第一篇：動物性病原微生物的實(shí)驗(yàn)室檢測常規(guī)方法簡述

動物病原微生物的常規(guī)實(shí)驗(yàn)室檢測方法簡述

隨著我國動物養(yǎng)殖業(yè)的飛速發(fā)展，動物傳染病逐漸呈現(xiàn)出非典型性癥狀和混合感染的征狀日趨嚴(yán)重，許多病例僅靠臨床和病理診斷很難進(jìn)行確診，而實(shí)驗(yàn)室檢測已逐漸成為動物病原微生物確診的依據(jù)。目前，動物病原微生物實(shí)驗(yàn)室檢測經(jīng)常使用的方法主要包括病原學(xué)診斷，血清學(xué)診斷、分子生物學(xué)診斷。本文對動物病原微生物的實(shí)驗(yàn)室診斷方法進(jìn)行簡要的概括，為實(shí)驗(yàn)室診斷的初學(xué)者提供一些參考。1 病原學(xué)檢測 1.1 涂片鏡檢

對于送檢樣品首先一般要進(jìn)行涂片鏡檢，首先將樣品涂片，然后根據(jù)臨床診斷疑似感染病原情況進(jìn)行染色，常用的染色方法主要有革蘭氏染色、美藍(lán)染色、姬姆薩染色和抗酸性染色法等，最后在光學(xué)顯微鏡下觀察微生物形態(tài)，得出初步的結(jié)論。對于疑似的病毒性感染需要進(jìn)行電鏡觀察，電鏡是以電子束來代替可見光束，觀察物體時，分辨率就沒有波長要在可見光譜之內(nèi)的限制，因此其放大倍數(shù)和分辨率都比光學(xué)顯微鏡高得多。病毒顆粒極其微小，在17-300nm之間，光學(xué)顯微鏡無法觀察，只有電鏡才可以發(fā)現(xiàn)其形態(tài)。1.2 分離培養(yǎng)

病原分離是病原微生物檢測應(yīng)用較廣泛的方法，細(xì)菌、真菌、螺旋體和支原體需要將樣品處理后接種到其特定的培養(yǎng)基中進(jìn)行擴(kuò)增培養(yǎng)，然后劃線或涂到固體培養(yǎng)基上進(jìn)行分離培養(yǎng)，通過其生長形態(tài)、生化特性作出鑒定。立克次體、衣原體、病毒則需要將樣品接種到雞胚或特定的細(xì)胞分離病毒，通過病變情況鑒定病原。分離培養(yǎng)需要的時間較長，且分離的病原可能不是致病主要因素，但是它是病原微生物的基本鑒定方法，是病原學(xué)檢測的基礎(chǔ)。1.3 動物接種

將樣品處理后或分離培養(yǎng)的病原根據(jù)其不同的特性接種對待檢病原敏感的實(shí)驗(yàn)動物，通過觀察其是否發(fā)病和發(fā)病癥狀來進(jìn)行判斷，甚至還可以對發(fā)病實(shí)驗(yàn)動物繼續(xù)分離培養(yǎng)病原。分子生物學(xué)檢測 2.1 PCR

多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是目前病原檢測的最常用的分子生物學(xué)技術(shù)，具有高敏感性的特征，即使少量的感染也可以檢出，同時該方法也是許多其它檢測方法的基礎(chǔ)。其原理是將樣品的基因組DNA提出，在加熱條件下，DNA雙鏈變性分離為單鏈，加入合成的保守區(qū)域的特異性引物，在合適的溫度下和耐熱聚合酶的作用下引導(dǎo)DNA的合成，循環(huán)重復(fù)后即可得到大量的目的基因片段，經(jīng)電泳可以檢測。RNA病毒需要提取的是RNA，反轉(zhuǎn)錄生成DNA后再進(jìn)行PCR，即為RT-PCR檢測。目前，PCR技術(shù)發(fā)展已日趨完善，像實(shí)時熒光PCR、套式、多重、降落PCR已逐漸成為實(shí)驗(yàn)室常規(guī)檢測手段。2.2 核酸雜交

