第一篇：浙江省蜂蜜中有害重金屬因子殘留檢測(cè)方法的研究及風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

項(xiàng)目編號(hào)

原創(chuàng)

浙江工業(yè)大學(xué)“運(yùn)河杯”

大學(xué)生課外學(xué)術(shù)科技基金項(xiàng)目

申請(qǐng)書

項(xiàng)目名稱：浙江省蜂蜜中有害重金屬因子殘留檢測(cè)方法的研究及風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

申請(qǐng)人：馮強(qiáng)

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? 機(jī)械和控制（包括機(jī)械、儀器儀表、自動(dòng)化控制、工程、交通、建筑）

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數(shù)理（包括數(shù)學(xué)、物理等）?

√生命科學(xué)（包括生物、藥學(xué)、食品等）

? 能源化工（包括能源、材料、石油、化學(xué)、化工、生態(tài)、環(huán)保等）

社科（包括人文、管理、經(jīng)濟(jì)、社會(huì)科學(xué)等）

藝術(shù)設(shè)計(jì)（包括廣告、藝術(shù)、設(shè)計(jì)等）??

共青團(tuán)浙江工業(yè)大學(xué)委員

填 報(bào) 說 明

1、封面除“項(xiàng)目編號(hào)”外其他均需填寫。

2、“項(xiàng)目名稱”限25個(gè)漢字。

第二篇：食品中抗生素殘留危害及檢測(cè)方法

食品中抗生素殘留危害及檢測(cè)方法

隨著人們生活質(zhì)量的提高，食品安全問題越來越為廣大消費(fèi)者所關(guān)注，特別是農(nóng)藥和抗生素等藥物殘留問題更是廣大消費(fèi)者所關(guān)注的焦點(diǎn)問題。在食品安全這個(gè)全球關(guān)注的熱點(diǎn)問題上，如何快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)食品安全的問題已成為重中之重。要檢測(cè)抗生素在食品中的殘留，必須選擇特異性強(qiáng)、靈敏度高、高效快速的檢測(cè)方法。因此，研究各種抗生素類殘留檢測(cè)的方法，提高其靈敏度與選擇性具有十分重要的意義。

抗生素具有哪些危害

人們吃了有抗生素殘留的肉、蛋、奶等食物后，會(huì)造成抗生素在人體內(nèi)蓄積，使人產(chǎn)生對(duì)抗生素的抗性，引起各種組織器官病變，甚至癌變。

對(duì)人類健康的危害

對(duì)人體腸道菌群的影響

人體腸道菌群是一個(gè)平衡的生態(tài)系統(tǒng)，對(duì)保持人體健康起著非常重要的作用。如果人們長(zhǎng)期攝入含有抗生素的食品后，會(huì)使敏感菌群被殺滅或抑制，而耐藥菌群卻大量繁殖，從而打破原來的平衡狀態(tài)造成菌群失調(diào)，這就可能會(huì)導(dǎo)致長(zhǎng)期腹瀉或營(yíng)養(yǎng)不良，嚴(yán)重時(shí)還可造成耐藥菌感染，給臨床治療帶來困難。

引起過敏和變態(tài)反應(yīng) 青霉素、四環(huán)素、磺胺類及某些氨基糖苷類抗生素能使部分人群發(fā)生過敏反應(yīng)和變態(tài)反應(yīng)，氯霉素可破壞機(jī)體造血功能，誘發(fā)再生障礙性貧血。經(jīng)常食用含抗生素的動(dòng)物性食品，輕者出現(xiàn)皮膚瘙癢、蕁麻疹、關(guān)節(jié)腫痛，重者導(dǎo)致血管性水腫、休克、甚至死亡。

導(dǎo)致細(xì)菌耐藥性增加

目前，由于抗生素的廣泛使用，使得細(xì)菌的耐藥性不斷增加，食用含抗生素殘留的動(dòng)物性食品后，人體內(nèi)細(xì)菌的耐藥性增加。同時(shí)，動(dòng)物體內(nèi)的耐藥性菌株的耐藥性也可能轉(zhuǎn)移到人體細(xì)菌中，從而對(duì)人類產(chǎn)生極大的危害。

