第一篇：胡辛麻鎮(zhèn)痛軟膏中延胡索乙素提取方法的優(yōu)化研究

胡辛麻鎮(zhèn)痛軟膏中延胡素提取方法的優(yōu)化研究

季錫中，韓關(guān)綏，方志軍

（江蘇省中醫(yī)藥研究院，江蘇 南京 210028）

摘要：目的 探索優(yōu)化延胡素的提取方法。方法 在原有臨床研究及制劑預(yù)試的基礎(chǔ)上，對(duì)原藥材的關(guān)鍵技術(shù)條件及基質(zhì)處方進(jìn)行優(yōu)選。結(jié)果 初步建立了可行、穩(wěn)定的制備工藝流程，以及制備工藝流程關(guān)鍵步驟的質(zhì)量控制方法、成品質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)論 該工藝條件下制備出安全、有效、穩(wěn)定的中藥鎮(zhèn)痛霜?jiǎng)?/p>

關(guān)鍵詞：延胡索乙素，滲漉，軟膏劑，提取工藝

中圖分類號(hào)：R927 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1673-6427（2012）06-0039-03 胡辛麻鎮(zhèn)痛軟膏為我院已故外科專家，林祖庚主任醫(yī)師根據(jù)多年臨床經(jīng)驗(yàn)，設(shè)計(jì)的科研處方。主藥由祖師麻、延胡索、細(xì)辛組成，制成O/W型軟膏劑。

根據(jù)原藥材所含主要活性成分理化特性及立題前預(yù)試，擬將祖師麻用乙醇提取，延胡索用酸性乙醇提取，細(xì)辛提揮發(fā)油及水提醇沉其余部分。

本實(shí)驗(yàn)針對(duì)延胡索的單獨(dú)提取工藝，利用正交法，做工藝技術(shù)條件的優(yōu)選。1 儀器與材料

1.1 儀器與試劑

Wters HPLC儀，510泵，996型二極管陣列式檢測(cè)器，Millenuium 2010色譜管理系統(tǒng)；CQX25-06超聲清洗器，上海必能信超聲有限公司；B-490(水浴)BüCHI；對(duì)照品延胡索乙素（dl-tetrahydropalmatine）

購自中國藥品生物制品檢定所；試劑均為AR（上?；噺S）。

1.2 藥材

市售合格藥材、經(jīng)南京中醫(yī)藥大學(xué)吳德康教授鑒定，系罌粟科植物延胡索Corydalis yanhusuo W.T.Wang的干燥塊莖。2 方法與結(jié)果

2.1試驗(yàn)方案的設(shè)計(jì)：經(jīng)預(yù)試，選用提取方法，溶媒濃度，溶媒酸度及飲片粒度為考察因素見表1，作L8（27）正交優(yōu)選，考察指標(biāo)選用具鎮(zhèn)痛活性的延胡索乙素[1]及總提取物量，各試驗(yàn)號(hào)平行操作。2.2 含量測(cè)定方法

2.2.1色譜條件 色譜柱μ-bondpak TMC18(?3.9×300mm);流動(dòng)相：甲醇-水-醋酸（76：24：2），10%NH4OH 溶液調(diào)PH至4.6；流速0.5ml/min；檢測(cè)波長為280nm；柱溫：室溫。2.2.2對(duì)照品溶液的制備及線性關(guān)系的初步考察，精密稱定對(duì)照品1.750mg，無

水乙醇溶解，定容至1ml，為對(duì)照品溶液。精密吸取對(duì)照品溶液，2、6、10、14、18μl按上述色譜條件測(cè)定峰面積見表1。計(jì)算得回歸方程：Y = 1620331X – 10882，r = 0.9998。表明延胡索乙素在3.5），男，漢族，江蘇·宜興，副研究員，醫(yī)學(xué)學(xué)士，從事中藥制藥工程研究。Tel：（025）85637192 E-mail:xljn66@ sina.com