核酸雜交技術(shù)是較早的應(yīng)用于病原微生物的檢測技術(shù)，首先從樣品中提取核酸（DNA或RNA），將此核酸進(jìn)行變性處理后固定在固相載體上，加入帶有特殊標(biāo)記物的探針，利用堿基互補(bǔ)原理結(jié)合并固定探針，借助探針上標(biāo)記的物質(zhì)可以了解到是否有探針，甚至有多少探針被固定上去，再由此推知樣品中是否含有、甚至含有多少病原微生物。根據(jù)雜交核酸的不同，又可分為Southern印跡法(檢測DNA)及Northern印跡法(檢測RNA)。此外，斑點(diǎn)和原位雜交也是常用病原檢測技術(shù)。2.3 基因芯片

基因芯片技術(shù)在分子病原檢測領(lǐng)域顯示出了強(qiáng)大的生命力，主要是因?yàn)樗哂形⑿突?、集約化、標(biāo)準(zhǔn)化高通量的的特點(diǎn)。它的基本原理是將大量相似病原的基因保守片段的寡核苷酸分子固定于支持物上，然后與標(biāo)記的樣品或其PCR產(chǎn)物進(jìn)行雜交，通過檢測雜交信號的強(qiáng)弱進(jìn)而判斷樣品中靶分子的數(shù)量，特別適合數(shù)量較多的樣品的鑒別診斷，在規(guī)?；B(yǎng)殖生產(chǎn)中非常具有應(yīng)用前景。2.3 序列測定

序列測定耗時較長，但是比其它方法更為可靠，是確診的依據(jù)。測序分為全序列測定和保守區(qū)域的測定，全序列測定主要是一些核酸序列較短的病毒，但有時為了對病原進(jìn)行序列分析，有的細(xì)菌、支原體、衣原體等也進(jìn)行全序列測定，但耗費(fèi)巨大。3 血清學(xué)診斷

機(jī)體受致病病感染后，其免疫系統(tǒng)被刺激后發(fā)生免疫應(yīng)答而產(chǎn)生特異性抗體，用已知的特異性抗原檢測患者體液中有無相應(yīng)特異抗體及其效價的動態(tài)變化，可作為某些傳染病的輔助診斷。一般采取動物的血清進(jìn)行試驗(yàn)，故稱為血清學(xué)診斷。

3.1 ELISA 又稱酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，是最常用的血清學(xué)診斷方法。ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記，結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用于病原檢驗(yàn)的ELISA主要有:雙抗體夾心法測抗原、雙抗原夾心法測抗體、間接法測抗體、競爭法測抗體、競爭法測抗原、捕獲包被法測抗體和ABS-ELISA法。3.2 補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)

補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)是在補(bǔ)體參與下，以綿羊紅細(xì)胞和溶血素作為指示系統(tǒng)的抗原抗體反應(yīng)。補(bǔ)體無特異性，能與任何一組抗原抗體復(fù)合物結(jié)合而引起反應(yīng)。如果補(bǔ)體與綿羊紅細(xì)胞、溶血素的復(fù)合物結(jié)合，就會出現(xiàn)溶血現(xiàn)象，如果與病原及相應(yīng)抗體復(fù)合物結(jié)合，就會出現(xiàn)溶菌現(xiàn)象，而補(bǔ)體不單獨(dú)和抗原或抗體結(jié)合。如果出現(xiàn)溶菌，是補(bǔ)體與待檢系統(tǒng)結(jié)合的結(jié)果，說明抗原抗體是相對應(yīng)的，如果出現(xiàn)溶血，說明抗原抗體不相對應(yīng)。該方法雖操作復(fù)雜但敏感性高、特異性強(qiáng)，能測出少量抗原和抗體，所以應(yīng)用范圍也較廣。3.3 間接免疫熒光

間接免疫熒光的原理與簡接ELISA的原理相似，只是用熒光素替代酶標(biāo)記抗體，主要是用來檢測組織中的病原。首先將組織制成切片，加入能與待檢病原進(jìn)行反應(yīng)的特異一抗，再加入熒光二抗，通過熒光顯微鏡就可以觀察病原感染情況。以前制約免疫熒光方法使用的環(huán)節(jié)是熒光顯微鏡的數(shù)量太少，但隨著熒光技術(shù)的發(fā)展，熒光顯微鏡已成為實(shí)驗(yàn)室里不可缺少的儀器。3.4 免疫膠體金

