第一篇:考試,課件
10月11日,網(wǎng)友“后來”在自己的QQ空間曬出了溫馨的一幕
并配上了帥帥的軍人男友給她剝栗子的幾張照片。這條信息一經(jīng)發(fā)布,立即在網(wǎng)上引來點贊和驚嘆一片。這本來是件很觸動人們內(nèi)心最柔軟的地方、非常溫馨的一件事。展示了軍人不僅是錚錚鐵漢,更富有俠骨柔情。對展示軍人形象、展現(xiàn)軍人風(fēng)采,非常正面。
然而,這幾天,有人在網(wǎng)上造謠傳謠,說這位軍人男友“被總參查處通報,所在部隊全面清查手機,部隊黨委做檢查”等;更有人直接給這位軍人編造了幾個具體單位,造謠說這位軍人“受到了除名處分”,所在單位領(lǐng)導(dǎo)從師、團到營、連全部受到了責(zé)令轉(zhuǎn)業(yè)、各種行政處分等嚴厲處理,等等。
這些謠言在微博、微信群、朋友圈被大量傳播。引來許多不明真相的網(wǎng)友對軍隊領(lǐng)導(dǎo)機關(guān)、甚至是整個軍隊的質(zhì)疑和語言攻擊。
發(fā)現(xiàn)這一網(wǎng)絡(luò)信息后,筆者迅速進行了多方查證。經(jīng)詳細調(diào)查,網(wǎng)傳這位軍人所在的幾個單位、院校要不就根本不存在,要不就沒有這位軍人;軍委有關(guān)部門更是從來沒有發(fā)出過類似通報;所有網(wǎng)傳涉及此事的部隊,也沒有作出過類似處理決定。
經(jīng)過幾天仔細摸排查找,從點滴信息中終于找到了這位當事軍人。經(jīng)逐級核實,這位軍人所在單位的上級機關(guān)沒有發(fā)出過處理通報,這位軍人所在單位沒有就此事查處過這位軍人、沒有清查過手機,無論是這位軍人還是他的各級領(lǐng)導(dǎo)沒有一人因此受到過批評或處分。經(jīng)這位軍人所在單位調(diào)查核實,之前他與女友視頻是在業(yè)余時間著便裝進行的、剝栗子是利用個人休息時間進行的,目前沒有發(fā)現(xiàn)該軍人有其他違反部隊規(guī)定的問題。該戰(zhàn)士女友發(fā)現(xiàn)自己空間的信息被人轉(zhuǎn)發(fā)造謠后,立即進行了刪除并向所在地警方報案。
造謠動動嘴,辟謠跑斷腿。因為這一網(wǎng)絡(luò)謠言,展開了大量調(diào)查核實工作,牽扯了許多人力、精力;這些謠言的廣泛傳播,也給軍隊和軍人形象造成了很大損害。
以上是新聞案例 可以做成三張PPT(我想如果可以的話)將事情兩次轉(zhuǎn)折分開。以下是我想的問題和探究 問題1:為什么會有人去造謠?
答:從看笑話的心態(tài)期待他人發(fā)生悲劇以此來達到內(nèi)心卑劣的滿足感
制造熱點炒作熱度從中獲益 問題2:怎樣看待這種造謠行為?
答:造謠動動嘴,辟謠跑斷腿。因為這一網(wǎng)絡(luò)謠言,展開了大量調(diào)查核實工作,牽扯了許多人力、精力;這些謠言的廣泛傳播,也給軍隊和軍人形象造成了很大損害。利用互聯(lián)網(wǎng)編造傳播涉軍謠言是違法甚至犯罪行為。問題3:這個辟謠出來之后會對新聞界的發(fā)展產(chǎn)生什么影響?
答:網(wǎng)友紛紛表示“以后的新聞?wù)娴牟恢涝摬辉撓嘈帕恕保侣勈崟档腿藗儗π侣剤蟮赖男湃味?,阻礙新聞業(yè)發(fā)展,違背了新聞的真實性原則。
第二篇:細胞工程考試課件
第一章
緒論
1細胞工程:應(yīng)用細胞生物學(xué)和分子生物學(xué)的理論、方法和技術(shù),按人的設(shè)計,有計劃地大規(guī)模培養(yǎng)組織或細胞以獲得生物產(chǎn)品,或改變細胞的遺傳物質(zhì)以產(chǎn)生新的物種或品系。
2生物工程:也稱生物工藝學(xué),一般稱為生物技術(shù).是以生命科學(xué)為基礎(chǔ),利用生物體系和工程學(xué)原理來獲得生物制品和創(chuàng)造新物種的一門綜合技術(shù)。
生物工程的發(fā)展歷史
傳統(tǒng)生物工程:利用非純種微生物自然發(fā)酵工藝為標志的生物技術(shù),如釀酒。
1857,Pasteur L發(fā)現(xiàn)發(fā)酵是微生物作用的結(jié)果,而后形成的采用純種微生物的發(fā)酵工藝。
近代生物工程:以抗生素工業(yè)的興起為標志。
現(xiàn)代生物工程:1973基因工程和1975年單克隆抗體技術(shù)建立為標志的生物工藝。
生物工程的組成
一、發(fā)酵工程
二、酶工程
三、細胞工程
四、基因工程
五、蛋白質(zhì)工程
六、生化工程 一,發(fā)酵工程
1現(xiàn)代發(fā)酵工程主要指利用微生物、包括利用DNA重組技術(shù)改造的微生物在全自動發(fā)酵罐或生物反應(yīng)器中生產(chǎn)某種商品的技術(shù)。
現(xiàn)代發(fā)酵工程是生物代謝、微生物生長動力學(xué)、大型發(fā)酵罐或生物反應(yīng)器研制、化工原理等密切結(jié)合和應(yīng)用的結(jié)果。
2一般發(fā)酵工程包括以下基本步驟:(1)菌種選育;
(2)細胞大規(guī)模培養(yǎng)即發(fā)酵過程;(3)生產(chǎn)活性產(chǎn)物的誘導(dǎo);(4)菌體及產(chǎn)物的收獲
3發(fā)酵工程的產(chǎn)品范圍非常廣泛。
從食品、藥品、精細化工產(chǎn)品到許多工業(yè)用原料等等,生物可降解塑料PHB等
四,基因工程
1基因工程是指在微觀領(lǐng)域(分子水平)中,根據(jù)分子生物學(xué)和遺傳學(xué)原理,設(shè)計并實施一項把一個生物體中有用的目的DNA(遺傳信息)轉(zhuǎn)入另一個生物體中,使后者獲得新的需要的遺傳性狀或表達所需要的產(chǎn)物,最終實現(xiàn)該技術(shù)的商業(yè)價值。2 稀少珍貴的蛋白質(zhì)藥物
1982年,美國食品與藥物管理局批準了首例基因工程產(chǎn)品——人胰島素投放市場——它標志了基因工程產(chǎn)品正式進入到商業(yè)化階段。
人生長激素、表皮生長因子、腫瘤壞死因子、a-干擾素、纖維素酶、抗血友病因子、紅細胞生成素、尿激酶原、白細胞介素-
2、集落刺激因子、乙肝疫苗等等 3畜牧業(yè)中的應(yīng)用
動物疫苗、生長激素等
例:從轉(zhuǎn)基因羊的羊奶中提取出治療心臟病的藥物tPA 4種植業(yè)中的應(yīng)用 用攜帶外源基因的農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒轉(zhuǎn)化植物原生質(zhì)體,使外源DNA與植物染色體DNA整合,通過原生質(zhì)體的培養(yǎng)分化成愈傷組織,最后發(fā)育成具有新性狀的完整植株—轉(zhuǎn)基因植物 抗化學(xué)除草劑基因,轉(zhuǎn)基因西紅柿,固氮酶基因??
