第一篇：幼兒園生活專題小結(jié)

一個學(xué)期又在不經(jīng)意間匆匆過去，又到了該梳理自己一學(xué)期來的班級工作的時候了.這個學(xué)期是我班實(shí)施“生活化、游戲化”課程的第二個學(xué)期，經(jīng)過上個學(xué)期的探索教學(xué)后，這一學(xué)期已經(jīng)有了一些經(jīng)驗(yàn)，因此在實(shí)施中也能夠把握生活化、游戲化主題活動的宗旨，開展有效的教學(xué)。

下面，就班級工作的幾個方面加以總結(jié)。

（一）課程實(shí)施

1、本學(xué)期通過實(shí)施七個預(yù)設(shè)的主題（1、逛商場

2、生活用品

3、春天的電話

4、動物世界

5、漂亮的服飾

6、它們怎樣過夏天

7、聰明的一休（進(jìn)行了最后一周的教學(xué)），對照教學(xué)目標(biāo)，我們可以真真切切的感受到孩子們在認(rèn)知、情感、能力多方面都獲得了發(fā)展?！豆渖虉觥分黝}活動幼兒參觀了?？吐〈蟪?，讓幼兒了解商場，并進(jìn)行了親自的購物活動，幫助幼兒積累生活經(jīng)驗(yàn)，鼓勵幼兒積極參與社會實(shí)踐活動；《生活用品》豐富了幼兒有關(guān)生活用品的知識與經(jīng)驗(yàn)，并讓幼兒使用相關(guān)的用品，如肥皂、洗衣粉、洗潔凈等用品，接受日常生活安全教育，并進(jìn)行了一些洗手帕、大掃除等勞動活動；通過對文學(xué)作品的欣賞，讓幼兒以獨(dú)特的角度感知春天的到來，體驗(yàn)同伴間友好的情感，激發(fā)了幼兒認(rèn)識大自然，通過多種形式表達(dá)出對春天的認(rèn)識，發(fā)展了幼兒的語言表達(dá)能力和創(chuàng)造能力；結(jié)合春天主題，我們相應(yīng)把《動物世界》主題活動融入進(jìn)來，通過與親身的感知動物，萌發(fā)幼兒探索動物的興趣；主題《它們怎樣過夏天》，讓幼兒了解了人、動物、植物在夏天里的變化，了解了它們所采用的各種避暑方法，學(xué)習(xí)保護(hù)自己。

2、繼續(xù)創(chuàng)設(shè)良好學(xué)習(xí)環(huán)境，感受學(xué)習(xí)樂趣。這個學(xué)期在實(shí)施“生活化、游戲化”課程的過程中，教學(xué)組織形式繼承了上學(xué)期的傳統(tǒng)，注重為幼兒的學(xué)習(xí)活動營造一個更加開放、和諧的環(huán)境氛圍，讓幼兒在一個寬松的環(huán)境中學(xué)習(xí)，學(xué)得輕松和快樂。區(qū)域活動的形式跟課堂教學(xué)有機(jī)地結(jié)合，讓教學(xué)活動為游戲服務(wù)。幼兒在一種相對輕松的氛圍下進(jìn)行自主性學(xué)習(xí)操作，他們學(xué)習(xí)自主性提高了，他們之間的個別差異得到更多的照顧。

3、豐富生活經(jīng)驗(yàn)，拓展學(xué)習(xí)空間。實(shí)施“生活化、游戲化”課程的關(guān)鍵就是要豐富幼兒的生活經(jīng)驗(yàn)，我們一方面按照教學(xué)用書的提供的方法，通過家園聯(lián)系的渠道讓家長們重視孩子生活經(jīng)驗(yàn)的豐富和積累，另一方面我們充分利用周圍社區(qū)、公共設(shè)施、大自然等多種資源、多種渠道來幫助幼兒豐富生活經(jīng)驗(yàn)，拓展學(xué)習(xí)空間。開展豐富的社會實(shí)踐活動，讓幼兒走出幼兒園，走向社區(qū)、走進(jìn)生活、走進(jìn)大自然。如：我們帶孩子去琴楓苑參觀，看看夏天的綠化以及小動物是怎么過夏天的。開展《逛商場》主題活動時，我們又去了?？吐〈蟪?，看看商品布局，看看商品價格表等等，讓幼兒進(jìn)一步加強(qiáng)對商場的認(rèn)識，為教學(xué)活動游戲活動準(zhǔn)備了重要的感性經(jīng)驗(yàn)。通過自己去超市購物的活動，幼兒認(rèn)識了一些錢幣，查看了商品價格以及讓幼兒真真體驗(yàn)了購物實(shí)踐活動。通過拓展幼兒的學(xué)習(xí)空間，使學(xué)習(xí)的內(nèi)容從書本又重新回到了幼兒的現(xiàn)實(shí)生活，又從現(xiàn)實(shí)生活中回到課堂，并加以提升，讓幼兒真真切切學(xué)到一些與自己生活密切相關(guān)的知識與能力，學(xué)習(xí)興趣自然就提高了，知識面自然更廣了。

（二）幼兒學(xué)習(xí)工作

（1）運(yùn)動方面：在本學(xué)期，開展了一系列的運(yùn)動擂臺賽，如跳繩、運(yùn)球走、投擲，幼兒的運(yùn)動技能技巧發(fā)展很快。我們還重點(diǎn)抓住了一些不好動的孩子，如唐珩益、瞿程等幼兒，盡量選擇一些他們喜歡的，易于成功的簡單游戲，平時還和他們一起玩，經(jīng)常在游戲過程中肯定他們的進(jìn)步?，F(xiàn)在他們在活動中表現(xiàn)的很大膽，運(yùn)動能力也加強(qiáng)了。

（2）在開學(xué)初期我們班孩子的傾聽常規(guī)不是很好，老師與同伴在講的時候孩子們做自己的事或與同伴竊竊私語的交談，根本就不聽，老師請他起來說。他就支支吾吾說不出，根據(jù)孩子這一薄弱環(huán)節(jié)我們倆位老師就從培養(yǎng)幼兒平時的良好傾聽習(xí)慣入手，一點(diǎn)一滴地抓，并持之以恒。利用四月園部舉行的講故事擂臺賽為契機(jī)，鼓勵幼兒踴躍報名參加班級講故事擂臺賽。我們班44名幼兒都勇敢走到小朋友前面，大膽地講故事。通過幼兒民主投票推選3名幼兒參加年級總決賽，分別取得了“小擂主”、“金獎”和“銀獎”。

（3）幼兒合作性規(guī)則意識進(jìn)一步加強(qiáng)。由于年齡的特點(diǎn)決定著孩子以自我中心為主，缺乏一定的合作性。在教學(xué)活動以及游戲活動中，我們兩位老師有意識地組織幼兒合作的活動環(huán)節(jié)，經(jīng)過一個學(xué)期的努力，我班幼兒的合作能力發(fā)展很快，合作意識和責(zé)任感也有了明顯提高。

（三）家長工作

實(shí)施“生活化、游戲化”課程中家長資源是十分重要的資源，我們通過家長會讓家長們了解了我們現(xiàn)在實(shí)施的課程與以往的課程的區(qū)別，幫助家長更新了觀念，家長們都比較贊同和支持我們實(shí)施這一課程。本學(xué)期我們繼續(xù)在搞好搞精家園欄的同時，還在每個主題開始之前，發(fā)放親子活動單，及時讓家長了解主題目標(biāo)以及需要家長配合的地方。家長們有的放矢，認(rèn)真和幼兒一起做好調(diào)查報告單，還和幼兒一起收集了各種主題活動開展的材料。幼兒材料與經(jīng)驗(yàn)準(zhǔn)備充分，我們也能更有效地和幼兒開展

活動。本學(xué)期的家長工作也注意了現(xiàn)代化技術(shù)的使用，班級網(wǎng)站和年級論壇成為我們和家長交流的平臺。娃哈哈、奚小辮、慶慶媽媽、樂樂，陶然、lishun、hanfeichi、獨(dú)上寒枝不肯棲、聰聰媽媽、虎虎等一大批家長加入我們中（1）班這個大家庭，大家都能敞開心扉，述說著孩子的問題、孩子的成長。在心與心的碰撞著，更堅定了我們老師的教育信念。