免疫膠體金技術(shù)是近年來發(fā)展最快的一種血清學(xué)診斷技術(shù)，它具有其它檢測技術(shù)所無法比擬的簡單、快速、準(zhǔn)確和無污染的優(yōu)點(diǎn)，具有非常廣闊的臨床應(yīng)用前景。膠體金是由氯金酸在還原劑的作用下，聚合成為特定大小的金顆粒，弱堿環(huán)境下帶負(fù)電荷，可與蛋白質(zhì)分子的正電荷基團(tuán)形成牢固的結(jié)合，由于這種結(jié)合是靜電結(jié)合，所以不影響蛋白質(zhì)的生物特性。最常用的免疫膠體金主要有免疫膠體金光鏡染色法，斑點(diǎn)免疫金滲濾法，膠體金免疫層析法。以上方法是動物病原微生物目前最常用的檢測方法，每種待檢樣品都要根據(jù)其疑似病原的特性選擇不同的方法，且大多數(shù)病原需要兩種甚至兩種以上的方法才可以確診，這需要在實(shí)際應(yīng)用中靈活選擇。

第二篇：病原微生物實(shí)驗(yàn)室

病原微生物實(shí)驗(yàn)室檢查

為進(jìn)一步加強(qiáng)病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全的監(jiān)督管理，特別是病原微生物菌（毒）種及樣本的保藏管理工作，預(yù)防生物安全事故的發(fā)生，近日醫(yī)療衛(wèi)生監(jiān)督科對全市設(shè)置病原微生物實(shí)驗(yàn)室的7家醫(yī)療機(jī)構(gòu)（4家市級醫(yī)院、3家中心衛(wèi)生院）的生物安全進(jìn)行監(jiān)督檢查。檢查內(nèi)容包括實(shí)驗(yàn)室基本情況、組織制度、建筑設(shè)計(jì)和設(shè)施、防護(hù)設(shè)備、人員培訓(xùn)和上崗情況、病原微生物菌（毒）種和樣本的管理等，并抽查了相關(guān)臺賬資料。

本次共檢查醫(yī)療機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)7家，僅第一人民醫(yī)院1家是備案實(shí)驗(yàn)室。抽查從事實(shí)驗(yàn)室業(yè)務(wù)的衛(wèi)生技術(shù)人員29人，其中中級職稱12人，初級職稱17人。7家病原微生物實(shí)驗(yàn)室均按要求劃分清潔區(qū)、半污染區(qū)、污染區(qū)，配備有BSC1000-II生物安全柜，并能出示實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊、感染應(yīng)急預(yù)案及工作人員生物安全培訓(xùn)記錄。

檢查中發(fā)現(xiàn)主要存在以下問題：

一、大部分實(shí)驗(yàn)室未經(jīng)嘉興市衛(wèi)生局備案；

二、大部分實(shí)驗(yàn)室門非自動關(guān)閉，可開啟窗戶無紗窗；

三、未配備洗眼設(shè)施或應(yīng)急噴淋裝置；

四、在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)直接使用外排式高壓蒸汽鍋滅菌等。

對存在的問題當(dāng)場均提出了整改意見，接下來我所將對存在問題的醫(yī)療機(jī)構(gòu)進(jìn)行復(fù)查，督促整改到位，有效預(yù)防生物安全事故發(fā)現(xiàn)。

桐鄉(xiāng)市衛(wèi)生監(jiān)督所

2011.9.20

第三篇：病原微生物實(shí)驗(yàn)室簡介

病原微生物實(shí)驗(yàn)室簡介

病原微生物實(shí)驗(yàn)室的檢測項(xiàng)目和檢測方案根據(jù)臨床需要綜合設(shè)計(jì)，做到結(jié)果穩(wěn)定可靠、效率高、檢測周期短，從而為臨床診斷和治療提供及時和可靠的依據(jù)。

血液系統(tǒng)惡性疾病患者常伴免疫功能低下，尤其造血干細(xì)胞移植或長期的放化療后，患者的免疫功能更低，易繼發(fā)各種病原微生物感染，甚至機(jī)會性致病菌爆發(fā)感染，部分患者還可因感染繼發(fā)惡性淋巴細(xì)胞增殖性疾病，常常危及生命危險。

目前常用的病原微生物檢測方法有：病原微生物培養(yǎng)、免疫血清學(xué)檢測、抗原檢測和基因檢測。由于血液系統(tǒng)惡性疾病患者多免疫功能低下，產(chǎn)生抗體困難;病原微生物培養(yǎng)檢測周期長，而且受多種因素影響陽性率很低，不能滿足臨床需要。故檢測病原基因或抗原更能反應(yīng)感染的狀態(tài)。

