第一篇：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院研究生院招生簡章

中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院研究生院

2011年全日制專業(yè)學(xué)位碩士研究生統(tǒng)一入學(xué)考試大綱

科目代碼：341 考試科目：農(nóng)業(yè)知識綜合三

一、考查目標(biāo)

《農(nóng)業(yè)知識綜合三》側(cè)重于農(nóng)業(yè)工程綜合知識的考查?？荚噧?nèi)容涵蓋食品加工與安全領(lǐng)域的主干課程，包括食品衛(wèi)生學(xué)、食品安全管理與法規(guī)、食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)等學(xué)科。要求考生比較系統(tǒng)地理解和掌握本領(lǐng)域基本概念、基礎(chǔ)理論和基本方法，能夠運(yùn)用基本原理和方法分析、判斷和解決有關(guān)實(shí)際問題。

二、適用范圍

適用于報(bào)考食品加工與安全領(lǐng)域的考生。

三、考試形式和試卷結(jié)構(gòu)

1、試卷滿分及考試時(shí)間

本試卷滿分為150分，考試時(shí)間為180分鐘。

2、答題方式

閉卷、筆試。

3、試卷內(nèi)容結(jié)構(gòu)

食品衛(wèi)生學(xué)、食品安全管理與法規(guī)、食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)等科目內(nèi)容各占50分。

四、考試大綱

（一）食品衛(wèi)生學(xué) 1.食品的生物污染 1.1 食品的細(xì)菌污染

食品細(xì)菌污染的途徑 食品細(xì)菌污染的種類 食品細(xì)菌污染的危害 食品細(xì)菌污染的檢驗(yàn)和標(biāo)準(zhǔn) 食品細(xì)菌污染的預(yù)防 1.2 食品的真菌污染

食品真菌及其毒素污染的特點(diǎn) 食品的黃曲霉毒素污染：黃曲霉毒素污染的狀況和危害、黃曲霉毒素的性質(zhì)及控制措施

食品的其他真菌毒素污染：赭曲霉素、雜色曲霉毒素、伏馬菌素、T2毒素、單端孢霉烯族類化合物、展青霉素、桔青霉素易污染的食品和控制措施 1.3 食品的腐敗變質(zhì)

食品腐敗變質(zhì)的概念、發(fā)生的條件、影響因素、衛(wèi)生學(xué)意義及控制措施 1.4 食品的病毒污染

食品中甲肝病毒、脊髓灰質(zhì)炎病毒、口蹄疫病毒、瘋牛病病毒污染的途徑與控制措施

1.5 食品的寄生蟲污染

寄生蟲的概念、危害方式以及絳蟲（含幼蟲）、蛔蟲的感染途徑、危害、預(yù)防措施

2.食品的化學(xué)污染 2.1 食品農(nóng)藥殘留

食品中農(nóng)藥殘留的來源、影響因素和預(yù)防控制措施 2.2 食品的重金屬污染

生物放大的概念和意義、食品中鉛、砷、汞、鎘污染的途徑、危害及預(yù)防控制措施

2.3 食品的多環(huán)芳烴污染

多環(huán)芳烴的污染來源、危害及預(yù)防措施 2.4 食品中N-亞硝基化合物的污染

食品中N-亞硝基化合物的來源、危害及預(yù)防控制措施 2.5 食品中二噁英的污染

食品中二噁英的來源、危害及預(yù)防措施 2.6 食品添加劑

食品添加劑的使用原則、存在的問題及控制 2.7 食品包裝材料的污染

食品包裝材料的污染、影響因素、預(yù)防控制措施 3.食品安全性評價(jià) 3.1 基本概念

毒性、劑量、劑量-反應(yīng)關(guān)系、半數(shù)致死量、閾劑量、最大無作用劑量、ADI等食品安全性評價(jià)的基本概念

3.2 食品安全性毒理學(xué)評價(jià)程序及判斷標(biāo)準(zhǔn) 4.食物中毒

4.1 食物中毒的概念、流行病學(xué)特點(diǎn)、類型 4.2 細(xì)菌性食物中毒 沙門氏菌、副溶血弧菌、變形桿菌、蠟樣芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、肉毒梭狀芽孢桿菌食物中毒的原因食品、發(fā)生季節(jié)、預(yù)防措施 4.3 真菌性食物中毒

真菌性食物中毒的特點(diǎn)，毒蕈、霉變甘蔗、霉變甘薯、赤霉病麥等真菌毒素中毒發(fā)生的季節(jié)、原因和預(yù)防措施 4.4 天然植物食物中毒

四季豆、發(fā)芽馬鈴薯、毒蕈、鮮黃花菜、豆?jié){中毒的中毒物質(zhì)、危害及其預(yù)防措施

4.5 天然動物食物中毒

河豚魚、有毒貝類、熱帶魚、魚膽、動物甲狀腺中毒的中毒物質(zhì)、危害及其預(yù)防措施

（二）食品安全管理與法規(guī) 1.緒論

1.1 食品質(zhì)量和食品安全概念

1.2 食源性疾病、污染物和食品安全危害分類

食源性疾??；食品污染物；食品安全危害：生物危害、化學(xué)危害和物理危害。1.3 食品安全質(zhì)量控制體系的研究對象、內(nèi)容和手段 1.4 食品供應(yīng)鏈概念

2.建立實(shí)施HACCP體系的意義 2.1 HACCP體系概念及其來歷 2.2 建立實(shí)施HACCP體系的原因 2.3 建立實(shí)施HACCP體系的組織 2.4 ISO22000:2005食品安全管理體系 3.HACCP體系原理

3.1 HACCP體系的七項(xiàng)基本原理 3.2 HACCP體系所涉及的術(shù)語和定義

HACCP研究；HACCP計(jì)劃；HACCP體系；HACCP工作小組；直線型、模塊型和通用型HACCP方案；HACCP加工流程圖；顯著危害和非顯著危害；CCP判斷樹；關(guān)鍵控制點(diǎn)的關(guān)鍵限值與操作限值；糾偏。3.3 建立HACCP體系的步驟

4.建立HACCP體系的條件與前提方案 4.1 一般管理規(guī)范

4.2 ISO 9000質(zhì)量管理體系

質(zhì)量管理體系中質(zhì)量控制點(diǎn)和食品安全關(guān)鍵控制點(diǎn)的區(qū)別 4.3 HACCP體系的前提方案——GMP GMP的主要內(nèi)容和強(qiáng)調(diào)的環(huán)節(jié) 4.4 HACCP體系的前提方案——SSOP 4.5 HACCP體系與GMP和SSOP的關(guān)系 4.6 食品配方與食品安全

酸度、防腐劑、水分活度、配料等與食品安全 4.7 食品加工技術(shù)環(huán)節(jié)與食品安全

熱加工、發(fā)酵、輻照等加工技術(shù)環(huán)節(jié)與食品安全 4.8 對食品安全危害的控制措施 5.HACCP原理應(yīng)用實(shí)例

5.1 畜禽屠宰行業(yè)可能發(fā)生的食品安全危害與控制 5.2 凈菜加工可能發(fā)生的食品安全危害與控制 5.3 肉類罐頭加工可能發(fā)生的食品安全危害與控制 5.4 果蔬汁可能發(fā)生的食品安全危害與控制 5.5 糕點(diǎn)加工可能發(fā)生的食品安全危害與控制管理

（三）食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)

1.食品分析的概念、性質(zhì)、任務(wù)和作用 1.1 食品分析的概念及性質(zhì)

食品分析是研究和評定食品品質(zhì)及其變化、開發(fā)食品分析方法的一門專業(yè)性很強(qiáng)的技術(shù)學(xué)科。1.2 食品分析的任務(wù)與作用

是對食品工業(yè)生產(chǎn)中的原料、輔料、成品、半成品、副產(chǎn)品等進(jìn)行檢測，以達(dá)到控制和管理生產(chǎn)、保障食品質(zhì)量安全和開發(fā)新資源與新產(chǎn)品的目的。1.3 食品分析的內(nèi)容

主要包括（1）食品營養(yǎng)成分分析；（2）食品添加劑分析；（3）食品中有害物質(zhì)分析（4）食品的感官檢驗(yàn)等。2.樣品采集及預(yù)處理方法 2.1 樣品的采集

樣品采集是指從大量的分析對象中抽取有代表性的一部分樣品作為分析材料的過程。2.2 樣品的制備

是對上述采集的樣品進(jìn)一步粉碎、混勻、縮分，目的是保證樣品完全均勻，取任何部分都具有代表性。2.3 樣品的保存

樣品如不能立即分析應(yīng)妥善保存，其目的是防止樣品發(fā)生受潮、揮發(fā)、風(fēng)干、變質(zhì)等現(xiàn)象。2.4 樣品的預(yù)處理方法

樣品預(yù)處理就是在樣品正式分析測定前將被測組份提取出來或?qū)⒏蓴_成分去除的過程。一般分為（1）溶劑提取法；（2）有機(jī)物破壞法；（3）蒸餾法；（4）皂化法；（5）層析法等。3 食品分析檢驗(yàn)的一般方法

食品分析所采用的分析方法主要有 3.1 感官檢驗(yàn)法

通過人的感覺器官（眼、鼻、口、皮膚）所具有的視覺、嗅覺、味覺和觸覺，對食品的色、香、味、形等質(zhì)量特征和衛(wèi)生狀況作出判定和客觀評價(jià)的方法。3.2 物理檢驗(yàn)法

通過對被測食品的某些物理性質(zhì)如溫度、密度、折射率、旋光度、非典等的測定，可間接求出食品中某種成分的含量，進(jìn)而判斷被檢食品的純度和品質(zhì)。3.3 化學(xué)分析法

是以物質(zhì)的化學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)的分析方法，主要包括重量分析和容量分析法兩大類。

3.3.1 重量分析

是將被測成分與樣品中的其他成分分離，然后稱定該成分的質(zhì)量，計(jì)算出被測物質(zhì)的含量。3.3.2 容量分析

也稱滴定分析，它是將已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液由滴定管加到被檢溶液中，直到所用試劑與被測物質(zhì)的物質(zhì)量相等為止。可借助指示劑的變色來觀察終點(diǎn)。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度和消耗體積，計(jì)算出被測物質(zhì)的含量。3.3.3 化學(xué)分析中標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制及溶液濃度的表示方法

標(biāo)準(zhǔn)溶液是化學(xué)分析中用來直接定量測定待測組分含量的溶液，正確配制標(biāo)準(zhǔn)溶液對提高容量分析的準(zhǔn)確度有重大意義。標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制方法一般有直接法和間接法兩種。

溶液的濃度通常是指在一定量的溶液中所含溶質(zhì)的量。常用的方法有：物質(zhì)的量濃度（摩爾濃度）、溶質(zhì)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)（百分濃度）、溶質(zhì)的體積分?jǐn)?shù)、比例濃度等。

