第一篇：癌細胞有哪些特征

2癌細胞有哪些特征 ？

3我國對癌癥是如何預防的 ？ 在人類各種疾病中，癌癥可謂是“頭號殺手”。據(jù)世界衛(wèi)生組織報告，每年世界上有900萬新的癌癥病例發(fā)生，500萬人死于癌癥。盡管有先進的醫(yī)療技術，由于平均壽命的延長，生活方式的改變以及抽煙等原因，如果沒有進一步抑制癌癥的措施，預計到2020年每年將有2000萬新的癌癥病例發(fā)生，而癌癥患者死亡人數(shù)將突破1000萬人。為了全人類的健康，世界衛(wèi)生組織把每年的2月4日定為世界抗癌日，以聯(lián)合全球共同攻克癌癥。2010年世界癌癥日主題：癌癥同樣可以預防 701******20世紀70年代20世紀90年代21世紀初死于癌癥的人數(shù)單位:萬我國癌癥死亡人數(shù)不斷增加1環(huán)境因素：致癌因子煙草、亞硝酸鹽、黃曲霉毒素等紫外線、X射線等物理致癌因子：化學致癌因子：病毒致癌因子：肝炎病毒等

一、癌細胞的形成2主要內因：原癌基因與抑癌基因的變異（1）原癌基因與抑癌基因的作用原癌基因：人體正常細胞中的一類基因。其很多產物都是細胞生長、增

第二篇：淺析影響直腸癌細胞增值的因素

淺析影響直腸癌細胞增值的因素

一、細胞培養(yǎng)

人結腸癌細胞系CaCo2、HT29、HCT116、SW480、SW620、SW1116、LoVo均購自ATCC，并由上海消化外科研究所傳代保存。LoVo采用含10％胎牛血清的F-12K培養(yǎng)傳代；CaCo2、HT29、HCT116、SW480、SW620、SW1116均使用含10％胎牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液，置于37℃、5％CO2的培養(yǎng)箱中，以1∶2至1∶4的比例傳代培養(yǎng)。

二、方法

1.樣本收集及免疫組化染色：結腸直腸腫瘤標本取自上海市微創(chuàng)外科臨床醫(yī)學中心手術室。手術標本切除后生理鹽水清洗，打開腸腔，剔除瘤體表面壞死及炎性肉芽組織；取腫瘤中心部位及距腫瘤5cm以上的正常腸黏膜全層組織，切成1cm塊狀后置入樣本管。組織標本經4%甲醛溶液充分固定后，制作蠟塊，切片、貼片。隨后采用鏈霉素親和素-過氧化酶復合物（SP）法進行免疫組化染色，DAB顯色。TMPRSS4多克隆抗體購自美國Proteintech公司，1∶50稀釋。

2.半定量RT-PCR：采用Trizol試劑（Invitrogen，美國）提取細胞總RNA。電泳鑒定RNA完整性，分光光度計260nm處測定RNA濃度，使用逆轉錄試劑盒（Takara，日本）在ABIPrismSDS7000中進行逆轉錄cDNA合成。上海吉瑪生物有限公司合成如下引物：TMPRSS4上游引物5′-TCCAAGGACCGATCCACACT-3′，下游引物5′-AAGTTGTCGAAACAGGCAGAG-3′；GAPDH上游引物5′-GACATCAAGAAGGTGGTGAA-3′，下游引物5′-TGTCATACCAGGAAATGAGC-3′。cDNA在PCR儀(AppliedBiosystems，美國)中進行反應，50℃2min、95℃10min、95℃15s、60℃30s、72℃30s，共35個循環(huán)；然后，72℃10min，擴增產物于1％瓊脂糖凝膠中，130V、30min條件下電泳并在紫外燈下攝片，成像保存。

