第一篇：基因鑒定技術(shù)

基因鑒定技術(shù)

人體細(xì)胞有總數(shù)約為30億個(gè)堿基對(duì)的DNA，每個(gè)人的DNA都不完全相同，人與人之間不同的堿基對(duì)數(shù)目達(dá)幾百萬之多，因此通過分子生物學(xué)方法顯示的DNA圖譜也因人而異，由此可以識(shí)別不同的人。所謂“DNA指紋”，就是把DNA作為像指紋那樣的獨(dú)特特征來識(shí)別不同的人。由于DNA是遺傳物質(zhì)，因此通過對(duì)DNA鑒定還可以判斷兩個(gè)人之間的親緣關(guān)系。

技術(shù)歷史及現(xiàn)狀

DNA鑒定技術(shù)的起源

DNA鑒定技術(shù)是英國(guó)遺傳學(xué)家A·J·杰弗里斯（1950－）在1984年發(fā)明的。由于人體各部位的細(xì)胞都有相同的DNA，因此可以通過檢查血跡、毛發(fā)、唾液等判明身份。

河南的DNA身份證

2000年，我國(guó)河南省鄭州市首次頒發(fā)DNA身份證。這張?zhí)厥獾纳矸葑C表面印有持有者的姓名、年齡、性別、出生年月、血型、身份證號(hào)、照片等，但它的奧秘和價(jià)值所在是下方的一長(zhǎng)排條文形碼。個(gè)人的遺傳基因秘密就藏在這些條碼中，顯示持有者存在的惟一性。擁有者將真正與世界上其他60億人口區(qū)分開來。DNA身份證在人體器官移植、輸血、耐藥基因的認(rèn)定和干細(xì)胞移植方面都有非常大的作用。

國(guó)外案例

DNA鑒定技術(shù)除了可鑒定個(gè)人身份外，在鑒定親屬關(guān)系上也很有效。在阿根廷內(nèi)戰(zhàn)期間，許多孩子失去了父母。戰(zhàn)爭(zhēng)結(jié)束后，政府希望把這些孩子們交付給他們的親戚，使他們回到親人的懷抱?？墒窃鯓邮顾麄儧]見過面的親戚相信孩子是自己的親屬呢？科學(xué)家采用DNA鑒定技術(shù)，將孩子血液中的DNA與可能是他們親戚的DNA相比較，結(jié)果至少幫助50多個(gè)孩子找到了親人。現(xiàn)在這種用DNA鑒定身份的技術(shù)，已經(jīng)廣泛被各國(guó)采用了。

指紋技術(shù)應(yīng)用

近一個(gè)世紀(jì)以來，指紋技術(shù)給偵破工作帶來很大方便。但罪犯越來越狡猾，許多作案現(xiàn)場(chǎng)沒有留下指紋?，F(xiàn)在有了DNA指紋鑒定技術(shù)，只要罪犯在案發(fā)現(xiàn)場(chǎng)留下任何與身體有關(guān)的東西，例如血跡和毛發(fā)，警方就可以根據(jù)這些蛛絲馬跡將其擒獲，準(zhǔn)確率非常高。DNA鑒定技術(shù)在破獲強(qiáng)奸和暴力犯罪時(shí)特別有效，因?yàn)樵诖祟惏讣?，罪犯很容易留下包含DNA信息的罪證。根據(jù)DNA指紋破案雖然準(zhǔn)確率高，但也有出錯(cuò)的可能，因?yàn)閮蓚€(gè)人的DNA指紋在測(cè)試的區(qū)域內(nèi)有完全吻合的可能。因此在2000年英國(guó)將DNA指紋測(cè)

試擴(kuò)展到10個(gè)區(qū)域，使偶然吻合的危險(xiǎn)幾率降到十億分之一。即使這樣，出錯(cuò)的可能性仍未排除。

基因鑒定技術(shù)中的親子鑒定

通過遺傳標(biāo)記的檢驗(yàn)與分析來判斷父母與子女是否親生關(guān)系，稱之為親子試驗(yàn)或親子鑒定。DNA是人體遺傳的基本載體，人類的染色體是由DNA構(gòu)成的，每個(gè)人體細(xì)胞有23對(duì)（46條）成對(duì)的染色體，其分別來自父親和母親。夫妻之間各自提供的23條染色體，在受精后相互配對(duì)，構(gòu)成了23對(duì)（46條）孩子的染色體。如此循環(huán)往復(fù)構(gòu)成生命的延續(xù)。

由于人體約有30億個(gè)核苷酸構(gòu)成整個(gè)染色體系統(tǒng)，而且在生殖細(xì)胞形成前的互換和組合是隨機(jī)的，所以世界上沒有任何兩個(gè)人具有完全相同的30億個(gè)核苷酸的組成序列，這就是人的遺傳多態(tài)性。盡管遺傳多態(tài)性的存在，但每一個(gè)人的染色體必然也只能來自其父母，這就是DNA親子鑒定的理論基礎(chǔ)。

傳統(tǒng)的血清方法能檢測(cè)紅細(xì)胞血型、白細(xì)胞血型、血清型和紅細(xì)胞酶型等，這些遺傳學(xué)標(biāo)志為蛋白質(zhì)（包括糖蛋白）或多肽，容易失活而導(dǎo)致檢材得不到理想的檢驗(yàn)結(jié)果。此外，這些遺傳標(biāo)志均為基因編碼的產(chǎn)物，多態(tài)信息含量（PIC）有限，不能反映DNA編碼區(qū)的多態(tài)性，且這些遺傳標(biāo)志存在生理性、病理性變異（如A型、O型血的人受大腸桿菌感染后，B抗原可能呈陽(yáng)性。因此，其應(yīng)用價(jià)值有限。

DNA檢驗(yàn)可彌補(bǔ)血清學(xué)方法的不足，故受到了法醫(yī)物證學(xué)工作者的高度關(guān)注，近幾年來，人類基因組研究的進(jìn)展日新月異，而分子生物學(xué)技術(shù)也不斷完善，隨著基因組研究向各學(xué)科的不斷滲透，這些學(xué)科的進(jìn)展達(dá)到了前所未有的高度。在法醫(yī)學(xué)上，STR位點(diǎn)和單核苷酸（SNP）位點(diǎn)檢測(cè)分別是第二代、第三代DNA分析技術(shù)的核心，是繼RFLPs（限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性）VNTRs（可變數(shù)量串聯(lián)重復(fù)序列多態(tài)性）研究而發(fā)展起來的檢測(cè)技術(shù)。作為最前沿的刑事生物技術(shù)，DNA分析為法醫(yī)物證檢驗(yàn)提供了科學(xué)、可靠和快捷的手段，使物證鑒定從個(gè)體排除過渡到了可以作同一認(rèn)定的水平，DNA檢驗(yàn)?zāi)苤苯诱J(rèn)定犯罪、為兇殺案、強(qiáng)奸殺人案、碎尸案、強(qiáng)奸致孕案等重大疑難案件的偵破提供準(zhǔn)確可靠的依據(jù)。隨著DNA技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用，DNA標(biāo)志系統(tǒng)的檢測(cè)將成為破案的重要手段和途徑。此方法作為親子鑒定已經(jīng)是非常成熟的，也是國(guó)際上公認(rèn)的最好的一種方法。

