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      病理切片與免疫組化個(gè)人經(jīng)驗(yàn)總結(jié)

      時(shí)間:2019-05-15 10:01:09下載本文作者:會(huì)員上傳
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      第一篇:病理切片與免疫組化個(gè)人經(jīng)驗(yàn)總結(jié)

      免疫組織化學(xué)中對(duì)載波片和蓋波片的處理

      (一)載波片的清潔

      進(jìn)行免疫組化染色必須保證載波片的潔凈否則常導(dǎo)致非特異性染色和組織脫片現(xiàn)象的出現(xiàn)而新的載波片常有油污等可能影響免疫組化染色的異物。因此必須對(duì)載波片進(jìn)行清潔工作。常用的載波片清潔液是用重鉻酸鉀、濃硫酸和蒸餾水以不同比例混合配成不同強(qiáng)度的清潔液。

      1. 常用清潔液的配制方法:

      1.1重鉻酸鉀:濃硫酸:蒸餾水=1:1:10 重鉻酸鉀10g., 濃硫酸10ml, 蒸餾水100ml 1.2重鉻酸鉀:濃硫酸:蒸餾水=2:3:25 1.3重鉻酸鉀:濃硫酸:蒸餾水=2:5:25 2載波片的清潔方法

      1。1先將載波片用清潔液浸泡12-24h 1.2流水沖洗后再用蒸餾水清洗3-5遍 1。3 95%的酒精中浸泡2h,用紗布擦干

      1.4放入60℃烤箱中烤干或者自然晾干儲(chǔ)存在玻片盒內(nèi)備用

      (二)載玻片的表面處理

      在免疫組化試驗(yàn)中由于實(shí)驗(yàn)操作步驟的繁多常引起組織切片或者細(xì)胞涂片的脫落,影響檢測(cè)效果,因此常需要用粘附濟(jì)對(duì)切片進(jìn)行處理。

      1APES黏附劑APES是一種新型玻片黏附劑它的黏附劑機(jī)制是通過對(duì)玻璃表面的化學(xué)修飾改變玻璃表面的化學(xué)物理特性使組織切片活細(xì)胞成分牢固的貼附于玻璃表面不易脫落并可長(zhǎng)期保存。是目前應(yīng)用最多的組織黏附劑。

      1.1APES工作液配制APES1ml丙酮50ml,混勻即可。

      1.2切片處理方法1。1。1干警的切片放入盛有丙酮的染色缸中浸泡5min 1.1.2浸入APES工作液停留20-30s 1.1.3純丙酮洗2次1。1。4放入烤箱37℃過夜1。1。5用干凈玻片盒裝好室溫保存?zhèn)溆靡话憧纱娣虐肽暌陨?/p>

      2多聚賴氨酸(poly-l-lycine.pll)多聚賴氨酸水溶液是一種良好的組織黏附劑使用濃度在0。005-0。01%但是由于價(jià)格較高在免疫組化中很少用。1.1多聚賴氨酸儲(chǔ)備液的配制,將0.5g多聚賴氨酸充分溶于100 ml蒸餾水中,4℃或者-20℃保存?zhèn)溆茫╬ll可反復(fù)水融)工作液可將pll原液稀釋10-50倍使用 1。2切片的處理方法

      1。1。1干凈干燥切片浸入pll工作液,停留20-30s 1.1.3用干凈玻片盒裝好,室溫保存?zhèn)溆靡话憧纱娣虐肽暌陨?/p>

      (三)蓋波片的處理

      蓋波片的處理方法如上,處理時(shí)間可適當(dāng)縮短,清潔液浸泡2h即可(摘自常雙鎖主編醫(yī)學(xué)常用實(shí)驗(yàn)技術(shù)精編)

      石蠟切片微波修復(fù)抗原染色程序

      1載玻片防脫片劑處理:可選擇APES或poly-l-lycine。撈片后置烤箱58-60℃30-60分鐘以上使切片緊密黏附 2. 切片常規(guī)脫蠟至水

      3.30%H2O2+蒸餾水10份混合,室溫5-10分鐘以滅活內(nèi)源性酶,蒸餾水洗3次 4.熱修復(fù)抗原:將切片浸入0.01M購船酸鹽緩沖液中(PH6。0),電路或微波爐加熱之沸騰后斷電間隔5-10分鐘后,反復(fù)1-2次。冷卻后PBS(PH7。2-7。6)洗1-2次。5滴加5%BSA封閉液室溫20分鐘,甩去多余液體不洗。6滴加適當(dāng)稀釋的抗(小鼠或兔IgG).37℃1h左右或20℃時(shí)左右,也可4℃過夜,PBS(PH7。2-7。6)洗2分鐘×3次。(一抗的稀釋度孵育時(shí)間和溫度與染色強(qiáng)度、背景有直接關(guān)系。一般來說陽性染色強(qiáng)度不夠時(shí)可提高一抗?jié)舛群脱娱L(zhǎng)孵育時(shí)間背景過高時(shí)可降低一抗?jié)舛群涂s短孵育時(shí)間)

      7.滴加生物素化山羊抗小鼠IgG(或兔、人IgG),20-37℃20分鐘PBS(PH7。2-7。6)洗2分鐘×3次。

      8滴加試劑SABC,20-37℃20分鐘.PBS(PH7。2-7。6)洗5分鐘×4次.9.DAB顯色:使用DAB顯色試劑盒(AR1022)。取蒸餾水1ml加試劑盒中A,B,C試劑各1滴,混勻后加至切片,室溫顯色,鏡下控制反應(yīng)時(shí)間,一般在5-30分鐘之間.也可自配顯色劑顯色。蒸餾水洗滌。

      0.02M PBS(PH7。2-7。6)配法:

      1000ml蒸餾水中加氯化鈉8.5g,Na2HPO42.8g, Na2H2PO40.4g.如果用的是含水磷酸鹽,應(yīng)加上分子式中水的含量。

      0.02M枸椽酸鹽緩沖液:1000ml蒸餾水中加枸椽酸三鈉(C6H5Na3O7·2H2O)3g, 枸椽酸(C6H8O7·H2O)0.4g 注意事項(xiàng):

      如果染色背景較高,在SABC反應(yīng)之后,DAB顯色之前,用加水0。01-0。02%TWEEN20的PBS(PH7。2-7。6)洗滌切片4次,單純PBS洗2次,然后顯色。

      以上摘自武漢博士德生物工程有限工程公司所產(chǎn)的即用型SABC免疫組化染色試劑和使用說明書。

      HE染色方法

      1二甲苯I脫蠟10-15min 2二甲苯II脫蠟10-15min 3無水乙醇脫二甲苯1min×2次 4.95%乙醇 5.90%乙醇 6.85%乙醇 7自來水洗2min 8蘇木蘇染色1-5 min 9自來水洗1 min 10.0.5%-1%鹽酸乙醇分化20S 11自來水洗1min 12稀氨水(1%)返藍(lán)數(shù)秒,自來水或蒸餾水洗1 min 13尹紅染色1-5 min 14自來水洗

