第一篇：超凈實驗室 實 驗 報 告

實 驗 報 告

（2011 / 2012 學(xué)年 第 二 學(xué)期）

課程名稱 實驗名稱 實驗時間 指導(dǎo)單位

《超凈工作實習(xí)》 超凈工作實習(xí)

2011/2012學(xué)年第二學(xué)期（9-10周）

材料科學(xué)與工程學(xué)院

指導(dǎo)教師

王義成

學(xué)生姓名 學(xué)院(系)

戴祥祥 班級學(xué)號 B09070532 材料物理 材料科學(xué)與工程學(xué)院 專 業(yè)

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超凈實驗室簡介

一．超凈實驗室的定義

在國際標(biāo)準(zhǔn)化組織ISO中超凈實驗室被定義為：

一個空氣中的微粒濃度被控制、被建設(shè)用于減少房間內(nèi)微粒的引進、產(chǎn)生和滯留，且其他有關(guān)參數(shù)如溫度、濕度、壓力必要時也被控制的實驗室。

二．超凈實驗室的用途

工業(yè)

產(chǎn)品

電子工業(yè)

電腦，平面顯示屏

半導(dǎo)體

用于計算機存儲器和控制器的集成電路

光學(xué)器件

柔性焦距透鏡組，激光設(shè)備

生物技術(shù)

抗生素的生產(chǎn)，遺傳工程

制藥業(yè)

無菌藥品，無菌一次性用品

醫(yī)療設(shè)備

心臟瓣膜，心臟旁路系統(tǒng)

食物和飲料

啤酒的生產(chǎn)

從上面的表格中可以看出，超凈實驗室的應(yīng)用可以大致分為兩類： 三．超凈實驗室的發(fā)展史

早期（只在醫(yī)院里有超凈室，很少有通風(fēng)

設(shè)備）——>具備通風(fēng)設(shè)備的用于手術(shù)的超凈室——>早期的供工業(yè)用的超凈室——>均勻流型超凈室

超凈實驗室的設(shè)計標(biāo)準(zhǔn)

一．設(shè)計超凈實驗室的三個經(jīng)典條件

1、當(dāng)建立了超凈實驗室并安裝好各個儀器;

2、當(dāng)所有設(shè)備安裝好并能夠運行而且不受人為因素的干擾

3、當(dāng)超凈實驗室可操控并設(shè)備能夠運行，人員在工作。

二．設(shè)計方針

? 晶片生產(chǎn)設(shè)備的建造和運轉(zhuǎn)費用非常高，兩年內(nèi)就可以被取代，壽命最多就五年。所以頭兩年必須產(chǎn)生足夠的利潤去抵消建造和運轉(zhuǎn)成本，否則成功的概率非常小，所以必須堅定地控制建造和運轉(zhuǎn)費用。

ISO超凈實驗室設(shè)計標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用于一般潔凈室設(shè)施，它之所以有價值,是因為它不是特定工藝標(biāo)準(zhǔn),各種優(yōu)質(zhì)的地方使用。

? 空中懸浮微粒的清潔程度分類； ? 生物污染

? 計量及測試方法 ? 設(shè)計、施工和啟動 ? 超凈實驗室運行

第 1 頁 ? 條件,定義和單位 ? 增強清潔設(shè)備 ? 分子污染

三．布局

圖3.1的超凈室設(shè)計已經(jīng)流行數(shù)年

a.舞廳式b.管槽式c.微環(huán)境室

a.舞廳式b.管槽式c.微環(huán)境室

第 2 頁 四．空氣循環(huán)系統(tǒng)

圖3.8是典型的空氣流動系統(tǒng)，它用來實現(xiàn)對穿過地板高效空氣過濾器的空氣的再循環(huán)。

典型的再循環(huán)空氣移動系統(tǒng)有如下特征和要求

? 風(fēng)扇類型（發(fā)動機在空氣流緩?fù)獠浚?/p>

? 風(fēng)扇的結(jié)構(gòu)放在具有分離基本設(shè)備的薄片制造區(qū)域外圍； ? 發(fā)動機和風(fēng)扇要遠離薄片制造區(qū)域； ? 由于空氣通道打，這要求消聲處理設(shè)計 ? 冷線圈要在風(fēng)扇的逆方向。五．監(jiān)控和報警系統(tǒng)

? 監(jiān)控和警報系統(tǒng)在晶片的生產(chǎn)中擁有很高的優(yōu)先級，所以其設(shè)計也是相當(dāng)重要。設(shè)計者要考慮一下幾點：

1.液體，工業(yè)氣體，環(huán)境氣體的純凈度和實際條件 2.人員安全、車間和工藝設(shè)備 3.產(chǎn)品產(chǎn)量和質(zhì)量

4.對于廢水毒性或聲譽的社區(qū)關(guān)系 5.政府機構(gòu)要求的控制、計量和報告

6.設(shè)施和公用工程系統(tǒng)的工作特性的條件和安全。

空氣凈化

一．高效空氣過濾

?

供應(yīng)到潔凈室里面的空氣必須先進行過濾，這是為了確保去除空氣中的顆粒和微生物，以防止它們妨害在潔凈室里面的實驗。

第 3 頁 ?

直到二十世紀八十年代初，當(dāng)時潔凈室里面最高效的空氣過濾器是HEPA過濾器，亦稱高效空氣凈化器，它對空氣中直徑0.3微米的微?？梢杂兄辽?9.97%的過濾效率。現(xiàn)今，仍然有許多潔凈室在使用HEPA。

二、高效過濾器的結(jié)構(gòu)

? 高效過濾器一般有兩種結(jié)構(gòu)，深褶式過濾器和迷你褶式過濾器。

? 深褶式過濾器具有比較傳統(tǒng)的過濾器結(jié)構(gòu)：在其中，濾紙像折扇一樣并排折疊起來，每個折疊的部分相距15cm到30cm之間（6-12英寸）。? 結(jié)構(gòu)如右圖：

過濾介質(zhì)

放置鋁箔隔離板?

為了確?？諝馔ㄟ^過濾紙以及加強過濾器強度，在過濾紙之間會放置皺褶的鋁箔作為隔離板（前頁紅箭頭）。之后隔離板與濾紙結(jié)合的過濾裝置就會用密封劑粘合到塑料、木材或者是金屬的外框中，過濾器的整體如圖：

外框

密封膠

密封襯墊

? 迷你褶式過濾器大都用在單向流潔凈室。因為其更大的過濾面積所產(chǎn)生的壓降低于深褶式過濾器。

? 因為一個過濾器兩端的壓降取決于空氣通過過濾介質(zhì)的流速以及過濾介質(zhì)的結(jié)構(gòu)。通過過濾器的空氣流速通常認為是0.5米/秒。在這個速度下，壓降通常介于120帕到170帕之間。當(dāng)壓降達到原來氣壓的2.5到3倍，過濾器通常是無法承受的。更大的過濾面積產(chǎn)生的壓降比較低，故迷你褶式過濾器能使用于單向氣流潔凈室中。?

