射線 內(nèi)連髓外接皮層的薄壁細(xì)胞。在木質(zhì)部為l~2列細(xì)胞,稱之為木射線。在韌皮部細(xì)胞變大,并沿切向方向擴(kuò)展呈喇叭口狀,稱之為韌皮射線。
⑨維管射線 短于髓射線。不能同時(shí)連接髓和皮層。與髓射線一樣,在木質(zhì)部叫木射線,在韌皮部叫韌皮射線。
⑶裸子植物莖的次生結(jié)構(gòu) 裸子植物莖的次生結(jié)構(gòu)與雙子葉植物木本莖的結(jié)構(gòu)相似,所不同的只是細(xì)胞的組成類型。它們的次生木質(zhì)部形成了木材。其結(jié)構(gòu)可通過橫切面、徑向縱切面和切向縱切面3個(gè)切面來(lái)觀察各種細(xì)胞的特點(diǎn)。①橫切面 可觀察木材的年輪、早材和晚材、邊材和心材的特征。在裸子植物(縱向系統(tǒng)主要由管胞組成)的橫切面上見到的是管胞的橫斷面觀,細(xì)胞的孔徑比較均勻,細(xì)胞的組成比較簡(jiǎn)單。木射線展示的是長(zhǎng)和寬。
②徑向縱切面 可見到長(zhǎng)形的管胞及壁上的具緣紋孔。木射線像一堵磚墻,展示的是長(zhǎng)和高。
③切向縱切面 木射線展示的是高和寬,有時(shí)在較大的木射線中,可見到橫向的樹脂道。
4、徒手切片觀察不同植物莖的結(jié)構(gòu)
①蠶豆莖橫切,主要可以觀察莖表皮細(xì)胞,莖薄壁細(xì)胞及其細(xì)胞的結(jié)構(gòu)、原生質(zhì)流動(dòng)等,莖中的形成層,維管束結(jié)構(gòu),等。
②南瓜莖橫切或斜切,斜切可以看到螺紋導(dǎo)管。
③大葉黃楊的嫩莖橫切,為雙子葉木本植物莖的徒手切片代表。以上切片均可以不染色或用0.1%番紅染色在顯微鏡下觀察。(三)葉的顯微結(jié)構(gòu)
1葉片的顯微結(jié)構(gòu)
⑴取大葉黃楊或海桐葉作徒手切片,方法是:先將葉片中間葉脈兩側(cè)各留下2-3mm后切去,再切去剩下部分的遠(yuǎn)葉柄端,使切面呈近似的長(zhǎng)方形,然后讓葉正面貼向食指,材料、刀、手指均用清水濕潤(rùn)后,進(jìn)行徒手切片,并做成臨時(shí)裝片。顯微鏡下觀察,分清上下表皮、葉肉和葉脈三部分。
①表皮 一層排列整齊而又緊密的細(xì)胞。橫切面上呈長(zhǎng)方形,外壁較厚,其外有角質(zhì)層。在表皮細(xì)胞中有成對(duì)、較小的細(xì)胞即保衛(wèi)細(xì)胞,兩個(gè)保衛(wèi)細(xì)胞之間的縫隙是氣孔。在表皮上還可以見到表皮毛。注意觀察細(xì)胞中是否有葉綠體,以及上下表皮氣孔的數(shù)目的差異。
②葉肉 注意觀察柵欄組織和海綿組織的細(xì)胞特點(diǎn),以及孔下室的分布位置。試想這些特點(diǎn)與環(huán)境及功能有什么關(guān)系? ③葉脈 葉肉中的維管組織,主脈較大,由主脈進(jìn)行分支形成側(cè)脈。主脈包埋在基本組織中,上方表皮下有厚角組織,下方基本組織中有厚壁細(xì)胞分布。葉脈維管束的木質(zhì)部在近軸面,而韌皮部在遠(yuǎn)軸面。在較大葉脈的木質(zhì)部與韌皮部之間有一層形成層細(xì)胞。側(cè)脈維管束的組成趨于簡(jiǎn)單,木質(zhì)部和韌皮部只有少數(shù)幾個(gè)細(xì)胞,但一般具有薄壁細(xì)胞形成的維管束鞘。在切片中可以見到各種走向的葉脈,試想其原由。
