第一篇:高中生物實(shí)驗(yàn)常用的試劑總結(jié)
高中生物常用的試劑及其作用
1.斐林試劑: 成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.05g/ml CuSO4(乙液)。用法:將斐林試劑甲液和乙液混合,再將混合后的斐林試劑倒入待測(cè)液,水浴加熱,如待測(cè)液中存在還原糖,則呈磚紅色。
2.雙縮脲試劑:成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.01g/ml CuSO4(乙液)。用法:向待測(cè)液中先加入2ml甲液,搖勻,再向其中加入3~4滴乙液,搖勻。如待測(cè)中存在蛋白質(zhì),則呈現(xiàn)紫色。
3.蘇丹Ⅲ:用法:取蘇丹Ⅲ顆粒溶于95%的酒精中,搖勻。用于檢測(cè)脂肪。可將脂肪染成橘黃色(被蘇丹Ⅳ染成紅色)。
4.二苯胺:用于鑒定DNA。DNA遇二苯胺(沸水浴)會(huì)被染成藍(lán)色。
5.甲基綠:用于鑒定DNA。DNA遇甲基綠(常溫)會(huì)被染成藍(lán)綠色。
6.吡羅紅:檢測(cè)RNA,呈紅色 7、50%的酒精溶液:用于洗去蘇丹Ⅲ在脂肪上的浮色。8、70%的酒精溶液:用于醫(yī)學(xué)臨床上的消毒滅菌。
9、95%的酒精溶液:冷卻的體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精可用于凝集DNA 10、15%的鹽酸:和95%的酒精溶液等體積混合可用于解離根尖。
11.龍膽紫溶液或醋酸洋紅:堿性染料,用于染色體染色時(shí),前者呈深藍(lán)色,后者呈紅色 改良苯酚品紅染液:檢測(cè)染色體,紅色
健那綠:檢測(cè)線粒體,專一性讓線粒體染色呈藍(lán)綠色?;铙w染色劑
12.20%的肝臟研磨液、3%的過(guò)氧化氫、3.5%的氯化鐵:用于比較過(guò)氧化氫酶和Fe3+的催化效率。(新鮮的肝臟中含有過(guò)氧化氫酶)13、3%的可溶性淀粉溶液、3%的蔗糖溶液、2%的新鮮淀粉酶溶液:用于探索淀粉酶對(duì)淀粉和蔗糖的作用實(shí)驗(yàn)。
14.碘液:用于鑒定淀粉的存在。遇淀粉變藍(lán)。遇糖原變紅
15.丙酮:用于提取葉綠體中的色素
16.層析液:(成分:20份石油醚、2份丙酮、和1份苯混合而成,也可用93號(hào)汽油)可用于色素的層析,即將色素在濾紙上分離開。
17.二氧化硅:在色素的提取的分離實(shí)驗(yàn)中研磨綠色葉片時(shí)加入,可使研磨充分。
18.碳酸鈣:研磨綠色葉片時(shí)加入,可中和有機(jī)酸,防止在研磨時(shí)葉綠體中的色素受破壞。19、0.3g/mL的蔗糖溶液:相當(dāng)于30%的蔗糖溶液,比植物細(xì)胞液的濃度大,可用于質(zhì)壁分離實(shí)驗(yàn)。
20、氯化鈉溶液:①可用于溶解DNA。當(dāng)氯化鈉濃度為2mol/L、0.015mol/L時(shí)DNA的溶解度最高,在氯化鈉濃度為0.14 mol/L時(shí),DNA溶解度最低。②濃度為0.9%時(shí)可作為生理鹽水。
21、胰蛋白酶:①可用來(lái)分解蛋白質(zhì)。②可用于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)分解組織使組織細(xì)胞分散于。
22、秋水仙素:人工誘導(dǎo)多倍體試劑。用于萌發(fā)的種子或幼苗,可使染色體組加倍,原理是可抑制正在分裂的細(xì)胞紡綞體的形成。
23、氯化鈣:增強(qiáng)細(xì)菌細(xì)胞壁的通透性,可用于基因工程。
24、NaHCO3/ Na2CONa2HPO4/ NaH2PO4:酸堿緩沖對(duì)→調(diào)節(jié)PH
25.NaCl:配制生理鹽水(0.9%)或用于提取DNA(0.14M或2M)
26.溴麝香草酚藍(lán)水溶液:檢測(cè)CO2,由藍(lán)變綠再變黃
27.酸性重鉻酸鉀溶液:檢測(cè)酒精,橙色變?yōu)榛疑?/p>
常用的實(shí)驗(yàn)方法
化學(xué)物質(zhì)的檢測(cè)方法
1、淀粉————碘液
