第一篇：病理科操作規(guī)范及流程

病理標本的驗收規(guī)范及流程

病理科應有專人驗收普通活體組織病理學檢查(常規(guī)活檢)申請單和送檢的標本。

(二)病理科驗收人員必須：

1． 同時接受同一患者的申請單和標本。

2． 認真核對每例申請單與送檢標本及其標志（聯(lián)號條或其他寫明患者姓名、送檢單位和送檢日期等的標記）是否一致；對于送檢的微小標本，必須認真核對送檢容器內或濾紙上是否確有組織及其數(shù)量。發(fā)現(xiàn)疑問時，應立即向送檢方提出并在申請單上注明情況。3．認真檢查標本的標志是否牢附于放置標本的容器上。

4．認真查閱申請單的各項目是否填寫清楚，包括：①患者基本情況［姓名、性別、年齡，送檢單位（醫(yī)院、科室）、床位、門診號/住院號、送檢日期、取材部位、標本數(shù)量等］，②患者臨床情況［病史（癥狀和體征）、化驗/影象學檢查結果、手術（包括內鏡檢查）所見、既往病理學檢查情況（包括原病理號和診斷）和臨床診斷等］。5．在申請單上詳細記錄患者或患方有關人員的電話號碼，以便必要時進行聯(lián)絡，并有助于隨訪患者。

(三)驗收標本人員不得對申請單中由臨床醫(yī)師填寫的各項內容進行改動。

不合格標本的處理規(guī)范與程序

1． 申請單與相關標本未同時送達病理科；

2．申請單中填寫的內容與送檢標本不符合； 3．標本上無有關患者姓名、科室等標志； 4．申請單內填寫的字跡潦草不清； 5．申請單中漏填重要項目； 6．標本嚴重自溶、腐敗、干涸等； 7．標本過小，不能或難以制做切片；

8．其他可能影響病理檢查可行性和診斷準確性的情況。

病理科不能接收的申請單和標本一律當即退回申請醫(yī)師，不予存放，并記錄。病理標本檢查和取材規(guī)范及程序

1.取材前閱讀申請單中的內容，初步判斷病變的性質。2.核對申請單的編號與標本的編號、標本的份數(shù)是否相符。３.對于核對無誤的標本應按下列程序取材：

３.１小標本和不完整的標本通常為活檢標本，應按如下標準取材。

３.１.1應描述和記錄送檢標本的數(shù)量（少量時精確計算，多量時進行估計）、大?。ㄈ舾蒻m或cm；多量時聚攏測量）、形狀、色澤和質地等。

３.１.2少量的小標本應全部取材制片。

３.１.３多量的小標本，原則上全部取材制片；數(shù)量過多時，可盡量多地取材制片，剩余的標本應置于4%的中興甲醛中妥善保存?zhèn)溆谩?/p>

３.１.４.黏膜和皮膚組織應“立埋”，即將黏膜面與包埋盒的 底面垂直。

３.１.5使用鑷子夾取標本時須嚴防擠壓組織。３.２大標本通常為手術標本，應按如下標準取材：

３.２.1 記錄切除標本的手術類型。

３.２.2應描述和記錄送檢標本的大小（三維長度，mm或cm）、形狀、色澤、表面、質地等，球形或接近球形的標本可測其直徑（mm或cm）。必要時稱重（g或kg）。

３.２.3檢查切面：通常沿標本長徑切開或剪開（囊性標本時），3 描述和記錄其形狀特點，例如囊性和實性及其所占比例、色澤、質地、紋理、壞死；囊腫壁的厚度及其內外表面、囊腔內容物及其性狀等，有的臟器，例如前列腺、胰腺、甲狀腺等，應間隔一定距離（甚至間距2mm左右）做多個平行切面，檢查有無微小腫物。

３.２.4帶有臟器的標本，應描述和記錄病變處與有無臟器的毗鄰關系特點。

３.２.5必要時，繪簡圖說明巨檢病變的特點和解剖學關系，病注明取材部位的編號，以便鏡檢時定位。

３.２.6切取有代表性病變區(qū)域的組織制片，適量包括與病變區(qū)域毗鄰的“正?！苯Y構和壞死組織等。

３.２.7完整切除的腫瘤標本，切取的組織塊應包括其包膜，較

大的腫瘤應酌情多處包膜取材。

３.２.8切取組織塊的刀具必須鋒利，嚴防擠壓組織。３.２.9切取組織塊的數(shù)量，依巨檢病變的具體情況酌定，一般以滿足診斷需要為準。組織塊的面積，通常在2cmx1.5cm以內，厚度不宜超過3mm（快速包埋制片時則應盡量薄些）。

３.２.10組織塊的切面應平整。需要指定組織塊的包埋面時，可將其非包埋面切出凹痕作為標記。管壁和囊壁組織應立埋。

４.標本攝影，必要時酌情進行（標本固定前或固定后）。５.切取組織塊的編號、數(shù)量和取材后是否尚有標本存留等均應在活檢記錄單的肉眼檢查描寫欄內和取材工作單中注明，以便鏡檢時核對切片。例如，1.組織較少，全部包埋制片者，可注明“全”字；2.針吸、內鏡取材或少量易碎的組織，須用軟紙妥善包裹（以防制片過程中丟失），可注明“包”字；3.取材后尚有存留的標本，可注明“留”字等。

６.需要重新肉眼檢查標本時，應在有關病例活檢記錄單中補充必要的文字描述，需要補充切取組織塊時，應按上述取材操作程序進行，并應在相關活檢記錄單、取材工作單中和編號小條上注明“補”字。常規(guī)石蠟包埋組織切片規(guī)范及程序

１.脫水（常溫下）

3.2.1乙醇-甲醛（AF）液固定：60~120min。3.2.2 80%乙醇：60~120min。3.2.3 95%乙醇Ⅰ：60~120min。3.2.4 95%乙醇Ⅱ：60~120min。3.2.5 無水乙醇Ⅰ：30~60min。3.2.6無水乙醇Ⅱ：30~60min。3.2.7無水乙醇Ⅲ：30~60min。２.透明

a..二甲苯Ⅰ：20 min。b.二甲苯Ⅱ：20 min。c.二甲苯Ⅲ：20 min。

３.浸蠟

3.3 石蠟Ⅰ（45~50℃）：60 min。3.4 石蠟Ⅱ（56~58℃）：60 min。3.5 石蠟Ⅲ（56~58℃）：60 min。4 包埋

４.１先將熔化的石蠟傾入包埋模具中，再用加熱的彎曲鈍頭鑷子輕輕夾取已經(jīng)浸蠟的組織塊，使組織的最大面或被特別指定的組織面埋入熔蠟中，應將組織塊平整地置放于包埋模具底面的中央處。包埋于同一拉塊的多塊細小組織應彼此靠近并位于 同一平面上；腔壁、皮膚和黏膜組織必須垂直包埋（立埋）。４.２將與組織塊相關的病理號小條置入包埋模具內熔蠟的一側。

４.３待包埋模具內的熔蠟表面凝固后，即將模具移入冷水中加速凝固。

４.４從包埋模具中取出凝固的包埋蠟塊（簡稱蠟塊），用刀片去除組織塊周圍的過多石蠟（組織周圍保留1~2mm石蠟為宜）。將包埋蠟塊修整成為規(guī)則的正方形或長方形。

４.５將病理號小條牢固地烙貼在蠟塊一側（編號應清晰可見）。４.６把修整好的蠟塊烙貼在支持器上，準備切片。４.７使用包埋機的方法按有關廠商的說明書操作。5 切片

5.1 切片刀或一次性切片刀必須鋒利。5.2 載玻片必須潔凈、光亮。

5.3 將切片刀或刀片安裝在持刀座上（以150為宜）。

5.4 細心移動刀座或蠟塊支持器，使蠟塊與刀刃接觸，旋緊刀座和蠟塊支持器。

5.5 修塊（粗切）。用右手勻速旋轉切片機輪，修切蠟塊表面至包埋其中的組織塊完整地全部切到。修塊粗切片的厚度為15~2μm。

5.6 調節(jié)切片厚度調節(jié)器（一般為4~6μm），進行切片。5.7 以專用小鑷子輕輕夾取完整、無刀痕、厚薄均勻的蠟片放入 伸展器的溫水中（45℃左右），使切片全面展開。

5.8 將蠟片附貼于載玻片上。蠟片應置放在載玻片右（或左）2/3處的中央，留出載玻片左（或右）1/3的位置用于貼附標簽。蠟片與載玻片之間無氣泡。

5.9 必須立即在置放了蠟片的載玻片一端，用優(yōu)質記號筆或刻號筆準確、清楚地標記其相應的病理號。

5.10 將置放了蠟片的載玻片呈45℃斜置片刻；待載玻片上的水分流下后，將其置于烤箱中烘烤（60~62℃，30~60min），然后即可進行染色。

5.11 內鏡小的活檢，穿刺等組織需連續(xù)切片不少于６片。5.12 針對不同組織（如小活檢，骨組織，淋巴結等），優(yōu)化制片，染色流程，保證切片質量。術中快速冰凍切片的規(guī)范及程序

１.冰凍切片的制備

１.１打開照明開關，打開冰凍切片機的玻璃箱蓋。１.2選擇凍頭，在凍頭滴上冰凍切片機包埋劑適當。１.3 待組織完全冷凍后，將凍頭移到切片刀口的凍口內，扭緊凍頭，進行切片，切片時有節(jié)奏的來回推動搖手柄，切得完整且較薄的切片（厚度8-9um），即可貼在玻璃片上。

１.4 將切好的片子用95%的乙醇固定，然后進行染色、封片、鏡檢（同石蠟切片H-E染色步驟）。

１.5 工作完畢后將凍頭上組織取出，放回送檢的標本袋內，用10%的中性甲醛固定液固定。

１.6清掃切冰凍切片機箱，將凍頭擦干后放回冰凍切片機內。

１.7關好冰凍切片機的玻璃箱蓋，關閉照明電源。２.冰凍切片機須24h開機，長假或節(jié)假日前檢查切片機箱內的結凍情況，必要時關機，化霜，清潔冰凍切片機。３.注意事項

３.1 制作冷凍切片所需的試劑和設備等應處于隨時可供使用狀態(tài)。

３.2 切取的組織塊大小適宜（厚度<2mm），并盡快置于冷凍組織切片機上制備切片。

３.3 調節(jié)冷凍程度，試切合合適時便迅速切片。冷凍不足無法切片，冷凍過度切片易碎。

３.4 冷凍切片固定液

95%乙醇

50ml ４.單體標本的冰凍制片應在１５min內完成。術中快速冰凍診斷的規(guī)范及程序

１.臨床醫(yī)師在術前向患者或近親屬告知術中快速病理診斷的局限性，簽署術中快速病理診斷知情同意書。

２.從標本接收到發(fā)出報告的時間，應在病理申請單上注明。３.有條件的由兩位中／高級稱職的病理醫(yī)師共同簽署快速活檢的病理診斷意見。對于病變疑難、手術切除范圍廣泛和會嚴重致殘的手術中快速活檢，應由兩位高級稱職的病理醫(yī)師共同簽署會診意見。主檢病理醫(yī)師簽名的字跡應能辨認。

４.快速活檢診斷意見一般在收到送檢標本后３０min內發(fā)出；同一時間段內相繼收到的多例患者標本或是同一例患者的多次標本，其發(fā)出報告的時間依次類推。對于疑難病變，可酌情延時報告。５.對于難以即時快速診斷的病變（例如病變不典型、交界性腫瘤病變或送檢組織不足以明確診斷等），主檢病理醫(yī)師應向手術醫(yī)師說明情況，恰如其分地簽發(fā)病理診斷意見或告知需要等待常規(guī)石蠟切片進一步明確病理診斷。

６.主檢病理醫(yī)師簽署的快速活檢病理診斷意見，以書面形式報告（可傳真或網(wǎng)絡傳輸）?？焖倩顧z病理診斷意見報告書發(fā)出前應認真核對無誤。

７.冷凍切片后剩余組織的處理

７.１ 冷凍切片后剩余的冷凍組織（簡稱 “凍后”）和冷凍切片取材后剩余、未曾冷凍的組織（簡稱“凍剩”），均應保存，用以制備常規(guī)石蠟切片，以便與冷凍切片進行對照觀察。７.２“凍后”／“凍剩”組織的蠟塊和切片需與同一病例手術后送檢的切除標本編為同一病理號，并作出綜合性診斷。

７.３當冷凍切片病理診斷意見與其“凍后”組織的常規(guī)石蠟-HE片的病理診斷不一致時，該例的病理診斷一般應以石蠟-HE片診斷為準。常用特殊染色的操作規(guī)范

膠原纖維染色

Van Gieson(VG)苦味酸-酸性品性紅法

一、染色程序

1、組織塊固定于4%中性甲醛液中，常規(guī)脫水、石蠟包埋和切片。

2、切片脫蠟至水。

3、用Weigrt鐵蘇木精液染5-10min。

4、流水稍洗。

5、1%鹽酸-乙醇迅速分化。

6、流水沖洗5-10min。

7、用Van Gieson液染1-2min。

8、傾去染液，直接用95%乙醇分化和脫水。

9、無水乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹膠封固。

二、染色結果 膠原纖維呈鮮紅色。細胞質、肌纖維和紅細胞呈黃色，胞核呈藍褐色。Maasson三色法

一、染色程序

1、組織塊固定于4%中性甲醛液中。用Bouin液或Zenker固定時，流水沖洗組織塊過夜，效果更好。常規(guī)脫水、石蠟包埋和切片。

2、切片脫蠟到水。組織塊經(jīng)Zenker液固定時應對切片進行除汞處理：（1）切片脫蠟后，以0.5%碘乙醇作用10min；（2）稍水洗；（3）以5%硫代硫酸鈉作用5min；（4）流水沖洗10min。

3、gert鐵蘇木精液染5-10min。

4、流水沖洗。

5、1%鹽酸-乙醇分化。

6、流水沖洗5-10min。

7、麗春紅酸性品紅液染5-10min。

8、蒸餾水稍洗。

9、1%磷鉬酸水溶液處理約5min。

10、不用水洗，直接用苯胺藍液復染5min。

11、0.2%冰醋酸處理1min。

12、95%乙醇脫水并洗去冰醋酸。

13、無水乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹膠封固。

二、染色結果 膠原纖維呈藍色。細胞質、肌纖維和紅細胞呈紅色，胞核呈藍色。

網(wǎng)狀纖維染色

氫氧化銀氨液浸染法

一、染色程序

1、組織塊固定于4%中性甲醛液中，常規(guī)脫水、石蠟包埋和切片。

2、切片脫蠟至水。

3、酸化高錳酸鉀液氧化5min。

4、稍水洗。

5、2%草酸水溶液漂白1-2min。

6、稍水洗。

7、2%硫酸鐵銨水溶液媒染5min。

8、稍水洗，再用蒸餾水洗1次。

9、滴加Gordon-Sweet銀氨液，作用1min。

10、蒸餾水稍洗。

11、4%中性甲醛液還原1min。

12、流水沖洗5-10min。

13、以0.2%氯化金調色1-2min。

14、蒸餾水洗。

15、固定于5%硫代硫酸鈉2min。

16、用核固紅液復染5-10min或行HE復染。

17、稍水洗。

18、常規(guī)脫水、透明，中性樹膠封固。

二、染色結果 網(wǎng)狀纖維呈黑色，胞核呈紅色（用核固紅復染）或（用蘇木精復染），膠原纖維呈黃棕色，細胞質呈淡紅色（用伊紅復染）。

彈力纖維染色

醛品紅法

一、染色程序

1、組織塊固定于4%中性甲醛液中，常規(guī)脫水、石蠟包埋和切片。

2、切片脫蠟至水。

3、用Lugol碘液處理5min。

4、稍水洗。5、5%硫代硫酸鈉處理5min。

6、流水沖洗5min。7、70%乙醇稍洗。

8、醛品紅液浸染10min。9、70%乙醇浸洗2次，每次約30s,至切片不再脫色為止。

10、稍水洗。

11、澄黃基液滴染約1s。

12、稍水洗。

14、常規(guī)脫水、透明，中性樹膠封固。

二、染色結果 彈力纖維呈深紫色，底色為不同程度的黃色。

抗酸桿菌染色

苯酚堿性品紅法

一、染色程序

1、組織塊固定于4%中性甲醛液中，常規(guī)脫水、石蠟包埋和切片。

2、切片用汽油松節(jié)油脫蠟2次，每次5-10min。

3、不經(jīng)乙醇洗，只用紗布將切片周圍余液擦干。

4、流水稍洗。

5、滴入苯酚堿性品紅液，于室溫下染15-30min。

6、流水洗去多余染液。

7、有20%硫酸水溶液分化至適當為止。（一般需1-5min）

8、用流水充分沖洗。

9、用Mayer蘇木精淺染細胞核。

10、流水沖洗10-15min。

11、胸風扇把切片吹干。隨即二甲苯透明，中性樹膠封固。

二、染色結果 抗酸（包括麻風桿菌和結核桿菌）呈鮮紅色，胞核呈藍色。

淀粉樣蛋白染色

甲醇剛果紅法

一、染色程序

1、組織塊固定于4%中性甲醛液中，常規(guī)脫水、石蠟包埋和切片。

2、切片脫蠟至水。

3、甲醇剛果紅液染10min，傾去余液。

4、用堿性乙醇急速分化約數(shù)秒，鏡下控制。

5、水沖洗5min。

6、蘇木精液淺染細胞核。

7、流水沖洗10min。

8、常規(guī)脫水、透明，中性樹膠封固。

二、染色結果 淀粉樣蛋白呈紅色，細胞核呈藍色。在偏光鏡下，淀粉樣蛋白呈現(xiàn)綠色雙折光。

脂肪染色

蘇丹Ⅲ染色法

一、染色程序

1、組織塊固定于4%中性甲醛液中。

2、冷凍切，厚6-10um，如為新鮮組織，須用40%中性甲醛液固定10min，稍水洗后，用60%乙醇稍洗。

3、蘇丹Ⅲ染液浸染1-2min。

4、70%乙醇稍洗去多余染液。

5、流水稍洗。

6、Mayer蘇木精液復染胞核，必要進用1%鹽酸-乙醇分化。

7、水洗10min，或于稀碳酸鋰水溶液中促藍。

8、阿拉伯糖膠或明膠封蓋。

二、染色結果 中性脂肪呈猩紅色、橙紅色或橙黃至橙紅色，細胞核呈藍色。

糖原染色

高碘酸-無色品紅（PAS）法。

一、染色程序

1、取新鮮薄片組織，立即用Gendre液固定6-12h或Cornoy液固定3-6h，其間可更換2次固定液，然后轉入95%乙醇。

2、無水乙醇按常規(guī)脫水透明，石蠟包埋，切片厚4-5um。

3、取兩張連續(xù)切片，分別作A和B記號，然后把B片脫蠟至水。

4、把B切片置入預熱至37℃的1%淀粉液，于37℃溫箱內消化1h，或用預熱至37℃的唾液在37℃溫箱消化30min。

5、取出切片稍水洗。

6、在消化過程中，把A片脫蠟至水。

7、在A、B兩片同時滴入0.5%高碘酸水溶液氧化5-8min。

8、流水沖洗2min，再用蒸餾水洗1次。

9、于暗處，無色品紅液加蓋染色10-20min。

10、用0.5%偏重亞硫酸鈉液滴洗2次，每次約1min。

11、流水沖洗2min。

12、1%甲基綠水溶液復染胞核3-5min，或用Mayer蘇木精液淺染細胞核（必要時用鹽酸乙醇分化，再用流水沖洗）。

13、稍水洗。

14、常規(guī)脫水、透明，中性樹膠封固。

二、染色結果 A片上的細胞質呈現(xiàn)亮紅色顆粒為陽性（顯示糖原），經(jīng)消化后B片應為陰性。

黏液染色

愛先藍（pH 2.5）法

一、染色程序

1、組織塊固定于4%中性甲醛液中，常規(guī)脫水、石蠟包埋和切片。

2、切片脫蠟至水。

3、愛先藍（pH 2.5）液染10-20min。

4、流水稍洗。

5、核固紅復染5-10min，或用沙紅染液復染2-3min。

6、稍水洗。

7、常規(guī)脫水、透明，中性樹膠封固。

二、染色結果 唾液酸黏液和弱硫酸化黏液以及一般黏液均呈藍色，各種強堿酸化黏液不著色或淡染，細胞核呈紅色。免疫組化染色（Envision System）的規(guī)范及程序