（四）保育保健

這學(xué)期發(fā)生了一些事情，如朱子辰不小心撞破了頭，石芷晴在家玩耍時手骨裂，余婧若跳繩膝關(guān)節(jié)受傷，幼兒的安全問題還需警鐘長鳴。

生活進(jìn)餐環(huán)節(jié)進(jìn)步比較大，幼兒也能自覺的保持桌面清潔，不過這些現(xiàn)象孩子時有反復(fù)，要在以后的日子中持之以恒。在五月份我們開展了用筷子夾豆豆的擂臺賽，絕大多數(shù)幼兒能熟練地夾起黃豆了。在六月份里，我們開始用筷子吃飯，幼兒也能很熟練地用筷子吃飯了，而且地面也能保持和以前一樣的水平。

（五）禮儀養(yǎng)成

通過每月禮儀重點(diǎn)，我們將這些要求滲透在每周、每日的活動之中，在一日生活的各個環(huán)節(jié)進(jìn)行培養(yǎng)和教育。

利用每周的國旗下講話、評比禮儀之星的形式激發(fā)幼兒的榮譽(yù)感和進(jìn)步的愿望。對于一些特殊的幼兒和事件，我們能進(jìn)行個別教育和隨機(jī)教育，并主動和家長進(jìn)行交流，取得家長的配合，共同促進(jìn)幼兒的進(jìn)步。

經(jīng)過我們的共同努力和相互合作，我們圓滿完成了一學(xué)期的工作任務(wù)，幼兒也在各個方面獲得了進(jìn)步，但也有一些不盡人意的地方：如陶立、張映白等幼兒的規(guī)則意識還不強(qiáng)；陸順學(xué)習(xí)不專注；朱子辰、陳子彥等幼兒交往能力還不夠等等。在下一個學(xué)期中，我們將繼續(xù)努力！

第二篇：實(shí)驗(yàn)室生活小結(jié)

平時在實(shí)驗(yàn)室最常聽到的一句話就是“今天某某試驗(yàn)沒做好是為什么？今天某某試驗(yàn)沒出結(jié)果是什么原因？今天某某試驗(yàn)為什么會是這樣的呢？” 等等。然后仔細(xì)一查找原因，往往是由于操作上面的不認(rèn)真，或是一些小小的細(xì)節(jié)沒有注意到。以下是集各路朋友的一些經(jīng)驗(yàn)，與大家分享：

1跑page膠的時候，小電壓跑會避免高電壓產(chǎn)生的熱量爾導(dǎo)致的膠層變形。低電壓泳道會比大電壓泳道跑的直一些，且分離效果更高，有利于分子量相差不大的蛋白分離。

2.提取質(zhì)粒的時候，最后一步的酒精揮發(fā)很關(guān)鍵，基本上是其后續(xù)的酶切反應(yīng)的決定性因素。所以這一步盡量揮發(fā)長一點(diǎn)時間，最好是空調(diào)吹熱風(fēng)，或是37度溫箱放長一點(diǎn)的時間，我試過室溫過夜，酶切很好。3.做WESTERN BLOT 的時候，大家往往會摸索一抗、二抗的濃度，封閉時間，曝光時間等等，而每次變換其中的一個條件就需要從新跑膠、轉(zhuǎn)膜，甚至重新提蛋白，這樣會浪費(fèi)大量的時間。其實(shí)完全沒有必要這樣。一次轉(zhuǎn)膜后，將PVDF膜晾干，裁減成小塊，保存起來，用的時候取出一塊，沒有任何影響。這對于摸索條件的戰(zhàn)友來說，節(jié)約了大量的時間。4.有關(guān)緩沖液和培養(yǎng)基配置

1）將緩沖液配方中的成分分別以10－100倍配成母液儲存，需要的時候只需將相應(yīng)的母液混合，補(bǔ)加水稀釋即可

2）配培養(yǎng)基時通常會忘記各成分的量，如配LB時的三個成分不記得到底哪個是5g，哪個要10個，因此可以在常用的試劑瓶的標(biāo)簽上注明所需的量，如配LB時，在NaCl瓶外注明10g/L, yeast 5 g/L, tryton 10 g/L等，很方便，不需要每次配之前臨時翻書 5.有關(guān)PCR主反應(yīng)液配置: 在做克隆鑒定的時候經(jīng)常需要在酶切鑒定前進(jìn)行PCR鑒定，每次配置PCR反應(yīng)液很繁瑣，可以將其配置類似kit的形式，按你需要的反應(yīng)體系列表，然后放大100倍配置100×主反應(yīng)液（100次反應(yīng)），其中含buffer，Mg2＋，dNTPs，但不含引物和Taq酶，然后可以10×分裝或一管儲存在－20度，在需要的時候拿出融開，然后按所需的PCR反應(yīng)個數(shù)吸取相應(yīng)的倍數(shù)，再補(bǔ)加相應(yīng)反應(yīng)倍數(shù)的Taq和引物，混勻后分裝，這樣做的好處如下：

1）可極大的節(jié)省寶貴的時間，可早點(diǎn)收工，看球 2）避免每次反應(yīng)加樣不均的可能 3）大大減少PCR假陽性的產(chǎn)生 6.有關(guān)酶切反應(yīng)液的配置: 在做酶切時，也可以象PCR一樣配置主反應(yīng)液，每次反應(yīng)前先列好反應(yīng)的體系，算好需要的反應(yīng)數(shù)，然后按所需反應(yīng)的體系按所需反應(yīng)數(shù)放大，加入buffer、酶、水，質(zhì)粒欄空缺，然后混合后按除質(zhì)粒DNA的體積分裝，然后再在每管中加入相應(yīng)體積的質(zhì)粒DNA酶切，這樣做的好處如下，特別是當(dāng)同時有10幾個陽性克隆需要鑒定時尤為明顯： 1）各反應(yīng)成分均一

2）可大大減少限制型內(nèi)切酶的使用 3）節(jié)省時間

7.有關(guān)SDS－PAGE：

1）可將SDS－PAGE的積層膠，分離膠預(yù)先配好大體積如100ml儲存在4度冰箱（注：10％AP，TEMED不加，切記！?。?，每次配置時只需吸取相應(yīng)體積的預(yù)制膠加入AP，TEMED即可，沒必要每次制膠時候翻分子克隆，特別方便，而且，這樣的預(yù)制膠可儲存半年以上，不失為偷懶的絕佳方法；更關(guān)鍵的是可大大減少與丙稀酰胺的接觸，因此大大減少中毒的機(jī)會。

2）電泳時雖然小電泳分離效果要好一些，但2小時以上的等待的時間實(shí)在是痛苦，因此可以提高電泳至150V，但需要將整個電泳槽放在放滿冰水的臉盆里散熱，這樣跑出來的膠分離效果絲毫不比低電壓來的差，關(guān)鍵是時間大大節(jié)省，不需1h即可看結(jié)果了

8.實(shí)驗(yàn)中小竅門我想能夠分成兩類：一類是“非常規(guī)”操作；一類是常規(guī)操作過程中一些省時省事手段。前一類，我舉個例子：有時候第一天涂的轉(zhuǎn)化平板、次日早晨轉(zhuǎn)化子可能長成的菌落比較大（1~2毫米以上，BL21就長得快），下一步轉(zhuǎn)化子做質(zhì)粒鑒定。這個情況下可以直接挑取一塊菌苔（勿帶出培養(yǎng)基），50微升酚/氯仿懸浮菌體，放置兩分鐘，加40微升TE抽提，上層TE吸出后再氯仿抽提一次，吸取上層TE即是質(zhì)粒提取液。提取的質(zhì)粒可以直接用于電泳和酶切。這樣操作，可以省去轉(zhuǎn)接液體試管的培養(yǎng)步驟，至少節(jié)省6~8小時的時間。但是，要在各步驟都控制得很好的情況下才能保證提取和酶切的效果，不同的實(shí)驗(yàn)室或者操作者未必能夠很方便地重復(fù)----其實(shí)，其它的一些“小竅門”也是如此。

