第一篇：實(shí)驗(yàn)37 磺基水楊酸法測鐵的含量

實(shí)驗(yàn)37磺基水楊酸法測鐵的含量

實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?）鞏固吸光光度法的基本理論，掌握吸收曲線及標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制及應(yīng)用。

（2）了解721型分光光度計(jì)的工作原理及使用方法。

一、提問

（1）溶液酸度對磺基水楊酸鐵配合物的吸光度有何影響？

（2）本實(shí)驗(yàn)中哪些試劑應(yīng)準(zhǔn)確加入？哪些不必嚴(yán)格準(zhǔn)確加入？為什么？

（3）使用蒸餾水和試劑空白作參比溶液有何區(qū)別？工作曲線是否都通過原點(diǎn)？

二、講解

1、原理：Fe3+離子與磺基水楊酸能形成有色配合物，在pH＝8～11的氨性溶液中該配合物呈黃色，且其濃度服從朗伯－比爾定律。可以固定溶液濃度和比色皿厚度，通過調(diào)節(jié)入射光的波長測定不同波長時的吸光度并繪制吸收曲線，找出最大吸收波長；固定波長為最大吸收波長，測定一系列標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度，作出工作曲線。根據(jù)相同條件下未知液的吸光度，可以在工作曲線上求出未知液的濃度。

（1）Fe3+離子與磺基水楊酸能形成逐級配合物，在不同酸度條件下，可能生成1：

1、1：2和1：3三種顏色不同的配合物，故測定時應(yīng)控制溶液酸度。

（2）配制標(biāo)準(zhǔn)溶液時鐵離子必須準(zhǔn)確加入，過量的磺基水楊酸和氨水對溶液的吸光度影響不是很大，不必嚴(yán)格準(zhǔn)確加入。

（3）試劑空白作參比溶液可以消除溶液中其它有色物質(zhì)的影響，所得工作曲線通過原點(diǎn)。蒸餾水不能消除溶液中其它有色物質(zhì)的影響，所得工作曲線不一定通過原點(diǎn)。

2、操作注意

（1）為避免引起光電池疲勞現(xiàn)象，不測定時應(yīng)打開暗室蓋，特別應(yīng)避免強(qiáng)光照射。

（2）比色皿盛取溶液時只需裝至比色皿的2/3處，過滿易濺出腐蝕儀器。

（3）比色皿的光學(xué)表面一定要注意保護(hù)。

（4）操作儀器要小心，不要用勁擰動，以免損壞機(jī)件。

（5）讀數(shù)時眼睛應(yīng)垂直于表盤，使平面鏡里外的指針重合，此時讀數(shù)最準(zhǔn)確。

（6）每改變一個波長，就得重新調(diào)0和100％。

三、實(shí)驗(yàn)要求

（1）熟悉分光光度計(jì)的構(gòu)造，并掌握其使用方法。

（2）繪制吸收曲線，找出最大吸收波長。

（3）繪制工作曲線，并利用工作曲線求出未知液的濃度。

第二篇：《目測法測透射光柵常數(shù)》實(shí)驗(yàn)提要

實(shí)驗(yàn)15《目測法測透射光柵常數(shù)》實(shí)驗(yàn)提要

實(shí)驗(yàn)課題及任務(wù)

《目測法測透射光柵常數(shù)》實(shí)驗(yàn)課題任務(wù)是，給定一個光柵和光源(如汞燈、鈉燈或激光器等)，根據(jù)光源的已知光譜，在沒有分光計(jì)和其它測量儀器的情況下，僅利用米尺和自制實(shí)驗(yàn)器材，結(jié)合直接目視法，測量透射光柵的光柵常數(shù)。該實(shí)驗(yàn)還可以已知光柵常數(shù)測量未知譜線的波長。

學(xué)生根據(jù)自己所學(xué)知識，設(shè)計(jì)出《目測法測透射光柵常數(shù)》的整體方案，內(nèi)容包括：(寫出實(shí)驗(yàn)原理和理論計(jì)算公式；選擇測量儀器；研究測量方法；寫出實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和步驟。)然后根據(jù)自己設(shè)計(jì)的方案，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作，記錄數(shù)據(jù)，做好數(shù)據(jù)處理，得出實(shí)驗(yàn)結(jié)果，寫出完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告，也可按書寫科學(xué)論文的格式書寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告。

設(shè)計(jì)要求

⑴ 通過在實(shí)驗(yàn)室用目測的方式觀察光柵的衍射現(xiàn)象，繪制出光路圖，通過對光路圖的分析，找出光柵方程與光路圖中的那些物理量(即待測量的物理量)有關(guān)，根據(jù)光柵方程和待測物理量的關(guān)系推導(dǎo)出計(jì)算公式，寫出該實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)原理。(注：這一步是本實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵所在，得先到實(shí)驗(yàn)室觀察實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象，通過實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象的觀察，繪制出光路圖，分析論證，找出規(guī)律，才能寫出實(shí)驗(yàn)原理。)

⑵ 選擇實(shí)驗(yàn)測量儀器，僅限于光柵、米尺(10m/0.005m或3m/0.001m)、光源(汞燈、鈉燈或激光器)的選擇，可以自制輔助器件。

⑶ 設(shè)計(jì)出實(shí)驗(yàn)方法和實(shí)驗(yàn)步驟，要具有可操作性。

⑷ 測量時那些物理量可以測量一次，那些物理量必須得多次測量，說明原理。⑸ 實(shí)驗(yàn)結(jié)果用標(biāo)準(zhǔn)形式表達(dá)，即用不確定度來表征測量結(jié)果的可信賴程度。實(shí)驗(yàn)儀器的選擇及提示

⑴ 光柵：實(shí)驗(yàn)室給定，光柵參數(shù)為：300/mm

⑵ 米尺：3m/0.001m或10m/0.005m任選，⑶ 光源：鈉燈、激光器.⑷ 可以自制實(shí)驗(yàn)器材，如帶刻度的條型光屏，也可以借助現(xiàn)有實(shí)驗(yàn)室的條件。實(shí)驗(yàn)所用公式及物理量符號提示

⑴ 光柵方程:d?sin??k?(k=0、?

1、?

2、?

