第一篇:課題《腹腔鏡技術(shù)在小兒腹股溝斜疝嵌頓中臨床應(yīng)用》工作總結(jié)
課題《腹腔鏡技術(shù)在小兒腹股溝斜疝嵌頓中臨床應(yīng)用》工作總結(jié)
1.課題立項(xiàng)的背景
隨著腹腔鏡技術(shù)的在小兒外科的迅速發(fā)展,在一些開展較好的單位,約有80%的小兒腹部外科疾病采用腹腔鏡治療,東莞市婦幼保健院小兒外科是東莞市唯一獨(dú)立成科的小兒外科,腹腔鏡技術(shù)是小兒外科特色微創(chuàng)技術(shù),目前開展各類小兒外科腹腔鏡手術(shù)病種20余種,許多項(xiàng)目填補(bǔ)東莞市在這一領(lǐng)域的空白,在東莞市處于領(lǐng)先水平。目前開展腹腔鏡小兒腹股溝斜疝手術(shù),腹腔鏡先天性巨結(jié)腸手術(shù),新生兒腹腔鏡腸閉鎖手術(shù),腹腔鏡食道裂孔疝修補(bǔ)及胃底折疊術(shù)、腹腔鏡幽門環(huán)肌切開術(shù)等手術(shù)。腹股溝嵌頓性斜疝是小兒外科常見的急腹癥之一,多見于嬰幼兒。傳統(tǒng)嵌頓疝開放手術(shù)后易出現(xiàn)陰囊血腫 睪九移位、睪丸萎縮、復(fù)發(fā)等井發(fā)癥,切口瘢痕大。腹腔鏡技術(shù)應(yīng)用于嬰幼兒腹股溝斜疝嵌頓國內(nèi)報(bào)道不多,存在一定爭(zhēng)議,在國內(nèi),只有少數(shù)幾家醫(yī)院開展,且例數(shù)較少,沒有大宗病例報(bào)道。我們?cè)陂_展大量腹腔鏡手術(shù)治療小兒腹股溝斜疝取得成功基礎(chǔ)上,我們將腹腔鏡技術(shù)應(yīng)用于小兒腹股溝嵌頓性疝,取得一定臨床效果。本課題研究是基于腹腔鏡技術(shù)的發(fā)展趨勢(shì),將其運(yùn)用于小兒腹股溝嵌頓性斜疝,在項(xiàng)目研究過程中發(fā)現(xiàn)新問題及解決方法及較全面及系統(tǒng)的評(píng)估小兒腹腔鏡技術(shù)治療腹股溝斜疝嵌頓的優(yōu)缺點(diǎn)。
2.課題研究的意義
通過研究明確腹腔鏡手術(shù)在小兒腹股溝斜疝中臨床應(yīng)用價(jià)值。腹股溝嵌頓性斜疝既往采用傳統(tǒng)開放手術(shù),創(chuàng)傷大,手術(shù)時(shí)間久,術(shù)后恢復(fù)慢,復(fù)發(fā)率高,切口疤痕大,而微創(chuàng)手術(shù)使用腹腔鏡技術(shù)證明具有損傷小,康復(fù)快,復(fù)發(fā)率低,操作簡(jiǎn)單,安全,療效可靠等優(yōu)點(diǎn),解決了小兒腹股溝嵌頓性斜疝的一種新的治療手段。通過課題研究論證腹腔鏡技術(shù)治療小兒腹股溝嵌頓性斜疝安全可行,療效確切,值得臨床推廣。
3.課題研究的理論依據(jù)
腹腔鏡技術(shù)應(yīng)用于小兒腹股溝嵌頓性斜疝的依據(jù):
?全麻后患兒無哭鬧,無抵抗,不增加腹壁緊張度。全麻加肌松藥物使腹壁肌肉完全松弛,有利于疝內(nèi)容物回納腹腔;腹腔鏡術(shù)中可以使用無損傷鉗牽拉嵌頓腸管,提高復(fù)位成功率。
?腹腔鏡內(nèi)環(huán)口結(jié)扎治療小兒腹股溝疝切口小,損傷小,康復(fù)快,復(fù)發(fā)率低,操作簡(jiǎn)單,安全,療效可靠。
?嬰幼兒嵌頓疝傳統(tǒng)手術(shù),年齡越小疝囊越薄,加上組織水腫游離疝囊易撕裂,可增加手術(shù)困難,造成疝囊頸部結(jié)扎不完全,導(dǎo)致術(shù)后復(fù)發(fā)。
④嵌頓疝術(shù)中腹股溝管組織水腫,易造成輸精管及精索血管、神經(jīng)損傷,甚至膀胱損傷。
4.課題研究的目標(biāo)
研究腹腔鏡技術(shù)在小兒腹股溝嵌頓性斜疝中臨床應(yīng)用價(jià)值。包括:1.腹腔鏡技術(shù)在小兒腹股溝嵌頓性斜疝臨床應(yīng)用較傳統(tǒng)手術(shù)的優(yōu)勢(shì)。2.腹腔鏡手術(shù)治療小兒腹股溝嵌頓性斜疝注意事項(xiàng)。3.腹腔鏡手術(shù)治療小兒腹股溝嵌頓性斜疝的適應(yīng)癥及禁忌癥。
5.課題研究的主要內(nèi)容
腹股溝斜疝是小兒外科的常見病,70%的斜疝在1歲以內(nèi)出現(xiàn)嵌頓,腹股溝斜疝一經(jīng)診斷,均應(yīng)手術(shù)治療。我院小兒外科2011年2月~2014年2月腹腔鏡手術(shù)治療嬰幼兒腹股溝斜疝855例,其中采用腹腔鏡手術(shù)急診治療嬰幼兒腹股溝嵌頓性斜疝62例,我們對(duì)腹腔鏡手術(shù)治療腹股溝嵌頓性斜疝進(jìn)行研究。
5.1 課題資料
課題完成期間共完成手術(shù)62例,男59例,女3例。年齡1個(gè)月~3歲,平均1.2歲。均發(fā)現(xiàn)腹股溝區(qū)不可復(fù)性包塊,伴隨哭鬧,胃納、睡眠差癥狀。嘔吐、腹脹38例,出現(xiàn)輕度脫水癥狀18例,6例陰囊皮膚潮紅或見瘀斑。發(fā)現(xiàn)嵌頓至就診時(shí)間<12 h 46例,>12 h 16例。術(shù)前明確診斷腹股溝斜疝嵌頓,右側(cè)43例,左側(cè)19例。術(shù)前均行腹部立位片示膈下無游離氣體,42例患者提示腸管輕度擴(kuò)張,有氣液平面。B超示嵌頓腸管有腸蠕動(dòng)征象。58例術(shù)前行1~2次手法復(fù)位,手法復(fù)位失敗;4例嵌頓>12 h,陰囊紅腫,陰囊腫塊質(zhì)硬,無復(fù)位指征,未行手法復(fù)位。
病例選擇標(biāo)準(zhǔn):腹股溝嵌頓疝診斷明確,手法復(fù)位失敗,或臨床不具備復(fù)位指征,有急診手術(shù)指征(嵌頓時(shí)間超過12 h,臨床判斷不能復(fù)位或手法復(fù)位失?。?,無嚴(yán)重心肺疾病等腹腔鏡手術(shù)禁忌,排除腸壞死及絞窄疝。5.2 手術(shù)操作方法
全麻下急診腹腔鏡手術(shù),根據(jù)術(shù)中嵌頓疝腹腔鏡輔助復(fù)位是否成功分嵌頓復(fù)位組及嵌頓松解組。
5.2.1 嵌頓復(fù)位組 術(shù)前常規(guī)放置尿管。氣管插管全麻,取頭低腳高仰臥位。臍下做5 mm切口,穿刺建立CO2氣腹,壓力設(shè)置在8~10 mm Hg。置入5 mm trocar,腹腔鏡探查。首先,觀察腹腔內(nèi)情況:腹腔滲液情況包括顏色及性狀,對(duì)側(cè)內(nèi)環(huán)口是否閉合。檢查嵌頓的組織器官血運(yùn)情況,確定有無明顯壞死、穿孔征象。于右側(cè)腹直肌外緣置入0.3 cm trocar,置入無損傷操作鉗。退鏡后解除氣腹行手法復(fù)位,如果手法復(fù)位困難,建立氣腹,腹腔鏡直視下用3 mm無損傷鉗牽拉腸管,輔助復(fù)位。復(fù)位成功后檢查腸管。觀察是否有腸壁腸穿孔,腸壁淤血、漿膜破裂等情況。女性應(yīng)檢查輸卵管、卵巢的情況。復(fù)位成功后內(nèi)環(huán)體表投影1.5 mm切口行腹腔鏡內(nèi)環(huán)口高位結(jié)扎術(shù)。如果血運(yùn)欠佳可觀察15~30 min,若腸壁有局部壞死、漿膜破裂,在腹腔鏡下行腸壁修補(bǔ)。
5.2.2 嵌頓松解組
腹腔鏡輔助手法復(fù)位失敗,解除氣腹,選擇外環(huán)體表投影1.5 cm切口,切開皮膚,皮下,剪開腹外斜肌腱膜外環(huán),松解嵌頓成功。重新建立氣腹完成腹腔鏡下內(nèi)環(huán)口高位結(jié)扎,依次縫合腹股溝切口。
腹腔鏡下內(nèi)環(huán)口高位結(jié)扎:采用內(nèi)環(huán)口腹膜外荷包縫合,于患側(cè)內(nèi)環(huán)口體表投影處作一1.5 mm小切口,刺入帶線針,從內(nèi)環(huán)口內(nèi)側(cè)沿著腹膜外潛行做一半荷包,操作鉗輔助穿刺過輸精管及精索血管,刺入腹腔將絲線一端留于腹腔,退出帶線針,術(shù)中注意顯露并保護(hù)輸精管,女孩可縫合子宮圓韌帶。同一切口取線針穿刺沿內(nèi)環(huán)口的外側(cè)腹膜外潛行做另一半荷包,與內(nèi)側(cè)半荷包縫合腹腔出針點(diǎn)匯合,將先前留下的絲線一端帶出,于體外剪斷帶出的荷包縫線,使之變成2根縫線。分別于體外收緊結(jié)扎縫線于皮下。術(shù)中發(fā)現(xiàn)對(duì)側(cè)內(nèi)環(huán)口未閉者診斷隱匿疝,同時(shí)行內(nèi)環(huán)口結(jié)扎術(shù)。對(duì)于內(nèi)環(huán)口直徑超過2 cm巨大疝,采用雙荷包加縫臍內(nèi)側(cè)襞內(nèi)環(huán)口高位結(jié)扎處理,其中第二荷包縫合平面距離內(nèi)環(huán)口1~1.5 cm。
6.課題完成情況
6.1項(xiàng)目進(jìn)程及主要內(nèi)容
2011/2至2012/2 課題前期準(zhǔn)備,資料,文獻(xiàn)查閱,查新 2012/2至2012/6 課題設(shè)計(jì),制定手術(shù)操作規(guī)程,手術(shù)醫(yī)生,護(hù)士培訓(xùn)
2012/02至2014/02 項(xiàng)目具體實(shí)施階段,實(shí)施過程中不斷優(yōu)化,改進(jìn) 2013/12至2014/02 統(tǒng)計(jì)課題數(shù)據(jù),撰寫論文。
2014/02至2014/08 論文發(fā)表,技術(shù)工作總結(jié)、研究工作總結(jié)。本課題按照科研立項(xiàng)申請(qǐng)時(shí)所擬定的實(shí)施計(jì)劃,合理地完成了各個(gè)階段的主要工作,并在各階段取得了一定的成果。
6.2項(xiàng)目工作主要結(jié)果
