第一篇：關(guān)于核實(shí)獨(dú)立設(shè)置縣鄉(xiāng)水產(chǎn)技術(shù)[精選]

關(guān)于核實(shí)獨(dú)立設(shè)置縣鄉(xiāng)水產(chǎn)技術(shù)

推廣機(jī)構(gòu)有關(guān)情況的說明

各省（區(qū)、市）水產(chǎn)技術(shù)推廣站（中心）：

按照部科技教育司的要求，我站擬對2011年各省（區(qū)、市）上報的獨(dú)立設(shè)置縣鄉(xiāng)水產(chǎn)推廣機(jī)構(gòu)的有關(guān)情況進(jìn)行核實(shí)，具體要求如下：

一、各省（市、區(qū)）水產(chǎn)技術(shù)推廣站要高度重視此項(xiàng)工作。經(jīng)核實(shí)的數(shù)據(jù)將作為我部制定基層水產(chǎn)技術(shù)推廣體系條件建設(shè)和補(bǔ)助項(xiàng)目方案的重要依據(jù)。

二、請各?。ㄊ小^(qū)）在2011年獨(dú)立設(shè)置水產(chǎn)技術(shù)推廣機(jī)構(gòu)情況調(diào)查上報數(shù)據(jù)的基礎(chǔ)上（農(nóng)漁技體[2011]25號文），進(jìn)一步核實(shí)有關(guān)情況。重點(diǎn)核實(shí)：是否有漏報或錯報;上報水產(chǎn)技術(shù)推廣機(jī)構(gòu)的名單是否規(guī)范。

三、有關(guān)要求

（一）獨(dú)立設(shè)置機(jī)構(gòu)的標(biāo)準(zhǔn)為：經(jīng)當(dāng)?shù)鼐幬鷱?fù)成立，有機(jī)構(gòu)名稱、有編制、有專職人員，主要承擔(dān)水產(chǎn)技術(shù)推廣職能的推廣機(jī)構(gòu)。

（二）各省（區(qū)、市）應(yīng)根據(jù)我站反饋的各省獨(dú)立設(shè)置縣鄉(xiāng)水產(chǎn)技術(shù)推廣機(jī)構(gòu)匯總表進(jìn)行核實(shí)，如匯總表上有遺漏的，要及時補(bǔ)充，務(wù)必做到一個不漏。各省上報的獨(dú)立設(shè)置機(jī)構(gòu)數(shù)應(yīng)盡量與《2011年水產(chǎn)技術(shù)推廣統(tǒng)計報表》中上報的水產(chǎn)專業(yè)站數(shù)量相一致。

（三）上報獨(dú)立設(shè)置水產(chǎn)技術(shù)推廣機(jī)構(gòu)的名稱應(yīng)規(guī)范。應(yīng)充分體現(xiàn)事業(yè)單位和獨(dú)立設(shè)置的特點(diǎn)，在有關(guān)規(guī)定允許的情況下，盡可能表述為水產(chǎn)（或漁業(yè)）技術(shù)推廣站，盡可能避免名稱中出現(xiàn)種植、畜牧、獸醫(yī)、農(nóng)機(jī)等字眼，否則在有關(guān)方案制定中可能作為綜合站予以核減。

（四）請各?。ㄊ小^(qū)）按獨(dú)立設(shè)置的縣、鄉(xiāng)水產(chǎn)技術(shù)推廣機(jī)構(gòu)匯總表的參與樣式（附件），以省為單位進(jìn)行匯總后，統(tǒng)一上報。計劃單列市單獨(dú)統(tǒng)計，有關(guān)數(shù)據(jù)報省匯總。

（五）請各省（市、區(qū)）于6月20日前完成核實(shí)工作，相關(guān)匯總表的紙質(zhì)和電子版發(fā)送我站體系建設(shè)處。

聯(lián)系人：錢銀龍，010-59195074，***。電子郵箱：tgc@nftec.org.cn。

全國水產(chǎn)技術(shù)推廣總站

二〇一三年五月二日

第二篇：獨(dú)立董事設(shè)置與工作細(xì)則

獨(dú)立董事設(shè)置與工作細(xì)則

1.1總則

1.1.1為完善.規(guī)范和保障康乃爾化學(xué)工業(yè)股份有限公司（以下簡稱“公司”）獨(dú)立董事的權(quán)利和義務(wù)，充分發(fā)揮獨(dú)立董事作用，根據(jù)《中華人民共和國公司法》（2005年修訂）（以下簡稱《公司法》）.《中華人民共和國證券法》（2005年修訂）（以下簡稱《證券法》）及其他有關(guān)法律法規(guī)和《康乃爾化學(xué)工業(yè)股份有限公司章程》（以下簡稱“公司章程”）規(guī)定，制定本制度。

1.1.2獨(dú)立董事是指不在公司擔(dān)任除董事外的其他職務(wù)，并與公司及主要股東不存在可能妨礙其進(jìn)行獨(dú)立客觀判斷的關(guān)系的董事。1.2一般規(guī)定

