第一篇：酵母抽提物及其在調(diào)味品中的應(yīng)用解析

酵母抽提物及其在調(diào)味品中的應(yīng)用

一直以來(lái)，味精作為主要的調(diào)味品之一，增加食品的鮮味，引起人們的食欲，但是味精對(duì)人體沒(méi)有直接的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，并且味精的呈味作用必須依賴于鹽的存在，而我國(guó)居民每標(biāo)準(zhǔn)人日食鹽攝入量遠(yuǎn)超世界衛(wèi)生組織每人每日的建議攝鹽量。我公司自主研發(fā)的酵母抽提物食品添加劑，可滿足消費(fèi)者對(duì)健康和天然的需求，將為中國(guó)乃至世界整個(gè)調(diào)味品行業(yè)提供更天然、更綠色、更安全的高品質(zhì)食品增鮮劑，減少人們對(duì)味精的攝取量，對(duì)提升全球消費(fèi)者的健康指數(shù)有著深遠(yuǎn)的意義。

酵母是一種單細(xì)胞蛋白，蛋白質(zhì)含量40%～50%，核酸6%～8%，富含20多種氨基酸（包括人體所必需的8種氨基酸，并且其含量接近理想蛋白質(zhì)水平），多種B族維生素，豐富的酶系和多種經(jīng)濟(jì)價(jià)值很高的生理活性物質(zhì)。細(xì)胞壁的主要成分為葡聚糖和甘露聚糖，這些免疫多糖能夠活化巨噬細(xì)胞、嗜中性白血球等，因此能提高白細(xì)胞素、細(xì)胞分裂素和特殊抗體的含量，全面刺激機(jī)體的免疫系統(tǒng)。β-葡聚糖能使受傷機(jī)體的淋巴細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞因子的能力迅速恢復(fù)正常，有效調(diào)節(jié)機(jī)體免疫機(jī)能，所以可作為保健食品的原料，開(kāi)發(fā)成為功能顯著的保健食品。另外，酵母葡聚糖具有很高的粘性、持水性、乳化穩(wěn)定性，在食品工業(yè)中常作為增稠劑、持水劑和乳化穩(wěn)定劑。由于酵母葡聚糖在人體消化道內(nèi)難以降解消耗，因此，還可以作為低熱量食品添加劑，提供脂肪樣口感，作為食品配料應(yīng)用到乳制品、肉制品、焙烤食品、飲料、糖果等普通食品中，酵母葡聚糖的持水能力使其具有增稠、保濕、改善口感等功能。

自2001年以來(lái)，唐山拓普生物科技有限公司一直堅(jiān)持不斷地針對(duì)啤酒鮮酵母進(jìn)行研究開(kāi)發(fā)。公司以啤酒鮮酵母為主要原料，采用先進(jìn)的現(xiàn)代生物工程技術(shù)，將酵母細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)，核酸進(jìn)行降解、提取，生產(chǎn)酵母抽提物、核糖核酸、葡聚糖、甘露寡糖等相關(guān)系列產(chǎn)品。

公司先后被認(rèn)定為“省級(jí)高新技術(shù)企業(yè)”、“唐山市生物工程研究中心”。2011年，通過(guò)與韓國(guó)的國(guó)際科技合作項(xiàng)目，我公司完成了高核酸和高含量細(xì)胞壁多糖啤酒酵母菌的定向篩選的關(guān)鍵技術(shù)研究。2010年參與申請(qǐng)1項(xiàng)專利“一種從啤酒廢酵母泥中回收啤酒工藝”。應(yīng)用此專利技術(shù)，使用德國(guó)HITK陶瓷研究所技術(shù)開(kāi)發(fā)的專用陶瓷膜元件，大大提高了產(chǎn)品的品質(zhì)，使得我公司產(chǎn)品質(zhì)量可以與國(guó)外進(jìn)口產(chǎn)品相媲美。

拓普YE產(chǎn)品

以新鮮的啤酒酵母為原料，經(jīng)自溶、分離、濃縮、干燥等工藝加工制成的酵母蛋白類產(chǎn)品，富含氨基酸、多肽、B族維生素、核苷酸，以及酵母多糖等生物活性物質(zhì)，是一種綠色、無(wú)污染的食品調(diào)味料，提取過(guò)程中采用美拉德等生香反應(yīng)，形成了肉味香氣成分，再通過(guò)調(diào)配調(diào)香制成各種不同特征的風(fēng)味型抽提物。目前公司生產(chǎn)的產(chǎn)品應(yīng)用在食品調(diào)味品中，主要有基礎(chǔ)型酵母浸粉/浸膏。同時(shí)公司可根據(jù)客戶要求，生產(chǎn)客戶定制的美拉德反應(yīng)型YE、高I+G型YE、高核酸型YE、醬油專用型YE等酵母

