第一篇：微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理制度

微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理制度

第一章 總 則

1.為了加強(qiáng)病原微生物實(shí)驗(yàn)室的生物安全管理，保護(hù)實(shí)驗(yàn)室工作人員和公眾的健康，制定本制度。

2.醫(yī)院和科內(nèi)實(shí)行對(duì)實(shí)驗(yàn)室的實(shí)驗(yàn)活動(dòng)進(jìn)行安全管理與監(jiān)督。

3.實(shí)驗(yàn)室實(shí)行分級(jí)管理，檢驗(yàn)科微生物室為二級(jí)生物安全標(biāo)準(zhǔn)。

4.檢驗(yàn)科負(fù)責(zé)微生物室日?；顒?dòng)的管理，承擔(dān)建立健全安全管理制度，檢查、維護(hù)實(shí)驗(yàn)設(shè)施、設(shè)備，控制實(shí)驗(yàn)室感染的職責(zé)。

第二章 生物安全水平

生物安全水平一般可分為四級(jí)：

a.生物安全水平Ⅰ級(jí)：用于已知的通常不引起健康成人感染，對(duì)實(shí)驗(yàn)室人員和環(huán)境危害甚少的病原體，如大腸艾希氏菌等。

b.生物安全水平Ⅱ級(jí)：用于具有中度潛在危害的病原的實(shí)驗(yàn)操作，主要防止通過(guò)皮膚黏膜及消化道的感染，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有進(jìn)出規(guī)定程序，粘貼生物危險(xiǎn)的警示標(biāo)志。

c.生物安全水平Ⅲ級(jí)：用于可通過(guò)氣溶膠傳播的，能引起嚴(yán)重可致死性疾病的病原體，如結(jié)核分支桿菌等。

d.生物安全水平Ⅳ級(jí)：可用于可通過(guò)氣溶膠傳播的，能引起致死性感染的高風(fēng)險(xiǎn)劇毒病原的操作。同時(shí)還要有內(nèi)部和外部進(jìn)行對(duì)話的裝置，要有應(yīng)急供氣、應(yīng)急供電和應(yīng)急出口等。

第三章 生物安全操作要求

實(shí)驗(yàn)室操作要求分為標(biāo)準(zhǔn)微生物學(xué)操作（見微生物操作規(guī)程）和特殊操作，前者是指實(shí)驗(yàn)室安全的共性要求，后者是指根據(jù)特定生物安全的級(jí)別提出的特殊要求。

安全裝備：為達(dá)到生物安全的目的，安全裝備包括兩部分，即操作設(shè)備、生物安全柜。二級(jí)實(shí)驗(yàn)室必須有可提供一個(gè)無(wú)菌操作的生物安全柜。

個(gè)人防護(hù)用品：主要有工作服、隔離衣、防護(hù)服、工作帽罩、眼罩、面罩、手套，呼吸保護(hù)裝置及正壓氣體供應(yīng)的工作服等。

第四章標(biāo)本的采集、轉(zhuǎn)運(yùn)和接收

微生物標(biāo)本在接收時(shí)操作者要穿工作服、帶手套和口罩，必要時(shí)要戴眼罩，必須在生物安全

柜內(nèi)執(zhí)行嚴(yán)格操作。所有盛標(biāo)本的容器必須是防漏的。在轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)應(yīng)密封，標(biāo)本不可發(fā)生泄露。一旦發(fā)生泄露，應(yīng)高壓滅菌處理。具有強(qiáng)感染性的標(biāo)本轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)要嚴(yán)格包裝，嚴(yán)格操作。標(biāo)本的采集應(yīng)由專人轉(zhuǎn)送，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)由專人驗(yàn)收和簽收。

第五章 生物廢物的安全處理

1.生物廢物包括培養(yǎng)物、分離物極其污染物，剩余標(biāo)本極其污染物，尖銳破碎物，吸管、針頭和費(fèi)包裝等。

2.生物廢物的安全處理要求：A.裝廢物的容器應(yīng)防漏，堅(jiān)固而不宜刺穿，密封并要避免裝的太滿。B.尖銳的破碎物要放入專用的硬質(zhì)容器中。C.盛放生物廢物的容器應(yīng)置入高壓滅菌袋中送去滅菌。D.所有能在實(shí)驗(yàn)室消毒的物品在送出實(shí)驗(yàn)室前盡可能先進(jìn)行一次消毒處理。E.盛放生物廢物的容器要做到安全轉(zhuǎn)運(yùn)。

第六章 安全應(yīng)急措施

1.操作者暴露的處理A.立即報(bào)警并告知同事。B.立即用肥皂水清洗暴露表面，用洗眼液洗眼，用生理鹽水漱口。C.啟動(dòng)應(yīng)急治療。D.盡快向上級(jí)報(bào)告。

2.污染表面的處理A.立即報(bào)警并告知同事。B.隔離污染區(qū)。C.處理者穿戴適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)服。

D.用鑷子將污染物移入廢物桶。E.用干毛巾吸干，將消毒劑到在毛巾上，一段時(shí)間后仍入廢物桶。F.先后以消毒劑和酒精清洗污染表面。G.以適當(dāng)方法對(duì)桶消毒。F.盡快報(bào)告上級(jí)。

第二篇：微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理制度

微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理制度

1.進(jìn)入微生物實(shí)驗(yàn)室所有人員必須以本規(guī)定規(guī)范自己的工作。

2.非工作人員不得進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域，外來(lái)參觀、學(xué)習(xí)、進(jìn)修人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室應(yīng)得到批準(zhǔn)并進(jìn)行登記，遵守實(shí)驗(yàn)室的生物安全相關(guān)規(guī)章制度。經(jīng)批準(zhǔn)的來(lái)實(shí)驗(yàn)室參觀、協(xié)作、工程維護(hù)和儀器調(diào)試（或維修）的外來(lái)人員必須有本實(shí)驗(yàn)室人員陪同。

3.實(shí)驗(yàn)室人員在下列情況進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室特殊工作區(qū)需經(jīng)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人同意： 1）身體出現(xiàn)開放性損傷；2）患發(fā)熱性疾?。?）呼吸道感染或其它導(dǎo)致抵抗力下降的情況；4）正在使用免疫抑制劑或免疫耐受；5）妊娠；

4.所有實(shí)驗(yàn)室工作人員上崗前必須接受相關(guān)生物安全知識(shí)、生物安全法規(guī)制度培訓(xùn)并考試合格。

5.實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立人員健康檔案，并定期對(duì)實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)行健康監(jiān)測(cè)與評(píng)估。包括上崗前體檢，存留血清樣本，定期體檢，免疫接種。體檢指標(biāo)除常規(guī)項(xiàng)目外還應(yīng)包括與準(zhǔn)備從事工作有關(guān)的特異性抗原、抗體檢測(cè)。

6.從事實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員應(yīng)熟練掌握相關(guān)檢驗(yàn)技術(shù)，常規(guī)消毒原則和技術(shù)，掌握意外事件和生物安全事故的應(yīng)急處置原則和上報(bào)程序。實(shí)驗(yàn)活動(dòng)輔助人員；（廢棄物管理人員、洗刷、保潔人員等）應(yīng)掌握責(zé)任區(qū)內(nèi)生物安全基本情況，了解所從事工作的生物安全風(fēng)險(xiǎn)，接受與所承擔(dān)職責(zé)有關(guān)的生物安全知識(shí)和技術(shù)，個(gè)體防護(hù)方法等內(nèi)容的培訓(xùn)，熟悉崗位所需消毒知識(shí)和技術(shù)，了解意外事件和生物安全事故的應(yīng)急處置原則和上報(bào)程序。

7.實(shí)驗(yàn)室工作人員必須遵守實(shí)驗(yàn)室各項(xiàng)規(guī)章制度，嚴(yán)格遵守操作規(guī)程，避免實(shí)驗(yàn)室生物安全事故的發(fā)生。實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程嚴(yán)格按照生物安全規(guī)定做好個(gè)人防護(hù)，以保證實(shí)驗(yàn)人員的安全和健康。

8.嚴(yán)格按照要求管理菌（毒）種，菌（毒）種在使用、保藏、轉(zhuǎn)運(yùn)、銷毀過(guò)程中發(fā)生被搶、盜、遺失等事故，不得隱瞞，應(yīng)保護(hù)好現(xiàn)場(chǎng)，立即報(bào)告生物安全負(fù)責(zé)人、保衛(wèi)部門、中心領(lǐng)導(dǎo)和公安部門及時(shí)進(jìn)行處理。

