第一篇：木本植物基因組DNA提取方法的對(duì)比研究開題報(bào)告

1.選題依據(jù)

1.1 論文題目及研究領(lǐng)域

1.1.1 論文題目: 木本植物基因組ＤＮＡ提取方法的對(duì)比研究 1.1.2 研究領(lǐng)域: 木本植物DNA的提取研究 1.2 論文研究的理論意義和應(yīng)用價(jià)值

DNA是遺傳信息的載體,是最重要的生物信息分子,是分子生物學(xué)研究的主要對(duì)象,因此DNA的提取也應(yīng)是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)中的最重要、最基本的操作，如不能有效的完成DNA提取方面的工作，那就根本談不上進(jìn)行分子生物學(xué)方面的實(shí)驗(yàn)。植物DNA的提取和純化是植物基因工程研究的基礎(chǔ)操作，實(shí)施分子標(biāo)記，基因文庫的構(gòu)建，基因分離及遺傳轉(zhuǎn)化和鑒定等都是以提取DNA為前提。如何簡(jiǎn)捷高效地提取到純凈、合格的DNA分子，一直是植物生物學(xué)者關(guān)注的問題。

隨著DNA分子標(biāo)記技術(shù)和重組DNA技術(shù)的發(fā)展，制備完整、純度較高的基因組DNA日益顯得重要。我們?cè)谶M(jìn)行木本植物DNA水平遺傳多樣性研究時(shí)，首先遇到的問題是如何快速獲得較完整、純度較高的基因組DNA。由于植物細(xì)胞與動(dòng)物細(xì)胞不同，具有一層堅(jiān)硬的細(xì)胞壁，且含有較多的多糖、色素、脂質(zhì)和多酚等物質(zhì)，給植物DNA提取帶來很多困難，特別是多糖和多酚類物質(zhì)不易與DNA分開。相對(duì)于草本植物，多年生木本植物的次生代謝類物質(zhì)含量更高，高質(zhì)量的DNA提取難度更大[1]。

大多數(shù)植物DNA提取方法所提取得到的DNA粗提物中往往含有大量RNA、蛋白質(zhì)、多糖、單寧和色素等雜質(zhì)，這些雜質(zhì)有時(shí)很難從DNA中除去，大多數(shù)蛋白質(zhì)可通過酚-氯仿-異戊醇處理后變性、沉淀除去，絕大部分RNA可通過經(jīng)RNase 處理后除去。但大多數(shù)木本植物富含多糖、多酚類物質(zhì)，DNA常受到嚴(yán)重的多酚污染，造成DNA沉淀物難以溶解或溶液色深；多糖污染直接影響基因組DNA的限制性核酸內(nèi)切酶的酶切效果。多酚類、多糖物質(zhì)的污染會(huì)造成AFLP酶切連接等后續(xù)實(shí)驗(yàn)效果差，甚至后續(xù)PCR沒有擴(kuò)增產(chǎn)物[2]。在大多數(shù)木本植物基因組DNA的提取方法中，SDS法和CTAB法是目前最為常用的兩種方法。

本試驗(yàn)以細(xì)胞生物學(xué)研究為基礎(chǔ)，以如何獲取高質(zhì)量、高純度DNA為目的，比較CTAB法和SDS法紅豆杉和銀杏基因組DNA的提取效果，對(duì)兩種方法提取的DNA進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳分析和紫外吸收分析，分別對(duì)兩種方法所提取的紅豆杉和銀杏基因組DNA的效率和質(zhì)量進(jìn)行分析，從中選出一種更適合木本植物基因組DNA的提取方法。

1.3 DNA提取研究概況和發(fā)展趨勢(shì)

Avery在1944年的研究報(bào)告中寫道：“當(dāng)溶液中酒精的體積達(dá)到9/10時(shí)，有纖維狀物質(zhì)析出。如稍加攪拌，它就會(huì)象棉線在線軸上一樣繞在硬棒上，溶液中的其它成份則呈顆粒狀沉淀。溶解纖維狀物質(zhì)并重復(fù)數(shù)次，可提高其純度。這一物質(zhì)具有很強(qiáng)的生物學(xué)活性，初步實(shí)驗(yàn)證實(shí)，它很可能就是DNA（誰能想到！）”。對(duì)DNA分子的物理化學(xué)研究導(dǎo)致了現(xiàn)代生物學(xué)翻天覆地的革命，這更是Avery所沒有想到。Fricdrich Miescher ,瑞士生物學(xué)家，有機(jī)化學(xué)家。1868年醫(yī)學(xué)畢業(yè)以后，在著名的有機(jī)化學(xué)家Hoppe-Seyle的實(shí)驗(yàn)室以膿細(xì)胞為材料，研究淋巴細(xì)胞的組成。1869年他從膿細(xì)胞的細(xì)胞核中分離出含有大量磷的“核素”即是DNA,是人類第一次真正提取的的DNA。

年代初,DNA被證明是所有生物最主要的遺傳物質(zhì)。隨著生物化學(xué)、分子生物學(xué)、遺傳學(xué)的發(fā)展,基因工程和生物技術(shù)的創(chuàng)立,DNA的有關(guān)技術(shù)也得到了飛速發(fā)展。DNA提取方法成了這些研究和應(yīng)用中最重要的技術(shù)之一。目前已經(jīng)建立了用于各種不同目的的DNA提取方法,這些方法也被用于生物學(xué),尤其是生物工程的各個(gè)方面。但是,對(duì)于不同的植物樣品,由于其組織成分的差異,采取的DNA 提取方法不完全一致。.文獻(xiàn)綜述

2.1 南方紅豆杉概況

紅豆杉屬(Taxus L．)植物屬紅豆杉科，為常綠喬木或灌木。紅豆杉(Taxus mairei)又名紫杉、赤柏松，是第三世紀(jì)孑遺植物，被稱為植物王國(guó)里的“活化石”，因其資源稀少，被列為世界珍稀樹種加以保護(hù)，在我國(guó)為珍稀瀕危物種。在幾千萬年的歷史長(zhǎng)河中，紅豆杉是歷經(jīng)強(qiáng)度陽光、低薄空氣、高溫干旱、嚴(yán)寒冰川等地球氣候巨變的考驗(yàn)，演化遺留下來的物種。其樹體極大的適應(yīng)存活能力所具有的各種生物石堿、化合物，既是本身生存的需要，也是現(xiàn)在被人類認(rèn)識(shí)和開發(fā)的珍稀貴重藥物。南方紅豆杉廣泛分布福建、浙江、安徽、江西、湖南、湖北、四川等省，生于海拔1300米以下，喜濕潤(rùn)的微酸性粘質(zhì)土壤，多生長(zhǎng)在山的中下部及溝谷旁，常與刺栲、絲栗栲、甜櫧、木荷、杜英、楓香、杉木等混生。2.2 南方紅豆杉的化學(xué)組分

根據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)共測(cè)定我國(guó)南方紅豆杉的平均化學(xué)指標(biāo)分別為(10項(xiàng)): 原料含水率7.94﹪、冷水抽提物0.385﹪、熱水抽提物0.765 ﹪、乙醚抽出物2.855﹪、NAOH抽出物12.17 ﹪、苯醇抽出物1.391 ﹪、木素含量27.01 ﹪、半纖維素含量11.78 ﹪、綜纖維素含量65.5 ﹪、PH值5.33[3]。2.3 紅豆杉主要價(jià)值

紅豆杉因其次生代謝物質(zhì)紫杉醇良好的抗癌效果而受到人類的關(guān)注，從紅豆杉樹皮和嫩葉中提取的紫杉醇，是繼阿霉素和順鉑之后被公認(rèn)最好的廣普、強(qiáng)活性天然抗癌藥。紅豆杉除了重要的藥用價(jià)值以外，其獨(dú)特的外觀造型、四季常青的鮮艷綠色，又是不可多得的綠化樹種，具有很高的觀賞價(jià)值。其次紅豆杉屬植物木材由于其優(yōu)良品質(zhì)還是不可多得的木材樹種。2.4 銀杏概況

銀杏（Ginkgo Liloba L.）俗稱白果，公孫樹。最早出現(xiàn)于3.45億年前的石炭紀(jì)，曾廣泛分布于北半球的歐、亞、美洲，與動(dòng)物界的恐龍一樣稱王稱霸于世，至50萬年前，發(fā)生了第四紀(jì)冰川運(yùn)動(dòng)，地球突然變冷，絕大多數(shù)銀杏類植物瀕于絕種，唯有我國(guó)自然條件優(yōu)越，才奇跡般的保存下來。所以，科學(xué)家稱它為“活化石”，“植物界的熊貓”。2.5 銀杏主要價(jià)值

銀杏葉也具有重要的藥用價(jià)值。到目前為止已知其化學(xué)成分的銀杏葉提取物多達(dá)160余種。主要有黃酮類、萜類、酚類、生物堿、聚異戊烯、奎寧酸、亞油酸、蟒草酸、抗壞血酸、a-已烯醛、白果醇、白果酮等。中國(guó)科學(xué)院植物所等單位于60年代用銀杏葉研制出舒血寧針劑，經(jīng)試驗(yàn)對(duì)冠心病、心絞痛、腦血管疾病有一定的療效。同時(shí)，銀杏葉也可以作為農(nóng)藥使用[4]。

3.實(shí)驗(yàn)原理

2.1 CTAB法提取原理

CTAB(cetyltriethyammoniumb romide,十六烷基三甲基溴化銨)法是一種快速簡(jiǎn)便提取植物基因組DNA的方法：先將新鮮的葉片放在液氮中研磨，破碎其細(xì)胞，然后加入CTAB分離緩沖液。再經(jīng)氯仿-異戊醇抽體除去蛋白質(zhì)，最后得到DNA。

2.2 SDS法提取原理

SDS法(Sodium dodecyl sulfate，十二烷基磺酸鈉)先將新鮮的葉片在液氮中研磨破碎其細(xì)胞壁，然后加入SDS使其細(xì)胞膜破裂。并同時(shí)將蛋白質(zhì)、多糖等雜質(zhì)同核酸分開。加入KAc可使SDS—蛋白質(zhì)復(fù)合物轉(zhuǎn)變?yōu)楦〉拟淃}形式，使沉淀更加完全[5]。

2.3 紫外吸收法分析原理

組成核酸分子的堿基，均具有一定的吸收紫外線特性，最大吸收值在波長(zhǎng)為25038 ［3］丁曉東，呂柳新.從頑拗植物荔枝中提取基因組DNA技術(shù)的研究［J］.應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報(bào).2000，6(2)：142370.［5］王景雪, 孫毅, 高武軍.-種簡(jiǎn)便實(shí)用的植物總DNA提取方法[J].山西大學(xué)學(xué)報(bào)，2000，23(3): 27139.［8］黃豐, 周聯(lián)等.植物中藥材總DNA提取方法比較[J].中藥新藥與臨床理,1999 ,10(1): 1814.［11］李思光，羅玉萍, 陳萬秋等.獼猴桃基因組DNA的提取及其RAPD擴(kuò)增研究[J].南昌大學(xué)學(xué)報(bào)，2001，25(3):264–268.