病原微生物實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)已開展了多種血液病患者中常見的致病和機(jī)會性致病的病原微生物定量和定性檢測項(xiàng)目。主要應(yīng)用PCR基因擴(kuò)增檢測的方法對病原微生物進(jìn)分型鑒定，具有檢測靈敏度高、分型準(zhǔn)確、窗口期短、報(bào)告速度快的優(yōu)勢。所配備的儀器主要有AB 3500實(shí)時熒光定量PCR儀、AB 9700和AB Verity型普通PCR儀。

本實(shí)驗(yàn)室的檢測項(xiàng)目和檢測方案根據(jù)臨床需要綜合設(shè)計(jì)，做到結(jié)果穩(wěn)定可靠、效率高、檢測周期短，從而為臨床診斷和治療提供及時和可靠的依據(jù)。

病原微生物實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有人員5人，其中特聘教授1人、碩士學(xué)歷2人、本科1人，?？?人。

項(xiàng)目介紹：

1。病原微生物PCR定性檢測項(xiàng)目：

1)人類皰疹病毒篩查(HHV1-HHV8)

同時篩查8種人類皰疹病毒

2)出血性膀胱炎病毒(BKV、JCV、SV40)

3)人類T淋巴細(xì)胞白血病病毒1型(HTLV1-RNA)

4)真菌PCR

2。病原微生物PCR定量檢測項(xiàng)目：

人類皰疹病毒

1)單純皰疹病毒(HSV-

1、HSV-2)

2)水痘-帶狀皰疹病毒(VZV)

3)EB病毒(EBV)

4)巨細(xì)胞病毒(CMV)

5)人類皰疹病毒6型(HHV-6)

6)人類皰疹病毒7型(HHV-7)

7)人類皰疹病毒8型(HHV-8)

呼吸道病毒：

1)呼吸道合胞病毒

2)腺病毒(ADV)

腸道病毒：

1)柯薩奇病毒

2)輪狀病毒

其他特殊病原微生物：

1)微小病毒B19

2)結(jié)核桿菌 3)卡氏肺囊蟲 4)支原體

3。其它病原微生物檢測項(xiàng)目： 1)內(nèi)毒素

2)真菌1，3-β-D葡聚糖檢測(G試驗(yàn))

第四篇：金屬檢測常規(guī)方法

主流金屬制品表面缺陷在線檢測方法。

一、漏磁檢測

漏磁檢測技術(shù)廣泛應(yīng)用于鋼鐵產(chǎn)品的無損檢測。其檢測原理是，利用磁源對被測材料局部磁化，如材料表面存在裂紋或坑點(diǎn)等缺陷，則局部區(qū)域的磁導(dǎo)率降低、磁阻增加，磁化場將部分從此區(qū)域外泄，從而形成可檢驗(yàn)的漏磁信號。在材料內(nèi)部的磁力線遇到由缺陷產(chǎn)生的鐵磁體間斷時，磁力線將會發(fā)生聚焦或畸變，這一畸變擴(kuò)散到材料本身之外，即形成可檢測的磁場信號。采用磁敏元件檢測漏磁場便可得到有關(guān)缺陷信息。因此，漏磁檢測以磁敏電子裝置與磁化設(shè)備組成檢測傳感器，將漏磁場轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘柼峁┙o二次儀表。

漏磁檢測技術(shù)的整個過程為：激磁-缺陷產(chǎn)生漏磁場-傳感器獲取信號-信號處理-分析判斷。在磁性無損檢測中，磁化時實(shí)現(xiàn)檢測的第一步，它決定著被測量對象(如裂紋)能不能產(chǎn)出足夠的可測量和可分辨的磁場信號，同時也影響著檢測信號的性能，故要求增強(qiáng)被測磁化缺陷的漏磁信號。被測構(gòu)件的磁化由磁化器來實(shí)現(xiàn)，主要包括磁場源和磁回路等部分。因此，針對被測構(gòu)件特點(diǎn)和測量目的，選擇合適的磁源和設(shè)計(jì)磁回路是磁化器優(yōu)化的關(guān)鍵。