后一類的小竅門則在實(shí)驗(yàn)室中無處不在。如：平行作不同樣本的PCR,模板DNA加量一樣，配置PCR體系可以一起配制后分裝----這點(diǎn)做過試驗(yàn)的都知道，但是配制的時候配制量可以比預(yù)期分裝量稍多一點(diǎn)（如用100微升則配110微升），這樣可以避免有時候分裝不夠的尷尬，因?yàn)椴煌貏e是大小不同的槍，會有誤差。再比如：樓上有站友說的sds-page膠預(yù)配（APS和TEMED、或者后者先不加）的問題，實(shí)際上時間放置過長肯定影響效果，如果要在一天內(nèi)連續(xù)地跑兩次板，何嘗不可？又比如，配sds-page膠的時候，上層膠和下層膠可以只用一個大槍頭：先取膠，次取水，取6.8的tris后再取8.8的tris，省時省料。20021108站友開的這個帖子很好，在上上層樓的帖子說得也有道理。但我想，“竅門”和“偷懶”不應(yīng)該是因果關(guān)系。其實(shí)，不管是那一類的小竅門，都是在充分地理解實(shí)驗(yàn)各步驟的原理、經(jīng)過多次試驗(yàn)積累、再加上一點(diǎn)點(diǎn)思索然后嘗試的結(jié)果。知其然知其所以然和勤于思考敢于探索，是根本。否則，別人的小竅門對你也未必能夠有用。才進(jìn)實(shí)驗(yàn)室的新手，務(wù)必要先練好規(guī)范扎實(shí)的操作，然后才能弄“竅門”。本末倒置，貽害無窮。

9.我一直是把SDS－PAGE的積層膠，分離膠預(yù)先配成mixture，APS制膠時加入，半年內(nèi)使用，絕對沒有問題，我保證。

10.做SDS-PAGE的時候，除了蛋白量上樣一致，最好體積也一致，這樣跑出來的膠各個泳道之間的band能做到一樣寬，方便后面的比較，特別是WB。做法就是拿1X的上樣緩沖補(bǔ)全要加的樣做到體積一致，否則跑出來會有的寬有的窄，特別是上樣體積相差較大的。

11.在把蛋白膠做成干膠時，很多時候會因?yàn)橛袣馀菔鼓z裂掉，我的經(jīng)驗(yàn)是在做膠時加上層膜前在膠上多加些水就不容易進(jìn)氣泡了，還有就是高溫烘膠，我喜歡放到60度烘箱里烘，這樣水分蒸發(fā)速度快，即使有一些小的氣泡也不會有影響，呵呵，這是經(jīng)驗(yàn)之談，我從來都沒失手過，大家可以試試

12.做大腸表達(dá)時確定蛋白是否表達(dá)一般要煮樣做誘前誘后檢測,但很多時候煮出來的很黏影響跑膠效果.我發(fā)現(xiàn)如果現(xiàn)用8M Urea重懸細(xì)菌再煮效果會有極大改善.注:不能用Gu-HCl代替 13.我也推薦幾個偷懶的方法 做SDS-PAGE跑膠通常都是現(xiàn)配現(xiàn)用,但配膠要>1h,所以如果想第二天睡個懶覺而又不耽誤跑膠可以于前一天晚上做好濃縮膠和分離膠,待凝聚后不要拔下梳子,把含膠玻璃板從制膠槽取下,用保鮮膜包上,注意玻璃板上下兩邊緣會有氣體,所以需要加一點(diǎn)電泳緩沖液以避免膠內(nèi)水分蒸發(fā).然后放4度過夜.第二天直接拔下梳子行后續(xù).國外好多公司出售腳既是如此,可以保存上星期.2 配置分離膠或者非變性膠時因膠凝時收縮可導(dǎo)致加樣孔變淺.可以將加剩的膠放入4度以降低凝聚速度,而將凝膠放入37度促聚,并隨時用4度加剩的膠補(bǔ)充下降的膠面.另外將膠橫放與水平面成~10度角也可以減少收縮的影響.3 推薦一個節(jié)約抗體/時間的做法: 同時跑2塊膠,同時轉(zhuǎn)膜,然后兩塊膜背靠背放入同一封口膜同時封閉,同時一抗二抗(最好是用轉(zhuǎn)輪,這樣效果好.如果是搖床,隔一段時間幫它們翻個身以保證兩張膜的正面都有機(jī)會與液體充分接觸.一起洗膜(可以稍微加強(qiáng)洗膜也可以不做.我最多一張盤子里放4張膜而沒有影響洗膜).可分別或同時壓片.這樣就可以節(jié)約一半抗體和接近一半時間而不會影響結(jié)果.或者另外一個就是孵育后的抗體不要扔,好的抗體可以反復(fù)做好幾張膜呢.但每次都會減弱,效果不如上面一種方法.14.做western blotting 轉(zhuǎn)膜時，膠放在轉(zhuǎn)膜緩沖液中一段時間，待膠在含有甲醇的緩沖夜中縮小的差不多后裝好轉(zhuǎn)膜裝置，我的經(jīng)驗(yàn)是把膜印在膠上直接在膜上畫出預(yù)染maker條帶，方便的很。因?yàn)楹芏鄷r候跑電泳時膠上的預(yù)染maker很清楚，等轉(zhuǎn)膜后就不是分辨的很清楚了。不過要注意畫好預(yù)染maker后就不要使膠和膜發(fā)生對位移動了，以防m(xù)aker失去參照價值。

15.超濾最合適用于蛋白的濃縮，更換緩沖液和除鹽，對于按照分子量進(jìn)行初分離的效果不是很好，理論和現(xiàn)實(shí)是有很大差別的^_^ 16.關(guān)于Western Blot 1）器具的清潔非常重要，開始做前，為了安全，尤其是裝膠的厚薄玻璃板，可以先用中性洗滌劑和自來水反復(fù)沖洗，確保無洗滌殘液后用蒸餾水沖洗2－3遍，然后用去離子水沖洗一遍。最后用95％酒精再擦一遍后晾干備用。

2）配膠最好現(xiàn)用現(xiàn)配，先配下層膠（分離膠），后配上層膠（濃縮膠或積層膠），而且在臨灌膠前加APS并迅速混勻，即用移液槍抽吸與注入1－2次即可。

17跑蛋白page的時候，一開始用加樣針，太麻煩，發(fā)現(xiàn)用20ul槍+普通小白槍頭點(diǎn)，非常省事。另外，點(diǎn)樣時有可能看不清孔在哪，看遠(yuǎn)離你的那面膠，孔有反光的。點(diǎn)樣也點(diǎn)你對面的那塊膠，省的總低頭，干咱這行的容易得頸椎呀，愛惜自己。

18.垂直電泳時，可在電泳糟中放入青霉素小瓶等，可自然使液面提高而不影響電泳，又很節(jié)約電泳緩沖液。

19.我們有時要沉淀東西時，由于沉淀量很少，離心完之后不知道到底有沒沉淀下來東西，由于量很少，不好觀察，所以離心時建議按特定的方向放置離心管，這樣你就可以在離心之前確定沉淀該沉淀到管子的大致部位，這樣離心后就可直接觀察那有沒有沉淀，避免滿管子找，另外看沉淀時可以對光看，這樣就是顆粒狀的細(xì)小沉淀也能看見的。

20.大家都知道PMSF有劇毒，以前都是知道濃度和要配的體積的基礎(chǔ)上,算出要稱多少毫克的PMSF,其實(shí)也可以先稱PMSF,稱多少算多少,再調(diào)整異丙醇的體積，到達(dá)你所要的濃度。這樣就避免了你長時間和它接觸。

21.跑好SDS-PAGE膠的一些體會。

1.清洗好玻璃板，不要偷懶，很多時候跑完電泳撬膠時會因?yàn)椴ＡО宀桓蓛裟z粘在板上把膠撬破。2.配膠時不要反復(fù)用槍混，稍微搖混就可以了，用槍混多次會導(dǎo)致膠凝不好影響電泳圖的分辨率。3.AP分裝成500微升一管保存放-20度，避免AP用太久失效。

