第一篇：T6新世紀(jì)紫外可見分光光度計 詳細操作步驟

T6新世紀(jì)紫外可見分光光度計

快速操作指南

一、開機自檢：依次打開打印機、儀器主機電源，儀器開始初始化；約3分鐘時間初始化完成。

◆初始化完成后，儀器進入主菜單界面。

二、進入光度測量狀態(tài)：在上圖所示狀態(tài)按

鍵，進入光度測量界面。

三、進入測量界面：按

鍵進入樣品測定界面。

四、設(shè)置測量波長：按按

鍵，在下圖界面輸入測量的波長，例如需要在460nm測量，輸入460，鍵確認，儀器將自動調(diào)整波長。

◆調(diào)整波長完成后如下圖

五、進入設(shè)置參數(shù)：在這個步驟中主要設(shè)置樣品池。按到“試樣設(shè)定”，如圖顯示。按

鍵進入?yún)?shù)設(shè)定界面，按

鍵使光標(biāo)移動

鍵確認，進入設(shè)定界面。

六、設(shè)定使用樣品池個數(shù)：按鍵使光標(biāo)移動到“使用樣池數(shù)”，如圖顯示。按鍵循環(huán)選擇需要使用的樣品池個數(shù)。（主要根據(jù)使用比色皿數(shù)量確定，比如使用2個比色皿，則修改為2）

七、樣品測量：按鍵返回到參數(shù)設(shè)定界面，再按

鍵返回到光度測量界面。在1號樣品

鍵進行空白校正，再按池內(nèi)放入空白溶液，2號池內(nèi)放入待測樣品。關(guān)閉好樣品池蓋后按鍵進行樣品測量。測量結(jié)果如下圖顯示：

如果需要測量下一個樣品，取出比色皿，更換為下一個測量的樣品按

鍵既可讀數(shù)。

如果需要更換波長，可以直接按鍵，調(diào)整波長。

注意：更換波長后必須重新按進行空白校正。

如果每次使用的比色皿數(shù)量是固定個數(shù)，下一次使用儀器時可以跳過第五、六步驟直接進入樣品測量。

八、結(jié)束測量：測量完成后按鍵打印數(shù)據(jù)，如果沒有打印機請記錄數(shù)據(jù)。退出程序或關(guān)閉儀器后測量數(shù)據(jù)將消失。確保已從樣品池中取出所有比色皿，清洗干凈以便下一次使用。按返回到儀器主菜單界面后再關(guān)閉儀器電源。

鍵直到

第二篇：Uvmini-1240紫外分光光度計操作

UVmini-1240紫外分光光度計

一、原理：同721/722

二、儀器簡介

島津UVmini－1240是一款小巧靈便的紫外可見分光光度計，波長范圍：190~1100nm，波長準(zhǔn)確度±0.3nm，吸光度測量范圍-0.3~3.0

Abs，配20W鹵素?zé)簦ㄩL壽命2000h型）和氘燈。

儀器面板介紹：

1、START/STOP（啟動/停止）參數(shù)設(shè)置完成按下該鍵開始或停止測量。

2、AUTO

ZERO

（自動歸零）按此鍵，當(dāng)前波長下讀數(shù)將自動設(shè)為0Abs（100%T），確認樣品測量前在放置有空白吸收池。

3、GOTO

WL，改變波長

4、ENTER（鍵）

輸入數(shù)值按該鍵確認所輸入的數(shù)值

5、光標(biāo)鍵

7、RETURN

返回鍵

8、LOD

CONT

調(diào)對比度

9、PRINT（打印）用該鍵輸出當(dāng)前屏幕的硬拷貝

10、數(shù)字鍵

11、CE鍵

清除數(shù)值輸入錯誤可按此鍵清除

12、F1、F2、F3、F4，選擇對應(yīng)的功能

13、開關(guān)（背面）

14、樣品室

三、操作

1、打開儀器后部電源開關(guān)，分光光度計開始自檢，所有項目進行初始化，每一項初始化完成，顯示OK，大概初始化過程約需6分鐘。

2、每一項初始化正常，將顯示“OK”，若檢測異常，將出現(xiàn)“NG”（No

Good）字樣，出現(xiàn)“NG”信息，按照表中檢測點的項目檢查儀器。

3、初始化結(jié)束后，UV1240同樣存在預(yù)熱穩(wěn)定的過程，10分鐘可進入樣品測定。

4、樣品測定（可選以下兩種方式）

（1）、按下1“光度值”鍵，進入簡易的吸光度測量，按下GOTO

WL選擇相應(yīng)的波長，按下ENTER確定鍵，確定后，空白放在樣池中清零，倒入樣品，進行樣品測定，得出吸光值A(chǔ)結(jié)果，納入計算，計算方法與722分光光度計一致。

（2）、按下F1“參數(shù)”，選擇相應(yīng)的曲線進入測定界面，先把空白試液放在樣池中，清零，再放入入樣品，進行樣品測定。

5、曲線制作操作

按下3“定量”鍵，進入多點標(biāo)準(zhǔn)，在標(biāo)準(zhǔn)個數(shù)中輸入曲線中所有點的數(shù)值（包括零點），選擇測定次數(shù)，是否過原點，設(shè)置完成，按下START/STOP鍵，切換到曲線制作屏幕，設(shè)置λ即相應(yīng)的波長，2鍵方法中修改成為所需的條件，按下測定鍵，輸入曲線相應(yīng)的濃度，選擇2測定進行曲線的測定，所有數(shù)據(jù)測定完成后，保存在數(shù)據(jù)文件中即可（只有“0截距”設(shè)定為“否”的情況下才顯示相關(guān)系數(shù)r2和線性方程）。

6、比色完畢，按RETURN建回到初始界面，關(guān)機，蓋上防塵罩。

三、維護

1、使用儀器應(yīng)保持室內(nèi)清潔，可用水或少量清洗劑潤濕的軟布清潔，擦拭儀器避免使用過濕的抹布，或液體滴入樣品室。滴入水和有機溶劑，易導(dǎo)致電路故障或機械故障。

2、當(dāng)處理大量液體樣品，立即擦拭漸灑的樣品并檢查樣品室的底板上是否漸灑樣品溶液，確認無殘留，如有蒸發(fā)的氣體將充滿樣品室的光通道，腐蝕內(nèi)部元件并引起測定結(jié)果不準(zhǔn)確。

3、檢查基線平直度（原則上每月一次），如存在異常，或不能回零，則校正儀器基線。

（1）、測量方式：ABS

（2）、波長范圍：1100nm~200nm

（3）、記錄范圍：-0.01A~0.01A

（4）、掃描速度：快

（5）、掃描次數(shù)：1

（6）、顯示方式：順序

基線平直度應(yīng)在±0.010ABS之間，不包括震動噪聲。點擊“?；€”開始，不放比色皿進行空校。

4、檢查波長準(zhǔn)確度（原則上每月一次）。

紫外分光光度計在656.1nm和486.0nm處有2個特征銳線校準(zhǔn)紫外分光光度計的最好的方式，準(zhǔn)確度極高，所以只用這兩個波長校驗波長準(zhǔn)確度。

