第一篇：食品微生物實(shí)驗(yàn)室操作手冊

食品微生物實(shí)驗(yàn)室操作手冊

介紹了微生物實(shí)驗(yàn)中使用的標(biāo)準(zhǔn)菌的驗(yàn)收、制備、保藏、傳代、使用、銷毀的管理規(guī)程 規(guī)定了質(zhì)量管理部門實(shí)驗(yàn)用標(biāo)準(zhǔn)菌種的驗(yàn)收、制備、儲(chǔ)管、使用、以及銷毀等的相關(guān)規(guī)定。適用于微生物限度檢查、無菌檢查、抗生素微生物（效價(jià)）測定、評價(jià)防腐劑和抗菌劑的抑菌效果和確認(rèn)滅菌效果、檢驗(yàn)方法的驗(yàn)證、培養(yǎng)基的適用性檢查，樣品檢驗(yàn)時(shí)的陽性對照等。

依據(jù): 中國藥典2010年版二部及菌種使用說明書

1.標(biāo)準(zhǔn)菌的來源

標(biāo)準(zhǔn)菌株由中國藥品生物制品檢定所醫(yī)學(xué)菌種保藏中心（China Medical culture collection ,CMCC）提供的冷凍干燥菌種（0代）或由上級(jí)藥檢部門已接種好的菌種斜面（3代）。黑曲霉的0代菌種為保存于含15%甘油的0.9%無菌氯化鈉溶液中的孢子懸液冷存管。中國藥品生物制品檢定所醫(yī)學(xué)微生物菌種保藏管理中心提供的冷凍干燥菌種的標(biāo)簽CMCC

（B）代表細(xì)菌（bacteria）,CMCC(F)代表真菌（fungi）每種菌具有固定的代號(hào)。

2.標(biāo)準(zhǔn)菌的驗(yàn)收

從菌種保藏中心購買的原始菌種管是玻璃安瓿裝的凍干菌，接收同時(shí)應(yīng)檢查是否有隨菌種附有的相關(guān)資料。接收菌種時(shí)應(yīng)檢查安瓿的數(shù)量和名稱，和每一支安瓿的完整性。在相應(yīng)的菌種接收記錄上記上所有的關(guān)于菌種的信息，如名稱、數(shù)量和接收日期等。在菌種安瓿及菌種管上粘貼標(biāo)簽，內(nèi)容包括：菌種名稱、菌種代號(hào)、代次、接收日期、接收人、貯存條件、有效期至。新購入的0代原始菌種儲(chǔ)存于－20℃，有效期為三年。從上級(jí)藥檢部門購買的已接種好的菌種斜面（3代）應(yīng)檢查菌種管是否完好。儲(chǔ)存于2～ 8 ℃，有效期為3個(gè)月。

3.標(biāo)準(zhǔn)菌的復(fù)蘇、復(fù)壯及標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株的制備

3.1物品及試劑：接種針、酒精燈、移液管、75%酒精及75%酒精棉球

3.2培養(yǎng)基

改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基:用于黑曲霉復(fù)蘇、復(fù)壯.液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基:用于生孢梭菌復(fù)蘇、復(fù)壯.營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基:用于金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、大腸埃希菌、乙型副傷寒沙門菌、短小芽孢桿菌、銅綠假單胞菌復(fù)蘇、復(fù)壯。

改良馬丁培養(yǎng)基:用于白色念珠菌復(fù)蘇、復(fù)壯.3.3操作步驟：

a.打開潔凈工作臺(tái)。

b.在安瓿的外表面用75%的酒精擦拭并讓其自然風(fēng)干。

c.用一小砂輪在安瓿的上部劃一條線，用手輕輕將安瓿掰開（開啟安瓿時(shí)必須小心，因?yàn)榘碴秤鰺釙r(shí)可能會(huì)破裂）。

d.以無菌方法用一無菌吸管從已準(zhǔn)備好的上述液體培養(yǎng)基中移取0.5～0.8 ml到安瓿中。e.輕輕地旋轉(zhuǎn)安瓿以使凍干菌種和液體培養(yǎng)基充分混合并完全溶解。

