第一篇：2000年技術(shù)考核總結(jié),組織部

二000年度在崗專業(yè)技術(shù)人員考核總結(jié)

根據(jù)城建局組織處的安排，結(jié)合我公司實(shí)際情況，于2001年3月13日至3月30日，對(duì)在崗專業(yè)技術(shù)人員進(jìn)行了年度考核。

一、專業(yè)技術(shù)人員基本情況

截止2000年底，我公司取得任職資格并受聘在崗的各類專業(yè)技術(shù)人員

人。按高、中、初級(jí)職務(wù)檔次分為高級(jí)

人、中級(jí)

人、初級(jí)

人。分別占在崗專業(yè)技術(shù)人員總數(shù)的%、%、%。因故未能參加考核的人，實(shí)際參加考核的 人。

二、基本作法

考核以邯人[1996]65號(hào)轉(zhuǎn)發(fā)冀人[1996]35號(hào)文和邯人發(fā)[1999]41號(hào)文件的基本原則，以專業(yè)技術(shù)人員崗位職責(zé)的依據(jù)，堅(jiān)持公平、公開(kāi)、民主、客觀、公正的原則，采取自我總結(jié)、民主評(píng)議、單位（科室）鑒定，公司職政小組審查把關(guān)的辦法進(jìn)行。

（一）提高認(rèn)識(shí)，加強(qiáng)領(lǐng)導(dǎo)

公司首先召開(kāi)了職政小組會(huì)議，學(xué)習(xí)有關(guān)文件精神，研究了考核方案，制定了年度考核安排意見(jiàn)。二是召開(kāi)了有關(guān)單位（科室）主管領(lǐng)導(dǎo)會(huì)議，布置任務(wù)。從考核程序、辦法、標(biāo)準(zhǔn)、時(shí)間、內(nèi)容等方面作出具體部署，并提出明 確要求，各單位對(duì)考核工作都比較重視。

（二）嚴(yán)格程序，確保質(zhì)量

此次考核總結(jié)了以往的經(jīng)驗(yàn)，從時(shí)間上分為三個(gè)階段，第一階段各單位（科室）傳達(dá)文件，進(jìn)行思想動(dòng)員，個(gè)人總結(jié)一年來(lái)的履職情況，并寫出述職報(bào)告。第二階段基層單位（科室）組織宣讀述職報(bào)告，進(jìn)行民主評(píng)議，而給個(gè)人填寫考評(píng)表。第三階段由單位（科室）負(fù)責(zé)人作業(yè)鑒定，初步提出優(yōu)秀、基本稱職、不稱職三個(gè)檔次，報(bào)公司職政小組審定。

三、考核結(jié)果

二000年度實(shí)際參加考核的專業(yè)技術(shù)人員共有

人，評(píng)為優(yōu)秀的31人，其余均為基本稱職。

（1）工程系列

人，優(yōu)秀1人，占該系列人數(shù)的%；（2）政工系列

人，優(yōu)秀8人，占該系列人數(shù)

%；（3）經(jīng)濟(jì)系列

人，優(yōu)秀4人，占該系列人數(shù)

%；（4）會(huì)計(jì)系列

人，優(yōu)秀4人，占該系列人數(shù)

%；（5）統(tǒng)計(jì)系列

人，優(yōu)秀1人，占該系列人數(shù)

%；

第二篇：組織部考核

2015-2016學(xué)年第二學(xué)期組織部考核（30分）

1.2認(rèn)真抓好團(tuán)員青年的思想教育活動(dòng)，有青年馬克思主義培訓(xùn)班。本學(xué)年共交四篇新聞稿

材料要求：(至少新聞稿四篇+學(xué)員名單)（2分）

1.3組織學(xué)習(xí)毛澤東思想、鄧小平理論、“三個(gè)代表”重要思想，黨的路線、方針、政策以及團(tuán)的基礎(chǔ)知識(shí)等社會(huì)質(zhì)疑核心價(jià)值體系，每學(xué)期組織2次學(xué)生集體學(xué)習(xí)。（注：黨校）本學(xué)年共交四篇新聞稿 材料要求：(至少新聞稿四篇+學(xué)員名單+集體照)（2分）