三．去除微粒的機理

第 4 頁 ?

? ? 設(shè)計出來的高效空氣過濾器要求能夠去除2μm甚至更小的微粒。高效空氣過濾器的過濾介質(zhì)是由玻璃纖維制造而成，玻璃纖維的直徑要求在0.1μm到10μm之間。玻璃纖維之間的空間往往要大于要捕獲的微粒。ULPA過濾器中使用的精細的玻璃纖維比例比HEPA過濾器的要高。

這些纖維隨機地縱橫交錯于整個過濾介質(zhì)的深層，纖維之間孔徑空隙的大小也是隨機而不可控的。

這些玻璃纖維10μm級的微觀圖像如下圖所示：

當(dāng)空氣中的微粒通過濾材時，它們碰上玻璃纖維或者其他已經(jīng)粘附在纖維上得微粒。一個微粒與纖維之間或者與被纖維捕獲的微粒之間會產(chǎn)生一個比較強的作用力，如范德華力，從而實現(xiàn)濾材對微粒的捕獲。

去除微粒的原理大概有三種：擴散捕捉原理、沖突原理和攔截原理。值得一提的是，濾過（篩選）原理發(fā)生在微粒直徑大于纖維間距時，這里不予考慮。并且靜電效應(yīng)在高效空氣過濾之中的影響不是很大，也不予討論。

四、高效過濾器的檢測

? 高效過濾器生產(chǎn)出來后需要用測試微粒對其過濾效率進行測試。測試的方法有許多，比較出名的有如下：

? DOP法：源于美國，相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)為美國軍用標(biāo)準(zhǔn)MIL-STD-282。利用加熱生成的0.3μm單分散相DOP油霧對高效過濾器的0.3μm微粒的過濾效率進行測試?，F(xiàn)在已經(jīng)用DOS和PAO的替代DOP（因為其中含有苯環(huán)，可能對人有害）。

? 鈉焰法：源于英國，標(biāo)準(zhǔn):歐洲Eurovent4/4.試驗塵源為單分散相氯化鈉鹽霧。鹽水在壓縮空氣的攪動下飛濺，經(jīng)過干燥形成微小鹽霧進入風(fēng)道。含鹽霧氣使氫氣火焰的顏色變藍、亮度增加。以火焰亮度可判斷鹽霧濃度，從而確定過濾器對鹽霧的過濾效率。鹽霧粒徑0.6μm左右。

? 粒子計數(shù)法/IEST-RPCC007:環(huán)境科學(xué)與技術(shù)研究所學(xué)會開發(fā)的一種用于測試ULPA過濾器的推薦方法。利用光粒子計數(shù)器測量粒子，通過選擇不同的氣溶膠材料可得到粒徑范圍在0.07到3.0不等的測試塵源。?

建造材料的選擇

第 5 頁 一．整體設(shè)計

1．保證實驗室整體美觀；

2．選用材料要求為無機材料，防酸、堿；

3．符合潔凈室設(shè)計的要求；

4．防靜電，不積塵；

5．堅固耐用便于安裝和維護。

二．建造材料的一般物理要求

? 超凈實驗室建設(shè)使用的材料，要嚴禁氣孔或粗糙面，以防止泄露的漏洞造成分散的懸浮顆粒留下污染。表面應(yīng)無壁架并且能夠輕松去除無任何污染沉積。微生物引起的污染，將需要消毒。消毒劑要溶于水中并且正確消毒要與材料接觸幾分鐘，如果建筑材料不合格，水滲透可能發(fā)生。因此，以確保水不會發(fā)生滲透，因為這可能導(dǎo)致微生物的生長。

三，建筑材料的化學(xué)性質(zhì)

要保證建造材料的穩(wěn)定性，確保其耐用，具有很強的化學(xué)惰性，不被化學(xué)制劑腐蝕無塵表面，尤其是地板，應(yīng)能承受在超凈實驗室使用的液體。一些實驗使用強酸或溶劑將破壞表面。超凈實驗室不能發(fā)生這種狀況。

四．室內(nèi)裝修材料材質(zhì)要求

1．維護結(jié)構(gòu)材料 采用彩鋼夾芯板制作 2．地面材料： 基層：水泥自流坪。

表層：靜電免維護的PVC地板

（顏色可選擇）3．門、窗材料： 采用鋁合金型材制作。

五．室內(nèi)工藝設(shè)備材質(zhì)要求

1．化學(xué)安全柜材料： 外層：采用冷扎鋼板噴塑制作。內(nèi)壁：采用PVC板制作。上下推拉窗：采用5mm的鋼化玻璃，表面進行防腐處理。

2．儀器臺、水盆臺、邊實驗臺臺面： 采用實芯理化板，厚度12.7mm。

3．邊實驗、樣品柜、試劑柜、水盆柜等柜體材料： 采用中密度板板式結(jié)構(gòu)，金屬件連接，但連接件外表加裝塑料扣件達到防腐作用，注：試劑柜帶通風(fēng)。超凈臺的下柜帶排風(fēng)。4．柜拉手材料：采用全塑拉手

5．電器插座： 采用防水插座、防水開關(guān)，防止腐蝕性液體濺入內(nèi)部，腐蝕內(nèi)部金屬件。

6．超凈工作臺內(nèi)部的高效過濾器： 采用玻璃纖維濾紙的無隔板過濾器。

7．水盆及水龍頭： 水盆為pp材料，水龍頭要防腐。

六．實驗室排風(fēng)系統(tǒng)的要求

1．送風(fēng)管道： 采用鍍鋅鋼板，厚度0.5～1.0mm。

2．排風(fēng)管道 采用PVC或玻璃鋼材料，厚度4~8mm。

3．高效過濾器 采用塑料隔板，玻璃纖維濾紙的高效過濾器。

4．送風(fēng)口 采用鋁合金制作的風(fēng)口。

5．回風(fēng)口 鋁合金材料雙層可調(diào)風(fēng)口。

6．排風(fēng)機 采用PVC或玻璃鋼防腐風(fēng)機。

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超純水的制備及循環(huán)系統(tǒng)一． 超純水的定義和應(yīng)用

? 超純水：既將水中的導(dǎo)電介質(zhì)幾乎完全去除，又將水中不離解的膠體物質(zhì)、氣體及有機物均去除至很低程度的水。電阻率大于18MΩ*cm，或接近18.3MΩ*cm極限值。在25℃時超純水的電阻率為 18.3(兆歐·厘米)，一般約為15～18（兆歐·厘米）。

? 集成電路工業(yè)中用于半導(dǎo)體原材料和所用器皿的清洗、光刻掩模版的制備和硅片氧化用的水汽源等。此外，其他固態(tài)電子器件、厚膜和薄膜電路、印刷電路、真空管等的制作也都要使用超純水。

