第一篇：紫外—可見分光光度法教案

第五章

紫外—可見分光光度法

一．教學內(nèi)容

1． 紫外－可見吸收光譜的產(chǎn)生（分子的能級及光譜、有機物及無機物電子能級躍遷的類型和特點）2． 吸收定律及其發(fā)射偏差的原因

3． 儀器類型、各部件的結(jié)構(gòu)、性能以及儀器的校正 4． 分析條件的選擇

5． 應用（定性及結(jié)構(gòu)分析、定量分析的各種方法、物理化學常數(shù)的測定及其它方面的應用

二．重點與難點

1． 比較有機化合物和無機化合物各種電子躍遷類型所產(chǎn)生吸收帶的特點及應用價值

2． 進行化合物的定性分析、結(jié)構(gòu)判斷

3． 定量分析的新技術（雙波長法、導數(shù)光譜法、動力學分析法）4． 物理化學常數(shù)的測定

三．教學要求

1． 較為系統(tǒng)、深入地掌握各種電子躍遷所產(chǎn)生的吸收帶及其特征、應用 2． 熟練掌握吸收定律的應用及測量條件的選擇 3． 較為熟練儀器的類型、各組件的工作原理 4． 運用各種類型光譜及的經(jīng)驗規(guī)則，判斷不同的化合物

5． 掌握定量分析及測定物理化學常數(shù)的常見基本方法 6． 一般掌握某些新的分析技術

四．學時安排

5學時

研究物質(zhì)在 紫外、可見光區(qū) 的分子吸收光譜 的分析方法稱為紫外-可見分光光度法。紫外—可見分光光度法是利用某些物質(zhì)的 1 分子吸收200 ~ 800 nm光譜區(qū)的輻射來進行分析測定的方法。這種分子吸收光譜產(chǎn)生于價電子和分子軌道上的電子 在電子能級間的躍遷，廣泛用于無機和有機物質(zhì)的定性和定量測定。

第一節(jié)

紫外—可見吸收光譜

一、分子吸收光譜的產(chǎn)生

在分子中，除了電子相對于原子核的運動外，還有核間相對位移引起的振動和轉(zhuǎn)動。這三種運動能量都是量子化的，并對應有一定能級。在每一電子能級上有許多間距較小的振動能級，在每一振動能級上又有許多更小的轉(zhuǎn)動能級。

若用△E電子、△ E振動、△ E轉(zhuǎn)動分別表示電子能級、振動能級轉(zhuǎn)動能級差，即有△ E電子? △ E振動? △ E轉(zhuǎn)動。處在同一電子能級的分子，可能因其振動能量不同，而處在不同的振動能級上。當分子處在同一電子能級和同一振動能級時，它的能量還會因轉(zhuǎn)動能量不同，而處在不同的轉(zhuǎn)動能級上。所以分子的總能量可以認為是這三種能量的總和：

E分子 = E電子

+ E振動

+ E轉(zhuǎn)動

當用頻率為?的電磁波照射分子，而該分子的較高能級與較低能級之差△ E恰好等于該電磁波的能量 h?時，即有

△ E

= h?

（h為普朗克常數(shù)）

此時，在微觀上出現(xiàn)分子由較低的能級躍遷到較高的能級；在宏觀上則透射光的強度變小。若用一連續(xù)輻射的電磁波照射分子，將照射前后光強度的變化轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?，并記錄下來，然后以波長為橫坐標，以電信號（吸光度 A）為縱坐標，就可以得到一張光強度變化對波長的關系曲線圖——分子吸收光譜圖。

二、分子吸收光譜類型

根據(jù)吸收電磁波的范圍不同，可將分子吸收光譜分為遠紅外光譜、紅外光譜及紫外、可見光譜三類。

分子的轉(zhuǎn)動能級差一般在0.005 ~ 0.05eV。產(chǎn)生此能級的躍遷，需吸收波長約為250 ~ 25?m的遠紅外光，因此，形成的光譜稱為轉(zhuǎn)動光譜或遠紅外光譜。

分子的振動能級差一般在0.05 ~ 1 eV，需吸收波長約為25 ~ 1.25?m的紅外光才能產(chǎn)生躍遷。在分子振動時同時有分子的轉(zhuǎn)動運動。這樣，分子振動產(chǎn)生的吸收光譜中，包括轉(zhuǎn)動光譜，故常稱為振-轉(zhuǎn)光譜。由于它吸收的能量處于紅外光區(qū)，故又稱紅外光譜。電子的躍遷能差約為1 ~ 20 eV，比分子振動能級差要大幾十倍，所吸收光的波長約為12.5 ~ 0.06?m，主要在真空紫外到可見光區(qū)，對應形成的光譜，稱為電子光譜或紫外、可見吸收光譜。

通常，分子是處在基態(tài)振動能級上。當用紫外、可見光照射分子時，電子可以從基態(tài)激發(fā)到激發(fā)態(tài)的任一振動（或不同的轉(zhuǎn)動）能級上。因此，電子能級躍遷產(chǎn)生的吸收光譜，包括了大量譜線，并由于這些譜線的重疊而成為連續(xù)的吸收帶，這就是為什么分子的紫外、可見光譜不是線狀光譜，而是帶狀光譜的原因。又因為絕 大多數(shù)的分子光譜分析，都是用液體樣品，加之儀器的分辨率有限，因而使記錄所得電子光譜的譜帶變寬。

由于氧、氮、二氧化碳、水等在真空紫外區(qū)（60 ~ 200 nm）均有吸收，因此在測定這一范圍的光譜時，必須將光學系統(tǒng)抽成真空，然后充以一些惰性氣體，如氦、氖、氬等。鑒于真空紫外吸收光譜的研究需要昂貴的真空紫外分光光度計，故在實際應用中受到一定的限制。我們通常所說的紫外—可見分光光度法，實際上是指近紫外、可見分光光度法。

第二節(jié)

化合物紫外—可見光譜的產(chǎn)生

在紫外和可見光譜區(qū)范圍內(nèi)，有機化合物的吸收帶主要由???*、???*、n??*、n??*及電荷遷移躍遷產(chǎn)生。無機化合物的 3 吸收帶主要由電荷遷移和配位場躍遷（即d—d躍遷和f—f躍遷）產(chǎn)生.由于電子躍遷的類型不同，實現(xiàn)躍遷需要的能量不同，因此吸收光的波長范圍也不相同。其中???*躍遷所需能量最大，n??*及配位場躍遷所需能量最小，因此，它們的吸收帶分別落在遠紫外和可見光區(qū)。從圖中 可知，???*（電荷遷移）躍遷產(chǎn)生的譜帶強度最大，???*、n??*、n??*躍遷產(chǎn)生的譜帶強度次之，（配位躍遷的譜帶強度最?。?/p>

一、有機化合物的紫外—可見吸收光譜

（一）、躍遷類型

基態(tài)有機化合物的價電子包括成鍵?電子、成鍵?電子和非鍵電子（以 n表示）。分子的空軌道包括反鍵 ?*軌道和反鍵?*軌道，因此，可能的躍遷為???*、???*、n??* n??*等。

1，???*躍遷

它需要的能量較高，一般發(fā)生在真空紫外光區(qū)。飽和烴中的—c—c—鍵屬于這類躍遷，例如乙烷的最大吸收波長?max為135nm。

2，n??*躍遷

實現(xiàn)這類躍遷所需要的能量較高，其吸收光譜落于遠紫外光區(qū)和近紫外光區(qū)，如CH3OH和CH3NH2的n??*躍遷光譜分別為183nm和213nm。

3，???*躍遷

它需要的能量低于???*躍遷，吸收峰一般 處于近紫外光區(qū)，在200 nm左右，其特征是摩爾吸光系數(shù)大，一般?max?104，為強吸收帶。如乙烯（蒸氣）的最大吸收波長?max為162 nm。

4，n??*躍遷

這類躍遷發(fā)生在近紫外光區(qū)。它是簡單的生色團如羰基、硝基等中的孤對電子向反鍵軌道躍遷。其特點是譜帶強度弱，摩爾吸光系數(shù)小，通常小于100，屬于禁阻躍遷。

5，電荷遷移躍遷

所謂電荷遷移躍遷是指用電磁輻射照射化合物時，電子從給予體向與接受體相聯(lián)系的軌道上躍遷。因此，電荷遷移躍遷實質(zhì)是一個內(nèi)氧化—還原的過程，而相應的吸收光譜稱為電荷遷移吸收光譜。例如某些取代芳烴可產(chǎn)生這種分子內(nèi)電荷遷移躍遷吸收帶。

電荷遷移吸收帶的譜帶較寬，吸收強度較大，最大波長處的摩爾吸光系數(shù)?max可大于104。

（二）、常用術語 1，生色團

從廣義來說，所謂生色團，是指分子中可以吸收光子而產(chǎn)生電子躍遷的原子基團。但是，人們通常將能吸收紫外、可見光的原子團或結(jié)構(gòu)系統(tǒng)定義為生色團。

2，助色團

助色團是指帶有非鍵電子對的基團，如-OH、-OR、-NHR、-SH、-Cl、-Br、-I等，它們本身不能吸收大于200nm的光，但是當它們與生色團相連時，會使生色團的吸收峰向長波方向移動，并且增加其吸光度。

