第一篇：分子生物學(xué)教學(xué)改革總結(jié)2014-7-7

高校課堂教學(xué)改革工作總結(jié)

（陳珂珂）

本學(xué)期在2012級生物技術(shù)專業(yè)進行了《分子生物學(xué)》課程教學(xué)改革的初步嘗試，以改變傳統(tǒng)的“教師教、學(xué)生學(xué)”的死板的課堂教學(xué)為目的，促進學(xué)生的學(xué)習(xí)積極性和對知識掌握的牢固性，我從兩個方面著手進行了改革，改革的效果和不足總結(jié)如下：

一、課堂測試及課后作業(yè)

大學(xué)的教學(xué)比較開放，教師對課堂的管理較中學(xué)松懈很多，教師對學(xué)生知識的掌握程度了解度不夠，學(xué)生基本靠自主學(xué)習(xí)，有部分同學(xué)的學(xué)習(xí)就比較盲目無重點。同時在課下，教師監(jiān)督不到位的情況下，很多同學(xué)就隨波逐流，放縱自我。期末考試就靠臨時抱佛腳，考試成績也并不理想。

因此，本學(xué)期開始，除了在課堂上對重點難點反復(fù)強調(diào)講解之外，在本章節(jié)結(jié)束后，也會對本章的重點知識布置課后作業(yè)，促使學(xué)生在課下也能夠復(fù)習(xí)課堂內(nèi)容，及時消化吸收。同時對于一些比較難以理解的內(nèi)容，利用這種形式也促使學(xué)生能夠主動查閱少量的文獻資料。在課程進行一半時，進行課堂測驗，檢驗學(xué)生對前面課程內(nèi)容的掌握情況，以在今后的教學(xué)中更好的有的放矢。

本學(xué)期共布置了2次課后作業(yè)，進行了1次課堂測驗。從結(jié)果來看，課后作業(yè)完成較好，但不乏部分同學(xué)抄襲的痕跡。從課堂測驗的分?jǐn)?shù)來看，大部分同學(xué)能夠掌握理解大部分的知識，少部分同學(xué)測試成績很不理想。

二、討論教學(xué)

在分子生物學(xué)的教學(xué)中，設(shè)置了兩個專題講述，一個是PCR技術(shù)，在實驗課中完成。二是人類基因組計劃，由學(xué)生討論完成。討論式教學(xué)的目的是為了增加課堂的趣味性，及學(xué)生參與的積極性，從中也能檢驗出學(xué)生的提出問題解決問題的能力、自我收集材料的能力，小組成員之間的相互配合情況等等方面的素質(zhì)。

1.教學(xué)程序，提前3周由教師提出計劃，簡單介紹人類基因組計劃（HGP），將專題內(nèi)容分為5個小部分，分組進行資料查詢和ppt制作，以小組為單位匯報，其他小組提問，由教師打分，總時間為2個課時。小組匯報內(nèi)容分別是：（1）HGP介紹

（2）HGP之遺傳圖譜的繪制

（3）HGP之物理圖譜的繪制

（4）HGP之序列圖譜的繪制

（5）HGP之轉(zhuǎn)錄圖譜的繪制

根據(jù)學(xué)生的講述，最后將提出的問題進行匯總，并以課后作業(yè)的形式布置給學(xué)生，讓其在課下繼續(xù)查閱文獻資料，進行回答。問題如下：

（1）HGP的意義何在？

（2）繪制遺傳圖譜時，分子標(biāo)記有哪些？（3）物理圖譜和遺傳圖譜的區(qū)別？（4）什么是STS標(biāo)簽，并舉例說明？（5）EST序列是什么？作用是什么？（6）DNA測序方法有哪些？ 2.效果

討論的效果沒有達到預(yù)期效果，學(xué)生的ppt制作、講解及對內(nèi)容的理解充分。大家除了對小故事很感興趣外，對于專業(yè)的知識不慎熱衷，查閱資料不充分，對于前沿的英文文獻置之不理。這也充分說明學(xué)生的自主學(xué)習(xí)能力還不夠，教師的督促也不能有絲毫的放松。

3.不足

這次討論課存在著很多的不足。第一，高估了學(xué)生的知識儲備，設(shè)置的專題有點難度，不夠大眾化。第二，教師的不足，在任務(wù)布置下去之后，沒有及時的進行監(jiān)督檢查。第三，課時設(shè)置不足，在以小組為單位的討論中，由于時間限制，兼顧不到每個人的發(fā)言。

總結(jié)：這次嘗試不是很成功，這些經(jīng)驗不足的積累，以期指導(dǎo)今后的教學(xué)改革工作。

第二篇：分子生物學(xué)課程教學(xué)改革初探

分子生物學(xué)課程教學(xué)改革初探

摘要：文章總結(jié)了在十余年分子生物學(xué)教學(xué)過程中，不斷開展的對教師自身綜合素質(zhì)和能力、教學(xué)內(nèi)容、教學(xué)方法和教學(xué)手段的改革探索，旨在提高分子生物學(xué)的教學(xué)效果。實踐證實，新的教學(xué)模式，在傳授學(xué)生專業(yè)知識的同時，激發(fā)了學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣，改進了學(xué)生的學(xué)習(xí)方法，也逐步提高了學(xué)生的自主學(xué)習(xí)能力，從而滿足了社會對高素質(zhì)創(chuàng)新型生物人才的需求。

關(guān)鍵詞：分子生物學(xué)；課程教學(xué)；改革研究；創(chuàng)新生物學(xué)人才

中圖分類號：G642.0 文獻標(biāo)志碼：A 文章編號：1674-9324（2016）26-0128-03

前言：

分子生物學(xué)的目標(biāo)是在分子水平上闡明細胞活動的規(guī)律，從而揭示生命的本質(zhì)[1]。雖然它在生物類專業(yè)課程體系中充當(dāng)著重要角色，對生命科學(xué)的發(fā)展起著至關(guān)重要的作用，但是分子生物學(xué)的教學(xué)卻因為課程內(nèi)容多，學(xué)科交叉廣，理解難度高，信息量大，知識更新快而使教學(xué)效果差強人意，集中表現(xiàn)為教師授課難和學(xué)生學(xué)習(xí)難。這種現(xiàn)狀不但困擾著老師和同學(xué)，也與大學(xué)培養(yǎng)高素質(zhì)創(chuàng)新型人才的目標(biāo)不相適應(yīng)。如何克服分子生物學(xué)課堂教學(xué)的“瓶頸”？本人在從事十多年的分子生物學(xué)教學(xué)過程中，努力研究和探索多種形式的教學(xué)改革，力求提升教學(xué)效果和教學(xué)質(zhì)量。

一、教學(xué)內(nèi)容的合理組織

分子生物學(xué)的教學(xué)除了選用好的教材，制定完善的教學(xué)大綱，如何組織教學(xué)內(nèi)容是教學(xué)的一個非常重要環(huán)節(jié)[2]。教學(xué)內(nèi)容呈現(xiàn)給學(xué)生的應(yīng)該是完整、清晰的、有層次、條理的知識。我們在組織教學(xué)的過程中，首先從提高自身學(xué)科素養(yǎng)著手?！耙槐窘滩臅瑪?shù)種參考書”，除分子生物學(xué)國內(nèi)、國外各類版本外，與分子生物學(xué)相互交叉和滲透的其他學(xué)科，如細胞生物學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)，我們也都進行了系統(tǒng)的學(xué)習(xí)和強化，不斷夯實專業(yè)知識、拓展專業(yè)領(lǐng)域，基本構(gòu)建了分子生物學(xué)完整的知識體系，具備了對教材處理的前提。既避免了教學(xué)中各學(xué)科的重復(fù)，也進一步凝練了知識。此外，我們還通過網(wǎng)絡(luò)教學(xué)平臺向全國優(yōu)秀教師學(xué)習(xí)，在不斷的探索中總結(jié)出了教學(xué)內(nèi)容合理組織的一些思路。

1.思維導(dǎo)學(xué)模式。在DNA復(fù)制教學(xué)環(huán)節(jié)，知識點多，并且較分散，很容易在教學(xué)中造成學(xué)習(xí)困難和知識混淆的現(xiàn)象，針對這章教學(xué)的特點，我們采用了思維導(dǎo)學(xué)模式，收到了非常好的教學(xué)效果。

2.重點、難點解讀。本科教學(xué)形式多樣化，也更提倡學(xué)生的自主學(xué)習(xí)，但并不是淡化了教師的教學(xué)，反而對教師提出了更高的要求[3]。教師必須圍繞每堂課的教學(xué)目的，合理組織和引導(dǎo)學(xué)生理解并掌握教學(xué)的重點和難點內(nèi)容。