二． 出去鹽溶液中的水

1、蒸餾法（在理想條件下）按蒸餾器皿可分為玻璃、石英蒸餾器，金屬材質(zhì)的有銅、不銹鋼和白金蒸餾器等。按蒸餾次數(shù)可分為一次、二次和多次蒸餾法。此外，為了去掉一些特出的雜質(zhì)，還需采取一些特殊的措施。例如預(yù)先加入一些高錳酸鉀可除去易氧化物；加入少許磷酸可除去三價鐵；加入少許不揮發(fā)酸可制取無氨水等。蒸餾水可以滿足普通分析實驗室的用水要求。

2、冷卻結(jié)晶法，用物理方法洗

3、水合作用法：固體水合物的形成除洗后可以分解產(chǎn)生純凈水

4、反滲透法：是滲透現(xiàn)象的逆過程,在濃溶液上加壓力,使溶劑從濃溶液一側(cè)通過半透膜向稀溶液一側(cè)反向滲透，脫鹽可達98%，并能除去99%的細菌顆粒和溶解在水中的有機物。常用的反滲透膜有：醋酸纖維素膜，聚酰胺膜和聚砜膜等。膜的孔徑為0.0001-0.001μm.反滲透的動力依賴于壓力差（10-100大氣壓）。去除雜質(zhì)的能力由膜的性能好壞和進出水比例決定。

三．脫鹽包括電滲析、反滲透和離子交換

? 電滲析，通過一個直流電流通過一個溶液將使正電荷的離子和帶負電荷的離子以相反的方向遷移。如果有放置在水膜對，其中（一個陽離子滲透膜）有選擇性地允許通過陽離子和其他（一anion-permeable膜）可以選擇性運輸陰離子，之間的水膜可以成為淡化。

? 反滲透:是滲透的反過程，施加的壓力超過溶液的滲透壓，迫使純凈水分子通過適當(dāng)?shù)陌胪改ぃ擕}可達98%，并能除去99%的細菌顆粒和溶解在水中的有機物。? 反滲透有螺旋纏繞系統(tǒng)和中空纖維系統(tǒng)這兩種系統(tǒng)。

四．顆粒物的去除

? 在離子交換之前需注意顆粒物的去除。顆粒物是指直徑大小在0.005至30微米之間的顆粒，它們極可能稱為堵住滲透膜孔的污垢，因此，十分有必要去除。

? 主要去除手段是過濾，微濾以及超濾，它們所清除的顆粒大小不同。

? 過濾去除的是直徑在10至30微米的顆粒?？杉尤朊鞯\作為混凝劑。

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? 微濾去除的是直徑在0.1至40微米的顆粒。

? 超濾可以去除細菌般大小的微粒，可至0.005微米。五．有機物的去除

對于純度要求極高的超純水來說，有機物含量絕對需要達到一個極低值。有機物的去除方法多種多樣，主要有：

? 納濾反滲透

? 離子交換

? 活性碳過濾

? 其他方法

值得一提的是一般情況下我們不依賴單一的方法去除有機物，而是多種方法同時進行。

六．離子交換

? 離子交換就是用一種等量的離子代替另一種離子的過程。離子交換主要分為陽離子交換和陰離子交換兩種。

? 離子交換的表述可由以下方程式表示：

陽離子交換（Cation exchange）(H+)R + M+ =(M+)R + H+

陰離子交換（Anion exchange）((OH)-)R + X-=4(X-)R +(OH)

? 需要注意的是：離子交換是可選擇性的加入某些離子以及出去某些離子。需要避免引入不必要的雜質(zhì)。

七．精處理

1、紫外線殺菌

生物體的核酸吸收紫外線光的能量而改變核酸自身結(jié)構(gòu),破壞核酸功能而使細菌死亡。殺菌最強的光譜波長為2600埃。

2、終端膜過濾

3、超濾

水在壓力下流過一個卷式或中空纖維膜棒。膜孔徑在10～200埃范圍內(nèi),薄膜厚度為0.1～0.5微米,附在一個中孔的纖維棒內(nèi)壁上，超濾能除去細菌和0.05微米的粒子

超凈實驗室的使用規(guī)范

第 8 頁 一． 人員可能帶來的污染 人們在行走時，每分鐘約能產(chǎn)生1000000顆粒子和數(shù)千個微生物顆粒，超凈實驗室里的人越多，分散在里面的污染也就越大，因此要確保只有必要人員才能進入潔凈室，許多污染問題都是因為認識不足造成的。

二． 進入實驗室的一些條件

? 進入潔凈室的人不應(yīng)該分散顯著，下面給出的例子在可能會導(dǎo)致更多的污染。以下的建議，包含標(biāo)準(zhǔn)，可以歧視一些工作人員。

? 應(yīng)確保任何歧視既不是非法的或有失公平。名單中還包含一些臨時條件。

如：皮膚皮膚細胞的異常大量分散的條件下，如皮炎，曬傷或壞頭皮屑。呼吸系統(tǒng)疾病，如感冒引起的咳嗽或打噴嚏，流感或慢性肺部疾病。

在一個biocleanroom，它可能是微生物成長的條件，并導(dǎo)致變質(zhì)或疾病。他們在潔凈室工作的適用性應(yīng)該就具體產(chǎn)品的易感性考慮各類微生物的生長。人與過敏性條件，引起打噴嚏，發(fā)癢，刮傷，或流鼻水，可能不適合在潔凈室就業(yè)?；ǚ郯Y患者有可能在潔凈室中找到救濟，因為空氣過濾系統(tǒng)會過濾掉過敏原負責(zé)。有些人可能會過敏，在潔凈室中使用的材料，如（a）由聚酯制成的服裝，（B）塑料或乳膠手套，（C）化學(xué)物質(zhì)，如酸，溶劑，清洗劑

（四）在房間里的產(chǎn)品制造，如抗生素 和激素。

三． 實驗室潔凈標(biāo)準(zhǔn)

人員來回緩沖區(qū)必須更換服裝，門不可懸空并且門一般開向內(nèi)進入生產(chǎn)車間 使用無接觸技術(shù)，比如長鉗 口罩需戴到鼻子上部 物品要保持經(jīng)常消毒

四．超凈實驗室人員出入標(biāo)準(zhǔn)

? 進入前更換為無塵服裝及鞋子污染的預(yù)防，? 無塵服裝存放方法

? 化妝品，發(fā)膠，指甲油應(yīng)在進入之前清除

人員進入要完全籠罩，工作服，頭罩，口罩，及膝靴子和手套。

五． 退出實驗室規(guī)范

退出時所有一次性裝備廢棄（在無菌制藥潔凈室完全廢棄）廢棄的物品集中放置處理

如工作服重復(fù)使用，不使用時工作服通常掛在單向流柜

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第二篇：超凈工作臺的使用

超凈工作臺的使用

1.超凈工作臺工作原理

（1）超凈工作臺內(nèi)配備紫外殺菌燈管，用于殺滅微生物。

（2）超凈工作臺內(nèi)變速離心機可將經(jīng)過高效過濾器過濾的空氣以水平或者垂直的單向氣流吹出，并能以一定的均勻斷面風(fēng)速吹過工作區(qū)，帶走塵埃顆粒和微生物顆粒，形成無塵、無菌的工作環(huán)境