漏磁檢測金屬表面缺陷的物理基礎(chǔ)使帶有缺陷的鐵磁件在磁場中被磁化后，在缺陷處會產(chǎn)生漏磁場，通過檢測漏磁場來辯識有無缺陷。因此，研究缺陷漏磁場的特點(diǎn)，確定缺陷的特征，就成為漏磁檢測理論和技術(shù)的關(guān)鍵。要測量漏磁場，測量裝置須具有較高的靈敏度，特別是能測空間點(diǎn)磁場，還應(yīng)有較大的測量范圍和頻帶；測量裝置須具有二維及三維的精確步進(jìn)或調(diào)整能力，以確定傳感器的空間位置；同時，應(yīng)用先進(jìn)的信號處理技術(shù)去除噪聲，確定實(shí)際的漏磁場量。Foerster，Athertion 已成功應(yīng)用霍爾器件檢測缺陷，霍爾器件可在z—Y二維空間步進(jìn)的最小間隔分別為2μm和0.1μm。

漏磁檢測不僅能檢測表面缺陷，且能檢測內(nèi)部微小缺陷；可檢測到5X10mm。的微小缺陷；造價較低廉。其缺點(diǎn)是，只能用于金屬材料的檢測，無法識別缺陷種類。目前，漏磁檢測在低溫金屬材料缺陷檢測方面已進(jìn)入實(shí)用階段。如日本川崎公司千葉廠于1993年開發(fā)出在線非金屬夾雜物檢測裝置；日本NKK公司福岡廠于同年研制出一種超高靈敏度的磁敏傳感器，用于檢測鋼板表面缺陷。

二、紅外線檢測與技術(shù)

紅外線檢測是通過高頻感應(yīng)線圈使連鑄板坯表面產(chǎn)生感應(yīng)電流，在高頻感應(yīng)的集膚效應(yīng)作用下，其穿透深度小于1 mm，且在表面缺陷區(qū)域的感應(yīng)電流會導(dǎo)致單位長度的表面上消耗更多電能，引起連鑄板坯局部表面的溫度上升。該升溫取決于缺陷的平均深度、線圈工作頻率、特定輸入電能，以及被檢鋼坯電性能、熱性能、感應(yīng)線圈寬度和鋼運(yùn)動速度等因素。當(dāng)其它各種因素在一定范圍內(nèi)保持恒定時，就可通過檢測局部溫升值來計(jì)算缺陷深度，而局部溫升值可通過紅外線檢測技術(shù)加以檢定。利用該技術(shù)，挪威Elkem公司于1990年研制出Ther—mOMatic連鑄鋼坯自動檢測系統(tǒng)，日本茨城大學(xué)工學(xué)部的岡本芳三等在檢測板坯試件表面裂紋和微小針孔的實(shí)驗(yàn)研究中也利用此法得到較滿意的結(jié)果。

三、超聲波探傷技術(shù)

超聲波檢測是利用聲脈在缺陷處發(fā)生特性變化的原理來檢測。接觸法是探頭與工件表面之間經(jīng)一層薄的起傳遞超聲波能量作用的耦合劑直接接觸。為避免空氣層產(chǎn)生強(qiáng)烈反射，在探測時須將接觸層間的空氣排除干凈，使聲波入射工件，操作方便，但其對被測工件的表面光潔度要求較高。液浸法是將探頭與工件全部浸入于液體或探頭與工件之間，局部以充液體進(jìn)行探傷的方法。脈沖反射法是當(dāng)脈沖超聲波入射至被測工件后，聲波在工件內(nèi)的反射狀況就會顯示在熒光屏上，根據(jù)反射波的時間及形狀來判斷工件內(nèi)部缺陷及材料性質(zhì)的方法。目前，超聲波探傷技術(shù)已成功應(yīng)用于金屬管道內(nèi)部的缺陷檢測。

四、光學(xué)檢測法

機(jī)器視覺是以圖像處理理論為核心，屬于人工智能范疇的一個領(lǐng)域，它是以數(shù)字圖像處理、模式識別、計(jì)算機(jī)技術(shù)為基礎(chǔ)的信息處理科學(xué)的重要分支，廣泛應(yīng)用于各種無損檢測技術(shù)中?；跈C(jī)器視覺的連鑄板坯表面缺陷檢測方法的基本原理是：一定的光源照在待測金屬表面上，利用高速CCD攝像機(jī)獲得連鑄板坯表面圖像，通過圖像處理提取圖像特征向量，通過分類器對表面缺陷進(jìn)行檢測與分類。20世紀(jì)70年代中期，El本Jil崎公司就開始研制鍍錫板在線機(jī)器視覺檢測裝置。1988年，美國Sick光電子公司也成功地研制出平行激光掃描檢測裝置，用以在線檢測金屬表面缺陷?；跈C(jī)器視覺的表面在線檢測與分類器設(shè)計(jì)的研究工作目前在國內(nèi)尚處于起步階段。1990年，華中理工大學(xué)采用激光掃描方法測量冷軋鋼板寬度和檢測孔洞缺陷，并開發(fā)了相應(yīng)的信號處理電路；1995年又研制出冷軋連鑄板坯表面軋洞、重皮和邊裂等缺陷檢測和最小帶寬測量的實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)。1996年，寶鋼與原航天部二院聯(lián)合研制出冷軋連鑄板坯表面缺陷的在線檢測系統(tǒng)，并進(jìn)行了大量的在線試驗(yàn)研究。近年來，北京科技大學(xué)、華中科技大學(xué)等也研制出較為實(shí)用化的在線檢測系統(tǒng)。