我院2011年2月~2014年2月腹腔鏡手術(shù)治療嬰幼兒腹股溝斜疝866例,其中采用腹腔鏡手術(shù)急診治療嬰幼兒腹股溝嵌頓性斜疝62例,占比7.2%。課題入組病例均順利完成腹腔鏡手術(shù),62例均順利完成腹腔鏡手術(shù),腹腔鏡輔助成功復(fù)位49例,復(fù)位不成功需要嵌頓松解13例,2組情況見表1、2。術(shù)中復(fù)位后發(fā)現(xiàn)腸管漿膜損傷2例,予以腹腔鏡下腸管漿肌層縫合修補(bǔ)。術(shù)中無輸精管、精索血管損傷,術(shù)后無陰囊血腫、切口感染等并發(fā)癥發(fā)生。麻醉清醒后根據(jù)術(shù)中腸管血運(yùn)情況指導(dǎo)飲食,次日恢復(fù)活動(dòng)。62例隨訪2~24個(gè)月,平均14個(gè)月,術(shù)后無睪丸萎縮、醫(yī)源性隱睪、切口疝等并發(fā)癥,術(shù)后4個(gè)月復(fù)發(fā)1例,復(fù)發(fā)率1.6%,為早期巨大疝(內(nèi)環(huán)口超過2 cm),術(shù)后半年再次腹腔鏡手術(shù)治愈,2例腹股溝線結(jié)炎癥反應(yīng),局部處理,3個(gè)月后清除線結(jié)后愈合。
7.課題成果
7.1.腹腔鏡治療小兒嵌頓性腹股溝斜疝與傳統(tǒng)的開放手術(shù)相比,具有下述優(yōu)點(diǎn):
?術(shù)中不需游離精索,不破壞腹股溝管解剖結(jié)構(gòu),輸精管及精索血管、神經(jīng)不會(huì)受到損傷,因而術(shù)后出現(xiàn)陰囊血腫和醫(yī)源性隱睪、輸精管損傷等并發(fā)癥明顯減少,本組無一例出現(xiàn)上述并發(fā)癥。
?全麻后手法復(fù)位及腹腔鏡監(jiān)視下無損傷鉗輔助復(fù)位成功率高。
?開放手術(shù)中嵌頓腸管可自行復(fù)位入腹腔或形成“W”形疝,再檢查嵌頓腸管困難,造成壞死腸管遺漏腹腔,造成嚴(yán)重后果。腹腔鏡可以完整觀察嵌頓腸管血運(yùn)情況,也可避免逆行性嵌頓疝導(dǎo)致腸壞死的漏診。
④腹腔鏡疝囊內(nèi)環(huán)口結(jié)扎,腹膜后縫合無間隙,因此術(shù)后復(fù)發(fā)率低。⑤腹腔鏡手術(shù)切口美容效果確切。
⑥腹腔鏡手術(shù)可診斷對(duì)側(cè)有無隱匿疝,并在不增加切口情況下完成雙側(cè)內(nèi)環(huán)口結(jié)扎,避免患兒二次手術(shù)的痛苦。
7.2 腹腔鏡技術(shù)應(yīng)用于小兒腹股溝嵌頓性斜疝應(yīng)注意以下幾個(gè)方面: ?腹腔鏡進(jìn)鏡首先明確嵌頓腸管血運(yùn)情況,排除壞死穿孔,退鏡解除氣腹壓力下手法復(fù)位。解除氣腹后可以避免較高的腹內(nèi)壓對(duì)抗和阻礙腸管回納腹腔,復(fù)位成功率高。
?腹腔鏡輔助復(fù)位,應(yīng)使用無損傷鉗順著腹股溝管縱軸方向小心、持續(xù)牽拉結(jié)合手法復(fù)位,切忌粗暴運(yùn)用分離鉗提拉腸管,容易損傷腸壁,嚴(yán)重時(shí)導(dǎo)致腸管醫(yī)源性穿孔的可能。
?目前,國內(nèi)多篇腹腔鏡疝囊高位結(jié)扎聯(lián)合臍皺壁覆蓋內(nèi)環(huán)口治療小兒腹股溝斜疝的報(bào)告。我們對(duì)于內(nèi)環(huán)口超過2 cm巨大疝,采用雙荷包加縫臍內(nèi)側(cè)襞內(nèi)環(huán)口高位結(jié)扎處理,無一例復(fù)發(fā)。本組復(fù)發(fā)1例為早期巨大疝病例采用單荷包縫合內(nèi)環(huán)口。
④對(duì)于腹腔鏡輔助手法復(fù)位困難者,可在下腹做一1.5 cm切口,經(jīng)此切口剪開腹外斜肌腱膜,松解外環(huán),手法復(fù)位,本組13例松解復(fù)位成功,手術(shù)中不需要游離精索,復(fù)位后建立氣腹腹腔鏡下內(nèi)環(huán)口高位結(jié)扎。
⑤術(shù)中一旦發(fā)現(xiàn)腸管壞死穿孔則應(yīng)及時(shí)中轉(zhuǎn)開腹手術(shù)。7.3.1 腹腔鏡手術(shù)治療小兒腹股溝嵌頓性斜疝適應(yīng)癥:
小兒腹股溝嵌頓性斜疝診斷明確,手法復(fù)位失敗,或臨床不具備復(fù)位指征,有急診手術(shù)指征(嵌頓時(shí)間超過12 h,臨床判斷不能復(fù)位或手法復(fù)位失?。?,無嚴(yán)重心肺疾病等腹腔鏡手術(shù)禁忌,排除腸壞死及絞窄疝。
7.3.2腹腔鏡手術(shù)治療小兒腹股溝嵌頓性斜疝禁忌癥:
?術(shù)前通過臨床表現(xiàn)、腹部立位片等檢查明確腸管絞窄壞死穿孔; ?嵌頓時(shí)間超過24 h,患兒一般情況差,或嵌頓時(shí)間超過12 h伴有休克,短期擴(kuò)容后不能糾正;
?有其他合并癥,不能耐受氣腹的; ④嵌頓疝合并隱睪者。
7.4 目前該課題完成相關(guān)論文三篇,《嬰幼兒腹股溝斜疝腹腔鏡手術(shù)328 例臨床應(yīng)用》2012年7月發(fā)表于《齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)》
《腹腔鏡手術(shù)治療嬰幼兒腹股溝嵌頓性斜疝62例》擬于2014.09發(fā)表于《中國微創(chuàng)外科雜志》
《腹腔鏡技術(shù)在小兒腹股溝斜疝嵌頓中臨床應(yīng)用評(píng)價(jià)》論文摘要在2013廣東省小兒外科年會(huì)上被錄用,并在會(huì)上交流
8.課題研究存在的主要問題及今后的設(shè)想
1)對(duì)于腹腔鏡技術(shù)是否能夠取代常規(guī)開放手術(shù)應(yīng)用于小兒腹股溝嵌頓性斜疝,還有待進(jìn)一步研究探討證實(shí)。
2)小兒腹腔鏡手術(shù)對(duì)手術(shù)醫(yī)師技術(shù)要求高,加強(qiáng)小兒外科年輕醫(yī)師腹腔鏡再培訓(xùn),逐步擴(kuò)大可以勝任完成手術(shù)的小兒外科醫(yī)師。
3)腹腔鏡技術(shù)在我院小兒外科已常規(guī)應(yīng)用于小兒腹股溝嵌頓性斜疝治療,取得明顯效果,如果能夠在東莞市其他醫(yī)院或省內(nèi)其他醫(yī)院推廣,將有重要的社會(huì)意義。加強(qiáng)宣傳推廣,為社會(huì)做更大貢獻(xiàn)。
項(xiàng)目工作組 2014-8-8
第二篇:臨床護(hù)理路徑在腹股溝疝的應(yīng)用分析
【摘要】目的 探討臨床護(hù)理路徑在腹股溝疝的應(yīng)用效果。方法 選擇住院腹股溝疝患者60例,隨機(jī)分為臨床路徑組和對(duì)照組各30例,臨床路徑組按制訂好的護(hù)理路徑表進(jìn)行護(hù)理,對(duì)照組采用常規(guī)護(hù)理方法,對(duì)兩組患者的住院天數(shù)、住院費(fèi)用、并發(fā)癥發(fā)生率及護(hù)理質(zhì)量滿意度等對(duì)比。結(jié)果 臨床路徑組平均住院天數(shù)、平均住院費(fèi)用、護(hù)理質(zhì)量滿意度優(yōu)于對(duì)照組,臨床路徑組患者并發(fā)癥發(fā)生率低于對(duì)照組,二者比較,p
【關(guān)鍵詞】腹股溝疝;臨床路徑;護(hù)理
【中圖分類號(hào)】r47 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】a 【文章編號(hào)】1671-8801(2016)03-0106-01
臨床護(hù)理路徑(cnp)是指依據(jù)每日標(biāo)準(zhǔn)護(hù)理計(jì)劃,為一類特殊病人所設(shè)定的住院期間的工作路線圖或表格[1],是一種先進(jìn)的護(hù)理管理模式,它的功能是用圖表的形式提供有時(shí)間和有效的照顧,使診療、護(hù)理有序,減少漏項(xiàng),提高質(zhì)量[2]。為規(guī)范工作流程,提高工作效率,2013年09月~2015年12月在我院行腹股溝疝手術(shù)的患者中實(shí)施臨床路徑護(hù)理,取得了滿意的效果,現(xiàn)報(bào)道如下:
1資料與方法歲
1.1一般資料:本組60例患者均經(jīng)臨床確診為腹股溝疝患者,符合手術(shù)適宜征。入院后隨機(jī)分為臨床路徑組和對(duì)照組各30例。臨床路徑組中男18例,女性12例,年齡31~79歲,平均(47.,5±13.5)歲;對(duì)照組中男16例,女性14例,年齡33~78歲,平均(46.,5±14.5)歲。兩組患者在年齡、性別及病變程度上差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05),具有可比性。
1.2方法 兩組均以優(yōu)質(zhì)護(hù)理為基礎(chǔ),對(duì)照組按常規(guī)護(hù)理,臨床路徑組自入院開始就進(jìn)入臨床護(hù)理路徑,按制訂好的路徑進(jìn)行護(hù)理。
1.2.1入院當(dāng)日:①入院宣教[3]。說明病房環(huán)境和管理制度,介紹主管護(hù)士和主管醫(yī)生:②入院評(píng)估,監(jiān)測(cè)生命體征,了解患者病史;③進(jìn)行心理評(píng)估和心理護(hù)理,消除恐懼感和陌生感:④講解各種檢查的必要性及檢查的注意事項(xiàng),主動(dòng)配合完善術(shù)前相關(guān)輔助檢查。