3.Western印跡法：細胞在10cm培養(yǎng)皿（Corning，美國）中生長融合約90%時，PBS清洗2次后加入300μLRIPA，置冰上30min裂解充分后煮沸10min，隨后13000r/min離心5min。取上清液，BCA法測定蛋白質濃度。每孔上樣量100μg，加入5×上樣緩沖液、去離子水至總體積一致后變性電泳（積層膠80V，分離膠120V），半干轉法轉膜（15V）70min后脫脂牛奶室溫封閉2h，4℃下一抗（兔抗人TMPRSS4多抗，112831-AP，Proteintech，美國，1∶600稀釋）孵育過夜。TBST洗膜3遍后加入一定比例稀釋的相應二抗室溫孵育1h，TBST洗膜2次，PBS洗膜1次后熒光發(fā)光顯色。

4.siRNA瞬時轉染：細胞生長至70%融合時胰酶消化，計數(shù)后按每孔3×105細胞鋪6孔板，過夜。24h后按照Lipofectamine2000（Invitrogen，美國）說明書操作進行細胞轉染。由上海吉瑪生物有限公司設計并合成TMRPSS4-siRNA序列：5′-AAGUUGUCGAAACAGGCAGAGAACC-3′（si組）。僅轉染Lipo2000的細胞為空白對照組，轉染陰性對照序列的細胞為陰性對照組（NC組）。轉染48h后用Trizol試劑提取細胞總RNA，72h提取總蛋白質。

5.CCK-8測細胞增殖：取轉染后SW480細胞計數(shù)后鋪于96孔板，每孔100個；設干擾組、陰性對照組和空白對照組，每組6個復孔。在第0、24、48、72、96和120h，分別于各孔加入CCK-8試劑（cellcountingkit-8，Dojindo,日本）10μL，37℃孵育2.5h，酶標儀測定各孔在450nm的吸光度值。以時間為橫坐標、吸光度值為縱坐標繪制細胞生長曲線。6.AnnexinⅤ/PI流式檢測細胞凋亡：轉染48h后收細胞，取100μL細胞懸液（1×106個/mL）至流式管，用PBS洗滌1次，離心后加入300μL結合緩沖液，混勻，再加入5μL的AnnexinⅤ-FITC和5μL的PI，孵育15min后用流式細胞儀（BD，美國）上機檢測。

7.劃痕試驗：6孔板轉染，待細胞鋪滿后，用無菌槍頭每孔筆直劃線，PBS清洗3次，加入無血清培養(yǎng)液置培養(yǎng)箱孵育。24h后在顯微鏡下每孔隨機選取視野觀察攝片。

8.transwell遷移試驗：取轉染24h后細胞，無血清RPMI1640培養(yǎng)液重懸后計數(shù)，調至終密度為5×105個/mL。24孔板每孔內加入900μL含10%胎牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液，隨后置入transwell小室（Corning，美國），小室內加入200μL細胞懸液（105個細胞）。培養(yǎng)箱孵育24h后取出，棉簽拭去內室面細胞，甲醇固定小室外穿出細胞10min，1%結晶紫染色10min，PBS清洗3遍后，顯微鏡下觀察攝片。

三、統(tǒng)計學方法

采用SPSS11．0軟件進行統(tǒng)計學分析，計數(shù)資料采用χ2檢驗。P<0．05為差異有統(tǒng)計學意義。

1.免疫組化檢測TMPRSS4蛋白在結腸直腸癌組織和正常腸上皮中表達標本免疫組化染色顯示，TMPRSS4蛋白定位于細胞膜上，本人系天天論文網就職11年的資深論文編輯；工作中與各大醫(yī)學期刊雜志社進行學術交流過程中建立了穩(wěn)定的編輯朋友圈，系多家醫(yī)學雜志社的特約編輯，常年為醫(yī)學期刊雜志供稿，負責天天論文網醫(yī)學論文·分檢·編?！ね扑汀ぶ笇У裙ぷ?！工作企鵝1:1550116010工作企鵝2：766085044在腫瘤組織和轉移淋巴結中均染色陽性，且轉移淋巴結中TMPRSS4蛋白染色更強。表明TMPRSS4表達可能與腫瘤細胞遷移能力有一定相關性。