其他毒害作用

動(dòng)物性食品中殘留的鏈霉素進(jìn)入人體后可引起腎損害和聽神經(jīng)受損。長(zhǎng)期攝入氨基糖苷類抗生素殘留嚴(yán)重超標(biāo)的動(dòng)物性食品，可損害第8 對(duì)腦神經(jīng)，出現(xiàn)頭暈、頭痛、耳鳴、耳聾、惡心、嘔吐等癥狀。四環(huán)素會(huì)引起肝損傷，與骨骼或牙齒中的鈣質(zhì)結(jié)合后，使骨骼及牙齒黃染，還可影響兒童的生長(zhǎng)發(fā)育。鄰氯青霉素、頭孢菌素等可引起人類免疫性疾??；氯霉素會(huì)損害人的造血功能，抑制蛋白質(zhì)

摘要：文章綜述了抗生素殘留的來源與途徑, 介紹了抗生素殘留對(duì)人類健康、乳制品生產(chǎn)、環(huán)境及其他方面造成的危害，分析了檢測(cè)抗生素殘留的方法，包括微生物檢測(cè)法、儀器檢驗(yàn)法、免疫學(xué)分析法等，并指出了這些檢測(cè)方法的研究現(xiàn)狀與發(fā)展前景。

對(duì)乳制品生產(chǎn)工藝的危害

由于含有抗生素的奶無法制成酸奶、奶酪等一些高質(zhì)量牛奶產(chǎn)品，容易造成大量原料奶的浪費(fèi)，給乳品企業(yè)造成經(jīng)濟(jì)損失。另一方面，一些不法奶戶在高溫季節(jié)為防止鮮乳的酸敗，往往向牛乳中摻雜各種抗生素，從而造成乳中抗生素殘留，對(duì)人體也造成了很大的危害。

對(duì)環(huán)境的危害

一些性質(zhì)穩(wěn)定的藥物被排泄到環(huán)境中仍能穩(wěn)定存在很長(zhǎng)時(shí)間，從而造成環(huán)境中的藥物殘留。鏈霉素、土霉素在環(huán)境中不易降解；螺旋霉素低濃度降解很快，但濃度高時(shí)需6 個(gè)月才能降解完；桿菌肽鋅在有氧的條件下完全降解需3～4個(gè)月，在無氧環(huán)境中降解所需要的時(shí)間更長(zhǎng)。據(jù)報(bào)道，動(dòng)物養(yǎng)殖場(chǎng)污水處理池中紅霉素、復(fù)紅霉素、磺胺甲唑質(zhì)量濃度可達(dá)69g/L，這些藥物的排放污染了環(huán)境，破壞了生態(tài)平衡。

抗生素殘留量的檢測(cè)方法

隨著社會(huì)的進(jìn)步和人們對(duì)抗生素殘留的日益重視，在客觀上就要求改進(jìn)傳統(tǒng)的檢測(cè)方法。引進(jìn)先進(jìn)的檢測(cè)儀器，尋求一種快速、精確的檢測(cè)方法，使得檢測(cè)結(jié)果更加準(zhǔn)確、可靠。

微生物檢測(cè)方法

微生物檢測(cè)方法的主要原理是根據(jù)抗微生物藥對(duì)特異微生物的抑制作用，來定性或定量檢測(cè)受檢樣品中殘留的抗微生物藥。微生物檢測(cè)法應(yīng)用較為廣泛，是抗生素殘留檢測(cè)的傳統(tǒng)方法，但測(cè)定時(shí)間長(zhǎng)，結(jié)果誤差較大，操作復(fù)雜。其優(yōu)點(diǎn)是費(fèi)用低，一般實(shí)驗(yàn)室都能操作。

氯化三苯四氮唑法（TTC）

這是目前我國(guó)食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)中用來檢查牛乳中抗生素殘留的檢測(cè)方法。如果牛乳中有抗生素存在，當(dāng)乳中加入菌種（嗜熱鏈球菌）經(jīng)培養(yǎng)后，菌種不增殖。此時(shí)，加入的TTC 指示劑不發(fā)生還原反應(yīng)，所以仍呈無色狀態(tài)。如果沒有抗生素存在，則加入菌種就可增殖，TTC 還原變成紅色，使樣品染成紅色。

棉拭法或紙片法

這是檢測(cè)胴體內(nèi)可疑抗生素殘留的現(xiàn)場(chǎng)試驗(yàn)方法，簡(jiǎn)便而又有一定準(zhǔn)確性，被世界普遍采用，具有廣域的靈敏性。它是用棉拭插入待檢部位浸潤(rùn)20min取出，放入有枯草桿菌的培養(yǎng)基中培養(yǎng)18h～24 h，或用圓濾紙從腎臟或乳取樣，與含有枯草桿菌等細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)瓊脂貼合培養(yǎng)，通過觀察棉拭周圍有無抑菌圈或根據(jù)其大小判定有無抗菌物質(zhì)存在。該法的特點(diǎn)是能夠確定抗生素的種類，提高檢出率和準(zhǔn)確率。如，氯霉素最低檢出限量為0.01mg/kg、土霉素為0.05mg/kg等。