環(huán)境保護等等
五,蛋白質(zhì)工程:利用生物技術(shù)手段,對蛋白質(zhì)的DNA編碼序列進行有目的的改造并分離、純化蛋白質(zhì),從而獲得自然界沒有的具有優(yōu)良性質(zhì)或適用于工業(yè)生產(chǎn)條件的全新蛋白質(zhì)技術(shù)。
蛋白質(zhì)工程的主要步驟通常包括:
(1)從生物體中分離純化目的蛋白;
(2)測定其氨基酸序列;
(3)借助核磁共振和X射線晶體衍射等手段,盡可能地了解蛋白質(zhì)的二維重組和三維晶體結(jié)構(gòu);(4)設(shè)計各種處理條件,了解蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)變化,包括折疊與去折疊等對其活性與功能的影響;
(5)設(shè)計編碼該蛋白的基因改造方案,如點突變;(6)分離、純化新蛋白,功能檢測后投入實際使用。
六,生化工程
生物化學(xué)工程是由生物科學(xué)與化學(xué)工程相結(jié)合的交叉學(xué)科,主要研究將生物技術(shù)的實驗室成果轉(zhuǎn)化為生產(chǎn)力過程中的帶有共性的工程技術(shù)問題。
細胞工程的分類
1、根據(jù)研究對象劃分:微生物細胞工程、植物細胞工程、動物細胞工程。
2、根據(jù)研究水平劃分:組織水平、細胞水平、細胞器水平、基因水平。
細胞工程主要研究內(nèi)容
1)植物細胞和組織培養(yǎng)技術(shù)
2)動物細胞和組織培養(yǎng)技術(shù)
3)細胞融合技術(shù)(體細胞雜交技術(shù))
4)細胞器移植技術(shù)
5)染色體工程技術(shù)
6)胚胎工程技術(shù)
第三章
植物組織培養(yǎng)
第一節(jié) 植物組織培養(yǎng)
植物組織培養(yǎng)的基本概念
植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用 1.無性系快速繁殖
2.去除病毒、真菌和細菌等病毒 3.培育新品種的得力手段 4.種質(zhì)資源的保存 5.次生代謝物的生產(chǎn)
植物組織培養(yǎng)的基本流程
脫分化:一個成熟細胞轉(zhuǎn)變?yōu)榉稚鸂顟B(tài)的過程即形成愈傷組織叫脫分化。愈傷組織:在人工培養(yǎng)基上由外植體長出來的一團無序生長的薄壁細胞。再分化:愈傷組織內(nèi)的細胞具有異質(zhì)性,能重新分化成各種類型的組織細胞。
植物組織培養(yǎng)的理論依據(jù)(1)細胞全能性
全能性:任何有完整的細胞核的植物細胞擁有形成一個完整植株所必需的遺傳信息,理論上都能發(fā)育成為一棵植株。
植物組織培養(yǎng)是建立在細胞具有全能性的理論基礎(chǔ)上的,(2)細胞分化
在體內(nèi)維管組織是高度分化的部分,主要受生長素和蔗糖的影響,木質(zhì)部的分化與細胞分裂素、赤霉素和細胞分裂相關(guān)。
在體外的培養(yǎng)細胞通過莖芽的分化或細胞胚胎發(fā)生能再生長成為完整的植株
第二節(jié) 植物細胞培養(yǎng)
1所謂細胞培養(yǎng),是指在離體條件下,將愈傷組織或其他易分散的組織置于液體培養(yǎng)基中進行振蕩培養(yǎng),得到分散成游離的懸浮細胞,通過繼代培養(yǎng)使細胞增殖,從而獲得大量細胞群體的一種技術(shù).2.與植物組織培養(yǎng)的區(qū)別
細胞培養(yǎng)是指動植物細胞在體外條件下的存活或生長,此時細胞不在生長成組織.對于植物,組織培養(yǎng)主要是指我們常用的快繁技術(shù),而細胞培養(yǎng)主要有以生產(chǎn)次生代謝產(chǎn)物為目的的大規(guī)模細胞培養(yǎng)技術(shù).植物單細胞培養(yǎng)技術(shù) 一.單細胞的分離
1.由植物器官分離單細胞
(1)機械法
主要通過機械磨碎.切割植物體從而獲得游離的單細胞.
(2)酶解法
這種方法是目前最為有效的一種獲得單細胞的方法,主要是利用果膠酶的處理,獲得大量的細胞. 2.由愈傷組織獲得單細胞
該方法通過愈傷組織培養(yǎng)獲得愈傷組織,并通過培養(yǎng)使愈傷組織增殖.由于愈傷組織細胞之間的結(jié)構(gòu)非常疏散,因此可以通過高頻率振動使細胞脫落,從而獲得單細胞.
二.單細胞培養(yǎng)方法
(1)平板培養(yǎng)法:指將制備好的單細胞,按照一定的密度,接種在約1mm厚的薄層固體培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)的方法.
(2)看護培養(yǎng)法:
指利用生長的愈傷組織所產(chǎn)生的物質(zhì)來培養(yǎng)單細胞的方法
(3)飼養(yǎng)層培養(yǎng)法
指用處理過的無活性的或者分裂很慢.不具備分裂代謝能力的細胞來飼養(yǎng)所需培養(yǎng)的細胞,使其分裂和生長.
(4)液體淺層靜置培養(yǎng)法
將一定密度的懸浮細胞放在培養(yǎng)皿中形成一淺薄層,封口靜止培養(yǎng).
(5)細胞懸浮培養(yǎng)法
主要指將細胞接種于液體培養(yǎng)基中,在保持良好的分散狀態(tài)情況下進行培養(yǎng)
懸浮細胞同步化的方法
(一)物理方法
1、體積選擇法
2、冷處理法
(二)化學(xué)方法
1、饑餓法
2、抑制法
3、有絲分裂法
細胞的保存
1.繼代培養(yǎng)保存法
每隔1—2周換液進行一次繼代培養(yǎng) 2.低溫保存法
5—10℃培養(yǎng),每10天換液 3.冰凍保存
原生質(zhì)體的分離和培養(yǎng)
原生質(zhì)體定義:植物除去細胞壁分離剝下的部分 來源:葉片,根尖,愈傷組織.一,原生質(zhì)體的分離
1)機械法:在細胞質(zhì)壁分離的狀態(tài)下,用利刀切割
2)酶解法
二,.原生質(zhì)體鑒定與活力測定
(一)原生質(zhì)體鑒定
1.低滲爆破法
2.熒光染色法
(二)原生質(zhì)體活力測定
1.滲透壓法
2.氧電極法
3.二乙酸熒光法(FDA)三,原生質(zhì)體培養(yǎng)方法
1.液體培養(yǎng)法
2.固體培養(yǎng)法
3.雙層培養(yǎng)法
在瓊脂培養(yǎng)基上部加入一薄層液體原生質(zhì)體培養(yǎng)液培養(yǎng)原生質(zhì)體
四,原生質(zhì)體的發(fā)育和植株的再生
1.細胞壁再生
2.分裂
3.愈傷組織的形成 4.植株再生
3.3植物器官培養(yǎng)
植物器官培養(yǎng):指將植株上的各種器官從母體上分離出來,放在無菌的人工環(huán)境中讓其進一步發(fā)育,最終長成幼苗的過程。主要包括:毛狀根,芽,體細胞胚等
3.31植物脫毒培養(yǎng)技術(shù)
如何在一個已經(jīng)受感染的群體中獲得無病植株?