2.超凈工作臺操作方法

（1）接通電源。將電源插入插座，并打開整個超凈工作臺的總開關(guān)后，可以看到按鈕面板個電源指示燈亮，表示電源處于接通狀態(tài)。（通常，實驗室的超凈工作臺總電源開關(guān)一直是處于打開狀態(tài)）。

（2）清理臺面，拉下防塵玻璃擋板，紫外殺菌。若超凈工作臺內(nèi)堆放有與本實驗無關(guān)的物品，可先移出，用酒精棉球清潔臺面后可預(yù)先放入實驗相關(guān)的且能以紫外照射的材料進行紫外滅菌。拉下工作臺前面的玻璃擋板，并關(guān)嚴。找到按鍵板，按下標(biāo)有“殺菌”字樣的按鈕即可開啟紫外燈管（再次按下該按鈕則會閉紫外燈）進行殺菌，一般照射30min即可。

【注意】可將操作臺面大致分為廢物回收區(qū)、物品放置區(qū)和操作區(qū)。操作區(qū)內(nèi)盡量不要堆放物品；不要在殺菌的同時開啟風(fēng)機。

（3）開啟風(fēng)機和照明系統(tǒng)，開始實驗。紫外殺菌結(jié)束前應(yīng)先開啟風(fēng)機，再關(guān)閉紫外燈，最后掀起玻璃擋板開始實驗。按鈕板面上面標(biāo)記“開啟/停止”字樣的按鈕是風(fēng)機的開啟和關(guān)閉的按鈕。正常情況下，風(fēng)機的最低檔在出廠時候已經(jīng)滿足風(fēng)速要求。使用時可多次按下“風(fēng)量調(diào)節(jié)”按鈕選擇需要的風(fēng)速大小。按動風(fēng)量調(diào)節(jié)按鈕后，風(fēng)速的變化為：“低→高→低”的不斷循環(huán)，并且有相應(yīng)的燈指示風(fēng)量狀態(tài)。標(biāo)有“照明”字樣的按鈕是超凈工作臺內(nèi)照明燈的開關(guān)，可根據(jù)需要開啟。

【注意】①試驗操作時候盡量避免快速且大幅度移動，以減少對超凈工作臺內(nèi)氣流的擾亂，避免外界細菌進入。②有的超凈臺同時具有正壓和負壓系統(tǒng)，一般情況下使用正壓系統(tǒng)；當(dāng)試驗的試劑可能有氣體逸出，對人員造成刺激性傷害時候，可使用負壓風(fēng)道系統(tǒng)，使所有的氣體只在超凈臺內(nèi)部循環(huán)。

（4）結(jié)束試驗，清理臺面，關(guān)閉風(fēng)機，拉下防塵玻璃擋板。試驗后，清理臺面廢棄物后，用酒精棉球擦拭臺面。關(guān)閉風(fēng)機后拉下防塵玻璃擋板。若下面還有試驗，可打開紫外燈，為接下來再次使用做好準(zhǔn)備。

3.超凈工作臺的維護

（1）根據(jù)環(huán)境潔凈度，定期更換濾布；定期對超凈臺內(nèi)外進行清潔。

（2）照明燈和紫外燈達到使用壽命后更換相同規(guī)格燈管。

第三篇：超凈工作臺清潔驗證方案

超凈工作臺的清潔

驗

證

方

案

目錄

一、概述

二、驗證目的三、驗證范圍

四、驗證人員

五、驗證內(nèi)容驗證條件可接受標(biāo)準(zhǔn)清潔過程取樣及樣品處理偏差分析及處理

六、驗證結(jié)論及評價

七、再驗證周期

八、驗證進度計劃

一、概述

超凈工作臺是用于疫苗檢驗的重要設(shè)備，工作區(qū)的潔凈度設(shè)備性能起決定性作用，對設(shè)備進行徹底地清潔，保證設(shè)備的清潔衛(wèi)生關(guān)系到疫苗的產(chǎn)量和質(zhì)量。故需對超凈工作臺的清洗效果進行驗證，確認清洗后設(shè)備的清潔狀況滿足預(yù)定要求。清潔驗證共需進行3次，方可證明清潔規(guī)程能持續(xù)穩(wěn)定達到要求。

二、驗證目的驗證本公司的超凈工作臺按清潔規(guī)程進行清潔后的清潔效果能達到預(yù)定要求，符合制品生產(chǎn)的要求。

三、驗證范圍

本驗證方案主要適用于超凈工作臺的清潔驗證。

四、驗證人員

五、驗證內(nèi)容驗證條件

1.1 設(shè)備應(yīng)為完好設(shè)備。

1.2 人員：包括設(shè)備管理部門、使用部門、QA人員、QC人員及具體崗位操作人員。

1.2.1 在崗人員均經(jīng)過GMP知識、藥品管理法及其實施細則、生物制品管理辦法、產(chǎn)品質(zhì)量法等法律法規(guī)的培訓(xùn)。

1.2.2 在崗人員均為經(jīng)過崗位SOP、崗位安全操作法、工藝規(guī)程、衛(wèi)生清潔規(guī)程等崗位專業(yè)知識培訓(xùn)，并持有上崗證的熟練工人。

1.3 清潔劑條件： 中性或弱堿性，對設(shè)備無腐蝕；不含4A沸石等不溶性助劑，洗滌后無不溶性殘留；對制品、人體無毒害?？山邮軜?biāo)準(zhǔn)

2.1目檢法：設(shè)備表面應(yīng)無可見的殘留物，并無殘留物的氣味。

2.2濁度檢查：取最終淋洗水50ml與純化水50ml比色，目測應(yīng)無可視差異。

2.3 塵埃粒子限度：塵埃粒子數(shù)應(yīng)符合相應(yīng)級別要求。（見下表）

潔凈度級別塵粒最大允許數(shù)/立方米

≥0.5μm≥5μm

100級35000

2.4 微生物限度：沉降菌指標(biāo)應(yīng)符合相關(guān)規(guī)定。（見下表）

潔凈度級別微生物最大允許數(shù)

沉降菌/皿.0.5h

100級0.53 清潔過程

3.1 清潔操作：按《超凈工作臺清潔規(guī)程》對設(shè)備進行清潔至目測合格。

3.2 清潔劑：飲用水、純化水。取樣及樣品處理

4.1目檢法：目視檢查設(shè)備內(nèi)外表面，目視檢查合格后方可進行取樣檢查。

4.2 濁度檢查

4.2.1取樣工具：廣口瓶。

4.2.2取樣步驟

4.2.2.1用廣口瓶接取樣點之水，沖洗瓶內(nèi)2次，裝取300ml，密封。

4.2.2.2取樣結(jié)束及時貼上標(biāo)簽，標(biāo)明取樣日期、樣品編號、樣品名稱送檢。

4.4 塵埃粒子測定

4.1.1取樣部位：超凈工作臺室內(nèi)各采樣點。

4.1.2 取樣器具：塵埃粒子計數(shù)器

4.1.3 取樣步驟：待超凈工作臺正常運行30分鐘，在其室內(nèi)各采樣點進行測試。按照塵埃粒子計數(shù)器標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程測量≥0.5μm、≥5μm粒子濃度，總采樣次數(shù)不得少于5次。