2.半定量RT-PCR和Western印跡檢測TMPRSS4在結腸癌細胞株中的表達通過半定量RT-PCR檢測發(fā)現(xiàn)，TMPRSS4基因在7株結腸癌細胞中有不同程度的表達，其中在HT29、SW480、SW620、SW1116中的表達相對較高。Western印跡檢測亦有類似結果，有細胞均不同程度表達TMPRSS4蛋白，而HCT116、SW480和SW1116蛋白表達量相對較高。因此，本研究決定選用SW480細胞進行下一步試驗。

三、siRNA瞬時轉染后SW480細胞中TMPRSS4蛋白表達下調在轉染siRNA48h后，Western印跡法檢測發(fā)現(xiàn)，與空白對照組和NC組相比，siRNA干擾組（si組）的TMPRSS4蛋白表達明顯下降。

3.TMPRSS4下調可顯著抑制SW480細胞的增殖能力siRNA處理SW480細胞株后，采用CCK-8法測定細胞增殖能力。在第1、2、3、4、5天不同時間點分別測定吸光度值，吸光度值可間接反映細胞增殖能力的強弱。與空白對照組和NC組相比，si組細胞增殖能力在48~96h時受到明顯抑制（P<0.05)。

4.下調TMPRSS4誘導SW480細胞凋亡SW480細胞株轉染TMPRSS4siRNA后孵育48h，收集細胞，用AnnexinⅤ/PI雙染色法檢測細胞周期，si組細胞凋亡比值為14.0%，而空白對照組和NC組分別為10.4%和10.1%，有統(tǒng)計學差異（P<0.05）。提示下調TMPRSS4可能有誘導結腸癌細胞凋亡的作用。

5.siRNA干擾TMPRSS4表達顯著影響SW480細胞的遷移能力采用siRNA處理SW480細胞后，進行細胞劃痕及transwell遷移試驗。結果顯示，si組的SW480細胞在劃痕試驗中的運動能力比對照組顯著降低(P<0.05)；si組在transwell試驗中的穿膜細胞數(shù)亦比對照組顯著降低(P<0.05)。

四、討論

Ⅱ型跨膜絲氨酸蛋白酶是一類新近發(fā)現(xiàn)的特殊蛋白酶，具有明顯的組織表達特異性，且與耳聾、貧血、高血壓和腫瘤等的發(fā)生相關。本研究探討該家族成員TMRPSS4在結腸直腸癌組織中的表達及其對增殖、凋亡、遷移等方面的影響。采用siRNA干擾TMPRSS4表達后，發(fā)現(xiàn)腫瘤細胞的增殖能力減弱，同時細胞運動遷移能力也降低，這與Jung等先前的研究結果相一致。針對該蛋白質的其他研究表明，TMPRSS4可能通過作用于細胞間黏附分子或激活其他蛋白酶在組織發(fā)育和細胞分化中發(fā)揮重要作用；并通過發(fā)揮其蛋白酶的水解作用裂解病毒表面的紅細胞凝集素，促進病毒在肺部的擴散而致病。因此，推測該基因可能通過靶向作用于細胞外基質及細胞-細胞間連接分子而在調控SW480細胞的增殖及遷移中發(fā)揮作用，具體機制尚有待后續(xù)研究來揭示。同時，流式細胞凋亡檢測顯示，在siRNA干擾后，SW480細胞的凋亡比例明顯增加，這與干擾后細胞的增殖能力降低相一致，表明敲除TMPRSS4基因可能通過誘導細胞凋亡而抑制增殖。最近有研究表明，乳腺癌中TMPRSS4表達與淋巴結轉移、病理分期差、腫瘤體積大以及總生存率和無病生存率低相關。本研究初步顯示，TMPRSS4在結腸直腸癌組織和轉移淋巴結中有不同程度表達，且轉移淋巴結染色強度略高。因此，有必要進一步探討TMPRSS4與結腸直腸癌病理分期、分級、淋巴結轉移及病人預后間的相關性，為其作為預后預測因素提供依據(jù)。我們將繼續(xù)探討TMPRSS4對于結腸癌細胞增殖、凋亡、侵襲方面的具體作用機制，揭示這一基因對于結腸直腸癌發(fā)生、發(fā)展的作用。

