第一篇：蛋白質(zhì)含量測定——雙縮脲試劑法,實驗報告（大全）

20XX 報 告 匯 編 Compilation of reports

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生物化學(xué)實驗報告

姓

名：

學(xué)

號：

專業(yè)年級：

組

別：

生物化學(xué)與分子生物學(xué)實驗教學(xué)中心

報告文檔·借鑒學(xué)習(xí)word 可編輯·實用文檔 實驗名稱 蛋白質(zhì)含量測定 —— 雙縮脲試劑法 實驗日期

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指導(dǎo)老師

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教師簽名

批改日期

一、實驗?zāi)康?1.1.掌握雙縮脲測定血清總蛋白的基本原理、操作； 1.2.掌握雙縮脲試劑的配制； 1.3.熟悉血清總蛋白的臨床意義； 1.4.了解雙縮脲法測定血清總蛋白的特點和注意事項。

二、實驗原理 2.1.兩分子尿素加熱脫氨縮合成的雙縮脲（H2N-OC-NH-CO-NH2），因分子內(nèi)含有兩個鄰接的肽鍵，在堿性溶液中可與 Cu2+發(fā)生雙縮脲反應(yīng)，生成紫紅色絡(luò)合物。

2.2.蛋白質(zhì)分子含有大量彼此相連的肽鍵（-CO-NH-），同樣能在堿性條件下與 Cu2+發(fā)生雙縮脲反應(yīng)，生成的紫紅色絡(luò)合物，且在 540nm 處的吸光度與蛋白質(zhì)的含量在 10～120g/L 范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系。

三、材料與方法 ：

3.1.實驗材料：

3.1.1.實驗試劑：①小牛血清；②6.0mol/LNaOH 溶液；③雙縮脲試劑:硫酸酮、酒石酸鉀鈉、碘化鉀；④蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)液（70g/L）；⑤0.9%NaCl；⑥蒸餾水。

3.1.2.實驗器材：①試管；②燒杯；③容量瓶；④加樣槍；⑤刻度吸管；⑥玻璃棒 ；⑥1100 分光光度計；⑦電子天平；⑧水浴鍋。

報告文檔·借鑒學(xué)習(xí)word 可編輯·實用文檔 3.2.實驗步驟 取 3 支試管，做好標(biāo)記，按下表操作：

加入物（ml）

B（空白）

S（標(biāo)準(zhǔn)）

U（待測）

小牛血清（1:10）

0.5 蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)液（1:10）

0.5

-0.9%Nacl

0.5

-雙縮脲試劑

4.0

4.0

4.0

a.各管混勻，觀察各試管顏色； b.將各試管置于 37℃水浴鍋中加熱 20min，觀察顏色； c.將試管中的液體倒入比色杯中，置于 1100 分光光度計的樣品槽內(nèi)，在波長 540nm，以空白管調(diào)零，測 S 和 U 管吸的光度； d.測定結(jié)束后，將比色杯中的樣品回收進(jìn)試管。

依據(jù)公式算出結(jié)果：）

蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)液濃度（）

血清總蛋白（g/LAAg/LSU? ?

四、結(jié)果與討論 ：

4.1.實驗現(xiàn)象：

①選取三支潔凈無損的試管，從左往右依次加入 0.9%氯化鈉溶液、蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)液、相應(yīng)的小牛血清各 0.5ml，分別命名為 B 試管、S 試管和 U 試管，再分別向三支試管內(nèi)加入 4ml 的雙縮脲試劑，溶液均成藍(lán)色透明狀。

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測定次數(shù)

平均吸光度 ②將三支試管放入 37℃水浴鍋中加熱 20min，取出后，B 試管呈淡藍(lán)色，S 試管和 U試管均成淺紫色，且 S 試管的顏色比 U 試管的顏色深。（如圖一）

圖一 水浴后三支試管顏色

圖二 分光計讀數(shù) 4.2.實驗數(shù)據(jù)

S

0.185

0.184

0.185

0.1847

U

0.152

0.151

0.152

0.1517 結(jié)果計算：代入公式：血清總蛋白（g/L)=(Au/As)X 蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)液濃度（g/L)，得出結(jié)果：血清總蛋白=57.493g/L。

