第一篇：Agilent1200 高效液相色譜儀工作站學(xué)習(xí)總結(jié)
Agilent1200 高效液相色譜儀工作站學(xué)習(xí)總結(jié)
開(kāi)首語(yǔ) 本人在2008年 本人在2008年1月8日至1月11日參加廣州 日至1 11日參加廣州 安捷倫科技有限公司的1200高效液相色譜儀 安捷倫科技有限公司的1200高效液相色譜儀 化學(xué)工作站的學(xué)習(xí)培訓(xùn)，幾天學(xué)習(xí)培訓(xùn)，使 我對(duì)1200液相色譜儀的硬件及軟件有了更全 我對(duì)1200液相色譜儀的硬件及軟件有了更全 面的了解和更多的認(rèn)識(shí)，現(xiàn)在做個(gè)總結(jié)向大 家介紹如下。
硬件篇 安捷倫高效液相色譜儀1200由幾部分 組成，脫氣機(jī)，泵、進(jìn)樣器、柱溫箱和檢測(cè)器。安捷倫1200HPLC系統(tǒng)采用積木式堆積結(jié)構(gòu)，方 便用戶按照自己的需要配置不同的的系統(tǒng)，整 個(gè)系統(tǒng)的流路自上而下設(shè)計(jì)、連接，減小了系 統(tǒng)的死體積和延遲體積。
Agilent 1200HPLC系統(tǒng)堆疊方式
脫氣機(jī) 安捷倫1200系列在線脫氣機(jī)有，微量真空 脫氣機(jī)G1379B、標(biāo)準(zhǔn)真空脫氣機(jī)G1322A。原理 基本相同，就是使用半透膜管路，允許氣體分 子通過(guò)，液體分子無(wú)法通過(guò)。A型用的是微滲 管，B型用的是濾膜。流路A型是左進(jìn)右出，而 B型為下進(jìn)上出，本科室使用的為A型G1322A。使用真空脫氣機(jī)可以降低噪聲，保證保留時(shí)間 的重現(xiàn)性，與He脫氣相比，更方便，更節(jié)省費(fèi) 用。
真空脫氣機(jī)脫氣原理
泵 安捷倫1200系列泵有： 單元泵：G1310A、四元泵：G1311A、二元泵：G1312A、二元泵SL型：G1212B。單獨(dú)一個(gè)泵腔 泵腔無(wú)法滿足溶劑傳輸系統(tǒng)的要 泵腔 求：連續(xù)性、穩(wěn)定性都不符合標(biāo)準(zhǔn)，現(xiàn)在新購(gòu) 儀器中已很少考慮。
單元泵，按溶劑的傳輸系統(tǒng)有兩種，一種是并 聯(lián)柱塞泵，另一種是串連柱塞泵。并聯(lián)柱塞泵 由于兩個(gè)泵的相位不同，可以補(bǔ)償流量脈沖，但由于單向閥的數(shù)量增多，所以容易造成泄漏，增加了維護(hù)使用的難度。串連柱塞泵左泵腔的 活塞運(yùn)動(dòng)速度為右泵腔活塞的2倍，因此，相同 時(shí)間內(nèi)，左泵提供的流量為右泵的兩倍，左泵 提供的溶劑一半直接供給系統(tǒng)，另一半被右泵 吸入，稍后供給液相系統(tǒng)，減少了單向閥的用 量，可以使用壓縮因子補(bǔ)償。
四元泵，其實(shí)就是比單元泵多了四元比例閥。由單元泵可以升級(jí)到四元泵，除了要加上四元 比例閥外，還要更換主板。需要注意的是，當(dāng) 使用鹽溶液和有機(jī)溶劑時(shí)，建議將鹽溶液接到 四元比例閥下面的通道上，有機(jī)溶劑接到上面 的通道上。如果經(jīng)常使用鹽溶液，建議定期用 水沖洗所有的通道以去除閥口上可能出現(xiàn)的鹽 沉淀。
四元泵的工作原理
二元泵，有兩個(gè)泵頭，特點(diǎn)是高壓混合，無(wú)需 脫氣；對(duì)于有強(qiáng)紫外吸收的流動(dòng)相，使用靜態(tài) 混合器可以降低基線噪聲；可以選擇溶劑切換 閥自動(dòng)進(jìn)行溶劑切換；對(duì)于高鹽流動(dòng)相，可選 擇泵頭密封墊清洗
裝置。所以脫氣機(jī)不是標(biāo)準(zhǔn) 配置，但增加真空脫氣機(jī)，流量范圍可以從 0.5～5ml/min擴(kuò)展至0.05～5ml/min；加入靜態(tài) 混合器，使流動(dòng)相混合更加均勻；如果配置
溶劑切換閥，則兩個(gè)泵頭可分別控制兩種溶劑，類似四元比例閥，但并不完全一樣，只能同時(shí) 混合兩種溶劑，不可實(shí)現(xiàn)四種溶劑的同時(shí)使用。二元泵為高壓泵，為后混合式，精度更高，而且由于為高壓混合，產(chǎn)生的氣泡也更少，所 以價(jià)格也比四元泵貴得多。四元泵為低壓泵，流速穩(wěn)定性相對(duì)較差，低壓混合容易產(chǎn)生氣泡，在實(shí)驗(yàn)中常會(huì)遇到這樣的問(wèn)題，多元
混合中出現(xiàn)流動(dòng)相不穩(wěn)定的現(xiàn)象，特別是流動(dòng) 相配比較低的如小于1%，其多元混合效果難以 達(dá)到我們的要求，造成保留時(shí)間漂移，甚至得 不到我們預(yù)期的色譜峰。明白四元泵的低壓混 合的道理，實(shí)際操作中我們發(fā)現(xiàn)問(wèn)題時(shí)，有助 于我們對(duì)原因的分析。必要時(shí)泵可以拆御，更換密封墊及濾芯。對(duì)容易出故障部位及處理方法，比如寶石
活塞桿是不能超聲的部件，泵頭密封墊要成對(duì) 更換，實(shí)驗(yàn)室中至少應(yīng)備有一付 號(hào)泵頭密封 室中至少應(yīng)備有一付4號(hào)泵頭密封 室中至少應(yīng)備有一付 墊，部件號(hào)為：5663-6589（用于反相色譜）； 部件號(hào)為：（用于反相色譜）； 0905-1420（用于正相色譜）。同時(shí)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)備（用于正相色譜）。同時(shí)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)備）。過(guò)濾芯，有5-10個(gè)PTFE過(guò)濾芯，以備日常所需。判斷方 個(gè) 過(guò)濾芯 以備日常所需。法為，打開(kāi)沖洗閥，以水為溶劑，法為，打開(kāi)沖洗閥，以水為溶劑，流速 5m
l/min，系統(tǒng)壓力大于10bar就應(yīng)更換過(guò)濾白，系統(tǒng)壓力大于 就應(yīng)更換過(guò)濾白 頭了。頭了。
二元泵的工作原理
進(jìn)樣器，安捷倫1200系列進(jìn)樣器有： 標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)進(jìn)樣器G1329A、高性能進(jìn)樣器G1367A、高性能進(jìn)樣器SL型G1367B、手動(dòng)進(jìn)樣器G1328B。自動(dòng)進(jìn)樣器的特殊功能，洗針功能可以把 樣品殘留降低到最小限度；多次吸液用于進(jìn)樣 量大于100μl的情況；程序進(jìn)樣可以非常靈活