從檢測技術(shù)的觀點(diǎn)來看，基于機(jī)器視覺的鋼表面缺陷檢測系統(tǒng)面臨困境：①要求檢測到的缺陷的幾何尺寸越來越小，有的甚至小于0.1 mm；② 檢測對象可能處于運(yùn)動狀態(tài)，導(dǎo)致采集的圖像抖動較大；③現(xiàn)場環(huán)境較惡劣，往往受煙塵、油污、溫度高等因素的影響，引起缺陷圖像信噪比下降；④表面缺陷的多樣性(如冷軋連鑄板坯表面可達(dá)100多種)，不同缺陷之間的光學(xué)特性、電磁特性不同；有的缺陷之間的差異不明顯。因此，基于機(jī)器視覺的連鑄板坯表面缺陷分類器要求具有收斂速度快、魯棒性好、自學(xué)習(xí)功能等特點(diǎn)。

第五篇：病原微生物實(shí)驗(yàn)室評估程序-定稿

附件

高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)室資格審批工作程序

第一章

總

則

第一條

為確保高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)室資格審批（以下簡稱資格審批）工作的公正、公開、公平，依據(jù)《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》和《人間傳染的高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)室和實(shí)驗(yàn)活動生物安全審批管理辦法》（以下簡稱《辦法》）等，制定本程序。

第二條

高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)室是指三級、四級生物安全實(shí)驗(yàn)室；高致病性病原微生物是指衛(wèi)生部頒布的《人間傳染的病原微生物名錄》中規(guī)定的第一類、第二類病原微生物。

第三條

資格審批工作包括申報(bào)、評估論證、批準(zhǔn)。

第四條

實(shí)驗(yàn)室資格審批的申請資料，經(jīng)所在地省級衛(wèi)生行政部門審查同意后，向衛(wèi)生部申報(bào)。

第二章

申

報(bào)

第五條

申請高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)室資格的單位應(yīng)具備《辦法》第六條規(guī)定的條件。

第六條

申請高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)室資格應(yīng)按照《辦法》第七條的規(guī)定，提交完整的資料。

《高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)室資格申請表》可從衛(wèi)生部網(wǎng)站下載（網(wǎng)址：004km.cn）。

第七條

所有申請資料應(yīng)一式1份。申請資料應(yīng)當(dāng)使用A4規(guī)格紙張打?。ㄖ形氖褂盟误w小4號字，英文使用12號字）。申報(bào)的各項(xiàng)內(nèi)容 1 應(yīng)當(dāng)完整、清楚。申請資料的復(fù)印件應(yīng)當(dāng)足夠清楚并與原件一致。所有申請資料應(yīng)加蓋申請單位公章。

第八條

申請單位將符合要求的申請資料報(bào)送省級衛(wèi)生行政部門。省級衛(wèi)生行政部門對申請資料的合法性、完整性及規(guī)范性進(jìn)行審核。對申請材料不齊全或者不符合規(guī)定形式的，應(yīng)當(dāng)在5日內(nèi)出具申請材料補(bǔ)正通知書；對申請材料齊全或者符合規(guī)定形式的，應(yīng)當(dāng)在15日內(nèi)提出初審意見，并將初審意見和有關(guān)資料報(bào)衛(wèi)生部。

