第一篇:實(shí)驗(yàn)二 Word排版技術(shù)
實(shí)驗(yàn)二 Word的排版技術(shù)
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
(1)掌握文本的選定、插入與刪除、移動(dòng)和復(fù)制、查找與替換等基本編輯技術(shù)(2)掌握文字格式、段落格式的設(shè)置(3)掌握頁面設(shè)置和分欄等基本排版技術(shù)
二、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容與步驟
注:部分操作步驟后有相關(guān)的操作提示,操作提示只列出了部分常用的方法。
操作一
啟動(dòng)Word后,在編輯狀態(tài)下輸入樣文1 所示的文檔內(nèi)容(時(shí)間關(guān)系,也可直接復(fù)制),編輯排版后的效果如下圖1。
【樣文1文檔開始】
微機(jī)家庭普及化的日子已到來!微機(jī)在發(fā)達(dá)國家中已大量進(jìn)入家庭。如美國100戶家庭中已有微機(jī)30~40臺(tái),但離完全普及還有距離。其他國家,特別是發(fā)展中國家當(dāng)然還會(huì)有相當(dāng)時(shí)日。
微機(jī)的發(fā)展也有兩種趨向,一種意見認(rèn)為微機(jī)應(yīng)充分發(fā)揮技術(shù)優(yōu)勢(shì)增強(qiáng)其功能使其用途更為廣泛。另一種意見認(rèn)為為家庭中使用的微機(jī)不能太復(fù)雜,應(yīng)簡化其功能,降低價(jià)格,使其以較快的速度廣泛進(jìn)入家庭??磥韮煞N意見各有道理,可能會(huì)同時(shí)發(fā)展。
近年有些公司提出網(wǎng)絡(luò)計(jì)算機(jī)的設(shè)想,即把微機(jī)本身大大簡化,大量的功能通過網(wǎng)絡(luò)來提供,這樣可降低本身造價(jià),這與前述趨向有所不同,至今也還有爭議。
【樣文1文檔結(jié)束】
圖1 按要求完成下列操作:(1))設(shè)置A4(210mm×297mm)紙張大小,左右邊距設(shè)置為2.5厘米,上下邊距(即頁眉頁腳)2.2厘米,其余頁面設(shè)置的參數(shù)不必修改。(通過“文件”|“頁面設(shè)置”)
(2)以WD3.doc為文件名保存在E盤下以自己學(xué)號(hào)姓名命名的文件夾中。將文中所有“微機(jī)”替換為“微型計(jì)算機(jī)”。(通過“編輯”菜單|“查找”或“替換”)
(3)將標(biāo)題(即第一段)設(shè)置為小二號(hào)空心黑體、紅色、居中,添加段落黃色底紋,并設(shè)置圖案樣式為純色100%,標(biāo)題段后間距為16磅。(通過“格式”菜單|“字體”、“格式”|“邊框和底紋”和“格式”|“段落”)
(4)將正文第一段復(fù)制到文檔的最后面,成為正文第四段。
(5)將正文第一段文字的格式改為:華文行楷、小四號(hào),加下劃線(雙波浪線)
(“格式”菜單|“字體”)
(6)用格式刷將正文第一段的格式復(fù)制到正文第四段。
(7)將正文各段落左右各縮進(jìn)1厘米,首行縮進(jìn)0.8厘米,1.5倍行距,段前間距16磅。(通過“格式”菜單|“段落”)(8)對(duì)本文檔的頁面添加藍(lán)色邊框。(通過“格式”菜單|“邊框和底紋”|“頁面邊框”)(9)將正文第二段等分兩欄,欄間距為0.6厘米,欄間加分隔線。(通過“格式”菜單|“分欄”)
(10)將正文第一段字符設(shè)置每行30字。(首先在該段段首段尾插入連續(xù)分節(jié)符,再通過“文件”|“頁面設(shè)置”|“文檔網(wǎng)格”)
(11)在頁面底端中間插入頁碼,數(shù)字格式選用“Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ?”形式,且“首頁顯示頁碼”。(“插入”菜單|“頁碼”)(12)在頁眉插入文件名。(通過“視圖”|“頁眉和頁腳”)(13)最后保存文檔。(最好邊做邊保存)
操作二
啟動(dòng)Word后,在編輯狀態(tài)下輸入樣文2所示的文檔內(nèi)容(時(shí)間關(guān)系,也可直接復(fù)制),編輯排版后的效果如下圖2。
【樣文2文檔開始】
打開文件或文件夾
打開我的電腦,然后雙擊包含該文件的驅(qū)動(dòng)器。
雙擊要打開的文件或文件夾。
注意
要打開“我的電腦”,請(qǐng)雙擊桌面上的“我的電腦”圖標(biāo)。
要使用“Windows 資源管理器”打開文件或文件夾,請(qǐng)單擊“開始”,把鼠標(biāo)指向“程序”,再指向“附件”,單擊“Windows 資源管理器”,然后雙擊要打開的文件或文件夾。
如果要打開的文件沒有和特定的程序關(guān)聯(lián),可以右鍵單擊該文件,單擊“打開方式”,然后通過選擇程序名稱來選擇用以打開該文件的程序。
可以使用“查看”菜單上的命令更改顯示文件的方式。也可以使用“文件夾選項(xiàng)”對(duì)話框的“查看”選項(xiàng)卡更改文件和文件夾設(shè)置。
【樣文2文檔結(jié)束】
圖2 按要求完成下列操作:
(1)設(shè)置頁面紙型為16開,指定每頁35行,每行30字符。(通過“文件”|“頁面設(shè)置”)
(2)以WD4.doc為文件名保存在E盤下以自己學(xué)號(hào)姓名命名的文件夾中。(3)將標(biāo)題,即第一段落居中,字體設(shè)置成“楷體_GB2321”、“三號(hào)”、藍(lán)色,段后距離0.5行,底下加著重號(hào)。(通過“格式”菜單|“字體”、“格式”|“段落”)(4)修改“正文”樣式,使中文文字字體為“黑體”,英文字體為“Arial”,大小為“小四號(hào)”,并將“正文”樣式應(yīng)用于除標(biāo)題外的所有段落。(通過“格式”菜單|“樣式和格式”)
(5)將正文第一、二段設(shè)置項(xiàng)目編號(hào):1.2.。(通過“格式”菜單|“項(xiàng)目符號(hào)和編號(hào)”|“編號(hào)”)
(6)對(duì)倒數(shù)4個(gè)自然段設(shè)置為左對(duì)齊,并設(shè)置相應(yīng)的項(xiàng)目符號(hào):?。(通過“格式”菜單|“項(xiàng)目符號(hào)和編號(hào)”|“項(xiàng)目符號(hào)”選項(xiàng)卡“中的“自定義”按鈕)
(7)給正文第3段添加藍(lán)色邊框和黃色底紋。(通過 “格式”|“邊框和底紋”)(8)在頁面底端中間插入頁碼,首頁不顯示頁碼,且第2頁頁碼從1開始。(大家可用Ctrl+Enter快捷健多分幾頁,通過“視圖”|“頁眉和頁腳”)
(9)在奇頁的頁眉設(shè)置為“文本編輯”,偶頁的頁眉設(shè)置為“表格操作”,文字為居中對(duì)齊方式。(大家可用Ctrl+Enter快捷健多分幾頁,通過“視圖”|“頁眉和頁腳”)(10)最后保存文檔。操作四:將學(xué)號(hào)姓名文件夾上傳 操作五:課后作業(yè)
學(xué)習(xí)指導(dǎo)書p103面:實(shí)驗(yàn)一 Word XP文檔的基本操作與排版
樣文如下: 什么是計(jì)算機(jī)軟件?