      15.85%乙醇脫水20S 16.90%乙醇30S 17.95%乙醇I 1 min 18.95%乙醇II 1 min 19.無水乙醇I 2min 20.無水乙醇II2min 21二甲苯I 2min 22二甲苯II2min 23二甲苯III2min 24中性樹膠或加拿大樹膠封固。結(jié)果:

      細(xì)胞核呈藍(lán)色,鈣鹽和各種微生物呈藍(lán)染色或紫藍(lán)色,細(xì)胞質(zhì),肌纖維,纖維結(jié)締組織,紅細(xì)胞和嗜尹紅顆粒呈不同程度的紅色。摘自梁曉俐主編病理學(xué)基礎(chǔ)與實(shí)驗(yàn)技術(shù)

      第二篇:免疫組化經(jīng)驗(yàn)總結(jié)

      免疫組化

      關(guān)鍵詞: 免疫 組織化學(xué) 細(xì)胞2012-03-30 14:41 來源:互聯(lián)網(wǎng) 點(diǎn)擊次數(shù):14044 一,免疫組織化學(xué)簡(jiǎn)介

      免疫組織化學(xué)又稱免疫細(xì)胞化學(xué),是指帶顯色劑標(biāo)記的特異性抗體在組織細(xì)胞原位通過抗原抗體反應(yīng)和組織化學(xué)的呈色反應(yīng),對(duì)相應(yīng)炕原進(jìn)行定性、定位、定量測(cè)定的一項(xiàng)新技術(shù)。它把免疫反應(yīng)的特異性、組織化學(xué)的可見性巧妙地結(jié)合起來,借助顯微鏡(包括熒光顯微鏡、電子顯微鏡)的顯像和放大作用,在細(xì)胞、亞細(xì)胞水平檢測(cè)各種抗原物質(zhì)(如蛋白質(zhì)、多肽、酶、激素、病原體以及受體等)。

      二,免疫組化技術(shù)的基本原理

      免疫組化技術(shù)是一種綜合定性、定位和定量;形態(tài)、機(jī)能和代謝密切結(jié)合為一體的研究和檢測(cè)技術(shù)。在原位檢測(cè)出病原的同時(shí),還能觀察到組織病變與該病原的關(guān)系,確認(rèn)受染細(xì)胞類型,從而有助于了解疾病的發(fā)病機(jī)理和病理過程。

      免疫酶組化技術(shù)是通過共價(jià)鍵將酶連接在抗體上,制成酶標(biāo)抗體,再借酶對(duì)底物的特異催化作用,生成有色的不溶性產(chǎn)物或具有一定電子密度的顆粒,于普通顯微鏡或電鏡下進(jìn)行細(xì)胞表面及細(xì)胞內(nèi)各種抗原成分的定位,根據(jù)酶標(biāo)記的部位可將其分為直接法(一步法)、間接法(二步法)、橋聯(lián)法(多步法)等,用于標(biāo)記的抗體可以是用免疫動(dòng)物制備的多克隆抗體或特異性單克隆抗體,最好是特異性強(qiáng)的高效價(jià)的單克隆抗體。直接法是將酶直接標(biāo)記在第一抗體上,間接法是將酶標(biāo)記在第二抗體上,檢測(cè)組織細(xì)胞內(nèi)的特定抗原物質(zhì)。目前通常選用免疫酶組化間接染色法。

      三,免疫組化步驟

      1,切片,烤片60℃,1h;

      2,脫蠟及復(fù)水

      二甲苯10min,100%乙醇5min,95%乙醇5min,90%乙醇5min,85%乙醇5min,80%乙醇5min,75%乙醇5min,60%乙醇5min,50%乙醇5min,30%乙醇5min,自來水1min,雙氧水1min;

      3,1份30%H2O2加10份蒸餾水,室溫10min,蒸餾水洗3次,每次3min;

      4,微波修復(fù)

      將切片浸入0.01M枸櫞酸緩沖液,微波中最大火力(98℃-100℃)加熱至沸騰,冷卻(約5-10min),反復(fù)兩次;

      5,將切片自然冷卻至室溫,PBS洗滌3次,每次5min;

      6,封閉,5%BSA,室溫20min,甩去多余液體;

      7,滴加一抗,37℃,1h,或者4℃過夜;

      8,PBS洗滌3次,每次3min;

      9,滴加二抗,37℃,15-30min;

      10,PBS洗滌3次,每次3min;

      11,滴加SABC,37℃,30min;

      12,PBS洗滌3次,每次5min;

      13,1ml蒸餾水中分別滴加顯色劑,混勻;

      14,DAB顯色劑配置好后,滴加于切片,室溫,鏡下檢測(cè)反應(yīng)時(shí)間(約5min);

      15,自來水沖洗干凈,過蒸餾水;

      16,蘇木素復(fù)染2min,自來水沖洗;

      17,脫水

      30%乙醇3min,50%乙醇3min,70%乙醇3min,80%乙醇3min,90%乙醇3min,95%乙醇3min,100%乙醇3min,二甲苯20min;

      18,樹膠封片,鏡檢。

      四,免疫組化常見問題分析

      1,石蠟切片在染色過程中出現(xiàn)脫片現(xiàn)象

      1)烤片時(shí)間不夠,或溫度不夠,可以延長(zhǎng)烤片時(shí)間和提高烤片溫度;

      2)用含有多聚賴氨酸的玻片,可以購買到或這自己做;

      3)有些組織本身就容易掉片,如骨組織等,操作時(shí)沖PBS不要直接沖到組織上,沖到組織上方,讓它流下沖洗組織;

      4)用高溫修復(fù)時(shí),溫度驟冷也可能引起。

      2,邊緣效應(yīng)

      1)組織邊緣與玻片粘貼不牢,邊緣組織松脫漂浮在液體中,每次清洗不易將組織下面試劑洗盡所致.解決辦法:制備優(yōu)質(zhì)的膠片(APES或多聚賴氨酸),切出盡量薄的組織切片,不厚于4微米,組織的前期處理應(yīng)規(guī)范,盡量避免選用壞死較多的組織;

      2)切片上滴加的試劑未充分覆蓋組織,邊緣的試劑容易首先變干,濃度較中心組織高而致染色深。解決辦法:試劑要充分覆蓋組織,應(yīng)超出組織邊緣2mm。用組化筆畫圈時(shí),為了避免油劑的影響,畫圈應(yīng)距組織邊緣3-4mm。

      3,產(chǎn)生組織切片非特異性染色

      1)抗體孵育時(shí)間過長(zhǎng)、抗體濃度高易增加背景著色。這可通過縮短一抗/二抗孵育時(shí)間、稀釋抗體來控制。這是最重要的一條;

      2)一抗用多克隆抗體易出現(xiàn)非特異性著色,建議試用單克隆抗體看看;

      3)內(nèi)源性過氧化物酶和生物素在肝臟、腎臟等組織含量很高(含血細(xì)胞多的組織),需要通過延長(zhǎng)滅活時(shí)間和增加滅活劑濃度來降低背景染色;