第二篇：酵母抽提物生產(chǎn)流程

酵母提取物

前處理和自溶：

廢酵母→清水洗滌→過(guò)濾→酵母泥→加水調(diào)至含干酵母10％～15％→調(diào)pH至4．5→夾層熱保溫45℃～55℃→自溶24小時(shí)。

自溶期間每隔1小時(shí)開(kāi)動(dòng)攪拌2～5分鐘，攪拌有利于酶類和酵母內(nèi)大分子物質(zhì)充分接觸，提高單位接觸面底物的濃度，從而加快細(xì)胞內(nèi)酶的反應(yīng)速度。

為了加速細(xì)胞的自溶，還可添加2％～3％的氯化鈉，其對(duì)提高抽提物得率和上清液氨基氮含量有一定促進(jìn)作用。

酶解：

自溶結(jié)束后，在自溶酵母液中加入0.2％復(fù)合酶，調(diào)整物料pH為7．0，在50℃條件下酶解24小時(shí)。酶解結(jié)束后，經(jīng)納米對(duì)撞機(jī)在150MP～200MP下進(jìn)行破碎。其作用原理是：物料形成150MP以上的高壓射流，經(jīng)分流裝置被分成兩股，然后，兩股高壓射流體在一個(gè)腔體內(nèi)發(fā)生對(duì)撞，產(chǎn)生瞬時(shí)高壓使振蕩片振蕩，形成頻率高達(dá)20000赫茲以上的超聲波，酵母細(xì)胞在對(duì)撞和超聲波的強(qiáng)大壓力的共同作用下發(fā)生納米級(jí)破碎。經(jīng)納米對(duì)撞機(jī)處理后，用顯微鏡檢測(cè)，混合物料中大多數(shù)為空腔細(xì)胞和大量碎片，酵母細(xì)胞壁的破碎率可達(dá)97．9％，抽提物得率為91．8％。破碎液經(jīng)進(jìn)一步純化、濃縮后可制得淡黃色的膠木抽提物制品。

采用上述方法制得的酵母抽提物，肌苷酸（I）含量為1．27g／100g，鳥苷酸（G）含量為1．498g／100g牞（I＋G）為2．76g／100g。與日本日研公司同類產(chǎn)品相比，指標(biāo)分別提高294．4％、626．82％、413．96％。具體工藝：廢酵母預(yù)處理【120目過(guò)篩→脫苦→調(diào)整母液濃度(10%~15%)→加促進(jìn)劑（2%Nacl）→自溶（溫度50℃，pH5.2～6.0，24h）】→酶解（0.2%,pH7.0，50℃，24h）→納米對(duì)撞機(jī)破碎（150MP～200MP，循環(huán)2～4次）→加麥芽根酶解酶（70℃，3～4h）→加熱滅酶（95℃，10分鐘）→離心分離→酵母上清液濃縮→酵母抽提物產(chǎn)品。

以上所述啤酒酵母抽提物的提取技術(shù)，其關(guān)鍵點(diǎn)是將傳統(tǒng)的自溶、酶解方法與先進(jìn)的納米破碎技術(shù)相結(jié)合，利用高壓撞擊作用破碎酵母細(xì)胞壁，從而使其內(nèi)容物最大限度溶出，提高制品中氨基酸含量。

第三篇：酵母抽提物應(yīng)用研究新進(jìn)展

酵母抽提物應(yīng)用研究新進(jìn)展

酵母抽提物是以蛋白質(zhì)含量豐富的食用酵母為原料，采用生物技術(shù)，將酵母細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、核酸等進(jìn)行降解后精制而成的天然調(diào)味料，主要成分為多肽、氨基酸、呈味核苷酸、B族維生素及微量元素。酵母抽提物具有純天然、營(yíng)養(yǎng)豐富、味道鮮美醇厚等優(yōu)點(diǎn)，在食品工業(yè)中應(yīng)用廣泛。

近年來(lái)，隨著人們對(duì)酵母抽提物認(rèn)識(shí)的加深，酵母抽提物市場(chǎng)越來(lái)越大，應(yīng)用范圍也越來(lái)越廣，而食品生產(chǎn)廠家對(duì)酵母抽提物的要求也越來(lái)越高，這大大促進(jìn)了酵母抽提物在研制和應(yīng)用方面的發(fā)展，出現(xiàn)了一些新的進(jìn)展和趨勢(shì)。

首先，由于拓展國(guó)際市場(chǎng)和滿足國(guó)內(nèi)高端市場(chǎng)的需要，部分酵母抽提物生產(chǎn)廠家已經(jīng)通過(guò)調(diào)整改進(jìn)生產(chǎn)工藝和設(shè)備，生產(chǎn)出淺色、溶解性好的高純度酵母抽提物。與以往的抽提物產(chǎn)品相比，新的高純度酵母抽提物產(chǎn)品在理化指標(biāo)、溶解性能、加工性能等方面更加接近國(guó)際同類產(chǎn)品，這就為產(chǎn)品進(jìn)入國(guó)際市場(chǎng)提供了保證。

