第一篇：九江學(xué)院 儀器分析仿真實(shí)驗(yàn)-教案

儀器分析仿真實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)一

紅外光譜實(shí)驗(yàn)

一、實(shí)驗(yàn)概述

光源發(fā)出的連續(xù)波長(zhǎng)的紅外光經(jīng)干涉儀、樣品室到達(dá)檢測(cè)器，檢測(cè)到的紅外干涉圖包含了光源全部頻率和強(qiáng)度的信息。計(jì)算機(jī)將干涉圖函數(shù)進(jìn)行付里葉變換就可以計(jì)算出光信號(hào)的強(qiáng)度按頻率的分布，即單光光譜。測(cè)試樣品的單光光譜與背景單光光譜的比值就是我們所需要的百分透過(guò)率紅外光譜圖。

實(shí)驗(yàn)分為教學(xué)模式和考核模式兩種情況，在教學(xué)模式下顯示全部的幫助信息，在考核模式下則把幫助信息隱藏掉。

本實(shí)驗(yàn)包含紅外光譜實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)知識(shí)，實(shí)驗(yàn)儀器自帶軟件的仿真模擬，實(shí)驗(yàn)操作部分的仿真模擬等內(nèi)容，用director+平臺(tái)的開(kāi)發(fā)工具，即統(tǒng)一了公司內(nèi)部實(shí)驗(yàn)開(kāi)發(fā)的模式，又能使實(shí)驗(yàn)不失生動(dòng)的界面。

二、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

1、了解紅外光譜儀的原理和結(jié)構(gòu)。

2、在模擬系統(tǒng)上學(xué)習(xí)紅外光譜儀的操作。

三、重點(diǎn)和難點(diǎn)：紅外光譜儀的原理和操作方法。

四、實(shí)驗(yàn)裝置

1.370紅外光譜儀技術(shù)參數(shù) ：

1)DSP動(dòng)態(tài)調(diào)整干涉儀，調(diào)整頻率可達(dá)130,000次/秒； 2)光學(xué)臺(tái)底板一體化，主部件對(duì)針定位，無(wú)需調(diào)整； 3)光譜范圍：7,800-350cm-1；

4)分辨率：標(biāo)準(zhǔn)0.9cm-1，0.5cm-1； 5)信噪比：1.7×10-5 吸光度單位(峰－峰值),大于24,000:1； 2.主要特點(diǎn)

1)專利Ever-Glo空冷紅外光源，能量高，壽命長(zhǎng)；

2)專利無(wú)磨損電磁驅(qū)動(dòng)干涉儀，動(dòng)態(tài)調(diào)整可達(dá)130,000次/秒； 3)永久準(zhǔn)直光路，無(wú)需用戶人工調(diào)整； 4)智能附件即插即用；

5)智能附件自動(dòng)識(shí)別，儀器參數(shù)自動(dòng)調(diào)整；光學(xué)臺(tái)底板整體鑄模成型，密封性好，穩(wěn)定性高。主要部件均采用預(yù)校準(zhǔn)對(duì)針定位，用戶可方便地自行更換而無(wú)需任何調(diào)整。智能附件(ATR,漫反射等)即插即用，光路永久準(zhǔn)直，系統(tǒng)自動(dòng)進(jìn)行性能檢驗(yàn)并自動(dòng)調(diào)整參數(shù)。

堅(jiān)固的無(wú)磨損電磁式驅(qū)動(dòng)干涉儀，采用數(shù)字化連續(xù)動(dòng)態(tài)調(diào)整技術(shù)(D.S.P.)，具有極高的穩(wěn)定性，Auto-tune功能自動(dòng)進(jìn)行系統(tǒng)優(yōu)化,確保干涉儀始終處于最佳工作狀態(tài)。

五、實(shí)驗(yàn)操作 一． 實(shí)驗(yàn)啟動(dòng)和界面介紹

1． 啟動(dòng)Ad500u.exe，選擇單機(jī)運(yùn)行還是網(wǎng)絡(luò)運(yùn)行。

2． 在培訓(xùn)項(xiàng)目頁(yè)選擇要進(jìn)行培訓(xùn)的項(xiàng)目，點(diǎn)擊左上方的啟動(dòng)培訓(xùn)單元按鈕。本實(shí)驗(yàn)是把不同形態(tài)的樣品設(shè)成不同的培訓(xùn)項(xiàng)目。如下圖：

3． 在考試模式下，無(wú)任何提示信息；在練習(xí)模式下，有評(píng)分幫助和提示信息

4． 下圖是實(shí)驗(yàn)的起始界面：

5． 下圖是實(shí)驗(yàn)的流程圖界面的介紹：

6． 點(diǎn)擊流程圖界面上計(jì)算機(jī)下方的綠色字，可以設(shè)置相關(guān)參數(shù)，點(diǎn)擊右上角圖標(biāo)返回流程圖界面。(注意:輸入完數(shù)據(jù)后，必須敲擊主鍵盤上的回車鍵，數(shù)據(jù)才能有效)界面如下：

四

樣品制作

1． 固態(tài)樣品制作，按照?qǐng)D片上的信息提示步驟來(lái)操作：

2． 液態(tài)樣品制作，按照?qǐng)D片上的信息提示步驟來(lái)操作：

3． 氣態(tài)樣品制作，按照?qǐng)D片上的信息提示步驟來(lái)操作：

五

軟件操作

4． 打開(kāi)參數(shù)設(shè)置的界面

5． 下面就是“Experiment Setup”窗口。當(dāng)鼠標(biāo)移動(dòng)到“No.of scans:”和“Resolution:” 字上面的時(shí)候，會(huì)出現(xiàn)這兩個(gè)參數(shù)所表示的含義。輸入數(shù)據(jù)(注意:輸入完數(shù)據(jù)后，必須敲擊主鍵盤上的回車鍵，數(shù)據(jù)才能有效)。界面如下：

6． 開(kāi)始收集樣品。

7． 輸入此次實(shí)驗(yàn)的名稱。

8． 出現(xiàn)提示框，提醒用戶開(kāi)始背景收集。

9． 背景收集的過(guò)程。

10． 提示開(kāi)始樣品的收集。

11． 樣品收集的過(guò)程。

12． 提示樣品收集完畢。

13． 點(diǎn)擊“Full Scale”菜單可以將譜圖完全的顯示在窗口內(nèi)，如下圖：

14．?！癈lear”、“Absorb”和“%Trans”三個(gè)工具欄中的按鈕可以應(yīng)用，當(dāng)鼠標(biāo)移動(dòng)到它們上面的

時(shí)候，在練習(xí)模式下，會(huì)出現(xiàn)如下提示：

15． 調(diào)出譜庫(kù)搜索界面。

16． 譜庫(kù)搜索界面如下：

17． 選中需要搜索的譜庫(kù)：

18． 點(diǎn)擊“Add〉〉”按鈕，將相應(yīng)的譜庫(kù)名稱添加到右邊：

19． 點(diǎn)擊“Search”按鈕，開(kāi)始譜庫(kù)搜索：

20． 下圖為譜庫(kù)搜索的結(jié)果：

六

譜圖練習(xí)

21． 點(diǎn)擊主界面上的“譜圖”按鈕，進(jìn)入到譜圖練習(xí)界面。在此界面下，用戶選擇相應(yīng)的官能團(tuán)拖動(dòng)到相應(yīng)的波峰位置，正確的話，此官能團(tuán)就停留在相應(yīng)的方框呢，否則就自動(dòng)回到原來(lái)的位置，效果如下圖：

22． 第二張譜圖：

23． 第三張譜圖：

24． 第四張譜圖：

25． 第五張譜圖：

26． 第六張譜圖：

點(diǎn)擊“結(jié)束”返回到流程圖界面。

實(shí)驗(yàn)二

紫外-可見(jiàn)光分光光度計(jì)仿真實(shí)驗(yàn)

一、實(shí)驗(yàn)概述：

在分之中，除了電子相對(duì)于原子核的運(yùn)動(dòng)之外，還有原子核之間振動(dòng)和轉(zhuǎn)動(dòng)引起的相對(duì)位移。這三種運(yùn)動(dòng)能量都是量子化的，對(duì)應(yīng)有一定的能級(jí)。分子的能量是這三種能量的總和。當(dāng)用一定頻率（波長(zhǎng)）的電磁波（光）照射分子，其能量恰好等于分子的兩個(gè)能級(jí)差時(shí)，則分子就會(huì)吸收光的能量而由較低的能級(jí)躍遷到較高的能級(jí)，同時(shí)光的強(qiáng)度（能量）變小。吸光度符合吸收定律：

A=lg（I0/I）=KcL

根據(jù)這一關(guān)系可以用工作曲線法來(lái)測(cè)定未知溶液中吸光物質(zhì)的濃度。

二、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/p>

1、掌握紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)的原理和結(jié)構(gòu)

2、掌握紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的操作方法

三、重點(diǎn)和難點(diǎn)：

學(xué)習(xí)和掌握紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的操作方法。

四、實(shí)驗(yàn)裝置：

Agilent 8453紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)使用最新的二極管陣列技術(shù)，符合歐洲藥典（EP）和美國(guó)藥典（USP）所有規(guī)范要求。Agilent8453具備二極管陣列的優(yōu)勢(shì)，氘、鎢雙燈設(shè)計(jì)，波長(zhǎng)范圍190-1100nm，分辨率小于 2 納米，并且標(biāo)準(zhǔn)雜散光強(qiáng)度低于 0.03%，配有安捷可見(jiàn)光化學(xué)工作站軟件。

五、實(shí)驗(yàn)操作步驟

第一步：?jiǎn)?dòng)系統(tǒng)平臺(tái)，選擇實(shí)驗(yàn)儀器

首先啟動(dòng)軟件運(yùn)行平臺(tái)，鼠標(biāo)左鍵點(diǎn)擊“單機(jī)運(yùn)行”，如果配有教師站，也可以點(diǎn)擊“網(wǎng)絡(luò)運(yùn)行”。

在實(shí)驗(yàn)內(nèi)容選擇界面，如上圖所示，用鼠標(biāo)左鍵雙擊要進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)儀器。然后進(jìn)入實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目選擇界面。

選擇要進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目，然后點(diǎn)擊左上角的“啟動(dòng)培訓(xùn)單元”按鈕，進(jìn)入仿真實(shí)驗(yàn)。每個(gè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目都有練習(xí)和考試兩種模式，其區(qū)別在于練習(xí)模式的實(shí)驗(yàn)界面上有文字說(shuō)明和步驟提示，評(píng)分模塊中也有步驟提示，而在考試模式當(dāng)中則沒(méi)有。第二步：進(jìn)入到起始界面

在界面上鼠標(biāo)左鍵點(diǎn)擊，進(jìn)入流程圖界面。第三步：進(jìn)入流程圖界面，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備工作

流程圖界面是一個(gè)對(duì)儀器進(jìn)行了簡(jiǎn)化和抽象的界面，可能各個(gè)學(xué)校的儀器不盡相同，但是對(duì)于一種儀器來(lái)說(shuō)，其原理和功能模塊都是相同的，我們?cè)O(shè)計(jì)這個(gè)界面，就是為了學(xué)生能夠?qū)τ趦x器的結(jié)構(gòu)和各個(gè)功能模塊有直觀的認(rèn)識(shí)，而不受具體儀器的限制。注意，在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中看到“標(biāo)志，都可以點(diǎn)擊回到流程圖界面。流程圖界面，如下圖所示：

”

在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)之前，首先要進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備工作，用鼠標(biāo)左鍵點(diǎn)擊流程圖界面右上角的“實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備”按鈕，進(jìn)入實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備工作。第四步：實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備工作

實(shí)驗(yàn)之前的準(zhǔn)備工作很多，也很重要，但是仿真實(shí)驗(yàn)以儀器操作為主，準(zhǔn)備工作簡(jiǎn)化，以文字說(shuō)明代替。

用鼠標(biāo)左鍵點(diǎn)擊界面下方的“確定”按鈕返回流程圖界面。第五步：?jiǎn)?dòng)工作站軟件

在流程圖界上，鼠標(biāo)左鍵點(diǎn)擊流程圖界面右上角的“啟動(dòng)工作站”按鈕，進(jìn)入啟動(dòng)化學(xué)工作站軟件的仿真流程。

Agilent的化學(xué)工作站，在操作系統(tǒng)啟動(dòng)的時(shí)候，會(huì)啟動(dòng)CAG Bootp Server程序，用以對(duì)儀器進(jìn)行檢測(cè)和通信，我們可以看到其中顯示的檢測(cè)信息。

這個(gè)程序不能關(guān)閉，否則工作站軟件就無(wú)法和儀器進(jìn)行通信了，所以首先把這個(gè)程序最小化。然后用鼠標(biāo)左鍵雙擊桌面上的“Instument 1 online”快捷方式，啟動(dòng)工作站軟件，“online”的意思是與儀器相連。

軟件啟動(dòng)后，會(huì)讀取配置信息，不同用戶可以有不同的配置。

再次需要輸入用戶名和密碼，這里密碼設(shè)置為空，用鼠標(biāo)左鍵點(diǎn)擊“OK”按鈕繼續(xù)。然后軟件就會(huì)進(jìn)行一系列初始化工作，最后啟動(dòng)完成。如下圖所示：

至此工作站啟動(dòng)完成，用鼠標(biāo)左鍵點(diǎn)擊界面右上角的“第六步：確定工作波長(zhǎng)

”回到流程圖界面。

在流程圖界面上，用鼠標(biāo)左鍵點(diǎn)擊右上角的“軟件操作”按鈕，進(jìn)入操作化學(xué)工作站軟件的仿真流程。

Agilent 8453紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)確定工作波長(zhǎng)的方法主要有兩種，分別是“Fixed Wavelengths”和“Spectrum/Peaks”。下面分別介紹：

在Task工具欄的下拉菜單中的“Fixed Wavelengths”模式下，首先點(diǎn)擊左下角的“Blank”按鈕掃描背景。（注意：左下角有兩個(gè)按鈕，分別是“Blank”和“Sample”，其中“Sample”按鈕因?yàn)槠脚_(tái)的原因，不能看到全部，但是按鈕是可用的。）

用鼠標(biāo)左鍵點(diǎn)擊右上角的“x”關(guān)閉背景噪聲窗口。然后點(diǎn)擊左下角的“Sample”按鈕掃描樣品，儀器掃瞄以后，會(huì)給出樣品的紫外吸收光譜，如下圖所示：

此時(shí)，可以拖動(dòng)紅色的線選擇最大吸光度的波長(zhǎng)作為工作波長(zhǎng)。但是這種方法精度比較差，不推薦使用。

第二種方法是“Spectrum/Peaks”，這種方法是在一定波長(zhǎng)范圍內(nèi)，自動(dòng)搜尋波峰和波谷。在Task工具欄的下拉菜單中選擇“Spectrum/Peaks”模式，這時(shí)系統(tǒng)會(huì)給出一個(gè)對(duì)話框，在這個(gè)對(duì)話框中，可以輸入要搜尋的波峰和波谷的數(shù)量，波長(zhǎng)范圍等等，然后點(diǎn)擊“OK”按鈕繼續(xù)。

然后系統(tǒng)就會(huì)自動(dòng)搜尋出波峰和波谷，在吸收光譜圖上標(biāo)示，并在下面列表中一一列出，以最大的吸收波長(zhǎng)為工作波長(zhǎng)

確定波長(zhǎng)以后，可以在此波長(zhǎng)下，建立工作曲線。第七步：建立工作曲線

在確定波長(zhǎng)以后，在在Task工具欄的下拉菜單中選擇“Quanlification”模式。

點(diǎn)擊左下角的“Blank”按鈕掃描背景。（注意：此時(shí)左下角有三個(gè)按鈕，分別是“Blank”，“Standard”和“Sample”，其中“Sample”按鈕因?yàn)槠脚_(tái)的原因，不能看到全部，但是按鈕是可用的。）

然后最小化背景噪聲窗口。

如上圖所示，點(diǎn)擊左下角的“Standard”按鈕，開(kāi)始掃描1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)樣品，等待大約3秒建立1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)樣品工作曲線。然后再次點(diǎn)擊“Standard”按鈕，開(kāi)始掃描2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)樣品，再等待大約3秒建立2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)樣品工作曲線，重復(fù)五次分別掃描五個(gè)標(biāo)準(zhǔn)樣品的工作曲線，吸收光譜會(huì)被顯示在左側(cè)窗 24

口中，數(shù)據(jù)點(diǎn)會(huì)顯示在右側(cè)的窗口中，并在下面列表。

此時(shí)工作曲線已經(jīng)基本完成，但是一般情況下，工作曲線和數(shù)據(jù)點(diǎn)的線性不是太好，此時(shí)可以進(jìn)行線性優(yōu)化，點(diǎn)擊Task工具欄的“Setup”按鈕：

在Calibration curve type選項(xiàng)的下拉菜單中選擇LineOffSet，然后點(diǎn)擊“OK”按鈕繼續(xù)。經(jīng)過(guò)優(yōu)化以后，工作曲線就更加完美了。

第八步：測(cè)試待測(cè)樣品 建立工作曲線以后，可以開(kāi)始測(cè)試待測(cè)樣品，如上圖所示，點(diǎn)擊左下角的“Sample”按鈕（注意： “Sample”按鈕因?yàn)槠脚_(tái)的原因，不能看到全部，但是按鈕是可用的。）系統(tǒng)會(huì)自動(dòng)掃描，并自動(dòng)計(jì)給出結(jié)果：

實(shí)驗(yàn)三

原子吸收仿真實(shí)驗(yàn)