杯蝶法

樣品經(jīng)處理后，注入牛津杯中，與含菌液的檢定平板貼合。培養(yǎng)后，根據(jù)抑菌圈的有無及大小判定結(jié)果。采用不同的試驗(yàn)菌種，可檢測(cè)不同的抗生素。如檢測(cè)肉中四環(huán)素類抗生素用蠟樣芽孢桿菌；檢測(cè)青霉素用金黃色葡萄球菌；檢測(cè)鏈霉素或雙氫鏈霉素用枯草桿菌。

電泳生物檢測(cè)法

該法靈敏度較高。Fusac（1989）應(yīng)用電泳和微生物自顯影技術(shù)測(cè)定動(dòng)物組織中殘留的氨基糖苷類抗生素（如，雙氫鏈霉素、卡那霉素等），取得了滿意的結(jié)果。

瓊脂擴(kuò)散法

Korkela 以豬腎為樣品采用瓊脂擴(kuò)散法對(duì)幾種抗生素殘留檢測(cè)進(jìn)行了比較。能檢測(cè)出土霉素和鏈霉素的殘留。Untermann（1986）報(bào)道，采用枯草桿菌進(jìn)行瓊脂擴(kuò)散法檢測(cè)出了牛、豬及山羊的肌肉中和腎臟內(nèi)抗生素的殘留。

儀器檢驗(yàn)方法

儀器檢驗(yàn)方法是利用抗生素分子中的基團(tuán)所具有的特殊反應(yīng)或性質(zhì)來測(cè)定其含量，進(jìn)行定性定量

和藥劑鑒定。其敏感性較高，但有的檢測(cè)程序較復(fù)雜或檢測(cè)費(fèi)用較高。

液相色譜法（LC）

德國(guó)Russel 報(bào)道了液相色譜法檢測(cè)氯霉素殘留，檢測(cè)限為10μg/kg，回收率為63%～79%。Jefery等（1994）報(bào)道了用LC法測(cè)定沙拉沙星在海峽鲇魚肌肉中的殘留，沙拉沙星的檢測(cè)限為1.4ng/g，回收率為85.4％～104％。

氣相色譜法（GC）

該法有許多高靈敏、通用性或?qū)Ｒ恍詮?qiáng)的檢測(cè)器供選用。Plomp和Maes報(bào)道了在血液和羊水中甲砜霉素的快速氣相色譜檢測(cè)方法，檢測(cè)限為0.1μg/mL，甲砜霉素血清的回收率為91.3％，羊水的回收率為90.3％。

薄層色譜法（TLC）

該法經(jīng)常作為樣品篩選方法。其優(yōu)點(diǎn)是速度快，有利于現(xiàn)場(chǎng)應(yīng)用，且已在飼料、組織和體液等的分析中得到了廣泛的應(yīng)用。Bossuyt 等（1976）報(bào)道用TLC 法測(cè)定牛奶中新霉素的殘留。但新霉素的檢測(cè)限為15μg/g，遠(yuǎn)高于牛奶中的新霉素殘留限量。

高效薄層色譜法（HPTLC）

該法現(xiàn)已成為僅次于HPLC的殘留分析法。HPTLC在獸藥殘留的快速篩選檢測(cè)方面應(yīng)用廣泛。測(cè)定組織樣品時(shí)需在樣品展開后噴以硫酸-高氯酸試液，靈敏度可提高10倍，檢測(cè)限達(dá)10μg/kg。

高效液相色譜法（HPLC）

這是目前廣泛應(yīng)用的一種理化檢測(cè)方法。該法對(duì)抗生素殘留的檢測(cè)具有較高的靈敏性。Anadan等（1995）報(bào)道了用HPLC法測(cè)定雞脂肪、肝臟、腎臟、肺臟及皮膚中恩諾沙星及代謝產(chǎn)物環(huán)丙沙星濃度，檢測(cè)限為0.003 μg/g，在各種組織中提取回收率均大于70％。Rolinski 等（1997）用HPLC 法檢測(cè)了肉雞組織和雞蛋中諾氟沙星殘留，檢測(cè)限為0.0025μg/g。