4.倒膠時把玻璃板中的水用濾紙盡量吸干，因?yàn)槲⒘康乃嬖跁绊懪涞哪z濃度。5.盡量不用過夜放室溫或者四度的膠，也回影響膠 的分離效果。

6.電泳完撬膠時根本不需要用撬膠板，在一平皿里裝好水，把有膠一面的放在水中晃動幾次膠很容易就脫落下來，一點(diǎn)沒有問題，方便的很。

7.點(diǎn)樣時樣品別忘了離心這步，因?yàn)樯蠘雍泄腆w沉淀會影響電泳圖分辨效果。8.盡量在冰浴狀態(tài)下跑。

22.做 ２－ＤＥ 做的比較多，總結(jié)了幾個小竅門：

１．一向電泳時，鹽離子容易聚在 膠槽的兩側(cè)．剪一小段ＩＰＧ膠條放在兩側(cè)，構(gòu)成鹽橋，電壓就容易上去了．避免一向電泳不好影響最后實(shí)驗(yàn)

結(jié)果．

２． SDS－PAGE時,在灌膠之前,一般大家都會用凡士林封底, 在SDS－PAGE 電泳之前又必須把凡士林搽干凈,很是麻煩,我的經(jīng)驗(yàn)是:不用凡士林,取少量未加Ap的分離膠,按比例加2倍量的Ap,然后灌入板間,等上幾分鐘,待膠凝固后就可以接著灌分離膠了.方面,效果好!23.蛋白質(zhì)純化時，蛋白質(zhì)降解可能與超聲破菌保持冰浴有關(guān)，之前建議加pmsf，建議在上柱子洗脫的時候也加pmsf（蛋白降解抑制劑），一定要用之前再加。

24.做透析的時候，拿一個5ml的槍頭或者是其他類似的東西，剪短，穿過個塑料泡沫之類的面積比燒杯大東西，然后把透析帶一端扎緊，另一端開口綁緊在5ml槍頭下端，扎緊得那端也可以彎過來綁成u字型。這樣就可以用1ml的槍穿過5ml的槍頭的孔，另一只手調(diào)整透析帶，來加樣取樣，省去了總綁透析帶的麻煩，對同一個蛋白大量多次透析非常方便 25.第一次發(fā)貼說一下自己的小經(jīng)驗(yàn)，希望版主能給我一分，每次看到好東西因?yàn)闆]分都沒法下，好羨慕有分的人啊。當(dāng)然也不能不勞而獲，說一下自己的實(shí)驗(yàn)技巧給大家分享。

1.配SDS-PAGE膠時，用槍頭混勻比較麻煩，而且費(fèi)時費(fèi)力，效果也不好?？梢约粢恍《螉A文件的那種曲針做轉(zhuǎn)子放到配膠的小燒杯里，在磁力攪拌器上邊攪邊加入各溶液，這樣加完也就混勻了，直接灌膠即可。2.上面的站友也說過，上樣用黃槍頭就行，我也一直在用，根本不用注射器，方便的很，建議大家也試試。3.電泳后考馬斯亮藍(lán)染色一般要1h到2h，脫色也要2h左右，麻煩的很?，F(xiàn)在給大家說一個簡單的方法，是我從一個師姐那里學(xué)到的。

加入染色液后，先放入微波爐里加熱5-10秒，使染色液微熱即可（千萬不要加熱太久，否則冰醋酸就揮發(fā)了）。然后放水平搖床上搖20分鐘，最多半小時就染好了。

脫色也很簡單，不用脫色液，直接用去離子水，放微波爐里煮沸5分鐘左右，然后將水倒掉，再換上新的去離子水煮，這樣反復(fù)幾次，就可以了。效果可能比正常的脫色稍差一點(diǎn)點(diǎn)，不如那樣清楚，只要電泳時比平時多上1/5的樣品就可以了，關(guān)鍵是這樣省時省材料（用不著含甲醇和冰醋酸的脫色液）。方便快捷！放心，反復(fù)煮膠不會把膠煮壞的。

26.我也說說我的小經(jīng)驗(yàn)。可能大家都知道，請別笑話我。

1、配膠時一定要掌握好時間，不要因?yàn)檫^度趕時間，而造成以后的條帶粗大，壓不成條帶，且消耗很多試劑和時間。

2、加樣時，沖洗加樣器可用雙蒸水，用電泳液會使加樣器中有很多的泡沫?；蛟S是因?yàn)镾DS的原因吧？

3、對于大分子蛋白質(zhì)，轉(zhuǎn)膜過夜更好。濾紙的張數(shù)可以適當(dāng)減少。

4、在跑樣時同時加入MARKER有助于正確識別所需的蛋白位置，減少NC膜的消耗。

5、一抗、二抗的濃度不要太高。

6、做ECL顯影時，根據(jù)熒光的亮度調(diào)整時間。泡完顯影液，膠片應(yīng)用水洗一下，以減少定影液變黃。

7、和有經(jīng)驗(yàn)的同學(xué)交流，也是非常重要的。知識的交流絕對有助于試驗(yàn)的成功。這是我目前的一點(diǎn)拙見。

27.推薦一個省質(zhì)粒試劑盒硅膠柱與溶液的方法：

所有試劑使用手提質(zhì)粒自己配置的溶液

一、溶液

二、溶液三（代替試劑盒的solution1、2、3），然后一比一的與飽和碘化鉀或碘化鈉（代替結(jié)合緩沖液）混合，就可以讓質(zhì)粒在硅膠上結(jié)合，而試劑盒的硅膠柱可以重復(fù)使用，沒有試劑盒溶液量的限制，只要是一樣的質(zhì)粒我想提幾管就提多少。

順便說一句硅膠柱也可以用自己買的硅膠粉末代替，離心后倒掉硅膠柱上面的上清就可以，用起來不象柱子方便。效果比手提的要好要快。

28.做WB時,樣品比較多, 又怕放時間長了對蛋白樣品不好,而且確定以后肯定要做某個抗體,只是一時沒有決定.那么你可以選擇先做SDS-PAGE,并轉(zhuǎn)膜.然后把PVDF膜涼干, 放四度保存.以后拿出來封閉后,加抗體就行了.蛋白在膜上,且已經(jīng)分離, 比保存在BUFFER里面的蛋白肯定更可靠。呵呵

29.今天作his純化的時候，又琢磨了一個竅門，與大家分享。我得樣品比較多，幾百ml，而柱子不夠大，只有10幾ml，跑來跑去的上樣，還總得記著，太麻煩了。于是，我就刷干凈了一個燒杯，裝了我的樣品，找了一個細(xì)膠皮管，當(dāng)連通器，就像魚缸換水一樣，用5ml槍在一頭一吸，液體流出來，放到純化柱里，調(diào)好燒杯的位置，兩個液面一樣平了，呵呵，上了好幾個小時了，沒有問題，現(xiàn)在調(diào)低速度，過夜上樣：）30.能導(dǎo)致PAGE膠不凝的原因主要有三個：

1、配膠中用到的主要試劑的配置。

主要就是30％的丙稀酰胺的配置。粉末狀的丙稀酰胺和甲叉丙稀酰胺使用不應(yīng)該超過一年，因?yàn)楸□０窌彼?，這樣以來丙烯酸的含量就會加大，從而導(dǎo)致page膠不凝。

2、溫度。

溫度高時凝固快，但是亦不宜過高，因?yàn)闇囟茸兓瘯绊懡贿B物的孔徑大小。所以溫度在25度最為合適。

3、氧氣。

氧氣是凝固的終止劑，所以不能讓膠中出現(xiàn)氣泡。雖然都是些看起來聽低級的錯誤，但是不注意還是會犯。31.我做2維蛋白電泳，也有些心得：

1、向電泳玻璃板內(nèi)加入膠條時，先在縫隙中加入配好的溴芬蘭緩沖液，要加滿，再將膠條貼后面玻璃板壁用薄塑料片將膠條緩緩?fù)葡轮聊z上緣，這樣可以很好的避免膠條下形成空氣泡。

2、能做出好的圖譜已經(jīng)很不容易了，如果在掃圖時撕破實(shí)在可惜，所以掃圖要小心，將凝膠轉(zhuǎn)移到掃描儀時可以用塑料隔片在下面托著，同時保持有些水，這樣就安全多了。32.湊個熱鬧說兩句吧

1、sds-page膠如果配好裝好倒入內(nèi)槽液以后，發(fā)現(xiàn)內(nèi)槽液稍有滲漏，可以把外槽液多加一些，加滿，加到與內(nèi)槽液相齊，這樣就可以繼續(xù)正常跑膠，不用浪費(fèi)已經(jīng)加進(jìn)去的內(nèi)槽液