3.4 儀器分析法

借助特殊的儀器，通過測量試樣溶液的光學(xué)性質(zhì)或電化學(xué)性質(zhì)，從而求出被測組分的含量。常用的方法有紫外-可見分光光度法、原子吸收光譜法、熒光分析法、氣相色譜法、高效液相色譜法等。3.5 酶分析法

是利用酶的反應(yīng)進(jìn)行物質(zhì)定性、定量的方法。要求掌握酶法分析的特點(diǎn)。4.食品中一般成分的檢驗(yàn) 不同食品其成分與含量也各不相同。要求了解下列各種成分測定的主要方法，掌握操作原理與簡單過程。4.1 水分的測定

水分測定常分為直接法和間接法兩大類。直接法是利用水分本身的物理、化學(xué)性質(zhì)來測定水分的方法，如干燥法、蒸餾法和卡爾.費(fèi)舍爾法；間接法是利用食品的相對密度、折射率、電導(dǎo)、介電常數(shù)等物理性質(zhì)測定水分的方法。本大綱僅要求掌握干燥法原理。4.2 灰分的測定

食品經(jīng)灼燒后的殘留物就叫灰分?；曳质鞘称分袩o機(jī)成分總量的標(biāo)志?；曳譁y定包括總灰分、水溶性灰分、水不溶性灰分、酸不溶性灰分等。要求掌握總灰分的測定原理和方法。4.3 總酸度的測定

通過中和滴定，用標(biāo)準(zhǔn)堿液測定淺色食品中總酸度的含量。4.4 粗脂肪的測定

常用的方法為索氏提取法，適用于脂類含量較高、含結(jié)合態(tài)脂肪較少、能烘干磨細(xì)、不易吸潮結(jié)塊的樣品測定。4.5 碳水化合物的測定 4.5.1 還原糖的測定

糖類的測定是以還原糖的測定為基礎(chǔ)的。掌握直接滴定法測定還原糖的原理和方法。

4.5.2 淀粉的測定

常用的淀粉測定方法有酸水解法和酶水解法。本大綱要求掌握酶水解法測定淀粉的原理和方法。4.6 蛋白質(zhì)的測定

蛋白質(zhì)的測定主要有紫外法、比色法、凱氏定氮法、儀器法等多種方法，凱氏定氮法是測定食品中粗蛋白的常用方法。4.7 維生素的測定

食品中維生素種類繁多，測定方法也各不相同。4.7.1 脂溶性維生素的測定

主要通過皂化和有機(jī)溶劑提取后，用比色法、紫外分光光度法或液相色譜法測定。要求掌握比色法測定維生素A的原理。4.7.2 水溶性維生素的測定

用熒光法、比色法、滴定法和高效液相色譜法測定。4.8 礦物元素的測定

食品中的礦物元素通過干灰化或濕灰化的方法，將有機(jī)物分解成無機(jī)物后用比色法、滴定法或原子吸收法進(jìn)行測定。5.分析結(jié)果的表示與數(shù)據(jù)處理 5.1 有效數(shù)字

就是可靠數(shù)字與可疑數(shù)字之和。有效數(shù)字的修約按“四舍六入五留雙”的原則。在有效數(shù)字的計(jì)算中，應(yīng)遵循四則運(yùn)算的規(guī)則。5.2 誤差、準(zhǔn)確度與精密度

分析結(jié)果的準(zhǔn)確度是指分析結(jié)果與真值的接近程度。準(zhǔn)確度的高低用誤差來衡量。精密度就是幾次平行測定結(jié)果相互接近的程度。精密度的高低用偏差來衡量。食品分析中誤差常用絕對誤差、相對誤差表示，而偏差常用絕對偏差及相對偏差表示。

6.各種食物成分結(jié)果的表述

檢測結(jié)果的表示應(yīng)采用法定計(jì)量單位并盡量與食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)一致。固體樣品與液體樣品的結(jié)果均有不同的表示方法。

第二篇：基因工程原理中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院研究生院

中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院究生院

《基因工程原理》復(fù)習(xí)題

一、名詞解釋

1.原核基因（Prokaryotic

gene）：由原核生物（如大腸桿菌）基因組編碼的基因，以及高等生物細(xì)胞器線粒體基因組和葉綠體基因組等編碼的基因，統(tǒng)稱原核基因。

2.真核基因（Eukaryotic

gene）：真核生物基因組DNA編碼的基因,以及感染

真核細(xì)胞的DNA病毒和反轉(zhuǎn)錄病毒基因組編碼的基因，統(tǒng)稱真核基因。

3..前導(dǎo)序列（Leader

sequence）：又叫前導(dǎo)序列區(qū)或5＇-非翻譯區(qū)（5＇-UTR），系指位于mRNA5＇-起始密碼子之前的一段長數(shù)百個(gè)核苷酸的不翻譯的RNA區(qū)段。

4.尾隨序列（Tai1er

sequence）：又稱尾隨序列區(qū)或3＇-非翻譯區(qū)（3＇-UTR），系指位于mRNA3＇-終止密碼子之后一段100多核苷酸的不翻譯的RNA區(qū)段。

復(fù)制子（Replicon）：

指有一個(gè)復(fù)制起始區(qū)（oriC）和起始基因的DNA復(fù)制單元。例如細(xì)菌染色體、病毒基因組、質(zhì)粒基因組等，凡其DNA能夠進(jìn)行復(fù)制的遺傳單元，均稱復(fù)制子。真核細(xì)胞基因組的復(fù)制子是指含有一個(gè)復(fù)制起始位點(diǎn)的DNA（RNA）的復(fù)制子特稱復(fù)制單元。

6.增強(qiáng)子

（Enhancer）：又叫增強(qiáng)子序列或增強(qiáng)子元件，是真核基因中發(fā)現(xiàn)的一

種特異序列，能夠在距離目標(biāo)基因50kb以上的位置，從上游或下游的不同位置及方向增強(qiáng)該基因的轉(zhuǎn)錄活性。

7.沉默子（Silencer）在真核基因啟動子中除了增強(qiáng)子之外，沉默子同樣也是一種可遠(yuǎn)距離調(diào)控相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄活性的順式元件。與增強(qiáng)子一樣，沉默子也能夠從啟動子的上游、下游甚至是基因內(nèi)部三種不同的位置以及正向或反向，影響相關(guān)基因啟動子的轉(zhuǎn)錄起始效率。同時(shí)沉默子往往是以組織特異性或時(shí)間特異的作用方式，控制基因的表達(dá)作用。但與增強(qiáng)子的功能效應(yīng)相反，沉默子只能抑制而不能激活相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄起始活性。

8.絕緣子（Insulator）亦即是增強(qiáng)子活性的物理邊界元件（physical

boundary

element），它是一段能夠抑制或隔離增強(qiáng)子功能效應(yīng)的順式轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)序列。絕緣子的這種功能作用的發(fā)揮，取決于它所在的位置。如果它是位于增強(qiáng)子和啟動子之間，便能夠阻斷增強(qiáng)子的功能效應(yīng)；但當(dāng)它是位于增強(qiáng)子-啟動子區(qū)段的外側(cè)，便不能夠阻斷增強(qiáng)子的功能作用。因此也有的作者將絕緣子稱為隔離鄰近增強(qiáng)子對啟動子激活作用的中間隔柵（neutral

barrier）。絕緣子的作用是與特異結(jié)合蛋白IBP的結(jié)合發(fā)揮作用。它的意義：能阻斷增強(qiáng)子超遠(yuǎn)距離的激活作用影響生物的發(fā)育順序；真核絕緣子能保護(hù)順序表達(dá)以防無義基因的表達(dá)。

9.調(diào)節(jié)子（Regulon）：指在大腸桿菌基因組中，其表達(dá)活性受同一種基因編碼的蛋白質(zhì)協(xié)同調(diào)節(jié)的，一組不連續(xù)相鄰排列的結(jié)構(gòu)基因。調(diào)節(jié)子與操縱子不同之處在于，后者的結(jié)構(gòu)基因是彼此相鄰排列的，而調(diào)節(jié)子的結(jié)構(gòu)基因則是分散于染色體的不同部位，甚至是位于不同染色體上

10.基因差異表達(dá)（Differential

expression

of

gene）：

真核生物在每一特定的發(fā)育階段，或是某一特定類型的細(xì)胞中，一般只有15%的基因進(jìn)行表達(dá)。這種在生物個(gè)體發(fā)育的不同階段，或是在不同組織和細(xì)胞中，發(fā)生不同基因按時(shí)間、空間進(jìn)行有序表達(dá)的方式，叫基因的差異表達(dá)。

11.基因內(nèi)互補(bǔ)（Intragenic

complementaion）：

系指編碼同樣的多肽序列，但又各具一個(gè)不同

突變的兩個(gè)基因聯(lián)合產(chǎn)生出一種有功能活性的蛋白質(zhì)多肽的生化過程。

12.基因圖（Gene

map）：描述染色體或DNA分子上不同基因的排列順序及其間隔距離的線性圖。它包括遺傳圖和物理圖兩種。

遺傳圖（genetic

map）：是根據(jù)遺傳重組實(shí)驗(yàn)繪制的，用來表示同一染色體上不同基因（或特定DNA序列區(qū)）之間的排列順序及其相對距離的線性圖。其圖距用厘摩(cM)表示。

物理圖（Physical

map）：以精確的物理長度為單位，一般以核苷酸數(shù)表示不同基因在染色體或DNA分子上的排列順序及其間隔距離的實(shí)際長度的線性圖。

13.基因簇（Gene

cluster）與基因家族（Gene

family）：系指原核生物基因組中，由不同或相關(guān)的一組相合基因組成的一種特殊的排列組合方式。同一基因簇的各個(gè)基因在遺傳上往往是緊密連鎖，它們可以是屬于同一操縱子的不同結(jié)構(gòu)基因，也可以是不同操縱子的不同結(jié)構(gòu)基因；它們可以是同一基因家族的不同成員，也可以是不同基因家族的不同成員。

基因家族（Gene

family：由同一生物中同一始祖基因經(jīng)過重復(fù)突變進(jìn)化而來，具相似的結(jié)構(gòu)、相似的產(chǎn)物和相似的功能。它們的特征：（1）多重姓；（2）緊密連鎖（3）表型及功能方面的相關(guān)性；（4）核苷酸序列的一致性。

14.基因克隆（Gene

cloning）：基因克隆又叫DNA克隆，它是指將外源基因插入到克隆載體上形成重組DNA分子群體，并轉(zhuǎn)化到大腸桿菌寄主細(xì)胞中進(jìn)行復(fù)制繁殖，以便從大分子DNA或DNA片段中分離純化目的基因或特定的DNA片段的實(shí)驗(yàn)操作，叫做基因克隆或DNA克隆。

