第一篇：禽流感疫苗研究進(jìn)展

禽流感疫苗研究進(jìn)展

摘要 對禽流感的預(yù)防，必須在采取嚴(yán)格的生物安全措施的同時(shí)，加強(qiáng)必要的免疫措施。對不同類型禽流感疫苗的研究現(xiàn)狀、優(yōu)越性與局限性進(jìn)行了綜述。

關(guān)鍵詞 禽流感；疫苗；研究進(jìn)展

最近，亞洲一些國家不斷暴發(fā)的禽流感（Avian influenza，AI）事件引起了人們對全球一系列動物和公眾健康問題的極大關(guān)注，最近的聯(lián)合國糧農(nóng)組織（FAO）羅馬提交會議指出[1]，當(dāng)面臨AI大流行威脅時(shí)，采取大規(guī)模撲殺感染動物的措施會喪失很大一部分食物來源，使地方養(yǎng)禽業(yè)遭受嚴(yán)重打擊，顯得不太合理。對禽流感的預(yù)防，必須努力集中在采取嚴(yán)格的生物安全措施的同時(shí)，加強(qiáng)必要的免疫措施。免疫能減輕臨床癥狀，降低死亡率，減少病毒的擴(kuò)散和提高群體對感染的抵抗力，從而控制禽流感病毒（Avian influenza vinus，AIV）的廣泛傳播[2]。然而，如果疫苗的使用和管理不當(dāng)，不僅達(dá)不到預(yù)期的效果，還會污染環(huán)境，威脅公眾健康。因此，研制安全、高效的AIV疫苗是專家們?yōu)橹恍概Φ哪繕?biāo)。

理想的疫苗應(yīng)具有高的生物保護(hù)容量，同時(shí)消除環(huán)境污染和易感動物感染的可能性?？偟膩碚f，對于AIV疫苗的發(fā)展，以下幾種設(shè)計(jì)思路均已被采用或嘗試。

1全病毒滅活疫苗

由于AIV基因組的抗原漂移，AIV疫苗僅能提供70%的保護(hù)力。針對這種特點(diǎn)，AIV滅活疫苗通常制備成針對幾種不同亞型AIV的多價(jià)疫苗，己證明1種滅活疫苗可以至少包括4種不同的AIV亞型。同只含單一亞型的疫苗比，多價(jià)疫苗并沒有減弱對同一種HA亞型AIV攻擊的有效保護(hù)[3]，而且各亞型抗原之間不產(chǎn)生免疫干擾。AIV滅活疫苗能使免疫雞群在感染AIV野毒時(shí)有效地減輕損失，并顯著減少可能存在于雞群和環(huán)境中的病毒數(shù)量，縮短其存活時(shí)間，是AI防治的主動措施、關(guān)鍵環(huán)節(jié)和最后防線。而且滅活疫苗具有制備工藝簡單、免疫效果確實(shí)、免疫持續(xù)期長等特點(diǎn)，許多國家已將其作為商品化的AIV疫苗應(yīng)用于家禽中。我國己研制成功不同亞型的AIV疫苗，且證明具有良好的免疫保護(hù)作用。但滅活苗本身存在一些缺陷[4]，主要是：影響疫情監(jiān)測；存在散播病毒的風(fēng)險(xiǎn)；免疫劑量較大，制備成本高。其最突出的缺點(diǎn)是不能誘導(dǎo)產(chǎn)生有效的粘膜免疫抗體和細(xì)胞免疫應(yīng)答，因而無法有效地抑制呼吸道中AIV的復(fù)制。近年來，人們試圖從技術(shù)上突破此缺點(diǎn)，篩選并利用同亞型弱毒疫苗株代替高致病性毒株制備滅活苗，是滅活苗研制中的努力方向之一。例如用2種不同的病毒同時(shí)感染雞胚可導(dǎo)致片段間的重排而有可能產(chǎn)生所期望的疫苗株，這些疫苗種子株獲得了抗原相關(guān)毒株相應(yīng)的HA和NA基因，和A/Puerto Rico/8/34（H1N1）中的6個(gè)基因片段[5]。這些PR/8/34的片段賦予病毒弱毒所以能在雞胚中迅速生長，適合作為滅活疫苗的生產(chǎn)。

2基因工程亞單位疫苗

亞單位疫苗是提取AIV具有免疫原性的抗原蛋白，加入佐劑而制成。這種疫苗安全性好，能刺激機(jī)體產(chǎn)生足夠的免疫力，只是抗體持續(xù)時(shí)間短，且成本高。謝快樂等曾用臺灣AIV分離株（H8N4）的HA和NP制備了復(fù)合亞單位疫苗，同時(shí)制備了滅活的油佐劑疫苗。當(dāng)以疫苗誘生的HI抗體作為評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，發(fā)現(xiàn)2種疫苗的差別不明顯，只是在加強(qiáng)免疫后，亞單位疫苗的HI抗體水平的升高比油佐劑疫苗明顯[6]。隨著基因工程技術(shù)的不斷發(fā)展，將免疫原性基因?qū)氡磉_(dá)載體，經(jīng)誘導(dǎo)可獲得大量表達(dá)的免疫原性蛋白，提取所表達(dá)的特定多肽，加入佐劑即制成基因工程亞單位疫苗，這樣可大大降低疫苗的成本。Kodihalli等研制了火雞H5N2病毒NP/HA和ISCOM的復(fù)合亞單位疫苗，用其免疫火雞，21d可產(chǎn)生較高的抗體滴度，并且T、B淋巴細(xì)胞被激活，可以對同源和異源（H6N1）亞型病毒的攻擊產(chǎn)生保護(hù)作用，在攻毒后3d，可清除火雞肺部和泄殖腔的病毒[7]。另外，將AIV的基因插入桿狀病毒表達(dá)載體，利用重組病毒在昆蟲細(xì)胞中表達(dá)的AIV蛋白來制備AIV的亞單位疫苗也已研究成功。Crawford等利用桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)生產(chǎn)H5、H7亞型AIV的重組HA佐劑疫苗，免疫3周齡白色Rock雞，用同亞型HPAIV攻擊，結(jié)果重組HA佐劑疫苗組所有的雞只均不發(fā)病，而未免疫組雞只全部死亡，且經(jīng)H5亞型病毒的重組亞單位疫苗免疫過的雞攻毒后都不排毒[8]。

基因工程亞單位疫苗產(chǎn)生的抗體不針對病毒的內(nèi)部蛋白，因此不會干擾AIV的血清學(xué)調(diào)查，而且其不存在毒力返強(qiáng)、散毒和環(huán)境污染的問題，是安全性很好的疫苗。重組桿狀病毒表達(dá)的HA亞單位疫苗在禽類表現(xiàn)出良好的免疫原性，免疫后只誘導(dǎo)HA特異性抗體應(yīng)答，不影響疫情監(jiān)測，顯示出了一定的應(yīng)用前景。

3重組活載體疫苗

雞痘病毒作為禽用疫苗病毒載體，具有外源基因容量大、可對表達(dá)的外源蛋白進(jìn)行正確加工修飾、嚴(yán)格的宿主特異性和生物安全性等優(yōu)點(diǎn)[9-11]，利用對禽類致病性很弱的痘苗病毒或禽痘病毒作載體，構(gòu)建含有免疫原性基因的重組病毒，用此重組病毒作疫苗，可在動物體內(nèi)復(fù)制，并不斷地表達(dá)出免疫原性蛋白，從而誘導(dǎo)禽類產(chǎn)生針對目標(biāo)病原的免疫保護(hù)力。Webster（1995）和Swaynes（1997）先后構(gòu)建了含A/Ty/Ire/1378/83（H5N8）HA基因的禽痘病毒重組疫苗，用其免疫仔雞，用在墨西哥分離的致死性強(qiáng)毒H5N2攻擊，試驗(yàn)結(jié)果證明該苗可對H5N2提供0%～100%的保護(hù)[12]；冀德君、劉紅旗等應(yīng)用表達(dá)H9亞型 AIV HA的重組雞痘病毒疫苗及其傳代后第20、30代疫苗免疫5日齡無特定病原（SPF）雞群，攻毒后第5天各免疫組排毒的雞數(shù)與對照組相比顯著減少[13]；程堅(jiān)等用表達(dá)H9亞型AIV HA基因的重組雞痘病毒在7日齡SPF雞及含抗FPV母源抗體的商品雞上進(jìn)行的免疫效力試驗(yàn)亦表明，重組雞痘疫苗能顯著抑制靜脈攻毒后免疫雞從泄殖腔的排毒，效果與AIV全病毒滅活苗相當(dāng)[14]。賈立軍用構(gòu)建的表達(dá)H5N1 HA的重組雞痘疫苗免疫SPF雞和無母源抗體的商品雞，免疫雞可抵抗H5N1亞型HPAIV的致死性攻擊，誘導(dǎo)95%～100%的免疫保護(hù)[15]。陳平用構(gòu)建的高效表達(dá)H9亞型AIV HA基因的重組雞痘病毒頸部皮下免疫1日齡SPF雞，攻毒后試驗(yàn)結(jié)果表明，rFPV-Ps-HA明顯抑制了病毒的排出[16]。以上試驗(yàn)均表明，攜帶AIV HA基因的重組雞痘疫苗具有良好的效果。

