第一篇：中科大生物化學與分子生物學實驗原理2015試題

簡答題

1.用數(shù)學術(shù)語描述熒光定量PCR的定量依據(jù) 2.等速電泳的原理以及定性定量

3.在SDS-PAGE中，請給出濃縮膠，分離膠，上樣緩沖液，電泳緩沖液的PH值（4分）并說明原因

4.用SDS-PAGE對某樣品中的目的蛋白進行分離時，發(fā)現(xiàn)此蛋白大小符合目的蛋白的大小，但是卻并不能確定是否為目的蛋白，因此需要進一步地對此種蛋白進行液相質(zhì)譜分析。請簡述實驗步驟

5.由于GCMS具有高靈敏性，在加入溶劑時都能夠檢測到峰型。那么應(yīng)該如何設(shè)計GCMS實驗，檢測某種樣品中是否含有需要的蛋白，請設(shè)計實驗 6.酵母雙雜交的實驗原理以及優(yōu)缺點 7.電滲流形成原理以及影響因素

8.簡述原核限制修飾系統(tǒng)以及二型限制性內(nèi)切酶。9.簡述蛋白質(zhì)純化的基本策略

10.簡述體外定向進化技術(shù)的核心技術(shù)環(huán)節(jié)

11.PET系統(tǒng)成為大腸桿菌中醫(yī)院蛋白表達首選載體的原因

12.以CH4為例，請簡要說明質(zhì)譜中4個分子量的名稱以及含義

以上是全部2015-2016簡答，選擇回憶不出來

第二篇：生物化學與分子生物學

生物化學與分子生物學

江西農(nóng)業(yè)大學生物化學與分子生物學專業(yè)于2003年獲得碩士學位授予權(quán)，2004年開始招收碩士研究生，是江西農(nóng)業(yè)大學的重點建設(shè)和優(yōu)勢學科之一。

碩士點有導(dǎo)師11人，其中博士生導(dǎo)師2人，教授7人，具有博士學位的9人，是一支以博士、碩士學歷教師為主要骨干，職稱和年齡結(jié)構(gòu)合理的師資隊伍。學科以科技部、農(nóng)業(yè)部、江西省動物生物技術(shù)重點實驗室和生物化學與分子生物學實驗室為依托，擁有較為先進和完備的現(xiàn)代儀器設(shè)備，承擔了一批國家級重點項目和省級重點科研項目，研究經(jīng)費達1000余萬元，主要以生物大分子如DNA、RNA、蛋白質(zhì)（酶）、抗體、新活性物質(zhì)為對象，進行結(jié)構(gòu)與功能、代謝、生物信息的研究方向。培養(yǎng)熟練掌握生物化學與分子生物學，以及生物學相關(guān)學科的基本理論和基礎(chǔ)知識，受到相關(guān)專業(yè)技能的訓(xùn)練，具備進一步攻讀博士研究生的良好潛質(zhì)，同時具備較扎實理論知識、實踐技能和創(chuàng)新意識的高級專業(yè)人才。8年來共培養(yǎng)6屆畢業(yè)生88人，發(fā)表論文共160篇。其中SCI、EI、ISTP收錄14篇。在植物生物化學、動物生物化學、動物功能基因組學、生殖生物化學、植物資源利用等研究方向形成了自身的優(yōu)勢與特色。

第三篇：生物化學與分子生物學課程實驗的體會

生物化學與分子生物學課程實驗的體會

井岡山大學醫(yī)學院口腔10（本1）班張佳

每次實驗課前，老師都要求我們做好每一次實驗課前的理論原理預(yù)習,這樣老師可以在盡可能短的時間內(nèi)說明實驗操作的注意事項,使我們盡快了解和掌握實驗的原理,操作過程,順利地完成實驗操作,以期達到更好的實踐效果。在實驗操作的選擇上,雖然實驗課時有限，老師還是盡可能讓我們觸及各種不同實驗,以及盡可能系統(tǒng)地實驗操作，本學期我們共進行了八個實驗。在實行實驗分組的過程中,不同的實驗以1-2人為一組,否則較大的實驗組難以達到人人動手操作的目的要求。

每一次實驗課程都要及時總結(jié)并交實驗報告,對我們在實驗過程中碰到的問題及時發(fā)現(xiàn),及時解決,對一些共性的問題，老師會重新強調(diào),并且在后續(xù)的實驗課程中給予針對性地預(yù)防；還有一些個性問題，老師也會講解給部分同學,以免造成一誤再誤。學生通過總結(jié)實驗結(jié)果、撰寫實驗報告，在師生之間進行實驗總結(jié)、交流和報告，可以培養(yǎng)學生分析實驗現(xiàn)象、總結(jié)實驗結(jié)果和撰寫實驗論文的能力。這對于我們的科研素養(yǎng)的養(yǎng)成和創(chuàng)新能力的培養(yǎng)是有著重要的作用。老師要求我們在實驗這個強調(diào)動手能力的課程上更需要打好堅實的基礎(chǔ),建立嚴謹?shù)膶嶒炞黠L,這將對我們將來踏入工作崗位起到重要的作用。

我認為實驗課在課程學習環(huán)節(jié)中占有特殊的地位，它可以使我們加深對所學課程基本理論和基本概念的理解，訓(xùn)練實驗技能，培養(yǎng)我 1