f.用無菌吸管將安瓿內(nèi)菌液全部轉(zhuǎn)接到相應(yīng)的液體培養(yǎng)基。

g.根據(jù)安瓿上所標(biāo)明的不同菌種類型而將其培養(yǎng)于相應(yīng)的溫度（細(xì)菌培養(yǎng)溫度30～35℃，培養(yǎng)18～24小時(shí)；真菌培養(yǎng)溫度23～28℃，培養(yǎng)3～5天。觀察是否渾濁，渾濁說明菌種復(fù)蘇生長；若不渾濁，細(xì)菌應(yīng)延長培養(yǎng)時(shí)間至7天，真菌應(yīng)延長培養(yǎng)時(shí)間至14天，若仍未渾濁，滅菌處理。

h.黑曲霉的菌懸液先室溫待菌懸液融化后用無菌吸管吸取管內(nèi)液體1～2滴滴在改良馬丁瓊脂斜面上，用吸管涂布均勻，置23～28℃培養(yǎng)5～7天，斜面正面為黑褐色厚絨狀，色澤均一，不應(yīng)有雜色，斜面?zhèn)让鏌o色，接近菌層培養(yǎng)基略帶黃色。確認(rèn)后用含有0.05%（ml/ml）的吐溫-80的0.9%無菌氯化鈉溶液洗脫到無菌試管中。

i.取經(jīng)復(fù)蘇后的上述細(xì)菌菌液8-10ml至液體培養(yǎng)基中按g項(xiàng)操作對菌種進(jìn)行復(fù)壯。以無菌技術(shù)向復(fù)壯后的菌種中加入100ml20%的無菌甘油混勻，1-2ml/管分裝于凍存管。每個(gè)菌種制備10支，按順序進(jìn)行編號(hào)，最后一支做為質(zhì)控管進(jìn)行質(zhì)量控制，即進(jìn)行相應(yīng)的確認(rèn)。其余作為儲(chǔ)備管。黑曲霉的h項(xiàng)下洗脫液按h項(xiàng)下方法進(jìn)行復(fù)壯，制成復(fù)壯后的孢子懸液20ml。以無菌技術(shù)向復(fù)壯后的菌種中加入20ml、30%的無菌甘油混勻，1-2ml/管封存于凍存管。制備10支，按順序進(jìn)行編號(hào)，最后一支做為質(zhì)控管進(jìn)行質(zhì)量控制，即進(jìn)行相應(yīng)的確認(rèn)。其余作為儲(chǔ)備管。將上述制備好的凍存管逐支粘貼標(biāo)簽。內(nèi)容包括：菌種名稱、菌種代號(hào)、編號(hào)、代次、制備日期、制備人、貯存條件、有效期至等。

j．儲(chǔ)備菌種管制備成功，儲(chǔ)存于－20℃，有效期為三年。

3.4菌種確認(rèn)

用無菌接種環(huán)從質(zhì)控管中取細(xì)菌培養(yǎng)物接種到營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基平板上，或相應(yīng)的宜于該細(xì)菌生長的鑒別平板上，劃線分離出單個(gè)菌落。然后在30～35℃下培養(yǎng)2～3天；同樣的方法取真菌到玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基平板，并在23～28℃下培養(yǎng)7天；培養(yǎng)后，觀察其菌落形態(tài)，應(yīng)符合該菌種形態(tài)特征。

3.5污染處理

假如在該平板上發(fā)現(xiàn)有其他菌落生長，則說明或操作有污染或菌種不純。將此被污染了的培

養(yǎng)物滅菌處理。可尋找原因重新分離挑選純菌落轉(zhuǎn)接斜面菌種作為第四代。并重新制備儲(chǔ)備菌種管

3.6菌種的傳代與保藏

將菌種接種至一新鮮培養(yǎng)基上，每萌發(fā)一次即稱為一代，因此，當(dāng)原始菌種復(fù)溶并轉(zhuǎn)至新培養(yǎng)基內(nèi)生長，即認(rèn)為已傳代一次，從菌種保藏中心獲得的冷凍干燥的菌種為第0代，冷凍干燥的原始菌種開啟后轉(zhuǎn)種后為第1代，直到第3代為工作菌種。菌種的傳代次數(shù)（自原始菌種凍干粉起）不得超過5代。