同滅活苗相比，攜帶HA基因的重組活載體疫苗不僅可提供相當(dāng)?shù)谋Ｗo(hù)效果，而且具有一些獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn)：安全性高；可通過刺種和皮下注射接種途徑進(jìn)行免疫，使用方便；免疫應(yīng)激??；用量少，不需添加佐劑，成本大大降低；而且抗體持續(xù)時(shí)間長，效果好，用其免疫家禽，既可刺激宿主產(chǎn)生體液免疫，又能刺激宿主產(chǎn)生細(xì)胞免疫[17]。基因重組的雞痘疫苗的最大優(yōu)點(diǎn)是不干擾血清學(xué)調(diào)查，因此該重組疫苗適用于監(jiān)測野毒感染[4]。

4DNA疫苗

Ulmer等[18]報(bào)道了小鼠肌肉注射含有編碼甲型流感病毒核蛋白（NP）的重組質(zhì)粒后，不僅產(chǎn)生抗NP的特異性IgG抗體，而且誘導(dǎo)CTL反應(yīng)，可有效地保護(hù)小鼠抗不同亞型分離時(shí)間相隔34a的流感病毒的攻擊。Pertmer發(fā)現(xiàn)，流感病毒NP基因的核酸疫苗激活機(jī)體的免疫反應(yīng)不受母源抗體的干擾[19]。同樣，在有母源抗體存在的情況下，HA和NP基因均能有效激活細(xì)胞免疫應(yīng)答反應(yīng)。我國研制的H7亞型HA基因DNA疫苗，在極小的使用劑量下即可成功誘導(dǎo)免疫保護(hù)反應(yīng)，并有效阻斷同源MPAIV在機(jī)體內(nèi)的感染和排毒 [20]。大量的動物試驗(yàn)都說明在合適的條件下，DNA接種后既能產(chǎn)生細(xì)胞免疫又能產(chǎn)生體液免疫[21-24]，于是，DNA疫苗技術(shù)應(yīng)運(yùn)而生，并逐漸顯示出它作為第3代疫苗的優(yōu)越性。與傳統(tǒng)疫苗相比DNA疫苗有許多優(yōu)點(diǎn)：能長時(shí)間表達(dá)抗原；具有與天然抗原相同的構(gòu)象和免疫原性，可同時(shí)激發(fā)機(jī)體產(chǎn)生細(xì)胞免疫、體液免疫和粘膜免疫應(yīng)答，而且不受母源抗體的干擾；結(jié)構(gòu)簡單，制備方便；穩(wěn)定性好，易于保存和運(yùn)輸；能夠克服由于免疫系統(tǒng)發(fā)育不完善而導(dǎo)致的免疫力低下的缺陷；可用于制備多價(jià)疫苗或聯(lián)苗。

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目前，對于DNA疫苗存在著安全方面的考慮：質(zhì)粒DNA低水平整合到宿主基因組的潛在危險(xiǎn)性；DNA疫苗載體攜帶的抗生素基因可能導(dǎo)致的生物學(xué)后果；產(chǎn)生針對雙鏈DNA的抗體；引起免疫耐受。針對上述四種潛在的危害性，美國FDA、WHO及EU都對DNA疫苗的研制制定了一些指導(dǎo)性規(guī)定，為DNA疫苗的研究、生產(chǎn)及應(yīng)用指明了方向。由于DNA疫苗代價(jià)相對較高，且不適于集約化養(yǎng)殖的群體免疫，因此可考慮改進(jìn)DNA疫苗生產(chǎn)工藝和優(yōu)化疫苗接種方式來開發(fā)出價(jià)格低廉、實(shí)用化的DNA疫苗。其中應(yīng)用減毒胞內(nèi)菌運(yùn)送DNA疫苗的途徑取得了一些令人振奮的結(jié)果。已經(jīng)有了一些比較好的減毒沙門氏菌菌株作為禽類DNA疫苗的運(yùn)送載體的研究報(bào)道，張小榮等以減毒沙門氏菌運(yùn)送H5亞型AIV DNA疫苗的生物學(xué)特性研究表明，該疫苗具有良好的安全性和免疫原性，能同時(shí)激發(fā)細(xì)胞免疫、體液免疫和粘膜免疫應(yīng)答[25]，這類疫苗仍在探討中，需對這類疫苗進(jìn)行進(jìn)一步優(yōu)化，才能最終篩選出真正適合臨床應(yīng)用的疫苗。

5RNA復(fù)制子疫苗

隨著DNA疫苗的深入研究，人們擔(dān)心DNA會整合到宿主細(xì)胞基因組上，造成致癌隱患。此外，DNA通過核膜較為困難，限制了其作用的發(fā)揮，在一定程度上阻礙了DNA疫苗的推廣應(yīng)用。于是，人們又設(shè)想用RNA替代DNA作基因疫苗，近年來開發(fā)的RNA復(fù)制子載體應(yīng)運(yùn)而生。該RNA復(fù)制子可以不依賴于宿主細(xì)胞而自主復(fù)制，包含病毒基因組5’和3’末端的順式作用元件、全部非結(jié)構(gòu)蛋白基因編碼區(qū)（包括復(fù)制酶編碼基因），而結(jié)構(gòu)蛋白基因被缺失，由外源基因取代，這種重組病毒粒子可以很容易地?cái)y帶達(dá)3kb的外源RNA，并且感染的細(xì)胞譜較廣，包括非分裂細(xì)胞[26]。Vignuzzi等[27]將A型流感病毒A/PR/8/34（ma）株的NP基因插入塞姆利基森林病毒（SFV）載體上構(gòu)建RNA疫苗，7～8周齡的C57BL/6老鼠肌肉注射10μg SFV RNA，3～4周后再加強(qiáng)1次，共免疫3次。第3次免疫后1～3周，由鼻腔攻入100pfu的A/PR/8/34（ma）病毒。試驗(yàn)結(jié)果不僅有較高的中和抗體出現(xiàn)，而且誘導(dǎo)了有效的CTL反應(yīng)，試驗(yàn)小鼠能有效清除肺部的病毒。大量的研究證實(shí)DNA/RNA復(fù)制子比常規(guī)DNA疫苗的免疫原性好[28]，可以產(chǎn)生更強(qiáng)的抗體應(yīng)答和更多的CTL前體，而且使用比常規(guī)DNA疫苗免疫劑量低100倍的復(fù)制子疫苗就可以產(chǎn)生與常規(guī)DNA疫苗相當(dāng)?shù)拿庖咝ЯΑ？梢?，RNA復(fù)制子載體的特點(diǎn)包括：復(fù)制效率高，用量遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于常規(guī)DNA疫苗；可同時(shí)誘導(dǎo)抗體應(yīng)答和CTL應(yīng)答；安全性好，RNA復(fù)制子在胞漿內(nèi)復(fù)制，避免了核的參與，不存在整合進(jìn)宿主基因組的可能性；RNA復(fù)制子導(dǎo)致轉(zhuǎn)染細(xì)胞的溶解，避免了有自主復(fù)制能力的病毒的產(chǎn)生；復(fù)制子系統(tǒng)能自主復(fù)制，可針對多種病原進(jìn)行連續(xù)免疫，而不受己有載體病毒抗體的干擾。

6冷適應(yīng)流感弱毒疫苗

用野毒株感染雞胚在較低溫度下（25～30℃）培養(yǎng)，連續(xù)傳代后可較快的使病毒的致病力減弱，從而獲得冷適應(yīng)流感弱毒病毒供體。通過在表達(dá)靶HA和NA的野生型病毒和病毒供體如A/Ann Arbor/6/60（H2N2）之間的基因重排可以獲得減毒的冷適應(yīng)性病毒株，病毒的這些特征與多基因的突變有關(guān)。滴鼻免疫減毒的冷適應(yīng)性的流感活疫苗，能引起全身和局部粘膜的免疫反應(yīng)，顯示出保護(hù)效力[29]。這些活的減毒病毒顯示出高水平的表型和基因穩(wěn)定性，不會轉(zhuǎn)變成接近的相關(guān)血清學(xué)陰性毒株。已經(jīng)獲得H5N1 和H9N2/Ann供體的重組冷適應(yīng)性病毒。這些病毒不會對哺乳動物和雞致病[30]。雖然現(xiàn)在流行的肌注禽流感疫苗能夠有效地誘導(dǎo)相關(guān)病毒特異的血清血凝抑制IgG抗體，他們卻不能刺激鼻腔產(chǎn)生分泌型IgA抗體[31]。因?yàn)榉置谛虸gA能與異源型的流感毒株交叉反應(yīng)，活的減毒的禽流感疫苗能夠廣泛地提供針對抗原變異株的交叉保護(hù)，一旦新的流感毒株流行時(shí)它將非常有用[32，33]。美國對冷適應(yīng)流感弱毒疫苗的研制己有30多年的歷史，但由于擔(dān)心其安全性，至今仍未被批準(zhǔn)使用。俄羅斯是目前全球唯一人流感冷適應(yīng)流感弱毒疫苗獲準(zhǔn)使用的國家，該疫苗己在數(shù)億兒童中使用，證實(shí)能提供良好的保護(hù)，并無不良反應(yīng)。到目前為止，無論俄羅斯還是全球，沒有流感病毒擴(kuò)散的跡象[34，35]，但活的AIV疫苗病毒仍有與人類共感染毒株發(fā)生基因重組，或毒力返強(qiáng)，造成新的流感毒株出現(xiàn)的可能，對其大面積的推廣使用，還需在生物安全性方面加以時(shí)間上的驗(yàn)證。