4.3.結(jié)果討論 經(jīng)查閱資料得：正常成人血清總蛋白含量為 60～80g/L，而小牛血清總蛋白含量比正常成人血清總蛋白含量略低一點，本次結(jié)果得出小牛血清總蛋白含量為 57.493g/L，符合情況。

4.3.1.成功原因：

①本次試驗的試劑混合水浴后出現(xiàn)了預(yù)期效果：B 試管呈淡藍(lán)色，S 試管和 U 試管均成淺紫色，且 S 試管的顏色比 U 試管的顏色深。B 試管呈淡藍(lán)色是因為 B 試管中沒有發(fā)生任何反應(yīng)，所以呈現(xiàn)雙縮脲試劑本來的淡藍(lán)色，而 S 試管和 U 試管呈淺紫色是因為試劑中的蛋白質(zhì)和雙縮脲發(fā)生了雙縮脲反應(yīng)而呈淺紫色。

管號

報告文檔·借鑒學(xué)習(xí)word 可編輯·實用文檔 ②吸光度測試后得到的數(shù)據(jù)，經(jīng)計算后得到了預(yù)期中的結(jié)果，是因為前面操作嚴(yán)謹(jǐn)。

4.3.2.誤差分析 ①三次重復(fù)測定過程中出現(xiàn)了一些浮動數(shù)據(jù)，可能是因為儀器本身存在的可允許的誤差范圍。

②第一次嘗試使用分光光度計的時候得到了負(fù)值，經(jīng)查明是因為放置在其內(nèi)的比色杯將磨面對準(zhǔn)了通光面，經(jīng)調(diào)整后，獲得了正確的數(shù)據(jù)。

4.4.課后復(fù)習(xí)題 4.4.1.什么叫雙縮脲試劑？為什么要在雙縮脲試劑中加入酒石酸鉀鈉和碘化鉀？ 答：雙縮脲試劑是一個用于鑒定蛋白質(zhì)的分析化學(xué)試劑，遇到蛋白質(zhì)顯紫色。它是一個堿性的含銅試液，呈藍(lán)色，由 0.1g/ml 氫氧化鈉或氫氧化鉀、0.01g/ml 硫酸銅和酒石酸鉀鈉配制。硫酸銅、酒石酸鉀鈉的堿性溶液中會生成紫紅色絡(luò)合物,在這種比例的堿性水溶液中，本來形成的 Cu(OH)2 會與溶液中多余的 OH-形成[Cu(OH)4]2-絡(luò)離子，酒石酸鉀鈉的作用就是保護(hù)這種絡(luò)離子不被析出變?yōu)槌恋?，向試劑中加入碘化?可延長試劑的使用壽命。

4.4.2.試劑配制過程中，為何 NaOH 要單獨配制，最后加入？ 答：先單獨加入 NaOH 溶液是為了營造一個堿性環(huán)境,在堿性環(huán)境下雙縮脲試劑 B 中的 Cu2+與蛋白質(zhì)肽鍵絡(luò)合產(chǎn)生顏色反應(yīng).如果先將雙縮脲試劑 A 與雙縮脲試劑 B 混合,即 NaOH 與 CuSO4 溶液混在一起,那么就會產(chǎn)生 Cu(OH)2 沉淀,藥劑就會失去作用,看不到效果,也就無法判斷是否存在蛋白質(zhì).4.4.3.簡述血清總蛋白測定的臨床意義。

答：臨床上，當(dāng)血清總蛋白濃度降低時，可能代表：血清總蛋白濃度降低、蛋白質(zhì)合成障礙、蛋白質(zhì)丟失增加、營養(yǎng)不良或消耗增加或血漿稀釋。當(dāng)血清總蛋白濃度增高時，可能代表：因多發(fā)性骨髓瘤而引起的蛋白質(zhì)合成增加或因脫水、休克而引起的血漿

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第二篇：物理實驗報告-穩(wěn)態(tài)法導(dǎo)熱系數(shù)測定實驗

