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      病理科免疫組化技術(shù)員培訓(xùn)

      時(shí)間:2019-05-12 17:16:15下載本文作者:會(huì)員上傳
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      第一篇:病理科免疫組化技術(shù)員培訓(xùn)

      病理科免疫組織化學(xué)技術(shù)員培訓(xùn)及技術(shù)操作規(guī)范

      一、病理科免疫組織化學(xué)技術(shù)員培訓(xùn)規(guī)范:

      凡新入我科的病理技術(shù)員均需進(jìn)行免疫組化理論知識(shí)的學(xué)習(xí)、培訓(xùn),經(jīng)考核合格、具備病理技術(shù)員技士資質(zhì)后方能從事免疫組織化學(xué)染色。

      二、病理科免疫組織化學(xué)染色操作規(guī)范 1.免疫組織化學(xué)染色前的準(zhǔn)備事項(xiàng)(一)組織切片的制備

      常規(guī)切片脫蠟至水(組織固定需用10%中性甲醛)(二)抗體的選擇、稀釋和保存

      (1)選擇抗體應(yīng)先了解其反應(yīng)譜和適用條件〔包括適用切片(石蠟切片抑或冷凍切片)、稀釋度和溫育時(shí)間等〕。

      (2)對(duì)于未曾使用過(guò)的新抗體,應(yīng)按照有關(guān)說(shuō)明書(shū)的提示,以幾個(gè)不同的稀釋度對(duì)適宜檢材(已知陽(yáng)性切片/涂片)進(jìn)行預(yù)試驗(yàn);根據(jù)染色陽(yáng)性表達(dá)的程度和檢材背景著色程度,確定用于染色的最適稀釋度

      (3)抗體的原液應(yīng)于分裝后置于一20℃冷室中保存,切勿反復(fù)凍存(以免效價(jià) 降低)。(4)抗體的工作液可置于4℃冰箱中保存。(5)抗體的稀釋。

      (1)一般用0.01M PBS(生理鹽水磷酸鹽緩沖液),pH值7.2。(2)或用0.05M TBS(生理鹽水三經(jīng)基氨基甲烷緩沖液),pH值7.6。(3)必要時(shí)可按需要加適量小牛血清清蛋白。(三)被檢測(cè)組織內(nèi)抗原的修復(fù)

      (1)經(jīng)4%中性甲醛之類(lèi)含醛基固定劑固定的組織,其切片中的抗原決定簇因醛的交聯(lián)作用而被封閉,從而影響抗原一抗體反應(yīng)。進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色前,對(duì)于組織切片進(jìn)行抗原修復(fù)處理,會(huì)使組織中的固有抗原盡量多地暴露出來(lái),提升了大部分檢測(cè)抗體的陽(yáng)性率和反應(yīng)強(qiáng)度。有的抗體不需要進(jìn)行抗原修復(fù)。應(yīng)按抗體試劑說(shuō)明書(shū)的提示決定是否進(jìn)行被檢測(cè)組織內(nèi)的抗原修復(fù)。(2)抗原修復(fù)緩沖液。

      (l)一般為0.01M檸檬酸緩沖液(2.1g檸檬酸溶于100ml蒸餾水中,用2M NaOH調(diào)節(jié)pH值至6.0)。(2)有些抗體需要特殊修復(fù)緩沖液,如高PH值的EDTA(50mM Tris.,10mM EDTA,pH9.0),或商品化的該高,10mM EDTA,pH9.0),或商品化的該高pH修復(fù)液等。(3)抗原修復(fù)的常用方法。(l)胰蛋白酶消化法: ①組織切片脫蠟、水化。

      ②滴加一滴0.1%胰蛋白酶液于組織切片上。

      ③37℃下溫育20-40min(溫育時(shí)間取決于組織經(jīng)4%中性甲醛固定時(shí)間的長(zhǎng)短和被檢測(cè)抗原)。

      ④蒸餾水沖洗,終止反應(yīng)。

      ⑤阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶。

      ⑥進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色。(配制0.1%胰蛋白酶液時(shí),應(yīng)將0.1g胰蛋白酶溶于0.1%無(wú)水氯化鈣水溶液(pH值7.8)中。)

      (2)胃蛋白酶消化法: ①組織切片脫蠟、水化.②滴加胃蛋白酶工作液于組織切片上。

      ③37℃下溫育10-30min(一般為10min,可延至30min,取決于組織經(jīng)4%中性甲醛固定時(shí)間的長(zhǎng)短).④浸人蒸餾水,終止反應(yīng)。

      ⑤進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色。用1%胰蛋白酶液37℃下處理20min。(應(yīng)以 0.1M HCI配制胃蛋白酶工作液。過(guò)度的胃蛋白酶消化會(huì)使組織結(jié)構(gòu)破壞、切片 脫落。)(3)微波修復(fù)抗原法: ①組織切片脫蠟、水化(硅化玻片或經(jīng)防脫片膠處理的玻片)。

      ②將組織切片置于容器(塑料盒或玻璃缸)中,并向其中加人抗原修復(fù)液 200ml,蓋上具有小孔的蓋子。

      ③將該容器置于微波爐(705-800W)中央加熱(95℃)5min,2次(于兩次之間,應(yīng)向容器中添加蒸餾水50ml,嚴(yán)防組織切片干燥)。

      ④將該容器移出微波爐,置于室溫下冷卻15-20min。

      ⑤蒸餾水沖洗。

      ⑥阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶,而后將切片置于蒸餾水中。

      ⑦用TBS或 PBS液沖洗。⑧進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色。(4)熱水浴法: ①組織切片脫蠟、水化(硅化玻片或經(jīng)防脫片膠處理的玻片)。