其次，高I+G含量的強(qiáng)鮮型酵母抽提物隨著調(diào)味行業(yè)對(duì)天然、營(yíng)養(yǎng)、健康的強(qiáng)烈鮮味劑的大量需求而出現(xiàn)并受到普遍關(guān)注。由于中國(guó)人對(duì)鮮味的偏愛(ài)，市場(chǎng)上銷售的各種調(diào)味品往往都會(huì)突出一個(gè)鮮字，因而各種鮮味增強(qiáng)劑如味精、I+G等產(chǎn)品都具有較大的市場(chǎng)。一般的酵母抽提物雖然在整體呈味上比味精強(qiáng)，但往往給人鮮度不夠的感覺(jué)。高I+G含量的強(qiáng)鮮型酵母抽提物通過(guò)在自溶過(guò)程中控制核酸的降解，使產(chǎn)品中呈味核苷酸（I+G）的含量增加，從而提高產(chǎn)品的鮮度，再加上酵母抽提物具有天然、營(yíng)養(yǎng)的特性和良好的加工性能，大大提高了酵母抽提物在與其他鮮味劑競(jìng)爭(zhēng)中的優(yōu)勢(shì)。

再次，酵母抽提物開(kāi)始向風(fēng)味化方向發(fā)展。與普通酵母抽提物和香精不同，風(fēng)味化酵母抽提物由于在酵母抽提物基礎(chǔ)上糅合了熱反應(yīng)技術(shù)，且其主要原料就是酵母抽提物，因此其可以看作是酵母抽提物和香精的結(jié)合體。

第四，一些針對(duì)某些行業(yè)的專用型酵母抽提物開(kāi)始出現(xiàn)。專用型酵母抽提物往往重點(diǎn)針對(duì)某一行業(yè)的特定需求和特殊加工要求，有目的地在產(chǎn)品中加以強(qiáng)化，由于對(duì)下游產(chǎn)品的生產(chǎn)過(guò)程和質(zhì)量要求了解透徹，針對(duì)性很強(qiáng)，很容易抓住客戶的需求，得到客戶的認(rèn)可。比如安琪酵母股份有限公司的雞精專用型酵母抽提物和醬油專用型酵母抽提物在推向市場(chǎng)后都獲得了很好的效果。

第五，咸味香精行業(yè)對(duì)酵母抽提物越來(lái)越認(rèn)可，使用量也越來(lái)越多。隨著食品加工行業(yè)的迅猛發(fā)展和對(duì)香精認(rèn)識(shí)的逐步加深，其對(duì)食用香精提出了更高的要求，這也對(duì)食用香精行

業(yè)的發(fā)展起到了巨大的推動(dòng)作用。

第六，方便面行業(yè)開(kāi)始嘗試在干脆面的面身中使用酵母抽提物。方便面行業(yè)在調(diào)料中使用酵母抽提物已經(jīng)形成了一種共識(shí)，而一些廠家在其即食干脆面面身中使用酵母抽提物也獲得了滿意的效果。隨著應(yīng)用技術(shù)的逐步提高，面身中使用酵母抽提物將會(huì)得到越來(lái)越多廠家的認(rèn)可。

第七，焙烤食品（餅干、面包等）加工中對(duì)酵母抽提物有了新的認(rèn)識(shí)。研究表明，酵母抽提物在面團(tuán)中通過(guò)與面筋基質(zhì)相互作用，可以改善面團(tuán)的延展性、烘焙特性以及口感和結(jié)構(gòu)。而酵母抽提物中所含有的海藻糖具有優(yōu)異的防止淀粉老化的作用，尤其在低溫或冷凍的條件下表現(xiàn)更為突出。海藻糖可以抑制油脂成分中脂肪的分解，對(duì)保持食品品質(zhì)起到了非常好的作用。

第八，豆瓣醬等傳統(tǒng)調(diào)味品行業(yè)開(kāi)始接受酵母抽提物。豆瓣醬行業(yè)一般采用傳統(tǒng)工藝進(jìn)行制作，生產(chǎn)周期較長(zhǎng)，產(chǎn)品質(zhì)量也容易出現(xiàn)波動(dòng)。應(yīng)用實(shí)驗(yàn)表明，在豆瓣醬的制作過(guò)程中添加酵母抽提物后對(duì)縮短產(chǎn)品成熟期、提升產(chǎn)品風(fēng)味具有較好的效果。