們分析問題、解決問題的能力和嚴謹求實的科學態(tài)度。如何培養(yǎng)具有一流素質(zhì)和創(chuàng)造能力的人才，相信也是實驗老師面臨的巨大挑戰(zhàn)?？v觀以往中學的實驗，普遍存在著一些問題，如在當前的應(yīng)試制度下，學生注重理論學習，輕視實驗學習思想還很嚴重；實驗教學內(nèi)容重復(fù)、實驗教學方法單

一、實驗教學的水平和裝備條件差異很大的問題依然存在。

生物化學與分子生物學是醫(yī)學專業(yè)基礎(chǔ)課之一，涉及醫(yī)學的方方面面，也是一門實驗學科，實驗是理論的來源，是理論的基礎(chǔ)，實驗先于理論，也可驗證理論。實驗學習有著不可替代的地位，實驗的目的不僅要加深對理論知識的理解，而且要利于實驗技能、研究、分析和解決問題的綜合能力的培養(yǎng)。生物化學與分子生物學實驗是生物化學與分子生物學學習中的重要環(huán)節(jié)，學好實驗，不僅使我加深理解生物化學的基礎(chǔ)知識，而且還培養(yǎng)我嚴肅認真的科學態(tài)度，掌握分析、研究、判斷、推理的科學方法及培養(yǎng)各種能力的重要手段。

分子生物學實驗具有完整性和連貫性,但是我們的上課時間分散,如果能夠有效地集中時間,完成綜合性的實驗,將對學生整體理解實驗設(shè)計思路,全程地跟蹤和了解實驗具體過程有很大的幫助，針對這一問題，我們老師將一些實驗列在一起進行實驗。我們這個學年總共有八個實驗：生物化學基本操作技術(shù)，溴甲酚綠法測定檢驗蛋白質(zhì)，血清ALT標準曲線制作，血清ALT活性測定，血清蛋白乙酸纖維膜電泳，血清葡萄糖的測定，兔全血DNA提取，DNA瓊脂糖凝膠電泳。

我最得意的實驗：血清蛋白乙酸纖維膜電泳實驗，一個混合的蛋

白質(zhì)樣品由于各蛋白質(zhì)的等電點不同，在相同的pH溶液中所帶的電荷性質(zhì)不同，電荷的數(shù)目不同，在電場中各種蛋白質(zhì)泳動的速度和方向也不相同。從而使蛋白質(zhì)混合樣分離開來。溶液的pH值：溶液的pH值決定了帶電顆粒的解離程度，也決定了物質(zhì)所帶凈電的多少。對蛋白質(zhì)和氨基酸等兩性電解質(zhì)而言，pH值離等電點越遠，顆粒所帶凈電荷越多，泳動速度也越快，反之越慢。因此，分離某一蛋白質(zhì)混合物時，應(yīng)選擇一種能擴大各種蛋白質(zhì)所帶電荷量差異的pH值，以利于各種蛋白質(zhì)的分離。為使電泳過程中溶液的pH值恒定，必須使用緩沖溶液。本次實驗使用的是巴比妥-巴比妥鈉緩沖溶液。

我認為，綜合性實驗不應(yīng)僅局限于實驗內(nèi)容的綜合，還應(yīng)包括實驗內(nèi)容、實驗方法、實驗手段的綜合。因此可以把綜合性實驗理解為實驗內(nèi)容涉及相關(guān)的綜合知識或運用綜合的實驗方法、實驗手段、對學生的知識、能力、素質(zhì)形成綜合的學習與培養(yǎng)的實驗。綜合性實驗的特征應(yīng)體現(xiàn)在:實驗內(nèi)容的復(fù)合性、實驗方法的多元性、實驗手段的多樣性、人才培養(yǎng)的綜合性。它不僅讓學生學習知識，掌握實驗技能,而且還要培養(yǎng)和提高學生綜合應(yīng)用實驗方法和技能以及思考問題和解決問題的能力。

在此，我提議老師可以提供給學生小題目，學生自己查閱文獻資料，自己制定方案，自行開展實驗，在必要的情況下，可以請教老師，完成實驗可能有幾種不同方法，學生通過分析、比較，選擇自己認為是可行的，合適的方案進行實驗。我覺得這樣從實驗中思考問題要閱讀資料以理論和新知識來討論，使理論學習與實踐學習有明顯的研究

性。開設(shè)這樣綜合性、設(shè)計性實驗，有助于提高和培養(yǎng)學生綜合能力和培養(yǎng)學生創(chuàng)新能力。在實驗過程中，學生的操作可以不局限于實驗指導(dǎo)中規(guī)定的操作內(nèi)容，而是將一部分試劑配制與實驗內(nèi)容相結(jié)合，使學生在實驗技能方面得到多層次的訓(xùn)練。

第四篇：生物化學與分子生物學專業(yè)

生物化學與分子生物學專業(yè)

專業(yè)簡介

學科：理學

門類：生物科學類

專業(yè)名稱：生物化學與分子生物學專業(yè)