⑵小麥葉的結(jié)構(gòu) 用小麥葉進(jìn)行徒手切片后觀察。小麥葉的徒手切片要用蘿卜條作為夾持物才可以。方法是用水果刀將蘿卜切成約3×4×40(mm)的蘿卜條,再在一端沿小長(zhǎng)方形的長(zhǎng)邊方向的中央切一10-20mm 的縫,并將小麥葉的一段夾進(jìn)去,捏緊,修切,作徒手切片。或 取小麥葉橫切永久制片,置于顯微鏡下逐項(xiàng)觀察。
①表皮 細(xì)胞一層,其外壁具有較厚的角質(zhì)層。在表皮中有成對(duì)的保衛(wèi)細(xì)胞,體積較小。在保衛(wèi)細(xì)胞的兩側(cè)是略大一些的副衛(wèi)細(xì)胞。上表皮中還有一些較大的細(xì)胞,常幾個(gè)連在一起,在橫切 面上略成扇形,叫泡狀細(xì)胞,因其與葉片的卷曲有關(guān),也被稱為運(yùn)動(dòng)細(xì)胞。此外,還可見到表皮毛。
②葉肉 無(wú)柵欄組織和海綿組織的分化,細(xì)胞比較均一。葉肉細(xì)胞均富含葉綠體。若將葉肉細(xì)胞解離,可發(fā)現(xiàn)每個(gè)細(xì)胞的長(zhǎng)壁呈有峰和谷之分的深的波浪狀。
③葉脈 維管束與莖中一樣都為有限維管束,木質(zhì)部位于近軸面,而韌皮部在遠(yuǎn)軸面。維管束外有兩層維管束鞘,外層細(xì)胞較大,壁薄,含有葉綠體;內(nèi)層細(xì)胞小,壁厚。維管束的上下兩側(cè)具有厚壁細(xì)胞,一直延伸到表皮之下。試想這些厚壁細(xì)胞的作用是什么? ⑶玉米葉的結(jié)構(gòu) 觀察玉米葉的橫切永久制片,并與小麥葉比較。玉米的維管束鞘只有一層大的薄壁細(xì)胞,含有大的葉綠體。維管束鞘與其外側(cè)相鄰的一圈葉肉細(xì)胞共同形成“花環(huán)狀”結(jié)構(gòu),這是C4植物的結(jié)構(gòu)特征。葉柄的顯微結(jié)構(gòu)
取芹菜葉柄,作徒手切片進(jìn)行觀察。主要可以見到表皮細(xì)胞、薄壁組織、厚角組織、維管束等。芹菜葉柄是最易進(jìn)行徒手切片的實(shí)驗(yàn)材料之一。松針葉的顯微結(jié)構(gòu)
取松針葉橫切永久制片,由外向內(nèi)觀察。
①表皮 細(xì)胞一層,排列緊密。細(xì)胞壁厚,胞腔小,外壁覆蓋有厚的角質(zhì)層。②下皮層 由1至多層厚壁細(xì)胞構(gòu)成。氣孔下陷到下皮層,由一對(duì)保衛(wèi)細(xì)胞和一對(duì)副衛(wèi)細(xì)胞組成。保衛(wèi)細(xì)胞側(cè)壁與下皮層細(xì)胞相連。副衛(wèi)細(xì)胞在保衛(wèi)細(xì)胞的上方,拱蓋著保衛(wèi)細(xì)胞,側(cè)壁與表皮細(xì)胞相連。二者的胞壁都有不均勻的加厚,氣孔下是下陷的孔下室。