第二篇：DNA提取方法和試劑作用匯總

1試劑的作用

氯仿的作用？

氯仿：克服酚的缺點(diǎn)；加速有機(jī)相與液相分層。

最后用氯仿抽提：去除核酸溶液中的跡量酚。（酚易溶于氯仿中）

用酚-氯仿抽提細(xì)胞基因組DNA時(shí)，通常要在酚-氯仿中加少許異戊醇，為什么？

異戊醇：減少蛋白質(zhì)變性操作過程中產(chǎn)生的氣泡。異戊醇可以降低表面張力，從而減少氣泡產(chǎn)生。另外，異戊醇有助于分相，使離心后的上層含DNA的水相、中間的變性蛋白相及下層有機(jī)溶劑相維持穩(wěn)定。

用乙醇沉淀DNA時(shí)，為什么加入單價(jià)的陽離子？

用乙醇沉淀DNA時(shí)，通常要在溶液中加入單價(jià)的陽離子，如NaCl 或 NaAc，Na+中和DNA分子上的負(fù)電荷，減少DNA分子之間的同性電荷相斥力，而易于聚集沉淀。DNA提取分為三個(gè)基本步驟

每個(gè)步驟的具體方法可根據(jù)樣品種類、影響提取的物質(zhì)以及后續(xù)步驟的不同而有區(qū)別。

.細(xì)胞的破碎

細(xì)菌有堅(jiān)硬的細(xì)胞壁，首先要破碎經(jīng)胞。方法有三種;①機(jī)械方法：超聲波處理法、研磨法、勻漿法;②化學(xué)試劑法：用SDS處理細(xì)胞;③酶解法：加入溶菌酶或蝸牛酶，都可使細(xì)胞壁破碎。

利用研磨或者超聲破碎細(xì)胞，并通過加入去污劑以除掉膜脂。

加入蛋白酶，醋酸鹽沉淀，或者酚/氯仿抽提，以除掉細(xì)胞內(nèi)的蛋白，如與DNA結(jié)合的組蛋白。將DNA在冷乙醇或異丙醇中沉淀，因?yàn)镈NA在醇中不可溶而黏在一起，這一步也能除掉鹽分。另外，目前也有利用吸附過柱的方法提取DNA的商業(yè)化試劑盒。

DNA提取的幾種方法(1).濃鹽法

A.利用RNA和DNA在電解溶液中溶解度不同，將二者分離，常用的方法是用1M 氯納抽提,得到的DNA粘液與含有少量蛋白質(zhì) 氯仿一起搖蕩,使乳化,再離心除去蛋白質(zhì),此時(shí)蛋白質(zhì)凝膠停留在水相及氯仿相中間，而DNA位于上層水相中,用2倍體積95%乙醇可將DNA 鈉鹽沉淀出來.B.也可用0.15 MNaCL液反復(fù)洗滌細(xì)胞破碎液除去RNA,再以1MNaCL提取脫氧核糖蛋白,再按氯仿---異醇法除去蛋白.兩種方法比較,后種方法使核酸降解可能少一些.C.以稀鹽酸溶液提取DNA 時(shí),加入適量去污劑,如SDS可有助于蛋白質(zhì)與DNA 的分離。在提取過程中為抑制組織中的DNase對(duì)DNA 的降解作用,在氯化鈉溶液中加入檸檬酸鈉作為金屬離子的烙合劑.通常用.15MNaCL,0.015M檸檬鈉,并稱SSC溶液,提取DNA.（2）.陰離子去污劑法;用SDS或二甲苯酸鈉等去污劑使蛋白質(zhì)變性,可以直接從生物材料中提取DNA.由于細(xì)胞中DNA與蛋白質(zhì)之間常借靜電引力或配位鍵結(jié)合,因?yàn)殛庪x子去污劑能夠破壞這種價(jià)鍵,所以常用陰離子去污劑提取DNA

（3）.苯酚抽提法：苯酚作為蛋白變性劑,同時(shí)抑制了DNase的降解作用.用苯酚處理勻漿液時(shí),由于蛋白與DNA 聯(lián)結(jié)鍵已斷,蛋白分子表面又含有很多極性基團(tuán)與苯酚相似相溶。蛋白分子溶于酚相，而DNA溶于水相。離心分層后取出水層，多次重復(fù)操作，再合并含DNA 的水相，利用核酸不溶于醇的性質(zhì)，用乙醇沉淀DNA。此時(shí)DNA是十分粘稠的物質(zhì)，可用玻璃漫漫繞成一團(tuán)，取出。此法的特點(diǎn)是使提取的DNA保持天然狀態(tài)

（4）.水抽提法:利用核酸溶解于水的性質(zhì),將組織細(xì)胞破碎后,用低鹽溶液除去RNA，然后將沉淀溶于水中，使DNA充分溶解于水中,離心后收集上清液.在上清中加入固體氯化鈉調(diào)節(jié)至2.6M.加入2倍體積95%乙醇,立即用攪拌法攪出.然后分別用66%，80%和95%乙醇以及丙銅洗滌,最后在空氣中干燥,既得DNA樣品.此法提取的DNA中蛋白質(zhì)含量較高,故一般不用.為除蛋白可將此法加以改良,在提取過程中加入SDS.1.動(dòng)物來源的DNA的提取 1.1經(jīng)典提取方法

酚抽提法、異丙醇沉淀法以及甲酞胺裂解法是提取DNA最為經(jīng)典的方法，目前很多方法的改進(jìn)都是在這些方法的基礎(chǔ)上進(jìn)行的，這三種方法均利用蛋白酶K和十二烷基硫酸鈉(SDS)消化破碎細(xì)胞。在前兩種方法中裂解液先用酚/氯仿去除蛋白質(zhì)，再分別用乙醇或異丙醇沉淀DNA。甲酞胺法是利用高濃度的甲酞胺解聚蛋白質(zhì)與DNA的結(jié)合，然后利用透析來處理DNA樣品。這些經(jīng)典方法獲得的DNA純度很高，能夠滿足各種試驗(yàn)的要求，但操作繁瑣，用時(shí)長(zhǎng)，且所用試劑具有一定的毒性。

1.2 玻璃棒纏繞法

該 法 用 鹽酸肌裂解細(xì)胞，然后將細(xì)胞裂解物小心鋪在離心管中的乙醇上，用一個(gè)帶鉤的或前端為U形的玻璃棒在這兩層液體的交界面慢慢攪動(dòng)，沉淀出的膠狀DNA纏繞在玻璃棒上。玻璃棒上的DNA經(jīng)多次乙醇浸泡并于室溫下蒸干乙醇，由膠狀逐漸回縮，然后浸人TE中過夜，使其重新吸水膨脹進(jìn)而和玻璃棒分離。這種方法對(duì)操作技術(shù)要求較高，但簡(jiǎn)單快速。

1.3 血細(xì)胞DNA的快速提取法

采用 非離子變性劑NP40(乙基苯基聚乙二醇)代替SDS裂解細(xì)胞，提取細(xì)胞核，然后用酚/氯仿抽提DNA。這樣從血液中分離獲得的DNA純度高，能夠滿足各種臨床檢驗(yàn)和實(shí)驗(yàn)的需要。也可采用NP40和Tween-20同時(shí)作用破碎細(xì)胞膜，以避免SDS對(duì)以后步驟的負(fù)面作用。Ba sun i等 [‘〕采用了4種常用的從血液中提取DNA的方法:High Pure Viral Nucleic 試劑盒法、QlAamp試劑盒法、Tri-PureTM試劑分離提取法以及經(jīng)典酚抽提法，對(duì)通常作拋棄處理的血凝塊進(jìn)行人DNA 及病毒DNA的抽提，發(fā)現(xiàn)前兩種方法可以迅速高效獲得目的DNA，從而建立了由血凝塊中提取DNA的方法，擴(kuò)大了臨床檢驗(yàn)樣本的來源。

1.4 玻璃顆粒吸附法

在該 法 中首先利用含異硫氰酸肌的細(xì)胞裂解液裂解細(xì)胞，然后加人含有能夠與DNA 結(jié)合的玻璃顆粒的緩沖液，經(jīng)沉淀收集結(jié)合染色體DNA的玻璃顆粒，利用洗脫液進(jìn)行洗脫獲得DNA。不僅玻璃顆?？梢耘cDNA 進(jìn)行結(jié)合，一定大小的硅膠顆粒也可以與 DNA進(jìn)行結(jié)合，據(jù)此，不少實(shí)驗(yàn)工作者實(shí)踐了很多利用顆粒結(jié)合DNA 的提取方法。Pichler等[2〕在從抹香鯨(Physeter macrocephalus)牙齒及骨骼中抽提DNA時(shí)采用了一種以二氧化硅為吸附介質(zhì)的方法，從抹香鯨標(biāo)本骨骼組織中鉆取的少量粉末中獲得了足夠用于分析的DNA產(chǎn)物，此方法擴(kuò)大了對(duì)稀有哺乳動(dòng)物DNA研究的取材范圍。Caldarelli-stefano等[3〕在從福爾馬林固定、石蠟包埋的人體組織標(biāo)本中提取DNA時(shí)利用小磁珠作為結(jié)合核，也獲得了理想的純化 DNA。很多試劑公司也依此設(shè)計(jì)生產(chǎn)了許多顆粒提取試劑盒，Pint。等[4]就探討了采用 Gibc。公司的GlassMAX系統(tǒng)，對(duì)福爾馬林固定的組織進(jìn)行DNA提取的具體操作方法，目前這些試劑盒在臨床上廣為應(yīng)用，省時(shí)省力。

1.5 三乙醇胺月桂基硫酸鹽(TLS)法

由于 常 規(guī) 方法中使用的蛋白酶K的水解條件不好掌握，采用TLS來提取組織、細(xì)胞以及外周血DNA可以克服這一弊端。TLS是一種較強(qiáng)的表面活性劑，將其直接作用于細(xì)胞或組織勻漿，可迅速溶解細(xì)胞膜、核膜，而且蛋白質(zhì)與其結(jié)合后即失去對(duì)DNA 的結(jié)合，進(jìn)一步的純化可采用常規(guī)方法。

1.6 臨床病理標(biāo)本的DNA提取方法

由于 PC R技術(shù)不僅可用于基因分離、核酸序列分析，還可用于突變體和重組體的構(gòu)建、基因表達(dá)調(diào)控研究、基因病的診斷及腫瘤發(fā)生機(jī)理的探討等。近年來，PCR技術(shù)已廣泛應(yīng)用于病理學(xué)研究，尤其對(duì)福爾馬林固定石蠟包埋病理標(biāo)本進(jìn)行相關(guān)的研究更成為關(guān)注的焦點(diǎn)。對(duì)于從這些病理標(biāo)本中提取 DNA的方法研究也很多。一般采用酚/氯仿抽提法，該法雖然效率較高，但費(fèi)時(shí)費(fèi)力，而且其操作中要求多次離心，增加了樣品污染的可能性。近年來很多高效靈敏的方法在實(shí)踐中得以采用，這些方法通常采用加熱或微波法〔s〕去除包埋的石蠟，使用Sephadex G-5。柱色譜或鹽析法[s7等去除蛋白質(zhì)。高文濤[71等在研究福爾馬林固定石蠟包埋組織 DNA提取方法對(duì)PCR的影響時(shí)，發(fā)現(xiàn)在組織切片中加人鰲合樹脂(Chelating Resin，亞氨基二乙酸)提取獲得的DNA可取得較好的PCR擴(kuò)增結(jié)果。Coombs等〔s〕則采用熱循環(huán)方法，將標(biāo)本上的蠟融人樣品溶液，在酶的作用下進(jìn)行裂解，然后用Chelex-100進(jìn)行吸附，離心去蠟，這種方法安全、簡(jiǎn)便、有效、經(jīng)濟(jì)。1.7 鹽析法