比如在講解染色體端粒末端修復(fù)機制中，教師首先要從教材的知識結(jié)構(gòu)中梳理出重點。染色體端粒末端修復(fù)機制的知識點包括：（1）引物切除造成的遺傳信息缺失；（2）端粒末端的特點；（3）體細胞和性細胞末端修復(fù)機制的不同；（4）DNA結(jié)構(gòu)的變化；（5）端粒酶的修復(fù)機制。梳理知識點后，總結(jié)教學(xué)重點：一是引物切除后損傷修復(fù)在體細胞和性細胞中的不同；二是四鏈DNA結(jié)構(gòu)；三是端粒酶的修復(fù)機制。其中端粒酶修復(fù)機制的講授是學(xué)生學(xué)習(xí)的難點。難點集中在端粒酶的性質(zhì)和修復(fù)發(fā)生的過程。

經(jīng)過對教學(xué)內(nèi)容中重點和難點的準(zhǔn)確把握和合理組織，教師才能在課堂教學(xué)中突出重點、突破難點，讓學(xué)生的課堂學(xué)習(xí)無障礙。

二、教學(xué)方法和手段的改進

教學(xué)方法的推陳出新，是教學(xué)改革的重要內(nèi)容[4]。為發(fā)揮學(xué)生作為教學(xué)主體的能動性，我們根據(jù)具體的教學(xué)內(nèi)容設(shè)置了啟發(fā)式、聯(lián)想式、探究式等多種教學(xué)方法[5]，讓學(xué)生參與到教學(xué)過程中，不僅活躍了課堂氣氛，而且在分享知識的同時，更注重教會學(xué)生靈活掌握學(xué)習(xí)的方法。

1.啟發(fā)式教學(xué)。啟發(fā)的目的在于舉一反三，觸類旁通。針對每一次的課堂教學(xué)，設(shè)計一些拋磚引玉的問題，供學(xué)生思考與討論，這成為了分子生物學(xué)理論教學(xué)的重要組成部分。如進行到真核生物基因表達調(diào)控學(xué)習(xí)環(huán)節(jié)，提出甲基化修飾的生物學(xué)意義，這個問題覆蓋范圍廣，涉及到了DNA復(fù)制的調(diào)節(jié)、蛋白質(zhì)和DNA甲基化修飾對基因表達的調(diào)控，以及Epigenetic（表觀遺傳學(xué)）方面的知識。通過提出問題―討論分析―不斷啟發(fā)―再討論分析―歸納總結(jié)―解決問題這一系列的互動教學(xué)活動，充分調(diào)動了學(xué)生課堂學(xué)習(xí)的主動性和積極性，在不斷的討論分析中通過展示不同的思維、發(fā)表各自的觀點，不但有利于促進學(xué)生在學(xué)習(xí)中發(fā)現(xiàn)問題、解決問題，而且有利于學(xué)生通過對基礎(chǔ)知識的消化、理解來達到理論的升華、拓展[4]。

2.聯(lián)想式教學(xué)。分子生物學(xué)是在生物化學(xué)、細胞生物學(xué)和遺傳學(xué)的基礎(chǔ)上發(fā)展而來[6]，因此知識相互交叉、相互滲透。在授課的過程中，教師一方面要避免重復(fù)，一方面要通過聯(lián)想知識點適時培養(yǎng)學(xué)生的發(fā)散性思維，提高學(xué)生對知識的遷移能力和整合能力。如在講解化學(xué)修飾對基因的表達調(diào)控時，將細胞生物學(xué)中的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)有機結(jié)合，使學(xué)生了解基因表達調(diào)控對細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的作用機制。

3.探究式教學(xué)。在分子生物學(xué)教學(xué)中，每一個理論知識的背后都是科學(xué)研究的重大突破。如確定遺傳物質(zhì)是DNA的兩大經(jīng)典實驗，我們以探究的形式呈現(xiàn)教學(xué)內(nèi)容，從實驗設(shè)計，到結(jié)果顯示，再經(jīng)過討論分析并得出結(jié)論，以課題研究的角度，研究人員的身份引導(dǎo)學(xué)生進入學(xué)習(xí)角色，將學(xué)科概念、理論產(chǎn)生的起因和過程展示給學(xué)生，啟發(fā)學(xué)生努力探索，走近科學(xué)，讓學(xué)生從中領(lǐng)悟知識形成的探究性和科學(xué)性，逐漸培養(yǎng)具有創(chuàng)新意識和能力的高素質(zhì)研究型人才。

4.多媒體多樣化教學(xué)。分子生物學(xué)的教學(xué)內(nèi)容具有微觀性、復(fù)雜性、抽象性和動態(tài)性。傳統(tǒng)的教學(xué)手段無法滿足教學(xué)的需求，而多媒體技術(shù)則具有聲像俱佳、動靜皆宜的特點[7]，是傳統(tǒng)教學(xué)無法比擬的。多年來我們不斷補充和完善教學(xué)手段，逐漸形成了獨具特色的多媒體教學(xué)課件。

多媒體圖像處理清晰直觀，文字表述簡潔明了、主題突出。課件中的圖像來源于國內(nèi)外的網(wǎng)絡(luò)數(shù)據(jù)平臺。如講述DNA半保留復(fù)制機理時[8]，首先將DNA可能存在的幾種復(fù)制方式用圖像展現(xiàn)，并利用Meselson和Stahl設(shè)計的DNA復(fù)制同位素示蹤實驗和密度梯度離心實驗來進行結(jié)果驗證，引導(dǎo)學(xué)生明確掌握DNA半保留復(fù)制特點，并結(jié)合文字，通過圖文并茂的多媒體課件，將教學(xué)內(nèi)容中的背景知識、基本概念、基本理論，以及靜態(tài)、抽象的微觀知識清晰講解。

多媒體課件動靜結(jié)合、聲像互動。對于生命過程中動態(tài)的知識點，比如DNA的復(fù)制、RNA的轉(zhuǎn)錄、蛋白質(zhì)的翻譯過程，可以將這些復(fù)雜的生命過程利用多媒體手段做成動畫并配以文字和聲像，形象直觀地展現(xiàn)給學(xué)生，既加深了學(xué)生對知識的理解，也提高了其學(xué)習(xí)效率。

三、知識領(lǐng)域的拓展

分子生物學(xué)的教學(xué)內(nèi)容除包含基礎(chǔ)理論知識外，還有大量理論應(yīng)用的研究方法部分。我們在教學(xué)中不僅僅將知識局限在教材中，利用課堂教學(xué)不斷引導(dǎo)學(xué)生去了解本學(xué)科相關(guān)領(lǐng)域內(nèi)的研究熱點、最新進展、發(fā)展趨勢[8]，以及生物技術(shù)在生產(chǎn)實踐中的廣泛應(yīng)用。

1.專題講座與專題討論。專題講座是教師根據(jù)教學(xué)內(nèi)容，自己組織參考資料對教學(xué)內(nèi)容的延伸與拓展。比如在講授“SNP技術(shù)”時，先從遺傳標(biāo)記分析的發(fā)展著手，把一代、二代的標(biāo)記分析做知識性的回顧，再將納入教材的第三代標(biāo)記分析“SNP”做詳細的講解，引導(dǎo)大家理解什么是單核苷酸多態(tài)性，核苷酸多態(tài)性研究的生物學(xué)意義以及在醫(yī)學(xué)、農(nóng)業(yè)、畜牧等多種領(lǐng)域的發(fā)展與應(yīng)用。通過這種方式激發(fā)了學(xué)生的學(xué)習(xí)熱情和求知欲，也使教師不斷地進行知識的更新，及時了解本學(xué)科當(dāng)前發(fā)展的趨勢、研究的熱點以及爭論的問題。

專題討論則是以學(xué)生為主體，根據(jù)課程教學(xué)內(nèi)容，組織學(xué)生就某一個專題自行查閱、組織文獻資料，并在課堂上展開討論[9]。比如在講授基因重組的教學(xué)內(nèi)容時，設(shè)計“轉(zhuǎn)基因的利與弊”供學(xué)生討論。引導(dǎo)學(xué)生思考基因工程藥物和轉(zhuǎn)基因動植物對社會產(chǎn)生的巨大影響，讓知識離開課本走進生活，從而喚起學(xué)生學(xué)習(xí)的興趣和探索未知領(lǐng)域的欲望。這不僅使學(xué)生更加深入、系統(tǒng)地理解所學(xué)知識，并且培養(yǎng)了學(xué)生靈活運用知識的能力[10]。