（1）、測量方式：E（能量）

（2）、波長范圍：660nm~650nm

（3）、記錄范圍：

0E~150E

（4）、掃描速度：非常慢

（5）、掃描次數(shù)：1掃描（1很快2快3中4慢5很慢）速度越快，取樣間隔越寬，數(shù)據(jù)點少，掃描時間所需時間越短。

（6）、顯示方式：順序

（7）、增益：3（最小設(shè)定1，最大為6，每一級靈敏度大約提高4倍）

（8）、光源：D2燈

比較找出峰的波長與656.1nm的差值，應(yīng)在±1.0之間。

（1）、測量方式：E

（2）、波長范圍：

490nm~480nm

（3）、記錄范圍：

0E~30E

（4）、掃描速度：非常慢

（5）、掃描次數(shù)：1掃描

（6）、顯示方式：順序

（7）、增益：3

（8）、光源：D2燈

比較找出峰的波長與486.0nm的差值，應(yīng)在±1.0之間。

5、日常使用時，有時會出現(xiàn)無法調(diào)零，可能因為空白消光值過高（高于0.200Abs）或測量室內(nèi)發(fā)生腐蝕或光柵氧化引起，班組可以清理測量室衛(wèi)生或進行基線校正。

6、實驗室的環(huán)境濕度一般控制45~80%（若室內(nèi)溫度為30℃或更高，相對濕度應(yīng)不超過70%），溫度一般控制在15~35℃之間。

7、在日常維護工作中要經(jīng)常更換儀器的硅膠，定期開機，這樣才能保證儀器的正常使用和測量數(shù)據(jù)穩(wěn)定可靠。

四、注意：同721/722

僅供參考

第三篇：紫外可見分光光度計單一來源采購公告-華東師范大學(xué)

單一來源采購公告

根據(jù)相關(guān)規(guī)定，現(xiàn)對紫外可見分光光度計進行單一來源采購，歡迎合格的供應(yīng)商前來報價。

項目名稱：紫外可見分光光度計 項目編號：HS-2017178 項目聯(lián)系方式： 聯(lián)系人：王翠紅 聯(lián)系電話：***

采購單位聯(lián)系方式：

采購單位：華東師范大學(xué)設(shè)備處 采購單位地址：上海市東川路500號 采購單位聯(lián)系方式：劉老師 021-54345242

一、擬采購的貨物或者服務(wù)的說明: 紫外可見分光光度計用于常規(guī)有機物定性、定量檢測，同時通過配備積分球附件可以用于不同溫度下粉末、紙、布料、玻璃、薄膜等固體試樣的漫反射、鏡面反射等反射光譜測定。設(shè)備組成：紫外可見主機、溫控系統(tǒng)、固體樣品支架、樣品池（用于固體、液體及粉末等不同樣品）、積分球、電腦、打印機、附件及配件組成。該成套設(shè)備必須是進口原裝，不接受由不同品牌、廠家模塊組合的產(chǎn)品。

二、采用單一來源采購方式的原因及相關(guān)說明: 紫外可見分光光度計是超分子有機化學(xué)研究工作中進行手性化合物合成與分析，測定超分子化合物紫外吸收的必備分析儀器。作為綠色化學(xué)實驗室全合成研究方向的學(xué)術(shù)骨干，在我們的研究工作中，每天都有大量合成化合物需要進行紫外吸收的測試，需要對樣品在不同溫度下漫反射和鏡面反射進行研究，從而確定化合物的正確結(jié)構(gòu)。這些工作要通過紫外分光光度計來實現(xiàn)。有機化學(xué)合成化合物的研究中，需要我們根據(jù)合成化合物的各種譜圖進行結(jié)構(gòu)分析，其中紫外光譜分析是其中一項。我們現(xiàn)有的質(zhì)譜分析采用的是島津公司的基質(zhì)輔助激光解析質(zhì)譜、制備型液質(zhì)聯(lián)用儀及氣質(zhì)聯(lián)用儀等一系列儀器，研究數(shù)據(jù)中一般要求實驗及表征數(shù)據(jù)進行統(tǒng)一性，所以采用同一廠家的儀器是數(shù)據(jù)統(tǒng)一的基礎(chǔ)?？紤]到數(shù)據(jù)的一致性，我們需要將紫外數(shù)據(jù)和熒光、紅外以及質(zhì)譜數(shù)據(jù)進行對比計算，得到理想的實驗結(jié)果。這套儀器的配套不僅可以提高本小組的工作效率，同時還可以為重點實驗室其他小組，甚至校內(nèi)其他單位服務(wù)。

基于以上原因，結(jié)合樣品在不同溫度下漫反射和鏡面反射研究的需要，我們申請采購島津公司的配備溫控裝置和積分球的紫外可見分光光度計。

三、公示時間：

2017年 10 月 30 日至2017年 11 月 3 日 16點止

四、擬定的唯一供應(yīng)商名稱及其地址：

島津企業(yè)管理(上海)有限公司 淮海西路570號

五、其它補充事宜

供應(yīng)商對本項目有異議的，可于公示期內(nèi)，以書面形式（加蓋單位公章）向華東師范大學(xué)設(shè)備處提出。

六、預(yù)算金額

預(yù)算金額：3.0萬美金

第四篇：紫外—可見分光光度法教案

第五章

紫外—可見分光光度法

一．教學(xué)內(nèi)容

1． 紫外－可見吸收光譜的產(chǎn)生（分子的能級及光譜、有機物及無機物電子能級躍遷的類型和特點）2． 吸收定律及其發(fā)射偏差的原因

3． 儀器類型、各部件的結(jié)構(gòu)、性能以及儀器的校正 4． 分析條件的選擇

5． 應(yīng)用（定性及結(jié)構(gòu)分析、定量分析的各種方法、物理化學(xué)常數(shù)的測定及其它方面的應(yīng)用

二．重點與難點

1． 比較有機化合物和無機化合物各種電子躍遷類型所產(chǎn)生吸收帶的特點及應(yīng)用價值

2． 進行化合物的定性分析、結(jié)構(gòu)判斷

3． 定量分析的新技術(shù)（雙波長法、導(dǎo)數(shù)光譜法、動力學(xué)分析法）4． 物理化學(xué)常數(shù)的測定

三．教學(xué)要求

1． 較為系統(tǒng)、深入地掌握各種電子躍遷所產(chǎn)生的吸收帶及其特征、應(yīng)用 2． 熟練掌握吸收定律的應(yīng)用及測量條件的選擇 3． 較為熟練儀器的類型、各組件的工作原理 4． 運用各種類型光譜及的經(jīng)驗規(guī)則，判斷不同的化合物

5． 掌握定量分析及測定物理化學(xué)常數(shù)的常見基本方法 6． 一般掌握某些新的分析技術(shù)

四．學(xué)時安排

5學(xué)時

研究物質(zhì)在 紫外、可見光區(qū) 的分子吸收光譜 的分析方法稱為紫外-可見分光光度法。紫外—可見分光光度法是利用某些物質(zhì)的 1 分子吸收200 ~ 800 nm光譜區(qū)的輻射來進行分析測定的方法。這種分子吸收光譜產(chǎn)生于價電子和分子軌道上的電子 在電子能級間的躍遷，廣泛用于無機和有機物質(zhì)的定性和定量測定。

第一節(jié)

紫外—可見吸收光譜

一、分子吸收光譜的產(chǎn)生

在分子中，除了電子相對于原子核的運動外，還有核間相對位移引起的振動和轉(zhuǎn)動。這三種運動能量都是量子化的，并對應(yīng)有一定能級。在每一電子能級上有許多間距較小的振動能級，在每一振動能級上又有許多更小的轉(zhuǎn)動能級。

若用△E電子、△ E振動、△ E轉(zhuǎn)動分別表示電子能級、振動能級轉(zhuǎn)動能級差，即有△ E電子? △ E振動? △ E轉(zhuǎn)動。處在同一電子能級的分子，可能因其振動能量不同，而處在不同的振動能級上。當(dāng)分子處在同一電子能級和同一振動能級時，它的能量還會因轉(zhuǎn)動能量不同，而處在不同的轉(zhuǎn)動能級上。所以分子的總能量可以認為是這三種能量的總和：

E分子 = E電子

+ E振動

+ E轉(zhuǎn)動

當(dāng)用頻率為?的電磁波照射分子，而該分子的較高能級與較低能級之差△ E恰好等于該電磁波的能量 h?時，即有

△ E

= h?

