第一篇：MaECM培養(yǎng)基-課題組選擇在BM培養(yǎng)基加入10 μg-L雌激素和50 μg-L生長激素做后續(xù)的實(shí)驗(yàn)

MaECM培養(yǎng)基-課題組選擇在BM培養(yǎng)基加入10 μg/L雌激素和50 μg/L生長激素做后續(xù)的實(shí)驗(yàn)

MaECM培養(yǎng)基-課題組選擇在BM培養(yǎng)基加入10 μg/L雌激素和50 μg/L生長激素做后續(xù)的實(shí)驗(yàn)，命名為

MaECM(mammary epithelial cell medium)培養(yǎng)基。該培養(yǎng)基能夠促進(jìn)乳腺上皮細(xì)胞生長和阻止成纖維細(xì)胞的增殖，是適合篩選乳腺干細(xì)胞的培養(yǎng)基。

學(xué)術(shù)術(shù)語來源---

乳腺干細(xì)胞培養(yǎng)基的建立及有效性驗(yàn)證

文章亮點(diǎn)：文章的創(chuàng)新點(diǎn)在于篩選出MaECM培養(yǎng)基, 能夠促進(jìn)乳腺上皮細(xì)胞生長，阻止成纖維細(xì)胞增殖，是適合篩選乳腺干細(xì)胞的培養(yǎng)基。在MaECM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上，證明了Sca-1+乳腺細(xì)胞具有干細(xì)胞的潛能。目前進(jìn)行的乳腺干細(xì)胞研究，每次實(shí)驗(yàn)需要消耗20只鼠。課題在乳腺干細(xì)胞研究中僅用4只鼠就可以滿足實(shí)驗(yàn)要求，減少了鼠的用量。一般培養(yǎng)的鼠乳腺細(xì)胞中含有大量與有些乳腺干細(xì)胞標(biāo)記相同的成纖維細(xì)胞，難以將它們區(qū)分。大多實(shí)驗(yàn)室是通過貼壁時(shí)間不同去除成纖維細(xì)胞，但純度難以保證。作者研發(fā)的鼠乳腺干細(xì)胞培養(yǎng)基可以有效抑制成纖維細(xì)胞的生長，提高制備乳腺干細(xì)胞的純度。

關(guān)鍵詞：

干細(xì)胞；培養(yǎng)；乳腺干細(xì)胞；成纖維細(xì)胞；Sca-1；乳腺干細(xì)胞培養(yǎng)基；國家重大科學(xué)研究計(jì)劃(973)資助項(xiàng)目；863項(xiàng)目

主題詞：

干細(xì)胞；乳腺腫瘤；成纖維細(xì)胞；培養(yǎng)基；熒光免疫測定

摘要

背景：干細(xì)胞培養(yǎng)基，尤其是乳腺干細(xì)胞培養(yǎng)基現(xiàn)階段尚無有效的制備方法。

目的：利用Sca-1+乳腺細(xì)胞驗(yàn)證自制乳腺干細(xì)胞培養(yǎng)基的有效性。

方法：用BM培養(yǎng)基培養(yǎng)乳腺器官樣小體，6 d后以免疫熒光方法監(jiān)測成纖維細(xì)胞Sca-1和vimentin的表達(dá)。篩選出MaECM培養(yǎng)基，培養(yǎng)乳腺細(xì)胞6 d后，免疫磁珠篩選Sca-1+和Sca-1-細(xì)胞群，流式細(xì)胞術(shù)分析Sca-1陽性細(xì)胞的純度，1×104 Sca-1+或Sca-1-細(xì)胞種植在4只鼠雙側(cè)乳腺脂肪墊上，6-8周后取出乳腺脂肪墊，以卡紅整體染色和蘇木精-伊紅染色分析長出乳腺的結(jié)構(gòu)數(shù)量。

結(jié)果與結(jié)論：乳腺器官樣小體用BM培養(yǎng)基培養(yǎng)6 d后，檢測到大量Sca-1和vimentin陽性的成纖維細(xì)胞，說明BM培養(yǎng)基不適合分離Sca-1+乳腺干細(xì)胞。篩選出的MaECM培養(yǎng)基能夠抑制成纖維的生長。磁珠篩選后，流式細(xì)胞術(shù)檢測Sca-1+細(xì)胞在Sca-1+和Sca-1-細(xì)胞群的純度分別是92%和5%。移植實(shí)驗(yàn)顯示在8個(gè)種植Sca-1+細(xì)胞的脂肪墊生長出6個(gè)乳腺結(jié)構(gòu)；而在8個(gè)種植Sca-1-細(xì)胞的脂肪墊中除1只鼠死亡，其余脂肪墊中均未長出乳腺結(jié)構(gòu)。提示MaECM培養(yǎng)基適用于培養(yǎng)鼠乳腺干細(xì)胞。

中國組織工程研究雜志出版內(nèi)容重點(diǎn)：干細(xì)胞；骨髓干細(xì)胞；造血干細(xì)胞；脂肪干細(xì)胞；腫瘤干細(xì)胞；胚胎干細(xì)胞；臍帶臍血干細(xì)胞；干細(xì)胞誘導(dǎo)；干細(xì)胞分化；組織工程