7復(fù)制缺陷型流感病毒疫苗

用反向遺傳系統(tǒng)可獲得減毒的AIV，在流感流行時(shí)對疫苗的供給可能會起很關(guān)鍵的作用。病毒的HA和NA基因被克隆并插入到質(zhì)粒中，通過去除HA的多個(gè)堿性氨基酸裂解位點(diǎn)序列使其減毒，插入了HA和NA的質(zhì)粒與攜帶A/PR8/34病毒內(nèi)部基因的質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染細(xì)胞系產(chǎn)生相應(yīng)的非致病性疫苗株。采用該方法產(chǎn)生的疫苗不僅能產(chǎn)生保護(hù)性抗體，而且能誘導(dǎo)很強(qiáng)的細(xì)胞免疫，是另一個(gè)很有發(fā)展前途的活疫苗。此疫苗能夠在幾個(gè)星期內(nèi)獲得，從而能應(yīng)付緊急流感大流行事件來臨時(shí)疫苗的需求。Watanable等[36]利用反向遺傳學(xué)從cDNA獲得NS2蛋白缺失的病毒粒子，用其感染細(xì)胞時(shí)，能在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)病毒蛋白但不能形成有感染力的病毒粒子，用此方法制成的疫苗能保護(hù)離最后1次免疫3個(gè)月后的老鼠接受10或100 LD50的攻擊（9只老鼠存活8只）。其它獲得復(fù)制缺陷型流感病毒疫苗的途徑是使M2基因缺失[37]。此缺失疫苗在組織培養(yǎng)物中生長良好，但在老鼠體內(nèi)有限生長，因此是一潛在的活疫苗候選。雖然重組減毒的H5病毒在小鼠中只具有限的神經(jīng)毒力，但其符合理想模式的疫苗設(shè)計(jì)特點(diǎn)――不會致死雞胚、減弱的毒力、對模型動物具有易感性，已經(jīng)開始運(yùn)用于生產(chǎn)，不過在疫苗生產(chǎn)技術(shù)被采用之前仍有一些規(guī)章，安全性以及合法性問題需要考慮和克服。在生產(chǎn)人用疫苗時(shí)用于轉(zhuǎn)染的哺乳動物細(xì)胞系（如vero細(xì)胞）的質(zhì)量必須符合標(biāo)準(zhǔn)。用反向遺傳系統(tǒng)產(chǎn)生的病毒可能被認(rèn)為是“基因改良的有機(jī)體”，因此各個(gè)國家強(qiáng)加了一些地方和民眾的安全性法則限制其研究和發(fā)展，而且高科技的反向遺傳技術(shù)的使用權(quán)被保留，需要經(jīng)過許可才能采用此方法生產(chǎn)商業(yè)化疫苗。

8表位疫苗

根據(jù)病毒的抗原表位來研制表位疫苗，尤其是為易變異的病毒疫苗的研制提供了方向。Levi等[38]將流感病毒的3個(gè)表位：Ｂ細(xì)胞表位HA91-108、CTL表位NP147-158、Th細(xì)胞表位NP55-69分別插入沙門氏菌的鞭毛蛋白基因中構(gòu)建了3個(gè)真核表達(dá)質(zhì)粒，鼻腔免疫小鼠。3種質(zhì)粒混合免疫組可以誘導(dǎo)長期的免疫應(yīng)答，并且可以完全抵抗病毒的致死性攻擊。Thomson等[39]以1個(gè)真核表達(dá)質(zhì)粒投遞了10個(gè)CTL抗原表位，其中包括NP基因的3個(gè)表位：NP50-

58、NP147-155、NP366-374和NS1基因的1個(gè)表位NS1152-160，免疫鼠后通過Cr51釋放試驗(yàn)，檢測這些表位顯示該質(zhì)粒誘導(dǎo)了強(qiáng)的CTL應(yīng)答，并且可以清除感染的病毒。

表位疫苗不僅提供了一種更有效地利用病原體中各個(gè)抗原成分的方法，而且對于流感病毒這種高度變異的病毒來說，一方面可以通過選擇具有交叉保護(hù)性的表位來達(dá)到預(yù)防多個(gè)毒株的目的，另一方面可以通過對流行毒株的監(jiān)測來及時(shí)合成表位，實(shí)現(xiàn)對變異毒株的控制。

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9轉(zhuǎn)基因植物疫苗

宋長征等利用轉(zhuǎn)基因馬鈴薯表達(dá)AIV HA蛋白[40]。利用電擊穿孔轉(zhuǎn)化法，將含有AIV HA基因的表達(dá)質(zhì)粒pHAO（其中含35S啟動子和來源于大豆植物存儲蛋白基因的vspB終止末端，另有抗性標(biāo)記）導(dǎo)入農(nóng)桿菌EHA105，轉(zhuǎn)化細(xì)菌再感染馬鈴薯的幼莖外植體，轉(zhuǎn)化植株再生和溫室栽培。Westernblot分析表明，83%的轉(zhuǎn)化植株在其馬鈴薯塊莖組織中表達(dá)了重組HA，表達(dá)量占總蛋白量的0.03%～0.04%。結(jié)果顯示，用轉(zhuǎn)基因馬鈴薯生產(chǎn)口服AIV疫苗是有前景的。

10參考文獻(xiàn)

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第二篇：雞新城疫疫苗研究進(jìn)展

雞新城疫疫苗研究進(jìn)展

摘要：新城疫(Newcastle disease,ND)是由新城疫病毒(NDV)引起的一種烈性病毒性傳染病,是當(dāng)今全球范圍內(nèi)最嚴(yán)重的家禽傳染病之一,也是我國所有雞病中危害最大的一種,被國際獸疫局列為A類傳染病。新城疫常呈敗血癥,主要特征是呼吸困難、下痢、神經(jīng)機(jī)能紊亂、黏膜和粘膜出血。該病發(fā)病急、致死率高,對養(yǎng)禽業(yè)的發(fā)展構(gòu)成嚴(yán)重的威脅。新城疫病毒只有一個(gè)血清型,但不同亞群和毒株在毒力、抗原性和致病性等方面存在著明顯的差異。這種差異雖然不足于造成免疫失敗,但有可能使一些致病毒株在免疫雞群持續(xù)存在。目前,雞新城疫尚無有效治療藥物，但在長期獸醫(yī)臨床實(shí)踐中，發(fā)現(xiàn)用中獸醫(yī)治療有明顯的效果，這對雞新城疫疫苗研究有新的進(jìn)展。

關(guān)鍵詞：雞新城疫傳染病中獸醫(yī)進(jìn)展

新城疫病毒基因組為一條負(fù)鏈不分節(jié)段的NA單個(gè)分子,由15186個(gè)核苷酸組成,包含6基因,由3′到5′的順序依次為NP-P-M-F-H-L,分別編碼核衣殼蛋白(NP)、磷酸化的核衣相聯(lián)蛋白(P)、基質(zhì)蛋白(M)、血凝素神經(jīng)氨酸酶(N)、融合蛋白(F)、RNA依賴的RNA聚合酶等6種病毒特異性結(jié)構(gòu)蛋白。HN蛋白與F蛋白是重要的宿主保護(hù)性抗原,其中F蛋白是決定病毒毒力的主要因素,其次是HN蛋白,HN蛋白和F蛋白在決定病毒毒力方面關(guān)系密切。有強(qiáng)毒株和弱毒株兩類。病毒分為低毒力型（即緩發(fā)型）、中等毒力型（即中發(fā)型）、強(qiáng)毒力型（即速發(fā)型）3型。多數(shù)高強(qiáng)度毒力株常屬嗜內(nèi)臟型新城疫病毒。

1、新城疫病原

雞新城疫病毒（NDV）屬于副粘病毒科腮腺炎病毒屬。但近年來對基因組長序列的測定表明，NDV以及其他禽副黏病毒（APMV）與腮腺炎病毒屬中的其他病毒之間的差別，足以把它們列為一個(gè)單獨(dú)的屬。BDV完整病毒料子近圓形，有囊膜，在囊膜的外層有呈放射狀排列的纖突，能刺激宿主產(chǎn)生抑制病毒凝集紅細(xì)胞的抗體和病毒中和抗體。

根據(jù)不同毒力毒株感染雞表現(xiàn)的不同，可將NDV分為幾種致病型：（1）速發(fā)型或強(qiáng)毒型毒株，在各種年齡易感染雞引起急性致死性感染（2）中發(fā)型或中毒弄毒株，公在易感染的幼齡雞造成致死性感染（3）緩發(fā)型即低毒型或無毒型毒株，表現(xiàn)為輕微的呼吸道感染或無臨診癥狀腸道感染。NDV的毒力分型必須進(jìn)行生物學(xué)試驗(yàn)，即依據(jù)雞胚平均死亡的時(shí)間（MDT）、1日齡雛雞腦內(nèi)接種致病指數(shù)（ICPI）和6周齡雞靜脈接種致病指數(shù)（IVPI）來區(qū)別。

NDV的一個(gè)很重要的生物學(xué)特性就是能吸附于雞及某些哺乳動物或人的紅細(xì)胞表面，并引起紅細(xì)胞凝集（HA），這種特性與病毒囊膜上纖突所含血凝素和神經(jīng)氨酸酶有關(guān)。其血凝現(xiàn)象能被抗NDV的抗體所抑制（HI），因此可用HA和HI試驗(yàn)來鑒定病毒，進(jìn)行免疫監(jiān)測和滸病學(xué)的調(diào)查。