15.融合基因（Fusion

gene）：亦稱重組基因、雜種基因或嵌合基因。通常是指通過自發(fā)突變形成或利用DNA重組技術(shù)構(gòu)建的。是一類具有來自兩個(gè)或兩個(gè)以上不同基因的核苷酸序列的新型基因。融合基因可以形成融合蛋白，但融合基因不一定都形成融合蛋白。

16.基因劑量

（Gene

dosage）：指的是一個(gè)細(xì)胞所擁有的同一種基因的拷貝數(shù)。

基因劑量實(shí)驗(yàn)是建立在局部二倍體菌株的基礎(chǔ)上，專門來檢測基因拷數(shù)的增加，對其編碼產(chǎn)物合成速率之影響的分子遺傳學(xué)的研究技術(shù)。

17.裂口（Gap）：雙鏈DNA分子上的某一條鏈丟失一個(gè)或連續(xù)數(shù)個(gè)核苷酸造成的單鏈斷裂。

缺口（Nick）：雙鏈DNA分子的某一條鏈的相鄰核苷酸之間丟失一個(gè)磷酸二酯鍵造成的單鏈斷裂。

18.切丁酶（Dicer）：亦有人譯為RNAi核酸酶。是一種RNaseⅢ樣（RNaseⅢ

like）的核酸內(nèi)切酶。能把雙鏈RNA（dsRNA）分子切割成21~23bp的小分子干擾RNA

。這是一種需要ATP的過程。

19.異裂酶（Neoschizomer）：

指一組來源不同，但具有相同的識別序列和不同的切割位點(diǎn)的一組核酸內(nèi)切限制酶稱異裂酶

20.同尾酶（Isocaudarner）：一組來源不同，識別序列各異，但能夠切割形成相同黏性末端的核酸內(nèi)切酶。

21.同裂酶

(Isoschizomer)

是一類來源不同，而識別序列相同，切割能產(chǎn)生相同的黏性末端的核酸內(nèi)切酶。

22.拓樸異構(gòu)酶（T0poisomerase）：在原核和真核細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的，具有催化單鏈DNA或雙鏈DNA產(chǎn)生瞬時(shí)斷裂的功能。具有切割與連接的雙重功能，導(dǎo)致雙鏈構(gòu)型的改變。在抗癌研究中，發(fā)展抑制拓?fù)洚悩?gòu)酶的活性的抗癌藥物好的開發(fā)研制具有重要意義。

23.質(zhì)粒DNA遷移作用（Plasmid

mobilization）：指由共存的接合型質(zhì)粒引發(fā)的非接合型質(zhì)粒的轉(zhuǎn)移過程。由于結(jié)合型質(zhì)粒的mob基因產(chǎn)生的遷移蛋白可作用于與其共存的非遷移型質(zhì)粒的nic位點(diǎn)所產(chǎn)生的遷移作用，稱質(zhì)粒DNA遷移作用。

24.柯斯載體（Cosmid）：是一類人工構(gòu)建的，含有λ噬菌體DNA的cos序列和質(zhì)粒復(fù)制子的特殊類型的質(zhì)粒載體。它既具有λ噬菌體的特性，也具有質(zhì)粒載體的特性。并且具有高容量的克隆能力，其DNA可以體外被包裝到噬菌體的外殼內(nèi)。

25.噬菌體展示載體（Phage

display

vector）：根據(jù)單鏈?zhǔn)删w表面表達(dá)的蛋白質(zhì)或多肽的噬菌體表面展示技術(shù)，當(dāng)把外源基因插入在該載體的基因Ⅲ或基因Ⅷ的編碼序列中，正確表達(dá)出融合蛋白的這類特殊用途的噬菌體載體。

26.穿梭質(zhì)粒載體（S

huttle

plasmid

vector）：

簡稱穿梭載體，或叫雙功能載體。是一類人工構(gòu)建具有兩種不同的復(fù)制起點(diǎn)和選擇記號，因而可在兩種不同寄主細(xì)胞（如大腸桿菌和釀酒酵母）中進(jìn)行復(fù)制與存留的質(zhì)粒載體。

27.M13克隆體系的優(yōu)點(diǎn)：

a.可方便地產(chǎn)生外源單鏈DNA；

b.重組子可用組織化學(xué)方法檢測；

c.lacZ基因上具多克隆位點(diǎn)，便于外源DNA插入；

d.可定向克隆外源基因；

28.質(zhì)粒載體的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：

a.具復(fù)制起點(diǎn)（ori）；

b.具抗生素抗性基因（選擇用）；

c.具若干核酸內(nèi)切酶的單切點(diǎn)；

d.較小的分子量和較高的拷貝數(shù)。

啟動子封堵（Promoter

occlusion）：由一個(gè)上游啟動子驅(qū)動的轉(zhuǎn)錄作用，當(dāng)其通讀過下游啟動子時(shí)，便會使該啟動子的功能受到抑制的現(xiàn)象，叫做啟動子封堵。

30.Ⅱ型核酸內(nèi)切酶的特點(diǎn)：a.不具有多亞基結(jié)構(gòu)（單一切割功能）；b.能識別雙鏈DNA分子中靶子序列c.切割形成不同長度的限制片段;

d由于不對稱切割，能形成粘性末端;

e

酶切反應(yīng)不需能量ATP。

31.表觀遺傳信息層（Epigenetic

layer

of

information）：它是貯藏在圍繞DNA分子周圍并與DNA分子結(jié)合的蛋白質(zhì)及化學(xué)物質(zhì)中。表觀遺傳信息如同RNA基因一樣令人困惑，甚至比RNA基因更為重要。

32.分子伴侶（Molecular

chaperone）：

專指一類多功能蛋白質(zhì)，它能促使某些蛋白質(zhì)按正確方式組裝或折疊，而它本身卻不是最終形成功能蛋白質(zhì)的組成部分，此類蛋白質(zhì)特稱為分子伴侶。

33.RNA干擾（RNAi）：近年來研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)一些小分子量的外源雙鏈RNA進(jìn)入寄主細(xì)胞后，便可促進(jìn)與其同源的內(nèi)源mRNA發(fā)生特異性的降解作用，從而高效而特異地阻斷體內(nèi)相應(yīng)基因的活性，在細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮基因的剔除作用。這種現(xiàn)象叫RNA干擾。

34.生命體遺傳信息的三個(gè)層次是：

第一層次是由編碼蛋白質(zhì)的基因組成，如人類基因組的基因編碼序列占總DNA序列的不到2%；

第二層次：僅由編碼RNA而不編碼蛋白質(zhì)的基因組DNA組成。這一部分DNA叫做非編碼的DNA，它的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物稱為非編碼的RNA（不包括tRNA、rRNA和snoRNA），其相應(yīng)的基因稱為RNA基因。這類基因隱藏在巨大的非編碼的染色體DNA序列當(dāng)中。因此過去亦被稱為隱藏基因（cryptic

gene）；

第三層次：表觀遺傳信息層（epigenetic

layer

of

information）。

它貯藏于圍繞在DNA分子周圍并與DNA結(jié)合的蛋白質(zhì)及其他化學(xué)物質(zhì)中。表觀遺傳信息如同RNA基因一樣令人興奮，甚至比RNA基因更為重要。

35.全局調(diào)節(jié)（Global

regulation

system）

原核生物如細(xì)菌細(xì)胞為了適應(yīng)環(huán)境條件的大范圍的重要變化，單靠一個(gè)操縱子作局部的調(diào)節(jié)顯然是不夠的，它還需一種能夠同時(shí)調(diào)節(jié)許多相關(guān)操縱子的，特殊調(diào)節(jié)體系。這種調(diào)節(jié)體系稱全局調(diào)節(jié)體系。它是由許多單一的調(diào)控途經(jīng)，交織組成的一種復(fù)雜的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，來應(yīng)付外界環(huán)境的壓力的同時(shí)，能適時(shí)快速作出反應(yīng)。

共線性

（Collinearity）：所謂共線性包括如下4種不同的情況：

其一是指位于同一條染色體DNA分子或是同一條DNA分子上，不同基因的位置排列關(guān)系。這種情況有時(shí)特稱為同線性（Synteny）。

其二是指不同物種的相關(guān)染色體DNA分子之間，基因排列順序的一致性。

其三是指位于DNA分子與其轉(zhuǎn)錄本RNA分子之間，核苷酸堿基排列順序的一

致性。

其四是指位于DNA分子或mRNA分子上遺傳密碼子的排列順序，與相應(yīng)的蛋白質(zhì)多肽鏈上氨基酸排列順序之間的一致性。

37.基因工程誕生的理論基礎(chǔ)和技術(shù)基礎(chǔ)是什么？

（1）

理論基礎(chǔ)：

（a）

上世紀(jì)40年代明確了遺傳物質(zhì)攜帶者是DNA，而不是蛋白質(zhì);明確了基因的載體。

（b）上世紀(jì)50年代相繼揭示了DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型和半保留復(fù)制機(jī)理，從而解決了基因的復(fù)制。

（c）

上世紀(jì)50

世紀(jì)末和60年代初相繼提出了中心法則和操縱子學(xué)說并成地破譯了遺傳密碼子，從而解決了遺傳信息的流向和基因表達(dá)問題。

（2）

技術(shù)基礎(chǔ)：

（a）

DNA分子的體外切割與連接技術(shù);

（b）

DNA測序技術(shù);

（c）

基因克隆的載體的發(fā)展與應(yīng)用;

（d）大腸桿菌的轉(zhuǎn)化技術(shù);

（e）瓊酯糖凝膠電泳技術(shù);

（f）

核酸雜交技術(shù)。

38.RNA編輯（RNA

editing）：

在有些基因的轉(zhuǎn)錄后加工過程中，會有大量的尿嘧啶核苷酸（Us）加入到前體mRNA（pre-mRNA）的核苷酸序列中去，或是從pre-mRNA的核苷酸序列中刪除下來，甚至還會發(fā)生核苷酸堿基的取代反應(yīng)。這種在RNA轉(zhuǎn)錄本成熟、修飾過程中發(fā)生的核苷酸的加入、刪除或取代的現(xiàn)象，叫做RNA編輯（RNA

editing）。

如此堿基飾變的結(jié)果，使得RNA轉(zhuǎn)錄本的核苷酸序列與其對應(yīng)的DNA鏈的核苷酸編碼序列并不完全匹配。由此飾變的mRNA所轉(zhuǎn)譯的蛋白質(zhì)多肽鏈的氨基酸序列結(jié)構(gòu)，便與按照其基因的核苷酸序列推導(dǎo)出來的有所差別。