3、CO2————Ca(OH)2
5、O2 ————熄滅、復(fù)燃
2、單糖、麥芽糖———斐林試劑
4、乳酸————石蕊試劑
6、蛋白質(zhì)——雙縮脲反應(yīng)
實(shí)驗(yàn)結(jié)果的顯示方法
1.光合速度——CO2吸收量
6.甲狀腺激素作用——飼喂法
2.呼吸速度——O2消耗量
7.生長(zhǎng)素作用——向光性
3.原子途徑——同位素示蹤法
8、胰島素作用—先給小鼠注射胰島素,再注射葡萄糖4.細(xì)胞液濃度大小——質(zhì)壁分離和復(fù)原
溶液5.細(xì)胞是否死亡——質(zhì)壁分離的復(fù)原
第二篇:高中生物實(shí)驗(yàn)常用的試劑(歸納總結(jié))
生物學(xué)中常用的試劑:
1.斐林試劑: 成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.05g/ml CuSO4(乙液)。用法:將斐林試劑甲液和乙液混合,再將混合后的斐林試劑倒入待測(cè)液,水浴加熱,如待測(cè)液中存在還原糖,則呈磚紅色。
2.班氏糖定性試劑:為藍(lán)色溶液。和葡萄糖混合后沸水浴會(huì)出現(xiàn)磚紅色沉淀。用于尿糖的測(cè)定。
3.雙縮脲試劑:成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.01g/ml CuSO4(乙液)。用法:向待測(cè)液中先加入2ml甲液,搖勻,再向其中加入3~4滴乙液,搖勻。如待測(cè)中存在蛋白質(zhì),則呈現(xiàn)紫色。
4.蘇丹Ⅲ:用法:取蘇丹Ⅲ顆粒溶于95%的酒精中,搖勻。用于檢測(cè)脂肪。可將脂肪染成橘黃色(被蘇丹Ⅳ染成紅色)。
5.二苯胺:用于鑒定DNA。DNA遇二苯胺(沸水浴)會(huì)被染成藍(lán)色。
6.甲基綠:用于鑒定DNA。DNA遇甲基綠(常溫)會(huì)被染成藍(lán)綠色。
吡羅紅:檢測(cè)RNA,呈紅色 7、50%的酒精溶液:用于洗去蘇丹Ⅲ在脂肪上的浮色。
8、70%的酒精溶液:用于醫(yī)學(xué)臨床上的消毒滅菌。9、95%的酒精溶液:冷卻的體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精可用于凝集DNA 10、15%的鹽酸:和95%的酒精溶液等體積混合可用于解離根尖。
11.龍膽紫溶液或醋酸洋紅:堿性染料,用于染色體染色時(shí),前者呈深藍(lán)色,后者呈紅色 改良苯酚品紅染液:檢測(cè)染色體,紅色
健那綠:檢測(cè)線粒體,專一性讓線粒體染色呈藍(lán)綠色
12.20%的肝臟、3%的過(guò)氧化氫、3.5%的氯化鐵:用于比較過(guò)氧化氫酶和Fe3+的催化效率。(新鮮的肝臟中含有過(guò)氧化氫酶)13、3%的可溶性淀粉溶液、3%的蔗糖溶液、2%的新鮮淀粉酶溶液:用于探索淀粉酶對(duì)淀粉和蔗糖的作用實(shí)驗(yàn)。
14.碘液:用于鑒定淀粉的存在。遇淀粉變藍(lán)。遇糖原變紅
15.丙酮:用于提取葉綠體中的色素
16.層析液:(成分:20份石油醚、2份丙酮、和1份苯混合而成,也可用93號(hào)汽油)可用于色素的層析,即將色素在濾紙上分離開。
17.二氧化硅:在色素的提取的分離實(shí)驗(yàn)中研磨綠色葉片時(shí)加入,可使研磨充分。
18.碳酸鈣:研磨綠色葉片時(shí)加入,可中和有機(jī)酸,防止在研磨時(shí)葉綠體中的色素受破壞。
19、0.3g/mL的蔗糖溶液:相當(dāng)于30%的蔗糖溶液,比植物細(xì)胞液的濃度大,可用于質(zhì)壁分離實(shí)驗(yàn)。20、0.1g/mL的檸檬酸鈉溶液:與雞血混合,防凝血
21、氯化鈉溶液:①可用于溶解DNA。當(dāng)氯化鈉濃度為2mol/L、0.015mol/L時(shí)DNA的溶解度最高,在氯化鈉濃度為0.14 mol/L時(shí),DNA溶解度最低。②濃度為0.9%時(shí)可作為生理鹽水。
22、胰蛋白酶:①可用來(lái)分解蛋白質(zhì)。②可用于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)分解組織使組織細(xì)胞分散于。