酵母抽提物作為一種快速發(fā)展的食品配料，其研制與應(yīng)用已經(jīng)越來(lái)越受到人們的關(guān)注，并在行業(yè)內(nèi)廣大人員的努力下取得了很大的進(jìn)步。隨著行業(yè)的發(fā)展和技術(shù)水平的提高，國(guó)內(nèi)對(duì)酵母抽提物產(chǎn)品的研制表現(xiàn)出了既與國(guó)際接軌，又結(jié)合中國(guó)實(shí)際的良好趨勢(shì)。而國(guó)內(nèi)食品加工業(yè)對(duì)酵母抽提物的接受程度也越來(lái)越高，并不斷在加工和應(yīng)用中尋求新的結(jié)合點(diǎn)。在酵母抽提物廠家與廣大食品調(diào)味品企業(yè)的共同努力下，國(guó)內(nèi)酵母抽提物行業(yè)和食品調(diào)味品行業(yè)必將擁有更美好的明天。

第四篇：酵母抽提物替代血漿蛋白粉在仔豬中的應(yīng)用

酵母抽提物替代血漿蛋白粉在仔豬中的應(yīng)用

摘要：酵母抽提物是將酵母細(xì)胞經(jīng)過(guò)破壁加工獲得，其作為優(yōu)質(zhì)的蛋白源，在部分或全部替代血漿蛋白粉的過(guò)程中具有提高仔豬日增重，改善飼料利用效率，提高仔豬生產(chǎn)性能和飼料成分，并對(duì)仔豬長(zhǎng)期健康生長(zhǎng)有良好的作用。同時(shí)酵母抽提物作為核苷酸主要來(lái)源物質(zhì)，其對(duì)仔豬腸道健康和微生物群體具有至關(guān)重要的作用，有利于促進(jìn)仔豬腸道發(fā)育，并提高機(jī)體細(xì)胞免疫和體液免疫的功能。

關(guān)鍵詞： 酵母抽提物；仔豬；核苷酸；腸道發(fā)育；免疫

Application of the Yeast Extract Replacing the Sprayed Dried Plasma Protein in Piglets Abstract：Yeast extract（YE）is the yeast cells to get through the wall treatment, as a high quality protein source, in part or all of the alternative in the process of the sprayed dried plasma protein(SDPP)is raising piglets weight, improve the feed efficiency, improve the production performance of piglets and feed ingredients, and has a good effect for the growth of piglets long-term health.And yeast extract as nucleotide main source material, the piglets intestinal health and microbial community has a crucial role, promote piglets intestinal development, and improve the function of the cellular immunity and humoral immunity.Keywords: Yeast extract（YE）；Piglets；Nucleotides ；Gut development；Immunization 斷奶仔豬由于消化道和免疫系統(tǒng)還未健全，再加上環(huán)境和日糧的改變及斷奶應(yīng)激的作用下，仔豬常出現(xiàn)采食量降低，疾病易感及腹瀉拉稀等斷奶綜合征,進(jìn)而言之影響其健康水平和生長(zhǎng)性能[1]。而且此階段斷奶仔豬消化器官未發(fā)育成熟，消化酶分泌水平低下，因而對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化能力弱。血漿蛋白粉作為一種傳統(tǒng)的優(yōu)質(zhì)動(dòng)物源蛋白，其適口性好，含有豐富的免疫球蛋白，能有效增強(qiáng)仔豬被動(dòng)免疫能力，改善仔豬的抗病力，降低腹瀉發(fā)生率，因而在乳仔豬日糧中應(yīng)用廣泛[2]；豐艷平[3]認(rèn)為，飼料中添加血漿蛋白粉能夠提高仔豬抗應(yīng)激能力。但是血漿蛋白粉原料來(lái)源于豬血，其由于加工工藝和動(dòng)物本身健康狀況等原因可能會(huì)導(dǎo)致同源性疾病的傳播，從而為養(yǎng)豬業(yè)帶來(lái)生物安全隱患。同時(shí)，在近來(lái)國(guó)際市場(chǎng)上血漿蛋白粉的價(jià)格日益增長(zhǎng)，和國(guó)內(nèi)血漿蛋白粉質(zhì)檢不能保證的情況下，進(jìn)一步促進(jìn)了對(duì)新的優(yōu)質(zhì)蛋白源的尋找利用。

酵母抽提物是將酵母細(xì)胞經(jīng)過(guò)破壁加工獲得的，是酵母細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的濃縮物，產(chǎn)品本身已不具備發(fā)酵活性。在生產(chǎn)過(guò)程中，酵母經(jīng)過(guò)其自身所含的酶類以及外加商品酶制劑和一些助溶劑等聯(lián)合作用，將細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)分解成以氨基酸、肽類為主要成分的物質(zhì)，溶出酵母細(xì)胞外后經(jīng)分離、濃縮和干燥等步驟精制而成[4]。它含有豐富的氨基酸、肽類、核酸及微量元素等，因而具有豐富的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。研究表明，酵母抽提物作為一種優(yōu)質(zhì)的天然完全蛋白質(zhì)，能夠促進(jìn)幼齡動(dòng)物的腸道發(fā)育，促進(jìn)其主動(dòng)免疫的建立，改善日糧適口性，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)利用率，是幼齡動(dòng)物優(yōu)良的蛋白質(zhì)來(lái)源。