軟件開發(fā)的過程就是人們使用各種電腦語言將人們關(guān)心的現(xiàn)實(shí)世界映射到電腦世界的過程?,F(xiàn)在的電腦的數(shù)學(xué)理論基礎(chǔ)是有電腦的開山鼻祖,大名鼎鼎的圖靈于1937年提出的圖靈機(jī)模型。隨后不到十年,電腦就誕生了。我們都知道,他當(dāng)時(shí)的主要任務(wù)之一就是用于導(dǎo)彈彈道軌跡的計(jì)算。當(dāng)時(shí)的軟件開發(fā)與現(xiàn)在的大不相同。為了算一道題,要有人事先把完成加減乘除等各類運(yùn)算的部件像搭積木那樣搭起來,如果換一道題目,則要把這些部件分解開來,根據(jù)新的要求重新搭建,效率低 ??
第二篇:挑戰(zhàn)書二排
挑戰(zhàn)書
親愛的一排戰(zhàn)友們:
為了圓滿完成這次“百日安全無事故”活動(dòng),我們二排謹(jǐn)向你們一排老大哥提出友誼的挑戰(zhàn)。我們具體的條件是:
一、提高認(rèn)識(shí),不斷端正態(tài)度
這次活動(dòng)是一次規(guī)格較高、難度較大、針對(duì)性較強(qiáng)的,也是我支隊(duì)貫徹武警部隊(duì)依法從嚴(yán)治警戰(zhàn)略方針的具體體現(xiàn)。
我們應(yīng)做到認(rèn)識(shí)充分,態(tài)度端正,從實(shí)際出發(fā),自覺練思想、練意志、練作風(fēng)、練體魄,努力增強(qiáng)高技術(shù)條件下組織管理能力、應(yīng)急救援能力和以現(xiàn)有裝備戰(zhàn)勝自然災(zāi)害和季節(jié)性事故的能力,以積極的態(tài)度,堅(jiān)強(qiáng)的斗志,頑強(qiáng)的作風(fēng)。迎接這次“百日安全無事故”活動(dòng)的嚴(yán)峻挑戰(zhàn)。
二、從難從嚴(yán),高標(biāo)準(zhǔn)完成規(guī)定的各項(xiàng)任務(wù)
我們二排擔(dān)任著駕駛?cè)蝿?wù),今年中隊(duì)以爆破任務(wù)主,車輛使用頻繁,運(yùn)輸爆破器材多,這次活動(dòng)是對(duì)我們貫徹新時(shí)期施工任務(wù)效果的一個(gè)實(shí)際檢驗(yàn)。我們要把平時(shí)練就的本領(lǐng)真正體現(xiàn)在施工一線上,抓安全,講安全爭取做到:人員不失控,車輛無事故,爆破油料無丟失嚴(yán)管控等安全率為100%。
三、以身作則,充分發(fā)揮骨干表率作用
這次活動(dòng)內(nèi)容也是是對(duì)我們?nèi)w官兵特別是各級(jí)骨干能否發(fā)揮表率作用的一次檢驗(yàn)。我排班排骨干要堅(jiān)持以身作則,當(dāng)好排頭兵、狠抓安全中經(jīng)常性思想工作和經(jīng)常性管理工作的落實(shí),保證這次的活動(dòng)圓滿完成,提高戰(zhàn)友們安全意識(shí);黨員、骨干要發(fā)揮楷模作用,認(rèn)真履行各自職責(zé)做到吃苦在前,享受在后,積極宣傳群眾,帶領(lǐng)群眾,幫助群眾;團(tuán)員青年要積極要求進(jìn)步。爭取將安全無事故活動(dòng)做到每個(gè)人心里,將安全意識(shí)做到細(xì)微持久,一年365天 天天都要抓、一天24小時(shí),時(shí)時(shí)都要想。
四、學(xué)習(xí)雷鋒,積極為人民群眾多做好事
整條施工線中,我們要途經(jīng)多個(gè)村鎮(zhèn)鄉(xiāng)村,還要經(jīng)常和民工打交道 為此在嚴(yán)格執(zhí)行群眾紀(jì)律的同時(shí),要不失時(shí)機(jī)地宣傳黨的路線、方針政策,大力開展“學(xué)雷鋒、樹新風(fēng)”活動(dòng),做到“走一路紅一線,住一地紅一片”,當(dāng)好社會(huì)主義精神文明建設(shè)的排頭兵。
同志們,對(duì)這次的“百日安全無事故活動(dòng)” 讓我們振奮精神,士氣高昂地迎接考驗(yàn)吧!
此致
敬禮
二排全體戰(zhàn)友
2010年9月5日
第三篇:實(shí)驗(yàn) 防火墻技術(shù)實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)九
防火墻技術(shù)實(shí)驗(yàn)
1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
防火墻是網(wǎng)絡(luò)安全的第一道防線,按防火墻的應(yīng)用部署位置分類,可以分為邊界防火墻、個(gè)人防火墻和分布式防火墻三類。通過實(shí)驗(yàn),使學(xué)生了解各種不同類型防火墻的特點(diǎn),掌握個(gè)人防火墻的工作原理和規(guī)則設(shè)置方法,掌握根據(jù)業(yè)務(wù)需求制定防火墻策略的方法。
2、題目描述
根據(jù)不同的業(yè)務(wù)需求制定天網(wǎng)防火墻策略,并制定、測試相應(yīng)的防火墻的規(guī)則等。
3、實(shí)驗(yàn)要求
基本要求了解各種不同類型防火墻的特點(diǎn),掌握個(gè)人防火墻的工作原理和規(guī)則設(shè)置方法,掌握根據(jù)業(yè)務(wù)需求制定防火墻策略的方法。提高要求能夠使用WindowsDDK開發(fā)防火墻。
4、相關(guān)知識(shí)
1)防火墻的基本原理防火墻(firewall)是一種形象的說法,本是中世紀(jì)的一種安全防務(wù):在城堡周圍挖掘一道深深的壕溝,進(jìn)入城堡的人都要經(jīng)過一個(gè)吊橋,吊橋的看守檢查每一個(gè)來往的行人。對(duì)于網(wǎng)絡(luò),采用了類似的處理方法,它是一種由計(jì)算機(jī)硬件和軟件的組合,使互聯(lián)網(wǎng)與內(nèi)部網(wǎng)之間建立起一個(gè)安全網(wǎng)關(guān)(securitygateway),也就是一個(gè)電子吊橋,從而保護(hù)內(nèi)部網(wǎng)免受非法用戶的侵入,它其實(shí)就是一個(gè)把互聯(lián)網(wǎng)與內(nèi)部網(wǎng)(通常指局域網(wǎng)或城域網(wǎng))隔開的屏障。它決定了哪些內(nèi)部服務(wù)可以被外界訪問、可以被哪些人訪問,以及哪些外部服務(wù)可以被內(nèi)部人員訪問。防火墻必須只允許授權(quán)的數(shù)據(jù)通過,而且防火墻本身也必須能夠免于滲透。典型的網(wǎng)絡(luò)防火墻如下所示。
防火墻也并不能防止內(nèi)部人員的蓄意破壞和對(duì)內(nèi)部服務(wù)器的攻擊,但是,這種攻擊比較容易發(fā)現(xiàn)和察覺,危害性也比較小,這一般是用公司內(nèi)部的規(guī)則或者給用戶不同的權(quán)限來控制。
2)防火墻的分類前市場的防火墻產(chǎn)品主要分類如下:
(1)從軟、硬件形式上軟件防火墻和硬件防火墻以及芯片級(jí)防火墻。(2)從防火墻技術(shù)“包過濾型”和“應(yīng)用代理型”兩大類。
(3)從防火墻結(jié)構(gòu)單一主機(jī)防火墻、路由器集成式防火墻和分布式防火墻三種。(4)按防火墻的應(yīng)用部署位置邊界防火墻、個(gè)人防火墻和混合防火墻三大類。(5)按防火墻性能百兆級(jí)防火墻和千兆級(jí)防火墻兩類。3)防火墻的基本規(guī)則