a.種子繁殖
b.消除病原菌 消除病原菌的方法
a.熱處理:熱水或熱空氣。b.莖尖培養(yǎng)。c.愈傷組織培養(yǎng)。
3.32 體細胞胚胎發(fā)生
體細胞胚:在離體或活體條件下,由除受精卵之外的體細胞形成的胚。體細胞胚胎發(fā)生的過程
1、取植物的一部分組織(如根、莖、葉的切段或胚等),用組織培養(yǎng)的方法,分裂產(chǎn)生愈傷組織,這個階段一般采用固體培養(yǎng)方法。通常所采用的脫分化試劑是2,4-D,有的植物除2,4-D以外,還需要附加少量的細胞分裂素。至于2,4-D的濃度,則因植物而異,一般宜采用較高的濃度。外植體的年齡也很重要,一般幼齡的較容易產(chǎn)生愈傷組織。
2、用所得的愈傷組織進行懸浮培養(yǎng),使細胞分散。
3、將懸浮培養(yǎng)物倒在沒有植物激素的固體平面培養(yǎng)基上,再進行固體培養(yǎng),其中有些胚性細胞就有可能發(fā)生體細胞胚。
3.33 人工種子
利用人工種皮包被體細胞胚可以制造人工種子,用以繁殖遺傳工程植物,自交不親合植物,稀有植物,遠緣雜交種等
人工種皮:藻酸鈉 人工種皮的選擇: 1)對所要包埋的胚乳無傷害。
2)有足夠的柔軟性,可以保護胚乳,并允許其發(fā)育.3)具有一定的硬度,避免運輸.操作過程中的傷害.4)具有穿透性,傳遞細胞生長所需的營養(yǎng);并能容納其他附加成分。5)可以用現(xiàn)有的溫室或農(nóng)機機械進行播種。
海藻酸鹽具有成膠容易、操作條件溫和、使用方便、毒性極低、成本低廉等特點。
人工種子的包埋方法
1.復(fù)合凝聚:兩種帶相反電荷的電解質(zhì)在水中相互作用形成多聚體包被溶液.2.界面聚合:在兩相界面處因溶解度低而成膜.3.離子交換凝膠:經(jīng)過離子交換而形成絡(luò)合物成為凝膠.4.變溫凝膠:高溫下為液體,低溫下為固體凝膠。
3.4植物細胞的生物反應(yīng)器大規(guī)模培養(yǎng)
生物反應(yīng)器培養(yǎng)(培養(yǎng)方法和各自特點)
1、分批培養(yǎng):一次性添加培養(yǎng)液培養(yǎng),期間不更換培養(yǎng)液。是一種封閉式的培養(yǎng)體系。
2、半連續(xù)培養(yǎng):在培養(yǎng)過程中將部分培養(yǎng)液和新鮮培養(yǎng)液進行交換的培養(yǎng)方法。
3、連續(xù)培養(yǎng)法:在培養(yǎng)過程中不斷抽取懸浮培養(yǎng)物并注入等量新鮮培養(yǎng)液,使培養(yǎng)物不斷補充并保持其恒定體積的培養(yǎng)。
目前生物反應(yīng)器主要分為以下三種:
機械攪拌式、鼓泡式、氣升循環(huán)式
植物細胞兩相培養(yǎng)技術(shù)
如何使細胞內(nèi)的次生代謝產(chǎn)物分泌出來并加以提取分離是降低成本、進行連續(xù)培養(yǎng)的關(guān)鍵。兩相培養(yǎng)技術(shù)是在培養(yǎng)體系中加入水溶性或脂溶性的有機物或者具有吸附作用的多聚化合物,使培養(yǎng)體系形成上下兩相,細胞在水相中生長,合成的次生代謝產(chǎn)物分泌出來后轉(zhuǎn)移至有機相中。
可以減少產(chǎn)物的反饋抑制作用從而提高產(chǎn)物含量;通過有機相的不斷回收及循環(huán)使用實現(xiàn)培養(yǎng)的連續(xù)化。
植物細胞固定化方法
1、海藻酸鹽固定化
2、卡拉膠固定化
3、瓊脂糖固定化
4、瓊脂固定化
植物細胞固定化生物反應(yīng)器培養(yǎng)
1、流化床生物反應(yīng)器
2、填充床生物反應(yīng)器
3、膜生物反應(yīng)器
第四章
動物組織培養(yǎng)
1、連接方式:
(1)緊密連接
(2)間隙連接:質(zhì)膜間有2—3nm的間隙
(3)隔壁連接:20--30nm的間隔,有橫隔
(4)中間連接: 20--30nm無橫隔的透明區(qū)
(5)橋粒連接
動物細胞與組織培養(yǎng)的定義
定義:是從動物體內(nèi)取出細胞或組織,模擬體內(nèi)的生理環(huán)境,在無菌、適溫和豐富的營養(yǎng)條件下,使離體細胞或組織生存、生長并維持結(jié)構(gòu)和功能的一門技術(shù) 體外培養(yǎng)分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)
原代培養(yǎng)指將機體取出的細胞或組織進行實效培養(yǎng)的過程
傳代培養(yǎng):從原代培養(yǎng)的細胞繼續(xù)轉(zhuǎn)接培養(yǎng)
體外培養(yǎng)的細胞根據(jù)生長方式分為
1、貼附型細胞
(1)成纖維細胞型細胞
(2)上皮型細胞(3)游走型細胞
(4)多形型細胞
2、非帖附型細胞
動物細胞體外培養(yǎng)的特點
(1)哺乳動物細胞只有附著在固體或半固體的表面才能生長
(2)動物細胞對營養(yǎng)要求更加苛刻
(3)對于培養(yǎng)環(huán)境的適應(yīng)性更差,對環(huán)境極其敏感
(4)動物細胞生長緩慢,培養(yǎng)時間較長
(5)動物細胞培養(yǎng)還需要防治污染問題 培養(yǎng)工具:無毒塑料制成的培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿
載體:空心纖維和微珠 培養(yǎng)條件
(1)溫度:最適溫度37℃
(2)PH:最適PH7.2—7.4
(3)氣體
(4)營養(yǎng):①天然培養(yǎng)基
②合成培養(yǎng)基 ③無血清培養(yǎng)基
④動物細胞培養(yǎng)必需的溶液
動物細胞培養(yǎng)必需的溶液
1、平衡鹽水
2、培養(yǎng)基PH調(diào)整液
3、細胞消化液
4、抗生素溶液
培養(yǎng)液中加入適量的抗生素,可以預(yù)防由于操作不慎而產(chǎn)生的微生物污染。
青、鏈霉素:青霉素能抑制細菌細胞壁的合成;鏈霉素能抑制細菌蛋白質(zhì)的合成.卡那霉素:卡那霉素也能抑制細菌蛋白質(zhì)的合成.制霉菌素:干擾細菌細胞質(zhì)膜的合成.體外培養(yǎng)細胞的生長與增殖過程
(1)原代培養(yǎng)期:1—4周(2)傳代期:10—50次
(3)衰退期
動物細胞培養(yǎng)的傳統(tǒng)方法
(1)懸滴培養(yǎng)法
(2)旋轉(zhuǎn)管培養(yǎng)法(3)灌注小室培養(yǎng)法
(4)培養(yǎng)瓶培養(yǎng)法(5)培養(yǎng)板培養(yǎng)法
生長特
①游離期
②吸附期:平均時間5-20分鐘
③繁殖期:接觸抑制
④退化期:輪廓變強,細胞內(nèi)有膨脹的線粒體顆粒堆積
動物細胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)
(1)氣升式深層培養(yǎng)系統(tǒng)
(2)懸浮培養(yǎng)技術(shù)
(3)微載體培養(yǎng)系統(tǒng)
(4)多孔載體培養(yǎng)
(5)微囊化培養(yǎng)技術(shù)
(6)中空纖維培養(yǎng)法
組織工程是應(yīng)用細胞生物學(xué)和工程學(xué)原理,將人體某部分的組織細胞種植和吸附在一種生物材料的支架上進行人工培養(yǎng)繁殖、擴增,然后種植到人體內(nèi)所需要的部位,從而達到器官修復(fù)或再造的治療目的的一種技術(shù)
器官培養(yǎng):取出動物器官或進一步修整成器官型植塊,將其接種到培養(yǎng)基上或培養(yǎng)液中,在適當?shù)臓I養(yǎng)、氣相、生長基質(zhì)等條件下使其存活或生長的技術(shù)
第五章
細胞融合與單克隆抗體
第一節(jié)
細胞融合 定義:又稱體細胞雜交.指用自然或人工方法,使兩個或更多個不同來源的原生質(zhì)體相融合并使之分化再生、形成新物種或新品種的技術(shù)。細胞融合的意義