同時(shí)酵母中的核酸含量8％～10％，酵母水解后，其核酸先降解為核苷酸，然后被進(jìn)一步降解為堿基、磷酸和戊糖，從而可以迅速進(jìn)人“補(bǔ)救途徑”，減少直接補(bǔ)充核酸大分子的消化耗能。酵母核酸富含天然核苷酸、活性肽GSH、多種游離氨基酸和B族維生素等，能補(bǔ)充動(dòng)物快速生長(zhǎng)時(shí)期內(nèi)源核苷酸合成的不足，加快機(jī)體腸上皮細(xì)胞、肝臟細(xì)胞和淋巴細(xì)胞等的復(fù)制、分裂增殖，提高免疫力。改善肝功能及脂質(zhì)代謝，激發(fā)動(dòng)物生產(chǎn)潛能，同時(shí)改善消化吸收、調(diào)理腸道等多種問(wèn)題，減少動(dòng)物消化道疾?。龠M(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育[5]。1 酵母抽提物替代血漿蛋白對(duì)仔豬生產(chǎn)性能的影響

酵母抽提物作為血漿蛋白的替代物，其蛋白含量和組成與血漿蛋白相似，同時(shí)酵母抽提物含有較高的核苷酸，也為其作為優(yōu)質(zhì)的動(dòng)物飼料原料提供基礎(chǔ)。在以往的研究中表明，酵母抽提物部分或全部替代血漿蛋白粉并不會(huì)降低斷奶仔豬的生產(chǎn)性能[5]。王學(xué)東等 [6]研究結(jié)果表明，與正常日糧相比，保育階段在日糧中添加0.3%的酵母抽提物能顯著提高仔豬的平均日增重，降低飼料系數(shù)，表現(xiàn)出降低仔豬腹瀉的趨勢(shì)，并且試驗(yàn)中酵母抽提物還顯示出緩解仔豬免疫應(yīng)激的作用。吳迪等[7]在斷奶仔豬日糧中添加酵母提取物或以不同水平替代日糧中的血漿蛋白粉，對(duì)仔豬的試驗(yàn)?zāi)┲?、平均日增重、飼料轉(zhuǎn)化率和仔豬平均日采食量均有不同程度的改善作用。同時(shí)，車煉強(qiáng)等[8]研究表明飼喂含酵母抽提物的日糧可以促進(jìn)仔豬生長(zhǎng)，顯著改善仔豬飼料轉(zhuǎn)化率；酵母抽提物全部替代SDPP后，能明顯改善斷奶仔豬飼料增重比，改善斷奶仔豬生產(chǎn)性能。并且，大量研究結(jié)果表明，血漿蛋白粉對(duì)仔豬的作用在斷奶后1~2周最為明顯，而在之后，其對(duì)采食量的增加和促生長(zhǎng)效應(yīng)減弱[9]，而酵母抽提物則具有長(zhǎng)期的促進(jìn)仔豬的生產(chǎn)性能，提高飼料轉(zhuǎn)化率的作用。

同時(shí)，在以往的研究中亦表明，日糧中隨著酵母抽提物添加量的增加，特別是酵母抽提物添加量大于0.4%時(shí)，會(huì)降低仔豬的采食量的趨勢(shì)，而在生產(chǎn)上，通常酵母抽提物采取一半替代血漿蛋白粉的做法效果最佳。其原因可能與酵母抽提物的加工工藝和酵母種類的不同有關(guān)。酵母抽提物中余留的酵母細(xì)胞壁雖然有刺激腸道免疫、抑制有害菌的作用，但高劑量添加時(shí)也可能會(huì)影響仔豬采食量，從而影響仔豬日增重。Dritz 等（1995）研究發(fā)現(xiàn)，斷奶仔豬日糧中添加0.1%啤酒酵母β-葡聚糖時(shí)會(huì)降低斷奶仔豬采食量和日增重，但料肉比并不會(huì)受到影響。李軍等（2006）[10]研究還發(fā)現(xiàn)，仔豬日增重也與啤酒酵母β葡聚糖的添加水平呈二次性影響趨勢(shì)。因此，酵母抽提物中酵母細(xì)胞壁含量不同對(duì)仔豬生產(chǎn)性能的影響可能會(huì)有所不同。

盡管如此，酵母抽提物作為優(yōu)質(zhì)的蛋白源，其替代血漿蛋白粉有提高仔豬生產(chǎn)性能和飼料成分，并對(duì)仔豬長(zhǎng)期健康生長(zhǎng)有良好的作用。2.酵母抽提物對(duì)仔豬腸道健康的影響