親子鑒定的準(zhǔn)確性

DNA親子鑒定是目前最準(zhǔn)確的親權(quán)鑒定方法，如果小孩的遺傳位點(diǎn)和被測(cè)試男子的位點(diǎn)（至少1個(gè)）不一致，那么該男子便100％被排除血緣關(guān)系之外，即他絕對(duì)不可能是孩子的父親。如果孩子與其父母親的位點(diǎn)都吻合，我們就能得出親權(quán)關(guān)系大于99．99％的可能性，即證明他們之間的血緣親子關(guān)系。

親子鑒定須知（1）被鑒定人應(yīng)由母－子－可疑父親或父母－子組成，只要求父子或母子二人鑒定者一般不予受理；（2）成年被鑒定人均應(yīng)自愿同意鑒定，12歲以上的青少年應(yīng)適當(dāng)求其對(duì)鑒定的意見；（3）被鑒定人應(yīng)

了解自己或近親屬有無遺傳病史；（4）被鑒定子女年齡一般在半歲以上為好；（5）羊水或絨毛作親子鑒定應(yīng)孕婦及可疑父親簽定委托鑒定協(xié)議書。親子鑒定可以在孩子未出生時(shí)檢查嗎？

可以，需要用產(chǎn)前診斷進(jìn)行親子鑒定的孕婦于懷孕16-20周通過采取臍血或羊水樣本即可行親子鑒定。

如何判斷檢驗(yàn)結(jié)果

親子鑒定結(jié)果報(bào)告方法。

親子鑒定報(bào)告內(nèi)容一般包括：檢驗(yàn)的方法、檢驗(yàn)結(jié)果、親子關(guān)系概率或認(rèn)定有親子關(guān)系的準(zhǔn)確性。

如：鑒定報(bào)告為 > 99.96 %

肯定父子關(guān)系

鑒定報(bào)告為 0%

否定父子關(guān)系

第二篇：基因定量分析技術(shù)

基因定量分析技術(shù)

基因定量分析技術(shù)的應(yīng)用價(jià)值

近年來基因定量分析的價(jià)值受到越來越多研究者的重視。過去由于過分強(qiáng)調(diào)了感染后過強(qiáng)的細(xì)胞免疫應(yīng)答介導(dǎo)肝細(xì)胞損傷，忽視了對(duì)病毒復(fù)制水平與致病性之間因果關(guān)系的研究。目前普遍認(rèn)為，盡管不直接破壞寄生細(xì)胞，但病毒的活躍復(fù)制是啟動(dòng)或激發(fā)肝臟組織炎癥反應(yīng)的因素。這表明確定

感染者體內(nèi)復(fù)制狀態(tài)，即從基因定量的角度作病情分析是十分有意義的。事實(shí)上，真正引起人們關(guān)注基因定量分析價(jià)值的重要原因是最近發(fā)現(xiàn)了干擾素治療與基因水平兩者之間有非常密切的關(guān)系?；蚨糠治鲞€在轉(zhuǎn)基因動(dòng)物、基因治療、蛋白疫苗和核酸疫苗、抗藥物體外試驗(yàn)和動(dòng)物試驗(yàn)及耐藥研究、流行病學(xué)研究、血液制品污染監(jiān)測(cè)等方面具有重要的應(yīng)用價(jià)值。

一、基因定量分析在干擾素治療中的應(yīng)用好范文版權(quán)所有

尚無藥物可以清除所有感染者體內(nèi)顆粒。干擾素是目前唯一有一定療效的一類生物制劑它在病毒等誘導(dǎo)下由幾種相關(guān)細(xì)胞產(chǎn)生，并發(fā)揮抗病毒作用。但是無論使用何種干擾素，也無論治療劑量或療程如何，干擾素治療后轉(zhuǎn)陰率迄今仍保持在左右，無法進(jìn)一步提高，究竟有哪些制約因素起作用尚無定論。

近年來發(fā)現(xiàn)干擾素的治療效果，即干擾素治療后的反應(yīng)性很大程度上取決于在體內(nèi)的復(fù)制水平。以下幾點(diǎn)事實(shí)值得注意⑴治療前低水平復(fù)制者的反應(yīng)性明顯優(yōu)于高水平復(fù)制者。轉(zhuǎn)陰的幾乎都是那些治療前血清含量較低者，而治療前含量特別高者大多沒有療效；⑵治療中病毒復(fù)制水平迅速降低者，有望治愈。相反，治療期間基因水平下降較慢，或下降幅度較小，或變化不明顯者，大多是無效者；⑶治療結(jié)束后，采用定量法檢測(cè)，完全轉(zhuǎn)陰者可能不再?gòu)?fù)發(fā)，而終止治療后仍保持較低水平者，反跳的可能性較大。可見，使用干擾素治療感染時(shí)，在各種近期和遠(yuǎn)期療效指標(biāo)中，除了病人的臨床表現(xiàn)是否好轉(zhuǎn)，生化指標(biāo)是否改善，肝組織炎癥反應(yīng)是否減輕等以外，血清定量分析是一個(gè)十分重要的觀察項(xiàng)目。從現(xiàn)有研究資料看，除病理檢查外，定量檢測(cè)，也許是干擾素治療效果判斷依據(jù)中最直接、最可靠和最有價(jià)值的指標(biāo)。多數(shù)研究者認(rèn)為，通過定量分析來指導(dǎo)干擾素治療，有重大意義。首先，在治療對(duì)象的選擇方面，即確定干擾素治療適應(yīng)癥時(shí)，應(yīng)對(duì)各侯選病例在某個(gè)時(shí)間段內(nèi)定期反復(fù)檢測(cè)水平，那些長(zhǎng)期保持高復(fù)制水平者不宜接受干擾并素治療，或應(yīng)當(dāng)聯(lián)合治療；其次，干擾素治療期間，可根據(jù)基因水平的動(dòng)態(tài)變化適時(shí)調(diào)整治療劑量，決定是否縮短或延長(zhǎng)療程，及是否終止治療。這不僅對(duì)制訂合理的治療方案，也對(duì)減輕病人負(fù)擔(dān)，避免不恰當(dāng)用藥有指導(dǎo)意義。筆者認(rèn)為，目前國(guó)際上普遍采用的所謂“六個(gè)月療程”及某些中高劑量治療方案均缺乏充分和足夠的立論依據(jù)，有必要結(jié)合基因定量分析結(jié)果，重新評(píng)價(jià)和制訂干擾素治療計(jì)劃；最后，干擾素治療結(jié)束后，對(duì)有反應(yīng)者定期作定量分析，有助于發(fā)現(xiàn)復(fù)發(fā)者，并根據(jù)血清含量波動(dòng)情況決定是否實(shí)施再治療。有人報(bào)告，首次干擾素治療有效者，再治療的效果亦佳。如果第一次治療無反應(yīng)或反應(yīng)較差者，第二次干擾素治療仍不能取得理想療效。

二、基因定量分析的其他臨床價(jià)值

感染后，在臨床表現(xiàn)方面的差異非常明顯可以表現(xiàn)為無癥狀攜帶者、急性肝炎、慢性肝炎、暴發(fā)型肝炎、肝硬化及肝癌等多種疾病狀態(tài)。病毒在肝細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制水平與各種臨床疾病狀態(tài)之間可能存在著某些必然聯(lián)系。由于基因定量技術(shù)的發(fā)展和成熟，目前已有可能從某些現(xiàn)象上闡明復(fù)制與致病性之間的“量效”關(guān)系。