2、新城疫疫苗的研究及中藥防治

目前已知主要的新城疫疫苗有基因工程苗、弱毒活疫苗、滅活疫苗、聯(lián)苗等。

2、1 基因工程苗

基因工程苗是目前疫苗研究的熱點(diǎn)，國內(nèi)外一些實(shí)驗(yàn)室從20 世紀(jì)80年代末開始利用重組DNA 技術(shù)研制ND 基因工程疫苗。目前，ND 基因工程苗主要有DNA 疫苗、亞單位苗、活載

體疫苗、多肽苗和轉(zhuǎn)基因植物疫苗等幾種。DNA 疫苗具有能夠激發(fā)機(jī)體體液免疫和細(xì)胞免疫反應(yīng)、不散毒、便于儲存和運(yùn)輸?shù)葍?yōu)點(diǎn)。亞單位苗是將NDV 保護(hù)性抗原基因在原核或真核系統(tǒng)中表達(dá)所獲得的產(chǎn)品制成的疫苗，具有安全性高，穩(wěn)定性好，便于保存運(yùn)輸，易于批量生產(chǎn)的優(yōu)點(diǎn)。活載體疫苗的載體病毒或細(xì)菌表達(dá)目標(biāo)抗原可以最大限度地不受接種動物體內(nèi)新城疫抗體的干擾。轉(zhuǎn)基因植物疫苗的效果好，成本低、疫苗的植載體易于保存，使用方便，市場潛力巨大，發(fā)展前景十分廣闊。目前，ND的基因工程苗主要有以下幾種：

2．1．1 DNA疫苗

DNA疫苗是二十世紀(jì)九十年代從基因治療領(lǐng)域發(fā)展起來的一種全新的疫苗，具有能夠激發(fā)機(jī)體體液免疫和細(xì)胞免疫反應(yīng)、不散毒、便于儲存和運(yùn)輸?shù)葍?yōu)點(diǎn)。新城疫病毒的F和HN蛋白基因均是新城疫病毒的保護(hù)性抗原基因。新城疫DNA疫苗將病毒HN或F基因通過表達(dá)質(zhì)粒DNA導(dǎo)入機(jī)體細(xì)胞，借助宿主細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)病毒NA或F蛋白，誘發(fā)機(jī)體產(chǎn)生針對這些抗原的特異性免疫發(fā)應(yīng)。

2．1．2 亞單位苗

亞單位苗是將NDV保護(hù)性抗原基因在原核或真核系統(tǒng)中表達(dá)所獲得的產(chǎn)品制成的疫苗，即利用重組DNA 技術(shù)在高效表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)NDV 免疫原性基因, 并輔以佐劑而制成的疫苗，這種疫苗具有安全性高，穩(wěn)定性好，便于保存運(yùn)輸，易于批量生產(chǎn)的優(yōu)點(diǎn)。

2．1．3 活載體疫苗

雖然DNA疫苗和亞單位苗均顯示了良好的免疫性能，但因受到價(jià)格的限制往往難以實(shí)際推廣應(yīng)用。因此，大多數(shù)學(xué)者利用痘病毒、火雞皰疹病毒和某些細(xì)菌作為載體，插入新城疫病毒HN或F基因，通過動物接種，使接種雞得到免疫保護(hù)。載體病毒或細(xì)菌表達(dá)目標(biāo)抗原可以最大限度地不受接種動物體內(nèi)新城疫抗體的干擾，隨后發(fā)展了包括痘病毒、皰疹病毒、反轉(zhuǎn)錄病毒和沙門氏菌減毒株等活載體重組體，其中以重組痘病毒和皰疹病毒研究最為深入。2、2 弱毒活疫苗

用新城疫弱毒苗是目前許多國家用來預(yù)防雞新城疫的常規(guī)而廣泛的方法。弱毒疫苗系用雞新城疫低毒毒株接種敏感雞胚培養(yǎng)，收獲感染雞胚尿囊液，加適當(dāng)穩(wěn)定劑，經(jīng)冷凍真空干燥制成的凍干苗。在我國使用的弱毒疫苗有兩種類型：中等毒力的I系疫苗以及弱毒的Ⅱ系、Ⅲ系、Ⅳ系和V4弱毒疫苗。其中Ⅰ系苗屬于中等毒力苗,免疫后雞體產(chǎn)生抗體快,抗體維持時(shí)間長(3～5周),但Ⅰ系苗對雛雞和產(chǎn)蛋雞均有一定的致病力,使用時(shí)應(yīng)注意。多用于60～120日齡的青年雞的加強(qiáng)免疫。Ⅱ系、Ⅲ系、Ⅳ系苗等均為弱毒疫苗,通常用于青年雞群的早期接種,而Ⅳ系苗的毒力相對Ⅱ系、Ⅲ系稍強(qiáng),對雞群具有較好的免疫保護(hù)性,是目前使用較多的弱毒苗。

2、3 滅活疫苗

滅活疫苗會使受種者產(chǎn)生以體液免疫為主的免疫反應(yīng)，它產(chǎn)生的抗體有中和、清除病原微生物及其產(chǎn)生的毒素作用，對細(xì)胞外感染的病原微生物有較好的保護(hù)效果。滅活疫苗對病毒、細(xì)胞內(nèi)寄生的細(xì)菌和寄生蟲的保護(hù)效果較差或無效。滅活疫苗是經(jīng)處理而致死的病原體，安全性好，免疫應(yīng)激反應(yīng)小。其優(yōu)缺點(diǎn)見表1。Takada等通過鼻內(nèi)接種ND滅活疫苗，能夠引起局部和全身的抗體反應(yīng)，對致死量的NDV強(qiáng)毒鼻內(nèi)攻毒產(chǎn)生保護(hù)力，其免疫效應(yīng)通過配合使用霍亂毒素B亞單位(CTB)的佐劑可得到增強(qiáng)。沈志強(qiáng)等用NDV Clone-30株病毒接種非免疫雞胚，制備抗原液，經(jīng)甲醛滅活后與純化的天然免疫增強(qiáng)劑蜂膠乳化，研制成雞ND蜂膠滅活疫苗，其安全性和免疫原性良好。目前預(yù)防雞新城疫滅活苗使用較多的為油乳劑滅活疫苗。

2、4 聯(lián)苗

目前國內(nèi)外生產(chǎn)的雞用聯(lián)苗日漸增多，采用聯(lián)苗可以減少對雞的免疫次數(shù)和應(yīng)激，可以用來防治雞的各種疾病。2005年12月24日，我國農(nóng)業(yè)部在北京宣布，我國成功研制了禽流感一新城疫重組二聯(lián)活疫苗，并正式批準(zhǔn)生產(chǎn)。美國在27個(gè)苗中就有18個(gè)是聯(lián)合苗，日本生產(chǎn)的雞所用聯(lián)合苗占雞用苗的40％，如雞新城疫一傳染性支氣管炎疫苗，新城疫一雞痘疫苗，新城疫一鼻炎疫苗等。趙恒章等通過斌驗(yàn)證明，新城疫一傳染性支氣管炎二聯(lián)油乳劑滅活苗接種21日齡雛雞后，14天后便能產(chǎn)生有效的保護(hù)抗體。王宏俊等經(jīng)過試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)當(dāng)NDV+AIV(H9)二聯(lián)苗免疫劑量為O．5毫升／只時(shí)，免疫后2l天雞血清中 AIV及NDV的HI抗體均大于28，并具有很好的免疫保護(hù)性，能夠耐受AIV(H9亞型)及NDV F48的攻擊。新城疫傳染性支氣管炎聯(lián)合疫苗已早研制成功，并可將2 種病毒接種于同一雞胚中生產(chǎn)疫苗，試驗(yàn)結(jié)果證明這種疫苗具有良好的免疫效果和實(shí)用價(jià)值。王麗男等對雞新城疫、傳染性支氣管炎、傳染性法氏囊病三聯(lián)活疫苗的安全性和免疫效力進(jìn)行了試驗(yàn)，結(jié)果證明該疫苗的安全性和免疫效果良好。用常規(guī)量的1 0 倍劑量接種雛雞未見不良反應(yīng)。

2、5 中藥防治

長期以來,中藥飼料添加劑在獸醫(yī)臨床上防治雞新城疫病取得了較好療效,適合于臨床推廣。獸醫(yī)工作者通過提取中藥有效成分后作為疫苗免疫佐劑應(yīng)用,可大大降低疫苗與中藥的使用次數(shù)和劑量,提高雞新城疫免疫效果,從而更有效地防治雞新城疫病。中藥佐劑能顯著促進(jìn)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化,提高血清抗體效價(jià),多數(shù)時(shí)間點(diǎn)與油佐劑的效果相當(dāng),部分時(shí)間點(diǎn)顯著強(qiáng)于油佐劑。目前有中藥散劑防治雞新城疫和中藥煎劑防治雞新城疫兩種方法，由于我國養(yǎng)禽業(yè)總體水平不高,特別是在某些重大禽類傳染性疾病的防治上存在較多問題。另外,當(dāng)前養(yǎng)禽業(yè)中抗生素、化學(xué)合成藥物、激素等使用不規(guī)范,禽類產(chǎn)品藥物殘留超標(biāo)而影響出口,禽類排放糞便造成環(huán)境污染和破壞生態(tài)平衡等。使用了數(shù)千年的傳統(tǒng)中藥具有諸多抗生素等化藥無法比擬的優(yōu)點(diǎn),可用于雞新城疫、禽流感等重大禽類傳染性疾病的防治。因此,為了生產(chǎn)更多的“健康綠色食品”,有必要進(jìn)一步加強(qiáng)中藥防治禽類疾病的科研投入,使我國養(yǎng)禽業(yè)走上健康、良性、持續(xù)發(fā)展的道路。