原子吸收分光光度計(jì)仿真實(shí)驗(yàn)

一、實(shí)驗(yàn)概述：

原子吸收分光光度分析法又稱原子吸收光譜分析法，是根據(jù)物質(zhì)產(chǎn)生的原子蒸氣對(duì)特定波長(zhǎng)的光的吸收作用來(lái)進(jìn)行定量分析的。

與原子發(fā)射光譜相反，元素的基態(tài)原子可以吸收與其發(fā)射波長(zhǎng)相同的特征譜線。當(dāng)光源發(fā)射的某一特征波長(zhǎng)的光通過(guò)原子蒸氣時(shí)，原子中的外層電子將選擇性地吸收該元素所能發(fā)射的特征波長(zhǎng)的譜線，這時(shí)，透過(guò)原子蒸氣的入射光將減弱，其減弱的程度與蒸氣中該元素的濃度成正比，吸光度符合吸收定律：

A=lg（I0/I）=KcL 根據(jù)這一關(guān)系可以用工作曲線法或標(biāo)準(zhǔn)加入法來(lái)測(cè)定未知溶液中某元素的含量。

在火焰原子吸收光譜分析中，分析方法的靈敏度、準(zhǔn)確度、干擾情況和分析過(guò)程是否簡(jiǎn)便快速等，除與所用儀器有關(guān)外，在很大程度上取決于實(shí)驗(yàn)條件。因此最佳實(shí)驗(yàn)條件的選擇是個(gè)重要的問(wèn)題。本實(shí)驗(yàn)在對(duì)鈉元素測(cè)定時(shí)，分別對(duì)燈電流、狹縫寬度、燃燒器高度、燃?xì)夂椭細(xì)饬髁勘龋ㄖ急龋┑纫蛩剡M(jìn)行選擇。

二、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/p>

1、了解原子吸收光譜儀的原理和結(jié)構(gòu)。

2、在模擬系統(tǒng)上學(xué)習(xí)原子吸收光譜儀的操作。

三、重點(diǎn)和難點(diǎn)：

原子吸收光譜儀的原理和操作方法。

四、實(shí)驗(yàn)裝置：

本實(shí)驗(yàn)仿真的設(shè)備是AA320型原子吸收分光光度計(jì)，主要設(shè)備參數(shù)如下： 波長(zhǎng)范圍：190.0~900.0 nm 光柵刻線：1200 條/mm 閃躍波長(zhǎng)：250 nm 線色散倒數(shù)：2.38 nm/mm 狹縫寬度1~6檔對(duì)應(yīng)的nm數(shù)分別為：0.2，0.4，0.7，1.4，2.4，5.0 原子吸收分光光度計(jì)的放大圖：

五、實(shí)驗(yàn)操作： 第一步：選取實(shí)驗(yàn)

啟動(dòng)實(shí)驗(yàn)后，點(diǎn)擊“培訓(xùn)項(xiàng)目”，選取實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：

第二步：打開(kāi)電源

在主界面上用鼠標(biāo)點(diǎn)擊原子吸收分光光度計(jì)，會(huì)出現(xiàn)原子吸收分光放大圖，用鼠標(biāo)點(diǎn)擊右下角的總電源開(kāi)關(guān)打開(kāi)電源。

第三步：打開(kāi)空氣壓縮機(jī)電源開(kāi)關(guān)

打開(kāi)原子吸收分光光度計(jì)的總電源開(kāi)關(guān)后，用鼠標(biāo)點(diǎn)擊窗口右下角的“返回”按鈕回到主界面，然后點(diǎn)擊空氣壓縮機(jī)，會(huì)出現(xiàn)空氣壓縮機(jī)窗口，如圖所示：用鼠標(biāo)點(diǎn)擊空氣壓縮機(jī)電源開(kāi)關(guān)打開(kāi)電源，電源上面的指示燈會(huì)亮起來(lái)。

打開(kāi)電源開(kāi)關(guān)后，關(guān)閉空氣壓縮機(jī)的窗口回到主界面。第四步：選擇陰極燈 回到主界面后，點(diǎn)擊原子吸收分光光度計(jì)出現(xiàn)原子吸收分光光度計(jì)放大圖，用鼠標(biāo)點(diǎn)擊左上的陰極燈箱，會(huì)出現(xiàn)陰極燈窗口。

做實(shí)驗(yàn)時(shí)要根據(jù)待測(cè)元素的不同選擇相應(yīng)的元素?zé)簟Ｓ檬髽?biāo)左鍵點(diǎn)擊左上角的陰極燈的種類，會(huì)出現(xiàn)陰極燈選擇畫(huà)面：

用鼠標(biāo)左鍵點(diǎn)擊要選的陰極燈，然后點(diǎn)擊陰極燈電源開(kāi)關(guān)接通電源，燈被點(diǎn)亮。關(guān)閉此窗口回到原子吸收分光光度計(jì)畫(huà)面，然后進(jìn)行下一步。第五步：粗調(diào)節(jié)陰極的燈電流

點(diǎn)擊原子吸收分光光度計(jì)上的陰極燈電流指示位置，會(huì)出現(xiàn)陰極燈電流調(diào)節(jié)窗口：

在調(diào)節(jié)旋鈕上點(diǎn)擊鼠標(biāo)左鍵增大電流，點(diǎn)擊右鍵減小電流。根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求，調(diào)節(jié)電流再8~11mA之間。然后關(guān)閉電流表調(diào)節(jié)窗口，回到原子吸收分光光度計(jì)畫(huà)面。第六步：波長(zhǎng)掃描

用鼠標(biāo)點(diǎn)擊原子吸收分光光度計(jì)右下的波長(zhǎng)掃描按鈕，左邊白色的按鈕是在一定范圍內(nèi)自動(dòng)從大到小掃描，灰色按鈕是在一定范圍內(nèi)自動(dòng)從小到大掃描，系統(tǒng)會(huì)自動(dòng)掃描找到最合適的波長(zhǎng)。

第七步：調(diào)節(jié)多功能面板

用鼠標(biāo)點(diǎn)擊原子吸收分光光度計(jì)右上的多功能面板，出現(xiàn)多功能面板的放大圖。

多功能面板上的調(diào)節(jié)旋鈕用鼠標(biāo)左鍵點(diǎn)擊逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)，用鼠標(biāo)右鍵點(diǎn)擊順時(shí)針旋轉(zhuǎn)。調(diào)節(jié)“方式”到“調(diào)整”檔，然后關(guān)閉多功能面板窗口回到原子吸收分光光度計(jì)畫(huà)面。第八步：調(diào)節(jié)陰極燈位置

用鼠標(biāo)步左鍵點(diǎn)擊原子吸收分光光度計(jì)右下的能量表，會(huì)出現(xiàn)能量表的放大圖，用鼠標(biāo)點(diǎn)中能量表窗口的藍(lán)色標(biāo)題欄，然后按住左鍵移動(dòng)鼠標(biāo)，窗口就會(huì)跟隨鼠標(biāo)的軌跡移動(dòng)，按照此方法把能量表窗口移動(dòng)到屏幕靠邊上的位置。然后用鼠標(biāo)點(diǎn)擊原子吸收分光光度計(jì)的陰極燈箱，出現(xiàn)陰極燈調(diào)節(jié)窗口。此時(shí)應(yīng)調(diào)節(jié)窗口的位置，使得在調(diào)節(jié)陰極燈位置的時(shí)候可以看到能量?jī)x表。

分別在垂直和水平方向上調(diào)節(jié)陰極燈的位置，使得獲得的能量最大，調(diào)節(jié)的時(shí)候一定要反復(fù)多試幾次，如果在最大點(diǎn)位置附近移動(dòng)一兩下不好調(diào)準(zhǔn)，可以先移動(dòng)到最大點(diǎn)位置比較遠(yuǎn)的地方再向回調(diào)，如此反復(fù)幾次，找準(zhǔn)最大能量的位置。如果調(diào)整到最大能量后能量表指針偏出了紅色區(qū)域，可以用增益旋鈕調(diào)節(jié)使指針回到紅色范圍。調(diào)節(jié)好以后，關(guān)閉陰極燈窗口。不要關(guān)閉能量表窗口。第九步：微調(diào)波長(zhǎng)

用鼠標(biāo)點(diǎn)擊原子吸收分光光度計(jì)的波長(zhǎng)微調(diào)旋鈕，左鍵增加，右鍵減小，使獲得最大的能量輸出。如果調(diào)整到最大能量后能量表指針偏出了紅色區(qū)域，可以用增益旋鈕調(diào)節(jié)使指針回到紅色范圍。不要關(guān)閉能量?jī)x表，進(jìn)入下一步。第十步：調(diào)節(jié)狹縫寬度

點(diǎn)擊原子吸收分光光度計(jì)右上的多功能面板，調(diào)整多功能面板窗口和能量窗口的位置，使得再多功能面板上操作的時(shí)候能夠看見(jiàn)能量窗口。

用鼠標(biāo)點(diǎn)擊狹縫調(diào)節(jié)旋鈕，左鍵點(diǎn)擊順時(shí)針旋轉(zhuǎn)，右鍵點(diǎn)擊逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)，調(diào)節(jié)需要的狹縫寬度，一般情況下狹縫越小，能量越小，太小的能量不利于測(cè)定，狹縫越大，能量越大，但是可能會(huì)引起光譜通帶的增加而產(chǎn)生其他共振線的吸收而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，因此狹縫的寬度要根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)來(lái)定。選擇好狹縫寬度后，如果能量表的指針偏出紅色區(qū)域，可以用增益旋鈕調(diào)節(jié)使指針回到紅色范圍。調(diào)節(jié)好以后，關(guān)閉多功能面板和能量表，然后在原子吸收分光光度計(jì)畫(huà)面上點(diǎn)擊右下角的“返回”按鈕返回到主界面。

第十一步：打開(kāi)乙炔鋼瓶

在主界面上點(diǎn)擊乙炔鋼瓶，會(huì)出現(xiàn)乙炔鋼瓶的放大窗口。

先打開(kāi)乙炔總閥，用鼠標(biāo)左鍵點(diǎn)擊乙炔總閥，總閥會(huì)自動(dòng)打開(kāi)，再次用鼠標(biāo)左鍵點(diǎn)擊后自動(dòng)關(guān)閉。然后調(diào)節(jié)乙炔支閥，左鍵點(diǎn)擊增加開(kāi)度，右鍵點(diǎn)擊減小開(kāi)度，調(diào)節(jié)支壓力表的壓力到足夠大。在真實(shí)實(shí)驗(yàn)中，如果支閥壓力太小，可能造成火焰無(wú)法點(diǎn)燃，建議壓力不小于0.15Mpa。調(diào)節(jié)完成后，關(guān)閉乙炔鋼瓶窗口，回到主界面。第十二步：接通氣路、點(diǎn)火

在主界面上點(diǎn)擊原子吸收分光光度計(jì)，出現(xiàn)原子吸收分光光度計(jì)放大圖。用鼠標(biāo)左鍵點(diǎn)擊原子吸收分光光度計(jì)中間下部的氣路開(kāi)關(guān)部分，出現(xiàn)氣路開(kāi)關(guān)放大的窗口，從左到右依次點(diǎn)擊打開(kāi)各個(gè)開(kāi)關(guān)，然后關(guān)閉窗口。

打開(kāi)氣路開(kāi)關(guān)以后，關(guān)閉氣路開(kāi)關(guān)窗口回到原子吸收分光光度計(jì)畫(huà)面，用鼠標(biāo)左鍵點(diǎn)住點(diǎn)按鈕幾秒鐘，火焰即被點(diǎn)燃。

注：真實(shí)實(shí)驗(yàn)中，點(diǎn)火前要先進(jìn)行室內(nèi)排風(fēng)，本實(shí)驗(yàn)忽略了這一環(huán)節(jié)。第十三步：調(diào)零

打開(kāi)原子吸收分光光度計(jì)右上的多功能面板，點(diǎn)擊“方式”旋鈕使調(diào)整到“吸光度”位置后，關(guān)閉多功能面板。點(diǎn)擊主界面右下的溶液燒杯選取溶液

選中您要選擇的溶液，下面會(huì)出現(xiàn)選取溶液的濃度等參數(shù)，選取“空白樣液”，然后點(diǎn)擊窗口下部的“確定”按鈕，系統(tǒng)會(huì)將所選的溶液自動(dòng)噴入霧化器。

點(diǎn)擊原子吸收分光光度計(jì)右下的調(diào)零按鈕進(jìn)行調(diào)零，左右兩個(gè)鍵功能相同。第十四步：調(diào)節(jié)燃燒器位置

任意選取一份在線性范圍的標(biāo)準(zhǔn)對(duì)比樣液

點(diǎn)擊“確定”按鈕自動(dòng)噴入霧花器后，儀器會(huì)顯示一定的吸光度值，此時(shí)點(diǎn)擊原子分光光度計(jì)中下部的燃燒器位置調(diào)節(jié)旋鈕，兩個(gè)旋鈕中上面的是調(diào)垂直位置，左鍵點(diǎn)擊燃燒器向下移動(dòng)，右鍵點(diǎn) 34

擊向上移動(dòng)，下面的旋鈕是調(diào)水平位置，左鍵點(diǎn)擊向右移動(dòng)，右鍵點(diǎn)擊向左移動(dòng)，調(diào)整的同時(shí)密切注意吸光度的變化，找到吸光度最大的位置。

第十五步：微調(diào)陰極燈電流

同時(shí)打開(kāi)能量表和陰極燈電流表，調(diào)整兩個(gè)窗口的位置，使得在調(diào)節(jié)電流表的時(shí)候可以看到能量表和吸光度值

微調(diào)陰極燈電流的原則是：在保證有足夠且穩(wěn)定的光強(qiáng)輸出條件下，選擇低的工作電流，沒(méi)有特別的數(shù)量限制，根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求而定，一般是先選定大致的測(cè)量條件，然后選定一個(gè)大致的燈電流的范圍，然后噴入標(biāo)準(zhǔn)溶液，在選定的燈電流范圍內(nèi)每隔1~2mA測(cè)量一次，計(jì)算平均值和標(biāo)準(zhǔn)偏差，并繪制吸光度與燈電流的關(guān)系曲線，選取靈敏度高、穩(wěn)定性好的條件為工作條件。對(duì)于本實(shí)驗(yàn)，10mA為最佳值，省略了選擇的過(guò)程。如果調(diào)整電流后能量表指針偏出了紅色區(qū)域，可以用增益旋鈕調(diào)節(jié)使指針回到紅色范圍。調(diào)節(jié)好以后，關(guān)閉能量表和陰極燈電流表。

注：在實(shí)驗(yàn)中調(diào)節(jié)陰極燈的電壓、電流以及能量增益按鈕都可以改變能量輸出值的大小；實(shí)際上，在新式的陰極燈中，一般沒(méi)有電壓調(diào)節(jié)鈕，它的能量增益鈕能自動(dòng)控制電壓。第十六步：調(diào)節(jié)空氣和乙炔的流量

用鼠標(biāo)點(diǎn)擊原子吸收分光光度計(jì)左下的空氣和乙炔流量調(diào)節(jié)位置出現(xiàn)空氣和乙炔的流量調(diào)節(jié)窗口，調(diào)整窗口位置，使得在調(diào)節(jié)空氣和乙炔流量的時(shí)候可以看到吸光度數(shù)值，35

左邊的轉(zhuǎn)子流量計(jì)指示空氣的流量，右邊的轉(zhuǎn)子流量計(jì)指示乙炔的流量，左邊的旋鈕調(diào)節(jié)空氣的流量，右邊的旋鈕調(diào)節(jié)乙炔的流量。首先固定空氣流量（具體值由實(shí)驗(yàn)確定），改變乙炔流量，使當(dāng)前液指示吸光度最大。接著固定乙炔流量，改變空氣流量，使當(dāng)前液指示吸光度最大。第十七步：樣品測(cè)試和數(shù)據(jù)記錄

前面已經(jīng)把儀器調(diào)節(jié)好，不要在改變實(shí)驗(yàn)條件，打開(kāi)多功能面板，把“信號(hào)”旋鈕轉(zhuǎn)到“積分”位置（由于吸光度的值一直在變化，旋轉(zhuǎn)“信號(hào)”旋鈕到“信號(hào)積分”位置，這可使變化速率變慢）。點(diǎn)擊左邊菜單的“溶液選取”或者燒杯選擇溶液，依次測(cè)量各標(biāo)準(zhǔn)溶液和未知溶液，且在每次測(cè)試前都要用空白樣液校零。每測(cè)量一種溶液后，點(diǎn)擊“記錄數(shù)據(jù)”按鈕記錄數(shù)據(jù)。

測(cè)量并記錄完最后一組數(shù)據(jù)。第十八步：數(shù)據(jù)處理

記錄完最后一組數(shù)據(jù)后，點(diǎn)擊“繪制曲線”按鈕，出現(xiàn)繪制曲線界面：

此時(shí)就可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)確定待測(cè)元素的濃度。（提示：每次實(shí)驗(yàn)所得到的未知物質(zhì)的濃度都是不同的）

第十九步：實(shí)驗(yàn)完畢（仿真實(shí)驗(yàn)不作要求）

實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，吸入去離子水2~3min，先關(guān)乙炔，再關(guān)空氣。

關(guān)閉燈電源開(kāi)關(guān)及總電源開(kāi)關(guān)，將儀器上各旋鈕轉(zhuǎn)至零位，最后關(guān)閉通風(fēng)裝置電源。

實(shí)驗(yàn)四

氣相色譜試驗(yàn)手冊(cè)