9.如發(fā)生實(shí)驗(yàn)室生物安全事故，應(yīng)立即對(duì)被污染的表面或物品進(jìn)行消毒，對(duì)受傷的人員進(jìn)行緊急救護(hù)處理，并做好記錄，及時(shí)報(bào)告實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人和中心分管領(lǐng)導(dǎo)。

10.實(shí)驗(yàn)區(qū)發(fā)生泄漏事件或溢出事件影響到辦公區(qū)人員安全時(shí)，辦公區(qū)人員應(yīng)及時(shí)撤離。在明確撤離指示后不得再進(jìn)入返回實(shí)驗(yàn)區(qū)。撤離路線按照通道中“安全通道”箭頭指示，有序撤離。

11.實(shí)驗(yàn)室生物安全監(jiān)督員定期巡查實(shí)驗(yàn)室生物安全情況并做好巡查記錄，發(fā)現(xiàn)問(wèn)題應(yīng)及時(shí)提出并督促糾正。

12.實(shí)驗(yàn)室監(jiān)控設(shè)備管理人員定期對(duì)監(jiān)控設(shè)備進(jìn)行電路、線路檢查，定期備份管理監(jiān)控信息，以備需要時(shí)可以及時(shí)提供相關(guān)監(jiān)控資料。

13.實(shí)驗(yàn)室廢氣、廢物和廢水處理必須符合國(guó)家相關(guān)規(guī)定，并詳細(xì)記錄，以備檢查。

14.安保人員定時(shí)巡查，尤其是節(jié)假日和夜間，防止安保事件發(fā)生。安保人員或?qū)嶒?yàn)室人員發(fā)現(xiàn)安全隱患時(shí)，應(yīng)及時(shí)報(bào)告中心安全保衛(wèi)工作分管領(lǐng)導(dǎo)。

第三篇：微生物實(shí)驗(yàn)室安全管理制度

微生物實(shí)驗(yàn)室安全管理制度

一、生物安全管理

1、實(shí)驗(yàn)室主任（對(duì)實(shí)驗(yàn)室直接負(fù)責(zé)的人員）負(fù)責(zé)制訂和采用生物安全管理計(jì)劃以及安全或操作手冊(cè)。

2、實(shí)驗(yàn)室安全主管（向?qū)嶒?yàn)室主任匯報(bào)）提供常規(guī)的實(shí)驗(yàn)室安全培訓(xùn)。

3、將生物安全實(shí)驗(yàn)室的特殊危害告知實(shí)驗(yàn)室人員，要求他們閱讀生物安全或操作手冊(cè)，并遵循標(biāo)準(zhǔn)的操作和規(guī)程。實(shí)驗(yàn)室主管應(yīng)當(dāng)確保所有實(shí)驗(yàn)室人員都了解這些要求。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)應(yīng)備有可供取閱的安全或操作手冊(cè)。

二、實(shí)驗(yàn)室生物安全規(guī)程

（一）進(jìn)入規(guī)定

1、在處理危險(xiǎn)度2級(jí)或更高危險(xiǎn)度級(jí)別的微生物的實(shí)驗(yàn)室門上應(yīng)標(biāo)有國(guó)際通用的生物危害警告標(biāo)志。

2、只有經(jīng)批準(zhǔn)的人員方可進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域。

3、實(shí)驗(yàn)室的門應(yīng)保持關(guān)閉。

4、兒童不應(yīng)被批準(zhǔn)或允許進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域。

（二）操作規(guī)范

1、嚴(yán)禁用口吸移液管。

2、嚴(yán)禁將實(shí)驗(yàn)材料置于口內(nèi)。嚴(yán)禁舔標(biāo)簽。

3、所有的技術(shù)操作要按盡量減少氣溶膠和微小液滴形成的方式來(lái)進(jìn) 行。

4、出現(xiàn)溢出、事故以及明顯或可能暴露于感染性物質(zhì)時(shí)，必須向?qū)嶒?yàn)室安全主管報(bào)告。

5、必須制訂關(guān)于如何處理溢出物的書面操作程序，并予以遵守執(zhí)行。

（三）人員防護(hù)

1、在實(shí)驗(yàn)室工作時(shí)，任何時(shí)候都必須穿著工作服。

2、在進(jìn)行可能直接或意外接觸到血液、體液以及其他具有潛在感染性的材料或感染性動(dòng)物的操作時(shí)，應(yīng)戴上合適的手套。手套用完摘除后必須洗手。

3、在處理完感染性實(shí)驗(yàn)材料和動(dòng)物后，以及在離開實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域前，都必須洗手。

4、有噴濺的可能時(shí)，為了防止眼睛或面部受到潑濺物的傷害，應(yīng)戴安全眼鏡、面罩（面具）或其他防護(hù)設(shè)備。

5、不得在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)穿露腳趾的鞋子。

6、禁止在實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域進(jìn)食、飲水、吸煙、化妝和處理隱形眼鏡。

7、禁止在實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域儲(chǔ)存食品和飲料。

8、在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)用過(guò)的防護(hù)服不得和日常服裝放在同一柜子內(nèi)。

（四）實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)

1、實(shí)驗(yàn)室應(yīng)保持清潔整齊，嚴(yán)禁擺放和實(shí)驗(yàn)無(wú)關(guān)的物品。

2、發(fā)生具有潛在危害性的材料溢出以及在每天工作結(jié)束之后，都必須清除工作臺(tái)面的污染。

3、所有受到污染的材料、標(biāo)本和培養(yǎng)物在廢棄或清潔再利用之前，必須清除污染。

4、在進(jìn)行包裝和運(yùn)輸時(shí)必須遵循國(guó)家和∕或國(guó)際的相關(guān)規(guī)定。

5、如果窗戶可以打開，則應(yīng)安裝防止節(jié)肢動(dòng)物進(jìn)入的紗窗。

（五）實(shí)驗(yàn)室生物安全預(yù)防技術(shù) 實(shí)驗(yàn)室中標(biāo)本的安全操作

實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本的收集、運(yùn)輸和處理不當(dāng)，會(huì)帶來(lái)使相關(guān)人員感染的危險(xiǎn)。

1、標(biāo)本容器

標(biāo)本容器可以是玻璃的，但最好使用塑料制品。標(biāo)本容器應(yīng)當(dāng)堅(jiān)固，正確地用蓋子或塞子蓋好后應(yīng)無(wú)泄漏。在容器外部不能有殘留物。容器上應(yīng)當(dāng)正確地粘貼標(biāo)簽以便于識(shí)別。標(biāo)本的要求或說(shuō)明書不能夠卷在容器外面，而是要分開放置，最好放置在防水的袋子里。

2、標(biāo)本接收

設(shè)有接收大量標(biāo)本的專門的房間或空間。

3、打開包裝

接收和打開標(biāo)本的人員應(yīng)當(dāng)了解標(biāo)本對(duì)身體健康的潛在危害，并接受過(guò)如何采用標(biāo)準(zhǔn)防護(hù)方法的培訓(xùn)。標(biāo)本的內(nèi)層容器要在生物安全柜內(nèi)打開，并準(zhǔn)備好消毒劑。避免感染性物質(zhì)的擴(kuò)散

1、為了避免被接種物灑落，微生物接種環(huán)的直徑應(yīng)為2～3mm 并完全封閉，柄的長(zhǎng)度應(yīng)小于6cm 以減小抖動(dòng)。

2、準(zhǔn)備高壓滅菌和／或?qū)⒈惶幚淼膹U棄標(biāo)本和培養(yǎng)物應(yīng)當(dāng)放置在防 漏的容器內(nèi)（如實(shí)驗(yàn)室廢棄物袋）。

3、在每一階段工作結(jié)束后，必須采用適當(dāng)?shù)南緞┣宄ぷ鲄^(qū)的污染。

避免感染性物質(zhì)的食入以及與皮膚和眼睛的接觸

1、微生物操作中釋放的較大粒子和液滴（直徑大于5μm）會(huì)迅速沉降到工作臺(tái)面和操作者的手上。實(shí)驗(yàn)室人員在操作時(shí)應(yīng)戴一次性手套，并避免觸摸口、眼及面部。

2、不能在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)飲食和儲(chǔ)存食品。

3、在實(shí)驗(yàn)室里時(shí)，嘴里不應(yīng)有東西--鋼筆、鉛筆、口香糖。

4、不應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室化妝。

5、在所有可能產(chǎn)生潛在感染性物質(zhì)噴濺的操作過(guò)程中，操作人員應(yīng)將面部、口和眼遮住或采取其他防護(hù)措施。避免感染性物質(zhì)的注入