2.生物信息技術(shù)與數(shù)據(jù)庫。生物信息技術(shù)已經(jīng)發(fā)展成為分子生物學(xué)研究方法中不可分割的一部分，比如在“PCR技術(shù)”的專題講座中，不僅要對實驗?zāi)康摹⒃?、操作以及?yīng)用進行講解，還要特別對引物設(shè)計的生物信息技術(shù)進行補充，介紹學(xué)生對一些常規(guī)的生物信息技術(shù)軟件Primer6.0、DNAman、Olig6.0、DNAStar、Cluster等有一個基本的認(rèn)知度。

在整個分子生物學(xué)的教學(xué)中，學(xué)生需要自行查閱和組織各種文獻資料，因此，必須特別強調(diào)互聯(lián)網(wǎng)資源運用的重要性。教師通過介紹中國知網(wǎng)、維普、清華同方、NCBI等幾個常用資源庫，使學(xué)生了解如何利用資源庫進行查詢，對互聯(lián)網(wǎng)資源的熟練應(yīng)用使學(xué)生的知識體系得以完善，學(xué)生通過自身的努力來提高信息收集和辨別的能力，培養(yǎng)了學(xué)生的自學(xué)能力。

四、教學(xué)改革中應(yīng)該注意的問題

1.教師的專業(yè)修養(yǎng)與教學(xué)基本功。教師在教學(xué)中具有雙重身份，既是一名導(dǎo)演，又是一名演員。作為導(dǎo)演，首先需要有最新的教學(xué)理念，整個教學(xué)過程中適時設(shè)問、適時討論、適時啟發(fā)。其次要有較強的課堂組織能力，根據(jù)學(xué)生的學(xué)習(xí)情況，把握課堂節(jié)奏，調(diào)動學(xué)生課堂學(xué)習(xí)激情，使教學(xué)有的放矢。否則會在教學(xué)中出現(xiàn)“啟而不發(fā)”和論證條理不清的現(xiàn)象；作為演員，還要有良好的課程駕馭能力，通過教師扎實的專業(yè)知識、廣泛的認(rèn)知領(lǐng)域、全面的知識結(jié)構(gòu)，呈現(xiàn)給學(xué)生的是一個豐盛的知識大餐，而不是一鍋夾生飯。因此作為教師，必須從理論水平、科研水平、思維水平這3個方面提高教師自身的專業(yè)素質(zhì)，此外，還要掌握適合自己的各項教學(xué)技能。

2.多媒體教學(xué)的合理應(yīng)用。多媒體教學(xué)只是一種提高教學(xué)效果的輔助手段，是為教師的教學(xué)和學(xué)生的學(xué)習(xí)服務(wù)的，只有運用合理才可能達到好的效果。因此盡量避免在多媒體教學(xué)課件上出現(xiàn)過多的文字，否則多媒體成了教學(xué)活動中的主體，老師由照本宣科轉(zhuǎn)變?yōu)榘缪莘庞硢T和播音員的角色。學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣不高，教學(xué)效果也就適得其反。多媒體和傳統(tǒng)教學(xué)只有合理地結(jié)合，取長補短，才能在課堂教學(xué)中體現(xiàn)出其真正的價值。

總之，教學(xué)改革的目標(biāo)是幫助學(xué)生建立學(xué)科知識體系，培養(yǎng)學(xué)生良好的科學(xué)素養(yǎng)，提升學(xué)生后繼學(xué)習(xí)的能力。正如葉圣陶先生所說：“教師的教學(xué)，不在于給學(xué)生搬去可以致富的金子。而在于給學(xué)生點金的指頭?！蹦壳埃覀冴P(guān)于分子生物學(xué)課堂教學(xué)改革還處于不斷探索和實踐階段，除了需要不斷地提高教師自身的學(xué)科修養(yǎng)和科研素質(zhì)外，也以“夯實基礎(chǔ)、拓展知識、增強能力、提高素質(zhì)”[8]作為教學(xué)的目的和人才培養(yǎng)目標(biāo)，努力在今后把教學(xué)工作開展得更加有生有色，為社會培養(yǎng)更多高素質(zhì)創(chuàng)新型人才。

參考文獻：

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第三篇：分子生物學(xué)綜合性實驗教學(xué)改革和探索

分子生物學(xué)綜合性實驗教學(xué)改革和探索

摘 要：分子生物學(xué)是一門實踐性較強的前沿學(xué)科，實驗教學(xué)是其重要組成部分。安徽師范大學(xué)借助教育部“國家級雙語教學(xué)示范課程建設(shè)項目”的機遇，對分子生物學(xué)實驗教學(xué)的建設(shè)與改革進行了探索。該文介紹了安徽師范大學(xué)分子生物學(xué)綜合實驗改革的背景、理念及目標(biāo)，提出了綜合性實驗教學(xué)體系的設(shè)計，這種改革方式不僅能提高學(xué)生對實驗的參與度和關(guān)心度，還能將理論知識系統(tǒng)化，并形成一種整體思維方式。

關(guān)鍵詞：分子生物學(xué)；綜合性實驗；改革

中圖分類號 G642.0 文獻標(biāo)識碼 A 文章編號 1007-7731（2014）10-126-03

綜合性實驗也稱為復(fù)合型實驗，是對學(xué)生實驗技能和實驗方法進行綜合訓(xùn)練的一種大實驗，其內(nèi)容組合了多項單個實驗，是一個系統(tǒng)的、連續(xù)的過程，類似于一個比較完整的科研過程，前一實驗內(nèi)容作為后一實驗內(nèi)容的基礎(chǔ)，實驗間聯(lián)系性強。它一方面要求對理論知識有較強的綜合能力，可以培養(yǎng)學(xué)生對知識的綜合能力及應(yīng)變能力，另一方面其復(fù)雜性也可以極大地提高學(xué)生對實驗結(jié)果的關(guān)注度，提升實踐操作的興趣和能力[1]。2001 年8月，教育部印發(fā)了《關(guān)于加強高等學(xué)校本科教學(xué)工作提高教學(xué)質(zhì)量的若干意見》，要求各高等學(xué)校積極推動使用英語等外語進行教學(xué)[2]。安徽師范大學(xué)分子生物學(xué)雙語教學(xué)于2009年獲得教育部“國家級雙語教學(xué)示范課程建設(shè)項目”，其實驗教學(xué)也是建設(shè)內(nèi)容之一。本文總結(jié)了安徽師范大學(xué)在分子生物學(xué)綜合性實驗改革中的背景、目標(biāo)和建設(shè)體系等內(nèi)容。分子生物學(xué)綜合性實驗改革背景

分子生物學(xué)是在分子水平研究生命本質(zhì)的一門學(xué)科，是當(dāng)前生命科學(xué)中發(fā)展最快并與其他學(xué)科廣泛交叉及相互滲透的前沿學(xué)科[3]，是生物科學(xué)、生物技術(shù)和應(yīng)用生物科學(xué)等專業(yè)的基礎(chǔ)課程，在此基礎(chǔ)上開設(shè)其他專業(yè)方向課程，如基因工程、酶工程、發(fā)酵工程和分子免疫學(xué)等。

以往我校分子生物學(xué)實驗內(nèi)容設(shè)置是選取相對經(jīng)典的驗證性實驗，忽略了實驗項目之間的內(nèi)在聯(lián)系，導(dǎo)致實驗項目相對孤立、缺乏知識邏輯、項目間的邏輯順序不合理等問題，一般采用理論教學(xué)與實驗教學(xué)穿插的方式進行教學(xué)，每次實驗間隔的時間較長，不利于學(xué)生知識的系統(tǒng)化；且由于各課程間缺乏交流，導(dǎo)致不同課程間的某些實驗項目相同或相似，如分子生物學(xué)、遺傳學(xué)、生物化學(xué)、基因工程、細胞生物學(xué)等學(xué)科，在實驗項目上均出現(xiàn)同質(zhì)化現(xiàn)象，同一個實驗項目在不同實驗指導(dǎo)教材中反復(fù)出現(xiàn)。

近年來，我校雖然多次對實驗教學(xué)考核方式進行了調(diào)整，目前考核方式為平時成績占60%，期末考試成績占40%，但是對各部分的具體要求未有明確說明。這種考核方式對學(xué)生的激勵作用不大，不能很好地調(diào)動學(xué)生學(xué)習(xí)的積極性和主動性。以上這些問題影響了學(xué)生對實驗的興趣及主動性，甚至出現(xiàn)學(xué)生輕視實驗教學(xué)的現(xiàn)象，不僅不利于教學(xué)質(zhì)量的提高，也不利于學(xué)生能力的培養(yǎng)。綜合性實驗設(shè)置的理念及目標(biāo)