該 法用 飽 和氯化鈉代替有機(jī)溶劑去除蛋白質(zhì)，所獲得的DNA質(zhì)量可以滿足PCR模板的要求，但產(chǎn)率相對(duì)較低，純度較差。譚建明等[9]對(duì)上述鹽析法進(jìn)行了改進(jìn)，即將處理過的樣本加人SDS和蛋白酶K后，在56'C 消化1h，然后用飽和氯化鈉沉淀蛋白質(zhì)，并經(jīng)離心除去，上清直接用乙醇沉淀DNA。該法簡(jiǎn)化了DNA的抽提步驟，可用于人體各種樣本DNA的提取，所獲DNA的純度可以滿足各種檢測(cè)的需要。植物來源的DNA提取

利用 基 因工程手段對(duì)植物進(jìn)行定向改造，已成為當(dāng)今植物育種學(xué)發(fā)展的一個(gè)新領(lǐng)域，植物基因工程操作離不開植物基因組總 DNA的制備，不同植物的核酸結(jié)合蛋白的情況各不相同，因而要采取不同的提取方法[10]。由于植物中次生代謝產(chǎn)物— 多酚類化合物可介導(dǎo)DNA降解，而多糖的污染也是影響植物DNA純度最常見的問題，這些多糖能抑制限制酶、連接酶及DNA聚合酶等酶類的生物活性。因此要從富含多酚和多糖的植物組織中分離獲得高質(zhì)量的基因組 DNA也并非易事[11l。目前采用的方法有以下幾種。

2.1 十六烷基三乙基澳化按(CTAB)法

CTAB 是 一種陽離子去污劑，它能與核酸形成復(fù)合物，這些復(fù)合物在低鹽溶液中會(huì)因溶解度的降低而沉淀，而在高鹽溶液中可解離，從而使DNA和多糖分開，再用乙醇沉淀DNA 而除去CTAB。在該法中使用的聚維酮(PVP)與多酚結(jié)合形成復(fù)合物，從而可有效避免多酚類化合物介導(dǎo)的DNA降解[121。王卓偉等[13〕在對(duì)桑葉DNA提取方法研究過程中發(fā)現(xiàn)PVI〕還能有效地去除多糖。羅志勇等[14〕在研究中對(duì)這種方法進(jìn)行了幾點(diǎn)改進(jìn): ①提高CTAB的濃度;②對(duì)于含多酚類較多的植物，增加CTAB提取緩沖液中琉基乙醇的含量，同時(shí)加人PVP使其與多酚類物質(zhì)結(jié)合形成復(fù)合物;③增加低鹽沉淀緩沖液的量;④增加高鹽溶液中鹽的濃度。用改進(jìn)的方法從人參、西洋參、三七等藥用植物中分離獲得了高純度的DNA, Porebski等[1s]在沉淀粗提 DNA時(shí)，將提取緩沖液中氯化鈉的濃度提高至2.5m o卜L-’以使DNA在高鹽緩沖條件下優(yōu)先沉淀，可更有效地除去多糖。Stein等[16] 對(duì)傳統(tǒng)的CTAB法進(jìn)行了優(yōu)化，創(chuàng)建了一種從新鮮草本植物樣本中提取DNA的方法。首先在特制的有96個(gè)孔的托盤上種植植物樣本，并依照不同樣本在托盤中的位置進(jìn)行編號(hào)，然后取適量植物葉子分裝在充滿提取液的塑料袋中，除去袋中的空氣并封口，再用特制的手工勻化器將各袋中的樣本混勻，56`C孵育 1h后將袋中的液體取出進(jìn)行離心以及DNA 的沉淀。Xin等〔17〕則采用簡(jiǎn)易的96孔托盤作為提取時(shí)的容器，將多種植物樣本經(jīng)研磨處理后分別放在不同的孔中進(jìn)行提取，在一天內(nèi)由一人就可完成上千個(gè)樣本的DNA提取，為高通量植物基因分析及篩選提供了極大的便利。

2.2 SDS法

為 了避 免 CTAB法試驗(yàn)步驟多、操作繁瑣的不足之處，近年來又提出了利用SDSTris-Cl--EDTA等直接裂解細(xì)胞使其釋放出DNA的方法]。在該法后續(xù)的DNA純化過程中通常采用酚/氯仿處理，但對(duì)于植物 DNA純化不是一個(gè)很好的選擇，因?yàn)榉拥氖褂每山档虳NA的提取效率和純度。在用該法提取DNA的過程中采用較大的離心力和較長(zhǎng)的離心時(shí)間，然后用氯仿一異戊醇代替酚來去除變性蛋白質(zhì)，從而克服了由于酚的摻人及殘留對(duì)以后酶切帶來的困難。用琉基乙醇代替SDS，對(duì)大豆DNA分離提取能夠更有效地去除蛋白質(zhì)，而且可以有效防止褐變，獲得天然雙鏈高分子量的DNA產(chǎn)物，并且減少了SDS對(duì) PCR、隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA技術(shù)(Random amplified polymorphic DNA, RAPD)等操作的影響。在對(duì)辣椒DNA進(jìn)行提取時(shí)為了提高DNA的產(chǎn)率將待提取的植物材料首先在液氮中研磨成粉末，并且針對(duì)辣椒葉子中多酚類物質(zhì)極少的特點(diǎn)將其中的加人PVP的步驟省去，消除了PVP對(duì)以后操作的影響.2.3 氯化千法在對(duì)稱猴桃的基因組DNA 提取過程中選用了氯化節(jié)法，與其他方法相比該法的得率較高，其原因可能是氯化節(jié)不僅可與植物細(xì)胞壁上的多糖經(jīng)基反應(yīng)生成醚，而且與細(xì)胞液中多糖物質(zhì)的All基反應(yīng)，起到破壞糖鏈的作用，利于DNA的釋放和提純。

2.4 高鹽低pH法

該 法 中 所用的提純?cè)噭﹥H為無機(jī)鹽和異丙醇。通常采用的無機(jī)鹽為醋酸鉀，低pH的醋酸鉀是有效的蛋白質(zhì)沉淀劑。與一般氯仿一異丙醇反復(fù)抽提去除蛋白質(zhì)的操作相比該法操作更方便省時(shí)，所需樣品量少，適用于 瀕危植物DNA的提取。

2.5 果膠酶法

Ste ve n等 [2s采用果膠酶對(duì)植物細(xì)胞破碎后的抽提混合物進(jìn)行消化處理使與DNA共沉淀的膠狀物質(zhì)分解成小的片段，從而無法與DNA一起沉淀下來，降低了DNA的純化難度，提高純化效率。微生物來源DNA的提取

常規(guī) 的微 生物DNA提取多是根據(jù)某種微生物的具體特點(diǎn)選擇合適的方法。在實(shí)際的科學(xué)研究過程中，很多科學(xué)工作者通過實(shí)踐總結(jié)出許多快速實(shí)用的提取方法，現(xiàn)擇其中比較典型的加以總結(jié)。

3.1 細(xì)菌質(zhì)粒的提取方法

質(zhì)粒是獨(dú)立于細(xì)菌染色體DNA之外的環(huán)狀DNA，它能攜帶外源基因進(jìn)人細(xì)菌進(jìn)行擴(kuò)增，或表達(dá)外源基因，是基因工程中常用的載體，在DNA重組技術(shù)、DNA測(cè)序、轉(zhuǎn)基因等方面具有廣泛的應(yīng)用。對(duì)于細(xì)菌質(zhì)粒的提

取比較經(jīng)典的方法有:堿裂解法、煮沸法、SDS裂解法以及Triton-溶菌酶裂解法等。這些方法的選擇取決于質(zhì)粒的大小、細(xì)菌菌株的性質(zhì)等。Keunosky等GE_發(fā)展了一種以 Zn'+誘導(dǎo)DNA沉淀的方法，在該法中利用一定濃度的ZnCl:溶液使一定體積的細(xì)菌菌液質(zhì)粒DNA大量沉淀，無需多次離心，大大簡(jiǎn)化了抽提的步驟。

近年 來，一些生物技術(shù)公司，比如Promega公司及Qiagen公司等紛紛推出質(zhì)粒抽提試劑盒，這些試劑盒多運(yùn)用樹脂材料或硅膠來特異性的吸附質(zhì)粒DNA，提取過程用時(shí)少，效率高。

3.2 真菌DNA提取方法

對(duì) 真菌 DNA的提取關(guān)鍵是破碎細(xì)胞，通常采取酶解破壁法或以液氮冷凍處理增加細(xì)胞壁脆性的物理破壁法。在這兩種方法中酶解破壁法較為簡(jiǎn)單，易于操作和控制，而物理破壁法在處理過程中容易造成細(xì)胞核的大量破損。在提取獲得核酸一蛋白質(zhì)復(fù)合物后，對(duì)其中蛋白質(zhì)的沉淀也多采用傳統(tǒng)的氯仿一異戊醇沉淀法或高鹽沉淀法。韓利剛等C25用CTA13法直接從絲狀真菌的新鮮菌絲中提取DNA，并將所提取的DNA進(jìn)行 RAPD，得到了較清晰的擴(kuò)增圖譜。Loeffler 等[Z6為滿足快速靈敏準(zhǔn)確的臨床檢驗(yàn)的需要，利用MagNA Pure LC系統(tǒng)建立了一種實(shí)用的快速提取方法，該法自動(dòng)化程度高，避免了可能的交叉污染。Manian等[z7〕在對(duì)真菌進(jìn)行DNA抽提時(shí)采用幾個(gè)循環(huán)的快速制冷、煮沸以破碎真菌細(xì)胞壁，并通過Qiagen 公司的QIAquick DNA純化柱，迅速從極微量的真菌中獲得高純度的DNA大分子。3.3 結(jié)核桿菌DNA的提取方法

利用 PC R微孔板雜交技術(shù)檢測(cè)臨床標(biāo)本中結(jié)核桿菌DNA是診斷結(jié)核桿菌感染的一種快速靈敏和特異的方法。從不同的臨床標(biāo)本中獲得DNA是檢測(cè)準(zhǔn)確和成功的關(guān)鍵。而不同來源的結(jié)核桿菌又分別受到不同來源材料的影響，所以提取方法各不相同。同時(shí)由于結(jié)核桿菌的細(xì)胞壁比較厚不易破碎，一般的微波法、異硫氰酸肌法、凍融法等難以破壞結(jié)核桿菌的細(xì)胞壁。通常采取的方法有:經(jīng)典酶一酚一氯仿法，堿一SDS裂解法，堿裂解煮沸法，超聲裂解法，Chelex-100 法，玻璃粉一硅吸附法等。楊正林等[28〕通過對(duì)以上幾種方法的比較發(fā)現(xiàn)玻璃粉一硅吸附法操作簡(jiǎn)單，假陽性低，適合臨床檢測(cè)使用。3.4 土壤微生物總DNA的提取方法