4.2沉降菌測定

4.2.1取樣部位：超凈工作臺室內(nèi)各采樣點。

4.2.2 取樣器具：Φ90mm玻璃平皿

4.2.3 取樣步驟：在超凈工作臺正常運行30分鐘，用￠90mm玻璃培養(yǎng)皿和營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，在采樣點放置，打開平皿蓋，使培養(yǎng)基表面暴露30分鐘后，將平皿蓋蓋上并做空白對照，然后在30-35℃條件下培養(yǎng)48小時后計數(shù)。采樣點的位置可以同懸浮粒子測試點。

4.2.4 取樣結(jié)束及時貼上標(biāo)簽，標(biāo)明取樣日期、樣品編號、樣品名稱送檢。

4.5 樣品檢查

4.5.1取最終洗滌水50ml與純化水50ml進行目視比色，應(yīng)無可視差異。

4.5.2取最終洗滌水按《中國藥典》微生物限度檢查法檢查10個培養(yǎng)皿，結(jié)果應(yīng)符合規(guī)定。偏差分析及處理

按照驗證方案對超凈工作臺進行清潔效果確認，在確認的過程中若出現(xiàn)不符合標(biāo)準(zhǔn)的情況（偏差），應(yīng)進行分析，找出原因，進行糾正改進直至達到要求。

六、驗證結(jié)論及評價

由驗證小組匯總各項驗證確認結(jié)果，進行驗證過程的整理并寫出驗證報告，由質(zhì)量管理部根據(jù)結(jié)論填發(fā)驗證證書。

七、再驗證周期

根據(jù)驗證報告結(jié)果確定再驗證周期。

八、驗證進度計劃

在年月日到年月日組織驗證小組對超凈工作臺進行清潔驗證。

第四篇：省級CDC實驗室開展實驗報告

省級CDC實驗室開展工作報告

為了更好的迎合本單位工作的開展，為了更好的建設(shè)本單位實驗室的各個項目，根據(jù)上級領(lǐng)導(dǎo)指示，筆者在網(wǎng)上收集全國各省級CDC所開展的實驗室工作項目，并匯報如下。

1急慢性傳染病控制科

急性傳染病科主要開展的實驗工作有：食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗 菌落總數(shù)測定；食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗 大腸菌群測定；食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗 沙門氏菌檢驗；食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗 志賀氏菌檢驗；食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗 致瀉大腸埃希氏菌檢驗；食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗 副溶血性弧菌檢驗；食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌檢驗；食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗 空腸彎曲菌檢驗； 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗 金黃色葡萄球菌檢驗；食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗 溶血性鏈球菌檢驗； 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗 肉毒梭菌及肉毒毒素檢驗；食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗 產(chǎn)氣莢膜梭菌檢驗；食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗 蠟樣芽胞桿菌檢驗； 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗 霉菌和酵母計數(shù)； 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗 常見產(chǎn)毒霉菌的鑒定。

2營養(yǎng)與食源性疾病防治科

營養(yǎng)與食源性疾病防治科主要開展的工作有：食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗 肉與肉制品檢驗；食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗 乳與乳制品檢驗； 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗 蛋與蛋制品檢驗；食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗 水產(chǎn)食品檢驗；食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗 冷凍飲品、飲料檢驗；食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗 調(diào)味品檢驗； 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗 冷食菜、豆制品檢驗； 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗 糖果、糕點、蜜餞檢驗；食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗 酒類檢驗； 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗 罐頭食品商業(yè)無菌的檢驗；食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗 鮮乳中抗生素殘留量檢驗；食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗 染色法、培養(yǎng)基和試劑； 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗 椰毒假單胞菌酵米面亞種檢驗； 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗 單核細胞增生李斯特氏菌檢驗；食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗 糧谷、果蔬類食品檢驗；食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗 雙歧桿菌檢驗；食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗 乳酸菌飲料中乳酸菌檢驗；食品的相對密度的測定；食品中水分的測定；食品中灰分的測定；食品中蛋白質(zhì)的測定； 食品中脂肪的測定；食品中還原糖的測定；食品中蔗糖的測定；食品中淀粉的測定； 植物類食品中粗纖維的測定；食品中總砷及無機砷的測定；食品中鉛的測定；食品中銅的測定；食品中鋅的測定；食品中鎘的測定；食品中錫的測定；食品中總汞及有機汞的測定；食品中氟的測定；食品中六六

六、滴滴涕殘留量的測定； 食品中有機磷農(nóng)藥殘留量的測定；糧、油、菜中甲萘威殘留量的測定；食品中黃曲霉毒素B1的測定；食品中黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2的測定；食品中黃曲霉毒素M1與B1的測定；植物性食品中雜色曲霉素的測定；食品中N-亞硝胺類的測定；食品中苯并（a）芘的測定；食品中糖精鈉的測定；食品中山梨酸、苯甲酸的測定；食品中叔丁基羥基茴香醚（BHA）與2，6-二叔丁基對甲酚（BHT）的測定； 食品中對羥基苯甲酸酯類的測定；油脂中沒食子酸丙酯（PG）的測定； 食品中亞硝酸鹽與硝酸鹽的測定； 食品中亞硫酸鹽的測定；食品中合成著色劑的測定； 糧食中二溴乙烷殘留量的測定；食品添加劑中重金屬限量試驗； 食品添加劑中鉛的測定； 食品添加劑中砷的測定；食品中維生素A和維生素E的測定；食品中胡蘿卜素的測定；食品中硫胺素（維生素B1）的測定；食品中核黃素的測定； 蔬菜、水果及其制品中總抗壞血酸的測定（熒光法和2，4-二硝基苯肼法）；食品中磷的測定；食品中不溶性膳食纖維的測定；食品中煙酸的測定；食品中鐵、鎂、錳的測定；食品中鉀、鈉的測定；食品中鈣的測定；食品中硒的測定；植物性食品中稀土的測定；蜂蜜中四環(huán)素族抗生素殘留量的測定；谷物和大豆中赭曲霉毒素A的測定；食品中環(huán)已基氨基磺酸鈉的測定；食品容器及包裝材料用聚酯樹脂及其成型品中銻的測定；植物性食品中辛硫磷農(nóng)藥殘留量的測定；植物性食品中甲胺磷和乙酰甲胺磷農(nóng)藥殘留量的測定；植物性食品中氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的測定；黃瓜中百菌清殘留量的測定；植物性食品中二氯苯醚菊酯殘留量的測定；植物性食品中二嗪磷殘留量的測定； 畜禽肉中已烯雌酚的測定； 柑桔中水胺硫磷殘留量的測定；植物性食品中氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯殘留的測定；谷物及其制品中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇的測定；大米和柑桔中喹硫磷殘留量的測定；大米中殺蟲環(huán)殘留量的測定；大米中殺蟲雙殘留量的測定；稻谷中三環(huán)唑殘留量的測定；畜、禽肉中土霉素、四環(huán)素、金霉素殘留量的測定（高效液相色譜法）；食用豆粕衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的分析方法； 小麥中T-2毒素的酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）；復(fù)合食品包裝袋中二氨基甲苯的測定。