（h為普朗克常數(shù)）

此時，在微觀上出現(xiàn)分子由較低的能級躍遷到較高的能級；在宏觀上則透射光的強度變小。若用一連續(xù)輻射的電磁波照射分子，將照射前后光強度的變化轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘枺⒂涗浵聛?，然后以波長為橫坐標(biāo)，以電信號（吸光度 A）為縱坐標(biāo)，就可以得到一張光強度變化對波長的關(guān)系曲線圖——分子吸收光譜圖。

二、分子吸收光譜類型

根據(jù)吸收電磁波的范圍不同，可將分子吸收光譜分為遠紅外光譜、紅外光譜及紫外、可見光譜三類。

分子的轉(zhuǎn)動能級差一般在0.005 ~ 0.05eV。產(chǎn)生此能級的躍遷，需吸收波長約為250 ~ 25?m的遠紅外光，因此，形成的光譜稱為轉(zhuǎn)動光譜或遠紅外光譜。

分子的振動能級差一般在0.05 ~ 1 eV，需吸收波長約為25 ~ 1.25?m的紅外光才能產(chǎn)生躍遷。在分子振動時同時有分子的轉(zhuǎn)動運動。這樣，分子振動產(chǎn)生的吸收光譜中，包括轉(zhuǎn)動光譜，故常稱為振-轉(zhuǎn)光譜。由于它吸收的能量處于紅外光區(qū)，故又稱紅外光譜。電子的躍遷能差約為1 ~ 20 eV，比分子振動能級差要大幾十倍，所吸收光的波長約為12.5 ~ 0.06?m，主要在真空紫外到可見光區(qū)，對應(yīng)形成的光譜，稱為電子光譜或紫外、可見吸收光譜。

通常，分子是處在基態(tài)振動能級上。當(dāng)用紫外、可見光照射分子時，電子可以從基態(tài)激發(fā)到激發(fā)態(tài)的任一振動（或不同的轉(zhuǎn)動）能級上。因此，電子能級躍遷產(chǎn)生的吸收光譜，包括了大量譜線，并由于這些譜線的重疊而成為連續(xù)的吸收帶，這就是為什么分子的紫外、可見光譜不是線狀光譜，而是帶狀光譜的原因。又因為絕 大多數(shù)的分子光譜分析，都是用液體樣品，加之儀器的分辨率有限，因而使記錄所得電子光譜的譜帶變寬。

由于氧、氮、二氧化碳、水等在真空紫外區(qū)（60 ~ 200 nm）均有吸收，因此在測定這一范圍的光譜時，必須將光學(xué)系統(tǒng)抽成真空，然后充以一些惰性氣體，如氦、氖、氬等。鑒于真空紫外吸收光譜的研究需要昂貴的真空紫外分光光度計，故在實際應(yīng)用中受到一定的限制。我們通常所說的紫外—可見分光光度法，實際上是指近紫外、可見分光光度法。

第二節(jié)

化合物紫外—可見光譜的產(chǎn)生

在紫外和可見光譜區(qū)范圍內(nèi)，有機化合物的吸收帶主要由???*、???*、n??*、n??*及電荷遷移躍遷產(chǎn)生。無機化合物的 3 吸收帶主要由電荷遷移和配位場躍遷（即d—d躍遷和f—f躍遷）產(chǎn)生.由于電子躍遷的類型不同，實現(xiàn)躍遷需要的能量不同，因此吸收光的波長范圍也不相同。其中???*躍遷所需能量最大，n??*及配位場躍遷所需能量最小，因此，它們的吸收帶分別落在遠紫外和可見光區(qū)。從圖中 可知，???*（電荷遷移）躍遷產(chǎn)生的譜帶強度最大，???*、n??*、n??*躍遷產(chǎn)生的譜帶強度次之，（配位躍遷的譜帶強度最小）。

一、有機化合物的紫外—可見吸收光譜

（一）、躍遷類型

基態(tài)有機化合物的價電子包括成鍵?電子、成鍵?電子和非鍵電子（以 n表示）。分子的空軌道包括反鍵 ?*軌道和反鍵?*軌道，因此，可能的躍遷為???*、???*、n??* n??*等。

1，???*躍遷

它需要的能量較高，一般發(fā)生在真空紫外光區(qū)。飽和烴中的—c—c—鍵屬于這類躍遷，例如乙烷的最大吸收波長?max為135nm。

2，n??*躍遷

實現(xiàn)這類躍遷所需要的能量較高，其吸收光譜落于遠紫外光區(qū)和近紫外光區(qū)，如CH3OH和CH3NH2的n??*躍遷光譜分別為183nm和213nm。

3，???*躍遷

它需要的能量低于???*躍遷，吸收峰一般 處于近紫外光區(qū)，在200 nm左右，其特征是摩爾吸光系數(shù)大，一般?max?104，為強吸收帶。如乙烯（蒸氣）的最大吸收波長?max為162 nm。

4，n??*躍遷

這類躍遷發(fā)生在近紫外光區(qū)。它是簡單的生色團如羰基、硝基等中的孤對電子向反鍵軌道躍遷。其特點是譜帶強度弱，摩爾吸光系數(shù)小，通常小于100，屬于禁阻躍遷。

5，電荷遷移躍遷

所謂電荷遷移躍遷是指用電磁輻射照射化合物時，電子從給予體向與接受體相聯(lián)系的軌道上躍遷。因此，電荷遷移躍遷實質(zhì)是一個內(nèi)氧化—還原的過程，而相應(yīng)的吸收光譜稱為電荷遷移吸收光譜。例如某些取代芳烴可產(chǎn)生這種分子內(nèi)電荷遷移躍遷吸收帶。

電荷遷移吸收帶的譜帶較寬，吸收強度較大，最大波長處的摩爾吸光系數(shù)?max可大于104。

（二）、常用術(shù)語 1，生色團

從廣義來說，所謂生色團，是指分子中可以吸收光子而產(chǎn)生電子躍遷的原子基團。但是，人們通常將能吸收紫外、可見光的原子團或結(jié)構(gòu)系統(tǒng)定義為生色團。

2，助色團

助色團是指帶有非鍵電子對的基團，如-OH、-OR、-NHR、-SH、-Cl、-Br、-I等，它們本身不能吸收大于200nm的光，但是當(dāng)它們與生色團相連時，會使生色團的吸收峰向長波方向移動，并且增加其吸光度。

3，紅移與藍移（紫移）

某些有機化合物經(jīng)取代反應(yīng)引入含有未共享電子對的基團（-OH、-OR、-NH2、-SH、-Cl、-Br、-SR、-NR2）之后，吸收峰的波長將向長波方向移動，這種效應(yīng)稱為紅移效應(yīng)。這種會 使某化合物的最大吸收波長向長波方向移動的基團稱為向紅基團。