菌種的傳代保藏過程

3.3項(xiàng)下標(biāo)準(zhǔn)菌的復(fù)蘇為傳第一代，復(fù)壯為第二代。傳第三代時(shí)取1支凍存管自然解凍，將其轉(zhuǎn)接斜面菌種作為工作用菌種。此時(shí)，工作用菌種為第3代。工作用菌種，分為兩類：一類用于定期傳代(W3)，一類用于實(shí)驗(yàn)用（S3）。

定期傳代用菌的傳代其操作步驟如下（斜面接種法）：

（1）從冰箱冷藏室中取出菌種斜面后，應(yīng)在室溫放置約30分鐘。

（2）將裝有新鮮配制的培養(yǎng)基菌種保藏管管壁上注明菌名及接種日期，和傳代菌種一并移入潔凈工作臺(tái)，打開紫外燈照射一小時(shí)。

（3）關(guān)閉紫外燈。點(diǎn)燃酒精燈，左手握住菌種斜面，將管口靠近火焰上方，右手拿接種棒后端，將接種環(huán)燒紅約30秒，隨后將接種棒金屬部分在火焰上燒灼，往返通過三次。

（4）右手用無名指、小指及掌部夾住管塞，左手將管口在火焰上旋轉(zhuǎn)燒灼，右手再輕輕拔開管塞，將接種環(huán)伸入管內(nèi)先在近壁的瓊脂斜面上靠一下，稍冷后再至菌苔上，刮取少量菌苔，隨即取出接種棒并將菌種管口移至火焰上方。

（5）塞上管塞，左手將菌種管放下，取營養(yǎng)瓊脂斜面（或改良馬丁瓊脂斜面）一支，照上述操作打開管塞，將接種環(huán)伸入管內(nèi)至瓊脂斜面的底部向上劃一條直線，然后從底部向上作連續(xù)曲線劃線，一直劃到斜面頂端，使細(xì)菌接種在斜面的表面上。

（6）取出接種環(huán)，在火焰上方將培養(yǎng)基管蓋上塞子，然后將接種過細(xì)菌的接種環(huán)在火焰上燒灼滅菌。

（7）將已接種好的細(xì)菌管置30～35℃細(xì)菌培養(yǎng)箱培養(yǎng)22 ～24h，真菌管置23～28℃真菌培養(yǎng)箱最多培養(yǎng)7天。

當(dāng)工作用菌種傳代代數(shù)小于5時(shí)，可直接用上一代工作用菌種轉(zhuǎn)接下一代工作用菌種，如：（W3）可直接轉(zhuǎn)接為（W4）。按上述程序操作，直至（W4）轉(zhuǎn)為（W5）為止，需重新接種，舊的工作菌種進(jìn)行銷毀。

菌種斜面的培養(yǎng)、保藏條件及時(shí)間

菌種培養(yǎng)條件及時(shí)間培養(yǎng)基保存條件及時(shí)間

大腸埃希菌(CMCC(B)44102)30～35℃22～ 24h營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基2℃～ 8 ℃保存3個(gè)月

金黃色葡萄球菌(CMCC(B)26003)30～35℃22～ 24h營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基2℃～ 8 ℃保存3個(gè)月

枯草芽孢桿菌(CMCC(B)63501)30～35℃22～ 24h營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基2℃～ 8 ℃保存3個(gè)月

銅綠假單胞菌(CMCC(B)10104)30～35℃22～ 24h營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基2℃～ 8 ℃保存3個(gè)月

乙型副傷寒沙門菌(CMCC(B)50094)30～35℃22～ 24h營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基2℃～ 8 ℃保存3個(gè)月

生孢梭菌(CMCC(B)64941)30～35℃22～ 24h營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基2℃～ 8 ℃保存3個(gè)月

白色念珠菌(CMCC(F)98001)23～28℃ 最多7天改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基2℃～ 8 ℃保存3個(gè)月