3職業(yè)病防治科 職業(yè)病防治科主要開展的實驗工作有： 用于光子外照射放射防護的劑量轉(zhuǎn)換系數(shù)；個人膠片劑量計；X射線防護材料衰減性能的測定；用于中子測井的CR39中子劑量計的個人劑量監(jiān)測方法。

4慢病防治科

慢病防治科主要開展的工作有：化妝品衛(wèi)生化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法 汞；化妝品衛(wèi)生化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法 砷；化妝品衛(wèi)生化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法 鉛；化妝品衛(wèi)生化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法 甲醇；化妝品微生物標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法 細菌總數(shù)測定；化妝品微生物標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法 糞大腸菌群；化妝品微生物標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法 綠膿桿菌； 化妝品微生物標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法 金黃色葡萄球菌。

5環(huán)境衛(wèi)生科

環(huán)境衛(wèi)生科主要開展的實驗工作有：生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)檢驗；居住區(qū)大氣中一氧化碳衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法 汞置換法；居住區(qū)大氣中砷化物衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法 二乙氨基二硫代甲酸銀分光光度法；居住區(qū)大氣中二氧化硫衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法 四氯汞鹽鹽酸副玫瑰苯胺分光光度法； 居住區(qū)大氣中汞衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法 金汞齊富集-原子吸收法；居住區(qū)大氣中硝基苯衛(wèi)生檢驗標(biāo)準(zhǔn)方法 氣相色譜法；居住區(qū)大氣中吡啶衛(wèi)生檢驗標(biāo)準(zhǔn)方法 氯化氰-巴比妥酸分光光度法；居住區(qū)大氣中硫酸鹽衛(wèi)生檢驗標(biāo)準(zhǔn)方法 離子色譜法；居住區(qū)大氣中甲基-1605衛(wèi)生檢驗標(biāo)準(zhǔn)方法 氣相色譜法；居住區(qū)大氣中鈹衛(wèi)生檢驗標(biāo)準(zhǔn)方法桑色素?zé)晒夥止夤舛确?；居住區(qū)大氣中氯衛(wèi)生檢驗標(biāo)準(zhǔn)方法甲基橙分光光度法；居住區(qū)大氣中苯、甲苯和二甲笨衛(wèi)生檢驗標(biāo)準(zhǔn)方法 氣相色譜法；居住區(qū)大氣中甲醇、丙醇衛(wèi)生檢驗標(biāo)準(zhǔn)方法 氣相色譜法；居住區(qū)大氣中鉛衛(wèi)生檢驗標(biāo)準(zhǔn)方法 原子吸收分光光度法； 居住區(qū)大氣中鎘衛(wèi)生檢驗標(biāo)準(zhǔn)方法 原子吸收分光光度法；居住區(qū)大氣中二硫化碳衛(wèi)生檢驗標(biāo)準(zhǔn)方法 氣相色譜法；居住區(qū)大氣中硫化氫衛(wèi)生檢驗標(biāo)準(zhǔn)方法 亞甲藍分光光度法；水源水中乙醛、丙烯醛衛(wèi)生檢驗標(biāo)準(zhǔn)方法 氣相色譜法；水源水中氯丁二烯衛(wèi)生檢驗標(biāo)準(zhǔn)方法 氣相色譜法；水源水中丙烯酰胺衛(wèi)生檢驗標(biāo)準(zhǔn)方法 氣相色譜法；水源水中苯系物衛(wèi)生檢驗標(biāo)準(zhǔn)方法 氣相色譜法；水源水中氯苯系化合物衛(wèi)生檢驗標(biāo)準(zhǔn)方法 氣相色譜法；水源水中二硝基苯類和硝基氯苯類衛(wèi)生檢驗標(biāo)準(zhǔn)方法 氣相色譜法；水源水中巴豆醛衛(wèi)生檢驗標(biāo)準(zhǔn)方法 氣相色譜法； 水原水中硫化物衛(wèi)生檢驗標(biāo)準(zhǔn)；居住區(qū)大氣中二氧化氮檢驗標(biāo)準(zhǔn)方法 改進的Saltzman法； 居住區(qū)大氣中氣態(tài)污染物液體吸收法的標(biāo)準(zhǔn)采樣裝置；居住區(qū)大氣中硝酸鹽檢驗標(biāo)準(zhǔn)方法 鎘柱還原-鹽酸萘乙二胺分光光度法；大型水蚤測試標(biāo)準(zhǔn)方法；居室空氣中甲醛的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)； 居住區(qū)大氣中甲醛衛(wèi)生檢驗標(biāo)準(zhǔn)方法 分光光度法；居住區(qū)大氣中苯胺衛(wèi)生檢驗標(biāo)準(zhǔn)方法 氣相色譜法；居住區(qū)大氣中正已烷衛(wèi)生檢驗標(biāo)準(zhǔn)方法 氣相色譜法；居住區(qū)大氣中三氯甲烷、四氯化碳衛(wèi)生檢驗標(biāo)準(zhǔn)方法 氣相色譜法； 居住區(qū)大氣中酚類化合物衛(wèi)生檢驗標(biāo)準(zhǔn)方法 4-氨基安替比林分光光度法；飲用水化學(xué)處理劑衛(wèi)生安全性評價；公共場所空氣微生物檢驗方法 細菌總數(shù)測定；公共場所茶具微生物檢驗方法 細菌總數(shù)測定；公共場所茶具微生物檢驗方法 大腸菌群測定；公共場所毛巾、床上臥具微生物檢驗方法 細菌總數(shù)測定 ；公共場所毛巾、床上臥具微生物檢驗方法 大腸菌群測定；理發(fā)用具微生物檢驗方法 大腸菌群測定；理發(fā)用具微生物檢驗方法 金黃色葡萄球菌測定；公共場所拖鞋微生物檢驗方法 霉菌和酵母菌測定；游泳池水微生物檢驗方法 細菌總數(shù)測定 ；游泳池水微生物檢驗方法 大腸菌群測定；公共場所浴盆、臉（腳）盆微生物檢驗方法 細菌總數(shù)測定；公共場所浴盆、臉（腳）盆微生物檢驗方法 大腸菌群測定；公共場所空氣溫度測定；公共場所空氣濕度測定；公共場所風(fēng)速測定；公共場所氣壓測定；公共場所輻射熱測定；公共場所室內(nèi)新風(fēng)量測定； 公共場所室內(nèi)換氣率測定；公共場所采光系數(shù)測定；公共場所照度測定；公共場所噪聲測定；公共場所空氣中一氧化碳測定；公共場所空氣中二氧化碳測定；公共場所空氣中氨測定；公共場所空氣中甲醛測定；公共場所空氣中臭氧測定；游泳水溫度測定；游泳水中尿素測定； 海濱游泳水透明度測定；室內(nèi)空氣質(zhì)量測定。