在某些生色團如羰基的碳原子一端引入一些取代基之后，吸收峰的波長會向短波方向移動，這種效應(yīng)稱為藍移（紫移）效應(yīng)。這些會使某化合物的最大吸收波長向短波方向移動的基團（如-CH2、-CH2CH3、-OCOCH3）稱為向藍（紫）基團。(三)有機化合物紫外-可見吸收光譜 1，飽和烴及其取代衍生物

飽和烴類分子中只含有?鍵，因此只能產(chǎn)生???*躍遷，即?電子從成鍵軌道（?）躍遷到反鍵軌道（? *）。飽和烴的最大吸收峰一般小于150nm，已超出紫外、可見分光光度計的測量范圍。

飽和烴的取代衍生物如鹵代烴，其鹵素原子上存在n電子，可產(chǎn)生n??* 的躍遷。n??* 的能量低于???*。例如，CH3Cl、CH3Br和CH3I的n??* 躍遷分別出現(xiàn)在173、204和258nm處。這些數(shù)據(jù)不僅說明氯、溴和碘原子引入甲烷后，其相應(yīng)的吸收波長發(fā)生了紅移，顯示了助色團的助色作用。直接用烷烴和鹵代烴的紫外吸收光譜分析這些化合物的實用價值不大。但是它們是測定紫外和（或）可見吸收光譜的良好溶劑。2，不飽和烴及共軛烯烴

在不飽和烴類分子中，除含有?鍵外，還含有?鍵，它們可以產(chǎn)生???*和???*兩種躍遷。???*躍遷的能量小于 ???*躍遷。例如，在乙烯分子中，???*躍遷最大吸收波長為180nm

在不飽和烴類分子中，當(dāng)有兩個以上的雙鍵共軛時，隨著共軛系統(tǒng)的延長，???*躍遷的吸收帶 將明顯向長波方向移動，吸收強度也隨之增強。在共軛體系中，???*躍遷產(chǎn)生的吸收帶又稱為K帶。

3，羰基化合物

羰基化合物含有?C=O基團。?C=O基團主要可產(chǎn)生???*、n??*、n??*三個吸收帶，n??*吸收帶又稱R帶，落于近紫外或紫外光區(qū)。醛、酮、羧酸及羧酸的衍生物，如酯、酰胺等，都含有 羰基。由于醛酮這類物質(zhì)與羧酸及羧酸的衍生物在結(jié)構(gòu)上的差異，因此它們n??*吸收帶的光區(qū)稍有不同。

羧酸及羧酸的衍生物雖然也有n??*吸收帶，但是，羧酸及羧酸的衍生物的羰基上的碳原子直接連結(jié)含有未共用電子對的助色團，如-OH、-Cl、-OR等，由于這些助色團上的n電子與羰基雙鍵的?電子產(chǎn)生n??共軛，導(dǎo)致?*軌道的能級有所提高，但這種共軛作用并不能改變n軌道的能級，因此實現(xiàn)n??* 躍遷所需的能量變大，使n??*吸收帶藍移至210nm左右。4，苯及其衍生物

苯有三個吸收帶，它們都是由???*躍遷引起的。E1帶出現(xiàn)在180nm（?MAX = 60，000）； E2帶出現(xiàn)在204nm（?MAX = 8，000）；B帶出現(xiàn)在255nm（?MAX = 200）。在氣態(tài)或非極性溶劑中，苯及其許多同系物的B譜帶有許多的精細結(jié)構(gòu)，這是由于振動躍遷在基態(tài)電子上的躍遷上的疊加而引起的。在極性溶劑中，這些精細結(jié)構(gòu)消失。當(dāng)苯環(huán)上有取代基時，苯的三個特征譜帶都會發(fā)生顯著的變化，其中影響較大的是E2帶和B譜帶。5，稠環(huán)芳烴及雜環(huán)化合物

稠環(huán)芳烴，如奈、蒽、芘等，均顯示苯的三個吸收帶，但是與苯本身相比較，這三個吸收帶均發(fā)生紅移，且強度增加。隨著苯環(huán)數(shù)目的增多，吸收波長紅移越多，吸收強度也相應(yīng)增加。

當(dāng)芳環(huán)上的-CH基團被氮原子取代后，則相應(yīng)的氮雜環(huán)化合物（如吡啶、喹啉）的吸收光譜，與相應(yīng)的碳化合物極為相似，即吡啶與苯相似，喹啉與奈相似。此外，由于引入含有n電子的N原子的，這類雜環(huán)化合物還可能產(chǎn)生n??*吸收帶。

二、無機化合物的紫外-可見吸收光譜

產(chǎn)生無機化合物紫外、可見吸收光譜的電子躍遷形式，一般分為兩大類：電荷遷移躍遷和配位場躍遷。

（一）電荷遷移躍遷

無機配合物有電荷遷移躍遷產(chǎn)生的電荷遷移吸收光譜。

在配合物的中心離子和配位體中，當(dāng)一個電子由配體的軌道躍遷到與中心離子相關(guān)的軌道上時，可產(chǎn)生電荷遷移吸收光譜。

不少過度金屬離子與含生色團的試劑反應(yīng)所生成的配合物以及許多水合無機離子，均可產(chǎn)生電荷遷移躍遷。

此外，一些具有d10電子結(jié)構(gòu)的過度元素形成的鹵化物及硫化物，如AgBr、HgS等，也是由于這類躍遷而產(chǎn)生顏色。

電荷遷移吸收光譜出現(xiàn)的波長位置，取決于電子給予體和電子接受體相應(yīng)電子軌道的能量差。

（二）配位場躍遷

配位場躍遷包括df

躍遷。元素周期表中第四、五周期的過度金屬元素分別含有3d和4d軌道，鑭系和錒系元素分別含有4f和5f軌道。在配體的存在下，過度元素五 個能量相等的d軌道和鑭系元素七個能量相等的f軌道分別分裂成幾組能量不等的d軌道和f軌道。當(dāng)它們的離子吸收光能后，低能態(tài)的d電子或f電子可以分別躍遷至高能態(tài)的d或f軌道，這兩類躍遷分別稱為df

躍遷。由于這兩類躍遷必須在配體的配位場作用下才可能發(fā)生，因此又稱為配位場躍遷。

三、溶劑對紫外、可見吸收光譜的影響

溶劑對紫外—可見光譜的影響較為復(fù)雜。改變?nèi)軇┑臉O性，會引起吸收帶形狀的變化。例如，當(dāng)溶劑的極性由非極性改變到極性時，精細結(jié)構(gòu)消失，吸收帶變向平滑。

改變?nèi)軇┑臉O性，還會使吸收帶的最大吸收波長發(fā)生變化。下表為溶劑對亞異丙酮紫外吸收光譜的影響。

正己烷

CHClCH3OH

H2O ???* ?max/nm

230

238

237

243

n ??*?max/nm

329

315

309

305

由上表可以看出，當(dāng)溶劑的極性增大時，由n ??* 躍遷產(chǎn)生的吸收帶發(fā)生藍移，而由???* 躍遷產(chǎn)生的吸收帶發(fā)生紅移。因此，在測定紫外、可見吸收光譜時，應(yīng)注明在何種溶劑中測定。