土壤 中 細(xì) 菌的含量豐富，種類齊全，從中提取細(xì)菌DNA可用于檢測(cè)不可培養(yǎng)的細(xì)菌，跟蹤某些目標(biāo)菌或重組基因在自然環(huán)境中的行為，也可用來解釋土壤微生物生態(tài)系統(tǒng)中的基因的多樣性及其隨環(huán)境的變化。從土壤中提取和純化DNA是最關(guān)鍵的技術(shù)之一。Courtoi:等[29]對(duì)比了在土壤中直接裂解微生物體、然后提取DNA和先將微生物菌體通過梯度離心與土壤顆粒分開再進(jìn)行提取的方法，利用PCR技術(shù)以及雜交技術(shù)檢測(cè)不同方法獲得DNA的種類和純度，發(fā)現(xiàn)前一種方法具有更高的效率，能夠提取獲得較多微生物物種的 DNA。張瑞福等[30]采用SDS高鹽提取法和透析袋回收法對(duì)9種不同來源的土壤進(jìn)行微生物DNA的提取，與通常采用的對(duì)菌體細(xì)胞的超聲破碎法以及對(duì)粗提DNA的微型柱純化法相比，既保證了一定提取與回收效率，又兼顧了DNA的質(zhì)量，使DNA在提取和純化過程中不會(huì)受到損傷。4 海洋生物DNA的提取方法

海洋 是 地 球上最大的生物資源庫，同時(shí)由于海水的保護(hù)使海洋生物變化很少，物種得到較好的保存，這樣就為研究生命現(xiàn)象的基本問題提供了豐富的資料。在利用這些資源探討諸如生命的起源、生物進(jìn)化、生物與環(huán)境的關(guān)系、改造海洋生物以為人類服務(wù)(如生產(chǎn)某種藥物)時(shí)離不開對(duì)生物核酸的研究。對(duì)于海洋來源的動(dòng)物、植物、微生物由于其不同于陸生生物的組織和細(xì)胞結(jié)構(gòu)特點(diǎn)往往采用不同的DNA提取方法。

張海 琪 等 [31_在對(duì)不同方法保存的大黃魚(Pseudosciaena crocea)肌肉樣品基因組 DNA進(jìn)行提取時(shí)發(fā)現(xiàn)，經(jīng)福爾馬林、乙醇及含有EDTA的乙醇保存的樣品可以同鮮活樣品和冷凍樣品一樣獲得基因組DNA，但相比之下采用乙醇作為固定劑更方便快速，所提取的DNA用于RAPD分析，獲得了滿意的效果。楊文新等[32〕利用75%的乙醇固定鮑魚(Haliotis discus)樣本并進(jìn)行DNA的提取，證明用乙醇固定海洋動(dòng)物組織是一種切實(shí)可行的方法，材料處理后可同步提取，增加了實(shí)驗(yàn)的同步性、可比性，適用于大量樣本的提取。由于組織中含有許多DNA酶，絕大多數(shù)DNA酶需要一個(gè)二價(jià)陽離子作為輔助因子，因此采用含適量EDTA的乙醇固定劑是野外標(biāo)本采集和運(yùn)輸?shù)囊环N更簡(jiǎn)便有效的方法。

韓兵 社 等 33:針對(duì)傳統(tǒng)的有機(jī)溶劑提取工藝進(jìn)行改進(jìn)，應(yīng)用多種萃取液體系從廢棄物魷魚肝臟中提取核酸，與原工藝相比，核酸提取產(chǎn)量提高30%-60%，整體工藝得到簡(jiǎn)化，而且避免了有機(jī)物的殘留。

赤 潮 是 在特定的環(huán)境前提條件下，海水中的某些浮游生物、原生動(dòng)物或細(xì)菌爆發(fā)性增殖或高度聚集而引起水體變色的一種有害生態(tài)現(xiàn)象，對(duì)海洋漁業(yè)、水產(chǎn)資源以及人類的健康造成很大的威脅。發(fā)生赤潮的生物類型主要為藻類，銅綠微囊藻(Microcytis aeruginosa)是造成赤潮的藻類之一。陸源等[34〕用乙醇乙醚混合液對(duì)純化的銅綠微囊藻作預(yù)處理，破壞了其膠質(zhì)鞘，從而使蛋白酶K和 SDS能更好地直接作用于其細(xì)胞壁，細(xì)胞內(nèi)的DNA釋放完全，提高了總DNA的得率。通過提取獲得的DNA有助于開展對(duì)有害藻類的研究，為防范赤潮提供依據(jù)。在對(duì) 紫 菜(Porphyras p.)進(jìn)行DNA提取時(shí)，郭寶太等[35〕先用海螺酶處理樣品制備紫菜體細(xì)胞，然后用SDS和蛋白酶K裂解細(xì)胞提取總DNA，再用Wizard DNA clean-up;樹脂進(jìn)行純化。經(jīng)海螺酶處理的紫菜細(xì)胞解決了通常采用的液氮破碎細(xì)胞后裂解物勃稠、DNA得率低且有嚴(yán)重的多糖污染等難題。但這種方法對(duì)植物組織需求量較多，不適于個(gè)體體積小的紫菜。劉必謙等[36〕采用美國(guó)Roche公司的DNA Isolation Kit for Cell and Tissue和上海生工公司的UNIQ-10小量柱式基因組DNA提取試劑盒對(duì)個(gè)體體積較小的圓紫菜(Porphyra suborbiculato)、鐵釘菜(Ishige okamurae)等進(jìn)行DNA 的提取，獲得高純度的基因組DNA，完全能滿足酶切片段長(zhǎng)度多態(tài)性(Amplified Fragment Length Polymorphism, AFLP)技術(shù)的需要。

陳子 桂 等[371以海洋尾絲蟲(Uronema marinum)為材料，針對(duì)纖毛蟲難以建立培養(yǎng)以及個(gè)體豐度不高等特點(diǎn)，就微量條件下提取DNA的方法進(jìn)行了探討，成功地獲得了活體直接提取、活體酚/氯仿抽提、固定標(biāo)本直接提取以及固定標(biāo)本酚/氯仿抽提等四種簡(jiǎn)便有效的微量DNA提取方法，解決了纖毛蟲微量DNA提取的困難。

綜合 DN A的提取方法，雖然不同生物 DNA的提取方法不盡相同，但各種提取方法也有很多相通之處，可以相互借鑒。隨著生物技術(shù)的飛速發(fā)展，對(duì)這一技術(shù)的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)將會(huì)越來越多，一些生物領(lǐng)域新的DNA提取方法也將逐漸固定下來，更為簡(jiǎn)捷、高效的方法也必將出現(xiàn)，為基因工程提供更高純度的DNA.1）學(xué)習(xí)并掌握動(dòng)物組織總DNA的提取方法及其原理。（2）從肝臟組織中提取到一定量的純凈的DNA樣品?！緦?shí)驗(yàn)原理】

DNA是一切生物細(xì)胞的重要組成成分，主要存在于細(xì)胞核中。通過研磨和SDS作用破碎細(xì)胞；苯酚和氯仿可使蛋白質(zhì)變性，用其混合液（酚：氯仿：異戊醇）重復(fù)抽提，使蛋白質(zhì)變性，然后離心除去變性蛋白質(zhì)；RNase降解RNA，從而得到純凈的DNA分子?！緝x器、材料、試劑】

（一）儀器 1．高速離心機(jī) 2．烘箱 3．冰箱 4．水浴鍋 5．微量移液器 6．高壓滅菌鍋

（二）材料 1．生理鹽水

2．十二烷基硫酸鈉（SDS）3．三羥甲基氨基甲烷（Tris）4．乙二胺四乙酸（EDTA）5．飽和酚 6．氯仿 7．異戊醇 8．無水乙醇 9．75%乙醇 10．蛋白酶K 11．RNase酶

12．手術(shù)剪刀、鑷子、吸水紙 13．微量取液器

14．研缽、1.5mL 離心管、一次性手套、1.5mL離心管架、記號(hào)筆

（三）試劑配制 1．Tris–HCL 1mol/L PH8.0 50ml 配制方法：

40ml雙蒸水，6.057g固體Tris放入燒杯中溶解，用濃鹽酸調(diào)PH值到8.0，轉(zhuǎn)移到50ml容量瓶中，加入雙蒸水定容，搖勻后，轉(zhuǎn)到準(zhǔn)備好的輸液瓶中，貼上標(biāo)簽，高壓滅菌后，降至室溫，4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

2．生理鹽水: 0.85%NaCL 100ml 配制方法：

在20ml雙蒸水中溶解0.85g固體NaCL，加水定容至100ml，搖勻后，轉(zhuǎn)到準(zhǔn)備好的輸液瓶中，貼上標(biāo)簽，高壓滅菌后，降至室溫，4℃保存?zhèn)溆谩?．EDTA 0.5mol/L PH8.0 50ml 配制方法：

將9.08g的EDTA·Na2·2H2O溶解于40ml雙蒸水，用1g的NaOH顆粒（慢慢逐步加入）調(diào)PH值到8.0，用50ml容量瓶定容，如果EDTA難溶，先加NaOH溶解，然后逐步加EDTA·Na2·2H2O。

4．TES緩沖液（釋放DNA）100ml 配制方法：

將0.5844g的5 mol/lNaCl溶解于80ml雙蒸水，在分別加入1ml的0.5 mol/l EDTA、0.2ml的Tris-HCl(pH=8.0)，加定容至100ml, 搖勻后，轉(zhuǎn)到準(zhǔn)備好的輸液瓶中，貼上標(biāo)簽，高壓滅菌后，降至室溫，4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

5．10% SDS（變性劑 破細(xì)胞壁）100ml 配制方法：

將10g的十二烷基硫酸鈉（SDS）溶解于80ml雙蒸水于68℃加熱溶解，用濃HCl調(diào)至PH=7.2，定容至100ml，搖勻后，轉(zhuǎn)到準(zhǔn)備好的輸液瓶中，貼上標(biāo)簽，4℃保存?zhèn)溆谩?．蛋白酶K（降解蛋白質(zhì)）：20mg/mL 無菌三蒸水溶解。7．RNA酶（降解RNA）配制方法：

將胰RNA酶（RNA酶A）溶于10mmol/L的Tris·CL（PH7.5）、15mmol/LNaCL中，配成10mg/ml的濃度，于100℃加熱15min，緩慢冷卻至室溫，分裝成小份存于–20℃。8．氯仿：異戊醇=24：1 100ml 按24:1的比例加入氯仿、異戊醇，搖勻，轉(zhuǎn)到準(zhǔn)備好的瓶中，貼上標(biāo)簽，4℃保存?zhèn)溆谩?．TE緩沖液（溶解DNA）PH8.0 50ml 配制方法：

將0.5ml 的10mmol Tris-HCl(PH8.0)、0.1ml的0.5mol/l EDTA(PH8.0)加入到50ml的容量瓶中，調(diào)PH8.0定容至50ml搖勻后，轉(zhuǎn)到準(zhǔn)備好的瓶中，貼上標(biāo)簽，高壓滅菌后，降至室溫，4℃保存?zhèn)溆谩！緦?shí)驗(yàn)步驟】

1．組織塊解凍，用生理鹽水洗去血污，剪取約0.5g組織，放入1.5ml離心管中，剪碎。2．加入0.45ml TES混勻，再加入50ul SDS（10%），5.0ul蛋白酶K（20mg/ml），充分混勻后，于56°C保溫4-6h，每2h搖1次。3．放置到室溫，加入等體積飽和酚（500ul），顛倒混勻，10000r/m，離心10m，分離水相和有機(jī)相，小心吸取上層含核酸的水相，到一個(gè)新的1.5ml離心管。4．加入等體積酚：氯仿：異戊醇（25：24：1），顛倒混勻，10000r/m，離心10分鐘，取上層轉(zhuǎn)移到新的1.5ml離心管中。5．加入等體積氯仿：異戊醇（24：1），顛倒混勻，10000r/m，離心10分鐘，取上層清液到一個(gè)新的1.5ml離心管。6．加入2.5倍體積的-20°C預(yù)冷的無水乙醇沉淀DNA，觀察現(xiàn)象。7．12000 r/m，離心10分鐘，棄乙醇。8．-20°C保存的75%乙醇洗滌，10000 r/m，離心5分鐘，去乙醇，55°C干燥DNA。9．加入適量TE溶解DNA（具體依DNA的多少而定），-20°C保存?zhèn)溆??！咀⒁馐马?xiàng)】