1.切片脫蠟水洗：將石蠟切片浸于二甲苯5分鐘，三次。取出切片置于100%無水乙醇中3分鐘，兩次；依次置入90%-70%各級酒精各3分鐘。取出置于蒸餾水中。

2.抗原修復(根據(jù)一抗說明而定)。

3.取出置于蒸餾水中的切片，甩掉并擦干切片上組織周圍的液體，平放于濕盒中，滴加過氧化酶阻斷劑（通常用3%的過氧化氫）于組織上避光孵育15分鐘。蒸餾水沖洗，再將切片置入TBS緩沖液中，浸泡3分鐘，三次。取出切片，甩掉并擦干切片上組織周圍的液體（組織切勿干燥），平放于濕盒中。

4.滴加50-100毫升一抗工作液于組織上，室溫孵育30分鐘。用TBS液沖洗切片。將切片置入TBS緩沖液中，浸泡5分鐘，三次。取出切片，甩掉并擦干切片上組織周圍的液體（組織切勿干燥），平放于濕盒中。

5.滴加50-100毫升A液于組織上，室溫孵育30分鐘。用TBS液沖洗切片。將切片置入TBS緩沖液中，浸泡5分鐘，三次。取出切片，甩掉并擦干切片上組織周圍的液體（組織切勿干燥），平放于濕盒中。

6.滴加Y預備好的顯色劑DAB工作液50-100微升，室溫孵育5-10分鐘，或光鏡下控制顯色。顯色完畢后，用蒸餾水沖 洗終止顯色。

7.蘇木精復染。

8.各級酒精（70%-100%）脫水，每級3分鐘。取出切片置入二甲苯5分鐘，三次。

9.用封片膠封片。

病理診斷的規(guī)范及程序

1.診斷前注意事項

1．1病理醫(yī)師進行診斷前，核對申請單和切片核查是否相符。1.2閱讀申請單上所有填寫的內容，對于不清楚的內容及時聯(lián)系送檢醫(yī)師。

1.3閱片時必須全面，不要遺漏病變。

1.4疑難病例，應由上級醫(yī)師復核，并簽署全名。1.5因特殊原因遲發(fā)報告，應向臨床醫(yī)師說明遲發(fā)的原因。1.6有科內疑難病例會診制度（2名以上高級職稱人員參與），并有相應的記錄和簽字。

2.病理學診斷表述的基本類型

2.1 Ⅰ類：檢材部位、疾病名稱、病變性質明確和基本明確的病理學診斷。

2.2 Ⅱ類：不能完全肯定疾病名稱、病變性質，或是對于擬診的疾病名稱、病變性質有所保留的病理學診斷意向，可在擬診疾病/病變名稱之前冠以諸如兵變“符合為”、“考慮為”、“傾向為”、“提示為”、“可能為”、“疑為”、“不能排除（除外）”之類的詞語。

2.3 Ⅲ類：檢材切片所顯示的病變不足以診斷為某種疾病（即不能做出Ⅰ類或Ⅱ類病理學診斷），只能進行病變的形態(tài)描述。

2.4 Ⅳ類：送檢標本應過于細小、破碎、固定不當、自溶、嚴重受擠壓（變形）、被燒灼、干涸等，無法做出病理學診斷。

病理診斷報告書寫的規(guī)范

1.病理學診斷報告書的基本內容

1.1患者的基本情況，包括病理號、姓名、性別、年齡、送檢醫(yī)師或科室（住院或門診）、住院號和門診號、送驗和收檢日期等。1.2巨檢病變和鏡下病變要點描述。1.3與病理學診斷相關技術的檢驗結果。1.4病理學診斷的描述。

1.5對于疑難病例或做出Ⅱ、Ⅲ類病理學診斷的病例，可酌情就病理學診斷及其相關問題附加：建議和注釋及討論等。1.6未經(jīng)本病理科和（或）科外病理會診的病例，可將各方病理會診意見列于該例患者的病理學診斷報告書中。2.病理學診斷報告書的書寫要求

2.1病理學診斷報告書的文字表述力求嚴謹、恰當、精練，條理和層次清楚。

2.2病理學診斷報告書應為一式二份，一份交予送檢方，另一份隨同患者的病理學檢查申請單和病理學檢查記錄單一并存檔。主檢病理醫(yī)師必須在每一份病理學診斷報告書上簽名，不能以個人印章代替簽名，不能由他人代為簽名。主檢病理醫(yī)師簽名的字跡應能辨認。

2.3手寫的病理學診斷報告書必須二聯(lián)復寫，必須文字規(guī)范、字跡清楚，不得潦草、涂改。

2.4手寫和計算機打印的病理學診斷報告書中的關鍵性文字，如“癌”、“瘤”、“ 陽性”、“陰性”和數(shù)字等，要認真核對，不得 有誤。

2.5計算機打印的圖文病理學診斷報告書提供的病變圖象要準確，具有典型（代表）性，放大倍數(shù)適當。

2.6患者的基本情況項目必須嚴格按照送檢臨床醫(yī)師填寫的文字抄寫或用計算機輸錄于病理學診斷報告書中，并認真核查無誤，簽發(fā)報告書的病理醫(yī)師和病理科的其他人員都不得改動。2.7病理醫(yī)師不得簽發(fā)虛假的病理學診斷報告書，不得向臨床醫(yī)師和患方人員提供有病理醫(yī)師簽名的空白病理學診斷報告書。細胞學診斷的規(guī)范及程序

１.直接表述性診斷：適用于穿刺標本的細胞病理學診斷報告。根據(jù)形態(tài)學觀察的實際情況，對于某種疾?。∽冏龀隹隙ㄐ裕á耦悾⒉煌潭纫庀蛐裕á蝾悾┘毎麑W診斷，或是提供形態(tài)描述性（Ⅲ類）細胞學診斷，或是告知無法做出（Ⅳ類）細胞學診斷。[參考本章第一節(jié)的八(一)項：“病理學診斷表述的基本類型”] ２.間接分級性診斷：用于查找惡性腫瘤細胞的診斷。

Ⅰ級：未見惡性細胞 Ⅱ級：查見核異質細胞 Ⅱa：輕度核異質細胞 Ⅱb：重度核異質細胞 Ⅲ級：查見可疑惡性細胞 Ⅳ級：查見高度可疑惡性細胞 Ⅴ級：查見惡性細胞細胞病理學診斷報告書的基本內容

1.患者的基本情況項目，包括病理號、姓名、性別、年齡、送檢醫(yī)院／科室（住院／門診）、住院號／門診號、送檢／收驗日期等。2.細胞病理學診斷的表述（參見上項“細胞病理學診斷報告表述的基本類型”）。

3.必要時或條件允許時，可酌情就細胞病理學診斷及其相關問題附加：①某些建議（例如進行其他有關檢查、再做活檢、病理科外病理學會診、密切隨查/隨訪等）；②注釋／討論。

4.經(jīng)過本病理科或/和科外病理會診的病例，可將各方的細胞病理學診斷意見附于該例的細胞病理學診斷報告書中。病理學診斷報告書的發(fā)送

1.病理科自接收標本至簽發(fā)該病理學診斷報告書的時間，一般為3-5個工作日，細胞病理診斷報告一般為2個工作日。

2.由于某些原因延遲取材、制片，或是進行其他相關技術檢測，不能如期簽發(fā)病理學診斷報告書時，應以口頭或書面形式告知有關臨床醫(yī)師或患方，說明遲發(fā)病理學診斷報告書的原因。

3.病理科應有專人發(fā)送病理學診斷報告書，并有接受人的簽字。4.病理科已經(jīng)發(fā)出的病理學診斷報告書被遺失時，一般不予補發(fā)；必要時，經(jīng)病理科主任同意可以抄件形式補發(fā)。

顯微鏡操作的標準化程序

1.目的

正確使用顯微鏡。

2.適用范圍

全體病理科工作人員。3.具體操作

3.1將準備觀察的切片放在載物臺上。

3.2調光：開啟顯微鏡的電源開關。

3.3對焦：先用粗調螺旋把低倍物鏡下降至載物片上6cm處，然后上升物鏡，直接看到物象，再用細螺旋把物鏡調節(jié)到清晰處。

3.4觀察：用低倍鏡觀察組織的一般結構，然后再用高倍鏡進一步觀察，必要時方使用油鏡，再低倍鏡轉至高倍鏡觀察時，只要適當轉動細調節(jié)即能看到物像。

3.5放置載物片時注意勿把蓋玻片面向下，以免用高倍鏡觀察時因對不到焦點而壓破玻片，甚至損壞鏡頭。

3.6觀察顯微鏡物像時應養(yǎng)成同時睜開雙眼的習慣，眼的觀察位置也要適當，即應放在眼點處。

3.7用畢應將顯微鏡放回木箱或用罩蓋好。

普洱市人民醫(yī)院病理科操作規(guī)范及流程

目錄

1.病理標本的驗收規(guī)范及流程 ????????1-2 2.不合格標本的處理規(guī)范與程序?????????3 3.病理標本檢查和取材規(guī)范及程序????????.4-6 4.常規(guī)石蠟包埋組織切片規(guī)范及程序???????...7-9 5.術中快速冰凍切片的規(guī)范及程序????????..10-11 6.術中快速冰凍診斷的規(guī)范及程序????????.12-13 7.特殊染色的操作規(guī)范????????????14-21 8.免疫組化染色（Envision System）的規(guī)范及程序?22-23 9.病理診斷的規(guī)范及程序?????????????24-25 10.病理診斷報告書寫的規(guī)范??????????.26-27 11.細胞學診斷的規(guī)范及程序????????????28 12.細胞病理學診斷報告書的基本內容???????????29 13.病理學診斷報告書的發(fā)送???????????.30 14.顯微鏡操作的標準化程序????????31-32

第二篇：病理科制度職責及操作規(guī)范

病理科主任（副主任）醫(yī)師崗位職責

一：資格要求

1：具有主任（副主任）醫(yī)師專業(yè)技術職務任職資格。2：具有執(zhí)業(yè)醫(yī)師資格并注冊。二：知識要求

1：精通本專業(yè)基礎理論和專業(yè)知識掌握本專業(yè)國內外發(fā)展趨勢，能夠解決疑難特殊病例。能吸收最新科研成果并應用于實踐工作。

2：借助工具書能閱讀本專業(yè)的外文資料。

3：熟練掌握計算機操作，取得計算機中級上崗證書（3—5年取得）。

4：通過繼續(xù)教育不斷提高，更新專業(yè)知識水平。三：能力要求

1：理解判斷能力：對診療過程中出現(xiàn)的各種問題做出正確的分析判斷，并妥善進行處理。

2：組織實施能力：能夠組織和開展本專業(yè)的工作，培養(yǎng)下級醫(yī)師，實施和指導本專業(yè)的科研工作。

3：業(yè)務實施能力：參加并負責簽發(fā)疑難、特殊病理報告及術中快速冰凍報告。

4：教學能力：具有承擔專題講座或講課的能力。

5：語言文字能力：具有較強的書面文字能力及口頭表達能力。

病理科主治醫(yī)師崗位職責

一：資格要求

1：具有主治醫(yī)師專業(yè)技術職務任職資格。2：具有執(zhí)業(yè)醫(yī)師資格并注冊。二：知識要求

1：熟悉本專業(yè)基礎理論和專業(yè)知識，掌握本專業(yè)國內外發(fā)展趨勢，能吸收最新科研成果并應用于實踐工作。2：借助工具書能閱讀本專業(yè)的外文資料。

3：熟練掌握計算機操作，取得計算機中級上崗證書（3—5年取得）。

4：通過繼續(xù)教育不斷提高，更新專業(yè)知識水平。三：能力要求

1：理解判斷能力：對診療過程中出現(xiàn)的各種問題做出正確的分析判斷，并進行處理。

2：組織實施能力：能夠實施開展本專業(yè)的業(yè)務工作，代教下級醫(yī)師，協(xié)助參與本專業(yè)的科研工作。

3：業(yè)務實施能力：能夠獨立簽發(fā)常見病病理報告及部分疑難特殊病理報告。

4：語言文字能力：具有一定的書面文字能力及口頭表達能力。

病理科住院醫(yī)師崗位職責

一：資格要求

1：具有住院醫(yī)師專業(yè)技術職務任職資格。2：具有執(zhí)業(yè)醫(yī)師資格并注冊。

3：經(jīng)過1年以上的業(yè)務進修或培訓并合格。二：知識要求

1：掌握本專業(yè)基礎理論和專業(yè)知識，了解國內外發(fā)展趨勢，能吸收最新科研成果并應用于實踐工作。2：借助工具書能閱讀本專業(yè)的外文資料。

3：熟練掌握計算機操作，取得計算機中級上崗證書（3—5年取得）。三：能力要求

1：理解判斷能力：對診療過程中出現(xiàn)的各種問題做出正確的分析判斷。

2：業(yè)務實施能力：負責活檢的初檢工作，對于常見一般病例可獨立簽發(fā)病理報告。

3：語言文字能力：具有一定的書面文字能力及口頭表達能力。

病理科主任（副主任）技師崗位職責

一：資格要求

1：具有主任（副主任）技師專業(yè)技術職務任職資格。二：知識要求：

1：精通本專業(yè)基礎理論和專業(yè)知識，掌握本專業(yè)國內外發(fā)展趨勢并能夠應用于工作實踐。

2：借助工具書能閱讀本專業(yè)的外文資料。

3：熟練掌握計算機操作，取得計算機中級上崗證書（3—5年取得）。

4：通過繼續(xù)教育不斷提高，更新專業(yè)知識水平。三：能力要求

1：理解判斷能力：對診療過程中出現(xiàn)的各種問題做出正確的分析判斷，并妥善進行處理。

2：組織實施能力：能夠組織和指導開展本專業(yè)的業(yè)務科研工作，培養(yǎng)下級技師。

3：業(yè)務實施能力：熟練掌握本專業(yè)各種儀器的操作及維護。4：教學能力：具有承擔本專業(yè)專題講座或講課的能力。5：語言文字能力：具有較強的書面文字能力及口頭表達能力。

病理科主管技師崗位職責

一：資格要求

1：具有主管技師專業(yè)技術職務任職資格。二：知識要求

1：熟知本專業(yè)基礎理論和專業(yè)知識，掌握本專業(yè)國內外發(fā)展趨勢。2：借助工具書能閱讀本專業(yè)的外文資料。

3：熟練掌握計算機操作，取得計算機中級上崗證書（3—5年取得）。

4：通過繼續(xù)教育不斷提高，更新專業(yè)知識水平。三：能力要求

1：了解判斷能力：對診療過程中出現(xiàn)的各種問題做出正確的分析判斷，并妥善進行處理。

2：組織實施能力：能夠開展本專業(yè)的業(yè)務工作，代教下級技師，參與本專業(yè)的科研工作。

3：業(yè)務實施能力：熟練掌握本專業(yè)各種儀器的操作及維護。4：語言文字能力：具有一定的書面文字能力及口頭表達能力。

病理科技師崗位職責

一：嚴格要求

1：具有技師專業(yè)技術職務任職資格。二：知識要求

1：掌握本專業(yè)基礎理論和專業(yè)知識，了解本專業(yè)國內外發(fā)展趨勢。2：借助工具書能閱讀本專業(yè)的外文資料。

3：熟練掌握計算機操作，取得計算機中級上崗證書（3—5年取得）。三：能力要求

1：理解判斷能力：對診療過程中出現(xiàn)的各種問題做出正確的分析判斷。

2：業(yè)務實施能力：熟練掌握本專業(yè)各種儀器的操作。3：語言文字能力：具有一定的書面文字能力及口頭表達能力。

病理科 2010年一月二十日

病理科一般工作制度

1：工作人員必須嚴格遵守醫(yī)院及科內的工作制度，服從管理，嚴格遵守各項操作規(guī)程。

2：每位工作人員必須履行自己的職責，精神飽滿，熱情、耐心、負責的接待每位患者。

3：堅持每月定期或不定期的召開科務會，討論本科發(fā)展及解決科室中存在的問題。

4：在不影響工作的前提下，堅持每月1-2次的業(yè)務學習活動，以提高工作人員的業(yè)務水平。

5：全科人員在發(fā)揮現(xiàn)有設備、技術力量的前提下，努力開展新技術、新項目，為患者提供優(yōu)質的服務。

6：每月開展質量控制的自查工作、并將檢查結果與經(jīng)濟效益掛鉤。7：每年安排1-2人進修學習、培訓（包括短期學習班、學術會議），不斷提高全體工作人員的診斷、技術水平。8：做好各項設備的使用保養(yǎng)記錄，保證機器正常運行。

病理科 2010年一月二十日

病理診斷報告書類別

病理診斷表述的基本類型

Ⅰ類：檢材部位／疾病名稱／病變性質明確和基本明確的病理診斷。

Ⅱ類：不能完全肯定疾病名稱/病變性質，或是對于擬診的疾病名稱／病變性質有所保留的病理診斷意向，可在擬診疾?。∽兠Q之前冠以諸如病變可“符合為”、“考慮為”、“傾向為”、“提示為”、“可能為”、“疑為”、“不能排除（除外）”之類的詞語。

Ⅲ類：檢材切片所顯示的病變不足以診斷為某種疾?。床荒茏龀觫耦惢颌蝾惒±碓\斷），只能進行病變的形態(tài)描述。

Ⅳ類：送檢標本因過于細小、破碎、固定不當、自溶、嚴重受擠壓（變形）、被燒灼、干涸等，無法做出病理診斷。

病理科 2010年一月二十日

病理診斷室工作制度

1.主檢醫(yī)師接收切片時，應核對切片數(shù)后簽字。

2.主檢醫(yī)師認真閱讀申請單，必要時與有關臨床醫(yī)師了解更詳細臨床信息，細致全面的閱片，寫出初步診斷。

3.主檢醫(yī)師不能明確診斷的病例交上級醫(yī)師診斷，必要時科內討論，提出處理意見。

4.疑難病例應用輔助診斷技術，如特染、免疫組化等協(xié)助診斷。5.病理報告交圖文報告室打印，仔細核對后簽名，一般報告四個工作日發(fā)出。

病理科 2010年一月二十日

術中冰凍切片報告制度

1.值班醫(yī)師接受標本，并逐項查對姓名、科別、住院號及標本是否相符，立即巨檢及取材，如有疑問請上級醫(yī)師指導取材。必要時與手術醫(yī)師直接聯(lián)系。

