第一篇：薄層色譜法實(shí)驗(yàn)報(bào)告

實(shí)驗(yàn)報(bào)告 專業(yè)班級(jí)

姓名

評(píng)分

學(xué)號(hào)

同組人

指導(dǎo)老師

實(shí)驗(yàn)課程名稱

實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目名稱

開課實(shí)驗(yàn)室

實(shí)驗(yàn)時(shí)間

一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/span>

掌握薄層色譜得基本原理及其在有機(jī)物分離中得應(yīng)用、二、實(shí)驗(yàn)原理

有機(jī)混合物中各組分對(duì)吸附劑得吸附能力不同, 當(dāng)展開劑流經(jīng)吸附劑時(shí), 有機(jī)物各組分會(huì)發(fā)生 無數(shù)次吸附與解吸過程, 吸附力弱得組分隨 流動(dòng)相迅速向前, 而吸附力弱得組分則滯后, 由于各組分不同得移動(dòng)速度而使得她們得以分離。物質(zhì)被分離后在圖譜上得位置 置, 常用比移值 R ｆ 表示、三、實(shí)驗(yàn)儀器與藥品5。

0c ｍ×１5 5。0 0 ｃm m 硅膠層析板兩塊, , 臥式層析槽一個(gè), , 點(diǎn)樣用毛細(xì)管。

四、物理常數(shù)

名稱

分子量

熔點(diǎn)/ / ℃

沸點(diǎn)/ / ℃

折光率／n n２0 0

比重

顏色與形態(tài)

溶解度

甲基橙

７、33０ 未確定。

１。62６ ６6。20３２ ２ 橙紅色 鱗狀晶體或粉末

微 溶 于水 水, 較易溶 于 熱水 水, 不溶于乙醇

熒光黃

332。3１

定 未確定 未確定

未確定

-—— 橙紅色結(jié)晶粉末

不 溶 于水 水 , 乙 乙醚 醚, 氯仿苯 與苯,溶 溶于堿液。

五、儀器裝置圖

“浸有層析板得層析槽”圖

１--層析缸 ,2 — 薄層板 ,3 －展開劑飽與蒸汽 ,4 — 層析液

六、實(shí)驗(yàn)步驟

(1))薄層板得制備: :

稱?。?~5 ｇ層析用硅膠, , 加適量水調(diào)成糊狀, , 等石膏開始固化時(shí), , 再加少許水, , 調(diào)成勻漿, ,平均攤在兩塊 5 5、０×１ 5c ｍ得層析玻璃板上, ,。

再輕敲使其涂布均勻。((！

老師代做！))

固化后, ,經(jīng) 經(jīng) 1 1 ０5 5 ℃烘烤活化 ０、5 5 h, 貯于干燥器內(nèi)備用、(2)點(diǎn)樣。

在層析板下端２、0cm 處,(用鉛筆輕化一起始線, 并在點(diǎn)樣出用鉛筆作一記號(hào)為原點(diǎn)、)取毛細(xì)管, 分別蘸取偶氮苯、偶氮苯與蘇丹紅混合液, 點(diǎn)于原點(diǎn)上(注意點(diǎn)樣用得毛細(xì)管不能混用, 毛細(xì)管不能將薄層板表面弄破,在 樣品斑點(diǎn)直徑在 1 ～２mm 為宜！斑點(diǎn)間為 距為 1cm)

(3)定位及定性分析

用鉛筆將各斑點(diǎn)框出, , 并找出斑點(diǎn)中心, , 用小尺量出各斑點(diǎn)到原點(diǎn)得距離與溶劑前沿到起始線得距離, , 然后計(jì)算各樣品得比移值并定性確定混合物中各物質(zhì)名稱。

純?nèi)玖?/p>

混合染料2

甲基橙

熒光黃

甲基橙

熒光黃

混合液

斑點(diǎn)移動(dòng)距離a(cm))

溶劑移動(dòng)距離ｂ((ｃｍ))