3、疫苗的使用方法及注意事項(xiàng)

目前我國對雞新城疫疫苗的使用方法有：飲水免疫、注射免疫、氣霧免疫、滴鼻點(diǎn)眼免疫等。3、1飲水免疫

首先要保證足夠的飲水器，并把飲水器清洗干凈，無抗菌、消毒藥物殘留；飲水免疫前停水2~4小時(shí)；疫苗水中不含金屬離子和氯離子，可使用涼開水或蒸餾水，最好使用去離子水，并在其中加入2~3%鮮牛奶或0.2~0.3%脫脂奶粉，以穩(wěn)定病毒活性。然后按要求加入疫苗，混勻后給雞飲服。

特別注意疫苗的用水量，一般為雞日飲水量的30%，疫苗用量高于平均用量的2~3倍，保證所有的雞同時(shí)喝到疫苗水，并在0.5~1小時(shí)內(nèi)飲完。如飲水量少，只能讓一部分雞飲上疫苗，造成免疫不均勻；飲水量太多，很長時(shí)間飲不完，造成疫苗效價(jià)降低。

3、2 注射免疫

注射前要將注射器具徹底消毒，疫苗現(xiàn)配現(xiàn)用，疫苗用滅菌生理鹽水或涼開水稀釋，不能用熱水或含氯的自來水作稀釋液，滅活疫苗要搖勻后才能使用；注射劑量要準(zhǔn)確，不能任意加大或減少疫苗用量；注射時(shí)操作要規(guī)范，頸部皮下注射應(yīng)提起皮膚掌握好角度，針頭刺入皮膚與肌肉之間，避免刺傷頸骨或穿針；肌肉注射應(yīng)根據(jù)雞齡大少確定實(shí)施部位，一般胸部龍骨肌肉最厚處注射，避免破血管或內(nèi)臟器官，造成骨骼損傷及死亡，腿部注射應(yīng)在腿外側(cè)無血管處，進(jìn)針時(shí)順腿骨方向刺入，避免刺傷血管神經(jīng)。

3、3 氣霧免疫

主要在大群免疫時(shí)應(yīng)用，但不適宜于30日齡內(nèi)的雛雞和存在慢性呼吸道病的雞群，以免誘發(fā)呼吸道系統(tǒng)疾患。氣霧免疫時(shí)，將疫苗按規(guī)定稀釋好，用噴霧器或空壓機(jī)將疫苗液噴成氣霧粒子。一般對6周齡以內(nèi)的雛雞氣霧免疫，氣霧粒子為 50μm，而對12周齡雛雞氣霧免疫時(shí)，氣霧粒子取10~30μm為宜。在雞頭上為約1.5米左右噴霧，噴完后要最大限度地降低通風(fēng)換氣量，以保證氣霧免疫效果，同時(shí)也要防止通風(fēng)不良而造成 窒息死亡，一般噴霧后密閉雞舍10~20分即可。但應(yīng)注意有雞支原體感染的雞群，禁用噴霧接種；疫苗稀釋后，應(yīng)放冷暗處，必須在4小時(shí)內(nèi)用完。

3、4點(diǎn)眼滴鼻

點(diǎn)眼滴鼻適用于雞新城疫II系、III系、IV系疫苗的接種。對幼雛應(yīng)用這種方法，可以避免疫苗病毒被母源抗體中和，從而取得比較良好的免疫效果，而且能保證每只雞普遍得到免疫，且劑量一致。因此，一般認(rèn)為點(diǎn)眼滴鼻法是雞疫苗接種的最佳方法，尤其是雞新城疫苗接種更是如此。用點(diǎn)眼滴鼻法接種時(shí)，可把1000只份的疫苗稀釋于50或t00毫升生理鹽水中，充分搖勻，然后在每只雞的眼結(jié)膜或鼻孔上滴1滴(約0．05m1)。用La Sota弱毒苗0．05毫升滴鼻免疫，同時(shí)皮下注射0．3毫升油乳劑滅活苗或蜂膠苗0．5毫升，可獲得90％以上的保護(hù)率，單獨(dú)用其中一種苗免疫則效果低得多。

展望

隨著我國養(yǎng)禽業(yè)的迅猛發(fā)展, 對ND 的防治越來越重要。因此研制出高效、安全、生產(chǎn)工藝簡單、價(jià)格低廉、適用的ND 疫苗有重要意義。此外中獸藥是在獨(dú)特中獸醫(yī)理論指導(dǎo)之下用于動物疾病防治,兼有營養(yǎng)和藥用雙重功效,與西藥相比具有天然性、多能性、低毒副、不易產(chǎn)生有害殘留和耐藥性等優(yōu)點(diǎn),為動物臨床廣泛應(yīng)用。于此同時(shí)，建立統(tǒng)一的獸醫(yī)行政管理監(jiān)督執(zhí)法體系，改變現(xiàn)行的分散管理格局，實(shí)行從中央到地方的官方獸醫(yī)制度，盡快與國際接軌，強(qiáng)化畜禽生產(chǎn)管理，加大執(zhí)法力度，建立綠色畜禽產(chǎn)品專營市場，嚴(yán)格實(shí)行準(zhǔn)入制，使合格產(chǎn)品進(jìn)入，不合格的淘汰；扶持綠色品牌龍頭企業(yè)，讓綠色品牌和龍頭企業(yè)結(jié)合，使 綠色品牌優(yōu)勢轉(zhuǎn)化為經(jīng)濟(jì)發(fā)展優(yōu)勢，真正提高其質(zhì)量安全水平。目前對雞新城疫疫苗研究和中藥防治，已經(jīng)成為國際疫苗研究領(lǐng)域最熱門的課題之一。

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第三篇：豬圓環(huán)病毒2型疫苗最新研究進(jìn)展

豬圓環(huán)病毒2型疫苗最新研究進(jìn)展

豬圓環(huán)病毒病是公認(rèn)的免疫抑制病之一，造成豬場損失慘重，疫苗免疫成了救命的稻草。從2011年豬圓環(huán)疫苗上市至今，已有17家圓環(huán)產(chǎn)品先后上市，目前，出現(xiàn)嚴(yán)重供大于求的現(xiàn)象，同時(shí)，養(yǎng)殖場也面臨著幸福的煩惱，大量產(chǎn)品的上市，產(chǎn)品價(jià)格可能下降，但是，面對玲瑯滿目的產(chǎn)品，如何選擇疫苗成了養(yǎng)殖場一個(gè)重要的課題，針對這些煩惱，本文希望能夠?yàn)轲B(yǎng)殖場選擇疫苗帶來幫助，避免走彎路，為養(yǎng)殖場服務(wù)。

1.PCV-2國內(nèi)外最新流行動態(tài)

由PCV-2引發(fā)的疾病已成全球流行之勢，在加拿大首次報(bào)道該病原引起PMWS后[1]，學(xué)者通過調(diào)查本國包括SPF豬、部分散養(yǎng)豬以及育肥豬發(fā)現(xiàn)，豬群中PCV-2血清中抗體普遍存在，但目前該病在加拿大仍然只是散發(fā)。在英國和北愛爾蘭，豬群血清中PCV-2抗體陽性率分別為86％和92％。美國、法國、丹麥、意大利、西班牙、荷蘭、新西蘭、日本、韓國、墨西哥等國家也相繼報(bào)道豬群中存在PMWS。在我國豬群中PCV-2感染情況也不容樂觀。2000年郎洪武等[2]在北京、河北、山東、天津、江西、吉林、河南等7省(市)的22個(gè)豬群采集了559份血清，用ELISA方法檢測PCV-2抗體，其陽性率高達(dá)5l％，表明我國豬群中存在PCV-2的感染。王忠田等[3]用PCR方法對我國北京、山東、河北、深圳、山西、天津、廣東等省(市)的12個(gè)規(guī)模化豬場發(fā)病豬群進(jìn)行豬圓環(huán)病毒2型感染的流行病學(xué)調(diào)查，結(jié)果表明豬圓環(huán)病毒2型感染情況在我國豬群中相當(dāng)嚴(yán)重。李超等[4]在2010年對安徽省PCV-2流行病學(xué)調(diào)查，結(jié)果表明安徽省14個(gè)市(縣)的PCV-2抗體陽性率平均為74.36％，表明安徽省豬群中普遍存在著PCV-2的感染。從上述報(bào)道表明PCV-2在我國豬群中廣泛存在。根據(jù)流行病學(xué)調(diào)查顯示，雖然豬群中PCV-2抗體陽性率較高，但很大比例的抗體陽性豬群并不表現(xiàn)出臨床癥狀。PCV-2與其他多種病原混合感染較為嚴(yán)重，調(diào)查發(fā)現(xiàn)沙門氏菌、大腸桿菌等細(xì)菌性病原與PCV-2混合感染率達(dá)到了20％[5]。陜西省PCV-2與PRV混合感染率是21.7％[6]。2005年陳義祥等對廣西地區(qū)197份組織病料檢測發(fā)現(xiàn)，PCV-2與PRRSV、CSFV、SIV、PRV混合感染占總病料數(shù)量的57.73％。2003年王文軍等[7]對黑龍江地區(qū)PCV-2陽性豬群的病料調(diào)查發(fā)現(xiàn)，藍(lán)耳病和豬瘟的陽性率也較高。