2.技術人員及時切片，切片厚5um。染色后送主檢醫(yī)生。3.一般冰凍報告由高年資主治醫(yī)師簽發(fā)，遇有下列情況之一者，應請上級醫(yī)師會診，共同簽發(fā)。① 所有惡性腫瘤 ② 交界性病變 ③ 良惡性難定的病變 ④ 病理診斷與臨床不符

⑤ 其它疑難病變，主檢醫(yī)師不能明確診斷 4.冰凍報告由傳真發(fā)出，一般情況下小于30分鐘。5.報告發(fā)出后，技術人員及時將冰凍組織固定。

病理科 2010年一月二十日

病理科會診制度

一、科內會診

如有下述情況之一者，由具有高級職稱的病理醫(yī)師會診后簽發(fā)報告：

1.主檢醫(yī)師不能明確診斷。2.臨床與病理診斷不符。3.初次診斷為惡性腫瘤的病例。

4.一組病理醫(yī)師中兩人或多人的診斷意見不一致。5.患者要求得到另外一位醫(yī)師的意見。6.臨床醫(yī)師要求傾聽另外一位醫(yī)師的意見。

二、科外（院外）會診

接受外院個人、單位送檢的病理切片會診，由具有高級職稱的病理醫(yī)師簽發(fā)會診報告。如遇疑難病例，會診醫(yī)師不能明確診斷時，由科內高級職稱的醫(yī)師討論后簽發(fā)會診報告。

病理科 2010年一月二十日

病理切片質控制度

病理切片質量高低，對病理診斷起著重要的作用。因此，努力提高病理切片質量，尤為重要?？剖乙扇「鞣N措施，使切片優(yōu)良率達到91%以上。特作如下要求：

1.每日主班醫(yī)師閱片時，要對當日切片存在問題及時向主班技師告知，找出存在問題的原因，及時糾正。2.3.4.對不合格切片及時重切糾正。脫水機的各種試劑每周更換一次。

每月由技師、醫(yī)師共同對病理切片進行抽查、評分，找出問題。并進行科內小結。

病理科 2010年一月二十日

病理診斷質控制度

為持續(xù)提高病理診斷準確率及病理醫(yī)師病理診斷水平，減少差錯發(fā)生，根據(jù)有關標準力爭達到活檢病理診斷準確率≥99.5％，細胞學病理診斷準確率≥85％，冰凍切片與石蠟切片診斷符合率≥95%，制定如下措施：

① 病理學診斷報告書一般應由具有執(zhí)業(yè)資格的注冊主治醫(yī)師以上（含主治醫(yī)師）的病理醫(yī)師簽發(fā)，常見病的診斷也可酌情準予資格相當?shù)母吣曩Y病理住院醫(yī)師簽發(fā)。② 診斷報告書上應有主檢醫(yī)師親筆簽名，主檢醫(yī)師難以明確診斷的應行科內會診或院外會診。

③ 每月由專人統(tǒng)計分析院外會診意見、手術前后的診斷結果，統(tǒng)計診斷的符合率，分析不符原因，制定改進措施。④ 每月由專人統(tǒng)計分析有活檢對照的細胞學的診斷結果，統(tǒng)計診斷的符合率，分析不符原因，制定改進措施。⑤ 每月由專人統(tǒng)計冰凍診斷與術后石蠟切片診斷符合率，分析不符原因，制定改進措施。

⑥ 對少數(shù)經(jīng)會診不能明確診斷的，應力爭做到病人隨訪。

病理科 2010年一月二十日

病理質控制度

為持續(xù)提高病理診斷準確率及病理醫(yī)師病理診斷水平，減少差錯發(fā)生，根據(jù)有關標準力爭達到病理切片優(yōu)良率≥91%，活檢病理診斷準確率≥99.5％，細胞學病理診斷準確率≥85％，冰凍切片與石蠟切片診斷符合率≥95%，制定如下措施：

1.每月由技師、醫(yī)師共同對病理切片進行抽查評分，找出存在問題，制定改進措施并糾正。

2.病理學診斷報告書一般應由具有執(zhí)業(yè)資格的注冊主治醫(yī)師以上（含主治醫(yī)師）的病理醫(yī)師簽發(fā)，常見病的診斷也可酌情準予資格相當?shù)母吣曩Y病理住院醫(yī)師簽發(fā)。

3.診斷報告書上應有主檢醫(yī)師親筆簽名，主檢醫(yī)師難以明確診斷的應行科內會診或院外會診。

4.每月由專人統(tǒng)計分析院外會診意見、手術前后的診斷結果，統(tǒng)計診斷的符合率，分析不符原因，制定改進措施。5.每月由專人統(tǒng)計分析有活檢對照的細胞學的診斷結果，統(tǒng)計診斷的符合率，分析不符原因，制定改進措施。

6.每月由專人統(tǒng)計冰凍診斷與術后石蠟切片診斷符合率，分析不符原因，制定改進措施。

7.對少數(shù)經(jīng)會診不能明確診斷的，應力爭做到病人隨訪。8.科內每月召開一次質控小組會議進行總結。

圖像分析室工作制度

1.接收標本，認真核對病人姓名、科室與標本一致后并簽收登記。

2.認真執(zhí)行物價收費標準，負責劃價扣費。

3.負責病理申請單錄入，病理診斷錄入及圖像分析、采集，認真核對無誤后打印報告。

4.報告打印后審查無差錯后交醫(yī)師簽發(fā)并登記。5.及時將資料裝訂后歸檔。

6.負責查詢病理結果。

病理科 2010年一月二十日

病理科取材室工作制度

1.病理技術人員負責接收標本，接受標本時認真核對申請單及送檢標本，填寫項目是否一致：姓名、科室、床號、住院號、標本類型及數(shù)量。

下列情況不予接收：

① 申請單內容與送檢標本不符合 ② 標本上無有關標志，如姓名、科室等

2.技術人員將申請單編號并將標本按順序排列好等待取材。3.病理醫(yī)師負責巨檢、取材。取材前應再次核對標本袋上的標志，如病人姓名、科室等。巨檢內容由技術人員記錄。

4.取材后，將標本固定放好，已備補取材。報告發(fā)出后一周，如臨床無疑問，將標本清理交專門部門處理。

5.每日取材完畢后，認真清洗取材臺基各種器械，關閉門窗、水電等。

6.每周六集中紅外線消毒。

病理科 2010年一月二十日

細胞學室穿刺規(guī)范

1、先由臨床醫(yī)師提出申請，穿刺醫(yī)師在詳細了解病人病史及一般情況后決定是否進行穿刺。

2、一般穿刺為體表明顯的、不在危險部位的病變、病人一般情況可以耐受的。

3、在仔細檢查病人后，確定穿刺部位，做好標記，給病人解釋具體穿刺中可能出現(xiàn)的問題后，征得病人或家屬同意后準備穿刺。

4、準備好穿刺用品，穿刺部位消毒后，依無菌操做進行穿刺。

5、穿刺過程中避開明顯血管，平行進針，達到部位后反復抽吸，穿刺后按壓止血。

6、涂片要求要盡量薄，標記號碼，及時固定涂片。

病理科 2010年一月二十日

技術室工作制度

1.技術人員每日上午負責組織包埋，包埋時應對號對蠟塊，嚴防差錯發(fā)生。

2.嚴格遵守切片操作規(guī)程，切片厚4~5um。3.染色時統(tǒng)一使用自動染色機程序。4.封片時注意防止氣泡產(chǎn)生。

5.貼上標簽寫上編號，切片編號核對后交主檢醫(yī)師并簽字。6.每日清理干凈各種機器及桌面。

7.根據(jù)工作量的情況及時更換各種液體及染液。8.主班下班前關好水電、門窗，以防意外發(fā)生。9.負責各機器設備的維護。

病理科 2010年一月二十日

細胞學室工作制度

1.接收院內外送檢的細胞學標本并簽收，認真核對病人姓名、科室及標本與申請單是否一致。

2.針吸細胞學穿刺時，做好消毒并按規(guī)范操作。

3.編號后及時離心、涂片、固定、蘇木素伊紅染色后，封片編號。

4.閱片前認真閱讀申請單各項內容，仔細閱讀全片內容，結合臨床寫出診斷報告，交圖文報告室打印后簽字發(fā)出。5.剩余各種標本放冰箱保存，等報告發(fā)出后交保潔部門集中處理，嚴防標本造成環(huán)境污染。

6.報告發(fā)出后，及時將涂片及申請單歸檔。7.每天下班前，關好水電及門窗。

病理科 2010年一月二十日

病理科資料管理制度

1、常規(guī)活檢、快速冰凍、細胞病理學檢查、尸檢等的文字資料、非文字資料（蠟塊、切片、涂片等）以及其他相關資料均為有價值的醫(yī)學資料，應妥為保存。

2、由專人管理。

3、活體組織檢查剩余標本在報告發(fā)出后保存一周。

4、報告申請書每100份為一本由圖文報告室主班技術員檢查核對后裝訂成冊。

5、蠟塊管理由技術室負責，每天在切片結束后按順序歸檔，如需特染、免疫組化、深切，在制好切片后及時歸回原位。

6、切片的管理由診斷組醫(yī)師負責，當班醫(yī)師在閱片后按前后順序歸檔，每月有一名醫(yī)師負責按時統(tǒng)一歸入資料庫，歸庫時應仔細檢查核對無誤。

7、免疫組化申請單由免疫組化室技術員負責整理裝訂。

8、細胞學涂片除痰陰性涂片外應全部保存，送檢體液標本應保存在冰箱內，直至報告發(fā)出2-3天。

9、出于學習或研究的目的，歸檔后的切片及文字資料需要調閱，調閱時應仔細登記時間、切片號（病理號）、歸還與否、是否損壞。

10、技術組組長定期抽查各種資料保管情況，發(fā)現(xiàn)問題應及時處理及處罰。

病理科 2010年一月二十日

切片借閱制度

1、切片借閱由科室安排專人負責，其他人不得私自借出。

2、由患者或家屬提出要求和目的，并出示相關身份證明及復印件。

3、負責人調閱切片及相關資料，由醫(yī)師審核后借出。

4、登記借閱切片號、切片數(shù)量并由借片人簽名。

5、借閱期最長1月，為防止損壞、丟失，應依切片種類及數(shù)量收取押金。

6、歸還切片時借閱人歸還切片及押金收據(jù)并提供其他醫(yī)院的診斷。

7、免疫組化及細胞學涂片因無法重復制片，確需借閱的應征得科主任同意后方可。

病理科 2010年一月二十日

尸檢工作制度

1、尸檢應由臨床醫(yī)師提出申請，死者家屬同意并簽字，填寫申請單，申請單內所有項目應詳細填寫并簽字，經(jīng)醫(yī)務部批準，方為有效。并由申請人辦理有關手續(xù)后，及時送交病理科。

2、檢驗的尸體應在死亡2小時后進行，在死亡2小時后則應及早進行，以免尸體發(fā)生過多的死后變化，影響病理診斷結果。如有尸體腐敗現(xiàn)象，不宜解剖。

3、檢驗的尸體涉及法律案件者，原則上應由法醫(yī)剖驗。如遇特殊情況，應受司法機關的委托，并提供死者生前的社會情況調查，報院醫(yī)務部批準后，方可接受。最后將尸檢報告交委托單位，不與死者家屬發(fā)生直接聯(lián)系。

4、對有醫(yī)療糾紛的病例，臨床應提供詳細的病史及其它有關情況，并了解死者親屬的意見。必要時與有關人員進行討論，提出解剖目的，使剖驗人員心中有數(shù)，以便作出符合客觀實際的診斷。解剖結果，以尸檢報告書為準，并將此報告交院醫(yī)務部。

5、病理醫(yī)師接到尸檢申請后，應立即登記編號，及早進行剖驗。尸檢前必須核對死者姓名，年齡，性別無誤后，方可進行。同時詳細閱讀死者的病史和臨床醫(yī)師提出的要求，以加強尸檢的針對性。

6、尸檢同時，應安排相關人員對整個解剖過程進行記錄，對不同臟器、不同病變進行詳細描述，完成尸檢記錄，一般在一個月內經(jīng)組織學檢查后發(fā)出最后的尸檢報告。報告發(fā)出后，全部資料及時歸檔，并清理大體標本，除保留有科研，教學價值外，一律交后勤部焚化處理。

病理科 2010年一月二十日

切片機操作規(guī)程

1.先切片機鎖扣打開。

2.將切片刀放置在刀架上，調整好角度。3.將石蠟組織塊放置在蠟塊夾中固定好。4.正常進行正常切片。

5.完成切片后，鎖緊鎖扣（在切片過程中動作要輕，均勻）。6.拆開各部件進行徹底清潔。7.先切片機鎖扣打開。

8.將切片刀放置在刀架上，調整好角度。9.將石蠟組織塊放置在蠟塊夾中固定好。10.正常進行正常切片。

11.完成切片后，鎖緊鎖扣（在切片過程中動作要輕，均勻）。12.拆開各部件進行徹底清潔。

病理科 2010年一月二十日

染色機操作過程

1.打開電源開關。

2.按“F1”啟動染色程序。3.打開水龍頭開關。4.揭開染色盒盒蓋。

5.將需染色切片放置備染盒中按“LOAD”。6.染色完畢后取出切片，按“EXIT”。7.按“F4”退出程序。8.關閉電源開關。

病理科 2010年一月二十日

自動染色機染色程序

1.烘片1分鐘

11.水洗10秒 2.二甲苯Ⅰ脫蠟5分鐘

3.二甲苯Ⅱ脫蠟5分鐘

4.二甲苯Ⅲ脫蠟5分鐘

5.無水乙醇5秒

6.無水乙醇5秒

7.95％酒精5秒

8.80％酒精5秒

9.水洗10秒

10.蘇木素染色10分鐘

2010

12.分化15秒 13.水洗返蘭1分鐘 14.伊紅染色15秒 15.水洗5秒 16.80％酒精5秒 17.95％酒精5秒 18.無水乙醇5秒 19.無水乙醇5秒 20.染色程序結束送EXIT

病理科 年一月二十日

冰凍機操作程序

1.在開機狀態(tài)下先解除操作臺的鎖定，打開冰凍機蓋。2.開啟照明燈。打開手柄鎖，搖動手柄檢查其工作狀態(tài)。3.檢查切片臺是否固定，將切片固定于刀架上。4.將已凍好的組織固定于切片機頭上進行切片。

5.切片完備后鎖定操作臺及手柄鎖，關照明燈，關冰凍機蓋。

病理科 2010年一月二十日

EnVision兩步法免疫組化染色步驟

1、石蠟切片烤片12小時，脫蠟至水。

2、高壓修復：將高壓鍋內的EDTA液燒開后，放入切片加蓋，待壓力閥吹起后，定時3分鐘，開蓋自然放涼。

3、蒸餾水洗2遍。

4、放入3%H2O2溶液中，室溫下孵育10分鐘。

5、蒸餾水沖洗2遍。

6、PBS浸洗3次，每次5分鐘（3×5/）。

7、擦去多余PBS液，每張切片上滴加一抗，放入4℃冰箱過夜。

8、PBS浸洗3次，每次5分鐘（3×5/）。

9、擦去多余PBS液，滴加二抗，室溫下孵育45分鐘。

10、PBS浸洗3×5/。

11、加DAB顯色液，顯微鏡下觀察，陽性部位顯棕色，背景無著色，終止顯色。

12、自來水沖洗，蘇木素復染2—5分鐘、分化液分化、脫水、透明、中性樹膠封片。

脫水機操作程序

1.檢查脫水機內各種液體及石蠟是否充分。2.將脫水機調整至起始位置。

3.將放置組織籃固定于脫水機上，降入液體缸內。4.選擇已設置好的程序1，進行組織標本處理。5.次日停止程序，升起組織籃，將其取下復位。

病理科 2010年一月二十日

圖文報告系統(tǒng)操作流程

1． 檢查電源后打開電腦。2． 點擊“圖文報告系統(tǒng)”。

3． 點擊“報告登錄”鍵進行病理報告錄入。4． 點擊“改一般信息”鍵對已發(fā)報告進行輸入。5． 點擊“攝像采集”鍵進行病理切片的采集、分析。6． 認真核對無誤后點擊“打印”鍵進行報告打印。7． 下班前退出“圖文報告系統(tǒng)”并關機，關電源。

病理科 2010年一月二十日

電子天平操作規(guī)程

1.打開電源開關。2.打開天平開關。3.校正到“0”。4.進行藥物稱量。

5.稱量完畢后，關閉開關及電源。

病理科 2005年8月

尼康顯微鏡80i熒光使用操作注意事項

1.開機前檢查顯微鏡電源和熒光汞燈電源是否關閉，在做熒光觀察時最好關閉顯微鏡主機電源。

2.開機預熱：落射熒光汞燈電源開啟后，需預熱最少5分鐘再進行激發(fā)。

3.使用中根據(jù)熒光的強弱選擇不同的減光片。

4.使用激發(fā)后，不能少于30分鐘再停止激發(fā)。在關閉了激發(fā)光源后，若要再次使用，時間間隔不能少于30分鐘。

5.經(jīng)常觀察汞燈位置是否居中（通過對中望遠鏡進行觀察），如有偏差進行調節(jié)至對中。

6.顯微鏡使用完畢后，依次關閉電源開關，等機器冷卻一段時間后蓋上防塵罩。

病理科 2006年12月

尼康顯微鏡50i圖像采集系統(tǒng)操作流程

1.檢查電源后打開電腦。2.打開圖像傳輸系統(tǒng)按鈕/ 3.打開顯微鏡。

4.雙擊“圖像采集系統(tǒng)”。5.調整“圖像采集系統(tǒng)”設置。6.拍攝并保存圖像。

7.拍攝完畢，退出“圖像采集系統(tǒng)”，并關機。8.關閉顯微鏡。

9.關閉“圖像傳輸系統(tǒng)”。

10.關電源，等機器冷卻一段時間后蓋上防塵罩。

病理科 2006年12月

試劑配制方法

一、蘇木素染液的配制方法：

A液：蘇木素1g，無水酒精10ml;B液：硫酸鋁鉀20克，蒸餾水200ml;兩液分別溶解后混合，加熱煮沸后，徐徐加入紅色氧化汞0.5g，然后將染液迅速冷卻后過濾使用，使用前每100ml加入冰醋酸4ml。

一、伊紅染液的配制方法（一般濃度為0.25~1%）：

伊紅0.5g，蒸餾水100ml，先用20ml蒸餾水溶解伊紅，全部溶解后加入80ml蒸餾水，最后加一滴冰醋酸。

二、分化液的配制方法：

鹽酸0.5ml，70%酒精100ml。

病理科 2005年6月

腎穿刺活檢染色操作常規(guī)

（一）一、常規(guī)染色

蘇木素——伊紅常規(guī)染色

注：石蠟切片伊紅必須染夠2分鐘。

二、特殊染色

（一）PAS（periodic acid shiff reaction）染色1、1%過碘酸10分鐘；

2、蒸餾水水洗5分鐘；

3、shiff 氏液40分鐘，觀察；

4、蒸餾水水洗；

5、蘇木素復染；

6、常規(guī)脫水、透明、封片。

（二）Masson染色 染色液配制：

1、Regnd氏蘇木素

蘇木素

95%酒精

甘油

雙蒸水2、0．2%酸性水

冰醋酸

蒸餾水

3、甲液（分析純）

麗春紅

酸性復紅

冰醋酸

蒸餾水

4、乙液（1%磷鉬酸）

磷鉬酸

蒸餾水

5、丙液（苯胺蘭液）

苯胺蘭

冰醋酸

蒸餾水

操作方法：

1、蘇木素

2、甲液

3、蒸餾水水洗；

1g

10ml

80ml

0.2ml 100ml 0.7g

0.3g

1ml

100ml

1g 100ml 2g 1ml 980ml

5-10分鐘；

20分鐘；

10ml

4、分化于乙液

10分鐘；

5、勿水洗直接入丙液

30秒鐘；

6、蒸餾水水洗；

腎穿刺活檢染色操作常規(guī)