1.2.1獨(dú)立董事對公司及全體股東負(fù)有誠信與勤勉義務(wù)。獨(dú)立董事應(yīng)當(dāng)按照相關(guān)法律法規(guī)和公司章程的要求，認(rèn)真履行職責(zé)，維護(hù)公司整體利益，在公司股票上市后獨(dú)立董事應(yīng)尤其要關(guān)注中小股東的合法權(quán)益不受損害。

1.2.2獨(dú)立董事人數(shù)不得低于公司董事會成員人數(shù)的三分之一，其中至少有一名會計專業(yè)人士（具有高級職稱或注冊會計師資格）。

獨(dú)立董事應(yīng)當(dāng)按照中國證監(jiān)會和公司上市掛牌證券交易所（“證券交易所”）的要求，參加中國證監(jiān)會.證券交易所及其授權(quán)機(jī)構(gòu)所組織的專門培訓(xùn)。

每名獨(dú)立董事最多兼任不得超過五家上市公司（包括本公司）的獨(dú)立董事職務(wù)。

每屆獨(dú)立董事的具體人數(shù)由換屆選舉董事會的股東大會通過決議予以確定。1.3獨(dú)立董事的任職條件獨(dú)立性 1.3.1獨(dú)立董事應(yīng)符合下列基本條件：

根據(jù)法律.行政法規(guī)及其他有關(guān)規(guī)定，具備擔(dān)任上市公司董事的資格； 具有法律.法規(guī)和其他規(guī)范性文件中所要求的獨(dú)立性； 具備上市公司運(yùn)作的基本知識，熟悉相關(guān)法律.行政法規(guī).規(guī)章及規(guī)則； 具有五年以上法律.經(jīng)濟(jì)或者其他履行獨(dú)立董事職責(zé)所必需的工作經(jīng)驗(yàn)； 公司章程規(guī)定的其他條件。1.3.2下列人員不得擔(dān)任公司獨(dú)立董事：

（一）直接或間接持有本公司已發(fā)行股份1%以上或者是本公司前十名股東中的自然人股東及其直系親屬；

（二）在直接或間接持有本公司已發(fā)行股份 5%以上的股東單位或者在本公司前五名股東單位任職的人員及其直系親屬；

（三）最近一年內(nèi)曾經(jīng)具有前三項(xiàng)所列舉情形的人員；

（四）已在5家（含5家）上市公司擔(dān)任獨(dú)立董事的人員

（五）為公司或附屬公司提供財務(wù).法律.咨詢等服務(wù)的人員；

（六）根據(jù)法律法規(guī)和公司章程不得擔(dān)任公司董事的人員；

（七）中國證監(jiān)會有關(guān)規(guī)定認(rèn)定的其他人員。1.4獨(dú)立董事的提名選舉和更換

1.4.1獨(dú)立董事由公司董事會.監(jiān)事會.單獨(dú)或者合并持有公司已發(fā)行股份百分之一以上的股東提名，由股東大會選舉或更換。

獨(dú)立董事的提名人在提名前應(yīng)征得被提名人的同意。提名人應(yīng)對被提名人擔(dān)任獨(dú)立董事的資格和獨(dú)立性發(fā)表意見，被提名人應(yīng)當(dāng)就其本人與公司之間不存在任何影響其獨(dú)立客觀判斷的關(guān)系發(fā)表聲明。在選舉獨(dú)立董事的股東大會召開前，公司董事會應(yīng)當(dāng)按照規(guī)定公布上述內(nèi)容。

1.4.2獨(dú)立董事每屆任期與公司其他董事任期相同，任期屆滿，可連選連任，但是連任時間不得超過六年。

1.4.3獨(dú)立董事連續(xù)三次未親自出席董事會會議的，由董事會提請股東大會予以撤換。除出現(xiàn)上述情況及《公司法》中規(guī)定的不得擔(dān)任董事的情形外，獨(dú)立董事任期屆滿前不得無故被免職。被免職的獨(dú)立董事認(rèn)為公司的免職理由不當(dāng)?shù)模梢宰鞒龉_的聲明。

1.4.4獨(dú)立董事在任期屆滿前可以提出辭職。獨(dú)立董事辭職應(yīng)向董事會提交書面辭職報告，對任何與其辭職有關(guān)或其認(rèn)為有必要引起公司股東和債權(quán)人注意的情況進(jìn)行說明。

如因獨(dú)立董事辭職導(dǎo)致公司董事會中獨(dú)立董事所占的比例低于全體董事會成員三分之一時，該獨(dú)立董事的辭職報告在下任獨(dú)立董事填補(bǔ)其缺額后生效。1.4.5獨(dú)立董事出現(xiàn)不符合獨(dú)立性條件或其他不適宜履行獨(dú)立董事職責(zé)的情形，由此造成公司獨(dú)立董事達(dá)不到本工作制度要求的人數(shù)時，公司應(yīng)按規(guī)定補(bǔ)足獨(dú)立董事人數(shù)。

1.5獨(dú)立董事的權(quán)力和義務(wù)