1．抽提每一步用力要柔和，防止機(jī)械剪切力對(duì)DNA的損傷。2．取上層清液時(shí)，注意不要吸起中間的蛋白質(zhì)層。3．乙醇漂洗去乙醇時(shí)，不要蕩起DNA。

4．離心后，不要晃動(dòng)離心管，拿管要穩(wěn)，斜面朝外。

第三篇：教育研究方法開題報(bào)告

桂林市農(nóng)村留守兒童教育問題研究”課題

開題報(bào)告

數(shù)學(xué)科學(xué)學(xué)院 數(shù)學(xué)與應(yīng)用數(shù)學(xué) 201010700015 徐小鴻 一．研究的背景

所謂留守兒童，是指父母雙方或一方流動(dòng)到其他地區(qū)工作，孩子留在戶籍所在地不能和父母共同生活在一起的兒童,大規(guī)模的人口流動(dòng)形成了一個(gè)特殊群體：留守兒童。父母外出打工后，孩子留在了家中(主要在農(nóng)村)，他們被稱為留守兒童。

由于地理和歷史等原因，我國(guó)不同區(qū)域的經(jīng)濟(jì)發(fā)展很不平衡，農(nóng)村人地矛盾尖銳。在市場(chǎng)經(jīng)濟(jì)迅猛發(fā)展的推動(dòng)下，大量農(nóng)村剩余勞動(dòng)力為改變生存狀況外出務(wù)工，其中大部分為夫妻一同外出，因經(jīng)濟(jì)等原因無法將子女帶在身邊，由此引發(fā)“留守兒童”問題。由于留守兒童多由祖輩照顧，父母監(jiān)護(hù)教育角色的缺失，對(duì)留守兒童的全面健康成長(zhǎng)造成不良影響，“隔代教育”問題在“留守兒童”群體中最為突出。

據(jù)調(diào)查顯示，父母外出打工后，與留守兒童聚少離多，溝通少，遠(yuǎn)遠(yuǎn)達(dá)不到其作為監(jiān)護(hù)人的角色要求，而占絕對(duì)大比例的隔代教育又有諸多不盡人意處，這種狀況容易導(dǎo)致留守兒童“親情饑渴”，心理健康、性格等方面出現(xiàn)偏差，學(xué)習(xí)受到影響。

二、研究目的：

課題研究、實(shí)施的主要目的在于將留守兒童的這一特殊群體的問題與社會(huì)轉(zhuǎn)型期少年兒童發(fā)展中普遍存在的共性問題區(qū)別開來，真實(shí)、全面地了解留守兒童的心理、學(xué)習(xí)、生活狀態(tài)，了解留守兒童的教育狀況、分析留守兒童長(zhǎng)遠(yuǎn)發(fā)展趨勢(shì)和中國(guó)社會(huì)的長(zhǎng)遠(yuǎn)發(fā)展趨勢(shì)，探索有效推進(jìn)留守兒童教育、發(fā)展的方法和手段，為學(xué)校和政府相關(guān)部門制定政策提供背景資料和學(xué)術(shù)支持。

三、課題研究的價(jià)值

1、通過本課題的研究，找到農(nóng)村留守兒童的學(xué)習(xí)、生活和行為習(xí)慣方面存在的問題，分析這些問題產(chǎn)生的原因。

2、加強(qiáng)家校聯(lián)系，對(duì)留守兒童的學(xué)習(xí)、生活和行為習(xí)慣進(jìn)行指導(dǎo)，培養(yǎng)留守兒童健全的個(gè)性心理品質(zhì)及社會(huì)適應(yīng)能力。

3、有計(jì)劃地推行行之有效的措施與方法，狠抓落實(shí)，全面推廣“留守兒童之家”工程，為留守兒童創(chuàng)建健康、安全、平等的成長(zhǎng)環(huán)境。

四、國(guó)內(nèi)外相近課題研究情況： 由于國(guó)外國(guó)情的差異，留守兒童比例較少，留守兒童教育問題并不十分突出，所以相關(guān)的課題研究基本沒有。

國(guó)內(nèi)對(duì)留守兒童問題的關(guān)注，主要是近幾年才有的。中央教科所和部分市縣教育部門對(duì)留守兒童教育問題的研究逐漸增多，大多正在課題研究過程。

五、研究的方法 1、文獻(xiàn)資料法

搜集、整理與課題有關(guān)的教育教學(xué)理論，為課題研究提供充實(shí)可行的理論依據(jù)。、問卷調(diào)查法

抽樣調(diào)查桂林市農(nóng)村的一些學(xué)校留守兒童基本情況及存在的問題。3、教育實(shí)驗(yàn)法

對(duì)留守兒童與其他學(xué)生進(jìn)行比較實(shí)驗(yàn)研究，以便發(fā)現(xiàn)、驗(yàn)證因果規(guī)律。4、經(jīng)驗(yàn)總結(jié)法

對(duì)收集的資料和實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果主要運(yùn)用經(jīng)驗(yàn)總結(jié)法，探求留守兒童的教育方法和手段。5、案例研究法

選擇恰當(dāng)?shù)膶W(xué)生樣本，通過跟蹤調(diào)查、教育引導(dǎo)，摸索留守兒童教育的一般規(guī)律。

六、正文提綱：

1、桂林市農(nóng)村留守兒童基本情況調(diào)查研究。

2、桂林市農(nóng)村留守兒童生存現(xiàn)狀分析。

3、桂林市農(nóng)村留守兒童教育中存在的問題及產(chǎn)生原因。

4、桂林市農(nóng)村留守兒童個(gè)案研究。

5、桂林市農(nóng)村留守兒童教育的對(duì)策與建議。

七、進(jìn)度安排

第一階段：準(zhǔn)備階段（2013年4月15――2011年4月30）

計(jì)劃開題，收集資料調(diào)查桂林市留守兒童教育現(xiàn)狀，確定研究子課題，搜集已有研究成果，學(xué)習(xí)理論，寫出研究實(shí)驗(yàn)方案。

第二階段：實(shí)驗(yàn)階段（2012年5月――2012年5月）

堅(jiān)持學(xué)習(xí)、實(shí)踐、研究。邊實(shí)施，邊改進(jìn)，邊研究，積累收集資料，總結(jié)歸納桂林市農(nóng)村留守兒童教育存在的問題，研究桂林市農(nóng)村留守兒童教育的對(duì)策，撰寫階段研究報(bào)告、典型案例分析或論文。

第三階段：結(jié)題階段（2013年6月――2013年6月）收集、整理實(shí)驗(yàn)原始資料，撰寫實(shí)驗(yàn)課題研究報(bào)告和課題總結(jié)，進(jìn)行結(jié)題驗(yàn)收和研究成果交流。

八、目前的困惑

1、怎么樣做到盡可能深入了解留守兒童的真實(shí)情況，做到數(shù)據(jù)的均衡性。

2、怎樣能和留守兒童的父母做一個(gè)交流，探討下有關(guān)留守兒童中的一些問題在那些父母心里的真實(shí)想法，或者讓他們重視孩子身心成長(zhǎng)的重要性。

九、參考文獻(xiàn) ［1］ 徐群．關(guān)注留守兒童教育與創(chuàng)建和諧新農(nóng)村［J］．現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2007（11）:156-157．

［2］ 常青.農(nóng)村留守兒童人格特征研究——以江西玉山縣為例［D］．華東師范大學(xué)碩士論文，2007：17-23． ［3］ 方銘琳．留守兒童的關(guān)愛教育機(jī)制［J］．中國(guó)農(nóng)村教育，2007（10）:32．

第四篇：15年開題報(bào)告研究方法

15年開題報(bào)告研究方法

隨著新課程改革的不斷深人，“教師成為研究者”的觀念逐漸深人人心。開展和參與課題研究是教師獲得自我持續(xù)發(fā)展能力的最佳途徑。事實(shí)證明，通過開展課題研究，邊學(xué)習(xí)邊做課題，邊研究邊實(shí)踐，逐漸成為研究型的教師不乏其人。

課題研究是教育科研活動(dòng)的一項(xiàng)重要內(nèi)容?！胺彩骂A(yù)則立，不預(yù)則廢”。對(duì)于課題研究，開題報(bào)告如同建筑師的藍(lán)圖。有了好的開題報(bào)告，才能使研究工作者有計(jì)劃、有系統(tǒng)、有組織地開展研究工作，以保證課題研究任務(wù)的順利完成。因此，制定開題報(bào)告是課題由設(shè)想轉(zhuǎn)化為實(shí)際行動(dòng)的關(guān)鍵步驟。當(dāng)前許多教師由于過去從未做過課題研究，現(xiàn)在要申報(bào)課題，撰寫課題開題報(bào)告不知從何人手。為了使廣大教師更加積極而有效地開展課題研究活動(dòng)，培養(yǎng)、提高教師撰寫課題開題報(bào)告的能力和水平，本文從課題開題報(bào)告的含義、作用、結(jié)構(gòu)等方面來談教師應(yīng)該如何規(guī)范撰寫開題報(bào)告，力求對(duì)教師提供一點(diǎn)啟示。

一、課題開題報(bào)告的含義與作用

著名的物理學(xué)家愛因斯坦說過，提出一個(gè)問題比解決一個(gè)問題更重要。何謂有價(jià)值、有創(chuàng)見性的問題?這樣的問題從何而來呢?這需要研究者長(zhǎng)期實(shí)踐、細(xì)心觀察和深思熟慮。當(dāng)自己提出的課題得到上級(jí)認(rèn)可后，就要把自己的研究方案設(shè)計(jì)好，即撰寫科研課題開題報(bào)告。

課題開題報(bào)告就是課題研究方案的設(shè)計(jì)、規(guī)劃和制定。換言之，就是當(dāng)課題方向確定之后，課題負(fù)責(zé)人在調(diào)查研究的基礎(chǔ)上撰寫的課題實(shí)施計(jì)劃。開題報(bào)告主要說明這個(gè)課題有價(jià)值進(jìn)行研究，自己有條件進(jìn)行研究以及準(zhǔn)備如何開展研究等問題，也可以說是對(duì)課題的論證和設(shè)計(jì)。

撰寫課題開題報(bào)告是提高選題質(zhì)量和水平的重要環(huán)節(jié)，是創(chuàng)新新知，不是可有可無的。正如學(xué)者文翁說過，“搞好開題報(bào)告的主要目的是促使大家理清研究思路，完善研究設(shè)計(jì)”。制定課題研究計(jì)劃和安排，是為解決自己提出的問題提供探索的途徑。課題開報(bào)告初步規(guī)定了課題研究各方面的具體內(nèi)容和步驟，對(duì)整個(gè)研究工作的順利開展起著關(guān)鍵的作用。對(duì)于科研經(jīng)驗(yàn)較少的人來講，一個(gè)好的方案，可以使他們明確課題研究的方向，避免發(fā)生進(jìn)行一段時(shí)間后不知道下一步干什么的情況，保證整個(gè)研究工作有條不紊地進(jìn)行。可以說，課題開題報(bào)告水平的高低，是一個(gè)課題質(zhì)量與水平的重要反映。沒有科學(xué)的開題報(bào)告，就沒有科學(xué)而有價(jià)值的成果。隨著教育科研管理工作規(guī)范化不斷加強(qiáng)，開題論證問題越來越受到教育科研管理部門的重視。