R f

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)1、鋪板時(shí)一定要鋪勻, , 特別就是邊、角部分, , 晾干時(shí)要放在平整得地方、2、點(diǎn)樣時(shí)點(diǎn)要細(xì), , 直徑不要大于 2m ｍ, , 間隔 0 0。5 5 ｃm m 以上, , 濃度不可過大, , 以免出現(xiàn)拖尾、混雜現(xiàn)象。3、展 開用得燒杯要洗凈烘干, , 放入板之前, , 要先加展開劑, , 蓋上表面皿, ,、讓燒杯內(nèi)形成一定得蒸氣壓、點(diǎn)樣得一端要浸入展開劑０、m 5cm 以上, ,但展開劑不可沒過樣品原點(diǎn)、當(dāng)展開劑上升到距上端 0.5--１m cm 時(shí)要及時(shí)將板取出, , 用鉛筆標(biāo)示出展開劑前沿得位置。

討論: :

七、思考題

第二篇：薄層色譜法驗(yàn)證方案

白術(shù)薄層鑒別方法驗(yàn)證方案

一、試液的配制

1、重現(xiàn)性 取相同的供試品、對(duì)照藥材溶液，由兩名檢驗(yàn)員同時(shí)做，做薄層鑒別實(shí)驗(yàn)，由色譜圖實(shí)驗(yàn)結(jié)果，驗(yàn)證其重現(xiàn)性。

2、專屬性 取相同的供試品、對(duì)照藥材溶液，利用正己烷試劑作為空白溶液，做薄層鑒別實(shí)驗(yàn)，由薄層色譜圖結(jié)果，驗(yàn)證其專屬性。

3、耐用性 按1、2方法下做薄層色譜實(shí)驗(yàn)，分別點(diǎn)樣于青島海洋化工廠分廠、煙臺(tái)大學(xué)生物科技與工程研究所制備的硅膠G薄層板，由薄層色譜圖結(jié)果，驗(yàn)證其耐用性。

白附子薄層鑒別方法驗(yàn)證方案

一、試液的配制

1、重現(xiàn)性 取相同的供試品、對(duì)照藥材溶液、對(duì)照品溶液，由兩名檢驗(yàn)員同時(shí)做，做薄層鑒別實(shí)驗(yàn)，由色譜圖實(shí)驗(yàn)結(jié)果，驗(yàn)證其重現(xiàn)性。

2、專屬性 取相同的供試品、對(duì)照藥材溶液、對(duì)照品溶液，利用丙酮試劑作為空白溶液，做薄層鑒別實(shí)驗(yàn)，由薄層色譜圖結(jié)果，驗(yàn)證其專屬性。

3、耐用性 按1、2方法下做薄層色譜實(shí)驗(yàn)，分別點(diǎn)樣于青島海洋化工廠分廠、煙臺(tái)大學(xué)生物科技與工程研究所制備的硅膠G薄層板，由薄層色譜圖結(jié)果，驗(yàn)證其耐用性。

五味子薄層鑒別方法驗(yàn)證方案

一、試液的配制

1、重現(xiàn)性 取相同的供試品、對(duì)照藥材溶液、對(duì)照品溶液，由兩名檢驗(yàn)員同時(shí)做，做薄層鑒別實(shí)驗(yàn)，由色譜圖實(shí)驗(yàn)結(jié)果，驗(yàn)證其重現(xiàn)性。

2、專屬性 取相同的供試品、對(duì)照藥材溶液、對(duì)照品溶液，利用三氯甲烷試劑作為空白溶液，做薄層鑒別實(shí)驗(yàn)，由薄層色譜圖結(jié)果，驗(yàn)證其專屬性。

3、耐用性 按1、2方法下做薄層色譜實(shí)驗(yàn)，分別點(diǎn)樣于青島海洋化工廠分廠、煙臺(tái)大學(xué)生物科技與工程研究所制備的硅膠G薄層板，由薄層色譜圖結(jié)果，驗(yàn)證其耐用性。