3、……)

式中d?a?b(其中a為光柵縫寬，b為相鄰縫間不透明部分的寬度)為相鄰狹縫之間的距離，稱為光柵常數(shù)，?為光波波長，k為衍射光譜線的級次。

⑵ 用x表示譜線到0級譜線的距離，用y表示光柵到0級譜線的垂直距離。提交整體設(shè)計(jì)方案時間

學(xué)生自選題后2~3周內(nèi)完成實(shí)驗(yàn)整體設(shè)計(jì)方案并提交。提交整體設(shè)計(jì)方案，要求用紙質(zhì)版供教師修改。

思考題

⑴ 光柵與光源之間的距離多遠(yuǎn)比較合適？

⑵ 眼睛與光柵的距離對測量有沒有影響？

⑶ 光屏和光源是否一定要在一個平面內(nèi)？

⑷ 光柵與光屏的距離測量，該實(shí)驗(yàn)應(yīng)采用單次測量還是多次測量？單次測量能否滿足測量精度的要求？

參考文獻(xiàn)

參閱各實(shí)驗(yàn)書籍中的夫瑯和菲衍射原理及光柵衍射原理。幾何光學(xué)，人眼睛的光學(xué)原理。

第三篇：04實(shí)驗(yàn)四鄰二氮菲分光光度法測定鐵的含量-教案

實(shí)驗(yàn)四鄰二氮菲分光光度法測定鐵的含量教案 課程名稱：分析化學(xué)實(shí)驗(yàn)B 教學(xué)內(nèi)容：鄰二氮菲分光光度法測定鐵的含量 實(shí)驗(yàn)類型：驗(yàn)證

教學(xué)對象：化工、環(huán)境工程、藥學(xué)、生物科學(xué)、應(yīng)用化學(xué)、醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)、制藥、復(fù)合材料、生物工程、生物技術(shù)

授課地點(diǎn)：中南大學(xué)南校區(qū)化學(xué)實(shí)驗(yàn)樓401 授課學(xué)時：4學(xué)時

一、教學(xué)目的與要求

1、練習(xí)鞏固吸量管、比色管（容量瓶）、比色皿的正確使用；

2、了解分光光度法的基本原理，學(xué)會吸收曲線測繪及選擇測定波長和標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制；

3、掌握用鄰二氮菲分光光度法測定微量鐵的原理、方法和計(jì)算；

4、學(xué)習(xí)掌握722S型分光光度計(jì)的正確使用，了解其工作原理；

5、掌握利用標(biāo)準(zhǔn)曲線法進(jìn)行定量分析的操作與數(shù)據(jù)處理方法。

二、知識點(diǎn) 分光光度法、朗伯—比耳定律、配位反應(yīng)、顯色反應(yīng)、標(biāo)準(zhǔn)溶液、吸收曲線、最大吸收波長、標(biāo)準(zhǔn)曲線、吸量管、比色管、比色皿、實(shí)驗(yàn)報(bào)告的撰寫（數(shù)據(jù)處理三線表表格化）、有效數(shù)字

三、技能點(diǎn)

玻璃器皿的洗滌、吸量管的使用、標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的配制、比色皿的使用、分光光度計(jì)的使用

四、教學(xué)重點(diǎn)及難點(diǎn)

重點(diǎn)：鄰二氮菲分光光度法測定微量鐵的基本原理和操作方法 難點(diǎn)：722s型分光度計(jì)的操作

五、教學(xué)方法

任務(wù)驅(qū)動法、分組討論法、閱讀指導(dǎo)法、現(xiàn)場講解指導(dǎo)等

六、復(fù)習(xí)引入

1、復(fù)習(xí)分光光度法有關(guān)知識，提問學(xué)生:(1)分光光度法測定對象是什么？(有色溶液物質(zhì))(2)在用分光光度法測定微量鐵中，以什么試劑作顯色劑？(鄰二氮菲)(3)測定波長如何選擇？(吸收曲線)[引入] 分光光度法的應(yīng)用：鄰二氮菲分光光度法測定微量鐵-標(biāo)準(zhǔn)曲線法

[引言] 鐵是最重要的基本結(jié)構(gòu)材料，鐵合金用途很廣，國防和戰(zhàn)爭更是鋼鐵的較量，鋼鐵的年產(chǎn)量代表一個國家的現(xiàn)代化水平，因而，對各種樣品中所含的鐵進(jìn)行測定，有助于對產(chǎn)品的生產(chǎn)進(jìn)行監(jiān)督。測定鐵的方法很多，選擇不同方法主要是看不同樣品中鐵的含量，含量高的含鐵試樣采用滴定分析法測定，含量低的含鐵試樣采用儀器分析方法測定。常用的儀器分析方法有分光光度法、原子吸收分光光度法、原子發(fā)射光譜法等，其中鄰二氮菲分光光度法測定微量鐵的含量是國際國內(nèi)規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)分析方法，因而生產(chǎn)和實(shí)驗(yàn)室中廣泛采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法鄰二氮菲分光光度法測定微量鐵的方法測定樣品中微量鐵的含量。

[新授]課題：鄰二氮菲分光光度法測定鐵的含量-標(biāo)準(zhǔn)曲線法

[提出任務(wù)]教師提出本課題的學(xué)習(xí)任務(wù)：

1、鄰二氮菲分光光度法測定鐵的基本原理是什么？

2、鄰二氮菲吸光光度法測定微量鐵的實(shí)驗(yàn)中，吸收曲線與標(biāo)準(zhǔn)曲線有何區(qū)別?