1.5.1獨(dú)立董事對公司及全體股東負(fù)有誠信與勤勉義務(wù)。獨(dú)立董事應(yīng)當(dāng)按照相關(guān)法律法規(guī)和公司章程的要求，認(rèn)真履行職責(zé)，維護(hù)公司整體利益，在公司上市后獨(dú)立董事應(yīng)尤其要關(guān)注中小股東的合法權(quán)益不受損害。

1.5.2獨(dú)立董事除具有《公司法》和其他相關(guān)法律.法規(guī)賦予董事的職權(quán)外，還具有以下特別職權(quán)：

（一）重大關(guān)聯(lián)交易（指公司擬與關(guān)聯(lián)人達(dá)成的總額高于300 萬元或高于公司最近經(jīng)審計凈資產(chǎn)5%以上的關(guān)聯(lián)交易）應(yīng)由獨(dú)立董事認(rèn)可后，提交董事會討論。獨(dú)立董事在做出判斷前，可以聘請中介機(jī)構(gòu)出具獨(dú)立財物顧問報告，作為判斷的依據(jù)；

（二）向董事會提議聘用或解聘會計師事務(wù)所；

（三）向董事會提請召開臨時股東大會；

（四）提議召開董事會；

（五）立聘請外部審計機(jī)構(gòu)和咨詢機(jī)構(gòu)；

（六）可以在股東大會召開前公開向股東征集投票權(quán)；

（七）獨(dú)立董事行使上述職權(quán)應(yīng)當(dāng)取得全體獨(dú)立董事二分之一以上同意。

（八）如上述提議未被采納或上述職權(quán)不能正常行使，公司應(yīng)將有關(guān)情況予以披露。

1.5.3獨(dú)立董事除履行上述職責(zé)外，還應(yīng)當(dāng)對以下事項(xiàng)向董事會或股東大會發(fā)表獨(dú)立意見：

（一）提名.任免董事；

（二）聘任或解聘高級管理人員；

（三）公司董事.高級管理人員的薪酬；

（四）公司當(dāng)年盈利但董事會未提出包含現(xiàn)金分紅的利潤分配預(yù)案；

（五）公司的股東.實(shí)際控制人及其關(guān)聯(lián)公司對公司現(xiàn)有或新發(fā)生的總額高于300萬元或高于公司最近經(jīng)審計凈資產(chǎn)值的5%的借款或其他資金往來，以及公司是否采取有效措施回收欠款；

（六）獨(dú)立董事認(rèn)為可能損害中小股東權(quán)益的事項(xiàng)；

（七）審計意見涉及的事項(xiàng)（如公司的財務(wù)會計報告被注冊會計師出具非標(biāo)準(zhǔn)無保留審計意見）；

（八）變更募集資金投資項(xiàng)目；

（九）公司董事.監(jiān)事.高級管理人員.員工或者其所控制或者委托的法人.其他組織擬對公司進(jìn)行收購或者取得控制權(quán)；

（十）股權(quán)激勵事項(xiàng)；

（十一）法律.行政法規(guī).部門規(guī)章及公司章程規(guī)定的其他事項(xiàng)。

獨(dú)立董事應(yīng)當(dāng)就上述事項(xiàng)發(fā)表以下幾類意見之一：同意；保留意見及其理由；反對意見及其理由；無法發(fā)表意見及其障礙。

1.5.4除參加董事會會議外，獨(dú)立董事每年應(yīng)保證不少于十天的時間，對公司生產(chǎn)經(jīng)營狀況.管理和內(nèi)部控制等制度的建設(shè)及執(zhí)行情況.董事會決議執(zhí)行情況等進(jìn)行現(xiàn)場調(diào)查。

1.5.5獨(dú)立董事獨(dú)立履行職責(zé)，不受公司主要股東.實(shí)際控制人.或者其他與公司存在利害關(guān)系的單位或個人的影響。獨(dú)立董事行使職權(quán)時，公司有關(guān)人員應(yīng)當(dāng)積極配合，不得拒絕.阻礙或隱瞞，不得干預(yù)其獨(dú)立行使職權(quán)。

1.5.6獨(dú)立董事應(yīng)當(dāng)向公司股東大會提交述職報告，述職報告應(yīng)包括以下內(nèi)容：上出席董事會及股東大會次數(shù)及投票情況；

發(fā)表獨(dú)立意見的情況；

履行獨(dú)立董事職務(wù)所做的其他工作，如提議召開董事會.提議聘用或解聘會計師事務(wù)所.獨(dú)立聘請外部審計機(jī)構(gòu)和咨詢機(jī)構(gòu)等。

1.5.7獨(dú)立董事應(yīng)當(dāng)通過《獨(dú)立董事工作筆錄》對其履行職責(zé)的情況進(jìn)行書面記載。

1.6對獨(dú)立董事履行職責(zé)的保障

1.6.1公司應(yīng)保證獨(dú)立董事享有與其他董事同等的知情權(quán)，及時向獨(dú)立董事提供相關(guān)材料和信息，定期通報公司運(yùn)營情況，必要時可組織獨(dú)立董事實(shí)地考察。凡須經(jīng)董事會決策的事項(xiàng)，公司必須按法定的時間提前通知獨(dú)立董事，并同時提供足夠的資料。獨(dú)立董事認(rèn)為資料不充分的，可以要求補(bǔ)充。當(dāng)兩名或兩名以上獨(dú)立董事認(rèn)為資料不充分或論證不明確時，可聯(lián)名書面向董事會提出延期召開董事會會議或延期審議該事項(xiàng)，董事會應(yīng)予以采納。