穩(wěn)態(tài)法導(dǎo)熱系數(shù)測定實驗

一、實驗?zāi)康?/p>

1、通過實驗使學(xué)生加深對傅立葉導(dǎo)熱定律的認(rèn)識。

2、通過實驗，掌握在穩(wěn)定熱流情況下利用穩(wěn)態(tài)平板法測定材料導(dǎo)熱系數(shù)的方法。

3、確定材料的導(dǎo)熱系數(shù)與溫度之間的依變關(guān)系。

4、學(xué)習(xí)用溫差熱電偶測量溫度的方法。

5、學(xué)習(xí)熱工儀表的使用方法

二、實驗原理

平板式穩(wěn)態(tài)導(dǎo)熱儀的測量原理是基于一維無限大平板穩(wěn)態(tài)傳熱模型，這種方法是把被測材料做成比較薄的圓板形或方板形，薄板的一個表面進(jìn)行加熱，另一個表面則進(jìn)行冷卻，建立起沿厚度方向的溫差。

三、實驗設(shè)備

實驗設(shè)備如圖2所示。

圖2平板式穩(wěn)態(tài)法導(dǎo)熱儀的總體結(jié)構(gòu)圖

1.調(diào)壓器2.銅板3.主加熱板 4.上均熱片 5.中均熱片

6.下均熱片7.熱電偶 8.副加熱板 9.數(shù)據(jù)采控系統(tǒng) 10.溫度儀表 11.試樣裝置 12.循環(huán)水箱電位器 13.保溫材料 14.電位器

鍵盤共有6個按鍵組成，包括為“5”、“1”、“0.1”3個數(shù)據(jù)鍵，“±”正負(fù)號轉(zhuǎn)換鍵，“RST”復(fù)位鍵，“ON/OFF”開關(guān)鍵。

數(shù)據(jù)鍵：根據(jù)不同的功能對相應(yīng)的數(shù)據(jù)進(jìn)行加減，與后面的“±”正負(fù)號轉(zhuǎn)換鍵和“shift”功能鍵配合使用?！啊馈闭?fù)號轉(zhuǎn)換鍵：當(dāng)“±”正負(fù)號轉(zhuǎn)換鍵為“+”時，在原數(shù)據(jù)基礎(chǔ)上加相應(yīng)的數(shù)值；為“-”時，減相應(yīng)的數(shù)值?！癛ST”復(fù)位鍵：復(fù)位數(shù)據(jù)，重新選擇。

控制板上的四個發(fā)光二極管分別對應(yīng)四路熱電偶，發(fā)光二極管發(fā)光表示對應(yīng)的熱電偶接通。由一臺調(diào)壓器輸出端采用并聯(lián)方式提供兩路輸出電壓，電位器對每路輸出電壓進(jìn)行調(diào)整，作為兩個加熱板的輸入電壓。

四、實驗內(nèi)容

1、根據(jù)提供的實驗設(shè)備儀器材料，搭建實驗臺，合理設(shè)計實驗步驟。調(diào)整好電加熱器的電壓(調(diào)節(jié)調(diào)壓器)，并測定相關(guān)的溫度及電熱器的電壓等試驗數(shù)據(jù)。

2、對測定的實驗數(shù)據(jù)按照一定的方法測量進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，確定材料的導(dǎo)熱系數(shù)與溫度之間的依變關(guān)系公式。

3、對實驗結(jié)果進(jìn)行分析與討論。

4、分析影響制導(dǎo)熱儀測量精度的主要因素。

5、在以上分析結(jié)論的基礎(chǔ)之上盡可能的提出實驗臺的改進(jìn)方法。

五、實驗步驟

1、利用游標(biāo)卡尺測量試樣的長、寬、厚度，測試樣3個點的厚度，取其算術(shù)平均值，作為試樣厚度和面積。

2、測量加熱板的內(nèi)部電阻。

3、校準(zhǔn)熱工溫度儀表。

4、向水箱內(nèi)注入冷卻水。

5、通過調(diào)整電位器改變提供給主加熱板和副加熱板的加熱功率，通過4位“LED”顯示主加熱板和副加熱板的溫度，根據(jù)主加熱板的溫度，調(diào)整電位器改變施加在副加熱板的電壓，使副加熱板的溫度與主加熱板的溫度一致。利用數(shù)字電壓表測量并記錄主加熱板電壓。