3、鄰二氮菲分光光度法測定鐵的操作方法。[任務(wù)探索]

1、鄰二氮菲分光光度法測定鐵的基本原理是什么？ 根據(jù)有關(guān)學(xué)習(xí)資料，思考下列問題：

(1)鄰二氮菲分光光度法測定鐵中的鐵主要是由什么形式存在？如何保障溶液中的鐵離子是以鄰二氮菲絡(luò)合鐵的價態(tài)形式存在？

(2)鄰二氮菲絡(luò)合鐵時，溶液pH值最好控制在多少？用什么緩沖溶液調(diào)節(jié)溶液pH？(3)鄰二氮菲分光光度法測定鐵時，哪些離子有干擾？如何消除干擾？ [歸納]引導(dǎo)學(xué)生歸納總結(jié)出鄰二氮菲分光光度法測定鐵的基本原理

測定溶液中的微量鐵，一般采用鄰二氮菲分光光度法。即在pH=3～9的溶液中，F(xiàn)e2+與鄰二氮菲(phen)生成穩(wěn)定的桔紅色配合物Fe(phen)32+，反應(yīng)如下： 2Fe3+ + 2NH2OH·HC1＝2Fe2+ +N2↑+2H2O+4H++2C1－

根據(jù)朗伯—比耳定律：A=εbc，當(dāng)入射光波長λ及光程b一定時，在一定濃度范圍內(nèi)，有色物質(zhì)的吸光度A與該物質(zhì)的濃度c成正比。采用標(biāo)準(zhǔn)曲線分析方法，測定被測物質(zhì)中微量鐵的含量。[學(xué)生回答](1)鄰二氮菲分光光度法測定鐵中的鐵主要是由什么價態(tài)形式存在？如何保障溶液中的鐵離子是以鄰二氮菲絡(luò)合鐵的價態(tài)形式存在？

鄰二氮菲分光光度法測定鐵中的鐵主要是以Fe2+離子形式存在的。通常在酸性條件下，加入鹽酸羥胺或抗壞血酸來保障溶液中的鐵離子是Fe2+離子形式存在。

(2)鄰二氮菲絡(luò)合鐵時，溶液pH值最好控制在多少？用什么緩沖溶液調(diào)節(jié)溶液pH？ [講解] 溶液pH值最好控制在5左右。用HAc-NaAc緩沖溶液調(diào)節(jié)溶液pH值。(3)鄰二氮菲分光光度法測定鐵時，哪些離子有干擾？如何消除干擾？

[講解] 產(chǎn)生干擾的離子較多，根據(jù)干擾的特性不同，選用適當(dāng)?shù)姆椒ㄟM(jìn)行掩蔽或分離而消除干擾。樣品中若含三價鐵離子、鈷、鎳、銅等共存離子，會干擾Fe2+的測定，可以加入鹽酸羥胺、KCN等掩蔽消除干擾。

2、鄰二氮菲吸光光度法測定微量鐵的實(shí)驗(yàn)中，吸收曲線與標(biāo)準(zhǔn)曲線有何區(qū)別? [講解] 吸收曲線和標(biāo)準(zhǔn)曲線是兩個完全不同用途的曲線，吸收曲線一般是指做全波段掃描時候的信號曲線，為吸光度-波長曲線，用于確定測定樣品所用的最佳波長;標(biāo)準(zhǔn)曲線一般是在定波長測定時，用不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)樣品作為不同的樣品點(diǎn)，測定繪制而成的吸光度-濃度曲線，根據(jù)樣品測得的吸光度值，可從曲線上查找或計(jì)算出樣品的濃度。

3、鄰二氮菲分光光度法測定鐵的操作方法。[閱讀] 指導(dǎo)學(xué)生閱讀實(shí)驗(yàn)報(bào)告中的實(shí)驗(yàn)步驟。[討論] 四個學(xué)生一組，歸納測定操作要點(diǎn)。

[提問] 學(xué)生代表小組發(fā)言：鄰二氮菲分光光度法測定鐵的測定步驟(1)系列標(biāo)準(zhǔn)溶液及分析試液的配制 取6只25mL比色管，用5ml吸量管分別加入鐵標(biāo)準(zhǔn)工作溶液0.00、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00mL，另取3只25mL比色管，分別加入含鐵分析試液5.00mL，然后加入1mL鹽酸羥胺，2.00mL鄰二氮菲，5mLNaAc溶液，每加入一種試劑都應(yīng)混勻。用去離子水定容至刻度，充分搖勻，放置10min，待測。(2)722s型分光度計(jì)操作步驟(a)開機(jī)

(b)定波長入=510nm(c)打開蓋子調(diào)零T=0。

(d)關(guān)上蓋子，調(diào)滿刻度至T=100(A=0)。

(e)參比溶液比色皿放入其中，均合T=100調(diào)滿(A=0)。

(f)第一格不動，二，三，四格換上標(biāo)液（共計(jì)六個點(diǎn)）調(diào)換標(biāo)液時先用蒸餾水清洗后，再用待測液（標(biāo)液）清洗，再測其分光度(3)吸收曲線（獲得最佳工作波長）

選用1cm比色皿，以試劑空白（1號）為參比溶液，取4號比色管試液，在440～560nm波長范圍內(nèi)，每隔10nm測一次吸光度，其中500～520nm之間，每隔5nm測定一次吸光度(每改變一次波長，都要在參比溶液下調(diào)整T=0、T=100、A=0)。以所得吸光度A為縱坐標(biāo)，以相應(yīng)波長λ為橫坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪制A與λ的吸收曲線。從吸收曲線上選擇最大吸收波長λmax作為測定波長。

(4)標(biāo)準(zhǔn)曲線（獲得線性范圍）及測定分析樣品的吸光度A 用1cm比色皿，以試劑空白（1號）為參比溶液，在選定波長下，測定各溶液的吸光度。在坐標(biāo)紙上，以鐵含量（濃度單位是××μg/25ml）為橫坐標(biāo)，吸光度A為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。依據(jù)試液的A值，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上即可查得其濃度，計(jì)算出原含鐵分析試液中含鐵含量(以mg·L-1表示)。(按下式計(jì)算)ρFe=cx/5(5)數(shù)據(jù)記錄與處理及結(jié)論(a)吸收曲線的繪制

表1 不同波長下的吸光度 波長/nm 430 450 470 490 500 505 510 515 520 530 550 570 590

吸光度A

以吸光度A為縱坐標(biāo)，以相應(yīng)波長λ為橫坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪制吸收曲線。(b)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制與鐵含量的測定 表2 不同濃度長下的吸光度 比色管號

標(biāo)準(zhǔn)溶液

未知液 2 3 4 5 6 7 8 9

移取含鐵液的體積/ml 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 5.0 5.0 5.0

含鐵總量/[μg·(25mL)-1]

吸光度A

以鐵含量（濃度單位是××μg/25ml）為橫坐標(biāo)，吸光度A為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。依據(jù)未知液的A值，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上即可查得其對應(yīng)濃度。(c)原含鐵分析試液中含鐵含量 序號