地執(zhí)行用戶的進(jìn)樣程序要求，如多種樣品自動(dòng) 混合，自動(dòng)進(jìn)樣等高級(jí)功能的自由設(shè)置，但是，由于進(jìn)樣針的擴(kuò)散，所以進(jìn)樣量越小，受到擴(kuò) 散的影響也越大，所以自動(dòng)混合的準(zhǔn)確度還是 難以達(dá)到容量瓶的混合方式。這在做標(biāo)準(zhǔn)由線 時(shí)得注意的問(wèn)題，如為定量則不推薦小樣量的 混合方式。程序進(jìn)樣方式設(shè)置如下圖：
第一步：設(shè)置進(jìn)樣 第一步： 器
第二步： 第二步：使用進(jìn)樣器程 序（U）
第三步：更多信息（功能項(xiàng)）第三步：更多信息（功能項(xiàng)）對(duì)于手動(dòng)進(jìn)樣器，必須了解六通閥的工作原理，應(yīng)特別注意的是進(jìn)樣量少于定量環(huán)的50%或大 于定量環(huán)的3-5倍量是比較準(zhǔn)確的，不過(guò)，大家 用自動(dòng)進(jìn)樣器已經(jīng)習(xí)慣了，如果再用回手動(dòng)進(jìn) 樣器會(huì)不會(huì)有
些郁悶？會(huì)不會(huì)有一種坐慣了寶 馬又要回到踩單車的感覺(jué)？ 柱溫箱，使用安捷倫柱溫箱可以保證柱的穩(wěn) 定性，從而保證了保留時(shí)間的重現(xiàn)性。恒定的 柱溫特別是日溫差大的時(shí)候更為必要。
檢測(cè)器，安捷倫1200系列檢測(cè)器有，可 變波長(zhǎng)檢測(cè)器G1314B、二極管陣列檢測(cè)器 G1315B、二極管陣列檢測(cè)器SL型G1315C、示 差折光檢測(cè)器G1362A、熒光檢測(cè)器G1321A。本所用的是VWD的G1314B型，DAD型及FLD的就 不多說(shuō)了。對(duì)VWD型檢測(cè)器應(yīng)了解它的工作原 理，氘燈的使用維護(hù)及更換。需要注意的是，使用中不要頻繁的開(kāi)關(guān)氘燈，否則影響氘燈 的壽命。
可以利用診斷方式來(lái)檢測(cè)氘燈的能量，當(dāng)然，發(fā)現(xiàn)氘燈能量降低時(shí)不要馬上得出氘燈應(yīng)該更 換的結(jié)論，這也許是流通池臟或有氣泡造成的 能量降低，所以必須用診斷方式檢測(cè)流通池。診斷結(jié)果大于0.6說(shuō)明流通池很干凈，小于0.2則 說(shuō)明流通池該清洗了。更換氘燈后要在診斷日 志中填寫更換氘燈，這樣氘燈的使用時(shí)數(shù)便從 零開(kāi)始。
這里還有一點(diǎn)得注意的是流通池的后壓力非常 重要，一定要使用適當(dāng)出口連接管，出口管線 要使用專用廢液管為系統(tǒng)提供適當(dāng)?shù)暮髩?，?得私自將廢液管截短，以防氣泡進(jìn)入流通池。但如果壓力過(guò)高，流通池的石英窗片可能破裂。在這里我要說(shuō)的是，對(duì)安捷倫1200高效液 相色譜儀正確的操作方法和定期的維護(hù)保養(yǎng)的 是很重要的。
軟件篇 軟件部分，這就是1200液相色譜儀的化學(xué) 工作站。本所安捷倫1200高效液相色譜儀工作 站軟件版本為B.02.01，現(xiàn)在新的版本為B.03-01 的了，但這沒(méi)有太多的差別，新版本增加的只 是一部分我們很少用到的高級(jí)功能。
在這里我就和大家一起討論一些日常使用 中遇到的細(xì)節(jié)問(wèn)題，也許是我們使用過(guò)程中所 容易忽略也容易造成操作問(wèn)題的。軟件方面從數(shù)據(jù)采集，數(shù)據(jù)分析至報(bào)告格 式及打印。首先我們應(yīng)該了解，脫機(jī)區(qū)別于聯(lián)機(jī)是不 能對(duì)儀器進(jìn)行控制，不能運(yùn)行診斷。
工作站運(yùn)行界面：?jiǎn)吾樳M(jìn)樣 工作站運(yùn)行界面： 工作站運(yùn)行界面： 工作站運(yùn)行界面：多針進(jìn)樣
數(shù)據(jù)采集中主要是分析方法和運(yùn)行控制，這是我們操作中常用的。方法的的概念，方法 是一個(gè)參和集，它包括分析一個(gè)樣品所需要的 所有參數(shù)：數(shù)據(jù)采集參數(shù)、數(shù)據(jù)分析參數(shù)及命 令或宏指令等內(nèi)容。方法的組成：
1、方法信息；
2、儀器/采集參數(shù)；
3、數(shù)據(jù)分析參數(shù)；
4、運(yùn) 行時(shí)選項(xiàng)表。
我想對(duì)方法的編輯大家應(yīng)該都比較常用和熟悉 的了，在這里我選一些也許大家不太注意的說(shuō) 一說(shuō)吧。編輯方法儀器中，方法編輯選項(xiàng)里有 四個(gè)可選項(xiàng)，1、方法信息（M）；
2、儀器/采 集（I）；
3、數(shù)據(jù)分析（D）；
4、運(yùn)行時(shí)選項(xiàng) 表（R）。首先選擇所要編輯方法哪一部分
內(nèi)容。需要注意的是，不選擇某一部分內(nèi)容，并不意 味著方法中不含有該部分內(nèi)容，而僅僅
意味著本次對(duì)該部分內(nèi)容不進(jìn)行編輯，使用原 方法中設(shè)置的參數(shù)。還有，儀器參數(shù)設(shè)置—— 四元泵的參數(shù)設(shè)置。
1、停止時(shí)間：是儀器停 止采集數(shù)據(jù)的時(shí)間，并不是泵停止工作的時(shí)間。本例中工作站僅采集0～10分鐘的色譜圖，10 分鐘后，不再采集數(shù)據(jù)，但泵仍然繼續(xù)工作，向系統(tǒng)提供流動(dòng)相。使用自動(dòng)進(jìn)樣器
時(shí)一定要設(shè)置適當(dāng)?shù)耐Ｖ箷r(shí)間，以保證連續(xù)進(jìn) 樣的要求；
2、后運(yùn)行時(shí)間：是指一次運(yùn)行結(jié)束 后，到第二次進(jìn)樣前的等候時(shí)間，該時(shí)間用于 系統(tǒng)為第二次進(jìn)樣做好準(zhǔn)備。例如：將不感興 趣的雜質(zhì)沖洗出色譜柱，或等待系統(tǒng)中的流動(dòng) 相真正變成下一次進(jìn)樣的初始比例。做梯度洗 脫時(shí)，一定要設(shè)置該數(shù)值；
3、壓力限：
壓力的上下限也要合理設(shè)置。壓力上限不要高 于柱子能夠承受的壓力最大值，一般比正常分 析壓力高20bar左右；而壓力下限的數(shù)值一般比 正常分析壓力低20bar左右；
4、時(shí)間表：此處 可以編輯梯度洗脫程序，規(guī)定溶劑比例變化方 式。要注意程序時(shí)間與停止時(shí)間和后運(yùn)行時(shí)間 之間的協(xié)調(diào)關(guān)系。單元泵的參數(shù)設(shè)置界面與四 元泵相比少了溶劑選擇項(xiàng)，參數(shù)設(shè)置的要求