      4)非特異性組分與抗體結(jié)合,這需要通過延長(zhǎng)二抗來源的動(dòng)物免疫血清封閉時(shí)間和適當(dāng)增加濃度來加強(qiáng)封閉效果;

      5)DAB孵育時(shí)間過長(zhǎng)或濃度過高;

      6)PBS沖洗不充分,殘留抗體結(jié)果增強(qiáng)著色,在一抗、二抗或SP孵育之后的浸洗尤為重要;

      7)標(biāo)本染色過程中經(jīng)常出現(xiàn)干片,這容易增強(qiáng)非特異性著色。

      4,免疫組化染色呈陰性結(jié)果

      1)抗體濃度和質(zhì)量問題以及抗體來源選擇錯(cuò)誤;

      2)抗原修復(fù)不全,對(duì)于甲醛固定的組織必須用充分抗原修復(fù)來打開抗原表位,以利于與抗體結(jié)合;建議微波修復(fù)用高火4次*6min試試。有人做過實(shí)驗(yàn),這是最佳的時(shí)間和次數(shù)。若不行,還可高壓修復(fù);

      3)組織切片本身這種抗原含量低;

      4)血清封閉時(shí)間過長(zhǎng);

      5)DAB孵育時(shí)間過短;

      6)細(xì)胞通透不全,抗體未能充分進(jìn)入胞內(nèi)參與反應(yīng);

      7)開始做免疫組化,我建議你一定要首先做個(gè)陽性對(duì)照片,排除抗體等外的方法問題。

      5,背景

      1,考慮一抗?jié)舛雀撸?/p>

      2,然后調(diào)整DAB孵育時(shí)間;

      3,也要考慮血清封閉時(shí)間是否過短;

      4,適當(dāng)增加抗體孵育后的浸洗次數(shù)和延長(zhǎng)浸洗時(shí)間等。

      第三篇:免疫組化常用方法介紹及個(gè)人經(jīng)驗(yàn)總結(jié)

      免疫組化常用方法介紹及個(gè)人經(jīng)驗(yàn)總結(jié)、定義

      用標(biāo)記的特異性抗體對(duì)組織切片或細(xì)胞標(biāo)本中某些化學(xué)成分的分布和含量進(jìn)行組織和細(xì)胞原位定性、定位或定量研究,這種技術(shù)稱為免疫組織化學(xué)(immunohistochemistry)技術(shù)或免疫細(xì)胞化學(xué)(immunocytochemistry)技術(shù)。

      2、原理

      根據(jù)抗原抗體反應(yīng)和化學(xué)顯色原理,組織切片或細(xì)胞標(biāo)本中的抗原先和一抗結(jié)合,再利用一抗與標(biāo)記生物素、熒光素等的二抗進(jìn)行反應(yīng),前者再用標(biāo)記辣根過氧化物酶(HRP)或堿性磷酸酶(AKP)等的抗生物素(如鏈霉親和素等)結(jié)合,最后通過呈色反應(yīng)或熒光來顯示細(xì)胞或組織中化學(xué)成分,在光學(xué)顯微鏡或熒光顯微鏡下可清晰看見細(xì)胞內(nèi)發(fā)生的抗原抗體反應(yīng)產(chǎn)物,從而能夠在細(xì)胞爬片或組織切片上原位確定某些化學(xué)成分的分布和含量。、分類

      1)按標(biāo)記物質(zhì)的種類,如熒光染料、放射性同位素、酶(主要有辣根過氧化物酶和堿性磷酸酶)、鐵蛋白、膠體金等,可分為免疫熒光法、放射免疫法、免疫酶標(biāo)法和免疫金銀法等。2)按染色步驟可分為直接法(又稱一步法)和間接法(二步、三步或多步法)。與直接法相比,間接法的靈敏度提高了許多。

      3)按結(jié)合方式可分為抗原-抗體結(jié)合,如過氧化物酶-抗過氧化物酶(PAP)法;親和連接,如卵白素-生物素-過氧化物酶復(fù)合物(ABC)法、鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結(jié)(SP)法等,其中 SP 法是比較常用的方法;聚合物鏈接,如即用型二步法,此方法尤其適合于內(nèi)源性生物素含量高的組織抗原檢測(cè)。、目前幾種常用免疫組化方法簡(jiǎn)單介紹 1)免疫熒光方法

      是最早建立的免疫組織化學(xué)技術(shù)。它利用抗原抗體特異性結(jié)合的原理,先將已知抗體標(biāo)上熒光素,以此作為探針檢查細(xì)胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原,在熒光顯微鏡下觀察。當(dāng)抗原抗體復(fù)合物中的熒光素受激發(fā)光的照射后即會(huì)發(fā)出一定波長(zhǎng)的熒光,從而可確定組織中某種抗原的定位,進(jìn)而還可進(jìn)行定量分析。由于免疫熒光技術(shù)特異性強(qiáng)、靈敏度高、快速簡(jiǎn)便,所以在臨床病理診斷、檢驗(yàn)中應(yīng)用較廣。

      2)免疫酶標(biāo)方法

      免疫酶標(biāo)方法是繼免疫熒光后,于 60 年代發(fā)展起來的技術(shù)?;驹硎窍纫悦笜?biāo)記的抗體與組織或細(xì)胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性產(chǎn)物或具有一定電子密度的顆粒,通過光鏡或電鏡,對(duì)細(xì)胞表面和細(xì)胞內(nèi)的各種抗原成分進(jìn)行定位研究。免疫酶標(biāo)技術(shù)是目前最常用的技術(shù)。

      本方法與免疫熒光技術(shù)相比的主要優(yōu)點(diǎn)是:定位準(zhǔn)確,對(duì)比度好,染色標(biāo)本可長(zhǎng)期保存,適合于光、電鏡研究等。

      免疫酶標(biāo)方法的發(fā)展非常迅速,已經(jīng)衍生出了多種標(biāo)記方法,且隨著方法的不斷改進(jìn)和創(chuàng)新,其特異性和靈敏度都在不斷提高,使用也越來越方便。目前在病理診斷中廣為使用的有 ABC 法、SP 三步法、即用型二步法檢測(cè)系統(tǒng)等。

      3)免疫膠體金技術(shù)

      免疫膠體金技術(shù)是以膠體金這樣一種特殊的金屬顆粒作為標(biāo)記物。膠體金是指金的水溶膠,它能迅速而穩(wěn)定地吸附蛋白,對(duì)蛋白的生物學(xué)活性則沒有明顯的影響。因此,用膠體金標(biāo)記一抗、二抗或其他能特異性結(jié)合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌 A 蛋白)等作為探針,就能對(duì)組織或細(xì)胞內(nèi)的抗原進(jìn)行定性、定位,甚至定量研究。由于膠體金有不同大小的顆粒,且膠體金的電子密度高,所以免疫膠體金技術(shù)特別適合于免疫電鏡的單標(biāo)記或多標(biāo)記定位研究。由于膠體金本身呈淡至深紅色,因此也適合進(jìn)行光鏡觀察。如應(yīng)用銀加強(qiáng)的免疫金銀法則更便于光鏡觀察。、被檢測(cè)的物質(zhì)