ρ（Fe）/ mg?L-1

平均值

s RSD

結(jié)論：鐵未知液中鐵的含量ρFe=

95%置信度下平均值的置信區(qū)間ρFe= [小結(jié)] 用鄰二氮菲分光光度法測定鐵是國際國內(nèi)規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)分析方法。在酸性條件下，加入鹽酸羥胺，保障溶液中的鐵離子是Fe2+離子形式存在，在pH=5的醋酸緩沖溶液中，以鄰二氮菲為顯示劑，與Fe2+生成一種穩(wěn)定的桔紅色絡(luò)合物Fe(phen)32+，用分光光度法測定物質(zhì)的含量。定量測定方法一般采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法，即配制一系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，在實(shí)驗(yàn)條件下依次測量各標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度(A)，以溶液的濃度為橫坐標(biāo)，相應(yīng)的吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。在同樣實(shí)驗(yàn)條件下，測定待測溶液的吸光度，根據(jù)測得吸光度值從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出相應(yīng)的濃度值，即可計(jì)算試樣中被測物質(zhì)的質(zhì)量濃度。

[演示] 學(xué)生代表上講臺演示測定操作過程，其余學(xué)生觀察其操作。

[講解、示范] 教師點(diǎn)評學(xué)生演示操作過程的正誤之處并講解示范操作要點(diǎn):(1)取樣的方法：取樣量5.0mL，取樣儀器：吸量管(2)吸量管的操作：吸液、調(diào)整液面的方法、放液(3)分光光度計(jì)的操作：(a)預(yù)熱30min。(b)調(diào)節(jié)T = 0。

(c)調(diào)節(jié)T = 100%（A=0）。(d)測定樣品的吸光度A。[講解注意事項(xiàng)]

1、試劑的加入必須按順序進(jìn)行；

2、定容后必須充分搖勻后進(jìn)行測量；

3、分光光度計(jì)必須預(yù)熱30min，穩(wěn)定后才能進(jìn)行測量；

4、比色皿必須配套，裝上待測液后透光面必須擦拭干凈；切勿用手接觸透光面；

5、在進(jìn)行條件試驗(yàn)時，每改變一次試液濃度，比色皿都要洗干凈；

6、同一組溶液必須在同一臺儀器上測量；

7、標(biāo)準(zhǔn)曲線的質(zhì)量是測定準(zhǔn)確與否的關(guān)鍵，標(biāo)準(zhǔn)系列溶液配制時，必須嚴(yán)格按規(guī)范進(jìn)行操作

待測溶液一定要在工作曲線線形范圍內(nèi)，如果濃度超出直線的線性范圍，則有可能偏離朗伯-比耳定律是光吸收的基本定律，就不能使用吸光光度法測定。[學(xué)生分組] 以每兩個同學(xué)一組分為12～16個小組

[學(xué)生實(shí)訓(xùn)] 測定樣品中的鐵含量并完成實(shí)驗(yàn)報(bào)告。教師巡回指導(dǎo) [交流討論] 引導(dǎo)學(xué)生說出自己完成任務(wù)的情況(成功或失誤之處)[試驗(yàn)小結(jié)] 教師小結(jié)本課題實(shí)驗(yàn)完成情況。

1、吸量管的規(guī)范操作：克服多加或少加的現(xiàn)象；

2、分光光度計(jì)使用時的注意事項(xiàng)：（1）為了防止光電管疲勞，不測定時必須將試樣室蓋打開，使光路切斷，以延長光電管的使用壽命。（2）取拿比色皿時，手指只能捏住比色皿的毛玻璃面，而不能碰比色皿的光學(xué)表面。（3）比色皿不能用堿溶液或氧化性強(qiáng)的洗滌液洗滌，也不能用毛刷清洗。比色皿外壁附著的水或溶液應(yīng)用擦鏡紙或細(xì)而軟的吸水紙吸干，不要擦拭，以免損傷它的光學(xué)表面。

3、分析誤差產(chǎn)生原因：取液不當(dāng)；溶液沒有搖勻；顯色時間不足；改動了儀器的工作條件等因素。

[布置作業(yè)]：根據(jù)你的測定，我們本地區(qū)的水中鐵的濃度在什么范圍？(寫出測定實(shí)驗(yàn)操作步驟、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和測定結(jié)果)

第四篇：07實(shí)驗(yàn)七鉛鉍混合液中鉛鉍含量的連續(xù)測定定-教案

實(shí)驗(yàn)七鉛、鉍混合液中鉛、鉍含量的連續(xù)測定教案 課程名稱：分析化學(xué)實(shí)驗(yàn)B 教學(xué)內(nèi)容：以二甲酚橙為指示劑連續(xù)測定鉛、鉍混合液中鉛、鉍含量 實(shí)驗(yàn)類型：驗(yàn)證

教學(xué)對象：化工、環(huán)境工程、藥學(xué)、生物科學(xué)、應(yīng)用化學(xué)、醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)、制藥、復(fù)合材料、生物工程、生物技術(shù)

授課地點(diǎn)：中南大學(xué)南校區(qū)化學(xué)實(shí)驗(yàn)樓302 授課學(xué)時：4學(xué)時

一、教學(xué)目的與要求

1、練習(xí)鞏固移液管、滴定管的正確使用；

2、了解鉛、鉍混合液中鉛、鉍含量連續(xù)測定的意義；

3、鞏固EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制與標(biāo)定；

4、學(xué)習(xí)利用酸效應(yīng)曲線進(jìn)行混合液中金屬離子連續(xù)滴定的條件選擇；

5、掌握鉛、鉍連續(xù)測定的原理、方法和計(jì)算；

6、熟悉二甲酚橙（XO）指示劑終點(diǎn)顏色判斷和近終點(diǎn)時滴定操作控制

二、知識點(diǎn)

配位反應(yīng)、化學(xué)計(jì)量點(diǎn)、金屬指示劑、指示劑的僵化和封閉現(xiàn)象、滴定終點(diǎn)、酸效應(yīng)曲線、標(biāo)準(zhǔn)溶液、移液管、酸式滴定管、實(shí)驗(yàn)報(bào)告的撰寫（數(shù)據(jù)處理三線表表格化）、有效數(shù)字

三、技能點(diǎn)