23、秋水仙素:人工誘導(dǎo)多倍體試劑。用于萌發(fā)的種子或幼苗,可使染色體組加倍,原理是可抑制正在分裂的細(xì)胞紡綞體的形成。
24、氯化鈣:增強(qiáng)細(xì)菌細(xì)胞壁的通透性,可用于基因工程。
25.石磊試劑:檢驗(yàn)溶液酸堿性→判斷光合速率與呼吸速率快慢的關(guān)系;
26、NaHCO3/ Na2CO3
Na2HPO4/ NaH2PO4:酸堿緩沖對(duì)→調(diào)節(jié)PH
27.NaCl:配制生理鹽水(0.9%)或用于提取DNA(0.14M或2M)28.溴麝香草酚藍(lán)水溶液:檢測(cè)CO2,由藍(lán)變綠再變黃 常用的實(shí)驗(yàn)方法
化學(xué)物質(zhì)的檢測(cè)方法
1、淀粉————碘液
2、麥芽糖———斐林試劑
3、CO2————Ca(OH)2
4、乳酸————石蕊試劑
5、O2 ————熄滅、復(fù)燃
6、蛋白質(zhì)——雙縮脲反應(yīng)
實(shí)驗(yàn)結(jié)果的顯示方法
1.光合速度——CO2吸收量
2.呼吸速度——O2消耗量
3.原子途徑——同位素示蹤法
4.細(xì)胞液濃度大小——質(zhì)壁分離和復(fù)原
5.細(xì)胞是否死亡——質(zhì)壁分離的復(fù)原
6.甲狀腺激素作用——飼喂法
7.生長(zhǎng)素作用——向光性
8、胰島素作用—切除、移植胰腺
實(shí)驗(yàn)條件的控制方法
1、增加水中氧氣——增加水生植物、通O2
2、減少水中氧氣——減少水生植物、通N2
3、除去容器中的CO2——NaOH
4、除去葉中原有的淀粉_______暗處理
5、除去葉中葉綠素——脫色處理
6、除去光合對(duì)呼吸的干擾——遮光處理
7、如何得到單色光——棱鏡折射
8、血液抗凝——加檸檬酸鈉
試劑
檢驗(yàn)物質(zhì)
反應(yīng)顏色 斐林(要加熱)
還原糖
磚紅色沉淀 雙縮尿
蛋白質(zhì)
紫色 蘇丹三/四
脂肪
橘黃/紅 碘
淀粉
藍(lán)色 DNA
二苯胺(加熱)
藍(lán)色 DNA
甲基綠
綠色 RNA
吡啰紅
紅色
線粒體
健那綠(唯一的活體染色劑)藍(lán)綠色 染色體
龍膽紫
紫色
染色體
醋酸洋紅
紅/紫紅色 乙醇
重鉻酸鉀
灰綠色
二氧化碳
溴麝香草酚藍(lán)
由藍(lán)變綠再變黃
第三篇:高中生物實(shí)驗(yàn)方法及試劑總匯
高中生物實(shí)驗(yàn)方法及試劑匯總
1.實(shí)驗(yàn)方法
實(shí)驗(yàn)方法是整個(gè)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的精髓,是做好實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的關(guān)鍵所在?,F(xiàn)將與中學(xué)實(shí)驗(yàn)有關(guān)的一些最常見的經(jīng)典的實(shí)驗(yàn)方法匯總?cè)缦拢?/p>
(1)化學(xué)物質(zhì)的檢測(cè)方法:
①淀粉——碘液
②還原糖——斐林試劑、班氏試劑
③CO2——Ca(OH)2溶液或酸堿指示劑
④乳酸——pH試紙
⑤O2——余燼復(fù)燃
⑥無(wú)O2——火焰熄滅
⑦蛋白質(zhì)——雙縮脲試劑
⑧染色體——龍膽紫、醋酸洋紅溶液
⑨DNA——二苯胺試劑
⑩脂肪——蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液
(2)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的顯示方法:
①光合速率——O2釋放量或CO2吸收量或淀粉產(chǎn)生量
②呼吸速率——O2吸收量或CO2釋放量或淀粉減少量
③原子途徑——放射性同位素示蹤法
④細(xì)胞液濃度大小——質(zhì)壁分離
⑤細(xì)胞是否死亡——質(zhì)壁分離
⑥甲狀腺激素作用——?jiǎng)游锖难趿?,發(fā)育速度等
⑦生長(zhǎng)激素作用——生長(zhǎng)速度(體重變化,身高變化)