HPLC法測(cè)五味子中五味子醇甲方法驗(yàn)證方案

一、標(biāo)準(zhǔn)曲線的制定 利用已知純度的對(duì)照品溶液，設(shè)計(jì)5個(gè)不同濃度，每個(gè)濃度制定一份供試品溶液，進(jìn)行測(cè)定，以峰面積作為Y軸，濃度為X軸，并進(jìn)行線性回歸，得出回歸方程，得出相關(guān)系數(shù)r。

二、方法的驗(yàn)證

1、準(zhǔn)確度的測(cè)定 用已知濃度的對(duì)照品溶液，利用加樣回收率實(shí)驗(yàn)的方法，制備不同濃度的溶液6份，計(jì)算回收率的大小，并計(jì)算出RSD的大小。

2、精密度的測(cè)定 取一批原藥材，分別制成6份溶液，測(cè)定峰面積，計(jì)算平均值，并計(jì)算出RSD大小。

3、專屬性 采用純甲醇試劑作為空白樣品，連續(xù)進(jìn)樣三針，有色譜圖結(jié)果，考察是否有干擾。

4、檢驗(yàn)結(jié)果考察 取一批原藥材，分別制成3份溶液，分別進(jìn)樣一針，并計(jì)算出結(jié)果，確定方法的可靠性。

第三篇：薄層色譜分析技術(shù)綜述

薄層色譜分析技術(shù)綜述

摘要薄層色譜法，是指將適宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或鋁基片上，成一均勻薄層。待點(diǎn)樣、展開后，與適宜的對(duì)照物按同法所得的色譜圖作對(duì)比，用以進(jìn)行藥物的鑒別、雜質(zhì)檢查或含量測(cè)定的方法[1]。本文介紹了薄層層析法的原理，操作方法，主要應(yīng)用及其在各個(gè)學(xué)科中的應(yīng)用，并指出了此方法的局限性、須待解決的問題。

關(guān)鍵詞：薄層色譜法；原理；操作方法；主要應(yīng)用；局限性

薄層色譜(Thin Layer Chromatography)常用TLC表示，又稱薄層層析，是色譜法中的一種，是快速分離和定性分析少量物質(zhì)的一種很重要的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，屬于固－液吸附色譜。是近年來發(fā)展起來的一種微量、快速而簡(jiǎn)單的色譜法。它兼?zhèn)淞酥V和紙色譜的優(yōu)點(diǎn)，一方面適用于少量樣品（幾到幾微克，甚至0.01微克）的分離；另一方面在制作薄層板時(shí)，把吸附層加厚加大，將樣品點(diǎn)成一條線，則可分離多達(dá)500mg的樣品。因此，又可用來精制樣品，此法特別適用于揮發(fā)性較小或較高溫度易發(fā)生變化而不能用氣相色譜分析的物質(zhì)。此外，在進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)時(shí)，薄層色譜法還可用來跟蹤有機(jī)反應(yīng)及進(jìn)行柱色譜之前的一種“預(yù)試”，常利用薄層色譜觀察原料斑點(diǎn)的逐步消失來判斷反應(yīng)是否完成。

薄層色譜是在被洗滌干凈的玻板（10×3cm左右）上均勻的涂一層吸附劑或支持劑，待干燥、活化后將樣品溶液用管口平整的毛細(xì)管滴加于離薄層板一端約1cm處的起點(diǎn)線上，涼干或吹干后置薄層板于盛有展開劑的展開槽內(nèi)，浸入深度為0.5cm。待展開劑前沿離頂端約1cm附近時(shí)，將色譜板取出，干燥后噴以顯色劑，或在紫外燈下顯色。