1、用于遺傳性狀的改良。
2、克服遠緣雜交中的不親和障礙。
3、可以更加廣泛的組合起各種植物的優(yōu)良遺傳性狀,從而培育出理想的新品種。
細胞融合技術(shù)
為了使制備好的原生質(zhì)體或細胞能融合在一起,選擇適宜有效的誘導(dǎo)融合方法很重要。誘導(dǎo)融合方法可分為:
1、仙臺病毒法
2、PEG(聚乙二醇)誘導(dǎo)法
3、電融合誘導(dǎo)法
一,生物法——仙臺病毒法
仙臺病毒也稱日本血凝病毒,是RNA病毒,多呈顆粒狀,由于被感染細胞表面發(fā)生某些改變,使得這些細胞容易發(fā)生融合,甚至處死的仙臺病毒也具有促進細胞融合的作用。
仙臺病毒具有促使凝結(jié)的細胞發(fā)生融合的能力,這是因為各種能被其作用的細胞均有相應(yīng)受體的緣故?,F(xiàn)已基本知道,其促進細胞融合的有效部位在于它的膜,被超聲波打碎的病毒膜片仍具有促進細胞融合的功能。
病毒促使細胞融合的主要步驟如下
1、兩個原生質(zhì)體或細胞在病毒黏結(jié)作用下彼 此靠近。
2、通過病毒與原生質(zhì)體或細胞膜的作用使兩個細胞膜間相互滲透,胞質(zhì)互相滲透。
3、兩個原生質(zhì)體的細胞核互相融合,融為一 體。
4、進入正常的細胞分裂途徑,分裂成含有兩種染色體的雜種子細胞。
二、PEG(聚乙二醇)誘導(dǎo)法
原理:由于PEG分子具有輕微的負極性,故可以與具有正極性基團的水、蛋白質(zhì)和碳水化合物等形成氫鍵,從而在原生質(zhì)體之間形成分子橋,其結(jié)果是使原生質(zhì)體發(fā)生粘連進而促使原生質(zhì)體的融合。
PEG誘導(dǎo)融合的特點
1)其優(yōu)點是融合成本低,勿需特殊設(shè)備;融合子產(chǎn)生的異核率較高;融合過程不受物種限制。
2)PEG可能對細胞有毒害。
三、電融合誘導(dǎo)法 電融合的基本過程:
1)細胞膜的接觸:當原生質(zhì)體置于電導(dǎo)率很低的溶液中時,電場通電后,電流即通過原生質(zhì)體而不是通過溶液,其結(jié)果是原生質(zhì)體在電場作用下極化而產(chǎn)生偶極子,從而使原生質(zhì)體緊密接觸排列成串;
2)膜的擊穿:原生質(zhì)體成串排列后,立即給予高頻直流脈沖就可以使原生質(zhì)膜擊穿,從而導(dǎo)致兩個緊密接觸的細胞融合在一起。優(yōu)點:
1、融合率高,達70%-80%,甚至100%。
2、不存在對細胞的毒害問題。
3、融合技術(shù)操作簡便。
融合細胞的選擇
1、遺傳互補篩選法
2、抗性互補篩選法
3、利用物理特性篩選法
4、利用生長特性篩選法
1、遺傳互補篩選法
利用每一親本貢獻一個功能正常等位基因,糾正另一親本的缺陷,令雜種細胞表現(xiàn)正常。
如:親本1:葉綠體缺陷型
親本2:光致死型
兩親本在光照下一種死亡,另一種呈白色,融合細胞長成植株呈綠色,并能成長。
2、抗性互補篩選法
利用親本細胞原生質(zhì)體對抗生素、除草劑及其它有毒物質(zhì)抗性差異選擇雜種細胞。
如:親本1:對放線菌素D抗性,但在MS培養(yǎng)基上不能生長
親本2:對放線菌素D很敏感,但能在MS上生長
雜種細胞能在含有放線菌素的MS培養(yǎng)基上生長,而親本和其它細胞死亡。
3、利用物理特性篩選法
根據(jù)親本的原生質(zhì)體大小、顏色、漂浮密度及電泳遷移率、形成的愈傷組織的差異篩選雜種細胞。
親本1:用異硫氰酸熒光素染色原生質(zhì)體
親本2:葉肉細胞原生質(zhì)體
在熒光顯微鏡下,親本1為紅色,親本2為綠色,雜種細胞可以區(qū)分。
4、利用生長特性篩選法
利用原生質(zhì)體對培養(yǎng)基成分要求與反應(yīng)的差異選擇雜種細胞。
例如:粉蘭煙草與朗氏煙草細胞原生質(zhì)體均需外源激素才能生長,但其融合細胞可以產(chǎn)生內(nèi)源激素,在培養(yǎng)基上不需加激素。
第二節(jié)單克隆抗體
抗原:進入動物體內(nèi)對肌體的免疫系統(tǒng)產(chǎn)生刺激作用的外源物質(zhì)。
特點:外源性、結(jié)構(gòu)性(分子表面具有穩(wěn)定的環(huán)狀結(jié)構(gòu)基團作為識別位點)、特異性(抗原與抗體的反應(yīng))。
單克隆抗體(monoclonal antibody,簡稱McAb):將能夠產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞和具有無限增殖力的骨髓瘤細胞融合在一起,形成雜交瘤細胞。雜交瘤細胞既能在體外快速生長,又能持續(xù)分泌成分單一的特異性抗體。這種單一類型的只針對某一特定抗原決定簇的抗體分子,就是單克隆抗體。
單抗的制備過程 動物免疫與親本細胞的選擇 細胞融合:淋巴細胞雜交瘤的制備 3 HAT培養(yǎng)基篩選雜交瘤細胞 雜交瘤細胞的篩選:有限稀釋法等 5 雜交瘤細胞的克隆化培養(yǎng) 6 單克隆抗體的大量制備
一、親本細胞的選擇
骨髓瘤細胞:一般不分泌抗體,能在體外無限繁殖和連續(xù)繼代培養(yǎng),且為HPRT-(次黃嘌呤鳥嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶)或TK-(胸腺嘧啶核苷激酶)。多用BALB/C 小鼠的骨髓瘤細胞。
三,HAT選擇系統(tǒng)
HAT是含一定濃度次黃嘌呤(H)、氨基喋呤(A)及胸腺嘧啶核苷(T)的一種選擇性培養(yǎng)基,其中三種成分與細胞DNA合成有關(guān)。DNA合成途徑有兩種。
雜交瘤技術(shù)中,常選用次黃嘌呤鳥嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶缺陷(HPRT-)骨髓瘤細胞或胸腺嘧啶核苷激酶缺陷型(TK-)骨髓瘤細胞為親本之一。HPRT-細胞的嘌呤只能由全合成途徑產(chǎn)生; TK-細胞的嘧啶只能由全合成途徑合成。
含氨基喋呤培養(yǎng)基抑制了細胞內(nèi)嘌呤和嘧啶的全合成途徑。
淋巴細胞具有合成DNA的兩條途徑。
雜種細胞通過互補作用獲得HRPT或TK基因,可應(yīng)用培養(yǎng)基中次黃嘌呤及胸腺嘧啶核苷,通過補救合成途徑合成DNA。
在HAT培養(yǎng)基中,HPRT-或TK-親本細胞死亡,淋巴細胞亦逐漸死亡,只有雜種細胞存活。
單抗的大規(guī)模生產(chǎn)
1、利用微載體、微囊、旋轉(zhuǎn)瓶、中空纖維培養(yǎng)系統(tǒng)等進行大規(guī)模培養(yǎng)。
2、體內(nèi)接種雜交瘤細胞,制備血清或腹水 1)實體瘤法:
對數(shù)生長期的雜交瘤細胞按1-3×107個/ml接種于小鼠背部皮下,每處注射0.2ml。待腫瘤達到一定大小后(一般10-20天)則可采血,從血清中獲得單抗含量可達1-10mg/ml,但采血量有限。2)腹水的制備
將穩(wěn)定分泌單抗的細胞株,通過擴大培養(yǎng),接種于Balb/c小鼠腹腔內(nèi),使其以腹水瘤形式在小鼠腹腔內(nèi)增殖,從而得到大量含單抗的腹水。
方法是將異十八烷或石蠟油注入Balb/c小鼠腹腔,0.5ml/只,7天后腹腔接種1×106 個 雜交瘤細胞。10-20天后即可抽取腹水,每毫升腹水中約含5-20mg單抗。
第六章
染色體工程
染色體工程: 是在細胞遺傳學(xué)研究的基礎(chǔ)上,利用已在染色體上標記的基因, 人們按照一定的設(shè)計,有計劃地消減、添加或代換同種或異種染色體,從而達到定向改變遺傳性和選育新品種的一種技術(shù)。
第一節(jié) 人工誘導(dǎo)多倍體
常見多倍體有三、四、五、六和八倍體。
多倍體產(chǎn)生的途徑
1、原種或雜種所形成的未減數(shù)配子的受精結(jié)合2、原種或雜種的合子的染色體加倍 染色體加倍的技術(shù)方法
1、生物學(xué)方法