生物化學與分子生物學是當前自然科學中發(fā)展最快、實踐影響最大的學科之一。生物化學是研究生物有機體的化學組成和生命過程中化學變化的科學，屬于生命科學的基礎(chǔ)和前沿學科；分子生物學是從分子水平上研究生命現(xiàn)象，它與生物化學密切相關(guān)，正以驚人的速度發(fā)展，已成為當前生物學發(fā)展的熱點。本專業(yè)研究的主要內(nèi)容包括：生物大分子的結(jié)構(gòu)與功能，遺傳信息的傳遞及表達，代謝過程及其調(diào)控，生物資源活性成分的分離純化，生化與分子生物學技術(shù)的原理及應(yīng)用等。這些研究將為相關(guān)學科的發(fā)展提供理論和方法，并在工、農(nóng)、醫(yī)等領(lǐng)域有廣泛的實踐意義。

該專業(yè)的特點是側(cè)重于從分子和微觀水平來認識和理解生命科學現(xiàn)象，學習從分子和微觀水平上改造生物和提取制備新型醫(yī)藥、食品、酶制劑、生物活性物質(zhì)等生物產(chǎn)品的方法。

專業(yè)信息

培養(yǎng)目標：本專業(yè)重視學生實踐能力的培養(yǎng)，使學生掌握最新的理論知識和研究方法，力求使學生具有良好的科學素養(yǎng)和創(chuàng)新能力、具有從事科研、教學、生產(chǎn)、管理等工作的能力。

培養(yǎng)要求：本專業(yè)要求學生全面、扎實地學習數(shù)、理、化、外語、計算機知識，系統(tǒng)地學習生物化學、細胞生物學、普通遺傳學、微生物學、分子生物學等現(xiàn)代生命科學基礎(chǔ)課程，同時強化基因工程、細胞工程、發(fā)酵工程、酶工程、生物制藥、免疫學等知識和技能的訓(xùn)練。

修業(yè)年限：以4年制為基礎(chǔ)，實行三至六年的彈性學制。

授予學位：理學學士學位。

主干學科：免疫學及實驗、基因工程、酶工程、細胞工程及實驗、發(fā)酵工程及實驗、生物制藥學、生物技術(shù)大實驗。

主要課程：植物生物學及實驗、動物生物學及實驗、生物化學及實驗、微生物學及實驗、普通遺傳學及實驗、細胞生物學及實驗、分子生物學。

專業(yè)就業(yè)狀況

畢業(yè)生能勝任理、工、農(nóng)、醫(yī)、環(huán)境等領(lǐng)域的研究、開發(fā)、管理以及教學研究工作。畢業(yè)生可報考相關(guān)學科高層次研究生繼續(xù)深造，優(yōu)秀學生可保送進入研究生階段學習。

院校分布(部分)

遼寧大學。

第五篇：《生物化學與分子生物學》教學大綱

分子生物學（Molecular Biology）

（50學時）

一、前言

本課程面向生物技術(shù)專業(yè)和生物科學專業(yè)，學時50，學分3，屬于專業(yè)必修課，先修課程為生物化學。

二、課程的性質(zhì)、地位和任務(wù)：

本課程首先介紹分子生物學的含義,它在生命科學中的位置、發(fā)展現(xiàn)狀及展望以及基因組織包括DNA結(jié)構(gòu)、復(fù)制、突變、修復(fù)和重組。同時兼顧學科發(fā)展動向,著重涉及當今分子生物學應(yīng)用技術(shù)即分子克隆工具酶、電泳技術(shù)、載體、DNA及RNA制備、構(gòu)建DNA文庫、遺傳轉(zhuǎn)化、基因表達、PCR、RFLP、RAPD,還介紹了蛋白質(zhì)合成及分析。旨在使研究生了解現(xiàn)代分子生物學理論的新進展并為相關(guān)學科從分子水平上闡明問題提供知識和技術(shù)。

三、教學基本要求和方法：

通過對本課程的學習，要求學生掌握基因概念在分子水平上的發(fā)展與演變、基因的分子結(jié)構(gòu)和特點、基因的復(fù)制、基因表達（在轉(zhuǎn)錄、翻譯水平）的基本原理、基因表達調(diào)控的基本模式、基因發(fā)生突變與交換及DNA遺傳多型性檢測的分子生物學原理。