黑曲霉(CMCC(F)98003)23～28℃ 最多7天改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基2℃～ 8 ℃保存3個(gè)月

短小芽孢桿菌(CMCC(B)63602)30～35℃22～ 24h營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基2℃～ 8 ℃保存3個(gè)月

注：菌種斜面1次/周觀察狀態(tài)是否正常。

3.7菌種的使用及銷毀

每次進(jìn)行菌種復(fù)活時(shí)，只能復(fù)活一個(gè)菌種。如果要復(fù)活其他菌時(shí)，應(yīng)對所用物品重新消毒滅菌。

每次操作，都應(yīng)進(jìn)行記錄。菌種管上應(yīng)貼有牢固的標(biāo)簽。標(biāo)明菌種名稱、菌種代號(hào)、代次、傳代人、編號(hào)和傳代日期、貯存條件、有效期至等。

廢棄菌種及實(shí)驗(yàn)用品廢棄物的處理：121℃ 高壓蒸汽滅菌30分鐘。并對操作過程進(jìn)行記錄。

第二篇：食品微生物檢測實(shí)驗(yàn)室要求

自來水水池至少有兩個(gè)，工作臺(tái)，藥品試劑柜，超凈工作臺(tái)（無菌室），滅菌鍋，培養(yǎng)箱，冰箱，干燥箱，電子天平，顯微鏡，平皿，試管，三角瓶等玻璃器皿。這些都是必備基本設(shè)備，只要能擺放的下就可以。

一、微生物實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)

微生物實(shí)驗(yàn)室由準(zhǔn)備室、洗滌室、滅菌室、無菌室、恒溫培養(yǎng)室和普通實(shí)驗(yàn)室六部分組成。這些房間的共同特點(diǎn)是地板和墻壁的質(zhì)地光滑堅(jiān)硬，儀器和設(shè)備的陳設(shè)簡潔，便于打掃衛(wèi)生。

二、微生物實(shí)驗(yàn)室基本要求

（一）準(zhǔn)備室

準(zhǔn)備室用于配制培養(yǎng)基和樣品處理等。室內(nèi)設(shè)有試劑柜、存放器具或材料的專柜、實(shí)驗(yàn)臺(tái)、電爐、冰箱和上下水道、電源等。

（二）洗滌室

洗滌室用于洗刷器皿等。由于使用過的器皿已被微生物污染，有時(shí)還會(huì)存在病原微生物。因此，在條件允許的情況下，最好設(shè)置洗滌室。室內(nèi)應(yīng)備有加熱器、蒸鍋，洗刷器皿用的盆、桶等，還應(yīng)有各種瓶刷、去污粉、肥皂、洗衣粉等。

（三）滅菌室

滅菌室主要用于培養(yǎng)基的滅菌和各種器具的滅菌，室內(nèi)應(yīng)備有高壓蒸汽滅菌器、烘箱等滅菌設(shè)備及設(shè)施。

（四）無菌室

無菌室也稱接種室，是系統(tǒng)接種、純化菌種等無菌操作的專用實(shí)驗(yàn)室。在微生物工作中，菌種的接種移植是一項(xiàng)主要操作，這項(xiàng)操作的特點(diǎn)就是要保證菌種純種，防止雜菌的污染。在一般環(huán)境的空氣中，由于存在許多塵埃和雜菌，很易造成污染，對接種工作干擾很大。1.無菌室的設(shè)置

無菌室應(yīng)根據(jù)既經(jīng)濟(jì)又科學(xué)的原則來設(shè)置。其基本要求有以下幾點(diǎn)：

（1）無菌室應(yīng)有內(nèi)、外兩間，內(nèi)間是無菌室，外間是緩沖室。房間容積不宜過大，以便于空氣滅菌。最小內(nèi)間面積2×2.5＝5m2，外間面積1×2＝2m2，高以2.5m以下為宜，都應(yīng)有天花板。