哈爾濱獸醫(yī)研究所劉長明[8]在2007年采用免疫過氧化物酶單層細(xì)胞染色試驗(yàn)（IPMA）對來自與黑龍江、吉林、河北、上海、內(nèi)蒙古、云南、江西等地的健康豬群480份血清和發(fā)病豬群424份血清，抗體陽性率分別為79.2%和91.7%，表明PCV-2在豬群中感染率非常高。山東農(nóng)科院畜牧獸醫(yī)研究所吳家強(qiáng)博士檢測結(jié)果也證實(shí)PCV-2防控比較糟糕，PCV-2，2010年檢出率為34.66%（124/357），2011年檢出率為25.59%(174/588)；2012年檢出率為2

1.38%(147/683)，圓環(huán)病毒病依然嚴(yán)重，但有下降趨勢，這個(gè)和使用圓環(huán)疫苗免疫有關(guān)系。

第四篇：禽流感范文

江蘇衛(wèi)生廳：板藍(lán)根沖劑可預(yù)防H7N9禽流感

江蘇省衛(wèi)生廳發(fā)布人感染H7N9禽流感防治中醫(yī)方:板藍(lán)根沖劑、黃芪口服液可用于預(yù)防H7N9禽流感

南報(bào)網(wǎng)訊(記者 查金忠 通訊員 沈衛(wèi))為探索和發(fā)揮中醫(yī)藥在防治人感染H7N9禽流感中的作用，昨天，省中醫(yī)藥局組織專家在國家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會《人感染H7N9禽流感診療方案(2013年第1版)》和臨床觀察基礎(chǔ)上，結(jié)合江蘇地域特點(diǎn)，制訂了《江蘇省人感染H7N9禽流感中醫(yī)藥防治技術(shù)方案(2013年第1版)》。這一方案提供了預(yù)防、診治人感染H7N9禽流感的多個(gè)中醫(yī)方?！驹敿?xì)】 甘肅衛(wèi)生廳：按摩迎香穴可預(yù)防H7N9禽流感

人民網(wǎng)蘭州4月3日電 3日下午，甘肅省衛(wèi)生廳緊急下發(fā)《發(fā)關(guān)于加強(qiáng)人感染H7N9禽流感防控工作的通知》(以下簡稱《通知》)。《通知》要求各級衛(wèi)生行政部門要高度重視，加強(qiáng)甘肅省人感染H7N9禽流感疫情防控工作，有效應(yīng)對可能出現(xiàn)的疫情，提高疫情的應(yīng)急處置能力，切實(shí)保障人民群眾身體健康和生命安全。

一、預(yù)防預(yù)案

起居預(yù)防

1.春季萬物復(fù)蘇，應(yīng)當(dāng)早睡早起，以適應(yīng)自然界的生發(fā)之氣。

2.“春捂”防?。捍杭菊€寒，氣候多變，要保暖防寒，提高人體的防御能力。

3.運(yùn)動鍛煉：春天，萬木吐翠，空氣清新，增加戶外運(yùn)動鍛煉，既采納自然之氣養(yǎng)陽，又使氣血通暢、郁滯疏散，提高正氣，強(qiáng)體防病。

4.調(diào)暢情志：多曬太陽，多聽音樂，保持樂觀情緒。

飲食預(yù)防

1.“春夏養(yǎng)陽”，勿食寒涼損傷陽氣。

2.飲食要清淡：由冬季的膏粱厚味轉(zhuǎn)變?yōu)閼?yīng)季時(shí)蔬的清溫平淡。如：菠菜、蒜苗、香蔥、小油菜等

3.飲食宜多甘少酸：春季宜吃甘味食物，以健脾胃之氣，溫補(bǔ)陽氣；肝主升發(fā)，與春相應(yīng)，酸入肝，少食酸性食物，既防陽氣生發(fā)太過，又能養(yǎng)肝，提高抗病能力。

習(xí)慣預(yù)防

1.保持手部清潔，并用正確方法洗手。

2.避免手部接觸眼睛、鼻及口。

3.打噴嚏或咳嗽時(shí)應(yīng)遮掩口鼻。

4.不隨地吐痰，如要吐痰應(yīng)將分泌物包好，棄置于有蓋垃圾箱內(nèi)。

5.有呼吸道感染癥狀或發(fā)燒時(shí)，應(yīng)戴上口罩，并盡早就醫(yī)。

衛(wèi)計(jì)委公布H7N9禽流感臨床表現(xiàn)及診療方案

中新網(wǎng)4月3日電 國家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會日前在其官方網(wǎng)站公布人感染H7N9禽流感診療方案。方案指出，根據(jù)流感的潛伏期及現(xiàn)有H7N9禽流感病毒感染病例的調(diào)查結(jié)果，潛伏期一般為7天以內(nèi)。以下是全文：

人感染H7N9禽流感診療方案

人感染H7N9禽流感是由H7N9亞型禽流感病毒引起的急性呼吸道傳染病。自2013年2月以來，上海市、安徽省、江蘇省先后發(fā)生不明原因重癥肺炎病例，其中確診人感染H7N9禽流感3例，2例死亡。3例均為散發(fā)病例，目前尚未發(fā)現(xiàn)3例病例間有流行病學(xué)關(guān)聯(lián)。

一、病原學(xué)

禽流感病毒屬正粘病毒科甲型流感病毒屬。禽甲型流感病毒顆粒呈多形性，其中球形直徑80～120nm，有囊膜?；蚪M為分節(jié)段單股負(fù)鏈RNA。依據(jù)其外膜血凝素(H)和神經(jīng)氨酸酶(N)蛋白抗原性不同，目前可分為16個(gè)H亞型(H1～H16)和9個(gè)N亞型(N1～N9)。禽甲型流感病毒除感染禽外，還可感染人、豬、馬、水貂和海洋哺乳動物?？筛腥救说那萘鞲胁《緛喰蜑镠5N1、H9N2、H7N7、H7N2、H7N3，此次報(bào)道的為人感染H7N9禽流感病毒。該病毒為新型重配病毒，其內(nèi)部基因來自于H9N2禽流感病毒。

禽流感病毒普遍對熱敏感，對低溫抵抗力較強(qiáng)，65℃加熱30分鐘或煮沸(100℃)2分鐘以上可滅活。病毒在較低溫度糞便中可存活1周，在4℃水中可存活1個(gè)月，對酸性環(huán)境有一定抵抗力，在pH4.0的條件下也具有一定的存活能力。在有甘油存在的情況下可保持活力1年以上。

二、流行病學(xué)

(一)傳染源。目前尚不明確，根據(jù)以往經(jīng)驗(yàn)及本次病例流行病學(xué)調(diào)查，推測可能為攜帶H7N9禽流感病毒的禽類及其分泌物或排泄物。

(二)傳播途徑。經(jīng)呼吸道傳播，也可通過密切接觸感染的禽類分泌物或排泄物等被感染，直接接觸病毒也可被感染?，F(xiàn)尚無人與人之間傳播的確切證據(jù)。

(三)易感人群。目前尚無確切證據(jù)顯示人類對H7N9禽流感病毒易感?，F(xiàn)有確診病例均為成人。

(四)高危人群?，F(xiàn)階段主要是從事禽類養(yǎng)殖、銷售、宰殺、加工業(yè)者，以及在發(fā)病前1周內(nèi)接觸過禽類者。

三、臨床表現(xiàn)

根據(jù)流感的潛伏期及現(xiàn)有H7N9禽流感病毒感染病例的調(diào)查結(jié)果，潛伏期一般為7天以內(nèi)。

(一)一般表現(xiàn)。

患者一般表現(xiàn)為流感樣癥狀，如發(fā)熱，咳嗽，少痰，可伴有頭痛、肌肉酸痛和全身不適。重癥患者病情發(fā)展迅速，表現(xiàn)為重癥肺炎，體溫大多持續(xù)在39℃以上，出現(xiàn)呼吸困難，可伴有咯血痰；可快速進(jìn)展出現(xiàn)急性呼吸窘迫綜合征、縱隔氣腫、膿毒癥、休克、意識障礙及急性腎損傷等。

(二)實(shí)驗(yàn)室檢查。

1.血常規(guī)。白細(xì)胞總數(shù)一般不高或降低。重癥患者多有白細(xì)胞總數(shù)及淋巴細(xì)胞減少，并有血小板降低。

2.血生化檢查。多有肌酸激酶、乳酸脫氫酶、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶升高，C反應(yīng)蛋白升高，肌紅蛋白可升高。

3.病原學(xué)檢測。

(1)核酸檢測。對患者呼吸道標(biāo)本(如鼻咽分泌物、口腔含漱液、氣管吸出物或呼吸道上皮細(xì)胞)采用real time PCR(或RT-PCR)檢測到H7N9禽流感病毒核酸。