1、通過(guò)認(rèn)真練習(xí)和仔細(xì)操作，可以避免破損玻璃器皿的刺傷所引起的接種感染。應(yīng)盡可能用塑料制品代替玻璃制品。

2、銳器損傷（如通過(guò)皮下注射針頭、巴斯德玻璃吸管以及破碎的玻璃）可能引起意外注入感染性物質(zhì)。

3、以下兩點(diǎn)可以減少針刺損傷：（a）減少使用注射器和針頭（可用一些簡(jiǎn)單的工具來(lái)打開瓶塞，然后使用吸管取樣而不用注射器和針頭）；（b）在必須使用注射器和針頭時(shí)，采用銳器。

4、不要重新給用過(guò)的注射器針頭戴護(hù)套。一次性物品應(yīng)丟棄在防∕耐穿透的帶蓋容器中。

5、應(yīng)當(dāng)用巴斯德塑料吸管代替玻璃吸管。

三、實(shí)驗(yàn)室設(shè)備

處理生物安全危害時(shí)，使用安全設(shè)施并結(jié)合規(guī)范的操作將有助于降低危險(xiǎn)。選擇設(shè)備時(shí)應(yīng)符合一些基本原則，即：

1、在設(shè)計(jì)上應(yīng)能阻止或限制操作人員與感染性物質(zhì)間的接觸

2、建筑材料應(yīng)防水、耐腐蝕并符合結(jié)構(gòu)要求

3、設(shè)備裝配后應(yīng)無(wú)毛刺、銳角以及易松動(dòng)的部件

4、設(shè)備的設(shè)計(jì)、建造與安裝應(yīng)便于操作、易于維護(hù)、清潔、清除污染和進(jìn)行質(zhì)量檢驗(yàn)。應(yīng)盡量避免使用玻璃及其他易碎的物品。生物安全柜的使用

1、參考國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)和相關(guān)文獻(xiàn)，對(duì)所有可能的使用者都介紹生物安全柜的使用方法和局限性。發(fā)給工作人員書面的規(guī)章、安全手冊(cè)或操作手冊(cè)。特別需要明確的是，當(dāng)出現(xiàn)溢出﹑破損或不良操作時(shí)，安全柜就不再能保護(hù)操作者。

2、生物安全柜運(yùn)行正常時(shí)才能使用。

3、生物安全柜在使用中不能打開玻璃觀察擋板。

4、安全柜內(nèi)應(yīng)盡量少放置器材或標(biāo)本，不能影響后部壓力排風(fēng)系統(tǒng)的氣流循環(huán)。

5、安全柜內(nèi)不能使用本生燈，否則燃燒產(chǎn)生的熱量會(huì)干擾氣流并可能損壞過(guò)濾器。允許使用微型電加熱器，但最好使用一次性無(wú)菌接種環(huán)。

6、所有工作必須在工作臺(tái)面的中后部進(jìn)行，并能夠通過(guò)玻璃觀察擋 板看到。

7、盡量減少操作者身后的人員活動(dòng)。

8、操作者不應(yīng)反復(fù)移出和伸進(jìn)手臂以免干擾氣流。

9、不要使實(shí)驗(yàn)記錄本﹑移液管以及其他物品阻擋空氣格柵，因?yàn)檫@將干擾氣體流動(dòng)，引起物品的潛在污染和操作者的暴露。

10、工作完成后以及每天下班前，使用消毒液對(duì)生物安全柜的表面進(jìn)行擦拭。

11、在安全柜內(nèi)的工作開始前和結(jié)束后，安全柜的風(fēng)機(jī)應(yīng)至少運(yùn)行5min。

12、在生物安全柜內(nèi)操作時(shí)，不能進(jìn)行文字工作。離心機(jī)的使用

1、在使用實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)時(shí)，儀器良好的機(jī)械性能是保障微生物安全的前提條件。

2、按照操作手冊(cè)來(lái)操作離心機(jī)。

3、離心機(jī)放置的高度應(yīng)當(dāng)使小個(gè)子工作人員也能夠看到離心機(jī)內(nèi)部，以正確放置十字軸和離心桶。

4、用于離心的試管和標(biāo)本容器應(yīng)當(dāng)始終牢固蓋緊（最好使用螺旋蓋）。

5、離心桶的裝載、平衡、密封和打開必須在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。

6、離心桶和十字軸應(yīng)按重量配對(duì)，并在裝載離心管后正確平衡。

7、空離心桶用蒸餾水或乙醇（異丙醇，70％）來(lái)平衡。鹽溶液或次氯酸鹽溶液對(duì)金屬具有腐蝕作用，因此不能使用。

8、當(dāng)使用固定角離心轉(zhuǎn)子時(shí)，必須小心不能將離心管裝得過(guò)滿，否 則會(huì)導(dǎo)致漏液。

9、每天檢查離心機(jī)內(nèi)轉(zhuǎn)子部位的腔壁是否被污染或弄臟。如污染明顯，應(yīng)重新評(píng)估離心操作規(guī)范。

10、每天檢查離心轉(zhuǎn)子和離心桶是否有腐蝕或細(xì)微裂痕。

11、每次使用后，要清除離心桶、轉(zhuǎn)子和離心機(jī)腔的污染。

12、使用后將離心桶倒置存放使平衡液流干。移液管和移液輔助器的使用

1、應(yīng)使用移液輔助器，嚴(yán)禁用口吸取。

2、所有移液管應(yīng)帶有棉塞以減少移液器具的污染。

3、不能向含有感染性物質(zhì)的溶液中吹入氣體。

4、感染性物質(zhì)不能使用移液管反復(fù)吹吸混合。

5、不能將液體從移液管內(nèi)用力吹出。

6、刻度對(duì)應(yīng)（Mark-to-mark）移液管不需要排出最后一滴液體，因此最好使用這種移液管。

7、污染的移液管應(yīng)該完全浸泡在盛有適當(dāng)消毒液的防碎容器中。移液管應(yīng)當(dāng)在消毒劑中浸泡適當(dāng)時(shí)間后再進(jìn)行處理。

8、盛放廢棄移液管的容器不能放在外面，應(yīng)當(dāng)放在生物安全柜內(nèi)。

9、有固定皮下注射針頭的注射器不能夠用于移液。

10、在打開隔膜封口的瓶子時(shí)，應(yīng)使用可以使用移液管的工具，而避免使用皮下注射針頭和注射器。

11、為了避免感染性物質(zhì)從移液管中滴出而擴(kuò)散，在工作臺(tái)面應(yīng)當(dāng)放置一塊浸有消毒液的布或吸有消毒液的紙，使用后將其按感染性廢棄 物處理。

四、廢棄物處理

廢棄物是指將要丟棄的所有物品。在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，廢棄物最終的處理方式與其污染被清除的情況緊密相關(guān)。廢棄物處理的首要原則是所有感染性材料必須在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)清除污染、高壓滅菌或焚燒。

1、銳器：皮下注射針頭用后不可再重復(fù)使用，包括不能從注射器上取下、回套針頭護(hù)套、截?cái)嗟?，?yīng)將其完整地置于專用一次性銳器盒中按醫(yī)院內(nèi)醫(yī)療廢物處置規(guī)程進(jìn)行處置。盛放銳器的一次性容器絕對(duì)不能丟棄于生活垃圾中。

2、高壓滅菌后重復(fù)使用的污染（有潛在感染性）材料：任何高壓滅菌后重復(fù)使用的污染（有潛在感染性）材料不應(yīng)事先清洗，任何必要的清洗、修復(fù)必須在高壓滅菌或消毒后進(jìn)行。

3、廢棄的污染（有潛在感染性）材料：除了銳器按上面的方法進(jìn)行處理以外，所有其他污染（有潛在感染性）材料在丟棄前均需消毒。消毒方法首選高壓蒸汽滅菌，其次為2000mg/l有效氯消毒液浸泡消毒。

五、意外事故應(yīng)對(duì)方案和應(yīng)急程序

（一）刺傷、切割傷或擦傷

受傷人員應(yīng)當(dāng)脫下防護(hù)服，清洗雙手和受傷部位，使用適當(dāng)?shù)钠つw消毒劑，必要時(shí)進(jìn)行醫(yī)學(xué)處理。記錄受傷原因和相關(guān)的微生物，保留完整適當(dāng)?shù)尼t(yī)療記錄。潛在感染性物質(zhì)的食入應(yīng)脫下受害人的防護(hù)服并進(jìn)行醫(yī)學(xué)處理。報(bào)告食入材料的鑒定和事故發(fā)生的細(xì)節(jié)，并保留完整 適當(dāng)?shù)尼t(yī)療記錄。