■一切未被允許的就是禁止的(No規(guī)則)。■一切未被禁止的就是允許的(Yes規(guī)則)。
很多防火墻(例如SunScreenEFS、CiscoIOs、FW-1)以順序方式檢查信息包,當(dāng)防火墻接收到一個(gè)信息包時(shí),它先與第一條規(guī)則相比較,然后是第二條、第三條??當(dāng)它發(fā)現(xiàn)一條匹配規(guī)則時(shí),就停止檢查并應(yīng)用那條規(guī)則。
4)防火墻自身的缺陷和不足
■限制有用的網(wǎng)絡(luò)服務(wù)。防火墻為了提高被保護(hù)網(wǎng)絡(luò)的安全性,限制或關(guān)閉了很多有用但存在安全缺陷的網(wǎng)絡(luò)服務(wù)。
■無法防護(hù)內(nèi)部網(wǎng)絡(luò)用戶的攻擊。目前防火墻只提供對(duì)外部網(wǎng)絡(luò)用戶攻擊的防護(hù),對(duì)來自內(nèi)部網(wǎng)絡(luò)用戶的攻擊只能依靠內(nèi)部網(wǎng)絡(luò)主機(jī)系統(tǒng)的安全性?!鯥nternet防火墻無法防范通過防火墻以外的其他途徑的攻擊。例如,在一個(gè)被保護(hù)的網(wǎng)絡(luò)上有一個(gè)沒有限制的撥出存在,內(nèi)部網(wǎng)絡(luò)上的用戶就可以直接通過SLIP或PPP聯(lián)接進(jìn)入Internet。
■對(duì)用戶不完全透明,可能帶來傳輸延遲、瓶頸及單點(diǎn)失效?!鯥nternet防火墻也不能完全防止傳送已感染病毒的軟件或文件。
■防火墻無法防范數(shù)據(jù)驅(qū)動(dòng)型的攻擊。數(shù)據(jù)驅(qū)動(dòng)型的攻擊從表面上看是無害的數(shù)據(jù)被郵寄或拷貝到Internet主機(jī)上,但一旦執(zhí)行就開始攻擊。例如,一個(gè)數(shù)據(jù)型攻擊可能導(dǎo)致主機(jī)修改與安全相關(guān)的文件,使得入侵者很容易獲得對(duì)系統(tǒng)的訪問權(quán)。
■不能防備新的網(wǎng)絡(luò)安全問題。防火墻是一種被動(dòng)式的防護(hù)手段,它只能對(duì)現(xiàn)在已知的網(wǎng)絡(luò)威脅起作用。
5、實(shí)驗(yàn)設(shè)備
主流配置PC,安裝有windows 2000 SP4操作系統(tǒng),網(wǎng)絡(luò)環(huán)境,天網(wǎng)防火墻個(gè)人版。
6、實(shí)驗(yàn)步驟
1)從指導(dǎo)老師處得到天網(wǎng)防火墻個(gè)人版軟件。
2)天網(wǎng)防火墻個(gè)人版的安裝。按照安裝提示完成安裝,并重啟后系統(tǒng)。
3)系統(tǒng)設(shè)置。在防火墻的控制面板中點(diǎn)擊“系統(tǒng)設(shè)置”按鈕,即可展開防火墻系統(tǒng)設(shè)置面板。
天網(wǎng)個(gè)人版防火墻系統(tǒng)設(shè)置界面如下。
防火墻自定義規(guī)則重置:占擊該按鈕,防火墻將彈出窗口,如下:
如果確定,天網(wǎng)防火墻將會(huì)把防火墻的安全規(guī)則全部恢復(fù)為初始設(shè)置,你對(duì)安全規(guī)則的修改和加入的規(guī)則將會(huì)全部被清除掉。
防火墻設(shè)置向?qū)В簽榱吮阌谟脩艉侠淼脑O(shè)置防火墻,天網(wǎng)防火墻個(gè)人版專門為用戶設(shè)計(jì)了防火墻設(shè)置向?qū)?。用戶可以跟隨它一步一步完成天網(wǎng)防火墻的合理設(shè)置。
應(yīng)用程序權(quán)限設(shè)置:勾選了該選項(xiàng)之后,所有的應(yīng)用程序?qū)W(wǎng)絡(luò)的訪問都默認(rèn)為通行不攔截。這適合在某些特殊情況下,不需要對(duì)所有訪問網(wǎng)絡(luò)的應(yīng)用程序都做審核的時(shí)候。(譬如在運(yùn)行某些游戲程序的時(shí)候)
局域網(wǎng)地址:設(shè)置在局域網(wǎng)內(nèi)的地址。防火墻將會(huì)以這個(gè)地址來區(qū)分局域網(wǎng)或者是INTERNET 的IP來源。日志保存:選中每次退出防火墻時(shí)自動(dòng)保存日志,當(dāng)你退出防火墻的保護(hù)時(shí),天網(wǎng)防火墻將會(huì)把當(dāng)日的日志記錄自動(dòng)保存到SkyNet/FireWall/log文件下,打開文件夾便可查看當(dāng)日的日志記錄。
4)安全級(jí)別設(shè)置天網(wǎng)個(gè)人版防火墻的缺省安全級(jí)別分為低、中、高三個(gè)等級(jí),默認(rèn)的安全等級(jí)為中級(jí)。了解安全級(jí)別的說明請(qǐng)查看防火墻幫助文件。為了了解規(guī)則的設(shè)置等情況,我們選擇自定義安全級(jí)別。
然后點(diǎn)擊左邊的將打開自定義的IP規(guī)則。
從中可以看出,規(guī)則的先后順序?yàn)镮P規(guī)則、ICMP規(guī)則、IGMP規(guī)則、TCP規(guī)則和UDP規(guī)則。自定義IP規(guī)則的工具條如下,可以使用這些工具完成規(guī)則的增加、修改、刪除、保存、調(diào)整、導(dǎo)入導(dǎo)出操作。重要:規(guī)則增加、修改、刪除等操作后一定要點(diǎn)擊保存圖標(biāo)進(jìn)行保存,否則無效。
單擊規(guī)則前面的,可使該規(guī)則不起作用,且其形狀變?yōu)椤?/p>
5)修改規(guī)則雙擊該規(guī)則,或者點(diǎn)擊工具條上的修改按鈕可以打開該規(guī)則的修改窗體。然后按照需求對(duì)各部分進(jìn)行修改。
(1)首先輸入規(guī)則的“名稱”和“說明”,以便于查找和閱讀。(2)然后,選擇該規(guī)則是對(duì)進(jìn)入的數(shù)據(jù)包還是輸出的數(shù)據(jù)包有效。
(3)“對(duì)方的IP地址”,用于確定選擇數(shù)據(jù)包從那里來或是去哪里,這里有幾點(diǎn)說明: ■“任何地址”是指數(shù)據(jù)包從任何地方來,都適合本規(guī)則,■“局域網(wǎng)網(wǎng)絡(luò)地址”是指數(shù)據(jù)包來自和發(fā)向局域網(wǎng),■“指定地址”是你可以自己輸入一個(gè)地址,“指定的網(wǎng)絡(luò)地址”是你可以自己輸入一個(gè)網(wǎng)絡(luò)和掩碼。
(4)除了錄入選擇上面內(nèi)容,還要錄入該規(guī)則所對(duì)應(yīng)的協(xié)議,其中:
■‘IP’協(xié)議不用填寫內(nèi)容,注意,如果你錄入了IP協(xié)議的規(guī)則,一點(diǎn)要保證IP協(xié)議規(guī)則的最后一條的內(nèi)容是:“對(duì)方地址:任何地址;動(dòng)作:繼續(xù)下一規(guī)則”。
■‘TCP’協(xié)議要填入本機(jī)的端口范圍和對(duì)方的端口范圍,如果只是指定一個(gè)端口,那么可以在起始端口處錄入該端口,結(jié)束處,錄入同樣的端口。如果不想指定任何端口,只要在起始端口都錄入0。TCP標(biāo)志比較復(fù)雜,你可以查閱其他資料,如果你不選擇任何標(biāo)志,那么將不會(huì)對(duì)標(biāo)志作檢查。