公司向獨(dú)立董事提供的資料，公司及獨(dú)立董事本人應(yīng)當(dāng)至少保存五年。1.6.2公司提供獨(dú)立董事履行職責(zé)所必需的工作條件。董事會秘書應(yīng)積極為獨(dú)立董事履行職責(zé)提供協(xié)助，如介紹情況.提供材料等。

1.6.3獨(dú)立董事聘請中介機(jī)構(gòu)的費(fèi)用及在行使職權(quán)時所需的相關(guān)費(fèi)用由公司承擔(dān)。

1.6.4公司給予獨(dú)立董事適當(dāng)?shù)慕蛸N。津貼的標(biāo)準(zhǔn)由董事會制訂預(yù)案，股東大會審議通過確定。除上述津貼外，獨(dú)立董事不應(yīng)從公司及其主要股東或有利害關(guān)系的機(jī)構(gòu)和人員取得額外的.未予披露的其他利益。

1.6.5公司可以建立必要的獨(dú)立董事責(zé)任保險制度，以降低獨(dú)立董事正常履行職責(zé)可能引致的風(fēng)險。1.7附則

1.7.1本制度由公司董事會負(fù)責(zé)解釋。本制度未盡事宜，依照所適用的有關(guān)法律.法規(guī).規(guī)章.規(guī)范性文件以及公司章程的有關(guān)規(guī)定執(zhí)行。

1.7.2本制度與相關(guān)法律.法規(guī).規(guī)范性文件的規(guī)定及公司章程相悖時，應(yīng)按后者規(guī)定內(nèi)容執(zhí)行，并應(yīng)及時對本制度進(jìn)行修訂。

1.7.3除本制度另有規(guī)定外，本制度所稱“以上”包含本數(shù)，“以下”不含本數(shù)。1.7.4本制度經(jīng)股東大會審議通過后，自頒布之日起實(shí)施。

1.7.5本制度的修訂由董事會提出修訂草案，提請股東大會審議通過。

第三篇：水產(chǎn)養(yǎng)殖技術(shù)補(bǔ)充常識

水產(chǎn)養(yǎng)殖技術(shù)補(bǔ)充常識

1、因地制宜地管理調(diào)節(jié)好水質(zhì)。水產(chǎn)養(yǎng)殖因?yàn)椴煌~種對環(huán)境水域水的溶解氧、氨氮等要求不同，因此，必須在飼養(yǎng)前了解不同品種的各種生理學(xué)指標(biāo)，使養(yǎng)殖水域能一直保持肥、活、嫩、爽。

2、寫好池塘日記。池塘日記是養(yǎng)殖魚類的管理及生長的記載，是養(yǎng)殖實(shí)踐的經(jīng)驗(yàn)積累，是池塘養(yǎng)魚財富的源泉。只有堅持及時寫好池塘日記，才能實(shí)現(xiàn)有根據(jù)的回顧，在養(yǎng)殖過程中出現(xiàn)問題時，便于采取相應(yīng)有效的措施加以解決。

3、堅持巡塘。每天要堅持巡塘，觀察池魚的活動是否出現(xiàn)異常，池水是否有缺氧現(xiàn)象，有無浮裝潢前兆，水質(zhì)有無變化，池水水位的高低。還要檢查魚群的吃食情況，根據(jù)吃食情況時增減投餌量，避免飼料的浪費(fèi)及對水質(zhì)的污染。

4、做好魚病防治。超級鯉與黃金鯽的抗病能力都很強(qiáng)，但不等于在任何環(huán)境內(nèi)、任何生長階段的任何情況下，都絕對不發(fā)生任何疾病。也就是說，“以防為方，防重于治”的思想不能放松，在飼養(yǎng)過程中，要嚴(yán)格按照無化害水產(chǎn)品的技術(shù)要求，選用低毒、高效、無殘留的綠包環(huán)保藥品進(jìn)行病害防治。除在投放魚種前對池塘進(jìn)行徹底清整消毒外，在養(yǎng)殖過程中還要每隔一段時間潑灑一次漂白粉溶液消毒，如果發(fā)現(xiàn)魚有異常情況，要提早診斷，對癥用藥，以保持池魚健康生長。

5、飼料投喂的“四定四看”。四定：一是定質(zhì)，就是確定投喂飼料的營養(yǎng)，具體講就是飼料中的蛋白指標(biāo)；二是定量，就是飼料時日投餌量；三是定時，就是飼養(yǎng)中投喂次數(shù)及時間；四是定位，就是每個養(yǎng)殖池固定的投喂位置。四看；一看魚，根據(jù)魚的吃食情況來投餌，當(dāng)魚群活動正常和攝食量旺盛時要適當(dāng)多投喂，當(dāng)魚活動不正常時則要少投喂；二看水，水質(zhì)好時要多投喂，水質(zhì)差時要少投喂；三看天氣，晴天多投喂，陰天少投喂；四看季節(jié)，高溫時要控制投餌量，水溫偏低時要少投喂。