（2）內(nèi)間應(yīng)當(dāng)設(shè)拉門，以減少空氣的波動(dòng)，門應(yīng)設(shè)在離工作臺(tái)最遠(yuǎn)的位置上；外間的門最好也用拉門，要設(shè)在距內(nèi)間最遠(yuǎn)的位置上。（3）在分隔內(nèi)間與外間的墻壁或“隔扇”上，應(yīng)開一個(gè)小窗，作接種過程中必要的內(nèi)外傳遞物品的通道，以減少人員進(jìn)出內(nèi)間的次數(shù)，降低污染程度。小窗寬60cm、高40cm、厚30cm，內(nèi)外都掛對拉的窗扇。

（4）無菌室容積小而嚴(yán)密，使用一段時(shí)間后，室內(nèi)溫度很高，故應(yīng)設(shè)置通氣窗。通氣窗應(yīng)設(shè)在內(nèi)室進(jìn)門處的頂棚上（即離工作臺(tái)最遠(yuǎn)的位置），最好為雙層結(jié)構(gòu)，外層為百葉窗，內(nèi)層可用抽板式窗扇。通氣窗可在內(nèi)室使用后、滅菌前開啟，以流通空氣。有條件可安裝恒溫恒濕機(jī)。

2.無菌室內(nèi)設(shè)備和用具

（1）無菌室內(nèi)的工作臺(tái)，不論是什么材質(zhì)、用途的，都要求表面光滑和臺(tái)面水平。

（2）在內(nèi)室和外室各安裝一個(gè)紫外燈（多為30W）。內(nèi)室的紫外線燈應(yīng)安裝在經(jīng)常工作的座位正上方，離地面2m，外室的紫外線燈可安裝在外室中央。

（3）外室應(yīng)有專用的工作服、鞋、帽、口罩、盛有來蘇兒水的瓷盆和毛巾、手持噴霧器和5%石炭酸溶液等。

（4）內(nèi)室應(yīng)有酒精燈、常用接種工具、不銹鋼制的刀、剪、鑷子、70%的酒精棉球、工業(yè)酒精、載玻璃片、特種蠟筆、記錄本、鉛筆、標(biāo)簽紙、膠水、廢物筐等。3.無菌室的滅菌消毒

（1）薰蒸：這是無菌室徹底滅菌的措施。無菌室使用了較長時(shí)間，污染比較嚴(yán)重時(shí)，應(yīng)進(jìn)行薰蒸滅菌?？捎眉兹?、乳酸或硫磺薰蒸。（2）噴霧：在每次使用無菌室前進(jìn)行。噴霧可促使空氣中微粒及微生物沉降，防止桌面、地面上的微塵飛場，并有殺菌作用。可用5%石炭酸噴霧。

（3）紫外線照射：在每次使用無菌室前進(jìn)行。紫外線有較好的殺菌效果。通常應(yīng)開啟紫外線燈照射30～60min。

（五）恒溫培養(yǎng)室1.培養(yǎng)室的設(shè)置

（1）培養(yǎng)室應(yīng)有內(nèi)、外兩間，內(nèi)室是培養(yǎng)室，外室是緩沖室。房間容積不宜大，以利于空氣滅菌，內(nèi)室面積在3.2×4.4＝14m2左右，外室面積在3.2×1.8＝6m2左右，高以2.5m左右為宜，都應(yīng)有天花板。

（2）分隔內(nèi)室與外室的墻壁上部應(yīng)設(shè)帶空氣過濾裝置的通風(fēng)口。（3）為滿足微生物對溫度的需要，需安裝恒溫恒濕機(jī)。（4）內(nèi)外室都應(yīng)在室中央安裝紫外線燈，以供滅菌用。2.培養(yǎng)室內(nèi)設(shè)備及用具（1）內(nèi)室通常配備培養(yǎng)架和搖瓶機(jī)（搖床）。常用的搖瓶機(jī)有旋轉(zhuǎn)式、往復(fù)式兩種。（2）外室應(yīng)有專用的工作服、鞋、帽、口罩、手持噴霧器和5%石炭酸溶液、70%酒精棉球等。

3.培養(yǎng)室的滅菌、消毒 同無菌室的滅菌、消毒措施。小規(guī)模的培養(yǎng)可不啟用恒溫培養(yǎng)室，而在恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行。