39（1）微小RNA(microRNA，miRNA)：

是在真核細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的一類調(diào)節(jié)型的、非編碼蛋白質(zhì)的、小分子量的單鏈RNA。miRNA是由內(nèi)源基因組編碼轉(zhuǎn)錄成的Pri-miRNA被果蠅酶切割生成70-80nt的pre-miRNA，經(jīng)自我折疊成雙鏈的發(fā)夾結(jié)構(gòu)，進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)后被切丁酶進(jìn)一步切割并除去單鏈環(huán)，形成21～25bp雙鏈體(miRNA：miRNA*)分子，雙鏈體解離出單鏈的存留鏈miRNA同目標(biāo)mRNA結(jié)合阻止翻譯，另一條消失鏈miRNA*被降解。

39（2）miRNA與siRNA的比較

相似點(diǎn)：

（1）

分子結(jié)構(gòu)十分相似。長度均為21～25的小分子量RNA、5，-端都具有P基團(tuán)、3，-端都具有0H-基團(tuán)；

（2）

都通過與RISC結(jié)合的方式發(fā)揮功能作用；

（3）

終極作用都是抑制mRNA的翻譯活性，而導(dǎo)致基因沉默。

不同點(diǎn)：

（1）

生物合成途徑不同；

siRNA主要是由外源導(dǎo)入的雙鏈(dsRNA)經(jīng)切割產(chǎn)生的、少數(shù)的是由內(nèi)源dsRNA切割產(chǎn)生。

miRNA則不然，它是由內(nèi)源基因組編碼轉(zhuǎn)錄成Pri-miRNA，被果蠅酶切割生成70-80nt的pre-miRNA，由于pre-miRNA存在回文結(jié)構(gòu)自我折疊成雙鏈的發(fā)夾結(jié)構(gòu)→由輸出蛋白的作用進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)后被切丁酶進(jìn)一步切割加工成21～25bp小片段并除去單鏈環(huán)形成雙鏈miRNA，雙鏈體(miRNA：miRNA*)分子，解離出單鏈的存留鏈miRNA同目標(biāo)mRNA結(jié)合阻止翻譯，另一條消失鏈miRNA*被降解。

（2）抑制翻譯的方式不同；

siRNA是通過與目標(biāo)mRNA編碼區(qū)中的靶序列的結(jié)合引導(dǎo)RISC復(fù)合物中的切段酶，從靶序列的中間部位切割斷裂mRNA分子，從而抑制翻譯。

miRNA與此不同，它是通過與目標(biāo)基因mRNA的3，-UTR序列中的結(jié)合位點(diǎn)的序列互補(bǔ)作用，促使mRNA失去翻譯活性。因此在miRNA作用過程中，雖然目標(biāo)蛋白質(zhì)的數(shù)量減少了，但其mRNA的豐度卻沒有明顯的變化。

（3）堿基互補(bǔ)水平不同；

siRNA與靶序列之間核苷酸堿基的互補(bǔ)水平達(dá)百分之百的完全匹配。

但miRNA則依材料來源的差異而有兩種不同的情況。植物mRNA與靶序列核苷酸堿基也是百分之百完全匹配的、而動物的miRNA與其結(jié)合位點(diǎn)的核苷酸堿基則不是完全互補(bǔ)的，兩者之間存在著若干非配對的堿基。

40.微量堿法分離純化質(zhì)粒DNA的原理有如下幾點(diǎn)：

（1）根據(jù)質(zhì)粒DNA與染色體線性

DNA在拓?fù)鋵W(xué)上的差異。質(zhì)粒DNA（cccDNA）是共價(jià)閉合雙鏈超盤旋構(gòu)型的小分子DNA，而細(xì)胞染色體DNA在細(xì)胞裂解分離過程中斷裂成線性DNA（LDNA），雖然在化學(xué)本質(zhì)上沒有本質(zhì)區(qū)別，但在高級結(jié)構(gòu)拓?fù)鋵W(xué)上存在差異。

（2）

差異堿變性，在pH

12.0-12.5高pH條件下，線性的DNA容易變性解鏈，而質(zhì)粒DNA不易變性或很少變性。

（3）

酸復(fù)性，在pH4.8條件下，cccDNA很快復(fù)性，而線性的染色體DNA不可逆的變性并與蛋白質(zhì)、RNA形成沉淀物，通過離心可以把LDNA與cccDNA分開。cccDNA在上清液中。

（4）

酒精沉淀cccDNA,以2.5倍的95%

酒精沉淀質(zhì)粒DNA，(濃度為66%沉淀最好)。保存在TE（pH8.o）緩沖液中，放置在－20Co下保存?zhèn)溆谩?/p>

41.圖示λZAP載體的組成結(jié)構(gòu)及優(yōu)點(diǎn)：

T3-MCS-

T7

___________________________＼／____________________

cos_｜

｜

｜

pBluescriptSK噬菌粒

｜

｜

___｜

｜______｜____｜________________________｜______｜__｜c(diǎn)os

I

LacZ

T

結(jié)構(gòu)組成：（1）含有具內(nèi)刪除特性的pBluescriptSK噬菌粒；

（2）在pBluescriptSK噬菌粒兩端具有f1的起始子（I）和終止子（T）；

（3）在pBluescriptSK噬菌粒內(nèi)部具有兩端帶有T3和T7啟動子的多克隆位點(diǎn)MCS；

（4）在pBluescript的內(nèi)部帶有缺陷的LacZ基因；

（5）在該載體的兩端具有cos末端。

λZAP的特點(diǎn)：

（1）是一種具有內(nèi)刪除特性的插入型λ噬菌體載體，（2）可克隆10kb大小的外源DNA。

（3）當(dāng)外源DNA插入取向和讀碼結(jié)構(gòu)正確，就能表達(dá)出融合蛋白質(zhì)，并可用抗體篩選。

（4）當(dāng)外源DNA插入在多克隆位點(diǎn)，使β半乳糖苷酶失活故可用Xgal顯色的組織化學(xué)篩選重組子（白色為重組子）；

（5）克隆的外源DNA可在體內(nèi)隨pBluescript噬菌粒刪除下來，省去了常規(guī)的亞克??；

（6）利用T3或T7噬菌體的RNA聚合酶，可方便地制備外源插入的DNA的任何一條鏈的mRNA。

內(nèi)刪除源理：當(dāng)含有外源DNA插入的重組λZAP載體，感染大腸桿菌F＋菌株，再用輔助噬菌體M13（或f1）

超感染。于是，在細(xì)胞內(nèi)由此輔助噬菌體基因Ⅱ提供的反式作用蛋白質(zhì)，便會識別位于λZAp載體上的f1起始子和終止子，并最終導(dǎo)致含有外源DNA插入的pBluescript噬菌粒在體內(nèi)從λZAP載體上刪除下來。最終被輔助噬菌體M13的蛋白質(zhì)包裝成單鏈DNA噬菌體顆粒，并被擠出寄主細(xì)胞。

42.M13克隆體系中β-半乳糖苷酶Xgal的顯色原理

M13克隆體系包括M13克隆載體和M13特殊的寄主菌株兩部分組成。β-半乳糖苷(LacZ)當(dāng)它為四聚體時(shí)具有活性，可把無色的X-gal切割成半乳糖和深藍(lán)色靛藍(lán)，因此Xgal可作為β-半乳糖苷酶活性的一種指示劑。由于LacZ基因分子量太大。依據(jù)基因內(nèi)互補(bǔ)作用的原理。利用基因工程的方法，即將編碼同樣的蛋白質(zhì)多肽鏈序列，但各自具突變的序列，當(dāng)這種載體轉(zhuǎn)入到特殊的寄主菌株中便組成具有功能活性的多肽的生化過程。根據(jù)這一原理，在M13克隆載體種上LacZ－HindⅡ片段具有β-半乳糖苷酶第2-92位氨基酸，大腸桿菌F，因子上帶有缺失了第11-42位氨基酸的缺陷性LacZ(簡稱M15基因)。當(dāng)M13載體感染了這種M13特殊的寄主菌株如JM101后，便會產(chǎn)生具有功能活性的β-半乳糖苷酶，于是在含有指示劑Xgal和誘導(dǎo)物IPTG的培養(yǎng)基中，就會出現(xiàn)藍(lán)色的噬菌斑。但當(dāng)外源基因插入到M13克隆載體時(shí)，無法形成四聚體的具活性的LacZ，就不能切割Xgal，故白色噬菌斑為重組子。

43.DNA標(biāo)簽法分離產(chǎn)物未知基因的原理及主要步驟

根據(jù)DNA插入突變作用原理，用已知的插入序列為探針，分離產(chǎn)物未知基因的方法。由于插入的DNA序列是己知的，人為地給目的基因加上標(biāo)簽，故稱DNA標(biāo)簽法。

主要步驟：（1）

當(dāng)一段特定的DNA標(biāo)簽序列插入到野生型的基因的內(nèi)部或其附近位點(diǎn)時(shí)，便會誘發(fā)該基因發(fā)生突變，形成突變體；（2）

用已知的標(biāo)簽序列作DNA分子探針，從突變體的基因組DNA文庫中篩選出突變的基因；（3）

再利用篩選到的突變基因除標(biāo)簽序列以外的序列作探針，再從野生型的基因組DNA文庫中篩選出目的基因。

44.用于克隆真核基因的大腸桿菌表達(dá)體系的優(yōu)點(diǎn)和條件

大腸桿菌表達(dá)體系的優(yōu)點(diǎn)：

（1）

背景知識清楚，分子生物學(xué)、遺傳學(xué)的基礎(chǔ)研究，特別是表達(dá)調(diào)控知識豐富；

（2）

具有完善安全的基因工程體系。包括安全的寄主菌株和載體系統(tǒng)；

（3）

早期轉(zhuǎn)基因表達(dá)調(diào)控研究扎實(shí)，許多基因如胰島素基因、生長素基因等，都能在大腸桿菌中高效的有效表達(dá)；

（4）

易工業(yè)化批量生產(chǎn)，培養(yǎng)方便、操作簡單、成本低廉，特別對藥用蛋白

發(fā)酵生產(chǎn)。

實(shí)現(xiàn)真核基因在大腸桿菌中有效表達(dá)的條件：

（1）真核基因的編碼序列必須是連續(xù)的cDNA，因?yàn)樵思?xì)胞中不具備剪輯加工的酶；

（2）原核的啟動子，最好是誘導(dǎo)型的強(qiáng)啟動子；

（3）以融合蛋白質(zhì)的形式表達(dá)，穩(wěn)定性好。

45.酵母

雙雜交體系的原理及其用途是什么？

酵母雙雜交體系簡稱Y2H。這是在上一世紀(jì)90年代初，在轉(zhuǎn)錄因子結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上發(fā)展出來的一種敏感的體內(nèi)鑒定基因的方法?？捎脕碛行У胤蛛x與己知靶蛋白相互作的另一種蛋白質(zhì)編碼基因，也是分離與某種特定啟動子調(diào)控元件結(jié)合的特異性轉(zhuǎn)錄因子的有效手段。