玻璃器皿的洗滌、移液管的使用、酸式滴定管的使用、標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制與標(biāo)定

四、教學(xué)重點(diǎn)及難點(diǎn)

重點(diǎn)：鋅標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液；控制酸度的辦法進(jìn)行金屬離子連續(xù)滴定的原理；絡(luò)合滴定中緩沖溶液的作用

難點(diǎn)：控制酸度的辦法進(jìn)行金屬離子連續(xù)滴定的原理

五、教學(xué)方法

任務(wù)驅(qū)動法、分組討論法、閱讀指導(dǎo)法、現(xiàn)場講解指導(dǎo)等

六、復(fù)習(xí)引入

1、復(fù)習(xí)配位滴定法有關(guān)知識，提問學(xué)生:(1)二甲酚橙指示劑在滴定終點(diǎn)的顏色如何變化的？(由紫紅色變成黃色)(2)EDTA配位滴定法測定鉍和鉛時，溶液的pH值分別控制在多少？(1和5～6)(3)EDTA配位滴定法測定鉍和鉛時，分別用什么溶液控制溶液的pH值？(硝酸和六次甲基四胺)[引入] EDTA配位滴定法的應(yīng)用：以二甲酚橙為指示劑連續(xù)測定鉛、鉍混合液中鉛、鉍含量 [引言] 鉛鉍合金是一種重要的材料，在許多的領(lǐng)域中得到應(yīng)用。在醫(yī)療領(lǐng)域，用做特定形狀的防輻射專用擋塊；在模具制造領(lǐng)域，用作鑄造制模，模具裝配調(diào)試等；在電子電氣、自動控制領(lǐng)域，用作熱敏元件、保險(xiǎn)材料、火災(zāi)報(bào)警裝置等；在折彎金屬管時，作為填充物；在做金相試樣時，作為嵌鑲劑以及液力偶合器用。合金中各元素的含量直接影響合金的性能，鉛鉍含量的高低成為評價其產(chǎn)品質(zhì)量的主要指標(biāo)。[新授]課題：鉛、鉍混合液中鉛、鉍含量的連續(xù)測定 [提出任務(wù)]教師提出本課題的學(xué)習(xí)任務(wù)：

1、鉛、鉍混合液中鉛、鉍含量的連續(xù)測定的基本原理是什么？

2、以二甲酚橙為指示劑，用Zn2+標(biāo)定EDTA濃度的實(shí)驗(yàn)中，溶液的pH為多少？

3、鉛、鉍混合液中鉍、鉛含量的連續(xù)測定的操作方法。[任務(wù)探索]

1、鉛、鉍混合液中鉛、鉍含量的連續(xù)測定的基本原理是什么？ 根據(jù)有關(guān)學(xué)習(xí)資料，思考下列問題：

(1)絡(luò)合滴定中，準(zhǔn)確分別滴定的條件是什么？

(2)滴定Pb2+時要調(diào)節(jié)溶液pH為5~6，為什么加入六亞甲基四胺而不加入醋酸鈉？

(3)能否取等量混合試液兩份，一份控制pH≈1，滴定Bi3+，而另一份控制pH為5~6滴定Pb2+、Bi3+總量？為什么？

[歸納]引導(dǎo)學(xué)生歸納總結(jié)出鉛、鉍含量的連續(xù)測定的基本原理

Bi3+、Pb2+均能與EDTA形成穩(wěn)定的絡(luò)合物，其lgK值分別為27.94和18.04，兩者穩(wěn)定性相差很大，ΔpK=9.90>5。因此，可以用控制酸度的方法在一份試液中連續(xù)滴定Bi3+和Pb2+。在測定中，均以二甲酚橙（XO）作指示劑，XO在pH<6時呈黃色，在pH>6.3時呈紅色；而它與Bi3+、Pb2+所形成的絡(luò)合物呈紫紅色，它們的穩(wěn)定性與Bi3+、Pb2+和EDTA所形成的絡(luò)合物相比要低；而且KBi-XO> KPb-XO。測定時，先用HNO3調(diào)節(jié)溶液pH=1.0，用EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定溶液由紫紅色突變?yōu)榱咙S色，即為滴定Bi3+的終點(diǎn)。然后加入六次甲基四胺溶液，使溶液pH為5～6，此時Pb2+與XO形成紫紅色絡(luò)合物，繼續(xù)用EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至溶液由紫紅色突變?yōu)榱咙S色，即為滴定Pb2+的終點(diǎn)。反應(yīng)如下： pH=1.0 滴定前：XO ＋

Me（Bi3+）＝

Me－XO（黃色）（紫紅色）

滴定開始至化學(xué)計(jì)量點(diǎn)前：H2Y2-+ Bi3+

＝

BiY-+ 2H+ 計(jì)量點(diǎn)時：H2Y2-+ Bi-XO ＝

BiY-+ XO + 2H+（紫紅色）（黃色）pH=5.5 滴定前：XO ＋

Me（Pb2+）＝

Me－XO（黃色）（紫紅色）

滴定開始至化學(xué)計(jì)量點(diǎn)前：H2Y2-+ Pb2+

＝

PbY2-+ 2H+ 計(jì)量點(diǎn)時：H2Y2-+ Pb-XO ＝

PbY2-+ XO + 2H+（紫紅色）（黃色）

以含 Bi3+、Pb2+的物質(zhì)的量濃度(mol·L-1)表示Bi3+、Pb2+含量，可由下式計(jì)算： [學(xué)生回答](1)絡(luò)合滴定中，準(zhǔn)確分別滴定的條件是什么？

[講解]絡(luò)合滴定中，準(zhǔn)確分別滴定的條件是△lgcK≥5。

(2)滴定Pb2+時要調(diào)節(jié)溶液pH為5~6，為什么加入六亞甲基四胺而不加入醋酸鈉？

[講解] 在選擇緩沖溶液時，不僅要考慮它的緩沖范圍或緩沖容量，還要注意可能引起的副反應(yīng)。在滴定Pb2+時，若用NaAc調(diào)酸度時，Ac-能與Pb2+形成絡(luò)合物，影響Pb2+的準(zhǔn)確滴定，醋酸鈉生成醋酸和硝酸鈉難于控制溶液的酸度，所以用六亞四基四胺調(diào)酸度。加入六亞甲基四胺避免了上述問題，六亞甲基四胺和質(zhì)子化的六亞甲基四胺組成緩沖溶液控制溶液的酸度，調(diào)節(jié)溶液pH為5~6。