      ②向裝組織切片的容器加人足量(例如200ml)抗原緩沖液,置于水浴鍋中,加熱至95-99℃(不沸騰)預(yù)熱。

      ③將組織切片插人已預(yù)熱的容器內(nèi),溫育20-40min。

      ④將該容器由微波爐移出,置于室溫下冷卻20min。⑤室溫下,用TBS、PBS或水洗。

      ⑥蒸餾水沖洗。

      ⑦阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶,而后將切片置于蒸餾水中。

      ⑧用TBS或PBS液沖洗。

      ⑨進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色。

      (5)壓力鍋法: ①組織切片脫蠟、水化(硅化玻片或經(jīng)防脫片膠處理的玻片)。

      ②向4-5.5L的不銹鋼壓力鍋中加人抗原修復(fù)緩沖液(約為鍋容積的2/3),不加閥情況 下加熱至沸騰。

      ③將組織切片插放于金屬切片架上,并置于壓力鍋內(nèi)沸騰的緩沖液中。

      ④加閥情況下,將組織切片加壓2min。

      ⑤壓力鍋?zhàn)孕欣鋮s或以流水冷卻減壓后,持續(xù)20min。

      ⑥將冷卻后的切片取出,蒸餾水沖洗后,置于TBS或PBS液中(以免組織切片干燥)。

      ⑦蒸餾水沖洗。

      ⑧阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶,而后將切片置于蒸餾水中。

      ⑨用TBS或PBS液沖洗。

      ⑩進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色。

      (四)組織切片中內(nèi)源性酶的阻斷

      1.內(nèi)源性過(guò)氧化物酶 主要存在于紅細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞了嗜酸性粒細(xì)胞和組織內(nèi)。阻斷方法:最常用0.3%-0.5%H2O2-甲醇液,作用15-30min,阻斷液必須使用時(shí)新鮮配制。由于阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶常同時(shí)導(dǎo)致被測(cè)抗原變性(使特異性著色減弱),而大部分組織不含有內(nèi)源性過(guò)氧化物酶,所以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶一般不必作為常規(guī)步驟。必須阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶時(shí),可安排在第一抗體反應(yīng)后進(jìn)行,以減少抗原的破壞。2.內(nèi)源性堿性磷酸酶 主要存在于嗜中性粒細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞。阻斷方法:應(yīng)用1M左旋咪唑,作用15-30min。

      3.內(nèi)源性生物素 肝、胰、腎等的細(xì)胞內(nèi)含有多量生物素或類(lèi)生物素物質(zhì)。阻斷方法:先將切片浸于卵白素(0.5μg/ml)中15min,以緩沖液洗凈后,移浸于生物素飽和溶液中15min,再用緩沖液洗去多余的生物素飽和液;也可應(yīng)用商供的阻斷試劑盒(按說(shuō)明書(shū)操作)。(五)正常血清保護(hù)

      作為檢測(cè)試劑的抗體蛋白帶有一定的負(fù)電荷,免疫組織化學(xué)染色時(shí),易與帶有正電荷的組織〔特別是纖維組織、變性和(或)壞死的細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞等〕發(fā)生靜電吸引而導(dǎo)致非特異性染色。去除這種非特異性染色最有效的方法是,在滴加第一抗體前,先滴加用于制備第二抗體動(dòng)物的非免疫血清或是滴加除制備第一抗體動(dòng)物以外的其他動(dòng)物非免疫血清,濃度為1:5-1:20;必要時(shí)可滴加2%-5%牛 血清清蛋白。正常血清保護(hù)作用時(shí)間10-20min。用于阻斷非特異性結(jié)合的血清不能有明顯的溶血。(六)緩沖液

      用于稀釋抗體,洗滌切片的緩沖液主要有兩種。1.TBS(0.05M,pH7.6),Tris一HCl緩沖液(0.SM,pH 7.6)100ml 8.5%NaCl 100ml 蒸餾水加至 1000ml Tris一HCI緩沖液(0.5M,pH7.6)三經(jīng)甲基氨基甲烷(Tris)61g HCl 37ml 蒸餾水加至 1000ml 2.PBS(0.IM,pH 7.6)Na2 HPO4 · 12H2O2 29g NaH2PO4 · 2H2O 3g NaCl 85g 蒸餾水加至 1000ml 使用時(shí)用蒸餾水稀釋10倍即成0.0lM。

      二、免疫組織化學(xué)染色常用方法(一)直接法 1.脫蠟和水化。

      2.3%過(guò)氧化氫或0.5%過(guò)氧化氫甲醇液,5min。

      3.TBS或PBS緩沖液洗滌。4.抗原修復(fù)。

      5.無(wú)關(guān)動(dòng)物正常血清(適當(dāng)稀釋)20-30min。

      6.甩去正常動(dòng)物血清,滴加適當(dāng)稀釋的辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記抗體,或增強(qiáng)的酶標(biāo)多聚物一步法(Enhanced Polymer One-step Staining,EPOS)抗體于切片上,20-60min。7.TBS或PBS緩沖液洗滌。

      8.0.04%-0.05%DAB(二氨基聯(lián)苯胺四鹽酸)H2O2液顯色5-10min,鏡下觀察控制顯色時(shí)間。底物配法:DAB 40-50mg;0.05M TBS(pH 7.6)l00ml;3% H2O2 100-200ml。9.緩沖液洗,流水洗滌。10.蘇木精淡染細(xì)胞核。11.脫水,透明,封片。(二)間接法

      l-5步同“直接法”。

      6.滴加第一抗體于切片上,濕盒內(nèi)溫育30-60min。7.TBS或PBS緩沖液洗滌。

      8.HRP標(biāo)記抗體或用增強(qiáng)的酶標(biāo)記多聚物(Enhanced Labeled一 Polymer Sys-tem,ELPS)抗體滴加切片上,濕盒內(nèi)溫育30min。9-14步同“直接法”的7-11步。(三)過(guò)氧化物酶一抗過(guò)氧化物酶(PAP)法 1-5步同直接法。

      6.適當(dāng)稀釋的第一抗體,濕盒內(nèi)溫育30-60min。7.緩沖液洗滌。

      8.第二抗體,濕盒內(nèi)溫育30min。9.緩沖液洗滌。

      10.滴加PAP,濕盒內(nèi)溫育30min。11-15步同“直接法”的7-11步。

      雙PAP法:上述操作進(jìn)行到第10步后,再重復(fù)7-10步1次,然后繼續(xù)11-15步。(四)葡萄球菌A蛋白(SPA)免疫酶法 1-5步同“直接法”。

      6.第一抗體,濕盒溫育30-60min。7.緩沖液洗滌。

      8.酶聯(lián)SPA,濕盒溫育30min。9.緩沖液洗滌。

      10-13步同“直接法”的8-11步。(五)ABC法和SABC法

      ABC法是卵白素-生物素-酶復(fù)合物(Avidin--Biotin--Peroxidase Complex)法的簡(jiǎn)稱。SABC法是鏈霉卵白素-生物素-酶復(fù)合物(Streptavidin一Biotin一peroxidase Complex)法的簡(jiǎn)稱。

      l-5步同“直接法”。

      6.第一抗體,濕盒溫育30-60min.7.緩沖液洗滌。

      8.生物素化的第二抗體,30min。9.緩沖液洗滌。

      10.ABC復(fù)合物或SABC復(fù)合物(皆于使用前新鮮配制),30-60min。11-15步同“直接法”7-11步。(六)LSAB(SP)法

      LSAB(SP)法,是標(biāo)記的鏈酶卵白素-生物素(Labeled Streptavidin--Biotin)法的簡(jiǎn)稱,操作步驟同“ABC法”,只是以LSAB復(fù)合物替代ABC復(fù)合物。(七)CSA法