如同許多真核生物的轉(zhuǎn)錄因子一樣，酵母β-半乳糖苷酶的轉(zhuǎn)錄因子GAL4也含有兩個(gè)結(jié)構(gòu)上可分開的、功能上相互獨(dú)立的結(jié)構(gòu)域，即DNA結(jié)合域(DNA_BD)和轉(zhuǎn)錄激活域(AD)。應(yīng)用DNA重組技術(shù)，可以把GAL4轉(zhuǎn)錄因子的這兩個(gè)結(jié)構(gòu)域分開。如果把它們放置在同一個(gè)酵母細(xì)胞中，所產(chǎn)生的GAL4

DNA-BD和AD多肽，彼此之間不會直接發(fā)生相互作用，所以不具有轉(zhuǎn)錄因子的功能活性，無法激活相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄。但是應(yīng)用DNA重組技術(shù)，將兩個(gè)分開的GAL4的DNA-BD和AD，甚至分別來自兩個(gè)不同的轉(zhuǎn)錄因子的DNA-BD和AD重組成一個(gè)轉(zhuǎn)錄因子(使之在空間上彼此靠近)則又可重新獲得轉(zhuǎn)錄因子的功能活性，即可激活相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄。酵母雙雜交體系就是根據(jù)這種原理建立的。

酵母雙雜交體系包括兩種大腸桿菌-酵母菌的穿梭載體；和一種特殊的己經(jīng)缺失了內(nèi)源GAL4轉(zhuǎn)錄因子的酵母寄主菌株。

第一種穿梭載體叫DNA-BD質(zhì)粒載體：

它具有色氨酸合成酶基因、把己知的靶基因按正確的讀碼結(jié)構(gòu)和取向插入在該載體的多克隆位點(diǎn)上，便可與GAL4

DNA-BD多肽形成第一種雜種蛋白(X)。

第二種穿梭載體叫AD質(zhì)粒載體：

它具有亮氨酸合成酶基因（leu）、是用于構(gòu)建cDNA表達(dá)文庫的專用載體?？寺〉腸DNA片段按正確的讀碼結(jié)構(gòu)和取向插入在該載體的多克隆位上（構(gòu)成cDNA文庫），cDNA編碼的蛋白質(zhì)便與GAL4的AD多肽融合成第二種雜種蛋白（Y）。

酵母寄主菌株：

將上述兩種雜種質(zhì)粒共轉(zhuǎn)化到酵母雙雜交體系專用的寄主菌株特點(diǎn)：（1）這種菌株己經(jīng)喪失了內(nèi)源GAL4轉(zhuǎn)錄因子的能力；（2）具有LacZ和his3的報(bào)告基因；（3）具有trp和leu的轉(zhuǎn)化標(biāo)記，即在缺少Trp和Leu的缺陷性培養(yǎng)基上無法生長的。

將共轉(zhuǎn)化的酵母細(xì)胞涂布在缺少亮氨酸(Leu）和色氨酸（Trp）的SD培養(yǎng)基上，如果由笫一種質(zhì)粒表達(dá)的靶蛋白同第二種質(zhì)粒表達(dá)的cDNA文庫編碼的一種蛋白質(zhì)發(fā)生了相互作用，這樣DNA-BD與AD就會在空間上彼此靠近，而且它具有色氨酸和亮氨酸的編碼基因，因此在缺陷性的選擇培養(yǎng)上能生長，于是便構(gòu)成了有功能活性的GAL4轉(zhuǎn)錄因子，從而啟動下游報(bào)告基因LacZ的表達(dá)，在含X-gal和誘導(dǎo)物IPTG的條件下，β-半乳糖苷酶把X-gal切割，選擇出藍(lán)色陽性克隆。這有可能分離到含有與靶蛋白相互作用的另一種蛋白編碼基因。

酵母雙雜交體系可以用于產(chǎn)物未知基因的分離、也可用于新基因功能的鑒定。

46.表達(dá)載體的組成：

（1）

原核啟動子，最好是誘導(dǎo)型的強(qiáng)啟動子，使外源基因蛋白表達(dá)量占總蛋白的10-30%。

如果表達(dá)的是毒蛋白，啟動子應(yīng)呈現(xiàn)低限的基礎(chǔ)轉(zhuǎn)錄水平；

（2）

多克隆位點(diǎn)(MCS)，用于插入外源基因；

（3）

抗生素抗性基因，用作選擇標(biāo)記；

（4）

復(fù)制起點(diǎn)(ori)，決定外源基因的拷貝數(shù);

（5）

轉(zhuǎn)錄終止子，防止啟動子通讀作用，提高蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性；

（6）

翻譯起始序列和轉(zhuǎn)譯增強(qiáng)子；

（7）

翻譯終止子，防止核糖體的跳躍(Skipping)。采用四聯(lián)核苷酸UAAU

效果更好。

47.簡述構(gòu)建cDNA克隆的定義、主要步驟及其優(yōu)越性？

（1)

定義：cDNA克?。簭膍RNA出發(fā)，經(jīng)反轉(zhuǎn)錄、與載體分子重組、轉(zhuǎn)化寄主細(xì)胞增殖，將目的基因克隆化的過程稱為cDNA克隆。從理論上講該生物的每一種mRNA都應(yīng)有一個(gè)克隆。故亦稱cDNA文庫

（2）

步驟：

第一步：提取處于特定發(fā)育階段的真核生物體的特定器官或組織中的總RNA，根據(jù)mRNA

poly(A)尾特點(diǎn)過Oligo(dT)柱，分離純化出mRNA；

第二步：利用適當(dāng)引物(一般用Oligo(dT)和反轉(zhuǎn)錄酶，獲得

cDNA/mRNA雜合分子。

第三步：，用堿處理降解，或用RNaseH酶切割cDNA/mRNA雜合分子中的mRNA鏈獲得cDNA第一鏈，再由第一鏈cDNA合成第二鏈cDNA。

第四步：雙鏈DNA與適當(dāng)?shù)妮d體重組，將重組體的群體導(dǎo)入大腸桿菌寄主細(xì)胞中增殖，從而構(gòu)成cDNA文庫。

（3）cDNA文庫的優(yōu)點(diǎn)：

（a）

以mRNA材料出發(fā)，對于RNA病毒特別適用；

（b）庫容量?。ㄏ喈?dāng)DNA文庫的15％）篩選工作量??；

（c）

假陽性比例小，因每一種mRNA就應(yīng)有一個(gè)克隆。

（d）

具特殊用途：①

克隆的真核基因在原核中表達(dá)需cDNA；

②

核苷酸序列測定；

③

發(fā)育過程中時(shí)空表達(dá)基因的研究分析。

48.何為柯斯質(zhì)粒載體，其結(jié)構(gòu)、特點(diǎn)是什么？

定義：柯斯質(zhì)粒載體是人工構(gòu)建帶有λ噬菌體的cos位點(diǎn)和E.coli質(zhì)粒的復(fù)制子的新型質(zhì)粒載體。它具有質(zhì)粒載體的特點(diǎn)和λ噬菌體的特點(diǎn)。

結(jié)構(gòu)：

（a）

具一個(gè)質(zhì)粒的復(fù)制起點(diǎn)（ori）;

（b）具若干來自質(zhì)粒載體的選擇記（1-2個(gè)）;

（c）具相當(dāng)數(shù)量的來自質(zhì)粒的核酸內(nèi)切酶的單切點(diǎn);

（d）具有λ噬菌體的cos位點(diǎn)。

特點(diǎn)：（1）λ噬菌體的特點(diǎn)：a.導(dǎo)入寄主細(xì)胞后，可以重新環(huán)化起來；

b.經(jīng)體外包裝后轉(zhuǎn)導(dǎo)效率大大提高;

c.無法進(jìn)入溶菌周期，也不能形成噬菌體顆粒。

（2）具質(zhì)粒載體特點(diǎn)：a.在寄主細(xì)胞內(nèi)可像質(zhì)粒DNA一樣復(fù)制；

b.在氯霉素作用下擴(kuò)增；

c.具有抗生素抗性記號。

（3）具有高容量的克隆能力：上限45kb，下限30kb；

（4）能與帶有同源序列的質(zhì)粒DNA重組。

49.分別敘述原核基因組和真核基因組的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。

（1）原核基因組的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：

（a）高效的遺傳信息利用率；

①

既沒有不必要的額外重復(fù)序列，也極少存在無功能的冗余序列；

②

基因組９８％以上的核苷酸序列都是編碼基因

③

基因排列緊湊，同一個(gè)操縱子不同基因之間的間隔距離一般不超過

２０bp，而且其中還存在著轉(zhuǎn)錄起始信號和終止信號；

④

存在著編碼序列彼此重疊、編碼不同蛋白質(zhì)的重疊基因。

（b）雙鏈ＤＮＡ的編碼功能；

（c）多基因聚集排列成操縱子結(jié)構(gòu)形式；

（d）染色體基因組的拷貝數(shù)平均每細(xì)胞為1.1條，在富裕培養(yǎng)基中可高達(dá)3～4條。

（2）真核基因組的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：

（a）包裝成特定的染色體結(jié)構(gòu)；

（b）基因組的多倍性；

（c）具有大量的重復(fù)序列；

（d）

高比例的非編碼的DNA序列。以人為例，非編碼序列占基因組總長的98%以上，而蛋白質(zhì)編碼基因的序列還不到基因組總長的2%。包括基因與基因之間的非編碼的DNA序列，以及基因內(nèi)部的非編碼的DNA序列。

（e）

龐大的基因數(shù)量；

如擬南芥：25，000個(gè)左右、水稻：40，000個(gè)左右、小鼠：30，000個(gè)左右、人類：24，000個(gè)左右。

（f）基因分布密度不均一。如基因分布有富集區(qū)和荒漠區(qū)之分。

.何為基因克??？其主要的實(shí)驗(yàn)步驟

定義：基因克隆又叫DNA克隆，它是指將外源基因插入到適當(dāng)?shù)目寺≥d體上，形成重組DNA分子群體轉(zhuǎn)化到大腸桿菌寄主細(xì)胞中進(jìn)行復(fù)制繁殖，以便從大分子DNA或DNA片段中分離純化出目的基因或特定的DNA片段的實(shí)驗(yàn)操作，叫做基因克隆或DNA克隆。