⑧胰島素作用——?jiǎng)游锘顒?dòng)狀態(tài)
⑨菌量——菌落數(shù)或亞甲基藍(lán)溶液褪色程度
⑩大腸桿菌——伊紅—美藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基
(3)實(shí)驗(yàn)條件的控制方法:
①增加水中氧氣——泵入空氣或吹氣或放入綠色植物
②減少水中氧氣——容器密封或油膜覆蓋或用涼開水
③除去容器中CO2——NaOH溶液
④除去葉片中原有淀粉——置于黑暗環(huán)境
⑤除去葉片中葉綠素——酒精隔水加熱
⑥除去光合作用對(duì)呼吸作用的干擾——給植株遮光
⑦如何得到單色光——棱鏡色散或彩色薄膜濾光
⑧血液抗凝——加入檸檬酸鈉
⑨線粒體提取——細(xì)胞勻漿離心
⑩骨的脫鈣——鹽酸溶液
⑩滅菌方法——微生物培養(yǎng)的關(guān)鍵在于滅菌,對(duì)不同材料,滅菌方法不同:培養(yǎng)基用高壓蒸氣滅菌;接種環(huán)用火焰灼燒滅菌;雙手用肥皂洗凈,擦干后用75%酒精消毒;整個(gè)接種過(guò)程都在實(shí)驗(yàn)室無(wú)菌區(qū)進(jìn)行。
(4)實(shí)驗(yàn)中控制溫度的方法:
①還原糖鑒定:水浴煮沸加熱
②酶促反應(yīng):水浴保溫
③用酒精溶解葉中的葉綠素:酒精要隔水加熱
④DNA的鑒定:水浴煮沸加熱
⑤細(xì)胞和組織培養(yǎng)以及微生物培養(yǎng):恒溫培養(yǎng)
2.斐林試劑、班氏試劑與尿糖試紙
這三種物質(zhì)均可用來(lái)檢驗(yàn)含醛基的有機(jī)物的存在,在醫(yī)學(xué)上用來(lái)檢驗(yàn)糖尿病,其原理均是利用了Cu2+的氧化性把醛基氧化,但成分略有不同:
斐林試劑:即硫酸銅、氫氧化鈉和酒石酸鉀鈉組成的藍(lán)色混合溶液。分為斐林試劑A和斐林試劑B,A為CuSO4溶液,B為氫氧化鈉和酒石酸鉀鈉的混合溶液,使用時(shí)將A、B等體積混合即成斐林試劑。
班氏試劑:即硫酸銅、碳酸鈉和檸檬酸鈉組成的混合液,又叫本尼迪克特(Benedict)試劑,它與醛反應(yīng)的結(jié)果是與斐林試劑一致的,只是比斐林試劑更穩(wěn)定,所以在臨床化驗(yàn)中更常使用。
尿糖試紙:又叫硫酸銅試紙,呈白色,帶藍(lán)色斑點(diǎn),用于糖尿病患者的尿糖測(cè)試。每片含硫酸銅20毫克,枸櫞酸300毫克,碳酸鈉80毫克,氫氧化鈉235毫克。尿糖試紙法快速、方便,試紙的正確使用方法為:將試紙條放在尿液中浸濕,一秒鐘后取出,在一分鐘內(nèi)觀察試紙的顏色,并與標(biāo)準(zhǔn)色板對(duì)照,根據(jù)不同的顏色來(lái)確定尿糖陽(yáng)性的程度。
3.斐林試劑和雙縮脲試劑的比較
相同點(diǎn):①都由NaOH溶液和CuSO4溶液構(gòu)成;
②斐林試劑甲液和雙縮脲試劑A都為0.1g/mLNaOH溶液。不同點(diǎn):①CuSO4溶液濃度不一樣:斐林試劑乙液為0.05g/mLCuSO4溶液,雙縮脲試劑B為0.01g/mLCuSO4溶液。
②配制比例不一樣。
③使用方法不一樣:斐林試劑是甲、乙液一起混合后再使用,雙縮脲試劑則是先向待鑒定材料加入A試劑搖勻后,再加入試劑B。
④鑒定的對(duì)象不一樣:斐林試劑鑒定的是還原糖,雙縮脲試劑鑒定的是蛋白質(zhì)。
⑤反應(yīng)本質(zhì)及顏色反應(yīng)不一樣。
4.蘇丹Ⅲ染液與蘇丹Ⅳ染液的比較
都是用來(lái)鑒定脂肪。蘇丹Ⅳ染液更易溶于脂肪,所以染色更深,同時(shí)要求染色時(shí)間更短。
生物學(xué)中常用的試劑:
1、斐林試劑: 成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.05g/ml CuSO4(乙液)。用法:將斐林試劑甲液和乙液等體積混合,再將混合后的斐林試劑倒入待測(cè)液,水浴加熱或直接加熱,如待測(cè)液中存在還原糖,則呈磚紅色。
2、班氏糖定性試劑:為藍(lán)色溶液。和葡萄糖混合后沸水浴會(huì)出現(xiàn)磚紅色沉淀。用于尿糖的測(cè)定。