3，紅移與藍移（紫移）

某些有機化合物經(jīng)取代反應引入含有未共享電子對的基團（-OH、-OR、-NH2、-SH、-Cl、-Br、-SR、-NR2）之后，吸收峰的波長將向長波方向移動，這種效應稱為紅移效應。這種會 使某化合物的最大吸收波長向長波方向移動的基團稱為向紅基團。

在某些生色團如羰基的碳原子一端引入一些取代基之后，吸收峰的波長會向短波方向移動，這種效應稱為藍移（紫移）效應。這些會使某化合物的最大吸收波長向短波方向移動的基團（如-CH2、-CH2CH3、-OCOCH3）稱為向藍（紫）基團。(三)有機化合物紫外-可見吸收光譜 1，飽和烴及其取代衍生物

飽和烴類分子中只含有?鍵，因此只能產(chǎn)生???*躍遷，即?電子從成鍵軌道（?）躍遷到反鍵軌道（? *）。飽和烴的最大吸收峰一般小于150nm，已超出紫外、可見分光光度計的測量范圍。

飽和烴的取代衍生物如鹵代烴，其鹵素原子上存在n電子，可產(chǎn)生n??* 的躍遷。n??* 的能量低于???*。例如，CH3Cl、CH3Br和CH3I的n??* 躍遷分別出現(xiàn)在173、204和258nm處。這些數(shù)據(jù)不僅說明氯、溴和碘原子引入甲烷后，其相應的吸收波長發(fā)生了紅移，顯示了助色團的助色作用。直接用烷烴和鹵代烴的紫外吸收光譜分析這些化合物的實用價值不大。但是它們是測定紫外和（或）可見吸收光譜的良好溶劑。2，不飽和烴及共軛烯烴

在不飽和烴類分子中，除含有?鍵外，還含有?鍵，它們可以產(chǎn)生???*和???*兩種躍遷。???*躍遷的能量小于 ???*躍遷。例如，在乙烯分子中，???*躍遷最大吸收波長為180nm

在不飽和烴類分子中，當有兩個以上的雙鍵共軛時，隨著共軛系統(tǒng)的延長，???*躍遷的吸收帶 將明顯向長波方向移動，吸收強度也隨之增強。在共軛體系中，???*躍遷產(chǎn)生的吸收帶又稱為K帶。

3，羰基化合物

羰基化合物含有?C=O基團。?C=O基團主要可產(chǎn)生???*、n??*、n??*三個吸收帶，n??*吸收帶又稱R帶，落于近紫外或紫外光區(qū)。醛、酮、羧酸及羧酸的衍生物，如酯、酰胺等，都含有 羰基。由于醛酮這類物質(zhì)與羧酸及羧酸的衍生物在結(jié)構(gòu)上的差異，因此它們n??*吸收帶的光區(qū)稍有不同。

羧酸及羧酸的衍生物雖然也有n??*吸收帶，但是，羧酸及羧酸的衍生物的羰基上的碳原子直接連結(jié)含有未共用電子對的助色團，如-OH、-Cl、-OR等，由于這些助色團上的n電子與羰基雙鍵的?電子產(chǎn)生n??共軛，導致?*軌道的能級有所提高，但這種共軛作用并不能改變n軌道的能級，因此實現(xiàn)n??* 躍遷所需的能量變大，使n??*吸收帶藍移至210nm左右。4，苯及其衍生物

苯有三個吸收帶，它們都是由???*躍遷引起的。E1帶出現(xiàn)在180nm（?MAX = 60，000）； E2帶出現(xiàn)在204nm（?MAX = 8，000）；B帶出現(xiàn)在255nm（?MAX = 200）。在氣態(tài)或非極性溶劑中，苯及其許多同系物的B譜帶有許多的精細結(jié)構(gòu)，這是由于振動躍遷在基態(tài)電子上的躍遷上的疊加而引起的。在極性溶劑中，這些精細結(jié)構(gòu)消失。當苯環(huán)上有取代基時，苯的三個特征譜帶都會發(fā)生顯著的變化，其中影響較大的是E2帶和B譜帶。5，稠環(huán)芳烴及雜環(huán)化合物

稠環(huán)芳烴，如奈、蒽、芘等，均顯示苯的三個吸收帶，但是與苯本身相比較，這三個吸收帶均發(fā)生紅移，且強度增加。隨著苯環(huán)數(shù)目的增多，吸收波長紅移越多，吸收強度也相應增加。

當芳環(huán)上的-CH基團被氮原子取代后，則相應的氮雜環(huán)化合物（如吡啶、喹啉）的吸收光譜，與相應的碳化合物極為相似，即吡啶與苯相似，喹啉與奈相似。此外，由于引入含有n電子的N原子的，這類雜環(huán)化合物還可能產(chǎn)生n??*吸收帶。

二、無機化合物的紫外-可見吸收光譜

產(chǎn)生無機化合物紫外、可見吸收光譜的電子躍遷形式，一般分為兩大類：電荷遷移躍遷和配位場躍遷。

（一）電荷遷移躍遷

無機配合物有電荷遷移躍遷產(chǎn)生的電荷遷移吸收光譜。

在配合物的中心離子和配位體中，當一個電子由配體的軌道躍遷到與中心離子相關的軌道上時，可產(chǎn)生電荷遷移吸收光譜。

不少過度金屬離子與含生色團的試劑反應所生成的配合物以及許多水合無機離子，均可產(chǎn)生電荷遷移躍遷。

此外，一些具有d10電子結(jié)構(gòu)的過度元素形成的鹵化物及硫化物，如AgBr、HgS等，也是由于這類躍遷而產(chǎn)生顏色。

電荷遷移吸收光譜出現(xiàn)的波長位置，取決于電子給予體和電子接受體相應電子軌道的能量差。

（二）配位場躍遷

配位場躍遷包括df

躍遷。元素周期表中第四、五周期的過度金屬元素分別含有3d和4d軌道，鑭系和錒系元素分別含有4f和5f軌道。在配體的存在下，過度元素五 個能量相等的d軌道和鑭系元素七個能量相等的f軌道分別分裂成幾組能量不等的d軌道和f軌道。當它們的離子吸收光能后，低能態(tài)的d電子或f電子可以分別躍遷至高能態(tài)的d或f軌道，這兩類躍遷分別稱為df

躍遷。由于這兩類躍遷必須在配體的配位場作用下才可能發(fā)生，因此又稱為配位場躍遷。

三、溶劑對紫外、可見吸收光譜的影響

溶劑對紫外—可見光譜的影響較為復雜。改變?nèi)軇┑臉O性，會引起吸收帶形狀的變化。例如，當溶劑的極性由非極性改變到極性時，精細結(jié)構(gòu)消失，吸收帶變向平滑。

改變?nèi)軇┑臉O性，還會使吸收帶的最大吸收波長發(fā)生變化。下表為溶劑對亞異丙酮紫外吸收光譜的影響。

正己烷

CHClCH3OH

H2O ???* ?max/nm

230

238

237

243

n ??*?max/nm

329

315

309

305

由上表可以看出，當溶劑的極性增大時，由n ??* 躍遷產(chǎn)生的吸收帶發(fā)生藍移，而由???* 躍遷產(chǎn)生的吸收帶發(fā)生紅移。因此，在測定紫外、可見吸收光譜時，應注明在何種溶劑中測定。

由于溶劑對電子光譜圖影響很大，因此，在吸收光譜圖上或數(shù)據(jù)表中必須注明所用的溶劑。與已知化合物紫外光譜作對照時也應注明所用的溶劑是否相同。在進行紫外光譜法分析時，必須正確選擇溶劑。選擇溶劑時注意下列幾點：

（1）溶劑應能很好地溶解被測試樣，溶劑對溶質(zhì)應該是惰性的。即所成溶液應具有良好的化學和光化學穩(wěn)定性。

（2）在溶解度允許的范圍內(nèi)，盡量選擇極性較小的溶劑。（3）溶劑在樣品的吸收光譜區(qū)應無明顯吸收。

第三節(jié)

紫外-可見分光光度計

一、組成部件

紫外-可見分光光度計的基本結(jié)構(gòu)是由五個部分組成：即光源、單色器、吸收池、檢測器和信號指示系統(tǒng)。

（一）光源

對光源的基本要求是應在儀器操作所需的光譜區(qū)域內(nèi)能夠發(fā)射連續(xù)輻射，有足夠的輻射強度和良好的穩(wěn)定性，而且輻射能量隨波長的變化應盡可能小。

分光光度計中常用的光源有熱輻射光源和氣體放電光源兩類。

熱輻射光源用于可見光區(qū)，如鎢絲燈和鹵鎢燈；氣體放電光源用于紫外光區(qū)，如氫燈和氘燈。鎢燈和碘鎢燈可使用的范圍在340 ~ 2500nm。這類光源的輻射能量與施加的外加電壓有關，在可見光 9 區(qū)，輻射的能量與工作電壓4次方成正比。光電流與燈絲電壓的n次方（n?1）成正比。因此必須嚴格控制燈絲電壓，儀器必須配有穩(wěn)壓裝置。

在近紫外區(qū)測定時常用氫燈和氘燈。它們可在160 ~ 375 nm范圍內(nèi)產(chǎn)生連續(xù)光源。氘燈的燈管內(nèi)充有氫的同位素氘，它是紫外光區(qū)應用最廣泛的一種光源，其光譜分布與氫燈類似，但光強度比相同功率的氫燈要大3~5倍。