■‘ICMP’規(guī)則要填入類型和代碼。如果輸入255,表示任何類型和代碼都符合本規(guī)則?!觥甀GMP’不用填寫內(nèi)容。
(5)當(dāng)一個(gè)數(shù)據(jù)包滿足上面的條件時(shí),你就可以對(duì)該數(shù)據(jù)包采取行動(dòng)了: ■‘通行’指讓該數(shù)據(jù)包暢通無阻的進(jìn)入或出去?!鰯r截’指讓該數(shù)據(jù)包無法進(jìn)入你的機(jī)器
■繼續(xù)下一規(guī)則’指不對(duì)該數(shù)據(jù)包作任何處理,由該規(guī)則的下一條同協(xié)議規(guī)則來決定對(duì)該包的處理。(6)在執(zhí)行這些規(guī)則的同時(shí),還可以定義是否記錄這次規(guī)則的處理和這次規(guī)則的處理的數(shù)據(jù)包的主要內(nèi)容,并用右下腳的“天網(wǎng)防火墻個(gè)人版”圖標(biāo)是否閃爍來“警告”,或發(fā)出聲音提示。
6)新增規(guī)則點(diǎn)擊工具條的新增規(guī)則按鈕可以新增一條規(guī)則,并彈出該規(guī)則的編輯界面。比如新增一條允許
訪問WWW端口的規(guī)則,可以按如下方法設(shè)置。設(shè)置完成后點(diǎn)擊“確定”,并點(diǎn)擊工具條的保存按鈕。
7)普通應(yīng)用程序規(guī)則設(shè)置天網(wǎng)防火墻個(gè)人版增加對(duì)應(yīng)用程序數(shù)據(jù)傳輸封包進(jìn)行底層分析攔截功能,它可以控制應(yīng)用程序發(fā)送和接收數(shù)據(jù)傳輸包的類型、通訊端口,并且決定攔截還是通過。在天網(wǎng)防火墻個(gè)人版打開的情況下,首次激活的任何應(yīng)用程序只要有通訊傳輸數(shù)據(jù)包發(fā)送和接收存在,都會(huì)被天網(wǎng)防火墻個(gè)人版先截獲分析,并彈出窗口,詢問你是通過還是禁止。這時(shí)可以根據(jù)需要來決定是否允許應(yīng)用程序訪問網(wǎng)絡(luò)。如果不選中“該程序以后按照這次的操作運(yùn)行”,那么天網(wǎng)防火墻個(gè)人版在以后會(huì)繼續(xù)截獲該應(yīng)用程序的數(shù)據(jù)傳輸數(shù)據(jù)包,并且彈出警告窗口。如果選中“該程序以后按照這次的操作運(yùn)行”選項(xiàng),該應(yīng)用程序?qū)⒆约尤氲綉?yīng)用程序列表中,可以通過應(yīng)用程序設(shè)置來設(shè)置更為詳盡的數(shù)據(jù)傳輸封包過濾方式。
8)高級(jí)應(yīng)用程序規(guī)則設(shè)置單擊
可以打開詳細(xì)的應(yīng)用程序規(guī)則設(shè)置。單擊應(yīng)用程序規(guī)則面板中對(duì)應(yīng)每一條應(yīng)用程序規(guī)則都有幾個(gè)按鈕
點(diǎn)擊“選項(xiàng)”即可激活應(yīng)用程序規(guī)則高級(jí)設(shè)置頁面。
“該應(yīng)用程序可以”窗口是設(shè)定該應(yīng)用程序可以做的動(dòng)作。其中:是指此應(yīng)用程序進(jìn)程可以向外發(fā)出連接請(qǐng)求,通常是用于各種客戶端軟件。則是指此程序可以在本機(jī)打開監(jiān)聽的端口來提供網(wǎng)絡(luò)服務(wù),這通常用于各種服務(wù)器端程序中。
9)根據(jù)以上功能,分別完成如下不同需求的防火墻規(guī)則設(shè)置并進(jìn)行測試。
需求1:ICMP規(guī)則允許ping進(jìn)來,其它禁止,TCP規(guī)則允許訪問本機(jī)的WWW服務(wù)和主動(dòng)模式的FTP服務(wù),其它禁止,UDP禁止。需求2:ICMP規(guī)則允許ping出去,其它禁止,TCP規(guī)則禁止所有連接本機(jī),允許IE訪問Internet的80端口,UDP規(guī)則允許DNS解析,其它進(jìn)出UDP報(bào)文禁止。
7、實(shí)驗(yàn)思考
1)根據(jù)你所了解的網(wǎng)絡(luò)安全事件,你認(rèn)為天網(wǎng)防火墻不具備的功能有哪些? 2)防火墻是不是絕對(duì)的安全?攻擊防火墻系統(tǒng)的手段有哪些?
第四篇:《生物制藥技術(shù)》實(shí)驗(yàn)
《生物制藥技術(shù)》實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)
實(shí)驗(yàn)一 金霉素鏈霉菌培養(yǎng)基的制備(驗(yàn)證型)
實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/p>
1、學(xué)會(huì)培養(yǎng)基的配制
2、掌握滅菌方法。實(shí)驗(yàn)原理:
金霉素鏈霉菌(Streptomyces aureofaciens)亦稱“金色鏈霉菌”,放線菌門(Actinobacteria),放線菌綱(Actinobacteria),放線菌目(Actinomycetales),鏈霉菌科(Streptomycetaceae),鏈霉菌屬(Streptomyces)。在固體培養(yǎng)基上產(chǎn)生金色色素,故名。其菌落為草帽型, 菌落直徑一般為3~5毫米, 表面較平坦, 中間有隆起。菌落開始為白色,長孢子后變青色。在顯微鏡下可以看到短桿狀的菌絲??咕毓I(yè)上用以生產(chǎn)金霉素。
放線菌是一類介于細(xì)菌與真菌之間的單細(xì)胞微生物。放線菌在土壤中分布最多,大多數(shù)生活在含水量較低、有機(jī)質(zhì)豐富和微堿性的土壤中。多數(shù)情況下,泥土中散發(fā)出的“泥腥味”就是由放線菌中鏈霉菌產(chǎn)生的土腥素造成的。放線菌大都好氧,屬于化能異養(yǎng),菌絲纖細(xì),分枝,常從一個(gè)中心向周圍輻射生長。因其生長具輻射狀,故名放線菌。放線菌能像真菌那樣形成分枝菌絲,并在菌絲末端產(chǎn)生外生的分生孢子,有些種類甚至形成孢子囊,因而曾被誤認(rèn)是真菌。但其菌落較小而致密,不易挑取。不少菌種在醫(yī)藥、農(nóng)業(yè)和工業(yè)上廣泛應(yīng)用,可產(chǎn)生抗菌素,現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)和分離出的由放線菌產(chǎn)生的抗生素多達(dá)4 000多種,其中,有50多種抗生素已經(jīng)廣泛地得到應(yīng)用,如鏈霉素、紅霉素、土霉素、四環(huán)素、金霉素、卡那霉素、氯霉素等用于臨床治療人的多種疾??;有些可生產(chǎn)蛋白酶、葡萄糖異構(gòu)酶;有的用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn),如滅瘟素、井岡霉素、慶豐霉素等。
四環(huán)素類抗生素是由鏈霉菌生產(chǎn)或經(jīng)半合成制取的一類廣譜抗生素??咕V極廣,包括革蘭氏陽性和陰性菌、立克次體、衣原體、支原體和螺旋體。品種主要包括金霉素、四環(huán)素和土霉素。器材:
1ml移液槍;鋁鍋;電爐 試劑:
NaBr母液(100 g/L)KCl母液(100 g/L)
M-促進(jìn)劑母液(2.5 g/L)實(shí)驗(yàn)步驟: 1.種子培養(yǎng)基
種子培養(yǎng)基(g/L):可溶性淀粉40,黃豆餅粉20,酵母粉5,蛋白胨5,CaCO3 4,(NH4)2SO4 3,MgSO4·7H2O 0.25,KH2PO4 0.25。
先稱取黃豆餅粉20g,單獨(dú)煮沸10分鐘,加入少量涼水降溫,4層紗布?jí)赫ト≈?,與其它稱好的各成分混合,定容至1L。
每50ml分裝到250ml三角瓶中,每組2瓶。2.定向發(fā)酵培養(yǎng)基
發(fā)酵培養(yǎng)基(g/L):可溶性淀粉100,黃豆餅粉40,蛋白胨15,CaCO3 5,酵母粉2.5,(NH4)2SO4 3,MgSO4·7H2O 0.25,α—淀粉酶0.1。
配制方法同種子培養(yǎng)基,配好后分裝到500ml三角瓶中,每瓶100ml,分別加入如下成分,比較它們對(duì)四環(huán)素產(chǎn)量的影響:
(1)對(duì)照(不加其他成分);
(2)加入NaBr母液至終濃度為2g/L;(3)加入KCl母液至終濃度為2g/L;
(4)加入NaBr母液至終濃度為2g/L及M-促進(jìn)劑母液至終濃度為0.025g/L。每兩組配一套。3.滅菌
將封好口的培養(yǎng)基121℃滅菌30min。同時(shí)滅1ml 剪口移液槍頭、1.5mL離心管。(總過程:稱量——溶化——定容——分裝——封口——滅菌)注意事項(xiàng):
1.黃豆餅粉煮沸取汁。
2.培養(yǎng)基封口最好用8層紗布或棉花塞,最好不用橡膠塞,以增加透氣性。3.滅菌時(shí)鍋內(nèi)要補(bǔ)足水分。由于滅菌鍋較大,升溫排氣一定要充分(10min)。補(bǔ)充閱讀:
工業(yè)發(fā)酵中利用生產(chǎn)菌發(fā)酵得出最終產(chǎn)物是一個(gè)逐級(jí)放大的過程,各個(gè)不同的階段對(duì)于營養(yǎng)成分的要求也各有特點(diǎn),根據(jù)發(fā)酵不同階段的要求,培養(yǎng)基可分為孢子培養(yǎng)基、種子培養(yǎng)基和發(fā)酵培養(yǎng)基三種。
孢子培養(yǎng)基孢子培養(yǎng)基是供菌種繁殖孢子的一種常用固體培養(yǎng)基,對(duì)這種培養(yǎng)基的要求是能使菌體迅速生長,產(chǎn)生較多優(yōu)質(zhì)的孢子,并要求這種培養(yǎng)基不易引起菌種發(fā)生變異。所以對(duì)孢子培養(yǎng)基的基本配制要求是:第一,營養(yǎng)不要太豐富(特別是有機(jī)氮源),否則不易產(chǎn)孢子。如灰色鏈霉在葡萄糖-硝酸鹽-其它鹽類的培養(yǎng)基上都能很好地生長和產(chǎn)孢子,但若加入0.5%酵母膏或酪蛋白后,就只長菌絲而不長孢子。第二,所用無機(jī)鹽的濃度要適量,不然也會(huì)影響孢子量和孢子顏色。第三,要注意孢子培養(yǎng)基的pH和濕度。生產(chǎn)上常用的孢子培養(yǎng)基有:麩皮培養(yǎng)基、小米培養(yǎng)基、大米培養(yǎng)基、玉米碎屑培養(yǎng)基和用葡萄糖、蛋白胨、牛肉膏和食鹽等配制成的瓊脂斜面培養(yǎng)基。大米和小米常用作霉菌孢子培養(yǎng)基,因?yàn)樗鼈兒可?,疏松、表面積大,所以是較好孢子培養(yǎng)基。
種子培養(yǎng)基種子培養(yǎng)基是供孢子發(fā)芽、生長和大量繁殖菌絲體,并使菌體長得粗壯,成為活力強(qiáng)的“種子”。所以種子培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分要求比較豐富和完全,氮源和維生素的含量也要高些,但總濃度以略稀薄為好,這樣可達(dá)到較高的溶解氧,供大量菌體生長繁殖。種子培養(yǎng)基的成分要考慮在微生物代謝過程中能維持穩(wěn)定的pH,其組成還要根據(jù)不同菌種的生理特征而定。一般種子培養(yǎng)基都用營養(yǎng)豐富而完全的天然有機(jī)氮源,因?yàn)橛行┌被崮艽碳ゆ咦影l(fā)芽。但無機(jī)氮源容易利用,有利于菌體迅速生長,所以在種子培養(yǎng)基中常包括有機(jī)及無機(jī)氮源。最后一級(jí)的種子培養(yǎng)基的成分最好能較接近發(fā)酵培養(yǎng)基,這樣可使種子進(jìn)入發(fā)酵培養(yǎng)基后能迅速適應(yīng),快速生長。
發(fā)酵培養(yǎng)基發(fā)酵培養(yǎng)基是供菌種生長、繁殖和合成產(chǎn)物之用。它既要使種子接種后能迅速生長,達(dá)到一定的菌絲濃度,又要使長好的菌體能迅速合成需產(chǎn)物。因此,發(fā)酵培養(yǎng)基的組成除有菌體生長所必需的元素和化合物外,還要有產(chǎn)物所需的特定元素、前體和促進(jìn)劑等。但若因生長和生物合成產(chǎn)物需要的總的碳源、氮源、磷源等的濃度太高,或生長和合成兩階段各需的最佳條件要求不同時(shí),則可考慮培養(yǎng)基用分批補(bǔ)料來加以滿足。
實(shí)驗(yàn)二 金霉素鏈霉菌的定向發(fā)酵(驗(yàn)證型)
實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/p>
1、學(xué)習(xí)和掌握無菌操作技術(shù)。
2、掌握定向發(fā)酵四環(huán)素的原理。實(shí)驗(yàn)原理:
定向發(fā)酵是指通過改變培養(yǎng)基組分(加入某些物質(zhì))改變微生物代謝途徑,使發(fā)酵按主觀要求產(chǎn)生較多的產(chǎn)物。
金霉素、四環(huán)素和土霉素,它們的化學(xué)結(jié)構(gòu)極為相似:
R1 R2 Cl H H OH H H
金霉菌原是產(chǎn)生金霉素(Chlortetracycline)的菌種,但因金霉素比四環(huán)素只多一個(gè)氯離子,所以只要在發(fā)酵液中加入某些物質(zhì),阻止氯離子進(jìn)入四環(huán)素分子,從而使菌種產(chǎn)生較多的四環(huán)素。另外,金色鏈霉菌在30℃以下時(shí),合成金霉素的能力較強(qiáng);當(dāng)溫度超過35℃時(shí)則只合成四環(huán)素。
本實(shí)驗(yàn)中,利用溴離子在生物合成過程中對(duì)氯離子有競爭性抑制劑作用的原理,以及加入2-硫醇基苯并噻唑(即M—促進(jìn)劑,分子式:C7H5NS2,通常作為橡膠硫化促進(jìn)劑)抑制氯化酶的作用,從而增加四環(huán)素的產(chǎn)量。材料和試劑:
金霉素鏈霉菌:購于中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(菌種保藏號(hào):CGMCC4.1043;訂單號(hào)20111133 550元)。實(shí)驗(yàn)步驟:
前期準(zhǔn)備工作:配制斜面培養(yǎng)基(可選,1號(hào)培養(yǎng)基由菌種保藏中心提供)
1、麩皮36.0 g,K2HPO4 0.2 g,MgSO4·7H2O 0.1 g,(NH4)2HPO4 3 g,瓊脂 15~20 g,定容至1L,pH 7。
2、可溶性淀粉20g,KN O3 1g,K2HPO4 0.5g,MgSO4·7H2O 0.5g,NaCl
0.5g,F(xiàn)eSO4·7H2O 0.01g,定容至1L,pH 7.2~7.5。