3、雙縮脲試劑:成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.01g/ml CuSO4(乙液)。用法:向待測(cè)液中先加入2ml甲液,搖勻,再向其中加入3~4滴乙液,搖勻。如待測(cè)中存在蛋白質(zhì),則呈現(xiàn)紫色。
4、蘇丹Ⅲ:用法:取蘇丹Ⅲ顆粒溶于95%的酒精中,搖勻。用于檢測(cè)脂肪??蓪⒅救境砷冱S色(被蘇丹Ⅳ染成紅色)。
5、二苯胺:用于鑒定DNA。DNA遇二苯胺(沸水?。?huì)被染成藍(lán)色。鑒定DNA的試劑——二苯胺試劑
A液:1.5g二苯胺溶于100mL冰醋酸中,再加1.5mL濃硫酸,用棕色瓶保存。B液:乙醛的體積分?jǐn)?shù)為0.2。
配制:將0.1mLB液加到10mLA液中,現(xiàn)配現(xiàn)用。
6、甲基綠:用于鑒定DNA。DNA遇甲基綠(常溫)會(huì)被染成藍(lán)綠色。(甲基綠使DNA呈現(xiàn)綠色,吡羅紅使RNA呈現(xiàn)紅色。)
7、苔黑酚——乙醇溶液(用于RNA的鑒定)
溶解6克苔黑酚于是100毫升95%乙醇中,(可在冰箱中保存1個(gè)月)
8、50%的酒精溶液:在脂肪鑒定中,用蘇丹Ⅲ染液染色,再用50%的酒精溶液洗去浮色。
9、75%的酒精溶液:用于殺菌消毒,75%的酒精能滲入細(xì)胞內(nèi),使蛋白質(zhì)凝固變性。低于這個(gè)濃度,酒精的滲透脫水作用減弱,殺菌力不強(qiáng);而高于這個(gè)濃度,則會(huì)使細(xì)菌表面蛋白質(zhì)迅速脫水,凝固成膜,妨礙酒精透入,削弱殺菌能力。75%的酒精溶液常用于手術(shù)前、打針、換藥、針灸前皮膚脫碘消毒以及機(jī)械消毒等。
10、95%的酒精溶液:冷卻的體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精可用于凝集DNA。
11、龍膽紫溶液:(濃度為0.01g/ml或0.02g/ml)用于染色體著色,可將染色體染成紫色,通常染色3~5分鐘。
(也可以用醋酸洋紅染色:冰醋酸45ML+55ML蒸餾水+0.5克洋紅
先將洋紅溶于蒸餾水中,再加入冰醋酸充分搖勻后,加熱煮沸 10分鐘,待冷卻后,即可使用。)
12、20%的肝臟、3%的過(guò)氧化氫、3.5%的三氯化鐵:用于比較過(guò)氧化氫酶和Fe3+的催化效率。(新鮮的肝臟中含有過(guò)氧化氫酶)
13、3%的可溶性淀粉溶液、3%的蔗糖溶液、2%的新鮮淀粉酶溶液:用于探索淀粉酶對(duì)淀粉和蔗糖的作用實(shí)驗(yàn)。
14、碘液:用于鑒定淀粉的存在。遇淀粉變藍(lán)。
15、丙酮:用于提取葉綠體中的色素。
16、層析液:(成分:20份石油醚、2份丙酮、和1份苯混合而成,也可用93號(hào)汽油)可用于色素的層析,即將色素在濾紙上分離開。
17、二氧化硅:在色素的提取的分離實(shí)驗(yàn)中研磨綠色葉片時(shí)加入,可使研磨充分。
18、碳酸鈣:研磨綠色葉片時(shí)加入,可中和有機(jī)酸,防止在研磨時(shí)葉綠體中的色素受破壞。
19、0.3g/mL的蔗糖溶液:相當(dāng)于30%的蔗糖溶液,比植物細(xì)胞液的濃度大,可用于質(zhì)壁分離實(shí)驗(yàn)。20、0.1g/mL的檸檬酸鈉溶液:與雞血混合,防凝血。
21、班氏試劑:
溶85克檸檬酸鈉及50克無(wú)水碳酸鈉于400毫升水中。另溶8.5克硫酸銅于500毫升熱水中。將硫酸銅溶液緩緩傾入檸檬酸鈉——碳酸鈉溶液中,邊加邊攪拌。如有沉淀可過(guò)濾, 此混合液可長(zhǎng)期使用。
22、氯化鈉溶液:①可用于溶解DNA。當(dāng)氯化鈉濃度為2mol/L、0.015mol/L時(shí)DNA的溶解度最高,在氯化鈉濃度為0.14 mol/L時(shí),DNA溶解度最高。②濃度為0.9%時(shí)可作為生理鹽水。
23、有絲分裂細(xì)胞染液 醫(yī)用紫藥水和蒸餾水按1:16的比例混合 配成染色液。
24、有絲分裂細(xì)胞解離液
38%鹽酸和95%酒精按1:1的比例配成解離液。
24、卡諾氏固定液(用于細(xì)胞有絲分裂根尖的固定)
酒精:冰醋酸=3:1(體積比)
25、20%肝臟研磨液