二、撰寫課題開題報(bào)告的基礎(chǔ)性工作

寫好科研課題開題報(bào)告要了解其基本結(jié)構(gòu)與寫法，但“汝果欲學(xué)詩，功夫在詩外”，重要的還是要做好基礎(chǔ)性工作。首先，要了解別人在這一領(lǐng)域研究的基本情況。研究工作最根本的特點(diǎn)就是要有創(chuàng)造性，熟悉了別人在這方面的研究情況，才不會(huì)在別人已經(jīng)研究很多、很成熟的情況下，重復(fù)別人走過的路，而是站在別人研究的基礎(chǔ)上，從更高層次、更有價(jià)值的方面去研究;其次，要掌握與研究課題相關(guān)的基礎(chǔ)理論知識(shí)。理論基礎(chǔ)扎實(shí)，研究工作才能有一個(gè)堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)，否則，沒有理論基礎(chǔ)，你就很難深人進(jìn)去，很難有真正的創(chuàng)造。因此，我們進(jìn)行教育科學(xué)研究，一定要多方面地收集資料。要加強(qiáng)理論學(xué)習(xí)，只有這樣制定出的開題報(bào)告才能更科學(xué)、更完善。

三、課題開題報(bào)告的結(jié)構(gòu)

撰寫開題報(bào)告是進(jìn)行科研課題申請(qǐng)后的首要工作。通過開題報(bào)告的思考與寫作可以幫助我們清楚地了解自己為什么要做這個(gè)課題，究竟想做什么，想得到什么，怎么做，能否達(dá)到自己的預(yù)期目標(biāo)?若分析后覺得不現(xiàn)實(shí)，則可以立即調(diào)整自己的方向和目標(biāo)，使課題目標(biāo)的達(dá)成有可能性，從而避免“大題小作”或“小題大作”。課題開題報(bào)告的寫法根據(jù)課題研究的類別略有不同。但一般地說，科研課題開題報(bào)告主要包括以下幾個(gè)方面:

1.課題研究的背景

2.國(guó)內(nèi)外同一研究領(lǐng)域的現(xiàn)狀與趨勢(shì)分析、本課題與之聯(lián)系和區(qū)別

3.課題研究的實(shí)踐意義與理論價(jià)值

4.課題核心概念的界定

5.課題研究的目標(biāo)

6.課題研究的內(nèi)容(所要解決的主要問題)

7.課題研究的過程

8.課題研究的方法

9.預(yù)期研究成果

10.完成課題研究的可行性分析

11.參考文獻(xiàn)

四、課題開題報(bào)告撰寫規(guī)范

(一)課題提出的背景

首先，要闡明課題研究的背景，即根據(jù)什么、受什么啟發(fā)而進(jìn)行這項(xiàng)研究的。因?yàn)槿魏握n題研究都不是憑空來的，都有一定的背景和思路。其次，要闡明為什么要研究這個(gè)課題、研究它有什么價(jià)值，能解決什么問題。一般可以先從現(xiàn)實(shí)需要方面去論述，指出現(xiàn)實(shí)中存在這個(gè)問題，需要去研究，去解決，本課題的研究有什么實(shí)際作用，然后，再寫課題的理論和學(xué)術(shù)價(jià)值，最后就是所要解決的主要問題，課題研究所要解決的主要問題要有針對(duì)性、可操作性，這是課題研究的生命力所在。解決的重要問題與提出的背景間有著必然的、照應(yīng)的聯(lián)系，不能游離或架空。

這些都要寫得具體，不能漫無邊際地空喊口號(hào)，寫成諸如堅(jiān)持黨的教育方針、實(shí)施素質(zhì)教育、提高教育教學(xué)質(zhì)量等一般性的口號(hào)。一位高中化學(xué)教師在課題開題報(bào)告中對(duì)其課題意義是這樣寫的:“高考實(shí)施3十x方案后，化學(xué)學(xué)科作為一門選考科目，其教育、教學(xué)必將受到一定影響。如何在當(dāng)前的形勢(shì)下進(jìn)一步提高高中化學(xué)教學(xué)和教育水平，這是化學(xué)工作者所面臨的一個(gè)急待解決的問題。本課題正是以3十x對(duì)高中化學(xué)教學(xué)的影響為引線，以1999屆至xx屆為觀察樣本，運(yùn)用觀察、統(tǒng)計(jì)、訪問等現(xiàn)代教育科學(xué)研究方法，……研究如何在3十x實(shí)施過程中調(diào)整教學(xué)模式，提高學(xué)生綜合素質(zhì)等問題，為在教學(xué)改革的新形勢(shì)下提高高中化學(xué)教學(xué)水平進(jìn)行有益的探討”。這樣有針對(duì)性地寫使別人一看就覺得科學(xué)性、實(shí)用性比較強(qiáng)，的確有價(jià)值。

(二)國(guó)內(nèi)外同一研究領(lǐng)域的現(xiàn)狀與趨勢(shì)分析、本課題與之聯(lián)系和區(qū)別

闡述這部分內(nèi)容必須采用文獻(xiàn)資料研究的方法，通過查閱資料、搜索發(fā)現(xiàn)國(guó)內(nèi)外近似或界于同一課題研 究的歷史、現(xiàn)狀與趨勢(shì)。

歷史背景方面的內(nèi)容：按時(shí)間順序，簡(jiǎn)述本課題的來龍去脈，著重說明本課題前人研究過沒有?哪些方面已有人作過研究?取得了哪些成果?這些研究成果所表達(dá)出來的觀點(diǎn)是否一致?如有分歧，那么他們的分歧是什么?存在什么不足，通過歷史對(duì)比，說明各階段的研究水平。

現(xiàn)狀評(píng)述，重點(diǎn)論述當(dāng)前本課題國(guó)內(nèi)外的研究現(xiàn)狀，著重評(píng)述本課題目前存在的爭(zhēng)論焦點(diǎn)，比較各種觀點(diǎn)的異同，闡述本課題與之聯(lián)系及區(qū)別，力求表現(xiàn)出自己課題研究的個(gè)性及特色。這一部分的內(nèi)容應(yīng)力求精當(dāng)，力求體現(xiàn)自身研究的價(jià)值。

發(fā)展方向方面的內(nèi)容：通過縱(向)橫(向)對(duì)比，肯定本課題目前國(guó)內(nèi)外已達(dá)到的研究水平，指出存在的問題，提出可能的發(fā)展趨勢(shì)，指明研究方向，提出可能解決的方法。

(三)課題研究的實(shí)踐意義和理論價(jià)值

實(shí)踐意義，指向操作層面，即通過課題研究對(duì)學(xué)校、教師、學(xué)生的可持續(xù)發(fā)展有什么促進(jìn)，在具體的教育教學(xué)實(shí)踐中有哪些好處。它的闡述是通過假設(shè)關(guān)系，勾勒出通過研究可能會(huì)或一定會(huì)產(chǎn)生的實(shí)踐效果。

中小學(xué)的教育科研更多地取向于應(yīng)用研究和發(fā)展研究，在理論方面的學(xué)術(shù)研究?jī)r(jià)值可能比較匱乏，但也不可否認(rèn)，通過研究，可能達(dá)到了對(duì)某一相關(guān)理論的細(xì)化和補(bǔ)充，對(duì)某一理論進(jìn)行了具體闡述與充實(shí)，或許還會(huì)產(chǎn)生賦予全新內(nèi)涵的實(shí)用理論。這部分內(nèi)容有就寫，無則免。

(四)課題核心概念的界定

界定即定義，課題界定，即對(duì)課題的詮釋，對(duì)課題的核心概念進(jìn)行說明。采用歸納和演繹的方法，引用教育理論、整合文獻(xiàn)知識(shí)等，以分段或標(biāo)題陳述的形式確定概念及其內(nèi)涵與外延，采用分——總的方法，對(duì)課題中的研究對(duì)象、范疇、方法，抽取出本質(zhì)屬性分別給予概括，最終形成對(duì)整個(gè)研究課題名稱的科學(xué)界定。

如：在《培養(yǎng)學(xué)生創(chuàng)新精神和實(shí)踐能力策略研究》這個(gè)課題中，對(duì)課題的界定為：

本課題的研究就是圍繞著教育改革與發(fā)展的核心問題，運(yùn)用心理學(xué)、教育學(xué)、社會(huì)學(xué)理論和知識(shí)，積極探索與研究培養(yǎng)學(xué)生創(chuàng)新精神與實(shí)踐能力的途徑、方法、手段及學(xué)校環(huán)境等方面的問題，為職業(yè)學(xué)校進(jìn)行學(xué)生創(chuàng)新精神與實(shí)踐能力的培養(yǎng)提供可借鑒的實(shí)踐模型。

創(chuàng)新精神是指人的綜合性的積極穩(wěn)定的創(chuàng)造性心理品質(zhì)，是人們?cè)谡J(rèn)識(shí)世界、改造世界時(shí)表現(xiàn)出來的一種不因循守舊而積極求新的精神，是驅(qū)動(dòng)外顯創(chuàng)新行為的內(nèi)隱動(dòng)力。人的一切創(chuàng)新活動(dòng)都是以創(chuàng)新精神為基礎(chǔ)，沒有創(chuàng)精神便沒有人的一切創(chuàng)新活動(dòng)。因此人類的創(chuàng)新精神是創(chuàng)新活動(dòng)的根本動(dòng)力與靈魂。

實(shí)踐能力是指人們運(yùn)用理論知識(shí)、操作、分析、解決問題的能力。

支撐性理論也就是課題研究的理論依據(jù)。理論支撐行動(dòng)，科學(xué)的理論是科學(xué)研究的保證。比如：我們要進(jìn)行活動(dòng)課實(shí)驗(yàn)研究，就必須以課程理論、學(xué)習(xí)心理學(xué)理論、教育心理學(xué)理論為研究試驗(yàn)的理論依據(jù);進(jìn)行教育模式創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)研究，就必須以教學(xué)理論、教育實(shí)驗(yàn)理論為理論依據(jù)

(五)課題研究的目標(biāo)

課題研究的目標(biāo)就是通過研究，要達(dá)到什么目標(biāo)?研究的目標(biāo)是比較具體的，不能籠統(tǒng)地講，必須清楚地寫出來。只有目標(biāo)明確而具體，才能知道工作的具體方向是什么，才知道研究的重點(diǎn)是什么，思路就不會(huì)被各種因素所干擾。研究目標(biāo)一般包含以下三方面：

1.教師：通過研究希望獲得某一(些)教育教學(xué)規(guī)律，落實(shí)在知識(shí)產(chǎn)品上，表現(xiàn)為教師教育知識(shí)的增長(zhǎng)，教育經(jīng)驗(yàn)的豐富，教育方法的創(chuàng)新和教育理論的發(fā)展等。

2.學(xué)生：通過研究所要達(dá)到的培養(yǎng)人才的目標(biāo)，落實(shí)在學(xué)生的身上，表現(xiàn)為學(xué)生的發(fā)展和成長(zhǎng)。