1.4在“五四”、國(guó)慶節(jié)、一二·九運(yùn)動(dòng)等重大紀(jì)念日（元旦、一二·

九、雷鋒節(jié)、植樹(shù)節(jié)、清明、五一、五

四、母親節(jié)、父親節(jié)、端午、國(guó)慶、中秋）廣泛開(kāi)展理想信念教育、愛(ài)國(guó)主義教育和革命傳統(tǒng)教育，每次重大節(jié)日組織至少一次教育活動(dòng)。每學(xué)期組織開(kāi)展3次。材料要求：（新聞稿6篇）（3分）

1.6①分院領(lǐng)導(dǎo)重視共青團(tuán)工作，每學(xué)期至少專題研究1次團(tuán)的工作；②積極按學(xué)校政策要求落實(shí)分院團(tuán)總支的崗位、配備專職干部； ③分院領(lǐng)導(dǎo)經(jīng)常參與團(tuán)的活動(dòng)，主要領(lǐng)導(dǎo)每人每學(xué)期至少1次。材料要求：①新聞稿+方案(2份)②團(tuán)干部崗位名單③新聞稿（2篇）（3分）

2.1特色團(tuán)日活動(dòng)評(píng)比（加分項(xiàng)）

3.1定期組織團(tuán)內(nèi)政治學(xué)習(xí)、組織生活和組織活動(dòng)，有重點(diǎn)地開(kāi)展“特色團(tuán)日”活動(dòng)。

材料要求：（策劃書+總結(jié)+登記表）按月份3月，4月，5月整理好，進(jìn)行長(zhǎng)文檔排版。（6分）

3.2積極開(kāi)展優(yōu)秀團(tuán)支部創(chuàng)建活動(dòng)，認(rèn)真做好團(tuán)內(nèi)評(píng)優(yōu)工作。材料要求：優(yōu)秀團(tuán)支部創(chuàng)建材料+團(tuán)支部名單（3分）

3.3建立團(tuán)員名冊(cè)、檔案管理，統(tǒng)計(jì)、團(tuán)籍注冊(cè)、團(tuán)關(guān)系接轉(zhuǎn)、團(tuán)費(fèi)收繳、辦理團(tuán)員證、考核注冊(cè)等工作。材料要求：團(tuán)員花名冊(cè)+團(tuán)費(fèi)收繳明細(xì)（4分）

3.4認(rèn)真填寫《團(tuán)支部工作手冊(cè)》，規(guī)范團(tuán)的各項(xiàng)記錄工作。必須填寫每月工作計(jì)劃，每一月份主要工作計(jì)劃，每學(xué)期工作總結(jié)，會(huì)議記錄、活動(dòng)記錄。

材料要求：上交抽查樣本（5分）

3.5每學(xué)期組織分團(tuán)校培訓(xùn)1-2次，1課時(shí)，團(tuán)總支書記專題一次。（分團(tuán)校培訓(xùn)可以安排在入團(tuán)考試前期，作為入團(tuán)考試培訓(xùn)，入團(tuán)考試一學(xué)年一次）

材料要求：（新聞稿+策劃案）{2份}（2分）

除3.4團(tuán)支書工作手冊(cè)外，其他材料要求上交紙質(zhì)稿和電子稿。新聞稿字?jǐn)?shù)不少于500字附照片 電子稿壓縮包發(fā)至693285546@qq.com 截止日期：2016年6月20日18點(diǎn)截止。

校團(tuán)委組織部 2016年6月4日

第三篇：組織部工作考核

組織部工作考核

（一）姓名：

一.選擇題（單選或多選）

1、電子檔文件格式：

A.標(biāo)題小二加粗、內(nèi)容小

四、小標(biāo)題和落款小四加粗、行距1.5倍，落款日期中的〇為搜狗拼音中的ling

B.標(biāo)題小二加粗、內(nèi)容小

四、小標(biāo)題和落款小二加粗、行距1.0倍，落款日期中的〇為搜狗拼音中的ling

C.標(biāo)題小二加粗、內(nèi)容小

四、小標(biāo)題和落款小四加粗、行距1.5倍，落款日期中的零為搜狗拼音中的ling2、出現(xiàn)下面哪些情況，會(huì)扣分：

A.未及時(shí)將填寫好的考勤表交至院組織部

B.未及時(shí)查分簽字。

C.每月第三周星期三12點(diǎn)40之前未交政治團(tuán)活動(dòng)課。

D.公務(wù)條在星期二中午12：40之前打好并交到院組織部

E.上交的主題重復(fù)