1.2.2入院2-3天:①術(shù)前護(hù)理:進(jìn)行備皮、藥物過敏試驗(yàn),術(shù)前宣教及物品準(zhǔn)備;評(píng)估患者的心理狀況,進(jìn)行心理護(hù)理:講解手術(shù)方式及過程消除患者對(duì)手術(shù)的恐懼,以最好的狀態(tài)迎接手術(shù);遵醫(yī)囑給予術(shù)前用藥。②術(shù)后護(hù)理:迎接患者安返病房,吸氧,心電監(jiān)護(hù)觀察患者的生命體征、胃腸道反應(yīng)、麻醉副反應(yīng)。麻醉清醒后采取平臥屈膝位,以松弛腹股溝切口的張力,減輕患者切口疼痛感,防止疝修補(bǔ)處組織裂開;指導(dǎo)患者術(shù)后6-12小時(shí)若無不適可進(jìn)流食,次日進(jìn)軟食或普食;觀察切口敷料情況;進(jìn)行心理護(hù)理,協(xié)助生活護(hù)理,加強(qiáng)夜間巡視。
1.2.3住院第3-4天(術(shù)后1天):①觀察切口敷料情況,傷口有無感染征兆。告知患者注意保暖,咳嗽時(shí)用手掌按壓、保護(hù)切口。②飲食指導(dǎo):行腸切除吻合術(shù)的患者,腸蠕動(dòng)功能恢復(fù)后進(jìn)流食,逐漸過渡到半流質(zhì)、普食。③活動(dòng)指導(dǎo):平臥3日,主動(dòng)或被動(dòng)活動(dòng)下肢,防止深靜脈血栓形成。3天后下床活動(dòng),無張力疝修補(bǔ)術(shù)鼓勵(lì)早期活動(dòng)。④進(jìn)行心理護(hù)理,協(xié)助生活護(hù)理,加強(qiáng)夜間巡視。
1.2.4住院第4-5天(術(shù)后2天):繼續(xù)給予術(shù)后第一天護(hù)理措施。
1.2.5出院日:①告知出院流程,完成相關(guān)出院手續(xù);②出院指導(dǎo),告知患者出院后半年內(nèi)避免重體力勞動(dòng),多食粗纖維食物,保持大便通暢;避免咳嗽、打噴嚏致腹壓升高導(dǎo)致疾病復(fù)發(fā)。
1.2.6出院后回訪:①回訪時(shí)間:出院后3d、7d、1個(gè)月及3個(gè)月;②回訪內(nèi)容:飲食、切口、活動(dòng)、遵醫(yī)囑情況、有無復(fù)發(fā)等;③回訪內(nèi)容歸檔。
1.3評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn):①住院天數(shù):實(shí)際住院天數(shù);②住院費(fèi)用:住院期間的費(fèi)用(疝補(bǔ)片等耗材除外);③并發(fā)癥發(fā)生率:有無切口感染、尿潴留并發(fā)癥發(fā)生及發(fā)生率;④患者滿意度:采用我院出院患者滿意度調(diào)查表。
第三篇:兒科臨床論文:小切口日間手術(shù)治療小兒腹股溝斜疝804例分析
兒科臨床論文:
小切口日間手術(shù)治療小兒腹股溝斜疝804例分析
【摘要】 目的總結(jié)小切口日間手術(shù)治療小兒腹股溝斜疝手術(shù)技巧與經(jīng)驗(yàn)。方法對(duì)本院小切口日間手術(shù)治療小兒腹股溝斜疝804例手術(shù)資料進(jìn)行回顧性分析。結(jié)果804例患者采用該術(shù)式順利完成手術(shù),手術(shù)時(shí)間15~30 min,平均20 min;所有病例24 h內(nèi)出院,術(shù)后復(fù)發(fā)11例,占1.35%;陰囊血腫1例,隨訪未見遠(yuǎn)期并發(fā)癥。結(jié)論日間手術(shù)作為一個(gè)平臺(tái),具有顯著的優(yōu)點(diǎn)。對(duì)我國來講,不但可以節(jié)約巨大的醫(yī)療資源,其優(yōu)點(diǎn)也符合當(dāng)前醫(yī)療改革的目標(biāo),將來一定會(huì)得到長遠(yuǎn)的發(fā)展。
【關(guān)鍵詞】
小切口;日間手術(shù);小兒腹股溝斜疝
我院自2000年2月至2009年10月,應(yīng)用小切口日間手術(shù)模式,治療小兒腹股溝斜疝804例取得較好臨床效果,現(xiàn)報(bào)告如下。資料和方法
1.1 一般資料 本組患者共804例,其中男621例,女183例,年齡2個(gè)月~8歲,雙側(cè)174例,復(fù)發(fā)疝86例,單側(cè)554例。手術(shù)患者均檢查以下各項(xiàng):①血、尿、便常規(guī);②出凝血時(shí)間;③電解質(zhì)(鉀、鈉、氯,必要時(shí)查鈣);④胸部X線透視或攝片;⑤心電圖;⑥肝、腎功能。各項(xiàng)化驗(yàn)檢查均應(yīng)在手術(shù)前1~3 d或術(shù)當(dāng)日完成。
1.2 手術(shù)方法 采用基礎(chǔ)麻醉或基礎(chǔ)麻醉+骶叢麻醉。常規(guī)消毒鋪巾,于患側(cè)恥骨結(jié)節(jié)外上方做一約1~1.5 cm橫切口,年齡<4歲不切開腹股溝管,切開皮膚,皮下組織,切開提睪肌,尋找、分出疝囊,高位游離疝囊至暴露腹膜前脂肪。7號(hào)絲線貫穿縫扎,4號(hào)線結(jié)扎加固。仔細(xì)止血,檢查無出血,回拉睪丸,放回精索。外環(huán)口過大時(shí)在切時(shí)保護(hù)精索條件下用4號(hào)絲線縮緊外環(huán)1~2針。皮內(nèi)縫合切口。 結(jié)果
術(shù)后立即非甾體抗炎藥減輕術(shù)后疼痛。麻醉清醒或術(shù)后4 h,飲用富含碳水化合物的飲料。所有病例24 h內(nèi)出院,出院標(biāo)準(zhǔn):①生命體征平穩(wěn);②患者必須無惡心、嘔吐,無劇烈疼痛,無出血;③患者必須由麻醉和手術(shù)醫(yī)生共同簽字同意出院,并告知術(shù)后回家期間注意事項(xiàng)及需要幫助時(shí)的聯(lián)系人;④患者必須由有負(fù)責(zé)能力的成人護(hù)送并在家中照看。
手術(shù)時(shí)間15~30 min,平均20 min;術(shù)后復(fù)發(fā)11例,占1.25%;陰囊血腫1例,再次手術(shù)止血。 討論
小兒腹股溝斜疝幾乎均為先天性,為鞘狀突未閉所致。右側(cè)多以左側(cè),腹壓增高是疝的誘發(fā)因素,小兒腹股溝管很短,約1 cm幾乎垂直地從內(nèi)環(huán)通向外環(huán)。腹壓增高時(shí),沖力直接指向腹壁皮下,沒有斜行腹股溝管的緩沖,制約作用因而多仰臥位,兩髖常屈,外旋,外展使腹肌松弛,收縮力下降,所以嬰兒期很容易發(fā)生疝。
手術(shù)年齡:由于本病基本上為先天性,故原則上在小兒出生后任何時(shí)期均可進(jìn)行選擇性手術(shù)治療。一般在1歲左右手術(shù)為宜[1]。屢發(fā)嵌頓者則提前手術(shù)。
嬰幼兒斜疝基本上為先天性且外環(huán)口不大,約在0.5~0.8 cm,所以通常只需單純行高位結(jié)扎術(shù)或輔以外環(huán)口緊縮術(shù),僅在巨大疝(疝內(nèi)容物多,外環(huán)口在1.2~1.5 cm以上)或滑疝時(shí)可能行疝修補(bǔ)術(shù)。外環(huán)口直徑大于1.0~1.2 cm時(shí)在切時(shí)保護(hù)精索條件下用4號(hào)絲線縮緊外環(huán)1~2針。對(duì)2歲以內(nèi)的嬰幼兒,不必切開腹外斜肌腱膜,僅在外環(huán)外稍加牽引即可剝離疝囊致頸部。
[ambulatory(day)surgery]
日間手術(shù)是指選擇一定適應(yīng)證的患者,在1個(gè)工作日內(nèi)安排患者的住院、手術(shù)、手術(shù)后短暫觀察、恢復(fù)(一般數(shù)小時(shí))和辦理出院,患者不在醫(yī)院過夜。國際日間手術(shù)學(xué)
會(huì)(international Association for ambulatory surgery,IAAS)2003年提議,將日間手術(shù)定義為:患者入院、手術(shù)和出院在1個(gè)工作日中完成的手術(shù),除外在醫(yī)師診所或醫(yī)院開展的門診手術(shù)[2]。
我們?cè)卺t(yī)院外科內(nèi)劃分出部分病床作為日間手術(shù)區(qū),統(tǒng)一管理,做好術(shù)前護(hù)理、術(shù)后護(hù)理及隨訪,并保證24 h急救體制。日間手術(shù)的優(yōu)點(diǎn):①縮短住院等候時(shí)間和治療時(shí)間,使更多的患者得到治療;②醫(yī)院獲得性感染的機(jī)會(huì)降低;③降低了醫(yī)療費(fèi)用:住院時(shí)間減少和醫(yī)源性感染的避免在很大程度上減少了患者的治療費(fèi)用支出;④患者治療后可以早期返回正常生活環(huán)境。更重要的是,日間手術(shù)改變了醫(yī)療方式,使很多變化成為可能,并且隨著技術(shù)的進(jìn)步,這種變化可能還會(huì)增加。外科微創(chuàng)手術(shù)和麻醉學(xué)科的進(jìn)步為這種治療模式提供了技術(shù)保障和可行性。日間手術(shù)的缺點(diǎn)是當(dāng)患者離院后,出現(xiàn)術(shù)后并發(fā)癥,又沒能被及時(shí)發(fā)現(xiàn)和處理時(shí),醫(yī)院和醫(yī)師所要承擔(dān)的醫(yī)療風(fēng)險(xiǎn)明顯加大。