（二）潛在危害性氣溶膠的釋放（在生物安全柜以外）

所有人員必須立即撤離相關(guān)區(qū)域，任何暴露人員都應(yīng)接受醫(yī)學(xué)咨詢。立即通知實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人和科室安全主管。為了使氣溶膠排出和使較大的粒子沉降，1 h內(nèi)嚴(yán)禁人員入內(nèi)。如果實(shí)驗(yàn)室沒(méi)有中央通風(fēng)系統(tǒng)，則24h內(nèi)嚴(yán)禁人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。應(yīng)張貼“禁止進(jìn)入”的標(biāo)志。過(guò)了相應(yīng)時(shí)間后，在生物安全主管的指導(dǎo)下清除污染。應(yīng)穿戴適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)服和呼吸保護(hù)裝備。

（三）容器破碎及感染性物質(zhì)的溢出

立即用布或紙巾覆蓋受感染性物質(zhì)污染或受感染性物質(zhì)溢灑的破碎物品。然后在上面倒上消毒劑，并使其作用適當(dāng)時(shí)間。然后將布、紙巾以及破碎物品清理掉；玻璃碎片應(yīng)用鑷子清理。然后再用消毒劑擦拭污染區(qū)域。如果用簸箕清理破碎物，應(yīng)當(dāng)對(duì)他們進(jìn)行高壓滅菌或放在有效的消毒液內(nèi)浸泡。用于清理的布、紙巾和抹布等應(yīng)當(dāng)放在盛放污染性廢棄物的容器內(nèi)。在所有這些操作過(guò)程中都應(yīng)戴手套。如果實(shí)驗(yàn)表格或其他打印或手寫材料被污染，將這些信息復(fù)制，并將原件置于盛放污染性廢棄物的容器內(nèi)。

（四）火災(zāi)和自然災(zāi)害

事先告知消防人員和其他服務(wù)人員哪些房間有潛在的感染性物質(zhì)。要安排這些人員參觀實(shí)驗(yàn)室，讓他們熟悉實(shí)驗(yàn)室的布局和設(shè)備。發(fā)生自然災(zāi)害時(shí)，應(yīng)就實(shí)驗(yàn)室建筑內(nèi)和∕或附近建筑物的潛在危險(xiǎn)向當(dāng)?shù)鼗驀?guó)家緊急救助人員提出警告。只有在受過(guò)訓(xùn)練的實(shí)驗(yàn)室工作人員的陪 同下，他們才能進(jìn)入這些地區(qū)。感染性物質(zhì)應(yīng)收集在防漏的盒子內(nèi)或結(jié)實(shí)的一次性袋子中。由生物安全人員依據(jù)當(dāng)?shù)氐囊?guī)定決定繼續(xù)利用或是最終丟棄。

第四篇：微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全操作規(guī)程

微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全操作規(guī)程(2017版)

Dr.Tiger

(修訂說(shuō)明：CNAS-CL09實(shí)施后，對(duì)微生物實(shí)驗(yàn)室的生物安全提高了要求，對(duì)實(shí)驗(yàn)室人員在配制培養(yǎng)基過(guò)程的生物安全、高壓鍋的生物指示劑還有菌種的傳代次數(shù)均提出明確的要求，為適應(yīng)新要求，對(duì)舊版的微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全操作過(guò)程作了補(bǔ)充，同時(shí)修改和完善了一些小問(wèn)題)

一、目的

制訂本規(guī)則，保證實(shí)驗(yàn)室工作人員的健康安全、實(shí)驗(yàn)設(shè)備安全衛(wèi)生以及防止對(duì)外界環(huán)境造成污染。

二、適用范圍

適用于所有進(jìn)入微生物實(shí)驗(yàn)室人員。實(shí)驗(yàn)室工作人員必需嚴(yán)格遵守安全操作規(guī)程。

三、安全操作規(guī)程： 1.員工安全操作規(guī)程

1.1 實(shí)驗(yàn)室入口處須貼上生物危險(xiǎn)標(biāo)志，注明危險(xiǎn)因子、生物安全級(jí)別、負(fù)責(zé)人姓名和電話、進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的特殊要求及離開實(shí)驗(yàn)室的程序。

1.2 禁止非工作人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。參觀實(shí)驗(yàn)室等特殊情況須經(jīng)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)后方可進(jìn)入，做好衛(wèi)生防護(hù)，并在有關(guān)人員陪同下方可進(jìn)入，同時(shí)注意做好環(huán)境維護(hù)及保密工作。

1.3 進(jìn)行感染性實(shí)驗(yàn)時(shí)，禁止他人進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，或必須經(jīng)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人同意后方可進(jìn)入。免疫耐受或正在使用免疫抑制劑的工作人員必須經(jīng)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人同意方可在實(shí)驗(yàn)室工作。

1.4 接觸微生物或含有微生物的物品后，脫掉手套后和離開實(shí)驗(yàn)室前要洗手。1.5 禁止在工作區(qū)飲食、吸煙、處理隱形眼鏡、化妝及儲(chǔ)存食物。1.6 盡量以移液器吸取液體，禁止口吸。

1.7 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，嚴(yán)格按有關(guān)操作規(guī)程操作，降低濺出和氣溶膠的產(chǎn)生。

1.8 每天至少消毒一次工作臺(tái)面，活性物質(zhì)濺出后要隨時(shí)用75%乙醇或巴氏消毒液消毒。

1.9 實(shí)驗(yàn)人員在配制培養(yǎng)基過(guò)程中，需盡量避免接觸性或吸入性危害，特別是配制TTB和碘液等對(duì)人體有害的培養(yǎng)基或試劑時(shí)，要穿戴工作服、口罩和手套，并在通風(fēng)櫥中進(jìn)行。

1.10工作人員應(yīng)接受必要的免疫接種和檢測(cè)(如乙型肝炎疫苗、卡介苗等)。工作人員要接受有關(guān)的潛在危險(xiǎn)知識(shí)的培訓(xùn)，掌握預(yù)防暴露以及暴露后的處理程序。每年要接受一次最新的培訓(xùn)。人員暴露于感染性物質(zhì)時(shí)，及時(shí)向?qū)嶒?yàn)室負(fù)責(zé)人匯報(bào)，并記錄事故經(jīng)過(guò)和處理方案。

1.11禁止將無(wú)關(guān)動(dòng)物帶入實(shí)驗(yàn)室。2.無(wú)菌室安全操作規(guī)程

2.1無(wú)菌培養(yǎng)室每天都要用0.2%的新潔爾滅拖洗地面一次(拖布專用)，紫外線照射消毒30min以上，超凈工作臺(tái)臺(tái)面每次實(shí)驗(yàn)前要用75％酒精擦洗。然后紫外線消毒30min。操作用具如移液器、廢液缸、污物盒、試管架等用75%酒精擦洗后置于臺(tái)內(nèi)同時(shí)紫外線消毒。

2.2無(wú)菌室應(yīng)保持清潔，嚴(yán)禁堆放雜物，以防污染。

2.3無(wú)菌室應(yīng)備有工作濃度的消毒液，如5％的甲酚溶液，75％的酒精，0.1％的新潔爾滅溶液，等等。

2.4無(wú)菌室應(yīng)定期用適宜的消毒液滅菌清潔，以保證無(wú)菌室的潔凈度符合要求。2.5需要帶入無(wú)菌室使用的器械、平皿等一切物品，均應(yīng)包扎嚴(yán)密，并應(yīng)經(jīng)過(guò)適宜的方法滅菌。

2.6工作人員進(jìn)入無(wú)菌室前，必須用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在緩沖間更換專用工作服，鞋，帽子，口罩和手套(或用75% 乙醇等消毒劑再次擦拭雙手)，方可進(jìn)入無(wú)菌室進(jìn)行操作。

2.7無(wú)菌室使用前必須打開無(wú)菌室的紫外燈輻照滅菌30分鐘，滅菌后通無(wú)菌風(fēng)至少30min以上人員才能進(jìn)入。操作完畢，應(yīng)及時(shí)清理無(wú)菌室，再用紫外燈輻照滅菌30分鐘。

2.8供試品在檢查前，應(yīng)保持外包裝完整，不得開啟，以防污染。檢查前，用75％的酒精棉球消毒外表面。

2.9每次操作過(guò)程中，均應(yīng)做陰性對(duì)照，以檢查無(wú)菌操作的可靠性。2.10吸取菌液時(shí)，必須用移液器吸取，切勿直接用口接觸吸管。

2.11接種針每次使用前后，必須通過(guò)火焰灼燒滅菌，待冷卻后，方可接種培養(yǎng)物。2.12帶有菌液的吸管，試管，培養(yǎng)皿等器皿應(yīng)浸泡在盛有5%來(lái)蘇爾溶液或巴氏消毒液的消毒桶內(nèi)消毒，24小時(shí)后取出沖洗。