3、每個(gè)月有四周，第幾周要我們自己出主題：

A．第一周和第四周B.第二周和第三周C.第三周和第四周D.第一周和第四周4、到需要系部出主題時(shí)，主題要在之前交至院組織部。

A.主題要在本周政治團(tuán)活動(dòng)課下課后交與院組織部

B.主題要在本周政治團(tuán)活動(dòng)課下課后查分前交與院組織部

C.主題要在本周政治團(tuán)活動(dòng)課之前交與院組織部

D.主題要在下周政治團(tuán)活動(dòng)課查分前交與院組織部

5、下面說(shuō)法正確的有。

A.面向全院的活動(dòng)，開(kāi)展的非常成功且影響較大，由學(xué)工辦老師親自指導(dǎo)，并有院系領(lǐng)導(dǎo)觀看的加10分。

B.面向系部的活動(dòng)，有系部指導(dǎo)老師及院團(tuán)委成員觀看可加8分。

C.校外活動(dòng)或者是小型活動(dòng)則酌情加3-5分。

D.突出班級(jí)每月需在政治團(tuán)活動(dòng)課通報(bào)表?yè)P(yáng)好的班級(jí)里連續(xù)達(dá)到2次以上，這樣的班級(jí)所在系部加2分。

E.一個(gè)月沒(méi)有開(kāi)展一個(gè)活動(dòng)的系部扣分。

二、填空題（共25，一空1分）

1.植科系大二有個(gè)班級(jí)，大一有個(gè)班級(jí)。（不包括五年制）.植科系大一有哪幾個(gè)專業(yè)。

3.每月必須打一份各班情況通報(bào)表送至班主任，內(nèi)容包括各班、、。

4.每月做月評(píng)比表，需用到資料：、。

5.將專業(yè)名稱加在相應(yīng)數(shù)字前，園林12346；12347；12348；12349；12315；12309； 環(huán)藝12322；12323；12324；12325.園林11508班、理科12502教室位置分別在、；

6.每次活動(dòng)結(jié)束后，之內(nèi)必須交活動(dòng)總結(jié)和加分申請(qǐng)到院組織部，文件要蓋章。

7.通知各班組織委員每月15號(hào)之前上交計(jì)劃總結(jié)，上交計(jì)劃總結(jié)的同時(shí)發(fā)放本班本月，注意查收并做好月評(píng)比表。

8.填寫考勤表，政治團(tuán)活動(dòng)課結(jié)束后，把大一和大二班級(jí)的考情表匯總到一張紙上，一式份，在之前交一份到院組織部，遲交扣0.5分，缺交扣1分。

三、正確寫出一個(gè)本部門成員姓名以及所在班級(jí)，加一分。

植科系組織部

第四篇：任職期年技術(shù)總結(jié)

任職期專業(yè)技術(shù)工作報(bào)告

本人在擔(dān)任農(nóng)藝師工作期間，工作上能認(rèn)真負(fù)責(zé)，多干事、干實(shí)事、干好事。在工作和生活中發(fā)揚(yáng)艱苦樸素、樂(lè)于助人的優(yōu)良傳統(tǒng)，始終做到老老實(shí)實(shí)做人，勤勤懇懇做事，勤勞簡(jiǎn)樸的生活，時(shí)刻牢記黨員的責(zé)任和義務(wù)，在任何時(shí)候都嚴(yán)格要求自己。

