第一篇：醫(yī)藥衛(wèi)生類之?huà)D產(chǎn)科論文 (8)

妊娠期甲亢治療情況對(duì)子代預(yù)后的影響

作者：高潔錦，錢燕，朱雪潔，凌雅，池美珠

作者單位：溫州醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院，浙江 溫州 325000，1.新生兒科；2.婦產(chǎn)科

【摘要】

目的 ：探討孕婦妊娠合并甲狀腺功能亢進(jìn)癥（甲亢）對(duì)子代預(yù)后的影響。方法：選取2004年1月至2007年12月在我院出生，母妊娠合并甲亢的新生兒52例，根據(jù)孕婦甲亢治療情況分為甲亢治療組（41例）與未治療組（11例），對(duì)兩組甲亢孕婦所分娩的嬰兒甲狀腺功能與生長(zhǎng)發(fā)育進(jìn)行隨訪、分析。結(jié)果：未治療組中，新生兒甲亢發(fā)生率為36.4%（4/11），甲狀腺功能減低癥發(fā)生率為45.5%（5/11），早產(chǎn)兒發(fā)生率為54.5%（6/11），小于胎齡兒發(fā)生率為18.2%（2/11）。而治療組中，新生兒甲亢發(fā)生率為2.4%（1/41），早產(chǎn)發(fā)生率為9.8%（4/41），未發(fā)生甲狀腺功能減低癥和小于胎齡兒。兩組在嬰兒甲狀腺功能異常、早產(chǎn)及小于胎齡兒發(fā)生率上差異均有顯著性（P <0.05）。結(jié)論 ：母孕期甲亢未治療者嬰兒甲狀腺功能異常、早產(chǎn)及小于胎齡兒發(fā)生率升高。合理治療妊娠期甲亢對(duì)改善子代預(yù)后有積極意義。

【關(guān)鍵詞】

妊娠；甲狀腺功能亢進(jìn)癥；甲狀腺功能減低癥；嬰兒；新生兒

Effects of the therapy for maternal hyperthyroidism during pregnancy on the prognosis of offspring

GAO Jie-jin，QIAN-Yan，ZHU Xue-jie，LIN Ya，CHI Mei-zhu.Department of Neonatology，the First Affiliated Hospital of Wenzhou Medical College，Wenzhou，325000

Abstract:

Objective: To explore the effect of maternal hyperthyroidism during pregnancy on their offspring.Methods: The clinical data of 52 neonates of mothers with hyperthyroidism were reviewed.According to the maternal hyperthyroidism therapy，infants were divided into two groups:treated maternal hyperthyroidism group(41 infants)and un-treated group(11 infants).The thyroid function and growth in the two groups were analyzed.Results: The incidences of neonatal hyperthyroidism，neonatal hypothyroidism，premature infant and small for gestational age infant in un-treated group were 36.4%，45.5%，54.5% and 18.2%，respectivey，the inckidences of those in the treated group were 2.4%，0，9.8% and 0，respectively.The difference was statistically

significant（P <0.05）in two groups of abnormal function of thyroid，premature infant and small for gestational age infant.Conclusion: In the infants of un-treated maternal hyperthyroidism，the rates of neonatal abnormal thyroid function，premature，and small for gestational age infant are increased.Treated maternal hyperthyroidism can improve the prognosis of offspring.Key words: pregnancy；hyperthyroidism；hypothyroidism；infant；newborn

Graves病引起的甲狀腺功能亢進(jìn)癥(甲亢)好發(fā)于育齡婦女，妊娠期甲亢的患病率為0.02%～0.2%[1]，其生育后代發(fā)生早產(chǎn)、宮內(nèi)生長(zhǎng)遲緩、甲狀腺功能異常的危險(xiǎn)性明顯增加，如未能及時(shí)發(fā)現(xiàn)和干預(yù)，輕者引起智能發(fā)育障礙和生長(zhǎng)遲緩，重者可能引起死亡[2]。目前國(guó)內(nèi)有關(guān)妊娠期甲亢對(duì)子代的影響的研究報(bào)道較少。現(xiàn)將我院52例妊娠期甲亢母親嬰兒的轉(zhuǎn)歸情況報(bào)告如下。

資料和方法

1.1 資料來(lái)源和分組

選取2004年1月至2007年12月其母妊娠期甲亢52例為研究對(duì)象，根據(jù)妊娠期治療情況，分為甲亢治療組與甲亢未治療組，甲亢治療組41例，甲亢未治療組11例。甲亢治療組是指孕前或孕期發(fā)現(xiàn)甲亢，經(jīng)治療、定期隨訪，維持甲狀腺功能在正常范圍或略高于正常上限。甲亢未治療組是指母親孕前或孕期確診為甲亢，因孕期自行停服或拒絕服用抗甲狀腺藥物治療，使得妊娠期甲亢未得到治療，甲狀腺功能顯著高于正常值者。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn)