酵母抽提物是重要的核酸來(lái)源物質(zhì)，核苷酸參與了生命的許多代謝過(guò)程, 在細(xì)胞代謝中起很重要的作用,主要?dú)w結(jié)為:核苷酸是細(xì)胞組成主要成分,是組成DNA和RNA單體；核苷酸衍生物是許多生物合成的活性中間物；ATP 是生物能量代謝的核心；腺苷酸是三種重要輔酶(NAD,FAD,COA)的組分；cAMP 和從cGMP 是重要的代謝調(diào)節(jié)物質(zhì)；甲基供體；AMP 可調(diào)節(jié)平滑肌的收縮特性,調(diào)節(jié)血流量[11]。其在日糧添加中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。2.1 對(duì)微生物群落的影響

研究表明，在核苷酸降解過(guò)程中，核苷酶作用于核苷，使其釋放出糖并暴露出游離氮，而這一混合物影響了腸道內(nèi)微生物的形態(tài)和生長(zhǎng)。Tanaka 和Mutai(1980)的體外試驗(yàn)表明，添加了核苷酸的培養(yǎng)基可以促進(jìn)雙歧桿菌的生長(zhǎng)。日糧中核苷酸有助于在腸道微生物群落增殖中，使糞便中雙歧桿菌數(shù)量占優(yōu)勢(shì)，他們能將糖水解為乳酸，降低腸道PH，從而抑制腸道微生物的增殖，減少腹瀉。同時(shí)研究發(fā)現(xiàn)，核苷酸對(duì)腸道具有保護(hù)作用，能夠改善腸的屏障作用，維持腸壁的完整性，減少細(xì)胞的死亡率以及細(xì)菌、脂多糖引起的細(xì)菌易位，減少腹瀉的發(fā)生，加速饑餓應(yīng)激和感染后損傷的腸道恢復(fù)。Mary [12]給切除80%空腸和回腸的大鼠飼喂含1%尿嘧啶的日糧，7d 后屠宰，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，飼喂尿嘧啶的大鼠與對(duì)照組相比，其剩余空腸粘膜絨毛高度提高14%,隱窩深度提高18%。2.2 對(duì)腸道發(fā)育的影響

大量研究結(jié)果表明，外源核苷酸能夠加速腸細(xì)胞的分化、生長(zhǎng)與成熟，提高動(dòng)物腸粘膜DNA、蛋白含量以及麥芽糖酶、乳糖酶及蔗糖酶的活性。He 等(1993)[13]用體外培養(yǎng)小鼠小腸上皮細(xì)胞(IEC-6)的方式來(lái)觀察外源核苷酸對(duì)腸細(xì)胞分裂及分化的影響。在體外正常培養(yǎng)條件下添加核苷酸，能促進(jìn)正常小鼠小腸上皮細(xì)胞(IEC-6)的增殖、分化，且當(dāng)谷氨酰胺或谷氨酰胺和必需氨基酸缺乏時(shí)，添加核苷酸能促進(jìn)小腸上皮細(xì)胞的增殖，提高細(xì)胞內(nèi)ATP 水平。Holen 等（2004）[14]考察核苷酸對(duì)小腸上皮細(xì)胞株的增殖發(fā)育的影響，結(jié)果表明，RNA 和脫氧核苷酸dAMP、dGMP、dCMP 有促進(jìn)腸細(xì)胞增殖的功能，并且可以彌補(bǔ)因谷氨酰氨不足和腸局部缺血帶來(lái)的影響。

核苷酸具有清除體內(nèi)自由基的作用，其除了自身的堿基氮氧原子能夠捕捉機(jī)體氧化過(guò)程中形成的自由基外，與其相關(guān)物質(zhì)，如嘌呤的代謝產(chǎn)物尿酸也是體內(nèi)一些有害活性物質(zhì)的有效清除劑，其清除內(nèi)源自由基和抗氧化的能力最強(qiáng)，在生理濃度和各種pH 值條件下，具有保護(hù)紅細(xì)胞膜脂質(zhì)過(guò)氧化及由過(guò)氧化損傷造成的紅細(xì)胞破裂作用。并且核苷酸具有促進(jìn)小腸上皮細(xì)胞遷移，加強(qiáng)細(xì)胞周期素D1的表達(dá)，促進(jìn)DNA合成從而達(dá)到促進(jìn)仔豬腸道發(fā)育的作用[15，16]。酵母抽提物對(duì)仔豬機(jī)體免疫的影響