由于溶劑對電子光譜圖影響很大，因此，在吸收光譜圖上或數(shù)據(jù)表中必須注明所用的溶劑。與已知化合物紫外光譜作對照時也應(yīng)注明所用的溶劑是否相同。在進行紫外光譜法分析時，必須正確選擇溶劑。選擇溶劑時注意下列幾點：

（1）溶劑應(yīng)能很好地溶解被測試樣，溶劑對溶質(zhì)應(yīng)該是惰性的。即所成溶液應(yīng)具有良好的化學(xué)和光化學(xué)穩(wěn)定性。

（2）在溶解度允許的范圍內(nèi)，盡量選擇極性較小的溶劑。（3）溶劑在樣品的吸收光譜區(qū)應(yīng)無明顯吸收。

第三節(jié)

紫外-可見分光光度計

一、組成部件

紫外-可見分光光度計的基本結(jié)構(gòu)是由五個部分組成：即光源、單色器、吸收池、檢測器和信號指示系統(tǒng)。

（一）光源

對光源的基本要求是應(yīng)在儀器操作所需的光譜區(qū)域內(nèi)能夠發(fā)射連續(xù)輻射，有足夠的輻射強度和良好的穩(wěn)定性，而且輻射能量隨波長的變化應(yīng)盡可能小。

分光光度計中常用的光源有熱輻射光源和氣體放電光源兩類。

熱輻射光源用于可見光區(qū)，如鎢絲燈和鹵鎢燈；氣體放電光源用于紫外光區(qū)，如氫燈和氘燈。鎢燈和碘鎢燈可使用的范圍在340 ~ 2500nm。這類光源的輻射能量與施加的外加電壓有關(guān)，在可見光 9 區(qū)，輻射的能量與工作電壓4次方成正比。光電流與燈絲電壓的n次方（n?1）成正比。因此必須嚴(yán)格控制燈絲電壓，儀器必須配有穩(wěn)壓裝置。

在近紫外區(qū)測定時常用氫燈和氘燈。它們可在160 ~ 375 nm范圍內(nèi)產(chǎn)生連續(xù)光源。氘燈的燈管內(nèi)充有氫的同位素氘，它是紫外光區(qū)應(yīng)用最廣泛的一種光源，其光譜分布與氫燈類似，但光強度比相同功率的氫燈要大3~5倍。

（二）單色器

單色器是能從光源輻射的復(fù)合光中分出單色光的光學(xué)裝置，其主要功能：產(chǎn)生光譜純度高的波長且波長在紫外可見區(qū)域內(nèi)任意可調(diào)。

單色器一般由入射狹縫、準(zhǔn)光器（透鏡或凹面反射鏡使入射光成平行光）、色散元件、聚焦元件和出射狹縫等幾部分組成。其核心部分是色散元件，起分光的作用。單色器的性能直接影響入射光的單色性，從而也影響到測定的靈敏度度、選擇性及校準(zhǔn)曲線的線性關(guān)系等。

能起分光作用的色散元件主要是棱鏡和光柵。

棱鏡有玻璃和石英兩種材料。它們的色散原理是依據(jù)不同的波長光通過棱鏡時有不同的折射率而將不同波長的光分開。由于玻璃可吸收紫外光，所以玻璃棱鏡只能用于350 ~ 3200 nm的波長范圍，即只能用于可見光域內(nèi)。石英棱鏡可使用的波長范圍較寬，可從185 ~ 4000nm，即可用于紫外、可見和近紅外三 個光域。

光柵是利用光的衍射與干涉作用制成的，它可用于紫外、可見及紅外光域，而且在整個波長區(qū)具有良好的、幾乎均勻一致的分辨能力。它具有色散波長范圍寬、分辨本領(lǐng)高、成本低、便于保存和易于制備等優(yōu)點。缺點是各級光譜會重疊而產(chǎn)生干擾。入射、出射狹縫，透鏡及準(zhǔn)光鏡等光學(xué)元件中狹縫在決定單色器性能上起重要作用。狹縫的大小直接影響單色光純度，但過小的狹縫又會減弱 光強。

（三）吸收池

吸收池用于盛放分析試樣，一般有石英和玻璃材料兩種。石英池適用于可見光區(qū)及紫外光區(qū)，玻璃吸收池只能用于可見光區(qū)。為減少光的損失，吸收池的光學(xué)面必須完全垂直于光束方向。在高精度的分析測定中（紫外區(qū)尤其重要），吸收池要挑選配對。因為吸收池材料的本身吸光特征以及吸收池的光程長度的精度等對分析結(jié)果都有影響。

（四）檢測器

檢測器的功能是檢測信號、測量單色光透過溶液后光強度變化的一種裝置。

常用的檢測器有光電池、光電管和光電倍增管等。

硒光電池對光的敏感范圍為300~800nm，其中又以500 ~ 600nm最為靈敏。這種光電池的特點是能產(chǎn)生可直接推動微安表或檢流計的光電流，但由于容易出現(xiàn)疲勞效應(yīng)而只能用于低檔的分光光度計中。

光電管在紫外-可見分光光度計上應(yīng)用較為廣泛。

光電倍增管是檢測微弱光最常用的光電元件，它的靈敏度比一般的光電管要高200倍，因此可使用較窄的單色器狹縫，從而對光譜的精細結(jié)構(gòu)有較好的分辨能力。

（五）信號指示系統(tǒng)

它的作用是放大信號并以適當(dāng)方式指示或記錄下來。常用的信號指示裝置有直讀檢流計、電位調(diào)節(jié)指零裝置以及數(shù)字顯示或自動記錄裝置等。很多型號的分光光度計裝配有微處理機，一方面可對分光光度計進行操作控制，另一方面可進行數(shù)據(jù)處理。

二、紫外-可見分光光度計的類型

紫外-可見分光光度計的類型很多，但可歸納為三種類型，即單光束分光光度計、雙光束分光光度計和雙波長分光光度計。1，單光束分光光度計

經(jīng)單色器分光后的一束平行光，輪流通過參比溶液和樣品溶液，以進行吸光度的測定。這種簡易型分光光度計結(jié)構(gòu)簡單，操作方便，維修容易，適用于常規(guī)分析。2，雙光束分光光度計

經(jīng)單色器分光后經(jīng)反射鏡分解為強度相等的兩束光，一束通過參比池，一束通過樣品池。光度計能自動比較兩束光的強度，此比值即為試樣的透射比，經(jīng)對數(shù)變換將它轉(zhuǎn)換成吸光度并作為波長的函數(shù)記錄下來。

雙光束分光光度計一般都能自動記錄吸收光譜曲線。由于兩束光同時分別通過參比池和樣品池，還能自動消除光源強度變化所引起的誤差。

3，雙波長分光光度計

由同一光源發(fā)出的光被分成兩束，分別經(jīng)過兩個單色器，得到兩束不同波長（?1和?2）的單色光；利用切光器使兩束光以一定的頻率交替照射同一吸收池，然后經(jīng)過光電倍增管和電子控制系統(tǒng)，最后由顯示器顯示出兩個波長處的吸光度差值ΔA（ΔA=A?1-A?2）。對于多組分混合物、混濁試樣（如生物組織液）分析，以及存在背景干擾或共存組分吸收干擾的情況下，利用雙波長分光光度法，往往能提高方法的靈敏度和選擇性。利用雙波長分光光度計，能獲得導(dǎo)數(shù)光譜。