6性病科

性病科主要的實驗工作有：不加熱血清反應(yīng)素(USR)試驗；梅毒螺旋體特異性反應(yīng)(TPHA)試驗；梅毒反應(yīng)素快速環(huán)狀卡片(RPR)試驗；螺旋體蛋白補體結(jié)合試驗(RPCE)；梅毒螺旋體制動試驗(TPI)；間接免疫熒光螺旋體抗體吸附試驗(FTA-ABS)；淋球菌培養(yǎng)與涂片；酶聯(lián)吸附試驗測抗體 ELISA；蛋白印跡（Western印跡)法測HIV；HIV1型抗原檢測；DNA-PCR 擴增外周血單核細胞中的前病毒DNA 來確定HIV感染。

6地方病科 地方病科實施開展的實驗室工作主要以地域的不同而開展的具體工作也有所不同。

6總結(jié)與建議

本次搜查工作主要是簡單的搜查了各省級CDC實驗室開展的主要工作項目，有些科室開展的工作項目的搜查尚不全面。經(jīng)過比對，筆者發(fā)現(xiàn)本單位有許多工作由于條件所限尚無法開展，與其它省級CDC實驗室建設(shè)尚有一定距離。建議領(lǐng)導(dǎo)加大對實驗室建設(shè)的重視，陸續(xù)開展一些與各科室相關(guān)的實驗工作。

報告人：王冠中

報告時間：2015-3-11

第五篇：實驗室平菇栽培法 實驗報告[范文]

實驗報告

實驗名稱 實驗室平菇栽培法 班組 姓名 學(xué)號 日期 成績 教師簽名

一、實驗?zāi)康?/p>

1.掌握平菇基本栽培方法及其原理。

2.掌握平菇栽培中器械和培養(yǎng)基的滅菌方法及原理，如高壓蒸汽滅菌法、干熱滅菌、灼燒滅菌和紫外燈滅菌法等。

3.了解食用菌母種擴大繁殖生產(chǎn)的基本原理,掌握斜面母種的接種和培養(yǎng)方法。

4.掌握平菇栽培中原種、栽培種培養(yǎng)基的制備方法。5.培養(yǎng)學(xué)生自行設(shè)計出菇的方案。

二、基本原理

1.平菇是木質(zhì)腐生菌，生長發(fā)育所需各種營養(yǎng)物質(zhì)均從木屑、棉籽殼、稻草等培養(yǎng)料中獲得。平菇生長周期短，從播種到第一批采收一般為30天到40天，栽培方法簡便，成功率高。本實驗在實驗室條件下，用袋裝方法出菇。

2.食用菌生產(chǎn)中，培養(yǎng)基、器皿及接種工具的消毒滅菌，是防止雜菌污染，提高食用菌產(chǎn)量的關(guān)鍵措施，滅菌和消毒法主要有物理方法（高溫滅菌和紫外線滅菌）、化學(xué)滅菌法。

干熱滅菌是在保持恒溫的電烘箱中進行的,適用于各種耐熱的玻璃器皿、棉塞、濾紙、以及不能與蒸汽充分接觸的液體的滅菌.一般在160攝氏度持續(xù)1.5—2小時,就可達到滅菌的目的.灼燒滅菌可直接在酒精燈外火焰灼燒滅菌,酒精燈所用的酒精濃度要在百分之95以上.紫外燈滅菌是接種室(箱)最常用的方法之一,每次在使用前開燈20—30分鐘.紫外線可導(dǎo)致細胞內(nèi)核酸和酶發(fā)生變化而使細胞死亡,還可使空氣中氧氣產(chǎn)生臭氧,臭氧也具有殺菌作用.因其透射力差只適用于空氣及物體表面的滅菌,有效距離為1.5—2米,以1.2米內(nèi)為最好.3.食用菌母種培養(yǎng)基和分離菌種時用斜面培養(yǎng)基，適用于一般食用菌的母種分離與培養(yǎng)用的培養(yǎng)基是馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（即PDA培養(yǎng)基），配成后用加壓蒸汽滅菌法對培養(yǎng)基進行滅菌。

4.食用菌菌種生產(chǎn)一般按母種——原種——栽培種進行。母種數(shù)量少，要進行試管移接擴大培養(yǎng)才能進行生產(chǎn)。

5.原種由母種繁殖而成，由原種擴大培養(yǎng)成栽培種。原種和栽培種生產(chǎn)一般包括配料——裝瓶（袋）——滅菌——接種——培養(yǎng)等流程。一般用瓶裝或塑料袋裝，滅菌壓力和時間相應(yīng)延長。

三、實驗器材

1.材料：馬鈴薯、葡萄糖（或蔗糖）、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、瓊脂、75%乙醇溶液、麥粒、棉籽殼、石膏粉、碳酸鈣、麥麩

2.器具：錐形瓶、棉塞、超凈工作臺、燒杯、量筒、漏斗、天平、鐵架臺、紗布、藥匙、PH實紙、接種鏟、酒精燈、聚丙烯塑料袋、小試管、牛皮紙、高壓蒸汽滅菌鍋等

四、實驗過程 1、10月7日

①準(zhǔn)備干凈的一只試管和一個錐形瓶，貼上標(biāo)簽并制作兩個與試管和錐形瓶相配套的棉塞。②配置PDA培養(yǎng)基：

馬鈴薯（去皮）2500克 葡萄糖 250克 瓊脂 250克 水 12500克 自然PH值

按上述配料加，用小火加熱并用攪拌器不斷攪拌。

③分裝：將培養(yǎng)基在凝固前進行分裝，一般到試管的1/5至1/4左右，分裝完后加塞用牛皮紙包扎好。

④滅菌：用高壓蒸汽滅菌鍋對培養(yǎng)基進行滅菌。

打開滅菌鍋蓋，向鍋內(nèi)加入適量的水。將待滅菌物品放入鍋內(nèi)，然后價蓋旋緊螺旋，使蒸氣鍋密閉；

打開放氣閥加熱。自開始產(chǎn)生蒸汽后10分鐘左右關(guān)緊放氣閥讓溫度隨蒸汽壓力增高而上升，最后在115℃下，維持30分鐘。

停止加熱，待壓力降至5磅以下時，放氣，打開鍋蓋，取出滅菌物。

⑤ 制試管斜面：滅菌完畢降至60攝氏度后取出試管擺斜面，是斜面為試管長度的1/2。⑥無菌檢查：將斜面培養(yǎng)基放置于37攝氏度溫箱內(nèi)，培養(yǎng)24小時，若無菌長出，可存?zhèn)溆谩?、10月14日：

①超凈臺提前擦干凈,紫外燈殺菌,通風(fēng)打開10分鐘后可以操作;②接種菌絲型平菇母種擴大培養(yǎng)：

左手持試管，右手持接種工具，拔去棉塞后用酒精燈封住管口 將母種用接種鏟切成0.5厘米寬長條，深度約占培養(yǎng)基2/3，再用接種鋤切成寬0.5厘米的正方形小塊接種到空白試管中央，菌絲面朝上,使之緊貼于培養(yǎng)基斜面上。