㈠“無癥狀攜帶者”可能為活動(dòng)性乙肝患者。有部分感染者，由于免疫耐受或其它原因，體內(nèi)呈復(fù)制不活躍的“潛伏”狀態(tài)，但并不意味著不存在進(jìn)行性肝損害。等研究發(fā)現(xiàn)無癥狀攜帶者在其自然發(fā)展史上，復(fù)制處于波動(dòng)狀態(tài)，時(shí)有加劇，病毒復(fù)制積累到一定程度后水平增加。一般規(guī)律是血清水平上升活性增加抗滴度提高。因此無癥狀攜帶者應(yīng)采取積極治療措施，否則這類人群不僅作為重要的病毒庫(kù)傳播，而且由于隱匿性肝細(xì)胞損傷的不斷積累，不經(jīng)過慢性肝炎階段，直接向肝硬化和肝癌發(fā)展。

㈡水平與感染者病情和預(yù)后的關(guān)系密切。上述無癥狀攜帶者是一個(gè)特殊群體。而對(duì)那些急性和慢性乙型肝炎患者而言，水平對(duì)預(yù)后判斷有幫助。研究發(fā)現(xiàn)一直保持較高水平的急性肝炎患者易慢性化，而復(fù)制水平較高的慢性肝炎患者不僅對(duì)干擾素治療的反應(yīng)性差，而且肝組織炎癥反應(yīng)更明顯，病情更重，更易發(fā)生肝硬化和肝癌。目前在能否用血清水平來判斷肝組織炎癥損傷程度這類問題上尚有爭(zhēng)議。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，鴨肝被廣泛感染的同時(shí)，并不伴隨明顯病毒血癥肝細(xì)胞清除病毒的同時(shí)也無病毒血癥加重的證據(jù)。然而最近有人對(duì)感染者進(jìn)行基因定量分析研究，發(fā)現(xiàn)水平與水平以及肝臟分級(jí)之間有密切關(guān)系。

㈢肝移植者定量的意義

等報(bào)告肝移植前患者血清水平的高低決定移植后肝臟是否再感染。作者觀察到，例移植前血清含量低于拷貝，移植后不間斷

地采用免疫預(yù)防，隨訪個(gè)月，無一例再發(fā)肝炎，但另外兩例移植前病毒拷貝數(shù)大于則發(fā)生了嚴(yán)重再感染。建議移植前使用抗藥物，最大限度降低血清濃度，有助于防止侵犯移植后肝臟，提高肝臟移植的效果。

㈣前核基因突變定量意義好范文版權(quán)所有

前核基因突變可導(dǎo)致表達(dá)缺失。感染不表達(dá)的突變株，或野生型在體內(nèi)突變并成為優(yōu)勢(shì)株均產(chǎn)生較

嚴(yán)重的后果，如易發(fā)生暴發(fā)性肝炎，預(yù)后差，干擾素治療無效等。目前已能采用核酸序列測(cè)定技術(shù)、技術(shù)、限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性分析技術(shù)等來定性檢測(cè)前核基因突變。最近建立了一種及產(chǎn)物的顯色反應(yīng)點(diǎn)突變分析技術(shù)，用來定量分析突變前核基因，有助于進(jìn)一步探討突變與致病性之間的關(guān)系。

基因定量分析是一項(xiàng)臨床應(yīng)用型技術(shù)，但對(duì)基礎(chǔ)研究也有一定的應(yīng)用價(jià)值，尤其是在當(dāng)前基因治療、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物、核酸疫苗等熱點(diǎn)研究領(lǐng)域，基因定量分析可能是一種很好的輔助手段，對(duì)發(fā)現(xiàn)一些有意義的現(xiàn)象也許有一定幫助。比如在轉(zhuǎn)基因小鼠組織臟器分布規(guī)律可用定量標(biāo)準(zhǔn)來衡量，以及用定量手段觀察各種藥物、細(xì)胞因子和其它物質(zhì)對(duì)轉(zhuǎn)基因小鼠基因復(fù)制的調(diào)節(jié)作用。又如對(duì)核酸疫苗注入肌組織后的各種動(dòng)力學(xué)變化的研究遠(yuǎn)未深入，如能采用定量手段，分析抗原表達(dá)基因在體內(nèi)的存在狀態(tài)無疑是有益的。至于各種抗藥物，無論是在體外細(xì)胞模型包括轉(zhuǎn)基因細(xì)胞模型還是在動(dòng)物模型的研究，或在人體研究，采用基因定量分析，應(yīng)當(dāng)是考核藥物療效的最佳手段。

第三篇：古玩鑒定技術(shù)

古玩鑒定技術(shù)

在收藏交易市場(chǎng)上，給古玩藝術(shù)品附上一張由檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)開具的鑒定證書，似乎成了一種時(shí)髦的趨勢(shì)，古玩鑒定技術(shù)。但那些借助先進(jìn)的科學(xué)儀器手段檢驗(yàn)出來的結(jié)果，有時(shí)也未必就能服眾。

古玩藝術(shù)品的真假，是古玩收藏的關(guān)鍵所在?？墒牵谑詹厝锍３Ｓ袑?duì)同一件瓷器藏品說法不一的情況。如果說專家的眼光有“仁者見仁，智者見智”的局限，對(duì)于一些缺乏專家鑒定途徑的收藏人士來說，拿藏品到科學(xué)實(shí)驗(yàn)室去檢驗(yàn)，是辨別真?zhèn)蔚闹饕緩?。在收藏交易市?chǎng)上，給古玩藝術(shù)品附上一張由檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)開具的鑒定證書，似乎成了一種時(shí)髦的趨勢(shì)。但那些借助先進(jìn)的科學(xué)儀器手段檢驗(yàn)出來的結(jié)果，有時(shí)也未必就能服眾。

經(jīng)驗(yàn)更可靠還是儀器檢驗(yàn)更可靠？

收藏愛好者周先生最近從廣州的一個(gè)古玩市場(chǎng)買回來了幾件書畫、瓷器古玩藝術(shù)品，拿給行家?guī)涂矗姓f是真，有說是假。比如有一幅清代山水畫，有行家指出，這幅畫所用的紙張和墨，都是清代的沒有錯(cuò)，但是畫畫的人卻是現(xiàn)代的。作假者只要找收藏清代墨塊的藏家，買回墨料研成墨，再找清代出產(chǎn)的紙張畫畫，就能輕易行家的眼睛。

行家的說法，讓周先生傻了眼，因?yàn)閺睦碚撋蟻碚f，這種造假情況是行得通的。不過，周先生的心態(tài)比較平和，他的觀點(diǎn)是行家也會(huì)看走眼，不能依賴行家，況且時(shí)下不少所謂“行家”的鑒定水平也不見得就是權(quán)威，甚至還有一些心術(shù)不正的人士打著行家的名頭攪亂市場(chǎng)秩序。而科技檢驗(yàn)手段至少不受心情、燈光、環(huán)境的影響，能保證鑒定標(biāo)準(zhǔn)始終保持在同一水準(zhǔn)上，避免偏差。對(duì)于普通的收藏人士來說，如果買古玩藝術(shù)品也能像其它商品一樣，有可信賴的“免檢”標(biāo)志，那對(duì)于古玩收藏市場(chǎng)來說，將會(huì)起到積極的推動(dòng)作用。