第三篇：2012-2-3CCTV《走進科學 扼殺癌細胞》報道神奇CIK免疫治療

2012-2-3CCTV《走進科學 扼殺癌細胞》報道神奇CIK免疫治療

近日，央視科教頻道《走近科學》欄目報道了胃癌患者王治祥經診斷屬于彌漫大B淋巴瘤后，經歷了手術、化療、靶向治療、自體干細胞移植+局部放療等眾多治療，卻難逃癌癥短期內復發(fā)、癌細胞大面積擴散的噩運。而在經過8個療程的CIK細胞免疫治療后，王治祥的病情完全緩解，影像學顯示：腫瘤完全消失！央視《走進科學》揭秘生物免疫療法治愈癌癥。

什么是CIK細胞？

CIK細胞是指自體細胞因子誘導的殺傷細胞，它是一種強有力的抗腫瘤或者是抗感染的免疫細胞。CIK細胞能夠通過三種途徑殺滅腫瘤細胞和病毒感染細胞：①CIK細胞對腫瘤細胞和病毒感染細胞的直接殺傷：CIK細胞可以通過不同的機制識別腫瘤細胞，釋放顆粒酶/穿孔素等毒性顆粒，導致腫瘤細胞裂解。②CIK細胞釋放的大量炎性細胞因子具有抑瘤殺瘤活性：體外培養(yǎng)的CIK細胞可以分泌多種細胞因子，如IFN-γ、TNF-α、IL-2等，不僅對腫瘤細胞有直接抑制作用，還可通過調節(jié)機體免疫系統(tǒng)反應性間接殺傷腫瘤細胞。③CIK細胞能夠誘導腫瘤細胞的凋亡：CIK細胞在培養(yǎng)過程中表達FasL（Ⅱ型跨膜糖蛋白）通過與腫瘤細胞膜表達的Fas（Ⅰ型跨膜糖蛋白）結合，誘導腫瘤細胞凋亡。

什么是DC-CIK免疫治療？

生物DC-CIK免疫治療是聯(lián)合運用DC細胞和CIK細胞來治療腫瘤的全新生物治療技術。DC細胞又名樹突狀細胞，是機體功能最強的專職抗原遞呈細胞，DC細胞像“雷達”，能主動搜索、識別腫瘤細胞，并把信息傳遞給免疫細胞，激活免疫細胞殺滅腫瘤；CIK細胞則像“導彈”，精確殺死腫瘤細胞，且不損傷正常細胞。兩種免疫細胞相互配合，各司其職，可以帶來1+1＞2的抗腫瘤效果。最新研究顯示DC細胞與CIK細胞共培養(yǎng)后,提高了細胞的增殖速度和殺傷活性,且使其對腫瘤細胞的殺傷作用更具特異性。而且DCCIK細胞對于血液、消化、呼吸、泌尿及生殖系統(tǒng)等多個系統(tǒng)腫瘤細胞均有殺傷作用。

腫瘤生物治療是多種治療策略和治療手段的總稱，是應用各種生物治療制劑和手段來調節(jié)（增強）機體的免疫力和抗癌能力，維護機體生理平衡，抗御腫瘤的一種腫瘤治療新方法。腫瘤生物治療按照作用機理來分類，主要包括腫瘤免疫治療、腫瘤分子靶向治療、腫瘤基因治療、腫瘤干細胞相關治療等。其中生物DC-CIK免疫治療技術近年來已取得明顯突破，已在臨床治療上廣泛應用。

上海腫瘤生物治療中心是上海首家開展應用生物免疫治療的國家級腫瘤生物治療中心，擁有生物DC-CIK免疫治療、生物BLK免疫治療等技術。生物DC-CIK免疫治療是通過調動人體免疫系統(tǒng)殺滅腫瘤，發(fā)揮長期監(jiān)視的作用，克服了手術、放化療“不徹底、易轉移復發(fā)、毒副反應大”的弊端。不僅讓廣大腫瘤患者看到重生的希望，更為他們帶來了實實在在的效果。上海腫瘤生物治療中心自成立以來，已成功救治了千余位惡性腫瘤患者，患者平均5年生存率提高近一倍，并最終實現(xiàn)長期生存，創(chuàng)造了無數(shù)抗癌奇跡!