      CSA法是催化信號(hào)放大(Catalyzed Signal Amplifieation)法的簡(jiǎn)稱。1-5步同“直接法”。6.第一抗體,15-30min。7.緩沖液洗滌。

      8.生物素標(biāo)記的第二抗體,15-30min。9.緩沖液洗滌。

      10.鏈霉卵白素-生物素-HRP復(fù)合物(用前新鮮配制),15min。11.緩沖液洗滌。12.放大液,15min。13.緩沖液洗滌。

      14.HRP-StrePtavidin,15min。15-19步同“直接法”的7-11步。(八)二步法Envision System Envision是通過(guò)一個(gè)多聚葡聚糖骨架聯(lián)接成一個(gè)多聚體。1-5步同“直接法”。6.第一抗體,30-60min。7.緩沖液洗滌。

      8.Envision TM,10-30min。9-13步同“直接法”的7-11步。(九)雙重免疫組織化學(xué)法.Sequential(1)鼠或兔抗體1,30-60min。

      (2)Envision TM,羊抗鼠/羊抗兔/HRP,30 min。(3)DAB(棕色),2-10 min。(4)鼠或兔抗體2,30-60 min。

      (5)Envision TM,羊抗鼠/羊抗兔/AP,30 min。(6)AP(紅色)。2.Simnl一Aaneous(1)混合鼠抗體1和兔抗體2,4℃,過(guò)夜或60 min。(2)Envision TM羊抗鼠/HRP和羊抗兔/AP。(3)AP染色。(4)HRP染色。

      上述方法除注明溫度者外,均可在室溫(20-25℃)環(huán)境中進(jìn)行;第一抗體溫育后,如有必要可置于4℃ 下過(guò)夜。

      三、免疫組織化學(xué)染色的常用抗體標(biāo)記物(一)上皮源性標(biāo)記物 1.一般性標(biāo)記物

      (1)CK(角蛋白)CK亞型:①CK5/6;②CK7;③CK8;④CK10/13;⑤CK18;⑥CK19;⑦CK20。(2)EMA(上皮細(xì)胞膜抗原)。

      2.特異性和(或)相對(duì)特異性上皮標(biāo)記物

      (1)CEA(癌胚抗原,標(biāo)記胃癌、大腸癌).(2)CA242(腫瘤相關(guān)粘液抗原,標(biāo)記胰腺癌、大腸癌)。

      (3)TG(甲狀腺球蛋白,標(biāo)記甲狀腺癌).(4)PSA(前列腺特異性抗原,標(biāo)記前列腺癌)。

      (5)PSAP(前列腺特異性酸性磷酸酶,標(biāo)記前列腺癌).(6)34βE12(標(biāo)記前列腺底細(xì)胞).(7)AFP(甲胎蛋白,標(biāo)記肝癌、內(nèi)胚竇癌).(8)Hepatoeyte(標(biāo)記肝細(xì)胞癌)。

      (9)β-HCG(β-絨毛膜促性腺激素,標(biāo)記胎盤(pán)滋養(yǎng)層細(xì)胞腫瘤、生殖細(xì)胞腫瘤).(10)CA125(卵巢癌).(二)間葉源性標(biāo)記物

      主要是Vimentin(vim,波形蛋白)等.(三)肌源性標(biāo)記物 1.Desmin(Des,結(jié)蛋白)2.Actin(肌動(dòng)蛋白).3.SMA(平滑肌肌動(dòng)蛋白).4.MSA(肌特異性肌動(dòng)蛋白).5.Myosin(肌球蛋白).6.Myoglobin(MG,肌紅蛋白)7.Myogen(肌漿蛋白).8.MyoDI(肌調(diào)節(jié)蛋白).(四)血管源性標(biāo)記物 FⅧRAg(第8因子相關(guān)抗原).CD31 CD34 UEA-l BNH9.(五)組織細(xì)胞源性標(biāo)記物 1.CD68/KP-l.2.Lysozyme(溶菌酶)。3.a1-AT(a1-抗胰蛋白酶).4.a1-ACT(al-抗胰糜蛋白酶)5.Mac387.淋巴造血組織源性標(biāo)記物 1.全淋巴細(xì)胞

      (1)CD45/LCA(白細(xì)胞共同抗原)。(2)TdT(末端脫氧核昔酸轉(zhuǎn)移酶)。(3)CD30/Ki-1。2.全B細(xì)胞(1)Igκ。(2)Igλ。(3)CD20/L26。(4)CD79a。

      (5)BLA36(B淋巴細(xì)胞抗原)。3.B細(xì)胞亞型(1)CDl0。

      (2)CD21(標(biāo)記濾泡性樹(shù)突狀細(xì)胞)。(3)CD23。

      (4)CD35(標(biāo)記濾泡性樹(shù)突狀細(xì)胞)。(5)CD38.4.全T細(xì)胞(1)CD3。(2)CD5。(3)CD43。(4)CD45RO/UCHL-1.5.T細(xì)胞亞型(1)CDla。(2)CD4。(3)CD8。6.NK細(xì)胞(1)CD56。(2)CD57/Leu-7。(3)CD16/Leu-11。7.粒細(xì)胞和單核巨噬細(xì)胞(1)CD11c/LeuM5。(2)CD15/LeuM5。(3)Lysozyme(溶菌酶)。(4)al-AT(al-抗胰蛋白酶)。(5)al-ACT(al-抗胰糜蛋白酶)。(6)CD68.(7)S-100蛋白.(8)Mac387。8.其他

      (1)EMA(上皮細(xì)胞膜抗原).(2)CD99(尤因肉瘤標(biāo)記物).(3)ALK-l(間變性淋巴瘤激酶)。(4)HLA-DR。(5)Bel-2。(6)Bel-6。(7)Bel-10。(8)Ki-67。