周先生說，目前收藏圈子里，究竟是經(jīng)驗(yàn)更可靠，還是科技檢驗(yàn)手段更可靠，兩者之爭(zhēng)并沒有一個(gè)準(zhǔn)確的定論。這就意味著兩者都具有一定的參考價(jià)值，不能絕對(duì)否定其中一個(gè)。

利用儀器檢測(cè)手段越來越先進(jìn)

目前市場(chǎng)上主要有幾種針對(duì)古代瓷器的檢驗(yàn)方法，如“熱釋光”、“脫?；禂?shù)”等?！盁後尮狻笨梢詼?zhǔn)確檢測(cè)陶瓷的燒成年代，誤差為幾十年，這種方法需要取樣，對(duì)藝術(shù)品有一定的破壞;“脫?；禂?shù)”能有效檢測(cè)出高仿品，但是其局限在于只能檢測(cè)帶釉的瓷器。

古玩藝術(shù)品收藏人士劉先生，曾將自己收藏的古代瓷器送到外地進(jìn)行過檢測(cè)。他送檢的5件瓷器中有3件被肯定，2件被否定。劉先生談到，科學(xué)檢測(cè)的原理其實(shí)并不復(fù)雜，不同時(shí)代、不同窯口的古代瓷器，其胎土、釉質(zhì)的微量元素含量、所占比例等等數(shù)據(jù)肯定是不一樣的，并且有自己的規(guī)律所在。通過科學(xué)的手段進(jìn)行檢測(cè)、采集數(shù)據(jù)庫(kù)，技術(shù)人員就能建立一個(gè)對(duì)比途徑，從中驗(yàn)出真假?！斑@就像做D N A親子鑒定一樣”。

據(jù)悉，現(xiàn)在又有了更先進(jìn)的檢測(cè)手段。云南的一個(gè)古陶瓷科學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室，使用X射線熒光能譜儀檢測(cè)古瓷器，據(jù)說這種探測(cè)技術(shù)還曾經(jīng)使用于月球探測(cè)車的探測(cè)器上，可以深入瓷器的釉下探測(cè)陶瓷胎體的成分。據(jù)一位資深藏家唐先生介紹，這種檢測(cè)手段不僅可以應(yīng)用于古代瓷器，還可用于檢測(cè)古代青銅器、貴金屬、化石標(biāo)本等。2009年，唐先生將自己收藏的一批古代瓷器送到云南的這個(gè)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢驗(yàn)，其中相當(dāng)一部分通過檢測(cè)認(rèn)定為元代至清代的古瓷器。對(duì)于這個(gè)結(jié)果，他表示信服。

唐先生談到，陶瓷的生產(chǎn)離不開原料，選用的原料是根據(jù)其化學(xué)組成和工藝性質(zhì)來決定的?，F(xiàn)代制造的各種高仿品，無論外形如何相似，可是都添加了現(xiàn)代的瓷釉成分。這些現(xiàn)代成分難以用肉眼去發(fā)現(xiàn)，可是用儀器來檢測(cè)就能一目了然。

對(duì)此，有專家認(rèn)為，當(dāng)自己的藏品出現(xiàn)爭(zhēng)議，光憑行家“掌眼”拿不準(zhǔn)的情況下，花一筆檢測(cè)費(fèi)求助于科技手段，是明智的做法，古董鑒定《古玩鑒定技術(shù)》。

“眼力”鑒別是收藏的傳統(tǒng)

可是，這科技手段檢驗(yàn)出來的結(jié)果，卻不見得令廣大收藏人士都認(rèn)可。筆者了解到，曾經(jīng)有一些收藏人士，想過從外地引進(jìn)科學(xué)儀器經(jīng)營(yíng)藝術(shù)品鑒定這門生意，在進(jìn)行市場(chǎng)調(diào)查時(shí)因藏家們認(rèn)可的情況不理想而作罷。那么，對(duì)于以主張收藏三要素“財(cái)力、魄力、眼力”之“眼力”來鑒別的古玩藝術(shù)品真?zhèn)蔚牟丶覀儊碚f，他們的考慮又是什么呢。

“藏家通過自己的經(jīng)驗(yàn)、學(xué)識(shí)來辨別真?zhèn)?，是古玩收藏的傳統(tǒng)之一。”一位資深藏家談到，收藏活動(dòng)在我國(guó)有著悠久的歷史，都要求藏家先從學(xué)習(xí)、了解歷史知識(shí)開始，通過平時(shí)多接觸、多觀察古玩藝術(shù)品，逐漸提高自己的鑒賞水平。也就是說，行家的經(jīng)驗(yàn)其實(shí)就是一個(gè)數(shù)據(jù)庫(kù)，他們能結(jié)合歷史、人文、典故等因素對(duì)古玩藝術(shù)品做出綜合的評(píng)判。科技手段的檢測(cè)儀器，一是難以對(duì)所有古代瓷器都一一采樣，二是數(shù)據(jù)不全就難以成為評(píng)判是非的標(biāo)準(zhǔn)。

另一位資深藏家雷先生的觀點(diǎn)也是傾向于憑經(jīng)驗(yàn)鑒定。他認(rèn)為，在實(shí)際檢驗(yàn)當(dāng)中，采用微量元素的分析技術(shù)對(duì)古玩藝術(shù)品的鑒定是有成功案例的，比如說在上世紀(jì)90年代中期，西安附近的唐秋官尚書李晦墓中出土了一批精美的唐三彩制品，有關(guān)單位對(duì)其進(jìn)行了微量元素分析后，通過數(shù)據(jù)庫(kù)的對(duì)比，得出結(jié)論認(rèn)為李晦墓出土的唐三彩使用了與黃冶窯唐三彩成分比較接近的高嶺土作為制胎原料，推斷如果不存在元素組成相近的其他窯址，那么李晦墓中的唐三彩是河南黃冶窯燒制的。雷先生說，他不否定科學(xué)檢測(cè)的先進(jìn)性，但是關(guān)鍵在于對(duì)比參照物是否科學(xué)。比如說檢測(cè)元青花瓷器，眾所周知，目前存世的、發(fā)掘出土的元青花瓷器、殘片數(shù)量就比較少，要建立起一個(gè)完整的、系統(tǒng)的元青花瓷器數(shù)據(jù)庫(kù)并非易事。

另有專家認(rèn)為，光是憑借科學(xué)檢測(cè)手段來進(jìn)行古瓷器鑒定，只參照數(shù)據(jù)的相似性而忽視了器物本身是否符合同時(shí)代器物的審美、藝術(shù)性等特征，是過于片面的。

綜合判斷藏品真?zhèn)?/p>

如今，科學(xué)技術(shù)正在越來越廣泛地應(yīng)用到各種社會(huì)活動(dòng)領(lǐng)域。古玩收藏如何鑒定才好，其中的孰是孰非該如何看待，讓人關(guān)注。