2.1 設(shè)置理念 分子生物學(xué)涉及面廣、知識更新快，在我校其理論課程以雙語為教學(xué)手段，學(xué)生在理論素養(yǎng)和專業(yè)外語方面具有較好的基礎(chǔ)。通過設(shè)置綜合性實驗讓學(xué)生形成良好的整體思維，將理論課程中學(xué)習(xí)到的知識系統(tǒng)化，增強實踐能力，使學(xué)生在理論素養(yǎng)、專業(yè)外語、思維模式和實踐能力等方面的能力均得到提高，培養(yǎng)出能適應(yīng)生物學(xué)專業(yè)突飛猛進的高素質(zhì)人才。

2.2 設(shè)置目標(biāo) 一是摒除現(xiàn)有問題，改變我校以往以“點”形式為設(shè)置實驗課程，重點突出課程內(nèi)和課程間知識的系統(tǒng)性和整體性。先將基礎(chǔ)實驗課程設(shè)置為綜合性實驗，將單個實驗項目的“點”串聯(lián)成“線”，再通過在基礎(chǔ)課程實驗上設(shè)置專業(yè)方向課程實驗，逐步形成“面”。二是使學(xué)生掌握扎實的分子生物學(xué)基礎(chǔ)技術(shù)實踐能力，并最終使學(xué)生將知識系統(tǒng)化，學(xué)會整體思維方式。三是提高學(xué)生對實驗的重視度、參與度和興趣度。綜合性實驗教學(xué)體系的設(shè)計

3.1 建立整體貫通的實驗內(nèi)容 根據(jù)我院分子生物學(xué)在各專業(yè)的定位、學(xué)科特點、存在的問題及課程設(shè)置目標(biāo)，為學(xué)生設(shè)計一套完整的分子克隆技術(shù)實驗作為分子生物學(xué)基礎(chǔ)綜合性實驗，后繼的高級實驗技術(shù)將在專業(yè)方向課程中以此為基礎(chǔ)繼續(xù)開設(shè)，如在基因工程中學(xué)習(xí)蛋白質(zhì)表達及檢測技術(shù)，在酶工程中學(xué)習(xí)蛋白質(zhì)純化技術(shù)和酶學(xué)性質(zhì)分析技術(shù)等。分子生物學(xué)實驗共設(shè)36學(xué)時，7d內(nèi)完成教學(xué)，學(xué)生在實驗指導(dǎo)教師的指導(dǎo)下完成整個操作流程，所有操作均由學(xué)生完成，提高學(xué)生的參與度，改變學(xué)生以往只按步驟做實驗，不參與前期準(zhǔn)備的狀況。流程如圖1所示。

為了保證綜合性實驗的連貫性，我校實施了實驗教學(xué)月來集中強化訓(xùn)練。將理論課設(shè)置在學(xué)期前段，上調(diào)理論課周學(xué)時，整個理論教學(xué)過程要在前13周內(nèi)完成，在后期設(shè)置了為期30d的實驗教學(xué)月。在實驗教學(xué)月中，各年級的所有實驗均在此期間完成，由于實驗具有連貫性和整體性，實驗項目環(huán)環(huán)相扣，故將基礎(chǔ)實驗設(shè)置在前，其他專業(yè)方向?qū)嶒炘O(shè)置在后，每門實驗同時開設(shè)4個平行教學(xué)班。

3.2 完善基礎(chǔ)設(shè)施和教材建設(shè) 在上述實驗?zāi)繕?biāo)和實驗內(nèi)容的基礎(chǔ)上，我院對相關(guān)的基礎(chǔ)設(shè)施進行了改造和建設(shè)，先期配置了4間多媒體公用實驗室，共享了部分儀器設(shè)備，改變了以往為每門課程專門配備儀器設(shè)備的模式；同時在方案的基礎(chǔ)上，配備了空缺儀器，保證每4人能共有一套基礎(chǔ)儀器。

教材建設(shè)也是教學(xué)改革的一部分，教學(xué)效果設(shè)想和試驗最終都要體現(xiàn)和落實在教材建設(shè)上，而作為教學(xué)改革的物化成果，教材的質(zhì)量對學(xué)校教學(xué)改革的效果有很大影響[4]。我校分子生物學(xué)在建設(shè)國家級雙語教學(xué)示范課程建設(shè)項目時，已為理論課程選用和編寫了一批實用教材[5]。為了配合綜合性實驗教學(xué)和雙語教學(xué)，首先應(yīng)將各課程的實驗進行優(yōu)化組合編寫一套符合各專業(yè)特點的實驗教材，盡可能地使整個大學(xué)過程的實驗教學(xué)體系完整化、系統(tǒng)化，并分段實施教學(xué)，避免不同課程之間過于獨立，實驗項目重復(fù)等問題；其次，在雙語教師和實驗技術(shù)人員的共同努力下編寫了一本分子生物學(xué)英文實驗教材并投入使用；最后輔以現(xiàn)有的實驗教材作為補充。

3.3 運用現(xiàn)代化的教學(xué)手段 分子生物學(xué)實驗課程是一門對操作要求極為嚴(yán)格的實驗，同時綜合性實驗也要求學(xué)生對很多未接觸過的技術(shù)要有直觀的印象。運用多媒體和網(wǎng)絡(luò)技術(shù)是我院采用的主要教學(xué)手段，課件、操作錄像、網(wǎng)站資源和相關(guān)軟件都是綜合實驗教學(xué)的一部分。課件和操作錄像是指導(dǎo)學(xué)生了解實驗思路的必要條件，也是指導(dǎo)學(xué)生規(guī)范操作的主要手段。網(wǎng)站資源對現(xiàn)代分子生物學(xué)實驗有極大的參考作用，如文獻和基因序列查找時可以應(yīng)用NCBI等網(wǎng)站；在DNA雙酶切實驗時，可以使用試劑公司網(wǎng)站查找最佳反應(yīng)緩沖液、反應(yīng)時間和條件等；國內(nèi)外最新的實驗技術(shù)，既豐富了教學(xué)內(nèi)容，又可以提高學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣；生物學(xué)軟件是現(xiàn)代分子生物學(xué)實驗中必不可少的，教學(xué)過程中應(yīng)用多媒體可以直接指導(dǎo)學(xué)生對部分軟件和網(wǎng)絡(luò)的使用，如引物設(shè)計軟件、序列比對軟件和統(tǒng)計學(xué)軟件等。

3.4 組建高水平的教學(xué)團隊 我院以國家級雙語教學(xué)示范課程建設(shè)項目為依托，組建了一批高素質(zhì)的雙語教學(xué)師資隊伍[5]；課程組堅持讓教授走進實驗室指導(dǎo)本科生實驗，并要求各位教師在實驗過程中介紹自己的研究課題，激發(fā)學(xué)生的興趣；每個教學(xué)班級輔以2名相關(guān)專業(yè)研究生協(xié)助指導(dǎo)學(xué)生的操作過程，保證操作規(guī)范性；同時優(yōu)秀的實驗技術(shù)人員是實驗順利進行的基本保障。

3.5 建設(shè)綜合的評價體系 實驗課程評價體系是保證教學(xué)質(zhì)量的關(guān)鍵之一，構(gòu)建科學(xué)的實驗考核體系，可以提高實驗教學(xué)質(zhì)量和學(xué)生對實驗課的關(guān)注度與興趣度。實驗成績評定包括平時成績、操作考試和理論考試成績3方面內(nèi)容，其中平時成績占60%、操作考試占20%、理論考試占20%。平時成績包括出勤、實驗報告、課堂態(tài)度、操作規(guī)范程度等。其中，實驗報告改變了單個實驗項目的報告形式，而是要求學(xué)生按照整體思維，用科研論文的形式撰寫實驗的思路，列舉實驗材料和儀器設(shè)備，陳述實驗步驟和方法、分析并討論實驗結(jié)果，著重培養(yǎng)學(xué)生總結(jié)實驗結(jié)果和撰寫科研論文的能力；操作考試主要考察學(xué)生實驗過程是否規(guī)范，以及在沒有指導(dǎo)下的操作能力；理論考試主要是對實驗理論、方法原理及運用等進行閉卷考試，促使學(xué)生將理論知識與實際操作相結(jié)合。

參考文獻

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第四篇：分子生物學(xué)總結(jié)