（二）單色器

單色器是能從光源輻射的復合光中分出單色光的光學裝置，其主要功能：產(chǎn)生光譜純度高的波長且波長在紫外可見區(qū)域內(nèi)任意可調(diào)。

單色器一般由入射狹縫、準光器（透鏡或凹面反射鏡使入射光成平行光）、色散元件、聚焦元件和出射狹縫等幾部分組成。其核心部分是色散元件，起分光的作用。單色器的性能直接影響入射光的單色性，從而也影響到測定的靈敏度度、選擇性及校準曲線的線性關系等。

能起分光作用的色散元件主要是棱鏡和光柵。

棱鏡有玻璃和石英兩種材料。它們的色散原理是依據(jù)不同的波長光通過棱鏡時有不同的折射率而將不同波長的光分開。由于玻璃可吸收紫外光，所以玻璃棱鏡只能用于350 ~ 3200 nm的波長范圍，即只能用于可見光域內(nèi)。石英棱鏡可使用的波長范圍較寬，可從185 ~ 4000nm，即可用于紫外、可見和近紅外三 個光域。

光柵是利用光的衍射與干涉作用制成的，它可用于紫外、可見及紅外光域，而且在整個波長區(qū)具有良好的、幾乎均勻一致的分辨能力。它具有色散波長范圍寬、分辨本領高、成本低、便于保存和易于制備等優(yōu)點。缺點是各級光譜會重疊而產(chǎn)生干擾。入射、出射狹縫，透鏡及準光鏡等光學元件中狹縫在決定單色器性能上起重要作用。狹縫的大小直接影響單色光純度，但過小的狹縫又會減弱 光強。

（三）吸收池

吸收池用于盛放分析試樣，一般有石英和玻璃材料兩種。石英池適用于可見光區(qū)及紫外光區(qū)，玻璃吸收池只能用于可見光區(qū)。為減少光的損失，吸收池的光學面必須完全垂直于光束方向。在高精度的分析測定中（紫外區(qū)尤其重要），吸收池要挑選配對。因為吸收池材料的本身吸光特征以及吸收池的光程長度的精度等對分析結(jié)果都有影響。

（四）檢測器

檢測器的功能是檢測信號、測量單色光透過溶液后光強度變化的一種裝置。

常用的檢測器有光電池、光電管和光電倍增管等。

硒光電池對光的敏感范圍為300~800nm，其中又以500 ~ 600nm最為靈敏。這種光電池的特點是能產(chǎn)生可直接推動微安表或檢流計的光電流，但由于容易出現(xiàn)疲勞效應而只能用于低檔的分光光度計中。

光電管在紫外-可見分光光度計上應用較為廣泛。

光電倍增管是檢測微弱光最常用的光電元件，它的靈敏度比一般的光電管要高200倍，因此可使用較窄的單色器狹縫，從而對光譜的精細結(jié)構(gòu)有較好的分辨能力。

（五）信號指示系統(tǒng)

它的作用是放大信號并以適當方式指示或記錄下來。常用的信號指示裝置有直讀檢流計、電位調(diào)節(jié)指零裝置以及數(shù)字顯示或自動記錄裝置等。很多型號的分光光度計裝配有微處理機，一方面可對分光光度計進行操作控制，另一方面可進行數(shù)據(jù)處理。

二、紫外-可見分光光度計的類型

紫外-可見分光光度計的類型很多，但可歸納為三種類型，即單光束分光光度計、雙光束分光光度計和雙波長分光光度計。1，單光束分光光度計

經(jīng)單色器分光后的一束平行光，輪流通過參比溶液和樣品溶液，以進行吸光度的測定。這種簡易型分光光度計結(jié)構(gòu)簡單，操作方便，維修容易，適用于常規(guī)分析。2，雙光束分光光度計

經(jīng)單色器分光后經(jīng)反射鏡分解為強度相等的兩束光，一束通過參比池，一束通過樣品池。光度計能自動比較兩束光的強度，此比值即為試樣的透射比，經(jīng)對數(shù)變換將它轉(zhuǎn)換成吸光度并作為波長的函數(shù)記錄下來。

雙光束分光光度計一般都能自動記錄吸收光譜曲線。由于兩束光同時分別通過參比池和樣品池，還能自動消除光源強度變化所引起的誤差。

3，雙波長分光光度計

由同一光源發(fā)出的光被分成兩束，分別經(jīng)過兩個單色器，得到兩束不同波長（?1和?2）的單色光；利用切光器使兩束光以一定的頻率交替照射同一吸收池，然后經(jīng)過光電倍增管和電子控制系統(tǒng)，最后由顯示器顯示出兩個波長處的吸光度差值ΔA（ΔA=A?1-A?2）。對于多組分混合物、混濁試樣（如生物組織液）分析，以及存在背景干擾或共存組分吸收干擾的情況下，利用雙波長分光光度法，往往能提高方法的靈敏度和選擇性。利用雙波長分光光度計，能獲得導數(shù)光譜。

通過光學系統(tǒng)轉(zhuǎn)換，使雙波長分光光度計能很方便地轉(zhuǎn)化為單波長工作方式。如果能在?1和?2處分別記錄吸光度隨時間變化的曲線，還能進行化學反應動力學研究。

三、分光光度計的校正

通常在實驗室工作中，驗收新儀器或?qū)嶒炇沂褂眠^一段時間后都要進行波長校正和吸光度校正。

建議采用下述的較為簡便和實用的方法來進行校正：鐠銣玻 璃或鈥玻璃都有若干特征的吸收峰，可用來校正分光光度計的波長標尺，前者用于可見光區(qū)，后者則對紫外和可見光區(qū)都適用。也可用K2CrO4標準溶液來校正吸光度標度。

定性分析

紫外－可見分光光度法是一種廣泛應用的定量分析方法，也是 對物質(zhì)進行定性分析和結(jié)構(gòu)分析的一種手段，同時還可以測定某些 化合物的物理化學參數(shù)，例如摩爾質(zhì)量、配合物的配合比和穩(wěn)定常 數(shù)、以及酸、堿的離解常數(shù)等。

紫外－可見分光光度法在無機元素的定性分析應用方面 是比較少的，無機元素的定性分析主要用原子發(fā)射光譜法或化學分 析法。在有機化合物的定性分析鑒定及結(jié)構(gòu)分析方面，由于紫外－ 可見光譜較為簡單，光譜信息少，特征性不強，而且不少簡單官能 團在近紫外及可見光區(qū)沒有吸收或吸收很弱，因此，這種方法的應 用有較大的局限性。但是它適用于不飽和有機化合物，尤其是共軛體系的鑒定，以此推斷未知物的骨架結(jié)構(gòu)。此外，它可配合紅 外光譜法、核磁共振波譜法和質(zhì)譜法等常用的結(jié)構(gòu)分析法進行定量 鑒定和結(jié)構(gòu)分析，是不失為一種有用的輔助方法。一般定性分析方 法有如下兩種：

1.比較吸收光譜曲線法

吸收光譜的形狀、吸收峰的數(shù)目和位置及相應的摩爾吸 光系數(shù)，是定性分析的光譜依據(jù)，而最大吸收波長

及相應的是定性分析的最主要參數(shù)。比較法有標準物質(zhì)比較法和標準譜圖比 較法兩種。

利用標準物質(zhì)比較，在相同的測量條件下，測定和比較未知物 13 與已知標準物的吸收光譜曲線，如果兩者的光譜完全一致，則可以初步認為它們是同一化合物。為了能使分析更準確可靠，要注意如下幾點：

一、是盡量保持光譜的精細結(jié)構(gòu)。為此，應采用與吸收物質(zhì)作用力小的非極性溶劑，且采用窄的光譜通帶；

二、是吸收光譜采用不同，則曲線只是沿

對

作圖。這樣如果未知物與標準物的濃度

曲線那樣以的比

軸平移，而不是象例移動，更便于比較分析。

三、是往往還需要用其它方法進行證實，如紅外光譜等。利用標準譜圖或光譜數(shù)據(jù)比較。常用的標準譜圖有以下表中的四種：

[1] Sadtler Standard Spectra(Ultraviolet),Heyden,London,1978.薩特勒標準圖譜共收集了46000種化合物的紫外光譜。

[2] R.A.Friedel and M.Orchin,“Ultraviolet and Visible Absorption Spectra of Aromatic Compounds”,Wiley,New York, 1951.本書收集了597種芳香化合物的紫外光譜。

[3] Kenzo Hirayama：“Handbook of Ultraviolet and Visible Absorption Spectra a of Organic Compounds.”,New York,Plenum,1967。

[4] “Organic Electronic Spectral Data”。

2.計算不飽和有機化合物最大吸收波長的經(jīng)驗規(guī)則

有伍德沃德（Woodward）規(guī)則和斯科特（Scott）規(guī)則。

當采用其它物理或化學方法推測未知化合物有幾種可能結(jié)構(gòu)后，可用經(jīng)驗規(guī)則計算它們最大吸收波長，然后再與實測值進行比較，以確認物質(zhì)的結(jié)構(gòu)。

伍德沃德規(guī)則

它是計算共軛二烯、多烯烴及共軛烯酮類化合物π—π*躍遷最大吸收波長的經(jīng)驗規(guī)則，如表13.7和表13.9所示。計算時，先從未知物的母體對照表得到一個最大吸收的基數(shù)，然后對連接在母體中π電子體系(即共軛體系)上的各種取代基以及其他結(jié)構(gòu)因素按上所列的數(shù)值加以修正，得到該化合物的最大吸收波長