2.13如有菌液灑在桌上或地上，應(yīng)立即用5%石碳酸溶液或3％的來(lái)蘇爾傾覆在被污染處至少30分鐘，再做處理。工作衣帽等受到菌液污染時(shí)，應(yīng)立即脫去，高壓蒸汽滅菌后洗滌。

2.14凡帶有活菌的物品，必須經(jīng)消毒后，才能在水龍頭下沖洗，嚴(yán)禁污染下水道。2.15無(wú)菌室應(yīng)每月檢查菌落數(shù)。在層流無(wú)菌風(fēng)開啟的狀態(tài)下，取內(nèi)徑90mm的無(wú)菌營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板5個(gè)，分別放置無(wú)菌室四周及中央位置，開蓋暴露30分鐘后，倒置于36℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)48小時(shí)，取出檢查。100級(jí)潔凈區(qū)平板雜菌數(shù)平均不得超過(guò)1個(gè)菌落/平皿，10000級(jí)潔凈室平均不得超過(guò)3個(gè)菌落/平皿。如超過(guò)限度，應(yīng)用臭氧發(fā)生器等對(duì)無(wú)菌室進(jìn)行徹底消毒，直至重復(fù)檢查合乎要求為止。3.壓力蒸汽滅菌器的安全使用操作程序：

3.1堆放：將需滅菌的物品予以妥善包扎，各包之間留有空隙，依次堆放在滅菌桶的篩板上，以蒸汽穿透，提高滅菌效果。需滅菌物品外需黏上高壓指示膠帶以檢驗(yàn)滅菌溫度是否達(dá)到要求。

3.2 加水：在鍋體內(nèi)注入生活用水，水位一定要超過(guò)電熱管2厘米以上（不宜過(guò)多）；連續(xù)使用時(shí)，每次操作前，必須補(bǔ)足上述水位，以免燒壞電熱管和意外發(fā)生。

3.3 密封：在每次使用高壓鍋前，都必須認(rèn)真檢查高壓鍋的出氣伐和安全閥，確保其狀態(tài)完好，如有故障，在故障排除之前不得使用高壓滅菌鍋。把堆放好物品的滅菌桶放在鍋體內(nèi)，蓋上鍋蓋并鎖緊。

3.4 加熱滅菌：將滅菌器接通與銘牌一致的電源，按下電源開關(guān)，接通電源，指示燈亮，表示電源已正常輸入本器，按下開始按紐電熱管開始加熱工作；非全自動(dòng)的高壓滅菌鍋要注意排空空氣，確保滅菌時(shí)高壓鍋內(nèi)是飽和水蒸氣，高壓滅菌鍋內(nèi)滅菌期間工作人員需監(jiān)視高壓鍋指示面板上的壓力、溫度和時(shí)間等。

3.5 開蓋：滅菌結(jié)束后，切勿立即將滅菌鍋內(nèi)的蒸汽排出，否則：由于液體物品的溫度未能下降，而壓力蒸汽突然釋放，會(huì)使液體劇烈沸騰，造成溢出或容器爆裂。應(yīng)待壓力表指針歸零位后，方可開啟鍋蓋。

3.6 滅菌后無(wú)菌工器具及培養(yǎng)基應(yīng)存放于無(wú)菌區(qū)域（如滅過(guò)菌后的無(wú)菌室或生物安全柜內(nèi)），無(wú)菌物品需有明確標(biāo)識(shí)。

3.7 每年至少2次用嗜熱脂肪芽孢桿菌作為生物指示劑檢查滅菌效果并記錄，指示物需放在不一達(dá)到滅菌的部位（如堆放物品的居中位置）。4.生物安全柜操作規(guī)程

4.1確認(rèn)玻璃窗處于關(guān)閉位置后，打開紫外燈，對(duì)安全柜內(nèi)工作空間進(jìn)行滅菌。滅菌結(jié)束后，關(guān)閉紫外燈。安全柜使用前后均需滅菌。

4.2抬起玻璃門至正常工作位置。打開外排風(fēng)機(jī)。打開熒光燈及內(nèi)置風(fēng)機(jī)。檢查回風(fēng)格柵，使之不要被物品堵塞。在無(wú)任何阻礙狀態(tài)下，讓安全柜至少工作10分鐘。

4.3用消毒液徹底清洗手及手臂。穿上工作褂，戴橡膠手套并套在袖口上，如有必要的話，戴防護(hù)眼鏡和防護(hù)面罩。

4.4按實(shí)驗(yàn)程序放入實(shí)驗(yàn)材料，要將工作區(qū)域內(nèi)的污染物質(zhì)與潔凈物質(zhì)分開放置。盡量將所需要的物品在正式操作前全部放入安全柜，但不要過(guò)載，不要擋住前后風(fēng)口。4.5盡量避免使用可干擾安全柜內(nèi)氣流流動(dòng)的裝置和程序。在操作期間，避免隨便移動(dòng)材料，避免操作者的手臂在前方開口處頻繁移動(dòng)，盡量減少氣流干擾。

盡量不要使用明火，接種環(huán)之類用紅外滅菌器滅菌。

4.6在操作過(guò)程中，如果有物質(zhì)溢出或液體濺出，在將物品移出安全柜前，要對(duì)其表面進(jìn)行消毒，為防止安全柜內(nèi)有任何殘留的污染物，在安全柜工作過(guò)程中，就要將安全柜內(nèi)表面全部消毒。所有接觸了污染材料的物體，在從安全柜中取出前，要進(jìn)行表面消毒。所有開口容器，從安全柜中拿出前要蓋好。

4.7全部工作結(jié)束后，用70%的乙醇或適當(dāng)?shù)闹行韵緞?，擦拭安全柜?nèi)表面，讓安全柜在無(wú)任何阻礙的情況下繼續(xù)至少工作5分鐘，以清除工作區(qū)域內(nèi)浮沉污染。

4.8關(guān)閉照明燈和安全柜風(fēng)機(jī)。關(guān)閉玻璃門，打開UV燈消毒。滅菌結(jié)束后，關(guān)閉UV燈。4.9定期抬起工作區(qū)域下面板，擦拭或沖洗工作面底下空間。

5.標(biāo)準(zhǔn)菌株安全操作規(guī)程

5.1標(biāo)準(zhǔn)菌株由專人保管。保管人負(fù)責(zé)建立標(biāo)準(zhǔn)菌株目錄；目錄至少應(yīng)包編號(hào)、菌株號(hào)、菌種名稱、來(lái)源、購(gòu)買日期、購(gòu)買數(shù)量、保存方法等。

5.2標(biāo)準(zhǔn)菌株應(yīng)做好標(biāo)識(shí)后，保存于專用冰箱中。

5.3標(biāo)準(zhǔn)菌株不能隨意轉(zhuǎn)借其它單位或個(gè)人，需要時(shí)，須經(jīng)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)后方可提供。

5.4必須在生物安全柜中進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)菌株實(shí)驗(yàn)，操作過(guò)程中，不要穿戴巳經(jīng)污染的防護(hù)性手套觸摸門柄、儀器或污染區(qū)以外區(qū)域，避免擴(kuò)大污染范圍。

5.5試驗(yàn)結(jié)束后，操作過(guò)程中所有可能與生物危險(xiǎn)物接觸或被污染的試驗(yàn)器械和物品，能夠高壓消毒的必須高壓消毒，不能進(jìn)行高壓消毒的物品，應(yīng)使用有效的消毒劑消毒處理。

5.6 標(biāo)準(zhǔn)菌株傳代原則上不超過(guò)5代。

6.微生物培養(yǎng)物廢棄物安全處理程序

6.1 盡可能使用塑料器材代替玻璃器材,防止利器損傷。非一次性利器必須放入厚壁容器中并運(yùn)送到特定區(qū)域消毒，最好進(jìn)行高壓消毒。

6.2 禁止用手處理破碎的玻璃器具。裝有污染針、利器及破碎玻璃的容器在丟棄之前必須應(yīng)用次氯酸消毒液或其他有效藥品進(jìn)行消毒。

6.3 所有培養(yǎng)物、廢棄物在運(yùn)出實(shí)驗(yàn)室之前須經(jīng)巴氏消毒液消毒處理或高壓滅菌后,置于專門污物袋內(nèi)，交由專業(yè)衛(wèi)生處理公司處置。