以往的研究表明，酵母抽提物能給予動(dòng)物外源的核酸、核苷酸對(duì)于維持正常細(xì)胞免疫和體液免疫等有積極的作用[18]。在核酸營(yíng)養(yǎng)當(dāng)中，免疫系統(tǒng)是機(jī)體各項(xiàng)變化中最敏感也是最直接受影響的系統(tǒng)。盡管機(jī)體能夠利用小分子物質(zhì)從頭合成核酸,但免疫系統(tǒng)必須有外源性核酸才能維持其正常機(jī)能。由于免疫系統(tǒng)作為機(jī)體與外界聯(lián)系的門戶, 具有“衛(wèi)士”作用, 它與其他系統(tǒng)組織相互作用,在維持機(jī)體內(nèi)穩(wěn)定中起積極作用[18]。Molist F等在斷奶仔豬日糧中添加酵母衍生物試驗(yàn)結(jié)果顯示，酵母衍生物提高仔豬IgG和IgM的血清結(jié)合KLH抗體，提高綿羊紅細(xì)胞凝集效價(jià)。顯示其能促進(jìn)斷奶仔豬免疫系統(tǒng)反應(yīng)更加迅速且不影響動(dòng)物體生長(zhǎng)性能,有利于仔豬克服疾病[31]。3.1 對(duì)細(xì)胞免疫的影響

核酸營(yíng)養(yǎng)是維持正常細(xì)胞免疫的必需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)[19]。淋巴細(xì)胞受抗原刺激活化后會(huì)對(duì)核酸的需求增加, 然而淋巴細(xì)胞由于沒(méi)有從頭合成核酸的能力, 必須依賴攝入的核酸為其活化提供能量及前體物質(zhì), 其增殖與細(xì)胞內(nèi)核苷酸庫(kù)含量增加以及細(xì)胞膜上大量核苷跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白表達(dá)相平行[20]。然而在有無(wú)核酸飲食的對(duì)比研究結(jié)果顯示, 核酸對(duì)細(xì)胞免疫具有:增加化學(xué)抗原、細(xì)菌抗原等引起的遲發(fā)型超敏反應(yīng)強(qiáng)度；增強(qiáng)同種抗原誘導(dǎo)的淋巴細(xì)胞增生；營(yíng)養(yǎng)不良及饑餓誘導(dǎo)的免疫抑制時(shí), 補(bǔ)充核酸可以恢復(fù)正常的免疫功能, 而補(bǔ)充蛋白質(zhì)則不能起到相似的效果；核酸飲食可以增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬能力。無(wú)核酸飲食實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的巨噬細(xì)胞超氧化物產(chǎn)量少于核酸飲食組的相應(yīng)產(chǎn)量；增強(qiáng)金黃色葡萄球菌及白色念珠菌的抵抗力；增加自然殺傷細(xì)胞活性；增加增殖的脾淋巴細(xì)胞IL-2 產(chǎn)量、IL-2 受體及l(fā)yt-1 表面標(biāo)志的表達(dá)；Van Buren 等認(rèn)為核苷酸對(duì)免疫的影響是作用在輔助/誘導(dǎo)T細(xì)胞亞群上, 主要作用在抗原遞呈的最初階段和淋巴細(xì)胞增殖階段[21-26]。3.2 對(duì)體液免疫的影響

無(wú)核苷酸飲食時(shí)小鼠和人對(duì)T 細(xì)胞依賴性抗原的特異性抗體反應(yīng)明顯下降,脾分泌IgM和IgG 的細(xì)胞數(shù)減少,對(duì)非T 細(xì)胞依賴性抗原的反應(yīng)以及非特異性多克隆B 細(xì)胞活化無(wú)影響[27],補(bǔ)充RNA可專一性逆轉(zhuǎn)這種抗體細(xì)胞數(shù)的減少[28],如用核糖核酸酶處置,則無(wú)此作用[29]。多核苷酸通過(guò)與T 細(xì)胞或其他譜系細(xì)胞表面分子的相互作用調(diào)節(jié)體液免疫, 在有抗原刺激時(shí)能夠抑制非特異性T 細(xì)胞的活化, 增加Th1 克隆細(xì)胞IFN-r產(chǎn)量、抑制Th1 克隆細(xì)胞介導(dǎo)的抗體產(chǎn)生和減少Th2 克隆細(xì)胞IL-5 產(chǎn)量, 但并不改變Th2 克隆細(xì)胞介導(dǎo)的抗體產(chǎn)生, 這些作用呈現(xiàn)劑量依賴性[30]。腸道相關(guān)淋巴組織能夠引發(fā)和調(diào)節(jié)T 細(xì)胞發(fā)育, 起胸腺類似物作用, 核酸對(duì)外周免疫的作用可能部分通過(guò)腸相關(guān)淋巴組織介導(dǎo), 但機(jī)制不清[29]。目前對(duì)老齡鼠作用的研究涉及很少, 僅見(jiàn)Ameho 等通過(guò)低蛋白飲食造成的早老小鼠模型實(shí)驗(yàn), 發(fā)現(xiàn)核酸營(yíng)養(yǎng)可恢復(fù)其正常免疫功能。日糧核苷酸能夠提高抗體水平,增加輔助性T 細(xì)胞的數(shù)目,有助于由于核苷酸缺乏引起的IgM、IgG分泌細(xì)胞數(shù)目的恢復(fù)。4.小結(jié)