目前,在美國日間手術(shù)占所有外科手術(shù)的83.5%。在英國,2003年已達(dá)到62.5%。在香港,2003年日間手術(shù)占所有外科手術(shù)的比例為42.5%。日間手術(shù)已超過1 000種,幾乎涵蓋所有相關(guān)科室。在國內(nèi)未廣泛地開展。國內(nèi)住院費(fèi)用較低,日間手術(shù)節(jié)約醫(yī)療費(fèi)用的優(yōu)越性還不太明顯,可能是國內(nèi)對(duì)開展日間手術(shù)不夠積極的原因之一。另外,醫(yī)療機(jī)構(gòu)本身對(duì)日間手術(shù)的態(tài)度、對(duì)院外護(hù)理質(zhì)量的擔(dān)憂、麻醉科和不同手術(shù)科室的協(xié)作,以及醫(yī)療和法律環(huán)境的好壞,都是目前影響日間手術(shù)發(fā)展的因素。
日間手術(shù)不是傳統(tǒng)的門診手術(shù),也不是住院手術(shù)的簡(jiǎn)單形式。間手術(shù)作為一個(gè)平臺(tái),許多臨床研究將產(chǎn)生于這一領(lǐng)域。仍有許多問題擺在我們面前。從長遠(yuǎn)看日間手術(shù)具有顯著的優(yōu)點(diǎn),不但治得好,還治得快。對(duì)我國來講,不但可以節(jié)約巨大的醫(yī)療資源,其優(yōu)點(diǎn)也符合當(dāng)前醫(yī)療改革的目標(biāo),將來一定會(huì)得到長足的發(fā)展。
參 考 文 獻(xiàn)
[1]葉秦秦.嬰幼兒腹股溝斜疝手術(shù)應(yīng)注意的問題.中國實(shí)用外科雜志,2001,21(2):7677.
[2] 安燚,王振軍.日間手術(shù)的概念和基本問題.中國實(shí)用外科雜志,2007,27(1):3840.
第四篇:臨床護(hù)理路徑干預(yù)在腹股溝疝腹腔鏡完全腹膜外疝修補(bǔ)術(shù)后患者中的效果
臨床護(hù)理路徑干預(yù)在腹股溝疝腹腔鏡完全腹膜外疝修補(bǔ)術(shù)
后患者中的效果
[摘要]目的 探?臨床護(hù)理路徑在腹股溝疝腹腔鏡完全腹膜外疝修補(bǔ)術(shù)(TEP)患者中的效果。方法 選取2015年6月~2016年12月我院收治的腹股溝疝患者82例,隨機(jī)分為觀察組與對(duì)照組,各41例。所有患者采取TEP治療,對(duì)照組采取常規(guī)護(hù)理,觀察組采取臨床護(hù)理路徑干預(yù)。比較兩組患者術(shù)后排氣時(shí)間、下床活動(dòng)時(shí)間、術(shù)后住院時(shí)間、術(shù)后恢復(fù)時(shí)間、并發(fā)癥、護(hù)理滿意度及血清中CRP水平。結(jié)果 觀察組的術(shù)后排氣時(shí)間、下床活動(dòng)時(shí)間、術(shù)后住院時(shí)間以及術(shù)后恢復(fù)時(shí)間均短于對(duì)照組,并發(fā)癥發(fā)生率低于對(duì)照組,護(hù)理滿意度高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);術(shù)后12、24 h兩組患者的血清中CRP水平有所提高,與術(shù)前比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);但觀察組水平低于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。結(jié)論 臨床護(hù)理路徑可縮短腹股溝疝TEP患者術(shù)后排氣時(shí)間、術(shù)后下床時(shí)間、術(shù)后住院時(shí)間以及術(shù)后恢復(fù)時(shí)間,減少并發(fā)癥,提高患者的滿意度,降低血清CRP水平。
[關(guān)鍵詞]臨床護(hù)理路徑;腹腔鏡;完全腹膜外疝修補(bǔ)術(shù);腹股溝疝
[中圖分類號(hào)] R473.6 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-4721(2017)09(a)-0179-04
Efficacy of clinical nursing pathway on inguinal hernia patients with laparoscopic total peritoneal hernia repair
FAN Yue-xiu LIAO Qiu-mei FAN Hui-qin HU Xian-yan
Department of Gastroenterology,F(xiàn)ogang County People′s Hospital in Guangdong Province,F(xiàn)ogang 511600,China
[Abstract]Objective To investigate efficacy of clinical nursing pathway on inguinal hernia patients with laparoscopic total peritoneal hernia repair(TEP),and the influence on serum level of C-reactive protein(CRP).Methods 82 patients with inguinal hernia in our hospital from June 2015 to December 2016 were selected and randomly divided into the control group and the observation group,with 41 cases in each group,all cases were treated with TEP.The control group was given with routine nursing care,while the observation group was given clinical nursing pathway.The postoperative exhaust time,off-bed activity time,length of hospital stays,postoperative recovery time,complication,nursing satisfaction and serum CRP were compared between two groups.Results The postoperative exhaust time,off-bed activity time,length of hospital stays and postoperative recovery time in the observation group were shorter than those in the control group,the incidence of complication was lower than that in the control group,and the differences were statistically significant(P0.05);12,24 h after operation,the level of serum CRP in two groups were all increased,and compared with those before operation,the differences were statistically significant(P
[Key words]Clinical nursing pathway;Laparoscopic;Total peritoneal hernia repair;Inguinal hernia
臨床護(hù)理路徑是針對(duì)特定患群的一種住院護(hù)理模式,以時(shí)間為橫軸,以入院指導(dǎo)、接診時(shí)診斷、檢查、用藥、護(hù)理、治療、活動(dòng)、飲食指導(dǎo)、教育以及出院指導(dǎo)等為縱軸,根據(jù)需要給予相應(yīng)干預(yù)措施,為患者提供一套系統(tǒng)、標(biāo)準(zhǔn)、連續(xù)且針對(duì)性強(qiáng)的護(hù)理措施,增強(qiáng)患者自我護(hù)理意識(shí)和能力,利于患者康復(fù)[1-2]。腹股溝疝是普外科常見疾病之一,調(diào)查顯示其發(fā)病率約為3.6%[3]。Meta分析顯示,在腹股溝疝修補(bǔ)術(shù)臨床護(hù)理中,臨床護(hù)理路徑獲得的效果明顯優(yōu)于常規(guī)護(hù)理[4]。本組研究選取接受腹股溝疝完全腹膜外疝修補(bǔ)術(shù)(TEP)的患者,應(yīng)用臨床護(hù)理路徑護(hù)理和常規(guī)護(hù)理進(jìn)行隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)研究,取得了滿意的效果,現(xiàn)報(bào)道如下。
1資料與方法
1.1一般資料
收集2015年6月~2016年12月在本院住院并擬行TEP的腹股溝疝患者82例,隨機(jī)分為觀察組與對(duì)照組,各41例。對(duì)照組男25例,女16例;年齡57~68歲,平均(60.62±8.85)歲;體重62~66 kg,平均(64.17±8.05)kg;類型:直疝11例,斜疝30例;位置:左側(cè)疝17例,右側(cè)疝15例,雙側(cè)疝9例。觀察組男27例,女14例;年齡58~69歲,平均(60.33±8.71)歲;體重:61~67 kg,平均(63.83±8.12)kg;類型:直疝10例,斜疝31例;位置:左側(cè)疝16例,右側(cè)疝16例,雙側(cè)疝9例。兩組患者臨床資料比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。本研究得到本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。