2、至于染色脫色的問題，我們這里一直是染色：加熱半分鐘，搖20分鐘；如果染液不是新配的，就加熱半分鐘搖十分鐘，涼透了再重復(fù)一次即可 脫色也一直是用去離子水煮兩三次即可

3、不知道大家都是怎么做酶切的，我的體會是，酶切質(zhì)粒時，兩個酶分別單酶切比直接雙酶切效果要好很多。我有一次雙酶切兩次都沒連出來，后來分步單酶切，連接效率幾乎100%。

可以第一個酶切完后直接把體系熱失活，（根據(jù)酶說明書上一般是65度20min）然后直接向里面補(bǔ)第二個酶

或者第一個切完后用氯仿抽提，把蛋白提出

或者中間做一次回收，這個就要考慮回收效率和損失的問題了，但是這樣除蛋白最徹底 前兩個方法我們這都是有人做過的，已經(jīng)都很好用了

33.俺也來說說關(guān)于Bradford法蛋白濃度定量和DTNB法巰基濃度定量的一點(diǎn)體會：

我是做蛋白修飾巰基后，通過這兩種方法的定量來間接反應(yīng)修飾的程度。一路摸索過來，也有半年有余；最大的體會就是不要急于求成，直接實(shí)驗(yàn)，首先檢測修飾體系是否對方法有影響，修飾基團(tuán)是否會在595nm和412nm下有特定的吸收，修飾后修飾試劑本身是否會有變化，對蛋白整體結(jié)構(gòu)造成影響，其次再談具體修飾比例和程度。對于巰基濃度測定方法，有四種（Anal Biochem.1998 Dec 1;265(1):8-14），而DTNB本身雖然靈敏度不高，但是重復(fù)性和抗干擾是最佳的了。

34.考馬斯亮藍(lán)染色后的脫色，如在脫色液中加數(shù)張捏成條狀的Kimwipes紙（國外實(shí)驗(yàn)室常用，相當(dāng)我們的擦鏡紙，全棉纖維制造），由于染料吸附到紙纖維上，脫色加速。待紙著色較深時，更換新紙條，不用換液。我想脫脂棉或紗布也是一樣的。但濾紙等可能不行，會溶掉。

半貼壁細(xì)胞如SP/0或雜交瘤細(xì)胞傳代時，不用吹打或刮落。先將上清吸出，適當(dāng)拍打培養(yǎng)瓶（當(dāng)然是塑料瓶，玻璃瓶拍碎了別找我），即可見貼壁細(xì)胞脫落，加培養(yǎng)基混懸即可。注意，過力拍打培養(yǎng)瓶會裂，特別是瓶頸。

35.一向電泳時，鹽離子容易聚在 膠槽的兩側(cè)．剪一小段ＩＰＧ膠條放在兩側(cè)，構(gòu)成鹽橋，電壓就容易上去了．避免一向電泳不好影響最后實(shí)驗(yàn)結(jié)果． 36.我也推薦幾條：

1、關(guān)于20021108戰(zhàn)友的說法，我覺得我們制備好了一批感受態(tài)，最好馬上轉(zhuǎn)化一種已知質(zhì)粒，與此同時，取一點(diǎn)感受態(tài)接種到含抗性的固/液體培養(yǎng)基培養(yǎng)來做對照。這樣第二天即可以知道這批感受態(tài)是否還有外源質(zhì)粒，又可以知道這批感受態(tài)轉(zhuǎn)化效率的高低。如果合格，那以后就可以放心使用！因?yàn)槲乙苍?jīng)遇到其實(shí)是因?yàn)楦惺軕B(tài)不好而導(dǎo)致試驗(yàn)不成功，但是當(dāng)時不知道，結(jié)果費(fèi)時費(fèi)力。

2、做克隆挑斑時，我們可以在將沾有菌體的牙簽丟到試管前，在一塊相應(yīng)抗性的平板上點(diǎn)一下，標(biāo)注清楚，培養(yǎng)時間稍長一點(diǎn)，待長成較大菌落后收取。以后需要哪一個菌,就在平板上挑取。這樣既方便快捷，又可以保證菌的一致。

3、抽提質(zhì)粒時，加入Sloution II和III后要求輕柔混勻。我個人覺得不用這樣，只要不是非常劇烈，可以快速混勻。尤其可以運(yùn)用在一次抽提多管質(zhì)粒的時候，這樣可以快速，而且效果一點(diǎn)也不差。

4、抽提質(zhì)粒時，用無水乙醇沉淀的時間可以由實(shí)驗(yàn)操作者來決定，如果時間充?？梢?0min，否則8-10min也可以。至于溫度，個人覺得-20度好于常溫。如果加入可醋酸鈉，會較容易形成鹽類雜質(zhì)，所以時間短一些更好！

今天想到這些，先寫到這里，以后想到了在上來與大家分享。希望我的小經(jīng)驗(yàn)對大家有所幫助！37.首先聲明：實(shí)驗(yàn)中的一些技巧要用在首先對基本的操作有深刻了解的基礎(chǔ)上，在力求省時、省力、節(jié)約成本等的同時，實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性是最重要的。

對大多數(shù)做蛋白的戰(zhàn)友們來說，培養(yǎng)細(xì)胞應(yīng)該是不陌生的，我這里談一個培養(yǎng)細(xì)胞的小技巧，大家知道，對于一定的空間（如某種尺寸的細(xì)胞培養(yǎng)瓶）來說，細(xì)胞數(shù)目太多或者太少都不利于其生長，太多了就要消化，太少了要換一個小點(diǎn)兒的培養(yǎng)瓶，我的做法是：如果細(xì)胞數(shù)目太少，可以不必去找小一點(diǎn)兒的培養(yǎng)瓶，可把原來的培養(yǎng)瓶由原來的平放改為豎著放，這樣底部的空間就小了，有利于細(xì)胞的生長，當(dāng)細(xì)胞數(shù)目增加到一定程度的時候還可以在平過來，避免了來回?fù)Q培養(yǎng)瓶而增加污染的機(jī)會（對沒有小培養(yǎng)瓶的更實(shí)用）。

個人體會，僅供參考。

38.說說關(guān)于SDS-PAGE的幾個小經(jīng)驗(yàn)

1、做好膠后，把所有的加樣孔都加上樣，這樣可以防止邊緣的樣品脫尾。

2、高電壓/高電流電泳時，可以把電泳槽放到4度冰箱中進(jìn)行電泳，省時省力，1hr搞定。

3、膠考染時間40min，放在凝膠搖床上（沒有膠床可以放到28度普通搖床上，但要控制好搖床速度）緩緩搖動，使染色均勻，同時可提高檢測的靈敏度，根據(jù)我的經(jīng)驗(yàn)可以達(dá)到銀染的級別，就是脫色時間比較長，一般需要脫色2－3d，夏天的時候要勤換脫色液，防止變臭哦

39.質(zhì)粒小提如果是用作鑒定或酶切，不必進(jìn)行酚仿抽提，將溶液1.2.3 離心后的清液移入一個新的1.5ml離心管中，再次離心3-5分鐘，小心取出上清液后，直接沉淀，不必?fù)?dān)心DNA切不開，我已經(jīng)這樣使用一年多，沒出過什么問題。當(dāng)然這樣的質(zhì)粒不很干凈，但是做鑒定足夠了。尤其是實(shí)驗(yàn)室女同胞們，可以減少酚仿的侵害，而且節(jié)省時間。

分子生物學(xué)當(dāng)中的經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)及技巧[copy](2009-03-23 15:02:08)大家平時做實(shí)驗(yàn)，肯定都有很多小的技巧，在書上都看不到的，也沒有系統(tǒng)的整理，但是確實(shí)能夠起到很好的作用，不妨在這里與大家分享一下。

任何專業(yè)任何點(diǎn)滴的東西都行，也許就對別人有一點(diǎn)好處哦！舉個例子：

我在用酶標(biāo)板加樣的時候，蛋白樣品常常會產(chǎn)生很多氣泡，如果做熒光實(shí)驗(yàn)，由于靈敏度非常高，一點(diǎn)點(diǎn)微小的氣泡都會影響很大，常常又不可能加消泡劑，我就用衛(wèi)生紙，撕下來一下條，搓成小針，碰一碰氣泡就破了，很好使：）