在業(yè)務(wù)工作方面，及時(shí)了解農(nóng)業(yè)局推廣的新技術(shù)新品種，及時(shí)完成上級(jí)下達(dá)的各項(xiàng)任務(wù)；針對(duì)市場(chǎng)發(fā)展結(jié)合我鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)實(shí)際情況，引進(jìn)和推廣優(yōu)質(zhì)、高值、新奇的農(nóng)作物品種；加強(qiáng)農(nóng)作物的栽培管理技術(shù)、加強(qiáng)病蟲害預(yù)防防治、加強(qiáng)信息溝通、支持種糧大戶、種果大戶等。積極、認(rèn)真參加業(yè)務(wù)主管部門安排的在職教育學(xué)習(xí)，同時(shí)自覺(jué)加強(qiáng)學(xué)歷培訓(xùn)和其他業(yè)務(wù)技能培訓(xùn)；對(duì)工作中發(fā)現(xiàn)的問(wèn)題能積極尋找答案和深入研究學(xué)習(xí)，不斷提高自己的工作能力。任職期間的主要工作有：

1、積極參加科技示范入戶工程，作為一個(gè)科技示范指導(dǎo)員，認(rèn)真指導(dǎo)好十個(gè)示范戶，通過(guò)十個(gè)示范戶在帶動(dòng)100個(gè)果農(nóng)開(kāi)展新技術(shù)推廣，使沙田柚達(dá)到高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、高效的目的，是科技示范工作取得實(shí)實(shí)在在的效果。

2、、積極試驗(yàn)和推廣高產(chǎn)值新品種火龍果和四季龍眼、靈芝人工培植；火龍果、靈芝、早熟大果枇杷和四季龍眼是近年來(lái)在我鎮(zhèn)新引進(jìn)試種成功的新品種，具有新、特、優(yōu)、價(jià)高的特點(diǎn)，很值得推廣；我們和專業(yè)戶一起認(rèn)真摸索和總結(jié)高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)的大規(guī)模生產(chǎn)方法，爭(zhēng)取 加快推廣發(fā)展，帶動(dòng)廣大農(nóng)戶生產(chǎn)致富。

3、結(jié)合丙村鎮(zhèn)沙田柚科技示范場(chǎng)開(kāi)展沙田柚的低桿矮冠新修剪方法，在當(dāng)?shù)毓麍@推廣使用后，使沙田柚取得高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)高效的栽培效果，去年報(bào)送縣科技委員會(huì)獲得科技進(jìn)步獎(jiǎng)，今年加大推廣力度。

4、紅肉火龍果優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)栽培管理技術(shù)研究獲得縣科技進(jìn)步獎(jiǎng)。該水果經(jīng)臺(tái)灣引種到從化種植改良，再引種到當(dāng)?shù)睾?，針?duì)當(dāng)?shù)貧夂?、環(huán)境特點(diǎn)，總結(jié)出一套優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)栽培管理方法，經(jīng)推廣實(shí)施，簡(jiǎn)單實(shí)用，經(jīng)濟(jì)效益高。

5、四季蜜反季節(jié)龍眼栽培技術(shù)研究在全國(guó)屬于先進(jìn)技術(shù)，該技術(shù)通過(guò)物理和化學(xué)方法調(diào)控龍眼開(kāi)花時(shí)間結(jié)果時(shí)間，控制龍眼果實(shí)成熟時(shí)間，在不同的季節(jié)獲得產(chǎn)品，從而使產(chǎn)品得到較高的經(jīng)濟(jì)效益，經(jīng)推廣實(shí)施，該技術(shù)在生產(chǎn)上可以較高經(jīng)濟(jì)效益，值得大力推廣，2011年獲得市級(jí)科技進(jìn)步獎(jiǎng)。

6、測(cè)土配方施肥是國(guó)家安排實(shí)施的一項(xiàng)重要的新技術(shù)，測(cè)土配方工作的第一個(gè)步驟是土樣的選取，我們跑遍了全鎮(zhèn)的各個(gè)耕作區(qū)按要求取好樣本，為了按時(shí)完成這個(gè)工作，甚至放棄星期天的休息時(shí)間繼續(xù)工作。

7、本鎮(zhèn)銀二村是一個(gè)枇杷種植專業(yè)村，前幾年引進(jìn)種植大果枇杷獲得成功，但前兩年病害很嚴(yán)重，損失巨大，我到現(xiàn)場(chǎng)觀察了解，認(rèn)為是枇杷炭疽病，采用正確的防治方法后，病害得到控制，使枇杷產(chǎn)量和質(zhì)量得到保證，從而提高經(jīng)濟(jì)效益。