其主要步驟：

（1）

DNA片段化：從實(shí)驗(yàn)材料分離純化基因組DNA，經(jīng)機(jī)械方法或酶

消化、超聲波等方法獲得一定長度的DNA片段。

（2）

體外重組：將片段化的DNA與適當(dāng)載體分子重組。

（3）

重組子轉(zhuǎn)化：將重組子轉(zhuǎn)入到適當(dāng)?shù)募闹骶曛羞M(jìn)行增殖。

（4）

重組子的篩選：從大量的轉(zhuǎn)化細(xì)胞中篩選陽性克隆的重組子。

（5）

目的基因的分離：用多種酶切后走凝膠電泳，并用探針進(jìn)行雜交，分離出目的基因的DNA，并克隆在M13載體上進(jìn)行測序。

(6）

目的基因的表達(dá)與功能鑒定。

51.DNA轉(zhuǎn)錄與復(fù)制有哪些差別？

基因的轉(zhuǎn)錄與復(fù)制的過程，無論在生物化學(xué)還是酶學(xué)方面都是十分相似的。它們二者都是在各自特有的核酸酶，即RNA聚合酶和DNA聚合酶的催化下，合成出一條與DNA模板鏈互補(bǔ)的新的多核苷酸鏈。盡管如此，基因的轉(zhuǎn)錄（RNA合成）和基因的復(fù)制（DNA合成）之間，仍然存在著如下幾個(gè)方面的差別：

（1）對引物需求有別

。在基因復(fù)制中，需要同時(shí)存在模板鏈和引物，DNA聚合酶才能啟動DNA新鏈的合成。而基因的轉(zhuǎn)錄則不同，它不需要引物，RNA聚合酶便能啟動RNA新鏈的合成。

（2）使用的底物不一樣。由于DNA和RNA分子的核苷酸組成成分不同，因此基因復(fù)制與轉(zhuǎn)錄所用的底物也不一樣：前者是用脫氧核糖核苷三磷酸：dATP、dGTP、dTTP、dCTP；后者是用核糖核苷三磷酸：ATP、GTP、TTP和CTP。

（3）與模板的結(jié)合狀態(tài)有異?；虻膹?fù)制是按照半保留方式進(jìn)行的，在新生成的兩條子代DNA分子中，新生鏈和模板鏈?zhǔn)冀K是結(jié)合在一起的。而基因的轉(zhuǎn)錄則不同，新合成的RNA鏈最終是要從模板上解離下來的。

（4）精確性程度差異懸殊。在基因的轉(zhuǎn)錄過程中錯(cuò)誤參入RNA鏈的核苷酸頻率是10－4，也就是說每參入10，000個(gè)核苷酸，就會出現(xiàn)一個(gè)錯(cuò)誤（萬分之一錯(cuò)誤率）。而在基

因的復(fù)制核苷酸錯(cuò)誤參入頻率是10－7，也就是說每參入10，000，000個(gè)核苷酸，僅出現(xiàn)一次錯(cuò)誤（千萬分之一錯(cuò)誤率）。這也就是說DNA復(fù)制的精確度是超過轉(zhuǎn)錄的1000倍！

（5）涉及范圍不同。基因復(fù)制往往是整個(gè)基因組從頭至尾逐步進(jìn)行，涉及范圍包括整個(gè)基因組中的所有的DNA和基因。而基因轉(zhuǎn)錄則不同，它所涉及的范圍要比復(fù)制小得多，通常只是一個(gè)基因或一個(gè)操縱子。

52.何為基因擴(kuò)增，它有哪些方式？

基因擴(kuò)增是指某種基因拷貝數(shù)增多的現(xiàn)象。

其方式有：（1）利用PCR

技術(shù)使某基因拷貝數(shù)增多；

（2）隆基因?qū)爰闹骷?xì)胞內(nèi)使大量繁殖，使基因擴(kuò)增(單拷貝基因可擴(kuò)增到約1x106的拷貝)；

（3）環(huán)境壓力影響使某種基因適應(yīng)性的擴(kuò)增；

（4）程序性基因擴(kuò)增。如非洲爪蟾在形成卵發(fā)育過程中其rRNA大量擴(kuò)增；

（5）生物進(jìn)化過程中的某種基因得以擴(kuò)增。

53.真核基因與原核基因表達(dá)調(diào)解機(jī)理的差異

（1）源于細(xì)胞結(jié)構(gòu)水平的差異。真核細(xì)胞轉(zhuǎn)錄和翻譯分別在細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)中分開進(jìn)行；沒有涉及mRNA運(yùn)送過程的調(diào)節(jié)。原核細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄和翻譯是在細(xì)胞質(zhì)中偶聯(lián)發(fā)生。

（2）源于染色體結(jié)構(gòu)水平的差異。真核細(xì)胞基因組被包裝成染色體，存在于細(xì)胞質(zhì)的有關(guān)蛋白質(zhì)因子（如TF）進(jìn)入細(xì)胞核必須克服染色體的層層屏障才能與順式元件結(jié)合。

（3）源于基因排列與結(jié)構(gòu)的差異。真核基因?yàn)閱雾樂醋?，大多為斷裂基因。轉(zhuǎn)錄后加工復(fù)雜，而原核基因?yàn)槎囗樂醋?，轉(zhuǎn)錄后加工也簡單得多。

54.說明mRNA差別顯示分離產(chǎn)物未知基因的基本原理并評述其優(yōu)缺點(diǎn)。

答：（1）mRNA差別顯示：是建立在基因差別表達(dá)理論基礎(chǔ)上，通過比較不同個(gè)體，或同一個(gè)體的不同組織或不同發(fā)育階段之間mRNA種的差別，并應(yīng)用反轉(zhuǎn)錄PCR技術(shù)而發(fā)展出來的一種分離產(chǎn)物未知基因的方法。故又叫mRNA差別顯示反轉(zhuǎn)錄PCR，簡稱DDRT-PCR。

（2）原理：根據(jù)真核基因3，-端的mRNA分子的poly（A）尾巴前2位堿基，可把mRNA分子分成12種類群，如1個(gè)堿基可分為3大類群;根據(jù)3，-端的錨定引物，和5，-端設(shè)計(jì)隨機(jī)引物。從數(shù)理統(tǒng)計(jì)推算和實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)，3種錨定引物和80種隨機(jī)引物(3×80＝240）240組合,大體上涵蓋95%的mRNA。

（3）mRNA差別顯示優(yōu)點(diǎn)：

（a）簡單方便，由于使用PCR擴(kuò)增和序列膠電泳技術(shù)，故簡單快捷。

（b）靈敏度高，實(shí)驗(yàn)利用了PCR技術(shù)、序列電泳技術(shù)和同位素自

影技術(shù)，故具極高的靈敏度。

（c）多用性，可同時(shí)比較多個(gè)樣品間的基因表達(dá)差異。④直觀性，其每個(gè)步驟均可被直觀地檢測。

（4）mRNA差別顯示缺點(diǎn)：

（a）假陽性比率高。

（b）擴(kuò)增的片段分子量較小。

（c）工作量大。

55.影響酶切反應(yīng)的因素：

答：（1）DNA分子的性質(zhì)：（a）酶切位點(diǎn)周圍的堿基成分；

（b）酶切位點(diǎn)的密度；

（c）DNA分子的構(gòu)型；

（d）NA分子的甲基化程度。

（2）酶切的溫度；

（3）DNA制劑的純度。

56.產(chǎn)生酶切星號活性的因素：

（1）每μg樣品酶切的用量不得超過10單位；

（2）酶切反應(yīng)體系中的甘油濃度不得超過5%；

（3）其他金屬離子取代二價(jià)Mg；

（4）金屬鎂離子不得低于25mmol/L；

（5）pH不得超過8；

（6）樣品中有機(jī)溶劑污染的影響。

57.一種基因產(chǎn)生多種蛋白質(zhì)的原因分析

答：（1）主要原因：（a）.許多基因都擁有多個(gè)啟動子。在人類基因組中，至少有一半以上的基因都具有多個(gè)啟動子。在真核斷裂基因的轉(zhuǎn)錄過程中，可變啟動子的使用常常涉及到位于轉(zhuǎn)錄起點(diǎn)的可變首位外顯子（alternative

first

exon）。可變啟動子的不同成員，驅(qū)動從相應(yīng)的可變首位外顯子開始轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。已經(jīng)對有些基因的可變首位外顯子作了全陣列（whole

arrays）分析，結(jié)果證明每個(gè)可變首位外顯子都具有一個(gè)自身專有的啟動子?？勺兊氖孜煌怙@子的不同產(chǎn)生的蛋白質(zhì)產(chǎn)物不同；

（b）

初級轉(zhuǎn)錄本的可變剪接可產(chǎn)生多種蛋白。可變剪接（alternative

splicing）又稱為差異剪接（differential

splicing）或可變mRNA剪接。這是指真核斷裂基因初級轉(zhuǎn)錄本，在不同類型的或處于不同發(fā)育階段的細(xì)胞中發(fā)生的不同形式的剪接作用。結(jié)果生成具有不同序列結(jié)構(gòu)特征、并編碼不同蛋白質(zhì)異形體的成熟的mRNA分子。因此說，可變剪接可以使同一個(gè)基因的初級轉(zhuǎn)錄本，最終翻譯出多種不同功能的蛋白質(zhì)分子。以果蠅Dscam基因?yàn)槔?，可形?8016種蛋白質(zhì)異形體?？梢娍勺兗艚邮窃斐梢环N基因多種蛋白質(zhì)現(xiàn)象的另一種重要原因。

（2）次要原因：（c）

RNA的編輯；致使mRNA分子核苷酸序列的結(jié)構(gòu)出現(xiàn)了變化。此種RNA編輯具有多種不同的效應(yīng)，諸如產(chǎn)生出新的起始密碼子、終止密碼子或是造成多肽鏈編碼序列出現(xiàn)變化。因此，RNA編輯的結(jié)果，改變了源自基因DNA模板鏈的遺傳信息，翻譯出不同于基因原來編碼的新的蛋白質(zhì)多肽。