一、原理

色譜法的基本原理是利用混合物中各組分在某一物質(zhì)中的吸附或溶解性能的不同，或和其它親和作用性能的差異，使混合物的溶液流經(jīng)該種物質(zhì)，進(jìn)行反復(fù)的吸附或分配等作用，從而將各組份分開。薄層色譜是一種微量、快速和簡(jiǎn)便的色譜方法。由于各種化合物的極性不同，吸附能力不相同，在展開劑上移動(dòng)，進(jìn)行不同程度的解析，根據(jù)原點(diǎn)至主斑點(diǎn)中心及展開劑前沿的距離，計(jì)算比移值（Rf）：

化合物的吸附能力與它們的極性成正比，具有較大極性的化合物吸附較強(qiáng)，因此Rf值較小。在給定的條件下（吸附劑、展開劑、板層厚度等），化合物移

動(dòng)的距離和展開劑移動(dòng)的距離之比是一定的，即Rf值是化合物的物理常數(shù)，其大小只與化合物本身的結(jié)構(gòu)有關(guān)，因此可以根據(jù)Rf值鑒別化合物[2]。

薄層色譜可適用小量樣品（幾到幾十微克甚至0.01μg）的分離：也可用于多達(dá)500mg樣品的分離，是近代有機(jī)化學(xué)中用于定性，定量的一種重要手段。特別適用于那些揮發(fā)性小的化合物，以及在高溫下易發(fā)生化學(xué)變化而不能用氣相色譜分析的物質(zhì)。

二、實(shí)驗(yàn)基本流程

鋪板點(diǎn)樣展開顯色 計(jì)算Rf值

鋪板：取7.5x2.5cm左右的載玻片5片，洗凈晾干。在50mL燒杯中，放置3g硅膠G，逐漸加入0.5﹪羧甲基纖維素鈉水溶液(CMC)8mL，調(diào)成均勻的糊狀，涂于上述潔凈的載玻片上，用手將帶漿的玻片在水平的桌面上做上下輕微的顛動(dòng)，制成薄厚均勻、表面光潔平整的薄層板，涂好的硅膠G的薄層板置于水平的玻璃板上，在室溫放置0.5h后，放入烘箱中，緩慢升溫至110℃，恒溫0.5h后取出，稍冷后置于干燥器中備用。

點(diǎn)樣：點(diǎn)樣用的毛細(xì)管為內(nèi)徑lmm的管口平整的毛細(xì)管，將樣品溶于低沸點(diǎn)的溶劑（乙醚、丙酮、乙醇、四氫呋喃等）配成溶液。點(diǎn)樣前，可先用鉛筆在小板上距一端5mm處輕輕劃一橫線，作為起始線，然后用毛細(xì)管吸取樣品在起始線上小心點(diǎn)樣，如需重復(fù)點(diǎn)樣，則應(yīng)待前次點(diǎn)樣的溶劑揮發(fā)后方可重點(diǎn)。若在同一塊板上點(diǎn)幾個(gè)樣，樣品點(diǎn)間距離為5mm以上。

展開：展開劑的選擇主要根據(jù)樣品的極性、溶解度和吸附劑的活性等因素來考慮。薄層的展開在密閉的容器中進(jìn)行。先將選擇的展開劑放入廣口瓶中，使廣口瓶內(nèi)空氣飽和5－10min，再將點(diǎn)好試樣的薄層板放入廣口瓶中進(jìn)行展開，點(diǎn)樣的位置必須在展開劑液面之上，當(dāng)展開劑上升到薄層的前沿（離前端5~10mm）或多組分已明顯分開時(shí)，取出薄層板放平晾干，用鉛筆劃溶劑前沿的位置后，即可顯色。

顯色：如果化合物本身有顏色，就可直接觀察它的斑點(diǎn)。如果本身無色，可先在紫外燈光下觀察有無熒光斑點(diǎn)（有苯環(huán)的物質(zhì)都有），用鉛筆在薄層板上劃出斑點(diǎn)的位置；對(duì)于在紫外燈光下不顯色的，可放在含少量碘蒸氣的容器中顯色來檢查色點(diǎn)（因?yàn)樵S多化合物都能和碘成黃棕色斑點(diǎn)），顯色后，立即用鉛筆標(biāo)出斑點(diǎn)的位置。