(2)病毒分離。從患者呼吸道標(biāo)本中分離H7N9禽流感病毒。

(三)胸部影像學(xué)檢查。發(fā)生肺炎的患者肺內(nèi)出現(xiàn)片狀影像。重癥患者病變進(jìn)展迅速，呈雙肺多發(fā)磨玻璃影及肺實(shí)變影像，可合并少量胸腔積液。發(fā)生ARDS時(shí)，病變分布廣泛。

(四)預(yù)后。人感染H7N9禽流感重癥患者預(yù)后差。影響預(yù)后的因素可能包括患者年齡、基礎(chǔ)疾病、合并癥等。

四、診斷與鑒別診斷

(一)診斷。根據(jù)流行病學(xué)接觸史、臨床表現(xiàn)及實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果，可作出人感染H7N9禽流感的診斷。在流行病學(xué)史不詳?shù)那闆r下，根據(jù)臨床表現(xiàn)、輔助檢查和實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果，特別是從患者呼吸道分泌物標(biāo)本中分離出H7N9禽流感病毒，或H7N9禽流感病毒核酸檢測陽性，可以診斷。

1.流行病學(xué)史。發(fā)病前1周內(nèi)與禽類及其分泌物、排泄物等有接觸史。

2.診斷標(biāo)準(zhǔn)。

(1)疑似病例：符合上述臨床癥狀及血常規(guī)、生化及胸部影像學(xué)特征，甲型流感病毒通用引物陽性并排除了季節(jié)性流感，可以有流行病學(xué)接觸史。

(2)確診病例：符合疑似病例診斷標(biāo)準(zhǔn)，并且呼吸道分泌物標(biāo)本中分離出H7N9禽流感病毒或H7N9禽流感病毒核酸檢測陽性。

重癥病例：肺炎合并呼吸功能衰竭或其他器官功能衰竭者為重癥病例。

(二)鑒別診斷。應(yīng)注意與人感染高致病性H5N1禽流感、季節(jié)性流感(含甲型H1N1流感)、細(xì)菌性肺炎、傳染性非典型肺炎(SARS)、新型冠狀病毒肺炎、腺病毒肺炎、衣原體肺炎、支原體肺炎等疾病進(jìn)行鑒別診斷。鑒別診斷主要依靠病原學(xué)檢查。

五、治療

(一)對臨床診斷和確診患者應(yīng)進(jìn)行隔離治療。

(二)對癥治療?？晌酢?yīng)用解熱藥、止咳祛痰藥等。

(三)抗病毒治療。應(yīng)盡早應(yīng)用抗流感病毒藥物。

1.神經(jīng)氨酸酶抑制劑：可選用奧司他韋(Oseltamivir)或扎那米韋(Zanamivir)，臨床應(yīng)用表明對禽流感病毒H5N1和H1N1感染等有效，推測對人感染H7N9禽流感病毒應(yīng)有效。奧司他韋成人劑量75mg每日兩次，重癥者劑量可加倍，療程5-7天。扎那米韋成人劑量10mg，每日兩次吸入。

2.離子通道M2阻滯劑：目前實(shí)驗(yàn)室資料提示金剛烷胺(Amantadine)和金剛乙胺(Rimantadine)耐藥，不建議單獨(dú)使用。

(四)中醫(yī)藥治療。

1.疫毒犯肺，肺失宣降

癥狀：發(fā)熱，咳嗽，少痰，頭痛，肌肉關(guān)節(jié)疼痛。

治法：清熱宣肺

參考處方：

桑葉 金銀花 連翹 炒杏仁 生石膏 知母 蘆根 青蒿 黃芩 生甘草

水煎服，每日1—2劑，每4—6小時(shí)口服一次。

加減：咳嗽甚者加枇杷葉、浙貝母。

中成藥：可選擇疏風(fēng)解毒膠囊、連花清瘟膠囊、清開靈注射液。

2.疫毒壅肺，內(nèi)閉外脫

癥狀：高熱，咳嗽，痰少難咯，憋氣，喘促，咯血，四末不溫，冷汗淋漓，躁擾不安，甚則神昏譫語。

治法：清肺解毒，扶正固脫

參考處方：

炙麻黃 炒杏仁 生石膏 知母 魚腥草 黃芩

炒梔子 虎杖 山萸肉 太子參

水煎服，每日1—2劑，每4—6小時(shí)口服或鼻飼一次。

加減：高熱、神志恍惚、甚至神昏譫語者，上方送服安宮牛黃丸；肢冷、汗出淋漓者加人參、炮附子、煅龍骨、煅牡蠣；咯血者加赤芍、仙鶴草、側(cè)柏葉；口唇紫紺者加三

七、益母草、黃芪、當(dāng)歸尾。

中成藥：可選擇參麥注射液、生脈注射液。

(五)加強(qiáng)支持治療和預(yù)防并發(fā)癥。注意休息、多飲水、增加營養(yǎng)，給易于消化的飲食。密切觀察，監(jiān)測并預(yù)防并發(fā)癥?？咕幬飸?yīng)在明確繼發(fā)細(xì)菌感染時(shí)或有充分證據(jù)提示繼發(fā)細(xì)菌感染時(shí)使用。

(六)重癥患者的治療。重癥患者應(yīng)入院治療，對出現(xiàn)呼吸功能障礙者給予吸氧及其他相應(yīng)呼吸支持，發(fā)生其它并發(fā)癥的患者應(yīng)積極采取相應(yīng)治療。

1.呼吸功能支持：

(1)機(jī)械通氣：重癥患者病情進(jìn)展迅速，可較快發(fā)展為急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)。在需要機(jī)械通氣的重癥病例，可參照ARDS機(jī)械通氣的原則進(jìn)行。

①無創(chuàng)正壓通氣：出現(xiàn)呼吸窘迫和(或)低氧血癥患者，早期可嘗試使用無創(chuàng)通氣。但重癥病例無創(chuàng)通氣療效欠佳，需及早考慮實(shí)施有創(chuàng)通氣。

②有創(chuàng)正壓通氣：鑒于部分患者較易發(fā)生氣壓傷，應(yīng)當(dāng)采用ARDS保護(hù)性通氣策略。

(2)體外膜氧合(ECMO)：傳統(tǒng)機(jī)械通氣無法維持滿意氧合和(或)通氣時(shí)，有條件時(shí)，推薦使用ECMO。

(3)其他：傳統(tǒng)機(jī)械通氣無法維持滿意氧合時(shí)，可以考慮俯臥位通氣或高頻振蕩通氣(HFOV)。

2.其他治療：在呼吸功能支持治療的同時(shí)，應(yīng)當(dāng)重視其他器官功能狀態(tài)的監(jiān)測及治療；預(yù)防并及時(shí)治療各種并發(fā)癥尤其是醫(yī)院獲得性感染。

六、其它

嚴(yán)格規(guī)范收治人感染H7N9禽流感患者醫(yī)療機(jī)構(gòu)的醫(yī)院感染控制措施。遵照標(biāo)準(zhǔn)預(yù)防的原則，根據(jù)疾病傳播途徑采取防控措施。具體措施依據(jù)《人感染H7N9禽流感醫(yī)院感染預(yù)防與控制技術(shù)指南(2013年版)》的相關(guān)規(guī)定

第五篇：聚氨酯研究進(jìn)展

聚氨酯樹脂的研究進(jìn)展

摘要：本文綜述了聚氨酯目前研究熱點(diǎn)，其中包括氟硅改性、水性化、非異氰酸酯聚氨酯和聚氨酯納米復(fù)合材料的研究，指出了聚氨酯未來研究方向。

關(guān)鍵詞：聚氨酯；氟硅改性；水性；非異氰酸酯；納米復(fù)合材料

Research progress of polyurethane

Abstract：This article reviews the current research focus of polyurethane, including fluorine-modified, water-based, non-isocyanate polyurethane and polyurethane nano-composites, demonstrating future research directions of polyurethane.Keyword: polyurethane;fluorine-modified;non-isocyanate;nano-composites

引言

聚氨酯樹脂(PU)是一種重要的合成樹脂，它具有優(yōu)良的性能，如硬度范圍寬、強(qiáng)度高、耐磨、耐油、耐臭氧性能優(yōu)良，且具有良好的吸振，抗輻射和耐透氣性能，具有高拉伸強(qiáng)度和斷裂伸長率，良好的耐磨損性、抗撓曲性、耐溶劑性，而且容易成型加工，并具有性能可控的優(yōu)點(diǎn)；它的產(chǎn)品形態(tài)多樣，如泡沫塑料、彈性體、涂料、膠黏劑、纖維素、合成革等；因此廣泛應(yīng)用于交通運(yùn)輸、建筑、機(jī)械、家具等諸多領(lǐng)域。