      (9)CyclinD1(周期素D1)。(10)CD25。

      (11)CD34。

      (七)神經(jīng)源性標(biāo)記物 1.S-100蛋白.2.NSE(神經(jīng)原特異性烯醇化酶).3.Leu7。

      4.Neurofilament(NF,神經(jīng)微絲蛋白)。5.GFAP(膠質(zhì)纖維酸性蛋白)

      (八)神經(jīng)內(nèi)分泌源性標(biāo)記物 1.激素標(biāo)記物(1)CA(兒茶酚胺)。(2)5-HT(5-經(jīng)色胺).(3)垂體激素。

      ①GH(促生長(zhǎng)素)。

      ②PRL(催乳素)。

      ③ACTH(促腎上腺皮質(zhì)激素).④TSH(促甲狀腺素).⑤FSH(促濾泡素).⑥LH(促黃體素)。(4)甲狀腺。

      ①TG(甲狀腺球蛋白)。

      ②CT(降鈣素)。

      (5)甲狀旁腺:PTH(甲狀旁腺素)。(6)胰島。

      ①I(mǎi)nsulin(胰島素)。

      ②Glueagon(胰高糖素)。

      ③VIP(舒血管腸肽).④PP(胰多肽).⑤Someitostatin(生長(zhǎng)抑素)。

      ⑥Gastrin(胃泌素)。2.非激素標(biāo)記物

      (1)NSE(神經(jīng)原特異性烯醇化酶).(2)CgA(嗜鉻素A).(3)SY(突觸素).3.激素受體(1)ER(雌激素受體).(2)AR(雄激素受體).(3)PR(孕激素受體).(九)細(xì)胞增殖標(biāo)記物 1.PCNA(增殖細(xì)胞核抗原).2.Ki-67.(十)黑色素標(biāo)記物 1.S-100蛋白.2.HMB45.3.Melanoma。

      (十一)癌基因和(或)抑癌基因 1.bel-2.2.c-erbB-2.3.p53 4.p16(多腫瘤抑制基因)。5.nm23。(十二)病原體標(biāo)記物

      1.Myoeobaeterium Bovis(分枝桿菌,抗卡介苗)。2.HBsAg(乙型肝炎病毒表面抗原).3.HBcAg(乙型肝炎病毒核心抗原).4.HPV(人乳頭狀瘤病毒)5.HTLV-1(人類(lèi)T細(xì)胞白血病病毒)。

      第二篇:病理科技術(shù)員管理制度

      病理科技術(shù)員管理制度

      1.目的:

      規(guī)范病理科技術(shù)員的管理制度,提高技術(shù)員的職業(yè)水平。2.職責(zé):

      2.1病理醫(yī)師:負(fù)責(zé)對(duì)病理技術(shù)員的日常制片質(zhì)量和相關(guān)的技術(shù)水平作好監(jiān)督,并作出指導(dǎo)性意見(jiàn)。

      2.2病理技術(shù)員:嚴(yán)格遵守相關(guān)作業(yè)指導(dǎo)書(shū)操作科室設(shè)備和完成相關(guān)技術(shù)的操作。

      3.病理科技術(shù)員管理細(xì)則

      3.1病理科對(duì)病理技術(shù)人員實(shí)行分級(jí)授權(quán)管理制度;

      3.2病理技術(shù)人員應(yīng)具有中專(zhuān)以上衛(wèi)生專(zhuān)業(yè)學(xué)歷,并接受繼續(xù)教育與技能培訓(xùn); 3.3具備病理專(zhuān)業(yè)資質(zhì)的技術(shù)人員從事制作細(xì)胞涂片、石蠟切片等工作; 3.4病理技術(shù)人員經(jīng)過(guò)相應(yīng)崗位培訓(xùn)并考核合格后,由病理科主任(副主任)進(jìn)行相應(yīng)崗位授權(quán);考核不合格人員需再培訓(xùn),合格后方可授權(quán);

      3.5質(zhì)量與安全管理小組于每月對(duì)科室進(jìn)行質(zhì)量與安全監(jiān)督時(shí),隨機(jī)抽取50張病理切片,對(duì)病理技術(shù)人員進(jìn)行重新再評(píng)價(jià),合格者給予再授權(quán);不合格者,須重新進(jìn)行培訓(xùn)。

      第三篇:病理-病理科技術(shù)員職責(zé)

      病理科技術(shù)員職責(zé)

      主任技師職責(zé)

      (1)負(fù)責(zé)制訂病理技術(shù)室的建設(shè)及發(fā)展規(guī)劃。

      (2)負(fù)責(zé)病理新技術(shù)的開(kāi)發(fā)及應(yīng)用。

      (3)精通各項(xiàng)技術(shù)室工作并指導(dǎo)各項(xiàng)技術(shù)工作,解決各種疑難技術(shù)問(wèn)題。

      (4)組織技術(shù)室人員學(xué)習(xí),提高業(yè)務(wù)能力。

      (5)負(fù)責(zé)制訂進(jìn)修技術(shù)人員的培訓(xùn)計(jì)劃,具體落實(shí)安排及指導(dǎo)。

      (6)組織技術(shù)室開(kāi)展科研工作及參加科內(nèi)外科研工作。

      (7)在科主任領(lǐng)導(dǎo)下負(fù)責(zé)儀器、設(shè)備、試劑等的選購(gòu)工作。

      (副主任技師按分工履行主任技師崗位職責(zé)的相應(yīng)部分)主管技師職責(zé)

      (1)獨(dú)立承擔(dān)合格的常規(guī)切片、冷凍切片及涂片制作。(2)獨(dú)立承擔(dān)20項(xiàng)以上組織化學(xué)染色工作。(3)獨(dú)立開(kāi)展免疫組化技術(shù)工作。

      (4)協(xié)助上級(jí)技師承擔(dān)輔導(dǎo)進(jìn)修技術(shù)人員的教學(xué)工作。(5)在上級(jí)技師指導(dǎo)下,獨(dú)立開(kāi)展或參加有關(guān)科研工作。

      (6)參加巨檢及尸檢記錄工作,協(xié)助醫(yī)師做好臨床病理討論會(huì)前的準(zhǔn)備工作。(7)在主治醫(yī)師指導(dǎo)下,承擔(dān)或參加大體標(biāo)本攝影及大體標(biāo)本制作工作。(8)承擔(dān)儀器的維修、保養(yǎng)工作。

      (9)在沒(méi)有主任技師的科室,力所能及地承擔(dān)主任技師的相應(yīng)工作。技師職責(zé)