計(jì)算Rf值：準(zhǔn)確地找出原點(diǎn)，溶劑前沿以及樣品展開后斑點(diǎn)的中心，分別測(cè)量溶劑前沿和樣點(diǎn)在薄層板上移動(dòng)的距離，求出其Rf值。

三、主要應(yīng)用

（1）定性鑒別 化學(xué)上經(jīng)典的定性鑒別，例如經(jīng)典的有機(jī)定性分析或經(jīng)典的毒物分析，是利用各種化合物的溶解度不同和所含功能基的不同，用溶劑提取或用試劑處理，把它們分組或分為單一組分，然后作試管反應(yīng)或點(diǎn)滴反應(yīng)(顏色反應(yīng))，或根據(jù)它們衍生物的理化性質(zhì)進(jìn)行定性鑒別。這種方法的缺點(diǎn)是樣品用量叫大，分離手續(xù)麻煩,分析時(shí)間較長(幾小時(shí)或幾時(shí)個(gè)小時(shí))，并可能有雜質(zhì)干擾?，F(xiàn)采用合適的展開劑和現(xiàn)色劑在薄層上作為分離和鑒別，根據(jù)樣品中組分的值和現(xiàn)色情況，同時(shí)用標(biāo)準(zhǔn)作對(duì)照，一般即能卻證為某一化合物。用薄層色譜法定性，樣品用量小，分離方便，分離時(shí)間短(幾分鐘或幾時(shí)分鐘)，檢出靈敏度高。例如，再毒物分析中檢驗(yàn)是否巴比妥安眠藥中毒時(shí)，取胃內(nèi)容物或尿樣品，先用鹽酸酸

化后，用乙醚提取，乙醚提取液脫水，過濾蒸干，溶于無水乙醇中，點(diǎn)在硅膠版上用氯仿、無水乙醇（36：1）展開，用硫酸汞二苯偶碳酰肼試劑顯色，并用標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照，意見出巴比妥，苯巴比妥，戊巴比妥和異巴比妥。鑒別速度快（1小時(shí)），這對(duì)于搶救中毒患者和及時(shí)為醫(yī)生提供治療方案極為重要。

（2）藥品的質(zhì)量控制和雜質(zhì)檢查 藥品的純度，通常用熔點(diǎn)，吸光值等物理常數(shù)作為鑒定的指標(biāo)。但是薄層檢查也是藥品質(zhì)量控制和雜質(zhì)檢查的一種有效方法，有時(shí)甚至比一般方法更有效。一些國家的藥典和藥品規(guī)范已經(jīng)采用。方法是把一定量得樣品溶液(例如，相當(dāng)于樣品)電在薄層上，用展開劑展開并顯色，同時(shí)用純品作對(duì)照,如果樣品只顯示出純品值一致的一個(gè)斑點(diǎn)，則表示含有雜質(zhì)。進(jìn)一步可用薄層作雜質(zhì)的限量檢查。例如鎦體藥物的合成和精致工作中，常含結(jié)構(gòu)類似的雜質(zhì),即按上述方法控制其質(zhì)量和雜質(zhì)的限量。