8、桔小實(shí)蠅是近年來(lái)嚴(yán)重危害農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的一種蟲害，特別是對(duì)當(dāng) 地的主導(dǎo)農(nóng)產(chǎn)品沙田柚、蜜柚，發(fā)生發(fā)展非?？欤：Υ?，損失嚴(yán)重，我和農(nóng)業(yè)站的同志一起，通過(guò)印制發(fā)放資料、開(kāi)現(xiàn)場(chǎng)會(huì)、下鄉(xiāng)指導(dǎo)等形式，發(fā)動(dòng)果農(nóng)積極開(kāi)展聯(lián)防聯(lián)治，使這個(gè)蟲害的到有效控制，大大減少損失。

9、當(dāng)?shù)厮镜究v卷葉蟲每隔幾年就會(huì)爆發(fā)一次，這個(gè)時(shí)候防治工作一定要及時(shí)到位，今年8月初，據(jù)縣測(cè)報(bào)站監(jiān)測(cè)與調(diào)查，預(yù)計(jì)第五代兩遷害蟲稻縱卷葉螟、發(fā)生偏重、局部大發(fā)生，如不及時(shí)防治，累積的蟲源將為下一代防治帶來(lái)很大壓力，將危害水稻長(zhǎng)生發(fā)育，嚴(yán)重影響糧食生產(chǎn)安全。我在農(nóng)業(yè)站負(fù)責(zé)植保工作，見(jiàn)到通知后，立即開(kāi)展田間觀察，查看卷葉蟲發(fā)育進(jìn)度，結(jié)合通知內(nèi)容，馬上印制病蟲害防治通知書，下發(fā)到各村、村民小組，指導(dǎo)農(nóng)戶立即開(kāi)展防治工作，把蟲害損失降到最小。

10、加強(qiáng)農(nóng)業(yè)合作社、農(nóng)業(yè)龍頭企業(yè)地考核與申報(bào)也是一項(xiàng)很重要地工作；在考核原有級(jí)別農(nóng)業(yè)合作社、龍頭企業(yè)的基礎(chǔ)上，結(jié)合實(shí)際情況，繼續(xù)新申報(bào)市級(jí)、縣級(jí)農(nóng)業(yè)龍頭企業(yè)，農(nóng)業(yè)合作社和龍頭企業(yè)的發(fā)展大大帶動(dòng)了我鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)專業(yè)化和產(chǎn)業(yè)化發(fā)展的步伐，帶領(lǐng)廣大農(nóng)戶奔康致富。

11、利用上級(jí)資金直補(bǔ)的機(jī)會(huì)，大力推廣沼氣池的建設(shè)，繼續(xù)深入到農(nóng)戶家中加強(qiáng)宣傳工作，繼續(xù)在全鎮(zhèn)掀起建設(shè)沼氣池的熱潮，繼續(xù)推進(jìn)新農(nóng)村建設(shè)，享受黨中央惠民政策。

13、落實(shí)好種糧大戶和種植水稻直補(bǔ)工作；配合財(cái)政所對(duì)全鎮(zhèn)的水稻種植面積進(jìn)行準(zhǔn)確統(tǒng)計(jì)，及時(shí)按要求發(fā)放補(bǔ)助款，使政府護(hù)持農(nóng) 業(yè)的政策及時(shí)得到兌現(xiàn)，得到群眾的好評(píng)。

在日常工作中，堅(jiān)持做到經(jīng)常下鄉(xiāng)，深入農(nóng)業(yè)生產(chǎn)一線學(xué)習(xí)和指導(dǎo)，對(duì)農(nóng)戶反映的生產(chǎn)遇到的問(wèn)題及時(shí)進(jìn)行調(diào)查、研究和解決；特別注意觀察了解各種病蟲害的發(fā)生、發(fā)展趨勢(shì)，及時(shí)掌握情況，指導(dǎo)農(nóng)戶采取及時(shí)有效的防治手段對(duì)病蟲害進(jìn)行控制，把病蟲害造成的損失減到最小，保證了我鎮(zhèn)糧食、水果、蔬菜生產(chǎn)的高產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn)。在思想上能認(rèn)真領(lǐng)會(huì)黨中央的指示精神，在局機(jī)關(guān)和鎮(zhèn)黨委的正確領(lǐng)導(dǎo)下，以科學(xué)發(fā)展觀思想為指導(dǎo)，促進(jìn)和諧社會(huì)為出發(fā)點(diǎn)，能堅(jiān)決貫徹執(zhí)行黨的路線、方針、政策，認(rèn)真了解國(guó)內(nèi)外時(shí)事新聞，認(rèn)清形勢(shì)。