(3)能否取等量混合試液兩份，一份控制pH≈1，滴定Bi3+，而另一份控制pH為5~6滴定Pb2+、Bi3+總量？為什么？

[講解] 不能取等量混合試液兩份，一份控制pH≈1，滴定Bi3+，而另一份控制pH為5~6滴定Pb2+、Bi3+總量，因?yàn)閜H為5~6，Bi3+已發(fā)生水解生成沉淀，不被EDTA溶液滴定。只有Pb2+被滴定，因而不能測出Pb2+、Bi3+總量。

2、以二甲酚橙為指示劑，用Zn2+標(biāo)定EDTA濃度的實(shí)驗(yàn)中，溶液的pH為多少？ [講解]：六次甲基四胺與鹽酸反應(yīng)為：(CH2)6N4+HCl==(CH2)6NH+·Cl-

(0.01000鋅標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制是：準(zhǔn)確稱取基準(zhǔn)氧化鋅0.2035克，用10mL6mol/L鹽酸溶解定容至250mL，分取25.00mL鋅標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定EDTA溶液的準(zhǔn)確濃度)反應(yīng)中鹽酸的物質(zhì)的量：

六次甲基四胺的物質(zhì)的量：(六次甲基四胺加入量一般為10mL)

故六次甲基四胺過量。

緩沖體系中剩余六次甲基四胺的濃度為：

六次甲基四胺鹽的濃度為：

根據(jù)一般緩沖溶液計(jì)算公式：

得：

（六次甲基四胺pKb=8.85）

3、鉛、鉍混合液中鉍、鉛含量的連續(xù)測定的操作方法。[閱讀] 指導(dǎo)學(xué)生閱讀實(shí)驗(yàn)報(bào)告中的實(shí)驗(yàn)步驟。[討論] 四個學(xué)生一組，歸納測定操作要點(diǎn)。[提問] 學(xué)生代表小組發(fā)言:水的總硬度測定步驟(1)0.01mol/L EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的標(biāo)定

準(zhǔn)確移取25.00ml濃度為0.01000 mol·L-1Zn2+標(biāo)準(zhǔn)溶液3份，置于250ml 的錐形瓶中，加入二甲酚橙指示劑2～3滴，滴加200g·L-1六次甲基四胺溶液至溶液顯示紫紅色后再過量5mL，用欲標(biāo)定的EDTA溶液滴定到由紫紅色變?yōu)辄S色即為終點(diǎn)，記錄消耗的EDTA溶液體積，根據(jù)滴定時用去的EDTA溶液體積計(jì)算EDTA溶液的準(zhǔn)確濃度。(2)鉛、鉍混合液中鉍、鉛含量的連續(xù)測定

用移液管移取20.00ml Bi3+、Pb2+ 混合試液于已加入10ml 0.10mol·L-1 HNO3的250ml錐形瓶中，加2滴二甲酚橙，用EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定溶液由紫紅色突變?yōu)榱咙S色，即為終點(diǎn)，記取V1(ml)，然后滴加200g·L-1六次甲基四胺溶液至溶液顯示紫紅色后再過量5mL，補(bǔ)加二甲酚橙指示劑2～3滴，繼續(xù)用EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定溶液由紫紅色突變?yōu)榱咙S色，即為終點(diǎn)，記下V(ml)，并計(jì)算V2=V-V1。平行測定三份，計(jì)算混合試液中Bi3+和Pb2+ 的含量(mol·L-1)。

(3)數(shù)據(jù)記錄與處理及結(jié)論

1、EDTA溶液的標(biāo)定

表1 EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度

序號

V（Zn2+）/ml

V（EDTA）/ml

C（EDTA）/（mol·L-1）平均值

RSD 2 3 結(jié)論：EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度c=

95%置信度下平均值的置信區(qū)間c=

2、鉛、鉍混合液中鉛、鉍含量的連續(xù)測定 表2 混合液中鉍的含量

序號混合液體積/ml

V1/ml

CPb/ mol ?L-1

CPb平均值

RSD 1 2 3 結(jié)論：混合液中鉍的濃度c=

95%置信度下平均值的置信區(qū)間c= 表3 混合液中鉛的含量

序號混合液體積/ml

V2/ml

CBi/ mol ?L-1

CBi平均值

RSD 1 2 3 結(jié)論：混合液中鉛的濃度c=

95%置信度下平均值的置信區(qū)間c= [小結(jié)] 用EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定連續(xù)測定鉛、鉍含量常應(yīng)用于鉛鉍合金中鉍和鉛的分析方法。在pH=l.0的硝酸強(qiáng)酸性緩沖溶液中，以二甲酚橙為指示劑，用EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定鉛、鉍樣品溶液由紫紅色變黃色(約帶橙色)為終點(diǎn)，記錄EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液消耗體積計(jì)算鉛、鉍樣品溶液中鉍的含量；之后，用六次甲基四胺調(diào)節(jié)溶液的pH值，在pH=5～6的六次甲基四胺緩沖溶液中，以二甲酚橙為指示劑，繼續(xù)用EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定鉛、鉍樣品溶液由紫紅色變亮黃色為終點(diǎn)，記錄EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液消耗體積計(jì)算鉛、鉍樣品溶液中鉛的含量。[演示] 學(xué)生代表上講臺演示測定操作過程，其余學(xué)生觀察其操作。

[講解、示范] 教師點(diǎn)評學(xué)生演示操作過程的正誤之處并講解示范操作要點(diǎn):(1)取樣的方法：取樣量20.00mL，取樣儀器：移液管(2)移液管的操作：吸液、調(diào)整液面的方法、放液

(3)酸式滴定管的操作：左手的用法，防止管尖和兩側(cè)漏液

(4)終點(diǎn)判斷：待滴定至溶液為紫紅色變淺時即接近終點(diǎn)，要注意每加一滴EDTA都需充分搖勻，最好每滴間隔2-3s，滴到黃色即為終點(diǎn)。[講解注意事項(xiàng)]