（3）化學(xué)反應(yīng)進(jìn)程的控制 反應(yīng)副產(chǎn)物的檢出以及中間體的分析，在化學(xué)反應(yīng)進(jìn)行到一定時(shí)間或反應(yīng)終了時(shí)，把反應(yīng)液取出作薄層分析，可以知道還剩下多少原料藥未起作用。方法是把反應(yīng)液或其有機(jī)溶劑提取液點(diǎn)在薄層上，同時(shí)點(diǎn)原料作參比對(duì)照，看薄層上是否出現(xiàn)原料藥斑點(diǎn)。還可以用薄層檢查反應(yīng)副產(chǎn)物。如果化學(xué)反應(yīng)分步進(jìn)行，則每一步反應(yīng)的中間體的質(zhì)量和產(chǎn)率也都可用薄層進(jìn)行定性和定量。例如在合成強(qiáng)力霉素的過程中，需要中間地甲烯土霉素氫化物為脫氧土霉素。氫化反應(yīng)是否完全，可用薄層檢查，如果反應(yīng)完全，則反應(yīng)釜中幾乎沒有或只有極少量的甲烯土霉素存在，薄層板上只顯示出一個(gè)脫氧土霉素，如果薄層板上有上下二個(gè)明顯的斑點(diǎn)，表示反應(yīng)還沒有完全，尚需繼續(xù)還原,直到只顯示出脫氧土霉素的一個(gè)斑點(diǎn)為止才能出料。

（4）柱色普法分離條件的探索 柱色普法的實(shí)驗(yàn)條件，例如選用什么吸附劑和洗脫劑較好各個(gè)組分按什么順序從柱中洗脫出來，每一分洗脫液中是含單一組分或就含幾種沒有分開的組分等，都可以在薄層上進(jìn)行探索和檢驗(yàn)。薄層上所有的展開劑雖不完全照搬柱色普法上，但仍有參考價(jià)值。

四、薄層色譜法在各個(gè)學(xué)科中的應(yīng)用

（1）食品和營養(yǎng) 食品中的營養(yǎng)成分是蛋白質(zhì)、氨基酸、糖類、油和脂肪、維生素、食用色素等。與食品和營養(yǎng)有害的物質(zhì)則有殘留農(nóng)藥、致癌的曲黃霉素等。這些成分都可用薄層色譜法定性和定量。蛋白質(zhì)和多肽水解為氨基酸，對(duì)不同來源的動(dòng)物性和植物性蛋白水解后產(chǎn)生不同的氨基酸進(jìn)行定性和定量，有助于解決蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和食品營養(yǎng)問題。二十多種氨基酸用硅膠G薄層板雙向展開，一次即能分開，然后定性和定量，方法快速而簡(jiǎn)便。多糖和寡糖可水解為單糖，可用薄層色譜法進(jìn)行單糖和雙糖的定性和定量。文獻(xiàn)上有每一個(gè)糖的Rf值和相應(yīng)的展開劑。油和脂肪解為脂肪酸，脂肪酸的種類和結(jié)構(gòu)中的不飽和鍵數(shù)，與營養(yǎng)和衛(wèi)生有關(guān)，關(guān)于油和脂肪的薄層（硅膠、硅藻土、纖維素)分析，文獻(xiàn)和綜述很多。脂溶性和水溶性維生素在薄層上可方便地定性和定量，例如脂溶性維生素A,D,E,K及B2,B6,B12,酶酸，泛酸，葉酸，C,促生素在硅膠G薄層上可用苯：甲醇：丙酮：冰醋酸（7:2:0.5:0.5）分開。用硅膠G薄層和丙酮：氯仿（1:1)以及激發(fā)波長365nm和波長450nm,可用熒光法測(cè)定ng量的曲黃素B1,B2,G1,G2,方法靈敏快速。

（2）藥物和藥物代謝 薄層色譜法在合成藥物和天然藥物中的應(yīng)用很廣。有些文獻(xiàn)和內(nèi)容偏重于合成藥物、化合物及其代謝產(chǎn)物，有文獻(xiàn)為在中草藥分析中的應(yīng)用。每一類藥物，例如磺胺、巴比妥、苯駢噻嗪、甾體激素、抗菌素、生

物堿、強(qiáng)心甙、黃酮、揮發(fā)油和萜等，都包括幾種或十幾種化學(xué)結(jié)構(gòu)和性質(zhì)非常相似的化合物，可以在上述文獻(xiàn)中找出一、二種全盤的展開劑，一次即能把每一類的多種化合物很好地分開。藥物代謝產(chǎn)物的樣品一般先經(jīng)預(yù)處理后用薄層分析，應(yīng)用也很廣，但有時(shí)因含量甚微，不用采用氣相和高效液相色譜法靈敏。