。

結(jié)構(gòu)分析

紫外－可見分光光度法可以進行化合物某些基因的判別、共軛體系及構(gòu)型、構(gòu)象的判斷。

1.某些特征集團的判別

有機物的不少基團(生色團)，如羰基、苯環(huán)、硝基、共軛體系等，都有其特征的

紫外或可見吸收帶，紫外－可見分光光度法在判別這些基團時，有時是十分有用的。如在270～300nm處有弱的吸收帶，且隨溶劑極性增大而發(fā)生藍移，就是羰基n－π*躍遷所產(chǎn)生R吸收帶的有力證據(jù)。在184nm附近有強吸收帶(E1帶)，在204nm附近有中強吸收帶(E2帶)，在260nm附近有弱吸收帶且有精細結(jié)構(gòu)(B帶)，是苯環(huán)的特征吸收，等等。可以從有關資料中查找某些基團的特征吸收帶。

2.共軛體系的判斷

共軛體系會產(chǎn)生很強的K吸收帶，通過繪制吸收光譜，可以判斷化合物是否存在共軛體系或共軛的程度。如果一化合物在210nm以上無強吸收帶，可以認為該化合物不存在共軛體系；若在215～250nm區(qū)域有強吸收帶，則該化合物可能有兩至三個雙鍵的共軛體系，如1－3丁二烯，為217nm，為21,000；若260～350nm 15 區(qū)域有很強的吸收帶，則可能有三至五個雙鍵的共軛體系，如癸五烯有五個共軛雙鍵，3.異構(gòu)體的判斷

包括順反異構(gòu)及互變異構(gòu)兩種情況的判斷。

順反異構(gòu)體的判斷

生色團和助色團處在同一平面上時，才產(chǎn)生最大的共軛效應。由于反式異構(gòu)體的空間位阻效應小，分子的平面性能較好，共軛效應強。因此，及都大于順式異構(gòu)體。例如，肉桂酸的順、反式的吸收如下：

為335nm，為118,000。

＝280nm

295nm =27000

=13500

＝

同一化學式的多環(huán)二烯，可能有兩種異構(gòu)體：一種是順式異構(gòu)體；另一種是異環(huán)二烯，是反式異構(gòu)體。一般來說，異環(huán)二烯的吸收帶強度總是比同環(huán)二烯來的大。

互變異構(gòu)體的判斷

某些有機化合物在溶液中可能有兩種以上的互變異構(gòu)體處于動態(tài)平衡中，這種異構(gòu)體的互變過程常伴隨有雙鍵的移動及共軛體系的變化，因此也產(chǎn)生吸收光譜的變化。最常見的是某些含氧化合物的酮式與烯醇式異構(gòu)體之間的互變。例如乙酰乙酸乙酯就是和烯醇式兩種互變異構(gòu)體：

它們的吸收特性不同：酮式異構(gòu)體在近紫外光區(qū)的272nm（為為16)，是n－π*躍遷所產(chǎn)生R吸收帶。烯醇式異構(gòu)體的為243nm(為16000)，是π－π*躍遷出共軛體系的K吸收帶。兩種異構(gòu)體的互變平衡與溶劑有密切關系。在象水這樣的極性溶劑中，由于 可能與H2O形成氫鍵而降低能量以達到穩(wěn)定狀態(tài)，所以酮式異構(gòu)體占優(yōu)勢:

而象乙烷這樣的非極性溶劑中，由于形成分子內(nèi)的氫鍵，且形成共軛體系，使能量降低以達到穩(wěn)定狀態(tài)，所以烯醇式異構(gòu)體比率上升:

此外，紫外－可見分光光度法還可以判斷某些化合物的構(gòu)象(如取代基是平伏鍵還是直平鍵)及旋光異構(gòu)體等。

定量分析

紫外－可見分光光度法定量分析的方法常見到的有如下幾 種 ：

1.單組分的定量分析

如果在一個試樣中只要測定一種組分，且在選定的測量波長下，試樣中其它組分對該組分不干擾，這種單組分的定量分析較簡單。一般有標準對照法和標準曲線法兩種。標準對照法

在相同條件下，平行測定試樣溶液和某一濃度Cs（應與試液濃度接近）的標準溶液的吸光度Ax和As則由Cs可計算試樣溶液中被測物質(zhì)的濃度Cx

標準對照法因知使用單個標準，引起誤差的偶然因素較多，故往往較不可靠。標準曲線法

這是實際分析工作中最常用的一種方法。配制一系列不同濃度的標準溶液，以不含被測組分的空白溶液作參比，測定標準系列溶液的吸光度，繪制吸光度－濃度曲線，稱為校正曲線（也叫標準曲線或工作曲線）。在相同條件下測定試樣溶液的吸光度，從校正曲線上找出與之對應的未知組分的濃度。

此外，有時還可以采用標準加入法。2.多組分的定量分析

根據(jù)吸光度具有加和性的特點，在同一試樣中可以同時測定兩個或兩個以上組分。假設要測定試樣中的兩個組分A、B，如果分別繪制A、B兩純物資的吸收光譜，繪出三種情況，如圖13.20所示。

（a）情況表明兩組分互不干擾，可以用測定單組分的方法分

別在λ

1、λ2測定A、B兩組分；

（b）情況表明A組分對B組分的測定有干擾，而B組分對A組分的測定無干擾，則可以在λ1處單獨測量A組分，求得A組分的濃 18 度CA。然后在λ2處測量溶液的吸光度值，根據(jù)吸光度的加和性，即得

及A、B純物質(zhì)的和

則可以求出CB；

（c）情況表明兩組分彼此互相干擾，此時，在λ

1、λ2處分別測定溶液的吸光度

及，而且同時測定A、B純物質(zhì)的、及、。然后列出聯(lián)立方程

解得CA、CB。顯然，如果有n個組分的光譜互相干擾，就必須在n個波長處分別測定吸光度的加和值，然后解n元一次方程以求出各組分的濃度。應該指出，這將是繁瑣的數(shù)學處理，且n越多，結(jié)果的準確性越差。用計算機處理測定結(jié)果將使運算大為方便。3.雙波長分光光度法

當試樣中兩組分的吸收光譜較為嚴重時，用解聯(lián)立方程的方法測定兩組分的含量可能誤差較大，這時可以用雙波長分光光度法測定。它可以進行一組分在其它組分干擾下，測定該組分的含量，也可以同時測定兩組分的含量。雙波長分光光度法定量測定兩混合物組分的主要方法有等吸收波長法和系數(shù)倍率法兩種。等吸收波長法

試樣中含有A、B兩組分，若要測定B組分，A組分有干擾，采用雙波長法進行B組分測量時方法如下：為了要能消除A組分的吸收干擾，一般首先選擇待測組分B的最大吸收波長λ2為測量波長，然后用作圖法選擇參比波長λ1，作法如圖所示。

在λ2處作一波長軸的垂直線，交于組分B吸收曲線的另某一點，再從這點作一條平行于波長軸的直線，交于組分B吸收曲線的另一點，該點所對應的波成為參比波長λ1。可見組分A在λ2和λ1處是等吸收點，由吸光度的加和性可見，混合試樣在λ2和λ1處的吸光度可表示為

雙波長分光光度計的輸出信號為ΔA，可見儀器的輸出訊號ΔA與干擾組分A無關，它只正比于待測組分B的濃度，即消除了B的干擾。系數(shù)倍率法

當干擾組分A的吸收光譜曲線不呈峰狀，僅是陡坡狀時，不存在兩個波長處的等吸收點時，如圖所示。在這種

情況下，可采用系數(shù)倍率法測定B組分，并采用雙波長分光光度計來完成。選擇兩個波長λ

1、λ2，分別測量A、B混合液的吸光度，利用雙波長分光光度計中差分函數(shù)放大器，把大k1、k2倍，獲得、兩波長處測得的差示信號S：

調(diào)節(jié)放大器，選取和，使之滿足、、分別放得到系數(shù)倍率K為

差示信號S與待測組分B的濃度CB成正比，與干擾組分A無關，即消除了A的干擾。4.導數(shù)分光光度計法

采用不同的實驗方法可以獲得各種導數(shù)光譜曲線。不同的實驗方法包括雙波長法、電子微分法和數(shù)值微分法。

將對波長λ求導:

在整個波長范圍內(nèi)可控制在恒定值，則

上式表明，第一，導數(shù)分光光度法的一階導數(shù)信號與濃度成正比例，不需要通過對數(shù)轉(zhuǎn)換為吸光度；第二，測定靈敏度決定于摩爾吸光系數(shù)在特定波長處的變化率，在吸收曲線的拐點波長處大，靈敏度最高。如圖 所示。

對于二階導數(shù)光譜：

最

只有當一階導數(shù)

時，二階導數(shù)信號才與濃度成正比例。測定波長選擇在吸收峰處，其曲率

三階導數(shù)光譜：

最大，靈敏度就高。

當一階導數(shù)