（二）7、酸化液

5分鐘； 8、95%乙醇分化、快速脫水、透明、封固。

（三）PASM染色 染液配制

六胺銀染液：

2%硝酸銀水溶液

ml 6%六次甲基四胺（烏洛托品）

25ml 5%硼砂（四硼酸鈉）

2ml 注：四硼酸鈉易結晶，事先應全部溶解。操作方法：

1、1%過碘酸

10分鐘

2、蒸餾水水洗3、5%鉻酸水溶液

40分鐘

4、蒸餾水水洗

5、六胺銀溶液60℃ 40分鐘（20分鐘后

每5分鐘觀察一次）

6、蒸餾水水洗7、0．2%氯化金水溶液

1-2分鐘

8、蒸餾水水洗9、5%硫代硫酸鈉水溶液

1-2分鐘

10、蒸餾水水洗

11、蘇木素復染、透明、封固。

（四）PASm+Masson套染

1、上接PASm第9步，水洗；

2、甲液

2分鐘；

3、蒸餾水水洗；

4、乙液

10分鐘；

5、勿水洗直接入丙液

30分鐘；

6、蒸餾水水洗入酸化液

5分鐘；

7、95%乙醇分化、快速脫水、透明、封固。

離心機操作規(guī)范

1、將液體標本分裝入離心管中，用天平平衡后對稱地放入離心管托架內。

2、蓋上離心機蓋，設定時間為5分鐘，轉速為2000轉/分，按下“開始”鍵后離心機開始工作。

3、待離心機完全停止運轉后，方可關閉電源，打開離心機蓋，取出標本，蓋好離心機蓋。

4、每日清潔離心機。

生物光學顯微鏡操作規(guī)程

顯微鏡屬于精密光學儀器，為了保證顯微鏡系統(tǒng)正常的發(fā)揮功能，特制定本規(guī)程。顯微鏡由專人使用，專人負責日常維護、保養(yǎng)。任何人未經(jīng)許可，不得調試該設備。

顯微鏡系統(tǒng)的操作步驟及日常維護、保養(yǎng)注意事項如下：

一、顯微鏡部分

1、去掉防塵罩，打開電源。

2、將試樣置于載物臺墊片，調整粗/微調旋鈕進行調焦，直到觀察到的圖像清晰為止。

3、調整載物臺位置，找到關心的視場，進行金相分析。

二、計算機及圖像分析系統(tǒng)

將顯微鏡上的觀察/照相切換旋鈕調至位置，顯微鏡里觀察到的信息便轉換到視頻接口和攝像頭，打開計算機，啟動圖象分析軟件，即可觀察到來自顯微鏡的實時的圖像，找到關心的視場后將其采集、處理。

三、日常維護、保養(yǎng)及注意事項

為保證系統(tǒng)的使用壽命及可靠性，注意以下事項：

1.試驗室應具備三防條件：防震（遠離震源）、防潮（使用空調、干燥器）、防塵（地面鋪上地板）；電源：220V+-10%,50HZ溫度：0-40℃ 2.調焦時注意不要使物鏡碰到試樣，以免劃傷物鏡。3.當載物臺墊片圓孔中心的位置遠離物鏡中心位置時不要切換物鏡，以免劃傷物鏡。

4.亮度調整切忌忽大忽小，也不要過亮，影響燈泡的使用壽命，同時也有損視力。

5.所有（功能）切換，動作要輕，要到位。6.關機時要將亮度調到最小。

7.非專業(yè)人員不要調整照明系統(tǒng)（燈絲位置燈），以免影響成像質量。8.更換鹵素燈時要注意高溫，以免灼傷；注意不要用手直接接觸鹵素燈的玻璃體。

9.關機不使用時，將物鏡通過調焦機構調整到最低狀態(tài)。

10.關機不使用時，不要立即該蓋防塵罩，待冷卻后再蓋，注意防火。11.不經(jīng)常使用的光學部件放置于干燥皿內。

12.非專業(yè)人員不要嘗試擦物鏡及其它光學部件。目鏡可以用脫脂棉簽蘸1:1比例（無水酒精：乙醚）混合液體甩干后擦拭，不要用其他液體，以免損傷目鏡。

病理檢查服務項目目錄

1、局部切除組織活檢檢查與診斷

2、內鏡組織活檢檢查與診斷

3、手術標本檢查與診斷

4、骨髓組織活檢檢查與診斷

5、穿刺組織活檢檢查與診斷

6、特殊染色：

PAS染色 VG染色 Masson染色 剛果紅染色 抗酸染色

7、普通病理會診

8、細胞學診斷

病理科

2010年1月20日

第三篇：病理科免疫組織化學技術員培訓及技術操作規(guī)范

題目：病理科免疫組織化學技術員培訓及技術操作規(guī)范 市一—病理科—30 生效日期：2012年1月1日 版本號1.0 修改日期： 頁碼1/13

病理科免疫組織化學技術員培訓及技術操作規(guī)范

一、病理科免疫組織化學技術員培訓規(guī)范：

凡新入我科的病理技術員均需進行免疫組化理論知識的學習、培訓，經(jīng)考核合格、具備病理技術員技士資質后方能從事免疫組織化學染色。

二、病理科免疫組織化學染色操作規(guī)范 1.免疫組織化學染色前的準備事項(一)組織切片的制備

常規(guī)切片脫蠟至水（組織固定需用10%中性甲醛）(二)抗體的選擇、稀釋和保存

（1）選擇抗體應先了解其反應譜和適用條件〔包括適用切片(石蠟切片抑或冷凍切片)、稀釋度和溫育時間等〕。

（2）對于未曾使用過的新抗體，應按照有關說明書的提示，以幾個不同的稀釋度對適宜檢材(已知陽性切片/涂片)進行預試驗;根據(jù)染色陽性表達的程度和檢材背景著色程度，確定用于染色的最適稀釋度（3）抗體的原液應于分裝后置于一20℃冷室中保存，切勿反復凍存(以免效價 降低)。（4）抗體的工作液可置于4℃冰箱中保存。（5）抗體的稀釋。

(1)一般用0.01M PBS(生理鹽水磷酸鹽緩沖液)，pH值7.2。(2)或用0.05M TBS(生理鹽水三經(jīng)基氨基甲烷緩沖液)，pH值7.6。(3)必要時可按需要加適量小牛血清清蛋白。(三)被檢測組織內抗原的修復

（1）經(jīng)4%中性甲醛之類含醛基固定劑固定的組織，其切片中的抗原決定簇因醛的交聯(lián)作用而被封閉，從而影響抗原一抗體反應。進行免疫組織化學染色前，對于組織切片進行抗原修復處理，會使組織中的固有抗原盡量多地暴露出來，提升了大部分檢測抗體的陽性率和反應強度。有的抗體不需要進行抗原修復。應按抗體試劑說明書的提示決定是否進行被檢測組織內的抗原修復。（2）抗原修復緩沖液。

(l)一般為0.01M檸檬酸緩沖液(2.1g檸檬酸溶于100ml蒸餾水中，用2M NaOH調節(jié)pH值至6.0)。(2)有些抗體需要特殊修復緩沖液，如高PH值的EDTA(50mM Tris.，10mM EDTA，pH9.0)，或商品化的該高題目：病理科免疫組織化學技術員培訓及技術操作規(guī)范 市一—病理科—30 生效日期：2012年1月1日 版本號1.0 修改日期： 頁碼2/13

pH修復液等。

（3）抗原修復的常用方法。(l)胰蛋白酶消化法: ①組織切片脫蠟、水化。

②滴加一滴0.1%胰蛋白酶液于組織切片上。

③37℃下溫育20-40min(溫育時間取決于組織經(jīng)4%中性甲醛固定時間的長短和被檢測抗原)。

④蒸餾水沖洗，終止反應。

⑤阻斷內源性過氧化物酶。

⑥進行免疫組織化學染色。（配制0.1%胰蛋白酶液時，應將0.1g胰蛋白酶溶于0.1%無水氯化鈣水溶液(pH值7.8)中。）

（2)胃蛋白酶消化法: ①組織切片脫蠟、水化.②滴加胃蛋白酶工作液于組織切片上。

③37℃下溫育10-30min(一般為10min，可延至30min，取決于組織經(jīng)4%中性甲醛固定時間的長短).④浸人蒸餾水，終止反應。

⑤進行免疫組織化學染色。用1%胰蛋白酶液37℃下處理20min。(應以 0.1M HCI配制胃蛋白酶工作液。過度的胃蛋白酶消化會使組織結構破壞、切片 脫落。)（3)微波修復抗原法: ①組織切片脫蠟、水化(硅化玻片或經(jīng)防脫片膠處理的玻片)。

②將組織切片置于容器(塑料盒或玻璃缸)中，并向其中加人抗原修復液 200ml，蓋上具有小孔的蓋子。

③將該容器置于微波爐(705-800W)中央加熱(95℃)5min，2次(于兩次之間，應向容器中添加蒸餾水50ml，嚴防組織切片干燥)。

④將該容器移出微波爐，置于室溫下冷卻15-20min。

⑤蒸餾水沖洗。

⑥阻斷內源性過氧化物酶，而后將切片置于蒸餾水中。

⑦用TBS或 PBS液沖洗。

⑧進行免疫組織化學染色。(4)熱水浴法: 題目：病理科免疫組織化學技術員培訓及技術操作規(guī)范 市一—病理科—30 生效日期：2012年1月1日 版本號1.0 修改日期： 頁碼3/13

①組織切片脫蠟、水化(硅化玻片或經(jīng)防脫片膠處理的玻片)。

②向裝組織切片的容器加人足量(例如200ml)抗原緩沖液，置于水浴鍋中，加熱至95-99℃(不沸騰)預熱。

③將組織切片插人已預熱的容器內，溫育20-40min。

④將該容器由微波爐移出，置于室溫下冷卻20min。⑤室溫下，用TBS、PBS或水洗。

⑥蒸餾水沖洗。

⑦阻斷內源性過氧化物酶，而后將切片置于蒸餾水中。

⑧用TBS或PBS液沖洗。

⑨進行免疫組織化學染色。

（5)壓力鍋法: ①組織切片脫蠟、水化(硅化玻片或經(jīng)防脫片膠處理的玻片)。

②向4-5.5L的不銹鋼壓力鍋中加人抗原修復緩沖液(約為鍋容積的2/3)，不加閥情況 下加熱至沸騰。

③將組織切片插放于金屬切片架上，并置于壓力鍋內沸騰的緩沖液中。

④加閥情況下，將組織切片加壓2min。

⑤壓力鍋自行冷卻或以流水冷卻減壓后，持續(xù)20min。

⑥將冷卻后的切片取出，蒸餾水沖洗后，置于TBS或PBS液中(以免組織切片干燥)。

⑦蒸餾水沖洗。

⑧阻斷內源性過氧化物酶，而后將切片置于蒸餾水中。

⑨用TBS或PBS液沖洗。

⑩進行免疫組織化學染色。

（四）組織切片中內源性酶的阻斷

1.內源性過氧化物酶 主要存在于紅細胞、嗜中性粒細胞、單核細胞了嗜酸性粒細胞和組織內。阻斷方法:最常用0.3%-0.5%H2O2-甲醇液，作用15-30min，阻斷液必須使用時新鮮配制。由于阻斷內源性過氧化物酶常同時導致被測抗原變性(使特異性著色減弱)，而大部分組織不含有內源性過氧化物酶，所以阻斷內源性過氧化物酶一般不必作為常規(guī)步驟。必須阻斷內源性過氧化物酶時，可安排在第一抗體反應后進行，以減少抗原的破壞。題目：病理科免疫組織化學技術員培訓及技術操作規(guī)范 市一—病理科—30 生效日期：2012年1月1日 版本號1.0 修改日期： 頁碼4/13

2.內源性堿性磷酸酶 主要存在于嗜中性粒細胞和內皮細胞。阻斷方法:應用1M左旋咪唑，作用15-30min。

3.內源性生物素 肝、胰、腎等的細胞內含有多量生物素或類生物素物質。阻斷方法:先將切片浸于卵白素(0.5μg/ml)中15min，以緩沖液洗凈后，移浸于生物素飽和溶液中15min，再用緩沖液洗去多余的生物素飽和液;也可應用商供的阻斷試劑盒(按說明書操作)。(五)正常血清保護

作為檢測試劑的抗體蛋白帶有一定的負電荷，免疫組織化學染色時，易與帶有正電荷的組織〔特別是纖維組織、變性和(或)壞死的細胞、嗜酸性粒細胞等〕發(fā)生靜電吸引而導致非特異性染色。去除這種非特異性染色最有效的方法是，在滴加第一抗體前，先滴加用于制備第二抗體動物的非免疫血清或是滴加除制備第一抗體動物以外的其他動物非免疫血清，濃度為1：5-1：20;必要時可滴加2%-5%牛 血清清蛋白。正常血清保護作用時間10-20min。用于阻斷非特異性結合的血清不能有明顯的溶血。(六)緩沖液

用于稀釋抗體，洗滌切片的緩沖液主要有兩種。1.TBS(0.05M，pH7.6)，Tris一HCl緩沖液(0.SM，pH 7.6)100ml 8.5%NaCl 100ml 蒸餾水加至 1000ml Tris一HCI緩沖液(0.5M，pH7.6)三經(jīng)甲基氨基甲烷(Tris)61g HCl 37ml 蒸餾水加至 1000ml 2．PBS(0.IM，pH 7.6)Na2 HPO4 · 12H2O2 29g NaH2PO4 · 2H2O 3g NaCl 85g 蒸餾水加至 1000ml 使用時用蒸餾水稀釋10倍即成0.0lM。

二、免疫組織化學染色常用方法 題目：病理科免疫組織化學技術員培訓及技術操作規(guī)范 市一—病理科—30 生效日期：2012年1月1日 版本號1.0 修改日期： 頁碼5/13

(一)直接法 1.脫蠟和水化。

2.3%過氧化氫或0.5%過氧化氫甲醇液，5min。

3.TBS或PBS緩沖液洗滌。4.抗原修復。

5.無關動物正常血清(適當稀釋)20-30min。

6.甩去正常動物血清，滴加適當稀釋的辣根過氧化物酶標記抗體，或增強的酶標多聚物一步法(Enhanced Polymer One-step Staining，EPOS)抗體于切片上，20-60min。7.TBS或PBS緩沖液洗滌。

8.0.04%-0.05%DAB(二氨基聯(lián)苯胺四鹽酸)H2O2液顯色5-10min，鏡下觀察控制顯色時間。底物配法:DAB 40-50mg；0.05M TBS(pH 7.6)l00ml；3% H2O2 100-200ml。9.緩沖液洗，流水洗滌。10.蘇木精淡染細胞核。11.脫水，透明，封片。(二)間接法

l-5步同“直接法”。

6.滴加第一抗體于切片上，濕盒內溫育30-60min。7.TBS或PBS緩沖液洗滌。

8.HRP標記抗體或用增強的酶標記多聚物(Enhanced Labeled一 Polymer Sys-tem，ELPS)抗體滴加切片上，濕盒內溫育30min。9-14步同“直接法”的7-11步。(三)過氧化物酶一抗過氧化物酶(PAP)法 1-5步同直接法。

6.適當稀釋的第一抗體，濕盒內溫育30-60min。7.緩沖液洗滌。

8.第二抗體，濕盒內溫育30min。9.緩沖液洗滌。

10.滴加PAP，濕盒內溫育30min。題目：病理科免疫組織化學技術員培訓及技術操作規(guī)范 市一—病理科—30 生效日期：2012年1月1日 版本號1.0 修改日期： 頁碼6/13

11-15步同“直接法”的7-11步。

雙PAP法:上述操作進行到第10步后，再重復7-10步1次，然后繼續(xù)11-15步。(四)葡萄球菌A蛋白(SPA)免疫酶法 1-5步同“直接法”。

6.第一抗體，濕盒溫育30-60min。7.緩沖液洗滌。

8.酶聯(lián)SPA，濕盒溫育30min。9.緩沖液洗滌。

10-13步同“直接法”的8-11步。(五)ABC法和SABC法

ABC法是卵白素-生物素-酶復合物(Avidin--Biotin--Peroxidase Complex)法的簡稱。SABC法是鏈霉卵白素-生物素-酶復合物(Streptavidin一Biotin一peroxidase Complex)法的簡稱。l-5步同“直接法”。

6.第一抗體，濕盒溫育30-60min.7.緩沖液洗滌。

8.生物素化的第二抗體，30min。9.緩沖液洗滌。

10.ABC復合物或SABC復合物(皆于使用前新鮮配制)，30-60min。11-15步同“直接法”7-11步。(六)LSAB(SP)法

LSAB(SP)法，是標記的鏈酶卵白素-生物素(Labeled Streptavidin--Biotin)法的簡稱，操作步驟同“ABC法”，只是以LSAB復合物替代ABC復合物。(七)CSA法

CSA法是催化信號放大(Catalyzed Signal Amplifieation)法的簡稱。1-5步同“直接法”。6.第一抗體，15-30min。7.緩沖液洗滌。

8.生物素標記的第二抗體，15-30min。題目：病理科免疫組織化學技術員培訓及技術操作規(guī)范 市一—病理科—30 生效日期：2012年1月1日 版本號1.0 修改日期： 頁碼7/13

9.緩沖液洗滌。

10.鏈霉卵白素-生物素-HRP復合物(用前新鮮配制)，15min。11.緩沖液洗滌。12.放大液，15min。13.緩沖液洗滌。

14.HRP-StrePtavidin，15min。15-19步同“直接法”的7-11步。(八)二步法Envision System Envision是通過一個多聚葡聚糖骨架聯(lián)接成一個多聚體。1-5步同“直接法”。6.第一抗體，30-60min。7.緩沖液洗滌。

8.Envision TM，10-30min。9-13步同“直接法”的7-11步。(九)雙重免疫組織化學法.Sequential(1)鼠或兔抗體1，30-60min。

(2)Envision TM，羊抗鼠/羊抗兔/HRP，30 min。(3)DAB(棕色)，2-10 min。(4)鼠或兔抗體2，30-60 min。

(5)Envision TM，羊抗鼠/羊抗兔/AP，30 min。(6)AP(紅色)。2.Simnl一Aaneous(1)混合鼠抗體1和兔抗體2，4℃，過夜或60 min。(2)Envision TM羊抗鼠/HRP和羊抗兔/AP。(3)AP染色。(4)HRP染色。

上述方法除注明溫度者外，均可在室溫(20-25℃)環(huán)境中進行;第一抗體溫育后，如有必要可置于4℃題目：病理科免疫組織化學技術員培訓及技術操作規(guī)范 市一—病理科—30 生效日期：2012年1月1日 版本號1.0 修改日期： 頁碼8/13