一位文物人士談到，行家、專家憑肉眼鑒定，其實(shí)也是一種科學(xué)檢驗(yàn)手段。之所以這樣說，是因?yàn)閷＜业难酃庖彩墙⒃趯?duì)歷史、藝術(shù)、考古等多方面知識(shí)的基礎(chǔ)之上，得出來的一個(gè)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，這個(gè)標(biāo)準(zhǔn)并不是某一位專家自己發(fā)明出來的，是凝結(jié)著一代一代人的智慧和經(jīng)驗(yàn)。這位人士談到，科學(xué)儀器檢驗(yàn)方法準(zhǔn)確的說法應(yīng)該叫做“儀器檢驗(yàn)法”，前者與后者并不對(duì)立，而是相輔相成。在如今的考古活動(dòng)中，也運(yùn)用上了大量的科學(xué)儀器，用科學(xué)儀器檢測(cè)出來的數(shù)據(jù)對(duì)專家分析進(jìn)行補(bǔ)充、論證，兩者配合得很好。

這位人士還談到，對(duì)于藏家來說，看待古玩藝術(shù)品的鑒定問題應(yīng)該抱著謙虛謹(jǐn)慎的態(tài)度，請(qǐng)教專家、行家，也要講究“找對(duì)人”。比如說，請(qǐng)一位木器專家來給自己看翡翠，那么得出來的結(jié)論就難免有失偏頗。實(shí)際上，有的收藏人士，在自己得到一件藏品的時(shí)候，喜歡與不同的人士進(jìn)行交流，當(dāng)各方給出的結(jié)論互相矛盾的時(shí)候，由于不善于分析，結(jié)果自己也暈了頭。其實(shí)，藏家應(yīng)該針對(duì)自己藏品的年代、材質(zhì)特點(diǎn)，請(qǐng)教相應(yīng)的人士。此外，對(duì)于科學(xué)儀器的鑒定，同樣也要分析鑒定機(jī)構(gòu)的權(quán)威性和科學(xué)性。

總的來說，對(duì)于各種有效的鑒定手段，不妨持一種不排斥、不迷信的態(tài)度。對(duì)于古玩藝術(shù)品的鑒定，還是應(yīng)該把握住歷史、人文、藝術(shù)性等多方面的因素進(jìn)行綜合評(píng)判

第四篇：2018國(guó)內(nèi)基因編輯技術(shù)走勢(shì)

2018國(guó)內(nèi)基因編輯技術(shù)走勢(shì)

3月30~31日，由北京大學(xué)天然藥物及仿生藥物國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室主辦的2018基因編輯學(xué)術(shù)研討會(huì)將在京舉行。屆時(shí)眾多一線科研工作者將聚集于此共襄學(xué)術(shù)盛宴。

2018基因編輯技術(shù)期待進(jìn)展一覽

王皓毅

中國(guó)科學(xué)院動(dòng)物研究所CRISPR-Cas9在動(dòng)物模型構(gòu)建、T細(xì)胞治療以及基因表達(dá)調(diào)控中的應(yīng)用

高效精確的基因工程技術(shù)對(duì)于發(fā)展基因治療，建立細(xì)胞和動(dòng)物疾病模型具有極為重要的價(jià)值。近年來特異性定點(diǎn)核酸酶的研究取得了長(zhǎng)足的進(jìn)步。為了突破傳統(tǒng)基因打靶方法的局限，我們率先通過受精卵注射CRISPR-Cas9一步獲得多基因敲除的小鼠。為了取代低通量且技術(shù)要求極高的顯微注射技術(shù)，我們建立了受精卵電擊的方法，從而極大簡(jiǎn)化了動(dòng)物模型的構(gòu)建。這一系列工作大大提高了基因修飾小鼠構(gòu)建效的率和速度，為疾病和發(fā)育生物學(xué)的體內(nèi)研究提供了重要的工具。同時(shí)我們?cè)谠鶷細(xì)胞和表達(dá)嵌合性抗原受體的T細(xì)胞（CART）中建立了高效的單基因和多基因敲除技術(shù)，為細(xì)胞免疫治療研究提供了工具。除了基因編輯，我們也基于CRISPR-Cas9系統(tǒng)建立了新技術(shù)，用來調(diào)控基因的表達(dá)水平和表觀遺傳修飾狀態(tài)。

王艷麗

中國(guó)科學(xué)院生物物理研究所Cas13a 切割RNA的分子機(jī)制CRISPR/Cas系統(tǒng)是原核生物抗免疫防御系統(tǒng)，是近年來發(fā)現(xiàn)的由小分子RNA介導(dǎo)的免疫系統(tǒng)。CRISPR-Cas系統(tǒng)分為兩大類，Cas13a是第二大類VI型系統(tǒng)中的效應(yīng)蛋白，亦稱C2c2，具有RNA介導(dǎo)的RNA酶切活性，是目前第二大類CRISPR-Cas系統(tǒng)發(fā)現(xiàn)的唯一能夠降解RNA的蛋白，在RNA技術(shù)中具有潛在的應(yīng)用價(jià)值，對(duì)開發(fā)研究RNA工具，擴(kuò)展CRISPR系統(tǒng)在基因編輯方面的運(yùn)用具有重大價(jià)值。

為了研究Cas13a如何被激活來切割RNA，我們解析了與crRNA及其靶RNA結(jié)合的Leptotrichia buccalis（Lbu）Cas13a的晶體結(jié)構(gòu)，以及LbuCas13a-crRNA復(fù)合物的cryo-EM結(jié)構(gòu)。研究結(jié)果揭示了crRNA-靶RNA雙鏈體結(jié)合在核酸酶（NUC）葉片的帶正電的中心通道中，并且Cas13a蛋白和crRNA在靶RNA結(jié)合后發(fā)生顯著的構(gòu)象變化。指導(dǎo)目標(biāo)RNA雙鏈體形成觸發(fā)HEPN1結(jié)構(gòu)域向HEPN2結(jié)構(gòu)域移動(dòng)，激活Cas13a蛋白的HEPN催化位點(diǎn)，其隨后以非特異性方式裂解單鏈靶標(biāo)和旁系RNA。研究結(jié)果證實(shí)targetRNA的結(jié)合導(dǎo)致LbuCas13a的兩個(gè)HEPN結(jié)構(gòu)域發(fā)生構(gòu)象變化，從而激發(fā)LbuCas13a非特異性地切割任意單鏈RNA的酶切活性，該成果為研究Cas13a發(fā)揮RNA酶活性的分子機(jī)制提供了重要的結(jié)構(gòu)生物學(xué)基礎(chǔ)。該研究的發(fā)現(xiàn)為CRISPR-Cas13a系統(tǒng)的進(jìn)一步開發(fā)提供了可靠的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)，對(duì)深入理解細(xì)菌抵御病毒入侵的分子機(jī)制提供了強(qiáng)有力的證據(jù)，并將對(duì)病毒引起的疾病的預(yù)防、檢測(cè)、控制與治療產(chǎn)生重大意義，特別是基于Cas13a高效的RNA酶切活性，對(duì)其應(yīng)用于各類重大疾病的快速檢測(cè)具有十分廣闊的前景。

吳強(qiáng) 上海交通大學(xué)開發(fā)DNA大片段編輯技術(shù)研究染色質(zhì)高級(jí)結(jié)構(gòu)