SectionA 1 三個域：真細菌，古細菌，真核生物 2 組裝中的主要作用力：非共價健作用力

SectionB 1 蛋白質(zhì)純化的分析方法

正電荷：天冬氨酸 谷氨酸

負(fù)電荷：賴氨酸 精氨酸

組氨酸

極性：天冬酰胺 谷氨酰胺

蘇氨酸 絲氨酸 半胱氨酸

非極性：脂肪族 甘氨酸 丙氨酸 纈氨酸 亮氨酸

異亮氨酸 甲硫氨酸 脯氨酸

芳香族 苯丙氨酸

酪氨酸 色氨酸 Cys 二硫鍵 Gly 無手性 Pro 亞氨基酸

芳香族氨基酸最大吸收峰280mm 3 蛋白質(zhì)的一級(決定蛋白折疊及其最后的形狀的最重要的因素)：氨基酸脫水縮合形成肽鏈 N端到C端

共價鍵

二級：多肽鏈中空間結(jié)構(gòu)鄰近的肽鏈骨架通過氫鍵形成的特殊結(jié)構(gòu)。

α轉(zhuǎn)角

β螺旋 氫鍵為主要作用力

三級： 多肽鏈中的所有二級結(jié)構(gòu)和其他松散肽鏈區(qū)域（散環(huán)結(jié)構(gòu)）通過各種分子間作用力（非共價鍵為主），彎曲、折疊成具有特定走向的緊密球狀構(gòu)象。

非共價鍵

四級： 許多蛋白分子由多條多肽鏈（亞基，subunits）構(gòu)成。組成蛋白的各亞基以各種非共價鍵作用力為主，結(jié)合形成的立體空間結(jié)構(gòu)即為四級結(jié)構(gòu)。非共價鍵 偶極：電子云在極性共價鍵的兩原子間不均勻分布，使共價鍵兩端的原子分別呈現(xiàn)不同的電性

兼性離子：具有正電荷（堿性），又具有負(fù)電荷（酸性）的分子 雙極性分子：

Section C 1核酸的光學(xué)特性：

增色性：一種化合物隨著結(jié)構(gòu)的改變對光的吸收能力增加的現(xiàn)象 減色性：一種化合物隨著結(jié)構(gòu)的改變對光的吸收能力減少的現(xiàn)象 Reason: 堿基環(huán)暴露在環(huán)境中的越多，對紫外的吸收力越強 Absorbance（吸收值）：Nucleotide > ssDNA/RNA > dsDNA 核酸的最大吸收峰260mm(堿基有芳香環(huán))芳香族氨基酸最大吸收峰280mm A260/A280:

純的 dsDNA：1.8 純的 RNA：2.0 純的 Protein：0.5 2 Tm 值（熔解溫度）：熱變性時，使得DNA雙鏈解開一半所需要的溫度。

Tm=2x(A+T)+ 4x(G+C)

Tm值與DNA分子的長度，及GC的含量成正比

Annealing（退火）:熱變性的DNA經(jīng)過緩慢冷卻后復(fù)性

快速冷卻： Stay as ssDNA

緩慢冷卻: 復(fù)性成dsDNA 3 脫氧核糖核酸與核糖核苷酸得到畫法 支持雙螺旋結(jié)構(gòu)的兩個實驗：查戈夫規(guī)則

X射線晶體衍射 5 雙螺旋的內(nèi)容：

雙鏈之間的關(guān)系：DNA分子由兩條鏈組成

雙鏈反向平行(5’?3’ 方向)

兩鏈的堿基通過氫鍵互補配對，A:T;G:C。

雙鏈序列反向互補

各基團排列方式：糖-磷酸骨架DNA分子排列在外;

堿基對平面相互平行，排列在DNA分子的內(nèi)部?？臻g結(jié)構(gòu)為：右手雙螺旋結(jié)構(gòu)

每轉(zhuǎn)一圈~10個堿基對，每一圈長度33.2A

雙鏈螺旋中形成大溝，小溝。堿對DNA的影響：高pH值對DNA的影響比低pH值的要小。

高 pH 值(pH>11)會改變堿基構(gòu)象，使DNA變性（雙鏈解旋，成單鏈）

RNA的影響：高pH值，2’羥基會攻擊磷酸二酯鍵，使其斷裂，形成2’，3’-環(huán)式磷酸二酯鍵，從而使RNA分子斷裂 共價閉合環(huán)狀DNA(convalently closed circular DNA, cccDNA）。即通過共價鍵結(jié)合形成的封閉環(huán)狀DNA分子。超螺旋DNA（Supercoil DNA）:松弛型雙鏈DNA進一步旋轉(zhuǎn)后，再形成閉環(huán)結(jié)構(gòu)時，就會形成DNA超螺旋結(jié)構(gòu)

L=T+W 判斷是否為超螺旋 正負(fù)超螺旋 拓?fù)洚悩?gòu)酶：暫時斷裂DNA分子中一條或兩條單鏈上的磷酸二酯鍵，改變DNA分子的連接數(shù)及拓?fù)錉顟B(tài)。

功能：消除DNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄等過程產(chǎn)生的超螺旋。

細胞中，Ⅰ型酶與Ⅱ型酶的活性保持一種平衡狀態(tài)。Ⅱ型酶的“使DNA超螺旋化” 與Ⅰ型酶“使DNA松馳化” 相抗衡，從而使DNA保持適當(dāng)?shù)某菪芏?。EB: 嵌入DNA配對堿基之間，使DNA分子在嵌入處局部解旋，增加ccDNA其它部位的正超螺旋 Type II RE

二型限制性內(nèi)切酶:識別位點一般為４～8個堿基對的回文序列

如：EcoRI

5’-GAATTC-3’

3’-CTTAAG-5

Section D 1 染色體的折疊：串珠結(jié)構(gòu) ：核心組蛋白:H2A, H2B, H3 and H4.連接組蛋白 H1

核小體

30nm纖絲

高級環(huán)狀結(jié)構(gòu)（染色質(zhì)的最高結(jié)構(gòu)）

緊密纏繞結(jié)構(gòu) 著絲粒：兩側(cè)是大量的名叫衛(wèi)星DNA的重復(fù)序列

端粒：上百個短的重復(fù)序列

作用：端粒DNA 形成特殊的環(huán)狀二級結(jié)構(gòu)，保護染色體末端不被核酸外切酶降解。

抵消DNA復(fù)制時每一輪復(fù)制都導(dǎo)致兩末端形成的后隨鏈比母鏈要短一截的現(xiàn)象對染色體的影響 異染色質(zhì)：高度濃縮，無轉(zhuǎn)錄活性

常染色質(zhì)：結(jié)構(gòu)松散，有轉(zhuǎn)錄活性

DNaseI 敏感區(qū)域：對區(qū)域內(nèi)DNA的轉(zhuǎn)錄活躍

串珠結(jié)構(gòu)

DNaseI 超敏感區(qū)域：轉(zhuǎn)錄活躍的基因的調(diào)控區(qū)域

DNA裸露 4 原核染色體結(jié)構(gòu)：非特異性DNA結(jié)合蛋白：類組蛋白

位點特異性DNA結(jié)合蛋白：與特殊的DNA序列結(jié)合

有其他特殊的生理功能：RNA polymerases

對結(jié)構(gòu)域的形成也很重要

復(fù)性動力曲線：

Low C0t: 高重復(fù) 衛(wèi)星DNA Moderate C0t : 中重復(fù) 串聯(lián)基因簇

反轉(zhuǎn)座子 High C0t :單拷貝或低重復(fù)

大腸桿菌基因組 染色體結(jié)構(gòu)對基因轉(zhuǎn)錄的影響

CpG 抑制→CpG位點中的胞嘧啶的C-5常發(fā)生甲基化(CpG甲基化），CpG 甲基化可能可以DNA轉(zhuǎn)錄被限制→哺乳動物基因組中，有些區(qū)域含有很多未甲基化的CpG 位點，被稱為CpG 孤島。

甲基化—轉(zhuǎn)錄抑制

去甲基化—恢復(fù)轉(zhuǎn)錄

組蛋白的乙?；汉诵慕M蛋白N-端的Lys被乙?；?，DNA與核心組蛋白體解聚。Gene 表達被激活

去乙?；阂种?gene表達

組蛋白的磷酸化:對組蛋白 H1 磷酸化，抑制基因表達 其他組蛋白中心法則

Section E 1 DNA復(fù)制：細胞中，一條雙鏈DNA分子通過堿基配對，形成兩條與其序列相同的DNA雙鏈分子的過程。2

確定DNA半保留復(fù)制

半不連續(xù)復(fù)制 3 復(fù)制的基本步驟 復(fù)制為雙向

大腸桿菌的復(fù)制：

起始AT含量高的區(qū)域

參與蛋白：DnaA（復(fù)制起始因子)：識別并結(jié)合于重復(fù)序列上，驅(qū)使富含AT的重復(fù)序列解鏈，需負(fù)超螺旋，及ATP

DnaB(DNA解旋酶):DNA雙鏈解旋，形成復(fù)制叉

SSB:(單鏈結(jié)合蛋白):保持解旋部分的單鏈狀態(tài)