1、酶切或者PCR體系混合好以后，大家都會用手指輕彈EP管的底部來混勻溶液，常常出現(xiàn)很多氣泡。這時候輕彈液面上方的管壁，消除氣泡就輕而易舉了。千萬別彈液面下方的，氣泡會越來越多。

2、CR不要一次做太多樣品 有時候機(jī)器不穩(wěn)定 影響結(jié)果

3、用衛(wèi)生紙是一個，我覺得最好的是用接種針燒熱了之后去戳一下，防止被衛(wèi)生紙污染哈 建議瞬間離心一下是最好的，不但消除氣泡，還有將管壁上的液體離下來，否則可能不夠分裝

4、衛(wèi)生紙主要成分是纖維素，一般并不會污染樣品，除非你做分析實(shí)驗(yàn)，之所以用衛(wèi)生紙是因?yàn)樗鼤?，減少水的表面張力，很容易就讓氣泡破裂了

5、磁珠回收時，不要貪多，收集上層即可，太過影響DNA的純度和質(zhì)量，對鏈接、轉(zhuǎn)化有影像。

6、各種buffer都要完全融化后才能用，而且不管什么藥品，如果只剩下最后一點(diǎn)底子了，最好放棄，因?yàn)榭赡軙绊懩愕膶?shí)驗(yàn)

7、動手前，一定要思路清晰，盡量把要做的事情列出來

8、做前一定要在筆記上寫上1、2、3.....，在按照筆記一步一步做，否則容易出錯。

9、要加的酶阿，dNTP，水啊之類的能分裝的話最好分裝好一點(diǎn)，萬一污染的話就全完了

10、實(shí)驗(yàn)前,列個表單,列明關(guān)鍵點(diǎn).避免出錯.這樣費(fèi)一點(diǎn)時間是值得的.不要太相信自己的記憶.孤風(fēng)逐日：任何試劑反復(fù)凍融對其效率都有很大地影響。所以買來的試劑第一次使用時要注意按每次實(shí)驗(yàn)用量分裝保存。提取的模板或純化的樣品也最好分裝保存，以備不測。

很多個人經(jīng)驗(yàn)在個板塊相關(guān)分析中都有一些提及，只要多加留意就可以學(xué)到很多高手的不傳經(jīng)驗(yàn)。

11、同時做很多管PCR時的加樣技巧 例如，需要做n管PCR：

1.如果用同一對引物擴(kuò)不同的模板，可以先按照事先確定的比例，按照n+2的量把水，反應(yīng)緩沖液，dNTP，鎂鹽，引物和Tag酶先加到一個大管里面，混勻后就是“預(yù)混合液”了，然后把“預(yù)混合液”分裝到做PCR用的小管里面，通常我會分裝n+1管，最后向前n管里面入模板，混勻，最后一管不加模板而是加入和模板等量的無菌水，作為對照，以檢查加樣過程中是否引入了污染，接下來就可以進(jìn)行PCR反應(yīng)。2.如果用不同的引物擴(kuò)同一模板（不做多重PCR），則將第1點(diǎn)的引物和模板次序調(diào)換即可。3.同理，如果用不同的引物分別擴(kuò)不同的模板，則將引物和模板留在最后分裝后再分別加入。

這樣做的優(yōu)點(diǎn)：可以大量減少取樣次數(shù)，減少了不同PCR管之間的誤差（這一點(diǎn)對于熒光定量PCR尤其重要）；節(jié)省時間。

缺點(diǎn)：如果在制備預(yù)混合液時的任何一步引入了污染則會導(dǎo)致這一批次的所有PCR反應(yīng)都被污染，所以我每次都做一個陰性對照（用無菌水替換模板），以檢測是否被污染。

12、如果遇到試驗(yàn)有很多步，只是自己看protocol做，沒有人帶而且是第一次，我建議確立好步驟，然后每做一步的時候只注重眼前這一步，認(rèn)真的做，不出錯。這樣每一步都只是關(guān)心眼下，可以集中精力，并且每一步都保證無誤，最后結(jié)果應(yīng)該不會太壞，而且即使出了問題，可以排除操作的因素。

13、跑PAGE膠染色的技巧吧：

其實(shí)是我自己的親身體會，大家都知道如果嚴(yán)格按照protocol上的去做不但浪費(fèi)藥品，也浪費(fèi)時間，程序還繁瑣，當(dāng)然代價也高些。

1、如果你跑的是小板的（SSR之類的分析足夠），那么先找來4個1升左右的空塑料瓶，洗干凈（我用的是上海國藥的裝尿素瓶，帶蓋的），用來分別裝銀染要用的固定液、染色液（硝酸銀）、顯影液、純水，在每個上面分別寫上名字，以免弄錯，每次回收這些溶液后，把蓋子擰緊，以阻止一些揮發(fā)或分解吧，延長使用“壽命”。

2、一般的書上都說顯影液只能用一次，其實(shí)完全不至，我一般都是至少用2次，根本一點(diǎn)問題都沒有。還有固定液和染色液也可以適當(dāng)多用幾次，只要能然出來就行。

3、有的時候?qū)嶒?yàn)室用超純水so多，也so浪費(fèi)，或是一時半會制不出來，而染色要用怎么辦呢，我無意中就用蒸餾水代替，什么問題都沒有，根本沒啥差別，甚至于后來我壓根都不用蒸餾水了，干脆改自來水，也沒啥問題，完全可行，不信大家可以試試，呵呵，雖然說是可能某些地方不是很合理，但對一般像做分子標(biāo)記之類的根本沒啥影響，替老板能省就省點(diǎn)吧，大家都不容易，哈哈!還有我忘了說了，以前經(jīng)常跑完膠后來不及染色就得回寢室了，怎么辦呢，不用熬夜，就把膠剝離下來泡在固定液里，第二天早上再來接著下面的步驟一點(diǎn)問題都沒有，就是可能膠尺寸會有些變化，但絕對不影響你的結(jié)果。

最后一個就是讀帶問題，我見過別人好多種方法，但我自己“發(fā)明”了一種實(shí)用、準(zhǔn)確的：

找一塊大點(diǎn)的普通玻璃板(我當(dāng)時用的是跑大垂直板膠的），帶上手套（保護(hù)好自己，雖然聚合后毒性小，但還是有的），快速把膠撈出來，放在玻璃板上，再迅速把玻璃翻個面，平放在觀片燈上，只要你速度快，膠是不會掉下來的，會緊緊貼在玻璃上的，最好玻璃板和管片燈的平面有點(diǎn)空隙，否則膠粘住觀片燈表面就會把燈面弄臟，膠也可能會掉，一切弄好后，你就可以直接那筆在玻璃的這個干凈面上一清二楚的讀帶，直接可以往上面寫帶型，然后為了以后檢查用，最好用數(shù)碼相機(jī)快速拍照保存，不但膠上的帶可以看清，你在玻璃上寫的帶型數(shù)字也是非常清楚的，當(dāng)然讀完的膠就可以立即扔掉，沒必要保存

14、做實(shí)驗(yàn)時，認(rèn)真做好記錄，寫好實(shí)驗(yàn)結(jié)果，過一段時間再去看看，溫故而知新

15、有些時候做完ＰＣＲ，由于條帶很淡，但你想回收．不妨將有目的條帶的膠切下來．放到－２０度凍一會，拿出吸它的液體作摸板，再擴(kuò)增效果很好！

16、做轉(zhuǎn)染，我養(yǎng)過四五種細(xì)胞，都做了轉(zhuǎn)染，但每種的轉(zhuǎn)染率都不一樣，本人當(dāng)時就吃了這個虧，提醒大家，誰做轉(zhuǎn)染事前先查一下要轉(zhuǎn)的細(xì)胞轉(zhuǎn)然率怎么樣。