      組織或細(xì)胞中凡是能作為抗原或半抗原,如蛋白質(zhì)、多肽、氨基酸、多糖、磷脂、受體、酶、激素、核酸及病原體等都可用相應(yīng)的特異性抗體進(jìn)行檢測(cè)。、特點(diǎn)

      1)特異性強(qiáng)。免疫學(xué)的基本原理決定抗原與抗體之間的結(jié)合具有高度特異性,因此,免疫組化從理論上講也是組織細(xì)胞中抗原的特定顯示,如角蛋白(keratin)顯示上皮成分,LCA 顯示淋巴細(xì)胞成分。只有當(dāng)組織細(xì)胞中存在交叉抗原時(shí),才會(huì)出現(xiàn)交叉反應(yīng)。

      2)敏感性高。在應(yīng)用免疫組化的起始階段,由于技術(shù)上的限制,只有直接法、間接法等敏感性不高的技術(shù),那時(shí)的抗體只能稀釋幾倍、幾十倍;現(xiàn)在由于 ABC 法或 SP 三步法的出現(xiàn),使抗體稀釋上千倍、上萬倍甚至上億倍仍可在組織細(xì)胞中與抗原結(jié)合,這樣高敏感性的抗體抗原反應(yīng),使免疫組化方法越來越方便地應(yīng)用于常規(guī)病理診斷工作。

      3)定位準(zhǔn)確、形態(tài)與功能相結(jié)合。該技術(shù)通過抗原抗體反應(yīng)及呈色反應(yīng),可在組織和細(xì)胞中進(jìn)行抗原的準(zhǔn)確定位,因而可同時(shí)對(duì)不同抗原在同一組織或細(xì)胞中進(jìn)行定位觀察,這樣就可以進(jìn)行形態(tài)與功能相結(jié)合的研究,對(duì)病理學(xué)領(lǐng)域開展深入研究是十分有意義的。、從蛋白水平檢測(cè)角度,免疫組化技術(shù)與 Western blotting、ELISA 的異同

      1)Western blotting:蛋白質(zhì)免疫印跡,也是利用抗體抗原反應(yīng)原理,結(jié)合化學(xué)發(fā)光等技術(shù)來檢查組織或細(xì)胞樣品內(nèi)蛋白含量的檢測(cè)方法。與免疫組化技術(shù)相比,定量可能更加準(zhǔn)確;當(dāng)然 Western blotting 也可定性和定位(通過提取膜蛋白或核蛋白、胞漿蛋白分別檢測(cè)其中抗原含量,進(jìn)而間接反映它們的定位),但敏感性遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于免疫組化技術(shù)。

      2)ELISA:酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),也是利用抗體-抗原-抗原結(jié)合反應(yīng)原理來檢查體液或組織勻漿中蛋白含量的檢測(cè)。與免疫組化技術(shù)相比,定量最準(zhǔn)確,是分泌性蛋白檢測(cè)首選方法之一。

      8、免疫組化個(gè)人經(jīng)驗(yàn)總結(jié)

      1、方法操作不難,最大的難處是出現(xiàn)異常結(jié)果時(shí)如何解決?這就需要掌握免疫組化實(shí)驗(yàn)原理,每一步知道為什么這樣做,這樣你才敢大膽地改革先前的不對(duì)的方法步驟。如抗體孵育條件主要是抗體濃度、溫度、時(shí)間,這三者一般是相互成反比的(相對(duì)),其中濃度是最重要的先決條件,溫度決定反應(yīng)的速度、時(shí)間決定反應(yīng)的量。就拿溫度來說,可以有 4 度、室溫、37 度,我推薦4 度最佳,反應(yīng)最溫和,背景較淺;而 37 度反應(yīng)速度較快,時(shí)間較短;室溫我不太提倡,除非你每次都把環(huán)境溫度控制在一定的范圍,否則,盡量選擇前兩者。

      2、免疫組化最大的優(yōu)勢(shì)是定位和定性。相比于其他蛋白檢測(cè)方法,免疫組化具有定性靈敏度高、定位較直接準(zhǔn)確,是定位檢測(cè)分析首選方法。尤其對(duì)于有些因子的轉(zhuǎn)位研究十分有用。

      3、免疫組化結(jié)果定量分析的前提是高質(zhì)量的染色切片。免疫組化結(jié)果也能定量分析,但必須是背景染色淺而特異性染色較深的情況下,分析最為準(zhǔn)確,這種原則可能也是我們?nèi)粘徃鍟r(shí)判定研究結(jié)果的必備條件。

      4、免疫組化實(shí)驗(yàn)一定要設(shè)置陽性對(duì)照和陰性對(duì)照。陽性對(duì)照一般是用肯定表達(dá)這種抗原的切片來做;陰性對(duì)照一般是用 PBS 或非一抗替代一抗來進(jìn)行反應(yīng),其余步驟均一致。前者是排除方法和實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)有無問題;后者是排除有無一抗外的非特異性染色。

      5、免疫組化的應(yīng)用廣泛,是當(dāng)前實(shí)驗(yàn)研究的最重要方法之一。如今發(fā) SCI 論文時(shí),明顯感覺僅靠量化的數(shù)據(jù)來發(fā)文章很難,加一些形態(tài)學(xué)數(shù)據(jù)或圖片,老外十分歡迎,可能是怕你學(xué)術(shù)造假吧。當(dāng)然也不能做假陽性或假陰性結(jié)果。

      6、免疫組化技術(shù)掌握與否的鑒定標(biāo)準(zhǔn)是同一切片或不同切片中不同抗原均從摸索濃度或條件而做出優(yōu)良的染色切片。

      免疫組化技術(shù)掌握與否的鑒定標(biāo)準(zhǔn)是同一切片或不同切片中不同抗原均從摸索濃度或條件而做出優(yōu)良的染色切片。我在平時(shí)帶教中就發(fā)現(xiàn)許多研究生把我已經(jīng)摸索很成熟的反應(yīng)條件、濃度、方法步驟,重復(fù)運(yùn)用于同一性質(zhì)的切片和同一種抗體,做出來后就覺得自己已經(jīng)掌握了免疫組化方法,更換一種抗體后,居然連二抗的種屬來源都拿錯(cuò)了。失敗往往促進(jìn)你去思考試驗(yàn)原理和過程,成功有時(shí)也加快你自傲。

      7、實(shí)驗(yàn)方法需要?jiǎng)邮? 動(dòng)腦。如今我還不敢說我在免疫組化什么都知道。我只所以今天敢在這里說這說那,這是因?yàn)槲医?jīng)過了反復(fù)的動(dòng)手+動(dòng)腦,把理論原理運(yùn)用于實(shí)踐,在把實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)的問題帶到理論知識(shí)中去解決,最終把理論與實(shí)踐融會(huì)貫通。

      第四篇:個(gè)人經(jīng)驗(yàn)總結(jié)