      (1)獨(dú)立承擔(dān)合格的常規(guī)切片、冷凍切片及涂片制作。(2)在上級(jí)技師指導(dǎo)下,參加或承擔(dān)部分主管技師的工作。

      (3)在沒(méi)有專(zhuān)職檔案管理員、文秘相應(yīng)編制的科室,應(yīng)根據(jù)實(shí)際需要分別承擔(dān)下述任務(wù): 收費(fèi)、資料歸檔、各項(xiàng)登記工作、診斷報(bào)告書(shū)的打印及發(fā)送等。

      第四篇:病理科免疫組織化學(xué)技術(shù)員培訓(xùn)及技術(shù)操作規(guī)范

      題目:病理科免疫組織化學(xué)技術(shù)員培訓(xùn)及技術(shù)操作規(guī)范 市一—病理科—30 生效日期:2012年1月1日 版本號(hào)1.0 修改日期: 頁(yè)碼1/13

      病理科免疫組織化學(xué)技術(shù)員培訓(xùn)及技術(shù)操作規(guī)范

      一、病理科免疫組織化學(xué)技術(shù)員培訓(xùn)規(guī)范:

      凡新入我科的病理技術(shù)員均需進(jìn)行免疫組化理論知識(shí)的學(xué)習(xí)、培訓(xùn),經(jīng)考核合格、具備病理技術(shù)員技士資質(zhì)后方能從事免疫組織化學(xué)染色。

      二、病理科免疫組織化學(xué)染色操作規(guī)范 1.免疫組織化學(xué)染色前的準(zhǔn)備事項(xiàng)(一)組織切片的制備

      常規(guī)切片脫蠟至水(組織固定需用10%中性甲醛)(二)抗體的選擇、稀釋和保存

      (1)選擇抗體應(yīng)先了解其反應(yīng)譜和適用條件〔包括適用切片(石蠟切片抑或冷凍切片)、稀釋度和溫育時(shí)間等〕。

      (2)對(duì)于未曾使用過(guò)的新抗體,應(yīng)按照有關(guān)說(shuō)明書(shū)的提示,以幾個(gè)不同的稀釋度對(duì)適宜檢材(已知陽(yáng)性切片/涂片)進(jìn)行預(yù)試驗(yàn);根據(jù)染色陽(yáng)性表達(dá)的程度和檢材背景著色程度,確定用于染色的最適稀釋度(3)抗體的原液應(yīng)于分裝后置于一20℃冷室中保存,切勿反復(fù)凍存(以免效價(jià) 降低)。(4)抗體的工作液可置于4℃冰箱中保存。(5)抗體的稀釋。

      (1)一般用0.01M PBS(生理鹽水磷酸鹽緩沖液),pH值7.2。(2)或用0.05M TBS(生理鹽水三經(jīng)基氨基甲烷緩沖液),pH值7.6。(3)必要時(shí)可按需要加適量小牛血清清蛋白。(三)被檢測(cè)組織內(nèi)抗原的修復(fù)

      (1)經(jīng)4%中性甲醛之類(lèi)含醛基固定劑固定的組織,其切片中的抗原決定簇因醛的交聯(lián)作用而被封閉,從而影響抗原一抗體反應(yīng)。進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色前,對(duì)于組織切片進(jìn)行抗原修復(fù)處理,會(huì)使組織中的固有抗原盡量多地暴露出來(lái),提升了大部分檢測(cè)抗體的陽(yáng)性率和反應(yīng)強(qiáng)度。有的抗體不需要進(jìn)行抗原修復(fù)。應(yīng)按抗體試劑說(shuō)明書(shū)的提示決定是否進(jìn)行被檢測(cè)組織內(nèi)的抗原修復(fù)。(2)抗原修復(fù)緩沖液。

      (l)一般為0.01M檸檬酸緩沖液(2.1g檸檬酸溶于100ml蒸餾水中,用2M NaOH調(diào)節(jié)pH值至6.0)。(2)有些抗體需要特殊修復(fù)緩沖液,如高PH值的EDTA(50mM Tris.,10mM EDTA,pH9.0),或商品化的該高題目:病理科免疫組織化學(xué)技術(shù)員培訓(xùn)及技術(shù)操作規(guī)范 市一—病理科—30 生效日期:2012年1月1日 版本號(hào)1.0 修改日期: 頁(yè)碼2/13

      pH修復(fù)液等。

      (3)抗原修復(fù)的常用方法。(l)胰蛋白酶消化法: ①組織切片脫蠟、水化。

      ②滴加一滴0.1%胰蛋白酶液于組織切片上。

      ③37℃下溫育20-40min(溫育時(shí)間取決于組織經(jīng)4%中性甲醛固定時(shí)間的長(zhǎng)短和被檢測(cè)抗原)。

      ④蒸餾水沖洗,終止反應(yīng)。

      ⑤阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶。

      ⑥進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色。(配制0.1%胰蛋白酶液時(shí),應(yīng)將0.1g胰蛋白酶溶于0.1%無(wú)水氯化鈣水溶液(pH值7.8)中。)

      (2)胃蛋白酶消化法: ①組織切片脫蠟、水化.②滴加胃蛋白酶工作液于組織切片上。

      ③37℃下溫育10-30min(一般為10min,可延至30min,取決于組織經(jīng)4%中性甲醛固定時(shí)間的長(zhǎng)短).④浸人蒸餾水,終止反應(yīng)。

      ⑤進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色。用1%胰蛋白酶液37℃下處理20min。(應(yīng)以 0.1M HCI配制胃蛋白酶工作液。過(guò)度的胃蛋白酶消化會(huì)使組織結(jié)構(gòu)破壞、切片 脫落。)(3)微波修復(fù)抗原法: ①組織切片脫蠟、水化(硅化玻片或經(jīng)防脫片膠處理的玻片)。

      ②將組織切片置于容器(塑料盒或玻璃缸)中,并向其中加人抗原修復(fù)液 200ml,蓋上具有小孔的蓋子。

      ③將該容器置于微波爐(705-800W)中央加熱(95℃)5min,2次(于兩次之間,應(yīng)向容器中添加蒸餾水50ml,嚴(yán)防組織切片干燥)。

      ④將該容器移出微波爐,置于室溫下冷卻15-20min。

      ⑤蒸餾水沖洗。

      ⑥阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶,而后將切片置于蒸餾水中。

      ⑦用TBS或 PBS液沖洗。

      ⑧進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色。(4)熱水浴法: 題目:病理科免疫組織化學(xué)技術(shù)員培訓(xùn)及技術(shù)操作規(guī)范 市一—病理科—30 生效日期:2012年1月1日 版本號(hào)1.0 修改日期: 頁(yè)碼3/13