還有就是我在用脂質(zhì)體2000做轉(zhuǎn)染時，一次發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染6小時后的液體打到其他細(xì)胞里仍可以轉(zhuǎn)進(jìn)去，所以為了提高轉(zhuǎn)染率，我以后在6小時的時候都沒有把轉(zhuǎn)染液體打出去，只是又加了含血清的培養(yǎng)基。但有一個問題就是，不打出去的話，細(xì)胞會死很多，這個也與養(yǎng)的細(xì)胞種類，狀態(tài)都有關(guān)。PCR預(yù)混:預(yù)混一般根據(jù)樣品的多少，一般我在預(yù)混的時候大概每個樣品管中預(yù)計損失0。5－0。6微升，這樣計算需要的總的預(yù)混液數(shù)量，比較合適。

18、做實(shí)驗(yàn)前 一定先寫出步驟和列出實(shí)驗(yàn)所需要的試劑和器材，下面看看哪些是要購買的，哪些是需要清洗的，哪些是要前處理的如過濾、高壓。

定試劑一定要打提前量，不好買的試劑一定要在3周左右前訂購，如在SIGMA訂貨。實(shí)驗(yàn)的時候一定要坐好標(biāo)記！什么時間，多少濃度，如PH值,是否過濾了，做完實(shí)驗(yàn)有寫離心或過濾的殘液，先不要丟棄，萬一實(shí)驗(yàn)失敗，還要重復(fù)的。實(shí)驗(yàn)中的每個環(huán)節(jié)都很重要 忽略任何一個都可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)的失敗

每個人在實(shí)驗(yàn)中都有自己的一些好的細(xì)小的習(xí)慣

例如tip頭吸完后馬上從移液器上取下來，以免忙亂的時候又以同一tip汲取另一種試劑 用完量桶或者燒杯后，及時清洗，并放入烘箱。不管大小實(shí)驗(yàn)，做完后都要認(rèn)真做記錄。

一個槍頭如果可以連續(xù)吸兩次的話，也不能吸，主要是第二次吸時不準(zhǔn)，同時也不能完全打出來。做完實(shí)驗(yàn)擦干桌子，一切東西歸位，有些東西可以回收的就回收，很多實(shí)驗(yàn)室的槍頭是回收的 實(shí)驗(yàn)前認(rèn)真設(shè)計，作實(shí)驗(yàn)時不胡思亂想，嘰嘰喳喳，做完后在海闊天空，認(rèn)真分析試驗(yàn)數(shù)據(jù)

做之前認(rèn)真設(shè)計,做時就不要老是想著結(jié)果,平心靜氣,注意細(xì)節(jié)，認(rèn)真記錄，因?yàn)槭∈浅Ｊ拢灰剡^頭不知道該從哪里找原因。

每次的實(shí)驗(yàn)結(jié)束，要及時做好記錄，不要等。好記性不如爛筆頭，這雖然是俗語，但是不要放棄筆的重要性！

加入試劑之前,把它混勻一下,以免放置時間長了濃度不均

做完實(shí)驗(yàn)，清理實(shí)驗(yàn)臺，以便下次能夠更快、更好，更方便的繼續(xù)工作！藥品歸位，儀器歸位！做實(shí)驗(yàn)一定要有計劃,最好在有部分實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)出來時,就著手寫文章,這個不是為了出文章,而是在寫文章的時候,可以清晰自己的思路,知道后面該先做什么,該重點(diǎn)做什么.不然有時候辛苦半死,數(shù)據(jù)太分散,不能說明問題.不輕易用別人的東西，用時先打招呼，記錄要詳細(xì)，配液體時要記錄試劑的批號等? 所有的東西都要即時標(biāo)記好，日期，藥品名稱，濃度，等

移液槍用完之后要?dú)w到最大計量的位置，防止久而久之彈簧失去彈性。

不用酶標(biāo)槍時不要一直拿在手里，不可以倒過來（特別是里面還有液體的時候）不要一直說話、聊天~~ 筆記要全~要多全有多全~ 還有一點(diǎn)很關(guān)鍵，筆記要放好，最近我的筆記掉了~哭死 最后，做完實(shí)驗(yàn)要洗手~ 離開實(shí)驗(yàn)室前或進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室前注意水，電是否安全

試驗(yàn)之前看資料的時候，最好規(guī)類存放，看過后記下重點(diǎn)內(nèi)容，并將出處標(biāo)明，以免日后找不到 一定要記著關(guān)水浴箱，切記切記。

第三篇：生活財政小結(jié)

2013年工作計劃

作為班中的生活委員兼財政大臣，在進(jìn)行了一學(xué)期的工作后，發(fā)現(xiàn)了班級工作生活中的某些漏洞和不足。

首先，上學(xué)期的收入主要來自與開學(xué)初收取的班費(fèi)；知道上學(xué)期末，最后的余額為255.8元。

上學(xué)期使用班費(fèi)時，總是發(fā)生買回來的東西無用或是重復(fù)購買的事，導(dǎo)致班費(fèi)的浪費(fèi)。希望這學(xué)期同學(xué)在預(yù)支班費(fèi)的能做好預(yù)算分析，并且購買班級用品時能貨比三家，在班集體中弘揚(yáng)簡樸節(jié)儉精神。當(dāng)然，最后還要記得要收據(jù)或發(fā)票。

上學(xué)期每個月收取伙食費(fèi)，同學(xué)們總是不能及時地、高效率地把伙食費(fèi)交齊。而當(dāng)本學(xué)期第一個月收取伙食費(fèi)時，只用了兩天同學(xué)們就將錢交齊了。本學(xué)期，希望同學(xué)們能在各方面收取費(fèi)用時交費(fèi)及時高效。作為班級的財務(wù)大臣，當(dāng)然希望班級的財政在自己的精心打理下能呈現(xiàn)日益上升的趨勢。這學(xué)期，如果能在班級同學(xué)的支持和我這個生活委員的努力下，我們這個“不二之家”一定能蒸蒸日上！

張伊妮

高一（2）班

第四篇：生活委員小結(jié)

生活委員小結(jié)

轉(zhuǎn)眼間已經(jīng)是大二下半學(xué)期了，我擔(dān)任08屆3班的生活委員一職也已經(jīng)快2個年頭了。

在這兩年中，我從懵懂無知遇事手忙腳亂到現(xiàn)在自認(rèn)能游刃有余地處理生活委員的相關(guān)事物，不能不說這個職位給了我很多鍛煉。初時競選這個職務(wù)，只是因?yàn)橛X得自己還算細(xì)心耐心，也有一定的責(zé)任感，應(yīng)該可以勝任，可當(dāng)上后才明白，這樣是遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠的。

擔(dān)任生活委員，除了要處理班級財務(wù)上的一系列事情外，還要為班級后勤做好服務(wù)，在上個學(xué)期，除了一些支出諸如班級報刊的訂閱，或者材料的復(fù)印，我們班還舉辦了兩次班會，一次是為馬馮莉同學(xué)辦的參軍送別會，還有一次是元旦和圣誕的雙蛋晚會，從教室布置到采買東西，我都盡了自己應(yīng)該盡的一份力，做好了身為一個生活委員應(yīng)盡的職責(zé)，其過程雖然瑣碎繁忙，但我卻能樂在其中，因?yàn)檫@不僅在一定程度上培養(yǎng)了我的能力，也鍛煉了我的心性，使我遇事更加沉著冷靜，有條不紊。

當(dāng)然，在生活上，我也盡量關(guān)心同學(xué)，和睦友愛，我還主動擔(dān)任了女生寢室的廳長，以便更好的為同學(xué)們服務(wù)。作為一個生活委員，除了在班級財務(wù)上要有一絲不茍的態(tài)度外，還要有很好的溝通交涉能力。我承認(rèn)在大學(xué)以前我都是一個性格內(nèi)向不愿意多說話的人，所以在第一次收班費(fèi)或者第一次安排同學(xué)做勞動時，我委實(shí)遇到了困難，但我漸漸明白，這是我所欠缺的能力，我必須不斷地完善自己，大學(xué)是個很好的煉鋼爐，它永遠(yuǎn)能讓你明白你還欠缺什么，還需要向哪方面進(jìn)行努力，于是我慢慢愿意與人溝通交流，與同學(xué)們也越來越相處愉快了。

同樣地，在學(xué)習(xí)上我也刻苦努力，我學(xué)會了如何更好的利用時間，如何規(guī)劃好自己的人生，不浪費(fèi)自己的生命，獲取知識，爭取獲得獎學(xué)金，以做好班干部的帶頭作用，在能幫助到別人的時候盡量幫助別人，與班級同榮辱共進(jìn)退。