      一學(xué)期很快地過去了,在各級(jí)領(lǐng)導(dǎo)和家長(zhǎng)的支持下,幼兒各方面都取得了一定的成績(jī)。為了將我的工作做得更好,特總結(jié)如下:

      一、現(xiàn)狀分析:

      我班幼兒二十五人,其中男孩十二人,女孩有十三人,年齡在兩歲半到三歲。其中十人是本期新插入的。本班大部分幼兒身體發(fā)育正常,他們喜歡問,求知欲強(qiáng),對(duì)唱歌、跳舞有一定的興趣,能用簡(jiǎn)單的語言表達(dá)愿望。經(jīng)過一學(xué)期的學(xué)習(xí),幼兒各方面進(jìn)步很大。在本期以新《幼兒園教育指導(dǎo)綱要》和“三個(gè)代表”重要思想為指導(dǎo),堅(jiān)持“孩子第一”的原則,積極地將教育觀念轉(zhuǎn)變?yōu)榻逃袨椋谝蝗毡=谈鳝h(huán)節(jié)中認(rèn)真落實(shí)《幼兒園教育指導(dǎo)綱要》;從而保證幼兒一日生活的愉快進(jìn)行,促進(jìn)孩子們?nèi)姘l(fā)展。

      二、政治思想方面:

      本期在園領(lǐng)導(dǎo)組織下,觀看學(xué)習(xí)了師德啟示錄和教師職業(yè)道德規(guī)范。在實(shí)際工作中把這種精神踏實(shí)奉獻(xiàn)精神一直牢牢地記在心里,從而把孩子放在第一位,在工作中不分上下班,不計(jì)報(bào)酬,真正體現(xiàn)主人翁精神。

      積極參加政治業(yè)務(wù)學(xué)習(xí),做到認(rèn)真做好筆記,會(huì)后寫出自己的心得體會(huì),不斷提高自己的思想政治覺悟,不信、不傳“法輪功”的歪理邪說,使自己的思想與黨中央保持一致。

      加強(qiáng)自身的文化修養(yǎng),多讀多看報(bào)刊雜志,努力提高自己的業(yè)務(wù)能力,用新的知識(shí)不斷充實(shí)自己的頭腦,盡快適應(yīng)新形式的要求。

      做到了團(tuán)結(jié)同志,熱愛集體,遵守幼兒園一切規(guī)章制度,保質(zhì)保量的完成了本職工作。

      工作中做到了服從領(lǐng)導(dǎo)安排,協(xié)調(diào)好本班教師的關(guān)系,共同配合,促進(jìn)了幼兒全面發(fā)展。

      三、業(yè)務(wù)工作內(nèi)容

      (1)教研工作

      積極參加小班組的課題研究,仔細(xì)為新教師周碧上匯報(bào)課和教研課出力出策。認(rèn)真聽新教師的匯報(bào)課,并記錄下來討論,幫助了別人,也豐富了自己的已有經(jīng)驗(yàn)。

      認(rèn)真完成教研組長(zhǎng)交給的任務(wù),主講小班教師如何開展游戲。

      (2)教學(xué)工作

      細(xì)致耐心的做好個(gè)別幼兒工作。按照一日活動(dòng)常規(guī)的要求,進(jìn)行教養(yǎng)活動(dòng),著重教育幼兒愛護(hù)玩具,會(huì)收拾整理玩具,學(xué)會(huì)自己洗手,學(xué)會(huì)自己愉快進(jìn)餐,愉快睡眠,自己上廁所等,培養(yǎng)幼兒養(yǎng)成良好的生活衛(wèi)生習(xí)慣。促進(jìn)了幼兒健康發(fā)展。根據(jù)季節(jié)變化,幼兒體質(zhì)差異以及戶外活動(dòng)時(shí)活動(dòng)量大小等及時(shí)給幼兒增減衣物,避免幼兒受熱或著涼。開展符合本班實(shí)際的體育游戲,訓(xùn)練幼兒基本動(dòng)作,鍛煉幼兒身體動(dòng)作的協(xié)調(diào)性,充分利用日光、空氣、水等自然因素,對(duì)幼兒進(jìn)行體格鍛煉。培養(yǎng)幼兒活潑開朗的性格,增強(qiáng)了幼兒的自信心,敢于在陌生人面前展示自己,從而使自己的交往能力得到了提高。

      環(huán)境創(chuàng)設(shè):根據(jù)本班幼兒的實(shí)際特點(diǎn)和我班開展的親子活動(dòng)進(jìn)行了環(huán)境的創(chuàng)設(shè)。比如:帶孩子到公園進(jìn)行戶外親子活動(dòng)的照片以及六一慶?;顒?dòng)的照片資料等。我們還布置了一些孩子喜歡的動(dòng)物掛飾,以及節(jié)日彩帶,氣球等。

      常規(guī)教育:托班幼兒自控力差,一日生活的自理能力還很差,因此,在常規(guī)教育中我們與幼兒家長(zhǎng)保持了一定的聯(lián)系,讓自控能力差的孩子在家中也進(jìn)行一定的常規(guī)教育,如:這學(xué)期新插入的幼兒,常有打人的情況,我們通過與家長(zhǎng)共同教育,使孩子改掉了這一壞習(xí)慣。劉諾言、婁潤(rùn)秋和簡(jiǎn)靖逸開學(xué)時(shí),愛搶別人的玩具,現(xiàn)在也有了很大的進(jìn)步。

      認(rèn)真開展主題活動(dòng)“家園共育”。結(jié)合《綱要》精神和我班幼兒的年齡特點(diǎn),我班開展了主題活動(dòng)“家園共育”,并制作了網(wǎng)絡(luò)圖,采取了家長(zhǎng)助教,幼兒生日會(huì),戶外親子活動(dòng),家園欄,每月一次家長(zhǎng)開放日等多種形式,并隨時(shí)記錄幼兒的表現(xiàn)和張貼幼兒活動(dòng)照片。讓家長(zhǎng)真正了解幼兒園,了解教師的工作,了解孩子的在園生活,更好地促進(jìn)孩子的發(fā)展。

      (三)保育工作。保育工作是幼兒園的永久之重,特別是我班幼兒年齡小,體制差,天氣變化很容易生病,對(duì)此,我們幾位老師非常重視保育工作。

      記住家長(zhǎng)的叮囑,對(duì)每個(gè)幼兒的情況牢記在心,并落實(shí)。

      對(duì)特殊幼兒細(xì)心照顧。如劉諾言,孫若馨等體質(zhì)差的幼兒在游戲之后要及時(shí)隔背,馮唯恒小朋友有疝氣,不能運(yùn)動(dòng)量太,如果肚痛就必須平著抱一會(huì),婷婷小朋友上廁所時(shí)常常容易打濕褲腳,要時(shí)時(shí)注意,發(fā)現(xiàn)濕了立即換好??.協(xié)助保健醫(yī)生做好了衛(wèi)生保健工作和預(yù)防工作,保證幼兒身體健康。為幼兒創(chuàng)設(shè)了豐富的物質(zhì)環(huán)境,清潔衛(wèi)生和生活環(huán)境。還為幼兒創(chuàng)設(shè)輕松愉快的精神環(huán)境,保證幼兒身心健康成長(zhǎng)。