①孕婦甲亢：血清FT4>21.1 pmol/L、血清FT3>10.43 pmol/L，伴有甲狀腺腫大、怕熱、多汗、激動(dòng)、心慌、手抖等。若FT4正常，而TT4升高明顯，同時(shí)伴有甲狀腺腫大或突眼等甲亢表現(xiàn)，也診斷孕婦甲亢[3]。②新生兒甲狀腺功能異常：根據(jù)《實(shí)用新生兒學(xué)》第3版正常值不同日齡標(biāo)準(zhǔn)分別診斷為：①新生兒甲亢：血清T4，T3升高，TSH正?；蛳陆?；②甲狀腺功能減低癥：血清T4和（或）T3下降，TSH下降或正常。

1.3 觀測(cè)指標(biāo)和方法

52例孕婦分娩新生兒52例，出生后測(cè)定臍血、生后第2～7天與第14～21天的甲狀腺功能，隨訪、治療至少半年，定期隨訪內(nèi)容包括：母子甲狀腺功能、頭圍、身高、體重、神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育等情況。血清T4，T3，F(xiàn)T4，F(xiàn)T3和TSH測(cè)定采用美國(guó)Beckman-coulter公司

UniCel DxI 800化學(xué)發(fā)光免疫分析儀進(jìn)行檢測(cè)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法

計(jì)數(shù)資料采用卡方檢驗(yàn)或Fisher精確概率檢驗(yàn)法，計(jì)量資料采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。

結(jié)果

2.1 對(duì)子代體重及胎齡的影響

甲亢治療組在胎齡、出生體重上顯著高于甲亢未治療組，差異有顯著性（P<0.01），而在早產(chǎn)兒、小于胎齡兒發(fā)生率上顯著低于甲亢未治療組，差異有顯著性（P<0.05）（見(jiàn)表1）。

2.2 對(duì)子代甲狀腺功能的影響

41例甲亢治療組中僅1例（例1）發(fā)生新生兒甲亢，發(fā)生率為2.4%。11例甲亢未治療組中，有9例發(fā)生新生兒甲狀腺功能異常，發(fā)生率為81.8%，其中4例新生兒甲亢（例2～例5），5例新生兒甲減（例6～例10）。例1～例5臍血或出生后第2～7天靜脈血提示T4升高明顯，予隨訪或抗甲狀腺藥物治療后降至正常故診斷為甲亢。例

6、例7出生時(shí)為甲亢，未予抗甲狀腺藥物治療，自行轉(zhuǎn)為甲減，而例

8、例9出生時(shí)甲功正常，而后出現(xiàn)甲減，例10出生時(shí)即診斷為甲減，患兒生后甲狀腺功能動(dòng)態(tài)變化見(jiàn)表2。

2.3 子代的隨訪、治療、預(yù)后情況

5例甲亢中出生后1周時(shí)2例未用藥甲狀腺素已降至正常，3例甲狀腺素仍高，予他巴唑治療，約用藥1周后全部甲功恢復(fù)正常，故減量、停藥。5例甲減患兒均予口服優(yōu)甲樂(lè)片5～10 ug/(kg·d)治療，根據(jù)甲狀腺功能情況調(diào)節(jié)劑量，分別在出生后4～17個(gè)月時(shí)停藥，停藥后復(fù)查甲功無(wú)異常，故5例甲減均屬暫時(shí)性。甲減中的例7患兒家屬于出生后4個(gè)月自行停服優(yōu)甲樂(lè)40余天，生后隨訪智力發(fā)育可，但體格發(fā)育低于同月齡的第10百分位。余51例神經(jīng)系統(tǒng)及體格發(fā)育未發(fā)現(xiàn)異常。

討論

整個(gè)孕期母親T4都能通過(guò)胎盤(pán)進(jìn)入胎兒體內(nèi)，在胎兒12周前，因不能自身合成甲狀腺素，故母－胎的甲狀腺素轉(zhuǎn)運(yùn)對(duì)胎兒的腦發(fā)育起著重要的作用[4]。若母親甲亢未治療，其過(guò)量的甲狀腺素及抗甲狀腺抗體會(huì)通過(guò)胎盤(pán)，可引起胎兒甲狀腺功能以及下丘腦-垂體-甲狀腺軸的異常。