6、在加熱功率不變條件下, 試樣下表面和循環(huán)水箱下表面的溫度波動每5min不超過±1℃時，認(rèn)為達(dá)到穩(wěn)態(tài)。此時，記錄主加熱板溫度、試樣兩面溫差。

7、通過數(shù)據(jù)鍵輸入試樣面積、厚度等相關(guān)參數(shù)，由試樣面積、厚度、主加熱板的電阻、電壓、上表面溫度及上均熱片的上表面溫度獲得試樣的導(dǎo)熱系數(shù)。

8、改變電位器改變提供給主加熱板和副加熱板的加熱功率件，重復(fù)步驟(5至7)測量并記錄多個溫度下的材料導(dǎo)熱系數(shù)。

9、關(guān)掉電源。

六、實驗要求

1、采用精度不低于0.05 mm的厚度測量工具(游標(biāo)卡尺)，沿試樣四周測量四處的厚度，取其算術(shù)平均值，作為實驗前試樣厚度。

2、用酒精將試件及均熱片擦洗干凈并晾干，晾干后在其上均勻涂抹導(dǎo)熱油。

3、用調(diào)壓器將電壓調(diào)至一定值，保持不變，經(jīng)一段時間后，待跟試件上下表面接觸的銅片各點溫度為一定值時，即導(dǎo)熱過程達(dá)到穩(wěn)定后記錄各點溫度及電熱器的電壓。

4、改變電加熱器的電壓(調(diào)節(jié)調(diào)壓器)，即改變電熱器熱量使之維持在另一個數(shù)值上，跟試件上下表面接觸的銅片各點溫度達(dá)到新的穩(wěn)定狀態(tài)后，重復(fù)第3項的測量。

5、用最小二乘法計算不同橡膠材料的導(dǎo)熱系數(shù)隨溫度變化的關(guān)系式。

五、實驗報告要求

1、材料溫度可取材料上下表面溫度的平均值，即，其中：Tw1為試樣材料下表面溫度，Tw2為試樣上表面溫度。

2、實驗報告需用專用的實驗報告用紙進(jìn)行書寫；

3、實驗報告中必須包含實驗?zāi)康暮蛯嶒灢襟E；

4、實驗報告中必須包括實驗數(shù)據(jù)的記錄；

5、實驗報告中必須包括實驗數(shù)據(jù)處理的具體步驟，并有材料的導(dǎo)熱系數(shù)隨溫度變化的關(guān)系式及關(guān)系曲線圖；

6、實驗報告中必須有對實驗數(shù)據(jù)結(jié)果的分析。

第三篇：河北科技大學(xué)HPLC法進(jìn)行地塞米松磷酸鈉中特殊雜質(zhì)的檢查及含量測定

實驗五HPLC法進(jìn)行地塞米松磷酸鈉中特殊雜質(zhì)的檢查及含量測定

一．目的要求

1.掌握實驗中藥物特殊雜質(zhì)的來源和檢察原理。

2.掌握高效液相色譜法用于特殊雜質(zhì)檢查及含量測定的方法。

二、實驗方法

有關(guān)物質(zhì)取本品，加流動相溶解并稀釋制成每1ml中約含1mg的溶液，作為供試品溶液；取地塞米松對照品適量，精密稱定，加甲醇溶解并稀釋成每1ml中約含1mg的溶液，作為對照品溶液；精密量取供試品溶液與對照品溶液各1ml，置100ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液。照含量測定項下的色譜條件，取對照溶液20μl注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測靈敏度，使地塞米松磷酸鈉色譜峰的峰高為滿量程的15%～20%，再精密量取供試品溶液與對照溶液各20μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時間的2倍。供試品溶液色譜圖中如有與地塞米松保留時間一致的峰，按外標(biāo)法以峰面積計算，含量不得超過0.5%；其他單個雜質(zhì)峰面積不得大于對照溶液中地塞米松磷酸鈉峰面積的1/2，其他雜質(zhì)峰面積的和不得大于對照溶液中地塞米松磷酸鈉峰面積的2倍。