置于25℃至27℃恒溫箱中培養(yǎng)，當(dāng)菌種塊上菌絲萌發(fā)后可將溫度降至2到3℃。當(dāng)菌絲長至斜面培養(yǎng)基長度的4/5時可停止培養(yǎng)放恒溫箱中培養(yǎng)。3、10月21日：

①配制麥粒培養(yǎng)基（即原種培養(yǎng)基）： 麥粒 2500克 蔗糖 62.5克 碳酸鈣 62.5克 水 6250克

②將麥粒培養(yǎng)基裝到錐形瓶中（約占錐形瓶的一半，不可太滿），加棉塞包扎后滅菌，滅菌條件一般采用1.4公斤/平方厘米，1.5—2.0小時。4、10月28日： ①原種接種：在超凈工作臺上，取斜面母種，切取2.5平方厘米大小斜面菌種一塊放置于上述配置的麥粒培養(yǎng)基上，并使菌種埋在培養(yǎng)基中。接種后，用酒精燈灼燒瓶口、棉塞，用棉塞塞住瓶口，并用繩將牛皮紙扎在瓶口上。

②原種培養(yǎng)：接種后的原種的培養(yǎng)瓶，要及時移入25℃至27℃恒溫培養(yǎng)箱或培養(yǎng)室中；菌種培養(yǎng)初期，每天檢查染菌情況，污染的瓶袋要及時發(fā)現(xiàn)處理；適齡的菌種為菌絲長至5—10天室最適于擴大生產(chǎn)的；培養(yǎng)過程中，除對溫度的要求較直接外，其余對培養(yǎng)室的濕度，通風(fēng)條件等都是間接的，只要做到基本恒溫，對濕度、空氣、光線等培養(yǎng)條件只要做到一般性的綜合調(diào)節(jié)就足夠了。5、11月4日：

①配制棉籽殼培養(yǎng)基（即栽培種培養(yǎng)基）： 棉殼 98% 石膏粉 1% 蔗糖 1% 含水量 60%—65% 按配方用量分別稱取所需各種原料；

調(diào)整培養(yǎng)料的含水量：用手緊握培養(yǎng)料，以指縫中由水外滲而不往下滴為適宜，沒有水漬為過干，由水珠連續(xù)淌下為過濕?？捎眉铀鸶苫蚣恿系姆椒ㄕ{(diào)整。

②裝袋培養(yǎng)基配制好后，裝入塑料袋中，在裝的過程中插入一根小試管直達瓶底或至培養(yǎng)料4/5處（目的是增加袋內(nèi)氧氣，固定菌種和有利于菌絲沿著洞穴向下蔓延），注意裝袋袋料保持一致均勻，手握時由彈性，不下陷，不要太松或太緊，及時扎口，仔細檢查防止破損。③包扎后滅菌：滅菌條件與原種滅菌條件同。6、11月11日：

①栽培種接種：采用直接在接種穴內(nèi)灌滿的接種方法，在其表面也撒些菌種碎屑，操作在超凈工作臺上進行。

②恒溫培養(yǎng)3周（要求與菌種的原種培養(yǎng)條件相同），菌絲即長滿塑料袋，已分化出子實體原基。7、12月2日：

帶回寢室培養(yǎng)：打開塑料袋口，或?qū)⑺芰洗诩羝茢傞_，同時注意環(huán)境噴霧保濕，加強通風(fēng)換氣。待菌蓋長至玉米粒大小后，才開始向子實體上噴少量霧狀水，隨子實體上大，逐漸增多噴水量和次數(shù)。

8、到菌菇體成熟時采收，一般鮮銷的平菇在其成熟期的初期和中期采收。通常一手按住菇柄基部的培養(yǎng)料，一手捏住菌柄輕輕擰下，但切不可硬拔，以免將培養(yǎng)料帶起，影響下潮出菇。

五、實驗結(jié)果

實驗結(jié)果：12月19日采收得到生長尚未成熟的平菇子實體。具體過程中：

1.母種擴大培養(yǎng)后的菌絲從外觀看，菌絲潔白、濃密、粗壯、富有彈性，生長整齊，不產(chǎn)生色素，菌種無雜菌污染且無雜色出現(xiàn)； 2.原種培養(yǎng)得到的菌絲潔白、濃密，生長到最錐形瓶底部； 3.栽培種培養(yǎng)得到的菌絲潔白、濃密，生長到袋料的底部； 12月10日：子實體早期生長在培養(yǎng)基的周圍，不規(guī)則分布。

12月12-13日：菇體發(fā)育成熟的初期和中期，菌蓋邊緣尚未完全展開、菌蓋平滑完整無開裂，菌蓋邊緣韌性好，菌肉厚實肥嫩，菌柄中實柔軟。

六、實驗分析及注意事項：

實驗分析：實驗做的不是非常成功，由于培養(yǎng)時間不足，長出的菌菇尚未完全成熟。在母種、原種培養(yǎng)時做到?jīng)]有讓菌種污染，嚴格按照無菌操作步驟，所以在得到菌種時都是好的菌種。在出菇期的培養(yǎng)，控制了培養(yǎng)基的濕度、光照、溫度等，每天檢查濕度及生長狀況。注意事項：

①在母種、原種、栽培種接種時，必須嚴格按照無菌操作的方法進行，接種工具在火焰上灼燒滅菌后，須在試管壁上冷卻下在切割菌種，否則菌絲被燙融影響菌種恢復(fù)。盡量在超凈工作臺上操作。

②保藏的母種在接種前應(yīng)進行認真檢查是否由污染現(xiàn)象，已污染雜菌的母種不能用于擴大培養(yǎng)。

③掌握好菌種的適齡期，適齡菌種為菌絲長至瓶底后5—10天，最適于擴大生長，此時為菌絲生長處最佳生長期，適應(yīng)性強。

④供制種的麥粒最好是儲存一年左右的陳麥粒，新麥制種菌絲吃料慢長勢弱；煮熟麥粒是制種的關(guān)鍵，要掌握熟而不爛，表皮不破，沒有淀粉滲出。

⑤出菇期管理要點：

首先：刺激子實體的發(fā)生可通過增進散射光，延長光照時間；加大晝夜溫差；保持較濕潤環(huán)境的方法。

其次：提高成菇率主要是噴水和通氣環(huán)節(jié)上，桑葚期時千萬不要噴水，只有當(dāng)菌蓋長到1—2分硬幣大小時才可根據(jù)天氣情況和培養(yǎng)料濕度適當(dāng)噴水，噴水后要適當(dāng)加強通風(fēng)，噴水時間一般在中午前后溫度較高時進行。

⑥轉(zhuǎn)潮管理：第一批菇采收后，不要馬上噴水覆蓋，要讓料面露干4—5天，然后重噴一次水覆蓋，保持濕潤，批蕾萌發(fā)，原基形成后轉(zhuǎn)入出菇期管理，方法同上。