超臨界流體色譜法（SFC）

該法可彌補(bǔ)GC和HPLC法的不足，但不可能取代二者。SFC 最大優(yōu)點(diǎn)是可以方便地連接各種靈敏的檢測(cè)器。Pensabene 等將雞蛋樣品進(jìn)行超臨界流體萃取后進(jìn)行磺胺類藥物的殘留分析，檢測(cè)限為25 μg/kg，回收率為81％~101%。

毛細(xì)管電泳法（CE）Ackermans 等將豬肉樣品加乙腈提取，離心后上清液過濾膜后直接進(jìn)行毛細(xì)管區(qū)帶電泳分析。測(cè)出肉樣中15 種磺胺類藥物的檢測(cè)限在2 mg/kg~9mg/kg 的范圍內(nèi)。

聯(lián)用技術(shù)

聯(lián)用技術(shù)可揚(yáng)長(zhǎng)避短，一般兼分離、定量和定性（分子結(jié)構(gòu)信息）于一體，因而特別適用于確證性分析。常見的聯(lián)用技術(shù)有薄層色譜-質(zhì)譜（TLC-MS）、氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）、液相色譜-質(zhì)譜（LC-MS）等。色譜和質(zhì)譜聯(lián)用由于實(shí)現(xiàn)了高效層析分離和檢測(cè)聯(lián)機(jī)，可用微電腦控制層析條件、程序和數(shù)據(jù)處理，其特異性、靈敏度和重復(fù)性均好，并可一次同時(shí)完成同一樣本中多種藥物及其代謝物的檢測(cè)。

免疫分析法

免疫分析法主要有放射免疫分析（RIA）、酶免疫分析（EIA）、熒光免疫分析（FIA）和酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）。與常規(guī)的理化分析技術(shù)相比，免疫分析技術(shù)最突出的優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)單、容量大、速度快、儀器化程度低且分析成本低，分析效率則為HPLC 或GC 的幾十倍以上。免疫分析法能與其他技術(shù)聯(lián)用。

放射免疫分析（RIA）

Mahon 等曾將卡那霉素與人血清白蛋白直接連接制備結(jié)合抗原，并建立了血清樣品的放射免疫測(cè)定法，檢測(cè)限為10 ng/mL。1984 年Arnold 等即建立了氯霉素的放射免疫測(cè)定法，其檢測(cè)限為0.21μg/kg。酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）

Prithipal Singh 等（1989）建立了檢測(cè)豬血中磺胺二甲嘧啶的ELISA 方法，其檢測(cè)范圍為10ng/mL~1 000 ng/mL。國(guó)內(nèi)劉智宏等（1998）建立了檢測(cè)血清中磺胺二甲基嘧啶的ELISA 方法，其檢測(cè)限為50 ng/mL。楊紅（1999）建立了測(cè)定牛奶、豬血漿等樣本的ELISA 檢測(cè)方法，其檢測(cè)限約0.025 ng/mL。

第三篇：蔬菜水果中27種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留快速掃描檢測(cè)方法研究

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蔬菜水果中27種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留快速掃描檢測(cè)方法研究

作者：黃錦沛

來源：《新農(nóng)村》2012年第07期

摘 要：當(dāng)前，隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)持續(xù)發(fā)展進(jìn)而人們生活水平不斷提高，人們對(duì)生活質(zhì)量的要求越來越高，蔬菜水果的質(zhì)量問題受到了人們的高度重視，其中蔬菜水果的農(nóng)藥殘留污染問題受到了全球消費(fèi)者的關(guān)注。因此，檢測(cè)蔬菜水果的農(nóng)藥殘留情況成為提高人們生活質(zhì)量的主要途徑。本篇文章針對(duì)當(dāng)前蔬菜水果農(nóng)藥殘留問題的現(xiàn)狀，對(duì)蔬菜水果中27種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留快速掃描檢測(cè)方法進(jìn)行了深入的探究。

第四篇：風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估方法研究國(guó)際工程項(xiàng)目[定稿]