1、制備斜面孢子:將保藏的菌種的比例接種于液體培養(yǎng)基中(不加瓊脂的斜面培養(yǎng)基),28℃下200 r/min振蕩培養(yǎng),將活化1d后的金霉素鏈霉菌種接入斜面培養(yǎng)基,28℃培養(yǎng)5~7天,金霉素 土霉素 四環(huán)素
待孢子長成灰色,于4℃冰箱中保藏。
2、種子培養(yǎng):在斜面上用接種鏟挑取1cm2左右生長良好的菌體接入裝有50ml四環(huán)素種子培養(yǎng)基的250ml錐形瓶中,230 r/min、28℃下振蕩培養(yǎng)20~24h。
3、發(fā)酵培養(yǎng):以剪口移液槍頭取10 ml種子液接入裝有100ml發(fā)酵培養(yǎng)液的500ml錐形瓶中(注意:同一處理組用同一瓶種子液接種),230 r/min、28℃下振蕩培養(yǎng)5 d。用于后面的測定效價(jià)和薄層層析實(shí)驗(yàn)。
四環(huán)素的提取和精制(選作)
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.掌握沉淀法精制四環(huán)素的原理、方法和基本操作技術(shù)。2 .熟悉pH 的控制與產(chǎn)量、質(zhì)最的關(guān)系。
二、實(shí)驗(yàn)原理
四環(huán)素為兩性化合物,其等電點(diǎn)為5.4。當(dāng)溶液pH 等于等電點(diǎn)時(shí),四環(huán)素呈游離堿形式,從水溶液中沉淀出來。利用四環(huán)素的這一性質(zhì),可將四環(huán)素從發(fā)酵液中提取出來。
在連續(xù)結(jié)晶過程中,pH 的高低對(duì)產(chǎn)量、質(zhì)量都有一定的影響。四環(huán)素的等電點(diǎn)為5.4 , 在pH 4.5~7.5 之間,游離堿在水中的溶解度乎不變。若pH 控制在接近等電點(diǎn)時(shí),沉淀結(jié)品雖然比較完全,收率也高,但此時(shí)會(huì)有大量雜質(zhì)同時(shí)析出,影響產(chǎn)品的色澤和質(zhì)量;若pH控制得較低一些,對(duì)提高產(chǎn)品質(zhì)量雖有好處,但沉淀結(jié)晶不夠完全,收率會(huì)低些,影響產(chǎn)量。因此,在選擇沉淀結(jié)晶pH 時(shí),就必須同時(shí)考慮到產(chǎn)量、質(zhì)量的效果。在正常情況下,工藝上控制pH4.8左右。若沉淀結(jié)晶質(zhì)量較差,pH可控制得稍低些,有利于結(jié)晶質(zhì)量的改善,但不能低于4.5,否則收率低,影響產(chǎn)量。
四環(huán)素的提取和精制分酸化、純化、過濾、結(jié)晶和淋洗五個(gè)步驟。
(1)酸化加入草酸,使積聚在菌絲體內(nèi)的四環(huán)素盡可能多地成為可溶性鹽,而轉(zhuǎn)入液相。四環(huán)素在酸性條件下較隱定,且草酸與鈣離子反應(yīng)生成不溶性的草酸鈣,析出的草酸鈣能促進(jìn)蛋白質(zhì)的凝固,提高濾液的純度和過濾速度。
(2)純化 純化劑(黃血鹽、硫酸鋅和硼砂)與草酸一起混合作用,可以除去發(fā)酵液中大量酸溶性蛋白質(zhì)、鐵離子和其他多種離子色素以及其他雜質(zhì),從而使濾液純凈,并減少發(fā)酵液的粘度,利于過濾。其中純化劑黃血鹽能與發(fā)酵液中的鐵離子作用,生成普魯士鹽而除去鐵離子。
(3)過濾 通過過濾,使四環(huán)素溶液與菌絲體以及其他雜質(zhì)分離,再經(jīng)過復(fù)濾、精濾,進(jìn)一步提高濾液質(zhì)址,得到澄清的濾液。
(4)結(jié)晶
將濾液的pH調(diào)節(jié)到等電點(diǎn),在較低溫度下析出純凈的四環(huán)素。
(5)淋洗 雖然發(fā)酵液經(jīng)酸化后大部分四環(huán)素已溶入溶液中,但仍有部分殘存在菌渣中,且過濾不可能十分徹底。所以用酸水淋洗,以提高收率。
三、實(shí)驗(yàn)試劑及儀器 1.試劑
300 g/L草酸溶液、200 g/L 黃血酸鉀溶液、200 g/L 硫酸鋅溶液、200 g/L 硼砂溶液、濃氮水、3 g/L草酸溶液。2.儀器
1000 mL 燒杯、攪拌器、布氏漏斗、抽濾瓶、濾紙、量筒、pH 試紙、酸度計(jì)、溫度計(jì)、水泵、表面皿。
四、實(shí)驗(yàn)步驟 1.酸化
取600ml 四環(huán)素發(fā)酵液,置裝有機(jī)械攪拌的1000 mL燒杯中,開始攪拌,待發(fā)酵液溫度降至20 ℃ 以下時(shí),緩緩加入草酸溶液,草酸加入量為27~35g/L,并不時(shí)測定發(fā)酵液的pH。當(dāng)發(fā)酵液pH為1.7~1.8 時(shí)(用酸度計(jì)測定),酸化完畢。2.純化
在酸化反應(yīng)的燒壞中,按酸化的發(fā)酵液凈體積,攪拌下依次緩慢加入純化劑(黃血酸鉀溶液、硫酸鋅溶液、硼砂溶液),每種溶液終濃度均為2 g/L,加入時(shí)間間隔15min,以便作用完全。3.過濾
將布氏漏斗裝于抽濾瓶上,鋪好濾紙,開啟水泵,用少量水將濾紙濕潤,并使濾紙緊貼布氏漏斗。將純化后的溶液緩緩倒入布氏漏斗,過濾濾液應(yīng)完全澄清,否則必須重新過濾,直到完全澄清。4.結(jié)晶
將抽濾瓶中的濾液倒入裝有機(jī)械攪拌的1000 mL燒杯中,開動(dòng)攪拌,并用水或冰水冷卻。待濾液溫度冷至5 ~ 7 ℃ 時(shí),徐徐加入經(jīng)過濾的濃氨水,并隨時(shí)用pH 試紙測定溶液的pH,當(dāng)pH 達(dá)到4.6 ~4.8 時(shí)(用酸度計(jì)測定),停止加入氨水,并繼續(xù)攪拌2 h,使結(jié)晶完全。
裝好布氏漏斗后,將上述液緩緩倒人布氏漏斗,過濾。結(jié)晶液全部倒入后,抽干。用35~45 ℃ 的熱水充分洗滌粗堿3 次,抽干,再用0.3 %草酸洗滌,抽干。
五、注意事項(xiàng)
1.純化攪拌時(shí)間不應(yīng)少于2h,溶液溫度保持在15 ℃ 以下。2.pH 要調(diào)準(zhǔn)確。
六、結(jié)果與討論 .計(jì)算四環(huán)素的得率。.討論影響四環(huán)素得率和純度的因素。
實(shí)驗(yàn)三 四環(huán)素、金霉素的薄層層析鑒定(驗(yàn)證型)
實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/p>
掌握薄層層析的原理,四環(huán)素族抗生素的定性鑒定方法。實(shí)驗(yàn)原理:
層析(色譜,chromatograpby)是相當(dāng)重要、且相當(dāng)常見的一種技術(shù),在把微細(xì)分散的固體或是附著于固體表面的液體作為固定相,把液體(與上述液體不相混合的)或氣體作為移動(dòng)相的系統(tǒng)中(根據(jù)移動(dòng)相種類的不同,分為液相層析和氣相層析二種),使試料混合物中的各成分邊保持向兩相分布的平衡狀態(tài)邊移動(dòng),利用各成分對(duì)固定相親和力不同所引起的移動(dòng)速度差,將它們彼此分離開的定性與定量分析方法,稱為層析,亦稱色譜法。用作固定相的有硅膠、活性炭、氧化鋁、離子交換樹脂、離子交換纖維等,或是在硅藻土和纖維素那樣的無活性的載體上附著適當(dāng)?shù)囊后w。將作為固定相的微細(xì)粉末狀物質(zhì)裝入細(xì)長形圓筒中進(jìn)行的層析稱為柱層析(column chromatography),在玻璃板上涂上一層薄而均的支持物(硅膠、纖維素和淀粉等)作為固定相的稱為薄層層析(thin layer chromatography),或者用濾紙作為固定相的紙上層析。層析根據(jù)固定相與溶質(zhì)(試料)間親和力的差異分為吸附型、分配型、離子交換型層析等類型。但這并不是很嚴(yán)格的,有時(shí)常見到其中間類型。此外,近來 5 也應(yīng)用親和層析,即將與基質(zhì)類似的化合物(通常為共價(jià)鍵)結(jié)合到固定相上,再利用其特異的親和性沉淀與其對(duì)應(yīng)的特定的酶或蛋白質(zhì)。