下過夜。

三、免疫組織化學染色的常用抗體標記物(一)上皮源性標記物 1.一般性標記物

（1）CK(角蛋白)CK亞型:①CK5/6;②CK7;③CK8;④CK10/13;⑤CK18;⑥CK19;⑦CK20。(2)EMA(上皮細胞膜抗原)。

2.特異性和(或)相對特異性上皮標記物

（1）CEA(癌胚抗原，標記胃癌、大腸癌).（2）CA242(腫瘤相關粘液抗原，標記胰腺癌、大腸癌)。

（3）TG(甲狀腺球蛋白，標記甲狀腺癌).（4）PSA(前列腺特異性抗原，標記前列腺癌)。

（5）PSAP(前列腺特異性酸性磷酸酶，標記前列腺癌).（6）34βE12(標記前列腺底細胞).（7）AFP(甲胎蛋白，標記肝癌、內胚竇癌).（8）Hepatoeyte(標記肝細胞癌)。

(9)β-HCG(β-絨毛膜促性腺激素，標記胎盤滋養(yǎng)層細胞腫瘤、生殖細胞腫瘤).（10）CA125(卵巢癌).（二)間葉源性標記物

主要是Vimentin(vim，波形蛋白)等.（三）肌源性標記物 1.Desmin(Des，結蛋白)2.Actin(肌動蛋白）.3.SMA(平滑肌肌動蛋白).4.MSA(肌特異性肌動蛋白).5.Myosin(肌球蛋白).6.Myoglobin(MG，肌紅蛋白)7.Myogen(肌漿蛋白).題目：病理科免疫組織化學技術員培訓及技術操作規(guī)范 市一—病理科—30 生效日期：2012年1月1日 版本號1.0 修改日期： 頁碼9/13

8.MyoDI(肌調節(jié)蛋白).(四)血管源性標記物 FⅧRAg(第8因子相關抗原).CD31 CD34 UEA-l BNH9.(五)組織細胞源性標記物 1.CD68/KP-l.2.Lysozyme(溶菌酶)。3.a1-AT(a1-抗胰蛋白酶).4.a1-ACT(al-抗胰糜蛋白酶)5.Mac387.淋巴造血組織源性標記物 1.全淋巴細胞

(1)CD45/LCA(白細胞共同抗原）。(2)TdT(末端脫氧核昔酸轉移酶)。(3)CD30/Ki-1。2.全B細胞(1)Igκ。(2)Igλ。(3)CD20/L26。(4)CD79a。

(5)BLA36(B淋巴細胞抗原)。3.B細胞亞型(1)CDl0。

(2)CD21(標記濾泡性樹突狀細胞)。(3)CD23。題目：病理科免疫組織化學技術員培訓及技術操作規(guī)范 市一—病理科—30 生效日期：2012年1月1日 版本號1.0 修改日期： 頁碼10/13

(4)CD35(標記濾泡性樹突狀細胞)。(5)CD38.4.全T細胞(1)CD3。(2)CD5。(3)CD43。(4)CD45RO/UCHL-1.5.T細胞亞型(1)CDla。(2)CD4。(3)CD8。6.NK細胞(1)CD56。(2)CD57/Leu-7。(3)CD16/Leu-11。7.粒細胞和單核巨噬細胞(1)CD11c/LeuM5。(2)CD15/LeuM5。(3)Lysozyme(溶菌酶)。(4)al-AT(al-抗胰蛋白酶)。(5)al-ACT(al-抗胰糜蛋白酶)。(6)CD68.(7)S-100蛋白.(8)Mac387。8.其他

(1)EMA(上皮細胞膜抗原).(2)CD99(尤因肉瘤標記物).(3)ALK-l(間變性淋巴瘤激酶)。題目：病理科免疫組織化學技術員培訓及技術操作規(guī)范 市一—病理科—30 生效日期：2012年1月1日 版本號1.0 修改日期： 頁碼11/13

(4)HLA-DR。(5)Bel-2。(6)Bel-6。(7)Bel-10。(8)Ki-67。

(9)CyclinD1(周期素D1)。(10)CD25。

(11)CD34。

（七）神經(jīng)源性標記物 1.S-100蛋白.2.NSE（神經(jīng)原特異性烯醇化酶）.3.Leu7。

4.Neurofilament(NF，神經(jīng)微絲蛋白)。5.GFAP(膠質纖維酸性蛋白）

（八）神經(jīng)內分泌源性標記物 1.激素標記物(1)CA(兒茶酚胺)。(2)5-HT(5-經(jīng)色胺).(3)垂體激素。

①GH(促生長素)。

②PRL(催乳素)。

③ACTH(促腎上腺皮質激素).④TSH(促甲狀腺素).⑤FSH(促濾泡素).⑥LH(促黃體素)。(4)甲狀腺。

①TG(甲狀腺球蛋白)。

②CT(降鈣素)。題目：病理科免疫組織化學技術員培訓及技術操作規(guī)范 市一—病理科—30 生效日期：2012年1月1日 版本號1.0 修改日期： 頁碼12/13

(5)甲狀旁腺:PTH(甲狀旁腺素)。(6)胰島。

①Insulin(胰島素)。

②Glueagon(胰高糖素)。

③VIP(舒血管腸肽).④PP(胰多肽).⑤Someitostatin(生長抑素)。

⑥Gastrin(胃泌素)。2.非激素標記物

(1)NSE(神經(jīng)原特異性烯醇化酶).(2)CgA(嗜鉻素A).(3)SY(突觸素).3.激素受體

（1）ER(雌激素受體）.（2）AR(雄激素受體）.（3）PR(孕激素受體).(九)細胞增殖標記物 1.PCNA(增殖細胞核抗原).2.Ki-67.（十）黑色素標記物 1.S-100蛋白.2.HMB45.3.Melanoma。

(十一）癌基因和（或）抑癌基因 1.bel-2.2.c-erbB-2.3.p53 4.p16(多腫瘤抑制基因)。題目：病理科免疫組織化學技術員培訓及技術操作規(guī)范 市一—病理科—30 生效日期：2012年1月1日 版本號1.0 修改日期： 頁碼13/13

5.nm23。(十二)病原體標記物

1.Myoeobaeterium Bovis(分枝桿菌，抗卡介苗)。2.HBsAg(乙型肝炎病毒表面抗原).3.HBcAg(乙型肝炎病毒核心抗原).4.HPV(人乳頭狀瘤病毒)5.HTLV-1(人類T細胞白血病病毒)。

第四篇：銷售部業(yè)務操作流程及規(guī)范

業(yè)務操作流程及要求

為提高工作效率，規(guī)范服務標準，提高服務質量，強化工作的原則性，縮短團散操作周期，特別制定此條款，所有業(yè)務人員必須嚴格按照本條例程序和要求進行操作，工作中秉承嚴謹、認真、干練、專業(yè)及完善的服務態(tài)度。旨在服務好本期當前客戶的前提下，同時做好客戶資源儲備和客戶管理及后續(xù)服務，用長遠的眼光和永續(xù)的思維去工作。

一、出團前準備工作。

1、出團前的操作流程及要求：

① 訪問交談深入了解客戶具體團隊細節(jié)：出行人數(shù)和年齡（明確不同情況的不同收費情況，與計調對接好，獲得客戶本人的認可并簽字。）②證件情況：是否白本護照，是否外地戶口，取證時間和郵寄地點。③ 出行時間：某月大概的時間。

④大交通：是否含接送，接送機具體地址，核價前告知計調。

⑤ 特殊要求：是否有孕婦、老人、小孩、高血壓等需要特殊照顧的病人。⑥ 具體行程要求：常規(guī)操作，還是高品。具體住宿要求，常規(guī)星級還是特色酒店。用餐自理、標準團餐、還是需要升級。行程安排常規(guī)景點還是非常規(guī)，要求加入哪些景點，明確自費和購物要求等。

⑦ 遇到競爭，應盡量詳細的了解清楚當前具體進展程度，了解競爭對手狀態(tài)，及時告知計調，報價時需斟酌。

（以上內容需做詳細記錄，業(yè)務需在計調設計產(chǎn)品和報價前提供給計調，配合給出有針對性、有競爭力、最適合此客戶的產(chǎn)品，團隊中每一個細節(jié)性的調整，業(yè)務都要與計調QQ聊天記錄，做到有據(jù)可依。）

2、確定行程：跟進客戶要求，按要求調整行程，給客人詳細講解行程，定

稿后請客戶在最終行程上簽字確認。

3、最終報價：不得低于計調給出的正常報價，根據(jù)客戶情況靈活掌握。涉

及到團隊或老客戶優(yōu)惠幅度較大時，需申請主管副總批準。

4、簽合同。收取出行人員名單并叮囑客人名單一定要保密，防止被他人盜

用引發(fā)不必要的后果。單位出行的需蓋公章，負責人簽字。散客出行需客戶本人簽字。

5、收款。散客收全款。特殊團隊出發(fā)前至少收總團款的80%（需經(jīng)總經(jīng)理

批準），同時在合同備注尾款支付日期。當日交款至財務。

6、名單核實。負責人需在名單上簽署“名單準確無誤”及負責人名字和日期。

再次和每一個客人逐一確認，并通知客人出票后不能做任何更改變動。如發(fā)現(xiàn)團中有客戶過生日的客戶，需要特殊標志，并告知計調及導游。

7、出票。出票前在與計調核對最終名單，確認無誤時再進行出票。出票后，應立即通知客戶，并把航班信息通知給客戶，并電話作《出團通知》，告知旅游目的地注意事項、天氣、須帶物品等情況。將客戶信息上傳至管理系統(tǒng)中，以便計調做派團單。

8、計調派團后，業(yè)務將客戶要求與帶團導游對接詳細。

行前說明會。導游講解行程（導游不在由業(yè)務代替）特別強調確認行程的住宿、用餐標準等，贈品發(fā)放（講解贈品使用方法）、當?shù)刈⒁馐马椉殑t、需帶物品提醒、告知客戶根據(jù)旅行中的實際體會如實填寫地接導游給出《意見反饋單》，并告知此單將作為我公司與對方的結算依據(jù)，（帶團導游需根據(jù)實際情況判斷客人評價是否屬實，后簽字確認。）與領導

對接特殊要求及其他細節(jié)等。

9、送團。提前通知客戶集合時間和地點，確保每一位需要送機的客戶能夠

準確抵達集合地點，自行前往的客戶統(tǒng)計標注，并提前告知計調及送帶團導游。

二、團中，操作流程及要求：

1、團中質量監(jiān)控。隔天下午或晚上短息或電話跟蹤，問候領隊，了解團隊進行中的具體情況，如果車、餐、導、宿、行程等具體細節(jié)方面客戶提出不足之處，需和帶團導游核實確認情況屬實后，立即通知計調在合理要求范圍之內做出調整，并把調整后結果及時告知客戶。長線團隊至少要做1次團中質量監(jiān)控。

2、回團接團。與計調落實好接機或接站的時間、地點、車，提前跟司機再確認一遍。如團隊返回，和導游及領隊打電話詢問是否順利，酌情考慮是否需要業(yè)務員親自前往接團。

三、回團后：

1、回團后3天之內做質量回訪（參照客服中心回訪標準進行）。

2、收尾款?；貓F后根據(jù)合同簽訂的尾款支付日期收取剩余團款。

3、將此客戶更新至《已成單客戶列表》，并完善自己的客戶檔案（一個計劃號一個文檔，體現(xiàn)客戶提供的初始名單、最終確認名單、客戶咨詢的備選線路、確認行程等，以便后期查閱）。

4、完善《管理系統(tǒng)》

5、生日及特殊日期問候、祝福。

6、關注此客戶出行特點和規(guī)律，及時進行實施營銷。

業(yè)務日常工作要求：

一、周一工作安排：

①09：00之前上交《周計劃》至副經(jīng)理。部門領導布置本周工作，根據(jù)公司任務下達及時調整本周工作計劃。本周主推，新產(chǎn)品發(fā)布，培訓等。做日常推廣、客戶回復。下午拜訪客戶，老客戶及陌生拜訪5+。及其他日常。

二、工作日安排：

①每日在QQ、微信、微博等網(wǎng)絡銷售平臺做至少2次推廣。09：00前做完第一次推廣。

②09:00之前外去開展業(yè)務，老客戶客戶維護，意向跟進，陌生拜 訪等。每日資料發(fā)放8-12份，有效溝通8-12訪。（根據(jù)客戶接待情況作適當調整。）

③總結當日工作，當日拜訪情況當日匯總（附《客戶檔案表》）。剔出意向客戶，匯總至（附《意向客戶列表》）。以上文件備注自己的名字、日期，組長負責匯總完畢后，下班前將當日意向電子版發(fā)送至主管領導。業(yè)務動態(tài)表匯總完畢后，方可下班。

④做好次日計劃，筆記本體現(xiàn)，備查。

三、工作日17:00小組小會（各組值班組長負責組織，副經(jīng)理指導工作），做會議記錄。具體內容及要求：

①了解各業(yè)務員當日工作情況。

②匯總市場最新動態(tài)，當前當季客戶市場分析，掌握客戶需求變化并做記錄，目標市場定位，尋找新客源。

③各業(yè)務員遇到的問題，回來匯總，處理，并做記錄。

④銷售經(jīng)理（或者輪值經(jīng)理）把握各業(yè)務員的意向客戶及并實時關注跟進情況。（附《意向客戶統(tǒng)計表》，部門當日更新。）匯總意向和各部門意向對接，配合計調做出合理定“團期收客”計劃。

⑤當日成單客戶統(tǒng)計匯總。

⑥布置次日工作，指導督促員工做當日工作總計及次日工作安排。⑦督促各業(yè)務員的專業(yè)化程度，根據(jù)時間適當安排培訓學習計劃。⑧每周匯總《任務實時收客表》《任務實時收客表 營業(yè)額》，并上 交主管副總。

四、周五工作安排：

早上拜訪5+。下午進行本周工作總結（附《個人周總結表》），部門會議分析、解決本周工作中間存在的問題安排部署下周的工作方向、下達各自任務量。匯總本周收客情況，機票數(shù)據(jù)及收欠款等。

主管做部門工作總結（附《部門周總結表》），上交《集團公司實

時收客表 營業(yè)額》給公司。

五、業(yè)務員將采集回來的客戶需要實時的反饋給部門負責人，部門每周匯

總一次給計調部，便于做新產(chǎn)品的研發(fā)和產(chǎn)品升級。

六、每天基礎性的專業(yè)知識、新產(chǎn)品的學習。

七、每天早中晚按時簽到簽退四次，外出業(yè)務需在前臺外出登記表登記并打卡，特殊情況需要提前或推后的，需提前給主管領導申請。如需第二天

早上直接去拜訪客戶時，需前一天下午提前申請，主管領導檢查此員工次日工作安排后放行。

八、關注行業(yè)新聞，媒體報道，了解行業(yè)趨勢，資格認證，培訓視頻等，銷售技能技巧的提升等相關知識。

各部門配合需求細節(jié)

1、計調部必須嚴格按照業(yè)務反饋回來的客戶要求進行安排和行程標準操作，保質保量。

此文件要求內容作為月度之星及之星的考核打分依據(jù)。

此文件要求內容作為本考核及打分制度的依據(jù)

第五篇：病理科操作常規(guī)

醫(yī)技科室操作常規(guī)

病理科操作常規(guī)

第一章 病理學檢查常規(guī)

第一節(jié) 普通活體組織病理學檢查常規(guī)

一、申請單和標本的驗收

（一）病理科應有專人驗收普通活體組織病理學檢查（常規(guī)活檢）申請單和送檢的標本。

1、同時接受同一患者的申請單和標本。

2、認真核對每例申請單與送檢標本及其標志（聯(lián)號條或其他寫明患者姓名、送檢單位和送檢日期等的標記）是否一致；對于送檢的微小標本，必須認真核對送檢容器內或濾紙上是否確有組織及其數(shù)量。發(fā)現(xiàn)疑問時，應立即向送檢方提出并在申請單上注明情況。

3、認真檢查標本的標志是否牢附于放置標本的容器上。

4、認真查閱申請單的各項目是否填寫清楚，包括：

（1）患者基本情況［姓名、性別、年齡、送檢單位（醫(yī)院、科室）、床位、門診號／住院號、送檢日期、取材部位、標本數(shù)量等」；

（2）患者臨床情況［病史（癥狀和體征）、化驗／影像學檢查結果、手術（包括內鏡檢查）所見、既往病理學檢查情況（包括原病理號和診斷）和臨床診斷等]。

5、在申請單上詳細記錄患者或患方有關人員的明確地址、郵編及電話號碼，以便必要時進行聯(lián)絡，并有助于隨訪患者。

（二）驗收標本人員不得對申請單中由臨床醫(yī)師填寫的各項內容進行改動。

（三）下列情況的申請單和標本不予接收。

1、申請單與相關標本未同時送達病理科。

2、申請單中填寫的內容與送檢標本不符合。

3、標本上無有關患者姓名、科室等標志。

4、申請單內填寫的字跡潦草不清。

5、申請單中漏填重要項目。

6、標本嚴重自溶、腐敗。干涸等。

7、標本過小，不能或難以制做切片。

8、其他可能影響病理檢查可行性和診斷準確性的情況。病理科不能接收的申請單和標本一律當即退回，不予存放。

（四）臨床醫(yī)師采取的標本應盡快置放于盛有固定液（４％中性甲醛，即１０％中性福爾馬林）的容器內，固定液至少為標本體積的５倍。對于需要做特殊項目檢查（如微生物、電鏡、兔疫組織化學、分子生物學等）的標本，應按相關的技術要求進行固定或預處理。

（五）病理醫(yī)師只對病理科實際驗收標本的病理學診斷負責。

（六）病理科應建立與送檢方交接申請單和標本的手續(xù)制度。具體交接方法由各醫(yī)院病理科自行制定。

二、申請單和標本的編號、登記

（一）病理科驗收人員應在已驗收的申請單上注明驗收日期，及時、準確編號（病理號），并逐項錄入活檢標本登記簿或計算機內。嚴防病理號的錯編、錯登。

（二）標本的病理號可按年編序，或連續(xù)性（不分）編序。

（三）同一病例同一次的申請單、活檢標本登記簿（包括計算機錄入）、放置標本的容器、組織的石蠟包埋塊（簡稱蠟塊）及其切片等的病理號必須完全一致。

（四）病理科應建立驗收人員與組織取材人員之間申請單和標本的交接制度。

（五）在病理科內移送標本時，必須確保安全，嚴防放置標本的容器傾覆、破損和標本的散亂、缺失等。

三、標本的預處理

標本驗收人員對已驗收的標本酌情更換適宜的容器，補充足量的固定液。對于體積大的標本，值班取材的病理醫(yī)師在不影響主要病灶定位的情況下，及時、規(guī)范地予以剖開，以便充分固定。

四、標本的巨檢、組織學取材和記錄

（一）對于核驗無誤的標本，應按照下列程序進行操作：

1、肉眼檢查標本（巨檢）；

2、切取組織塊（簡稱取材）；

3、將巨檢和取材情況記錄于活檢記錄單上（活檢記錄單印于活檢申請單的背面）。

（二）巨檢和取材的技術操作：

1、巨檢和取材必須由病理醫(yī)師進行，應配備人員負責記錄。

2、巨檢和取材過程中，應嚴防污染工作人員和周圍環(huán)境。

3、標本一般應經(jīng)適當固定后再行取材。已知具有傳染性（例如結核病、病毒性肝炎等）的標本，應在不污染環(huán)境和（或）不擴散傳染的原則下，經(jīng)必要的初步巨檢或切開后，立即置于盛有足量固定液的專用容器內，充分固定后再行常規(guī)巨檢和取材。