（3）化學(xué)和化工 化工和化學(xué)方面的有機(jī)原料和產(chǎn)品都可用薄層色譜法分析。例如含各種功能基的有機(jī)物，石油產(chǎn)品，塑料單體，橡膠裂解產(chǎn)物，油漆原料，合成洗滌劑等，內(nèi)容非常廣泛。

（4）醫(yī)學(xué)和臨床 薄層色譜法的應(yīng)用還滲透到醫(yī)學(xué)和臨床中去，例如它是一種快速的診斷方法可用于妊娠的早期診斷。方法是基于在孕婦的尿中能檢出比未媳婦婦女的尿中含更多的孕二醇，把兩者的尿提取后點(diǎn)在薄層上比較，即可作出判斷。這一方法可不用動(dòng)物而在2~3小時(shí)內(nèi)化驗(yàn)出結(jié)果。

（5）毒物分析和法醫(yī)化學(xué) 如前所述，經(jīng)典的毒物分析有許多缺點(diǎn)，目前毒物分析和法醫(yī)化學(xué)采用薄層色譜法等新的手段，對(duì)麻醉藥、巴比妥、印度大麻、鴉片生物堿等均可分析。

（6）農(nóng)藥 十多種有機(jī)磷農(nóng)藥和六種有機(jī)氯農(nóng)藥都可在硅膠G薄層上分開并測(cè)定含量，可用于農(nóng)藥分析及其殘留量分析。

綜上所述，薄層層析有許多優(yōu)點(diǎn)：它保持了操作方便、設(shè)備簡(jiǎn)單、顯色容易等特點(diǎn)，同時(shí)展開速率快，一般僅需15～20分鐘；混合物易分離，分辨力一般比以往的紙層析高10～100倍，它既適用于只有0．01μg的樣品分離，又能分離大于500mg的樣品作制備用，而且還可以使用如濃硫酸、濃鹽酸之類的腐蝕性顯色劑。薄層層析的缺點(diǎn)是對(duì)生物高分子的分離效果不甚理想。

參考文獻(xiàn):

[1] 國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典.化學(xué)工業(yè)出版社, 2000二部: 附錄31.[2] 何麗一.平面色譜方法及應(yīng)用[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社, 2000.108-112.

第四篇：制作薄層色譜硅膠板經(jīng)驗(yàn)總結(jié)（模版）

制作薄層色譜硅膠板經(jīng)驗(yàn)總結(jié)

（1）CMC配制：CMC的濃度為3-4‰。在500ml燒杯中加入150ml水，在磁力攪拌器攪拌下慢慢加入1.75gCMC，促使其溶解，攪拌20min后，再加入350ml水，一直攪拌1h。抽濾得CMC溶液待用。

（2）硅膠液配制：在研缽中加入約100ml上述CMC溶液，用研棒不斷攪拌下，慢慢加入硅膠GF254粉末（CMC水溶液的用量大約是硅膠質(zhì)量的2-3倍之間），直至感到液體變得較粘稠狀，且用研棒蘸取硅膠液可見粘絲狀即可。切記不能馬上就開始鋪板，需要將其再放置約十幾分鐘，以使硅膠粉末能夠充分吸收水分溶脹，過早鋪板，將會(huì)造成硅膠板起泡、起鼓或起楞等。

（3）鋪板：用藥勺取適量硅膠液置于玻璃板上，并用藥勺大致均勻地?cái)傞_，尤其四個(gè)角及邊緣鋪滿，然后將該玻璃板在桌面上做上下地且幅度要大些顛動(dòng)幾次即可。

（4）干燥：自然晾干十幾小時(shí)。

（5）活化：放在恒溫干燥箱里于105-110℃干燥30min，然后冷卻室溫，取出存放在干燥器保存，待用。

第五篇：第十七章 氣相色譜法 - 章節(jié)小結(jié)