與四元泵參數(shù)設(shè)置要求相同，只是此時(shí)只有一 種溶劑可供選擇，也無(wú)法進(jìn)行梯度洗脫實(shí)驗(yàn)。二元泵的參數(shù)設(shè)置要求與四元泵參數(shù)設(shè)置
要求 相同，只是此時(shí)只有A、B兩種溶劑可供選擇。二元泵SL的參數(shù)設(shè)置可以在溶劑類型處的列表 中選擇本次使用的溶劑，并寫入對(duì)溶劑描述。
系統(tǒng)將根據(jù)你所選擇的溶劑自動(dòng)進(jìn)行溶劑壓縮 因子補(bǔ)償，保證流量、比例更加精確。當(dāng)選擇 “使用高級(jí)壓縮因子校正”選項(xiàng)時(shí)，將按照各 個(gè)方法中泵參數(shù)部分選擇的溶劑的對(duì)應(yīng)的壓縮 因子來(lái)控制泵，進(jìn)而保證流動(dòng)相的流量和比例 更加精確。有一個(gè)問(wèn)題，就是在數(shù)據(jù)采集完畢洗柱的時(shí)候 是不用開(kāi)燈的，但如果強(qiáng)行關(guān)燈則方法運(yùn)行時(shí)
會(huì)報(bào)錯(cuò)，會(huì)提示儀器沒(méi)有準(zhǔn)備就緒。怎么辦呢，在方法的運(yùn)行時(shí)選項(xiàng)表中有“運(yùn)行前命令/宏” 和“運(yùn)行后命令/宏”，我們可不可以在“運(yùn)行 前命令/宏”中設(shè)置把燈關(guān)了呢？當(dāng)然可以，而 且這是關(guān)燈后再洗柱方法中所必須的，但我在 前面說(shuō)過(guò)，先關(guān)燈，儀器會(huì)報(bào)錯(cuò)，方法無(wú)法運(yùn) 行。其實(shí)很簡(jiǎn)單，這是因?yàn)槲覀冇幸粋€(gè)細(xì)節(jié)
設(shè)置關(guān)燈后洗柱： 設(shè)置關(guān)燈后洗柱：第一步 設(shè)置關(guān)燈后洗柱： 設(shè)置關(guān)燈后洗柱：第二步 設(shè)置關(guān)燈后洗柱： 設(shè)置關(guān)燈后洗柱：第三步 設(shè)置關(guān)燈后洗柱： 設(shè)置關(guān)燈后洗柱：第四步
沒(méi)編好，在方法編輯過(guò)程中，進(jìn)入儀器參數(shù)設(shè) 置-檢測(cè)參數(shù)VWD設(shè)置，在右下角選“更多信 息”，點(diǎn)擊進(jìn)入后點(diǎn)選“特殊設(shè)置”，對(duì)“當(dāng)
燈關(guān)閉時(shí)可進(jìn)行分析（E）”進(jìn)行勾選，再在 “運(yùn)行前命令/宏”中輸入LAMP OFF，這樣，就 可以實(shí)現(xiàn)先關(guān)燈后再運(yùn)行洗柱的方法了。然后 在“運(yùn)行后命令/宏”中設(shè)置完成后關(guān)泵或關(guān)閉 閉 工作站，工作站，這就是隨你所欲啦。關(guān)泵為PUMP OFF，關(guān)閉 整個(gè)系統(tǒng)為STANDBY，這里要說(shuō)明的是PUMP OFF和STANDBY是有區(qū)別的，前者為泵的關(guān)閉，后者為停泵至待機(jī)狀態(tài)的。如果選BACK命令，則關(guān)閉工作站。這是關(guān)機(jī)方法中的一個(gè)小技巧，這當(dāng)然不 可用在分析方法上，分析方法中前后宏命令最 好慎用，特別是在VWD設(shè)置中更不可選特殊設(shè)置中勾選 “當(dāng)關(guān)燈時(shí)可進(jìn)行分析”，不然我們的實(shí)驗(yàn)操 作就沒(méi)有意義了。這是為什么，大家一想就知 道啦。還有，在運(yùn)行時(shí)選項(xiàng)表中要注意的問(wèn)題是，除 非有特殊要求，一般不建議選擇“保存GLP數(shù) 據(jù)”、“將方法和數(shù)據(jù)保存在一起”選項(xiàng)，GLP 數(shù)據(jù)是最原始的數(shù)據(jù)，不允許改動(dòng)。一般情況 下選擇這兩種選項(xiàng)只是浪費(fèi)硬盤空間而已。泵的設(shè)置方面，特別是梯度洗脫設(shè)置中建議先 預(yù)覽一下，看看是不是我們想要的突變或浙變 效果。數(shù)據(jù)分析中重點(diǎn)在于圖譜的處理，以及如何建 立校正表。有時(shí)我們得到的色譜圖并不很理想，那如何對(duì)它進(jìn)行合理積分以得到比較準(zhǔn)確的數(shù) 據(jù)這是個(gè)關(guān)鍵，這可以從積分事件中進(jìn)行設(shè)置。斜率靈敏度和峰寬的數(shù)值改動(dòng)要慎重，因?yàn)檫x 用不同數(shù)值，將影響色譜峰起止點(diǎn)的識(shí)別，得 到不同的峰面積，進(jìn)而影響到所得定量結(jié)果的 準(zhǔn)確程度。一定要保證處理同一系列數(shù)據(jù)（各 個(gè)標(biāo)樣數(shù)據(jù)和未知樣品數(shù)據(jù)）時(shí)，這兩個(gè)參數(shù)值是一致的。最小峰面積和最小峰 高的數(shù)值大小不會(huì)影響所得峰面積，僅僅做為 是否對(duì)該色譜峰進(jìn)行積分的標(biāo)準(zhǔn)。積分事件表 中的積分參數(shù)并不是孤立于方法的參數(shù)，它們 屬于方法的一部分內(nèi)容，所以保存積分參數(shù)時(shí) 應(yīng)先將積分事件保存到方法中，然后再保存方 法，積分參數(shù)就會(huì)被保存下來(lái)。如果自動(dòng)積分
和利用積分事件表設(shè)置積分參數(shù)都不能滿足用 戶積分的具體要求，那么退出積分事件表，即 可看到上圖所示的手動(dòng)積分工具欄，你可以使 用手動(dòng)積分的功能進(jìn)行積分條件優(yōu)化，手動(dòng)積 分不能被直接保存到方法中，也不建議保存手 動(dòng)積分參數(shù)。
校正，校正即是利用某個(gè)峰的峰高或峰面 積來(lái)確定其對(duì)應(yīng)組分的濃度或含量，當(dāng)檢測(cè)器 靈敏度針對(duì)不同的組分而變化時(shí)需要進(jìn)行校正，檢測(cè)器對(duì)同一組分不同含量響應(yīng)值發(fā)生變化時(shí) 需要進(jìn)行校正。校正分單級(jí)校正和多級(jí)校正。
一、單級(jí)校正：即單點(diǎn)校正，單點(diǎn)法。僅有一 個(gè)濃度的標(biāo)樣，無(wú)論進(jìn)樣幾針取平均值，只要濃度相同，都相當(dāng)于只做一次校正。單點(diǎn) 校正的兩種假設(shè)（1、響應(yīng)曲線必須是直線；
2、響應(yīng)曲線必須通過(guò)原點(diǎn)。）都不盡合理，使得 單級(jí)校正定量結(jié)果不準(zhǔn)確。但其具有簡(jiǎn)單、快 速的優(yōu)點(diǎn)，常適用于以下情況：