時，三階導數(shù)信號與濃度成比例，測定波長在曲率半徑小的肩峰處

最大，可獲得高的靈敏度。

在一定條件下，導數(shù)信號與被測組分的濃度成比例。測量導數(shù)光譜曲線的峰值方法有基線法、峰谷法，如圖13.24所示。

基線法又稱切線法在相鄰兩峰的極大或極小處畫一公切線，在由峰谷引一條平行于縱坐標的直線相交于a點，然后測量距離他t的大小的。

峰谷法測量相鄰兩峰的極大和極小之間的距離p，這是較常用的方法。

峰零法測量峰至基線的垂直距離z。該法只適用與導數(shù)光譜曲 23 線對稱于橫坐標的高階導數(shù)光譜。

導數(shù)分光光度法對吸收強度隨波長的變化非常敏感，靈敏度高。對重疊譜帶及平坦譜帶的分辯率高，噪聲低。導數(shù)分光光度法對痕量分析、稀土元素、藥物、氨基酸、蛋白質(zhì)的測定，以及廢氣或空氣中污染氣體的測定非常有用。

6.其它分析方法：簡單介紹動力學分光光度法及膠束分光光度法 動力學分光光度法

一般的分光光度法是在溶液中發(fā)生的化學反應達到平衡后測量吸光度，然后根據(jù)吸收定律算出待測物資的含量。而動力學分光光度法則是利用反應速率與反應物、產(chǎn)物或催化劑的濃度之間的定量關系，通過測量與反應速率成正比例關系的吸光度，從而計算待測物質(zhì)的濃度。根據(jù)催化劑的存在與否，動力學分光光度法可分為非催化和催化分光光度法。當利用酶這種特殊的催化劑時，則稱為酶催化分光光度法。由反應速度方程式及吸收定律方程式可以推導出動力學分光光度法的基本關系為

A=KCc

式中K為常數(shù)，Cc為催化劑的濃度。測定Cc的方法常有固定時間法、固定濃度法和斜率法三種。

優(yōu)點：靈敏度高，選擇性好(有時是特效的)、應用范圍廣(快速、慢速反應，有副反應，高、低濃度均可)。

缺點：影響因素較多，測量條件不易控制，誤差經(jīng)常較大。膠束增容分光光度法

膠束強度分光光度法是利用表面活性劑的增強、增敏、增穩(wěn)、褪色、析向等作用，以提高顯色反應的靈敏度、對比度或選擇性，改善顯色反應條件，并在水向中直接進行光度測量的分光光度法。

表面活性劑(有陽離子型、陰離子型、非離子型之分)在水相中有生成膠體的傾向，隨其濃度的增大，體系由真溶液轉(zhuǎn)變?yōu)槟z體溶液，形成極細小的膠束，體系的性質(zhì)隨之發(fā)生明顯的變化。體系由真溶液轉(zhuǎn)變?yōu)槟z束溶液時，表面活性劑的濃度稱為臨界膠束濃度，常用cmc表示。由于形成膠束而使顯色產(chǎn)物溶解度較大的現(xiàn)象，稱為膠束增容效應。由于膠束與顯色產(chǎn)物的相互作用，結(jié)合成膠束化合物，增大了顯色分子的有效吸光截面，增強其吸光截面，增強其吸光能力，使ε增大，提高顯色反應的靈敏度，稱為膠束的增敏效應。膠束增容分光光度法比普通分光光度法的靈敏度由顯著的提高，ε可達106(L·mol－1·cm)。近年來，這種方法得到很廣泛的應用。這種方法得到很廣泛的應用。

第二篇：T6新世紀紫外可見分光光度計 詳細操作步驟

T6新世紀紫外可見分光光度計

快速操作指南

一、開機自檢：依次打開打印機、儀器主機電源，儀器開始初始化；約3分鐘時間初始化完成。

◆初始化完成后，儀器進入主菜單界面。

二、進入光度測量狀態(tài)：在上圖所示狀態(tài)按

鍵，進入光度測量界面。

三、進入測量界面：按

鍵進入樣品測定界面。

四、設置測量波長：按按

鍵，在下圖界面輸入測量的波長，例如需要在460nm測量，輸入460，鍵確認，儀器將自動調(diào)整波長。

◆調(diào)整波長完成后如下圖

五、進入設置參數(shù)：在這個步驟中主要設置樣品池。按到“試樣設定”，如圖顯示。按

鍵進入?yún)?shù)設定界面，按

鍵使光標移動

鍵確認，進入設定界面。

六、設定使用樣品池個數(shù)：按鍵使光標移動到“使用樣池數(shù)”，如圖顯示。按鍵循環(huán)選擇需要使用的樣品池個數(shù)。（主要根據(jù)使用比色皿數(shù)量確定，比如使用2個比色皿，則修改為2）

七、樣品測量：按鍵返回到參數(shù)設定界面，再按

鍵返回到光度測量界面。在1號樣品

鍵進行空白校正，再按池內(nèi)放入空白溶液，2號池內(nèi)放入待測樣品。關閉好樣品池蓋后按鍵進行樣品測量。測量結(jié)果如下圖顯示：

如果需要測量下一個樣品，取出比色皿，更換為下一個測量的樣品按

鍵既可讀數(shù)。

如果需要更換波長，可以直接按鍵，調(diào)整波長。

注意：更換波長后必須重新按進行空白校正。

如果每次使用的比色皿數(shù)量是固定個數(shù)，下一次使用儀器時可以跳過第五、六步驟直接進入樣品測量。

八、結(jié)束測量：測量完成后按鍵打印數(shù)據(jù)，如果沒有打印機請記錄數(shù)據(jù)。退出程序或關閉儀器后測量數(shù)據(jù)將消失。確保已從樣品池中取出所有比色皿，清洗干凈以便下一次使用。按返回到儀器主菜單界面后再關閉儀器電源。

鍵直到

第三篇：紫外可見分光光度計單一來源采購公告-華東師范大學

單一來源采購公告

根據(jù)相關規(guī)定，現(xiàn)對紫外可見分光光度計進行單一來源采購，歡迎合格的供應商前來報價。

項目名稱：紫外可見分光光度計 項目編號：HS-2017178 項目聯(lián)系方式： 聯(lián)系人：王翠紅 聯(lián)系電話：***

采購單位聯(lián)系方式：

采購單位：華東師范大學設備處 采購單位地址：上海市東川路500號 采購單位聯(lián)系方式：劉老師 021-54345242

一、擬采購的貨物或者服務的說明: 紫外可見分光光度計用于常規(guī)有機物定性、定量檢測，同時通過配備積分球附件可以用于不同溫度下粉末、紙、布料、玻璃、薄膜等固體試樣的漫反射、鏡面反射等反射光譜測定。設備組成：紫外可見主機、溫控系統(tǒng)、固體樣品支架、樣品池（用于固體、液體及粉末等不同樣品）、積分球、電腦、打印機、附件及配件組成。該成套設備必須是進口原裝，不接受由不同品牌、廠家模塊組合的產(chǎn)品。

二、采用單一來源采購方式的原因及相關說明: 紫外可見分光光度計是超分子有機化學研究工作中進行手性化合物合成與分析，測定超分子化合物紫外吸收的必備分析儀器。作為綠色化學實驗室全合成研究方向的學術骨干，在我們的研究工作中，每天都有大量合成化合物需要進行紫外吸收的測試，需要對樣品在不同溫度下漫反射和鏡面反射進行研究，從而確定化合物的正確結(jié)構(gòu)。這些工作要通過紫外分光光度計來實現(xiàn)。有機化學合成化合物的研究中，需要我們根據(jù)合成化合物的各種譜圖進行結(jié)構(gòu)分析，其中紫外光譜分析是其中一項。我們現(xiàn)有的質(zhì)譜分析采用的是島津公司的基質(zhì)輔助激光解析質(zhì)譜、制備型液質(zhì)聯(lián)用儀及氣質(zhì)聯(lián)用儀等一系列儀器，研究數(shù)據(jù)中一般要求實驗及表征數(shù)據(jù)進行統(tǒng)一性，所以采用同一廠家的儀器是數(shù)據(jù)統(tǒng)一的基礎?？紤]到數(shù)據(jù)的一致性，我們需要將紫外數(shù)據(jù)和熒光、紅外以及質(zhì)譜數(shù)據(jù)進行對比計算，得到理想的實驗結(jié)果。這套儀器的配套不僅可以提高本小組的工作效率，同時還可以為重點實驗室其他小組，甚至校內(nèi)其他單位服務。

基于以上原因，結(jié)合樣品在不同溫度下漫反射和鏡面反射研究的需要，我們申請采購島津公司的配備溫控裝置和積分球的紫外可見分光光度計。

三、公示時間：

2017年 10 月 30 日至2017年 11 月 3 日 16點止

四、擬定的唯一供應商名稱及其地址：

島津企業(yè)管理(上海)有限公司 淮海西路570號

五、其它補充事宜

供應商對本項目有異議的，可于公示期內(nèi)，以書面形式（加蓋單位公章）向華東師范大學設備處提出。

六、預算金額

預算金額：3.0萬美金

第四篇：過硫酸鉀消解紫外分光光度法測總氮的經(jīng)驗總結(jié)

過硫酸鉀消解紫外分光光度法測總氮的經(jīng)驗總結(jié)

水質(zhì)檢測 2010-01-29 16:37:30 閱讀418 評論0字號：大中小 訂閱

水中總氮項目的測定常采用堿性過硫酸鉀消解紫外分光光度法。采用這種方法的優(yōu)點是步驟相對簡單,所需試劑較少,要求使用的儀器設備一般實驗室都能具備。但是該方法對空白值的要求非常嚴格,其所需試劑中的過硫酸鉀、氫氧化鈉本身都含有一定量的氮,因此空白實驗不易做好。要做好總氮的空白實驗,不僅與試劑有關,而且還與實驗用水、器皿、家用壓力鍋或醫(yī)用手提蒸氣滅菌器的壓力、實驗室環(huán)境及方法步驟的掌握等因素關系密切。以下幾個測定總氮過程中應注意的問題是筆者長期工作中的一點心得,現(xiàn)與大家共同探