1份肝臟4份水。用剪子迅速將肝臟剪碎,先加少量的水研研磨,用剩余的水沖洗。
26、鑒定CO2試劑——澄清石灰水(Ca(OH)2溶液);酸堿指示劑。
取飽和石灰水澄清過(guò)濾,密封備用。
第四篇:高中生物教材實(shí)驗(yàn)中涉及試劑知識(shí)總結(jié)
高中生物教材實(shí)驗(yàn)中涉及試劑知識(shí)總結(jié)
1、斐林試劑 : 配制:1)甲液質(zhì)量濃度為 0.1g/ml,取10gNaOH溶于蒸餾水,稀釋至100ml.2)乙液質(zhì)量濃度為0.05g/ml,取5gCuSO4溶于蒸餾水,稀釋至100ml.用時(shí)甲乙兩夜等量混合,水浴加熱,且必須現(xiàn)配現(xiàn)用。鑒別可溶性還原糖(葡萄糖,果糖,麥芽糖)時(shí)產(chǎn)生磚紅色沉淀。
2、雙縮脲試劑:配制:1)甲液質(zhì)量濃度為 0.1g/ml,取10gNaOH溶于蒸餾水,稀釋至100ml。2)乙液質(zhì)量濃度為0.01g/ml,取1gCuSO4溶于蒸餾水,稀釋至100ml。先加入甲液,再加入乙液。用于檢測(cè)蛋白質(zhì)中的肽鍵。應(yīng)注意的是蛋白質(zhì)一定有肽鍵,有肽鍵的不一定是蛋白質(zhì),如尿素。鑒定蛋白質(zhì)時(shí),產(chǎn)生紫色反應(yīng)。
3、班氏尿糖定性試劑:配制:稱取17.4克無(wú)水硫酸銅(CuSO4)溶解于100毫升熱蒸餾水中,冷卻后,稀釋到150毫升。稱取檸檬酸鈉(Na2CO3)100克,加蒸餾水600毫升,加熱使之溶解,冷卻后,稀釋到850毫升。把硫酸銅溶液傾入檸檬酸鈉及碳酸鈉溶液中,攪勻后即為班氏尿糖定性試劑。使用方法同斐林試劑。
4、蘇丹紅Ⅲ /Ⅳ:配制:取0.1g蘇丹Ⅲ,溶解在20ml95%酒精中。用于鑒定脂肪被蘇丹紅Ⅲ染為橘黃色,被蘇丹紅Ⅳ染為紅色。鑒定時(shí),先制備臨時(shí)裝片,再進(jìn)行顯微觀察。
5、甲基綠吡羅紅染色劑:用于觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布情況。必須現(xiàn)用現(xiàn)配。DNA遇到甲基綠為藍(lán)綠色,RNA遇到吡羅紅為紅色。
6、鹽酸:配置解離液或改變?nèi)芤旱腜H值。
7、碘液:用于鑒定淀粉的存在,遇到淀粉變?yōu)樗{(lán)色。(用于光合作用實(shí)驗(yàn))。
8、龍膽紫溶液:用于染色體著色,可將染色體染成紫色,顯色反應(yīng)。
9、醋酸洋紅溶液:為堿性染料。與龍膽紫溶液一樣,都是用于染色體著色,但它卻是將染色體染成紅色。
10、層析液:配置:苯+丙酮。用于色素的層析,即將色素在濾紙上分離開。
11、二氧化硅:可使綠葉研磨充分。
12、碳酸鈣:防止在研磨時(shí),葉綠體中的色素受到破壞。
13、13.0.3g/ml的蔗糖溶液:相當(dāng)于30%的蔗糖溶液,用于質(zhì)壁分離實(shí)驗(yàn)。不會(huì)使細(xì)胞致死,且細(xì)胞分離后可復(fù)原。
14、胰蛋白酶:用于分離蛋白質(zhì)。用于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)分解組織,使組織細(xì)胞分散開,制成細(xì)胞懸浮液。
15、秋水仙素:巨毒。人工誘導(dǎo)染色體組加倍。原理:化學(xué)誘變因子抑制有絲分裂時(shí)紡錘體的形成。
16、氫氧化鈉:用于吸收二氧化碳或改變?nèi)芤旱腜H值。用于細(xì)胞呼吸。
17、碳酸氫鈉:提供二氧化碳。用于細(xì)胞光合作用。
18、澄清石灰水:鑒定二氧化碳。
19、溴麝香草酚藍(lán)水溶液:檢測(cè)二氧化碳。溴麝香草酚藍(lán)水溶液由藍(lán)色變?yōu)辄S色 20、重鉻酸鉀的濃硫酸溶液:檢測(cè)酒精在酸性條件下,酒精使橙色的重鉻酸鉀的濃硫酸溶液變?yōu)榛揖G色。用于探究酵母菌的呼吸方式。
21、健那綠染色劑:專一性用于線粒體染色的活細(xì)胞染料。將線粒體染成藍(lán)綠色
22、解離液:固定細(xì)胞形態(tài),使細(xì)胞分散開。
23、23.95%的酒精溶液:用于提取葉綠體中的色素。用于與15%的鹽酸等體積混合后解離根尖。