6.4 實(shí)驗(yàn)設(shè)備在運(yùn)出修理或維護(hù)前必須進(jìn)行消毒。

7、微生物實(shí)驗(yàn)室緊急事故處理辦法

7.1刺傷、切割傷或擦傷。受傷人員應(yīng)脫下防護(hù)服，清洗雙手和受傷部位，使用適當(dāng)?shù)钠つw消毒劑進(jìn)行消毒，必要時(shí)進(jìn)行醫(yī)學(xué)處理。同時(shí)記錄受傷原因和相關(guān)的微生物，并保留完整適當(dāng)?shù)尼t(yī)療記錄。

7.2潛在感染性物質(zhì)的食入。應(yīng)脫下受害人的防護(hù)服，進(jìn)行必要的醫(yī)學(xué)處理。報(bào)告食入材料的鑒定和事故發(fā)生的細(xì)節(jié)，并保留完整適當(dāng)?shù)尼t(yī)療記錄。7.3潛在危害性氣溶膠的釋放（在生物安全柜以外）。所有人員必須立即撤離相關(guān)區(qū)域，暴露人員應(yīng)接受醫(yī)學(xué)咨詢，同時(shí)立即通知實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人和生物安全負(fù)責(zé)人。為了使氣溶膠排出和使較大的粒子沉降，在一定時(shí)間內(nèi)嚴(yán)禁人員入內(nèi)，若實(shí)驗(yàn)室沒(méi)有中央通風(fēng)系統(tǒng)，應(yīng)推遲進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的時(shí)間，同時(shí)張貼“禁止進(jìn)入”的標(biāo)志。待氣溶膠排出、較大的粒子沉降后，在生物安全負(fù)責(zé)人的指導(dǎo)下，清理人員穿戴適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)服和呼吸保護(hù)裝備進(jìn)行污染的清除。

7.4容器破碎及感染性物質(zhì)的溢出。應(yīng)立即用布或紙巾覆蓋被感染性物質(zhì)污染或受感染性物質(zhì)溢灑的破碎物品，并倒上消毒劑。作用適當(dāng)時(shí)間后，將覆蓋物以及破碎物品清除，再用消毒劑擦拭污染區(qū)域。玻璃碎片應(yīng)用鑷子清理，已污染的布、紙巾和抹布等應(yīng)放在盛放污染性廢棄物的容器內(nèi)。如果用簸箕清理破碎物，應(yīng)對(duì)其進(jìn)行高壓滅菌或放在有效的消毒液內(nèi)浸泡消毒。所有操作過(guò)程中要求戴手套。

若實(shí)驗(yàn)表格或其他打印或手寫材料被污染，應(yīng)將這些信息復(fù)制后，再將原件置于盛放污染性廢棄物的容器內(nèi)，按廢棄物處理的方式進(jìn)行處理。

7.5未裝可封閉離心桶的離心機(jī)內(nèi)盛有潛在感染性物質(zhì)的離心管發(fā)生破裂。如果機(jī)器正在運(yùn)行時(shí)發(fā)生破裂或懷疑發(fā)生破裂，應(yīng)關(guān)閉機(jī)器電源，讓機(jī)器密閉適當(dāng)時(shí)間（如30min），使氣溶膠沉積。如果機(jī)器停止后發(fā)現(xiàn)破裂，不開蓋或立即將蓋子蓋上，并密閉（如30min）。同時(shí)應(yīng)通知生物安全負(fù)責(zé)人。玻璃碎片應(yīng)使用鑷子，或用鑷子夾著棉花進(jìn)行清理。所有破碎的離心管、玻璃碎片、離心桶、十字軸和轉(zhuǎn)子都應(yīng)放入無(wú)腐蝕性的、已知對(duì)相關(guān)微生物具有殺滅活性的消毒劑內(nèi)進(jìn)行消毒。未破損的帶蓋離心管應(yīng)放在另一個(gè)有消毒劑的容器中，消毒后回收。離心機(jī)內(nèi)腔應(yīng)用適當(dāng)濃度的同種消毒劑多次擦拭，再用水沖洗后干燥。

清理時(shí)，應(yīng)戴結(jié)實(shí)的手套（如厚橡膠手套），必要時(shí)在外面再戴適當(dāng)?shù)囊淮涡允痔?。所使用的全部材料都?yīng)按感染性廢棄物處理。

7.6在可封閉的離心桶（安全杯）內(nèi)離心管發(fā)生破裂。所有的密封離心桶都應(yīng)在生物安全柜內(nèi)裝卸。若懷疑在安全杯內(nèi)發(fā)生破損，應(yīng)松開安全杯蓋子并將離心桶高壓滅菌，也可采用化學(xué)消毒的方法進(jìn)行處理。

7.7生物安全柜內(nèi)生物危害溢出。等待至少5min，讓安全柜充滿氣溶膠，清理時(shí)應(yīng)穿戴實(shí)驗(yàn)服，安全眼鏡和手套，且讓安全柜繼續(xù)工作。使用浸泡消毒劑的消毒紙巾吸附溢出物，進(jìn)行消毒處理應(yīng)保證一定的接觸時(shí)間（至少20min）。并用同樣的消毒紙巾擦拭安全柜內(nèi)壁、工作臺(tái)表面和柜內(nèi)所有設(shè)備。按照正確的生物廢棄物處理步驟處理被污染的物質(zhì)，將可回收的被污染物品放入生物危害物回收袋或高壓滅菌盤并且用報(bào)紙包起來(lái)，然后進(jìn)行消毒或清理。用消毒劑對(duì)無(wú)法進(jìn)行高壓滅菌的物品進(jìn)行至少20 min的消毒處理后再拿出安全柜。最后脫下個(gè)人防護(hù)服并放進(jìn)污染物收集袋中進(jìn)行高壓滅菌處理。若所要清理的物品達(dá)到2級(jí)生物安全水平或者更高，應(yīng)聯(lián)系生物安全辦公室負(fù)責(zé)人。

7.8使用消毒劑進(jìn)行清潔的具體步驟如下：用干紙巾覆蓋溢出物(用來(lái)吸附液體)后，再放上浸泡消毒液的紙巾，使消毒劑包圍溢出物，并確保消毒劑與污染溢出物充分接觸，盡可能減少氣溶膠的形成。對(duì)溢出物附近的所有物品進(jìn)行消毒處理，處理一定時(shí)間，使消毒劑的消毒作用得到充分發(fā)揮。使用正確的消毒劑擦拭設(shè)備，并按照正確的生物危害物處理程序處理被污染的物質(zhì)。對(duì)可回收利用的物品進(jìn)行消毒處理。

第五篇：微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全操作規(guī)程

微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全操作規(guī)程

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一、目的

制訂本規(guī)則，保證實(shí)驗(yàn)室工作人員的健康安全、實(shí)驗(yàn)設(shè)備安全衛(wèi)生以及防止對(duì)外界環(huán)境造成污染。

二、適用范圍

適用于微生物實(shí)驗(yàn)室人員人身安全、衛(wèi)生健康安全管理及設(shè)備安全。

三、職責(zé)

實(shí)驗(yàn)室工作人員必需嚴(yán)格遵守安全操作規(guī)程。

四、安全操作規(guī)程： 1.員工安全操作規(guī)程

1.1 實(shí)驗(yàn)室入口處須貼上生物危險(xiǎn)標(biāo)志，注明危險(xiǎn)因子、生物安全級(jí)別、負(fù)責(zé)人姓名和電話、進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的特殊要求及離開實(shí)驗(yàn)室的程序。

1.2 禁止非工作人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。參觀實(shí)驗(yàn)室等特殊情況須經(jīng)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)后方可進(jìn)入，做好衛(wèi)生防護(hù)，并在有關(guān)人員陪同下方可進(jìn)入，同時(shí)注意做好環(huán)境維護(hù)及保密工作。

1.3 進(jìn)行感染性實(shí)驗(yàn)時(shí)，禁止他人進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，或必須經(jīng)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人同意后方可進(jìn)入。免疫耐受或正在使用免疫抑制劑的工作人員必須經(jīng)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人同意方可在實(shí)驗(yàn)室工作。

1.4 接觸微生物或含有微生物的物品后，脫掉手套后和離開實(shí)驗(yàn)室前要洗手。1.5 禁止在工作區(qū)飲食、吸煙、處理隱形眼鏡、化妝及儲(chǔ)存食物。1.6 盡量以移液器吸取液體，禁止口吸。

1.7 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，嚴(yán)格按有關(guān)操作規(guī)程操作，降低濺出和氣溶膠的產(chǎn)生。