今后努力的方向：隨著市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)的發(fā)展、農(nóng)業(yè)新技術(shù)也不斷發(fā)展，需掌握的知識(shí)更多更廣，為此，我將更加勤奮的工作，刻苦的學(xué)習(xí)，努力提高專業(yè)知識(shí)和各種工作技能，積極參加各種技術(shù)創(chuàng)新研究活動(dòng)，積極參加實(shí)踐；爭(zhēng)取做一名優(yōu)秀的農(nóng)業(yè)工作者。對(duì)任職期間工作自評(píng)稱職。

****鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)站

*****

2012-7-19 4

第五篇：實(shí)驗(yàn)技術(shù)考核總結(jié)(全)

一、與進(jìn)實(shí)驗(yàn)室制度相關(guān)

實(shí)驗(yàn)室預(yù)約制度

凡申請(qǐng)使用醫(yī)藥研究院科研平臺(tái)的人員必須辦理登記手續(xù)，具體流程如下：

1.填寫“醫(yī)藥研究院科研平臺(tái)登記表”；

2.實(shí)驗(yàn)室各項(xiàng)規(guī)章制度學(xué)習(xí)及考核；

3.大型儀器培訓(xùn)及考核；

4.填寫“進(jìn)入實(shí)驗(yàn)動(dòng)物房申請(qǐng)表”；

5.閱讀知情同意書并簽字；

6.院長(zhǎng)審核。

二、大型設(shè)備儀器使用管理制度

1.實(shí)驗(yàn)室由專人負(fù)責(zé)儀器設(shè)備的操作,為科研人員服務(wù)；若學(xué)生獨(dú)立上機(jī)操作,必須接受

培訓(xùn)并經(jīng)考核合格才能上機(jī)。

2.上機(jī)測(cè)試必須預(yù)先預(yù)約登記，在規(guī)定時(shí)間內(nèi)完成測(cè)試實(shí)驗(yàn)。

3.不得用儀器設(shè)備的計(jì)算機(jī)做與儀器功能無(wú)關(guān)的工作。嚴(yán)格按各臺(tái)儀器的操作規(guī)程操

作。

4.儀器設(shè)備使用完后送樣人員必須填寫使用記錄，包括測(cè)試項(xiàng)目、機(jī)時(shí)數(shù)（或費(fèi)用），并簽字。

5.若儀器設(shè)備發(fā)生故障，須及時(shí)通知有關(guān)負(fù)責(zé)人，操作人員不得自行處理。

6.本中心實(shí)驗(yàn)室各臺(tái)儀器設(shè)備的說(shuō)明書、有關(guān)資料均有固定保存處，閱讀完后請(qǐng)放回

原處，勿帶出室外。

7.嚴(yán)禁在實(shí)驗(yàn)室水槽中排放腐蝕及劇毒溶液，傾倒少量廢液必須用大量水沖洗。實(shí)驗(yàn)

結(jié)束后，注意檢查各氣體、水、電是否關(guān)閉，并搞好實(shí)驗(yàn)室臺(tái)面及地面的衛(wèi)生。

三、高壓滅菌鍋使用的注意事項(xiàng)

答案要點(diǎn)：

1、高壓前鍋底水需沒(méi)過(guò)橫杠；

2、高壓前注意廢液缸廢水水位在high與low間

3、高壓時(shí)選擇模式。無(wú)液體時(shí)選擇固體模式，物品可直接放入，有液體時(shí)選擇液體模式，若液體是用塑料瓶蓋封口，則需旋松瓶蓋，若為橡膠瓶蓋，則需插上針頭中和內(nèi)外壓差，防止爆炸。