      (四)家長(zhǎng)工作

      孩子年齡小,本期新生又多。家長(zhǎng)工作是非常重要的。因此,從一開學(xué),我們就向家長(zhǎng)宣傳先進(jìn)的育兒經(jīng)驗(yàn),如:孩子入園的適應(yīng)期,幼兒習(xí)慣養(yǎng)成,幼兒用藥的正確性等。通過家園聯(lián)系欄,家長(zhǎng)借閱,電話聯(lián)系,便條聯(lián)系等多種形式,讓家長(zhǎng)了解幼兒在園的情況,也讓我們了解了家長(zhǎng)的想法,使教師我家長(zhǎng)增進(jìn)了理解和友誼。

      通過開展家長(zhǎng)會(huì),家長(zhǎng)開放日,“親子”活動(dòng)等,促進(jìn)了家園之間的相互理解、支持。在教學(xué)活動(dòng)、慶?;顒?dòng)等都少不了家長(zhǎng)的支持和理解,有的家長(zhǎng)可以為孩子提供參觀的場(chǎng)所;有的家長(zhǎng)可以提供幼兒操作的材料??不論是以哪種形式的幫助都是對(duì)幼兒教育的支持和理解

      (五)安全工作 在一日保教活動(dòng)中,我班教師始終以“安全第一”為原則。因?yàn)楹⒆佑辛税踩庞薪】蛋l(fā)展。從晨間入園到離園,老師都要隨時(shí)注意幼兒的安全,并檢查幼兒活動(dòng)場(chǎng)所的安全隱患。托班幼兒有流尿現(xiàn)象,我們也同樣做到勤檢查,勤換洗,像對(duì)待自己的孩子一樣。

      三、反思和今后改進(jìn)方向

      這一學(xué)期來,我的工作中還存在著很多不足,我班幼兒的常規(guī)還不夠好,玩玩具時(shí),不夠愛惜,在收拾玩具和學(xué)具時(shí),不能主動(dòng)將其放回原處,并有隨地亂扔的現(xiàn)象。同時(shí),今后我要認(rèn)真學(xué)習(xí)新的幼兒園指導(dǎo)《綱要》將綱要的精神落實(shí)到教育教學(xué)工作中??炭嚆@研新教材.加強(qiáng)理論學(xué)習(xí),不斷提高自己的理論水平。

      第五篇:個(gè)人經(jīng)驗(yàn)總結(jié)

      個(gè)人經(jīng)驗(yàn)總結(jié)

      時(shí)間的腳步匆匆,在課改的春風(fēng)下作為新課程實(shí)施的具體操作者,面對(duì)新課程賦予我們的更寬泛更具有彈性的選擇空間。開展課程改革的目的在于讓幼兒更快樂,健康的成長(zhǎng),以下是我在一個(gè)學(xué)期實(shí)踐中的幾點(diǎn)總結(jié):

      一、政治思想方面:

      本人熱愛祖國、熱愛中國共產(chǎn)黨。做為幼兒教師能時(shí)刻關(guān)注國際形式的變化,以三個(gè)代表的思想引領(lǐng)自我,愛崗敬業(yè),遵守幼兒園的各種規(guī)章制度。能認(rèn)真的參加政治學(xué)習(xí),做好筆記,本學(xué)期主要學(xué)習(xí)了:十六屆三中全會(huì)的精神;兩會(huì)精神和《中國人民政治協(xié)商會(huì)議章程修正案》等內(nèi)容。平時(shí)能嚴(yán)格的要求自己,以師德建設(shè)年的要求時(shí)刻提醒自己,認(rèn)真的學(xué)習(xí)《中小學(xué)教師師德規(guī)范》,結(jié)合臺(tái)江區(qū)優(yōu)秀青年教師:鄭婕老師的先進(jìn)事跡鞭策自己的工作。時(shí)刻以“愛生敬業(yè)、誠實(shí)守信、服務(wù)家長(zhǎng)、奉獻(xiàn)社會(huì)”的口號(hào)嚴(yán)格要求自己。樹立高度的責(zé)任心對(duì)待幼兒園中的新的教育形式,關(guān)注每一個(gè)幼兒和幼兒的每一個(gè)細(xì)節(jié),以積極的情感態(tài)度和幼兒應(yīng)對(duì)。積極參加團(tuán)組織的活動(dòng),在活動(dòng)中能積極發(fā)表自己的意見和建議,時(shí)時(shí)以一個(gè)優(yōu)秀團(tuán)員的標(biāo)準(zhǔn)要求自己。

      二、業(yè)務(wù)工作方面

      1、加強(qiáng)班級(jí)的管理工作,創(chuàng)設(shè)與幼兒互動(dòng)的環(huán)境:

      結(jié)合大班幼兒的特點(diǎn)構(gòu)建一個(gè)安全、愉快、寬松的外部環(huán)境,讓幼兒在教師,集體面前想表現(xiàn)、敢表現(xiàn)、喜歡表現(xiàn)并能得到教師與同伴的積極應(yīng)對(duì)。在環(huán)境的創(chuàng)設(shè)上不再只是老師單方面的努力或者簡(jiǎn)單意義上幼兒的參與,而是讓幼兒出主意、參與設(shè)計(jì)、參與材料收集、布置、參與環(huán)境的管理,體現(xiàn)幼兒的思維、幼兒的發(fā)現(xiàn)、幼兒的操作、幼兒的記錄。物質(zhì)環(huán)境上,讓幼兒有豐富的操作材料進(jìn)行動(dòng)手探索,在實(shí)踐的過程中對(duì)已有的經(jīng)驗(yàn)進(jìn)行整合并獲得新經(jīng)驗(yàn)。本學(xué)年主要?jiǎng)?chuàng)設(shè)了:數(shù)學(xué)區(qū)、特色角、科學(xué)區(qū)、語言區(qū)等。在數(shù)學(xué)區(qū)中投放更多的操作材料,并提供記錄本,鼓勵(lì)幼兒將自己發(fā)現(xiàn)的記錄下來,培養(yǎng)記錄的好習(xí)慣;科學(xué)區(qū)中投放:磁性、浮沉、輕重等方面的操作材料,讓幼兒通過活動(dòng)發(fā)現(xiàn)身邊的秘密;在語言區(qū)重點(diǎn)提供拼音方面的內(nèi)容,制作了有趣的拼音樹,拼音小列車等,以游戲的形式鞏固幼兒對(duì)拼音的認(rèn)識(shí);特色區(qū)的創(chuàng)設(shè)能時(shí)刻進(jìn)行改動(dòng),根據(jù)幼兒最近繪畫的狀況,請(qǐng)幼兒自己發(fā)表怎樣布置的意見,教師再和幼兒一起動(dòng)手布置。結(jié)合安全教育創(chuàng)設(shè)安全墻飾,將幼兒的談話、繪畫內(nèi)容和教師的壁畫結(jié)合,設(shè)計(jì)更生動(dòng)的墻飾,讓環(huán)境更好的與幼兒互動(dòng)。