1.8 每天至少消毒一次工作臺(tái)面，活性物質(zhì)濺出后要隨時(shí)用75%乙醇或巴氏消毒液消毒。

1.9 工作人員應(yīng)接受必要的免疫接種和檢測(cè)(如乙型肝炎疫苗、卡介苗等)。工作人員要接受有關(guān)的潛在危險(xiǎn)知識(shí)的培訓(xùn)，掌握預(yù)防暴露以及暴露后的處理程序。每年要接受一次最新的培訓(xùn)。人員暴露于感染性物質(zhì)時(shí)，及時(shí)向?qū)嶒?yàn)室負(fù)責(zé)人匯報(bào)，并記錄事故經(jīng)過(guò)和處理方案。

1.10禁止將無(wú)關(guān)動(dòng)物帶入實(shí)驗(yàn)室。2.無(wú)菌室安全操作規(guī)程

2.1無(wú)菌培養(yǎng)室每天都要用0.2%的新潔爾滅拖洗地面一次(拖布專用)，紫外線照射消毒30min以上，超凈工作臺(tái)臺(tái)面每次實(shí)驗(yàn)前要用75％酒精擦洗。然后紫外線消毒30min。操作用具如移液器、廢液缸、污物盒、試管架等用75%酒精擦洗后置于臺(tái)內(nèi)同時(shí)紫外線消毒。

2.2無(wú)菌室應(yīng)保持清潔，嚴(yán)禁堆放雜物，以防污染。

2.3無(wú)菌室應(yīng)備有工作濃度的消毒液，如5％的甲酚溶液，75％的酒精，0.1％的新潔爾滅溶液，等等。

2.4無(wú)菌室應(yīng)定期用適宜的消毒液滅菌清潔，以保證無(wú)菌室的潔凈度符合要求。2.5需要帶入無(wú)菌室使用的器械、平皿等一切物品，均應(yīng)包扎嚴(yán)密，并應(yīng)經(jīng)過(guò)適宜的方法滅菌。

2.6工作人員進(jìn)入無(wú)菌室前，必須用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在緩沖間更換專用工作服，鞋，帽子，口罩和手套(或用75% 乙醇等消毒劑再次擦拭雙手)，方可進(jìn)入無(wú)菌室進(jìn)行操作。

2.7無(wú)菌室使用前必須打開無(wú)菌室的紫外燈輻照滅菌30分鐘，并且同時(shí)打開超凈臺(tái)進(jìn)行吹風(fēng)。操作完畢，應(yīng)及時(shí)清理無(wú)菌室，再用紫外燈輻照滅菌30分鐘。

2.8供試品在檢查前，應(yīng)保持外包裝完整，不得開啟，以防污染。檢查前，用75％的酒精棉球消毒外表面。

2.9每次操作過(guò)程中，均應(yīng)做陰性對(duì)照，以檢查無(wú)菌操作的可靠性。2.10吸取菌液時(shí)，必須用移液器吸取，切勿直接用口接觸吸管。

2.11接種針每次使用前后，必須通過(guò)火焰灼燒滅菌，待冷卻后，方可接種培養(yǎng)物。2.12帶有菌液的吸管，試管，培養(yǎng)皿等器皿應(yīng)浸泡在盛有5%來(lái)蘇爾溶液或巴氏消毒液的消毒桶內(nèi)消毒，24小時(shí)后取出沖洗。

2.13如有菌液灑在桌上或地上，應(yīng)立即用5%石碳酸溶液或3％的來(lái)蘇爾傾覆在被污染處至少30分鐘，再做處理。工作衣帽等受到菌液污染時(shí)，應(yīng)立即脫去，高壓蒸汽滅菌后洗滌。

2.14凡帶有活菌的物品，必須經(jīng)消毒后，才能在水龍頭下沖洗，嚴(yán)禁污染下水道。2.15無(wú)菌室應(yīng)每月檢查菌落數(shù)。在層流無(wú)菌風(fēng)開啟的狀態(tài)下，取內(nèi)徑90mm的無(wú)菌營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板5個(gè)，分別放置無(wú)菌室四周及中央位置，開蓋暴露30分鐘后，倒置于36℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)48小時(shí)，取出檢查。100級(jí)潔凈區(qū)平板雜菌數(shù)平均不得超過(guò)1個(gè)菌落/平皿，10000級(jí)潔凈室平均不得超過(guò)3個(gè)菌落/平皿。如超過(guò)限度，應(yīng)用臭氧發(fā)生器等對(duì)無(wú)菌室進(jìn)行徹底消毒，直至重復(fù)檢查合乎要求為止。3.壓力蒸汽滅菌器的安全使用操作程序：

3.1堆放：將需滅菌的物品予以妥善包扎，各包之間留有空隙，依次堆放在滅菌桶的篩板上，以蒸汽穿透，提高滅菌效果。需滅菌物品外需黏上高壓指示膠帶以檢驗(yàn)滅菌溫度是否達(dá)到要求。

3.2 加水：在鍋體內(nèi)注入生活用水，水位一定要超過(guò)電熱管2厘米以上（不宜過(guò)多）；連續(xù)使用時(shí)，每次操作前，必須補(bǔ)足上述水位，以免燒壞電熱管和意外發(fā)生。

3.3 密封：在每次使用高壓鍋前，都必須認(rèn)真檢查高壓鍋的出氣伐和安全閥，確保其狀態(tài)完好，如有故障，在故障排除之前不得使用高壓滅菌鍋。把堆放好物品的滅菌桶放在鍋體內(nèi)，蓋上鍋蓋并鎖緊。

3.4 加熱滅菌：將滅菌器接通與銘牌一致的電源，按下電源開關(guān)，接通電源，指示燈亮，表示電源已正常輸入本器，按下開始按紐電熱管開始加熱工作；滅菌期間工作人員需監(jiān)視高壓鍋指示面板上的壓力、溫度和時(shí)間等。

3.5 開蓋：滅菌結(jié)束后，切勿立即將滅菌鍋內(nèi)的蒸汽排出，否則：由于液體物品的溫度未能下降，而壓力蒸汽突然釋放，會(huì)使液體劇烈沸騰，造成溢出或容器爆裂。應(yīng)待壓力表指針歸零位后，方可開啟鍋蓋。4.生物安全柜操作規(guī)程

4.1確認(rèn)玻璃窗處于關(guān)閉位置后，打開紫外燈，對(duì)安全柜內(nèi)工作空間進(jìn)行滅菌。滅菌結(jié)束后，關(guān)閉紫外燈。安全柜使用前后均需滅菌。

4.2抬起玻璃門至正常工作位置。打開外排風(fēng)機(jī)。打開熒光燈及內(nèi)置風(fēng)機(jī)。檢查回風(fēng)格柵，使之不要被物品堵塞。在無(wú)任何阻礙狀態(tài)下，讓安全柜至少工作10分鐘。

4.3用消毒液徹底清洗手及手臂。穿上工作褂，戴橡膠手套并套在袖口上，如有必要的話，戴防護(hù)眼鏡和防護(hù)面罩。

4.4按實(shí)驗(yàn)程序放入實(shí)驗(yàn)材料，要將工作區(qū)域內(nèi)的污染物質(zhì)與潔凈物質(zhì)分開放置。盡量將所需要的物品在正式操作前全部放入安全柜，但不要過(guò)載，不要擋住前后風(fēng)口。放入.4.5盡量避免使用可干擾安全柜內(nèi)氣流流動(dòng)的裝置和程序。在操作期間，避免隨便移動(dòng)材料，避免操作者的手臂在前方開口處頻繁移動(dòng)，盡量減少氣流干擾。盡量不要使用明火。

4.6在操作過(guò)程中，如果有物質(zhì)溢出或液體濺出，在將物品移出安全柜前，要對(duì)其表面進(jìn)行消毒，為防止安全柜內(nèi)有任何殘留的污染物，在安全柜工作過(guò)程中，就要將安全柜內(nèi)表面全部消毒。所有接觸了污染材料的物體，在從安全柜中取出前，要進(jìn)行表面消毒。所有開口容器，從安全柜中拿出前要蓋好。

4.7全部工作結(jié)束后，用70%的乙醇或適當(dāng)?shù)闹行韵緞?，擦拭安全柜?nèi)表面，讓安全柜在無(wú)任何阻礙的情況下繼續(xù)至少工作5分鐘，以清除工作區(qū)域內(nèi)浮沉污染。

4.8關(guān)閉照明燈和安全柜風(fēng)機(jī)。關(guān)閉玻璃門，打開UV燈消毒。滅菌結(jié)束后，關(guān)閉UV燈。4.9定期抬起工作區(qū)域下面板，擦拭或沖洗工作面底下空間。