風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估方法研究國(guó)際工程項(xiàng)目

摘要：風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估是國(guó)際工程項(xiàng)目管理的重要元素。國(guó)際工程項(xiàng)目的風(fēng)險(xiǎn)因素進(jìn)行了系統(tǒng)地分析從多個(gè)維度的特性的多層評(píng)價(jià)指標(biāo)體系項(xiàng)目。國(guó)際工程項(xiàng)目風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估提出并構(gòu)建,包括8 I-grade 24 II-grade索引和索引作為政策風(fēng)險(xiǎn),市場(chǎng)風(fēng)險(xiǎn)、資源風(fēng)險(xiǎn)、技術(shù)方案風(fēng)險(xiǎn)、進(jìn)度風(fēng)險(xiǎn)、融資風(fēng)險(xiǎn)、人員風(fēng)險(xiǎn)和管理風(fēng)險(xiǎn)。然后自我評(píng)估和基準(zhǔn)測(cè)試評(píng)價(jià)方法應(yīng)用于評(píng)價(jià)國(guó)際工程項(xiàng)目風(fēng)險(xiǎn),并建立了相應(yīng)的數(shù)學(xué)模型。最后,一個(gè)項(xiàng)目的評(píng)估實(shí)例說明數(shù)學(xué)模型的適用性和有效性。

關(guān)鍵詞:國(guó)際工程;風(fēng)險(xiǎn)分析;風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià);風(fēng)險(xiǎn)管理

1介紹

近年來，項(xiàng)目風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估可以包括在許多范圍發(fā)達(dá)國(guó)家項(xiàng)目管理內(nèi)，并成為一個(gè)重要組成部分影響建設(shè)項(xiàng)目環(huán)境。在當(dāng)前的工程項(xiàng)目，完整的系統(tǒng)國(guó)際級(jí)別風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估尚未確立，由于其影響因素的項(xiàng)目風(fēng)險(xiǎn)很多，模糊性，以及它們是難以完全定量[1]。究其原因，主要是因?yàn)樽裱簢?guó)際工程統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)不充足和大量原始數(shù)據(jù)的不可用。后提出適當(dāng)?shù)姆治龇椒▏?guó)際項(xiàng)目風(fēng)險(xiǎn)管理和綜合評(píng)價(jià),綜合評(píng)價(jià)項(xiàng)目和相關(guān)的數(shù)學(xué)方法風(fēng)險(xiǎn)管理和監(jiān)督結(jié)果的文章具有十分重要的現(xiàn)實(shí)意義[2]。拉爾夫和克萊姆提出了一個(gè)系統(tǒng)的方法來管理風(fēng)險(xiǎn)，和識(shí)別理論框架和實(shí)用的方法，分析和控制不同的風(fēng)險(xiǎn)［3］。M.伊麗莎白，帕特?？氯麪柡捅说肑.雷根研究在快速時(shí)變動(dòng)態(tài)風(fēng)險(xiǎn)管理系統(tǒng)建立了風(fēng)險(xiǎn)度量模型和基于決策分析決策模型框架和人工智能的方法［4,5］。

第五篇：乳制品中抗生素殘留現(xiàn)狀及其檢測(cè)方法的思

乳制品中抗生素殘留現(xiàn)狀及其檢測(cè)方法探究

來源：中國(guó)論文下載中心

[ 08-11-17 10:17:00 ]

作者：馮建成 張容鵠

編輯：cw2112549

摘 要：綜述了乳制品中抗生素殘留現(xiàn)狀和危害，以及各種抗生素殘留的檢測(cè)方法，為加強(qiáng)我國(guó)乳制品中的抗生素監(jiān)測(cè)，解決目前乳品工業(yè)發(fā)展中面臨的難題提供參考。 關(guān)鍵詞：乳制品；抗生素殘留；檢測(cè)方法

乳及乳制品是老少皆宜的營(yíng)養(yǎng)品，在我國(guó)，乳制品及乳制品工業(yè)發(fā)展迅速，同時(shí)畜牧業(yè)也發(fā)展迅猛，β-內(nèi)酰胺類、氨基糖苷類、四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類等抗生素在乳畜飼養(yǎng)業(yè)中廣泛應(yīng)用，造成乳及乳制品中抗生素殘留，給消費(fèi)者健康帶來了潛在威脅，因而提高抗生素殘留的檢測(cè)技術(shù)顯得尤其重要，盡快開發(fā)或引進(jìn)先進(jìn)的抗生素檢測(cè)技術(shù)以解決我國(guó)當(dāng)前乳和乳制品行業(yè)面臨的難題已成為當(dāng)務(wù)之急。