24、二苯胺:配制:稱取1.5g二苯胺,溶于100mL冰醋酸中,再加1.5mL濃硫酸,避光保存。DNA遇二苯胺(沸水浴)會(huì)染成藍(lán)色。
第五篇:【引用】高中生物實(shí)驗(yàn)常用的試劑和檢測(cè)方法
【引用】高中生物實(shí)驗(yàn)常用的試劑和檢測(cè)方法
(1)化學(xué)物質(zhì)的檢測(cè)方法: ①淀粉碘液——
②還原糖、班氏試劑——斐林試劑
③CO2——Ca(OH)2溶液或酸堿指示劑或溴麝香草酚藍(lán)溶液 ④O2——余燼復(fù)燃
⑤蛋白質(zhì)——雙縮脲試劑
⑥染色體、醋酸洋紅溶液——龍膽紫 ⑦DNA——二苯胺試劑 ⑧脂肪蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液—— ⑨酒精——酸化的重鉻酸鉀溶液
(2)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的顯示方法:
①光合速率——O2釋放量或CO2吸收量或淀粉產(chǎn)生量 ②呼吸速率——O2吸收量或CO2釋放量或淀粉減少量 ③原子途徑——放射性同位素示蹤法 ④細(xì)胞液濃度大小——質(zhì)壁分離 ⑤細(xì)胞是否死亡——質(zhì)壁分離
⑥甲狀腺激素作用——?jiǎng)游锖难趿浚l(fā)育速度等 ⑦生長(zhǎng)激素作用——生長(zhǎng)速度(體重變化,身高變化)⑧胰島素作用——?jiǎng)游锘顒?dòng)狀態(tài)
(3)實(shí)驗(yàn)條件的控制方法:
①增加水中氧氣——泵入空氣或吹氣或放入綠色植物 ②減少水中氧氣——容器密封或油膜覆蓋或用涼開水 ③除去容器中CO2——NaOH溶液
④除去葉片中原有淀粉——置于黑暗環(huán)境 ⑤除去葉片中葉綠素隔水加熱——酒精
⑥除去光合作用對(duì)呼吸作用的干擾——給植株遮光 ⑦如何得到單色光——棱鏡色散或彩色薄膜濾光 ⑧線粒體提取——細(xì)胞勻漿離心
⑾滅菌方法——微生物培養(yǎng)的關(guān)鍵在于滅菌,對(duì)不同材料,滅菌方法不同:培養(yǎng)基用高壓蒸氣滅菌;接種環(huán)用火焰灼燒滅菌;雙手用肥皂洗凈,擦干后用75%酒精消毒;整個(gè)接種過(guò)程都在實(shí)驗(yàn)室無(wú)菌區(qū)進(jìn)行。
(4)實(shí)驗(yàn)中控制溫度的方法: ①還原糖鑒定:水浴煮沸加熱 ②酶促反應(yīng):水浴保溫 ③用酒精溶解葉中的葉綠素:酒精要隔水加熱 ④DNA的鑒定:水浴煮沸加熱
⑤細(xì)胞和組織培養(yǎng)以及微生物培養(yǎng):恒溫培養(yǎng) 2.斐林試劑、班氏試劑與尿糖試紙
這三種物質(zhì)均可用來(lái)檢驗(yàn)含醛基的有機(jī)物的存在,在醫(yī)學(xué)上用來(lái)檢驗(yàn)糖尿病,其原理均是利用了Cu2+的氧化性把醛基氧化,但成分略有不同:
斐林試劑:即硫酸銅、氫氧化鈉和酒石酸鉀鈉組成的藍(lán)色混合溶液。分為斐林試劑A和斐林試劑B,A為CuSO4溶液,B為氫氧化鈉和酒石酸鉀鈉的混合溶液,使用時(shí)將A、B等體積混合即成斐林試劑。
班氏試劑:即硫酸銅、碳酸鈉和檸檬酸鈉組成的混合液,又叫本尼迪克特(Benedict)試劑,它與醛反應(yīng)的結(jié)果是與斐林試劑一致的,只是比斐林試劑更穩(wěn)定,所以在臨床化驗(yàn)中更常使用。
尿糖試紙:又叫硫酸銅試紙,呈白色,帶藍(lán)色斑點(diǎn),用于糖尿病患者的尿糖測(cè)試。每片含硫酸銅20毫克,枸櫞酸毫克,碳酸鈉80毫克,氫氧化鈉235毫克。尿糖試紙法快速、方便,試紙的正確使用方法為:將試紙條放在尿液中浸濕,一秒鐘后取出,在一分鐘內(nèi)觀察試紙的顏色,并與標(biāo)準(zhǔn)色板對(duì)照,根據(jù)不同的顏色來(lái)確定尿糖陽(yáng)性的程度。300 3.斐林試劑和雙縮脲試劑的比較
相同點(diǎn):①都由NaOH溶液和CuSO4溶液構(gòu)成;
②斐林試劑甲液和雙縮脲試劑A都為0.1g/mLNaOH溶液。
不同點(diǎn):①CuSO4溶液濃度不一樣:斐林試劑乙液為0.05g/mLCuSO4溶液,雙縮脲試劑B為0.01g/mLCuSO4溶液。