一、實(shí)驗(yàn)概述

氣相色譜法的基本原理是利用混合物中各組分在流動(dòng)相和固定相中具有不同的溶解和解析能力，或不同的吸附和脫附能力。當(dāng)兩相作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí)，樣品各組分在兩相中受上述各種作用力的反復(fù)作用，從而使混合物中的組分得到分離。色譜廣泛用于物質(zhì)的分離，分析、濃縮、回收、純化和置備。

實(shí)驗(yàn)分為教學(xué)模式和考核模式兩種情況，在教學(xué)模式下顯示全部的幫助信息，在考核模式下則把幫助信息隱藏掉。

二、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/p>

1、了解氣相色譜儀的原理和結(jié)構(gòu)。

2、在模擬系統(tǒng)上學(xué)習(xí)氣相色譜儀的操作。

三、重點(diǎn)和難點(diǎn)：

氣相色譜儀的原理和操作方法。

四、實(shí)驗(yàn)裝置

6890氣相色譜儀，第四代模塊化十三路EPC控制，數(shù)字化設(shè)定所有氣路參數(shù)，流量和壓力精確穩(wěn)定，壓力精度0.01psi，保留時(shí) 間和峰面積高度重復(fù)。

通過(guò)精確EPC氣路控制，快速柱箱升溫速率，超速FID、NPD和ECD響應(yīng)，高速數(shù)據(jù)采集處理系統(tǒng)，可得到與原譜圖分離度相同而速度可快2-10倍的結(jié)果。柱箱溫度穩(wěn)定性：0.02%

載氣流速穩(wěn)定性：0.31％

ECD檢測(cè)器檢測(cè)限：6.31×10-15g/ml FPD檢測(cè)限：3.40×10-13g/s 基線漂移:滿刻度的3%／h

五、實(shí)驗(yàn)操作

1．啟動(dòng)Ad500u.exe，在培訓(xùn)項(xiàng)目頁(yè)選擇要進(jìn)行培訓(xùn)的項(xiàng)目，點(diǎn)擊左上方的啟動(dòng)培訓(xùn)單元按鈕。本實(shí)驗(yàn)是把不同的樣品設(shè)成不同的培訓(xùn)項(xiàng)目。每個(gè)項(xiàng)目又分為“練習(xí)模式”和“考試模式”，在考試模式下，無(wú)任何提示信息；在練習(xí)模式下，有評(píng)分幫助和提示信息。如下圖：

2． 進(jìn)入初始界面。在單機(jī)版里，初始界面上有整套氣相色譜設(shè)備的簡(jiǎn)要示意圖，點(diǎn)擊設(shè)備進(jìn)入下一步操作。

3． 首先進(jìn)入一個(gè)實(shí)驗(yàn)原理分析的簡(jiǎn)圖，此界面為實(shí)驗(yàn)的主界面，通過(guò)此界面，可進(jìn)入到試驗(yàn)各個(gè)主要步驟里。點(diǎn)擊實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前的實(shí)驗(yàn)預(yù)習(xí)操作

4． 實(shí)驗(yàn)對(duì)操作的流程進(jìn)行練習(xí)，將操作的正確步驟依次排序后點(diǎn)擊確認(rèn)。

正確的順序是“開(kāi)機(jī)”-“方法編輯”-“進(jìn)樣”-“數(shù)據(jù)采集”-“數(shù)據(jù)分析”

除了熟悉正確的工作站操作外，還應(yīng)了解在實(shí)際操作中應(yīng)注意的準(zhǔn)備工作，如樣品和試劑的選擇，要掌握色譜試劑的選擇，在不同的條件下選擇不同檔次的試劑，如“分析純”“色譜純”等等，試劑的選用關(guān)系到實(shí)驗(yàn)的成敗。

5． 進(jìn)入開(kāi)機(jī)步驟的介紹。讓學(xué)生了解氣相色譜的開(kāi)機(jī)準(zhǔn)備過(guò)程及相關(guān)化學(xué)站的使用，可以點(diǎn)擊“Top view窗口”和“Instrument Control 儀器控制窗口”進(jìn)入兩個(gè)分支介紹，也可點(diǎn)擊右上角圖標(biāo)返回主界面。

開(kāi)機(jī)之前一般要檢查氣路的氣密性，尤其是在使用易燃?xì)怏w做載氣的情況下，檢查完氣密性后先通氣后開(kāi)機(jī)，注意鋼瓶輸出壓比柱前壓要高0.05MP.開(kāi)機(jī)后要檢查檢測(cè)器及恒溫室的穩(wěn)定性，確保實(shí)驗(yàn)在可靠的環(huán)境下進(jìn)行可以提高實(shí)驗(yàn)的再現(xiàn)性。

點(diǎn)擊“Top view窗口”按鈕，進(jìn)入Top view界面；點(diǎn)擊“Instrument Control儀器控制窗口”，進(jìn)入儀器控制窗口。這里是對(duì)平臺(tái)與其它分析聯(lián)用時(shí)的接口算法，用于數(shù)據(jù)庫(kù)的查找和檢測(cè)，常用與氣質(zhì)聯(lián)用時(shí)。

如下兩副圖。

Top view

Instrument Control儀器控制窗口

6． 點(diǎn)擊上圖的“返回”按鈕，返回上級(jí)界面。點(diǎn)擊右上角圖標(biāo)返回實(shí)驗(yàn)主界面。在此我們返回實(shí)驗(yàn)的主界面。

7． 主界面的各個(gè)設(shè)備如有與實(shí)驗(yàn)參數(shù)關(guān)聯(lián)的情況，可以在鼠標(biāo)移動(dòng)到它的熱區(qū)時(shí)顯示

出來(lái)，此時(shí)可以點(diǎn)擊參數(shù)進(jìn)入設(shè)置頁(yè)面,設(shè)置參數(shù)以紅色突出顯示，輸入數(shù)字后按回車，再點(diǎn)擊右上角圖標(biāo)回主界面。

8． 按照上圖進(jìn)行的步驟可以將所有參數(shù)進(jìn)行設(shè)置，回到主頁(yè)面后也可點(diǎn)“切換至方法編輯”進(jìn)行部分參數(shù)設(shè)定。

實(shí)驗(yàn)參數(shù)的設(shè)定是氣相色譜實(shí)驗(yàn)中重要的環(huán)節(jié)，在實(shí)驗(yàn)預(yù)習(xí)時(shí)就應(yīng)當(dāng)了解和掌握，每次實(shí)驗(yàn)前應(yīng)了解實(shí)驗(yàn)需要設(shè)置的參數(shù)，并掌握了解不同參數(shù)的設(shè)置對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，便于在重復(fù)實(shí)驗(yàn)和分析結(jié)果時(shí)得到客觀的答案。

9． 點(diǎn)擊主界面的“方法編輯”進(jìn)入方法編輯界面。

10． 單擊Method菜單。

11． 在Instrument control窗口的標(biāo)題欄中應(yīng)顯示當(dāng)前的方法“*.M”。如果沒(méi)有，從Method菜單中選Load…。單擊“*.M”并單擊OK。

12． 點(diǎn)擊進(jìn)入Method/Edit Entire Method…窗口。確認(rèn)三個(gè)選項(xiàng)都選定，然后單擊OK。

13． 確認(rèn)Data Acquisition（數(shù)據(jù)采集）和Data Analysis（數(shù)據(jù)分析）已被選定。單擊OK。

14． 選擇Ｍanul作為進(jìn)樣源(本實(shí)驗(yàn)采用手動(dòng)進(jìn)樣，如果有自動(dòng)進(jìn)樣器的話，選擇GC ALS)。確認(rèn)Use MS已被選定。單擊OK。

15． 出現(xiàn)Instrument Edit Inlets(儀器編輯入口)，單擊Options（選項(xiàng)）圖標(biāo)，確認(rèn)壓力單位為psi。

16． 設(shè)置載氣類型、進(jìn)樣口溫度和分流比三個(gè)參數(shù)。用鼠標(biāo)點(diǎn)擊閃動(dòng)的文字，出現(xiàn)選項(xiàng)，用鼠標(biāo)點(diǎn)擊選擇正確答案。

17． 設(shè)置載氣平均速度參數(shù)。用鼠標(biāo)點(diǎn)擊閃動(dòng)的文字，出現(xiàn)選項(xiàng)，用鼠標(biāo)點(diǎn)擊選擇正確答案。

18． 設(shè)置載氣初始溫度和柱箱升溫過(guò)程。用鼠標(biāo)點(diǎn)擊閃動(dòng)的文字，出現(xiàn)選項(xiàng)，用鼠標(biāo)點(diǎn)擊選擇正確答案。

19．20．21．46 單擊OK按鈕完成設(shè)置。

此窗口因?yàn)闆](méi)有選擇Show選項(xiàng)，所以其他參數(shù)不可用。單擊OK。

選擇檢測(cè)器，實(shí)驗(yàn)不同要求不同的檢測(cè)器，點(diǎn)擊ok。

檢測(cè)器可以分為濃度型和質(zhì)量型，濃度型檢測(cè)器的響應(yīng)取決于組分濃度的瞬間變化，質(zhì)量型的響應(yīng)值取決于單位時(shí)間內(nèi)進(jìn)入檢測(cè)器的組分質(zhì)量，熱導(dǎo)（濃度型）、電子捕獲（濃度型）、氫火焰（質(zhì)量型）是檢測(cè)器中運(yùn)用的最廣泛的三個(gè)檢測(cè)器。

22． 只選擇Percent Report。單擊OK。

23． 設(shè)定屏幕為輸出裝置。單擊OK。

24． 提醒您保存方法。完成它并單擊OK。返回到主界面。

25． 點(diǎn)擊“開(kāi)始進(jìn)樣”按鈕，進(jìn)入進(jìn)樣步驟界面。

26．27．28．48 點(diǎn)擊紅色字“觀看進(jìn)樣錄像”，演示進(jìn)樣過(guò)程。

點(diǎn)擊界面上的“進(jìn)入自動(dòng)進(jìn)樣”，進(jìn)入到到自動(dòng)進(jìn)樣界面。

打開(kāi)進(jìn)樣器的蓋子，放入樣品。如下圖

第二篇：《儀器分析》仿真實(shí)驗(yàn)

儀器分析實(shí)驗(yàn)仿真實(shí)驗(yàn)

紫外分光光度計(jì)仿真實(shí)驗(yàn)

一、實(shí)驗(yàn)概述：

在分之中，除了電子相對(duì)于原子核的運(yùn)動(dòng)之外，還有原子核之間振動(dòng)和轉(zhuǎn)動(dòng)引起的相對(duì)位移。這三種運(yùn)功能量都是量子化的，對(duì)應(yīng)有一定的能級(jí)。分子的能量是這三種能量的總和。當(dāng)用一定頻率（波長(zhǎng)）的電磁波（光）照射分子，其能量恰好等于分子的兩個(gè)能級(jí)差時(shí)，則分子就會(huì)吸收光的能量而由較低的能級(jí)躍遷到較高的能級(jí)，同時(shí)光的強(qiáng)度（能量）變小。吸光度符合吸收定律：

A=lg（I0/I）=KcL 根據(jù)這一關(guān)系可以用工作曲線法來(lái)測(cè)定未知溶液中吸光物質(zhì)的濃度。

二、實(shí)驗(yàn)裝置：

儀器調(diào)節(jié)面板：

本實(shí)驗(yàn)仿真的設(shè)備是UV-754C紫外可見(jiàn)光風(fēng)光光度計(jì)，它具有鹵鎢燈（30W）、氘燈（2.5A）兩種光源，分別適用于360～850nm和200～360nm波段，采用平面光柵作色散元件，GD33光電管作接受器。

三、實(shí)驗(yàn)操作： 第一步：選取實(shí)驗(yàn)

點(diǎn)擊主菜單上的“實(shí)驗(yàn)選取”，會(huì)出現(xiàn)如下的對(duì)話框：

用鼠標(biāo)左鍵點(diǎn)中你要做的實(shí)驗(yàn)，此文件名會(huì)出現(xiàn)在對(duì)話框的“文件名”一欄的文本框中，在此實(shí)驗(yàn)文件上面雙擊左鍵或者點(diǎn)擊“打開(kāi)”按鈕打開(kāi)實(shí)驗(yàn)文件。

第二步：打開(kāi)電源、預(yù)熱

用鼠標(biāo)點(diǎn)擊紫外分光光度計(jì)上的暗箱蓋，暗箱蓋會(huì)自動(dòng)打開(kāi)，如下圖所示：

１

然后用鼠標(biāo)點(diǎn)擊儀器右下角的紅色電源開(kāi)關(guān)接通電源，這是儀器調(diào)節(jié)面板會(huì)自動(dòng)顯示，并進(jìn)入開(kāi)機(jī)自檢狀態(tài),此狀態(tài)大約持續(xù)10秒左右,在這段時(shí)間里計(jì)算機(jī)出現(xiàn)停滯現(xiàn)象是正常的.隨后計(jì)算機(jī)進(jìn)入預(yù)熱期, 時(shí)間大約為1分鐘（真實(shí)儀器為20分鐘）。預(yù)熱結(jié)束時(shí)會(huì)聽(tīng)見(jiàn)蜂鳴聲,并且會(huì)看見(jiàn)預(yù)熱按鈕上方的燈熄滅此時(shí)儀器就進(jìn)入工作狀態(tài)了。

關(guān)狀態(tài)：

開(kāi)狀態(tài)：

第三步：配置試液

用鼠標(biāo)點(diǎn)擊主菜單中的“配置試液”按鈕，出現(xiàn)配置試液窗口：

２

用鼠標(biāo)點(diǎn)擊下面5個(gè)容量瓶，選擇每個(gè)容量瓶要加入的蒽醌標(biāo)準(zhǔn)溶液量，系統(tǒng)會(huì)自動(dòng)稀釋到刻度線：

5個(gè)容量瓶的溶液都配置好以后，點(diǎn)擊窗口右下角的箭頭進(jìn)入下一步。

第四步：確定吸收波長(zhǎng)

點(diǎn)擊試液配置窗口右下角的箭頭后，系統(tǒng)會(huì)顯示如下窗口，自動(dòng)測(cè)量完成了吸收光譜圖: ３

點(diǎn)擊文字中的“吸光度——波長(zhǎng)曲線”到吸收光譜圖窗口，再點(diǎn)擊“繪制吸收光譜”按鈕就可以看到蒽醌的紫外吸收光譜圖：

記錄下最大的吸收波長(zhǎng)，關(guān)閉此窗口，然后進(jìn)行下一步

第五步：調(diào)節(jié)吸收波長(zhǎng)

用鼠標(biāo)點(diǎn)擊紫外分光光度計(jì)上的波長(zhǎng)調(diào)節(jié)位置，出現(xiàn)波長(zhǎng)調(diào)節(jié)窗口，用鼠標(biāo)左鍵或者右鍵點(diǎn)擊波長(zhǎng)調(diào)節(jié)旋鈕來(lái)增大或者減小波長(zhǎng)到剛才記錄的最大波長(zhǎng)。

４

第六步：儀器調(diào)節(jié)面板

點(diǎn)擊調(diào)出儀器調(diào)節(jié)面板

點(diǎn)擊按鈕打開(kāi)氘燈，依次點(diǎn)擊、、按鈕關(guān)閉鎢燈，點(diǎn)擊到T，然后按下 按鈕，等待數(shù)字顯示平穩(wěn)后，點(diǎn)擊到A。

調(diào)節(jié)完成后的面板如下圖：

５

第七步：將樣品裝入吸收池架

點(diǎn)擊主界面上的吸收池架調(diào)出吸收池畫(huà)面：

吸收池架有四個(gè)位置，在測(cè)量時(shí)分別對(duì)應(yīng)儀器調(diào)節(jié)面板的上的“參考”、“1#”、“2#”、“3#”四個(gè)指示位置。把鼠標(biāo)停留在上面6個(gè)容量瓶上，下面會(huì)顯示相應(yīng)的說(shuō)明。點(diǎn)擊每個(gè)位置選擇要加入的溶液：

加入溶液后，窗口右下角會(huì)出現(xiàn)箭頭提示放入暗箱，點(diǎn)擊系統(tǒng)會(huì)將吸收池架自動(dòng)放入。

第八步：測(cè)量

點(diǎn)擊調(diào)出儀器調(diào)節(jié)面板以便讀取吸光度數(shù)據(jù)，然后前后拉動(dòng)拉桿將不同的溶液放進(jìn)光路中，從儀器調(diào)節(jié)面板上讀取吸光度數(shù)據(jù)，系統(tǒng)會(huì)自動(dòng)記錄。

６

按照以上方法把六組數(shù)據(jù)測(cè)試完畢。

第八步：實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理

六組數(shù)據(jù)測(cè)試完畢后，點(diǎn)記主菜單上的“實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)”按鈕，調(diào)出數(shù)據(jù)處理窗口，在工作曲線頁(yè)點(diǎn)擊“繪制工作去先”按鈕，系統(tǒng)會(huì)自動(dòng)繪制工作曲線，并根據(jù)工作曲線給出待測(cè)溶液的濃度。

如果計(jì)算機(jī)安裝了打印機(jī)，可以點(diǎn)擊右上角“打印報(bào)表”按鈕打印實(shí)驗(yàn)報(bào)告。

第十步：實(shí)驗(yàn)完畢

取出暗箱中的吸收池，關(guān)閉暗箱，關(guān)閉電源。然后清洗吸收池、整理現(xiàn)場(chǎng)。

７

原子吸收分光光度計(jì)仿真實(shí)驗(yàn)