1.基本概念

固定液相對(duì)極性，麥?zhǔn)铣?shù)，程序升溫，噪聲，漂移，分流比，檢測(cè)器靈敏度，檢測(cè)限等。2．基本理論

（1）差速遷移：在色譜分析中，分配系數(shù)不同是組分分離的前提條件。氣相色譜法中，載氣種類少，可選余地小，要改變組分之間分配系數(shù)的或大小或比例，主要通過選擇合適的固定液。

（2）GC中的速率理論：速率理論是從色譜動(dòng)力學(xué)的角度闡述影響柱效的因素，以Van Deemter方程式表示，在填充柱中，速率方程為：

H=A+B/u+Cu =2λdp+ 2gDg/u+ 在開管柱中，A＝0，此時(shí)速率方程為：

H=B/u+Cgu+Clu =u +

最小板高對(duì)應(yīng)的載氣線速度稱為最佳線速度，為了減少分析時(shí)間，常用的最佳實(shí)用線速度大于最佳線速度。在學(xué)習(xí)速率理論時(shí)，應(yīng)熟悉速率方程式中各項(xiàng)和各符號(hào)的含義，即這些因素是如何影響柱效的，從而理解分離條件的選擇。

（3）色譜柱分填充柱及毛細(xì)管柱兩類，填充柱又分氣-固色譜柱及氣-液色譜柱。固定液按極性分類可分成非極性、中等極性、極性以及氫鍵型固定液。固定液的選擇按相似性原則。常用硅藻土載體分為紅色載體和白色載體，紅色載體常用于涂漬非極性固定液，白色載體常用于涂漬極性固定液。硅藻土載體常需進(jìn)行鈍化，其目的是為了減小載體表面的活性。載體鈍化的方法有酸洗（AW）、堿洗（BW）和硅烷化，這些鈍化方法分別除去堿性氧化物（主要是氧化鐵）、酸性氧化物（氧化鋁）和覆蓋硅羥基。

毛細(xì)管柱可分為涂壁毛細(xì)管柱（WCOT）、載體涂層毛細(xì)管柱（SCOT）、多孔層毛細(xì)管柱（PLOT）和填充毛細(xì)管柱。

檢測(cè)器分濃度型及質(zhì)量型兩類。氫焰檢測(cè)器是質(zhì)量型檢測(cè)器，具有靈敏度高，檢測(cè)限小，死體積小等優(yōu)點(diǎn)。熱導(dǎo)檢測(cè)器是濃度型檢測(cè)器，組分與載氣的熱導(dǎo)率有差別即能檢測(cè)。電子捕獲檢測(cè)器也是一種濃度型檢測(cè)器，檢測(cè)含有強(qiáng)電負(fù)性基團(tuán)的物質(zhì)，具有高選擇性和高靈敏度。

為保護(hù)檢測(cè)器和色譜柱，開氣相色譜儀時(shí)，必須先開載氣，后開電源，加熱。關(guān)機(jī)時(shí)，先關(guān)電源，最后關(guān)載氣。

（4）柱溫的選擇原則為：在使最難分離的組分有盡可能好的分離度的前提下，要盡可能采用較低的柱溫，但以保留時(shí)間適宜及不拖尾為度。對(duì)寬沸程樣品，采用程序升溫方式。

（5）定性與定量：定性方法有已知物對(duì)照法，相對(duì)保留值，保留指數(shù)，利用化學(xué)方法配合，兩譜聯(lián)用定性。定量方法常用歸一化法和內(nèi)標(biāo)法，在沒有校正因子情況下，使用內(nèi)標(biāo)對(duì)比法較好。3．基本計(jì)算

固定液的相對(duì)極性

分離方程式 R=

相對(duì)重量校正因子= 歸一化法 Ci%=

外標(biāo)法 mi =

內(nèi)標(biāo)法 mi=fiAi ms=fsAs mi= Ci%=

內(nèi)標(biāo)對(duì)比法