分配層析在支持物上形成部分互溶的兩相系統(tǒng)。一般是水相和有機(jī)溶劑相。常用支持物是硅膠、纖維素和淀粉等親水物質(zhì),這些物質(zhì)能儲(chǔ)留相當(dāng)量的水。被分離物質(zhì)在兩相中都能溶解,但分配系數(shù)不同,展層時(shí)就會(huì)形成以不同速度向前移動(dòng)的區(qū)帶。一種溶質(zhì)在兩種互不混溶的溶劑系統(tǒng)中分配時(shí),在一定溫度下達(dá)到平衡后,溶質(zhì)在固定相和流動(dòng)相溶劑中的濃度之比為一常數(shù),稱為分配系數(shù)。當(dāng)欲被分離的各種物質(zhì)在固定相和流動(dòng)相中的分配系數(shù)不同時(shí),它們就能被分離開。分配系數(shù)大的移動(dòng)快(阻力?。?。
薄層層析是以薄層材料為支持物,在密閉容器中,樣品在其上展開。當(dāng)斑點(diǎn)不易為肉眼觀察時(shí),可利用適當(dāng)?shù)娘@色劑,或通過紫外燈下產(chǎn)生熒光的方法進(jìn)行觀察。通過這種展開操作,各成分呈斑點(diǎn)狀移動(dòng)到各自的位置上,再根據(jù)Rf值的測定進(jìn)行鑒定。薄層色譜法具有分離與鑒定的雙重功能,通過薄層圖譜與對(duì)照品的圖譜相比較,除了能鑒出有效成分或特征成分外,還以完整的色譜圖作為一個(gè)整體對(duì)制劑加以鑒別。薄層色譜分析法由于簡便、快速,能有效地、直觀地反映藥品地真實(shí)性、穩(wěn)定性,現(xiàn)已成為藥物制劑的鑒別和質(zhì)量控制的行之有效的方法之一。薄層層析是鑒別抗生素的方法之一,層析后進(jìn)行顯色,并繪制層析圖譜,根據(jù)層析圖譜對(duì)抗生素進(jìn)行鑒定。本實(shí)驗(yàn)以四環(huán)素、金霉素標(biāo)準(zhǔn)品溶液作為對(duì)照對(duì)發(fā)酵液進(jìn)行鑒定。
儀器和設(shè)備:
1.玻璃層析缸
2.層析板(薄層層析硅膠煙臺(tái)芝罘區(qū)黃務(wù)硅膠開發(fā)實(shí)驗(yàn)廠有售)3.毛細(xì)玻璃管或微量注射器 4.紫外投射儀 試劑:
四環(huán)素、金霉素標(biāo)準(zhǔn)品 用0.01M鹽酸溶解定容,4℃冰箱保存(可使用7天)。展開劑:正丁醇:醋酸:水(4∶1∶5)2L。凡士林 實(shí)驗(yàn)步驟:
1.層析板處理
層析板105℃烘烤過夜,均勻噴上0.1mol/L磷酸鹽緩沖液(PH4.5),于空氣中晾干、備用。
2.點(diǎn)樣
選取兩種定向發(fā)酵液加草酸酸化至pH為1.5~2.0,取上清約l.2 ml于1.5ml離心管中,10000 rpm,5min,備用。在距層析板底邊2.5~3 cm起始線上(用鉛筆劃線,做出點(diǎn)樣點(diǎn)記號(hào)),用毛細(xì)玻璃管在薄層層析板上點(diǎn)四環(huán)素標(biāo)準(zhǔn)品和金霉素標(biāo)準(zhǔn)品溶液3次,發(fā)酵液上清點(diǎn)8~10次,點(diǎn)樣點(diǎn)不大于0.4cm,每次都要吹干后再點(diǎn)。(一般效價(jià)在1000u/ml以上點(diǎn)3次,500~1000u/ml點(diǎn)4次,200~500u/ml點(diǎn)5次)。剩余的發(fā)酵液上清于4℃冰箱保存。
3.層析(展開)
用正丁醇:醋酸:水(4∶1∶5)的上相作展開劑。層析前需預(yù)先用展開劑預(yù)平衡層析缸,可在缸中倒入2cm高的展開劑,密閉,一般保持15-30分鐘。然后將層析板置于盛有展開劑的層析缸中,在室溫下展層6~8h(與溫度有關(guān))。封口不嚴(yán)可涂抹凡士林。
4.熒光顯影
待溶劑前沿展至板的一半以上時(shí)將層析板取出,標(biāo)出溶劑前沿,于通風(fēng)櫥中晾干,用氨水熏數(shù)秒鐘后即可在紫外燈下顯影,畫出黃色斑點(diǎn),分別算出Rf值。(四環(huán)素標(biāo)準(zhǔn)品慢和金霉素標(biāo)準(zhǔn)品快)
無水四環(huán)素在波長365nm下顯黃色熒光,根據(jù)與標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照可定性測定。注意事項(xiàng):
因四環(huán)素能和鈣鹽形成不溶性化合物,故發(fā)酵液中的四環(huán)素濃度不高,預(yù)處理時(shí)通常用草酸將發(fā)酵液酸化至pH=1.5~2.0,使四環(huán)素盡量溶解。
點(diǎn)樣時(shí)必須注意勿損傷薄層表面。要控制好點(diǎn)樣量,樣品太少,斑點(diǎn)不清楚,難以觀察,但樣品量太多時(shí)往往出現(xiàn)斑點(diǎn)太大或拖尾現(xiàn)象。
若因樣品溶液太稀,可重復(fù)點(diǎn)樣,但應(yīng)待前次點(diǎn)樣的溶劑揮發(fā)后方可重新點(diǎn)樣,以防樣點(diǎn)過大,造成拖尾、擴(kuò)散等現(xiàn)象,而影響分離效果。
作展開劑中極少量強(qiáng)極性溶劑(0.5%)或pH值的改變可顯著改善拖尾現(xiàn)象。
實(shí)驗(yàn)四 四環(huán)素的效價(jià)測定(綜合型)
實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/p>
1、了解抗生素效價(jià)的表示方法
2、學(xué)習(xí)抗生素的測定方法 實(shí)驗(yàn)原理:
實(shí)驗(yàn)利用比色法測定四環(huán)素和金霉素的效價(jià)。效價(jià)(titer或titre)是評(píng)價(jià)抗生素效能的標(biāo)準(zhǔn),它代表抗生素對(duì)微生物的抗菌效力,也是衡量發(fā)酵液中抗生素含量的尺度,人們以1μg金霉素或四環(huán)素標(biāo)準(zhǔn)品為1個(gè)單位,0.6μg青霉素G鈉鹽為1個(gè)單位。
四環(huán)素和金霉素在酸性條件下,加熱,可產(chǎn)生黃色的脫水金霉素和脫水四環(huán)素,其色度與含量成正比。
在堿性條件下,四環(huán)素較穩(wěn)定,而金霉素則生成無色的異金霉素:
根據(jù)上述原理,可以在酸性條件下,利用比色法測定四環(huán)素、金霉素混合液的總效價(jià);而四環(huán)素效價(jià)的測定可在堿性條件下,使金霉素生成無色的異金霉素,然后再在酸性條件下,使四環(huán)素生成黃色的脫水四環(huán)素,經(jīng)比色測得四環(huán)素效價(jià)??傂r(jià)與四環(huán)素效價(jià)二者之差即為金霉素的效價(jià)。本實(shí)驗(yàn)只測定四環(huán)素的效價(jià)。