      ①組織切片脫蠟、水化(硅化玻片或經(jīng)防脫片膠處理的玻片)。

      ②向裝組織切片的容器加人足量(例如200ml)抗原緩沖液,置于水浴鍋中,加熱至95-99℃(不沸騰)預(yù)熱。

      ③將組織切片插人已預(yù)熱的容器內(nèi),溫育20-40min。

      ④將該容器由微波爐移出,置于室溫下冷卻20min。⑤室溫下,用TBS、PBS或水洗。

      ⑥蒸餾水沖洗。

      ⑦阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶,而后將切片置于蒸餾水中。

      ⑧用TBS或PBS液沖洗。

      ⑨進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色。

      (5)壓力鍋法: ①組織切片脫蠟、水化(硅化玻片或經(jīng)防脫片膠處理的玻片)。

      ②向4-5.5L的不銹鋼壓力鍋中加人抗原修復(fù)緩沖液(約為鍋容積的2/3),不加閥情況 下加熱至沸騰。

      ③將組織切片插放于金屬切片架上,并置于壓力鍋內(nèi)沸騰的緩沖液中。

      ④加閥情況下,將組織切片加壓2min。

      ⑤壓力鍋?zhàn)孕欣鋮s或以流水冷卻減壓后,持續(xù)20min。

      ⑥將冷卻后的切片取出,蒸餾水沖洗后,置于TBS或PBS液中(以免組織切片干燥)。

      ⑦蒸餾水沖洗。

      ⑧阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶,而后將切片置于蒸餾水中。

      ⑨用TBS或PBS液沖洗。

      ⑩進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色。

      (四)組織切片中內(nèi)源性酶的阻斷

      1.內(nèi)源性過(guò)氧化物酶 主要存在于紅細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞了嗜酸性粒細(xì)胞和組織內(nèi)。阻斷方法:最常用0.3%-0.5%H2O2-甲醇液,作用15-30min,阻斷液必須使用時(shí)新鮮配制。由于阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶常同時(shí)導(dǎo)致被測(cè)抗原變性(使特異性著色減弱),而大部分組織不含有內(nèi)源性過(guò)氧化物酶,所以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶一般不必作為常規(guī)步驟。必須阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶時(shí),可安排在第一抗體反應(yīng)后進(jìn)行,以減少抗原的破壞。題目:病理科免疫組織化學(xué)技術(shù)員培訓(xùn)及技術(shù)操作規(guī)范 市一—病理科—30 生效日期:2012年1月1日 版本號(hào)1.0 修改日期: 頁(yè)碼4/13

      2.內(nèi)源性堿性磷酸酶 主要存在于嗜中性粒細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞。阻斷方法:應(yīng)用1M左旋咪唑,作用15-30min。

      3.內(nèi)源性生物素 肝、胰、腎等的細(xì)胞內(nèi)含有多量生物素或類(lèi)生物素物質(zhì)。阻斷方法:先將切片浸于卵白素(0.5μg/ml)中15min,以緩沖液洗凈后,移浸于生物素飽和溶液中15min,再用緩沖液洗去多余的生物素飽和液;也可應(yīng)用商供的阻斷試劑盒(按說(shuō)明書(shū)操作)。(五)正常血清保護(hù)

      作為檢測(cè)試劑的抗體蛋白帶有一定的負(fù)電荷,免疫組織化學(xué)染色時(shí),易與帶有正電荷的組織〔特別是纖維組織、變性和(或)壞死的細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞等〕發(fā)生靜電吸引而導(dǎo)致非特異性染色。去除這種非特異性染色最有效的方法是,在滴加第一抗體前,先滴加用于制備第二抗體動(dòng)物的非免疫血清或是滴加除制備第一抗體動(dòng)物以外的其他動(dòng)物非免疫血清,濃度為1:5-1:20;必要時(shí)可滴加2%-5%牛 血清清蛋白。正常血清保護(hù)作用時(shí)間10-20min。用于阻斷非特異性結(jié)合的血清不能有明顯的溶血。(六)緩沖液

      用于稀釋抗體,洗滌切片的緩沖液主要有兩種。1.TBS(0.05M,pH7.6),Tris一HCl緩沖液(0.SM,pH 7.6)100ml 8.5%NaCl 100ml 蒸餾水加至 1000ml Tris一HCI緩沖液(0.5M,pH7.6)三經(jīng)甲基氨基甲烷(Tris)61g HCl 37ml 蒸餾水加至 1000ml 2.PBS(0.IM,pH 7.6)Na2 HPO4 · 12H2O2 29g NaH2PO4 · 2H2O 3g NaCl 85g 蒸餾水加至 1000ml 使用時(shí)用蒸餾水稀釋10倍即成0.0lM。

      二、免疫組織化學(xué)染色常用方法 題目:病理科免疫組織化學(xué)技術(shù)員培訓(xùn)及技術(shù)操作規(guī)范 市一—病理科—30 生效日期:2012年1月1日 版本號(hào)1.0 修改日期: 頁(yè)碼5/13

      (一)直接法 1.脫蠟和水化。

      2.3%過(guò)氧化氫或0.5%過(guò)氧化氫甲醇液,5min。

      3.TBS或PBS緩沖液洗滌。4.抗原修復(fù)。

      5.無(wú)關(guān)動(dòng)物正常血清(適當(dāng)稀釋)20-30min。

      6.甩去正常動(dòng)物血清,滴加適當(dāng)稀釋的辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記抗體,或增強(qiáng)的酶標(biāo)多聚物一步法(Enhanced Polymer One-step Staining,EPOS)抗體于切片上,20-60min。7.TBS或PBS緩沖液洗滌。

      8.0.04%-0.05%DAB(二氨基聯(lián)苯胺四鹽酸)H2O2液顯色5-10min,鏡下觀察控制顯色時(shí)間。底物配法:DAB 40-50mg;0.05M TBS(pH 7.6)l00ml;3% H2O2 100-200ml。9.緩沖液洗,流水洗滌。10.蘇木精淡染細(xì)胞核。11.脫水,透明,封片。(二)間接法

      l-5步同“直接法”。

      6.滴加第一抗體于切片上,濕盒內(nèi)溫育30-60min。7.TBS或PBS緩沖液洗滌。

      8.HRP標(biāo)記抗體或用增強(qiáng)的酶標(biāo)記多聚物(Enhanced Labeled一 Polymer Sys-tem,ELPS)抗體滴加切片上,濕盒內(nèi)溫育30min。9-14步同“直接法”的7-11步。(三)過(guò)氧化物酶一抗過(guò)氧化物酶(PAP)法 1-5步同直接法。