討。試劑的配制、存放

堿性過硫酸鉀的配制過程十分重要,掌握不好,會影響消解效果,對測定結(jié)果產(chǎn)生一定的影響。GB11894—89中關于堿性過硫酸鉀的配制,只是簡單的說將過硫酸鉀和氫氧化鈉溶于水中,并未作其它要求。實際上,過硫酸鉀的溶解速度非常慢,若要加快溶解,絕對不能盲目加熱,即使加熱,也最好采用水浴加熱法,且水浴溫度一定要低于60℃,否則過硫酸鉀會分解失效。配制該溶液時,可分別稱取過硫酸鉀和氫氧化鈉,兩者分開配制,再混合定容,或者先配制氫氧化鈉溶液,待其溫度降到室溫后再加入過硫酸鉀溶解。若二者在一只燒杯中溶于水,應緩慢加水,同時攪拌,防止氫氧化鈉放熱使溶液溫度過高引起局部過硫酸鉀失效。過硫酸鉀的存放也要注意,應避免與還原性物質(zhì)、硫、磷等混合存放,另外,過硫酸鉀易吸潮,放出氧氣,因此,為防止

失效,要將其放在干燥的試劑櫥中。無氨水的制備

實驗過程對水的要求非常嚴格,普通的蒸餾水往往還達不到實驗要求。這時需再做二次加工以得到無氨水。在用蒸餾法制備無氨水時, GB11894—89 中指出:“棄去前50ml餾出液,然后將餾出液收集在帶有玻璃塞的玻璃瓶中”。根據(jù)筆者的工作經(jīng)驗,僅僅棄去前50ml餾出液是不夠的。舉個例子說,如果蒸出1000ml的無氨水,先前蒸出的200ml餾出液都要棄去,最后蒸出的200ml餾出液也要棄去,只保留中間蒸出的無氨水待

用,否則,重蒸無氨水的空白值往往還不如制備之前的普通蒸餾水空白值好。實驗室環(huán)境

總氮的分析應在無氨的實驗室環(huán)境中進行,室內(nèi)不應含有揚塵、石油類及其它的氮化合物,絕對不能在分析氨氮等氮類項目的實驗室中做總氮項目的分析,所使用的試劑、玻璃器皿等也要單獨存放,避免交叉污染,影響空白值。玻璃器皿的洗滌

所使用的玻璃器皿應先用(1 + 9)鹽酸浸泡后,再用無氨水沖洗數(shù)次才能使用,否則,也會造成空白值偏高或

平行性較差的情況。

5消解溫度、壓力的控制

對于使用醫(yī)用手提蒸氣滅菌器的實驗室,因測定壓力為1.1～1.4kg/ cm2 ,溫度為120℃～124℃,此時可以安裝一個穩(wěn)壓器,將壓力控制在該范圍,這樣就省去了通過人為切斷電源控制的麻煩,穩(wěn)定且省力。消解時, GB11894—89中要求達到規(guī)定溫度壓力后即開始計時,而筆者的經(jīng)驗是,達到規(guī)定溫度壓力后應當先放氣使壓力表指針回零,再次達到規(guī)定溫度壓力后再計時。或者直接打開放氣閥加熱一段時間,待蒸氣滅菌器內(nèi)的冷空氣被徹底趕盡、放出熱蒸氣后再關閉放氣閥消解,并且將消解溫度控制在123℃,這樣測定結(jié)果最為理想。

6比色時的注意事項

該項目的測定涉及兩個波長(220nm和275nm),有條件的實驗室可采用雙光路紫外分光光度計,其優(yōu)點是方便快速、可以避免反復調(diào)整波長產(chǎn)生測量誤差,皿間誤差也能自動修正。如果沒有雙光路的光度計,建議在測定完一組樣品的同一波長后,再調(diào)整到另一波長,統(tǒng)一測定,不要測完一個樣品的兩個吸光度后再換另一

個樣品,這樣反復調(diào)整波長會引起一定的測量誤差。試劑的選擇

堿性過硫酸鉀消解紫外分光光度法測定總氮的過程中,過硫酸鉀是至關重要的試劑。首先,試劑的純度關系到空白值的高低、測定結(jié)果的準確度。一般普通分析純過硫酸鉀的總氮含量最高不超過0.005% ,但由于試劑質(zhì)量存在差異,有些廠家、批次的試劑含氮量常常達不到這個要求,致使空白值偏高。另外,分析純氫氧化鈉的氮化合物含量雖然大大低于過硫酸鉀的含氮量,但也要仔細選擇。筆者在工作中就曾遇到過將過硫酸鉀溶液與氫氧化鈉溶液混合成堿性過硫酸鉀溶液時,竟散發(fā)出氨水氣味的現(xiàn)象,這說明試劑的純度不夠。因此,有條件的話建議使用優(yōu)級純或基準試劑,盡量降低試劑中的含氮量,從而降低實驗空白值。

8實驗用水及試劑的質(zhì)量檢驗

若實驗的空白值不夠理想,則需要對實驗用水及試劑進行檢驗,以選擇出含氮量最低的水和試劑,獲得理想的空白值。筆者的經(jīng)驗是,若每換一種水、每換一個廠家、一個批次的過硫酸鉀、氫氧化鈉試劑就全過程做一遍總氮,將是相當麻煩的,而且最終還往往難以得出結(jié)論。以下是筆者在工作中總結(jié)出的一點簡便的方法,僅供參考。

8.1 水的檢驗

將所有待選的實驗用水分別裝入石英比色皿中,分別在220nm和275nm波長處測其吸光度,按A220nm

～2A275nm對吸光度進行修正,以修正后吸光度值最小的水為實驗用水。

8.2 試劑的檢驗

將所有待檢的過硫酸鉀、氫氧化鈉按其在實驗時消解定容后的溶液中的含量分別配成相應濃度的溶液,以此溶液作為樣品,分別測定其氨氮、硝酸鹽氮的吸光度,擇其吸光度最低者而用即可,若有必要,也可進一步計算其氮含量。這里有必要強調(diào)的是硝酸鹽氮的檢驗。若采用酚二磺酸分光光度法測定,步驟稍為繁瑣,建議可以參考《水和廢水監(jiān)測分析方法》第四版中提到的紫外分光光度法,會更簡便。前面提到的配好后呈氨水味的堿性過硫酸鉀溶液,就是通過試劑檢驗,確定是其中的過硫酸鉀試劑氨氮含量太高而決定將其棄用的.

第五篇：新聞兩篇教案(與可見配套)

新聞兩則

●學習目標：

1、了解新聞的有關知識，培養(yǎng)學生閱讀新聞的能力。

2、閱讀課文，把握新聞的特點、結(jié)構(gòu)。

3、能根據(jù)新聞的結(jié)構(gòu)理清內(nèi)容、層次并體會語言的準確、簡潔。

4、綜合運用默讀的方法和自主、合作、探究的學習方式。

5、感受人民解放軍排山倒海、所向披靡的氣勢和一往無前、壓倒敵人的大無畏精神?！駥W習重點

從文體上抓住新聞的特點，從題材上抓住戰(zhàn)爭的主題，從遣詞造句上體會準確精練的語言。

●學習準備：

預習生字詞，查閱有關解放戰(zhàn)爭中三大戰(zhàn)役的資料。學生每人準備一份當天的報紙。

●教學設計：

一、創(chuàng)設情景，走進新聞。

在社會生活中發(fā)生了一件重大的事情，或者出現(xiàn)了一個有意義的新事物，如果我們要盡快地把它告訴盡可能多的人，可以采用怎樣的辦法呢？

（報紙上、電視上或者廣播里發(fā)布消息。）是啊，在現(xiàn)代社會里，新聞在傳播信息方面起著巨大作用。

新聞的有關知識：

1、廣義新聞泛指消息、通訊、報告文學等；狹義新聞，專指消息。消息，是報紙常用的一種文章樣式?！度嗣窠夥跑姲偃f大軍橫渡長江》是狹義新聞，即消息。

2、新聞的記敘要素：

人物 時間 地點 事件發(fā)生的原因、經(jīng)過、結(jié)果 ? 何人？（Who?）? 何時？（When?)? 何地？（Where?)? 何因？（Why?)? 何事？（What?)? 如何？（How?)新聞六要素，閱讀新聞是心里要自覺地問這六個問題，就不難解決了。6個“W”共同構(gòu)筑了把握新聞的道路和途徑（way)。