②配制比例不一樣。
③使用方法不一樣:斐林試劑是甲、乙液一起混合后再使用,雙縮脲試劑則是先向待鑒定材料加入A試劑搖勻后,再加入試劑B。
④鑒定的對(duì)象不一樣:斐林試劑鑒定的是還原糖,雙縮脲試劑鑒定的是蛋白質(zhì)。⑤反應(yīng)本質(zhì)及顏色反應(yīng)不一樣。4.蘇丹Ⅲ染液與蘇丹Ⅳ染液的比較
都是用來(lái)鑒定脂肪。蘇丹Ⅳ染液更易溶于脂肪,所以染色更深,同時(shí)要求染色時(shí)間更短。生物學(xué)中常用的試劑:
1、斐林試劑: 成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.05g/ml CuSO4(乙液)。用法:將斐林試劑甲液和乙液等體積混合,再將混合后的斐林試劑倒入待測(cè)液,水浴加熱或直接加熱,如待測(cè)液中存在還原糖,則呈磚紅色。
2、班氏糖定性試劑:為藍(lán)色溶液。和葡萄糖混合后沸水浴會(huì)出現(xiàn)磚紅色沉淀。用于尿糖的測(cè)定。
3、雙縮脲試劑:成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.01g/ml CuSO4(乙液)。用法:向待測(cè)液中先加入2ml甲液,搖勻,再向其中加入3~4滴乙液,搖勻。如待測(cè)中存在蛋白質(zhì),則呈現(xiàn)紫色。
4、蘇丹Ⅲ:用法:取蘇丹Ⅲ顆粒溶于95%的酒精中,搖勻。用于檢測(cè)脂肪。可將脂肪染成橘黃色(被蘇丹Ⅳ染成紅色)。
5、二苯胺:用于鑒定DNA。DNA遇二苯胺(沸水?。?huì)被染成藍(lán)色。
6、甲基綠:用于鑒定DNA。DNA遇甲基綠(常溫)會(huì)被染成藍(lán)綠色。(甲基綠使DNA呈現(xiàn)綠色,吡羅紅使RNA呈現(xiàn)紅色。)7、50%的酒精溶液:在脂肪鑒定中,用蘇丹Ⅲ染液染色,再用50%的酒精溶液洗去浮色。8、75%的酒精溶液:用于殺菌消毒,75%的酒精能滲入細(xì)胞內(nèi),使蛋白質(zhì)凝固變性。低于這個(gè)濃度,酒精的滲透脫水作用減弱,殺菌力不強(qiáng);而高于這個(gè)濃度,則會(huì)使細(xì)菌表面蛋白質(zhì)迅速脫水,凝固成膜,妨礙酒精透入,削弱殺菌能力。75%的酒精溶液常用于手術(shù)前、打針、換藥、針灸前皮膚脫碘消毒以及機(jī)械消毒等。9、95%的酒精溶液:冷卻的體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精可用于凝集DNA。10、15%的鹽酸:和95%的酒精溶液等體積混合可用于解離根尖。
11、龍膽紫溶液:(濃度為0.01g/ml或0.02g/ml)用于染色體著色,可將染色體染成紫色,通常染色3~5分鐘。(也可以用醋酸洋紅染色)12、20%的肝臟、3%的過(guò)氧化氫、3.5%的氯化鐵:用于比較過(guò)氧化氫酶和Fe3+的催化效率。(新鮮的肝臟中含有過(guò)氧化氫酶)13、3%的可溶性淀粉溶液、3%的蔗糖溶液、2%的新鮮淀粉酶溶液:用于探索淀粉酶對(duì)淀粉和蔗糖的作用實(shí)驗(yàn)。
14、碘液:用于鑒定淀粉的存在。遇淀粉變藍(lán)。
15、丙酮:用于提取葉綠體中的色素。
16、層析液:(成分:20份石油醚、2份丙酮、和1份苯混合而成,也可用93號(hào)汽油)可用于色素的層析,即將色素在濾紙上分離開。
17、二氧化硅:在色素的提取的分離實(shí)驗(yàn)中研磨綠色葉片時(shí)加入,可使研磨充分。
18、碳酸鈣:研磨綠色葉片時(shí)加入,可中和有機(jī)酸,防止在研磨時(shí)葉綠體中的色素受破壞。19、0.3g/mL的蔗糖溶液:相當(dāng)于30%的蔗糖溶液,比植物細(xì)胞液的濃度大,可用于質(zhì)壁分離實(shí)驗(yàn)。20、0.1g/mL的檸檬酸鈉溶液:與雞血混合,防凝血。
21、氯化鈉溶液:①可用于溶解DNA。當(dāng)氯化鈉濃度為2mol/L、0.015mol/L時(shí)DNA的溶解度最高,在氯化鈉濃度為0.14 mol/L時(shí),DNA溶解度最低。②濃度為0.9%時(shí)可作為生理鹽水。