1、做簡(jiǎn)單的粗 定量；
2、當(dāng)未知樣品的濃度小于且接近于標(biāo)樣 濃度時(shí)，變量定量結(jié)果較準(zhǔn)確；
3、主要用于檢 出實(shí)驗(yàn)，即不需要準(zhǔn)確定量未知樣品含量，只關(guān)心未知樣品是否達(dá)標(biāo)。
二、多級(jí)校正。
1、對(duì)每一峰需做至少兩次校正；
2、可以補(bǔ)償檢測(cè) 器的非線性響應(yīng)；
3、響應(yīng)曲線可以不通過(guò)原點(diǎn)。多級(jí)校正糾正了單級(jí)校正的缺點(diǎn)，可以進(jìn)行準(zhǔn) 確定量。液相色譜里面常用的多級(jí)校正為五級(jí) 校正（即五點(diǎn)法）。
建立校正表，它的目的 目的是為了得出含量結(jié)果。目的 校正表建立是自動(dòng)計(jì)算中必須的，標(biāo)準(zhǔn)曲線制 定也必須在校正表建立上。校正表編好后，也 要作為方法的一部分存入方法。同時(shí)想用批處 理來(lái)處理數(shù)據(jù)時(shí)首先建立校正表。至于批處理 方面的應(yīng)用，這是高級(jí)培訓(xùn)班中的內(nèi)容，在基 礎(chǔ)培訓(xùn)班中只提及一下，所以我在這里也就不 不
多說(shuō)了。在此提醒注意的是：如果使用內(nèi)標(biāo)法 或內(nèi)標(biāo)百分比法定量，一定要指定內(nèi)標(biāo)峰，否 則化學(xué)工作站會(huì)警告內(nèi)標(biāo)化合物丟失，無(wú)法完 成定量。最后是報(bào)告處理，工作站提供了一系列的報(bào)告 格式，如簡(jiǎn)單報(bào)告，性能報(bào)告，完整報(bào)告等，其中又分為內(nèi)標(biāo)法，外標(biāo)法，百分比法等多
種報(bào)告格式。如果你對(duì)工作站上給出的格式不 滿意，可以自定義設(shè)置報(bào)告，不過(guò)，自定義報(bào) 告的設(shè)置是一個(gè)令人頭痛的問(wèn)題，要想得到一 個(gè)較滿意的自定義報(bào)告，需要你花不少的心神。安捷倫的色譜工作站中的報(bào)告功能確實(shí)到了人 人痛罵的程度。安捷倫公司難道真的這么沒(méi)文 化么？一點(diǎn)沒(méi)考慮中國(guó)國(guó)情還一味在中國(guó)
第二篇：高效液相色譜儀驗(yàn)證方案
高效液相色譜儀驗(yàn)證方案
目 錄1.設(shè)備基本情況1.1 概述1.2 基本情況3 職責(zé)3.1 驗(yàn)證委員會(huì)3.2 工程處3.3 QC4 驗(yàn)證內(nèi)容4.1 安裝確認(rèn)4.1.1 安裝確認(rèn)所需文件資料4.1.2 關(guān)鍵性儀表及消耗性備品4.1.3 評(píng)價(jià)儀器的安裝是否符合GMp及供應(yīng)商提議的要求4.1.4 起草標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程4.2 校正4.2.1 紫外檢測(cè)器4.2.1.1 固定波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器波長(zhǎng)示值誤差的校正4.2.1.2 可調(diào)波長(zhǎng)紫外—可見(jiàn)光檢測(cè)器波長(zhǎng)示值誤差和重復(fù)性誤差的檢定4.2.2 高壓泵4.3 運(yùn)行確認(rèn)4.3.1 紫外檢測(cè)器4.3.2 高壓泵4.4 性能確認(rèn)4.4.1 最小檢測(cè)濃度4.4.2 定性、定量測(cè)量的重復(fù)性4.5 擬訂再驗(yàn)證項(xiàng)目及周期4.6 驗(yàn)證結(jié)果評(píng)定與結(jié)論1.設(shè)備基本情況1.1 概述本高效液相色譜儀主要由一個(gè)二元泵、一個(gè)柱溫箱、一個(gè)可變紫外檢測(cè)器、一個(gè)帶有20μL定量環(huán)的進(jìn)樣器和一臺(tái)工作站組成，各部分由工作站軟件控制。本儀器主要用于分析原料和成品的有關(guān)物質(zhì)和含量。1.2 基本情況設(shè)備編號(hào)：設(shè)備名稱：高效液相色譜儀型 號(hào)：生產(chǎn)廠家： 供貨廠家： 安裝日期： 使用部門： 工 作 間： 保 管 員：2．驗(yàn)證目的 為確認(rèn)高效液相色譜儀測(cè)試數(shù)據(jù)準(zhǔn)確可靠，性能穩(wěn)定，特制訂本驗(yàn)證方案，對(duì)高效液相色譜儀進(jìn)行驗(yàn)證。驗(yàn)證過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本方案規(guī)定的內(nèi)容進(jìn)行，若因特殊原因確需變更時(shí)，應(yīng)填寫驗(yàn)證方案變更申請(qǐng)及批準(zhǔn)書，報(bào)驗(yàn)證委員會(huì)批準(zhǔn)。3 職責(zé)3.1 驗(yàn)證委員會(huì)1.負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案的審批。2.負(fù)責(zé)驗(yàn)證的協(xié)調(diào)工作，以保證本驗(yàn)證方案規(guī)定項(xiàng)目的順利實(shí)施。3.負(fù)責(zé)驗(yàn)證數(shù)據(jù)及結(jié)果的審核。4.負(fù)責(zé)驗(yàn)證報(bào)告的審批。5.負(fù)責(zé)再驗(yàn)證周期的確定。3.2 工程處1.負(fù)責(zé)設(shè)備的安裝、調(diào)試，并做好相應(yīng)的記錄。2.負(fù)責(zé)建立設(shè)備檔案。3.負(fù)責(zé)數(shù)字顯示器、記錄儀的校正。3.3質(zhì)量部1.負(fù)責(zé)驗(yàn)證用對(duì)照品、樣品及其它消耗性備品的準(zhǔn)備2.負(fù)責(zé)備品、備件的保存。3.負(fù)責(zé)設(shè)備儀器的操作。4.負(fù)責(zé)記錄各種測(cè)試結(jié)果。5.負(fù)責(zé)擬訂再驗(yàn)證項(xiàng)目及周期。6.負(fù)責(zé)收集各項(xiàng)驗(yàn)證、試驗(yàn)記錄，起草驗(yàn)證報(bào)告，報(bào)驗(yàn)證委員會(huì)。7.負(fù)責(zé)起草儀器使用、維護(hù)保養(yǎng)的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。4 驗(yàn)證內(nèi)容4.1 安裝確認(rèn)4.1.1 安裝確認(rèn)所需文件資料 工程處在設(shè)備開(kāi)箱驗(yàn)收后建立設(shè)備檔案，整理使用手冊(cè)等技術(shù)資料，歸檔保存。