四、授課教材及主要參考書目 教材：

P.C.Turner,A.G.McLennan,A.D.Bates&M.R.H.White 1999 分子生物學（Molecular Biology）科學出版社

參考書目：

黃翠芬 1987 遺傳工程理論和方法 科學出版社 盛祖嘉等 1988 分子遺傳學 復(fù)旦大學出版社 齊義鵬 1989 基因工程原理和方法 武漢大學出版社 吳乃虎 1991 基因工程原理 高等教育出版社 1998 基因工程原理(第二版)科學出版社 金冬雁 黎孟楓等譯 1992 分子克隆實驗指南 科學出版社 謝友菊 1992 遺傳工程概論 北京農(nóng)業(yè)大學出版社 閻隆飛、張玉麟 1993 分子生物學 北京農(nóng)業(yè)大學出版社 閻隆飛、張玉麟 1997 分子生物學(第二版)北京農(nóng)業(yè)大學出版社 徐洵、劉震乾 1993 DNA重組技術(shù) 科學出版社 盧圣棟 1993 現(xiàn)代分子生物學實驗技術(shù) 高等教育出版社 李德葆 徐平1994 重組DNA原理和方法 淅江科學技術(shù)出版社 孫志賢 1995 現(xiàn)代生物化學理論與研究技術(shù) 軍事醫(yī)學科學出版社 林萬明等 1995 PCR技術(shù)操作和應(yīng)用指南 人民軍醫(yī)出版社 金冬雁 1996 英漢分子生物學與生物工程詞匯 科學出版社 1998 基因及其操作原理 武漢大學出版社 金冬雁等 1996 核酸和蛋白的化學合成與序列分析 科學出版社 夏其昌 1997 蛋白質(zhì)化學研究技術(shù)與進展 科學出版社 科學出版社名詞室 1997 英漢生物學詞匯（第二版）科學出版社 朱玉賢等 1997 現(xiàn)代分子生物學 高等教育出版社 瞿禮嘉等 1998 現(xiàn)代生物技術(shù)導(dǎo)論 高等教育出版社 Robert.F.Weaver 2000 分子生物學(in English)科學出版社 Sambrook J.等 1982 Molecular Cloning;A Laboratiry Manual 1989(2nd edition)Cold Spring Harbor Laboratory Press Turner等 1999 分子生物學(in English)科學出版社

五、教學內(nèi)容及學時分配： 第一章 細胞與大分子（2學時）

1、目的要求：掌握細胞和大分子的分類及用以分析的一些方法。

2、要點： 第一節(jié) 細胞分類

1.真細菌 2.古細菌 3.真核生物 4.分化 第二節(jié) 亞細胞器

1.細胞核 2.線粒體與葉綠體 3.內(nèi)質(zhì)網(wǎng) 4.微體 5.細胞器的分離 第三節(jié) 生物大分子

1.蛋白質(zhì)和核酸 2.多糖 3.脂類 4.復(fù)雜大分子 第四節(jié) 大分子的組裝

1.蛋白質(zhì)復(fù)合體 2.核蛋白 3.膜

4.非共價相互作用

第二章 原核與真核生物的染色體結(jié)構(gòu)（2學時）

1、目的要求：掌握DNA如何整合進原核和真核生物復(fù)雜的基因組中。

2、要點

第一節(jié) 原核生物的染色體結(jié)構(gòu)

1.大腸桿菌染色體 2.DNA結(jié)構(gòu)域 3.基因組超螺旋 4.DNA結(jié)合蛋白 第二節(jié) 染色質(zhì)結(jié)構(gòu)

1.染色質(zhì) 2.組蛋白 3.核小體 4.H1的功能 5.連接DNA 6.30nm纖絲 7.高級結(jié)構(gòu)

第三節(jié) 真核生物的染色體結(jié)構(gòu)

1.有絲分裂染色體 2.著絲粒 3.端粒 4.間期染色體 5.異染色質(zhì) 6.常染色質(zhì) 7.DNaseⅠ超敏性 8.CpG甲基化 9.組蛋白變異體和修飾 第四節(jié) 基因組復(fù)雜度

1.非編碼DNA 2.復(fù)性動力學 3.單一序列DNA 4.串聯(lián)基因簇 5.分散重復(fù)DNA 6.衛(wèi)星DNA 7.遺傳多態(tài)性 第五節(jié) 遺傳信息流

1.中心法則 2.原核基因表達 3.真核基因表達

第三章 DNA復(fù)制（4學時）

1、目的要求：重點掌握DNA復(fù)制的過程，DNA復(fù)制在原核生物與真核生物中的區(qū)別。

2、要點：

第一節(jié) DNA復(fù)制概述

1.半保留機制

2.復(fù)制子、復(fù)制起點與終點 3.半不連續(xù)復(fù)制 4.RNA引導(dǎo) 第二節(jié) 細菌的DNA復(fù)制

1.實驗系統(tǒng) 2.起始 3.解旋 4.延伸 5.終止與分離 第三節(jié) 細胞周期

1.細胞周期 2.細胞周期4個時期 3.檢驗點及其調(diào)控

4.細胞周期蛋白和依賴于細胞周期蛋白的激酶 5.E2F和RB的調(diào)控

6.細胞周期的激活、抑制與癌癥 第四節(jié) 真核生物的DNA復(fù)制

1.實驗系統(tǒng) 2.起始點與起始 3.復(fù)制叉 4.核基質(zhì) 5.端粒的復(fù)制

第四章 DNA損傷、修復(fù)與重組（4學時）

1、目的要求：了解導(dǎo)致DNA損傷的因素，掌握基因誘變、DNA重組和DNA修復(fù)的概念和方法。

2、要點： 第一節(jié) 誘變

1.突變 2.復(fù)制忠實性 3.物理誘變劑 4.化學誘變劑 5.直接誘變 6.間接誘變 第二節(jié) DNA損傷

1.DNA損傷 2.氧化性損傷 3.烷基化 4.聚化加合物 第三節(jié) DNA修復(fù)