（d）

基因重排均可產(chǎn)生不同的蛋白。由于基因區(qū)段轉(zhuǎn)位作用或隨機(jī)連接造成的基因可變區(qū)固有排列順序的改變的基因重排（gene

rearrangement）或DNA重排，可使基因產(chǎn)生不同的蛋白。

58.控制真核基因表達(dá)調(diào)節(jié)的主要方式：

（1）基因重排的調(diào)節(jié)方式；

（2）基因擴(kuò)增的調(diào)節(jié)方式；

（3）基因調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)方式；

（4）RNA加工的調(diào)節(jié)方式；

（5）核質(zhì)mRNA轉(zhuǎn)的調(diào)節(jié)方式；

（6）mRNA穩(wěn)定性的調(diào)節(jié)方式；

（7）mRNA翻譯的調(diào)節(jié)方式。

59.真核基因表達(dá)調(diào)節(jié)的主要特點(diǎn)：

（1）真核生物與原核生物在基因表達(dá)調(diào)節(jié)方面的相似性，已知有不少在大腸桿菌中出現(xiàn)的調(diào)節(jié)機(jī)理，原則上也適用于真核生物，例如：i.兩者的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)，都是通過DNA結(jié)合蛋白質(zhì)，同基因啟動子中的特異性順式元件的結(jié)合作用進(jìn)行的。ii.兩者DNA結(jié)合蛋白質(zhì)的多肽基序，在序列結(jié)構(gòu)上也是相同的.（2）真核生物與原核生物在基因表達(dá)調(diào)節(jié)方面的差異性：i.真核生物細(xì)胞類型的多樣性，與原核相比，特別高等植物與動物，都具有數(shù)百種功能各異的不同細(xì)胞類型；ii.真核生物具有細(xì)胞核結(jié)構(gòu)，因此基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯是分別在細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)中分步進(jìn)行的；iii.真核生物具有龐大的基因組，其長度要超過原核的700多倍；iii.真核生活物基因擁有大量的各種類型的基因，其總數(shù)可達(dá)數(shù)萬種，相當(dāng)原核生物的20多倍.（3）真核基因表達(dá)調(diào)節(jié)方面與原核基因相比其復(fù)雜性或特殊性：i.發(fā)育調(diào)節(jié),基因表達(dá)的發(fā)育階段性調(diào)節(jié)，器官和組織特異性調(diào)節(jié)；ii.分化調(diào)節(jié)，同一受精卵究竟是如何分化出各具特定功能和形狀態(tài)特征的不同類的組織、器官和細(xì)胞？；iii.表達(dá)順序性，復(fù)雜的多細(xì)胞生命體中，不同基因表達(dá)的順序性的調(diào)節(jié)機(jī)理；iv.同一生命個(gè)體中，不同細(xì)胞之間的生命活活動被此之間的協(xié)調(diào)和相對穩(wěn)定性是息怎樣維持的?；v.選擇性表達(dá)，相同基因組為什么在紅細(xì)胞前體中會選擇性表達(dá)編碼血紅蛋白的基因，而在胰腺細(xì)胞中卻是選擇性表達(dá)胰島素的基因。此種精確控制基因差異表達(dá)的分子機(jī)理又是如何解釋的呢？。

(2014.4.12由北京大學(xué)生命學(xué)院黃美娟提供)

第三篇：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院研究生院2014級新生報(bào)到須知

中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院研究生院2014級新生報(bào)到須知

2014級新同學(xué)：

你們好！歡迎你到中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院攻讀博士研究生！在您即將踏入校門報(bào)到之前，請?jiān)敿?xì)閱讀以下內(nèi)容，并按規(guī)定辦理入學(xué)報(bào)到有關(guān)事宜。

一、憑我院簽發(fā)的《錄取通知書》于2014年9月1日到北京市海淀區(qū)中關(guān)村南大街12號中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院研究生院報(bào)到，其他證明均不能作為入學(xué)憑證。

二、黨的組織關(guān)系臺頭寫到“農(nóng)業(yè)部直屬機(jī)關(guān)黨委”，去向?qū)憽爸袊r(nóng)業(yè)科學(xué)院研究生院”，不要轉(zhuǎn)到或?qū)懙窖芯克?；共青團(tuán)的組織關(guān)系由所在單位團(tuán)委直接轉(zhuǎn)到“中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院研究生院共青團(tuán)委”。委托培養(yǎng)研究生的臨時(shí)組織關(guān)系也必須轉(zhuǎn)入上述單位。

人事檔案郵寄地址：北京市海淀區(qū)中關(guān)村南大街12號中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院研究生院研究生工作處。郵編：100081

三、憑我院簽發(fā)的《錄取通知書》到戶口所在地派出所自愿遷出本人戶口。戶口遷出時(shí)應(yīng)注意以下事項(xiàng)：

1.戶口一律遷至“北京市海淀區(qū)中關(guān)村南大街12號中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院研究生院”，戶口遷移證上必須注明“居民身份證號”。

2.戶口只限本人，不能攜帶家屬。

3.戶口已在北京市正式落戶的新生（學(xué)校集體戶口者除外）不遷戶口。

4.農(nóng)業(yè)戶口遷入學(xué)校后，均要轉(zhuǎn)為非農(nóng)業(yè)戶口。

四、委托培養(yǎng)研究生及中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院各研究所的在職研究生不轉(zhuǎn)戶口、檔案。

五、帶全本人的被褥、蚊帳、衣物和日常生活用品(南方籍同學(xué)應(yīng)帶全冬季御寒衣物)。

六、報(bào)到時(shí)須提交以下材料：1.錄取通知書；2.戶口遷移證（不

遷戶口者除外）；3.學(xué)歷、學(xué)位證書原件；4.黨（團(tuán)）組織關(guān)系；5.近期免冠半身正面一寸照片8張。

七、請認(rèn)真按要求辦理各種手續(xù)。若手續(xù)不全，將不予報(bào)到，并須在規(guī)定時(shí)間內(nèi)回原單位重新辦理，否則將取消入學(xué)資格。如有特殊原因不能按時(shí)報(bào)到者，應(yīng)由所在學(xué)校（單位）出具有效證明向?qū)W校請假，并將請假條發(fā)傳真至：010－82106609（注明工作處收）。無故逾期兩周不報(bào)到者，將取消入學(xué)資格。

2014年6月11日

第四篇：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院2014年碩士研究生招生簡章

中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院2014年碩士研究生招生簡章

一、培養(yǎng)目標(biāo)

學(xué)術(shù)型碩士研究生旨在培養(yǎng)熱愛祖國，擁護(hù)中國共產(chǎn)黨的領(lǐng)導(dǎo)，擁護(hù)社會主義制度，遵紀(jì)守法，品德良好，為社會主義建設(shè)服務(wù)，掌握本學(xué)科堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)理論和系統(tǒng)的專業(yè)知識，具有創(chuàng)新精神和從事科學(xué)研究、教學(xué)、管理等工作能力的高層次學(xué)術(shù)型專門人才。

全日制專業(yè)學(xué)位研究生旨在培養(yǎng)熱愛祖國，擁護(hù)中國共產(chǎn)黨的領(lǐng)導(dǎo)，擁護(hù)社會主義制度，遵紀(jì)守法，品德良好，為社會主義建設(shè)服務(wù)，掌握某一專業(yè)（或職業(yè)）領(lǐng)域堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)理論和寬廣的專業(yè)知識、具有較強(qiáng)解決實(shí)際問題的能力、能夠承擔(dān)專業(yè)技術(shù)或管理工

作、具有良好職業(yè)素養(yǎng)的高層次應(yīng)用型專門人才。

二、報(bào)考條件

（一）推薦免試

我院接收優(yōu)秀應(yīng)屆本科畢業(yè)生到相關(guān)研究所推薦免試攻讀碩士學(xué)位（學(xué)術(shù)型或?qū)I(yè)學(xué)位）。考生應(yīng)取得畢業(yè)學(xué)校2014年碩士研究生推薦免試資格。具體要求參見2014年推

免生招收公告。

（二）全國統(tǒng)考

1．中華人民共和國公民。

2．擁護(hù)中國共產(chǎn)黨的領(lǐng)導(dǎo)，愿為社會主義現(xiàn)代化建設(shè)服務(wù)，品德良好，遵紀(jì)守法。

3．考生的學(xué)歷必須符合下列條件之一：

①國家承認(rèn)學(xué)歷的應(yīng)屆本科畢業(yè)生。

②具有國家承認(rèn)的大學(xué)本科畢業(yè)學(xué)歷的人員。

③已獲碩士學(xué)位或博士學(xué)位的人員（只準(zhǔn)報(bào)考委托培養(yǎng)或自籌經(jīng)費(fèi)碩士生）。

④獲得國家承認(rèn)的高職高專畢業(yè)學(xué)歷2年或2年以上（從高職高專畢業(yè)到2013年9月1日），以及國家承認(rèn)學(xué)歷的本科結(jié)業(yè)生和成人高校（含普通高校舉辦的成人高等學(xué)歷教育）應(yīng)屆本科畢業(yè)生，按本科畢業(yè)生同等學(xué)力身份報(bào)考，同時(shí)還須滿足以下三個(gè)條件：一，修完大學(xué)本科全部必修課程；二，在所報(bào)考專業(yè)領(lǐng)域的學(xué)術(shù)期刊上以第一作者發(fā)表過

1篇（含）以上文章；三，報(bào)考專業(yè)與所學(xué)專業(yè)相同或相近。

⑤自考生和網(wǎng)絡(luò)教育考生，須在報(bào)名現(xiàn)場確認(rèn)截止日期（2013年11月14日）前取得國家承認(rèn)的大學(xué)本科畢業(yè)證書方可報(bào)考。在校研究生報(bào)考須在報(bào)名前征得所在培養(yǎng)單位

同意。

4．身體健康狀況符合國家規(guī)定的體檢要求。

三、報(bào)名

考生報(bào)名前要仔細(xì)核對本人是否符合報(bào)考條件，報(bào)考資格審查將在復(fù)試階段進(jìn)行，凡

不符合報(bào)考條件的考生將不予錄取，相關(guān)后果由考生本人自負(fù)。

1．報(bào)名采取網(wǎng)上提交報(bào)考信息和現(xiàn)場確認(rèn)相結(jié)合的方式。

2．網(wǎng)上提交報(bào)考信息時(shí)間為2013年10月10日至10月31日（每天9:00-22:00），逾期不再補(bǔ)報(bào)，也不得再修改報(bào)名信息。預(yù)報(bào)名時(shí)間為2013年9月25日至9月28日（每天9:00-22:00）。屆時(shí)請考生自行登陸“中國研究生招生信息網(wǎng)”（公網(wǎng)網(wǎng)址：http：//yz.chsi.com.cn，教育網(wǎng)址：http://yz.chsi.cn）報(bào)名。

3．考生網(wǎng)上提交報(bào)名信息時(shí)，請正確詳盡填寫本人通信地址并確保其在2014年6月30前有效，以便我院準(zhǔn)確發(fā)放錄取通知書等材料。凡因通信地址填寫不詳或填寫錯(cuò)誤導(dǎo)致

錄取通知書等材料無法寄達(dá)的，后果由考生本人自負(fù)。

4．現(xiàn)場確認(rèn)時(shí)間為2013年11月10日至11月14日，逾期不再補(bǔ)辦。

5．報(bào)名點(diǎn)選擇中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院（報(bào)名點(diǎn)代碼：1176）的考生，請?jiān)谝?guī)定時(shí)間到我院現(xiàn)場照相、確認(rèn)報(bào)考信息；選擇其他外省市報(bào)名點(diǎn)的考生，請按當(dāng)?shù)卣猩块T要求，到指