通過光學(xué)系統(tǒng)轉(zhuǎn)換，使雙波長分光光度計能很方便地轉(zhuǎn)化為單波長工作方式。如果能在?1和?2處分別記錄吸光度隨時間變化的曲線，還能進行化學(xué)反應(yīng)動力學(xué)研究。

三、分光光度計的校正

通常在實驗室工作中，驗收新儀器或?qū)嶒炇沂褂眠^一段時間后都要進行波長校正和吸光度校正。

建議采用下述的較為簡便和實用的方法來進行校正：鐠銣玻 璃或鈥玻璃都有若干特征的吸收峰，可用來校正分光光度計的波長標(biāo)尺，前者用于可見光區(qū)，后者則對紫外和可見光區(qū)都適用。也可用K2CrO4標(biāo)準(zhǔn)溶液來校正吸光度標(biāo)度。

定性分析

紫外－可見分光光度法是一種廣泛應(yīng)用的定量分析方法，也是 對物質(zhì)進行定性分析和結(jié)構(gòu)分析的一種手段，同時還可以測定某些 化合物的物理化學(xué)參數(shù)，例如摩爾質(zhì)量、配合物的配合比和穩(wěn)定常 數(shù)、以及酸、堿的離解常數(shù)等。

紫外－可見分光光度法在無機元素的定性分析應(yīng)用方面 是比較少的，無機元素的定性分析主要用原子發(fā)射光譜法或化學(xué)分 析法。在有機化合物的定性分析鑒定及結(jié)構(gòu)分析方面，由于紫外－ 可見光譜較為簡單，光譜信息少，特征性不強，而且不少簡單官能 團在近紫外及可見光區(qū)沒有吸收或吸收很弱，因此，這種方法的應(yīng) 用有較大的局限性。但是它適用于不飽和有機化合物，尤其是共軛體系的鑒定，以此推斷未知物的骨架結(jié)構(gòu)。此外，它可配合紅 外光譜法、核磁共振波譜法和質(zhì)譜法等常用的結(jié)構(gòu)分析法進行定量 鑒定和結(jié)構(gòu)分析，是不失為一種有用的輔助方法。一般定性分析方 法有如下兩種：

1.比較吸收光譜曲線法

吸收光譜的形狀、吸收峰的數(shù)目和位置及相應(yīng)的摩爾吸 光系數(shù)，是定性分析的光譜依據(jù)，而最大吸收波長

及相應(yīng)的是定性分析的最主要參數(shù)。比較法有標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)比較法和標(biāo)準(zhǔn)譜圖比 較法兩種。

利用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)比較，在相同的測量條件下，測定和比較未知物 13 與已知標(biāo)準(zhǔn)物的吸收光譜曲線，如果兩者的光譜完全一致，則可以初步認為它們是同一化合物。為了能使分析更準(zhǔn)確可靠，要注意如下幾點：

一、是盡量保持光譜的精細結(jié)構(gòu)。為此，應(yīng)采用與吸收物質(zhì)作用力小的非極性溶劑，且采用窄的光譜通帶；

二、是吸收光譜采用不同，則曲線只是沿

對

作圖。這樣如果未知物與標(biāo)準(zhǔn)物的濃度

曲線那樣以的比

軸平移，而不是象例移動，更便于比較分析。

三、是往往還需要用其它方法進行證實，如紅外光譜等。利用標(biāo)準(zhǔn)譜圖或光譜數(shù)據(jù)比較。常用的標(biāo)準(zhǔn)譜圖有以下表中的四種：

[1] Sadtler Standard Spectra(Ultraviolet),Heyden,London,1978.薩特勒標(biāo)準(zhǔn)圖譜共收集了46000種化合物的紫外光譜。

[2] R.A.Friedel and M.Orchin,“Ultraviolet and Visible Absorption Spectra of Aromatic Compounds”,Wiley,New York, 1951.本書收集了597種芳香化合物的紫外光譜。

[3] Kenzo Hirayama：“Handbook of Ultraviolet and Visible Absorption Spectra a of Organic Compounds.”,New York,Plenum,1967。

[4] “Organic Electronic Spectral Data”。

2.計算不飽和有機化合物最大吸收波長的經(jīng)驗規(guī)則

有伍德沃德（Woodward）規(guī)則和斯科特（Scott）規(guī)則。

當(dāng)采用其它物理或化學(xué)方法推測未知化合物有幾種可能結(jié)構(gòu)后，可用經(jīng)驗規(guī)則計算它們最大吸收波長，然后再與實測值進行比較，以確認物質(zhì)的結(jié)構(gòu)。

伍德沃德規(guī)則

它是計算共軛二烯、多烯烴及共軛烯酮類化合物π—π*躍遷最大吸收波長的經(jīng)驗規(guī)則，如表13.7和表13.9所示。計算時，先從未知物的母體對照表得到一個最大吸收的基數(shù)，然后對連接在母體中π電子體系(即共軛體系)上的各種取代基以及其他結(jié)構(gòu)因素按上所列的數(shù)值加以修正，得到該化合物的最大吸收波長

。

結(jié)構(gòu)分析

紫外－可見分光光度法可以進行化合物某些基因的判別、共軛體系及構(gòu)型、構(gòu)象的判斷。

1.某些特征集團的判別

有機物的不少基團(生色團)，如羰基、苯環(huán)、硝基、共軛體系等，都有其特征的

紫外或可見吸收帶，紫外－可見分光光度法在判別這些基團時，有時是十分有用的。如在270～300nm處有弱的吸收帶，且隨溶劑極性增大而發(fā)生藍移，就是羰基n－π*躍遷所產(chǎn)生R吸收帶的有力證據(jù)。在184nm附近有強吸收帶(E1帶)，在204nm附近有中強吸收帶(E2帶)，在260nm附近有弱吸收帶且有精細結(jié)構(gòu)(B帶)，是苯環(huán)的特征吸收，等等?？梢詮挠嘘P(guān)資料中查找某些基團的特征吸收帶。

2.共軛體系的判斷

共軛體系會產(chǎn)生很強的K吸收帶，通過繪制吸收光譜，可以判斷化合物是否存在共軛體系或共軛的程度。如果一化合物在210nm以上無強吸收帶，可以認為該化合物不存在共軛體系；若在215～250nm區(qū)域有強吸收帶，則該化合物可能有兩至三個雙鍵的共軛體系，如1－3丁二烯，為217nm，為21,000；若260～350nm 15 區(qū)域有很強的吸收帶，則可能有三至五個雙鍵的共軛體系，如癸五烯有五個共軛雙鍵，3.異構(gòu)體的判斷

包括順反異構(gòu)及互變異構(gòu)兩種情況的判斷。

順反異構(gòu)體的判斷

生色團和助色團處在同一平面上時，才產(chǎn)生最大的共軛效應(yīng)。由于反式異構(gòu)體的空間位阻效應(yīng)小，分子的平面性能較好，共軛效應(yīng)強。因此，及都大于順式異構(gòu)體。例如，肉桂酸的順、反式的吸收如下：

為335nm，為118,000。

＝280nm

295nm =27000

=13500

＝

同一化學(xué)式的多環(huán)二烯，可能有兩種異構(gòu)體：一種是順式異構(gòu)體；另一種是異環(huán)二烯，是反式異構(gòu)體。一般來說，異環(huán)二烯的吸收帶強度總是比同環(huán)二烯來的大。