（六）普通實(shí)驗(yàn)室

進(jìn)行微生物的觀察、計(jì)數(shù)和生理生化測定工作的場所。室內(nèi)的陳設(shè)因工作側(cè)重點(diǎn)不同而有很大的差異。一般均配備實(shí)驗(yàn)臺(tái)、顯微鏡、柜子及凳子。實(shí)驗(yàn)臺(tái)要求平整、光滑，實(shí)驗(yàn)柜要足以容納日常使用的用具及藥品等。

第三篇：微生物實(shí)驗(yàn)室工作總結(jié)

微生物實(shí)驗(yàn)室工作總結(jié)

忙碌的2011年已經(jīng)走遠(yuǎn)，總結(jié)一年的工作，盡管有了一定的進(jìn)步和成績，但在一些方面還存在著不足，個(gè)別工作做的還不夠完善，這有待于在今后的工作中加以改進(jìn)。微生物室將逐漸建立建全各項(xiàng)政策規(guī)章制度，修正完善SOP文件，努力使思想覺悟和工作效率全面進(jìn)入一個(gè)新水平，新的起點(diǎn)意味著新的機(jī)遇新的挑戰(zhàn)，可以預(yù)料我們的工作將更加繁重，要求也更高，需掌握的知識(shí)更多更廣。為此，我將更加勤奮的工作，刻苦的學(xué)習(xí)，努力提高文化素質(zhì)和各種工作技能，為微生物室的發(fā)展做出更大的貢獻(xiàn)。一定努力打開一個(gè)工作新局面。我將從以下幾點(diǎn)做科室總結(jié)：

一． 微生物實(shí)驗(yàn)室在合理應(yīng)用抗生素中作用：怎樣才能充分發(fā)揮微生物檢測報(bào)告的作用

將經(jīng)驗(yàn)用藥改為根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果合理使用抗生素，從而有效避免耐藥菌的產(chǎn)生首先要規(guī)范標(biāo)本的采集：這是病原菌檢測正確與否的關(guān)鍵，若標(biāo)本的采集與處理不符合要求，則細(xì)菌培養(yǎng)的結(jié)果就沒有意義，甚至?xí)o臨床造成誤導(dǎo)，延誤對患者的正確治療，將造成嚴(yán)重后果。其次是規(guī)范化操作程序和加強(qiáng)病原菌的檢驗(yàn)提高時(shí)效性和準(zhǔn)確性，提高病原菌的陽性率和準(zhǔn)確率，鑒定出真正的病原菌，有菌部位標(biāo)本，如痰，咽拭子，糞便等在培養(yǎng)出細(xì)菌時(shí)面臨判斷該菌是致病菌還是正常菌群，以免給臨床造成誤導(dǎo)。一般標(biāo)本采集到明確檢驗(yàn)結(jié)果需要3—4天，有是需要更長時(shí)間，此時(shí)患者的病情可能早已發(fā)生了變化。檢驗(yàn)報(bào)告對臨床而言，已失去了相應(yīng)的價(jià)值，為讓臨床及時(shí)了解病原菌診斷情況應(yīng)積極與臨床大夫溝通。最后

二．與臨床溝通：臨床微生物實(shí)驗(yàn)室比其他任何實(shí)驗(yàn)室都需要與臨床進(jìn)行良好的溝通，微生物實(shí)驗(yàn)室的各種檢驗(yàn)數(shù)據(jù)尤其是藥敏試驗(yàn)結(jié)果以及病原菌的分離報(bào)告只有與臨床結(jié)合分析才能真正知道我們的價(jià)值所在，另外，這種溝通也會(huì)導(dǎo)致臨床在感染性疾病的診治方面采取更有效的手段，更合理的應(yīng)用抗菌藥物。

1、從提高自身素質(zhì)開始，提高整個(gè)實(shí)驗(yàn)室的整體素質(zhì)，增加各方面的知識(shí)儲(chǔ)備以及綜合分析能力與判斷能力。

