第一篇：河北科技大學(xué)HPLC法進(jìn)行地塞米松磷酸鈉中特殊雜質(zhì)的檢查及含量測(cè)定

實(shí)驗(yàn)五HPLC法進(jìn)行地塞米松磷酸鈉中特殊雜質(zhì)的檢查及含量測(cè)定

一．目的要求

1.掌握實(shí)驗(yàn)中藥物特殊雜質(zhì)的來(lái)源和檢察原理。

2.掌握高效液相色譜法用于特殊雜質(zhì)檢查及含量測(cè)定的方法。

二、實(shí)驗(yàn)方法

有關(guān)物質(zhì)取本品，加流動(dòng)相溶解并稀釋制成每1ml中約含1mg的溶液，作為供試品溶液；取地塞米松對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇溶解并稀釋成每1ml中約含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；精密量取供試品溶液與對(duì)照品溶液各1ml，置100ml量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照溶液。照含量測(cè)定項(xiàng)下的色譜條件，取對(duì)照溶液20μl注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度，使地塞米松磷酸鈉色譜峰的峰高為滿量程的15%～20%，再精密量取供試品溶液與對(duì)照溶液各20μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時(shí)間的2倍。供試品溶液色譜圖中如有與地塞米松保留時(shí)間一致的峰，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，含量不得超過(guò)0.5%；其他單個(gè)雜質(zhì)峰面積不得大于對(duì)照溶液中地塞米松磷酸鈉峰面積的1/2，其他雜質(zhì)峰面積的和不得大于對(duì)照溶液中地塞米松磷酸鈉峰面積的2倍。

【含量測(cè)定】照高效液相色譜法（附錄V D）測(cè)定。

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以三乙胺溶液（取三乙胺7.5ml，加水至1000ml,用磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.0±0.05）－甲醇－乙腈（55：40：5）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為242nm.理論板數(shù)按地塞米松磷酸鈉峰計(jì)算一般為7000，地塞米松磷酸鈉與地塞米松的分離度應(yīng)大于4.4。

測(cè)定法 取本品適量，精密稱定，置50ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取適量，用流動(dòng)相定量稀釋制成每1ml中含40μg的溶液，精密量取20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取地塞米松磷酸鈉對(duì)照品適量，精密稱定，同法測(cè)定。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。

四、注意事項(xiàng)：

五、思考題：

1.何謂反相高效液相色譜法？其常用的固定相和流動(dòng)相有哪些？如何選擇？

2.液相色譜流動(dòng)相、樣品前處理注意事項(xiàng)有哪些？