互變異構(gòu)體的判斷

某些有機化合物在溶液中可能有兩種以上的互變異構(gòu)體處于動態(tài)平衡中，這種異構(gòu)體的互變過程常伴隨有雙鍵的移動及共軛體系的變化，因此也產(chǎn)生吸收光譜的變化。最常見的是某些含氧化合物的酮式與烯醇式異構(gòu)體之間的互變。例如乙酰乙酸乙酯就是和烯醇式兩種互變異構(gòu)體：

它們的吸收特性不同：酮式異構(gòu)體在近紫外光區(qū)的272nm（為為16)，是n－π*躍遷所產(chǎn)生R吸收帶。烯醇式異構(gòu)體的為243nm(為16000)，是π－π*躍遷出共軛體系的K吸收帶。兩種異構(gòu)體的互變平衡與溶劑有密切關(guān)系。在象水這樣的極性溶劑中，由于 可能與H2O形成氫鍵而降低能量以達到穩(wěn)定狀態(tài)，所以酮式異構(gòu)體占優(yōu)勢:

而象乙烷這樣的非極性溶劑中，由于形成分子內(nèi)的氫鍵，且形成共軛體系，使能量降低以達到穩(wěn)定狀態(tài)，所以烯醇式異構(gòu)體比率上升:

此外，紫外－可見分光光度法還可以判斷某些化合物的構(gòu)象(如取代基是平伏鍵還是直平鍵)及旋光異構(gòu)體等。

定量分析

紫外－可見分光光度法定量分析的方法常見到的有如下幾 種 ：

1.單組分的定量分析

如果在一個試樣中只要測定一種組分，且在選定的測量波長下，試樣中其它組分對該組分不干擾，這種單組分的定量分析較簡單。一般有標(biāo)準(zhǔn)對照法和標(biāo)準(zhǔn)曲線法兩種。標(biāo)準(zhǔn)對照法

在相同條件下，平行測定試樣溶液和某一濃度Cs（應(yīng)與試液濃度接近）的標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度Ax和As則由Cs可計算試樣溶液中被測物質(zhì)的濃度Cx

標(biāo)準(zhǔn)對照法因知使用單個標(biāo)準(zhǔn)，引起誤差的偶然因素較多，故往往較不可靠。標(biāo)準(zhǔn)曲線法

這是實際分析工作中最常用的一種方法。配制一系列不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，以不含被測組分的空白溶液作參比，測定標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的吸光度，繪制吸光度－濃度曲線，稱為校正曲線（也叫標(biāo)準(zhǔn)曲線或工作曲線）。在相同條件下測定試樣溶液的吸光度，從校正曲線上找出與之對應(yīng)的未知組分的濃度。

此外，有時還可以采用標(biāo)準(zhǔn)加入法。2.多組分的定量分析

根據(jù)吸光度具有加和性的特點，在同一試樣中可以同時測定兩個或兩個以上組分。假設(shè)要測定試樣中的兩個組分A、B，如果分別繪制A、B兩純物資的吸收光譜，繪出三種情況，如圖13.20所示。

（a）情況表明兩組分互不干擾，可以用測定單組分的方法分

別在λ

1、λ2測定A、B兩組分；

（b）情況表明A組分對B組分的測定有干擾，而B組分對A組分的測定無干擾，則可以在λ1處單獨測量A組分，求得A組分的濃 18 度CA。然后在λ2處測量溶液的吸光度值，根據(jù)吸光度的加和性，即得

及A、B純物質(zhì)的和

則可以求出CB；

（c）情況表明兩組分彼此互相干擾，此時，在λ

1、λ2處分別測定溶液的吸光度

及，而且同時測定A、B純物質(zhì)的、及、。然后列出聯(lián)立方程

解得CA、CB。顯然，如果有n個組分的光譜互相干擾，就必須在n個波長處分別測定吸光度的加和值，然后解n元一次方程以求出各組分的濃度。應(yīng)該指出，這將是繁瑣的數(shù)學(xué)處理，且n越多，結(jié)果的準(zhǔn)確性越差。用計算機處理測定結(jié)果將使運算大為方便。3.雙波長分光光度法

當(dāng)試樣中兩組分的吸收光譜較為嚴(yán)重時，用解聯(lián)立方程的方法測定兩組分的含量可能誤差較大，這時可以用雙波長分光光度法測定。它可以進行一組分在其它組分干擾下，測定該組分的含量，也可以同時測定兩組分的含量。雙波長分光光度法定量測定兩混合物組分的主要方法有等吸收波長法和系數(shù)倍率法兩種。等吸收波長法

試樣中含有A、B兩組分，若要測定B組分，A組分有干擾，采用雙波長法進行B組分測量時方法如下：為了要能消除A組分的吸收干擾，一般首先選擇待測組分B的最大吸收波長λ2為測量波長，然后用作圖法選擇參比波長λ1，作法如圖所示。

在λ2處作一波長軸的垂直線，交于組分B吸收曲線的另某一點，再從這點作一條平行于波長軸的直線，交于組分B吸收曲線的另一點，該點所對應(yīng)的波成為參比波長λ1?？梢娊M分A在λ2和λ1處是等吸收點，由吸光度的加和性可見，混合試樣在λ2和λ1處的吸光度可表示為

雙波長分光光度計的輸出信號為ΔA，可見儀器的輸出訊號ΔA與干擾組分A無關(guān)，它只正比于待測組分B的濃度，即消除了B的干擾。系數(shù)倍率法

當(dāng)干擾組分A的吸收光譜曲線不呈峰狀，僅是陡坡狀時，不存在兩個波長處的等吸收點時，如圖所示。在這種

情況下，可采用系數(shù)倍率法測定B組分，并采用雙波長分光光度計來完成。選擇兩個波長λ

1、λ2，分別測量A、B混合液的吸光度，利用雙波長分光光度計中差分函數(shù)放大器，把大k1、k2倍，獲得、兩波長處測得的差示信號S：

調(diào)節(jié)放大器，選取和，使之滿足、、分別放得到系數(shù)倍率K為

差示信號S與待測組分B的濃度CB成正比，與干擾組分A無關(guān)，即消除了A的干擾。4.導(dǎo)數(shù)分光光度計法

采用不同的實驗方法可以獲得各種導(dǎo)數(shù)光譜曲線。不同的實驗方法包括雙波長法、電子微分法和數(shù)值微分法。

將對波長λ求導(dǎo):

在整個波長范圍內(nèi)可控制在恒定值，則

上式表明，第一，導(dǎo)數(shù)分光光度法的一階導(dǎo)數(shù)信號與濃度成正比例，不需要通過對數(shù)轉(zhuǎn)換為吸光度；第二，測定靈敏度決定于摩爾吸光系數(shù)在特定波長處的變化率，在吸收曲線的拐點波長處大，靈敏度最高。如圖 所示。

對于二階導(dǎo)數(shù)光譜：

最

只有當(dāng)一階導(dǎo)數(shù)

時，二階導(dǎo)數(shù)信號才與濃度成正比例。測定波長選擇在吸收峰處，其曲率

三階導(dǎo)數(shù)光譜：

最大，靈敏度就高。

當(dāng)一階導(dǎo)數(shù)