源于細(xì)菌和古菌的Ⅱ型成簇規(guī)律間隔短回文重復(fù)系統(tǒng)[Clustered regularly interspaced short palindromic repeats(CRISPR)/CRISPR-associated nuclease 9(Cas9)，CRISPR/Cas9]近年被改造成為基因組定點(diǎn)編輯的新技術(shù)。由于它具有設(shè)計(jì)簡(jiǎn)單、操作方便、費(fèi)用低廉等巨大優(yōu)勢(shì)，給遺傳操作領(lǐng)域帶來了一場(chǎng)革命性的改變。基于CRISPR/Cas9系統(tǒng)的基因組DNA片段靶向編輯技術(shù)主要包括DNA片段的刪除、反轉(zhuǎn)、重復(fù)、插入和易位等，這一有效的DNA片段編輯方法為研究基因功能、調(diào)控元件、組織發(fā)育和疾病發(fā)生發(fā)展提供了有力手段。我將著重匯報(bào)我們?cè)谠擃I(lǐng)域最新的研究CTCF等染色質(zhì)架構(gòu)蛋白在三維基因組組裝調(diào)控的進(jìn)展，為開展利用基因組DNA片段靶向編輯進(jìn)行基因調(diào)控和功能研究提供參考。

周德敏 北京大學(xué)天然藥物及仿生藥物國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室Manipulation of Viral Genome in Conversion of Life-ThreateningViruses as Precision Therapeutics The conversion of life-threatening viruses into live but avirulent vaccinesrepresents a revolution in vaccinology.In a proof-of-principle study, weexpanded the genetic code of the genome of influenza A virus via a transgeniccell line containing orthogonal translation machinery.This generated prematuretermination codon(PTC)–harboring viruses that exerted fullinfectivity but were replication-incompetent in conventional cells.Genome-wideoptimization of the sites for incorporation of multiple PTCs resulted in highlyreproductive and genetically stable progeny viruses in transgenic cells.Inmouse, ferret, and guinea pig models, vaccination with PTC viruses elicitedrobust humoral, mucosal, and T cell–mediated immunityagainst antigenically distinct influenza viruses and even neutralized existinginfecting strains.The methods presented here may become a general approach forgenerating live virus vaccines that can be adapted to almost any virus.王永明 復(fù)旦大學(xué)建立高效的CRISPR/Cas9編輯技術(shù) CRISPR/Cas9是一項(xiàng)革命性的基因編輯技術(shù)，得到廣泛應(yīng)用。我們從兩個(gè)方面著手提高CRISPR/Cas9的編輯效率。我們利用附著體載體表達(dá)Cas9和gRNA，稱之為epiCRISPR技術(shù)。附著體載體不整合到基因組，但是可以隨著細(xì)胞的分裂而復(fù)制，因而可以長(zhǎng)期的表達(dá)外源基因，實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)期的基因編輯。同時(shí)在附著體載體上表達(dá)嘌呤霉素抗性基因，可以富集轉(zhuǎn)染成功的細(xì)胞。編輯完成后撤除篩選藥物，附著體質(zhì)粒迅速丟失，編輯后的細(xì)胞不再表達(dá)外源基因。利用附著體技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)高達(dá)100%編輯效率，還可以高效的敲除基因組大片段，以及同時(shí)敲除多個(gè)基因。CRISPR/Cas9編輯效率受gRNA序列影響，不同的gRNA效率差別很大，測(cè)試gRNA效率費(fèi)時(shí)費(fèi)力。我們建立了高通量的測(cè)試gRNA活性的方法，得到了5萬多條gRNA的活性，覆蓋了2萬多個(gè)人類基因。這些工作將會(huì)極大的方便基因編輯工作。

常興 中國(guó)科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院利用靶向性胞嘧啶脫氨酶進(jìn)行基因編輯

單核苷酸的多樣性是遺傳多樣性的主要來源，是人類個(gè)體差異的重要遺傳學(xué)基礎(chǔ)，同時(shí)也是分子進(jìn)化的動(dòng)力和很多疾病的直接誘因。然而，在哺乳動(dòng)物中，仍然缺乏有效誘導(dǎo)單核苷酸的突變的工具，無法通過實(shí)驗(yàn)高效和高通量的地研究單核苷酸突變的功能?，F(xiàn)有的大部分實(shí)驗(yàn)技術(shù)只能擾亂基因的功能或者表達(dá)，造成基因功能缺失，對(duì)誘導(dǎo)新功能的獲得無能為力。而利用靶向性胞嘧啶脫氨酶介導(dǎo)的堿基編輯（TargetedAID-mediated mutagenesis ,TAM）技術(shù)，可以在sgRNA靶向的基因組DNA上，將胞嘧啶和鳥嘌呤隨機(jī)地向其它三個(gè)堿基轉(zhuǎn)變，因而產(chǎn)生海量的突變體，結(jié)合遺傳篩選，從而分析單核苷酸突變的功能或誘導(dǎo)蛋白質(zhì)的體內(nèi)進(jìn)化。同時(shí)在一種多肽抑制劑（UGI）的輔助下，dCas9-AID可以誘導(dǎo)特定的胞嘧啶向胸腺嘧啶轉(zhuǎn)變，實(shí)現(xiàn)單堿基的精確編輯，為治療單核苷酸突變誘導(dǎo)的遺傳病提供方案。利用這項(xiàng)技術(shù)，已經(jīng)在慢性骨髓瘤細(xì)胞中，成功篩選出已報(bào)道的以及新的imatinib耐藥性位點(diǎn)。因此，作為高效的哺乳動(dòng)物DNA堿基編輯新技術(shù)，TAM可以廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)工程，分子遺傳學(xué)研究和基因治療等領(lǐng)域。

朱潔廣州市婦女兒童醫(yī)療中心CRISPR-Cas9介導(dǎo)的光感受器細(xì)胞重編程治療視網(wǎng)膜色素變性

基因治療已經(jīng)在多種人類疾病治療中顯示出巨大的潛能。然而目前的方法通常只針對(duì)單個(gè)基因或單個(gè)突變，使得對(duì)多基因或多點(diǎn)突變的疾病治療受到極大限制。視網(wǎng)膜色素變性是臨床常見的致盲眼病，極具臨床和遺傳異質(zhì)性，是導(dǎo)致人類視力障礙最主要的疾病之一。目前已有超過40個(gè)基因和位點(diǎn)被報(bào)道與視網(wǎng)膜色素變性有關(guān)。這里我們采用CRISPR/Cas9介導(dǎo)的基因編輯方法，對(duì)視網(wǎng)膜色素變性小鼠進(jìn)行了基因治療。通過突變視桿細(xì)胞中重要的轉(zhuǎn)錄因子Nrl或Nr2e3，將視桿細(xì)胞重編程為視錐細(xì)胞。轉(zhuǎn)化后的視錐樣細(xì)胞對(duì)突變引起的感光細(xì)胞退化不敏感，從而使小鼠在發(fā)病后期仍能保留一定程度的視力。我們的發(fā)現(xiàn)不僅為視網(wǎng)膜色素變性提供了新的不依賴于基因突變的治療方法，而且證明了基因編輯技術(shù)介導(dǎo)的細(xì)胞重編程、細(xì)胞退化預(yù)防以及組織功能保護(hù)的巨大可能性。楊輝，中科院上海神經(jīng)所基因編輯在疾病模型建立及疾病治療中的應(yīng)用