4.1.2 關(guān)鍵性儀表及消耗性備品 列出關(guān)鍵性儀表及消耗性備品的目錄，匯總統(tǒng)計(jì)，作為儀器的關(guān)鍵資料，用來(lái)與儀器以后的變動(dòng)做比較。4.1.3 評(píng)價(jià)儀器的安裝是否符合GMp及供應(yīng)商提議的要求 查閱設(shè)備采購(gòu)定單、操作手冊(cè)等，列出設(shè)備安裝、使用所需條件，包括溫度、濕度、通風(fēng)條件、電路等。檢查儀器安裝與使用所處的環(huán)境條件，是否符合上述要求。4.1.4 起草標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程--高效液相色譜儀標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程--高效液相色譜儀維護(hù)保養(yǎng)規(guī)程--高效液相色譜儀校正規(guī)程4.2 校正4.2.1 紫外檢測(cè)器4.2.1.1 固定波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器波長(zhǎng)示值誤差的校正通常用一塊濾光片獲得指定波長(zhǎng)的光者，可小心將濾光片取出，用高精度的分光光度計(jì)檢定。4.2.1.2 可調(diào)波長(zhǎng)紫外—可見(jiàn)光檢測(cè)器波長(zhǎng)示值誤差和重復(fù)性誤差的檢定取120℃干燥至恒重的基準(zhǔn)重鉻酸鉀約60mg，精密稱定，用0.005mol/l硫酸溶液溶解并稀釋至1000ml，搖勻，即得重鉻酸鉀的硫酸溶液將檢測(cè)器與記錄儀聯(lián)好，接通電源預(yù)熱穩(wěn)定后，用注射器注入重鉻酸鉀的硫酸溶液將吸收池充滿，在235nm、257nm、313nm、350nm波長(zhǎng)處檢定儀器的波長(zhǎng)示值誤差。將記錄紙速調(diào)到4mm/min，將檢測(cè)器波長(zhǎng)調(diào)到較規(guī)定波長(zhǎng)低5nm處（例如檢定257nm時(shí)，檢測(cè)器波長(zhǎng)先調(diào)到252nm，調(diào)記錄筆到中間位置，然后每15秒改變1nm，直至規(guī)定的波長(zhǎng)高5nm處，記錄各點(diǎn)的吸收度，分別找出最小與最大點(diǎn)的波長(zhǎng)與標(biāo)準(zhǔn)波長(zhǎng)之差即為波長(zhǎng)示值誤差。每點(diǎn)重復(fù)測(cè)3次，最小與最大值之差即為波長(zhǎng)重復(fù)性誤差。標(biāo) 準(zhǔn)：固定波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器波長(zhǎng)示值誤差應(yīng)<±2nm可調(diào)波長(zhǎng)紫外-可見(jiàn)檢測(cè)器波長(zhǎng)示值誤差應(yīng)<±2nm，重復(fù)性誤差<±1nm?；€漂移≤5×10-3（AU/h）；基線噪聲≤5×10-4（AU）最小檢測(cè)濃度（靜態(tài)）_ch 4×10-8g/ml（奈的甲醇溶液）。4.2.2 高壓泵校正泵流量設(shè)定值：將儀器的輸液系統(tǒng)、進(jìn)樣器、色譜柱和檢測(cè)器連接好，以甲醇為流動(dòng)相，按表1設(shè)定流量，待流速穩(wěn)定后，在流動(dòng)相排出口用事先清洗稱重過(guò)的容量瓶收集流動(dòng)相，同時(shí)用秒表計(jì)時(shí)，準(zhǔn)確收集至規(guī)定的時(shí)間，稱重，按下式計(jì)算SS。表1 SS的檢定
流量設(shè)定值（ml/min）0.51.02.0測(cè)量次數(shù)333收集流動(dòng)相時(shí)間（min）864允許誤差3%2%2%計(jì)算公式：Fm=(W2-W1)/ρ·t Ss =(Fm-Fs)/Fs ×100%其中：Fm為流量實(shí)測(cè)值(ml/min)，F(xiàn)s為流量設(shè)定值(ml/min)，W2為容量瓶加流動(dòng)相的重量(g)，W1為容量瓶的重量(g)，ρ為實(shí)驗(yàn)溫度下流動(dòng)相的密度(g/cm3)，t為收集流動(dòng)相的時(shí)間(min)4.3 運(yùn)行確認(rèn)進(jìn)行運(yùn)行確認(rèn)的目的是在不使用任何試樣的條件下，確認(rèn)該儀器能夠達(dá)到設(shè)計(jì)要求。4.3.1 紫外檢測(cè)器基線漂移和基線噪聲的測(cè)定。將儀器的各部分連接好，紫外檢測(cè)器波長(zhǎng)調(diào)到254nm，流動(dòng)相為100%甲醇，流速為1.0ml/min，紙速為5mm/min，吸收度范圍選擇最靈敏檔，開(kāi)機(jī)，待基線穩(wěn)定后，記錄基線30~40分鐘，計(jì)算基線漂移和噪聲?；€漂移應(yīng)≤5×10-3(AU/h),基線噪聲應(yīng)≤5×10-4(AU)。4.3.2 高壓泵流量穩(wěn)定性誤差SR的檢定。將儀器的輸液系統(tǒng)、進(jìn)樣器、色譜柱和檢測(cè)器連接好，以甲醇為流動(dòng)相，按表2 設(shè)定流量，待流速穩(wěn)定后，在流動(dòng)相排出口用事先清洗稱重過(guò)的容量瓶收集流動(dòng)相，同時(shí)用秒表計(jì)時(shí)，準(zhǔn)確收集至規(guī)定的時(shí)間，稱重，按下式計(jì)算SR。表2 SR 的檢定流量設(shè)定值（ml/min）0.51.02.0測(cè)量次數(shù)333收集流動(dòng)相時(shí)間（min）864允許誤差3%2%2%計(jì)算公式：SR =(Fmax-Fmin)/F×100% 其中：Fmax為同一組測(cè)量中流量最大值（ml/min），F(xiàn)min為同一組測(cè)量中流量最小值（ml/min），F(xiàn) 為同一組測(cè)量中算術(shù)平均值（ml/min）。4.4性能確認(rèn)4.4.1 最小檢測(cè)濃度在靜態(tài)條件下，用注射器注入4×10-8g/ml萘的甲醇溶液，樣品峰高應(yīng)大于或等于兩倍基線燥聲峰高，按下式計(jì)算最小檢測(cè)濃度。Ct=2·HN.C/H式中：Ct:最小檢測(cè)濃度（g/ml）HN:噪聲峰高（記錄儀格數(shù)或?qū)崪y(cè)高度cm）C:樣品濃度（g/ml）H:樣品峰高（記錄儀格數(shù)或?qū)崪y(cè)高度cm）4.4.2 定性、定量測(cè)量的重復(fù)性將1×10—4g/ml 萘的甲醇溶液，注入高效液相色譜儀中，檢測(cè)波長(zhǎng)254nm，流動(dòng)相為甲醇，流速1.0ml/min。重復(fù)進(jìn)樣8次，計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD），應(yīng)小于等于1.5%。4.5擬訂再驗(yàn)證項(xiàng)目及周期 質(zhì)量處負(fù)責(zé)根據(jù)設(shè)備儀器情況，確定再驗(yàn)證周期項(xiàng)目及周期，報(bào)驗(yàn)證委員會(huì)審核。4.6 驗(yàn)證結(jié)果評(píng)定與結(jié)論QC負(fù)責(zé)收集各項(xiàng)驗(yàn)證、試驗(yàn)結(jié)果記錄，起草驗(yàn)證報(bào)告，報(bào)驗(yàn)證委員會(huì)。驗(yàn)證委員會(huì)負(fù)責(zé)對(duì)驗(yàn)證結(jié)果進(jìn)行綜合評(píng)審，做出驗(yàn)證結(jié)論。附件1關(guān)鍵性儀表及消耗性備品情況