第四篇：水產(chǎn)動物疾病診斷技術(shù)

現(xiàn)代生物技術(shù)在水產(chǎn)動物疾病診斷上的應(yīng)用

生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院水產(chǎn)養(yǎng)殖06-4班安海燕0601101401 隨著養(yǎng)殖規(guī)模的不斷擴(kuò)大，集約化程度的不斷提高，一方面推動了養(yǎng)殖業(yè)的迅速發(fā)，增加了經(jīng)濟(jì)效益；另一方面也帶來一個不容忽視的問題－疾病滋生，有嚴(yán)重困擾著養(yǎng)殖業(yè)的步伐。如何尋求一種有效的途徑來緩解疾病給養(yǎng)殖業(yè)帶來的危害與損失，一直是人們所關(guān)注的主題。近些年來，生物技術(shù)的蓬勃發(fā)展，給水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)帶來了新的挈機(jī)。國內(nèi)外諸多學(xué)者將這一新興科技用于病害防治，取得了不少成果，并顯示出良好的發(fā)展前景。水產(chǎn)動物疾病診斷技術(shù)的發(fā)展與相應(yīng)的病原研究的深入程度密切相關(guān)，近20年來，用現(xiàn)代生物學(xué)技術(shù)檢測病毒、細(xì)菌性病害的發(fā)展迅速，主要有熒光抗體技術(shù)、免疫酶技術(shù)、單克隆抗體技術(shù)、核酸雜交技術(shù)、聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)技術(shù)等。由于上述檢測技術(shù)的靈敏度高、特異性強(qiáng)、實(shí)用性好等特點(diǎn)，在國內(nèi)外已成為多種水產(chǎn)動物病毒、細(xì)菌等病害的常規(guī)診斷方法。對鮭鱒魚、對蝦等的主要病毒和細(xì)菌病原的相應(yīng)免疫學(xué)或分子生物學(xué)病原檢測技術(shù)多數(shù)都開發(fā)成了商品化的試劑盒。

近年來,根據(jù)目前國內(nèi)外研究的動向, 隨著分子生物學(xué)技術(shù)在水產(chǎn)領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用，分子生物學(xué)技術(shù)已經(jīng)體現(xiàn)出極高的應(yīng)用價值和經(jīng)濟(jì)價值。它對解決水產(chǎn)業(yè)的技術(shù)難題、開創(chuàng)新的領(lǐng)域、改造產(chǎn)業(yè)的傳統(tǒng)模式起著十分重要的作用。包括我國在內(nèi)的許多國家都在大力研發(fā)與水產(chǎn)業(yè)有關(guān)的分子生物學(xué)技術(shù)，并著力于開發(fā)新的優(yōu)良養(yǎng)殖種類、培育高產(chǎn)抗逆的良種以及探尋檢測和防治病害的新技術(shù)、新方法等。因此應(yīng)用分子生物學(xué)技術(shù)進(jìn)行水產(chǎn)養(yǎng)殖品種的疾病診斷領(lǐng)域具有強(qiáng)大的發(fā)展?jié)摿?。目前生物技術(shù)在水產(chǎn)養(yǎng)殖病原體檢測上的應(yīng)用，我國水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)尤其是蝦類、貝類、魚類受到病原微生物的侵?jǐn)_十分嚴(yán)重，如何對水產(chǎn)動物疾病進(jìn)行快速、準(zhǔn)確的預(yù)報與診斷，是擺在養(yǎng)殖業(yè)面前的第一道門坎。近些年來，生物技術(shù)的發(fā)展已為病原體的檢測提供了快速、高效、靈敏的技術(shù)手段。

同時，免疫學(xué)快速診斷技術(shù)是一項(xiàng)特異、敏感和簡便的技術(shù)，廣泛應(yīng)用于許多領(lǐng)域，尤其在生物醫(yī)學(xué)的理論研究和臨床診斷方面更是發(fā)揮了不可替代的作用。其主要包括血清凝集試驗(yàn)，免疫熒光抗體和免疫酶標(biāo)技術(shù)在水產(chǎn)動物疾病診斷上的應(yīng)用具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、定位準(zhǔn)確和應(yīng)用廣泛等優(yōu)點(diǎn)?，F(xiàn)代生物技術(shù)結(jié)合免疫學(xué)對免疫檢測技術(shù)、核酸檢測技術(shù)、核酸技術(shù)與免疫學(xué)相結(jié)合方法等 1