1.2診斷標(biāo)準(zhǔn)
根據(jù)《成人腹股溝疝診療指南(2014年版)》[5]制定。
1.3納入與排除標(biāo)準(zhǔn)
納入標(biāo)準(zhǔn):①符合腹股溝疝及相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)者;②年齡20~70歲;③首次發(fā)生腹股溝疝者;④患者或患者家屬知情,且簽署同意協(xié)議者。排除標(biāo)準(zhǔn):①伴心、肝、腎等嚴(yán)重功能不全者;②精神病者;③急診手術(shù)者;④依從性差者。
1.4治療方法
1.4.1 TEP 常規(guī)全身麻醉,臍下做―個(gè)長約1.5 cm的縱行切口,在腹直肌前鞘的中間位置縱行切開,逐步分離至腹直肌后鞘,再分離腹直肌后鞘間隙;建立人工氣腹,置入Trocar和腹腔鏡,推鏡法游離腹膜外間隙直達(dá)恥骨聯(lián)合,在臍與恥骨聯(lián)合間處置入5 mm Trocar;分離髂窩間隙(Brogos間隙)和恥骨膀胱間隙(Retzius間隙),顯露恥骨梳韌帶、恥骨結(jié)節(jié)等,斜疝鈍性將疝囊從精索分離,直疝將疝囊和腹壁剝離,用5 mm Hemlok夾閉后橫斷疝囊,自內(nèi)環(huán)口及其后方的精索血管和輸精管分離5~6 cm,使精索完全腹壁化;常規(guī)置入巴德3D補(bǔ)片,將內(nèi)環(huán)口和直疝三角覆蓋后逐層關(guān)閉腹腔。
1.4.2對(duì)照組 采取常規(guī)護(hù)理。術(shù)前囑患者清淡飲食、禁食、禁飲,術(shù)前晚清理腸道。術(shù)前至少戒煙2周,對(duì)已出現(xiàn)者應(yīng)給予針對(duì)性干預(yù)措施。囑患者清潔身體,尤其是臍部清潔,術(shù)前30 min 常規(guī)備皮。術(shù)后頭偏向一側(cè),去枕平臥6 h,低流量持續(xù)吸氧,術(shù)后6 h內(nèi)禁食,術(shù)后6 h后予流食,術(shù)后2 d后逐漸正常飲食。對(duì)術(shù)后出現(xiàn)便秘、疼痛等并發(fā)癥者給予相應(yīng)護(hù)理,并針對(duì)性處理。在整個(gè)圍術(shù)期,護(hù)理人員需全程監(jiān)測(cè),做好記錄,尤其對(duì)切口是否出現(xiàn)不良反應(yīng)等。
1.4.3觀察組 采取臨床護(hù)理路徑進(jìn)行干預(yù)[6]。①術(shù)前。對(duì)患者行入院評(píng)估,遵醫(yī)囑予以相應(yīng)級(jí)別護(hù)理;發(fā)放疾病健康手冊(cè),使患者了解診治和手術(shù)方式;對(duì)患者進(jìn)行心理干預(yù),建立良好醫(yī)護(hù)患關(guān)系,使患者積極配合治療,增強(qiáng)信心;按醫(yī)囑完善各項(xiàng)術(shù)前檢查和手術(shù)準(zhǔn)備;術(shù)前1 d根據(jù)手術(shù)通知單行術(shù)前訪視,全面評(píng)估患者的心理、生理狀態(tài),講述手術(shù)配合注意事項(xiàng)等;解答患者提出的疑問或反饋給醫(yī)生。②術(shù)中。調(diào)整手術(shù)室溫度為22~25℃和濕度為50%~60%;安慰和鼓勵(lì)患者,以緩解其不安、焦慮等不良心理;根據(jù)手術(shù)情況保持患者舒適體位,全麻后注意保護(hù)雙眼。③術(shù)后。用溫鹽水擦拭皮膚、穿衣等,取低枕平臥位,術(shù)后6 h半坐臥位,適當(dāng)進(jìn)食、下床活動(dòng);密切觀察切口癥狀如出血、感染等,及時(shí)報(bào)告醫(yī)生、進(jìn)行對(duì)癥處理;對(duì)患者進(jìn)行疾病相關(guān)宣教,耐心解答患者的問題,鼓勵(lì)其早期恢復(fù)鍛煉、防止下肢深靜脈栓塞等并發(fā)癥。④出院指導(dǎo)。囑患者出院后注意切口護(hù)理,盡量減少出汗和避免沾水,出?F不適應(yīng)立即就診;囑患者注意休息,保持大便通暢。
1.5觀察指標(biāo)
兩組治療3周后進(jìn)行檢測(cè)指標(biāo)和療效分析。①觀察兩組術(shù)后排氣時(shí)間、下床活動(dòng)時(shí)間、術(shù)后住院時(shí)間以及術(shù)后恢復(fù)時(shí)間。②觀察兩組術(shù)后并發(fā)癥發(fā)生情況。③兩組護(hù)理工作的滿意度。參照相關(guān)文獻(xiàn)[7]自擬《護(hù)理質(zhì)量滿意度調(diào)查表》,采取問卷調(diào)查形式對(duì)護(hù)理人員的服務(wù)態(tài)度、愛傷觀念、護(hù)理操作水平、解釋的合理性、基礎(chǔ)護(hù)理、健康教育等問題進(jìn)行評(píng)分,每個(gè)問題按非常滿意、滿意、可以接受、不滿意4級(jí)評(píng)分,滿分100分。非常滿意為100分,滿意為≥80分,可以接受為50~79分,不滿意為<50分,滿意度=(非常滿意+滿意)例數(shù)/總例數(shù)×100%。④兩組血清中C-反應(yīng)蛋白(CRP)水平。樣本采集:晨起抽取患者的外周血,室溫內(nèi)離心取血清,-20℃儲(chǔ)存?zhèn)錅y(cè);采取酶聯(lián)免疫吸附法(Elisa)于術(shù)前及術(shù)后12 h、24 h測(cè)定。⑤療效評(píng)判。根據(jù)《婦科疾病診斷與療效標(biāo)準(zhǔn)》[6]制定。痊愈:陰道流血等癥狀完全消除,基礎(chǔ)體溫維持在黃體期水平,B超提示胚胎發(fā)育正常,妊娠達(dá)28周以上或已正常分娩。有效:陰道出血等癥狀明顯好轉(zhuǎn),基礎(chǔ)體溫維持黃體期水平,B超提示胚胎發(fā)育正常。無效:陰道出血等癥狀無好轉(zhuǎn),甚或加重,基礎(chǔ)體溫波動(dòng)較大,B超提示胚胎發(fā)育異?;蛲V拱l(fā)育??傆行?(痊愈+有效)例數(shù)/總例數(shù)×100%。
1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,計(jì)量資料數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,兩組間比較采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料用率表示,組間比較采用χ2檢驗(yàn),以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2結(jié)果
2.1兩組患者術(shù)后指標(biāo)的比較
觀察組的術(shù)后排氣時(shí)間、下床活動(dòng)時(shí)間、術(shù)后住院時(shí)間以及術(shù)后恢復(fù)時(shí)間均短于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)(表1)。
2.2兩組患者術(shù)后并發(fā)癥的比較
觀察組并發(fā)癥發(fā)生率低于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(表2)。
2.3兩組患者護(hù)理滿意度的比較
觀察組患者護(hù)理滿意度高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)(表3)。
2.4兩組患者血清中CRP水平的比較
術(shù)前,兩組患者血清中CRP水平比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);術(shù)后12、24 h兩組患者的血清中CRP水平有所提高,與術(shù)前比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);但觀察組水平均低于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)(表4)。
表4 兩組血清中CRP水平的比較(mg/L,x±s)
與同組術(shù)前比較,aP<0.01;與對(duì)照組術(shù)后同時(shí)點(diǎn)比較,bP<0.01
3討論
腹股溝疝是臨床普外科常見病,治療不及時(shí)易導(dǎo)致多種并發(fā)癥,對(duì)患者的生命產(chǎn)生威脅[8]。目前,臨床治療腹股溝疝最有效的方法是手術(shù),包括傳統(tǒng)開放術(shù)、無張力疝修補(bǔ)術(shù)以及腹腔鏡疝修補(bǔ)術(shù)[9-10]。臨床實(shí)踐顯示,腹腔鏡疝修補(bǔ)術(shù)是腹股溝疝常用術(shù)式,具有手術(shù)時(shí)間短、創(chuàng)傷小、術(shù)后疼痛輕及恢復(fù)快等優(yōu)點(diǎn),其中TEP的技術(shù)路線合理性更佳、療效更好,已成為當(dāng)前腹股溝疝的首選手術(shù)療法[11]。然而,常規(guī)腹股溝疝TEP術(shù)后患者易合并多種并發(fā)癥,如血腫、慢性疼痛不適及少數(shù)血管和內(nèi)臟損傷等[12]。