2 1 1 2 2 546 157 4 1 2 2 2 2 1 1 451 161 5 2 1 2 1 2 1 2 446 191 6 2 1 2 2 1 2 1 374 196 7 2 2 1 1 2 2 1 476 187 8 2 2 1 2 1 1 2 377 186 K1 1804 1627 1666 1869 1698 1774 1702 K2 1673 1850 1817 1608 1779 1703 1775 R 43 56 37 68 20 18 19 S2 2145 6216 3081 8515 820 630 666 K1 720 791 775 733 735 737 740 K2 760 691 707 749 747 745 742 R 11 25 17 4 3 2 0.5 S2 2205 1250 578 32 18 8 0.5

B>A>C>D C>B>A>D

表6 延胡索吸收度方差分析

來源 離善平方和 自由度 方差 F值 顯著性

A 2145 1 2145 1.42 B 6216 1 6216 4.11 C 8515 1 8515 5.63 * D 666 1 666 0.40 e 4531 3 1510.3 F0.05(1,3)=10.1 F0.1(1,3)=5.54 * P<0.1

表7 總提取物方差分析

來源 離差平方和 自由度 方差 F值 顯著性

A 220.5 1 220.5 1.10 B 1250 1 1250 6.21 * C 32 1 32 0.16 e 604 3 201.3 F0.05(1,3)=10.1 F0.1(1,3)=5.54 *P<0.1 結(jié)合成本等綜合因素考慮，工藝選用A2B2C1D1，即20目延胡素用PH4的70%乙醇滲漉。2.4 工藝小試確定具體技術(shù)參數(shù)（以供工藝放大參考）

2.4.1樣品制備 照正交優(yōu)選的工藝技術(shù)條件及《中國藥典》2005版一部附錄[3]流侵膏制備法中滲漉要點(diǎn)操作。用HCl調(diào)至PH4的乙醇為滲漉溶媒，取20目延胡索2kg，3L 滲漉溶媒濕潤4h，裝筒、浸漬16h后，滴速6ml/min滲漉。滲漉液收集到10L時(shí)，每500ml取樣一次，以原濃度供TLC檢出。

2.4.2 TLC檢出試驗(yàn)、計(jì)算用量 參照《中國藥典》2005版一部附錄TLC法，硅膠G板，點(diǎn)樣5ul，環(huán)

滲漉用溶媒=3+10+0.5×13=19.5 L，延胡索滲漉溶媒量約為物料量的10倍。2.4.3滲漉速度的計(jì)算

滲漉速度 = 6 ml/min÷ 2 kg×投料量kg =3×投料量（kg數(shù)）ml/min 3 結(jié)論及討論

經(jīng)正交試驗(yàn)及工藝小試，胡辛麻鎮(zhèn)痛軟膏延胡索的提取工藝定為以1.5倍量滲漉溶媒濕潤物料4h，裝筒，浸漬16 h 后，以與投料量相應(yīng)的滲漉速度滲漉，制成相應(yīng)的中間品備用。

中藥軟膏多采用凡士林、飴糖等為基質(zhì)調(diào)制而成，相比之下W/O、O/W型軟膏基質(zhì)對(duì)所載主藥的量和其理化性質(zhì)有較為苛刻的要求，如有較多直接粉碎入藥的或提取物量較大的主藥，往往達(dá)不到良好的乳化效果或乳化了卻無合格的穩(wěn)定性。本實(shí)驗(yàn)?zāi)康脑趦?yōu)化延胡索提取工藝，以獲得指標(biāo)成分含量較高的提取物，以便制成合格的軟膏劑。另外，對(duì)傳統(tǒng)滲漉法具體工藝技術(shù)參數(shù)的確定，作了考察研究，獲得了較為理想的可參考數(shù)據(jù)，給工藝放大提供了依據(jù)。

參考文獻(xiàn)：

[1] 原永芳，李修祿，柳正良等.超臨界流體萃取及高效液相色譜法分析延胡索中延胡索乙素的含量[J].藥學(xué)學(xué)報(bào)，1996，31(4):282.[2] 《中國藥典》[S].一部.2005,附錄VI D.[3] 《中國藥典》[S].一部.2005,附錄I O.[4] 《中國藥典》[S].一部.2005,附錄VI B.-