進(jìn)行了研究與應(yīng)用。

單克隆抗體

單克隆抗體是由單個細(xì)胞傳代所產(chǎn)生的高純度、高特異性的抗體。它與常規(guī)血清抗體相比，具有更強(qiáng)的特異性與針對性，且制備簡單，因而在病原檢測中得以廣泛應(yīng)用。80年代后期，已成功研制出傳染性胰腺壞死病毒、出血病毒等單克隆抗體，并用于魚類多種疾病的診斷。近年來。有學(xué)者已成功制備了抗鰻弧菌的單抗和抗嗜水氣單胞菌的單抗。我國在單克隆抗體技術(shù)中，將其應(yīng)用于檢測草魚出血病毒和對蝦白斑病毒，均獲得了較為

酶聯(lián)免疫吸附

酶聯(lián)免疫吸附檢測(ELISA)是將抗原或抗體吸附在載體表面，通過酶與底物顯色來檢測特異性抗原或抗體的技術(shù)。該技術(shù)具有反應(yīng)迅速、特異性強(qiáng)、靈敏度高等特點(diǎn)。目前，ELISA在魚類病原體檢測上的應(yīng)用較廣，國內(nèi)諸多學(xué)者將此技術(shù)用于疾病檢測上，如李煥榮等(1997)應(yīng)用Dot－ELISA快速檢測出了嗜水氣單胞菌的致病因子胞外蛋白酶AhECPase54；黃?(1995)應(yīng)用單克隆抗體酶聯(lián)免疫技術(shù)檢測到了對蝦皮下及造血組織壞死桿狀病毒；陳懷青等(1993)應(yīng)用Dot－ELISA檢測到了魚類致病性嗜水氣單胞菌hec毒素。國外對此項(xiàng)技術(shù)的研究較國內(nèi)早，廣泛用于對癤瘡病、紅嘴病、細(xì)菌性腎臟病以及愛德華菌病等的快速檢測與診斷。此外，Noel等將ELISA用于菲律賓哈上，成功檢測出了弧菌PI滿意的效果。

核酸探針

核酸探針是指利用特定標(biāo)記的DNA或RNA探針與病原生物中的與探針互補(bǔ)的靶核苷酸序列進(jìn)行雜交，以此來確定宿主是否攜帶病毒的一類分子生物學(xué)技術(shù)。該方法以其靈敏度高、特異性強(qiáng)、簡便快速等特點(diǎn)，在病原檢測中倍受青睞。Futo，Hiney(1992)將此技術(shù)應(yīng)用診斷細(xì)菌性魚病，Comps等(1996)采用地高辛標(biāo)記的RNA探針檢測FEV病毒在魚類中的表達(dá)，Bruce等(1994)利用DNA探針檢測對蝦桿狀病毒。日本學(xué)者也采用地高辛標(biāo)記的DNA探針進(jìn)行菌落雜交，用于鰻弧菌的鑒定。我國學(xué)者對導(dǎo)致我國對蝦大規(guī)模死亡的病原－皮下及造血組織壞死桿狀病毒(HHNBV)，已成功研制出核酸探針試劑盒，用于蝦病的診斷。該法簡便快捷，操作性強(qiáng)，已獲國家專利。

聚合酶鏈反應(yīng)

酶鏈反應(yīng)(PCR)技術(shù)是指在引物的指導(dǎo)下，體外酶促反應(yīng)，迅速擴(kuò)增DN**段的一種方法。該法反應(yīng)十分迅速，幾小時內(nèi)便可擴(kuò)增到108－10倍，因而PCR技術(shù)具有高度的靈敏性。目前PCR在水產(chǎn)動物病原的操作中，已成功應(yīng)用于毛蛤甲肝病毒，對蝦桃拉病毒、的檢測白斑病毒等，并研制出了診斷白斑病毒的檢測試劑盒，可用于幼蝦、成蝦以及親蝦的帶毒檢測，同時還可對養(yǎng)殖環(huán)境中的宿主、底質(zhì)、餌料等進(jìn)行檢測。另外有學(xué)者也報道了應(yīng)用PCR技術(shù)檢測貝類腸道病毒以及周圍水體內(nèi)的病菌等。

PCR與其他技術(shù)的聯(lián)用

PCR不僅自身可以用來檢測病原體,也可以與其他技術(shù)相結(jié)合充分發(fā)揮其優(yōu)點(diǎn)。例如Sukhum-sirichart等(2002)通過在反應(yīng)體系中加入地高辛標(biāo)記的dUTP,采用將PCR和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)相結(jié)合(Polymerase Chain Reaction-Enzyme-Linked-Immuno-sorbent Assay,PCR-ELISA)從蝦中檢測出了對蝦肝胰腺細(xì)小病毒(Hepatopancreatic Par-vovirus,HPV),通過比較實(shí)驗(yàn),說明其靈敏度是southern雜交(Southern hybridization)的10倍,是常規(guī)PCR的20倍。該法避免了PCR中使用溴化乙錠的缺點(diǎn),但是它也有實(shí)驗(yàn)成本較高的缺點(diǎn)。Schwab等采用一種從嗜熱菌Thermus thermophilus中提取出的耐熱性的同時具有反轉(zhuǎn)錄酶和聚合酶活性的酶rTth,與RT-PCR結(jié)合建立了DEIA(DNAenzyme immunoassay)法檢測出了諾沃克樣病毒(Nor-walk-like viruses,NLVs),由于該法的結(jié)果是用數(shù)字表示的,這樣也避免了電泳和Southern雜交時人的主觀判斷。del Cerro等等利用基于TaqMan探針的PCR檢測了病原F.psychrophilum.。Heath等等利用競爭PCR擴(kuò)增魚類的一種病原體Piscirick-ettsia salmonis的核糖體RNA基因間(Internal Tran-scribed Spacer,ITS)的部分序列,并用DGGE(變性梯度凝膠電泳)檢測到了結(jié)果。