2、把好標(biāo)本采集與接種關(guān)，盡可能要求大夫多注明患者情況特別是以往和目前使用抗菌藥物情況，不合格的標(biāo)本盡量要求重新留取。

3、及時(shí)與臨床大夫溝通，進(jìn)一步了解病人詳細(xì)情況。

4、對每一張檢驗(yàn)報(bào)告都要認(rèn)真分析，包括分離菌與藥敏結(jié)果

5、科室交待，細(xì)菌標(biāo)本送檢時(shí)間，要讓他們知道標(biāo)本一旦留取，要盡快送到細(xì)菌室，不能和其他標(biāo)本一樣等到聚到一起送，從而導(dǎo)致無菌變得有菌。

6、有特殊菌生長，先電話通知臨床床醫(yī)生，這樣他們可以調(diào)整用藥。

7、人認(rèn)為其實(shí)藥敏結(jié)果比具體的細(xì)菌名更加重要，我們不需要拘伲于菌名的百分百準(zhǔn)確。

三．微生物檢測及消毒，滅菌的檢測：應(yīng)做好每月的院感檢測為醫(yī)院感染保駕護(hù)航，對某些科室的空氣，工作人員手，桌面等細(xì)菌學(xué)檢測出現(xiàn)超標(biāo)，不能因各種人情關(guān)系出現(xiàn)瞞報(bào)或漏報(bào)的情況。應(yīng)實(shí)事求是上報(bào)院感科。

四．明年的計(jì)劃：新技術(shù)和新項(xiàng)目的開展；我院今年成功升入二級(jí)甲等醫(yī)院，隨著病原量的增加，我們應(yīng)克服一切困難，想盡一切辦法，積極開展新項(xiàng)目，兼顧經(jīng)濟(jì)效應(yīng)和社會(huì)效應(yīng)，充分發(fā)展前期引進(jìn)的儀器設(shè)備的功能，開展臨床迫切需要的檢驗(yàn)項(xiàng)目，引進(jìn)新設(shè)備：隨著微生物實(shí)驗(yàn)室細(xì)菌量的增加及保證標(biāo)本質(zhì)量，明年?duì)幦≠忂M(jìn)：CO2 孵育箱，有條件可購置一臺(tái)半自動(dòng)細(xì)菌鑒定儀。

總之，2011年是一個(gè)收獲的一年，我們一定會(huì)不辱使命，會(huì)不斷改進(jìn)自我，創(chuàng)造一個(gè)輝煌的太航醫(yī)院。