生物學(xué)上主要通過雜交尤其是種間雜交獲得異源多倍體。
例如用雌性草魚(2n=48)與雄性三角魴(2n=48)雜交可以獲得子一代染色體數(shù)目為72的草魴雜種三倍體。
這種不同科、屬、種之間的遠源雜交、會導(dǎo)致第二極體不排出,而產(chǎn)生多倍體
2、物理學(xué)方法
溫度休克法:冷休克法(0~5度)和熱休克法(30度左右)。
定義:用略高于(冷休克)或略低于(熱休克)致死溫度來誘導(dǎo)三倍體或四倍體的方法。
關(guān)鍵:能否成功地阻止第二次成熟分裂或第二極體的排出。要達到這一點,必須考慮溫度處理的開始時間(TA)、處理持續(xù)時間(D)和處理溫度(T)這三個因素。目前對魚類使用溫度休克法誘導(dǎo)三倍體的工作報道較多。一般來說,冷水性魚類如鮭科種類應(yīng)用熱休克法、而溫水性魚類用冷休克效果較好。
優(yōu)點:廉價、易操作,是誘導(dǎo)動物細胞多倍體化的常用手段,也有利于大規(guī)模生產(chǎn)使用。
水靜壓法:采用較高的水靜壓(65kg/cm2)來抑制第二極體的放出或第一次卵裂產(chǎn)生多倍體。
這種方法誘導(dǎo)率高(一般在90%~100%)、處理時間(3~5min)短,對受精卵損傷小、成活率高。
但是,該法需要專門的設(shè)備——水壓機,成本較高,其樣品室容量有限,處理卵的量有限,所以不適于大規(guī)模生產(chǎn)的。
高鹽高堿法:高鹽高堿法是近幾年才嘗試使用的方法,采用高PH值或高鹽條件來誘導(dǎo)產(chǎn)生多倍體.3、化學(xué)方法
有些化學(xué)物質(zhì)也可以用來阻止第二極體的排出或受精卵的有絲分裂而產(chǎn)生三倍體或四倍體。
細胞松弛素B能抑制肌動蛋白聚合微絲,從而抑制細胞質(zhì)分裂,常用于動物多倍體誘導(dǎo)。
秋水仙堿可以抑制細胞分裂中紡錘絲的形成,因而抑制有絲分裂,這在植物中已經(jīng)廣泛應(yīng)用。
PEG是一種常見的細胞融合劑.用PEG處理虹鱒精子,使精子細胞融合后,再與卵子受精,也可獲得三倍體.其它藥物還有麻醉劑,如N2O、和聚乙二醇等。
缺點:化學(xué)藥品一般比較昂貴、且具有毒性,影響處理后的胚胎發(fā)育,同時加上化學(xué)藥物誘導(dǎo)產(chǎn)生的多倍體往往是在育種上沒有價值的鑲嵌體,所以化學(xué)方法在實際中的應(yīng)用不及物理方法。第二節(jié) 人工誘導(dǎo)雌、雄核發(fā)育
雌核發(fā)育:俗稱假受精,意指精子雖然正常地鉆入和激活卵子,但精子的細胞核并未參與卵球的發(fā)育,精子的染色體很快消失,胚胎的發(fā)育僅在母體遺傳的控制下進行。
赫特威氏效應(yīng):指只有在適當?shù)母咻椛鋭┝肯拢拍軐?dǎo)致精子染色體完全失活,屆時精子雖能穿入卵內(nèi),卻能起到激活卵球啟動發(fā)育的作用。
雌核發(fā)育的關(guān)鍵問題..要達到二倍體雌核發(fā)育目的,必須解決兩個最主要的問題。第一:人為地使精子的遺傳物質(zhì)失活; 第二:阻止雌性個體染色體數(shù)目的減少。
染色體轉(zhuǎn)移又稱為染色體轉(zhuǎn)導(dǎo),是指把同特定基因表達有關(guān)的染色體或染色體片段取轉(zhuǎn)入受體細胞,使之表達,并能在細胞分裂中一代一代傳遞下去的技術(shù)。
微細胞:是指含有一條或幾條染色體(即只含有一部分基因組),外有一薄層細胞質(zhì)和一個完整質(zhì)膜的核質(zhì)體
微細胞介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移法 方法:
1、微細胞的制備
用化學(xué)試劑阻斷供體細胞的有絲分裂,使染色體停滯在有絲分裂中期,從而在染色體周圍逐漸形成核膜而形成眾多的微核。然后在細胞松弛素B的作用下使微核逐漸突出細胞膜外,最后經(jīng)過離心獲得含有一個微核、四周有一薄層細胞質(zhì)和質(zhì)膜界限的微細胞
2、微細胞融合與細胞融合方法相同
第七章 胚胎工程
胚胎工程(embryo engineering)是指所有對配子和胚胎進行人為地干預(yù),使其環(huán)境因素、發(fā)育模式或局部組織功能,發(fā)生量和質(zhì)的變化的綜合技術(shù)。
胚胎工程的意義
1、發(fā)揮優(yōu)良母畜的繁殖潛力
2、促進家畜改良的速度
3、作為胚胎操作的基礎(chǔ)
4、保存遺傳資源
精子的成熟和獲能
精子離開精巢后,無使卵受精的能力,它必須經(jīng)過在附睪中成熟及在雌性生殖道內(nèi)獲能,才具有使卵受精的能力。
在附睪液和精液中存在著附睪蛋白和精清蛋白,稱為去獲能因子,精液中的精子表面被覆了這種因子。在雌性生殖道中的分泌物可以去掉這些覆蓋物而使精子質(zhì)膜、頂體發(fā)生一系列變化。
早期胚胎發(fā)育
卵裂:合子發(fā)生分裂形成無數(shù)小細胞。卵裂細胞不生長而連續(xù)分裂。主要是卵裂球的有絲分裂器與表層胞質(zhì)變化的過程。
桑椹胚:卵裂數(shù)次后,出現(xiàn)實心細胞團,形似桑椹得名 胚胎發(fā)育
胚泡:哺乳動物的胚胎處于16細胞期的桑椹期時,胚胎是球型細胞團,細胞之間形成充滿液體的腔隙,然后它們聯(lián)合形成一個大腔位于胚胎的一端,即為胚泡結(jié)構(gòu)。
囊胚:桑椹胚隨著卵裂出現(xiàn)充滿液體的囊胚腔,圍繞囊胚腔的細胞組成囊胚層
原腸胚:囊胚繼續(xù)發(fā)育、分化,形成雙胚層或三胚層的原腸胚。外層為外胚層、遷到里面的稱為內(nèi)胚層和中胚層。
7.2配子操作 采卵(方法)1輸卵管內(nèi)采卵:以鼠為例,一般為了防止干燥可將屠殺后取出的輸卵管放在平皿內(nèi),用石蠟油覆蓋,在實體顯微鏡下找到輸卵管膨大部,用磨尖的鐘表鑷子,切開輸卵管膨大部,使內(nèi)容物溢出而找到卵。
2對于稍大一些的動物可以用活體輸卵管采卵,例如將兔子的腹部正中線切開,找出子宮角和輸卵管。然后利用逆向沖卵法,自子宮輸卵管連接處插入注射針,傘部以平皿接著沖洗;或在子宮輸卵管連接處下1cm處,剪成V形小口,插入塑料細管,自傘部輸卵管腹腔口插入,將液體推入,得到?jīng)_出的卵。
3.對于屠宰場中的大中型動物,可以用注射器插入卵泡中抽取,或在手術(shù)后暴露卵巢,以注射器自卵泡中取卵。
4.對人而言通常在超數(shù)排卵步驟處理后,用B超檢測卵巢表面卵泡發(fā)育情況,然后,在腹腔后部體壁進行局部麻醉,將腹腔鏡望遠鏡插管插入,以觀察卵巢表面卵泡成熟情況,然后用套有聚四氟乙烯套管的吸卵針將卵吸出,放平皿中檢查。
體外受精(in vitro fertilization,IVF)就是將哺乳動物卵母細胞從母體取出,在體外進行精卵結(jié)合的過程。
胚胎操作
1胚胎培養(yǎng)
2胚胎移植
3胚胎保存
4胚胎分割
5胚胎嵌合 培養(yǎng)方法
即微滴培養(yǎng)法、輸卵管培養(yǎng)法和中間受體培養(yǎng)法。
微滴培養(yǎng)法是利用塑料平皿制成50μl培養(yǎng)液小滴數(shù)個,每滴加入一定數(shù)量胚胎,在上面覆以滅菌且平衡好的液體石蠟?;蛳葘⒁后w石蠟倒入平皿中,用注射器吸培養(yǎng)液和胚胎,垂直伸到平皿底部制成小滴。然后將培養(yǎng)皿放到5%CO2、95%空氣飽和濕度的37.5℃CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)所需要的時間。如果更換培養(yǎng)液,應(yīng)在實體顯微鏡下,用注射器或口控微吸管將培養(yǎng)液吸出,并加入新培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。