1、慢滴強(qiáng)搖，勿過頭。

2、滴定終點(diǎn)：

標(biāo)定EDTA----紫紅色突變?yōu)榱咙S色 測定Bi----紫紅色變?yōu)辄S色（微帶橙）測定Pb----紫紅色變?yōu)榱咙S色

3、測Bi3+時，滴定前及滴定初期，不要多用水沖洗錐形瓶口，以防Bi3+水解。

4、標(biāo)定EDTA溶液和測定Pb2+含量時，終點(diǎn)不明顯可加熱至50~60℃，使終點(diǎn)易于辨別。測Pb2+含量時，在滴定Bi3+后調(diào)節(jié)pH值，滴加EDTA溶液至近終點(diǎn)再加熱，然后小心滴至鉛的終點(diǎn)。否則，可能出現(xiàn)白色沉淀，影響終點(diǎn)的判斷。[學(xué)生分組] 以每個同學(xué)一組分為24～30個小組

[學(xué)生實(shí)訓(xùn)] 連續(xù)測定鉛、鉍混合液中鉍、鉛含量并完成實(shí)驗(yàn)報(bào)告。教師巡回指導(dǎo) [交流討論] 引導(dǎo)學(xué)生說出自己完成任務(wù)的情況(成功或失誤之處)[試驗(yàn)小結(jié)] 教師小結(jié)本課題實(shí)驗(yàn)完成情況。

1、酸式滴定管的規(guī)范操作：克服漏液的現(xiàn)象；

2、近終點(diǎn)時顏色判斷和操作：近終點(diǎn)慢滴多搖，控制半滴操作；

3、分析誤差產(chǎn)生原因：滴定速度控制不當(dāng)；終點(diǎn)判斷不準(zhǔn)確；讀數(shù)誤差；酸式滴定管管尖和兩側(cè)漏液等因素。

[布置作業(yè)]：根據(jù)你的測定，我們本地區(qū)的所應(yīng)用的鉛鉍合金屬于那個級別？(寫出測定實(shí)驗(yàn)操作步驟、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和測定結(jié)果)

第五篇：大學(xué)生創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)色法比較不同基源鉤藤總生物堿含量--結(jié)題報(bào)告

比色法比較不同基源鉤藤總生物堿含量-結(jié)題報(bào)告

申請人：劉偉 指導(dǎo)教師：劉莉

第一部分：[課題提出的背景及意義]

鉤藤，始載于《名醫(yī)別錄》（漢末），原名釣藤，列為下品。因其性味甘、涼，歸肝、心包經(jīng)，具有清熱平肝，息風(fēng)定驚之功效：主要用于頭痛眩暈、驚癇抽搐等癥。現(xiàn)代研究表明，鉤藤的主要有效成分是生物堿；其中鉤藤總生物堿又有降壓作用。根據(jù)藥典有關(guān)生物堿含量測定的方法為滴定法，文獻(xiàn)中多采用酸性染料比色法，但哪種方法更靈敏、更準(zhǔn)確、重現(xiàn)性更好文獻(xiàn)中并未報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)以鉤藤提取物作為樣品，對這兩種方法用于測定鉤藤總生物堿含量的比較研究，本研究將為含生物堿的中藥測定方法的選擇提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

第二部分：[研究的主要內(nèi)容和目標(biāo)] 鉤藤總生物堿含量測定方法的比較

第三部分：[研究方法] 采用酸化乙醇提取的方法提取獲得總生物堿粗品，比較滴定法與酸性染料比色法測定總生物堿含量。

第四部分：[研究工作的組織與實(shí)施]

劉莉老師作為指導(dǎo)，本研究小組討論提出研究方案，通過預(yù)實(shí)驗(yàn)確定了鉤藤總生物堿粗品的含量，經(jīng)過修改完善，確定研究方案。

研究的階段分為實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備階段、鉤藤總生物堿提取階段、不同測定方法的比較這三個步驟。

第五部分：[研究結(jié)論與成果]

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明酸性染料比色法測定鉤藤總生物堿含量更準(zhǔn)確、更穩(wěn)定，建議鉤藤生物堿含量測定采用酸性染料比色法。

第六部分：[質(zhì)量與效果分析] 對研究結(jié)果進(jìn)行分析：通過合理的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，正確的實(shí)驗(yàn)操作，根據(jù)鉤藤生物堿的提取規(guī)律，采用酸化乙醇溶劑提取法提取生物堿，并對滴定法與酸性染料比色法進(jìn)行含量測定比較，基本確定酸性染料比色法法用于鉤藤生物堿含量測定更優(yōu)。這些實(shí)驗(yàn)方法都是常用的提取與測定方法，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)合理，基本完成研究目標(biāo)。為生物堿含量測定提供了基本實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

研究的自我評價：鉤藤作為現(xiàn)在臨床常用中藥特別是現(xiàn)代藥理實(shí)驗(yàn)證實(shí)，鉤藤具有顯著的降壓作用，研究證明有效成分為生物堿，但對生物堿含量測定還缺乏靈敏、準(zhǔn)確的確卻方法。本實(shí)驗(yàn)就是探究確定酸性染料比色法比滴定法在測定鉤藤生物堿更穩(wěn)定準(zhǔn)確。

收獲與體會：通過這個研究對含生物堿成分的測定方法有了更深的了解，為以后其他中藥含生物堿成分含量測定方法選擇提供參考。

第七部分：[進(jìn)一步要研究的問題]

本實(shí)驗(yàn)只針對鉤藤生物堿含量測定做了方法學(xué)比較，進(jìn)而推廣到類似生物堿含量測定。是否有特殊還需進(jìn)一步研究。

附：實(shí)驗(yàn)報(bào)告

一 實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/p>

鉤藤總生物堿含量測定方法的比較

二 實(shí)驗(yàn)原理：

利用鉤藤生物堿可以用酸化乙醇提取的方法提取獲得總生物堿干膏，對干膏進(jìn)行生物堿含量測定。藥典測定生物堿常用滴定法，而文獻(xiàn)常見用酸性染料比色法測定生物堿含量。本實(shí)驗(yàn)采用這兩種測定方法分別對同一鉤藤生物堿干膏進(jìn)行生物堿含量測定以及方法學(xué)考察，從而比較兩種方法哪一種更靈敏、更準(zhǔn)確。三 實(shí)驗(yàn)儀器與試劑