DnaG(引發(fā)酶/引物酶):RNA引物合成，引發(fā)復(fù)制 延伸

參與蛋白：DNA Pol III全酶：負(fù)責(zé)新鏈的合成:前導(dǎo)鏈，岡崎片段

DNA pol

I：復(fù)制中除去引物，填補引物處空缺

終止： 真核生物的復(fù)制：

一個細胞周期內(nèi)，一個DNA分子只能復(fù)制一次

Section F 1 復(fù)制忠實性的機制：

DNA復(fù)制的高精度：模板連和進入核苷酸在DNA聚合酶的作用位點正確配對

3’到5’外切核酸酶對錯誤堿基的校正

錯配修復(fù) 2 holiday模型 3

Section K 編碼鏈 模板鏈 2 大腸桿菌的轉(zhuǎn)錄

RNAP酶：核心酶：a 亞基：aNTD對核心酶的組裝很重要。

aCTD在識別啟動子、調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄水平中起著非常重要的作用。

b 亞基：RNAP的催化中心。

與模板DNA、RNA產(chǎn)物、及底物核糖核苷酸緊密結(jié)合。

抗生素利福平結(jié)合在在b 亞基上，可以抑制RNAP的轉(zhuǎn)錄活性。

利福平只抑制轉(zhuǎn)錄的起始。

利迪鏈菌素只抑制延伸而不抑制轉(zhuǎn)錄起始

b’ 亞基：可能與RNAP的催化有關(guān)。

肝素與b’亞基結(jié)合后，能干擾RNAP與DNA的結(jié)合，抑制轉(zhuǎn)錄。

w 亞基：可能與RNAP的組裝及維持RNAP結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性有關(guān)

s factor(s因子)：s factor 在啟動子特異性識別過程中至關(guān)重要 移動慢的原因：可以保持與翻譯同步。

與有些基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控相關(guān)。

有利于轉(zhuǎn)錄終止

RNAP沒有3’ →5’外切酶活性，不能進行轉(zhuǎn)錄校正。其錯配率達10-4。RNAP倒退暴露新合成的錯配堿基，可以有利于其他輔助核酸酶將錯配堿基切除，增加轉(zhuǎn)錄的忠實性。s70基礎(chǔ)啟動子的一般結(jié)構(gòu)

-10 序列：它對轉(zhuǎn)錄起始時，RNAP打開DNA雙鏈的過程非常重要。-

10序列到TSS位點的距離對轉(zhuǎn)錄效率也有很大的影響-35 序列：增強RNAP s factor 的識別能力及與DNA的結(jié)合能力 4 影響啟動子效率的DNA序列：

核心啟動子的序列：與保守序列越像，效率越高。

TSS周圍序列：影響起始效率。

轉(zhuǎn)錄單位的前30個核苷酸的堿基序列：影響RNAP從啟動子處移動出去（啟動子區(qū)清空）的速率。

核心啟動子附近的調(diào)控元件。轉(zhuǎn)錄的起始：開放復(fù)合物 閉合復(fù)合物 無效起始

延伸：啟動子的清空，鏈的延伸轉(zhuǎn)錄泡，s因子的循環(huán)利用

終止：依賴性 不依賴性

反復(fù)重復(fù)序列

Section L 1.順式作用元件（cis-acting elements）：一般為DNA上較為保守的、有著特異性序列或結(jié)構(gòu)的特定區(qū)域。它們只能影響與其在同一條染色體上的基因的活動。如：啟動子，轉(zhuǎn)錄激活因子結(jié)合位點等。

反式作用基因/調(diào)節(jié)基因（trans-acting genes，regulator genes）

可以影響與他們不在同一條染色體上的基因的表達水平的DNA元件。2 乳糖操縱子 色氨酸操縱子 正負(fù)調(diào)控都可以有誘導(dǎo)和阻遏兩種調(diào)控方式。

正控誘導(dǎo)：誘導(dǎo)因子活化激活因子，使其可以增加基因的表達。（Lac operon，CRP調(diào)控）正控阻遏：共阻遏物使激活因子失活，減少基因的表達。負(fù)控誘導(dǎo)：誘導(dǎo)因子使阻遏蛋白失活，增加基因的表達。（Lac operon，lac repressor）負(fù)控阻遏:共阻遏物活化阻遏蛋白，使其可以降低基因的表達。（Trp operon，trp repressor）

Section M 增強子 沉默子 TFIID：可與多種核心啟動子元件或特異性轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合，啟動二類轉(zhuǎn)錄預(yù)起始復(fù)合物組裝的通用轉(zhuǎn)錄因子。

TBP(TATA-box binding protein):可識別并結(jié)合TATA-box TAFII（TBP-associated factor II）：TBP關(guān)聯(lián)蛋白，TFIID中與TBP形成復(fù)合體的所有蛋白，～13個。

TFII H的結(jié)構(gòu)與功能：蛋白激酶(4 個亞基)：催化蛋白磷酸化。將NTP（一般為ATP）的g-磷酸基團轉(zhuǎn)移到蛋白上。

磷酸化 RNA pol II 中的CTD 結(jié)構(gòu)域。TFIIE 刺激TFIIH介導(dǎo)的磷酸化反應(yīng)。DNA 解旋酶/ATPase(5 亞基)：

水解ATP，利用其能量打開DNA的雙鏈 TBP(TATA-binding protein): 確保 RNA Pol I能正確定位到轉(zhuǎn)錄起始區(qū)域上。

SP1 為組成性表達的轉(zhuǎn)錄因子，在所有的細胞中都存在，與基因本底表達水平有關(guān) SL1，選擇因子,RNA Pol I起始轉(zhuǎn)錄所必需的因子 CTD:羧基末端結(jié)構(gòu)域，的磷酸化狀態(tài)與轉(zhuǎn)錄進程有關(guān)

轉(zhuǎn)錄起始時期，CTD結(jié)構(gòu)域一般處于去磷酸化形式，與結(jié)合啟動子有關(guān)。

轉(zhuǎn)錄延伸時期，CTD結(jié)構(gòu)域常處于磷酸化形式，與mRNA的加工有關(guān)。

Section N 1 DNA-binding domains（DBD）:DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域

螺旋-轉(zhuǎn)角-螺旋結(jié)構(gòu)（域）

鋅指結(jié)構(gòu)（域）

堿性結(jié)構(gòu)（域）

Dimerization domains：二聚體化結(jié)構(gòu)域

亮氨酸拉鏈 螺旋 散環(huán) 螺旋 DBD+DM 激活結(jié)構(gòu)域 酸性激活結(jié)構(gòu)域 富含谷氨酰胺結(jié)構(gòu)域 富含脯氨酸的結(jié)構(gòu)域 LBD

Section O 真核生物中mRNA 加工的一般過程 5’加帽: CTD作用：轉(zhuǎn)錄起始時，參與加帽反應(yīng)的三種酶結(jié)合在RNA Pol II的CTD結(jié)構(gòu)域上。轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物剛開始合成時，即對其5’端進行加帽反應(yīng)。

作用：防止降解：核糖核酸酶一般不能降解帽結(jié)構(gòu)中的三磷酸鍵

幫助轉(zhuǎn)運mRNA到細胞質(zhì)中

增強翻譯水平：mRNA需要帽結(jié)合蛋白的幫助才能更好的與核糖體結(jié)合 幫助去除pre-mRNA中的第一個內(nèi)含子。3’加Poly(A)尾：

作用：防止被核酸酶降解：增加mRNA的穩(wěn)定性

有助于mRNA從細胞核到細胞質(zhì)的轉(zhuǎn)運

參與pre-mRNA的最后一個內(nèi)含子的剪接。

增強mRNA的翻譯水平，增加基因的表達 剪接 甲基化 2 核酶有：有催化功能的RNA即為核酶

U2 U6 RNAP 3 RNA的多樣性：可變加工，反式剪接，RNA編輯 原核生物核糖體

真核生物核糖體 原核rRNA 加工的大致過程：形成多個莖環(huán)結(jié)構(gòu)，與蛋白結(jié)合形成RNP，核苷酸修飾，逐級切割

真核rRNA 加工的大致過程：甲基化，切割。內(nèi)含子剪接 原核tRNA 加工的大致過程:將多順反子前體切割，分離出單順反子前體

單順反子前體進一步被切割，形成與成熟tRNA長度一致分子（RNases D, E, F，P

.堿基修飾，形成成熟tRNA 真核tRNA 加工的大致過程：5’-末端成熟，3’-末端成熟（添加5’-CCA-3’）去除內(nèi)含子 7 miRNA and siRNA的調(diào)控機制：mRNA降解，抑制翻譯，抑制轉(zhuǎn)錄

Section P 1 遺傳密碼的特性:

蛋白的編碼信息由三聯(lián)體密碼子組成。

密碼子為連續(xù)的，之間無間隔、無重疊。

除三個終止密碼子之外，每個密碼子對應(yīng)一種氨基酸

有密碼簡并現(xiàn)象。即：多個密碼子對應(yīng)同一種氨基酸。

標(biāo)準(zhǔn)遺傳密碼子在各類生物中基本通用，不過少數(shù)生物體或細胞器中，有一些密碼子對應(yīng)的氨基酸與標(biāo)準(zhǔn)的不同。

生物對同義密碼子的使用經(jīng)常有偏好性。不同生物的密碼子偏好性不同。

基因一般不重疊。一段核酸分子一般只有一個開放閱讀框（open reading frame, ORF/可讀框），被翻譯成一個蛋白。

有些物種也有重疊基因的現(xiàn)象。開放閱讀框:ORF 從起始密碼子ATG 到終止密碼子

TGA,TAA or TAG 之間的連續(xù)的蛋白編碼序列

CDS 編碼序列 當(dāng)ORF可以預(yù)測一個蛋白時 3 tRNA 二級結(jié)構(gòu):三葉草結(jié)構(gòu) 4 tRNA的特異性加載：（翻譯的高保真性）

氨酰-tRNA合成酶對相應(yīng)tRNA分子有很強的專一性：第二密碼子：

氨酰-tRNA合成酶接受相應(yīng)氨基酸時有很強的忠實性：校正：雙篩選機制—酶的活性中心，酶中的編輯位點 氨酰-tRNA（AA-tRNA）： 3’-end加載了一個氨基酸的tRNA分子。是在蛋白質(zhì)合成中，將密碼子轉(zhuǎn)換氨基酸的適配器。

Section Q 1 密碼子與反密碼子的反向互補配對 一個tRNA可識別的密碼子數(shù)由反密碼子的第一位堿基決定

擺動學(xué)說：第三位密碼子與第一位反密碼子的配對可以擺動

反密碼子第一位為A或C時，配對無搖擺現(xiàn)象。3 核糖體的E，P，A位點 A位：接受AA-tRNA部位.除了起始氨酰-tRNA，其他所有AA-tRNA都只能進A位點。P位：肽?；?tRNA結(jié)合部位。起始氨酰-tRNA也進入此位點。E位：空載tRNA離開核糖體的位點。4 核糖體各亞基的功能

核糖體小亞基功能：結(jié)合mRNA

促進密碼子與反密碼子的正確結(jié)合 mRNA移位

大亞基的功能A位、P位、肽酰轉(zhuǎn)移酶（轉(zhuǎn)肽酶）中心等在大亞基上。

負(fù)責(zé)攜帶AA-tRNA、肽鍵/肽鏈的形成 5 翻譯的基本內(nèi)容 核糖體與mRNA結(jié)合

氨酰tRNA逐個進入核糖體

氨酰tRNA通過反密碼子與mRNA互補配對 氨酰tRNA分子的氨基酸之間形成肽鍵。空載tRNA的釋放 肽鏈的釋放

第五篇：現(xiàn)代分子生物學(xué)總結(jié)

醫(yī)學(xué)細胞與分子生物學(xué)習(xí)題庫

一、名詞解釋

1．基因組

2．基因文庫

3．衛(wèi)星DNA

4．SD序列

5．分子克隆

6．載體

7．反式作用因子

8．粘性末端

9．限制性內(nèi)切酶

10．cDNA文庫

11．轉(zhuǎn)化率

12．質(zhì)?？截悢?shù)

13．體外重組

14．感受態(tài)細胞

15．探針

16．核酸雜交

17．陽性克隆

18．固相雜交

19．解鏈溫度

20．C值悖理

21．基因家簇

22．反義RNA

23．RNA干擾

24．魔斑

25．順式作用元件

二．填空題

1.真核生物基因組DNA序列可分為（）、（）和（）。

2.真核生物基因組高度重復(fù)序列包括（）、（）、（）和（）四種。

5.原核生物轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控的方式有（）和（）兩種方式；前者又可分為（）和（）；后者可分為（）和（）。

6.真核生物基因表達調(diào)控包括（）、（）、（）、（）和（）五個層次。

7.真核生物基因組DNA水平的調(diào)控包括（）、（）、（）、（）和（）五種方式。

8.反式作用因子可劃分為（）、（）和（）三類。

12.影響雜交的因素有（）、（）、（）、（）和（）。

15.逆轉(zhuǎn)錄酶是多功能酶，具有（）、（）、（）三種功能，但無（）作用。

16.DN的損傷突變類型有（）、（）、（）、（）和（）。

17.引起DNA損傷突變的因素是（）、（）、（）、（）和（）。

18.DNA的損傷修復(fù)方式有（）、（）、（）和（）。

20.病毒基因組可由（）或（）組成；細菌基因組由一條（）組成；真核生物基因組由（）和（）形成（）。

21.原核生物基因表達調(diào)控的方式有（）和（）；其中（）是主要的方式。

22.、操縱子由（）、（）和（）組成；受（）產(chǎn)物的調(diào)控。

23．順式作用元件按功能可劃分為（）、（）、（）和（）。

24．分子克隆技術(shù)的操作包括（）、（）、（）和（）等四個基本過程。

25．限制性內(nèi)切酶分為（）、（）、（）三種，其中只

有（）在基因工程操作中被應(yīng)用。

26.限制性內(nèi)切酶識別（）序列； DNA分子在該酶切割下可產(chǎn)生（）、（）或（）末端。

27．分子克隆中常用的工具酶有（）、（）、（）和（）。

28．分子克隆中常用的載體有（）、（）、（）和（）。

29．目的基因制備的常用方法有（）、（）、（）。

30．體外重組常用方法有（）、（）、（）和（）。

31．重組體導(dǎo)入原核生物細胞中的常用方法有（）和（）；重組體導(dǎo)入真核生物細胞中的常用方法有（）、（）和（）。

32．重組體的篩選方法有（）、（）、（）、（）。

33．cDNA文庫的構(gòu)建步驟是（）、（）（）、（）。

34．常用的核酸探針包括（）、（）和（）。

35．放射性同位素標(biāo)記常用的標(biāo)記方法有（）、（）、（）。

36．分子克隆中常用的非放射性同位素標(biāo)記物有（）、（）、（）等；常用的標(biāo)記方法有（）、（）。

37．核酸雜交技術(shù)可分為（）和（）兩種類型；后者又可分為（）和（）。

39．PCR技術(shù)的基本過程是（）、（）、（）。

40．影響PCR的因素有（）、（）、（）、（）、（）。

41．PCR反應(yīng)的特點是（）、（）、（）、（）。

45．限制性核酸內(nèi)切酶的作用特點是（）、（）、（）、（）。

50．DNA切除修復(fù)需要的酶有（）、（）和（）。

三、判斷題

1、生物越高度，基因組越龐大，基因數(shù)目就越多。（）

2、真核生物結(jié)構(gòu)基因都是單拷貝，rRNA基因為多拷貝。（）

3、同基因是一類結(jié)構(gòu)上完全相同，表達產(chǎn)物功能也相同的一組基因。（）

4、真核細胞基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為單順反子。（）

5、原核細胞基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為多順反子。（）

6、真核生物基因組中不編碼的區(qū)域多于編碼的區(qū)域。（）

7、衛(wèi)星DNA實際上是出現(xiàn)在非編碼區(qū)的串聯(lián)重復(fù)序列。

8、串聯(lián)重復(fù)序列是形成衛(wèi)星DNA 的基礎(chǔ)。

9、所有真核生物基因組中都有α衛(wèi)星DNA。

10、高度重復(fù)序列在真核生物細胞基因組中重復(fù)出現(xiàn)可達106次以上。

11、中度重復(fù)序列的長度和拷貝數(shù)很不均一。

12、短分散片段重復(fù)順序的平均長度約為3500-5000bp。

13、長分散片段重復(fù)順序的平均長度約為300bp。

14、中度重復(fù)序列大多不編碼蛋白質(zhì)。

15、高度重復(fù)序列中有一些可編碼蛋白質(zhì)。

16、中度重復(fù)順序一般具有種特異性。

17、每種組蛋白的基因在同一種生物中拷貝數(shù)是相同的。

18、不同生物中組蛋白基因在基因組中的排列不一樣。

19、端粒是所有生物染色體末端的一種特殊結(jié)構(gòu)。

20、以RNA為模版合成出的DNA鏈叫負(fù)股鏈。

21、顛換是指原為嘧啶突變后變?yōu)猷堰省?/p>

22、置換是指原為嘧啶突變后變?yōu)猷堰省?/p>

23、重組修復(fù)也叫復(fù)制后的修復(fù)。

24、原核細胞和真核細胞中許多mRNA都是多順反子轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物。