一、實(shí)驗(yàn)概述：

原子吸收分光光度分析法又稱原子吸收光譜分析法，是根據(jù)物質(zhì)產(chǎn)生的原子蒸氣對(duì)特定波長(zhǎng)的光的吸收作用來(lái)進(jìn)行定量分析的。

與原子發(fā)射光譜相反，元素的基態(tài)原子可以吸收與其發(fā)射波長(zhǎng)相同的特征譜線。當(dāng)光源發(fā)射的某一特征波長(zhǎng)的光通過(guò)原子蒸氣時(shí)，原子中的外層電子將選擇性地吸收該元素所能發(fā)射的特征波長(zhǎng)的譜線，這時(shí)，透過(guò)原子蒸氣的入射光將減弱，其減弱的程度與蒸氣中該元素的濃度成正比，吸光度符合吸收定律：

A=lg（I0/I）=KcL

根據(jù)這一關(guān)系可以用工作曲線法或標(biāo)準(zhǔn)加入法來(lái)測(cè)定未知溶液中某元素的含量。

在火焰原子吸收光譜分析中，分析方法的靈敏度、準(zhǔn)確度、干擾情況和分析過(guò)程是否簡(jiǎn)便快速等，除與所用儀器有關(guān)外，在很大程度上取決于實(shí)驗(yàn)條件。因此最佳實(shí)驗(yàn)條件的選擇是個(gè)重要的問(wèn)題。本實(shí)驗(yàn)在對(duì)鈉元素測(cè)定時(shí)，分別對(duì)燈電流、狹縫寬度、燃燒器高度、燃?xì)夂椭細(xì)饬髁勘龋ㄖ急龋┑纫蛩剡M(jìn)行選擇。

二、實(shí)驗(yàn)裝置：

本實(shí)驗(yàn)仿真的設(shè)備是AA320型原子吸收分光光度計(jì)，主要設(shè)備參數(shù)如下： 波長(zhǎng)范圍：190.0~900.0 nm 光柵刻線：1200 條/mm 閃躍波長(zhǎng)：250 nm 線色散倒數(shù)：2.38 nm/mm 狹縫寬度1~6檔對(duì)應(yīng)的nm數(shù)分別為：0.2，0.4，0.7，1.4，2.4，5.0 ８

原子吸收分光光度計(jì)的放大圖：

三、實(shí)驗(yàn)操作： 第一步：選取實(shí)驗(yàn)

點(diǎn)擊主菜單上的“試驗(yàn)選取”，會(huì)出現(xiàn)如下的對(duì)話框：

用鼠標(biāo)左鍵點(diǎn)中你要做的實(shí)驗(yàn)，此文件名會(huì)出現(xiàn)在對(duì)話框的“文件名”一欄的文本框 中，在此實(shí)驗(yàn)文件上面雙擊左鍵或者點(diǎn)擊“打開(kāi)”按鈕打開(kāi)實(shí)驗(yàn)文件。

選取實(shí)驗(yàn)后回到實(shí)驗(yàn)主界面，窗口上面的標(biāo)題欄會(huì)顯示實(shí)驗(yàn)名稱+實(shí)驗(yàn)文件名稱。第二步：打開(kāi)電源

在主界面上用鼠標(biāo)點(diǎn)擊原子吸收分光光度計(jì)，會(huì)出現(xiàn)原子吸收分光放大圖，用鼠標(biāo)點(diǎn)擊右下角的總電源開(kāi)關(guān)打開(kāi)電源。

９

第三步：打開(kāi)空氣壓縮機(jī)電源開(kāi)關(guān)

打開(kāi)原子吸收分光光度計(jì)的總電源開(kāi)關(guān)后，用鼠標(biāo)點(diǎn)擊窗口右下角的“返回”按鈕回到主界面，然后點(diǎn)擊空氣壓縮機(jī)，會(huì)出現(xiàn)空氣壓縮機(jī)窗口，如圖所示：用鼠標(biāo)點(diǎn)擊空氣壓縮機(jī)電源開(kāi)關(guān)打開(kāi)電源，電源上面的指示燈會(huì)亮起來(lái)。

打開(kāi)電源開(kāi)關(guān)后，關(guān)閉空氣壓縮機(jī)的窗口回到主界面。

第四步：選擇陰極燈 回到主界面后，點(diǎn)擊原子吸收分光光度計(jì)出現(xiàn)原子吸收分光光度計(jì)放大圖，用鼠標(biāo)點(diǎn)擊左上的陰極燈箱，會(huì)出現(xiàn)陰極燈窗口。

１０

做實(shí)驗(yàn)時(shí)要根據(jù)待測(cè)元素的不同選擇相應(yīng)的元素?zé)?。用鼠?biāo)左鍵點(diǎn)擊左上角的陰極燈的種類，會(huì)出現(xiàn)陰極燈選擇畫(huà)面：

用鼠標(biāo)左鍵點(diǎn)擊要選的陰極燈，然后點(diǎn)擊陰極燈電源開(kāi)關(guān)接通電源，燈被點(diǎn)亮。關(guān)閉此窗口回到原子吸收分光光度計(jì)畫(huà)面，然后進(jìn)行下一步。

１１

第五步：粗調(diào)節(jié)陰極的燈電流

點(diǎn)擊原子吸收分光光度計(jì)上的陰極燈電流指示位置，會(huì)出現(xiàn)陰極燈電流調(diào)節(jié)窗口：

在調(diào)節(jié)旋鈕上點(diǎn)擊鼠標(biāo)左鍵增大電流，點(diǎn)擊右鍵減小電流。根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求，調(diào)節(jié)電流再8~11mA之間。然后關(guān)閉電流表調(diào)節(jié)窗口，回到原子吸收分光光度計(jì)畫(huà)面。

第六步：波長(zhǎng)掃描

用鼠標(biāo)點(diǎn)擊原子吸收分光光度計(jì)右下的波長(zhǎng)掃描按鈕，左邊白色的按鈕是在一定范圍內(nèi)自動(dòng)從大到小掃描，灰色按鈕是在一定范圍內(nèi)自動(dòng)從小到大掃描，系統(tǒng)會(huì)自動(dòng)掃描找到最合適的波長(zhǎng)。

第七步：調(diào)節(jié)多功能面板

用鼠標(biāo)點(diǎn)擊原子吸收分光光度計(jì)右上的多功能面板，出現(xiàn)多功能面板的放大圖。

１２

多功能面板上的調(diào)節(jié)旋鈕用鼠標(biāo)左鍵點(diǎn)擊逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)，用鼠標(biāo)右鍵點(diǎn)擊順時(shí)針旋轉(zhuǎn)。調(diào)節(jié)“方式”到“調(diào)整”檔，然后關(guān)閉多功能面板窗口回到原子吸收分光光度計(jì)畫(huà)面。

第八步：調(diào)節(jié)陰極燈位置

用鼠標(biāo)步左鍵點(diǎn)擊原子吸收分光光度計(jì)右下的能量表，會(huì)出現(xiàn)能量表的放大圖，用鼠標(biāo)點(diǎn)中能量表窗口的藍(lán)色標(biāo)題欄，然后按住左鍵移動(dòng)鼠標(biāo)，窗口就會(huì)跟隨鼠標(biāo)的軌跡移動(dòng)，按照此方法把能量表窗口移動(dòng)到屏幕靠邊上的位置。然后用鼠標(biāo)點(diǎn)擊原子吸收分光光度計(jì)的陰極燈箱，出現(xiàn)陰極燈調(diào)節(jié)窗口。此時(shí)應(yīng)調(diào)節(jié)窗口的位置，使得在調(diào)節(jié)陰極燈位置的時(shí)候可以看到能量?jī)x表。

１３

分別在垂直和水平方向上調(diào)節(jié)陰極燈的位置，使得獲得的能量最大，調(diào)節(jié)的時(shí)候一定要反復(fù)多試幾次，如果在最大點(diǎn)位置附近移動(dòng)一兩下不好調(diào)準(zhǔn)，可以先移動(dòng)到最大點(diǎn)位置比較遠(yuǎn)的地方再向回調(diào)，如此反復(fù)幾次，找準(zhǔn)最大能量的位置。如果調(diào)整到最大能量后能量表指針偏出了紅色區(qū)域，可以用增益旋鈕調(diào)節(jié)使指針回到紅色范圍。調(diào)節(jié)好以后，關(guān)閉陰極燈窗口。不要關(guān)閉能量表窗口。

第九步：微調(diào)波長(zhǎng)

用鼠標(biāo)點(diǎn)擊原子吸收分光光度計(jì)的波長(zhǎng)微調(diào)旋鈕，左鍵增加，右鍵減小，使獲得最大的能量輸出。如果調(diào)整到最大能量后能量表指針偏出了紅色區(qū)域，可以用增益旋鈕調(diào)節(jié)使指針回到紅色范圍。不要關(guān)閉能量?jī)x表，進(jìn)入下一步。

第十步：調(diào)節(jié)狹縫寬度

點(diǎn)擊原子吸收分光光度計(jì)右上的多功能面板，調(diào)整多功能面板窗口和能量窗口的位置，使得再多功能面板上操作的時(shí)候能夠看見(jiàn)能量窗口。

１４

用鼠標(biāo)點(diǎn)擊狹縫調(diào)節(jié)旋鈕，左鍵點(diǎn)擊逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)，右鍵點(diǎn)擊順時(shí)針旋轉(zhuǎn)，調(diào)節(jié)需要的狹縫寬度，一般情況下狹縫越小，能量越小，太小的能量不利于測(cè)定，狹縫越大，能量越大，但是可能會(huì)引起光譜通帶的增加而產(chǎn)生其他共振線的吸收而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，因此狹縫的寬度要根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)來(lái)定。選擇好狹縫寬度后，如果能量表的指針偏出紅色區(qū)域，可以用增益旋鈕調(diào)節(jié)使指針回到紅色范圍。調(diào)節(jié)好以后，關(guān)閉多功能面板和能量表，然后在原子吸收分光光度計(jì)畫(huà)面上點(diǎn)擊右下角的“返回”按鈕返回到主界面。

第十一步：打開(kāi)乙炔鋼瓶

在主界面上點(diǎn)擊乙炔鋼瓶，會(huì)出現(xiàn)乙炔鋼瓶的放大窗口。

先打開(kāi)乙炔總閥，用鼠標(biāo)左鍵點(diǎn)擊乙炔總閥，總閥會(huì)自動(dòng)打開(kāi)，再次用鼠標(biāo)左鍵點(diǎn)擊后自動(dòng)關(guān)閉。然后調(diào)節(jié)乙炔支閥，左鍵點(diǎn)擊增加開(kāi)度，右鍵點(diǎn)擊減小開(kāi)度，調(diào)節(jié)支壓力表的壓力到足夠大。在真實(shí)實(shí)驗(yàn)中，如果支閥壓力太小，可能造成火焰無(wú)法點(diǎn)燃，建議壓力不小于0.15Mpa。調(diào)節(jié)完成后，關(guān)閉乙炔鋼瓶窗口，回到主界面。

第十二步：接通氣路、點(diǎn)火

在主界面上點(diǎn)擊原子吸收分光光度計(jì)，出現(xiàn)原子吸收分光光度計(jì)放大圖。用鼠標(biāo)左鍵點(diǎn)擊原子吸收分光光度計(jì)中間下部的氣路開(kāi)關(guān)部分，出現(xiàn)氣路開(kāi)關(guān)放大的窗口，從左到右依次點(diǎn)擊打開(kāi)各個(gè)開(kāi)關(guān)，然后關(guān)閉窗口。

１５

打開(kāi)氣路開(kāi)關(guān)以后，關(guān)閉氣路開(kāi)關(guān)窗口回到原子吸收分光光度計(jì)畫(huà)面，用鼠標(biāo)左鍵點(diǎn)住點(diǎn)按鈕幾秒鐘，火焰即被點(diǎn)燃。

注：真實(shí)實(shí)驗(yàn)中，點(diǎn)火前要先進(jìn)行室內(nèi)排風(fēng)，本實(shí)驗(yàn)忽略了這一環(huán)節(jié)。

第十二步：調(diào)零

打開(kāi)原子吸收分光光度計(jì)右上的多功能面板，點(diǎn)擊“方式”旋鈕使調(diào)整到“吸光度”位置后，關(guān)閉多功能面板。點(diǎn)擊主窗體左邊的菜單中的“溶液選取”按鈕或者右下角的溶液燒杯選取溶液

點(diǎn)擊“溶液選取”框內(nèi)的下拉條，選取“空白樣液”，然后點(diǎn)擊窗口下部的“選取”按鈕，系統(tǒng)會(huì)將所選的溶液自動(dòng)噴入霧化器。

１６

點(diǎn)擊原子吸收分光光度計(jì)右下的調(diào)零按鈕進(jìn)行調(diào)零，左右兩個(gè)鍵功能相同。

第十三步：調(diào)節(jié)燃燒器位置

任意選取一份在線性范圍的標(biāo)準(zhǔn)對(duì)比樣液

點(diǎn)擊“選取”按鈕自動(dòng)噴入霧花器后，儀器會(huì)現(xiàn)實(shí)一定的吸光度值，此時(shí)點(diǎn)擊原子分光光度計(jì)中下部的燃燒器位置調(diào)節(jié)旋鈕，兩個(gè)旋鈕中上面的是調(diào)垂直位置，左鍵點(diǎn)擊燃燒器向下移動(dòng)，右鍵點(diǎn)擊向上移動(dòng)，下面的旋鈕是調(diào)水平位置，左鍵點(diǎn)擊向右移動(dòng)，右鍵點(diǎn)擊向左移動(dòng)，調(diào)整的同時(shí)密切注意吸光度的變化，找到吸光度最大的位置。

１７

第十四步：微調(diào)陰極燈電流

同時(shí)打開(kāi)能量表和陰極燈電流表，調(diào)整兩個(gè)窗口的位置，使得在調(diào)節(jié)電流表的時(shí)候可以看到能量表和吸光度值

微調(diào)陰極燈電流的原則是：在保證有足夠且穩(wěn)定的光強(qiáng)輸出條件下，選擇低的工作電流，沒(méi)有特別的數(shù)量限制，根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求而定，一般是先選定大致的測(cè)量條件，然后選定一個(gè)大致的燈電流的范圍，然后噴入標(biāo)準(zhǔn)溶液，在選定的燈電流范圍內(nèi)每隔1~2mA測(cè)量一次，計(jì)算 １８

平均值和標(biāo)準(zhǔn)偏差，并繪制吸光度與燈電流的關(guān)系曲線，選取靈敏度高、穩(wěn)定性好的條件為工作條件。對(duì)于本實(shí)驗(yàn)，10mA為最佳值，省略了選擇的過(guò)程。如果調(diào)整電流后能量表指針偏出了紅色區(qū)域，可以用增益旋鈕調(diào)節(jié)使指針回到紅色范圍。調(diào)節(jié)好以后，關(guān)閉能量表和陰極燈電流表。

注：在實(shí)驗(yàn)中調(diào)節(jié)陰極燈的電壓、電流以及能量增益按鈕都可以改變能量輸出值的大小；實(shí)際上，在新式的陰極燈中，一般沒(méi)有電壓調(diào)節(jié)鈕，它的能量增益鈕能自動(dòng)控制電壓。

第十三步：調(diào)節(jié)空氣和乙炔的流量

用鼠標(biāo)點(diǎn)擊原子吸收分光光度計(jì)左下的空氣和乙炔流量調(diào)節(jié)位置出現(xiàn)空氣和乙炔的流量調(diào)節(jié)窗口，調(diào)整窗口位置，使得在調(diào)節(jié)空氣和乙炔流量的時(shí)候可以看到吸光度數(shù)值，左邊的轉(zhuǎn)子流量計(jì)指示空氣的流量，右邊的轉(zhuǎn)子流量計(jì)指示乙炔的流量，左邊的旋鈕調(diào)節(jié)空氣的流量，右邊的旋鈕調(diào)節(jié)乙炔的流量。首先固定空氣流量（具體值由實(shí)驗(yàn)確定），改變乙炔流量，使當(dāng)前液指示吸光度最大。接著固定乙炔流量，改變空氣流量，使當(dāng)前液指示吸光度最大。

第十四步：樣品測(cè)試和數(shù)據(jù)記錄

前面已經(jīng)把儀器調(diào)節(jié)好，不要在改變實(shí)驗(yàn)條件，打開(kāi)多功能面板，把“信號(hào)”旋鈕轉(zhuǎn)到“積分”位置（由于吸光度的值一直在變化，旋轉(zhuǎn)“信號(hào)”旋鈕到“信號(hào)積分”位置，這可使變化速率變慢）。點(diǎn)擊左邊菜單的“溶液選取”或者燒杯選擇溶液，依次測(cè)量各標(biāo)準(zhǔn)溶液和未知溶液，且在每次測(cè)試前都要用空白樣液校零。每測(cè)量一種溶液后，要記錄數(shù)據(jù)，點(diǎn)擊左邊菜單的“試驗(yàn)數(shù)據(jù)”按鈕打開(kāi)數(shù)據(jù)記錄窗口，按照所列的項(xiàng)目依次讀取數(shù)據(jù)并寫(xiě)入數(shù)據(jù)，然 １９

后點(diǎn)即“取消”按鈕關(guān)閉記錄窗口。

測(cè)量并記錄完最后一組數(shù)據(jù)后，點(diǎn)擊數(shù)據(jù)記錄窗口上的“試驗(yàn)報(bào)告”按鈕進(jìn)入實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理。

第十五步：數(shù)據(jù)處理

記錄完最后一組數(shù)據(jù)后，點(diǎn)擊“試驗(yàn)報(bào)告”按鈕，出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)報(bào)告界面：