 抗生素殘留現(xiàn)狀

我國(guó)乳制品中抗生素的殘留現(xiàn)狀不容樂觀，2006年的一份對(duì)北京、天津、石家莊5個(gè)零售點(diǎn)的77個(gè)牛奶樣品進(jìn)行β-內(nèi)酰胺酶的殘留檢測(cè)，63.6%的樣品檢測(cè)為陽性。一項(xiàng)對(duì)我國(guó)幾個(gè)大城市如西寧、南寧、廣州、杭州、泉州、北京等城市乳制品質(zhì)量的檢測(cè)調(diào)查結(jié)果顯示，在近八百份乳品采樣中，抗生素殘留超標(biāo)居不合格項(xiàng)目第一位。抗生素殘留的來源及其危害

乳和乳制品中抗生素殘留的來源要追尋到原料生產(chǎn)及其流通過程。首先，使用抗生素防治動(dòng)物疫病。對(duì)患病奶牛用藥不當(dāng)及不遵守停藥期是造成牛奶中抗生素殘留的重要因素。其次，抗生素類飼料添加劑的使用。第三，飼養(yǎng)戶和經(jīng)營(yíng)商為了保鮮，將抗生素人為添加到畜產(chǎn)品中，來抑制微生物的生長(zhǎng)、繁殖，防止牛奶酸敗變質(zhì)，也是造成抗生素殘留超標(biāo)的重要因素。

從乳制品加工的角度來看，原料乳中抗生素殘留物嚴(yán)重干擾發(fā)酵乳制品的生產(chǎn)，抗生素殘留可嚴(yán)重影響干酪、黃油、發(fā)酵乳的起酵和后期風(fēng)味的形成。長(zhǎng)期服用含低劑量抗生素殘留的乳制品，日積月累會(huì)危害人體健康。主要危害表現(xiàn)在：其一，毒性作用，如長(zhǎng)期攝入氨基糖苷類抗生素嚴(yán)重超標(biāo)的乳產(chǎn)品可導(dǎo)致腎毒性和耳毒性。其二，過敏反應(yīng)。其三，病原菌耐藥性增加。其四，破壞人體胃腸道微生物菌群的動(dòng)態(tài)平衡。其五，妨礙我國(guó)畜產(chǎn)品的國(guó)際貿(mào)易。抗生素殘留檢測(cè)方法的研究進(jìn)展

目前抗生素殘留檢測(cè)的方法很多，基本上可以分為四大類型：一是經(jīng)典的微生物檢測(cè)方法；二是現(xiàn)代儀器分析方法；三是生化免疫分析法；四是專一試劑盒法。

3.1 經(jīng)典微生物檢測(cè)法

其測(cè)定原理基于抗生素對(duì)微生物的生理機(jī)能、代謝的抑制作檢測(cè)用，因而與臨床應(yīng)用的要求一致，但其測(cè)定時(shí)間長(zhǎng)且結(jié)果誤差較大。如TTC法、戴爾沃檢測(cè)（Delvotest SP）法、BY法等。

3.1.1 TTC法 

TTC法是國(guó)際上較早通用的標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定法，也是我國(guó)鮮奶中抗生素殘留量檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)（GB4689.27-94）規(guī)定的檢測(cè)法。如果牛奶中含有抗生素，則加入菌種（嗜熱鏈球菌）經(jīng)培育2.5-3h后，加入TTC指示劑（三苯基四氮唑）不發(fā)生還原反應(yīng)，所以樣品呈無色狀態(tài)；如果牛奶中不含抗生素，則樣品呈紅色。TTC法檢測(cè)的各種抗生素靈敏度如下：青霉素為0.004單位、鏈霉素0.5單位、慶大霉素0.4單位、卡那霉素5單位。TTC法主要對(duì)于青霉素類和氯霉素藥物敏感，但對(duì)鏈霉素不太敏感，對(duì)新霉素根本不敏感，并且消毒劑可干擾TTC試驗(yàn)。TTC法檢測(cè)抗生素殘留雖然費(fèi)用較低，但檢測(cè)方法消耗時(shí)間也相對(duì)較長(zhǎng)，因此應(yīng)用受到一定限制。