4、病理醫(yī)師在對每例標本進行巨檢和取材前，應與記錄人員認真核對該例標本及其標志與申請單的相關內容是否一致。若對申請單填寫的內容和（或）標本有疑問（例如患者姓名有誤，標本內容、數(shù)量、病變特征與申請單填寫的情況不符等），應暫行擱置，盡快與送檢方聯(lián)系，查明原因，確保無誤后，再行巨檢和取材。必要時，可邀請有關臨床醫(yī)師共同檢查標本和取材。對于有疑問的標本，在消除疑問前不得進行巨檢和取材，應將有關標本連同其申請單一并暫時妥為保存。

5、病理醫(yī)師進行巨檢和取材時，記錄人員應根據(jù)病理申請單內容，向巨檢醫(yī)師報告患者的基本臨床情況、手術所見、標本情況（采取部位、數(shù)量等）和送檢醫(yī)師的特殊要求等，并如實、清楚地將病理醫(yī)師的口頭描述記錄于活檢記錄單上。必要時，應在活檢記錄單上（或另附紙）繪簡圖顯示巨檢所見和標示取材部位。取材者應核對記錄內容。

6、具有醫(yī)學學術價值的標本可攝影存檔，并酌情妥為保存。

7、病理科宜積極推行巨檢和取材的錄音記錄。每次巨檢和取材結束后，應由專人立即對錄音內容進行文字整理，記錄于活檢記錄單上（手錄或用計算機錄入、打印）。有關的錄音資料應保存至病理學診斷報告書發(fā)出后兩周。

8、細小標本取材時，可用伊紅點染并用軟薄紙妥善包裹。

9、每例標本取材前、后，應用流水徹底清洗取材臺面和所有相關器物，嚴防檢材被無關組織或其他異物污染，嚴防細小檢材被流水沖失。

10、巨檢和取材必須按照本規(guī)范的要求進行操作（參見第３章第四節(jié)）。對于由不同部位或不同病變區(qū)域切取的組織塊，應在其病理號之后再加編次級號（例如：一１，一２，一３，??；Ａ，Ｂ，C，??）。

11、巨檢者、取材者和記錄人員應相互配合、核查，確保所取組織塊及其編號標簽準確地置人用于脫水的容器（脫水盒等）內。

12、標本巨檢和取材后剩余的組織、器官應置人適當容器內，添加適量州中性甲醛并附有相關病理號和患者姓名等標志，然后按取材日期有序地妥善保存。取材剩余的標本一般保存至病理學診斷報告書發(fā)出后兩周。

13、病理醫(yī)師在每批標本巨檢和取材后，應與記錄人員共同核對取材內容，并在活檢記錄單、取材工作單上簽名和簽署日期。

14、取材后剩余的病理標本屬于污染源，應遵照有關規(guī)定處理。

15、巨檢和取材醫(yī)師或記錄人員與制片的技術人員應認真辦理所取檢材、活檢申請單／記錄單和取材工作單等的交接手續(xù)。具體交接方法由各醫(yī)院病理科自行制定。

五、組織切片制備的基本要求

（一）組織制片過程中，應確保切片號與蠟塊號一致。

（二）制片工作一般應在取材后２個工作日內完成（不含需要脫鈣、脫脂等特殊處理的標本）。

（三）制片完成后，技術人員應檢查制片質量，并加貼標有本病理科病理號的標簽。常規(guī)石蠟包埋一ＨＥ染色片的優(yōu)良率（甲、乙級切片所占的比例≥９０％，優(yōu)級率（甲級切片所占的比例）≥３５％。不合格切片應立即重做。切片質量的基本標準參見表2－1。

表2－1 常規(guī)石蠟包埋一ＨＥ染色切片質量的基本標準 優(yōu)質標準

組織切面完整，內鏡咬檢、穿刺標本切面數(shù)

滿分（分）

質量缺陷減分

組織稍不完整：減1～３分；不完整：減4～10分；未達到規(guī)定面數(shù)：減５分 切片?。ǎ场祏ｍ）厚薄均勻

切片厚（細胞重疊），影響診斷：減６～10分；厚薄不均勻：減３～５分

切片無刀痕、裂隙、顫痕 10 有刀痕、裂隙、顫痕，尚不影響診斷：減２分；有刀痕、裂隙、顫痕，影響診斷：減５分

切片平坦，無皺褶、折疊 10 有皺褶或折疊，尚不影響診斷：各減２分；有皺褶或折疊，影響診斷：各減５分

切片無污染物

無氣泡（切片與載玻片間／蓋玻片與切片、載玻片間），蓋玻片周圍無膠液外溢,透明度好

細胞核與細胞質染色對比清晰 10

有污染物：減１０分

有氣泡：減３分；膠液外溢：減３分 細胞核著色灰淡或過藍：減５分；紅（細胞質）與藍（細胞核）對比不清晰：減５分

切片無松散，裱貼位置適當 10 切片松散：減５分；切片裱貼位置不當：減５分

切片整潔，標簽端正粘牢，編號清晰 10 切片不整潔：減３分；標簽粘貼不牢：減３分；編號不清晰：減４分

合計 100

注：切片質量分級標準：（1）甲級片：≥９０分（優(yōu)）；（2）乙級片：７５～８９分（良）；（3）丙級片：６０～７４分（基本合格）；（4）丁級片：≤５９分（不合格）

（四）制片過程發(fā)生意外情況時，有關技術人員和技術室負責人應及時向病理科主任報告，并積極設法予以補救。

（五）制片完成后，技術人員應將所制切片與其相應的活檢申請單／活檢記錄單、取材工作單等進行認真核對，確認無誤后，將切片連同相關的活檢申請單／活檢記錄單、取材工作單等一并移交給病理醫(yī)師。雙方經(jīng)核對無誤后，辦理移交簽字手續(xù)。具體交接方法由各醫(yī)院病理科自行制定。

（六）常規(guī)活檢組織切片制備技術的基本要求參見第３章第一節(jié)。

六、組織切片的光學顯微鏡檢查和病理學診斷

（一）初檢病理醫(yī)師

1、應認真閱讀申請單提供的各項資料，必要時（尤其是疑難病例），應向有關臨床醫(yī)師了解更多的臨床信息。

2、應認真閱讀活檢記錄單中關于標本巨檢的描述。

3、應了解患者既往病理學檢查情況（包括切片的病理學診斷和有關文字記錄），包括：（1）本病理科既往受理者，必須及時調閱相關切片等病理學檢查資料；

（2）非本病理科既往受理者，應積極協(xié)助患者從有關病理科商借相關切片等病理學檢查資料參閱。

4、應在活檢記錄單上簽署“醫(yī)囑”，告知技術人員進行必要的深切片、連切片、特殊染色和其他相關技術檢測。

5、應全面、細致地閱片，注意各種有意義的病變。

初檢的病理醫(yī)師，應提出初診意見，送交主檢病理醫(yī)師復查。

（二）主檢病理醫(yī)師

1、主檢病理醫(yī)師對難以明確診斷的病例要做進一步的處理。

（1）必要時親自觀察標本，補充或訂正病變描述，指導或親自補取組織塊。（2）提請科內上級醫(yī)師會診或進行科內讀片討論（會診）。（3）與有關臨床醫(yī)師進行臨床-病理會診。

（4）必要時約見患者（尤其門診患者）或患者親屬（或其他患方相關人員），了解病情，說明病理學診斷的疑難情況和延期簽發(fā)病理學診斷報告書的原因等。

（5）于簽發(fā)病理學診斷報告書前進行科外病理會診（診斷報告前病理會診），應將各方面會診意見的原件（或復印件）作為檔案資料貼附于有關患者的活檢記錄單中備查。

（6）必要時，建議臨床醫(yī)師重復活檢，或密切隨查。

2、主檢病理醫(yī)師根據(jù)常規(guī)切片的鏡下觀察，結合標本巨檢、相關技術檢查結果、有關臨床資料和參考病理會診意見等，做出病理學診斷或提出病理學診斷意見（意向），清楚地書寫于活檢記錄單的有關欄目中，并親筆簽名。各方會診意見不

一、難以明確診斷時，主檢醫(yī)師可參考會診意見酌情診斷，或在病理學診斷報告書中將各方會診意見列出，供臨床醫(yī)師參考。

3、對打印的病理學診斷報告書，主檢病理醫(yī)師應與活檢記錄單上的病理學診斷文字進行核對，并親筆簽名（參見本節(jié)下文“

八、病理學診斷報告書及其簽發(fā)”）。

七、相關診斷技術的選用

病理醫(yī)師可借助于組織化學染色（包括特殊染色）、免疫組織化學染色、電子顯微鏡技術、分子生物學技術、流式細胞技術等相關診斷技術檢查提供的佐證，對某些病例（尤其是疑難病例）進行病理學診斷（具體內容參見第４章）。

八、病理學診斷報告書及其簽發(fā)

（一）病理學診斷表述的基本類型

Ｉ類：檢材部位、疾病名稱、病變性質明確和基本明確的病理學診斷。

Ⅱ類：不能完全肯定疾病名稱、病變性質，或是對于擬診的疾病名稱、病變性質有所保留的病理學診斷意向，可在擬診疾?。∽兠Q之前冠以諸如病變“符合為”、“考慮為”、“傾向為”、“提示為”、“可能為”、“疑為”、“不能排除（除外）”之類的詞語。

Ⅲ類：檢材切片所顯示的病變不足以診斷為某種疾病（即不能做出Ⅰ類或Ⅱ類病理學診斷），只能進行病變的形態(tài)描述。

Ⅳ類：送檢標本因過于細小、破碎、固定不當、自溶、嚴重受擠壓（變形）、被燒灼、干涸等，無法做出病理學診斷。

（二）病理學診斷報告書的基本內容

1、患者的基本情況，包括病理號、姓名、性別、年齡、送檢醫(yī)院或科室（住院或門診）、住院號或門診號、送檢和收驗日期等。

2、巨檢病變和鏡下病變要點描述（一般性病變和細小標本可酌情簡述或省略）。

3、與病理學診斷相關技術的檢查結果。

4、病理學診斷的表述，參見上文“

（一）病理學診斷表述的基本類型”。

5、對于疑難病例或做出Ⅱ、Ⅲ類病理學診斷的病例，可酌情就病理學診斷及其相關問題附加：（1）建議（例如進行其他有關檢查、再做活檢、科外病理學會診、密切隨診或隨訪等）；（2）注釋和（或）討論。

6、經(jīng)過本病理科和（或）科外病理會診的病例，可將各方病理會診意見列于該例患者的病理學診斷報告書中。

（三）病理學診斷報告書的書寫要求

1、病理學診斷報告書的文字表述力求嚴謹、恰當、精練，條理和層次清楚。

2、病理學診斷報告書應為一式二份，一份交予送檢方，另一份隨同患者的病理學檢查申請單和病理學檢查記錄單一并存檔。主檢病理醫(yī)師必須在每一份病理學診斷報告書上簽名，不能以個人印章代替簽名，不能由他人代為簽名。主檢病理醫(yī)師簽名的字跡應能辨認。

3、手書的病理學診斷報告書必須二聯(lián)復寫，必須文字規(guī)范、字跡清楚，不得潦草、涂改。

4、手書和計算機打印的病理學診斷報告書中的關鍵性文字，例如“癌”、“瘤”、“陽性”、“陰性”和數(shù)字等，要認真核對，不得有誤。

5、計算機打印的圖文病理學診斷報告書提供的病變圖像要準確，具有典型（代表）性，放大倍數(shù)適當。

6、患者的基本情況項目必須嚴格按照送檢臨床醫(yī)師填寫的文字抄寫或用計算機輸錄于病理學診斷報告書中，并認真核查無誤，簽發(fā)報告書的病理醫(yī)師和病理科的其他人員都不得改動。

7、病理醫(yī)師不得簽發(fā)虛假的病理學診斷報告書，不得向臨床醫(yī)師和患方人員提供有病理醫(yī)師簽名的空白病理學診斷報告書。

（四）病理學診斷報告書的發(fā)送

1、病理科自接受送檢標本至簽發(fā)該例病理學診斷報告書的時間，一般情況下為５個工作日以內。

2、由于某些原因（包括深切片、補取材制片、特殊染色、免疫組織化學染色、脫鈣、疑難病例會診或傳染性標本延長固定時間等）延遲取材、制片，或是進行其他相關技術檢測，不能如期簽發(fā)病理學診斷報告書時，應以口頭或書面形式告知有關臨床醫(yī)師或患方，說明遲發(fā)病理學診斷報告書的原因。

3、病理科應有專人發(fā)送病理學診斷報告書。住院患者的病理學診斷報告書應發(fā)送至有關臨床科室。病理科所在醫(yī)院門診患者和院外患者病理學診斷報告書的發(fā)送方法，由各醫(yī)院病理科自行制定。

4、病理學診斷報告書的經(jīng)收人員（包括患方人員）必須履行簽收手續(xù)。

5、病理科已發(fā)出的病理學診斷報告書被遺失時，一般不予補發(fā)；必要時，經(jīng)病理科主任同意可以抄件形式補發(fā)。

九、資料管理

普通活體組織病理學檢查的資料必須妥善管理，有關規(guī)定參見本章第五節(jié)。

十、會診

病理學會診是普通活體組織病理學診斷過程的重要環(huán)節(jié)，有關規(guī)定參見本章第六節(jié)。

第二節(jié) 手術中快速活體組織病理學檢查常規(guī)

一、概述

（一）手術中快速活體組織病理學檢查（簡稱快速活檢）是臨床醫(yī)師在實施手術過程中，就與手術方案有關的疾病診斷問題請求病理醫(yī)師快速進行的緊急會診，尤其需要臨床醫(yī)師與病理醫(yī)師間的密切合作。

（二）快速活檢要求病理醫(yī)師在很短時間內，根據(jù)對切除標本的巨檢和組織塊快速冷凍切片（或快速石蠟切片）的觀察，向手術醫(yī)師提供的參考性病理學診斷意見。

與常規(guī)石蠟切片的病理學診斷相比，快速活檢會診具有更多的局限性和誤診的可能性。有的病例難以快速診斷，需要等待常規(guī)石蠟切片進一步明確診斷。因此，應向臨床醫(yī)師說明快速活檢的：（1）局限性；（2）適用范圍；（3）慎用范圍；（4）不宜應用范圍。

（三）有關臨床醫(yī)師應于手術前向患者和（或）患者授權人說明快速活檢的意義和局限性等，取得患者和（或）患方的知情和理解。患者和（或）患者授權人應在由醫(yī)院制定的《手術中快速活檢患方知情同意書》簽署意見和簽名。

（四）主持手術的臨床醫(yī)師應在手術前一天向病理科遞交快速活檢申請單，填寫患者的病史，重要的影像學、實驗室檢查結果和提請病理醫(yī)師特別關注的問題等。盡可能不在手術進行過程中臨時申請快速活檢。

（五）手術中快速活檢應由經(jīng)過該項工作訓練的主治醫(yī)師以上的病理醫(yī)師主持。尚不具備相應條件的病理科不應勉強開展手術中快速活檢業(yè)務。

（六）負責快速活檢的主檢病理醫(yī)師應了解患者的（1）臨床情況；（2）手術所見；（3）既往有關的病理學檢查情況。

二、適用范圍

（一）需要確定病變性質（如腫瘤或非腫瘤、良性腫瘤或惡性腫瘤等），以決定手術方案的標本。

（二）了解惡性腫瘤的擴散情況，包括腫瘤是否浸潤相鄰組織、有無區(qū)域淋巴結轉移等。

（三）確定腫瘤部位的手術切緣有無腫瘤組織殘留。

（四）確認切除的組織，例如甲狀旁腺、輸卵管、輸精管及異位組織等。

三、慎用范圍

涉及截肢和其他嚴重致殘的根治性手術切除的標本。需要此類手術治療的患者，其病變性質宜于手術前通過常規(guī)活檢確定。

四、不宜應用范圍

（一）疑為惡性淋巴瘤。

（二）過小的標本（檢材長徑≤0.2ｃｍ者）。

（三）術前易于進行常規(guī)活檢者。

（四）脂肪組織、骨組織和鈣化組織。

（五）需要依據(jù)核分裂象計數(shù)判斷良、惡性的軟組織腫瘤。

（六）主要根據(jù)腫瘤生物學行為特征而不能依據(jù)組織形態(tài)判斷良、惡性的腫瘤。

（七）已知具有傳染性的標本（例如結核病、病毒性肝炎、艾滋病等）。

五、申請單和標本的驗收、編號和登記

手術中快速活體組織病理學檢查申請單和標本的驗收、編號和登記參見本章第一節(jié)中“

一、”至“

三、”項的有關規(guī)定。

六、標本的巨檢、取材和記錄

（一）病理科驗收快速活檢申請單和標本后，應參照本章第一節(jié)中“

四、”項的有關規(guī)定，立即進行標本的巨檢、取材和記錄。

（二）主持快速活檢的病理醫(yī)師應親自參與標本的巨檢和取材（或指導取材）。

（三）通常選取具有代表性的病變組織1或２塊，需要時，增加取材塊數(shù)。

七、組織切片的制備

（一）冷凍切片

1、完成冷凍ＨＥ染色切片制備的時間通常為２０～２５min。

2、恒冷箱切片機制片：至少應于切片前ｌｈ開機預冷，冷室溫度一般為-15～-20℃。常規(guī)開展冷凍切片快速病理學診斷的病理科，恒冷箱切片機宜處于24ｈ恒溫待機狀態(tài)。

3、其他方法的冷凍切片制備參見第３章第一節(jié)。

（二）快速石蠟切片

1、完成快速石蠟-ＨＥ染色切片的時間通常為30min。

2、快速石蠟切片的制備方法參見第３章第一節(jié)。

制備好的冷凍或快速石蠟-ＨＥ染色切片，加貼標有本病理科病理號的標簽后，立即交由主檢病理醫(yī)師進行診斷。

八、手術中快速活檢會診意見及其簽發(fā)

（一）有條件的病理科宜由兩位具有中、高級職稱的病理醫(yī)師共同簽署快速活檢的病理學診斷意見。對于病變疑難、手術切除范圍廣泛和會嚴重致殘的手術中快速活檢，應由兩位具有高級職稱的病理醫(yī)師共同簽署會診意見。主檢病理醫(yī)師簽名的字跡應能辨認。

（二）快速活檢診斷意見一般在收到送檢標本后40min內發(fā)出；同一時間段內相繼收到的多例患者標本或是同一例患者的多次標本，其發(fā)出報告的時間依次類推。對于疑難病變，可酌情延時報告。

（三）對于難以即時快速診斷的病變（例如病變不典型、交界性腫瘤病變或送檢組織不足以明確診斷等），主檢病理醫(yī)師應向手術醫(yī)師說明情況，恰如其分地簽發(fā)病理學診斷意見或告知需要等待常規(guī)石蠟切片進一步明確病理學診斷。

（四）主檢病理醫(yī)師簽署的快速活檢病理學診斷意見，宜以文字形式報告（具體發(fā)出方式由各醫(yī)院自行決定）?？焖倩顧z病理學診斷意見報告書發(fā)出前應認真核對無誤。