3、新聞的結(jié)構(gòu)要素

標題：高度概括事件（迅速了解新聞主要內(nèi)容，要看 標題）

導語：扼要揭示新聞的核心內(nèi)容。一般指“電頭”后的第一段或第一句話.（較詳細了解新聞內(nèi)容要看導語）

主體：是對導語內(nèi)容的進一步擴展和闡釋。（詳細地了解新聞內(nèi)容，要看主體）

結(jié)語：是新聞的結(jié)尾，一般指新聞的最后一句或一段。（依內(nèi)容的需要，可有可無）

背景：是新聞發(fā)生的社會環(huán)境和自然環(huán)境。（是從屬部分，常插在主體中，也可插在“導語”或“結(jié)語”中）

4、新聞的特點: 觀點鮮明、內(nèi)容真實、及時迅速、語言簡明準確。新聞(消息）結(jié)構(gòu)：

六要素：時間、地點、人物、原因、經(jīng)過、結(jié)果 五部分：標題、導語、主體、背景、結(jié)語 特 點：

1、讓事實說話；(真實性）

2、報道迅速及時；（及時性）

3、簡明扼要。（準確性）

5、如何寫消息的標題和導語 消息標題的特點是：

必須有——何人（物）做何事 必須簡潔 必須準確 例：

南京市民參觀鼓樓地下隧道

昨天，南京鼓樓廣場地下隧道首次開放供市民參觀。上午開通儀式前，已有數(shù)萬名欲先睹為快的市民等候在中央路、中山路兩洞口。市交警支隊出動數(shù)百名警員在現(xiàn)場維持秩序，以確保安全。開通儀式后，市民們有序地進入隧道參觀。參觀的市民大部分是全家出動，隧道中不時聽到“乖乖，這么大！”“真了不起！”的驚嘆聲。到晚上10點，約有20萬市民興致勃勃地參觀了隧道。

成都最低工資標準將提高

本報訊（記者李海燕）成都市政府常務會昨日原則通過關于調(diào)整該市最低工資標準的相關文件。成都各區(qū)（市）縣行政區(qū)域內(nèi)具體適用的最低工資標準分別為：蒲江、金堂、崇州、大邑、邛崍每月270元；青白江、龍泉驛、溫江、新都、都江堰、彭州、雙流、郫縣、新津每月310元；五城區(qū)及高新區(qū)每月340元。2001年上述三類行政區(qū)域的最低工資標準分別是215元、240元和270元。

相同點：

寫同樣的人（物）身上發(fā)生的同樣的事

即：有共同的人物和事件

不同點：

導語比標題詳細，主體又比導語詳細

即：導語既比標題詳細，又比主體簡略 “詳”——是指比標題多了時間、地點。

“簡”——是指它所描述的事件比主 體部分的事件簡略 導語的特點：

都有時間、地點、人（物）、事件

水庫游泳 小伙溺亡

昨天下午3點多鐘，19歲的溧水縣男青年田某和幾個學生打籃球，打到下午4點多鐘結(jié)束。此后田某等人便到該縣中山水庫游泳，結(jié)果下去沒多久，田某的雙腿出現(xiàn)抽筋，沉入水庫身亡。導語：

昨天，南京發(fā)生一起悲劇，一男青年下水庫游泳時不幸溺水身亡。

據(jù)報道，5月31日在韓國舉行的韓日世界杯足球賽揭幕戰(zhàn)中，首次涉足世界杯決賽圈的塞內(nèi)加爾隊制約了中場一向強大的法國隊，中場隊員迪奧普在比賽進行到30分鐘時攻入一球，最終以1：0戰(zhàn)勝上屆冠軍法國隊，爆出了世界杯賽歷史上的一個大冷門。

5月31日，在韓國舉行的韓日世界杯揭幕戰(zhàn)中塞內(nèi)加爾隊1：0戰(zhàn)勝法國隊。

在一般情況下標題的寫法：何人（何物）做何事

導語的寫法：何時何地何人（物）做何事

標題、導語、主體的區(qū)別：

? 標題：請同學們用一個短語或一句話說出這則新聞的內(nèi)容。? 導語：請同學們用一小段話說出這則新聞的內(nèi)容。

? 主體：請同學們用一大段話或幾小段話說出這則新聞的內(nèi)容。?

《人民解放軍百萬大軍橫渡長江》這篇課文，就充分體現(xiàn)了上述特點。人民解放軍百萬大軍橫渡長江，這是人類戰(zhàn)爭史上空前的奇觀，千里江面上萬船齊發(fā)，人民解放軍冒著炮火奮勇挺進，沖破敵陣，橫渡長江。這則新聞，給全軍戰(zhàn)士和全國人民以極大的鼓舞，今天讀來依然令人回腸蕩氣。下面讓我們一起學習由毛澤東親自撰寫的《人民解放軍百萬大軍橫渡長江》這篇新聞。

目標：

1、了解新聞的有關知識，培養(yǎng)閱讀 新聞的能力。

2、理清文章層次，體會文章準確、簡潔的語言。

3、把握課文中的人物、事件，認識中國革命勝利來之不易，并從中獲得有益啟示。

檢查預習

1、請給下面紅色的字標上正確的讀音。給下列多音字注音：

2、請解析下面的詞語：

《人民解放軍百萬大軍橫渡長江》報道了解放戰(zhàn)爭中渡江戰(zhàn)役的勝利戰(zhàn)況。這是人類戰(zhàn)爭史上空前的奇觀，千里江面上萬船齊發(fā)，人民解放軍冒著炮火奮勇挺進，沖破敵陣，橫渡長江。毛澤東親自撰寫了這則新聞，給全軍戰(zhàn)士和全國人民以極大的鼓舞，今天讀來依然令人回腸蕩氣。

人民解放軍百萬大軍橫渡長江的背景

解放戰(zhàn)爭時期，中國人民解放軍第二、第三野戰(zhàn)軍和第四野戰(zhàn)軍一部,在長江中下游強渡長江,對國民黨軍湯恩伯、白崇禧兩集團進行的戰(zhàn)略性進攻戰(zhàn)役。4月15日,國共雙方代表團擬定了《國內(nèi)和平協(xié)定(最后修正案)》,并商定4月20日簽字。但南京國民黨政府卻拒絕簽字，人民解放軍即遵照中共中央軍委命令，于20日夜發(fā)起渡江作戰(zhàn)。中突擊集團第一梯隊第24、第25、第27、第21軍在強大炮火掩護下，冒著國民黨軍軍艦和江防炮火的攔截，在100余公里的正面上，首先登船起渡，迅速攻占了鯽魚洲等江心洲。接著，突破魯港(蕪湖西南)至銅陵段國民黨軍江防陣地，連續(xù)打退守軍的多次反擊，鞏固了灘頭陣地，爾后向縱深發(fā)展攻勢，至21日，占領銅陵、繁昌、順安等地。

有關資料：

1949年4月20日，國民黨政府拒絕簽訂國內(nèi)和平協(xié)定。解放軍堅決執(zhí)行毛澤東主席和朱德總司令向全國進軍的命令，舉行了規(guī)?？涨暗娜娲筮M軍。第二、三野戰(zhàn)軍和地方武裝在長江南北廣大人民的支援下，于4月21日晨，以木帆船為主要渡江工具，在西起湖口、東至江陰，長達500余公里的戰(zhàn)線上強渡長江，徹底摧毀了國民黨軍的長江防線。4月23日，解放了國民黨22年來的統(tǒng)治中心南京。

二、朗讀課文，感知新聞

1、要求：

? 標題：請同學們用一個短語或一句話說出這則新聞的內(nèi)容。? 導語：請同學們用一小段話說出這則新聞的內(nèi)容。

? 主體：請同學們用一大段話或幾小段話說出這則新聞的內(nèi)容。

2、思 考 題

? 請你用簡潔的語言說說這則新聞的內(nèi)容。

? 讀新聞要抓住記敘的六要 素，即時間、地點、人物、事件發(fā)生的原因、經(jīng)過、結(jié)果。作為讀者，你能在看了這則新聞后找出它的六要素嗎？請概括出來。

? 你從中讀出了作者怎樣的思想感情？

《人民解放軍百萬大軍橫渡長江》

時間:

1949年4月20日夜起至4月22日22時

地點： 西起九江（不含），東至江陰一千余華里長江戰(zhàn)線 人物： 人民解放軍百萬大軍

事件發(fā)生的原因： 國民黨反動派拒絕簽訂和平協(xié)定，人民解放軍為打倒蔣介石，解放全中國而發(fā)起渡江戰(zhàn)役。經(jīng)過與結(jié)果：

中路軍

首先突破安慶、蕪湖線，三十萬人全部渡過，占西廣大南岸陣領 路

軍

三

十萬

渡

過

三

分

之

二，已

占

領 長江南岸。地。東路軍

三十五萬已渡過大部，經(jīng)過整天激戰(zhàn)，殲滅及擊潰

一切抵抗之敵，占領南岸陣地，控制江陰要塞，切

斷鎮(zhèn)江無錫段鐵路。

3、畫渡江示意圖

你能根據(jù)新聞的主體部分繪出三路軍渡江的示意圖嗎?