3.1.2 戴爾沃檢測(cè)（Delvotest SP）法

是由荷蘭其試劑是由荷蘭DSM公司生產(chǎn)并由AOAC認(rèn)證。原理是利用微生物——嗜熱芽胞菌在64℃條件下培養(yǎng)2.5～3h后會(huì)產(chǎn)酸，酸引起指示劑BCP(溴甲酚紫)變?yōu)辄S色；若牛奶樣品中不含抗生素，培養(yǎng)后樣品呈黃色，如樣品中含有抗生素, 嗜熱芽胞菌生長(zhǎng)受到抑制而無法產(chǎn)酸，指示劑將不變色?？蓹z測(cè)到β-內(nèi)酰胺類抗生素在內(nèi)的更多抗生素，如磺胺類、四環(huán)素類等，其中對(duì)青霉素和磺胺類抗生素特別靈敏。Delvotest SP 法操作方便，嚴(yán)格實(shí)用，容易判斷，結(jié)果可靠，費(fèi)用適中等優(yōu)點(diǎn)；但也易出現(xiàn)假陽性，此方法適用于農(nóng)場(chǎng)、企業(yè)、實(shí)驗(yàn)室及政府監(jiān)測(cè)部門。

3.1.3 BY法

BY法，也稱藍(lán)黃檢測(cè)法，是一種廣譜的微生物抑制法，能在較短的時(shí)間里檢測(cè)到乳制品中抗生素的殘留，通過顏色的對(duì)比判斷陽性、陰性和可疑樣品。B?Linage等通過這種方法對(duì)β-內(nèi)酰胺類、大環(huán)內(nèi)酯類、四環(huán)素類等25種抗生素進(jìn)行了檢測(cè)，其殘留的檢測(cè)限與歐盟規(guī)定的檢測(cè)限很接近。此方法耗時(shí)短，操從簡(jiǎn)單，檢測(cè)抗生素種類較多，但誤差較大，容易誤檢。

3.2 現(xiàn)代儀器分析方法

是利用抗生素分子中的基團(tuán)所具有的特殊反應(yīng)或理化特性，借助現(xiàn)代儀器對(duì)抗生素殘留進(jìn)行精確分析的一種方法。如色譜法、熒光法、毛細(xì)管電泳、色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)等。

色譜法有氣相色譜（GS）、高效液相色譜（HPLC）法、反相高效液相色譜法等。檢測(cè)的過程運(yùn)用了色譜理論，通過高靈敏度的檢測(cè)器，分離速度快、效率高和操作自動(dòng)化。一般要經(jīng)過樣品的提取、脫蛋白、離心、層析柱凈化、衍生化等步驟，能檢測(cè)抗生素的具體含量。蔡穎用反相HPLC法測(cè)定乳制品中土霉素、四環(huán)素和金霉素殘留量。檢測(cè)限為：土霉素為15.0μg/kg、四環(huán)素為20.0μg/kg、金霉素為18.0μg/kg。Jian Wang等運(yùn)用超高效液相色譜和飛行質(zhì)譜聯(lián)用(UPLC/Q-Tof MS)和LC/MS/MS測(cè)定牛奶中大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的殘留量，其檢測(cè)限為：紅霉素40ug/kg，泰樂菌素50ug/kg，替米考星50ug/kg，能滿足各國(guó)對(duì)這六種β-內(nèi)酰胺類抗生素的最低檢出要求。

儀器分析方法分離速度快、效率高和自動(dòng)化程度高，能檢測(cè)抗生素的具體含量，敏感性較高，結(jié)果準(zhǔn)確，但待檢樣品需經(jīng)一系列的預(yù)處理，繁瑣費(fèi)時(shí)，還必須有相應(yīng)的價(jià)格昂貴的儀器設(shè)備。一般在大型實(shí)驗(yàn)室使用，適合于精確測(cè)定。

3.3 生化免疫法

目前應(yīng)用的生化免疫分析技術(shù)，是以抗原與抗體的特異性、可逆性結(jié)合反應(yīng)為基礎(chǔ)的分析技術(shù)。其基本原理是抗原抗體的競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合?？煞譃槊嘎?lián)免疫測(cè)定法（ELISA）、熒光免疫測(cè)定法(FIA)、免疫分析技術(shù)與常規(guī)理化分析技術(shù)聯(lián)用的方法等。

酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)：以待測(cè)抗原（或抗體）與酶標(biāo)抗體（或抗原）的特異結(jié)合反應(yīng)為基礎(chǔ)，通過酶活力測(cè)定來確定抗原（或抗體）含量。因?yàn)榻Y(jié)合了免疫反應(yīng)和酶催化反應(yīng)，所以是一種特異而又敏感的技術(shù)。YONG JIN運(yùn)用酶聯(lián)免疫法(ELISA)對(duì)慶大霉素的檢測(cè)限度為0.5 ng/mL。Bucknal等運(yùn)用免疫檢測(cè)法測(cè)定了在牛奶中幾種喹諾酮藥物的殘留量。酶聯(lián)免疫法測(cè)定，其敏感性和特異性好，檢測(cè)的靈敏度以普遍使用的β-內(nèi)酰胺類計(jì)：青霉素為5ppb，阿莫西林為10ppb，氨芐西林為10ppb，頭孢西林為8ppb。其檢測(cè)結(jié)果快速準(zhǔn)確，9分鐘內(nèi)即可檢測(cè)出牛奶中β-內(nèi)酰胺類、四環(huán)素類、磺胺類等抗生素的殘留含量，可監(jiān)控牧場(chǎng)用藥的情況。