臨床護(hù)理路徑是依據(jù)特定患者群體而設(shè)定的一種新的診療護(hù)理模式[13]。該護(hù)理模式以時(shí)間為橫軸,以入院指導(dǎo)、診斷、用藥、日常護(hù)理、飲食指導(dǎo)以及出院計(jì)劃等為縱軸,使各項(xiàng)護(hù)理工作有序進(jìn)行,提高了護(hù)理的準(zhǔn)確性,促進(jìn)了患者術(shù)后的康復(fù)[14]。多項(xiàng)研究顯示[15-16],在腹股溝疝圍術(shù)期應(yīng)用臨床護(hù)理路徑,可縮短患者的平均住院時(shí)間和降低住院費(fèi)用,提高健康教育效果,進(jìn)而提高患者的滿意度,利于患者康復(fù)。
本組觀察了臨床護(hù)理路徑在腹股溝疝TEP中的應(yīng)用,結(jié)果顯示觀察組的術(shù)后排氣時(shí)間、下床活動(dòng)時(shí)間、術(shù)后住院時(shí)間以及術(shù)后恢復(fù)時(shí)間均顯著短于對(duì)照組(P<0.01)。觀察組并發(fā)癥發(fā)生率明顯低于對(duì)照組(P<0.05)。觀察組患者的護(hù)理滿意度明顯高于對(duì)照組(P<0.05)。結(jié)合既往臨床研究報(bào)道,提示在腹股溝疝TEP中應(yīng)用臨床護(hù)理路徑通過預(yù)見性和計(jì)劃性的護(hù)理工作,保證了各項(xiàng)護(hù)理措施連續(xù)性和完整性,利于腹股溝疝TEP患者的康復(fù)。
CRP是肝細(xì)胞合成的急性反應(yīng)蛋白,體內(nèi)CRP水平可一定程度上反映人體的應(yīng)激反應(yīng)狀況。文獻(xiàn)報(bào)道人體血清中CRP水平與手術(shù)創(chuàng)傷程度呈正相關(guān),手術(shù)過程中患者血清中CRP水平在手術(shù)早期即有顯著變化,CRP伴損傷程度加重而釋放增多,隨損傷減弱而降低,可客觀反映手術(shù)對(duì)機(jī)體的損傷程度,故檢測(cè)血清中CRP水平可判定手術(shù)對(duì)組織損傷程度[17-18]。本研究結(jié)果顯示,術(shù)后12 h和24 h,觀察組血清中CRP水平明顯低于對(duì)照組同時(shí)點(diǎn)(P<0.01)。
綜上所述,臨床護(hù)理路徑可減少腹股溝疝TEP患者的損失,降低并發(fā)癥,促進(jìn)疾病康復(fù),值得臨床借鑒。由于本研究納入的患者數(shù)量較少,觀察時(shí)間較短,今后將進(jìn)一步對(duì)上述療效進(jìn)行探討。
[參考文獻(xiàn)]
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第五篇:PCR技術(shù)在臨床檢驗(yàn)中的應(yīng)用
PCR技術(shù)在臨床檢驗(yàn)中的應(yīng)用
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醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)大致可分為形態(tài)學(xué)、生物化學(xué)、血清免疫學(xué)和分子生物學(xué)幾大類,其分別代表幾代實(shí)驗(yàn)診斷技術(shù)。60年代DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)及半保留復(fù)制模式的出現(xiàn),70年代基因重組及體外基因克隆技術(shù)、分子雜交技術(shù)的應(yīng)用使分子生物學(xué)在疾病診斷中得到了長足的發(fā)展。特別是1985年Mullis發(fā)明了聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù),使醫(yī)學(xué)界真正興起了基因診斷技術(shù)熱,成為現(xiàn)代醫(yī)學(xué)發(fā)展的又一里程碑。用于臨床檢驗(yàn)的PCR技術(shù)與經(jīng)典的PCR反應(yīng)在操作上稍有區(qū)別,有其自己的特色。一般在樣品處理上,多采用非離子去污劑一次加熱處理,這種方法對(duì)DNA純化有限,但適應(yīng)臨床微量、快速的特點(diǎn)。另外PCR反應(yīng)體系中各組成成份往往都預(yù)分裝到反應(yīng)管中,既減少操作者的工作強(qiáng)度而且也減少了污染的機(jī)會(huì),具有極高的使用價(jià)值。本公司率先研制并推出單管單人份的PCR診斷試劑,具有開創(chuàng)性意義。這些改進(jìn)都不影響PCR效果,同樣表現(xiàn)出高特異性、高敏感性、簡(jiǎn)便快捷等PCR最優(yōu)秀的特征,在常見傳染病、性病、腫瘤、遺傳病、寄生蟲病、優(yōu)生優(yōu)育、法醫(yī)學(xué)等廣泛領(lǐng)域中有相當(dāng)高的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。
常見的傳染性疾病有細(xì)菌、病毒、衣原體、支原體等,可引起消化、呼吸、循環(huán)、泌尿生殖等不同系統(tǒng)相應(yīng)的病變。消化系統(tǒng)感染性疾病在我國具有代表性意義的有肝炎、胃炎及腸道感染性疾病。引起肝炎的病原體主要包括乙型肝炎病毒(乙肝)、丙型肝炎病毒(丙肝),其它還有甲型肝炎病毒(甲肝)、丁型肝炎病毒(丁肝)、戊型肝炎病毒(戊肝)、庚型肝炎病毒(庚肝)等。這幾種肝炎病毒中只有乙型肝炎病毒是DNA病毒,其余均為RNA病毒。我國是乙肝高發(fā)區(qū),乙肝病人為世界乙肝病人總數(shù)的50%。乙肝病毒經(jīng)血液傳播,病毒主要在肝細(xì)胞中增殖,也可以長期存留在骨髓細(xì)胞或外周血白細(xì)胞中。通常用PCR法檢測(cè)血清中的乙肝病毒。有報(bào)道用PCR法可以在淚液、乳汁、精液及血白細(xì)胞中檢出乙肝病毒,這些發(fā)現(xiàn)提示其它傳染途經(jīng)存在的可能。PCR法檢測(cè)乙肝的優(yōu)勢(shì)表現(xiàn)在:①早期診斷,因?yàn)镻CR擴(kuò)增極其敏感,理論上可檢出100CID/ml乙肝病毒的患者血清,在感染潛伏期即可被PCR法檢出。②對(duì)低持續(xù)感染乙肝病人的診斷,有些乙肝病人體內(nèi)的病毒長期低復(fù)制感染,血清病毒濃度極低,一般酶標(biāo)試劑無法檢出,可以用PCR法檢出。③療效跟蹤及病程判斷,因?yàn)镻CR能半定量檢測(cè)乙肝病毒基因,是病毒是否存在及其數(shù)量多少的最直接指標(biāo)。在治療過程中通過監(jiān)測(cè)血清或白細(xì)胞中病毒基因存在與否及其動(dòng)態(tài)變化即能準(zhǔn)確地了解病情。丙型肝炎病毒在血清中的濃度很低,丙肝病毒的分離尚未成功。目前用于丙肝病毒檢驗(yàn)的方法主要是ELISA法測(cè)定血清中的HCV抗體。由于HCV尚無法分離純化,所以用于包被的抗原是人工合成肽或基因工程蛋白,這些人工抗原與天然病毒抗原有一定的區(qū)別,理論上是存在假陽性或假陰性。同時(shí)血清中抗體的出現(xiàn)及動(dòng)態(tài)變化與病人病情無線性相關(guān)關(guān)系。RT-PCR技術(shù)使這些困難得到解決。HCV是RNA病毒,需先將病毒RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA(RT)后再進(jìn)行PCR擴(kuò)增,這種技術(shù)稱之為逆轉(zhuǎn)錄-PCR(RT-PCR)。PCR敏感性高可以檢測(cè)出血清中低濃度的病毒,了解病毒在體內(nèi)復(fù)制的動(dòng)態(tài)狀況。RNA純化要求嚴(yán)格,是RT-PCR的技術(shù)關(guān)鍵,本公司目前使用的高效基因釋放劑,聯(lián)合特異性固相基因吸附乳膠顆粒,對(duì)樣本中的RNA進(jìn)行分離純化,使這一問題得到解決。通常用于RNA→cDNA逆轉(zhuǎn)錄的酶大致可以分為二大類,即低溫逆轉(zhuǎn)錄酶,如AMV/MLV逆轉(zhuǎn)錄酶,高溫逆轉(zhuǎn)錄酶,如Tth酶。Tth酶在錳離子作用下,具有逆轉(zhuǎn)錄酶活性,Tth酶活性溫度高,可以使核酸充分線性化,提高逆轉(zhuǎn)錄效率及特異性。Tth酶在鎂離子的作用下,又具有DNA聚合酶活性,從而真正實(shí)現(xiàn)單管單酶單人份的擴(kuò)增要求,這樣就在不降低擴(kuò)增敏感性的條件下,一步完成擴(kuò)增,不僅簡(jiǎn)化操作,而且又減少污染,提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性。國內(nèi)本公司已采用這種技術(shù)推出單管單酶單人份的RT-PCR診斷試劑。丁型肝炎病毒是缺陷病毒,與乙型肝炎病毒協(xié)同感染。甲型肝炎病毒、戊型肝炎病毒主要存在于急性病人糞便樣本中,戊型肝炎病毒也長期存在于血清中。在PCR檢測(cè)時(shí),需注意取材的合理性。在消化道傳染性疾病中,另一類最重要的感染性疾病是幽門螺旋桿菌(HP)所引起的胃炎、胃潰瘍等。HP可以經(jīng)口-口途經(jīng)傳播并定位于胃粘膜上皮細(xì)胞,早期表現(xiàn)為淺表性胃炎,可發(fā)展成為胃潰瘍。我國胃炎發(fā)病率之高估計(jì)比乙型肝炎更嚴(yán)重,對(duì)HP的檢測(cè)應(yīng)受到廣大醫(yī)務(wù)工作者的重視。對(duì)HP的檢測(cè)可以用生化法測(cè)試尿素酶或用免疫法測(cè)試血清中對(duì)HP特異性抗體,也可對(duì)胃液、胃粘膜樣本進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)及菌種鑒定。PCR法檢測(cè)HP非常敏感且特異性高,有研究發(fā)現(xiàn)可以從病人的唾液或口腔含漱液中檢出HP。PCR法避免了取胃液及胃粘膜,減少病人痛苦,是目前最理想的方法。