因四環(huán)素能和鈣鹽形成不溶性化合物,故發(fā)酵液中的四環(huán)素濃度不高,預(yù)處理時(shí)通常用草酸將發(fā)酵液酸化至pH=1.5~2.0,使四環(huán)素盡量溶解。發(fā)酵液中,由于雜質(zhì)的干擾,將影響比色的正確性,因此加入乙二胺四乙酸二鈉鹽(EDTA)作為螯合劑,掩飾金屬離子的干擾,改變四環(huán)素脫水條件(降低酸度或延長加熱時(shí)間),可以減少雜質(zhì)對(duì)比色反應(yīng)的干擾。實(shí)驗(yàn)步驟:
取上述保存的處理發(fā)酵液上清l ml(效價(jià)約為1000U/m1)于50ml容量瓶中,加入lml濃度為lg/l00ml EDTA溶液,加蒸餾水9ml,再加入lml濃度為3mol/L的NaOH,在20~25℃下保溫15min后,加入2.5ml濃度為6mol/L的HCl,煮沸15min后,冷卻,稀釋至刻度,在分光光度計(jì)上于440nm處測定其吸光度值。(紫外為100-390nm;可見光為380-780nm,根據(jù)波長選擇石英比色池或玻璃比色池,否則玻璃對(duì)于紫外光有吸收)
對(duì)照樣品(不加誘導(dǎo)劑)的前處理方法與上述步驟一樣,只是在加入HCl后,不加熱,稀釋至刻度,作為測定樣品的空白對(duì)照, 調(diào)零。
四環(huán)素標(biāo)準(zhǔn)品(1000U/ml)取1ml于50ml容量瓶中,加1ml濃度為6mol/L的HCl,水浴煮沸15min后,冷卻,稀釋至50ml,380nm測吸光度。(以蒸餾水作為空白測定)
以定向發(fā)酵培養(yǎng)基中的對(duì)照組作為空白對(duì)照,測定其它三個(gè)處理組的吸光度。(有時(shí)可能因?qū)φ战M處理不當(dāng)而使其它組的讀數(shù)為負(fù)值,這時(shí)可以以蒸餾水作為空白。)
計(jì)算公式:
發(fā)酵液中四環(huán)素的效價(jià)=
A發(fā)酵 A四環(huán)素標(biāo)準(zhǔn)
×四環(huán)素標(biāo)準(zhǔn)品的效價(jià)
第五篇:關(guān)于二排的軍訓(xùn)口號(hào)
關(guān)于二排的軍訓(xùn)口號(hào)
在學(xué)習(xí)、工作或生活中,大家一定沒少看到過口號(hào)吧,口號(hào)往往帶有很強(qiáng)的傾向性,它的引導(dǎo)和鼓動(dòng)作用十分明顯。那么都有哪些類型的口號(hào)呢?下面是小編幫大家整理的關(guān)于二排的軍訓(xùn)口號(hào),歡迎閱讀,希望大家能夠喜歡。
關(guān)于二排的軍訓(xùn)口號(hào)11、首戰(zhàn)用我,用我必勝!
2、武藝練不精,不算合格兵!
3、戰(zhàn)時(shí)怎么打,平時(shí)就怎么練!
4、服從命令聽從指揮團(tuán)結(jié)互助爭創(chuàng)佳績
5、認(rèn)真學(xué)習(xí)刻苦訓(xùn)練文武兼?zhèn)浒贌挸射?/p>
6、加強(qiáng)國防教育提高國防意識(shí)增強(qiáng)國防觀念
7、服從命令,聽從指揮,團(tuán)結(jié)互助,爭創(chuàng)佳績!
8、磨練頑強(qiáng)的斗志,培養(yǎng)吃苦的精神,錘煉良好的品質(zhì)
9、苦不苦想一想紅軍曾經(jīng)二萬五累不累看一看咱們的革命老前輩
10、學(xué)在協(xié)和,成就未來。日新月異,時(shí)不我待。體魄健康,意志如鋼。
11、軍紀(jì)如鐵,意志如鋼,北京奧運(yùn),再創(chuàng)輝煌!
12、以奧運(yùn)健兒為最佳榜樣刻苦訓(xùn)練銳意進(jìn)取
13、學(xué)政治學(xué)軍事全面提高自身素質(zhì)
14、流血流汗不流淚掉皮掉肉不掉隊(duì)
15、軍愛民民擁軍軍民團(tuán)結(jié)一家人
16、認(rèn)真學(xué)習(xí)刻苦訓(xùn)練文武兼?zhèn)浒贌挸射?/p>
17、服從命令聽從指揮團(tuán)結(jié)互助爭創(chuàng)佳績
關(guān)于二排的軍訓(xùn)口號(hào)21、挑戰(zhàn)極限超越自我自強(qiáng)不息厚德載物
2、秣馬揚(yáng)帆,團(tuán)結(jié)向前,青春無限,拼搏永遠(yuǎn)。
3、奧運(yùn)在我心,校運(yùn)與我行
4、不畏高溫,勇往直前(高溫天氣用語)
5、堅(jiān)持不懈,努力進(jìn)?。ㄍㄓ茫?/p>
6、磨練意志,挑戰(zhàn)自我7、創(chuàng)造自己,超越自己
8、繼承人民軍隊(duì)光榮傳統(tǒng)和優(yōu)良作風(fēng)為民族復(fù)興刻苦學(xué)習(xí)
9、發(fā)揚(yáng)集體主義和革命英雄主義精神為祖國富強(qiáng)立志成才
10、磨練頑強(qiáng)的`斗志,培養(yǎng)吃苦的精神,錘煉良好的品質(zhì)
11、服從命令聽從指揮團(tuán)結(jié)互助爭創(chuàng)佳績
12、認(rèn)真學(xué)習(xí)刻苦訓(xùn)練文武兼?zhèn)浒贌挸射?/p>
13、苦不苦想想紅軍二萬五累不累看看革命老前輩
14、以奧運(yùn)健兒為榜樣刻苦訓(xùn)練銳意進(jìn)取
15、學(xué)政治學(xué)軍事全面提高自身素質(zhì)
16、流血流汗不流淚掉皮掉肉不掉隊(duì)
17、軍愛民民擁軍軍民團(tuán)結(jié)一家人
18、加強(qiáng)國防教育提高國防意識(shí)增強(qiáng)國防觀念
關(guān)于二排的軍訓(xùn)口號(hào)31、讓火炬繼續(xù)傳遞人類的夢(mèng)想,讓我們用青春奔向奧運(yùn)的方向!
2、同心同德,求實(shí)創(chuàng)新,齊育桃李芳天下。
3、軍中驕子,校園精英,鏗鏘__連,勇往直前!
4、明德尚行,矢志報(bào)國,磨礪青春,升華自我。
5、天驕xxx,不懈追求,勇往直前,爭創(chuàng)一流!
6、流血流汗不流淚,掉皮掉肉不掉隊(duì)。
7、精英__連,豪情滿天,重志誠橙,勇往直前!
8、增強(qiáng)國防意識(shí),激發(fā)愛國熱情。
9、有體魄,能拼搏;有知識(shí),能創(chuàng)新。
10、集體的榮譽(yù),就是我的榮譽(yù)。
11、輕傷不下火線,小病不下訓(xùn)練場,勇于挑戰(zhàn)極限、12、歷經(jīng)一番血淚苦,敢教自我換新顏。
13、軍紀(jì)如鐵,意志如鋼,勇挑重?fù)?dān),力創(chuàng)一流。
14、自律自強(qiáng),奮發(fā)進(jìn)取,共繪一中馨未來、15、做學(xué)校的主人,自理、自律、自強(qiáng)。
16、成功從好習(xí)慣開始。
17、做學(xué)習(xí)的主人,勤學(xué)、善思、好問。
18、甜酸苦辣勤訓(xùn)練,一二三四展英姿。
19、繼承人民軍隊(duì)光榮傳統(tǒng)和優(yōu)良作風(fēng),為民族復(fù)興刻苦學(xué)習(xí)。
20、軍鷹xx連,翱翔九天,搏風(fēng)抗雨,共創(chuàng)輝煌!
21、磨練頑強(qiáng)的斗志,培養(yǎng)吃苦的精神,錘煉良好的品質(zhì)。
22、三大紀(jì)律,八項(xiàng)注意,個(gè)個(gè)要牢記。