【含量測定】照高效液相色譜法（附錄V D）測定。

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以三乙胺溶液（取三乙胺7.5ml，加水至1000ml,用磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.0±0.05）－甲醇－乙腈（55：40：5）為流動相；檢測波長為242nm.理論板數(shù)按地塞米松磷酸鈉峰計算一般為7000，地塞米松磷酸鈉與地塞米松的分離度應(yīng)大于4.4。

測定法 取本品適量，精密稱定，置50ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取適量，用流動相定量稀釋制成每1ml中含40μg的溶液，精密量取20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取地塞米松磷酸鈉對照品適量，精密稱定，同法測定。按外標(biāo)法以峰面積計算，即得。

四、注意事項：

五、思考題：

1.何謂反相高效液相色譜法？其常用的固定相和流動相有哪些？如何選擇？

2.液相色譜流動相、樣品前處理注意事項有哪些？

第四篇：03實驗三 酸堿混合物測定的方案設(shè)計(雙指示劑法)-教案

實驗三 酸堿混合物測定的方案設(shè)計(雙指示劑法)教案

課程名稱：分析化學(xué)實驗B 教學(xué)內(nèi)容：酸堿混合物測定的方案設(shè)計(雙指示劑法)實驗類型：設(shè)計

教學(xué)對象：化工、環(huán)境工程、藥學(xué)、生物科學(xué)、應(yīng)用化學(xué)、醫(yī)學(xué)檢驗、制藥、復(fù)合材料、生物工程、生物技術(shù)

授課地點：中南大學(xué)南校區(qū)化學(xué)實驗樓301 授課學(xué)時：4學(xué)時

一、教學(xué)目的與要求：

1、鞏固移液管、酸式滴定管的正確使用；

2、掌握電子分析天平的正確使用；

3、了解酸堿混合物的測定意義和常用堿度的表示方法；

4、學(xué)習(xí)HCl標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制與標(biāo)定；

5、掌握雙指示劑法測定堿混合物的原理、方法和計算；

6、熟悉甲基紅、酚酞、甲基橙指示劑終點顏色判斷和近終點時滴定操作控制

二、知識點：

酸堿反應(yīng)、化學(xué)計量點、酸堿指示劑、滴定終點、堿度的表示方法、標(biāo)準(zhǔn)溶液、移液管、酸式滴定管、電子分析天平、實驗報告的撰寫（數(shù)據(jù)處理三線表表格化）、有效數(shù)字

三、技能點：

玻璃器皿的洗滌、移液管的使用、酸式滴定管的使用、電子分析天平的使用、HCl標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制與標(biāo)定

四、教學(xué)重點及難點：

重點：堿混合物測定的基本原理和操作方法

難點：甲基紅、酚酞、甲基橙指示劑的變色特征和近終點時滴定操作控制

五、教學(xué)方法：

任務(wù)驅(qū)動法、分組討論法、閱讀指導(dǎo)法、現(xiàn)場講解指導(dǎo)等

六、復(fù)習(xí)引入：

1、復(fù)習(xí)酸堿滴定法有關(guān)知識，提問學(xué)生:(1)HCl酸堿滴定法測定對象是什么？(溶液中的氫氧根（OH-）離子的濃度，并且溶液中的堿性物質(zhì)的堿的強度要滿足cKb>10-8)(2)強酸直接滴定弱堿時一般以什么做指示劑？(甲基橙或甲基紅)(3)滴定終點顏色如何判斷？(由黃色變橙紅色30s不褪色為終點)[引入] 酸堿滴定法的應(yīng)用：雙指示劑法測定混合堿的組分及其含量