儀器名稱儀器編號(hào)型 號(hào)關(guān)鍵性儀表儀表名稱生產(chǎn)廠家型號(hào)校正證書編號(hào)保存處校正周期消耗性備品品名生產(chǎn)廠家型號(hào)數(shù)量單位保存處 確認(rèn)使用部門 年 月 日工程部 年 月 日驗(yàn)證委員會(huì) 年 月 日附件2 儀器安裝條件檢查記錄
設(shè)備名稱設(shè)備編號(hào)型 號(hào)安裝條件要求實(shí)際安裝條件溫度10～30℃濕度小于65%通風(fēng)水電氣汽其它條件
工作臺(tái)不受陽(yáng)光直射。室內(nèi)應(yīng)無(wú)腐蝕性氣體或其它影響測(cè)定的氣體干擾。周圍應(yīng)無(wú)影響測(cè)定的強(qiáng)電場(chǎng)、磁場(chǎng)和強(qiáng)烈震動(dòng)。確認(rèn)使用部門 年 月 日工程部 年 月 日驗(yàn)證委員會(huì) 年 月 日
附件3高效液相色譜儀校正記錄
設(shè)備名稱設(shè)備編號(hào)型 號(hào)溫度：濕度：甲醇密度：泵流量設(shè)定值誤差FstW2W1FmFm均值Ss標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定判定檢測(cè)者 復(fù)核人 年 月 日確認(rèn)使用部門 年 月 日工程部 年 月 日驗(yàn)證委員會(huì) 年 月 日附件4高效液相色譜儀運(yùn)行確認(rèn)記錄設(shè)備名稱設(shè)備編號(hào)型 號(hào)測(cè)試項(xiàng)目 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定實(shí)測(cè)結(jié)果結(jié)論 實(shí)測(cè)結(jié)果 結(jié)論 判定基線漂移≤5×10-3(AU/h)基線噪聲≤5×10-4(AU)流量穩(wěn)定性檢測(cè)者 復(fù)核者 年 月 日復(fù)核者 年 月 日 確認(rèn)使用部門 年 月 日工程部 年 月 日驗(yàn)證委員會(huì) 年 月 日附件5 高效液相色譜儀性能確認(rèn)記錄設(shè)備名稱設(shè)備編號(hào)型 號(hào)測(cè)試項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定測(cè)定結(jié)果判定最小檢測(cè)濃度＜4×10－8g/ml定性定量重復(fù)性RSD≤1.5%檢測(cè)者 復(fù)核者 年 月 日復(fù)核者 年 月 日確認(rèn)使用部門 年 月 日工程部 年 月 日驗(yàn)證委員會(huì) 年 月 日附件6 高效液相色譜儀再驗(yàn)證項(xiàng)目及周期設(shè)備編號(hào)： 設(shè)備名稱： 型號(hào)： 序號(hào)項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)驗(yàn)證方法周期1線路連接檢查線路、接地2附件檢查檢查操作記錄、操作手冊(cè)等3清潔清潔儀器外部4泵流量設(shè)定值和穩(wěn)定性基線漂移和基線噪聲最小檢測(cè)濃度定性定量重復(fù)性詳見(jiàn)驗(yàn)證方法起草： 工程部長(zhǎng)： 驗(yàn)證委員會(huì)： 年 月 日第三篇：LC1620A高效液相色譜儀 生產(chǎn)廠家
LC1620A高效液相色譜儀價(jià)格優(yōu)惠，專業(yè)生產(chǎn)銷售廠家：鄭州南北儀器設(shè)備有限公司（南北設(shè)備集團(tuán)），南北通過(guò)向客戶提供領(lǐng)先的技術(shù)、產(chǎn)品，更為優(yōu)異的質(zhì)量和服務(wù)，更高的性價(jià)比價(jià)值體來(lái)追求行業(yè)第一 可靠的性能.穩(wěn)定準(zhǔn)確的輸液能力，是高精度分析的可靠保證。
LC1620A高壓恒流泵采用了專利的端面凸輪設(shè)計(jì)，最大程度避免了加工和裝配誤差，結(jié)合經(jīng)過(guò)精密計(jì)算設(shè)計(jì)的凸輪曲線，從而獲得高精度流量。
豐富的功能紫外檢測(cè)器具有：
.豐富的功能
.波長(zhǎng)自動(dòng)校準(zhǔn)和修正功能
.波長(zhǎng)掃描功能
.波長(zhǎng)時(shí)間程序功能
.檢測(cè)池最大耐壓為15Mpa，便于串聯(lián)其他檢測(cè)器
自動(dòng)化的操作.功能強(qiáng)大的智能化反控工作站，所有系統(tǒng)設(shè)置均可在電腦上完成。配合準(zhǔn)確度和重復(fù)性高的自動(dòng)進(jìn)樣器，您只需在軟件上設(shè)置好條件，即能輕松完成整個(gè)分析過(guò)程。
更強(qiáng)的檢測(cè)能力.除了常規(guī)的紫外檢測(cè)器，LC1620A還可配置示差折光檢測(cè)器和蒸發(fā)光散射檢測(cè)器。無(wú)論您的實(shí)驗(yàn)室是從事制藥、質(zhì)量控制、食品安全、化學(xué)、環(huán)境等何種應(yīng)用領(lǐng)域，LC1620A都能為您提供適合的行之有效的檢測(cè)方案，幫助您分析各種各樣的化合物，全面滿足您分析檢測(cè)的需求。
多方位的細(xì)節(jié)設(shè)計(jì).流量監(jiān)控功能：對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)控，雙預(yù)警設(shè)計(jì)，當(dāng)達(dá)到設(shè)定值時(shí)，系統(tǒng)會(huì)報(bào)警提示或自動(dòng)停泵，有效保護(hù)HPLC系統(tǒng)。
.柱塞桿在線清洗功能： 高壓恒流泵采用雙密封圈設(shè)計(jì)，有效清洗緩沖鹽，減少關(guān)鍵部件磨損，延長(zhǎng)使用壽命。
第四篇：高效液相色譜儀檢測(cè)食肉中瘦肉精含量