      6.適當(dāng)稀釋的第一抗體,濕盒內(nèi)溫育30-60min。7.緩沖液洗滌。

      8.第二抗體,濕盒內(nèi)溫育30min。9.緩沖液洗滌。

      10.滴加PAP,濕盒內(nèi)溫育30min。題目:病理科免疫組織化學(xué)技術(shù)員培訓(xùn)及技術(shù)操作規(guī)范 市一—病理科—30 生效日期:2012年1月1日 版本號(hào)1.0 修改日期: 頁(yè)碼6/13

      11-15步同“直接法”的7-11步。

      雙PAP法:上述操作進(jìn)行到第10步后,再重復(fù)7-10步1次,然后繼續(xù)11-15步。(四)葡萄球菌A蛋白(SPA)免疫酶法 1-5步同“直接法”。

      6.第一抗體,濕盒溫育30-60min。7.緩沖液洗滌。

      8.酶聯(lián)SPA,濕盒溫育30min。9.緩沖液洗滌。

      10-13步同“直接法”的8-11步。(五)ABC法和SABC法

      ABC法是卵白素-生物素-酶復(fù)合物(Avidin--Biotin--Peroxidase Complex)法的簡(jiǎn)稱。SABC法是鏈霉卵白素-生物素-酶復(fù)合物(Streptavidin一Biotin一peroxidase Complex)法的簡(jiǎn)稱。l-5步同“直接法”。

      6.第一抗體,濕盒溫育30-60min.7.緩沖液洗滌。

      8.生物素化的第二抗體,30min。9.緩沖液洗滌。

      10.ABC復(fù)合物或SABC復(fù)合物(皆于使用前新鮮配制),30-60min。11-15步同“直接法”7-11步。(六)LSAB(SP)法

      LSAB(SP)法,是標(biāo)記的鏈酶卵白素-生物素(Labeled Streptavidin--Biotin)法的簡(jiǎn)稱,操作步驟同“ABC法”,只是以LSAB復(fù)合物替代ABC復(fù)合物。(七)CSA法

      CSA法是催化信號(hào)放大(Catalyzed Signal Amplifieation)法的簡(jiǎn)稱。1-5步同“直接法”。6.第一抗體,15-30min。7.緩沖液洗滌。

      8.生物素標(biāo)記的第二抗體,15-30min。題目:病理科免疫組織化學(xué)技術(shù)員培訓(xùn)及技術(shù)操作規(guī)范 市一—病理科—30 生效日期:2012年1月1日 版本號(hào)1.0 修改日期: 頁(yè)碼7/13

      9.緩沖液洗滌。

      10.鏈霉卵白素-生物素-HRP復(fù)合物(用前新鮮配制),15min。11.緩沖液洗滌。12.放大液,15min。13.緩沖液洗滌。

      14.HRP-StrePtavidin,15min。15-19步同“直接法”的7-11步。(八)二步法Envision System Envision是通過(guò)一個(gè)多聚葡聚糖骨架聯(lián)接成一個(gè)多聚體。1-5步同“直接法”。6.第一抗體,30-60min。7.緩沖液洗滌。

      8.Envision TM,10-30min。9-13步同“直接法”的7-11步。(九)雙重免疫組織化學(xué)法.Sequential(1)鼠或兔抗體1,30-60min。

      (2)Envision TM,羊抗鼠/羊抗兔/HRP,30 min。(3)DAB(棕色),2-10 min。(4)鼠或兔抗體2,30-60 min。

      (5)Envision TM,羊抗鼠/羊抗兔/AP,30 min。(6)AP(紅色)。2.Simnl一Aaneous(1)混合鼠抗體1和兔抗體2,4℃,過(guò)夜或60 min。(2)Envision TM羊抗鼠/HRP和羊抗兔/AP。(3)AP染色。(4)HRP染色。

      上述方法除注明溫度者外,均可在室溫(20-25℃)環(huán)境中進(jìn)行;第一抗體溫育后,如有必要可置于4℃題目:病理科免疫組織化學(xué)技術(shù)員培訓(xùn)及技術(shù)操作規(guī)范 市一—病理科—30 生效日期:2012年1月1日 版本號(hào)1.0 修改日期: 頁(yè)碼8/13

      下過(guò)夜。

      三、免疫組織化學(xué)染色的常用抗體標(biāo)記物(一)上皮源性標(biāo)記物 1.一般性標(biāo)記物

      (1)CK(角蛋白)CK亞型:①CK5/6;②CK7;③CK8;④CK10/13;⑤CK18;⑥CK19;⑦CK20。(2)EMA(上皮細(xì)胞膜抗原)。

      2.特異性和(或)相對(duì)特異性上皮標(biāo)記物

      (1)CEA(癌胚抗原,標(biāo)記胃癌、大腸癌).(2)CA242(腫瘤相關(guān)粘液抗原,標(biāo)記胰腺癌、大腸癌)。

      (3)TG(甲狀腺球蛋白,標(biāo)記甲狀腺癌).(4)PSA(前列腺特異性抗原,標(biāo)記前列腺癌)。

      (5)PSAP(前列腺特異性酸性磷酸酶,標(biāo)記前列腺癌).(6)34βE12(標(biāo)記前列腺底細(xì)胞).(7)AFP(甲胎蛋白,標(biāo)記肝癌、內(nèi)胚竇癌).(8)Hepatoeyte(標(biāo)記肝細(xì)胞癌)。

      (9)β-HCG(β-絨毛膜促性腺激素,標(biāo)記胎盤(pán)滋養(yǎng)層細(xì)胞腫瘤、生殖細(xì)胞腫瘤).(10)CA125(卵巢癌).(二)間葉源性標(biāo)記物

      主要是Vimentin(vim,波形蛋白)等.(三)肌源性標(biāo)記物 1.Desmin(Des,結(jié)蛋白)2.Actin(肌動(dòng)蛋白).3.SMA(平滑肌肌動(dòng)蛋白).4.MSA(肌特異性肌動(dòng)蛋白).5.Myosin(肌球蛋白).6.Myoglobin(MG,肌紅蛋白)7.Myogen(肌漿蛋白).題目:病理科免疫組織化學(xué)技術(shù)員培訓(xùn)及技術(shù)操作規(guī)范 市一—病理科—30 生效日期:2012年1月1日 版本號(hào)1.0 修改日期: 頁(yè)碼9/13