UV2000紫外分光光度計(jì)、堿式滴定管、燒杯、三角錐形瓶、容量瓶、蒸發(fā)皿、燒瓶、分液漏斗、冷凝管、分析天平、移液管、滴定管；

鉤藤藥材、鉤藤堿標(biāo)準(zhǔn)品、溴甲酚綠、亞甲基紅-溴甲酚綠混合指示劑、無水乙醇、乙醚、鹽酸、乙醇、氨水、PH試紙、無水硫酸鈉、硫酸、氫氧化鈉 四 實(shí)驗(yàn)步驟：

（一）鉤藤總生物堿的提取

取鉤藤藥材200g粉碎成粗粉用0.1%鹽酸酸化的80%乙醇1400ml浸泡24小時，抽濾，藥渣再用0.1%鹽酸酸化的80%乙醇700ml在60℃水浴回流2h，抽濾，重復(fù)一次，合并濾液，65℃減壓回收乙醇，得酸水濃縮液(1：1)200ml，抽濾得濃濾液，轉(zhuǎn)移到分液漏斗中加氨水調(diào)ph9~10，用乙醚萃取3次，合并乙醚層，回收乙醚得干燥鉤藤總堿樣品。

（二）鉤藤生物堿含量的測定

1、樣品生物堿溶液配制與生物堿溶液配制

精密稱取樣品鉤藤總堿干膏200 mg加無水乙醇使溶解定容到250ml容量瓶,得樣品①

取樣品①25ml用無水乙醇定容到250ml得樣品②；

精密稱取標(biāo)準(zhǔn)鉤藤堿5.2mg加無水乙醇使其溶解定容到50ml容量瓶，得標(biāo)準(zhǔn)品①

取標(biāo)準(zhǔn)品① 10ml用無水乙醇定容到100ml得標(biāo)準(zhǔn)品②

2、兩種測定方法測定生物堿含量

2.1.、滴定法（藥典）

取樣品①5ml至三角錐形瓶中，精確加入0．0116 mol／L硫酸標(biāo)準(zhǔn)液25 mL，加入甲基紅一溴甲酚綠混合指示劑2或3滴，以0．0232 mol／L 氫氧化鈉溶液滴定，由紅色至綠色為終點(diǎn)。重復(fù)做五組，記錄使用氫氧化鈉用量。<計(jì)算方法：每毫升0．0l16 mol／L 硫酸溶液相當(dāng)于8.9088 mg鉤藤堿> 2.2、酸性染料比色法 2.2.1標(biāo)準(zhǔn)曲線制備

精密量取鉤藤堿標(biāo)準(zhǔn)品②溶液1.0，2.0,5.0，10.0,15.0,18.0，揮干無水乙醇，殘?jiān)尤隭X緩沖液5.0ml，然后加入溴甲酚綠酸性染料溶液5.0ml加入乙醚4ml，搖擺2min，分出下層，反復(fù)萃取三次，合并乙醚萃取液加0.4g無水硫酸鈉脫水。分別在UV2000型紫外可見光光度計(jì)在412nm時測定吸光度，以吸光度A為縱坐標(biāo)，以鉤藤堿量為橫坐標(biāo)作標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程A=0.004297M-0.2695（r=0.9901）線性范圍為10.4ug--195.2ug。2.2.2樣品測定

精密量取鉤藤總堿樣品②5.0ml按上法測得吸光度，計(jì)算的含量。

（三）方法學(xué)考察 3.1 滴定法

3．1.1 精密度實(shí)驗(yàn) 精密量取鉤藤堿樣品①溶液3．0 ml 按2..1法操作測得含量，平行測定6次，含量得RSD=6.33%(n=6)，表明儀器精密度符合要求。3．1.2 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 精密取樣品液①5ml，每隔30min測一次含量，結(jié)果4 h內(nèi)含量沒變化。結(jié)果，RSD= 6.81%(n=7)。

3.1.3 加樣回收率實(shí)驗(yàn) 取鉤藤堿標(biāo)準(zhǔn)品液①10ml與樣品液①5．0 ml混合，3份，揮干無水乙醇，按2．1法操作，測定含量。得空白回收率平均值 79.95%，RSD=3.33%。3．1.4 重復(fù)性實(shí)驗(yàn) 精密稱取鉤藤樣品液①5.0ml按2.1法操作，測定含量，結(jié)果平均含量為0.388%，RSD=6.81%

3.2 酸性染料比色法

3．2.1 精密度實(shí)驗(yàn) 精密量取鉤藤堿樣品②溶液3．0 ml 按2.2.1法操作測得吸光度，平行測定6次，吸收值得RSD=0.117%，表明儀器精密度符合要求。3．2.2 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 取精密度試驗(yàn)樣品液②，每隔30min測一次吸收值，結(jié)果4 h內(nèi)吸收值穩(wěn)定。結(jié)果，RSD=(n=7)3.2.3 加樣回收率實(shí)驗(yàn) 取鉤藤堿標(biāo)準(zhǔn)品液②與樣品液各5．0 ml混合，6份，揮干無水乙醇，按2．2．1法操作，測定液分別在412 nm測定吸光度。得空白回收率平均值 97.19%，RSD= 1.34% 3．2.4 重復(fù)性實(shí)驗(yàn) 精密稱取鉤藤樣品液②5.0ml按2．2.1法操作，測定液分別在412 nm測定吸光度，結(jié)果平均含量為0.193%，RSD=0.017% 五 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論

上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，對于同一樣品，采用滴定法和酸性染料比色法對鉤藤生物堿含量的測定結(jié)果相差明顯（近兩倍），從測量結(jié)果上來看酸性染料比色法要比滴定法準(zhǔn)確性、可靠性要高。滴定法不僅靈敏性低，測量時需要的樣品量大，而且滴定終點(diǎn)顏色確定穩(wěn)定性低，實(shí)驗(yàn)結(jié)果容易受個人因素影響。酸性染料比色法樣品需要量小，穩(wěn)定性、重現(xiàn)性都非常好。因此建議，鉤藤生物堿含量測定用酸性染料比色法較為適宜。

點(diǎn)評：

1、各部分有點(diǎn)簡單。

2、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)列表分析。

3、缺實(shí)驗(yàn)的討論、缺乏參考文獻(xiàn)。

4、完成論文并投稿。