基因修飾動(dòng)物是研究在發(fā)育和疾病中基因功能的重要工具。CRISPR/Cas9系統(tǒng)有效的應(yīng)用于構(gòu)建基因敲除和敲入小鼠。然而，該方法獲得的基因修飾動(dòng)物存在嚴(yán)重的嵌合體現(xiàn)象，即動(dòng)物個(gè)體的一部分細(xì)胞被基因編輯，而另一部分則沒有。通過交配方法獲得純合的基因敲除小鼠需要很長(zhǎng)的時(shí)間和花費(fèi)，這在獲得多基因敲除小鼠中尤為明顯。而由于猴子的生殖周期長(zhǎng)（4-5年性成熟，半年懷孕期），生殖能力低（單胎動(dòng)物），通過交配方法來獲得純合突變的基因修飾猴則需要更長(zhǎng)的時(shí)間和花費(fèi)。為此，我們通過優(yōu)化CRISPR/Cas9系統(tǒng)，成功的在第一代就獲得了單基因或多基因功能完全敲除的小鼠及猴，可以直接用于表型分析，極大促進(jìn)了非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物模型的建立及其在腦科學(xué)及腦疾病中的研究。同時(shí)我們?cè)O(shè)計(jì)了一種同源介導(dǎo)末端接合（HMEJ）策略，可以在分裂和非分裂細(xì)胞中均實(shí)現(xiàn)精確且高效的基因整合。更重要的是，在小鼠和猴子胚胎或者體內(nèi)的肝細(xì)胞和神經(jīng)元中，該方法的效率均遠(yuǎn)高于以HR、NHEJ和MMEJ為基礎(chǔ)的策略。因此，這種HMEJ策略可能具有多種運(yùn)用性，譬如基因編輯來獲得動(dòng)物模型以及靶向基因治療。通過上述幾種方法，我們可以有效的在猴中獲得各種基因修飾猴模型。近期，我們目標(biāo)獲得的疾病猴模型包括PD，AD，ALS，DMD，RP，AS等，工具猴模型包括光遺傳猴，各種神經(jīng)元特異的Cre猴等。這些猴模型的建立將極大促進(jìn)我們對(duì)人類疾病的了解和治愈。

此外，我們也致力于各種CRISPR相關(guān)工具的開發(fā)及優(yōu)化，包括CRISPR激活系統(tǒng)，CRISPR標(biāo)記系統(tǒng)，CRISPR介導(dǎo)的成體治療等等。

馬燕琳

海南醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院基因編輯與生殖健康

基因編輯技術(shù)通過插入、缺失或替換的手段對(duì)基因組進(jìn)行定點(diǎn)改造，既能夠通過以突變基因代替正?；騺硌芯炕虻墓δ?，也能夠以正常基因代替突變基因來進(jìn)行基因治療。近年來，有著“基因剪刀”之稱的CRISPR/Cas9技術(shù)被認(rèn)為是能夠在活細(xì)胞中快速、準(zhǔn)確地編輯目的基因的有效方法。隨著人類在破譯基因的遺傳密碼和基因編輯技術(shù)上的不斷突破，通過修改基因從根本上治愈和預(yù)防疾病成為可能，特別是在單基因疾病的治療上，基因編輯有著廣闊的運(yùn)用前景。就生殖健康方面而言，卵巢早衰這類由表觀遺傳引起的疾病目前只能通過替代治療延緩癥狀，不能根治。CRISPR/Cas9技術(shù)的出現(xiàn)有望對(duì)表觀遺傳的靶點(diǎn)進(jìn)行遺傳編輯，改善生殖健康，也為生殖相關(guān)疾病提供了新的治療思路。此外，利用基因編輯對(duì)胚胎特定基因集進(jìn)行敲除操作，造成相應(yīng)基因在胚胎中的缺失，可深入研究人類胚胎早期發(fā)育中的功能、作用機(jī)理，幫助人類了解生物體的基本功能，也可以推動(dòng)人類健康事業(yè)的發(fā)展,從根源上清除遺傳疾病。張淑君 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)建立和利用豬全基因組基因敲除CRISPR/Cas9技術(shù)篩選鑒定豬流感病毒感染相關(guān)的宿主（豬）基因

在豬PK15細(xì)胞系中，證實(shí)了CRISPR/Cas9系統(tǒng)在豬細(xì)胞系中能高效地誘導(dǎo)豬基因敲除。設(shè)計(jì)和構(gòu)建了豬全基因組基因敲除CRISPR/Cas9文庫(kù)，該文庫(kù)包含了65316個(gè)gRNAs、覆蓋了13229個(gè)基因，其中含有5個(gè)gRNAs的基因有11400個(gè)基因、含有4個(gè)gRNAs的基因有1829個(gè)，并且全部的基因都含有至少2個(gè)gRNAs（最多不超過5個(gè)gRNAs/基因）。利用該豬全基因組基因突變gRNAs文庫(kù)進(jìn)行大規(guī)模的基因篩選，初步篩選出了140個(gè)候選宿主基因，并證實(shí)了其中的32個(gè)候選基因在病毒復(fù)制增殖中具有一定的調(diào)控作用

周峰復(fù)旦大學(xué)生物醫(yī)學(xué)研究院利用dcas9和超高靈敏度蛋白質(zhì)譜平臺(tái)構(gòu)建位點(diǎn)特異DNA-蛋白質(zhì)互作網(wǎng)絡(luò)

隨著功能基因組學(xué)的飛速發(fā)展，對(duì)調(diào)控基因表達(dá)的順式（cis-）和反式(trans-)作用元件進(jìn)行系統(tǒng)研究成為當(dāng)前急需填補(bǔ)的領(lǐng)域空白。利用生物素化的（biotinylated）功能缺失的dcas9系統(tǒng)加上能與我們所感興趣位點(diǎn)能夠形成特定結(jié)合的SgRNA，在原位去分離純化我們感興趣位點(diǎn)DNA以及與這個(gè)位點(diǎn)有特定結(jié)合的蛋白質(zhì)復(fù)合物。我們利用該系統(tǒng)去研究在白血病細(xì)胞系K562中，與血紅蛋白（Hemoglobin）的幾個(gè)亞型HBB、HBG、HBE1、以及與調(diào)控相關(guān)的幾個(gè)重要的增強(qiáng)子HS1、HS2、HS3、HS4和HS5上面所結(jié)合的蛋白質(zhì)復(fù)合物。在該實(shí)驗(yàn)中，我們利用Streptavidin的免疫特異性樹脂球?qū)в蠦iotin基團(tuán)的蛋白質(zhì)復(fù)合物進(jìn)行純化。然后進(jìn)行了iTRAQ的標(biāo)記，最后，樣品由高靈敏度的全蛋白定量平臺(tái)進(jìn)行定量的分析。在該實(shí)驗(yàn)中，我們能夠檢測(cè)到如GATA1，TAL1，NFE2等與血紅蛋白的表達(dá)息息相關(guān)的已知的轉(zhuǎn)錄因子。與此同時(shí)，我們也能發(fā)現(xiàn)新的蛋白質(zhì)核孔蛋白NUP98以及NUP153結(jié)合在hemoglobin基因的位點(diǎn)上面。然后，我們利用該方法研究了跟疾病關(guān)系密切的位點(diǎn)，HBE1到HBD之間的區(qū)域。通過蛋白質(zhì)組學(xué)，我們發(fā)現(xiàn)與HBD-1K相結(jié)合的蛋白質(zhì)的數(shù)量要多于與HBD-1.5K以及HBD-2K的蛋白我們同時(shí)也測(cè)定了與這些位點(diǎn)有相互作用的DNA區(qū)域，我們也同樣發(fā)現(xiàn)與HBD-1K相結(jié)合的DNA的數(shù)量要多于與HBD-1.5K以及HBD-2K的DNA數(shù)量。綜合以上的證據(jù)，HBD-1K是一個(gè)重要的疾病相關(guān)基因，通過CRISPR技術(shù)敲除了HBD-1K之后，我們能夠發(fā)現(xiàn)HBG的基因轉(zhuǎn)錄受到了明顯的影響，而HBB的轉(zhuǎn)錄則大致不變。我們的技術(shù)表明了，我們能對(duì)特定的DNA區(qū)域，即使是對(duì)單拷貝的DNA位點(diǎn)能夠進(jìn)行全面深度的蛋白質(zhì)復(fù)合物的解析。這些解析的結(jié)果能夠幫助我們發(fā)現(xiàn)那些對(duì)特定基因起著重要調(diào)控作用的蛋白質(zhì)，對(duì)研究這些基因的激活與靜默機(jī)制有著至關(guān)重要的作用。