呼吸系統(tǒng)感染性疾病主要的有肺結(jié)核、非典型性肺炎等。結(jié)核桿菌感染曾給人類健康帶來很大威脅,一度是較嚴(yán)重的致死性疾病之一。解放以后由于對(duì)結(jié)核病的預(yù)防的重視,特別是特效抗癆藥物的出現(xiàn),使結(jié)核病流行基本被控制。近來結(jié)核病有抬頭的趨勢(shì),基原因可能有兩方面,其一是耐藥株的不斷出現(xiàn),其二是對(duì)結(jié)核預(yù)防重視不足。結(jié)核菌痰涂片鏡檢陽性率太低,酶標(biāo)法又因抗原交叉反應(yīng)易出現(xiàn)假陽性,結(jié)核檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn)是結(jié)核菌培養(yǎng)法。但培養(yǎng)法費(fèi)時(shí)昂貴并且受到用藥的影響,在實(shí)際應(yīng)用中受到限制。PCR在結(jié)核菌檢測(cè)方面有簡(jiǎn)便、敏感、特異的優(yōu)點(diǎn)。一般認(rèn)為樣本中內(nèi)要有100個(gè)左右的結(jié)核菌即可被檢出。目前用于結(jié)核菌PCR診斷的試劑,其引物主要來源于以下基因片段36KD/65KD抗原蛋白基因;染色體重復(fù)插入序列IS986、IS960、IS6110、染色體質(zhì)粒DNA PH7311、PMTB4、P36基因等。其中最常用的是染色體重復(fù)插入序列IS986或IS6110,1990年Hermans首先介紹并使用了IS986基因設(shè)計(jì)的引物擴(kuò)增產(chǎn)物為245BP,研究表明這一基因?qū)θ诵徒Y(jié)核菌有特異性。而后Thierry又介紹了插入序列IS6110基因,并認(rèn)為這一基因?qū)θ诵徒Y(jié)核菌具有比IS986更高的特異性及敏感性,最適合M.TB的檢測(cè)。結(jié)核菌痰標(biāo)本的PCR檢測(cè)應(yīng)注意以下幾種常見的問題。其一,多條帶。即擴(kuò)增產(chǎn)物電泳后有三條或三條以上的螢光除最前面的引物以外有兩條產(chǎn)物帶,這與插入序列本身各片段長度有差異、結(jié)核菌在治療過程中染色體畸變、斷裂、缺欠及不等位交換有關(guān)。這種擴(kuò)增結(jié)果的判斷應(yīng)特別注意,凡在陽性對(duì)照相應(yīng)位置有明顯條帶的判陽性,否則應(yīng)為陰性,或建議病人過一些時(shí)間后再復(fù)檢一次;其二,結(jié)核痰樣本PCR檢測(cè)時(shí),要使樣本充分液化,否則痰液中的粘液成份將影響擴(kuò)增效果,甚至?xí)?dǎo)致嚴(yán)重非特異性擴(kuò)增,電泳結(jié)果呈霧狀;基三,結(jié)核痰樣本PCR檢測(cè)結(jié)果可能表現(xiàn)為陽性、陰性交替出現(xiàn),這與結(jié)核病灶的不規(guī)律排菌有關(guān)。
循環(huán)系統(tǒng)以腸道小RNA病毒感染最具代表意義,如柯薩奇病毒等。這些病毒經(jīng)腸道粘膜、淋巴結(jié)進(jìn)入血液,最終可定位于心肌細(xì)胞中導(dǎo)致心肌炎。目前對(duì)這些病毒的血液樣本檢測(cè)往往比較困難。PCR用于柯薩奇病毒檢測(cè)時(shí)因其是RNA病毒所以應(yīng)注意樣本的保存。外在環(huán)境中存在大量RNA酶,病毒脫殼后RNA將被迅速降解。一般用于RNA檢測(cè)的血清常溫下不應(yīng)超過24小時(shí),4℃下可保存2天,-20℃下可以保存2月以下。
PCR檢測(cè)在性傳播性疾病(STD)的診斷中有較廣泛的應(yīng)用。經(jīng)典的性傳播疾病有梅毒、淋病、腹股溝淋巴肉芽腫、軟銳濕癘、硬下疳等。而在現(xiàn)代STD中、解尿支原體及沙眼衣原體引起的非淋菌性尿道炎(NGU)可能更具有代表性意義。梅毒是由梅毒螺旋體感染布致,首先在局部形成硬軟下疳,布后經(jīng)血行播散到全身,最嚴(yán)重的是波及中樞神經(jīng)系統(tǒng)。感染早期,梅毒螺旋體大量存在于硬下疳中,可以用生理鹽水濕棉簽擦去皮疹表面污物再用鈍刀片輕輕刮去上皮及結(jié)痂,用潔凈棉簽取滲出液樣本作PCR檢測(cè),其敏感性及特異性極高。二期梅毒皮疹中也存在梅毒螺體其取樣方法同埂下疳,三期梅毒皮疹中一般無螺旋體存在,因此III病人及部分無皮疹的I、II期梅毒病人可以取EDTA抗凝全血檢測(cè)。淋病是目前發(fā)病率最高的性傳播性疾病之一,由淋病雙球菌引起。淋病雙球菌一般為胞內(nèi)寄生,常見的感染部位為外生殖器、尿道粘膜最常見。在尿道及外生殖器分泌物中有許多非致病的雙菌存在,對(duì)分泌物拭子進(jìn)行涂片鏡檢時(shí),常導(dǎo)致誤診。另外目前非淋球菌性尿道炎的發(fā)病率不斷增加,鑒別診斷特要,培養(yǎng)法準(zhǔn)確但費(fèi)時(shí)且費(fèi)用高,受用藥的影響。PCR法簡(jiǎn)便、快捷、準(zhǔn)確非常理想。常用的引物多采用外膜蛋白抗原基因、隱性質(zhì)粒DNA或16s RNA基因。16s RNA基因設(shè)計(jì)的引物特異性高但其敏感性低;隱性質(zhì)粒設(shè)計(jì)的引物敏感性高但偶爾出現(xiàn)多條帶的擴(kuò)增產(chǎn)物,判斷結(jié)果時(shí)應(yīng)以陽性對(duì)照為標(biāo)準(zhǔn),凡在陽性對(duì)照相應(yīng)部位有明顯條帶的為陽性,其余均為陰性。以往對(duì)沙眼衣原體及解脲支原體的檢測(cè)主要靠培養(yǎng)法,費(fèi)時(shí)且昂貴,簡(jiǎn)便快速的PCR檢測(cè)對(duì)其有極高的使用價(jià)值。沙眼衣原體、解脲支原體樣本來源主要是尿道及宮頸分泌物拭子,由于分泌物中有許多污物含有PCR擴(kuò)增的抑制劑,因此每次采樣時(shí)盡量避免采集過多膿性分泌物,如果宮頸分泌物太多可以先用濕棉簽將表面的分泌物擦去,再用潔凈的濕棉簽輕壓旋轉(zhuǎn)采集宮頸脫落細(xì)胞送檢,其準(zhǔn)確性更高。PCR也可以用檢測(cè)單純皰疹病毒、EB病毒、乳頭瘤病毒等。引物尖銳濕疣的病毒是人類乳頭瘤(HPV),可致生殖系統(tǒng)感染的乳頭瘤病毒主要是6、11、16、18、33型。新近研究結(jié)果表明,在乳頭瘤病毒引起的良、惡性生殖器病變中,與血清型的關(guān)系并不密切,經(jīng)常有交叉或多型民時(shí)感染。為簡(jiǎn)化操作,對(duì)其基因?qū)Ρ确治鰧ふ夜餐蛄性O(shè)計(jì)的簡(jiǎn)并引物可以同時(shí)檢出這幾種型別的病毒既簡(jiǎn)化操作又減少費(fèi)用是一種極理想的方法。
我國惡性腫瘤為人口死亡的第一位原因,其中以肺癌、胃癌及食管癌的發(fā)病率最高,占惡性腫瘤死亡總數(shù)的60%以上。引起腫瘤的原因非常復(fù)雜包括外界環(huán)境因素及遺傳背景。外界因此可分為三大類即化學(xué)、物理及生物因素。腫瘤與遺傳有關(guān)的證據(jù)越來越多,除已知的單基因遺傳腫瘤如視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤、腎母細(xì)胞瘤等以外,還在幾乎所有的腫瘤細(xì)胞中觀察到原癌基因的重排,這些基因的變化常導(dǎo)致細(xì)胞增殖調(diào)控失調(diào)終形成腫瘤。癌基因是指在自然或?qū)嶒?yàn)條件下具有潛在誘導(dǎo)細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的基因,它們是在研究逆轉(zhuǎn)錄病毒時(shí)發(fā)現(xiàn)的。目前已知的腫瘤基因有60多種,1969年Hubner根據(jù)Rous(1911)的實(shí)驗(yàn),在小雞肉瘤濾液中發(fā)現(xiàn)一種能誘導(dǎo)宿主細(xì)胞轉(zhuǎn)化的RNA病毒性癌基因(Viral Oncogene)。后來又在其它哺乳動(dòng)物基因中發(fā)現(xiàn)與病毒癌基因同源序列,這種正常的細(xì)胞基因表達(dá)產(chǎn)物與細(xì)胞生長、增殖、分化有關(guān)。但若被某種因素激活就會(huì)轉(zhuǎn)化為有活力的癌基因,通常稱之為原癌基因(Proto Oncogene)。為了與病毒癌基因區(qū)分,分別用V-Onc及C-Onc基因來代表。目前了解較多的癌基因(C-one)有scr基因族、ras基因族、mgc及myb基因族。原癌基因存在于正常細(xì)胞中,并表達(dá)生物功能,只有在原癌基因被激活后才能誘導(dǎo)細(xì)胞轉(zhuǎn)化,可能的原癌基因活化機(jī)理有:①點(diǎn)突變,受到射線、化學(xué)因素、生物因素的誘導(dǎo),這樣微小的變化,就會(huì)活化癌基因,活化的基因產(chǎn)物僅有極微的結(jié)構(gòu)差異,但在功能在卻有很大的區(qū)別。②獲得啟動(dòng)子,原癌基因從病毒基因中獲得啟動(dòng)子而活化。③基因易位,內(nèi)外界因素能導(dǎo)致染色體的某些基因易位、重排使原來無活性的原癌基因移至某些強(qiáng)的啟動(dòng)因子或增強(qiáng)子附近而被活化。