２０

此時(shí)就可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)確定待測(cè)元素的濃度。如果計(jì)算機(jī)安裝了打印機(jī)，可以點(diǎn)擊右上角“打印報(bào)表”按鈕打印實(shí)驗(yàn)報(bào)告。

第十六步：實(shí)驗(yàn)完畢

實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，吸入去離子水2~3min，先關(guān)乙炔，再關(guān)空氣。

關(guān)閉燈電源開(kāi)關(guān)及總電源開(kāi)關(guān)，將儀器上各旋鈕轉(zhuǎn)至零位，最后關(guān)閉通風(fēng)裝置電源。

２１

氣相色譜仿真實(shí)驗(yàn)

一、實(shí)驗(yàn)概述：

實(shí)現(xiàn)色譜分離的先決條件是必須具備固定相和流動(dòng)相。固定相可以是一種固體吸附劑，或?yàn)橥繚n于惰性載體表面上的液態(tài)薄膜，此液膜可稱作固定液。流動(dòng)相可以是具有惰性的氣體、液體或超臨界流體，其應(yīng)與固定相和被分離的組分無(wú)特殊相互作用（若流動(dòng)相為液體或超臨界流體可與被分離的組分存在相互作用）。

色譜分離能夠?qū)崿F(xiàn)的內(nèi)因是由于固定相與被分離的各組分發(fā)生的吸附（或分配）系數(shù)的差別，其微觀解釋就是分子間的相互作用力（取向力、誘導(dǎo)力、色散力、氫鍵力、絡(luò)合作用力）的差別。

實(shí)現(xiàn)色譜分離的外因是由于流動(dòng)相的不斷流動(dòng)。由于流動(dòng)相的流動(dòng)使被分離的組分與固定相發(fā)生反復(fù)多次（達(dá)幾百、幾千次）的吸附（或溶解）、解吸（或揮發(fā)）過(guò)程，這樣就使那些在同一固定相上吸附（或分配）系數(shù)只有微小差別的組分，在固定相上的移動(dòng)速度產(chǎn)生了很大的差別，從而達(dá)到了各個(gè)組分的完全分離。

二、實(shí)驗(yàn)裝置：

本實(shí)驗(yàn)仿真的設(shè)備是GC102型氣相色譜儀，該產(chǎn)品為實(shí)驗(yàn)室用的填充相氣相色譜儀，具有熱導(dǎo)、氫焰二種檢測(cè)器，定溫控制恒溫槽及氣流控制裝置。主要設(shè)備參數(shù)如下： 檢測(cè)器靈敏度：熱導(dǎo)池：S≥1000mVml/mg；載氣H2樣品C6H6

－氫焰：Mt≤1×1010g/sec；載氣N2樣品C6H6

檢測(cè)器穩(wěn)定性：基線漂移：≤0.05mV/h 層析柱恒溫室：室溫＋40℃－300℃ 恒溫精度：±0.3℃

２２

有效區(qū)最大溫差：2℃ 氣化室：最高400℃

氣相色譜儀各部分介紹：

三、實(shí)驗(yàn)操作： 第一步：選取實(shí)驗(yàn)

點(diǎn)擊主菜單上的“實(shí)驗(yàn)選取”，會(huì)出現(xiàn)如下的對(duì)話框：

用鼠標(biāo)左鍵點(diǎn)中你要做的實(shí)驗(yàn)，此文件名會(huì)出現(xiàn)在對(duì)話框的“文件名”一欄的文本框 中，在此實(shí)驗(yàn)文件上面雙擊左鍵或者點(diǎn)擊“打開(kāi)”按鈕打開(kāi)實(shí)驗(yàn)文件。

選取實(shí)驗(yàn)后回到實(shí)驗(yàn)主界面，窗口上面的標(biāo)題欄會(huì)顯示實(shí)驗(yàn)名稱+實(shí)驗(yàn)文件名稱。

第二步：確認(rèn)操作條件

點(diǎn)擊主菜單上的“操作條件”，會(huì)出現(xiàn)如下的操作條件列表：

２３

在實(shí)驗(yàn)調(diào)節(jié)過(guò)程中，請(qǐng)以此列表內(nèi)的條件為準(zhǔn)進(jìn)行調(diào)節(jié)，否則不能正確輸出色譜峰。

第三步：開(kāi)載氣

用鼠標(biāo)點(diǎn)擊實(shí)驗(yàn)主界面上三個(gè)氣體鋼瓶中的載氣鋼瓶，出現(xiàn)鋼瓶的調(diào)節(jié)閥畫(huà)面：

當(dāng)閥關(guān)閉時(shí)，用鼠標(biāo)左鍵點(diǎn)擊打開(kāi)，當(dāng)閥打開(kāi)時(shí)，用鼠標(biāo)左鍵點(diǎn)擊關(guān)閉。打開(kāi)總閥和減壓閥，注意開(kāi)關(guān)閥門的順序。

第四步：檢查柱前壓力

點(diǎn)擊氣相色譜儀上的柱前壓力表，查看柱前壓力是否符合操作條件。

２４

注意：在仿真實(shí)驗(yàn)中，柱前壓力都默認(rèn)是正確值，在真實(shí)實(shí)驗(yàn)中，應(yīng)該根據(jù)實(shí)驗(yàn)的具體要求用鋼瓶的減壓閥調(diào)節(jié)柱前壓力。

第五步：調(diào)節(jié)載氣流量

點(diǎn)擊氣相色譜儀上的流量調(diào)節(jié)部分，會(huì)出現(xiàn)流量調(diào)節(jié)器和皂膜流量計(jì)。

一般氣相色譜儀的流量調(diào)節(jié)部分都有三個(gè)調(diào)節(jié)器，分別控制載氣、氫氣、空氣（后兩者用于FID檢測(cè)氣），但是轉(zhuǎn)子流量計(jì)的指示都不是很準(zhǔn)確，因此都要加一個(gè)皂膜流量計(jì)來(lái)進(jìn)行精確的測(cè)定。界面上的三個(gè)流量調(diào)節(jié)旋鈕，左鍵點(diǎn)擊增加流量，右鍵點(diǎn)擊減小流量，調(diào)節(jié)到一定開(kāi)度后，轉(zhuǎn)子流量計(jì)中的轉(zhuǎn)子上升到了一定的高度，此時(shí)用鼠標(biāo)左鍵點(diǎn)擊皂膜流量計(jì)的橡皮頭，產(chǎn)生一個(gè)皂膜，被載氣推動(dòng)由下向上運(yùn)動(dòng)，記錄皂膜通過(guò)一定體積的時(shí)間就可以求出載氣的流量，載氣的精確流量在上面自動(dòng)計(jì)算顯示出來(lái)。在仿真實(shí)驗(yàn)中，為了簡(jiǎn)便，用皂膜流量計(jì)測(cè)量過(guò)一次以后，以后再調(diào)節(jié)流量調(diào)節(jié)旋鈕時(shí)，精確流量就會(huì)自動(dòng)顯示，不用反復(fù)測(cè)量，在真實(shí)實(shí)驗(yàn)當(dāng)中，是每次都重新測(cè)量的。

調(diào)節(jié)載氣流量到實(shí)驗(yàn)操作條件要求的數(shù)值，然后進(jìn)行下一步。

第六步：打開(kāi)電源

用鼠標(biāo)點(diǎn)擊打開(kāi)氣相色譜儀上的電源開(kāi)關(guān)。

關(guān)的狀態(tài)：

開(kāi)的狀態(tài)：

第七步：調(diào)節(jié)溫度

用鼠標(biāo)點(diǎn)擊氣相色譜儀的溫度調(diào)節(jié)步部分，出現(xiàn)溫度調(diào)節(jié)詳細(xì)畫(huà)面。

２５

調(diào)節(jié)溫度時(shí)，用鼠標(biāo)點(diǎn)擊相應(yīng)數(shù)字位上的“+”或者“—”，該數(shù)字位就會(huì)加1或者減1。按照實(shí)驗(yàn)操作條件要求分別調(diào)節(jié)柱室（柱溫）、進(jìn)樣器（氣化室溫）、離子室（離子室溫）的溫度，注意：柱室的溫度是X1的，而進(jìn)樣器和離子室的溫度是X10的。

第八步：調(diào)節(jié)TCD參數(shù)（如果用FID檢測(cè)器，此步應(yīng)該調(diào)節(jié)FID參數(shù)）

用鼠標(biāo)點(diǎn)擊氣相色譜儀上的TCD調(diào)節(jié)面版。

首先用鼠標(biāo)點(diǎn)擊電源開(kāi)關(guān)接通電源，指示燈亮。然后根據(jù)實(shí)驗(yàn)的要求選擇橋電流和衰減比。如果電流表指示的電流稍有偏差，可以用“電流微調(diào)”旋鈕調(diào)節(jié)?！傲阏{(diào)”旋鈕可以用來(lái)調(diào)節(jié)記錄筆在記錄紙上的位置，粗調(diào)位置變化大，細(xì)調(diào)位置變化小。然后點(diǎn)擊落筆開(kāi)始走基線。

調(diào)節(jié)好各項(xiàng)參數(shù)，基線走平穩(wěn)后，可以進(jìn)行下一步——“進(jìn)樣”。

注意：對(duì)于使用FID檢測(cè)器的實(shí)驗(yàn)，此步應(yīng)該調(diào)節(jié)FID參數(shù)，如下圖：

２６

然后還要開(kāi)氫氣、壓縮空氣（助燃?xì)猓?，點(diǎn)火等步驟。

第九步：進(jìn)樣

所有的實(shí)驗(yàn)參數(shù)調(diào)節(jié)好之后，點(diǎn)擊主界面上的注射進(jìn)樣器，出現(xiàn)如下對(duì)話框：

輸入實(shí)驗(yàn)操作條件規(guī)定的進(jìn)樣量，然后點(diǎn)擊“開(kāi)始進(jìn)樣”按鈕。系統(tǒng)會(huì)自動(dòng)注射進(jìn)樣，記錄儀開(kāi)始畫(huà)出色譜圖。

當(dāng)色譜峰輸出完成后，會(huì)出現(xiàn)如下對(duì)話框：

點(diǎn)擊“確定”按鈕關(guān)閉對(duì)話框。

第十步：數(shù)據(jù)處理

２７

點(diǎn)擊主界面上的“實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)”按鈕，出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)報(bào)告界面：

根據(jù)得出的保留時(shí)間、峰高、半峰寬等實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，可以計(jì)算分離度等相關(guān)參數(shù)。如果計(jì)算機(jī)安裝了打印機(jī)，可以點(diǎn)擊右上角“打印報(bào)表”按鈕打印實(shí)驗(yàn)報(bào)告。

第十一步：實(shí)驗(yàn)完畢

在真實(shí)實(shí)樣當(dāng)中，實(shí)驗(yàn)完畢半小時(shí)后，按開(kāi)機(jī)步驟反方向關(guān)機(jī)：

1、關(guān)閉記錄儀電源，臺(tái)起記錄筆

2、將橋電流關(guān)至最小，關(guān)閉熱導(dǎo)電源和氫火焰離子放大器電源

3、依次將柱室、進(jìn)樣器、離子室的溫度調(diào)節(jié)至常溫

4、關(guān)閉總電源

5、打開(kāi)柱室，等柱溫接近室溫時(shí)，關(guān)閉載氣。

6、最后清洗進(jìn)樣器。

２８

高效液相色譜仿真實(shí)驗(yàn)

一、實(shí)驗(yàn)概述：

以液體做流動(dòng)相的色譜稱為液相色譜。人們把已經(jīng)比較成熟的氣相色譜理論應(yīng)用于液相色譜，使液相色譜得到了迅速的發(fā)展。隨著其他科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，出現(xiàn)了新型的高壓輸液泵、高效的固定相和柱填充技術(shù)、高靈敏度的檢測(cè)器，加上計(jì)算機(jī)的應(yīng)用，使得液相色譜實(shí)現(xiàn)了高效率和高速度。這種分離效率高、分析速度快的液相色譜稱為高效液相色譜（High performance liquid chromatography, HPLC）。

二、實(shí)驗(yàn)裝置：

Agilent(安捷倫)1100系列液相色譜系統(tǒng)簡(jiǎn)介：

Agilent1100系列HPLC組件和系統(tǒng)，將Agilent長(zhǎng)期的化學(xué)分析經(jīng)驗(yàn)與領(lǐng)先的計(jì)算機(jī)技術(shù)結(jié)合，把網(wǎng)絡(luò)技術(shù)引入了實(shí)驗(yàn)室。從1996年以來(lái)，在全球已經(jīng)安裝了超過(guò)130,000臺(tái)1100組件和55,000多套化學(xué)工作站數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，成為目前單一型號(hào)市場(chǎng)占有率最高的液相色譜系統(tǒng)。

本仿真軟件是模擬用Agilent化學(xué)工作站的數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)進(jìn)行樣品分析和數(shù)據(jù)采集（色譜圖）的過(guò)程。

注：本軟件只是模擬分析的過(guò)程和內(nèi)容，并不涉及其原理，所以實(shí)驗(yàn)中的參數(shù)調(diào)節(jié)對(duì)結(jié)果并沒(méi)有影響，而真實(shí)實(shí)驗(yàn)結(jié)果是隨參數(shù)的變化而變化的，這一點(diǎn)需要特別注意！

實(shí)驗(yàn)主界面：

２９

化學(xué)工作站界面：

三、實(shí)驗(yàn)操作： 第一步：選取實(shí)驗(yàn)

點(diǎn)擊主菜單上的“實(shí)驗(yàn)選取”，會(huì)出現(xiàn)如下的對(duì)話框：

用鼠標(biāo)左鍵點(diǎn)中你要做的實(shí)驗(yàn)，此文件名會(huì)出現(xiàn)在對(duì)話框的“文件名”一欄的文本框 中，在此實(shí)驗(yàn)文件上面雙擊左鍵或者點(diǎn)擊“打開(kāi)”按鈕打開(kāi)實(shí)驗(yàn)文件。

３０

第二步：確認(rèn)操作條件

點(diǎn)擊主菜單上的“操作條件”，會(huì)出現(xiàn)如下的操作條件列表：

第三步：加入試劑

點(diǎn)擊儀器上的自動(dòng)進(jìn)樣器部分（當(dāng)鼠標(biāo)移到儀器的各部分時(shí)會(huì)出現(xiàn)相應(yīng)的說(shuō)明），出現(xiàn)如下畫(huà)面：

在實(shí)驗(yàn)調(diào)節(jié)過(guò)程中，請(qǐng)以此列表內(nèi)的條件為準(zhǔn)進(jìn)行調(diào)節(jié)，否則不能正確輸出色譜峰。

點(diǎn)擊下面的試劑小瓶，會(huì)自動(dòng)放置到自動(dòng)進(jìn)樣器的托盤中。

完成后，點(diǎn)擊主界面上的電腦啟動(dòng)化學(xué)工作站。

第四步：編輯方法

擊主界面上的電腦啟動(dòng)化學(xué)工作站開(kāi)始編輯方法。

所謂方法就是一個(gè)參數(shù)集，它包括分析一個(gè)樣品所需要的所有的參數(shù)：數(shù)據(jù)采集參數(shù)、數(shù)據(jù)分析參數(shù)和命令行或者宏指令。

點(diǎn)擊菜單“方法→編輯方法”開(kāi)始編輯方法（注意：此時(shí)不可以改變方法的參數(shù)，可改變的參數(shù)將在下面特別說(shuō)明）：

３１

然后會(huì)出現(xiàn)下面的窗口讓你選擇編輯方法的內(nèi)容：

用鼠標(biāo)點(diǎn)擊復(fù)選框選擇要編輯的方法的內(nèi)容，然后點(diǎn)擊“確定”按鈕開(kāi)始方法編輯，點(diǎn)擊“取消”按鈕終止方法編輯。

開(kāi)始方法編輯后，系統(tǒng)會(huì)根據(jù)你選擇的內(nèi)容分別依次顯示每一部分的具體內(nèi)容，點(diǎn)擊“確定”按鈕進(jìn)入下一部分，點(diǎn)擊“取消”按鈕終止方法編輯。

完成方法編輯后，系統(tǒng)會(huì)回到主操作界面，此時(shí)色譜柱已經(jīng)開(kāi)始升溫，在圖形界面中會(huì)有顯示，如下圖中紅色圓圈標(biāo)示區(qū)域所示：

３２

特別說(shuō)明：

對(duì)于本實(shí)驗(yàn)要改變的參數(shù)，可以點(diǎn)擊化學(xué)工作站軟件界面中央的圖示的進(jìn)樣器、溶劑系統(tǒng)、色譜柱、檢測(cè)器等部分，會(huì)彈出各部分參數(shù)窗口，此時(shí)可以按照實(shí)驗(yàn)要求的參數(shù)進(jìn)行調(diào)節(jié)（實(shí)驗(yàn)參數(shù)可以點(diǎn)擊主界面上左邊菜單中的“實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)”按鈕察看）。進(jìn)樣器：

溶劑系統(tǒng)：

３３

色譜柱：

檢測(cè)器：

編輯方法完成后，在啟動(dòng)系統(tǒng)之前，請(qǐng)返回液相色譜儀，打開(kāi)二元泵系統(tǒng)，調(diào)節(jié)Purge閥，觀察使回路無(wú)汽泡。

第五步：調(diào)節(jié)Purge閥

點(diǎn)擊儀器上的二元泵系統(tǒng)部分（當(dāng)鼠標(biāo)移到儀器的各部分時(shí)會(huì)出現(xiàn)相應(yīng)的說(shuō)明），出現(xiàn)如下畫(huà)面：