      8.MyoDI(肌調(diào)節(jié)蛋白).(四)血管源性標(biāo)記物 FⅧRAg(第8因子相關(guān)抗原).CD31 CD34 UEA-l BNH9.(五)組織細(xì)胞源性標(biāo)記物 1.CD68/KP-l.2.Lysozyme(溶菌酶)。3.a1-AT(a1-抗胰蛋白酶).4.a1-ACT(al-抗胰糜蛋白酶)5.Mac387.淋巴造血組織源性標(biāo)記物 1.全淋巴細(xì)胞

      (1)CD45/LCA(白細(xì)胞共同抗原)。(2)TdT(末端脫氧核昔酸轉(zhuǎn)移酶)。(3)CD30/Ki-1。2.全B細(xì)胞(1)Igκ。(2)Igλ。(3)CD20/L26。(4)CD79a。

      (5)BLA36(B淋巴細(xì)胞抗原)。3.B細(xì)胞亞型(1)CDl0。

      (2)CD21(標(biāo)記濾泡性樹(shù)突狀細(xì)胞)。(3)CD23。題目:病理科免疫組織化學(xué)技術(shù)員培訓(xùn)及技術(shù)操作規(guī)范 市一—病理科—30 生效日期:2012年1月1日 版本號(hào)1.0 修改日期: 頁(yè)碼10/13

      (4)CD35(標(biāo)記濾泡性樹(shù)突狀細(xì)胞)。(5)CD38.4.全T細(xì)胞(1)CD3。(2)CD5。(3)CD43。(4)CD45RO/UCHL-1.5.T細(xì)胞亞型(1)CDla。(2)CD4。(3)CD8。6.NK細(xì)胞(1)CD56。(2)CD57/Leu-7。(3)CD16/Leu-11。7.粒細(xì)胞和單核巨噬細(xì)胞(1)CD11c/LeuM5。(2)CD15/LeuM5。(3)Lysozyme(溶菌酶)。(4)al-AT(al-抗胰蛋白酶)。(5)al-ACT(al-抗胰糜蛋白酶)。(6)CD68.(7)S-100蛋白.(8)Mac387。8.其他

      (1)EMA(上皮細(xì)胞膜抗原).(2)CD99(尤因肉瘤標(biāo)記物).(3)ALK-l(間變性淋巴瘤激酶)。題目:病理科免疫組織化學(xué)技術(shù)員培訓(xùn)及技術(shù)操作規(guī)范 市一—病理科—30 生效日期:2012年1月1日 版本號(hào)1.0 修改日期: 頁(yè)碼11/13

      (4)HLA-DR。(5)Bel-2。(6)Bel-6。(7)Bel-10。(8)Ki-67。

      (9)CyclinD1(周期素D1)。(10)CD25。

      (11)CD34。

      (七)神經(jīng)源性標(biāo)記物 1.S-100蛋白.2.NSE(神經(jīng)原特異性烯醇化酶).3.Leu7。

      4.Neurofilament(NF,神經(jīng)微絲蛋白)。5.GFAP(膠質(zhì)纖維酸性蛋白)

      (八)神經(jīng)內(nèi)分泌源性標(biāo)記物 1.激素標(biāo)記物(1)CA(兒茶酚胺)。(2)5-HT(5-經(jīng)色胺).(3)垂體激素。

      ①GH(促生長(zhǎng)素)。

      ②PRL(催乳素)。

      ③ACTH(促腎上腺皮質(zhì)激素).④TSH(促甲狀腺素).⑤FSH(促濾泡素).⑥LH(促黃體素)。(4)甲狀腺。

      ①TG(甲狀腺球蛋白)。

      ②CT(降鈣素)。題目:病理科免疫組織化學(xué)技術(shù)員培訓(xùn)及技術(shù)操作規(guī)范 市一—病理科—30 生效日期:2012年1月1日 版本號(hào)1.0 修改日期: 頁(yè)碼12/13

      (5)甲狀旁腺:PTH(甲狀旁腺素)。(6)胰島。

      ①I(mǎi)nsulin(胰島素)。

      ②Glueagon(胰高糖素)。

      ③VIP(舒血管腸肽).④PP(胰多肽).⑤Someitostatin(生長(zhǎng)抑素)。

      ⑥Gastrin(胃泌素)。2.非激素標(biāo)記物

      (1)NSE(神經(jīng)原特異性烯醇化酶).(2)CgA(嗜鉻素A).(3)SY(突觸素).3.激素受體

      (1)ER(雌激素受體).(2)AR(雄激素受體).(3)PR(孕激素受體).(九)細(xì)胞增殖標(biāo)記物 1.PCNA(增殖細(xì)胞核抗原).2.Ki-67.(十)黑色素標(biāo)記物 1.S-100蛋白.2.HMB45.3.Melanoma。

      (十一)癌基因和(或)抑癌基因 1.bel-2.2.c-erbB-2.3.p53 4.p16(多腫瘤抑制基因)。題目:病理科免疫組織化學(xué)技術(shù)員培訓(xùn)及技術(shù)操作規(guī)范 市一—病理科—30 生效日期:2012年1月1日 版本號(hào)1.0 修改日期: 頁(yè)碼13/13

      5.nm23。(十二)病原體標(biāo)記物

      1.Myoeobaeterium Bovis(分枝桿菌,抗卡介苗)。2.HBsAg(乙型肝炎病毒表面抗原).3.HBcAg(乙型肝炎病毒核心抗原).4.HPV(人乳頭狀瘤病毒)5.HTLV-1(人類(lèi)T細(xì)胞白血病病毒)。

      第五篇:病理科技術(shù)員崗位職責(zé)(共)

      1.在病理科主任領(lǐng)導(dǎo)和醫(yī)師指導(dǎo)下進(jìn)行工作。

      2.按操作常規(guī)進(jìn)行病理切片、染色,保證制片質(zhì)量。

      3.協(xié)助醫(yī)師進(jìn)行尸檢和科研工作,負(fù)責(zé)臨床病理討論會(huì)前的準(zhǔn)備工作。

      4.負(fù)責(zé)病理標(biāo)本、資料的保管和積累,做好登記、統(tǒng)計(jì)工作。

      5.負(fù)責(zé)藥品、器材、染料的請(qǐng)領(lǐng)和保管。

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