液相色譜法測(cè)定肉類食品中瘦肉精殘留量
摘要瘦肉精是一種動(dòng)物用藥，將瘦肉精添加于飼料中，可以增加動(dòng)物的瘦肉量、減少飼料使用、使肉品提早上市、降低成本。近期，國(guó)內(nèi)雙匯火腿腸出現(xiàn)食品安全問(wèn)題所引發(fā)的“瘦肉精”事件令國(guó)人對(duì)食品安全頗為堪憂，因此 ,對(duì)動(dòng)物肉類或內(nèi)臟中鹽酸克倫特羅的監(jiān)督檢測(cè)顯得十分必要。為此南京科捷應(yīng)用LC-600液相色譜儀，探討肉類樣品中瘦肉精（鹽酸克倫特羅）的前處理方法 ,了解本市肉品中鹽酸克倫特羅的殘留情況。用水提取肉品中鹽酸克倫特羅殘留量 ,我們用固相萃取法對(duì)肉類樣品提取液進(jìn)行凈化和濃縮 ,可以有效去除干擾 ,簡(jiǎn)便 ,靈敏度高 ,適于在日常檢測(cè)工作中推廣使用。殘留監(jiān)測(cè)作為食品安全的重要課題。使之越來(lái)越廣泛地應(yīng)用于不同類型獸藥、農(nóng)藥及毒素類有毒有害物質(zhì)的檢測(cè)分析之中。關(guān)鍵詞瘦肉精鹽酸克倫特羅獸藥農(nóng)藥殘留高效液相色譜法 液相色譜儀 液相色譜 色譜儀 分析儀器
本方法的應(yīng)用范圍
本方法的檢測(cè)思路可供食品中農(nóng)藥、獸藥殘留檢測(cè)的借鑒。如獸藥殘留動(dòng)物源食品中硝基呋喃類殘留(呋喃唑酮、呋喃西林、呋喃妥因、呋馬唑酮)磺胺類藥物殘留(磺胺對(duì)甲氧嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺喹嚼啉)喹諾酮類(嚼喹酸、萘啶酸)氯羥吡啶、莫能菌素和鹽霉素、乙氧酰胺苯甲酯、氯霉素、伊維菌素、克倫特羅、尼卡巴嗪、土霉素、四環(huán)素、金霉素(國(guó)標(biāo)GBT14931．1)阿莫西林、盤尼西林及喹乙醇等。農(nóng)藥殘留氨基甲酸酯農(nóng)藥、有機(jī)磷農(nóng)藥、百草枯、殺草快、草甘膦及氨基膦酸、苯并瞇唑類殺菌劑、利谷隆、滅草隆及敵草隆、三嗪類多種農(nóng)藥的檢測(cè)。
2.實(shí)驗(yàn)步驟
(1)儀器和設(shè)備
①LC-600高效液相色譜儀整套配置如下
P600寶石恒流泵1臺(tái)UV600紫外檢測(cè)器1臺(tái)
7725i六通進(jìn)樣閥1只WS600色譜工作站1套
②勻漿機(jī) ③旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 ④電子天平：0.01mg ⑤紫外分光光度計(jì)
⑥離心機(jī) ⑦固相萃取儀 HGC-8 ⑧固相小柱
（2）試劑
①鹽酸克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)品 ②乙醚；分析純 ③正己烷：分析純 ④甲醇：色譜純
⑤鹽酸克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)液 ⑥lmol／I。鹽酸溶液 ⑦0．05mol／L乙酸緩沖液
⑧0．3mol／L乙酸緩沖液 ⑨lmol／LNaOH溶液 ’
⑩甲醇液：甲醇—重蒸水(75+25)
(2)儀器和設(shè)備
②勻漿機(jī) ③旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 ④電子天平：0.01mg ⑤紫外分光光度計(jì)
⑥離心機(jī) ⑦固相萃取儀 HGC-8 ⑧固相小柱
(3)測(cè)定步驟
①提取和凈化 取組織樣品10g，加入30ml lmol／L鹽酸溶液勻漿，超聲波振蕩3h，5000r／mln的速度離心10min，—上清液用lmo]／LNaOH溶液滴至堿性，乙醚或正已烷抽三3次，抽提液在水浴鍋上蒸發(fā)至5ml后上Silioa小柱，以除去大部分雜質(zhì)，洗脫液上Alu—mina
A小柱，將待測(cè)成分吸附在小柱上，用0．05mol幾乙酸緩沖液(pH7．0)洗滌小柱3次，o．3mol／L乙酸緩沖液洗脫待測(cè)成分，冷凍干燥，用0．5ml甲醇液溶解后取100uL供高效液相色譜儀檢測(cè)。
②測(cè)定
a．色譜條件
色譜柱：C18柱，250mmX4.6mm
流動(dòng)相：甲醇—水(75+25)
流速：0．65ml／mill
檢測(cè)波長(zhǎng)：243nm
進(jìn)樣量：100uL
b．色譜測(cè)定 分析樣品按上述儀器操作條件供高效液相色譜儀分析。
③空白試驗(yàn) 除不加試樣外，按上述測(cè)定步驟進(jìn)行。
(4)檢測(cè)限和回收率
本方法在豬的肌肉和肝臟組織中的檢測(cè)限為0．001ug/g’回收率范圍為80％±20％
傳真025-83738955銷售熱線025-83738955
技術(shù)咨詢025-84372573售后服務(wù)025-84372572
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第五篇：Agilent 7890A 培訓(xùn)資料總結(jié)
Agilent 7890A 培訓(xùn)資料總結(jié)
1.分析方法的建立
首先在程序或電腦桌面上選擇“聯(lián)機(jī)1”→在聯(lián)機(jī)窗口菜單欄里點(diǎn)擊“方法”選擇“新建方法”，再點(diǎn)擊“方法”選擇“編輯完整方法” →進(jìn)入“編輯方法”窗口【該窗口里把“數(shù)據(jù)分析”不要勾選，其他勾選】→“確定” →“方法信息”窗口【在下面的注釋里可以編輯，如寫入創(chuàng)建方法的原因或檢測(cè)的注意事項(xiàng)等】→“確定” →“選擇進(jìn)樣源”【根據(jù)需要選擇手動(dòng)或GC進(jìn)樣器，如果需要手動(dòng)進(jìn)樣時(shí)，該窗口要選擇“手動(dòng)”一般默認(rèn)選擇為“GC進(jìn)樣器”。若進(jìn)樣口有兩個(gè)的話，要選擇“前”或“后”】 →“確定” →“設(shè)置方法”窗口【該窗口上部為設(shè)定方法的程序升溫的曲線。需要在“自動(dòng)進(jìn)樣器”、“進(jìn)樣口”、“色譜柱”、“柱箱”、“檢測(cè)器”、“信號(hào)”、“配置”等幾個(gè)窗口里面編輯我們需要的條件】→在“設(shè)置方法”窗口里點(diǎn)擊“自動(dòng)進(jìn)樣器”【子窗口“前進(jìn)樣器”里輸入進(jìn)樣量、清洗方法、樣品前處理的方法等。該窗口“樣品盤/其他”窗口里“樣品重疊”不要勾選】→“進(jìn)樣口”【首先要選擇進(jìn)樣口的位置“SSL-前”或“SSL-后”，下面窗口里“分流不分流進(jìn)樣口”里“加熱器”、“壓力”、“隔墊吹掃流量”、“載氣節(jié)省”勾選，“模式”里面選擇“分流”，輸入需要的分流比】→“色譜柱”【“控制模式”里勾選“打開(kāi)”，其中選擇“壓力”為恒壓模式，“流速”為恒流模式，我們一般選擇“流速”。