３４

圖中藍(lán)色方框部分就是Purge閥，此時(shí)是關(guān)閉的，用鼠標(biāo)點(diǎn)擊藍(lán)色方框部分，會(huì)出現(xiàn)Purge閥的放大畫(huà)面，然后點(diǎn)擊Purge閥會(huì)自動(dòng)逆時(shí)針?lè)较蛐D(zhuǎn)打開(kāi)Purge閥。

打開(kāi)Purge閥后，右邊的試劑瓶的導(dǎo)管當(dāng)中會(huì)有氣泡流出，待沒(méi)有氣泡再流出之后，再次點(diǎn)擊Purge閥會(huì)自動(dòng)逆時(shí)針?lè)较蛐D(zhuǎn)關(guān)閉Purge閥。然后進(jìn)行下一步“啟動(dòng)系統(tǒng)”。

第六步：?jiǎn)?dòng)系統(tǒng)

完成方法編輯后，點(diǎn)擊菜單“設(shè)備→系統(tǒng)開(kāi)”或者圖中紅色圓圈指示的按鈕“開(kāi)啟系統(tǒng)”:

３５

啟動(dòng)系統(tǒng)后，在圖形界面中會(huì)有顯示，如下圖中紅色圓圈標(biāo)示區(qū)域所示：

同時(shí)在色譜峰顯示區(qū)域開(kāi)始走基線，開(kāi)始的時(shí)候系統(tǒng)不穩(wěn)定，基線變化很厲害，等到基線走平穩(wěn)表示系統(tǒng)穩(wěn)定后，可以開(kāi)始進(jìn)樣運(yùn)行方法。

第七步：進(jìn)樣、運(yùn)行方法

等到狀態(tài)指示欄顯示“Ready”后，表明系統(tǒng)已經(jīng)準(zhǔn)備完畢。點(diǎn)擊菜單“運(yùn)行控制→運(yùn)行方法”開(kāi)始進(jìn)樣和分析，或者點(diǎn)擊圖中紅色圓圈所指示的“Start”按鈕或者按“F5”鍵：

３６

開(kāi)始進(jìn)樣后，在圖形界面中會(huì)有顯示，如下圖中紅色圓圈標(biāo)示區(qū)域所示：

３７

待色譜圖出完后，樣品分析完畢。

第八步：完成實(shí)驗(yàn)報(bào)告

樣品分析完成后，點(diǎn)擊化學(xué)工作站界面上的紅色方框部分，或者點(diǎn)擊主界面左邊菜單中的“實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)”調(diào)出實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

３８

根據(jù)得出的保留時(shí)間、峰高、半峰寬等實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，可以計(jì)算分離度等相關(guān)參數(shù)。如果計(jì)算機(jī)安裝了打印機(jī)，可以點(diǎn)擊右上角“打印報(bào)表”按鈕打印實(shí)驗(yàn)報(bào)告。

３９

第三篇：《儀器分析實(shí)驗(yàn)》復(fù)習(xí)題

《儀器分析實(shí)驗(yàn)》復(fù)習(xí)題

1、單光束和雙光束紫外吸收光譜儀的結(jié)構(gòu)有什么特點(diǎn)？

2、紅外光譜法中，對(duì)試樣有哪些要求？

3、pH玻璃電極的原理，如何測(cè)定pH值

答：玻璃電極法測(cè)定水樣的PH值是以飽和甘汞電極為參比電極，以玻璃電極為指示電極，與被測(cè)水樣組成工作電池，再用PH計(jì)測(cè)量工作電動(dòng)勢(shì)，由PH計(jì)直接讀取PH值。

4、為什么熒光光度計(jì)使用的比色皿是四面透光的？ 答：如果在一條直線上 那是測(cè)吸光度的

熒光分光光度計(jì)入射光源和檢測(cè)器的方向是垂直的 這樣在垂直方向上 就不可能有入射光

而激發(fā)的熒光在四個(gè)方向上都有 在垂直方向上檢測(cè) 干擾最小 所以四面透光

不是四面透光，只有倆面透光，透光面是為了不同波長(zhǎng)的激發(fā)光穿透比色皿與比色皿內(nèi)的待測(cè)物質(zhì)發(fā)生物理作用而測(cè)定物質(zhì)的濃度等，不透光的倆面是為了方便實(shí)驗(yàn)操作人員用手抓取放置比色皿

5、在極性、非極性色譜柱上的出峰順序是如何確定的？

答：對(duì)于同分異構(gòu)體來(lái)說(shuō)，極性柱上是極性弱的組份先出峰，極性強(qiáng)的組份后出峰。其它情況下不一定。對(duì)于同系物來(lái)說(shuō)，非極性柱上是沸點(diǎn)低的先出峰，沸點(diǎn)高的后出峰。其它情況不一定。

6、在原子吸收光譜法中，峰值吸收代替積分吸收的條件是什么？

7、簡(jiǎn)述火焰原子化器（包括霧化器）的工作原理。

8、從速率理論可以看出有哪些因素可以影響色譜的柱效？在什么情況下應(yīng)采用相對(duì)分子質(zhì)量較大的載氣，什么情況下應(yīng)采用相對(duì)分子質(zhì)量較小的載氣？如何確定最佳流速？

9、原子吸收分析中，若產(chǎn)生下述情況而引致誤差，應(yīng)采用什么措施來(lái)減免之？

（１）光源強(qiáng)度變化引起基線漂移，（２）火焰發(fā)射的輻射進(jìn)入檢測(cè)器（發(fā)射背景），（３）待測(cè)元素吸收線和試樣中共存元素的吸收線重疊．

10、在電導(dǎo)滴定過(guò)程中，為什么溶液的電導(dǎo)會(huì)發(fā)生連續(xù)變化，解釋鹽酸、醋酸的電導(dǎo)滴定曲線。設(shè)計(jì)電導(dǎo)法測(cè)定鹽酸、醋酸混合液的實(shí)驗(yàn)方案。

第四篇：《儀器分析實(shí)驗(yàn)》指導(dǎo)書(shū)

編寫(xiě)

劉開(kāi)敏

化學(xué)工程與技術(shù)系

2008年3月

《儀器分析實(shí)驗(yàn)》指導(dǎo)書(shū)

目

錄

鄰菲羅啉分光光度法測(cè)定鐵??????????????????????1 電位法測(cè)定水溶液的pH值??????????????????????4 醋酸的電位滴定和酸常數(shù)測(cè)定?????????????????????6 水中氟化物的測(cè)定－離子選擇電極法??????????????????8 氣相色譜定量分析?????????????????????????10 紫外分光光度法測(cè)定苯甲酸含量???????????????????11 熒光法測(cè)定維生素B2????????????????????????13 水質(zhì) 鉀和鈉的測(cè)定 火焰原子吸收分光光度法?????????????15 原子吸收分光光度法測(cè)定自來(lái)水中鎂的含量??????????????19 苯、萘、聯(lián)苯的高效液相色譜分析及柱效能的測(cè)定???????????21

鄰菲羅啉分光光度法測(cè)定鐵

一、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：

1.吸收曲線的制作。

2.標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作。

3.未知水樣的鐵含量的測(cè)定。

二、準(zhǔn)備工作 1、722S型分光光度計(jì)20臺(tái)（二人一臺(tái)）。

2、通知儀器室準(zhǔn)備20套儀器：

(1)50ml容量瓶7只。

(2）1ml刻度吸管1支。

(3）吸球1只。

(4）洗瓶1只。

(5）400ml燒杯（廢液杯）1只。3.準(zhǔn)備好公用儀器：

(l）1ml刻度吸管（發(fā)樣品用）1支。

(2）100ml小燒杯（發(fā)標(biāo)準(zhǔn)Fe3+）20只。

(3）自動(dòng)加液器二套（6只），盛放HAc－NaAc緩沖溶液，1％鹽酸羥胺及0.1％鄰菲羅啉。

4.試劑：

（1）100μg／mlFe3+標(biāo)準(zhǔn)溶液：準(zhǔn)確稱取1.9gNH4Fe(SO4)2·12H2O于100ml燒杯中，加入1：1HCl20ml及少量水，溶解后，轉(zhuǎn)移到1L容量瓶中，用水稀釋到刻度、搖勻。

（2）0.10％鄰菲羅啉水溶液：將0.100g鄰菲羅啉溶于加有2～3滴濃HCl的蒸餾水100ml中，貯于棕色瓶?jī)?nèi)。

（3）HAc－NaAc緩沖溶液：取12.9mlC.P.級(jí)HAc及34gC.P.級(jí)NaAc·3H2O溶于水中，稀釋至1000ml。

（4）1％鹽酸羥胺水溶液：取1g鹽酸羥胺溶于水中，稀釋至100ml。

5.未知樣品

不另配制，直接將標(biāo)準(zhǔn)Fe3+液發(fā)于同學(xué)交上來(lái)的容量瓶中，發(fā)放體積應(yīng)介于0.2～1.0ml間，可為0.3，0.5，0.7，0.9ml。未知樣品體積以1ml計(jì)。

三、提問(wèn)內(nèi)容：

1.在本實(shí)驗(yàn)中，那些試劑加入量要比較準(zhǔn)確，哪些試劑則可不必？為什么？

2.要使分光光度測(cè)定結(jié)果的誤差盡可能小一些，吸光度的最佳讀數(shù)范圍為多少？如何控制？

比色皿壁被有機(jī)試劑染上顏色，用水不易洗去，可試用HCl－C2H5OH（1：2）洗滌液浸泡，然后水洗，應(yīng)避免使用毛刷或鉻酸洗滌液。

（3）比色皿的盛液量：比色皿內(nèi)所裝溶液量不宜太少，致使光線無(wú)法照射到溶液上，也不宜太多，以使溶液灑出流入光度計(jì)內(nèi)，一般以裝至比色皿高度的2/3～4/5為宜。

7.實(shí)驗(yàn)中如用配制過(guò)久的鹽酸羥胺溶液，對(duì)分析結(jié)果將有何影響？

如鹽酸羥胺配制過(guò)久，則因其還原能力減弱，而無(wú)法將試樣中的Fe3+完全還原成Fe3+，并與鄰菲羅啉定量形成橙紅色絡(luò)合物，這樣將使測(cè)定結(jié)果偏低。

8.吸收曲線的制作：

吸取1.0ml 100μg／ml標(biāo)準(zhǔn)Fe3+溶液，注入50ml容量瓶中，加入5ml 1％鹽酸羥胺溶液，5mlHAc—NaAc緩沖液及3ml 0.10％鄰菲羅啉溶液，以水稀釋至刻度、搖勻。

在722S型分光光度計(jì)上，用1cm比色皿，采用試劑空白，在440～560nm間，每隔10nm測(cè)定一次吸光度，然后繪制A—λ吸收曲線，以選擇最適當(dāng)?shù)臏y(cè)定波長(zhǎng)。

9.標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作：

在5只容量瓶中，分別加入100μg／ml標(biāo)準(zhǔn)Fe3+液0.20ml，0.40ml，0.60ml，0.80ml及1.0ml（可利用上述那個(gè)，不必再配）。再各加入5ml 1％鹽酸羥胺溶液，5ml HAc-NaAc緩沖溶液和3ml 0.10％鄰菲羅啉溶液（次序不能顛倒），以水稀釋至刻度搖勻，在所選擇的波長(zhǎng)下，用1cm比色皿，采用試劑空白，測(cè)定各溶液的吸光度，作出A－C工作曲線。

10.未知試樣中鐵含量的測(cè)定：

用洗凈的50ml容量瓶一只向教師領(lǐng)取1ml未知試樣（貼上標(biāo)簽，寫(xiě)上學(xué)號(hào)），按與標(biāo)準(zhǔn)溶液完全相同的步驟配成有色溶液，并搖勻，然后在與制作標(biāo)準(zhǔn)曲線完全相同的測(cè)試條件下測(cè)出其吸光度。由該吸光度值即可從工作曲線上查得相應(yīng)的鐵含量。

五、計(jì)算公式

未知試樣含鐵量（p.p.m．）＝

六、評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)

≤5‰

≤10‰

≤15‰

＞15‰

5分

4分

3分

2分

（1）選用儀器“pH”檔，將清洗干凈的電極浸入欲測(cè)標(biāo)準(zhǔn)pH緩沖溶液中，按下測(cè)量按鈕，轉(zhuǎn)動(dòng)定位調(diào)節(jié)旋鈕，使儀器顯示的pH值穩(wěn)定在該標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液pH值；（2）松開(kāi)測(cè)量按鈕，取出電極，用蒸餾水沖洗幾次，小心用濾紙吸去電極上水液；（3）將電極置于欲測(cè)試液中，按下測(cè)量按鈕，讀取穩(wěn)定值pH，記錄。松開(kāi)測(cè)量按鈕，取出電極，按（2）清洗，繼續(xù)下個(gè)樣品溶液測(cè)量。測(cè)量完畢，清洗電極，并將玻璃電極浸泡在蒸餾水中。

2．雙標(biāo)準(zhǔn)pH緩沖溶液法測(cè)量溶液pH值

為了獲得高精度的pH值，通常用兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)pH緩沖溶液進(jìn)行定位校正儀器，并且要求未知溶液的pH值盡可能落在這兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)pH溶液的pH值中間。

（1）按單位標(biāo)準(zhǔn)pH緩沖溶液方法步驟（1）﹑（2），選擇兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液，用其中一個(gè)對(duì)儀器定位；

（2）將電極置于另一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液中，調(diào)節(jié)斜率旋鈕（如果沒(méi)設(shè)斜率旋鈕，可使用溫度補(bǔ)償旋鈕調(diào)節(jié)），使儀器顯示的pH讀數(shù)至該標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液的pH值；

(3)松開(kāi)測(cè)量按鈕，取出電極，用蒸餾水沖洗幾次，小心用濾紙吸去電極上水液；再放入第一次測(cè)量的標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液中，按下測(cè)量按鈕，其讀數(shù)與該試液的pH值相差至多不超過(guò)0.05pH單位，表明儀器和玻璃電極的響應(yīng)特性均良好。往往要反復(fù)測(cè)量﹑反復(fù)調(diào)節(jié)幾次，才能使測(cè)量系統(tǒng)達(dá)到最佳狀態(tài)；

(4)當(dāng)測(cè)量系統(tǒng)調(diào)定后，將洗干凈的電極置于欲測(cè)試樣溶液中，按下測(cè)量按鈕，讀取穩(wěn)定pH值，記錄。松開(kāi)測(cè)量按鈕，取出電極，沖洗凈后，將玻璃電極浸泡在蒸餾水中。

五﹑問(wèn)題討論

1． 在測(cè)量溶液的pH值時(shí)，為什么pH計(jì)要用標(biāo)準(zhǔn)pH緩沖溶液進(jìn)行定位？ 2． 使用玻璃電極測(cè)量溶液pH值時(shí)，應(yīng)匹配何種類型的電位計(jì)？

3．為什么用單標(biāo)準(zhǔn)pH緩沖溶液法測(cè)量溶液pH值時(shí)，應(yīng)盡量選用pH與它相近的標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液來(lái)校正酸度計(jì)？

用吸液管取1.00、3.00、5.00、10.00、20.00 mL氟化物標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別置于5只50 mL容量瓶中，加入10mL總離子強(qiáng)度調(diào)節(jié)緩沖溶液，用水稀釋至標(biāo)線，搖勻。分別移入100 mL聚乙烯杯中，放入一只塑料攪拌子，按濃度由低到高的順序，依次插入電極，連續(xù)攪拌溶液，讀取攪拌狀態(tài)下的穩(wěn)態(tài)電位值(E)。在每次測(cè)量之前，都要用水將電極沖洗凈，并用濾紙吸去水分。在半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上繪制E-lgcF-標(biāo)準(zhǔn)曲線，濃度標(biāo)于對(duì)數(shù)分格上，最低濃度標(biāo)于橫坐標(biāo)的起點(diǎn)線上。

4．水樣測(cè)定

用無(wú)分度吸液管吸取適量水樣，置于50 mL容量瓶中，用乙酸鈉或鹽酸溶液調(diào)節(jié)至近中性，加入10mL總離子強(qiáng)度調(diào)節(jié)緩沖溶液，用水稀釋至標(biāo)線，搖勻。將其移入100 mL聚乙烯杯中，放入一只塑料攪拌子，插入電極，連續(xù)攪拌溶液，待電位穩(wěn)定后，在繼續(xù)攪拌下讀取電位值(Ex)。在每次測(cè)量之前，都要用水充分洗滌電極，并用濾紙吸去水分。根據(jù)測(cè)得的毫伏數(shù)，由標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得試液氟化物的濃度，再根據(jù)水樣的稀釋倍數(shù)計(jì)算其氟化物含量。

5．空白試驗(yàn)

用去離子水代替水樣，按測(cè)定樣品的條件和步驟測(cè)量電位值，檢驗(yàn)去離子水和試劑的純度，如果測(cè)得值不能忽略，應(yīng)從水樣測(cè)定結(jié)果中減去該值。

當(dāng)水樣組成復(fù)雜時(shí)，宜采用一次標(biāo)準(zhǔn)加入法，以減小基體的影響。其操作是：先按步驟4測(cè)定出試液的電位值(E1)，然后向試液中加入與試液中氟含量相近的氟化物標(biāo)準(zhǔn)溶液(體積為試液的1/10～1/100)，在不斷攪拌下讀取穩(wěn)態(tài)電位值(E2)，按下式計(jì)算水樣中氟化物的含量：