省級衛(wèi)生行政部門應(yīng)當(dāng)直接向衛(wèi)生部報(bào)送資料，不得委托申請單位向衛(wèi)生部報(bào)送資料。

第九條

衛(wèi)生部收到申報(bào)資料后，對申報(bào)資料進(jìn)行形式審查。符合要求的，在30日內(nèi)完成現(xiàn)場評估論證工作。

第三章

現(xiàn)場評估論證

第十條

衛(wèi)生部組織專家組進(jìn)行現(xiàn)場評估論證，有關(guān)要求書面告知申請單位。

第十一條

專家組由5～7名相關(guān)專業(yè)的專家組成，專家由衛(wèi)生部從病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全專家?guī)熘羞x取。專家組組長由衛(wèi)生部指定，為現(xiàn)場評估論證工作技術(shù)總負(fù)責(zé)人。

衛(wèi)生部可指派1~2名管理或?qū)I(yè)人員以觀察員的身份參加現(xiàn)場評估論證工作。

第十二條

現(xiàn)場評估論證時間一般為2~3天。在現(xiàn)場評估論證前，專家組長應(yīng)當(dāng)提前制定現(xiàn)場技術(shù)考核初步計(jì)劃。

第十三條

衛(wèi)生部應(yīng)當(dāng)在專家組到達(dá)評估地前3天將其人員組成情況告知申請單位。申請單位如對專家組成員有異議的，應(yīng)當(dāng)在接到通知 后24小時內(nèi)提出需回避的專家名單，并說明理由，由衛(wèi)生部做出是否回避的決定。

第十四條

現(xiàn)場評估程序包括：專家組預(yù)備會議、首次會議、資料審查、實(shí)驗(yàn)室考察、現(xiàn)場模擬操作考核、理論知識測試、專家組內(nèi)部會議、末次會議等。

專家組依據(jù)計(jì)劃進(jìn)行現(xiàn)場評估論證，申請單位應(yīng)積極配合，并提供相應(yīng)協(xié)助。

第十五條

專家組在現(xiàn)場評估論證工作開始前召開全體專家組成員參加的預(yù)備會議，會議內(nèi)容包括：

（一）專家組長重申評估論證工作的公正、客觀、保密要求，專家組全體人員簽署公正性聲明和保密協(xié)議；

（二）明確評估范圍、內(nèi)容、依據(jù)和要求；

（三）明確評估日程和專家組成員分工，確定現(xiàn)場技術(shù)考核計(jì)劃，準(zhǔn)備現(xiàn)場評估和論證所需考核試題等有關(guān)資料和表格。

第十六條

召開首次會議。參加會議人員包括專家組成員、申請單位負(fù)責(zé)人及相關(guān)人員。會議由專家組組長主持，會議程序及內(nèi)容如下：

（一）介紹專家組成員和分工；

（二）宣布現(xiàn)場評估論證工作安排、要求和時間表；

（三）明確評估的方法、程序和評定原則；

（四）向申請單位做公正和保密的承諾；

（五）申請單位負(fù)責(zé)人報(bào)告工作情況；

（六）與申請單位確認(rèn)現(xiàn)場評估所需現(xiàn)場操作和面試考核項(xiàng)目以及被考核人員名單。

第十七條

資料審查。專家組審查實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊、程序文件、危害評估報(bào)告、標(biāo)準(zhǔn)操作程序、相關(guān)記錄表格以及《高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)室從事實(shí)驗(yàn)活動資格現(xiàn)場檢查表》涉及的其他資料，并對審查情況進(jìn)行記錄。

第十八條

實(shí)驗(yàn)室考察。由專家組根據(jù)《高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)室從事實(shí)驗(yàn)活動資格現(xiàn)場檢查表》的內(nèi)容對實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行實(shí)地考察，并對考察情況進(jìn)行記錄。

第十九條

現(xiàn)場模擬操作考核。由專家組從實(shí)驗(yàn)室操作人員名單中抽取30%的人員（不少于4人）進(jìn)行現(xiàn)場操作考核，并對考核情況進(jìn)行記錄。

現(xiàn)場模擬操作考核題目由專家組制訂，現(xiàn)場操作應(yīng)涉及申請范圍的主要項(xiàng)目，應(yīng)當(dāng)覆蓋主要儀器設(shè)備、主要人員和主要操作技術(shù)。

由每名參試人員抽取1個題目進(jìn)行現(xiàn)場操作，由2位專家組成員進(jìn)行評判。評判標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)準(zhǔn)操作程序。

第二十條

理論知識測試。采取面試形式，全體實(shí)驗(yàn)室人員均應(yīng)參加，參加現(xiàn)場模擬操作考核的人員除外。由2位專家組成員組成考核組，對每名被考核人員進(jìn)行單獨(dú)面試并進(jìn)行評判。