微生物實(shí)驗(yàn)室 2011-12-9

第四篇：微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)章制度

實(shí)驗(yàn)室生物安全操作規(guī)范

（一級(jí)生物安全）

一.在實(shí)驗(yàn)期間實(shí)驗(yàn)室門需保持關(guān)閉狀態(tài)。二.按規(guī)程操作，盡量避免氣溶膠的產(chǎn)生。

三.在工作區(qū)域內(nèi)不允許吸煙、進(jìn)食、喝飲料以及儲(chǔ)存食物。四.工作期間需穿工作服、戴手套和口罩。

五.不允許用嘴吸吸液管，應(yīng)使用機(jī)械的吸液設(shè)備。六.避免使用皮下注射針。

七.完成實(shí)驗(yàn)操作后，離開實(shí)驗(yàn)室前需洗手。八.定期消毒工作臺(tái)，有液體飛濺應(yīng)立即消毒。

九.生物廢棄物丟棄前需消毒，其它污染的原料器材在清洗、再利用或丟棄前也需消毒。

十.污染物應(yīng)被封口，被耐用的、防漏的容器袋包裹，高壓消毒后送到指定地點(diǎn)銷毀。

十一.控制昆蟲和嚙齒類動(dòng)物的出沒。

十二.保持工作區(qū)的清潔消毒工作。

微生物實(shí)驗(yàn)室工作制度

一.在科主任的領(lǐng)導(dǎo)下，由實(shí)驗(yàn)室組長負(fù)責(zé)安排日常工作流程和工作人員的任務(wù)。

二.進(jìn)入工作室穿工作衣、戴工作帽、口罩，進(jìn)入無菌接種室應(yīng)穿隔離衣、褲、帽、口罩、手套，換工作鞋。

三.堅(jiān)持做好室內(nèi)室間質(zhì)控工作，做好室內(nèi)質(zhì)控的記錄和室間質(zhì)評的回報(bào)工作。

四.收到檢驗(yàn)標(biāo)本應(yīng)及時(shí)處理，嚴(yán)格按照操作規(guī)程操作，并及時(shí)發(fā)出報(bào)告。

五.發(fā)現(xiàn)有烈性傳染的標(biāo)本應(yīng)嚴(yán)格做好標(biāo)本處理后的消毒工作，或轉(zhuǎn)送有關(guān)部門處理。發(fā)現(xiàn)特殊陽性標(biāo)本和難以確定的標(biāo)本結(jié)果，應(yīng)報(bào)告組長或主任，討論后方可填發(fā)報(bào)告單。六.做好培養(yǎng)基的配制、消毒工作和日常消耗品的準(zhǔn)備。七.經(jīng)常保持工作間的清潔衛(wèi)生，做好日常標(biāo)本的污物處理、消毒工作。定時(shí)定期做好無菌室的消毒工作。

八.配合臨床相關(guān)科室做好病房、手術(shù)室等的院內(nèi)感染監(jiān)測工作，并做好監(jiān)測資料的記錄、統(tǒng)計(jì)和分析工作。發(fā)現(xiàn)異常，及時(shí)報(bào)告院內(nèi)感染管理委員會(huì)。九.做好菌種的保存工作。

十.做好每天的工作量統(tǒng)計(jì)工作，并做好特殊陽性結(jié)果的登記統(tǒng)計(jì)工作。做好交接班工作。

第五篇：微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)

平陸中學(xué)高二生物

課題一：微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)第二課時(shí)

車柳順2.24學(xué)習(xí)目標(biāo)：

1、明確配制培養(yǎng)基的步驟

2、說出純化微生物的方法和步驟

目標(biāo)一：制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基

1、步驟：計(jì)算→稱量→溶化→→滅菌→倒平板。

2、演示倒平板操作

導(dǎo)思：（完成倒平板操作的討論題1——4）

目標(biāo)二：純化大腸桿菌

1、微生物接種最常用的方法是劃線法和涂布平板法。

2、平板劃線法通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)分散到培養(yǎng)基的表面。稀釋涂布平板法則是將菌液進(jìn)行一系列的梯度，然后將不同稀釋度的菌液分別到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。

3、總結(jié)平板劃線法和稀釋涂布平板法的操作步驟并演示

（1）平板劃線操作：

導(dǎo)思：（完成平板劃線法的討論題）

（2）稀釋涂布平板法：

導(dǎo)思：（完成稀釋涂布平板法操作的討論題）

4、平板劃線法和稀釋涂布平板法的異同點(diǎn)是

目標(biāo)三：菌種的保存

（1）對于頻繁使用的菌種，可以采用的方法

（2）對于需要長期保存的菌種，可以采用的方法。

自我反思

1、以下關(guān)于制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的敘述錯(cuò)誤的是（）

A.操作順序?yàn)橛?jì)算、稱量、溶化、倒平板、滅菌

B.將稱量好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯

C.將培養(yǎng)皿冷卻至50C左右時(shí)進(jìn)行倒平板

D.待平板冷卻凝固約5—10min后將平板倒過來放置

2、有關(guān)倒平板的操作錯(cuò)誤的是（）

A.將滅過菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上

B.將打開的錐形瓶瓶口迅速通過火焰

C.將培養(yǎng)皿打開，培養(yǎng)皿蓋倒放在桌面上

D.等待平板冷卻凝固后需要倒過來放置

3、有關(guān)稀釋涂布平板法，敘述錯(cuò)誤的是（）

A.先將菌液進(jìn)行一系列的稀釋

B.然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基的表面

C.適宜條件下培養(yǎng)

D.結(jié)果都可在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落

4、產(chǎn)生標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)菌落的細(xì)菌的最初數(shù)目和培養(yǎng)基分別是（）

A.一個(gè)細(xì)菌、液體培養(yǎng)基B.許多細(xì)菌、液體培養(yǎng)基

C.一個(gè)細(xì)菌、固體培養(yǎng)基D.許多細(xì)菌、固體培養(yǎng)基