所以說，進(jìn)入大學(xué)的兩年，我覺得我成長的不僅是年齡，更是人格?；蛟S有一些困難，但是在同學(xué)與老師的陪伴下，我順利的走過來了。我希望我的工作能得到同學(xué)們的認(rèn)可，這是我經(jīng)過兩年工作后最欣慰的事，而在以后的工作中我會更加努力的完成自己的工作，也會更加自信，更加努力，做一個真正為大家服務(wù)的班干部，希望在以后的日子里，大家能給我提寶貴的意見，讓我不斷的進(jìn)步，更好的為大家服務(wù)！

第五篇：寒假生活小結(jié)（精選）

寒假生活小結(jié)

我們剛剛度過一個“健康、安全、愉快、有益”的寒假和“歡樂、祥和、文明”的春節(jié)，送走了三個星期輕輕松松的寒假，又迎來了一學(xué)期緊張而又快樂的學(xué)習(xí)生活?，F(xiàn)對這個寒假作以下小結(jié)：

1、安排好作息時間。

雖然寒假生活十分愜意，但每個同學(xué)都過得很有規(guī)律，并沒有因此而養(yǎng)成壞習(xí)慣。每個同學(xué)都制定了一份合理的作息時間表。安排好自己的作業(yè)、活動和休息，養(yǎng)成了良好的生活習(xí)慣。

2、提高安全意識。

由于很多家庭都是雙職工，因此，有些同學(xué)在暑假里要獨(dú)自在家。但同學(xué)們都做好了防火、防盜、禁毒、交通安全工作。春節(jié)期間，大家沒有暴飲暴食，沒有購買非法煙花爆竹，也沒有在內(nèi)環(huán)線以內(nèi)燃放煙花爆竹。

3、認(rèn)真完成寒假作業(yè)。

兩個月的暑假，同學(xué)們認(rèn)真完成暑假作業(yè)，做到溫故知新，并為新學(xué)期的學(xué)習(xí)作好充分準(zhǔn)備。還利用寒假，看了不少課外書，增長了知識，與書交上了好朋友。

4、做父母的好幫手。

作為家庭中的一員，假期里，同學(xué)們能主動幫助父母做力所能及的事，體驗(yàn)了爸爸媽媽持家的辛苦，也鍛煉自己勞動的能力，還從中學(xué)會了幾種勞動技能。

5、關(guān)心時事。

在寒假里，同學(xué)們能每天收看電視新聞或收聽廣播，了解國家大事，增強(qiáng)了自己的愛國意識和責(zé)任意識。

6、堅持體鍛，增強(qiáng)體質(zhì)。

雖然寒假十分寒冷，但同學(xué)們能堅持體鍛，如：跳繩、踢毽子、排球等。通過體鍛，增強(qiáng)了體質(zhì)，也培養(yǎng)了堅強(qiáng)的意志。

7、作好新學(xué)期準(zhǔn)備。

在寒假里，每個同學(xué)根據(jù)自己的實(shí)際情況，做了新學(xué)期的打算，為自己定好了新學(xué)期的新目標(biāo)。這樣，有了目標(biāo)，才有動力;有了動力，才會進(jìn)步。

2016年學(xué)校寒假生活工作總結(jié)

快樂而短暫的寒假帶著春節(jié)的喜慶一晃而過，踏著春天的腳步，老師和孩子們帶著收獲和成長的喜悅重返美麗校園，又將迎接一個新的學(xué)期。回顧寒假生活，大家都覺得在寒假中過得有滋有味，生活豐富多彩?，F(xiàn)將情況總結(jié)如下：

一、認(rèn)真做好假前宣傳教育工作。

寒假開始前，分別召開了學(xué)校領(lǐng)導(dǎo)班子會議、班主任會議及全體教職工會議，明確了各自的工作任務(wù)，同時還給向全體學(xué)生家長發(fā)了一份《寒假致家長的一封信》，使學(xué)生家長明確學(xué)校寒假工作的指導(dǎo)思想、要求、安排，并請家長配合學(xué)校關(guān)心、指導(dǎo)、教育好孩子的寒假生活。

二、開展了豐富多彩的寒假實(shí)踐活動。

感恩教育和習(xí)慣養(yǎng)成教育是我校常抓不懈的重點(diǎn)工作之一，寒假期間，學(xué)校積極引導(dǎo)學(xué)生在假期開展了一系列有意義的寒假活動，通過活動鍛煉自我，快樂成長。

1、“小鬼當(dāng)家”春節(jié)感恩主題活動。

假期中，我們許多的孩子主動承擔(dān)起家庭的一個個小崗位：洗碗、拖地、洗衣服、倒垃圾??就連低年級的小朋友也已經(jīng)嘗試自己洗襪子、洗紅領(lǐng)巾等力所能及的事情。在勞動中，他們體會到了父母勞動的艱辛，培養(yǎng)了學(xué)生關(guān)心父母、孝順長輩、感恩社會的意識。

2、“新春送春聯(lián)”活動。

寒風(fēng)送春聯(lián)，墨香暖人心。1月20日——22日，我們學(xué)校依托鄉(xiāng)村少年宮開展了“送春聯(lián)”活動?；顒蝇F(xiàn)場，我校少年宮的書法老師擺出筆墨紙硯，揮毫潑墨，為村民們現(xiàn)場書寫春聯(lián)，書寫的同時也送上了一份份新春的祝福?！盎ㄩ_天下福，馬躍人間春”、“春來山水秀，馬躍路途款”。村民們拿著一幅幅寫好的春聯(lián)，笑得合不攏嘴。“謝謝你們舉辦這次活動，為我們現(xiàn)場寫春聯(lián)，讓我們可以帶著春聯(lián)喜慶的過年?！倍潭桃粋€多小時，現(xiàn)場就送出了二百余幅春聯(lián)。

3、“書香閱讀”好書伴我成長活動。

在假期中孩子們除了有計劃地認(rèn)真完成寒假作業(yè)外，還通過閱讀一些有益的課外書籍，增長見識，并能認(rèn)真做好閱讀筆記，寫好讀后感。開學(xué)后，學(xué)校大隊(duì)部已陸續(xù)收到了各班的優(yōu)秀作文。

4、鄉(xiāng)村少年宮實(shí)踐活動

“鄉(xiāng)村少年宮開課了，農(nóng)村娃娃可以免費(fèi)學(xué)舞蹈、美術(shù)、小提琴啦!”2月9日，學(xué)校鄉(xiāng)村少年宮正式開課，本次活動按照完全自愿的原則免費(fèi)向?qū)W生開放。來自學(xué)區(qū)四所小學(xué)的近100名學(xué)生參加了少年宮課程的學(xué)習(xí)。擔(dān)任少年宮的老師除了學(xué)校有特長的教師外，還邀請了校外的志愿者擔(dān)任輔導(dǎo)員。鄉(xiāng)村學(xué)校少年宮活動的正常開展，受到了教師、學(xué)生和家長的熱烈歡迎和高度評價，產(chǎn)生了廣泛的社會效應(yīng)。一位母親看到自己孩子的變化，高興地說：“以前放假，孩子要么在外面‘野’，要么往網(wǎng)吧鉆，就算在家也是趴在電視機(jī)前一看就是幾個小時?，F(xiàn)在好了，少年宮讓他收了‘玩心’，而且有機(jī)會根據(jù)自己的興趣愛好發(fā)展特長，真是太好了!”

三、做好假期學(xué)校安全保衛(wèi)工作。

學(xué)校加強(qiáng)了假期值班護(hù)校工作，注意防火、防盜，確保學(xué)校校舍和財產(chǎn)安全;加強(qiáng)門衛(wèi)管理和夜間巡邏，嚴(yán)防火災(zāi)、盜竊和其他突發(fā)事故發(fā)生，確保了學(xué)校財產(chǎn)安全。

寒假是短暫的，但同學(xué)們的寒假生活是豐富多彩的，家長的反映也很好，學(xué)生得到了許多的鍛煉，也收獲到了成功的果實(shí)。在今后的假期中將繼續(xù)開展豐富的有利于學(xué)生們成長的綜合實(shí)踐活動，不斷創(chuàng)新，再創(chuàng)佳績