1.光復(fù)活 2.烷基轉(zhuǎn)移酶 3.切除修復(fù) 4.錯配修復(fù) 5.遺傳性的修復(fù)缺陷 第四節(jié) 重組

1.同源重組 2.位點特異性重組 3.轉(zhuǎn)座作用

第五章 基因操作（4學時）

1、目的要求：掌握現(xiàn)有的對DNA進行操作的技術(shù)，學習用簡單的DNA克隆策略圖說明問題。

2、要點：

第一節(jié) DNA克隆概述

1.DNA克隆 2.宿主和載體 3.亞克隆 4.DNA文庫 5.篩選文庫 6.克隆分析 第二節(jié) 質(zhì)粒DNA的制備

1.載體質(zhì)粒 2.質(zhì)粒的小量制備 3.堿裂解 4.酚抽提 5.乙醇沉淀 6.氯化銫梯度 第三節(jié) 限制酶與電泳

1.限制性內(nèi)切核酸酶 2.識別序列 3.黏末端 4.限制性酶解 5.瓊脂糖凝膠電泳 6.DNA片段的分離

第四節(jié) 連接、轉(zhuǎn)化與重組體分析

1.DNA連接 2.重組DNA分子 3.堿性磷酸酶 4.轉(zhuǎn)化 5.篩選 6.轉(zhuǎn)化率 7.篩選轉(zhuǎn)化子 8.轉(zhuǎn)化子的增殖與保存 9.凝膠分析 10.插入片段定向

第六章 克隆載體（4學時）

1、目的要求：了解常用的適合于各種用途的克隆載體。

2、要點：

第一節(jié) 質(zhì)粒載體的設(shè)計

1.連接產(chǎn)物 2.雙抗生素抗性 3.藍—白顏色篩選 4.多克隆位點 5.已克隆插入片段的轉(zhuǎn)錄 6.表達載體 第二節(jié) 噬菌體載體

1.λ噬菌體 2.λ置換型載體 3.包裝與侵染 4.噬菌斑的形成 5.λ溶原體 6.M13噬菌體載體 7.克隆到M13 8.質(zhì)粒—M13雜合載體 第三節(jié) 黏粒、YAC與BAC 1.大片段DNA的克隆 2.黏粒載體 3.YAC載體

4.用釀酒酵母的篩選 5.BAC載體 第四節(jié) 真核生物載體

1.克隆到真核生物 2.轉(zhuǎn)染真核細胞 3.穿梭載體 4.酵母附加型質(zhì)粒 5.根癌農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒 6.桿狀病毒 7.哺乳動物病毒載體 8.直接基因轉(zhuǎn)移

第七章 基因文庫與篩選（4學時）

1、目的要求：介紹用DNA文庫來分離篩選新的基因序列的過程與方法。

2、要點：

第一節(jié) 基因組文庫

1.具代表性的基因文庫 2.文庫大小 3.基因組DNA 4.載體 第二節(jié) cDNA文庫

1.mRNA分離、純化與分級分離 2.cDNA的合成 3.cDNA末端的處理 4.與載體的連接 第三節(jié) 篩選流程

1.篩選 2.菌落及噬菌斑雜交 3.表達篩選 4.雜交扣留與釋放 5.染色體步移

第八章 克隆DNA的分析與應(yīng)用（2學時）

1、目的要求：了解涉及DNA測序和克隆序列分析方面的一些更加復(fù)雜和詳細的方法，熟練掌握PCR技術(shù)的原理和過程。

2、要點：

第一節(jié) 克隆的鑒定

1.鑒定 2.限制圖譜 3.部分酶解 4.核酸標記 5.DNA和RNA雜交 第二節(jié) 核酸測序

1.DNA測序 2.RNA測序 3.序列數(shù)據(jù)庫 4.序列分析 5.基因組測序計劃 第三節(jié) 聚合酶鏈式反應(yīng)

1.PCR 2.PCR循環(huán) 3.模板 4.引物 5.酶

6.PCR的條件優(yōu)化 7.PCR派生技術(shù) 第四節(jié) 克隆基因的組構(gòu)

1.組構(gòu)