熒光免疫測(cè)定(FIA)法原理是應(yīng)用一對(duì)單克隆抗體的夾心法。底物用磷酸-4-甲基傘形酮，檢測(cè)產(chǎn)物發(fā)出的熒光，熒光強(qiáng)度與抗原抗體復(fù)合物(Mb)濃度呈正比，可在8min內(nèi)得出結(jié)果。結(jié)果以Mb每小時(shí)釋放的速率表示(△Mb)表示。Huth 已經(jīng)用熒光免疫法測(cè)定了牛奶中的6種β-內(nèi)酰胺類抗生素，得到它們的最低檢測(cè)限為：青霉素G3.2μg/kg、氨芐青霉素2.9μg/kg、羥氨芐青霉素3.6μg/kg、頭孢匹林16.3μg/kg；該法重復(fù)性好，具有快速、敏感、準(zhǔn)確的特點(diǎn)。

生化免疫法測(cè)定抗生素殘留靈敏度極高，達(dá)到ng級(jí)水平；檢測(cè)快速、專一性強(qiáng)。由于此法的高度專一性，每檢測(cè)一種抗生素就要制備或購買相應(yīng)的抗原或抗體，導(dǎo)致檢測(cè)費(fèi)用較高。因此生化免疫檢測(cè)法不可能取代色譜或光譜等常規(guī)分析方法，只能作為其重要的補(bǔ)充。

 專一試劑盒法

ECLIPSE試劑盒的原理是含有芽孢桿菌的瓊脂培養(yǎng)基和pH指示劑，當(dāng)在(65±1)℃下培養(yǎng)時(shí)，孢子發(fā)育生長(zhǎng)，降低培養(yǎng)基pH值，在pH指示劑的作用下，藍(lán)(紫)色變?yōu)榫G-黃色。生鮮牛乳中的抗生素殘留使微生物生長(zhǎng)和酸的產(chǎn)生受到抑制，由于沒有酸生成，顏色將不會(huì)改變。

ECLIPSE試劑盒有ECLIPSE50和ECLIPSE100兩種試劑盒。ECLIPSE50的精確度雖然沒有ECLIPSE100的高，但其檢測(cè)限都符合歐盟標(biāo)準(zhǔn)，彌補(bǔ)了快速方法只能單一檢測(cè)某類抗生素的缺陷，同時(shí)提高了檢測(cè)的廣譜性和高靈敏度，同時(shí)也可以同歐盟等國(guó)家的先進(jìn)檢測(cè)技術(shù)和標(biāo)準(zhǔn)接軌我國(guó)的牛奶事業(yè)提供非常有效和準(zhǔn)確的抗生素殘留檢測(cè)方法。且操作簡(jiǎn)單，靈活性強(qiáng)，無需對(duì)樣品進(jìn)行任何的處理，只需嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的方法進(jìn)行操作，就能獲得理想的效果，且不易出現(xiàn)假陽性現(xiàn)象，被檢樣品的需要量少，且費(fèi)用低，越來越被廣泛應(yīng)用。

乳制品抗生素殘留的檢測(cè)方法很多，有的操作煩瑣,有的實(shí)驗(yàn)條件要求高，有的檢驗(yàn)時(shí)間太長(zhǎng)；這些不僅會(huì)給乳制品生產(chǎn)企業(yè)造成經(jīng)濟(jì)上和時(shí)間上的損失，而且檢測(cè)結(jié)果常常會(huì)被原輔材料和人為操作等因素所影響。牛奶中抗生素殘留是涉及人類健康的公共衛(wèi)生問題，開發(fā)出越來越準(zhǔn)確、快速，誤差越來越小的檢測(cè)方法，方便地檢出乳和乳制品中抗生素殘留，凈化消費(fèi)環(huán)璄，就能為居民的身心健康提供保障，促進(jìn)中國(guó)乳業(yè)健康發(fā)展。

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