四、課文分析：

（一）、找出文章的導語部分，并分析其作用：

從“人民解放軍百萬大軍”到“均是人民解放軍的渡江區(qū)域”

這一部分簡述渡江戰(zhàn)役勝利成功。語言簡明扼要，概括性強，及時、準確的對事件進行了報道，給讀者以完整鮮明的印象，又領起了下文。

（二）、找出文章的主體部分，并加以分析：

1、主體部分分為幾個層次？ 分為三個層次：

第一層：從“20日夜起”到“即已渡過30萬人”（寫中路軍渡江的時間、突破地點、渡過人數(shù)）

第二層：從“21日下午5時起”到“不起絲毫作用”（對西路軍渡江情況加以評論）

第三層：從“我東路三十五萬大軍”到篇末（寫東路軍的渡江情況）

2、概括出該消息的背景和結(jié)語。

背景：國民黨政府拒絕簽訂和平協(xié)議。結(jié)語：人民解放軍于23日全體渡過長江。

3、開頭的括號部分是什麼內(nèi)容？

是“電頭”部分，交待了通訊社的名稱、發(fā)電時間和地點。

4、你能概括這則新聞的中心嗎？

這篇新聞，氣勢磅礴，全面地報道了人民解放軍的渡江戰(zhàn)役，這是中國解放戰(zhàn)爭戰(zhàn)略進攻階段具有關鍵意義的勝利。這一歷史，讓我們看到正義戰(zhàn)爭的威力，認識到中國革命的勝利來之不易。

（三）、問題探究（小組討論）

1、本文主體部分的三個層次是怎樣銜接的？

第二層開頭“二十日下午五時起”與第一層開頭“二十日夜起”緊相銜接； 第三層開頭“不料正是湯恩伯到蕪湖的那一天……我軍突破了”一句起了承上啟下的作用，把第二層與第三層銜接起來了。

2、找出本文的議論句，看看它屬新聞結(jié)構(gòu)的哪個部分，有什么表達效果？ “此種情況……都很泄氣”。屬“背景”部分。分析了敵潰我勝的原因，突出了文章中心。

五、揣摩語言

A、20日夜起，長江北岸人民解放軍中路軍首先越過安慶、蕪湖線，到達繁昌、銅陵、青陽、荻港地區(qū)，共渡過了30萬人。

B、20日夜起，長江北岸人民解放軍中路軍首先突破安慶、蕪湖線，渡至繁昌、銅陵、青陽、荻港、魯港地區(qū)，24小時內(nèi)即已渡過30萬人

“越過”只表示經(jīng)過，表現(xiàn)不出經(jīng)過戰(zhàn)斗?！巴黄啤北砻魑臆姎灉缁驌魸⑹財硾_破敵陣。

“到達”只表示一般的“到了”“抵達”之意，“渡至”表現(xiàn)的是“從水路進軍，來到了——” ,且文字簡潔有力。“共”表示一般的總結(jié)性的統(tǒng)計，“24小時內(nèi)即已”時間明確，且強調(diào)了時間之短、進軍之神速。

A、此處敵軍抵抗較為頑強，然在21日下午至22日下午，東路軍已戰(zhàn)勝一切抵抗之敵，占領揚中、鎮(zhèn)江、江陰諸縣，封鎖長江。

B、此處敵軍抵抗較為頑強，然在21日下午至22日下午的整天激戰(zhàn)中，我已殲滅及擊潰一切抵抗之敵，占領揚中、鎮(zhèn)江、江陰諸縣的廣大地區(qū)，并控制江陰要塞，封鎖長江。

上句只交代了我軍取得了勝利并占領了哪些區(qū)，下句用“整天激戰(zhàn)”、“殲滅”、“擊潰”等詞突出戰(zhàn)斗的艱巨，表現(xiàn)我軍的英勇無畏，具有震撼人心的力量。結(jié)果就在21日那一天，東面防線又被我軍突破了。

A、不料正是湯恩伯到蕪湖的那一天，東面防線又被我軍突了。B、“不料正是湯恩伯到蕪湖的那一天”，有嘲諷意味，嘲諷湯恩伯過高估計東面防線的鞏固性，過低估計人民解放軍的戰(zhàn)斗力，倘說“結(jié)果就在二十日那一天”，只是一般交代了時間，毫無感情色彩，且與上句“二十一日”重復。小結(jié)： 可見這則新聞的語言用詞準確精練，鏗鏘有力。另外還有書面語和口頭語相穿插，相益得彰（如“敵亦紛紛潰退，毫無斗志”——文氣十足；“不想再打了”“都很泄氣”——非常口語化），各有妙處。

六、質(zhì)疑析疑

1、為什么按中、西、東的順序敘述？

中路軍首先發(fā)起渡江作戰(zhàn)，所以先說。西路軍和中路軍所遇敵情一樣，敵軍抵抗甚為微弱，而東線敵軍抵抗較為頑強，所以西路接著中路說，合在一起，可以議一議。最后說東路激戰(zhàn)，文勢也涌起高潮。

2、東路與西路是同時發(fā)起渡江作戰(zhàn)的，為什么先說西路軍，再說東路軍？ 在新聞的主體里，中路軍和西路軍都從時間說起，中路一層開頭是“二十日夜起”，西路一層開頭是“二十一日下午五時起”，層次分明而又緊相銜接。說了西路戰(zhàn)況之后，又合起來有所議論，議論最后一句是“湯恩伯認為南京江陰段防線是很鞏固的，弱點只存在于南京九江一線。不料正是湯恩伯到蕪湖的那一天，東面防線又被我軍突破了”。話題巧妙而自然地從“西面”轉(zhuǎn)到“東面”。

七、拓 展 延 伸

請找出下面這則新聞的標題、導語和主體。

溫家寶強調(diào)加強應急管理工作

國務院于7月23日在京召開全國應急管理工作會議。中共中央政治局常委、國務院總理溫家寶強調(diào)，加強全國應急體系建設和應急管理工作，必須做好健全組織體系、運行機制、保障制度等工作。

八、小結(jié)

本文是一篇消息（狹義新聞），它真實、及時、簡要地報道人民解放軍百萬大軍橫渡長江的情況。全面介紹了渡江三路軍的進軍的時間、地點、戰(zhàn)線、戰(zhàn)況，使人對震驚中外的渡江戰(zhàn)役之概貌有所了解。這則新聞的標題、導語和主體部分的結(jié)構(gòu)安排等都頗有講究，值得細心體味。文中的語言準確精練，鏗鏘有力。

九、作業(yè)

1、完成課后練習三的第三組句子的比較

2、預習《中原我軍解放南陽》這則新聞。

3、完成作業(yè)本1——8題。

《中原我軍解放南陽》

一、自學討論：

1、請在文中劃出這則新聞的六個要素。

2、請找出本則新聞的導語和主體。

3、理清記敘的六要素。? 《中原我軍解放南陽》 ? 人物：中原我軍

? 時間：1948年11月4日下午 ? 地點：南陽

? 事件發(fā)生的原因：蔣軍因全局敗壞，被迫將整個南部戰(zhàn)線近百個師的兵力集中于以徐州為中心和以漢口為中心的兩個地區(qū)。在我強大的野戰(zhàn)軍和地方軍配合打擊之下，困守南陽的蔣軍，不得不被迫棄城南逃。

? 經(jīng)過與結(jié)果：自去年七月，南陽人民解放軍開始向敵后進軍，大量殲敵，擴大并鞏固了根據(jù)地，壯大了人民武裝，徹底孤立了敵人，南陽守敵王凌云棄城南逃，我軍當即占領南陽，從此河南全境除若干據(jù)點外，全部為我解放。

4、二、分析研究：

1、這一則新聞，為什么不僅報道解放南陽的消息，而且概述一年多來南線人民解放軍的戰(zhàn)績？ ? 南陽解放，是南線人民解放軍一年多來取得偉大勝利的必然結(jié)果，所以南陽解放之日正是總結(jié)一年多來偉大勝利的最好時機。? 另一方面，總結(jié)一年多來的戰(zhàn)績，? 也可以說明蔣軍為什么棄城南逃。

2、品味兩則新聞語言的特點，完成課后練習三。? 第一小題: ②句好。? 因為：“突破”表明有敵軍防守，我軍殲滅或擊潰守敵，沖破敵陣。用“越過”表現(xiàn)不出經(jīng)過戰(zhàn)斗。

? “渡至”比“到達”含義豐富，有橫渡與到達兩層意思，且文字簡潔有力。? “二十四小時內(nèi)即已”，時間明確，且含渡江迅疾，作戰(zhàn)順利之意。用“共”字不能表達這些意思。第二小題: ②句好?！安涣险菧鞑绞徍哪且惶臁?，有嘲諷意味，嘲諷湯恩伯過高估計東面防線的鞏固性，過低估計人民解放軍的戰(zhàn)斗力，倘說“結(jié)果就在二十一日那天”，毫無感情色彩，且與上一句“二十一日”重復。

第三小題: ①句好。語言生動形象，森林的形象，枝葉茂盛的形象，生機勃勃，富有氣勢。

三、小結(jié)

《新聞兩則》所報道的渡江戰(zhàn)役和南陽解放，都是中國人民解放戰(zhàn)爭戰(zhàn)略進攻階段具 有關鍵意義的勝利。學習這兩則新聞，使我們了解了歷史，看到正義戰(zhàn)爭的威力，認識到中國革命的勝利來之不易。兩則新聞氣勢磅礴，語言準確簡明，感情色彩鮮明。給我們留下很深刻的印象。希望同學們把今天所學習的知識運用到今后的生活中去，用心體 驗、感受、思考周圍的世界，開闊視野，提高認識水平。

四、作業(yè)；

1、寫一則新聞：

2、報道學?；虬嗌夏橙?、某事或某項活動。要求：

? 運用所學有關新聞知識，寫一則新聞，報道發(fā)生在你自己身邊的新鮮事，200字左右。（注意：要符合新聞的結(jié)構(gòu)和要素）——作業(yè)本13題 ? 完成語文作業(yè)本中第一課的作業(yè)。? 預習《蘆花蕩》，掃清字詞障礙。

教學后記:學生讀書開不了腔,須加強指導;學生對戰(zhàn)爭的殘酷性認識不足。