九、冷凍切片后剩余組織的處理

（一）冷凍切片后剩余的冷凍組織（簡稱“凍對”）和冷凍切片取材后剩余、未曾冷凍的組織（簡稱“凍?！保鶓４?，用以制備常規(guī)石蠟切片，以便與冷凍切片進行對照觀察。

（二）“凍對”、“凍剩”組織的蠟塊和切片須與同一病例手術后送檢的切除標本編為同一病理號，并做出綜合性診斷。

（三）當冷凍切片病理學診斷意見與其“凍對”組織的常規(guī)石蠟-HE片的病理學診斷不一致時，該例的病理學診斷一般應以石蠟-HE片診斷為準。

十、資料管理

手術中快速活體組織病理學檢查的資料必須妥善管理，有關規(guī)定參見本章第五節(jié)。

第二章 病理學基本技術操作

第一節(jié) 病理組織學診斷檢材的制備技術

一、組織的固定

（一）凡需要進行病理組織學檢查的標本（器官或組織），離體（活體或尸體）后，應盡快置放（浸泡）于裝有足夠量固定液的容器中固定。固定液量應為被固定標本體積的５～１０倍。置放標本的容器大小視標本和固定液的體積而定，應適當大一些。臨床科室切取的標本置放于容器中固定后，應盡快送交病理科繼續(xù)固定。未能及時、充分固定的干涸或腐敗標本不能再進行固定和用于制作切片。

（二）常規(guī)固定液為４％中性甲醛（10％中性福爾馬林）。應預先多量配制貯存，以備隨時使用。小標本的固定時間為4～6ｈ，大標本為18～24ｈ或更久。

（三）根據(jù)病理學特殊檢查（特殊染色和組織化學染色、免疫組織化學染色和原位核酸分子雜交染色、電鏡觀察等）的需要，應選用其他適宜的固定液進行固定。[參見后文“

（七）常用固定液?！盷

（四）器官、組織固定的基本方法可參見本章第四節(jié)“病理標本的肉眼檢查和組織學切片取材技術”。

1、管、胃、腸、膽囊、膀胱等空腔器官：依規(guī)范方法剪開后，按其自然狀態(tài)平鋪于硬紙板上（重點暴露黏膜面或內表面的病變處），并用大頭針將標本邊緣處固定于紙板上，然后放人４％中性甲醛中固定（黏膜面或內表面朝向容器的液面，并覆蓋薄層脫脂棉）。

2、肝、脾：由器官背面，沿其長軸每間隔1.5～2.0ｃｍ縱向平行剖開，切成數(shù)片。將每片肝或脾輕輕地平放于裝有4％中性甲醛的容器中，容器底面襯以脫脂棉。應避免標本彎曲和相互間的疊壓。

3、肺葉：放人固定液中的肺葉漂浮于液面，須在肺表面覆蓋浸含固定液的薄層脫脂棉。必要時從支氣管注人適量4％中性甲醛。

4、腎：沿腎外緣中線朝腎門方向做一水平切面（深達于腎盞），再行固定。

5、淋巴結：先用4％中性甲醛固定ｌｈ后，再沿其長軸切開（腫大的淋巴結可切成數(shù)片，厚2～3ｍｍ），繼續(xù)固定。

6、骨組織：先鋸成小片（若是長骨應做橫向鋸片），在4％中性甲醛中固定24ｈ后，再進行脫鈣。

7、微小組織或液體沉淀物：先用拭紙或濾紙妥為包裹（須用大頭針扎牢），然后放入專用小盒內進行4％中性甲醛固定，以防檢材遺失。凡進入固定程序的標本必須連帶其正確無誤的病理檢驗號（病理號）。

（五）多數(shù)固定液對人體有害，需要防護，必須在封閉的通風條件下進行操作。

（六）組織塊的切取和固定。

1、由較大標本切取用于制作切片的組織塊（取材）時，應與標本的斷面平行，組織塊厚度一般為0.3cm（不應＞0.5cm），面積一般在（1～1.5）cm×（1～1.5）cm。

2、切取組織塊的形狀，在充分包括肉眼所見病變的前提下盡量規(guī)則些（例如方形、矩形、三角形等）；由一個標本切取的多塊組織的形狀有所不同，便于蠟塊與其相應切片的核對。

3、固定組織塊的固定液量，一般應為組織塊總體積的5～10倍以上。

4、室內常溫（25℃左右）下的固定時間為3～24ｈ；低溫（4℃）下的固定時間應延長。

5、固定組織塊的容器要大一些。

6、組織塊固定期間需要間斷地輕搖或攪動固定液以利于固定液的滲入。

（七）常用固定液。1、4％中性甲醛（10％中性福爾馬林）固定液： 甲醛（40％）100ｍｌ 無水磷酸氫二鈉6.5ｇ 磷酸二氫鈉4.0ｇ 蒸餾水900ｍｌ

2、乙醇-甲醛（酒精-福爾馬林，AF）固定液： 甲醛（40％）100ｍｌ 95％乙醇900ｍｌ

[說明]一般組織塊經(jīng)乙醇-甲醛固定１～2ｈ后，即可移入95％乙醇內脫水。

3、Carnoy固定液： 無水乙醇 60ｍｌ 氯仿 30ｍｌ 冰醋酸 10ｍｌ

[說明]本液是組織化學染色的常用固定液，組織經(jīng)Carnoy液固定1～2ｈ后，即可移入95％乙醇中脫水。

二、常規(guī)石蠟包埋組織切片（常規(guī)切片）的制備

（一）制備程序

1、水洗。

2、脫水。

3、透明。

4、浸蠟。

5、包埋。

6、切片。

（二）注意事項

組織切片制備及其HＥ染色過程中使用的乙醇、丙酮、二甲苯、石蠟等為易燃、有毒物，必須專人管理，2ｍ以內不得有明火，局部環(huán)境應有良好的通風和消防設施。

（三）常規(guī)切片的手工操作

1、水洗 用流水沖洗已經(jīng)固定的組織塊30min。

2、脫水（常溫下）

（1）乙醇-甲醛（AF）液固定：60～120min。（2）乙醇-甲醛（AF）液固定：60～120min。（3）80％乙醇：60 min。（4）95％乙醇Ⅰ：60 min。（5）95％乙醇Ⅱ：60 min。（6）無水乙醇Ⅰ：60 min。（7）無水乙醇Ⅱ：60 min。

3、透明

（1）正丁醇Ⅰ：30min。（2）正丁醇Ⅱ：30min。4.浸蠟；

（1）石蠟Ⅰ：（52-54℃）60min。（2）石蠟Ⅱ：（52-56℃）60min。（3）石蠟Ⅲ：（52-56℃）60min。

注意事項：（1）用熔化石蠟必須有專人負責，必須在熔蠟箱內或水浴中（70℃）進行，不得用明火加溫；（2）熔蠟的容積應為組織塊總體積的5～10倍以上；（3）組織塊經(jīng)二甲苯適度透明后方可轉人浸蠟過程，應盡可能減少將透明后組織塊表面的二甲苯帶入熔蠟中；（4）浸蠟時間適宜，過短時浸蠟不充分（組織過軟），過長時組織硬脆；（5）熔蠟應及時過濾、更換。

5、包埋

（1）先將熔化的石蠟傾入包埋模具中，再用加熱的彎曲鈍頭鑷子輕輕夾取已經(jīng)過浸蠟的組織塊，使組織塊的最大面或被特別指定處的組織面向下埋入熔蠟中，應將組織塊平整地置放于包埋模具底面的中央處。包埋于同一蠟塊內的多塊細小組織應彼此靠近并位于同一平面上；腔壁、皮膚和黏膜組織必須垂直包埋（立埋）。

（2）將與組織塊相關的病理號小條置入包埋模具內熔蠟的一側。（3）待包埋模具內的熔蠟表面凝固后，即將模具移入冷水中加速凝固。

（4）從包埋模具中取出凝固的包埋蠟塊（簡稱蠟塊），用刀片去除組織塊周圍的過多石蠟（組織塊周圍保留1～2ｍｍ石蠟為宜）。將包埋蠟塊修整成為規(guī)則的正方形或長方形。

（5）將病理號小條牢固地烙貼在蠟塊一側（編號應清晰可見）。（6）把修整好的蠟塊烙貼在支持器上，以備切片。（7）使用包埋機的方法按有關廠商的說明書操作。（8）注意事項。

①應將組織塊嚴格分件包埋。包埋時一定要首先認真核對組織塊的病理號（包括次級號）、塊數(shù)和取材醫(yī)師對包埋面的要求，準確地置入相應的病理號小條。發(fā)生包埋差錯時，必須立即與取材醫(yī)師和病理科當班負責人取得聯(lián)系，及時處置。

②必須嚴防各種異物污染，勿將無關組織如縫線、紙屑或其他異物（尤其是硬質異物）埋入蠟塊內。

③包埋過程要操作迅速，以免組織塊尚未埋妥前熔蠟凝固。

④包埋用的熔蠟應純凈，熔點適宜。浸蠟工用軟蠟（熔點為45～50℃），浸蠟Ⅱ、Ⅲ和包埋用蠟均用硬蠟（熔點為56～58℃）。

⑤包埋用熔蠟使用前應先靜置沉淀、過濾。

⑥熔蠟時不得使用明火，以防燃燒。包埋用熔蠟的溫度應＜65℃；包埋用的鑷子不可加溫過高，以免燙傷組織。

（六）切片

1、切片刀或一次性切片刀片必須鋒利。使用切片刀時，必須精心磨備（在低倍顯微鏡下確認刀刃無缺口）；使用一次性切片刀片時，應及時更新。

2、載玻片必須潔凈、光亮。

3、將切片刀或刀片安裝在持刀座上（以15°為宜）。

4、將蠟塊固定于支持器上，并調整蠟塊和刀刃至適當位置（刀刃與蠟塊表面呈5°夾角）。

5、細心移動刀座或蠟塊支持器，使蠟塊與刀刃接觸，旋緊刀座和蠟塊支持器。

6、修塊（粗切）。用右手勻速旋轉切片機輪，修切蠟塊表面至包埋其中的組織塊完整地全部切到。修塊粗切片的厚度為15～20μｍ［注意：對于醫(yī)囑再次深切片（特別是在原切片中發(fā)現(xiàn)了有意義病變而進行的深切片），應盡量少修塊，以盡量好地獲得有關病變的連續(xù)性]。

7、調節(jié)切片厚度調節(jié)器（一般為4～6μｍ），進行切片。切出的蠟片應連續(xù)成帶狀，完整無缺，厚度適宜（4～5μｍ）、均勻，無刀痕、顫痕、皺褶、開裂、缺損、松解等。

8、以專用小鑷子輕輕夾取完整、無刀痕、厚薄均勻的蠟片，放入伸展器的溫水中（45℃左右），使切片全面展開[注意：必須水溫適宜、潔凈（尤其是水面）；每切完一個蠟塊后，必須認真清理水面，不得遺留其他病例的組織碎片，以免污染]。

9、將蠟片附貼于涂有蛋白甘油或經(jīng)3-氨丙基-三乙氧基硅烷（3-aminopropyl-triethoxy silane，APES）處理過的載玻片上（HE染色時酌情使用，可省略）。蠟片應置放在載玻片右（或左）2/3處的中央，留出載玻片左（或右）1/3的位置用于貼附標簽。蠟片與載玻片之間無氣泡。

10、必須立即在置放了蠟片的載玻片一端（待貼標簽的一端），用優(yōu)質記號筆或刻號筆準確、清楚地標記其相應的病理號（包括次級號兒注意：必須確保載玻片上的病理號與相關組織石蠟包埋塊的病理號完全一致，不得錯寫或漏寫病理號）。

11、將置放了蠟片的載玻片呈４５°斜置片刻；待載玻片上的水分流下后，將其置于烤箱中烘烤（60～62℃，30～60min），然后即可進行染色。

12、注意事項。

（1）組織塊固定、脫水、透明和浸蠟的質量直接影響切片制備。切片過程中遇到的困難首先應注意從切片前的上述各環(huán)節(jié)中尋找原因。

（2）切片機的質量是制備優(yōu)質切片的重要前提。要使用質量好的切片機，規(guī)范地切片，精心維護切片機。

（3）經(jīng)由內鏡、穿刺等獲取的細小組織，應間斷性連續(xù)切片多面（一般至少制備６張蠟片，必要時制備更多張）。須做特殊染色、免疫組化染色等的病例，可預制蠟片備用。

（4）切片人員應細心操作，防范被切片刀具割傷。

三、冷凍組織切片的制備程序

（一）應用恒冷箱切片機制備切片

是目前最適用方法。恒冷箱切片機種類較多，應嚴格按有關廠商的說明書操作。用于切片的組織塊必須未曾固定并不能沾水。

（三）注意事項

1、制作冷凍切片所需的試劑和設備等應處于隨時可供使用狀態(tài)。

2、切取的組織塊大小適宜（厚度＜3ｍｍ），并盡快置于冷凍組織切片機上制備切片。

3、調節(jié)冷凍程度，試切合適時便迅速切片。冷凍不足無法切片，冷凍過度切片易碎。

4、冷凍切片固定液。

苦味酸飽和于80％酒精液 75ML 甲醛 10ML 丙酮 10ML 冰醋酸 5ML 醋酸 1G 5.冰凍切片操作程序

（1）新鮮組織冰凍切片入固定液中固定30秒中。（2）自來水洗1－2分鐘。

（3）用蘇木素置于60度下染核20—30秒。（4）自來水水洗1－2分鐘。

（5）0·5％－1％鹽酸酒精液分化1－2次（6）入弱氨水返蘭。（7）自來水洗1－2分鐘。（8）1％伊紅染液染色15秒鐘。

（9）逐級酒精脫水，二甲苯透明，中性樹膠封固。

四、脫鈣方法

骨和其他鈣化組織，通常需要脫去鈣鹽后進行切片。骨組織脫鈣前須先行固定。

（一）常規(guī)脫鈣法

1、將骨組織鋸成薄片（約1ｃｍ×1ｃｍ×0.3ｃｍ）。

2、在ＡＦ中或州中性甲醛中固定6～12ｈ。

3、將骨片置于5％硝酸（急需時可置于37℃溫箱）中脫鈣，至用針輕刺可進人時為止，需12～24ｈ（小塊骨組織脫鈣僅需2～3ｈ），其間可更新脫鈣液2～3次。

4、流水沖洗１～2ｈ。

5、移人5％甲明礬液，2～4h。

6、流水沖洗2～3ｈ。

7、按常規(guī)脫水。

8、石蠟包埋。

（二）電解脫鈣法

將骨片置于裝有8％硝酸和10％甲酸混合液的電泳槽（有蓋的方形玻璃標本缸或燒杯）內的陽極處，6Ｖ直流電源下持續(xù)電解30 min至3ｈ，至用針輕刺可入時為止。

（三）骨髓組織脫鈣

可浸泡于苦味酸乙醇飽和液（占85％）、甲醛（占10％）和冰醋酸（占5％）的混合液中（同時進行固定和脫鈣）。

（四）注意事項

1、骨片等脫鈣組織的厚度適宜。

2、脫鈣組織與脫鈣液的體積比＞1：30。

3、脫鈣過程中應不時搖動，多次更換脫鈣液。

4、脫鈣時間不可過長。

5、微波處理可加速脫鈣過程。

6、脫鈣后的組織必須用流水充分沖洗。

7、用于包埋的石蠟硬度適中（不要過軟或過硬）。

五、蘇木精一伊紅（ＨＥ）染色

HE染色是應用最廣泛的組織病理學常規(guī)染色技術。

（一）染色程序

1、石蠟切片 HE染色（常規(guī)HE染色）（1）松節(jié)油Ⅰ：5～10min。（2）松節(jié)油Ⅱ：5～10min。（3）水乙醇Ⅰ：1～3min。（4）無水乙醇Ⅱ：1～3min。（5）95％乙醇Ⅰ：1～3min。（6）95％乙醇Ⅱ：1～3min。（7）80％乙醇：1min。（8）蒸餾水：1min。

（9）蘇木精液染色：10～20 min。（10）流水洗去蘇木精液：1min。（11）１％鹽酸-乙醇：1～3s。（12）稍水洗：1～2s。

（13）返藍（用溫水或１％氨水等）：5～10s。（14）流水沖洗：1～2 min。（15）蒸餾水洗：1～2ｍmin（16）0.5％伊紅液染色：min。（17）蒸餾水稍洗：1～2s。（18）８０％乙醇：1～2s。（19）無水乙醇Ⅰ：3～5 min。（20）無水乙醇Ⅱ：3～5 min。（21）無水乙醇Ⅲ：3～5 min（22）中性樹膠封固。

2、冷凍切片ＨＥ染色

（1）冷凍切片固定：10～30s。（2）稍水洗：1～2Ｓ。

（3）蘇木精液染色（60℃）：30～60s。（4）流水洗去蘇木精液：5～10s。（5）１％鹽酸-乙醇：1～3Ｓ。（6）稍水洗：1～2ｍｉｎ。

（7）返藍（用溫水或1％氨水等）：5～10s。（8）流水沖洗：15～30s。（9）0.5％伊紅液染色：1～2 min。（10）蒸餾水稍洗：1～2 min。（11）80％乙醇：1～2 min。（12）95％乙醇：1～2 min。（13）無水乙醇Ⅰ：1～2 min。（14）無水乙醇Ⅱ：1～2 min。（15）石炭酸-二甲苯：2～3min。（16）二甲苯Ｉ：2～3min。（17）二甲苯Ⅱ：2～3min。（18）中性樹膠封固。

上述（7）和（8）項可省去，但（9）的沖水時間須延長至10～15min（細胞核顯示更清晰）；(15)項可用無水乙醇代替，北方地區(qū)可省略。

（二）染色結果

細胞核呈藍色，細胞質、肌纖維、膠原纖維和紅細胞呈不同程度的紅色。鈣鹽和細菌可呈藍色或紫藍色。

（三）染色注意事項

1、切片染色前，應徹底脫蠟。

2、用含有升汞液體固定的組織，其切片染色前應先脫去汞鹽。（1）石蠟切片脫蠟至水洗。（2）Ｌｕｇｏｌ碘液：20min。（3）流水沖洗：5 min。（4）95％乙醇：10min。（5）水洗：1min。

（6）5％次亞硫酸鈉水溶液：5 min。（7）流水沖洗：5min。

（8）顯微鏡觀察除汞滿意后，轉入HE染色。

3、脫除甲醛色素（必要時）。（1）石蠟切片脫蠟至水洗。

（2）１％ＮａＯＨ（ｌｍｌ）與８０％乙醇（９９ｍｌ）混合液：１０min。（3）流水沖洗：5 min。（4）轉入ＨＥ染色。

4、嚴格執(zhí)行ＨＥ染色流程，用顯微鏡控制細胞核的蘇木精染色質量。ＨＥ染片應著色鮮艷，紅、藍分明，對比清晰。

5、載玻片自二甲苯中取出后，應立即用潔凈、光亮的蓋玻片和稠度適宜的中性樹膠濕封載玻片。封蓋處內無氣泡，外無溢膠。封片時必須進行操作人員和局部環(huán)境的二甲苯污染防護。不應將組織切片烤干或風干后再行封片。

6、必須在載玻片的一端牢貼標簽。標簽上應印有病理科所在的醫(yī)院名稱。標簽上應清楚顯示有關的病理號及其次級號；標簽上的病理號應準確無誤，無涂改。

7、制片完成后，技術人員應將切片與其相應的病理學檢杏記錄單或取材工作記錄單認真進行核對；確認無誤后，將制備好的切片連同相關的活檢申請單、活檢記錄單以及取材工作單等一并移交給有關的病理醫(yī)師；交接雙方經(jīng)核對無誤后，辦理移交簽字手續(xù)。