式中：Cx—水樣中氟化物(F-)濃度(mg/L)；

Vx—水樣體積(mL)；

cs—F-標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度(mg/L)；

Vs—加入F-標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積(mg/L)；

△E—等于E1

氣相色譜定量分析

一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

用苯作標(biāo)準(zhǔn)物，測(cè)定己烷、環(huán)己烷、甲苯的定量校正因子，根據(jù)色譜圖，用歸一法測(cè)定混合物中各組分的含量；用外標(biāo)法測(cè)定混合物中甲苯的含量。學(xué)習(xí)定量校正因子的測(cè)定和氣相色譜常用的定量方法。

二、儀器與試劑

氣相色譜儀、熱導(dǎo)池檢測(cè)器、10微升注射器3支、色譜柱：不銹鋼色譜柱（長(zhǎng)2米，內(nèi)徑4毫米）

15%聚乙二醇—1000：6201擔(dān)體（60—80目）、苯、甲苯、己烷、環(huán)己烷（都為分析純）、混合物樣品

三、實(shí)驗(yàn)步驟

1.色譜條件：

柱溫80oC；載氣，氮?dú)饣驓錃?5—20毫升/分鐘（柱后），檢測(cè)器溫度100℃，汽化室溫度120—150℃，橋電流130毫安。2.測(cè)定相對(duì)重量校正因子

在分析天平上，于5毫升中，按重量比大約2 :1的比例，稱取己烷和苯配制二元混合物。待色譜儀基線穩(wěn)定后，進(jìn)樣分析二元混合物，重復(fù)3—5次。量取己烷和苯的峰面積，按公式求出己烷對(duì)苯的相對(duì)重量校正因子。以此為例，測(cè)定并求出環(huán)己烷對(duì)甲苯的相對(duì)重量校正因子。

3.定量測(cè)定各組分含量

（1）歸一化法

如果被測(cè)樣品中只含有己烷、環(huán)己烷和甲苯，并且三者相對(duì)重量校正因子均已求出，即可進(jìn)被測(cè)樣品進(jìn)行色譜分析，按歸一化法求出各組分的含量。（2）外標(biāo)法

如果被測(cè)試樣中含有微量苯，預(yù)測(cè)定其含量，則可以甲苯為溶劑，配制已知濃度的苯標(biāo)準(zhǔn)溶液，用外標(biāo)法測(cè)定試樣中苯的含量，具體方法如下：準(zhǔn)確量取10毫升苯于100毫升容量瓶中，用甲苯稀至刻度，搖勻，作為標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（體積百分?jǐn)?shù)，v/V）。準(zhǔn)確分別量取1，2，3，4，5，6毫升儲(chǔ)備液于5個(gè)10毫升容量瓶中，用甲苯稀釋定容，搖勻，作為系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。

將六個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液分別進(jìn)樣，每次1微升，測(cè)量各自的峰高（或峰面積）。以峰高（或峰面積）對(duì)苯濃度繪制工作曲線。取1微升被測(cè)樣品注入色譜分析，重復(fù)3次，取峰高（或峰面積）平均值，由工作曲線查出被測(cè)樣品中苯的濃度。

四、問(wèn)題討論

1.在氣相色譜定量分析中，峰面積為什么要用校正因子校正？ 2.試說(shuō)明歸一化法定量的適用范圍。

0

苯甲酸吸收曲線(10ug/mL)1.6001.4001.200吸光度1.0000.8000.6000.4000.2000.0002002052102************3103***335340345350波長(zhǎng)

3.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

準(zhǔn)確吸取苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)溶液若干體積，稀釋成一系列不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液（0～16ug/mL），于最大吸收波長(zhǎng)分別測(cè)出其吸光度。然后以濃度為橫坐標(biāo)，以相應(yīng)的吸光度為縱坐標(biāo)繪制出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.4 樣品測(cè)定

由步驟3.2的測(cè)量結(jié)果，從標(biāo)準(zhǔn)曲線查出樣品的濃度。

五、結(jié)果計(jì)算

根據(jù)未知液的稀釋倍數(shù)，可求出未知溶液的濃度。

三、儀器與試劑

1.儀器

930 型熒光光度計(jì)（附液槽一對(duì)，漏光片一盒）容量瓶

毫升6個(gè) 吸量管

5毫升l支

棕色試劑瓶（500 mL）洗瓶（500 mL）冰箱 2.試劑

（1）100.0 mg·L1 －維生素B2標(biāo)準(zhǔn)貯備液準(zhǔn)確稱取0.1000 g維生素B2,將其溶解于少量的1%乙酸 中，轉(zhuǎn)移至1 L容量瓶中，用1%乙酸稀釋至刻度，搖勻。（2）5.00 mg·L－1

－維生素B2工作標(biāo)準(zhǔn)溶液準(zhǔn)確移取5.00 mL 100.0 mg·L1

維生素B2標(biāo)準(zhǔn)貯備液于1L容量瓶中，用1%乙酸稀釋至刻度，搖勻。

（3）待測(cè)液取市售維生素B2一片，用1%乙酸溶液溶解，在1 L容量瓶中定容。以上溶液均應(yīng)裝于棕色試劑瓶中，置于冰箱冷藏保存溶液應(yīng)保存在棕色瓶中，置于陰涼處。

四、實(shí)驗(yàn)步驟

1．標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的配制

在五個(gè)干凈的50 mL容量瓶中，分別加入1.00 mL，2.00 mL，3.00 mL，4.00 mL和5.00 mL 5.00 mg·L－1維生素B2工作標(biāo)準(zhǔn)溶液，用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻。

2．標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的測(cè)定

開(kāi)啟儀器電源，預(yù)熱約10min。用蒸餾水作空白，從稀到濃測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的熒光強(qiáng)度。

3．未知試樣的測(cè)定

取2.50 mL待測(cè)液置于50 mL容量瓶中，用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻。用測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)系列溶液時(shí)相同的條件，測(cè)量其熒光強(qiáng)度。

五、數(shù)據(jù)及處理

1．用標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的熒光強(qiáng)度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。2．根據(jù)待測(cè)液的熒光強(qiáng)度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上求得其濃度。3．計(jì)算藥片中維生素B2的含量，用mg/片表示。

六、思考題

1.在熒光測(cè)量時(shí)，為什么激發(fā)光的入射與熒光的接收不在一直線上，而呈一定角度？ 2.為什么要使用兩塊濾光片，其選擇的根據(jù)是什么？

參考資料

[1]H.H.Willard,L.L.Merritt and J.A.Dean,《Instrumental Methods ofAnalysis》，5th ed.,p.145,Nostrand,New York,1974。

[2]廈門大學(xué)化學(xué)系分祈化學(xué)教研室編，陳國(guó)珍主編，《螢光分析法》，第248頁(yè)，科學(xué)出版社，1975。

43.5.5 鈉標(biāo)準(zhǔn)使用溶液I，含鈉100.00mg／L：吸取鈉標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液(3.5.2)10.00mL于100mL容量瓶中，加2mL硝酸溶液(3.2)，以水稀釋至際線，搖勻。此溶液可保存3個(gè)月。3.5.6 鈉標(biāo)準(zhǔn)使用溶液Ⅱ，含鈉10.00mg／L：吸取鈉標(biāo)準(zhǔn)使用溶液Ⅰ(3.5.5)10.00mL于100mL容量瓶中，加2mL硝酸溶液(3.2)，以水稀釋至標(biāo)線，搖勻。此溶液可保存一個(gè)月。儀器

4.1 原子吸收分光光度計(jì)：儀器操作參數(shù)可參照廠家說(shuō)明書(shū)進(jìn)行選擇。

4.2 鉀和鈉空心陰極燈：靈敏吸收線為鉀766.5nm，鈉589.0nm；次靈敏吸收線為鉀404.4nm，鈉330.2nm。

4.3 乙炔的供氣裝置：使用乙炔鋼瓶或發(fā)生器均可，但乙炔氣必須經(jīng)水和濃硫酸洗滌后，方可使用。

4.4 空氣壓縮機(jī)：均應(yīng)附有過(guò)濾裝置，由此得到無(wú)油無(wú)水凈化空氣。

4.5 對(duì)玻璃器皿的要求：所用玻璃器皿均應(yīng)經(jīng)硝酸溶液(3.2)浸泡，用時(shí)以去離子水洗凈。采樣和樣品

水樣在采集后，應(yīng)立即以0.45μm濾膜(或中速定量濾紙)過(guò)濾，其濾液用硝酸(3.2)調(diào)至pH1～2，于聚乙烯瓶中保存。分析步驟

6.1 試料的制備

如果對(duì)樣品中鉀鈉濃度大體已知時(shí)，可直接取樣，或者采用次靈敏線測(cè)定先求得其濃度范圍。然后再分取一定量(一般為2～10mL)的實(shí)驗(yàn)室樣品于50mL容量瓶中，加3.0mL硝酸艷溶液(3.3)，用水稀釋至標(biāo)線，搖勻。此溶液應(yīng)在當(dāng)天完成測(cè)定。6.2 校準(zhǔn)溶液的制備 6.2.1 鉀校準(zhǔn)溶液

取6只50mL容量瓶，分別加入鉀標(biāo)準(zhǔn)使用溶液(3.5.4)0，0.50，1.00，1.50，2.00，2.50mL，加硝酸艷溶液(3.3)3.00mL，加硝酸溶液(3.2)1.00mL，用水稀釋至標(biāo)線，搖勻。其各點(diǎn)的濃度分別為：0，1.00，2.00，3.00，4.00，5.00mg／L。本校準(zhǔn)溶液應(yīng)在當(dāng)天使用。6.2.2 鈉校準(zhǔn)溶液

取6只50mL容量瓶，分別加入納標(biāo)準(zhǔn)使用溶液Ⅱ(3.5.6)0，1.00，3.00，5.00，7.50，10.00mL，加3.00mL硝酸銫溶液(3.3)，加1mL硝酸溶液(3.2)，用水稀釋至標(biāo)線，搖勻。其各點(diǎn)的濃度分別為0，0.20.0.60，1.00，1.50，2.00mg／L。本校準(zhǔn)溶液應(yīng)在當(dāng)天使用。6.3 儀器的準(zhǔn)備

將待測(cè)元素?zé)粞b在燈架上，經(jīng)預(yù)熱穩(wěn)定后，按選定的波長(zhǎng)，燈電流，狹縫，觀測(cè)高度，空氣及乙炔流量等各項(xiàng)參數(shù)進(jìn)行點(diǎn)火測(cè)量。

注意：在打開(kāi)氣路時(shí)，必須先開(kāi)空氣，再開(kāi)乙炔；當(dāng)關(guān)閉氣路時(shí)，必須先關(guān)乙炔，后關(guān)空氣，以免回火爆炸。

當(dāng)點(diǎn)火后，在測(cè)量前，先以硝酸溶液(3.3)噴霧5min，以清洗霧化系統(tǒng)。

6對(duì)于鉀和鈉濃度較高的樣品，在使用本標(biāo)準(zhǔn)時(shí)會(huì)因稀釋倍數(shù)過(guò)大，降低測(cè)定的精密度、同時(shí)也給操作帶來(lái)麻煩。因一般的地表水中鉀和鈉的濃度都比較高，可使用次靈敏線鉀440.4nm、鈉330.2nm測(cè)定，濃度范圍可擴(kuò)大到鉀為200mg／L以內(nèi)，鈉為100mg／L以內(nèi)。

附加說(shuō)明：

本標(biāo)準(zhǔn)由國(guó)家環(huán)境保護(hù)局規(guī)劃標(biāo)準(zhǔn)處提出。本標(biāo)準(zhǔn)由黃河水資源保擴(kuò)監(jiān)測(cè)中心站負(fù)責(zé)起草。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人馮榮周。

本標(biāo)準(zhǔn)委托中國(guó)環(huán)境監(jiān)測(cè)總站負(fù)責(zé)解釋。

83、濃鹽酸 優(yōu)級(jí)純，稀鹽酸溶液1 mol·L

4、純水 去離子水或蒸餾水

1四、實(shí)驗(yàn)步驟

1、配制標(biāo)準(zhǔn)溶液系列

（1）標(biāo)準(zhǔn)溶液系列 準(zhǔn)確吸取2.00、4.00、6.00、8.00、10.0mL上述鈣標(biāo)準(zhǔn)使用液，分別置于5只25mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻備用。該標(biāo)準(zhǔn)溶液系列鈣的濃度分別為8.00、16.0、24.0、32.0、40.0μg ·L-1。

（2）鎂標(biāo)準(zhǔn)溶液系列 準(zhǔn)確吸取1.00、2.00、3.00、4.00、5.00mL上述鎂標(biāo)準(zhǔn)使用液，分別置于5只25mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻備用。該標(biāo)準(zhǔn)溶液系列鎂地濃度分別為2.0、4.0、6.0、8.0、10.0μg ·L-1。

2、配制自來(lái)水樣溶液 準(zhǔn)確吸取適量（視未知鈣、鎂的濃度而定）自來(lái)水置于25mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻。

3、根據(jù)實(shí)驗(yàn)條件，將原子吸收分光光度計(jì)按儀器操作步驟（見(jiàn)本章8.3.4節(jié)）進(jìn)行調(diào)節(jié)，待儀器電路和氣路系統(tǒng)達(dá)到穩(wěn)定，記錄儀基線平直時(shí)，即可進(jìn)樣。測(cè)定各標(biāo)準(zhǔn)溶液系列溶液的吸光度。

4、在相同的實(shí)驗(yàn)條件下，分別測(cè)定自來(lái)水樣溶液中鈣、鎂的吸光度。

五、思考題

1、簡(jiǎn)述原子吸收分光光度分析的基本原理。

2、原子吸收分光光度分析為何要用待測(cè)元素的空心陰極燈作光源？能否用氫燈或鎢燈代替，為什么？

3、如何選擇最佳的實(shí)驗(yàn)條件？

4、原子化器有何作用？

5、樣品預(yù)處理的目的是什么？

0－

1－1

四、操作步驟

1．測(cè)定條件的選擇

（1）色譜柱長(zhǎng) 250 mm，內(nèi)徑 4.6 mm，裝填 C-18 烷基鍵合相，顆粒度 10μm 的固定相

（2）流動(dòng)相 甲醇:水（83:17），流量 1.0 mL· min1

－（3）紫外光度檢測(cè)器 測(cè)定波長(zhǎng) 254 nm（4）進(jìn)樣量 20μL 2．儀器操作

（1）將配置好的流動(dòng)相于超聲波發(fā)生器上，脫氣 15 min。

（2）將儀器按照儀器的操作步驟調(diào)節(jié)至進(jìn)樣狀態(tài)，待儀器液路和電路系統(tǒng)達(dá)到平衡，基線平直時(shí)，吸取 60μL 標(biāo)準(zhǔn)工作液，進(jìn)樣 20μL，記錄色譜圖，重復(fù)進(jìn)樣兩次。

（3）吸取 60μL 樣品，進(jìn)樣 20μL，記錄色譜圖，重復(fù)進(jìn)樣兩次。

五、數(shù)據(jù)處理

1．記錄實(shí)驗(yàn)測(cè)定條件

（1）色譜柱與固定相

（2）流動(dòng)相及其流量

（3）檢測(cè)器

（4）進(jìn)樣量

2．測(cè)量各色譜圖中苯、萘、聯(lián)苯等的保留時(shí)間tR及相應(yīng)色譜峰的半峰寬Y1/2，計(jì)算各對(duì)應(yīng)理論塔板n，并將數(shù)據(jù)列表。已知組分的出峰順序?yàn)楸健⑤?、?lián)苯。

3．求樣品中各組分的含量。

六、思考題

1．由計(jì)算得到的各組分理論塔板數(shù)說(shuō)明了什么？

2．高效液相色譜采用 5~10 μm 粒度的固定相有何優(yōu)點(diǎn)？為什么？

第五篇：儀器分析教案

第三節(jié) 高效液相色譜法的主要類型及其分離原理

【教學(xué)目標(biāo)】

1.掌握液-液分配色譜法及化學(xué)鍵合相色譜法的分離原理，分配系數(shù)、固定相的類型和特點(diǎn) 2.熟悉高效液相色譜法的主要類型 3.熟悉高效液相色譜法的主要類型

4.了解各類高效液相色譜法的特點(diǎn)及應(yīng)用 【教學(xué)重點(diǎn)】

液-液分配色譜法及化學(xué)鍵合相色譜法；分離原理；分配系數(shù) 【教學(xué)難點(diǎn)】

分配系數(shù)；分配系數(shù)與組分流出順序的關(guān)系 【復(fù)習(xí)題】

1.氣相色譜法有哪幾種類型？各類氣相色譜法的固定相與流動(dòng)相的類型是什么？ 2.各類氣相色譜法的分離原理是什么？ 3.分配系數(shù)的定義是什么？意義是什么？

【講授新課】

與氣相色譜一樣，液相色譜分離系統(tǒng)也由兩相——固定相和流動(dòng)相組成。液相色譜的固定相可以是固定液、吸附劑、化學(xué)鍵合固定相（或在惰性載體表面涂上一層液膜）、離子交換樹(shù)脂或多孔性凝膠；流動(dòng)相是各種溶劑。被分離混合物由流動(dòng)相液體推動(dòng)進(jìn)入色譜柱。根據(jù)各組分在固定相及流動(dòng)相中的吸附能力、分配系數(shù)、離子交換作用或分子尺寸大小的差異進(jìn)行分離。色譜分離的實(shí)質(zhì)是樣品分子（以下稱溶質(zhì)）與溶劑（即流動(dòng)相或洗脫液）以及固定相分子間的作用，作用力的大小，決定色譜過(guò)程的保留行為。