嚴(yán)重的甲亢可引起胎兒流產(chǎn)、死胎、宮內(nèi)生長(zhǎng)遲緩、早產(chǎn)、先天畸形等[5]。本研究中

甲亢未治療組早產(chǎn)兒發(fā)生率為54.5%，顯著高于甲亢治療組（為9.8%）。Davis等[6]曾報(bào)道甲亢治療的孕婦早產(chǎn)發(fā)生率為4%～11%，甲亢未治療的孕婦早產(chǎn)發(fā)生率為53%，與本研究結(jié)果相似?？梢?jiàn)甲亢未治療，早產(chǎn)發(fā)生率顯著增加。本研究甲亢未治療組中小于胎齡兒即宮內(nèi)生長(zhǎng)遲緩發(fā)生率為18.2%，明顯高于甲亢治療組。文獻(xiàn)報(bào)告，Graves病孕母妊娠末3個(gè)月甲狀腺功能亢進(jìn)，其新生兒低體重發(fā)生的危險(xiǎn)性增加4.1倍[7]，目前有如下解釋：一種認(rèn)為，由于妊娠期甲亢，母親體內(nèi)熱卡不足，致使從母體轉(zhuǎn)運(yùn)到胎兒的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)減少；另一種認(rèn)為，由于Graves病母親體內(nèi)的促甲狀腺激素受體抗體（TRAb），直接拮抗胎兒甲狀腺的TSH受體，致使新生兒甲狀腺功能障礙所致。由此可見(jiàn)妊娠期甲亢如治療不及時(shí)將影響胎兒宮內(nèi)生長(zhǎng)。

孕婦甲亢未治療使新生兒的甲狀腺功能異常發(fā)生率顯著增高。本研究中甲亢未治療組新生兒甲亢、甲減發(fā)生率分別為36.4%、45.5%，而甲亢治療組分別為2.4%、0。妊娠甲亢對(duì)嬰兒甲狀腺功能的影響可表現(xiàn)為新生兒甲亢，甲狀腺功能減低以及高TSH血癥、藥物性甲減，其中絕大部分為暫時(shí)性甲狀腺功能異常。本研究中嬰兒甲狀腺功能異常10例全部為暫時(shí)性甲狀腺功能異常，包括暫時(shí)性新生兒甲亢、暫時(shí)性甲狀腺功能減低。新生兒甲亢是胎兒甲亢的延續(xù)，主要是因?yàn)镚raves病母親體內(nèi)的甲狀腺刺激性抗體(TSAb)通過(guò)胎盤(pán)傳到患兒體內(nèi)引起。胎兒甲亢一般發(fā)生在孕30周左右，此時(shí)胎兒體內(nèi)的抗體滴度接近母體的抗體滴度，故其母TSAb滴度顯著增高對(duì)預(yù)測(cè)胎兒及新生兒甲亢有意義[8]。但也有文獻(xiàn)報(bào)道許多TSAb滴度不高或陰性也導(dǎo)致新生兒甲亢，考慮可能為胎傳過(guò)量的甲狀腺素引起[6，9]。本研究中5例甲亢中有2例未經(jīng)抗甲狀腺藥物治療生后1周復(fù)查甲功即恢復(fù)正常，而通常TSAb的半衰期為12 d，故患兒甲亢與母胎傳過(guò)量甲狀腺素有關(guān)。

5例暫時(shí)性甲減均發(fā)生于母親孕期甲亢未得到治療而分娩的患兒身上，此甲減最早由日本的Matsuura于1988年報(bào)道。此后，國(guó)外的文獻(xiàn)對(duì)此病陸續(xù)有報(bào)道[10-12]，但國(guó)內(nèi)報(bào)道[13-14]很少，由于報(bào)道的病例數(shù)較少，故目前臨床醫(yī)師對(duì)本病的認(rèn)識(shí)還不夠。此病均發(fā)生在母親孕期Graves病未能及時(shí)有效治療而分娩的患兒身上，目前認(rèn)為它的發(fā)病機(jī)制如下：由于Graves病母親甲亢在整個(gè)妊娠期，尤其是妊娠后期，都沒(méi)得到及時(shí)治療，過(guò)量的甲狀腺素通過(guò)胎盤(pán)傳到胎兒體內(nèi)，高T4將反饋性抑制胎兒垂體功能，從而造成患兒生后TSH分泌不足[11]。實(shí)驗(yàn)室檢查為生后或生后不久出現(xiàn)T4，T3的下降，TSH下降或正常，TRH試驗(yàn)顯示TSH

分泌遲鈍。TSH暫時(shí)性的分泌不足是造成暫時(shí)性甲減的原因，故為暫時(shí)性中樞性甲減，一般于1歲左右恢復(fù)正常[10-11]。本病早產(chǎn)兒及足月兒均可發(fā)生[12]。本研究中暫時(shí)性甲減中就有3例為早產(chǎn)兒，由于其臍血TSH下降明顯（TSH<0.0025），故與一般早產(chǎn)兒的暫時(shí)性低甲狀腺素血癥的TSH正常有著顯著不同。由于本病患兒出生時(shí)臍血甲狀腺素可正?；蚪档突蛏撸虼顺錾笮鑴?dòng)態(tài)觀察。由于本病TSH下降或正常，與原發(fā)性甲減TSH升高有本質(zhì)區(qū)別，因此對(duì)于母妊娠合并甲亢的患兒，僅用濾紙血斑時(shí)間分辨熒光法測(cè)TSH會(huì)造成甲減漏診，故對(duì)懷疑本病的患兒需檢查甲狀腺功能。