16S rRNA技術(shù)

16S rRNA是核糖體RNA的一種，具有分子量適中、所含的遺傳信息豐富等特點(diǎn)。在結(jié)構(gòu)上分為保守區(qū)（Conserved domain）和可變區(qū)（Variable domain）。保守區(qū)能反映生物物種的親緣關(guān)系，可變區(qū)能揭示生物物種的特征核酸序列，被認(rèn)為是最適細(xì)菌系統(tǒng)發(fā)育和分類鑒定的指標(biāo)。目前16S rRNA序列分析已廣泛用

于水產(chǎn)動物病原菌的鑒定。Ragnhild等（1995）通過對分離于大西洋鮭魚、虹鱒魚、大菱鲆和鱈魚中的致病弧菌的16S rRNA序列進(jìn)行比對，對魚類致病弧菌進(jìn)行分類。Carlos等（1999）通過對26株不同來源的魚病菌的16S rRNA基因序列的分析，確定了魚出血性敗血病血癥病原美人魚發(fā)光桿菌的分類地位，并建立了基于16S rRNA基因的巢式PCR病原檢測方法。Cerda等（2001）利用一種特異的16SrRNA基因探針對V.vulnificus 病毒進(jìn)行檢測。鄒玉霞等（2004）通過對大菱鲆出血癥病原菌的16S rRNA 基因進(jìn)行系統(tǒng)發(fā)育學(xué)分析，確定了該病原菌為鰻弧菌。耿毅等（2006）從發(fā)生急性流行性傳染病的斑點(diǎn)叉尾魚回肝臟、腎臟分離到一高致病性的菌株，經(jīng)16S rRNA序列分析，鑒定其為嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌。

細(xì)胞培養(yǎng)

當(dāng)前，動物細(xì)胞培養(yǎng)也作為一類技術(shù)用于水產(chǎn)動物病原體的檢測。如Lu等(1995)應(yīng)用對蝦淋巴器官原代培養(yǎng)細(xì)胞檢測對蝦黃頭桿狀病毒(YBV)。此外，水產(chǎn)動物細(xì)胞培養(yǎng)也可用于篩選抗菌藥物、培育新型品種以及生產(chǎn)各類疫苗和免疫制劑等。

限制性酶酶切檢測

限制性酶可識別DNA上較短的序列，在識別位點(diǎn)上切開DNA，單個核苷酸變化即可導(dǎo)致限制性酶切位點(diǎn)的增加或缺失。因此，酶切后產(chǎn)生的片段數(shù)目發(fā)生了改變，即所謂的限制性片段長度多態(tài)性(RFLP)。根據(jù)酶切后的DNA片段在凝膠電泳上進(jìn)行分離，染色后即可觀察各個不同大小的片段，進(jìn)行遺傳變異的分析。這種診斷對于病原微生物是相當(dāng)有效而直接的方法。如Katja Einer-Jensen等通過RFLP技術(shù)分析魚體棒狀病毒血紅素敗血病病毒的基因型。

熒光抗體技術(shù)

熒光抗體技術(shù)是根據(jù)抗原抗體具有高度特異性的反應(yīng)，把熒光素作為抗原標(biāo)記物，在熒光顯微鏡下檢查呈現(xiàn)熒光的特異性抗原復(fù)合物及其存在部位，在水產(chǎn)動物病原體的檢測上得到了一定的應(yīng)用。鄢慶枇等應(yīng)用熒光抗體技術(shù)檢測牙鲆體內(nèi)的弧菌。

近半個世紀(jì)以來，隨著水產(chǎn)動物疾病研究廣泛地與其它先進(jìn)技術(shù)手段相結(jié)合，尤其與分子生物學(xué)技術(shù)的結(jié)合，為水產(chǎn)動物疾病快速診斷技術(shù)的研發(fā)帶來了

福音?？焖贉?zhǔn)確的病原體檢測手段，高效免疫疫苗的制備都在很大程度上緩解了病害所帶來的嚴(yán)重?fù)p失。然而目前許多快速診斷技術(shù)都處實(shí)驗(yàn)室研究階段，將這些快診技術(shù)應(yīng)用于生產(chǎn)，還有待于條件方法的優(yōu)化以及儀器設(shè)備成本的降低。隨著研究的深化，水產(chǎn)動物疾病的快速診斷技術(shù)也在不斷向前發(fā)展，基因芯片（又稱DNA芯片）技術(shù)的研發(fā)也漸有突破。日本水產(chǎn)綜合研究中心已經(jīng)成功開發(fā)出利用DNA晶片快速診斷魚類細(xì)菌性疾病的新技術(shù)，利用DNA晶片的診斷法與過去只能檢出特定病原菌的PCR法或培養(yǎng)法相比，不但在檢察時間或步驟上縮短許多，在成本上也比較便宜。利用該技術(shù)，以往被歸為不明原因的細(xì)菌性疾病也能在一次的診斷中檢測出來。應(yīng)用基因芯片技術(shù)快速診斷技術(shù)確實(shí)是一種敏感性強(qiáng)、精確度高的有效檢測手段。