5.標(biāo)準(zhǔn)菌株安全操作規(guī)程

5.1標(biāo)準(zhǔn)菌株由專人保管。保管人負(fù)責(zé)建立標(biāo)準(zhǔn)菌株目錄；目錄至少應(yīng)包編號(hào)、菌株號(hào)、菌種名稱、來(lái)源、購(gòu)買日期、購(gòu)買數(shù)量、保存方法等。

5.2標(biāo)準(zhǔn)菌株應(yīng)做好標(biāo)識(shí)后，保存于專用冰箱中。

5.3標(biāo)準(zhǔn)菌株不能隨意轉(zhuǎn)借其它單位或個(gè)人，需要時(shí)，須經(jīng)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)后方可提供。

5.4必須在生物安全柜中進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)菌株實(shí)驗(yàn)，操作過(guò)程中，不要穿戴巳經(jīng)污染的防護(hù)性手套觸摸門柄、儀器或污染區(qū)以外區(qū)域，避免擴(kuò)大污染范圍。

5.5試驗(yàn)結(jié)束后，操作過(guò)程中所有可能與生物危險(xiǎn)物接觸或被污染的試驗(yàn)器械和物品，能夠高壓消毒的必須高壓消毒，不能進(jìn)行高壓消毒的物品，應(yīng)使用有效的消毒劑消毒處理。

6.微生物培養(yǎng)物廢棄物安全處理程序

6.1 盡可能使用塑料器材代替玻璃器材,防止利器損傷。非一次性利器必須放入厚壁容器中并運(yùn)送到特定區(qū)域消毒，最好進(jìn)行高壓消毒。

6.2 禁止用手處理破碎的玻璃器具。裝有污染針、利器及破碎玻璃的容器在丟棄之前必須應(yīng)用次氯酸消毒液或其他有效藥品進(jìn)行消毒。

6.3 所有培養(yǎng)物、廢棄物在運(yùn)出實(shí)驗(yàn)室之前須經(jīng)巴氏消毒液消毒處理或高壓滅菌后,置于專門污物袋內(nèi)，交由專業(yè)衛(wèi)生處理公司處置。

6.4 實(shí)驗(yàn)設(shè)備在運(yùn)出修理或維護(hù)前必須進(jìn)行消毒。

7、微生物實(shí)驗(yàn)室緊急事故處理辦法

7.1刺傷、切割傷或擦傷。受傷人員應(yīng)脫下防護(hù)服，清洗雙手和受傷部位，使用適當(dāng)?shù)钠つw消毒劑進(jìn)行消毒，必要時(shí)進(jìn)行醫(yī)學(xué)處理。同時(shí)記錄受傷原因和相關(guān)的微生物，并保留完整適當(dāng)?shù)尼t(yī)療記錄。

7.2潛在感染性物質(zhì)的食入。應(yīng)脫下受害人的防護(hù)服，進(jìn)行必要的醫(yī)學(xué)處理。報(bào)告食入材料的鑒定和事故發(fā)生的細(xì)節(jié)，并保留完整適當(dāng)?shù)尼t(yī)療記錄。

7.3潛在危害性氣溶膠的釋放（在生物安全柜以外）。所有人員必須立即撤離相關(guān)區(qū)域，暴露人員應(yīng)接受醫(yī)學(xué)咨詢，同時(shí)立即通知實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人和生物安全負(fù)責(zé)人。為了使氣溶膠排出和使較大的粒子沉降，在一定時(shí)間內(nèi)嚴(yán)禁人員入內(nèi)，若實(shí)驗(yàn)室沒(méi)有中央通風(fēng)系統(tǒng)，應(yīng)推遲進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的時(shí)間，同時(shí)張貼“禁止進(jìn)入”的標(biāo)志。待氣溶膠排出、較大的粒子沉降后，在生物安全負(fù)責(zé)人的指導(dǎo)下，清理人員穿戴適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)服和呼吸保護(hù)裝備進(jìn)行污染的清除。

7.4容器破碎及感染性物質(zhì)的溢出。應(yīng)立即用布或紙巾覆蓋被感染性物質(zhì)污染或受感染性物質(zhì)溢灑的破碎物品，并倒上消毒劑。作用適當(dāng)時(shí)間后，將覆蓋物以及破碎物品清除，再用消毒劑擦拭污染區(qū)域。玻璃碎片應(yīng)用鑷子清理，已污染的布、紙巾和抹布等應(yīng)放在盛放污染性廢棄物的容器內(nèi)。如果用簸箕清理破碎物，應(yīng)對(duì)其進(jìn)行高壓滅菌或放在有效的消毒液內(nèi)浸泡消毒。所有操作過(guò)程中要求戴手套。

若實(shí)驗(yàn)表格或其他打印或手寫材料被污染，應(yīng)將這些信息復(fù)制后，再將原件置于盛放污染性廢棄物的容器內(nèi)，按廢棄物處理的方式進(jìn)行處理。

7.5未裝可封閉離心桶的離心機(jī)內(nèi)盛有潛在感染性物質(zhì)的離心管發(fā)生破裂。如果機(jī)器正在運(yùn)行時(shí)發(fā)生破裂或懷疑發(fā)生破裂，應(yīng)關(guān)閉機(jī)器電源，讓機(jī)器密閉適當(dāng)時(shí)間（如30min），使氣溶膠沉積。如果機(jī)器停止后發(fā)現(xiàn)破裂，不開蓋或立即將蓋子蓋上，并密閉（如30min）。同時(shí)應(yīng)通知生物安全負(fù)責(zé)人。玻璃碎片應(yīng)使用鑷子，或用鑷子夾著棉花進(jìn)行清理。所有破碎的離心管、玻璃碎片、離心桶、十字軸和轉(zhuǎn)子都應(yīng)放入無(wú)腐蝕性的、已知對(duì)相關(guān)微生物具有殺滅活性的消毒劑內(nèi)進(jìn)行消毒。未破損的帶蓋離心管應(yīng)放在另一個(gè)有消毒劑的容器中，消毒后回收。離心機(jī)內(nèi)腔應(yīng)用適當(dāng)濃度的同種消毒劑多次擦拭，再用水沖洗后干燥。

清理時(shí)，應(yīng)戴結(jié)實(shí)的手套（如厚橡膠手套），必要時(shí)在外面再戴適當(dāng)?shù)囊淮涡允痔?。所使用的全部材料都?yīng)按感染性廢棄物處理。

7.6在可封閉的離心桶（安全杯）內(nèi)離心管發(fā)生破裂。所有的密封離心桶都應(yīng)在生物安全柜內(nèi)裝卸。若懷疑在安全杯內(nèi)發(fā)生破損，應(yīng)松開安全杯蓋子并將離心桶高壓滅菌，也可采用化學(xué)消毒的方法進(jìn)行處理。

7.7生物安全柜內(nèi)生物危害溢出。等待至少5min，讓安全柜充滿氣溶膠，清理時(shí)應(yīng)穿戴實(shí)驗(yàn)服，安全眼鏡和手套，且讓安全柜繼續(xù)工作。使用浸泡消毒劑的消毒紙巾吸附溢出物，進(jìn)行消毒處理應(yīng)保證一定的接觸時(shí)間（至少20min）。并用同樣的消毒紙巾擦拭安全柜內(nèi)壁、工作臺(tái)表面和柜內(nèi)所有設(shè)備。按照正確的生物廢棄物處理步驟處理被污染的物質(zhì)，將可回收的被污染物品放入生物危害物回收袋或高壓滅菌盤并且用報(bào)紙包起來(lái)，然后進(jìn)行消毒或清理。用消毒劑對(duì)無(wú)法進(jìn)行高壓滅菌的物品進(jìn)行至少20 min的消毒處理后再拿出安全柜。最后脫下個(gè)人防護(hù)服并放進(jìn)污染物收集袋中進(jìn)行高壓滅菌處理。若所要清理的物品達(dá)到2級(jí)生物安全水平或者更高，應(yīng)聯(lián)系生物安全辦公室負(fù)責(zé)人。

7.8使用消毒劑進(jìn)行清潔的具體步驟如下：用干紙巾覆蓋溢出物(用來(lái)吸附液體)后，再放上浸泡消毒液的紙巾，使消毒劑包圍溢出物，并確保消毒劑與污染溢出物充分接觸，盡可能減少氣溶膠的形成。對(duì)溢出物附近的所有物品進(jìn)行消毒處理，處理一定時(shí)間，使消毒劑的消毒作用得到充分發(fā)揮。使用正確的消毒劑擦拭設(shè)備，并按照正確的生物危害物處理程序處理被污染的物質(zhì)。對(duì)可回收利用的物品進(jìn)行消毒處理。