定的報(bào)名點(diǎn)現(xiàn)場照相、確認(rèn)報(bào)考信息。

6．我院實(shí)行按研究所、二級學(xué)科及研究方向報(bào)名考試，考生通過復(fù)試后與導(dǎo)師雙向選擇的招生錄取辦法。報(bào)名前請考生仔細(xì)閱讀我院2014年招生專業(yè)目錄。各研究所、各專業(yè)招生導(dǎo)師信息查詢方法：進(jìn)入中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院研究生院網(wǎng)站→招生就業(yè)→招生信息→導(dǎo)

師信息。

四、初試

1．2013年12月25日-2014年1月6日，考生憑網(wǎng)報(bào)用戶名和密碼登錄“中國研究生招生信息網(wǎng)”下載打印《準(zhǔn)考證》?？忌鷳{下載打印的《準(zhǔn)考證》及第二代居民身份

證參加初試。

2．初試時(shí)間：2014年1月4日-5日?？荚嚂r(shí)間以北京時(shí)間為準(zhǔn)，上午8:30～11:30，下午14:00～17:00。不在該規(guī)定日期舉行的研究生入學(xué)考試，國家一律不予承

認(rèn)。

3．考試地點(diǎn)：報(bào)名點(diǎn)選擇中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院（報(bào)名點(diǎn)代碼：1176）的考生，到中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院參加考試；報(bào)名點(diǎn)選擇當(dāng)?shù)厥?、市招生辦公室指定報(bào)名點(diǎn)的考生，在當(dāng)?shù)貓?bào)名點(diǎn)

進(jìn)行考試。

4．招生研究所、專業(yè)、研究方向、考試科目等信息詳見《中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院2014年碩士研究生招生專業(yè)目錄》?？荚嚳颇恐?01-思想政治理論、201-英語

一、202-俄語、203-日語、204-英語

二、301-數(shù)學(xué)

一、302-數(shù)學(xué)

二、303-數(shù)學(xué)三等為全國統(tǒng)一命題；其他科目均由我院自行組織命題。2014年起，原農(nóng)學(xué)門類聯(lián)考科目314-數(shù)學(xué)（農(nóng)）、315-化學(xué)（農(nóng)）、414-植物生理學(xué)與生物化學(xué)、415-動物生理學(xué)與生物化學(xué)將改為由我院自主命

題，請考生注意。

五、復(fù)試

我院研究生復(fù)試工作由各研究所在研究生院的統(tǒng)一安排下分別組織進(jìn)行。復(fù)試時(shí)間、地點(diǎn)、科目、方式均由各研究所自行規(guī)定，并在復(fù)試前通過網(wǎng)站向考生公布。

1．復(fù)試分?jǐn)?shù)線：進(jìn)入我院各研究所復(fù)試的考生，初試成績必須達(dá)到國家一類地區(qū)復(fù)試分?jǐn)?shù)線要求，各研究所可根據(jù)上線生源情況制定不低于國家分?jǐn)?shù)線的本研究所復(fù)試線。

2．復(fù)試時(shí)間：一般在2014年4月，具體時(shí)間由各研究所規(guī)定。

3．復(fù)試內(nèi)容：一般包括外國語口語和聽力測試、專業(yè)筆試和綜合面試，具體復(fù)試科目由各研究所自定。重點(diǎn)考察學(xué)生的專業(yè)基礎(chǔ)、綜合分析能力、解決實(shí)際問題的能力和動手能力等。以同等學(xué)力資格報(bào)考的考生復(fù)試時(shí)還須加試兩門本科專業(yè)基礎(chǔ)課，具體科目由

報(bào)考研究所規(guī)定。

4．復(fù)試比例及權(quán)重：實(shí)行差額復(fù)試，復(fù)試人數(shù)一般為招生人數(shù)的120%左右。各研究所根據(jù)本所生源情況和專業(yè)特點(diǎn)，差額比例可適當(dāng)擴(kuò)大。復(fù)試成績不及格者不予錄取?？忌偝煽冇沙踉嚦煽兒蛷?fù)試成績組成，復(fù)試成績占總成績的權(quán)重一般為40%。

5．我院各研究所將在復(fù)試時(shí)將對考生有效身份證件、學(xué)歷證書、學(xué)生證等報(bào)名材料

原件及考生資格進(jìn)行審查，對不符合教育部規(guī)定者，不予復(fù)試。

六、調(diào)劑政策

我院調(diào)劑原則：先院內(nèi)、后院外。根據(jù)各研究所和各專業(yè)的實(shí)際需求，對一志愿報(bào)考我院且成績達(dá)到國家復(fù)試分?jǐn)?shù)線的考生優(yōu)先在院內(nèi)各研究所之間調(diào)劑。

報(bào)考學(xué)術(shù)型和報(bào)考專業(yè)學(xué)位研究生之間的調(diào)劑政策，待初試結(jié)束后，根據(jù)教育部規(guī)定

并視第一志愿生源上線情況而定。

七、體檢

體檢工作在復(fù)試階段由各研究所分別組織進(jìn)行。體檢標(biāo)準(zhǔn)將參照《普通高等學(xué)校招生體檢工作指導(dǎo)意見》（教學(xué)〔2003〕3號）和《教育部辦公廳衛(wèi)生部辦公廳關(guān)于普通高等學(xué)校招生學(xué)生入學(xué)身體檢查取消乙肝項(xiàng)目檢測有關(guān)問題的通知》（教學(xué)廳〔2010〕2號）

等有關(guān)規(guī)定執(zhí)行。

八、錄取

經(jīng)過初試、復(fù)試、體檢等環(huán)節(jié)，各研究所在綜合考察考生思想政治表現(xiàn)、業(yè)務(wù)素質(zhì)及身心狀況的基礎(chǔ)上，以考生的總成績排名決定擬錄取名單，考生通過雙向選擇的方式確定

本人導(dǎo)師。

擬錄取為定向及委托培養(yǎng)的碩士研究生，須在錄取前簽訂定向和委托培養(yǎng)協(xié)議書；擬錄

取的往屆考生須在考生人事檔案到達(dá)后發(fā)放錄取通知書。

錄取考生入學(xué)報(bào)到時(shí)需攜帶本人錄取通知書及本科畢業(yè)證書、學(xué)位證書原件等材料。

九、學(xué)習(xí)年限

我院學(xué)術(shù)型和全日制專業(yè)學(xué)位碩士研究生學(xué)制一般均為3年，其中在研究生院（北京）進(jìn)行集中課程學(xué)習(xí)時(shí)間一般為1年，符合規(guī)定的碩士生可以申請?zhí)崆爱厴I(yè)。

十、碩博連讀

學(xué)習(xí)成績優(yōu)秀、科研能力突出的學(xué)術(shù)型碩士生可在二年級時(shí)申請碩博連讀，通過我院

組織的評審考核后，可在第三年直接進(jìn)入博士階段學(xué)習(xí)。

十一、學(xué)費(fèi)及待遇

按照國家規(guī)定，從2014年秋季入學(xué)起，我院對新入學(xué)研究生將統(tǒng)一收取學(xué)費(fèi)，具體辦法另行制定，同時(shí)我院將進(jìn)一步完善研究生獎助政策體系，加大對優(yōu)秀在學(xué)研究生的獎

助力度。

十二、就業(yè)

定向或委托培養(yǎng)碩士生畢業(yè)后回定向地區(qū)或委托單位。

非定向碩士生畢業(yè)時(shí)采取畢業(yè)生與用人單位“雙向選擇”的方式，落實(shí)就業(yè)去向。

十三、咨詢方式及其他

1．我院實(shí)行院所兩級管理，考生在報(bào)名、考試過程中的相關(guān)問題可與我院招生辦公室聯(lián)系咨詢；考生在復(fù)試、錄取過程中的相關(guān)問題可直接與報(bào)考研究所聯(lián)系咨詢。

2．我院研究生招生的最新信息，如招生專業(yè)目錄、報(bào)名公告、復(fù)試方案、擬錄取名單等均可在中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院研究生院主頁上查詢，網(wǎng)址：http://004km.cn。

4．2014年我院將繼續(xù)招收少數(shù)民族高層次骨干計(jì)劃考生，相關(guān)政策請參考《中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院2014年少數(shù)民族高層次骨干人才計(jì)劃碩士研究生招生簡章》。

5．我院不舉辦任何形式的考前輔導(dǎo)班，不出售歷年真題及參考書目或辦理郵購業(yè)

務(wù)。雙休日及節(jié)假日休息，工作時(shí)間接待咨詢。

6．本簡章中如有內(nèi)容與教育部最新政策相沖突，按教育部最新政策執(zhí)行。

第五篇：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院研究生院應(yīng)屆畢業(yè)生出國(境)協(xié)議書

中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院研究生院應(yīng)屆畢業(yè)生出國（境）協(xié)議書 甲方：

乙方：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院研究生院

按照《中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院研究生院學(xué)生管理規(guī)定》和《國家公派出國留學(xué)研究生管理規(guī)定（試行）》中的有關(guān)規(guī)定，現(xiàn)甲、乙雙方在自主自愿的條件下，達(dá)成以下協(xié)議：

1、甲方確因（A.學(xué)術(shù)交流、科研合作B.攻讀學(xué)位 C.其它：）需要出國（境），所赴國家或地區(qū)為____________。

2、甲方出國（境）期限為____________，最遲應(yīng)在_____年_____月_____日前回國。

3、甲方需認(rèn)真遵守《國家公派出國留學(xué)研究生管理規(guī)定（試行）》中的各項(xiàng)規(guī)定。

4、乙方協(xié)助甲方辦理有關(guān)護(hù)照和簽證手續(xù)。乙方負(fù)責(zé)保存甲方在留學(xué)期限內(nèi)的戶籍和檔案，超過規(guī)定留學(xué)期限未歸，乙方將甲方檔案和戶籍遷轉(zhuǎn)回生源所在地。

5、甲方不享受在校生待遇，留學(xué)期間要嚴(yán)格遵守我國和當(dāng)?shù)胤梢?guī)定、風(fēng)俗人情，如有違紀(jì)違規(guī)現(xiàn)象，造成的意外及其它刑事、民事責(zé)任與乙方無關(guān)。

6、甲方回國應(yīng)在一個(gè)月內(nèi)向乙方報(bào)到，辦理有關(guān)手續(xù)。

7、本協(xié)議自簽訂之日起生效。

8、本協(xié)議書一式三份，甲方持一份、乙方持兩份。

甲方（蓋章）代表簽字日期 乙方（蓋章）代表簽字日期 甲方國內(nèi)聯(lián)系人與本人關(guān)系聯(lián)系方式