輸卵管培養(yǎng)法取發(fā)情動物的輸卵管洗滌后,置于培養(yǎng)皿中,培養(yǎng)液面超過輸卵管,將同種或異種動物的胚胎自傘口注入輸卵管,進行培養(yǎng)。中間受體培養(yǎng)法是指,將受精卵或早期胚胎移入同種或異種動物的胚胎,該方法沒有種屬特異性,但為了在培養(yǎng)后容易找到胚胎和對胚胎的保護,一般先用瓊脂包埋后再培養(yǎng)。同期發(fā)情
胚胎移植時,供體胚胎必須與受體子宮內(nèi)膜發(fā)育狀態(tài)高度同步化,才能獲得好效果,這個過程稱為同期發(fā)情(oestrus ynchronization),包括自然同期發(fā)情和人工同期發(fā)情。
自然同期發(fā)情即不經(jīng)任何藥物處理,依靠動物自身的性周期規(guī)律,選擇處于適當時期的母畜作為受體。
胚胎移植
移植分為手術(shù)移植和非手術(shù)移植,胚胎保存
保存的方法可以分為非冷凍保存和冷凍保存。
非冷凍保存主要有三種方法,即異種動物體內(nèi)保存法、卵和胚胎的37℃保存法和冷藏保存法。
胚胎分割的原理
根據(jù)卵裂球具有發(fā)育成為一個個體的全能性的特點,人們就考慮用這種實驗技術(shù),生產(chǎn)同卵雙胎或多胎,以加速優(yōu)良種群的繁殖。
胚胎的分割在不同時期有不同的分離培養(yǎng)方法,如卵裂球分離培養(yǎng)法、致密化前各期胚胎分割法、桑椹胚至囊胚期胚胎分割法等。
嵌合體(chimera)是指在同一個體中,由于基因型不同的細胞或組織互相接觸,且各自獨自并存的狀態(tài)
發(fā)育早期,如卵裂球甚至受精卵所形成的嵌合體稱為原發(fā)性嵌合體,而把在發(fā)育的較晚期,如胚層已經(jīng)分化,或器官開始形成后,通過組織移植或嫁接等方法所形成的部分組織或器官的嵌合,稱為次生性嵌合體
植入前胚胎嵌合體的制作方法
聚合法
第一種可以利用胚胎與胚胎聚合,即使用發(fā)生致密化后的胚胎,用酸性臺氏液(pH2.5)或0.5%鏈霉蛋白酶除去透明帶,充分洗滌后,放入含有5μg/ml植物凝集素A(PHA)的聚合液滴中。讓一個胚胎垂直位于另一胚胎之上,借機械壓力和PHA的作用,更易聚合。若放到37℃時,效果更佳,聚合完畢后,洗除PHA,繼續(xù)培養(yǎng),或進行胚胎移植。
第二種是利用卵裂球或細胞與胚胎聚合,將胚胎卵裂球解離或用其他游離的細胞,與胚胎聚合。當用一個已經(jīng)除去透明帶的胚胎時,將卵裂球或細胞在胚胎的正上方慢慢釋放,使兩者直接接觸,借助PHA的作用使之聚合。當用兩個無透明帶胚胎時,以類似“三明治”的方式,把細胞放到兩個胚胎之間,使之聚合。
第三種利用兩種細胞間聚合。聚合時,各取數(shù)個細胞或卵裂球,放入空透明帶內(nèi),用PHA使之聚合在一起,并用瓊脂包埋。通過中間受體培養(yǎng)一段時間后,觀察其發(fā)育的情況。
囊胚注射法
第八章
細胞重組與克隆技術(shù)
細胞重組:又叫細胞拆合,是指從活細胞中分離出細胞器及其組分,然后在體外一定條件下將不同細胞來源的細胞器及其組分進行重組,使其重新裝配成為具有生物活性的細胞或細胞器的一種試驗技術(shù) 細胞重組的方式:
1、胞質(zhì)體與完整細胞重組形成胞質(zhì)雜種
2、微細胞與完整細胞重組形成微細胞異核體
3、胞質(zhì)體與核體重新組合形成重組體
細胞重組技術(shù)
(一)顯微操縱術(shù)
(二)細胞分離技術(shù)
1、梯度沉降分離法
2、等密度沉降分離法
3、流式細胞儀分離法
(三)細胞破碎方法
1、超聲波破碎法
2、反復(fù)凍融法
3、化學(xué)裂解法
4、高速組織搗碎法
(四)細胞器的分離
(五)胞質(zhì)體、核體和微細胞的制備
克隆的技術(shù)方法
(一)細胞核移植
細胞核移植技術(shù)是一種利用顯微操作技術(shù)將一種動物的細胞核移入同種或異種動物的去核成熟卵內(nèi)的精細技術(shù)
(二)核移植技術(shù)一般操作程序
1、核受體細胞的準備(1)卵母細胞的來源(2)核受體細胞的去核
2、核供體細胞的準備(1)核供體細胞的要求
(2)核供體的種類:胚胎卵裂球和體細胞
3、細胞核移植
胞質(zhì)內(nèi)注射和透明帶下注射
4、激活
電刺激和化學(xué)試劑法(乙醇、DMAP)
5、重組胚的體內(nèi)或體外培養(yǎng)
6、胚胎移植
克隆動物一般制備技術(shù)
1、胚胎細胞核移植法
2、胚胎干細胞核移植
3、胎兒成纖維細胞核移植
第九章
轉(zhuǎn)基因生物與生物反應(yīng)器
幾種有效的轉(zhuǎn)基因方法
一物理方法1電穿孔法
2、微注射法
3、裸露DNA直接注射法
4、基因槍介導(dǎo)的DNA轉(zhuǎn)移 二,化學(xué)方法
1、DEAE-葡聚糖法
2、DNA-磷酸鈣沉淀法
3、脂質(zhì)體(liposome)介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移 三,生物學(xué)方法 病毒介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移
病毒載體包括:
DNA病毒載體
反轉(zhuǎn)錄病毒載體
第三篇:考試總結(jié)班會課件
考試總結(jié)班會課件
總結(jié)是社會團體、企業(yè)單位和個人在自身的某一時期、某一項目或某些工作告一段落或者全部完成后進行回顧檢查、分析評價,從而肯定成績,得到經(jīng)驗,找出差距,得出教訓(xùn)和一些規(guī)律性認識的一種書面材料。下面是小編為你帶來的考試總結(jié)班會課件,歡迎閱讀。
活動過程
1、成績狀況介紹
2、班級前十名成績
3、進步之星
4、單科狀元
5、預(yù)計本科分數(shù)線
6、一批本科, 二批本科人數(shù)的確定7、11班預(yù)計升學(xué)人數(shù)
實力打造非凡,王者決非偶然
1、這次考試和上學(xué)期期末在個人名次上發(fā)生了一些明顯的變化,原因為何?
2、我們也有不少同學(xué)在期中考試前也投入了大量精力,但未收到如期效果。幫他們分析原因。
3、個別同學(xué)大榜名次下降,自己分析原因。
進步大的同學(xué)介紹經(jīng)驗:
同學(xué)發(fā)言:
我認為學(xué)習(xí)成績體現(xiàn)的是一個人的綜合素質(zhì)。成績好不但要有一套好的學(xué)習(xí)方法,更需要有積極的樂觀的向上的態(tài)度。首先我認為學(xué)習(xí)就像馬拉松的比
賽。選手們不但要有耐力,更需要具備信心和決心。最好在每個階段設(shè)立一個小目標,因為目標大會使你感到遙不可及而放棄或者或者總是擺脫到明天。其次影響學(xué)習(xí)成績的是學(xué)習(xí)方法。
進步最大的同學(xué)發(fā)言:我認為考試進步最大的 原因是因為近期學(xué)習(xí)較為努力,上課認真聽講,回家及時完成當天的 作業(yè),保證自習(xí)紀律,有不懂的問題請教同學(xué)和老師。這次進步是由于老師和同學(xué)的 幫助,我 希望下次考得優(yōu)秀的 成績。
同學(xué)發(fā)言:本次考試進步了306名,我認為這都是離不開老師的 鼓勵,主任的 教導(dǎo)還有同學(xué)的 幫助。在我成績最差的 時候,老師鼓勵我,支持我,給我加油,要我有了重新回到200名的 信心。雖然這次沒有考回200名,但我相信在老師和同學(xué)的 幫助下,我在下回考試中一定會有更大的 進步。
同學(xué)發(fā)言:咱班這次考得非常理想,大部分同學(xué)都取得了成大成小的 進步,而我是退步最大的同學(xué)之一,這次考得如此的 慘烈是由于我個人的 一些原因造成的,耽誤了 一些課程,造成了一些知識不會,另外因為一些課外活動牽扯了時間和精力。我們很快就進入高三了,我在高三前把落下的課程補上,爭取下次下次回到我原來的位置。
最后還有個別取得進步的 同學(xué)介紹自己的 學(xué)習(xí)經(jīng)驗和方法。
請你評價班級的現(xiàn)狀,哪些地方需要改善?