第五篇：臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)驗(yàn)收?qǐng)?bào)告

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法定代表人:實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人:聯(lián)系人:email:

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(二)接受現(xiàn)場(chǎng)技術(shù)驗(yàn)收的實(shí)驗(yàn)室代表姓名及職務(wù):

二.驗(yàn)收依據(jù):衛(wèi)生部下發(fā)文《臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理暫行辦法》和《臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室工作規(guī)范》

三.驗(yàn)收時(shí)間:

四.驗(yàn)收評(píng)審地點(diǎn):

五.技術(shù)驗(yàn)收結(jié)論:

合格,建議授予驗(yàn)收合格證書;

基本合格,尚存在部份缺陷,缺陷為項(xiàng),限期改進(jìn),改進(jìn)后授予驗(yàn)收合格證書;

不合格,停止驗(yàn)收,實(shí)驗(yàn)室改進(jìn)后需重新申請(qǐng).(一)驗(yàn)收中發(fā)現(xiàn)的問題及意見:

附件1:臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)驗(yàn)收表;

附件2:臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)驗(yàn)收意見匯總表;

附件3:整改要求.(二)需要說明的其它問題:□如果有的話見附件4;□無.(三)驗(yàn)收評(píng)審員姓名及簽名:

主評(píng)審員姓名:簽名:

評(píng)審員姓名:簽名:

簽名:

簽名:

協(xié)調(diào)員姓名:簽名:

簽字時(shí)間:

(四)簽字地點(diǎn):

驗(yàn)收評(píng)審組意見:

附件1臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)驗(yàn)收表

序號(hào)

驗(yàn)收內(nèi)容

驗(yàn)收意見

符合基但本有

符缺

合陷

不符合缺此項(xiàng)

暫不需考核

評(píng)論與說明

實(shí)驗(yàn)室設(shè)置和設(shè)備

1.1

實(shí)驗(yàn)室的規(guī)范化分區(qū):原則上應(yīng)分為四個(gè)區(qū),但如使用全自動(dòng)擴(kuò)增檢測(cè)儀,區(qū)域可適當(dāng)合并

1.2

各工作區(qū)的明確標(biāo)記

1.3

實(shí)驗(yàn)室應(yīng)配備開展臨床基因擴(kuò)增檢測(cè)所需的所有儀器設(shè)備(包括質(zhì)控物).保證《臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理辦法》和《臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室工作規(guī)范》的有關(guān)要求得到滿足.1.4

試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)

冰箱;

混勻器;

微量加樣器;

可移動(dòng)紫外燈;

專用工作服和工作鞋;

消耗品(帶濾心吸頭,一次性手套等);

專用實(shí)驗(yàn)記錄本,記號(hào)筆等.1.5

標(biāo)本制備區(qū)

(a)冰箱(2~8℃和-20℃或-80℃);

高速臺(tái)式冷凍離心機(jī)

(c)水浴箱和/或加熱模塊

(d)超凈工作臺(tái)或防污染罩

混勻器;

注:請(qǐng)?jiān)隍?yàn)收所選項(xiàng)打“

臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)驗(yàn)收表

序號(hào)

驗(yàn)收內(nèi)容

驗(yàn)收意見

符合基但本有

符缺

合陷

不符合缺此項(xiàng)

暫不需考核

評(píng)論與說明

微量加樣器;

可移動(dòng)紫外燈;

專用工作服和工作鞋;

消耗品(帶濾心吸頭,一次性手套等);

專用實(shí)驗(yàn)記錄本,記號(hào)筆等.1.6

擴(kuò)增區(qū)

(a)核酸擴(kuò)增儀;

微量加樣器;

可移動(dòng)紫外燈;

專用工作服和工作鞋;

消耗品(帶濾心吸頭,一次性手套等);

專用實(shí)驗(yàn)記錄本,記號(hào)筆等.1.7

擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)

微量加樣器;

可移動(dòng)紫外燈;

專用工作服和工作鞋;

消耗品(帶濾心吸頭,一次性手套等);

專用實(shí)驗(yàn)記錄本,記號(hào)筆等.2.設(shè)施和環(huán)境

2.1

實(shí)驗(yàn)室的設(shè)施,工作區(qū)域,能源,照明,采暖,通風(fēng)等

應(yīng)便于檢測(cè)工作的正常進(jìn)行.2.2

實(shí)驗(yàn)室應(yīng)配備溫度濕度計(jì),穩(wěn)壓電源等.2.3

進(jìn)入和使用實(shí)驗(yàn)室各區(qū)域應(yīng)有明確的限制和控制.注:請(qǐng)?jiān)隍?yàn)收所選項(xiàng)打”“.臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)驗(yàn)收表

序號(hào)

驗(yàn)收內(nèi)容

驗(yàn)收意見

符合基但本有

符缺

合陷

不符合缺此項(xiàng)

暫不需考核

評(píng)論與說明

2.4

應(yīng)有實(shí)驗(yàn)室”內(nèi)務(wù)管理"(如人員流動(dòng),清潔等)制度;

2.5

實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有關(guān)化學(xué)試劑管理,廢棄血清處理,生物防護(hù)等的措施

3.人員

3.1

實(shí)驗(yàn)室應(yīng)配備足夠數(shù)量的人員;這些人員必須經(jīng)過培訓(xùn),并取得上崗證.3.2

實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有培訓(xùn)計(jì)劃和措施,保證其技術(shù)人員得到及時(shí)培訓(xùn).3.3

實(shí)驗(yàn)室應(yīng)保存其技術(shù)人員有關(guān)資格證書(如上崗證),培訓(xùn),技能和經(jīng)歷,發(fā)表論文,科研成果等技術(shù)業(yè)績(jī)檔案.4.設(shè)備管理和質(zhì)控物

4.1

所有設(shè)備應(yīng)有維護(hù)程序文件;

*

如