2.在基因組DNA上定位cDNA 3.S1核酸酶作圖 4.引物延伸 5.凝膠阻滯 6.DNaseⅠ足跡法 7.報道基因 第五節(jié) 克隆基因的誘變

1.缺失突變 2.定點誘變 3.PCR誘變 第六節(jié) 克隆技術(shù)的應(yīng)用

1.應(yīng)用 2.重組蛋白 3.遺傳修飾生物體 4.DNA指紋分析 5.醫(yī)學診斷 6.基因治療

第九章

原核生物的轉(zhuǎn)錄（3學時）

1、目的要求：熟練掌握原核生物基因轉(zhuǎn)錄的原理、過程。

2、要點：

第一節(jié) 轉(zhuǎn)錄的基本原則

1.轉(zhuǎn)錄概述 2.起始 3.延伸 4.終止

第二節(jié) 大腸桿菌RNA聚合酶

1.大腸桿菌RNA聚合酶 2.α亞基 3.β亞基 4.β’亞基 5.σ因子 第三節(jié) 大腸桿菌σ70啟動子

1.啟動子序列 2.啟動子大小 3.-10序列 4.-35序列 5.轉(zhuǎn)錄起始點 6.啟動子效率

第四節(jié) 轉(zhuǎn)錄的起始、延伸與終止

1.啟動子結(jié)合 2.DNA解旋 3.RNA鏈起始點 4.RNA鏈延伸 5.RNA鏈終止 6.依賴ρ的轉(zhuǎn)錄終止

第十章

原核生物的轉(zhuǎn)錄調(diào)控（3學時）

1、目的要求：熟練掌握一些被細菌用來調(diào)控特定基因表達的精細機制。

2、要點：

第一節(jié) 乳糖操縱子

1.操縱子 2.乳糖操縱子 3.乳糖阻抑物 4.誘導(dǎo) 5.cAMP受體蛋白 第二節(jié) 色氨酸操縱子

1.色氨酸操縱子 2.色氨酸阻抑物 3.弱化子 4.前導(dǎo)RNA結(jié)構(gòu) 5.前導(dǎo)肽 6.弱化作用 7.弱化的重要性

第三節(jié) 不同σ因子對轉(zhuǎn)錄的調(diào)節(jié)

1.σ因子 2.啟動子識別 3.熱休克

4.枯草桿菌的孢子形成 5.噬菌體σ因子

第十一章

真核生物的轉(zhuǎn)錄（2學時）

1、目的要求：熟練掌握真核生物基因轉(zhuǎn)錄的基本原理和過程。

2、要點：

第一節(jié) 三種RNA聚合酶：性質(zhì)與功能

1.真核生物RNA聚合酶 2.RNA聚合酶亞基 3.真核生物RNA聚合酶的活性 4.RNA聚合酶Ⅱ的CTD 第二節(jié) RNA聚合酶Ⅰ基因：核糖體重復(fù)

1.核糖體RNA基因 2.核仁的作用 3.RNA聚合酶Ⅰ啟動子 4.上游結(jié)合因子 5.選擇因子1 6.TBP與TAF1 7.其他rRNA基因

第三節(jié) RNA聚合酶Ⅲ基因：5S基因與tRNA基因的轉(zhuǎn)錄

1.RNA聚合酶Ⅲ 2.tRNA基因 3.5S rRNA基因

4.可變的RNA聚合酶Ⅲ啟動子 5.RNA聚合酶Ⅲ的終止

第四節(jié) RNA聚合酶Ⅱ基因：啟動子與增強子

1.RNA聚合酶Ⅱ 2.啟動子 3.上游調(diào)控元件 4.增強子

第五節(jié) 通用轉(zhuǎn)錄因子與RNA聚合酶Ⅱ的起始

1.RNA聚合酶Ⅱ的基本轉(zhuǎn)錄因子 2.TFⅡD 3.TBP 4.TFⅡA 5.TFⅡB與RNA酶的結(jié)合 6.RNA聚合酶進入之后的結(jié)合因子 7.TFⅡH作用下的CTD磷酸化 8.起始轉(zhuǎn)錄復(fù)合體

第十二章

真核生物的轉(zhuǎn)錄調(diào)控（2學時）

1、目的要求：掌握一些重要的真核細胞基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控的例子。

2、要點：

第一節(jié) 真核生物的轉(zhuǎn)錄因子

1.轉(zhuǎn)錄因子結(jié)構(gòu)域結(jié)構(gòu) 2.DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域 3.二聚體結(jié)構(gòu)域 4.轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域 5.阻抑物結(jié)構(gòu)域 6.轉(zhuǎn)錄調(diào)控的對象 第二節(jié) 轉(zhuǎn)錄調(diào)控舉例

1.組成性轉(zhuǎn)錄：SP1 2.激素調(diào)控：類固醇激素受體 3.磷酸化調(diào)控：STAT蛋白 4.轉(zhuǎn)錄延伸：HIV Tat 5.細胞決定：myoD 6.胚胎發(fā)育：同源域蛋白

第十三章 RNA加工與核糖核蛋白復(fù)合體（4學時）

1、目的要求：熟練掌握從新生RNA到成熟RNA分子的加工過程。

2、要點：

第一節(jié) rRNA加工與核糖體

1.RNA的加工類型 2.原核生物的rRNA加工 3.真核生物的rRNA加工 4.核糖核蛋白復(fù)合體及其研究 5.原核生物的核糖體 6.真核生物的核糖體

第二節(jié) tRNA的加工、RNA酶P和核酶

1.原核生物的tRNA加工 2.真核生物的tRNA加工 3.核糖核酸酶P 4.核酶

第三節(jié) mRNA加工、hnRNP和snRNP 1.mRNA的加工 2.hnRNP 3.snRNP顆粒 4.5’端加帽 5.3’端剪切及加尾 6.剪接

7.前mRNA的甲基化 第四節(jié) 可變mRNA加工

1.可變加工 2.可變poly(A)位點 3.可變剪接 4.RNA編輯

第十四章

遺傳密碼與tRNA（2學時）

1、目的要求：掌握遺傳密碼的特點以及tRNA在翻譯過程中的作用。

2、要點： 第一節(jié) 遺傳密碼

1.特性 2.破譯 3.特征 4.突變的效應(yīng) 5.通用性 6.可讀框 7.重疊基因

第二節(jié) tRNA的結(jié)構(gòu)與功能

1.tRNA的一級結(jié)構(gòu) 2.tRNA的二級結(jié)構(gòu) 3.tRNA的三級結(jié)構(gòu) 4.tRNA功能 5.tRNA的氨?；?6.氨酰tRNA合成酶 7.校正