班長發(fā)言:
班級在紀律、衛(wèi)生、學(xué)習(xí)各方面都有了很大的飛躍。尤其是同學(xué)在期中考試中取得了可喜的成績。但離完美的程度還有很大距離,班級的學(xué)習(xí)氛圍還要繼續(xù)去營造,同學(xué)們要克服懶散,惰性提高學(xué)習(xí)效率。班級的課堂和自習(xí)紀律還需加強。
第四篇:十八大課件考試答案90分
1.(3分)黨在社會改革方面必須依靠的最堅實的基礎(chǔ)是
A.西方模式的模仿 B.歷史經(jīng)驗的總結(jié) C.蘇聯(lián)模式的利用 D.歷史發(fā)展的判斷 你的答案: AB
C
D 得分: 3分
2.(3分)以下不屬于十八大報告中關(guān)于民生建設(shè)提出的“三個平等”的是
A.平等受到法律保護 B.平等分配經(jīng)濟利益 C.平等參與市場競爭 D.平等使用生產(chǎn)要素 你的答案: AB
C
D 得分: 3分
3.(3分)十八大報告指出,在黨的執(zhí)政過程中必須堅持以()為指導(dǎo)。
A.中國傳統(tǒng)文化 B.科學(xué)社會主義 C.民族、民權(quán)、民生 D.科學(xué)發(fā)展觀 你的答案: AB
C
D 得分: 3分
4.(3分)十八大報告提出的建設(shè)中國特色社會主義的總布局與以往相比,區(qū)別在于增加了
A.政治建設(shè) B.社會建設(shè) C.文化建設(shè) D.生態(tài)文明建設(shè) 你的答案: AB
C
D 得分: 3分
5.(3分)在廉潔制度改革過程中,著眼點應(yīng)該是
A.權(quán)力集中 B.權(quán)力保障 C.權(quán)力下放 D.權(quán)力制約 你的答案: AB
C
D 得分: 3分
6.(3分)目前,民生建設(shè)所要達到的目標是
A.人民地位得到加強 B.人民民主專政得到實現(xiàn) C.人民真正當家作主 D.人民享受發(fā)展成果 你的答案: AB
C
D 得分: 3分
7.(3分)十八大提出的“五位一體”的戰(zhàn)略布局中,其核心任務(wù)是 A.社會建設(shè) B.政治建設(shè) C.文化建設(shè) D.經(jīng)濟建設(shè) 你的答案: AB
C
D 得分: 3分
8.(3分)十八大報告提出,治理腐敗的核心方針是
A.生態(tài)文明建設(shè) B.廉潔政治建設(shè) C.社會民主建設(shè) D.核心價值觀建設(shè) 你的答案: AB
C
D 得分: 3分
9.(3分)十八大報告指出,為保證黨的發(fā)展方向必須堅持的中心是
A.如何提高黨的執(zhí)政能力 B.堅定不移地走社會主義道路 C.如何實現(xiàn)富強、文明 D.堅定不移地學(xué)習(xí)西方民主 你的答案: AB
C
D 得分: 3分
10.(3分)十八大報告強調(diào)了文化建設(shè)的作用,下列選項中對文化建設(shè)的作用描述錯誤的是
A.推動社會發(fā)展 B.教育人民 C.提高國家硬實力 D.引領(lǐng)風(fēng)尚 你的答案: AB
C
D 得分: 3分
11.(4分)十八大強調(diào)在黨的發(fā)展中必須堅持的原則有
A.認真總結(jié)改革與建設(shè)的實踐經(jīng)驗 B.堅持以科學(xué)發(fā)展觀為指導(dǎo) C.堅持與時俱進、實事求是 D.從戰(zhàn)略全局上對改革開放進行布置 你的答案: AB
C
D 得分: 4分
12.(4分)黨的十八大報告中明確提出的需要創(chuàng)新以增加動力的領(lǐng)域有
A.黨的建設(shè) B.政治協(xié)商制度 C.經(jīng)濟發(fā)展方式 D.社會管理 你的答案: AB
C
D 得分: 0分
13.(4分)亞腐敗是當前反腐敗斗爭的一個新課題,下列屬于亞腐敗現(xiàn)象的有
A.公款旅游 B.買官賣官 C.公款娛樂 D.公款吃喝 你的答案: AB
C
D 得分: 4分
14.(4分)下列選項中,能有效推進廉潔政治建設(shè)的有
A.提高干部權(quán)力 B.廉潔政治環(huán)境建設(shè) C.約束干部行為 D.廉潔政治制度建設(shè) 你的答案: AB
C
D 得分: 4分
15.(4分)目前,解決我國腐敗現(xiàn)象的主要方法有
A.以民主制約權(quán)力 B.用道德制約權(quán)力 C.以法律制約權(quán)力 D.用權(quán)力制約權(quán)力 你的答案: AB
C
D 得分: 2分
16.(4分)十八大報告精神的兩個基本點是
A.政治體制改革為基礎(chǔ) B.經(jīng)濟體制改革為保障 C.廉潔政治建設(shè)為保障 D.民生建設(shè)為基礎(chǔ) 你的答案: AB
C
D 得分: 4分
17.(4分)十八大的召開處在復(fù)雜的國際背景之下,具體表現(xiàn)在
A.黃巖島事件 B.敘利亞內(nèi)戰(zhàn) C.釣魚島事件 D.利比亞戰(zhàn)爭 你的答案: AB
C
D 得分: 4分
18.(4分)廉潔政治建設(shè)所要實現(xiàn)的目標是
A.政府清廉 B.干部清正 C.政治清明 D.百姓清楚 你的答案: AB
C
D 得分: 4分
19.(4分)民生建設(shè)是十八大報告的重要內(nèi)容,下列選項描述的社會問題中,涉及民生問題的有
A.房價上漲過快 B.收入差距加大 C.工資待遇過低 D.勞動工人下崗 你的答案: AB
C
D 得分: 4分
20.(4分)下列選項中,屬于“右”的思想的有
A.在中國推行三權(quán)分立的政治模式 B.在中國推行多黨制
C.中國應(yīng)回到建國時的平均主義時期 D.中國必須由共產(chǎn)黨領(lǐng)導(dǎo) 你的答案: AB
C
D 得分: 0分
21.(3分)在建國初期,我國沒有腐敗現(xiàn)象,腐敗在我國的滋生始于改革開放。
你的答案: 正確
錯誤 得分: 3分
22.(3分)十八大報告中指出,加強社會建設(shè),必須以加強和改善民生為重點。
你的答案: 正確
錯誤 得分: 3分
23.(3分)目前,在黨內(nèi)及社會上不存在“左”的思想
你的答案: 正確
錯誤 得分: 3分
24.(3分)十八大報告提出,在黨內(nèi)存在的腐敗現(xiàn)象是對我黨生死存亡的考驗。
你的答案: 正確
錯誤 得分: 3分
25.(3分)社會主義制度是廉潔的政治制度,不需要對制度進行改革。
你的答案: 正確
錯誤 得分: 3分
26.(3分)群體性社會事件頻發(fā),表明了我國在社會管理方面存在著嚴峻形勢于生的原則是拖著筆走,而不能推著筆走。
你的答案: 正確
錯誤 得分: 3分
27.(3分)十八大報告指出,目前,我們?nèi)匀灰^續(xù)堅持解放思想。
你的答案: 正確
錯誤 得分: 3分
28.(3分)目前,嚴重的裸官現(xiàn)象極大地威脅著我黨的安全。
你的答案: 正確
錯誤 得分: 3分
29.(3分)十八大報告鮮明指出,反腐倡廉要加大力度,實現(xiàn)它的創(chuàng)新發(fā)展,黨建必須創(chuàng)新。
你的答案: 正確
錯誤 得分: 3分
30.(3分)地方政府以發(fā)展為名的借債行為,促進地方經(jīng)濟發(fā)展,應(yīng)該得到鼓勵。
你的答案: 正確
錯誤 得分: 3分
第五篇:黨課 團課 考試復(fù)習(xí)課件 文檔
1、黨的性質(zhì):
中國共產(chǎn)黨是中國工人階級的先鋒隊,同時是中國人民和中華民族的先鋒隊,是中國特色社會主義事業(yè)的領(lǐng)導(dǎo)核心,代表中國先進生產(chǎn)力的發(fā)展要求,代表中國先進文化的前進方向,代表中國最廣大人民的根本利益。黨的最高理想和最終目標是實現(xiàn)共產(chǎn)主義
2、黨的指導(dǎo)思想
中國共產(chǎn)黨以馬克思列寧主義、毛澤東思想、鄧小平理論和“三個代表”重要思想作為自己的行動指南。這是新時期黨的指導(dǎo)思想
3、黨的最高理想和最終奮斗目標:實現(xiàn)共產(chǎn)主義
4、黨的根本宗旨:全心全意為人民服務(wù)
5、黨的群眾路線和群眾思想:
一切為了群眾,一切依靠群眾,從群眾中來,到群眾中去
6、黨的根本組織原則:民主集中制
7、紀律處分的種類:警告、嚴重警告、撤銷黨內(nèi)職務(wù)、留黨察看、開除黨籍
8、黨徽黨旗的圖案描述:黨徽為鐮刀和錘頭組成的圖案;黨旗為旗面綴有金黃色黨徽圖案的紅旗
9、中國共產(chǎn)黨在社會主義初級階段的基本路線是:
領(lǐng)導(dǎo)和團結(jié)全國各族人民,以經(jīng)濟建設(shè)為中心,堅持四項基本原則,堅持改革開放,自力更生,艱苦創(chuàng)業(yè),為把我國建設(shè)成為富強民主文明和諧的社會主義現(xiàn)代化國家而奮斗。
10、改革開放以來我們?nèi)〉靡磺谐煽兒瓦M步的根本原因,歸結(jié)起來就是:
開辟了中國特色社會主義道路,形成了中國特色社會主義理論體系
11、共青團和黨的關(guān)系:
中國共產(chǎn)主義青年團是中國共產(chǎn)黨領(lǐng)導(dǎo)的先進青年的群眾組織,是廣大青年在實踐中學(xué)習(xí)中國特色社會主義和共產(chǎn)主義的學(xué)校,是黨的助手和后備軍。共青團中央委員會受黨中央委員會領(lǐng)導(dǎo)。共青團的地方各級組織受同級黨的委員會領(lǐng)導(dǎo),同時受共青團上級組織領(lǐng)導(dǎo)
12、民主與集中的辯證關(guān)系:
①民主集中制的實質(zhì)是民主與集中的辯證統(tǒng)一。民主和集中是有機聯(lián)系、相互制約、相互促進的。民主是集中的前提和基礎(chǔ),集中是民主的必然要求和保障;②民主集中制是在民主基礎(chǔ)上的集中和集中指導(dǎo)下的民主相結(jié)合的制度,是馬克思主義認識論和群眾路線在黨的生活和組織建設(shè)中的運用。貫徹民主集中制,既不能離開民主談集中,也不能離開集中談民主,必須把兩者有機的結(jié)合起來,才能全面正確的貫徹執(zhí)行民主集中制。
13、黨的權(quán)力與義務(wù): 義務(wù):
(一)認真學(xué)習(xí)馬克思列寧主義、毛澤東思想、鄧小平理論和“三個代表”重要思想,學(xué)習(xí)科學(xué)發(fā)展觀,學(xué)習(xí)黨的路線、方針、政策和決議,學(xué)習(xí)黨的基本知識,學(xué)習(xí)科學(xué)、文化、法律和業(yè)務(wù)知識,努力提高為人民服務(wù)的本領(lǐng)。
(二)貫徹執(zhí)行黨的基本路線和各項方針、政策,帶頭參加改革開放和社會主義現(xiàn)代化建設(shè),帶動群眾為經(jīng)濟發(fā)展和社會進步艱苦奮斗,在生產(chǎn)、工作、學(xué)習(xí)和社會生活中起先鋒模范作用。
(三)堅持黨和人民的利益高于一切,個人利益服從黨和人民的利益,吃苦在前,享受在后,克己奉公,多做貢獻。
(四)自覺遵守黨的紀律,模范遵守國家的法律法規(guī),嚴格保守黨和國家的秘密,執(zhí)行黨的決定,服從組織分配,積極完成黨的任務(wù)。
(五)維護黨的團結(jié)和統(tǒng)一,對黨忠誠老實,言行一致,堅決反對一切派別組織和小集團活動,反對陽奉陰違的兩面派行為和一切陰謀詭計。
(六)切實開展批評和自我批評,勇于揭露和糾正工作中的缺點、錯誤,堅決同消極腐敗現(xiàn)象作斗爭。
(七)密切聯(lián)系群眾,向群眾宣傳黨的主張,遇事同群眾商量,及時向黨反映群眾的意見和要求,維護群眾的正當利益。
(八)發(fā)揚社會主義新風(fēng)尚,帶頭實踐社會主義榮辱觀,提倡共產(chǎn)主義道德,為了保護國家和人民的利益,在一切困難和危險的時刻挺身而出,英勇斗爭,不怕犧牲。權(quán)利:
(一)參加黨的有關(guān)會議,閱讀黨的有關(guān)文件,接受黨的教育和培訓(xùn)。
(二)在黨的會議上和黨報黨刊上,參加關(guān)于黨的政策問題的討論。
(三)對黨的工作提出建議和倡議。
(四)在黨的會議上有根據(jù)地批評黨的任何組織和任何黨員,向黨負責(zé)地揭發(fā)、檢舉黨的任何組織和任何黨員違法亂紀的事實,要求處分違法亂紀的黨員,要求罷免或撤換不稱職的干部。
(五)行使表決權(quán)、選舉權(quán),有被選舉權(quán)。
(六)在黨組織討論決定對黨員的黨紀處分或作出鑒定時,本人有權(quán)參加和進行申辯,其他黨員可以為他作證和辯護。
(七)對黨的決議和政策如有不同意見,在堅決執(zhí)行的前提下,可以聲明保留,并且可以把自己的意見向黨的上級組織直至中央提出。
(八)向黨的上級組織直至中央提出請求、申訴和控告,并要求有關(guān)組織給以負責(zé)的答復(fù)。
14、“三個代表”的基本內(nèi)容和實踐意義
基本內(nèi)容:中國共產(chǎn)黨必須始終代表中國先進生產(chǎn)力的發(fā)展要求,代表中國先進文化的前進方向,代表中國最廣大人民的根本利益
實踐意義:黨的指導(dǎo)思想的又一次與時俱進;全面建設(shè)小康社會的根本指針;加強和改進黨的建設(shè)、推進我國社會主義自我完善和發(fā)展的強大理論武器。
15、科學(xué)發(fā)展觀的基本內(nèi)容和實踐意義
基本內(nèi)容:科學(xué)發(fā)展觀第一要義是發(fā)展,核心是以人為本,基本要求是全面協(xié)調(diào)可持續(xù)性,根本方法是統(tǒng)籌兼顧
實踐意義:科學(xué)發(fā)展觀是同馬克思列寧主義、毛澤東思想、鄧小平理論和三個代表重要思想既一脈相承又與時俱進的科學(xué)理論;是馬克思主義關(guān)于發(fā)展的世界觀和方法論的集中體現(xiàn)。
16、社會主義核心價值觀的基本內(nèi)容 堅持馬克思主義指導(dǎo)(靈魂)
堅持中國特色社會主義共同理想(主題)
堅持以愛國主義為核心的民主精神和以改革創(chuàng)新為核心的時代精神(精髓)堅持社會主義榮辱觀(基礎(chǔ))
17、十七屆六中全會的基本精神
(1)“建設(shè)社會主義文化強國”的戰(zhàn)略目標。十七屆六中全會向全黨明確提出了“增強國家文化軟實力,弘揚中華文化,努力建設(shè)社會主義文化強國”的戰(zhàn)略任務(wù)。
(2)提出了“社會主義核心價值體系是興國之魂”的重要論斷。全會指出:社會主義核心價值體系是興國之魂,是社會主義先進文化的精髓,決定著中國特色社會主義發(fā)展方向。
(3)提出了黨在發(fā)展先進文化過程中的重要地位和作用。全會指出:中國共產(chǎn)黨從成立之日起,就既是中華優(yōu)秀傳統(tǒng)文化的忠實傳承者和弘揚者,又是中國先進文化的積極倡導(dǎo)者和發(fā)展者。
(4)提出了推進我國文化改革發(fā)展的極端重要性和緊迫性。
(5)提出了社會主義文化建設(shè)的基本任務(wù)。全會指出:滿足人民基本文化需求是社會主義文化建設(shè)的基本任務(wù)。
(6)提出了推進我國文化改革發(fā)展的指導(dǎo)思想(7)提出了建設(shè)社會主義文化強國的總體要求。(8)提出了我國到2020年文化改革發(fā)展的奮斗目標。(9)提出了我國文化改革發(fā)展的基本方針。(10)提出了我國文化改革發(fā)展的重大舉措
18、發(fā)展黨員的程序
(1)自愿提出入黨申請(書面入黨申請書);
(2)確定入黨積極分子(自傳、入黨積極分子考察表)(3)進入考察期(入黨積極分子考察表)(4)政治審查(政治表現(xiàn)證明材料)(5)短期培訓(xùn)
(6)聽取黨內(nèi)外群眾意見(評定意見)(7)確定發(fā)展對象(8)確定入黨結(jié)介紹人(9)填寫入黨志愿書(10)支委會審查(11)黨委預(yù)審(12)組織員談話(13)發(fā)展黨員公示(14)召開支部大會(15)黨委審批
(16)支部向本人發(fā)出入黨通知書(17)入黨宣誓(18)預(yù)備期的培養(yǎng)考察(19)預(yù)備期滿及轉(zhuǎn)正
19、如何做一名優(yōu)秀的學(xué)生黨員(答案不一)(1)具有堅定的共產(chǎn)主義理想和信念
(2)努力學(xué)習(xí)黨的基礎(chǔ)理論知識(要了解黨的性質(zhì)、指導(dǎo)思想,要牢記黨的宗旨,要正確理解黨的基本路線,要正確行使黨員的權(quán)利、切實履行黨員義務(wù),要清楚黨的思想路線、政治路線、組織路線和群眾路線)
(3)全面提高自身綜合素質(zhì)(扎實的專業(yè)功底,良好的交際能力,合理的知識結(jié)構(gòu),謙虛謹慎、不驕不躁的作風(fēng))或者:(1)堅持黨的理想信念
(2)保持高度的政治敏銳性
(3)堅持勤奮學(xué)習(xí)、工作,創(chuàng)造一流業(yè)績(4)堅持黨的根本宗旨(5)密切聯(lián)系群眾
(6)遵守黨的紀律,維護黨的團結(jié)
(7)堅持“兩個務(wù)必”,永葆共產(chǎn)黨人的政治本色