3.學(xué)校：通過研究所要達(dá)到的學(xué)校教育工作改革和發(fā)展的目標(biāo)，落實(shí)在學(xué)校工作過程中，表現(xiàn)在學(xué)校的效益上。

確定課題研究目標(biāo)時(shí)，一方面要考慮課題本身的要求，另一方面要考慮課題實(shí)際的工作條件與工作水平。

(六)課題研究的內(nèi)容(所要解決的主要問題)

有了課題的研究目標(biāo)，就要將研究題目依據(jù)研究目標(biāo)展開、細(xì)化為若干小問題。課題越大，內(nèi)容越多，越要具體，研究范圍較大的課題應(yīng)列出各子課題的內(nèi)容。

目前在這方面存在的主要問題是:

1、只有課題而無具體研究?jī)?nèi)容;

2、研究?jī)?nèi)容與課題不吻合;

3、課題很大而研究?jī)?nèi)容卻很少;4,把研究的目的、意義當(dāng)作研究?jī)?nèi)容。

因此，我們要學(xué)會(huì)把課題進(jìn)行分解，一點(diǎn)一點(diǎn)地去做。例如：《初中語文活動(dòng)課實(shí)驗(yàn)研究》的開題報(bào)告指出，本課題研究的中心是，如何科學(xué)有序、切實(shí)有效地開展初中語文活動(dòng)課。具體內(nèi)容包括下列三個(gè)方面:

1、根據(jù)初中各年級(jí)學(xué)生的情況和語文教學(xué)要求，對(duì)初中各年級(jí)語文活動(dòng)課對(duì)學(xué)生認(rèn)知領(lǐng)域、情感領(lǐng)域和動(dòng)作技能領(lǐng)域素質(zhì)的發(fā)展進(jìn)行詳細(xì)的目標(biāo)規(guī)定，從而建立初中語文活動(dòng)類課程的目標(biāo)體系。

2、根據(jù)初中各年級(jí)語文活動(dòng)課目標(biāo)和語文學(xué)科的特點(diǎn)，安排初中各年級(jí)語文活動(dòng)課的內(nèi)容，內(nèi)容的安排力求充實(shí)、精確、有序，并初步形成一個(gè)相對(duì)完整的活動(dòng)課內(nèi)容體系。

3、根據(jù)初中各年級(jí)語文活動(dòng)課目標(biāo)內(nèi)容和初中各年級(jí)學(xué)生的特點(diǎn)，探索初中語文活動(dòng)類課程的學(xué)習(xí)活動(dòng)方式，確定活動(dòng)類課程的教學(xué)時(shí)間、空間及程序，并在此基礎(chǔ)上形成多種切實(shí)可行的可操作的語文活動(dòng)教學(xué)模式。

(七)課題研究的過程(步驟和計(jì)劃)

課題研究的步驟，就是課題研究在時(shí)間和順序上的安排。研究的步驟要充分考慮研究?jī)?nèi)容的相互關(guān)系和難易程度，一般情況下，都是從基礎(chǔ)性問題開始，分階段進(jìn)行。一般劃分為三個(gè)階段：前期準(zhǔn)備階段、中期實(shí)施階段、后期總結(jié)階段。每一個(gè)階段有明顯的時(shí)間設(shè)定，從什么時(shí)間開始，至什么時(shí)間結(jié)束都要有規(guī)定，要有詳盡的研究?jī)?nèi)容安排、具體的目標(biāo)落實(shí)，從而保證研究過程的環(huán)環(huán)緊扣，有條不紊、循序漸進(jìn)。

每一階段的工作任務(wù)和要求，不僅要胸中有數(shù)，還要落實(shí)到書面計(jì)劃中。從而保證課題研究按時(shí)保質(zhì)保量完成，課題研究的管理也可據(jù)此對(duì)課題研究進(jìn)行檢查、督促和管理。

(八)課題研究的方法

任何科學(xué)研究除了要應(yīng)用哲學(xué)方法和一般科學(xué)方法之外，還要有具體的研究方法、技術(shù)手段?！把芯糠椒ā边@部分，主要反映一項(xiàng)課題的研究通過什么方法來驗(yàn)證我們的假設(shè)，為什么要用這個(gè)方法?以及要“做什么”、“怎么做”。教育研究的方法很多，包括文獻(xiàn)研究法、調(diào)查研究法、實(shí)驗(yàn)研究法、個(gè)案研究法、經(jīng)驗(yàn)總結(jié)法、行動(dòng)研究法等等。一個(gè)大的課題往往需要多種方法，小的課題可能主要是

一、兩種方法。比如，要研究學(xué)生實(shí)踐能力的現(xiàn)狀必定離不開調(diào)查法;要研究問題家庭學(xué)生的教育對(duì)策可采用個(gè)案法等等。這一部分是課題方案設(shè)計(jì)的主體，課題研究是否有價(jià)值、目標(biāo)任務(wù)如何得到研究落實(shí)，在這部分應(yīng)給人一覽無余的感覺。

(九)課題研究的預(yù)期成果與表現(xiàn)形式

課題研究成果預(yù)測(cè)即研究過程中可能會(huì)帶來什么成果?成果形式包括研究報(bào)告、教育教學(xué)論文、專著、影像資料(含課件)、典型的教案、教具學(xué)具、學(xué)生作品等。課題不同，研究成果的內(nèi)容、形式也不一樣，但不管形式是什么，課題研究必須有成果，否則，就是這個(gè)課題沒有完成。在開題報(bào)告中設(shè)計(jì)出成果形式，可以使研究者明確將來用什么表現(xiàn)研究成果，以便從開始就可以著手努力積累材料、構(gòu)思框架、進(jìn)行分工，以利于研究成果的順利問世。同時(shí)也有利于課題管理者據(jù)此對(duì)課題進(jìn)行檢查驗(yàn)收。

(十)完成課題的可行性分析

可行性，即研究課題的可實(shí)施性，是指課題研究所需的條件是否具備，如研究所需的信息資料、實(shí)驗(yàn)器材、研究經(jīng)費(fèi)、學(xué)生的知識(shí)水平和技能及研究者的學(xué)歷、學(xué)習(xí)能力、研究能力和研究經(jīng)驗(yàn)等等是否具備。它建構(gòu)于先進(jìn)的理念、科學(xué)的設(shè)計(jì)、扎實(shí)的功底等，一句話，就是要從若干方面說明對(duì)本課題的研究，我們有實(shí)力、有能力、有潛力去完成。

成立課題組、健全研究機(jī)構(gòu)，做到研究任務(wù)、時(shí)間、人員三落實(shí);制度保證：制定課題管理?xiàng)l例、規(guī)范學(xué)習(xí)、研究制度，以激勵(lì)為杠桿，激活教師研究熱情;經(jīng)費(fèi)保證：設(shè)立課題研究專項(xiàng)經(jīng)費(fèi)，保證研究過程中相關(guān)書籍、必要設(shè)備的添置及外出學(xué)習(xí)、開展活動(dòng)等的經(jīng)費(fèi)來源;技術(shù)保證：聘請(qǐng)專家擔(dān)任顧問，選派骨干外出培訓(xùn)，組織外出參觀學(xué)習(xí)等;課題研究與學(xué)校工作相協(xié)調(diào)：做到教學(xué)科研化，科研教學(xué)化，使學(xué)校教育教學(xué)與教育科研同步發(fā)展、共同提高。

第五篇：教育研究方法開題報(bào)告材料

有關(guān)大學(xué)生考試作弊現(xiàn)象的研究

（一）研究背景分析

1．選題背景

在當(dāng)今社會(huì)上，應(yīng)試教育已經(jīng)是普遍的一種選拔人才的教育制度，不論中小學(xué)生，還是高中生，甚至是大學(xué)生，都必須面臨考試。而現(xiàn)在許許多多的在校大學(xué)生們都需要通過考試，從而獲得學(xué)分，當(dāng)獲得足夠多的學(xué)分時(shí)，才能夠順利畢業(yè)；否則將面臨無法畢業(yè)的情況?？墒?，現(xiàn)在的大學(xué)校園生活里，學(xué)生的學(xué)習(xí)氛圍越來越淡薄，許多學(xué)生把精力、心思都放在社團(tuán)活動(dòng)或者是兼職等方面上。已經(jīng)不再像高中時(shí)期那樣，把所有心思都放在學(xué)習(xí)上。也有不少大學(xué)生平時(shí)總是逃課或者是不聽課，導(dǎo)致一點(diǎn)知識(shí)都沒有學(xué)進(jìn)去，然而，不管怎樣在大學(xué)里，所有學(xué)生都必須通過考試來獲得學(xué)分，而且想要申請(qǐng)一些獎(jiǎng)項(xiàng)時(shí)，申請(qǐng)條件中總會(huì)有要求學(xué)生的成績(jī)要很好，所以這時(shí)成績(jī)顯得尤為重要，但是，對(duì)于那些沒有認(rèn)真學(xué)習(xí)過的學(xué)生而言，要順利通過考試，那是相當(dāng)有難度的，于是，他們?yōu)榱送ㄟ^考試，盲目地選擇了作弊。

2．選題意義

當(dāng)代社會(huì)，誠信問題已經(jīng)是大眾所關(guān)注的焦點(diǎn)，現(xiàn)在許多公司或者是招聘單位都會(huì)明確表明他們需要的人才具備誠信的品質(zhì)。因?yàn)檎\信在當(dāng)今社會(huì)中起著舉足輕重的地位，誠信往往與許多事情有關(guān)系，例如：商品質(zhì)量、公司信譽(yù)度、員工素質(zhì)等等，誠信往往能夠決定一個(gè)單位的存亡問題，所以對(duì)于要在社會(huì)建立一個(gè)立足點(diǎn)，誠信是必不可少的。

核心概念的界定

作弊一詞的含義，在《當(dāng)代漢語詞典》中，是指用欺騙的手法做違法亂紀(jì)或不合規(guī)定的事情。

（二）文獻(xiàn)綜述

我國(guó)已有許多學(xué)者對(duì)大學(xué)生考試作弊進(jìn)行研究，探討究竟是什么因素影響大學(xué)生，導(dǎo)致他們?cè)诳荚囍羞M(jìn)行作弊。

《高校對(duì)話型全員德育新體系研究》中，第九章《對(duì)話的艱難性——大學(xué)生德育工作中的另類問題剖析》談?wù)摰阶鞅走@樣問題。其中文中的第一部分講述了作弊問題，作者分成三部分闡述，第一部分是大學(xué)生作弊的主要類型，在此作者提出了三個(gè)類型：紙條傳遞型、肢體語言表達(dá)型、信息技術(shù)應(yīng)用型。作者比較詳細(xì)地講述了這些作弊類型；而第二部分講的是大學(xué)生作弊的主要原因，作者從宏觀角度和微觀角度來分析大學(xué)生的作弊行為。從宏觀角度講，作者認(rèn)為社會(huì)不良風(fēng)氣、高校人才評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)的偏頗和高等教育教學(xué)管理工作中的弊端導(dǎo)

致大學(xué)生考試作弊；從微觀角度出發(fā)，則是大學(xué)生自身做人標(biāo)準(zhǔn)問題出現(xiàn)偏差；第三部分則是高校德育工作的應(yīng)對(duì)策略，作者從強(qiáng)化輿論宣傳、建立健全制度、教學(xué)改革等角度提出自己的見解。