④原癌基因的過量擴(kuò)增,原癌基因產(chǎn)物一般與生長因子、生長因子受體、跨膜信息蛋白有關(guān)或功能相近,過度表達(dá)時(shí),會(huì)因調(diào)控失常而引起細(xì)胞癌變。另一類與腫瘤相關(guān)的基因是抑癌基因如P53。抑癌基因較復(fù)雜,作用機(jī)理不太清楚。癌基因檢測(cè)中常用的分子生物學(xué)技術(shù)有:雜交、DNA分子克隆、PCR擴(kuò)增及序列分析。PCR擴(kuò)增簡(jiǎn)便、快捷有較強(qiáng)的實(shí)用性,甚至可從病人體液樣本中檢測(cè)活化的癌基因而不需取活組織,對(duì)癌癥的早期診斷有極重要的意義。Ras基因是1964年首次從大鼠肉瘤的急性逆轉(zhuǎn)錄病毒(Harver Murine Sarcoma and Kister Murine Sarcoma Virus)中分離出來取大鼠肉瘤(Rat Sarcoma)的字首命名。1982年首次在人膀胱細(xì)胞細(xì)胞癌中檢出有轉(zhuǎn)化能力的ras基因與Harver大鼠肉瘤病毒癌基因有同源性稱C-H-ras基因,后從肺細(xì)胞癌中發(fā)現(xiàn)了與Kister大鼠肉瘤癌基因同源的C-K-ras基因,從神經(jīng)母細(xì)胞中又發(fā)現(xiàn)了N-ras基因。Ras基因激活的最常見方式是點(diǎn)突變。人類原發(fā)腫瘤時(shí)點(diǎn)突變主要發(fā)生在密碼子12、13、59、61位。激活后的ras基因不牟自行滅活,根據(jù)其點(diǎn)突變的情況可以基因診斷、療效觀察。用PCR擴(kuò)增樣本ras原癌基因,再使用雜交法、限制性內(nèi)切酶消化或產(chǎn)物測(cè)序法檢測(cè)基因的突變情況即可用診斷。P53是抑制癌基因的代表,位于17號(hào)染色體短臂上,其產(chǎn)物為53KD分子量的蛋白從此而得名,可分為突變型和野生型,前者為癌基因,后者為抗癌基因。1979年Cane發(fā)現(xiàn)了P53蛋白Eliyahu發(fā)現(xiàn)了p53基因有抑癌作用。P53突變后其產(chǎn)物突變蛋白穩(wěn)定性增加,半衰期較野生型基因產(chǎn)物長,在細(xì)胞內(nèi)堆積,可以用免疫組化法測(cè)出。PCR-RELP、PCR-SSCP則因方法簡(jiǎn)單、快速、特異性高,更具有實(shí)用價(jià)值。在SSCP分析中,單鏈DNA因堿基序列的變異,導(dǎo)致構(gòu)型改變,在進(jìn)行凝膠電泳時(shí),其泳動(dòng)速率發(fā)生改變,從布將變異的DNA與正常DNA區(qū)分開,統(tǒng)計(jì)表明100-300bp分子大小的ssDNA突變檢出率可達(dá)97%,300-450bp標(biāo)出率可達(dá)69%,因此大于400bp的片段多態(tài)性應(yīng)采用其它方法檢測(cè)。
遺傳病是由于遺傳基礎(chǔ)異常而引起的疾病,人類遺傳病約有3000多種,患者占總?cè)丝跀?shù)的10%。遺傳病大概可分為單基因、多基因及染色體遺傳病。常用診斷方法有家系譜分析、染色體檢查(特別是顯帶法)、生物化分析等。隨分子生物學(xué)發(fā)展,基因診斷愈來愈表現(xiàn)出其優(yōu)越性,PCR技術(shù)是基因診斷的主要技術(shù)之一,為快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)人類遺傳病開辟了一個(gè)新的途徑,預(yù)計(jì)與遺傳相關(guān)的疾病的檢測(cè)有80%將在3-5年內(nèi)被PCR法所取代。PCR在遺傳病診斷應(yīng)用中,可以利用引物直接擴(kuò)增變化的基因產(chǎn)物,也可以結(jié)合應(yīng)用限制內(nèi)切酶,分子雜交及電泳圖譜分析進(jìn)行診斷。應(yīng)用較為廣泛的有PCR法檢測(cè)中海貧血、苯丙酮尿癥、血友病、脆性X綜合癥及性別鑒定等。地中海貧血(Thalassmia)是世界上最常見的單基因遺傳病,不有同類型,以a地中海貧血及在中海貧血最常見。a珠蛋白基因位于11號(hào)染色體短臂上,a珠蛋白基因突變致血紅蛋白的全成減少或缺失,表現(xiàn)溶血性貧血,肝脾腫大,在我國發(fā)病率為0.66%,貴州、四川等地高發(fā)可達(dá)2.2%。應(yīng)用PCR技術(shù)可以直接檢測(cè)突變的基因診斷此病。苯丙酮尿癥(Phenylketouria,PKU)是一種常染色體隱性遺傳病。病人肝臟苯丙氨酸羥化酶嚴(yán)重缺乏使苯丙氨酸不能轉(zhuǎn)化為酷氨酸血癥,出現(xiàn)腦組織損傷,智力障礙。此病患者出生時(shí)正常,出生后一經(jīng)確診立即停止母乳喂養(yǎng),采用低苯丙氨酸飲食治療8-10年不致影響患者智力,但低苯丙氨酸飲食代價(jià)之昂貴是一般家庭所不能承受的,關(guān)鍵在于避免患兒出生。因此本病的早期診斷有極其重要的意義。PCR結(jié)合斑點(diǎn)雜交能有效診斷PKU。遺傳性疾病的基因變化很復(fù)雜,單基因固定位點(diǎn)變異布致病的情況很少,因此基因診斷過程中往往需要PCR技術(shù)與限制性內(nèi)切酶、斑點(diǎn)雜交、聚丙烯酰胺膠電泳圖譜分析及擴(kuò)增產(chǎn)物序列分析結(jié)合,作綜合判斷。
優(yōu)生學(xué)包括基礎(chǔ)優(yōu)生學(xué)、社會(huì)優(yōu)生學(xué)、臨床優(yōu)生學(xué)及環(huán)境優(yōu)生學(xué)。孕期檢查及產(chǎn)前診斷是臨床優(yōu)生學(xué)的最重要內(nèi)容之一。孕期檢查除一般項(xiàng)目外還能及時(shí)了解孕婦是患有某些對(duì)胎兒發(fā)育有嚴(yán)重影響的疾病如風(fēng)疹病毒感染、沙眼衣原體、解脲支原體、單純皰疹病毒、巨細(xì)胞病毒、弓體感染等,及時(shí)發(fā)現(xiàn)及時(shí)治療并采取有效措施預(yù)防發(fā)展成為宮內(nèi)感染。PCR技術(shù)對(duì)這些病原體的檢測(cè)簡(jiǎn)便而確實(shí),另外利用PCR技術(shù)可以對(duì)地中海貧血、血友病、苯丙酮尿癥、脆性X綜合癥等遺傳性疾病進(jìn)行宮內(nèi)診斷??梢奝CR在優(yōu)生優(yōu)育方面有很高的應(yīng)用價(jià)值。
PCR技術(shù)的出現(xiàn)對(duì)法醫(yī)學(xué)的發(fā)展也有不可低估的作用。在法醫(yī)物證如血斑、毛發(fā)、組織碎片等的確證,DAN多態(tài)性分析遠(yuǎn)比血清學(xué)或等方法確實(shí)可靠。早期DNA多態(tài)性分析主要使用Southern印跡雜交的方法。1985年Jeffreys首先采用肌紅基因第一個(gè)內(nèi)含子中的串聯(lián)重復(fù)序列作探針,從人的基因庫中篩選出小衛(wèi)量DNA,使用阿交法產(chǎn)生雜交圖譜即DNA指紋。這一技術(shù)成功地應(yīng)用于個(gè)人識(shí)別及親子鑒定。這種方法仍受到樣本量的限制,當(dāng)樣本DNA數(shù)量不足時(shí)或DAN嚴(yán)重降解則不能正常檢出。且雜交技術(shù)常使用同位素杯記探針要求較鎬的防護(hù)措施。PCR技術(shù)的出現(xiàn),可以對(duì)極少量物證如一根毛發(fā)、一滴血液、極小精斑都可以進(jìn)行分析。在人類基因組中有許多由10-15bp核心順序構(gòu)成的串聯(lián)重復(fù)DNA序列,具有單位點(diǎn)特征的稱為VNTR結(jié)構(gòu),多位點(diǎn)串聯(lián)成為衛(wèi)星DNA。由于VNTR在等位基因中的多態(tài)性便構(gòu)成了遺傳標(biāo)記。使用PCR技術(shù)對(duì)其進(jìn)行擴(kuò)增結(jié)合對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物凝膠電泳圖譜分析即可進(jìn)行個(gè)人識(shí)別及親子鑒定。由2-6核苷組成的重復(fù)串聯(lián)序列稱為微衛(wèi)星。在人類基因組中,微衛(wèi)星更加豐富。微衛(wèi)星的重復(fù)序列比VNTR短,擴(kuò)增分型簡(jiǎn)便,易于自動(dòng)化,在VNTR或微衛(wèi)星不僅重復(fù)片段的數(shù)量不同而且重復(fù)片段的核苷酸也具有多態(tài)性。在VNTR或微衛(wèi)星多態(tài)性分析時(shí),如再結(jié)合堿基配對(duì)分析可以藜得更大量的信息,這一種更有希望的標(biāo)志即MVR(Microsatllite Variant Repeats)。理論上其對(duì)嫌疑人的排除率為99.999%。PCR技術(shù)可以完成替代早期的Southern印跡法進(jìn)行多態(tài)性分析而且操作簡(jiǎn)便,敏感性及準(zhǔn)確性都有大幅度的提高。當(dāng)然PCR技術(shù)在法醫(yī)中的應(yīng)用仍在起步階段有許多技術(shù)問題等待解決,如樣本中的抑制劑、檢村中DNA的損報(bào)告?zhèn)?、PCR擴(kuò)增污染等。想念隨著PCR技術(shù)的不斷完善它將在法醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中有更加廣泛的應(yīng)用。