時，三階導(dǎo)數(shù)信號與濃度成比例，測定波長在曲率半徑小的肩峰處

最大，可獲得高的靈敏度。

在一定條件下，導(dǎo)數(shù)信號與被測組分的濃度成比例。測量導(dǎo)數(shù)光譜曲線的峰值方法有基線法、峰谷法，如圖13.24所示。

基線法又稱切線法在相鄰兩峰的極大或極小處畫一公切線，在由峰谷引一條平行于縱坐標(biāo)的直線相交于a點，然后測量距離他t的大小的。

峰谷法測量相鄰兩峰的極大和極小之間的距離p，這是較常用的方法。

峰零法測量峰至基線的垂直距離z。該法只適用與導(dǎo)數(shù)光譜曲 23 線對稱于橫坐標(biāo)的高階導(dǎo)數(shù)光譜。

導(dǎo)數(shù)分光光度法對吸收強度隨波長的變化非常敏感，靈敏度高。對重疊譜帶及平坦譜帶的分辯率高，噪聲低。導(dǎo)數(shù)分光光度法對痕量分析、稀土元素、藥物、氨基酸、蛋白質(zhì)的測定，以及廢氣或空氣中污染氣體的測定非常有用。

6.其它分析方法：簡單介紹動力學(xué)分光光度法及膠束分光光度法 動力學(xué)分光光度法

一般的分光光度法是在溶液中發(fā)生的化學(xué)反應(yīng)達到平衡后測量吸光度，然后根據(jù)吸收定律算出待測物資的含量。而動力學(xué)分光光度法則是利用反應(yīng)速率與反應(yīng)物、產(chǎn)物或催化劑的濃度之間的定量關(guān)系，通過測量與反應(yīng)速率成正比例關(guān)系的吸光度，從而計算待測物質(zhì)的濃度。根據(jù)催化劑的存在與否，動力學(xué)分光光度法可分為非催化和催化分光光度法。當(dāng)利用酶這種特殊的催化劑時，則稱為酶催化分光光度法。由反應(yīng)速度方程式及吸收定律方程式可以推導(dǎo)出動力學(xué)分光光度法的基本關(guān)系為

A=KCc

式中K為常數(shù)，Cc為催化劑的濃度。測定Cc的方法常有固定時間法、固定濃度法和斜率法三種。

優(yōu)點：靈敏度高，選擇性好(有時是特效的)、應(yīng)用范圍廣(快速、慢速反應(yīng)，有副反應(yīng)，高、低濃度均可)。

缺點：影響因素較多，測量條件不易控制，誤差經(jīng)常較大。膠束增容分光光度法

膠束強度分光光度法是利用表面活性劑的增強、增敏、增穩(wěn)、褪色、析向等作用，以提高顯色反應(yīng)的靈敏度、對比度或選擇性，改善顯色反應(yīng)條件，并在水向中直接進行光度測量的分光光度法。

表面活性劑(有陽離子型、陰離子型、非離子型之分)在水相中有生成膠體的傾向，隨其濃度的增大，體系由真溶液轉(zhuǎn)變?yōu)槟z體溶液，形成極細小的膠束，體系的性質(zhì)隨之發(fā)生明顯的變化。體系由真溶液轉(zhuǎn)變?yōu)槟z束溶液時，表面活性劑的濃度稱為臨界膠束濃度，常用cmc表示。由于形成膠束而使顯色產(chǎn)物溶解度較大的現(xiàn)象，稱為膠束增容效應(yīng)。由于膠束與顯色產(chǎn)物的相互作用，結(jié)合成膠束化合物，增大了顯色分子的有效吸光截面，增強其吸光截面，增強其吸光能力，使ε增大，提高顯色反應(yīng)的靈敏度，稱為膠束的增敏效應(yīng)。膠束增容分光光度法比普通分光光度法的靈敏度由顯著的提高，ε可達106(L·mol－1·cm)。近年來，這種方法得到很廣泛的應(yīng)用。這種方法得到很廣泛的應(yīng)用。

第五篇：網(wǎng)站后臺更新文章詳細的操作步驟

網(wǎng)站的后臺操作

現(xiàn)在給大家分享下，后臺操作：

(溫馨提示：大部分的網(wǎng)站后臺都是相差不了多少的，下面展示的只是織夢后臺的具體操作步驟，其它根據(jù)自己的網(wǎng)站后臺來定。）一.根據(jù)關(guān)鍵詞寫文章

1.先不急寫文章，但要想好幾個長尾關(guān)鍵詞。先準(zhǔn)備后臺的網(wǎng)址及賬號密碼。

2.輸入賬號和密碼登陸到后臺管理。

3.進入后臺后尋找“搜索關(guān)鍵詞維護”。大概是順序是：核心→批量維護→搜索關(guān)鍵詞維護。如下圖

4.在點擊右上角的“文檔關(guān)鍵字（詞）維護”就會出現(xiàn)下圖

5.在搜索后面的那個框框里面填寫先想好的長尾關(guān)鍵詞，點擊確定，看有沒有搜到一樣的長尾關(guān)鍵詞，如果有就不要圍繞這個詞來寫文章了，反之則寫。

這個時候，就可以寫文章了。之所以不提前備文章，是因為擔(dān)心這里會重復(fù)，那樣可能要改文章里面的東西，麻煩，所以要搜索后才寫。這里，大家可以建個表格，把寫過的關(guān)鍵詞寫在里面。這樣，以后就不用重復(fù)以上動作了。直接在表格里面找關(guān)鍵詞，看有沒有。因為寫文章要時間嘛。二.上傳文檔及圖片

1.進入后臺的“網(wǎng)站欄目管理”，選擇合適自己寫的文章的分類。

2.進入后就是下圖的頁面了，點擊“添加文檔”，進入后，進行文檔的一些編輯及操作。

3.填寫相關(guān)的信息：

3.1：文章標(biāo)題：就是寫的文章標(biāo)題，照寫。

3.2：TAG標(biāo)簽：寫的文章的關(guān)鍵詞，中間用“，”隔開。3.3：關(guān)鍵字：填寫TAG，自動生成的，不用管。

3.4：內(nèi)容摘要：寫段能吸引人的話，可以是文章里的，也可以自

己寫，但是要包含關(guān)鍵詞。也就是描述。

3.5：把寫好文章粘貼在下面的文檔編輯里面，改好字體的一些屬性。改時注意下，要跟網(wǎng)址里面之前的一樣，美觀嘛。

3.6：加入圖片，這個跟文字一樣，弄成跟之前網(wǎng)址里面的一樣大小，圖片的來源盡量不要從別的網(wǎng)站上弄，可以復(fù)制到桌面在上傳。

3.7點擊保存，進入下面的頁面，點擊“查看文章”，預(yù)覽下，是否跟網(wǎng)站之前的效果一樣。這里要把預(yù)覽的網(wǎng)址給復(fù)制下來。

三．關(guān)鍵詞設(shè)置及布置

1.重復(fù)第一大點的第3點，進入“文檔關(guān)鍵詞維護”，在“新增關(guān)鍵詞”填寫那篇文章的關(guān)鍵詞。把剛才復(fù)制那篇文章的網(wǎng)址，粘貼在“鏈接網(wǎng)址”里面。頻率改成2或3，這里的頻率是指這個關(guān)鍵詞在文章出現(xiàn)的頻率，自然不能多。也可在文章編輯時加入其他的鏈接。點擊保存即可。

四．這樣，后臺的添加文檔.五．生成代碼（注意：只有生成代碼了，網(wǎng)站里面才能看得到）

第二步：

第三步：

第四步：

顯示如下的文字提醒表示已更新完畢。

按照上方操作就可以了。