4、高壓結(jié)束后需等到壓力表壓力顯示為零時(shí)才能開(kāi)鍋。

四、WB基本步驟

答案要點(diǎn)：

1、蛋白質(zhì)的樣品制備；

2、測(cè)定蛋白濃度；

3、SDS-PAGE電泳【①制膠：分離膠靜置約40min凝固，濃縮膠（插入梳子）約靜置30min凝固；②預(yù)電泳；③樣品準(zhǔn)備；④加樣；⑤電泳：80V恒壓 濃縮膠約（30min），100V恒壓 分離膠約（60min）】；

4、轉(zhuǎn)膜【①切膠；②剪膜和濾紙；③按如下順序制作“三明治”：黑→海綿→三層濾紙（小于膠）→凝膠→PVDF膜→三層濾紙→海綿→白→放入轉(zhuǎn)膜槽，黑面對(duì)黑面，400mA轉(zhuǎn)膜，約60min】；

5、膜的封閉：TBST洗三次，每次約5min，5%脫脂奶粉封閉1h；

6、TBST洗三次，每次約5min；

7、一抗孵育（4度過(guò)夜）；

8、TBST洗四次，每次約5min；

9、二抗孵育（室溫1h)；

10、TBST洗四次，每次約5min；

11、顯色（A液：B液=1：1）；

12、曝光。

五、離體組織灌流技術(shù)實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)（李勇老師）

1.2.3.4.5.6.KHS須新鮮配制，如出現(xiàn)沉淀，棄用。取材時(shí)，盡量避免牽拉組織。實(shí)驗(yàn)前要調(diào)整好氣體進(jìn)氣量，實(shí)驗(yàn)開(kāi)始后盡量避免調(diào)整進(jìn)氣。初始張力設(shè)置參考相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道。實(shí)驗(yàn)完成后要清洗進(jìn)氣口，避免堵塞。數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)工作期間，不能頻繁使用電腦，避免程序運(yùn)行干擾軟件采集數(shù)據(jù)。

六、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的基本操作--SPF的概念及相關(guān)問(wèn)題（劉秀芬老師）SPF動(dòng)物：即無(wú)特定病原體（Specific pathogen Free,SPF）動(dòng)物，是指機(jī)體內(nèi)無(wú)特定的微生物和寄生蟲存在的動(dòng)物，但非特定的微生物和寄生蟲是容許存在的。一般指無(wú)傳染病的健康動(dòng)物，是目前國(guó)外使用最廣泛的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。

七、免疫組化（堯青老師）

組織化學(xué)的基本原理：

化學(xué)反應(yīng)

化學(xué)試劑+擬檢物質(zhì)—————→ 反應(yīng)產(chǎn)物沉淀（有色）（組織切片或細(xì)胞涂片）（擬檢物質(zhì)所在處）石蠟切片步驟：

取材（大小5mm*5mm*2mm時(shí)間：迅速溫度：冰?。潭ǎ兹?/p>

→脫水（梯度酒精）→透明（二甲苯）→浸蠟（石蠟）→包埋（石蠟）

→切片（石蠟切片機(jī)）→粘片（載玻片）→烤片（烤箱）

HE染色程序：

二甲苯Ⅰ 10 min→二甲苯Ⅱ10 min→無(wú)水乙醇Ⅰ 5 min→無(wú)水乙醇Ⅱ3 min

→95%乙醇 3 min→85%乙醇3 min→流水沖洗2 min→蘇木素3-5min

→流水沖洗 1 min→1%鹽酸乙醇數(shù)秒→流水沖洗1min→碳酸鋰2min

→流水沖洗3-10min→伊紅染色 數(shù)秒→85%乙醇30 s→95%乙醇Ⅰ1min

→95%乙醇Ⅱ 3min→無(wú)水乙醇Ⅰ3 min→無(wú)水乙醇Ⅱ 3 min→二甲苯Ⅰ 3 min

→二甲苯Ⅱ3 min→中性樹(shù)膠封片

鏡下觀察：細(xì)胞核藍(lán)色，細(xì)胞漿紅色，背景粉紅色

八、PCR的基本原理、步驟（李敏才老師）

PCR技術(shù)的基本原理類似于DNA的天然復(fù)制過(guò)程，其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物。

試管中進(jìn)行的DNA復(fù)制反應(yīng)，依據(jù)