根據(jù)其分離原理不同，高效液相色譜法可分為幾種類型：

一． 液-液分配色譜法及化學(xué)鍵合相色譜法

（一）液-液分配色譜法

1.固定相：將液體固定液涂漬在擔(dān)體上作為固定相。

流動(dòng)相：液體。

且要求，流動(dòng)相液體與固定相液體互不相溶。

2．分離原理：溶解——溶解分配平衡過(guò)程（組分溶解在固定相中—組分溶解在流動(dòng)相中），類似于液液萃取機(jī)理。

溶質(zhì)在兩相間進(jìn)行分配時(shí)，在固定液中溶解度較小的組分較難進(jìn)入固定液，在色譜柱中向前遷移速度較快；在固定液中溶解度較大的組分容易進(jìn)入固定液，在色譜柱中向前遷移速度較慢，從而達(dá)到分離的目的。

3.分配系數(shù)：

當(dāng)樣品中的被測(cè)定組分在固定相和流動(dòng)相中達(dá)到動(dòng)態(tài)平衡時(shí)，可以用分配系數(shù)來(lái)描述這個(gè)分配平衡過(guò)程：

其中，（1）分離的順序決定于分配系數(shù)的大?。?/p>

固定相對(duì)某組分的溶解力大于溶劑對(duì)某組分的溶解力，K↑，后流出色譜柱 固定相對(duì)某組分的溶解力小于溶劑對(duì)某組分的溶解力，K↓，先流出色譜柱

（2）某色譜條件下，兩組分分配系數(shù)差值為零，則代表兩組分在該色譜條件下不能分離。4.分類：

正相液-液色譜法：固定相極性＞流動(dòng)相極性，極性較小組分先出峰，極性較大組分后出峰 適于分離極性較強(qiáng)的物質(zhì)

反相液-液色譜法：固定相極性＜流動(dòng)相極性

極性較大組分先出峰，極性較小組分后出峰 適于分離非極性至中等極性的物質(zhì)

（二）化學(xué)鍵合相色譜法：

（1）固定相：將固定液通過(guò)化學(xué)反應(yīng)共價(jià)鍵合到擔(dān)體（硅膠）表面作為固定相。

流動(dòng)相：液體。

（2）分離原理：同液-液分配色譜法。（3）分配系數(shù)：同液-液分配色譜法。（4）分類：同液-液分配色譜法。

（三）液-液分配色譜法與化學(xué)鍵合相色譜法的對(duì)比

液-液分配色譜法 化學(xué)鍵合相色譜法 與擔(dān)體結(jié)合方式 涂漬 共價(jià)鍵合

柱效對(duì)比 較低 較高

固定液是否流失 是 否

能否進(jìn)行梯度洗脫 否 能

另外，化學(xué)鍵合固定相表面固定液一般多為單分子層，因此無(wú)液坑，液層薄，傳質(zhì)速度快；且有載樣量大，化學(xué)性能穩(wěn)定，重現(xiàn)性高，色譜柱壽命長(zhǎng)等優(yōu)點(diǎn)。目前已經(jīng)逐漸取代了傳統(tǒng)的液液分配色譜，成為液相色譜法中使用最廣泛的方法。

二．液-固吸附色譜法

1.固定相：液固吸附色譜法的固定相是固體吸附劑。吸附劑是一些多孔的固體顆粒物質(zhì)，在它的表面通常存在吸附中心點(diǎn)，可以有效地從氣體或液體中吸附其中某些成分。流動(dòng)相：液體

2.分離原理：吸附——吸附競(jìng)爭(zhēng)平衡過(guò)程（組分吸附在固定相上—流動(dòng)相吸附在固定相上）

流動(dòng)相中的溶質(zhì)分子X(jué)（流動(dòng)相）被流動(dòng)相S帶入色譜柱后，在隨流動(dòng)相流動(dòng)的過(guò)程中，發(fā)生如下交換反應(yīng)：

其作用機(jī)制是被分離組分（溶質(zhì)分子X(jué)）與流動(dòng)相（溶劑分子S）爭(zhēng)奪吸附劑表面吸附活性中心的結(jié)果（競(jìng)爭(zhēng)吸附）。在這個(gè)過(guò)程中，交換能力較強(qiáng)的溶質(zhì)分子會(huì)競(jìng)爭(zhēng)得到更多的吸附中心點(diǎn)，從而在色譜柱中移動(dòng)較慢，從而達(dá)到分離的目的。3.分配系數(shù)：

其中，（1）分離的順序決定于分配系數(shù)的大?。?/p>

吸附劑對(duì)某組分的吸附力越強(qiáng)，K↑，后流出色譜柱 吸附劑對(duì)某組分的吸附力越弱，K↓，先流出色譜柱

（2）某色譜條件下，兩組分分配系數(shù)差值為零，則代表兩組分在該色譜條件下不能分離。

4.應(yīng)用：

液固色譜法適用于分離分子量中等，能溶于有機(jī)溶劑的非離子性化合物，此外，液固色譜法對(duì)于分離具有不同官能團(tuán)的結(jié)構(gòu)相似的化合物、異構(gòu)體有較高的選擇性。

三．離子交換色譜法

1.固定相：是一種帶電荷的官能團(tuán)的固定基質(zhì)，稱為離子交換劑。為保證交換劑的電中性，基質(zhì)上還存在帶相反電荷的離子，稱為反離子。

目前常用的三大類離子交換劑基質(zhì)：合成樹(shù)脂、纖維素、硅膠。流動(dòng)相：具有一定pH和鹽濃度的緩沖溶液

2.分離原理：吸附——吸附競(jìng)爭(zhēng)平衡過(guò)程（反離子吸附在固定相上—組分離子吸附在固定相上）

在離子交換過(guò)程中，流動(dòng)相中存在的被分析離子（M+）與樹(shù)脂上吸附的反離子（Y-）之間發(fā)生競(jìng)爭(zhēng)吸附，可用下列平衡表示：

陽(yáng)離子交換： 陰離子交換：

被分離樣品中不同離子對(duì)交換劑具有不同的親和力，在發(fā)生競(jìng)爭(zhēng)吸附時(shí)，不同的樣品離子交換反離子的能力也不同。對(duì)交換劑親和力較強(qiáng)的樣品離子，交換反離子的能力較強(qiáng)，從而在色譜柱中遷移速度較慢，從而達(dá)到分離的目的。3.分配系數(shù)：

以陰離子交換平衡過(guò)程為例，分配系數(shù)：

其中，（1）分離的順序決定于分配系數(shù)的大小：

溶質(zhì)中某離子與離子交換劑的相互作用越強(qiáng)，K↑，后流出色譜柱 溶質(zhì)中某離子與離子交換劑的相互作用越弱，K↓，先流出色譜柱

（2）某色譜條件下，兩組分分配系數(shù)差值為零，則代表兩組分在該色譜條件下不能分離。

4.應(yīng)用：

離子交換色譜法特別適用于分離離子化合物、有機(jī)酸和有機(jī)堿等能電力的化合物和能與離子基團(tuán)相互作用的化合物。它不僅廣泛地應(yīng)用于有機(jī)物質(zhì)，而且廣泛地應(yīng)用于生物物質(zhì)的分離，如氨基酸、核酸、蛋白質(zhì)等生物分子，還能用于維生素的混合物、食品防腐劑、血清等的分離。5.分類：

陽(yáng)離子交換色譜和陰離子交換色譜

【小結(jié)】

1． 固定相：

液-液分配色譜法 將液體固定液涂漬在擔(dān)體上作為固定相

化學(xué)鍵合相色譜法 將固定液通過(guò)化學(xué)反應(yīng)共價(jià)鍵合到擔(dān)體（硅膠）表面作為固定相 液-固吸附色譜法 吸附劑 離子交換色譜法 離子交換劑 2．分離原理

液-液分配色譜法 溶解——溶解分配平衡過(guò)程（組分溶解在固定相中—組分溶解在流動(dòng)相中）化學(xué)鍵合相色譜法 溶解——溶解分配平衡過(guò)程（組分溶解在固定相中—組分溶解在流動(dòng)相中）液-固吸附色譜法 吸附——吸附競(jìng)爭(zhēng)平衡過(guò)程（組分吸附在固定相上—流動(dòng)相吸附在固定相上）離子交換色譜法 吸附——吸附競(jìng)爭(zhēng)平衡過(guò)程（反離子吸附在固定相上—組分離子吸附在固定相上）3．各種色譜法的分配系數(shù)表示方法雖各不相同，但分配系數(shù)與組分流出順序的關(guān)系均可表述為，組分K↑，后流出色譜柱；組分K↓，先流出色譜柱。

【作業(yè)】

課后習(xí)題 2、6、9。

第九節(jié) 高效液相色譜法在食品檢測(cè)中的應(yīng)用

【教學(xué)目標(biāo)】

1.了解高效液相色譜法在食品檢測(cè)中的具體應(yīng)用實(shí)例

2.能夠通過(guò)實(shí)例系統(tǒng)地了解之前所學(xué)關(guān)于高效液相色譜法的具體內(nèi)容 3.了解食品高效液相色譜法前處理知識(shí) 【教學(xué)重點(diǎn)】

外標(biāo)法定量的運(yùn)用 【教學(xué)難點(diǎn)】

不同定量方法的運(yùn)用 【復(fù)習(xí)題】

1.液相色譜法的主要定量方法包括哪幾種？

【講授新課】

5.動(dòng)物源食品呋喃唑酮?dú)埩袅康臏y(cè)定

呋喃唑酮（痢特靈）是一種抗菌效果非常好的廣譜抗生素藥物，曾被廣泛應(yīng)用于家禽、家畜、水產(chǎn)品中的疾病預(yù)防和治療。近年的研究表明，呋喃唑酮及其代謝物具有致基因突變和致癌性。美國(guó)1993年禁止呋喃唑酮作為獸藥，歐盟將其列為違禁藥品，我國(guó)農(nóng)業(yè)部第235號(hào)公告中也規(guī)定動(dòng)物性食品中呋喃唑酮檢出限為不得檢出。

（一）原理：反相色譜法

（二）色譜條件：

固定相：C18柱

流動(dòng)相：乙腈—磷酸溶液 檢測(cè)器：Uv-vis檢測(cè)器 檢測(cè)波長(zhǎng)：367nm 流速：1.0ml/min 進(jìn)樣量：20ul

（三）測(cè)定方法： 1．試樣前處理：

固體試料破碎→混合→初分離→濃縮→再分離→過(guò)濾→供試樣液

2．測(cè)定方法（外標(biāo)法）：

（1）標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品溶液的配制與測(cè)定：精密稱取呋喃唑酮標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品適量，配制成一定濃度的溶液Cs。在上述色譜條件下得到色譜流出曲線，呋喃唑酮的保留時(shí)間在4.5min附近，得到呋喃唑酮峰的峰面積As。

（2）樣品溶液測(cè)定：試樣溶液在上述色譜條件下分離得到試樣的色譜流出曲線，得到試樣中呋喃唑酮的峰面積Ax。

（3）外標(biāo)法計(jì)算：利用下式即可計(jì)算的出樣品中的呋喃唑酮含量

二．高效液相色譜測(cè)定保健食品中的黃芪甲苷

黃芪是多年生草本豆科植物，藥用歷史悠久、廣泛。皂苷是黃芪中的主要有效成分之一，而黃芪皂苷以黃芪甲苷為主。黃芪甲苷具有增強(qiáng)機(jī)體免疫力、抗氧化、促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)，抑制內(nèi)毒素等作用。所以在一些保健食品中，黃芪甲苷作為功能性添加劑成分有添加。例如，蜂膠黃芪軟膠囊、蟲(chóng)草雞精口服液。

（一）原理：反相色譜法

（二）色譜條件：

固定相：C18柱 流動(dòng)相：乙腈—水

檢測(cè)器：二極管陣列檢測(cè)器 檢測(cè)波長(zhǎng)：227nm 流速0.8ml/min 進(jìn)樣量：10ul

（三）測(cè)定方法（外標(biāo)法峰面積標(biāo)準(zhǔn)曲線法）： 1．試樣前處理：

蟲(chóng)草雞精口服液試樣→濃縮→定容→過(guò)柱（大孔吸附樹(shù)脂）→濃縮→過(guò)濾→供試樣液 2．測(cè)定方法：

（1）標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品溶液的配制與測(cè)定：精密稱取黃芪甲苷標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品適量，配制為濃度從低到高的一系列溶液C1……C5（5.0，10.0，20.0，40.0，50.0μg/mL）。在上述色譜條件下依次得到相應(yīng)色譜流出曲線，并得到峰面積A1……A5。

（2）標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：以峰面積A對(duì)濃度進(jìn)行線性回歸，得線性回歸方程，即為標(biāo)準(zhǔn)曲線。

（3）樣品溶液測(cè)定：在標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍內(nèi)，加載供試樣液，得到樣品色譜流出曲線，測(cè)量其中黃芪甲苷對(duì)應(yīng)峰的峰面積。

將樣品黃芪甲苷峰的峰面積帶入線性回歸方程，利用標(biāo)準(zhǔn)曲線法即可算出樣品中的黃芪甲苷含量。

三．高效液相色譜法同時(shí)進(jìn)行測(cè)定食品中安賽蜜、糖精、苯甲酸、山梨酸和咖啡因

食品添加劑若使用不當(dāng)，添加過(guò)量，就會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生毒副作用。

（一）原理：反相色譜法

（二）色譜條件：

固定相：C18柱

流動(dòng)相：甲醇—檸檬酸銨 檢測(cè)器：Uv-vis檢測(cè)器 檢測(cè)波長(zhǎng)215nm 流速1.0ml/min 進(jìn)樣量20μL 柱溫40℃

（三）測(cè)定方法： 1．試樣前處理：

（1）乳狀液體樣品（果奶、冰淇淋等）：

試樣→沉淀蛋白質(zhì)→過(guò)濾、脫氣→供試樣液

（2）澄清液體樣品（汽水、可樂(lè)等）：

試樣→脫氣→稀釋→過(guò)濾→供試樣液

（3）固狀樣品（肉制品、醬脆菜等）：

試樣→搗碎→加入溶劑→沉淀蛋白質(zhì)→過(guò)濾、脫氣→供試樣液

2．測(cè)定方法（外標(biāo)法峰高標(biāo)準(zhǔn)曲線法）：

（1）標(biāo)準(zhǔn)溶液配制：使用流動(dòng)相配制安賽蜜、糖精鈉、苯甲酸、山梨酸、咖啡因標(biāo)準(zhǔn)溶液（1mg/mL），將各標(biāo)準(zhǔn)液按照安賽蜜、糖精鈉、苯甲酸、山梨酸、咖啡因比例依次為5.0、4.0、5.0、5.0、5.0μg/mL混合，得到混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。將混合標(biāo)準(zhǔn)溶液用水稀釋成6個(gè)濃度C1……C6

（2）確定成分峰位置：首先用各自的標(biāo)準(zhǔn)溶液稀釋，在色譜條件下進(jìn)行分析，定性確定每個(gè)峰對(duì)應(yīng)的成分。

（3）標(biāo)準(zhǔn)曲線：在上述色譜條件下，6個(gè)濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液分別得到相應(yīng)色譜流出曲線，并得到峰高h(yuǎn)1……h(huán)6。以峰高h(yuǎn)對(duì)含量進(jìn)行線性回歸，得各種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的線性回歸方程，即為標(biāo)準(zhǔn)曲線。

（4）樣品溶液測(cè)定：在標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍內(nèi)，加載供試樣液，得到每種樣品的色譜流出曲線，測(cè)量其中添加劑對(duì)應(yīng)峰的峰高。

將樣品添加劑相關(guān)峰的峰高帶入線性回歸方程，利用標(biāo)準(zhǔn)曲線法即可算出樣品中各種添加劑的含量。

四．反相高效液相色譜法測(cè)定巧克力中香蘭素

香蘭素是重要的食用香料之一，是食用調(diào)香劑，具有香莢蘭豆香氣及濃郁的奶香，是食品添加劑行業(yè)中不可缺少的重要原料，廣泛運(yùn)用在各種需要增加奶香氣息的調(diào)香食品中，香蘭素是國(guó)家允許添加的食品添加劑，按國(guó)標(biāo)添加不會(huì)對(duì)身體造成傷害。但大劑量食用可導(dǎo)致頭痛、惡心、嘔吐、呼吸困難，甚至損傷肝腎等。

（一）原理：反相色譜法

（二）色譜條件：

固定相：C18柱 流動(dòng)相：甲醇—水 檢測(cè)器：Uv-vis檢測(cè)器 檢測(cè)波長(zhǎng)：280nm 流速：1.0ml/min 進(jìn)樣量：10μL 柱溫：35℃

（三）測(cè)定方法： 1．試樣前處理：

巧克力樣品→加水加溫溶解→定容→離心取上層清液→過(guò)濾→供試樣液

2．測(cè)定方法：

外標(biāo)法峰面積標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量

參見(jiàn)實(shí)驗(yàn)二．高效液相色譜測(cè)定保健食品中的黃芪甲苷中的標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定方法

【小結(jié)】

1．樣品預(yù)處理：根據(jù)樣品狀態(tài)不同采用不同的預(yù)處理方法，再利用相似相溶粗提取要測(cè)的成分。2．分析實(shí)例中用的是反相色譜，其固定相為十八烷基硅烷鍵合硅膠，極性小于流動(dòng)相（乙腈-水；乙腈-磷酸鹽；甲醇-水；甲醇-檸檬酸）。且分析的樣品都是弱極性、中等極性的樣品。3．含量測(cè)定：外標(biāo)法（標(biāo)準(zhǔn)曲線法、峰面積法、峰高法）

【作業(yè)】

課后題 10。