1.氟硅改性

氟硅改性聚氨酯是目前研究的熱點(diǎn)之一，氟硅具有獨(dú)特的化學(xué)結(jié)構(gòu)，其表面能較低，因此在成膜過程中向表面富集，可賦予改性聚合物涂膜優(yōu)良的耐水、耐油污、耐候、耐高低溫使用性能以及良好的機(jī)械性能。常有兩種: 一種方法是將含有羥基或胺基的硅氧烷樹脂或單體與二異氰酸酯反應(yīng)，將有機(jī)硅氧烷引到水性聚氨酯中，利用硅氧烷的水解縮合交聯(lián)來改善聚氨酯的性能；另一種方法是在環(huán)氧硅氧烷作為后交聯(lián)劑引入到體系中，形成環(huán)氧交聯(lián)改性聚氨酯體系。Cheng(Cheng, Zhang et al.2005)等人基于聚丙二醇（PPG），聚醚接枝聚硅氧烷（PE-PSI），2,4丁二醇（BDO）合成一個(gè)新穎的硅氧烷改性聚氨酯（PE-PSI）。Luo(Luo, Huang et al.2010)等人基于異佛爾酮二異氰酸酯（IPDI），以二端羥烷基聚[甲基-（3,3,3-三氟丙基）]硅氧烷（PMTFPS）為軟段，聚己內(nèi)酯（PCL）的混合軟段的基礎(chǔ)上，合成氟-硅氧烷改性聚氨酯系列。Linlin(Linlin, Xingyuan et al.2007)等以2,4-甲苯二異氰酸酯、二端羥丁基聚二甲基硅氧烷（DHPDMS）、聚四氫呋喃醚二醇、1,4-丁二醇為主要原料合成了系列的有機(jī)硅改性聚氨酯（Si-PU）。硅烷改性聚氨酯的研究十分活躍，以聚氨酯為主鏈通過硅烷封端改性，是一個(gè)重要的發(fā)展方向。Mahdi(Mahdi, Syed Z.Rochester Hills et al.2001)通過硅烷偶聯(lián)劑改性聚氨酯，提高了聚氨酯密封膠對玻璃的粘接性，而且不用底涂劑，甚至可膠接油漆面和有機(jī)物污染的表面。Sun, DX(Sun, Miao et al.2011)等用硅烷偶聯(lián)劑（SiCA）改性功能化的納米二氧化硅聚氨酯，提高其熱穩(wěn)定性、硬度、耐水性和耐候性。Xu(Xu, Lu et al.2011)等利用2-三氟甲基-4,4'-二氨基二苯醚合成了一系列含氟聚氨酯彈性體，性能測定結(jié)果表明含氟聚氨酯彈性體具有較低的表面張力，更好的疏水性、熱穩(wěn)定性、良好的機(jī)械性能和阻燃性能。

2.水性聚氨酯

20世紀(jì)60年代以來，溶劑型聚氨酯得到了廣泛的使用，然而有機(jī)溶劑使用時(shí)造成空氣污染，具有或多或少的毒性，水性聚氨酯以水為基本介質(zhì)，具有不污染環(huán)境、節(jié)能、操作加工方便等優(yōu)點(diǎn)，已受到人們的重視(仝鋒 2000;顏俊, 涂偉萍 et al.2001)。水性聚氨酯按照分散粒子是否帶電可分為離子型和非離子型, 而離子型水性聚氨酯按照聚氨酯主鏈上的帶電性質(zhì)又可分為陰離子型、陽離子型和兩性離子型。LU(Lu, Tighzert et al.2005)等利用蓖麻油改性的水性聚氨酯與熱塑性淀粉共混，試驗(yàn)表明，兩者具有較好的相容性，這種改性彌補(bǔ)了熱塑性淀粉的耐水性、物理機(jī)械性能方面的不足，為高性能的可降解淀粉塑料的研究提供了理論支持。Tyre(Tyre 2008)等人對作為木地板涂料的水性聚氨酯-丙烯酸混合物與油性產(chǎn)品的硬度、耐磨性和耐化學(xué)性坐了詳細(xì)比較。Zhang(Zhang W)等人以聚醚多元醇、聚酯多元醇、異氰酸酯、二羥甲基丙酸、三乙烷、羥乙基丙烯酸酯為原料，合成作為水性油墨連接料的水性聚氨酯乳液，制成的水性油墨不燃，無毒，無害，環(huán)境友好，既安全又節(jié)能。Yang.Z(Yang Z 2010)等人以水和非羥基溶劑作為混合溶劑，得到環(huán)硫氯丙烷單體和巰基改性聚氨酯混合水性乳液，該乳液可以用作高效、環(huán)保的工業(yè)廢水汞離子吸附劑。Lagiewczyk(Lagiewczyk and Czech 2011)等基于羥基聚丁二烯（HTPB），聚丙二醇（PPG），二羥甲基丙酸（DMPA）和異佛爾酮二異氰酸酯（IPDI）制備水性聚氨酯的壓敏粘合劑（PU-PSA），其具有低粘性，低附著力和良好的凝聚力。

3.非異氰酸酯聚氨酯

20世紀(jì)90年代開始, 發(fā)達(dá)國家重視非異氰酸聚氨酯（NIPU）的開發(fā)與應(yīng)用，在歐美國家正逐步實(shí)現(xiàn)工業(yè)化，在涂料、彈性體、膠粘劑等行業(yè)的應(yīng)用大有與常規(guī)異氰酸酯競爭之勢(Rokicki 2000;Figovsky and Shapovalov 2002;Yu, Yuan et al.2009)。NIPU由環(huán)碳酸酯齊聚物與胺類齊聚物反應(yīng)制得, Garipov RM(Garipov, Sysoev et al.2003)等研究了環(huán)碳酸酯與胺的反應(yīng)動力學(xué)特征。Kim(Kim, Kim et al.2001)等利用二氧化碳在相轉(zhuǎn)移催化劑（PTC）作用下與二縮水甘油醚和雙酚S的反應(yīng)產(chǎn)物（DGEBS）反應(yīng)制備二元環(huán)碳酸酯。Tamami(Tamami, Sohn et al.2004)等[利用環(huán)氧大豆油（ESBO）在催化劑作用下于110 ℃與二氧化碳反應(yīng)合成大豆油環(huán)碳酸酯（CSBO），進(jìn)而與胺類化合物反應(yīng)可合成NIPU。Oleg Figovsky(Oleg Figovsky 2007)等研究了星形環(huán)碳酸酯的制備和其在合成星形羥基NIPU齊聚物、星形NIPU、星形雜化NIPU中的應(yīng)用，同時(shí)還研究了丙烯酸環(huán)氧化合物、丙烯酸環(huán)碳酸酯、丙烯酸羥基NIPU齊聚物、丙烯酸NIPU、丙烯酸雜化NIPU的制備方法。通過采用特殊的樹枝狀氨基硅烷低聚物（dendroaminosilane oligomer），可以將硅烷鏈段引入NIPU網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)中，成為一種雜化非異氰酸酯聚氨酯（hybrid NIPU，HNIPU）(王北海 2007)。雜化非異氰酸酯聚氨酯（HNIPU）涂料具有更好的耐化學(xué)性和透氣性，是無分子間氫鍵類似結(jié)構(gòu)的傳統(tǒng)聚

氨酯涂料的1.5-2.5倍(Figovsky, Shapovalov et al.2001)。Poul-Ernst Meier,Farum(DK)(Poul-Ernst Meier 2004)發(fā)明了以HNIPU為基的膠粘劑和密封膠，用于金屬表面涂裝材料。

4.聚氨酯納米復(fù)合材料

聚氨酯/納米復(fù)合材料是未來的研究方向之一，近年來國內(nèi)外聚氨酯/納米復(fù)合材料的制備方法，主要介紹了共混法、原位聚合法、插層聚合法、溶膠-凝膠法等幾種常用的納米材料改性聚氨酯的方法(Dong-mei, Shao-ling et al.2011)。Zheng(Zheng, Gao et al.)等通過分散蒙脫石和多元醇，加入氨基烷基聚硅氧烷中和，制備蒙脫土/有機(jī)硅嵌段聚氨酯納米復(fù)合材料。Petrovic(Petrovic, Cho et al.2004)等用溶膠-凝膠法制備并表征了兩系列軟段質(zhì)量分?jǐn)?shù)為50%和70% 的嵌段SiO2 納米復(fù)合材料，研究了不同含量球形納米SiO2溶膠對軟、硬段相分離的影響。Yang hong-yan(Hongyan, Daocheng et al.2006)等以聚四氫呋喃醚二醇-1000(PTMG)、甲苯-2,4-二異氰酸酯（TDI）、3,3-二氯-4,4-二苯基甲烷二胺（MOCA）為原料，采用預(yù)聚法合成聚氨酯彈性體，并選用納米CaCO3 對聚氨酯彈性體進(jìn)一步增強(qiáng)，通過對納米CaCO3進(jìn)行表面改性及采用超聲波促進(jìn)納米粒子在基體中更好地分散，并考察了納米的CaCO3含量和合成溫度對聚氨酯彈性體力學(xué)性能的影響。You(You, Park et al.2011)等制備泡沫聚氨酯（PUF）/多壁碳納米管復(fù)合材料，并研究了其電學(xué)、熱學(xué)和形態(tài)學(xué)特性，為制備高性能復(fù)合材料提供了理論依據(jù)。

展望

1.聚氨酯制備方法多為傳統(tǒng)的制備方法，需進(jìn)一步研究新的制備方法，進(jìn)一步提高材料的綜合性能；

2.針對特定缺陷利用多元復(fù)合改性聚氨酯涂料進(jìn)行改良研究；

3.對于聚氨酯納米復(fù)合材料的研究，期待新型納米材料如納米金剛石、納米SiC等新型超硬納米材料的應(yīng)用研究；

4.聚氨酯復(fù)合材料還處于實(shí)驗(yàn)研究階段，工業(yè)應(yīng)用領(lǐng)域還有待于進(jìn)一步開發(fā)。

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