還有其他相關(guān)文章，在翟紅的《大學(xué)生考試作弊成因分析及對(duì)策》中，從作弊的行為特點(diǎn)、心理等方面進(jìn)行研究，又如曹容平、董九元、王剛等人寫的《當(dāng)代大學(xué)生考試作弊行為特征研究》通過數(shù)據(jù)分析等也對(duì)大學(xué)生考試作弊這一現(xiàn)象進(jìn)行探討。

2011年3月8日，在《武進(jìn)日?qǐng)?bào)》中，有一篇《英國(guó)大學(xué)生作弊嚴(yán)重論文買賣交易額超2億英鎊》，里面講述了英國(guó)大學(xué)生的作弊現(xiàn)象。

在《教育·實(shí)踐·創(chuàng)新：高職高專學(xué)生思想政治教育研究》里，何酉寧和楊浩的《大學(xué)生作弊行為的原因分析及對(duì)策研究——以成都紡織高等?？茖W(xué)校為例》，具體分析了成都紡織高等專科學(xué)校里大學(xué)生作弊的現(xiàn)象。

（三）研究?jī)?nèi)容及目標(biāo)

1．研究?jī)?nèi)容

（1）研究大學(xué)生考試作弊現(xiàn)狀。

（2）研究大學(xué)生考試作弊原因，從家庭因素、社會(huì)因素、學(xué)校因素、個(gè)人因素等等方面進(jìn)行研究，并提出一些建議。

2．研究目標(biāo)

詳細(xì)分析并整理大學(xué)生考試作弊的原因并就這些原因提出對(duì)學(xué)校、對(duì)學(xué)生都有效的意見或建議。

（四）研究的方法及具體措施

1．研究的方法：

（1）圖書館查找文獻(xiàn)。學(xué)校圖書館是一個(gè)資源庫，到圖書館里查找有關(guān)考試作弊的相關(guān)文獻(xiàn)，有利于我們更好的研究“大學(xué)生考試作弊原因”的這個(gè)課題。

（2）網(wǎng)上查找。網(wǎng)上有很多關(guān)于大學(xué)生考試作弊的相關(guān)內(nèi)容，我們可以借此作為參考

2．研究的具體措施

（1）我們組成員聚在一起討論對(duì)于這個(gè)課題所要研究的方向、步驟、分工。

（2）我們組成員各自去圖書館或網(wǎng)絡(luò)上查找相關(guān)的書籍、資料、報(bào)告等等。

（五）研究人員分工及步驟

XXX：

搜集資料，包括通過網(wǎng)絡(luò)檢索以及圖書館館藏書籍的查閱等手段，其

中網(wǎng)絡(luò)工具的檢索使用較多。最后對(duì)工作進(jìn)行總結(jié)。

在選定課題后分析選題背景，界定大學(xué)生考試作弊原因的核心概念以及選題的意義。

調(diào)查國(guó)內(nèi)相關(guān)高校學(xué)生考試作弊的研究綜述。

XXX：

負(fù)責(zé)整合資料，研究?jī)?nèi)容的最終確定以及探究研究目標(biāo)。

XXX：

確定研究人員的分工以及研究步驟。

研究步驟：

1、小組討論，草擬研究課題

2、調(diào)查資料，估計(jì)課題實(shí)施的可行性

3、最終確定研究課題

4、明確分工，開始行動(dòng)

5、小組討論分析資料

6、按原本的分工，將分析結(jié)果以書面形式呈現(xiàn)。

7、作總結(jié)

（六）課題研究條件分析

作為研究人員的馬曉銘、黎小英、胡文君都是韶關(guān)學(xué)院教育學(xué)院2010級(jí)小學(xué)教育專業(yè)的學(xué)生，作為身處被調(diào)查對(duì)象集中校園中的一名大學(xué)生，在正確選擇調(diào)查問題方面有相對(duì)優(yōu)勢(shì)。

現(xiàn)今社會(huì)推行誠信為人的準(zhǔn)則，作為教育中較為高層次的大學(xué)生作弊現(xiàn)象更被公眾所關(guān)注，因此調(diào)查分析大學(xué)生作弊屢禁不止現(xiàn)象的原因、找出解決問題的方案就顯得十分必要。我們的組員在再三思慮后決定將其作為我們的調(diào)查研究對(duì)象。

作為社會(huì)上眾人關(guān)注的問題之一，有關(guān)大學(xué)生考試作弊現(xiàn)象的研究的相關(guān)成果也不少。以下是部分我們搜索到的資料。

《大學(xué)生考試作弊屢禁不止的原因及對(duì)策》——曲秀英2004.03.31 經(jīng)濟(jì)導(dǎo)報(bào)

《大學(xué)生考試作弊現(xiàn)象淺析》——明哲2005.3 吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院學(xué)報(bào)第14卷第1期

《淺析大學(xué)生考試作弊行為原因及對(duì)策》——丁娜、馬健平、張洪綱 2009 文化與教育技術(shù)

《大學(xué)生考試作弊的原因和對(duì)策》——李寶華 遼寧教育研究，1999.05

《高校學(xué)生考試作弊的現(xiàn)狀調(diào)查及其對(duì)策》——王金彪，張麗霞 2004.01 大學(xué)教育科學(xué)

《大學(xué)生考試作弊的原因與對(duì)策》——王術(shù)，陳耀武 2008.08 高等教育農(nóng)業(yè)

《加強(qiáng)考風(fēng)建設(shè)、構(gòu)建和諧校園》——范玉輝，周先進(jìn) 2007.03 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)

《高校學(xué)生考試作弊問題的調(diào)查研究與對(duì)策》——陸桂平，陳龍，王小全 2002.02 中國(guó)高等醫(yī)學(xué)教育

《試論大學(xué)生考試作弊行為的現(xiàn)狀與對(duì)策》——陳志國(guó)，郭宏英 2009.3 中小企業(yè)管理與科技

《大學(xué)生考試作弊淺析》——王麗萍，梅永剛 2008.7（第13卷）西安郵電學(xué)院學(xué)報(bào)

《大學(xué)生學(xué)業(yè)作弊現(xiàn)象成因及對(duì)策探討》——徐亞，徐甜甜 2007（第三期）職業(yè)圈

《關(guān)于大學(xué)生考試作弊現(xiàn)象的探討》——崔玉波，喬志和，王忠民 2010.06 教書育人.高校論壇

《大學(xué)生考試作弊行為的博弈分析與對(duì)策》——孫世民，李世峰 2004

（8）高等農(nóng)業(yè)教育

《大學(xué)生考試作弊成因分析與對(duì)策探討》——漆勇政，魏友博 2003

（5）；83-86 高等農(nóng)業(yè)

（七）課題研究預(yù)期的成果表達(dá)形式

大學(xué)生考試作弊的現(xiàn)狀：

在現(xiàn)在的大學(xué)校園里，大學(xué)生考試作弊現(xiàn)象是實(shí)實(shí)在在地存在的，不論是中小學(xué)學(xué)校還是高等學(xué)府，考試作弊總是存在的。學(xué)生作弊無非是為了取得自己想要的成績(jī)，所以只要還存在考試制度，那么學(xué)生考試作弊就會(huì)一直存在。

研究預(yù)期成果：

一、找出大學(xué)生作弊的主要原因：

1.學(xué)生自身學(xué)習(xí)興趣不濃

學(xué)生自身的興趣、愛好不同導(dǎo)致對(duì)某一方面的投入精力不足，我們常說每個(gè)人的智力水平基本差不多，不存在智力過大的差異，之所以有學(xué)習(xí)成績(jī)好的學(xué)生，學(xué)生差的學(xué)生，主要是學(xué)生對(duì)于學(xué)習(xí)的態(tài)度不同。有的學(xué)生把學(xué)習(xí)知識(shí)當(dāng)作興趣；有的則把學(xué)習(xí)當(dāng)作負(fù)擔(dān)，但相反的可能動(dòng)手的能力比較強(qiáng)等；還有的學(xué)生不愛學(xué)習(xí)，熱衷于經(jīng)商；還有的家庭生活困難的學(xué)生平時(shí)大部分時(shí)間和精力用于家教等方面，以致對(duì)學(xué)習(xí)用心不足，考試只好企圖作弊過關(guān)。

2.學(xué)生之間的“傳幫”作用

剛剛?cè)雽W(xué)的新生，有的可能在高中時(shí)或多或少積累了一些作弊經(jīng)驗(yàn)，但由于剛剛步入大學(xué)的校門，如果學(xué)校抓的嚴(yán)，或許收斂一些，如果有機(jī)可乘，便可通過作弊獲得成績(jī)合格。但時(shí)間不長(zhǎng)，高年級(jí)的學(xué)生便會(huì)向低年級(jí)的學(xué)生、老鄉(xiāng)便會(huì)向老鄉(xiāng)傳授作弊經(jīng)驗(yàn)、心得，這是一個(gè)非?？膳碌默F(xiàn)象，如果長(zhǎng)此以往，而不加治理，學(xué)校的名聲可能會(huì)

毀于一旦。

3.學(xué)生的心理原因

⑴ 學(xué)生的不平衡心理，有的學(xué)生平時(shí)不努力學(xué)習(xí)，如果考試作弊成功，將會(huì)取得一個(gè)好的分?jǐn)?shù)，而平時(shí)努力學(xué)習(xí)的學(xué)生不作弊可能考試成績(jī)并不理想，這樣一來，好的學(xué)生有的就會(huì)出現(xiàn)不平衡心理，如果意志力薄弱，也會(huì)加入作弊的行列。

⑵ 學(xué)生之間的同情心，有的學(xué)生看到別人總是被抓科，補(bǔ)考還不過，而且大家又是同班同學(xué)，平時(shí)處得又比較好，于是考試時(shí)就會(huì)伸出援助之手，如果不幫忙，又怕同學(xué)的關(guān)系弄僵，更助長(zhǎng)了作弊之風(fēng)。⑶ 賭博心理，這類學(xué)生主要是平時(shí)根本不努力學(xué)習(xí)，上課逃課，考試經(jīng)常不及格。經(jīng)常作弊如果過了固然好，考試不過也不會(huì)太在乎。

4.社會(huì)激烈競(jìng)爭(zhēng)與大學(xué)生就業(yè)壓力增加帶來的影響

隨著高校擴(kuò)招后的畢業(yè)生數(shù)量大幅增加,社會(huì)競(jìng)爭(zhēng)加劇,就業(yè)緊張,優(yōu)秀畢業(yè)生倍受社會(huì)青睞。各類資格考試、等級(jí)考試將用人單位迷惑,用人單位對(duì)人才的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)也首先是以學(xué)習(xí)成績(jī)?yōu)闃?biāo)準(zhǔn),不考慮學(xué)生的綜合素質(zhì)高低,在招聘人才時(shí)只選用成績(jī)好、證書多的學(xué)生。這種錯(cuò)誤的價(jià)值導(dǎo)向造成了很多學(xué)生為了證明自己是優(yōu)秀的,用作弊來提高自己的考試分?jǐn)?shù),而學(xué)習(xí)成績(jī)較好的學(xué)生為了能在找工作時(shí)勝過別人,也加入到作弊的行列。

二、解決方案：

1.幫助學(xué)生樹立正確的道德觀、人生觀和價(jià)值觀。

2.科學(xué)地進(jìn)行考試方式和教育方式的改革。

3.積極深化素質(zhì)教育,建立科學(xué)的素質(zhì)評(píng)價(jià)體系。

4.健全并嚴(yán)格執(zhí)行考試制度,加強(qiáng)監(jiān)督與管理。