第一篇：從法醫(yī)相關(guān)性昆蟲體內(nèi)提取人類DNA的研究進(jìn)展

【摘要】本文從嗜血性昆蟲、嗜尸性昆蟲、嗜骨性昆蟲及實(shí)驗(yàn)技術(shù)等多角度闡述了從法醫(yī)相關(guān)性昆蟲嗉囔中提取人類dna的可

行性及國際研究和應(yīng)用進(jìn)展。

【關(guān)鍵詞】法醫(yī)昆蟲學(xué)；嗉囔；個(gè)體識別；dna

【中圖分類號】d919．

1【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】b

【文章編號】1007—9297(2005)04—0308～0

4隨

著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，dna在刑事案件及

民事案件中發(fā)揮了巨大的作用。對于死亡重罪中的個(gè)

體識別及將罪犯與現(xiàn)場的關(guān)聯(lián)方面．dna技術(shù)屢建奇

功。而在親子鑒定，打擊拐賣人口方面，dna技術(shù)也展

現(xiàn)了其非凡的魅力。目前較常見有從現(xiàn)場血痕、毛發(fā)、牙齒、香煙過濾嘴及搔抓當(dāng)事人時(shí)指甲縫中的殘留物

中提取擴(kuò)增dna。同時(shí)，作為新興學(xué)科，法醫(yī)昆蟲學(xué)在人類dna的提取擴(kuò)增中逐漸得以應(yīng)用。

法醫(yī)昆蟲學(xué)是介于法醫(yī)學(xué)和昆蟲學(xué)的交叉學(xué)科，主要用于刑事案件中被害人死亡時(shí)間的推斷(pmi)。

【作者簡介】萬香波(1980-)~j，河南西峽人，中山大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院法醫(yī)病理研究生。tel：+86—20-33080271，e-mail：wan1712@eyou．com

[通信作者】王江峰，法醫(yī)病理博士后，副教授；研究方向：法醫(yī)昆蟲學(xué)。

[基金項(xiàng)目】國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目“基于嘈尸性昆蟲的死亡時(shí)間推斷”(基金編號：30100216)；廣東省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(基金編號：001386)

法律與醫(yī)學(xué)雜志2005年第12卷(第4期)

目前法醫(yī)昆蟲學(xué)方法已被認(rèn)為是腐敗尸體死亡時(shí)間

推斷最有效的方法。除此之外，法醫(yī)昆蟲學(xué)亦可用于

死亡地點(diǎn)、死者中毒情況甚至死者身份的判別。日常

臨案工作常見的為嗜尸性、嗜血性昆蟲。由于其在現(xiàn)

場取食尸體組織，叮吸當(dāng)事人的血液，因而擴(kuò)增其胃

腸道(即嗉囔)中未消化的人的dna、線粒體dna，則

可望成為謀殺、強(qiáng)奸等案件以及用于死亡時(shí)間推斷的昆蟲是否與被害人尸體相關(guān)中個(gè)體識別的直接證據(jù)。

嗉囔作為昆蟲的食物儲存器官而非消化器官。故而沒

有蛋白水解酶的分泌。雖然昆蟲在吞噬食物時(shí)其唾液

中有少量蛋白酶，但這種預(yù)消化對宿主dna的降解

很少。故而對嗉囔內(nèi)容物中的宿主dna進(jìn)行提取、擴(kuò)

增則成為個(gè)人識別的理想底物。

一、法醫(yī)相關(guān)性昆蟲

(一)嗜血性昆蟲

臨案工作中常見的嗜血性昆蟲為虱和蚊。由于其

常常從一宿主轉(zhuǎn)移至另一宿主，因而使之成為強(qiáng)奸、謀殺等案件中當(dāng)事人曾在案發(fā)現(xiàn)場的有力證據(jù)。

法醫(yī)臨案中常見的蚊為按蚊(diptera：culicidae)，最

初常用免疫學(xué)方法通過對血型的檢驗(yàn)進(jìn)行個(gè)體識別的粗篩以及確定被蚊吸食的脊椎動物的種系。[1,21隨后的研究發(fā)現(xiàn)，用pcr方法從按蚊(diptera：culicidae)的嗉囔(blood mea1)中擴(kuò)增宿主dna，其吸食血液后的消化時(shí)間在0，8，16，24，32h時(shí)與宿主dna的成功擴(kuò)

增率在邏輯回歸曲線上呈明顯的負(fù)相關(guān)，且宿主dna

擴(kuò)增的成功率在吸食后12—24 h時(shí)下降得最快(p=

0．001)。但通過對擴(kuò)增的tc一

11、vwa兩段短串聯(lián)重

復(fù)序列(str)的觀察發(fā)現(xiàn)，在上述任一時(shí)點(diǎn)嗉囔內(nèi)血

量的多少對兩位點(diǎn)的成功擴(kuò)增影響不大，且在同一時(shí)

點(diǎn)，兩位點(diǎn)擴(kuò)增的成功率幾乎相等(p=0．85)。此外，周圍環(huán)境對蚊的消化速率影響較大，32cc時(shí)的消化速率

為22ci=時(shí)的兩倍。通過在實(shí)驗(yàn)室溫度為27℃、吸食血

液后最長32 h時(shí)仍可擴(kuò)增出宿主dna的事實(shí)，可知

在溫度升高或降低時(shí)其成功擴(kuò)增的極限時(shí)間亦隨之

縮短或延長。[31由此可見，由于分子生物學(xué)中pcr技

術(shù)的成熟，使微量dna的成功擴(kuò)增成為可能。因而從

蚊的嗉囔中提取擴(kuò)增宿主dna時(shí)，影響擴(kuò)增成功與否的主要因素是吸食后的消化時(shí)間而非嗉囔內(nèi)血量的多少。

寄生于人身上的虱分為體虱與頭虱。replogle等網(wǎng)

最早于1994年從17只陰虱的排泄物中通過amp—

flp技術(shù)獲得了人類特異性基因座d1s180及

humtho1，其與陰虱所寄生的宿主相一致，但是re—

plogle并未擴(kuò)增出完整的dna。lord等[51在1999年

成功地從陰虱pthirus pubis(l)中分離、擴(kuò)增出宿主的線粒體dna(mtdna)。人類線粒體dna(mtdna)位于

核染色體外，具有組織特異性，為共價(jià)閉合的環(huán)狀雙鏈

dna分子。沒有重組、倒置、易位等突變現(xiàn)