酵母抽提物作為一種優(yōu)質(zhì)的天然完全蛋白質(zhì)，在部分或全部替代血漿蛋白粉情況下能夠促進(jìn)幼齡動(dòng)物的腸道發(fā)育，促進(jìn)其主動(dòng)免疫的建立，改善日糧適口性，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)利用率，是仔豬優(yōu)良的蛋白質(zhì)來(lái)源。同時(shí)酵母抽提物作為核苷酸主要來(lái)源物質(zhì)，其對(duì)仔豬腸道健康和發(fā)育以及微生物群體具有至關(guān)重要的作用，同時(shí)具有提高細(xì)胞免疫和體液免疫功能。參考文獻(xiàn)

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第五篇：轉(zhuǎn)化方法和酵母質(zhì)粒抽提

酵母轉(zhuǎn)化（快速）

侯昕

1、挑單菌落于3ml 2XYPAD培養(yǎng)基中，30°C 200rpm培養(yǎng)至菌濃度為2X108 cell/ml。（約18h）。

2、用1.5ml離心管收集菌液兩次，每次1ml，13500rpm，常溫離心30秒。3、4、2mg/ml carrier DNA變性，100°C 5分鐘，置冰上備用。在菌中依次加入

50％PEG3350

240ul

1M LiAc

34ul 2mg/ml S.S.carrier DNA

50ul plasmid DNA(各1ug)

36ul 每加入一種后，要吸打混勻。5、6、42°C水浴1－3小時(shí)。

13500rpm離心1分鐘，吸棄上清。沉淀中加500ul水，吸打均勻，100ul涂皿。

7、30°C培養(yǎng)兩天

此方法可用于已知蛋白互做檢測(cè)，將兩個(gè)質(zhì)粒共轉(zhuǎn)化。

2×YPAD：Yeast Extract

16g

2mg/ml carrier DNA：

Peptone

32g

鮭魚精DNA（Sima D1626）

Glucose

32g

溶于水，低溫放置過(guò)夜，滅

Adenine hemisulfate

80mg

菌后－20°C保存。

d2 H2O

800ml 酵母轉(zhuǎn)化（高效）

侯昕

1、挑酵母單菌落于100ml SC液體培養(yǎng)基中，30°C，200rpm搖至菌濃度為2X107 cell/ml（稀釋20倍，OD545或OD600為0.1）。※或挑酵母單菌落于50ml 2XYPAD液體培養(yǎng)基中，30°C，200rpm搖至菌濃度為2X108cell/ml（稀釋200倍，OD545或OD600為0.1）。

2、用兩個(gè)50ml離心管分別收集40ml菌液，3000g，常溫離心5分鐘。

3、將菌分別轉(zhuǎn)入兩瓶150ml 2XYPAD培養(yǎng)基中，擴(kuò)大培養(yǎng)至菌濃度為2X107cell/ml。

4、用500ml離心管收集300ml菌液，3000g，5分鐘。用 200mlddH2O洗兩次，將菌轉(zhuǎn)入一個(gè)50ml離心管。

5、2mg/ml carrier DNA變性，100°C 5分鐘，置冰上備用。

6、配Mixture：

50％PEG3350

14.4Mml

1M LiAc

2.16ml 2mg/ml S.S.carrier DNA

3ml plasmid DNA＋ddH2O

2.04ml

7、把Mixture加入菌沉淀中，吸打均勻。

8、42°C水域熱激45分鐘；每5分鐘搖一下，使其受熱均勻。

9、3000g，離心5分鐘，棄上清，菌沉淀中加40ml水，吸打均勻，涂皿，100－200u/皿。

此方法可用于酵母雙雜交文庫(kù)篩選，建議分步轉(zhuǎn)化。

酵母質(zhì)粒抽提

侯昕

1、收集菌液，10000g，離心10秒。

2、菌沉淀中加200ul YLS，牙簽打散。

3、加200ul 苯酚氯仿異戊醇（25：24：1），搖5分鐘，13000rpm，離心5分鐘。

4、將上層轉(zhuǎn)入一新離心管中，重復(fù)3。

5、將上層轉(zhuǎn)入一新離心管中，加20ul 3M NaOAc（pH5.2）、500ul乙醇，搖勻，10000g，4°C離心10－30分鐘。

6、750ul 75％乙醇洗，10000g，離心5－10分鐘。

7、重復(fù)6。

8、吹干，加10－20ul 水或TE。

此方法得到的質(zhì)?？捎糜陔娹D(zhuǎn)大腸桿菌

Yeast lysis solution（YLS）：

2％（v/v）

Triton X－100

1％（w/v）

SDS 100mM

NaCl 1mM

EDTA