      最為班主任能做好班級(jí)財(cái)產(chǎn)的管理工作,按時(shí)領(lǐng)借材料,及時(shí)的歸還保管室。隨時(shí)根據(jù)主題和幼兒園要求調(diào)整班級(jí)環(huán)境和墻飾。本學(xué)期還能結(jié)合大班幼兒自尊心強(qiáng)的特點(diǎn)設(shè)計(jì)了名為“奪寶奇兵”的競(jìng)賽墻飾,改變以往單純點(diǎn)紅點(diǎn)點(diǎn)進(jìn)行表揚(yáng)的形式,采用幼兒自評(píng),一月一總評(píng)的形式。新的形式不僅調(diào)動(dòng)大班幼兒競(jìng)爭(zhēng)的積極性,也使幼兒在每月的總評(píng)后有新的開始,讓他們不會(huì)有一開始落后他人就泄氣的想法,更加努力的表現(xiàn)自己爭(zhēng)取進(jìn)步。并將每月總評(píng)的結(jié)果和幼兒成長(zhǎng)檔案上及家園聯(lián)系單上的星級(jí)寶寶評(píng)選掛鉤,使幼兒更積極的參與到其中,取得更好的效果,使家長(zhǎng)也投入到幼兒的進(jìn)中。

      2、教育教學(xué)方面

      根據(jù)開放教育理念,及幼兒全面平衡發(fā)展的理論基礎(chǔ),以挖掘幼兒潛能為教育模式的基本框架,以幼兒的經(jīng)驗(yàn)、能力、興趣、需要為出發(fā)點(diǎn),在課程統(tǒng)整化、教材生活化、教學(xué)活動(dòng)化的理念指導(dǎo)下,用主題的形式,將各領(lǐng)域的學(xué)習(xí)關(guān)聯(lián)起來,園內(nèi)園外活動(dòng)并重,使幼兒在生活中學(xué)習(xí),在與環(huán)境中人、事、物產(chǎn)生交互作用中獲取各種經(jīng)驗(yàn)而成長(zhǎng)。本學(xué)期主要開展了:一切都在變、有趣的橋、綠色家園、各式各樣的服裝、運(yùn)動(dòng)和我等活動(dòng)。我能根據(jù)主題目標(biāo)、幼兒的發(fā)展需求選擇適合的活動(dòng),在開學(xué)初制訂周計(jì)劃并每周及時(shí)調(diào)整教學(xué)內(nèi)容,嚴(yán)格按照周計(jì)劃開展活動(dòng),完成教育教學(xué)任務(wù)。在活動(dòng)中讓孩子自主地學(xué)習(xí),并對(duì)孩子的自主學(xué)習(xí)進(jìn)行了研究和實(shí)踐,努力探索孩子自主學(xué)習(xí)的所需要的條件和因素,總結(jié)教師在實(shí)踐中,促進(jìn)孩子自主學(xué)習(xí)所應(yīng)具備的教育理念和教育策略,從而切切實(shí)實(shí)地促進(jìn)孩子的自主學(xué)習(xí)能力的發(fā)展。小組教學(xué)和個(gè)別教育相結(jié)合,讓教師和幼兒、幼兒與同伴之間有更多的交流和對(duì)話。和社區(qū)對(duì)話,利用社區(qū)的環(huán)境開展活動(dòng),在本學(xué)期中利用白馬河公園開展了“我和小樹交朋友”“學(xué)習(xí)雷鋒好叔叔”的主題活動(dòng);在“綠色家園”的活動(dòng)中,我能和孩子一起動(dòng)手制作環(huán)保小標(biāo)志,并一起張貼到社區(qū)的宣傳欄中,獲得較好的反響。

      結(jié)合幼小銜接的特點(diǎn)開展數(shù)學(xué)和拼音的教育教學(xué)活動(dòng)。采用一周一競(jìng)賽了解幼兒的學(xué)習(xí)情況;一周兩教學(xué)是幼兒得到進(jìn)步。對(duì)個(gè)別能力較弱的幼兒在平時(shí)的區(qū)角活動(dòng)中進(jìn)行個(gè)別輔導(dǎo),并與個(gè)別家長(zhǎng)進(jìn)行交流,使每個(gè)孩子都得到進(jìn)步。本學(xué)期我主要負(fù)責(zé)數(shù)學(xué)方面的教育教學(xué),本班的孩子能熟練的掌握10以內(nèi)數(shù)的加減法、區(qū)分左右、認(rèn)識(shí)時(shí)鐘、根據(jù)算式編應(yīng)用題、以及10 以內(nèi)數(shù)的連加連減。在學(xué)期末我們還開展了“我要上小學(xué)”的系列主題活動(dòng),在活動(dòng)中讓幼兒了解小學(xué)、了解小學(xué)生、了解小學(xué)生的學(xué)習(xí)情況;在平時(shí)的教育教學(xué)中模仿小學(xué)上課的形式,激發(fā)幼兒做一個(gè)優(yōu)秀小學(xué)生的自豪感,樣成良好的學(xué)習(xí)習(xí)慣。

      注重幼兒品德教育,無論在教育活動(dòng)或生活活動(dòng)中,我都從細(xì)節(jié)做起,從一點(diǎn)一滴培養(yǎng)孩子的好習(xí)慣。在本學(xué)年中開展了“我是大班小朋友”“向雷峰叔叔學(xué)習(xí)”“從小愛勞動(dòng)”等主題活動(dòng)。同時(shí)還結(jié)合各種不同類型的活動(dòng)對(duì)幼兒盡心愛父母,愛家鄉(xiāng)的教育。結(jié)合安全教育活動(dòng)和季節(jié)的變化對(duì)幼兒進(jìn)行健康教育,還更加重視“關(guān)心他人”情感的培養(yǎng),培養(yǎng)幼兒從小愛他人、關(guān)心他人、關(guān)心社會(huì)的良好情感。

      3、愛的承諾方面

      (1)平時(shí)能作到熱愛學(xué)生,衣著整潔得體,語言規(guī)范健康,舉止文明禮貌,注重自身的語言和談吐,以優(yōu)美大方的形象帶給幼兒美好的體驗(yàn)。輕聲細(xì)語的和孩子交流。結(jié)合主題活動(dòng),采取討論的方式,和孩子共同制定班級(jí)常規(guī)。督促、提醒幼兒按討論過的常規(guī)活動(dòng),提高幼兒的自省能力,建立以幼兒為中心的自律班級(jí)常規(guī)。培養(yǎng)良好的傾聽和舉手回答問題的好習(xí)慣。