面試考核內(nèi)容及評判標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)為《傳染病防治法》、《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》、《人間傳染的高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)室和實(shí)驗(yàn)活動生物安全審批管理辦法》（衛(wèi)生部令第50號）、《人間傳染的病原微生物名錄》、《可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運(yùn)輸管理規(guī)定》（衛(wèi)生部令第45號）、《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》（GB 19489—2004）、本實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊、程序文件、標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SOP）以及WHO生物安全手冊第三版等相關(guān)內(nèi)容。

接受現(xiàn)場操作及面試考核的人員中，未合格者應(yīng)當(dāng)重新培訓(xùn)，經(jīng)考核合格后方能上崗。

第二十一條

專家組內(nèi)部會議。由專家組組長主持，全體專家組成員參加，會議程序及內(nèi)容：

（一）專家組成員分別報(bào)告資料審查、現(xiàn)場模擬操作考核、理論和知識測試、實(shí)驗(yàn)室檢查等結(jié)果，討論并提出評估論證意見；

（二）編寫并通過《高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)室從事實(shí)驗(yàn)活動資格現(xiàn)場評估論證報(bào)告》。

第二十二條

末次會議。會議由專家組組長主持，參加人員包括專家組成員、申請單位負(fù)責(zé)人及相關(guān)人員。會議程序及內(nèi)容：

（一）專家組組長宣讀評估論證報(bào)告及審查結(jié)論；

（二）專家組指出存在的問題，提出整改建議；

（三）專家組與申請單位人員溝通交流意見。

第二十三條

專家組長應(yīng)在現(xiàn)場評估論證結(jié)束之日起5日內(nèi)將評估論證報(bào)告、原始記錄及有關(guān)資料移交衛(wèi)生部。評估論證報(bào)告應(yīng)當(dāng)由專家組全體成員簽字。

申請單位應(yīng)按照專家組提出的整改意見，在三個月內(nèi)完成整改工作，并向衛(wèi)生部提交整改報(bào)告。衛(wèi)生部在收到整改報(bào)告之日起的20日內(nèi)完成整改復(fù)核工作。整改復(fù)核工作由原現(xiàn)場評估論證專家組成員完成。

第四章

批

準(zhǔn)

第二十四條

衛(wèi)生部在收到專家組評估論證報(bào)告或者整改復(fù)核意見之日起20日內(nèi)，做出是否批準(zhǔn)的決定。對予以批準(zhǔn)的，由衛(wèi)生部頒 發(fā)《高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)室資格證書》。對不予批準(zhǔn)的，由衛(wèi)生部書面通知申請單位，并說明理由。申請單位對衛(wèi)生部不予批準(zhǔn)結(jié)論有異議的，可自收到通知書之日起15日內(nèi)書面向衛(wèi)生部提出復(fù)核申請，逾期不予受理。

未通過資格審批的單位，6個月之后可以重新申請。

第二十五條 《高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)室資格證書》的有效期為五年。實(shí)驗(yàn)室需要繼續(xù)從事高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)活動的，應(yīng)在有效期滿前6個月按照本程序規(guī)定，重新申請《高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)室資格證書》。

第五章

評估論證工作紀(jì)律

第二十六條

專家組成員不得與申請單位有利害關(guān)系，否則應(yīng)主動提出回避；衛(wèi)生行政部門工作人員不得作為專家組成員參加評審。

第二十七條

專家組成員要嚴(yán)格按照指定的時間到達(dá)和離開現(xiàn)場評估目的地。評審期間，專家組成員不得私下與申請單位聯(lián)系和接觸、傳遞評審相關(guān)信息；專家組各項(xiàng)費(fèi)用由衛(wèi)生部負(fù)責(zé)。專家組在評審地的接待工作由省級衛(wèi)生行政部門安排，嚴(yán)禁申請單位參加接待工作。專家組不得提出任何與評審工作無關(guān)的要求。

第二十八條

現(xiàn)場評估過程中，嚴(yán)禁申請單位弄虛作假，嚴(yán)禁通過任何形式對評審施加壓力，嚴(yán)禁以各種理由不予配合或拒絕檢查。如果出現(xiàn)上述問題，專家組有權(quán)終止評審，衛(wèi)生部也將不予批準(zhǔn)。

第六章

附

則

第二十九條

本程序自頒布之日起施行。