[引言] 酸堿滴定法操作簡便，分析速度快和結(jié)果準(zhǔn)確，因而在工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和科學(xué)實踐中得到廣泛的應(yīng)用。在實際工作中，常常會遇到酸堿混合組分的分析問題，如氫氧化鈉物質(zhì)中常常含有一定量的碳酸鈉、純堿中含有一定量的碳酸氫鈉、氯化銨中會有一定量的游離鹽酸（HCl）、硫酸銨中會有一定量的游離硫酸（H2SO4），為了檢驗堿和銨鹽的質(zhì)量等級，需要對混合酸堿物中的各組分進(jìn)行測定；在氟化氫、四氟化硅的生產(chǎn)過程中，會有硫酸和氫氟酸混合酸體系，分析其各組分的含量，為生產(chǎn)工藝控制提供有效的保障。在同一個試樣中測定各組分的含量，用標(biāo)準(zhǔn)酸或標(biāo)準(zhǔn)堿溶液進(jìn)行滴定分析，根據(jù)滴定過程中的pH值的變化情況，選用兩種不同的指示劑分別指示終點，這種方法稱為雙指示劑法。該法快速、簡捷，已廣泛應(yīng)用于酸堿混合物的分析與測定。

[新授]課題：堿混合物測定的方案設(shè)計

[提出任務(wù)]教師提出本課題的學(xué)習(xí)任務(wù)：

1、工業(yè)混合堿測定的基本原理是什么？

2、堿度常用的表示方法有哪些?

3、氫氧化鈉與碳酸鈉混合堿的測定操作方法。[任務(wù)探索]

1、工業(yè)混合堿測定的基本原理是什么？ 根據(jù)有關(guān)學(xué)習(xí)資料，思考下列問題：

(1)工業(yè)混合堿主要是由什么物質(zhì)組成的？用什么滴定法測定混合堿的組分及其含量？

(2)用什么試劑作指示劑？各指示劑的變色點和變色范圍是多少？

(3)測定Na2CO3與NaOH或Na2CO3與NaHCO3的混合堿時，第一和第二化學(xué)計量點的pH值各是多少？ [歸納]引導(dǎo)學(xué)生歸納總結(jié)出混合堿測定的基本原理

工業(yè)堿是Na2CO3與NaOH或Na2CO3與NaHCO3的混合物，采用雙指示劑法酸堿滴定進(jìn)行分析，測定其組分及各組分的含量。

在混合堿的試液中加入酚酞指示劑（變色范圍8.0～10.0），用HCl標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至溶液呈微紅色（近無色）。此時溶液的pH值為8.31，試液中所含NaOH完全被中和，Na2CO3也被滴定成NaHCO3，反應(yīng)如下：

NaOH + HCl = NaCl + H2O Na2CO3 + HCl = NaCl + NaHCO3

設(shè)滴定體積為V1ml。再加入甲基橙指示劑（變色范圍3.1～4.4），繼續(xù)用HCl標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至溶液由黃色變?yōu)槌壬礊榻K點。此時溶液的pH值為3.9，試液中所含NaHCO3被中和成H2CO3，反應(yīng)為：

NaHCO3 + HCl = NaCl + H2O + CO2↑

設(shè)此時消耗HCl標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積為V2ml。根據(jù)V1和V2可以判斷出混合堿的組成。

設(shè)試液的體積為Vml。

當(dāng)V1>V2時，試液為NaOH和Na2CO3的混合物，NaOH和Na2CO3的含量（以質(zhì)量濃度g?L-1表示）可由下式計算：

?NOH?a(V1?V2)CHClMNaOH

V2V2CHClMNa2CO32V?Na2CO3?

當(dāng)V1

?Na2CO3?2V1CHClMNa2CO32V

?NHCO?a3(V2?V1)CHClMNaHCO3V

[學(xué)生回答](1)工業(yè)混合堿主要是由什么物質(zhì)成的？用什么滴定法測定混合堿的組分和含量？

工業(yè)堿通常是Na2CO3與NaOH或Na2CO3與NaHCO3的混合物，采用雙指示劑法酸堿滴定進(jìn)行分析，測定其組分及各組分的含量。(2)用什么試劑作指示劑？各指示劑的變色點和變色范圍是多少？