8、石蠟切片-ＨＥ染色的優(yōu)良率（甲、乙級切片所占的比率）應≥90％。石蠟切片-ＨＥ染色質量的基本標準列于表２－１。

9、制片工作一般應在取材后２個工作日內完成（不合進行脫鈣、脫脂等需要特殊處理的標本）。

10、制片過程出現(xiàn)意外情況時，技術室人員應及時向病理醫(yī)師和病理科主任報告，設法予以補救。

（四）HE染色試劑的配制

1、蘇木精染液

（1）Ｈａｒｒｉ蘇木精染液： 蘇木精1ｇ 無水乙醇１０ｍｌ 硫酸鋁鉀２０ｇ 蒸餾水２００ｍｌ 氧化汞0.5ｇ 冰醋酸8ｍｌ

先用無水乙醇溶解蘇木精，用蒸餾水加熱溶解硫酸鋁鉀，然后將該兩液合并煮沸，加人氧化汞，繼續(xù)加熱和攪拌溶液至深紫色，隨即用冰水冷卻，恢復至室溫后過濾備用。使用前加人冰醋酸并混勻、過濾。

（2）Ｇｉｌｌ改良蘇木精液： 蘇木精2ｇ 無水乙醇250ｍｌ 硫酸鋁鉀17ｇ 蒸餾水750ｍｌ 碘酸鈉0.2ｇ 冰醋酸20ｍｌ

先用無水乙醇溶解蘇木精，用蒸餾水溶解硫酸鋁鉀，然后將該兩液混合，再依次加入碘酸鈉和冰醋酸。使用前過濾。

（3）Ｍａｙｅｒ改良蘇木精液： Ａ液：蘇木精2ｇ 無水乙醇40ｍｌ Ｂ液：硫酸鋁鉀100ｇ 蒸餾水 600ｍｌ

將蘇木精溶于無水乙醇中（Ａ液）；稍加熱，使硫酸鋁鉀溶于蒸餾水中出液）。將Ａ液與Ｂ液混合后煮沸2 min，再用蒸餾水補足至60ml，加入400mg碘化鈉充分混勻。染液呈紫紅色。

2、針吸法穿刺術操作要點。

（1）用手固定腫物，將安裝在空注射器上的穿刺用針頭刺人腫物，然后外拉管芯２cm。（2）迅速上下提插注射器管芯10～20次（其間變換針頭方向3～4次），遂使腫物不同部位的較多內容吸進人針頭和注射器內。

（3）將注射器與針頭分離（管內負壓因而解除）；隨后，再將該注射器與仍插于腫物內的針頭相接，拔出針頭，穿刺結束。

（4）迅速推動注射器的管芯，盡快地將位于穿刺針頭內的少量吸出物排射在２～３張清潔的載玻片上，進行涂片。

3、涂片方法。用針頭將載玻片上的吸出物輕輕均勻撥開，或用推片法朝一個方向展開（不可雙向往返推移）。

4、吸出物過少時，可向離心管內沖洗穿刺針頭，再將沖洗液離心，然后取其沉淀物涂片，參見上文“

一、”項“

（五）液體涂片的制作”。

5、吸出物較多時，可用適量５０％乙醇-生理鹽水液將涂片后注射器和針頭內剩余的吸出物沖洗至離心管中，離心后，取其沉淀物制作常規(guī)石蠟包埋切片。

6、吸出物中含有細小組織塊時，應將其制作常規(guī)石蠟包埋切片。

7、內臟腫物穿刺時，必須在影像學檢查的引導下用較長細針進行穿刺。

8、穿刺操作完成后，即在細胞病理學檢查單上書寫穿刺記錄。

第二節(jié) 細胞學診斷檢材的制備技術

一、組織印片、壓片的制備

（一）組織印片

1、用鋒利刀片剖開剛切取的新鮮腫瘤組織或淋巴結等，然后用清潔載玻片輕壓于組織剖面處，將組織表面的細胞成分印在玻片上。用稍微加溫的載玻片制備印片時，可印得較多細胞。

2、制作淋巴結印片前，應先用濾紙吸去淋巴結切面上的血液、組織液。

（二）壓片

1、選取微小薄片組織平鋪于一張載玻片上，再用另一張載玻片疊加其上并予輕壓。

2、腦組織質軟，易于制作壓片；稍硬的組織須切成細碎薄片制作壓片。

二、涂片的固定

（一）用于ＨＥ染色和巴氏染色的涂片必須濕固定，即涂片后立即進行固定。乳頭溢液涂片和液體標本離心沉淀物涂片，應待涂膜潮干（即周膜稍干而其中央?yún)^(qū)域未干）時進行固定。用于瑞氏染色、Ｍａｙ-Ｇｒüｎｗａｌｄ-姬姆薩染色和免疫細胞化學染色的涂片，必須干固定，即待涂片稍干后再進行固定。

（二）巴氏（Ｐａｐａｎｉｃｏｌａｏｕ）染色巴氏染色時，細胞透明度好，細胞結構清晰，色彩豐富而鮮艷，主要用于婦科細胞學涂片、痰涂片和富含鱗狀上皮細胞的涂片檢查。

1、試劑配制

（1）Ｈａｒｒｉ蘇木精液：參見本章第一節(jié)“

五、蘇木精-伊紅（ＨＥ）染色”。（2）鹽酸-乙醇液： 濃鹽酸1ｍｌ 70％乙醇99ｍｌ（3）橙黃Ｇ6液： 橙黃Ｇ6 0.5ｇ 蒸餾水5ｍｌ 無水乙醇95ｍｌ 磷鎢酸0.015ｇ

先將橙黃Ｇ6溶于蒸餾水中，再加人無水乙醇，然后加人磷鎢酸。（4）ＥＡ36染液： ①ＥＡ36儲備液

Ａ液：亮綠0.5ｇ，溶于5ｍｌ蒸餾水中，溶解后加人無水乙醇至 100ｍｌ。Ｂ液：伊紅0.5ｇ，溶于5ｍｌ蒸餾水中，溶解后加人無水乙醇至100ｍｌ。Ｃ液：俾士麥棕 0.5ｇ，溶于5ｍｌ蒸餾水中，溶解后加人無水乙醇至100ｍｌ。②ＥＡ36工作液

ＥＡ36儲備液的Ａ液45ｍｌ ＥＡ36儲備液的 Ｂ液45ｍｌ ＥＡ36儲備液的Ｃ液10ｍｌ 磷鎢酸0.2ｇ

碳酸鋰飽和水溶液1滴

2、染色程序

（1）將已經(jīng)固定的涂片置于80％乙醇中２min。（2）蒸餾水洗2min。

（3）蘇木精液染核10～12min，自來水洗。

（4）鹽酸-乙醇液分化約20～30s，至涂片呈淡橙紅色。（5）流水沖洗10～15min，蒸餾水洗。（6）依次用80％、95％乙醇脫水，各2 min。（7）橙黃Ｇ６液染色3～5 min。

（8）95％乙醇洗2～3次，洗去多余染液。（9）ＥＡ36工作液染色3-5 min。（10）95％乙醇洗2～3次，洗去多余染液。（11）無水乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片。

3、染色結果 細胞核呈深藍色，核仁呈紅色；不同分化類型的鱗狀上皮細胞，其細胞質顏色各異：角化細胞呈粉紅色，不全角化細胞呈橙黃色，角化前細胞呈淡藍或淡綠色；紅細胞呈橙紅或鮮紅色，白細胞的細胞質呈淡藍綠色；黏液呈淡藍或粉紅色。

（三）瑞氏（Ｗｒｉｇｈｔ）染色 瑞氏染色一般用于血液涂片，也可用于檢查腫瘤細胞。

1、試劑配制（1）瑞氏染液： 瑞氏染料1ｇ 甲醇600ｍｌ

將瑞氏染料放人研缽內，加人適量甲醇與之混合研磨，使染料逐漸溶解。將溶解的染液傾入另一玻璃瓶內，然后再加人適量甲醇繼續(xù)研磨；未溶解的染料如此反復多次，直至染料完全溶解、甲醇用完為止。染液避光保存?zhèn)溆谩?/p>

（2）磷酸鹽緩沖液： 無水磷酸氫二鈉６·ｓｇ 磷酸二氫鈉4ｇ 蒸餾水1000ｍｌ ｐＨ：6.5～7.0

2、染色程序（1）涂片自然干燥。（2）滴加瑞氏液染色1min。

（3）滴加等量的磷酸緩沖液，輕輕搖蕩玻片或用洗耳膠球在玻片上輕輕吹氣，使兩液體混合均勻，持續(xù)10～15min。

（4）流水洗去染液。

（5）涂片風干后，二甲苯透明，中性樹膠封片。

3、染色結果 胞核呈紫紅色，細胞質呈紫藍色，黏液呈粉紅色或淡藍色。

（四）Ｍａｙ－Ｇｒüｎｗａｌｄ姬姆薩（Ｇｉｅｍｓａ）染色

Ｍａｙ－Ｇｒüｎｗａｌｄ一姬姆薩染色適用于造血系統(tǒng)的細胞涂片和鑒別惡型淋巴瘤的類型。Ｍａｙ-Ｇｒüｎｗａｌｄ原液和姬姆薩原液配制繁瑣，可直接購買。

1、試劑配制

（1）Ｍａｙ－Ｇｒüｎｗａｌｄ工作液： Ｍａｙ－Ｇｒüｎｗａｌｄ原液１份 蒸餾水6～10份 使用前配制。（2）姬姆薩工作液： 姬姆薩原液1份 蒸餾水6～10份 使用前配制。

2、染色程序

（1）涂片自然干燥，蒸餾水洗1～2min。

（2）Ｍａｙ－Ｇｒüｎｗａｌｄ作液染 15～30min。（3）自來水沖洗，洗去載玻片上的染液，蒸餾水稍洗。（4）姬姆薩工作液染15～30min。（5）自來水沖洗，洗去載玻片上的染液。（6）涂片風干后，二甲苯透明，中性樹膠封片。

3、染色結果 胞核呈紫紅色，細胞質和核仁呈藍紫色。

（五）Ｒａｋｏｆｆ染色

Ｒａｋｏｆｆ染色用于陰道細胞學涂片快速測定雌激素水平。

1、試劑配制

（1）5％淡綠水溶液83ｍｌ（2）1％伊紅水溶液17ｍｌ 將兩液混合后使用。

2、染色程序

（1）用細胞刷沿陰道側壁刷取黏膜鱗狀上皮細胞，放入裝有1～2ｍｌ生理鹽水的試管內。

（2）在試管內滴入3滴Ｒａｋｏｆｆ染液，用細胞刷在染液中輕搖混合。（3）將1～2滴混合液滴于載玻片上，制成涂片。（4）待涂片干燥后，用中性樹膠封片。

3、染色結果 鱗狀上皮細胞的嗜酸性和嗜堿性細胞質區(qū)分明顯。角化前細胞的核呈網(wǎng)狀，角化細胞的固縮核呈基本不著色的空泡狀。

三、TCT細胞學診斷方式及要求

一、標本評估 ㈠滿意標本

⒈送檢標本貼標簽，有編號，有申請目的。

⒉有關臨床病史填入送檢單（如年齡、末次月經(jīng)陰道宮頸和盆腔檢查主要發(fā)現(xiàn)）。⒊有足夠量保存好并結構清晰鱗狀上皮細胞達8000－12000個，其覆蓋液基制片應超過30－40％。

⒋足夠量頸管柱狀上皮團（1或2團，每團不少于10個或5個細胞），或有移行區(qū)細胞成分（化生細胞）。除此之外，保存好的鱗狀上皮細胞達5000個以上即可。㈡不滿意標本

⒈標本沒有識別標志和申請目的。⒉載玻片破裂而不能修復。

⒊缺乏足夠量、保存好并結構清晰鱗狀上皮細胞，覆蓋面少于10％。

⒋血細胞和炎細胞過多，細胞重疊、過厚，固定欠佳，空氣干燥和污染等因素，影響75％或更多上皮細胞的觀察。㈢不滿意標本處理原則

⒈說明拒收或不能制片的詳細原因。

⒉標本已進行制片和檢查，應說明何種原因引起無法滿意地對上皮細胞異常做出評估。

二、描述性診斷報告 ㈠反應性細胞改變

⒈炎癥反應（輕度 中度 重度）⒉萎縮反應（伴或不伴炎癥）⒊IUD反應 ⒋放療反應 ㈡鱗狀上皮細胞異常 ⒈無明確診斷意義的非典型鱗狀上皮細胞（ASCUS）

⒉非典型鱗狀上皮細胞,不除外高度鱗狀上皮內病變（ASC-H）⒊低度鱗狀上皮內病變（LSIL,CINⅠ）⒋高度鱗狀上皮內病變（HSIL,CINⅡⅢ）⒌鱗狀細胞癌（SCC）㈢腺上皮細胞異常

⒈非典型腺上皮細胞（AGC）⑴宮頸腺細胞 ⑵宮內膜細胞 ⒉非典型腺上皮細胞，不除外腺癌 ⒊腺癌

⑴宮頸腺癌 ⑵宮內膜腺癌 ⑶宮外腺癌

三、對診斷及治療建議

㈠有性行為的婦女在開始3年每年做1次宮頸抹片，若均為陰性以后每3年做1次，直至65歲。

㈡對ASCUS的處理意見分為重復涂片、檢測HPV和行陰道鏡檢查三種。⒈若能保證隨訪，3－6月復查涂片連續(xù)2年。

⒉若不能保證隨訪，或患者有高危因素，應立即做陰道鏡或組織活檢。

⒊宮頸瘤樣病變（包括ASCH）或臨床可疑病變而細胞學陰性，需做陰道鏡下組織活檢。⑴活檢結果為CINⅡ，行物理、抗炎等治療或宮頸錐切術。

⑵活檢結果為CINⅢ，45歲以下，行宮頸錐切或Leep刀宮頸環(huán)切；45歲以上或患者強烈要求，可行全宮切除，之后陰道鏡或細胞學定期隨訪。第一年每3月1次，第二、三年每6月1次，第四、五年每年1次。

⑶鱗癌、腺癌或其他類型惡性腫瘤，按具體臨床手術分期做相應的全宮切除和（或）加淋巴結清掃，必要時手術前后加放療或化療。

四、TCT質量管理標準

一、診斷部分 ㈠閱片嚴格核對編號、標本得5分；如標本與申請單據(jù)不符，應及時與臨床聯(lián)系，并報告上級醫(yī)師；如查對結果屬臨床差錯，本科得0.5分，如屬本科差錯扣0.5分。

㈡TCT標本應于3-5日內出報告，遇有疑難病例請值班主治醫(yī)師復驗，主治醫(yī)師如有疑難，請主任醫(yī)師復驗，實行三級復驗制得5分。

㈢病理報告書寫正確，條理清晰，無錯別字，無涂改得5分，如有一項欠缺扣0.1分。㈣細胞診斷嚴肅認真，防止差錯，正確診斷得10分，如有差錯，分清責任，及時登記，并按情節(jié)扣分。

㈤復驗完畢申請單和切片應有次序地交檔案室保管得4分，不得遺失或差錯，如有差錯每次扣0.1分。

㈥每人使用顯微鏡，負責保養(yǎng)愛護得3分，如有損害酌情扣分。㈦下班前關好門窗、水電，不出事故得3分，出事故酌情扣分。

二、技術部分

㈠收標本要嚴格核對編號與標本是否相符，得5分。如標本與申請單據(jù)不符，應及時與臨床聯(lián)系，屬臨床差錯，本科得0.5分，如屬本科差錯扣0.5分。㈡收到標本及時編號、登記，得5分，如做得不好每項扣0.1分。㈢嚴格執(zhí)行，遵守技術操作規(guī)程得5分，如有貼標簽差錯扣0.1分。

㈣制片要保證質量，染色鮮亮，核漿對比清晰得10分，如影響診斷扣0.5分。

㈤報告及時發(fā)出，并有登記簽收本，發(fā)出報告后7天內將診斷結果登記在記錄本上得5分，漏登記扣0.1分。

㈥收存切片、申請單要核對切片數(shù)，并及時整理歸檔，切片資料按章保管得5分，如有差錯每次扣0.1分。

㈦下班前關好門窗、水電，確保正常工作秩序，不出事故得3分，出事故酌情扣分。

三、切片質量控制

技術人員應檢查制片質量：染色片的優(yōu)良率（甲、乙級切片所占的比例）＞90％，優(yōu)級率（甲級切片所占的比例）35％。不合格切片應立即重做。TCT切片質量控制標準（參照常規(guī)石蠟包埋一HE染色片質量標準）

㈠細胞片無污染物，20分；有污染物，扣20分。㈡無氣泡（細胞片與載玻片間/蓋玻片與細胞片、載玻片間），蓋玻片周圍無膠液外溢，20分；有氣泡，扣6分，膠液外溢，扣6分。

㈢細胞核與細胞質染色對比鮮明、清晰，20分；細胞核著色灰或著色過蘭，扣10分，紅（細胞質）與蘭（細胞核）對比不清晰，扣10分。

㈣透明度好20分；透明度差，扣2－6分，細胞結構模糊，扣10－15分。

㈤切片整潔標簽端正粘牢編號清晰，20分；切片不整潔，扣6分，標簽粘貼不牢，扣6分，編號不清晰，扣8分。㈥切片質量分級標準

甲級片≥90分（優(yōu)）；乙級片75－89分（良）；丙級片60－74分（基本合格）；丁級片≤59分（不合格）

第三章 免疫組化染色操作常規(guī)

一、石蠟切片脫蠟和水化后，用PBS（Ph7.4）沖洗三次，每次3分鐘。

二、根據(jù)每一種抗體的要求，對組織抗原進行相應的修復。

三、如有必要（內源性過氧化物酶含量高的組織），每張切片加1滴3%過氧化氫，室溫下孵育10分鐘，以阻斷內源性過氧化物酶的活性。PBS沖洗三次，每次3分鐘，除去PBS液。

四、每張切片加1滴或50μl第一抗體（用戶自選），室溫下孵育60分鐘或4℃過夜。

五、PBS沖洗三次，每次3-5分鐘。除去PBS液，每張切片加1滴或50μl第二抗體，室溫下孵育10-15分鐘。PBS沖洗三次，每次3分鐘。

六、除去PBS液，每張切片加2滴或100μl新鮮配制的DAB或AEC溶液，顯微鏡下觀察3-5分鐘（DAB）或10分鐘（AEC）。

七、自來水沖洗，蘇木素復染，自來水沖洗返藍。二甲苯透明，中性樹膠封固。

第四章 病理科易燃易爆物品管理規(guī)定

1易燃易爆物品應嚴格按照相關部門發(fā)布的管理辦法進行管理。分類儲存，保持通風，避免高溫和陽光照射。

2倉庫必須遠離火源，貼有嚴禁煙火標志，配有相應消防器材。3由專人負責管理，接受，出入庫記錄。

4對性質不穩(wěn)定的藥品應定期檢查，定期清點數(shù)量，查看試劑包裝是否有破損、溢液等，若發(fā)現(xiàn)情況及時處理。

5對過期物品應定期清理，送有關部門進行銷毀。

6、凡遇“元旦”、“春節(jié)”、“五一”、“十一”等長假，應進行嚴格檢查登記。