第十五章

蛋白質(zhì)合成（4學時）

1、目的要求：熟練掌握RNA通過遺傳密碼翻譯成成熟蛋白質(zhì)序列的過程。

2、要點：

第一節(jié) 蛋白質(zhì)合成概述

1.密碼子與反密碼子的相互作用 2.擺動現(xiàn)象 3.核糖體結(jié)合位點 4.多聚核糖體 5.起始tRNA 第二節(jié) 蛋白質(zhì)合成機制 1.基本過程 2.起始 3.延伸 4.終止

第三節(jié) 真核生物蛋白質(zhì)合成的起始

1.基本過程 2.掃描 3.起始 4.延伸 5.終止

第四節(jié) 翻譯調(diào)控與翻譯后加工

1.翻譯調(diào)控 2.多蛋白 3.蛋白質(zhì)定位 4.蛋白質(zhì)修飾 5.蛋白質(zhì)降解

第十六章

噬菌體與真核生物病毒（2學時）

1、目的要求：掌握重要的原核生物和真核生物病毒，了解它們對我們理解分子信息處理所作的貢獻。

2、要點： 第一節(jié) 病毒簡介

1.病毒 2.病毒基因組 3.復(fù)制策略 4.病毒毒性 第二節(jié) 噬菌體

1.一般特性

2.裂解性與溶源性侵染 3.噬菌體M13 4.λ噬菌體 5.轉(zhuǎn)座噬菌體 第三節(jié) DNA病毒

1.DNA病毒基因組：復(fù)制與轉(zhuǎn)錄 2.較小DNA病毒 3.較大DNA病毒 4.單純皰疹病毒-1 第四節(jié) RNA病毒

1.RNA病毒基因組的一般特性 2.病毒的反轉(zhuǎn)錄 3.反轉(zhuǎn)錄病毒 4.致癌性反轉(zhuǎn)錄病毒

5.反轉(zhuǎn)錄病毒基因組結(jié)構(gòu)及其表達 6.反轉(zhuǎn)錄病毒的突變率

第十七章

腫瘤病毒與癌基因（2學時）

1、目的要求：從病毒的研究的進展以及分子生物學其他領(lǐng)域的知識累積了解癌癥的發(fā)生機制。

2、要點：

第一節(jié) 腫瘤病毒中的癌基因

1.癌癥 2.癌基因

3.致癌性反轉(zhuǎn)錄病毒 4.癌基因的分離 第二節(jié) 癌基因的分類

1.癌基因與生長因子 2.核癌基因 3.癌基因間的協(xié)同作用 第三節(jié) 腫瘤抑制基因

1.概述

2.腫瘤抑制基因存在的證據(jù) 3.RB1基因 4.P53基因 第四節(jié) 凋亡

1.凋亡

2.損傷或危險性細胞的清除 3.凋亡過程中細胞變化 4.線蟲中的凋亡作用 5.哺乳動物中的凋亡 6.凋亡在疾病和癌癥中的作用福建農(nóng)林大學生物科學專業(yè)

本科生《生物化學與分子生物學實驗》教學大綱

80學時 3學分

一、課程的性質(zhì)和任務(wù)

分子生物學和生物工程學是兩門新興的學科，無論對基礎(chǔ)理論研究，還是生產(chǎn)實踐都將產(chǎn)生巨大的影響。生物化學與分子生物學是這兩門學科的重要基礎(chǔ)，是一門實踐性很強的實驗課程。掌握和應(yīng)用生物化學與分子生物學實驗技能，是學好這一課程的必要條件。

生物化學與分子生物學實驗技術(shù)不僅是生物化學教學重要的組成部分，而且在培養(yǎng)學生分析和解決問題的能力，嚴謹?shù)目茖W態(tài)度和獨立工作的能力方面，有著不可替代的作用。

針對學生的培養(yǎng)方向，本課程以培養(yǎng)學生掌握生物技術(shù)與分子生物學研究的基礎(chǔ)實驗技能為主要目標，力圖最大限度地利用我?，F(xiàn)有的實驗條件，使學生通過本課程的學習和實踐，接觸和掌握從事生物技術(shù)研究所必要的實驗手段。通過有限的實驗室實踐，涵蓋生物化學與分子生物學各個方面的實驗內(nèi)容，以點帶面，突出重點，促進學生對生物化學與分子生物學課程學習內(nèi)容的理解和掌握。

二、課程教學的基本要求

本課程的內(nèi)容以蛋白質(zhì)（含酶）、核酸及脂類的提取、分離、純化及鑒定為重點，兼及這些內(nèi)容的定性和基團鑒定，以及糖類．維生素的實驗。本課程的實驗安排考慮到與化學基礎(chǔ)和后繼的專業(yè)實驗的銜接，盡量避免重復(fù)。在實驗項目安排方面，主要涉及提取、透析、凍干、層析、電泳、分光、離心、濃縮、PCR、分子雜交和基因表達等基礎(chǔ)實驗技能的訓(xùn)練。在時間安排上，針對本科生的學習特點，盡量安排每一個實驗可以在２－３小時內(nèi)完成，在課程結(jié)束前，適當安排少量綜合實驗，以培養(yǎng)學生應(yīng)用實驗手段的綜合能力。