如果更換了色譜柱 的型號(hào)后要在該窗口內(nèi)點(diǎn)擊“更改色譜柱”填寫完整的新色譜柱信息?！俊爸洹贝翱凇驹摯翱诶锕催x“柱箱溫度為開(kāi)”，其最高柱箱溫度設(shè)定值要小于或等于色譜柱正常使用的最高溫度，“覆蓋色譜柱最大值”不要勾選】，該窗口右側(cè)部分設(shè)定升溫程序（其中“后運(yùn)行溫度”可以認(rèn)為是老化程序，一般略高于方法的最終溫度）?！皺z測(cè)器”【該窗口首先要選擇要編輯的進(jìn)樣口，勾選“加熱器”、“H2流量”、“空氣流量”、“尾吹流量”、“火焰”，其中H2流量和空氣流量比為1：10】→“信號(hào)”【“信號(hào)源”欄里下拉菜單里選擇正確的信號(hào)源，如選擇“前部信號(hào)FID”，“數(shù)據(jù)采集頻率/最小峰寬”下拉菜單里選擇合適的檔位，我們一般選擇“20HZ/.01min”，勾選“保存”】 →“配置”【子菜單“其他”里勾選“低速風(fēng)扇”，“模塊”里“SS進(jìn)樣口”選擇N2，“尾吹氣”里選擇N2，“點(diǎn)火補(bǔ)償”為2.0-6.0PA，“自動(dòng)進(jìn)樣器”里輸入進(jìn)樣針的量程】→在窗口的空白處點(diǎn)擊右鍵，選擇“將方法下載的GC” →“確定” →“確定” →菜單里選擇“方法” →“方法另存為”選擇方法保存路徑及命名方法→“確定”。以上為新分析方法的建立的過(guò)程，若電腦上已經(jīng)有建立好的方法，直接點(diǎn)擊菜單里“方法”選擇“調(diào)用方法”即可。2.序列的生成
序列一般用于產(chǎn)品的分析，對(duì)于單個(gè)樣品的分析不建議用序列。菜單里選擇“序列” →“新建序列模板” →“序列” →“序列參數(shù)”【選擇數(shù)據(jù)保存的路徑、子目錄、勾選“前綴/計(jì)數(shù)器”編輯 “前綴”和“后綴”】 →“序列” →“序列表”【“樣品瓶位置”為101到116，其他錄入值無(wú)效，“樣品名稱”里錄入樣品名和批號(hào)，“方法名稱”可以根據(jù)路徑尋找，編寫進(jìn)樣次數(shù)，“樣品類型”選擇“樣品”】 →“確定” →“序列” →“序列模板另存為”【選擇路徑和名稱】→“確定” →等儀器穩(wěn)定后菜單里點(diǎn)擊“運(yùn)行控制” →“運(yùn)行序列”。3.儀器自算RSD的設(shè)定步驟
打開(kāi)脫機(jī)程序，首先先對(duì)一組要計(jì)算RSD的譜圖進(jìn)行積分，從一組譜圖里面任意調(diào)用一個(gè)，同時(shí)選擇分析方法為“使用序列方法”，菜單欄里點(diǎn)擊“校正” →“新建校正表” →進(jìn)入校正窗口【該窗口內(nèi)選擇“自動(dòng)設(shè)定”，“缺省含量”設(shè)定為“1”】→“確定”【如果前面已經(jīng)建立過(guò)校正表，會(huì)跳出一個(gè)窗口詢問(wèn)是否覆蓋現(xiàn)存的校正表，選“是”】 →在譜圖里面選擇要校正的峰，并在下面“校正表”窗口里輸入該峰的名字→ 點(diǎn)擊“校正表”窗口里面的“確定” →“是” →“方法” →“保存序列方法” →“序列” →“序列參數(shù)”【在序列參數(shù)窗口里選擇“序列輸出”，該窗口下“序列總結(jié)”里勾選“打印序列總結(jié)報(bào)告”和“輸出到文件”，其中可以重新命名后綴為TXT的文件名，若想設(shè)定好后打印報(bào)告可以勾選“輸出到打印機(jī)”,另外，該窗口內(nèi)點(diǎn)擊“設(shè)置”，在“序列總結(jié)參數(shù)”里面勾選7,8,9項(xiàng)，然后點(diǎn)擊“確定”】 →“確定” →“序列” →“部分序列”【在該窗口里面選擇要進(jìn)行運(yùn)算的譜圖，然后點(diǎn)擊“運(yùn)行序列”】 →在上述的這個(gè)序列的文件夾里找到一個(gè) 名字為GLPrpt.txt的文本，打開(kāi)即可看到我們需要 RSD。其中GLPrpt.txt為默認(rèn)的名字，如果上述曾經(jīng)更改過(guò)該.TXT名字，要打開(kāi)改好的名字的文本進(jìn)行查看。4.外標(biāo)定量法
首先調(diào)用譜圖，對(duì)所有標(biāo)樣和樣品的譜圖進(jìn)行積分。在菜單里點(diǎn)擊“校正表” →“校正設(shè)置…”【其中“參考峰”為相對(duì)保留時(shí)間的偏移值，特別是液相可能保留時(shí)間差異較大，這時(shí)就要調(diào)整該選項(xiàng)值，“缺省校正曲線”里面“類型”選擇“線型”】 →“確定”→“校正表” →“新建校正表”【在彈出的“校正”窗口內(nèi)選擇“自動(dòng)設(shè)定”，“級(jí)別”為1，“缺省含量”為0】 →“確定”【如果前面已建立過(guò)校正表，會(huì)彈出一窗口，點(diǎn)擊“是”】 →譜圖下面有個(gè)“校正表”窗口【選擇代表標(biāo)樣的峰，在其相對(duì)保留時(shí)間對(duì)應(yīng)行里輸入化合物名稱和含量數(shù)值，然后點(diǎn)擊“確定”】 →在提示“是否刪除含量為0的行”，根據(jù)需要選擇“是” →如果是多點(diǎn)校正，接著打開(kāi)第二針標(biāo)樣的譜圖→“校正” →“添加級(jí)別”【“級(jí)別”里輸入2，“缺省含量”為0】→“確定” →同樣在譜圖下面的“校正表”窗口內(nèi)輸入化合物名稱和含量數(shù)值→“確定”【依次可以加入第3、第4個(gè)等更多個(gè)點(diǎn)的校正】→“報(bào)告” →“設(shè)定報(bào)告”【在“設(shè)定報(bào)告”窗口內(nèi)，子窗口“定量結(jié)果”里“定量”選項(xiàng)里選擇“外標(biāo)法”】 →“確定” →調(diào)用要定量的樣品譜圖，點(diǎn)擊預(yù)覽或打印可以看到樣品的含量?！咀⒁猓何覀兺ǔＳ玫降氖敲娣e百分比，而不是樣品中標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的含量，要完成面積百 分比，需要設(shè)置如下，在建立好校正曲線后，打開(kāi)樣品的譜圖點(diǎn)擊“報(bào)告” →“設(shè)定報(bào)告”在該窗口內(nèi)“定量”選項(xiàng)里選擇“面積百分比”，子窗口“計(jì)算因子”，“使用樣品數(shù)據(jù)”選項(xiàng)里選擇“來(lái)自下面的樣品缺省值”，“確定”即可】。該外標(biāo)法的設(shè)置Agilent7890（氣相）與Agilent1200（液相）基本一樣。5.內(nèi)標(biāo)定量法
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