相關內容：2012-2-3CCTV《走進科學 扼殺癌細胞》節(jié)目視頻

臨床實例：生物治療有效阻止乳腺癌復發(fā)轉移

上海腫瘤生物治療中心咨詢熱線：400-6128-399

第四篇：青春期特征

青春期心理特征

★獨立性增強。隨著少男少女自我意識的形成，他們的獨立性急劇增強，他們不再被動地聽從父母的教誨和安排，而是渴望用自己的眼睛看世界，用自己的標準衡量是非曲直。這種從被動到主動，從依賴到獨立的轉變，對于青少年來說是成長的必由之路。

★情緒兩極化。青春期孩子情感濃烈，熱情奔放，情緒的兩極性表現(xiàn)得十分突出。他們既會為一時的成功而激動不已，也會為小小的失意而抑郁消沉。他們情緒多變，經常出現(xiàn)莫名的煩惱、焦慮。

★心理上“鎖”。進入青春期，少男少女結束了“少年不知愁滋味”的孩童時代，進入了“多事之秋”。此時由于心理的不斷發(fā)展，他們的情緒自控能力比孩提時有了較大的提高，學會掩飾、隱藏自己的真實情緒，出現(xiàn)心理“閉鎖”的特點。過去愛說愛笑的孩子，進入青春期可能會變得沉默寡言。他們常把自己關在房間里，很少和父母交談，甚至拒絕父母的關愛。★心理向成熟過渡。青春期是長大成人的開始，是由不成熟向成熟的過渡。這一過程對他們來說是漫長而痛苦的。此時，他們既非大人，又非兒童，原來的孩童世界已被打破，但新的成人世界又尚未建立。因此，他們的內心充滿了矛盾和沖突。比如，生理成熟提前和心理成熟滯后的矛盾；獨立意識增強與實際能力偏低的矛盾；渴望他人理解，但又心理“閉鎖”的矛盾。

★行為易沖動。美國和加拿大學者的最新研究指出，青春期青少年的大腦中，負責控制感情和沖動的神經尚未發(fā)育成熟，這是他們易沖動的原因。

（一）身心發(fā)展時差錯位

在青春期，生理發(fā)育迅速成熟，而心理發(fā)育則相對遲緩，從而造成人的心理成熟水平、社會閱歷積累與急劇的生理成熟不相適應，出現(xiàn)了心理年齡與生理年齡相脫離的現(xiàn)象。從而會產生許多心理矛盾：個人要求與依賴關系，自我設計與師長要求，理想目標與現(xiàn)實可能，個人消費與經濟能力，意識與社會行為，這種主觀上欲求與客觀上可能的心理矛盾，引起了他們內心的煩惱與不安。因此青春期容易產生心理不平衡和身心功能障礙。

（二）智力發(fā)展迅猛活躍

所謂智力，一般說來，是指人的心理特征，包括觀察、記憶、思維、想象以及創(chuàng)造性地解決問題的能力。

眾所周知，人總是在年輕的時期最有活力。不少事實證明，有很多人在他們未成年時會迸發(fā)出智慧的火花，而成年之后卻反而平淡了。這說明，青少年時期在一個人智力發(fā)展中有著極其重要的地位。

由于青春期的思維發(fā)生了質變－－抽象邏輯思維開始占主要地位，也必然會影響和制約其他心理現(xiàn)象發(fā)生質的變化。

（三）情緒發(fā)展強烈多變

心理學認為，人的需要是否得到滿足會引起對事物的好惡態(tài)度，從而產生肯定或否定的情緒體驗。我國古人稱這為，人有喜怒哀懼愛惡欲七種情緒。

心理學研究表明，人的情緒雖與人體的生理喚醒狀態(tài)有著密切的關系，但也受社會生活所影響，受人的認知過程的特點所制約。

青春期情緒發(fā)展的特征是：(1)易于波動并潛藏不安，表現(xiàn)為寂寞與孤獨，憂慮與不安，以及苦悶與憂郁；(2)憧憬未來并富于幻想；(3)情緒多樣并反應強烈。