[講解]用酚酞和甲基橙作指示劑。酚酞的變色點的pH值為9.1，變色范圍是pH值為8.0～10.0，甲基橙的變色點的pH值為4.0，變色范圍是pH值為3.1～4.4(3)測定Na2CO3與NaOH或Na2CO3與NaHCO3的混合堿時，第一和第二化學(xué)計量點的pH值各是多少？

[講解] 測定混合堿時，溶液中有Na2CO3與NaOH或Na2CO3與NaHCO3的存在，當(dāng)?shù)味ㄟ_(dá)到第一化學(xué)計量點時，溶液為NaHCO3和NaCl的混合液，溶液的pH值主要由NaHCO3控制，可根據(jù)酸式鹽溶液計算第一化學(xué)計量點的pH值，其值為8.31；當(dāng)?shù)味ㄟ_(dá)到第二化學(xué)計量點時，溶液為飽和H2CO3和NaCl的混合液，溶液的pH值主要由飽和H2CO3控制，飽和H2CO3溶液的濃度一般為0.04mol·L-1，可根據(jù)多元酸溶液計算第二化學(xué)計量點的pH值，其值為4.0。

2、堿度常用的表示方法有哪些? [講解] 堿度常用的表示方法有Na2O、NaOH、Na2CO3、NaHCO3等物質(zhì)含量或濃度來表示物質(zhì)的堿度。

3、氫氧化鈉與碳酸鈉混合堿的測定操作方法。[閱讀] 指導(dǎo)學(xué)生閱讀實驗報告中的實驗步驟。[討論] 四個學(xué)生一組，歸納測定操作要點。

[提問] 學(xué)生代表小組發(fā)言：氫氧化鈉與碳酸鈉混合堿的測定步驟(1)0.1mol/L HCl標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制及標(biāo)定

準(zhǔn)確稱取Na2B4O7·10H2O三份，每份0.4g～0.6g，置于250mL錐形瓶中，各加蒸餾水60mL，使之溶解，加甲基紅2滴，用欲標(biāo)定的HCl溶液滴定，近終點時，應(yīng)逐滴或半滴加入，直至被滴定的溶液由黃色恰變成淺紅色為終點。記錄消耗的HCl溶液體積，重復(fù)上述操作，滴定其余兩份基準(zhǔn)物質(zhì)。

根據(jù)Na2B4O7·10H2O的質(zhì)量m和消耗HCl溶液的體積VHCl，按下式計算HCl標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度CHCl，CHCl?2m(Na2B4O7?10H2O)?1000M(Na2B4O7?10H2O)?VHCl