25、限制性內(nèi)切酶切割的DNA片段都具有粘性末端。

26、原核生物中mRNA一般不需要轉(zhuǎn)錄后加工。

27、增強子并沒有啟動子活性，卻具有增強啟動子活性，促進轉(zhuǎn)錄起始的效能。

28、在雙向復(fù)制中一條鏈按5′→3′的方向合成，另一條鏈按3′→5′的方向合成。

29、原核細胞和真核細胞復(fù)制在多個位點同時起始進行。

30、真核細胞的基因是不連續(xù)的，轉(zhuǎn)錄出來的所有RNA都必須經(jīng)過加工。（31、生物DNA分子的大小等于基因的總和。（）

32、所有多肽鏈經(jīng)核糖體翻譯出來即有正常生理功能。

33、核糖體是蛋白質(zhì)和rRNA構(gòu)成的功能復(fù)合體。

34、機體的各種細胞中含有相同的遺傳信息，所以有相同的表達，35、在負(fù)控誘導(dǎo)系統(tǒng)中，阻遏蛋白不與效應(yīng)物結(jié)合時，結(jié)構(gòu)基因不轉(zhuǎn)錄。

36、在負(fù)控阻遏系統(tǒng)中，阻遏蛋白不與效應(yīng)物結(jié)合時，結(jié)構(gòu)基因不轉(zhuǎn)錄。

37、CAP結(jié)合在啟動子上時，能促進RNA聚合酶與啟動子結(jié)合，促進轉(zhuǎn)錄。）

38、CAP首先與cAMP形成復(fù)合物才能與啟動子結(jié)合。

39、RBS是指mRNA起始密碼AUG前的一段非翻譯區(qū)。

40、反義RNA由反義基因轉(zhuǎn)錄而來。

41、轉(zhuǎn)錄后基因沉默被稱為RNAi。

42、細胞中蛋白質(zhì)合成旺盛時，mRNA鏈上核糖體數(shù)量就多，poly（A）也較長。

43、限制性核酸內(nèi)切酶是原核生物所特有的酶。

44、只有Ⅱ型限制性核酸內(nèi)切酶在分子生物學(xué)中被應(yīng)用。

45、COS區(qū)是指λ噬菌體粘性末端構(gòu)成的區(qū)域。

53、基因擴增是指某些基因的拷貝數(shù)大量增加的現(xiàn)象。

54、基因重排是DNA水平調(diào)控的重要方式之一

55、所有核酸的合成都是以堿基配對為基礎(chǔ)的。

56、甲基化程度與基因的表達一般呈反比關(guān)系。

57、基因的甲基化程度愈高，其表達則降低。

58、去除組蛋白基因轉(zhuǎn)錄活性降低。

59、常染色質(zhì):結(jié)構(gòu)松散，基因不表達。

60、異染色質(zhì):結(jié)構(gòu)緊密，基因表達。

61、有基因表達活性的染色質(zhì)DNA對DNaseⅠ更敏感。

62、真核生物基因調(diào)控主要也是在轉(zhuǎn)錄水平上進行的。

四、選擇題：

1.原核生物基因組中的復(fù)制起始點有（）

A．1個B．2個C．多個D．1000個以上

2．真核生物基因組中的復(fù)制起始點有（）

A．1個B．2個C．多個D．1000個以上

3.真核生物基因之間的間隔區(qū)與基因組大?。ǎ?/p>

A．有關(guān)B．無關(guān)C．成正比E．成反比

４.衛(wèi)星DNA的長度一般為()

A．5-10bpB．300bpC．100bpD．500-1000bp

５.在大腸桿菌細胞中DNA復(fù)制的保真性主要是下列哪個酶的作用（A．DNA聚合酶ⅠB．DNA聚合酶Ⅱ

C．DNA聚合酶ⅢD．DNA連接酶

６.既有內(nèi)切酶活力，又有連接酶活力的是

A．拓?fù)洚悩?gòu)酶B．DNA聚合酶Ⅱ

C．解螺旋酶D．DNA連接酶）

7.轉(zhuǎn)錄過程中遺傳信息的轉(zhuǎn)遞方向是()

A．DNA→RNAB．RNA→DNAC．DNA→DNAD．RNA→RNA

8.hnRNA是()

A．存在于細胞核內(nèi)的tRNA前體B.存在于細胞核內(nèi)的mRNA前體

C.存在于細胞核內(nèi)的rRNA前體D.存在于細胞核內(nèi)的snRNA前體

9.以RNA為模板合成DNA的酶是（）

A．DNA聚合酶ⅢB．DNA聚合酶ⅠC．RNA聚合酶D．反轉(zhuǎn)錄酶

10.蛋白質(zhì)的生物合成中肽鏈延伸方向是（）

A．5→3B．從N端到C端C．3→5D．從C端到N端，，11.蛋白質(zhì)翻譯后的加工主要包括（）。

A．氨基酸側(cè)鏈修飾B．水解修飾

C．二硫鍵的形成D． 上述各種修飾都包括

12.操縱子調(diào)控系統(tǒng)屬于哪一種水平的調(diào)控（）

A．復(fù)制水平的調(diào)節(jié)B。轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)節(jié)

C．翻譯水平的調(diào)節(jié)D。轉(zhuǎn)錄后加工的調(diào)控

13.與乳糖操縱子操縱基因結(jié)合的物質(zhì)是（）

A．RNA聚合酶B．DNA聚合酶C．阻遏蛋白D．誘導(dǎo)物

14、參與線粒體DNA復(fù)制的酶是（）

A．polαB．polδC．polβD．polγ

15、參與領(lǐng)頭鏈DNA復(fù)制的酶是（）

A．polαB．polδC．polβD．polγ

16、端粒酶是一種()

A．逆轉(zhuǎn)錄酶B．RNA聚合酶C．DNA聚合酶D．DNA酶

17.含稀有堿基最多的RNA是（）

A．mRNAB、rRNAC．5S-rRNAD．tRNA

18.大腸桿菌DNA連接酶需要下列哪一種輔助因子？（）

A．FAD作為電子受體B．NADP+作為磷酸供體

C．NAD+形成活性腺苷酰酶D．NAD+作為電子受體

19.真核生物RNA聚合酶I催化轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物是（）

A．mRNAB．45S-rRNAC．5S-rRNAD．tRNA

20.魔斑是指（）

A．ppGppB．cAMPC．cGMPD．7mGppp

21.CAP復(fù)合體與操縱子結(jié)合的部位是（）

A．啟動子B．操縱基因C．結(jié)構(gòu)基因D．調(diào)節(jié)基因

22.基因的甲基化修飾一般發(fā)生在（）

A．CpGB．ApGC．GpTD．TpG

23.有基因表達活性的染色質(zhì)DNA對下列那個酶敏感性增加？（）

A．DNaseⅠB．DNA polⅠC．DNA polⅡD.Rnase H

24.真核生物的RNA聚合酶識別的是（）

A．啟動子B．增強子C．TF-DNA復(fù)合體D．RF

25.在分子生物學(xué)中被應(yīng)用的限制性核酸內(nèi)切酶是（）

A．Ⅰ型B．Ⅱ型C．Ⅲ型D．以上都沒用

26.限制性核酸內(nèi)切酶錯位切割產(chǎn)生（）

A．粘性末端B．平頭末端C．3’-磷酸D．5’-羥基

27.大腸桿菌DNA連接酶只能連接（）

A．粘性末端B．平頭末端C．3’-磷酸D．5’-羥基

28.pBR322是（）

A．復(fù)制型載體B．表達型載體C．穿梭載體D．噬菌體載體

29、pUC載體是（）

A．復(fù)制型載體B．表達型載體C．穿梭載體D．噬菌體載體

30.M13噬菌體是（）

A．單鏈DNA噬菌體B．雙鏈DNA噬菌體

C．RNA噬菌體D．都不是

31、B．表達型載體C．穿梭載體D．噬菌體載體

五．問答題

1．分子克隆中常用的工具酶有哪些？各有何用途？

2．何謂載體？分子克隆中常用的載體有哪些？理想的載體應(yīng)具備哪些條件？

3．何謂PCR？試述PCR基本技術(shù)原理和影響因素。

4．常用的核酸探針有哪些類型？各有何優(yōu)缺點？

5．將目的DNA與載體DNA連接起來的方法有哪些？并用文或圖表示各種連接過程。

6．簡述原核生物與真核生物基因組結(jié)構(gòu)特點。

9．體外重組常用的連接方法有哪些？各有何優(yōu)缺點？

13．何謂核酸雜交？常用的雜交方法有哪些？

28.何謂宿主細胞？分子克隆中常用的宿主細胞有哪些？宿主細胞應(yīng)具備哪些條件？

31.簡述重組體導(dǎo)入哺乳動物細胞的方法

35、DNA損傷修復(fù)有哪些類型？試述各類型的修復(fù)方式。