可以認為，人到了青春期，既像一輪冉冉升起的朝陽，充滿無限的生命力，又象一艘航行在變幻莫測大海里的航船，隨時都有遭到風暴襲擊的危險。這種難以駕駛的情緒和由于生理上的迅速發(fā)展變化所帶來的惱悶心情，就構成了青春期男女情緒和情感的典型特征。

（四）個性發(fā)展可變可塑

所謂個性，是指個人穩(wěn)定的心理特征（包括氣質、性格、興趣、能力等）的總和，也就是平常所說的一個人的精神面貌。

心理學認為，在青春期，自我評價和社會評價對形成獨特的個性起著重大的作用。青春期的個性特征表現(xiàn)為：(1)認同感逐漸擴大；(2)價值取向開始形成；(3)閉鎖心理開始出現(xiàn)；(4)興趣范圍逐漸擴大；(5)評價能力不斷發(fā)展；(6)行為方式發(fā)生變化。

（五）自我發(fā)展突出高漲

人的自我發(fā)展受到自我意識的影響與制約。而自我意識則是人們對人生對自己逐漸形成一定型式的自我價值觀、自我認識能力，能按照自己的需要不斷去探求人生道路和選擇自己的發(fā)展方向，具體表現(xiàn)為：企圖和要求擺脫父母和教師的管束，自行其事：不承認自己是小孩，要求長者平等相待，希望父母和教師充分理解和尊重他們的人格。

總之，到了青春期，人們開始注視自我、關心自我、發(fā)現(xiàn)自我、突出自我、獨立自我。

（六）情愛發(fā)展單純幼稚

在青春期，情愛包括友情、育情等多個方面。

友情，反映為對同學、同志的情愛。青春期與兒童期相比，有了很大的專注性和穩(wěn)定性。到了后期，友情甚至會具有一定的神秘性和浪漫性，講“義氣”，較“虔誠”。

育情，反映為對父母、師長和撫養(yǎng)、教育過他們的人的情愛。青春期，表現(xiàn)為有一定的感恩性和真誠性。

（七）交際發(fā)展自主自鎖

在青春期，交際逐漸擴大。由于自我意識的增強，自我價值觀的逐步形成，他們開始按照自己的價值觀來評判與自己交往的人，選擇與自己投合的朋友，且常常會排斥旁人的議論、影響與干預。因此帶有明顯的自主性、自鎖性。

一般說來，青春期的交際發(fā)展中，起作用的是興趣相同、性情相投、思想共鳴、甘苦共享等思想感情因素。

（八）理想發(fā)展起伏不定

所謂理想，是指有實現(xiàn)可能性的對未來事物的想象和希望。富于幻想、探索人生、憧憬未來是青春期的心理特征之一。他們渴望走向社會，確立個人和社會的理想，勇于開拓創(chuàng)造，敢于沖鋒陷陣。

理想受到人生的制約。理想的產生有賴于個人生理的成熟、社會的要求和個人認識水平的發(fā)展這三個基本條件。

第五篇：散文詩特征

散文詩特征： 散文詩兼有詩與散文特點的一種現(xiàn)代抒情文學體裁。它融合了詩的表現(xiàn)性和散文描寫性的某些特點。在本質上它屬于詩﹐有詩的情緒和幻想﹐給讀者美和想象；在內容上它保留了有詩意的散文性細節(jié)；在形式上它有散文的外觀﹐不像詩歌那樣分行和押韻﹐但不乏內在的音韻美和節(jié)奏感。散文詩一般表現(xiàn)作者基于社會和人生背景的小感觸﹐注意描寫客觀生活觸發(fā)下思想情感的波動和片斷。這些特點﹐決定了它題材上的豐富性﹐也決定了它的形式短小靈活。