式中MNa2B4O7·10H2O-------硼砂的摩爾質(zhì)量(381.4)。(2)氫氧化鈉與碳酸鈉混合堿的測定

用移液管移取

10.00mL試液

(3)數(shù)據(jù)記錄與處理及結(jié)論 a、HCl標(biāo)準(zhǔn)溶液的標(biāo)定

序號 Na2B4O7·10H2O質(zhì)量/g V（HCl）/ml C（HCl）/（mol·L）平均值 RSD 1 2 3

1250mL錐形瓶 HCl 滴定

1d 酚酞

HCl標(biāo)液滴至恰好紅色消失

準(zhǔn)確記錄HCl體積V2平行三次 黃色變橙色

再加入1d甲基橙

記下V1 結(jié)論：HCl標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度c=

95%置信度下平均值的置信區(qū)間c=x?2.5s b、酸堿混合物的測定 酸堿混合物中堿1的含量

序號 混合堿體積/ml V/ml ρ1/ g?L ρ1平均值 RSD 1 2 3

1-1注：當(dāng)分析試液為NaOH和Na2CO3的混合溶液時，V1=V1-V

2當(dāng)分析試液為Na2CO3和NaHCO3的混合溶液時，V1=V結(jié)論：混合堿中堿1的濃度ρ=

95%置信度下平均值的置信區(qū)間ρ=x?2.5s 酸堿混合物中堿2的含量

序號 混合堿體積/ml V/ml ρ1/ g?L ρ1平均值 RSD 1 2 3

2-1注：當(dāng)分析試液為NaOH和Na2CO3的混合溶液時，V2=V2

當(dāng)分析試液為Na2CO3和NaHCO3的混合溶液時，V2=V2-V1

結(jié)論：混合堿中堿2的濃度ρ=

95%置信度下平均值的置信區(qū)間ρ=x?2.5s

[小結(jié)] 采用雙指示劑法用HCl標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定測定混合堿的組分及各組分的含量是國際國內(nèi)廣泛應(yīng)用的快速、簡捷的分析方法。在混合堿溶液中，先以酚酞為指示劑，用HCl標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定混合堿溶液由紅色變呈微紅色（近無色）為終點，記錄HCl標(biāo)準(zhǔn)溶液消耗體積V1，再以甲基橙為指示劑，用HCl標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定混合堿溶液由黃色變呈橙色為終點，記錄此時HCl標(biāo)準(zhǔn)溶液消耗體積V2，根據(jù)V1和V2的大小，判定混合堿的組成并計算各組分的含量。[演示] 學(xué)生代表上講臺演示測定操作過程，其余學(xué)生觀察其操作。[講解、示范] 教師點評學(xué)生演示操作過程的正誤之處并講解示范操作要點:(1)取樣的方法：取樣量25.00mL，取樣儀器:移液管(2)移液管的操作：吸液、調(diào)整液面的方法、放液

(3)酸式滴定管的操作：左手的用法，防止管尖和兩側(cè)漏液

(4)終點判斷：以酚酞為指示劑時，待滴定至溶液紅色消失又即可返紅時即接近終點，要注意每加一滴HCl標(biāo)準(zhǔn)溶液都需充分搖勻，最好每滴間隔2-3s，滴到微紅色剛好消失即為終點；以甲基橙為指示劑時，待滴定至溶液橙色出現(xiàn)又即可返黃時即接近終點，要注意每加一滴HCl標(biāo)準(zhǔn)溶液都需充分搖勻，最好每滴間隔2-3s，滴到橙紅色剛好出現(xiàn)即為終點 [講解注意事項]

1、HCl標(biāo)準(zhǔn)溶液使用前必須再次搖勻；

2、實驗前檢查活塞是否靈活或漏水，必要時重新涂油。注意手握活塞的正確姿勢，手心不可頂活塞；

3、混合堿系NaOH和Na2CO3組成時，酚酞指示劑可適當(dāng)多加幾滴，否則常因滴定不完全使NaOH的測定結(jié)果偏低，Na2CO3的測定結(jié)果偏高。

4、最好用NaHCO3的酚酞溶液（濃度相當(dāng)）作對照。在達(dá)到第一終點前，不要因為滴定速度過快，造成溶液中HCl局部過濃，引起CO2的損失，帶來較大的誤差，滴定速度也不能太慢，搖動要均勻。

5、近終點時，一定要充分搖動，以防形成CO2的過飽和溶液而使終點提前到達(dá)。

6、酚酞從紅色變?yōu)闊o色，但肉眼觀察這種變化不靈敏，因此滴到微帶淺紅色時為終點。每次滴定條件盡量掌握一致。[學(xué)生分組] 以每個同學(xué)一組分為24～30個小組

[學(xué)生實訓(xùn)] 測定混合堿的組成及其含量并完成實驗報告。教師巡回指導(dǎo) [交流討論] 引導(dǎo)學(xué)生說出自己完成任務(wù)的情況(成功或失誤之處)[試驗小結(jié)] 教師小結(jié)本課題實驗完成情況。

1、電子分析天平的正確使用，藥勺的正確握法，加固體樣品的正確加入方式；

2、酸式滴定管的規(guī)范操作：克服漏液的現(xiàn)象；

3、近終點時顏色判斷和操作：近終點，慢滴多搖，控制半滴操作；

4、分析誤差產(chǎn)生原因：滴定速度控制不當(dāng)；終點判斷不準(zhǔn)確；讀數(shù)誤差；酸式滴定管管尖和兩側(cè)漏液等因素。

[布置作業(yè)]：根據(jù)你的測定，我們本地區(qū)的燒堿或純堿指標(biāo)屬于那個等級？(寫出測定實驗操作步驟、實驗數(shù)據(jù)和測定結(jié)果)