      (2)及時(shí)的撰寫每月愛的承諾,根據(jù)家長(zhǎng)的意見提出新的希望和要求。

      (3)認(rèn)真制定幼兒成長(zhǎng)檔案、社區(qū)成長(zhǎng)檔案和個(gè)人成長(zhǎng)檔案,能每月按時(shí)的增添新開展的內(nèi)容,及時(shí)拍照記錄,給幼兒的成長(zhǎng)、自身的成長(zhǎng)留下痕跡。豐富幼兒成長(zhǎng)檔案的內(nèi)容,改變以往單純以幼兒繪畫作品為主的形式,收集幼兒繪畫、手工、數(shù)學(xué)、拼音、談話、記錄等多種活動(dòng)痕跡,并結(jié)合幼兒每月一評(píng)分發(fā)“小紅花”豐富幼兒成長(zhǎng)檔案內(nèi)容。還能利用問卷調(diào)查、小表格等形式讓家長(zhǎng)也參與到幼兒檔案的制作中。在社區(qū)成長(zhǎng)檔案中制作班級(jí)主頁,除了能介紹最近開展的活動(dòng)外,還能根據(jù)家長(zhǎng)的疑難給予解答,根據(jù)季節(jié)和實(shí)際情況的需要增添家教文章,如《幼兒心理健康的調(diào)查》《幼兒入小學(xué)注意》等;還能請(qǐng)個(gè)別家長(zhǎng)撰寫家教文章,向其余家長(zhǎng)介紹自己的家教經(jīng)驗(yàn)。認(rèn)真的對(duì)待教師個(gè)人成長(zhǎng)檔案,每月及時(shí)反思,增添自己的學(xué)習(xí)心得和體會(huì),制作個(gè)人主頁,使成長(zhǎng)檔案更豐富。

      (4)注意培養(yǎng)幼兒良好的生活習(xí)慣,如正確的睡姿、坐姿、站姿等,引導(dǎo)幼兒學(xué)會(huì)解決同伴間的小糾紛。教幼兒了解自我保護(hù)的常識(shí)和行為,如用眼衛(wèi)生和換牙的注意事項(xiàng)等。根據(jù)天氣的變化,提醒幼兒及時(shí)的穿脫衣物,多飲水。對(duì)個(gè)別體弱的孩子格外關(guān)心。

      4、特色教學(xué)方面

      認(rèn)真的開展特色教育,在開學(xué)初制定好教學(xué)進(jìn)度,畫好所有范圖,每周五按時(shí)開展活動(dòng)。在活動(dòng)中更加重視用筆和用墨的講解和示范,使每個(gè)孩子都能較好的發(fā)展。注意個(gè)別幼兒的指導(dǎo),糾正其不正確的用筆姿勢(shì)。注意對(duì)幼兒作品的講評(píng),請(qǐng)幼兒自己觀察發(fā)現(xiàn)優(yōu)秀的作品,對(duì)有進(jìn)步的孩子及時(shí)的表揚(yáng)。將每次的幼兒作品進(jìn)行展示,并請(qǐng)家長(zhǎng)提出自己的意見和建議,及時(shí)的修改我們的教學(xué)。在期末布置幼兒特色展示區(qū),將幼兒一學(xué)期以來的作品分別展示,讓家長(zhǎng)縱向比較了解孩子的進(jìn)步。在期末撰寫特色教育心得《教水墨畫有感》。制作特色教育袋,整理特色教育的教材、范圖、文章等內(nèi)容,為今后開展活動(dòng)做好準(zhǔn)備。

      5、其他方面

      (1)能認(rèn)真的開展年段長(zhǎng)工作,帶領(lǐng)年段教師開展教研和教育教學(xué)工作。在每次的教研活動(dòng)中帶頭發(fā)表意見,總結(jié)年段教師的意見并進(jìn)行交流。本學(xué)期與年段教師配合開展了年段班級(jí)家長(zhǎng)會(huì)、家長(zhǎng)開放日、六一海報(bào)的設(shè)計(jì)、六一游園活動(dòng)、安全教育活動(dòng)、畢業(yè)典禮等活動(dòng)。

      (2)本學(xué)期繼續(xù)擔(dān)任林張艷老師的指導(dǎo)教師,本學(xué)期主要對(duì)藝術(shù)教育教學(xué)方面的進(jìn)行指導(dǎo)幫助。本學(xué)期在業(yè)務(wù)園長(zhǎng)的帶領(lǐng)下,開示范課:《歌曲——勤快人和懶惰人》、《繪畫——我喜歡的橋》《繪畫——海底的故事》,效果良好。年輕教師林張艷的匯報(bào)課也有很大的進(jìn)步。

      (3)本學(xué)期能認(rèn)真對(duì)待幼兒園里的各項(xiàng)任務(wù),在教師技能技巧比賽中獲演講二等獎(jiǎng)、繪畫三等獎(jiǎng)、歌唱?dú)g樂獎(jiǎng)的好成績(jī)。指導(dǎo)幼兒鄭婧儀獲市科協(xié)科幻畫比賽一等獎(jiǎng),薛鑫儀獲二等獎(jiǎng)。薛鑫怡、張鈺、詹妍、吳心悅、周仲卿分獲幼兒園“愛媽媽”繪畫比賽一二三等獎(jiǎng);薛鑫怡、林君藝、謝軒武獲幼兒園“元宵花燈制作比賽”一二三等獎(jiǎng)。

      (4)本學(xué)期還能根據(jù)幼兒的發(fā)展選擇科研的課題,從幼兒和教師的互動(dòng)關(guān)系入手進(jìn)行調(diào)查研究,撰寫了論文《教師在教育過程中與幼兒互動(dòng)關(guān)系的研究》。

      三、做好家長(zhǎng)工作——家園合作、同向同步

      1、利用家園聯(lián)系單向家長(zhǎng)介紹幼兒每月的情況,及時(shí)的了解幼兒在家在園的情況,家園同步的開展教育教學(xué)工作。

      2、本學(xué)期我們能認(rèn)真的制作幼兒成長(zhǎng)檔案和社區(qū)成長(zhǎng)檔案,家長(zhǎng)一起參與到制作的過程中,讓他們更深刻的體驗(yàn)幼兒園教育的特殊性和趣味性,更家了解自己的孩子的發(fā)展?fàn)顩r。

      3、通過及時(shí)更換家教之窗的家教知識(shí),向家長(zhǎng)宣傳科學(xué)的育兒知識(shí)。本學(xué)期還承擔(dān)了園社區(qū)宣傳欄5月份設(shè)計(jì)工作,能根據(jù)幼兒園的動(dòng)向和家長(zhǎng)的需要制作有效的宣傳欄,為家長(zhǎng)提供幫助,得到家長(zhǎng)的好評(píng)。

      4、按時(shí)召開班級(jí)家長(zhǎng)會(huì)和家委會(huì),做好記錄,能根據(jù)家長(zhǎng)的意見和建議調(diào)整具體工作。在家委會(huì)的支持下開展好各種家長(zhǎng)開放活動(dòng),如:家長(zhǎng)開放日、六一游園活動(dòng)等。

      總之在這一年里我的工作取得了一定的成績(jī),但仍然存在許多的不足,如性格比較急,個(gè)別的家長(zhǎng)也對(duì)我提出了意見和建議,在今后的工作中我會(huì)在反思中不斷的改進(jìn)自己提高自己。

      胡天慧

      2013年7月6日

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