③葉肉 位于下皮層以內(nèi),葉肉細(xì)胞的細(xì)胞壁內(nèi)折,胞質(zhì)內(nèi)富含葉綠體。在葉肉組織中有樹脂道分布。樹脂道由兩層細(xì)胞圍成,外層是厚壁的鞘細(xì)胞,內(nèi)層是薄壁的上皮細(xì)胞。樹脂道的數(shù)目與分布的不同可作為種的鑒別特征。
④內(nèi)皮層 葉肉細(xì)胞里面的一圈排列整齊的細(xì)胞,其徑向壁上有類似凱氏帶的加厚。⑤維管組織 位于針葉的中央,內(nèi)皮層以內(nèi),有1~2個(gè)外韌維管束。木質(zhì)部在近軸面,韌皮部在遠(yuǎn)軸面。木質(zhì)部和韌皮部的細(xì)胞均成徑向排列,木薄壁細(xì)胞與管胞各自成行,相間排列;篩管和韌皮薄壁細(xì)胞排列也是如此。韌皮部外側(cè)有幾個(gè)成堆分布的細(xì)胞,含有濃厚的細(xì)胞質(zhì),是蛋白細(xì)胞。內(nèi)皮層和維管柱之間排列緊密的細(xì)胞是傳輸組織,包括常含有鞣質(zhì)的生活薄壁細(xì)胞和壁稍厚略為木質(zhì)化且壁上有具緣紋孔的管胞狀細(xì)胞,前者占傳輸組織的大部分。
取雪松或黑松的葉作徒手切片觀察。4 不同生態(tài)環(huán)境下生長(zhǎng)的植物葉結(jié)構(gòu)特點(diǎn)
⑴旱生植物夾竹桃葉橫切永久制片
①表皮 細(xì)胞排列緊密,壁厚,外壁上有厚的角質(zhì)層。下表皮有一部分細(xì)胞構(gòu)成下陷的窩,窩內(nèi)有表皮細(xì)胞形成的表皮毛,毛下有氣孔分布。表皮細(xì)胞2~3層形成復(fù)表皮。
②葉肉 上、下表皮之內(nèi)都有柵欄組織,柵欄組織由多層細(xì)胞構(gòu)成,細(xì)胞排列非常緊密。海綿組織位于上、下柵欄組織之間,細(xì)胞層數(shù)較多,胞間隙不發(fā)達(dá)。在葉肉細(xì)胞中常含有簇晶。
③葉脈 維管束發(fā)達(dá)。主脈很大,為雙韌維管束。⑵水生植物睡蓮和眼子菜葉橫切永久制片
①睡蓮葉橫切永久制片觀察 上表皮有氣孔。葉肉的柵欄組織和海綿組織的分化明顯,柵欄組織在上方,細(xì)胞含有較多的葉綠體;而海綿組織在下方,有十分發(fā)達(dá)的氣腔和一些分支石細(xì)胞分布。維管組織特別是木質(zhì)部不發(fā)達(dá)。
②眼子菜葉橫切永久制片觀察 表皮無(wú)氣孔,也沒有角質(zhì)層,但表皮細(xì)胞中含有葉綠體,試想這是為什么?葉肉細(xì)胞不發(fā)達(dá),有1至幾層細(xì)胞組成。在靠近主脈處,葉肉細(xì)胞形成大的氣腔。葉脈的木質(zhì)部導(dǎo)管和機(jī)械組織都不發(fā)達(dá)
五、注意事項(xiàng)
1本實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的實(shí)施需要學(xué)生具有一定的理論基礎(chǔ),計(jì)劃學(xué)時(shí)為6學(xué)時(shí)。2 徒手切片技術(shù)非常簡(jiǎn)單和實(shí)用,一定要掌握其操作要領(lǐng)。
六、思考題
1繪鳶尾根的橫切面圖(四分之一部分),并注明各部分名稱。
2繪玉米莖或小麥莖橫切面輪廓圖,詳繪一個(gè)維管束,并注明各部分結(jié)構(gòu)的名稱。3 繪大葉黃楊(或海桐)葉橫切面圖或小麥葉的橫切片圖。