國際上正在著手建立水產(chǎn)病害檢疫網(wǎng)絡(luò)和規(guī)范，其相關(guān)的病原快速檢測技術(shù)將得到不斷完善并規(guī)范化?，F(xiàn)代免疫學(xué)、分子生物學(xué)和生物化學(xué)等高新生物技術(shù)，如核酸探針、PCR、熒光抗體檢測技術(shù)、酶聯(lián)免疫技術(shù)等在疾病診斷和病原生物檢測中將得到廣泛應(yīng)用，技術(shù)的商品化程度將大大提高。對病原生物核酸序列的掌握為核酸探針和PCR引物的人工合成提供越來越多的便利。借助上述手段，檢測技術(shù)將能精細(xì)到對病原分類分型鑒定和致病因子的測定。

第五篇：春季水產(chǎn)養(yǎng)殖技術(shù)要點(diǎn)

春季水產(chǎn)養(yǎng)殖技術(shù)要點(diǎn)

（滕州市水產(chǎn)技術(shù)指導(dǎo)站）

春季漁業(yè)生產(chǎn)時間緊、任務(wù)重, 尤其是今春的低溫、寒潮天氣影響了滕州漁業(yè)生產(chǎn)工作的按時進(jìn)行,為確保今年漁業(yè)生產(chǎn)豐收，市水產(chǎn)技術(shù)推廣站積極籌措，為廣大水產(chǎn)養(yǎng)殖戶編制發(fā)布了春季水產(chǎn)養(yǎng)殖技術(shù)要點(diǎn)，力保今年漁業(yè)生產(chǎn)起好步。

一是要根據(jù)市場信息和自身經(jīng)濟(jì)實(shí)力,及早做好全年養(yǎng)殖計劃，規(guī)劃好相應(yīng)的養(yǎng)殖模式、品種、規(guī)模、飼料、技術(shù)、市場銷售等因素，準(zhǔn)備好漁業(yè)生產(chǎn)物資,及時開展工作，保證養(yǎng)殖效益。

二是抓好標(biāo)準(zhǔn)化魚塘開發(fā)整理改造。在當(dāng)前天氣尚未轉(zhuǎn)暖還不適合水產(chǎn)養(yǎng)殖的時間,應(yīng)積極充分開發(fā)利用荒廢地，整理成適于養(yǎng)殖的池塘，新增水產(chǎn)養(yǎng)殖面積，提高水產(chǎn)養(yǎng)殖規(guī)模。抓好低標(biāo)準(zhǔn)池塘的清淤改造、消毒，提高池塘養(yǎng)殖標(biāo)準(zhǔn)，增加水產(chǎn)生產(chǎn)潛力。

三是抓好春放工作。一年之計在于春，積極利用氣溫回升的時機(jī)，聯(lián)系購買好優(yōu)質(zhì)魚種，加大品種調(diào)整力度，選擇市場銷售前景好的新品種，做好魚種放養(yǎng)。春季是漁業(yè)生產(chǎn)苗種銷售旺季，購買優(yōu)質(zhì)水產(chǎn)苗種，要注意供應(yīng)單位是否具備苗種生產(chǎn)銷售許可，購進(jìn)外來水產(chǎn)苗種是否有產(chǎn)地檢驗(yàn)檢疫合格證明等。在春投春放中，要注重大規(guī)格苗種的投放，做到品種優(yōu)、質(zhì)量好、規(guī)格大。由于當(dāng)前氣溫低,以及春季氣溫變化大,要在春放工作中,及時掌握天氣變化,防止凍傷魚種,操作要仔細(xì)，提高魚種的成活率。

四是抓好春季水產(chǎn)養(yǎng)殖及疾病的防治工作。隨著氣溫的回升，春季是水霉病、寄生蟲病等病害高發(fā)的季節(jié)，病害防治要堅持“以防為主、防治結(jié)合”的方針，積極推廣健康養(yǎng)殖模式，確保水產(chǎn)品質(zhì)量安全。及時做好池塘清整消毒工作，逐步提高池塘水位，注重改善水

質(zhì)，及時投喂飼料，加快魚類恢復(fù)體質(zhì)和生長。

五是開展水產(chǎn)苗種繁殖的養(yǎng)殖者，要利用2－4月氣溫逐漸回升的有利時機(jī)，加強(qiáng)親本的投喂管理，增強(qiáng)親魚的體質(zhì)，保證繁育質(zhì)量。要提前做好魚苗繁殖準(zhǔn)備。做好繁殖設(shè)施檢修，搞好親本的引進(jìn)更新和培育，確保魚苗繁殖順利進(jìn)行。