本課程教學總時數(shù)為8０學時，實驗技術(shù)原理采取以學生自習為主，課堂進行提要式的提示講解和必要的答疑的方式，使學生掌握實驗方法的基本原理和應(yīng)用范圍。本課程強調(diào)實驗技能訓(xùn)練的重要性，主要課時安排學生實驗，以便盡量提高學時利用率。為了節(jié)省基礎(chǔ)設(shè)施投資，提高儀器利用率，本課程采取開放式集中實驗的方式，要求學生在實施實驗之前，必須做好預(yù)習準備，擬好實驗方案，經(jīng)任課教師認可后，方可進入實驗室做實驗。課堂講授與實驗課的比例為１：10。

我們在課程成績評定上，不以一次考試定音的傳統(tǒng)考試方式，而強調(diào)平時和考試并重，基礎(chǔ)理論和實驗技能相結(jié)合的綜合評定方式（理論３０％，實驗技能考試３０％，平時觀察和記錄４０％）。

三、課程教學大綱及學時分配 1 緒論（3學時）常用生物化學實驗技術(shù)及原理（自學）2.1 樣品處理 2.1.1 透析

2.1.2 薄膜濃縮與冷凍干燥 2.2 層析技術(shù) 2.3 電泳技術(shù) 2.4 光譜技術(shù) 2.5 離心技術(shù) 2.6 PCR技術(shù) 3 學生實驗

3.1 氨基酸的分離鑒定───紙層析法（3學時）

了解層析技術(shù)的一般原理、分類及應(yīng)用范圍，重點掌握紙層層析法的原理及操作技術(shù)，用以分離游離氨基酸組分。3.2 多糖的薄層層析分離（5學時）

了解薄層層析的一般原理，掌握多糖的水解方法和硅膠G薄層層析的基本技術(shù)及其在可溶性糖分離鑒定中的應(yīng)用。

3.3 瓊脂糖凝膠柱層析測定蛋白質(zhì)分子量及分子量分布（8學時）

通過采用瓊脂糖凝膠柱層析測定蛋白質(zhì)分子量及分子量分布，學習和掌握凝膠柱層析法的工作原理和基本操作技術(shù)。

3.4 大蒜細胞ＳＯＤ的提取與分離（6學時）

通過大蒜細胞SOD的提取與分離，學習和掌握蛋白質(zhì)和酶的提取與分離的基本原理和操作方法。

3.5 ＳＤＳ－ＰＡＧＥ測定蛋白質(zhì)的相對分子量（8學時）

通過利用SDS-PAGE測定蛋白質(zhì)分子量實驗，掌握垂直板型聚丙烯酰胺凝膠電泳的原理和操作方法，以及SDS-PAGE測定蛋白質(zhì)分子量的原理和方法。3.6 酵母ＲＮＡ的提取與分離（8學時）

通過采用苯酚溶液提取法提取酵母RNA，采用地衣酚顯色法測定RNA含量，學習和掌握RNA的分離與測定的基本原理和技術(shù)。3.7 植物ＤＮＡ的提取與測定（8學時）

通過采用SDS提取法提取花椰菜DNA，采用二苯胺顯色法測定DNA含量，采用瓊 脂糖凝膠電泳鑒定DNA，學習和掌握RNA的分離與測定的基本原理和技術(shù)。3.8 大腸桿菌感受態(tài)細胞的制備和轉(zhuǎn)化（3學時）

通過本實驗，掌握大腸桿菌感受態(tài)細胞的制備及轉(zhuǎn)化方法和技術(shù)。3.9 質(zhì)粒DNA的提取及酶切（8學時）

通過本實驗學習和掌握堿裂解法提取質(zhì)粒。3.10

DNA重組（2學時）

通過本實驗學會重組DNA連接以及鑒定重組子的方法。3.11

DNA序列測定——銀染色法（8學時）

通過本實驗，掌握銀染測序法。3.12 PCR基因擴增（6學時）

通過本實驗學習PCR反應(yīng)的基本原理與實驗技術(shù)。4 實驗技能考試（2學時）和實驗基礎(chǔ)理論考試（2學時）

四、參考文獻

１

張立名，王賢舜： 現(xiàn)代生物化學分析原理，中國科學技術(shù)大學出版社，１９９１年４月第一版。

２

王重慶等： 高級生物化學實驗教程，北京大學出版社，１９９４年６月第一版。３

張龍翔等：生化實驗方法和技術(shù)（第二版），高等教育出版社，１９９７年７月第二版。

４

趙亞華：生物化學實驗技術(shù)教程，華南理工大學出版社，２０００年８月第一版。５

歐陽平凱：生物分離原理及技術(shù)，化學工業(yè)出版社，１９９９年２月第一版。６ 魏群：分子生物學實驗指導(dǎo)，高等教育出版社，１９９９年１２月第一版。７ 楊安鋼等：生物化學與分子生物學實驗技術(shù)，高等教育出版社，２００１年２月第一版。

８ 郭勇：現(xiàn)代生化技術(shù)，華南理工大學出版社，１９９６年８月第一版。