① DNA半保留復(fù)制的機(jī)理；

② 體外DNA分子于不同溫度下可變性和復(fù)性的性質(zhì)；

通過(guò)人為控制體外合成系統(tǒng)的溫度，使

① 雙鏈DNA變成單鏈，② 單鏈DNA與人工合成的引物退火，③ DNA聚合酶使引物沿著單鏈模板延伸為雙鏈DNA。

PCR由變性--退火--延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成：

1、模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時(shí)間后，使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結(jié)合，為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備；

2、模板DNA與引物的退火(復(fù)性)：模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后，溫度降至55℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合；

3、引物的延伸：DNA模板--引物結(jié)合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP為反應(yīng)原料，靶序列為模板，按堿基配對(duì)與半保留復(fù)制原理，合成一條新的與模板DNA 鏈互補(bǔ)的半保留復(fù)制鏈。

重復(fù)循環(huán)變性--退火--延伸三過(guò)程，就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈”，而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成一個(gè)循環(huán)需2～4分鐘，2～3小時(shí)就能將待擴(kuò)目的片段富集106～109倍。所需循環(huán)次數(shù)取決于樣品中模板的拷貝。

九、細(xì)胞培養(yǎng)（郭霜老師）

1.吸光培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液

2.加入1-2 ml 0.25％的胰蛋白酶液(以消化液能覆蓋整個(gè)瓶底為準(zhǔn)）

靜置2-10 min（顯微鏡下動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)）。

3.吸去胰蛋白酶液，加入培養(yǎng)液。

4.用吸管吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，反復(fù)吹打瓶壁細(xì)胞，形成細(xì)胞懸液。

5.吸取1/10—1/40細(xì)胞懸液，接種于新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。

6.加適量新鮮培養(yǎng)液于接種了細(xì)胞懸液的新培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。.將后者放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。細(xì)胞凍存方法：

1．預(yù)先配制凍存液：含20%血清培養(yǎng)基，10%DMSO，DMSO液用培養(yǎng)液配好，避免因臨時(shí)配制產(chǎn)熱而傷害細(xì)胞；

2．取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞，經(jīng)胰酶消化后，加入適量?jī)龃嬉? 用吸管吹打制成細(xì)胞懸液（1×106 ～5 ×106細(xì)胞/ml)；

3．加入1ml細(xì)胞于凍存管中，密封后標(biāo)記冷凍細(xì)胞名稱和冷凍日期。

慢凍程序：

1.先將凍存管放入4℃冰箱，約40min。

2.接著置于-20℃冰箱，約30～60min。

3.置于-80℃超低溫冰箱中放置過(guò)夜。

4.置于液氮罐中長(zhǎng)期保存。

（l）從液氮中取出冷凍管，迅速投入37～38 ℃水浴中，使其融化（1分鐘左右）。

（2）5分鐘內(nèi)用培養(yǎng)液稀釋至原體積的10倍以上。

（3）低速離心10分鐘。

（4）去上清，加新鮮培養(yǎng)液培養(yǎng)剛復(fù)蘇的細(xì)胞。

十、膜片鉗技術(shù)的四種基本記錄方式：（邱春玉老師）

將電極接觸細(xì)胞膜，輕輕給予負(fù)壓吸吮，達(dá)到高阻封接，就形成了細(xì)胞貼附記錄模式。

形成細(xì)胞貼附記錄模式后，采用繼續(xù)施加負(fù)壓或電擊的方法打破細(xì)胞膜，電極內(nèi)液與細(xì)胞內(nèi)液直接相通，即形成全細(xì)胞記錄模式。

從細(xì)胞貼附模式將微電極迅速提起，脫離細(xì)胞，則膜片就從細(xì)胞體上被切割分離下來(lái)，得到分離的膜片，形成膜內(nèi)面向外記錄模式。

4、外面向外記錄模式在形成全細(xì)胞記錄模式后，將電極緩緩提起，逐漸脫離細(xì)胞，同樣因?yàn)榧?xì)胞膜具有流動(dòng)性，黏著在電極尖端上的細(xì)胞膜會(huì)自動(dòng)融合，這樣細(xì)胞外面就朝向電極尖端外，形成外面向外記錄模式。