有人認(rèn)為輕度的甲狀腺素升高可不予治療。但目前對(duì)新生兒甲亢的長(zhǎng)期預(yù)后研究較少，曾有報(bào)道甲亢后出現(xiàn)小頭畸形的患兒可存在智力的障礙[5]。本資料中有7例出生時(shí)T4升高嬰兒出生后1周復(fù)查，2例轉(zhuǎn)為甲低，2例自行恢復(fù)正常，3例治療1周轉(zhuǎn)為正常，故對(duì)出生時(shí)甲亢的患兒需要及時(shí)復(fù)查，制定合理的治療方案，避免過(guò)度治療。而新生兒暫時(shí)性甲減若不及時(shí)治療，會(huì)對(duì)其腦及體格發(fā)育造成長(zhǎng)期的損害。本研究中例7因未堅(jiān)持正規(guī)治療，可能造成了其生長(zhǎng)發(fā)育受限。故暫時(shí)性甲減必須予優(yōu)甲樂(lè)替代治療。

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學(xué)術(shù)交流與討論，僅供參考不構(gòu)成任何學(xué)術(shù)建議。

第二篇：醫(yī)藥衛(wèi)生類之?huà)D產(chǎn)科論文

宮頸環(huán)切術(shù)在宮頸高度鱗狀上皮內(nèi)病變中的診治價(jià)值

作者：周凱，瞿文珍，楊孝軍，施錚錚，鄭飛云，楊開(kāi)顏

作者單位：溫州醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院，浙江 溫州 325000，1.婦產(chǎn)科；2.病理科

【摘要】

目的 ：探討宮頸環(huán)切術(shù)（LEEP）在宮頸高度鱗狀上皮內(nèi)病變（HSIL）中的診治價(jià)值，積累術(shù)后再處理經(jīng)驗(yàn)。方法：回顧性分析2004年12月至2007年12月，因?qū)m頸HSIL在我院接受LEEP治療的503例患者的臨床病理資料及隨訪資料，宮頸CIN 2級(jí)367例，CIN 3級(jí)130例，原位癌2例，可疑原位癌及浸潤(rùn)癌4例。結(jié)果：503例HSIL患者中，LEEP術(shù)前術(shù)后病理符合率為38.2%（192/503）；級(jí)別升高占14.9%（75/503），其中檢出20例浸潤(rùn)癌，占3.98%。LEEP術(shù)后行子宮切除或?qū)m頸癌根治術(shù)26例，病理轉(zhuǎn)陰9例，病變殘留8例，浸潤(rùn)癌5例，病理不詳4例；病變持續(xù)存在4例，行第二次LEEP治愈；復(fù)發(fā)3例。LEEP治療HSIL的初次治愈率為95.8%（482/503）。結(jié)論 ：LEEP可彌補(bǔ)陰道鏡活檢的不足，減少宮頸浸潤(rùn)癌的漏診；其次，通過(guò)LEEP標(biāo)本的二次病理，防止過(guò)度治療，為部分患者保留子宮提供可能；對(duì)LEEP術(shù)后病理升級(jí)的患者，排除浸潤(rùn)癌后，可進(jìn)一步隨訪觀察。

【關(guān)鍵詞】

宮頸環(huán)切術(shù)；HSIL；CIN；原位癌；治療

近年來(lái)，隨著宮頸細(xì)胞學(xué)和陰道鏡檢查的普及，宮頸上皮內(nèi)瘤變（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）的檢出率逐步增加，其治療方法也由傳統(tǒng)的冷刀錐切或子宮切除逐步轉(zhuǎn)為保守和簡(jiǎn)單。宮頸環(huán)切術(shù)（loop electrosurgical excision procedure，LEEP）由于操作方便，患者無(wú)需住院，相對(duì)費(fèi)用低廉，創(chuàng)面恢復(fù)快，標(biāo)本能二次檢查等，在臨床上得到越來(lái)越廣泛的使用。本研究回顧性分析我院503例宮頸高度鱗狀上皮內(nèi)病變（HSIL包括CIN 2和CIN 3）患者采用LEEP治療的臨床病理資料及隨訪資料，探討LEEP在HSIL患者中的診治價(jià)值，積累術(shù)后再處理經(jīng)驗(yàn)。

資料和方法

1.1 一般資料

收集2004年12月至2007年12月在我院門診因HSIL行LEEP治療資料完整的病例503例，患者均為已婚生育婦女，年齡23～72歲，≤35歲178例，36～49歲之間273例，≥50歲52例。每例患者術(shù)前常規(guī)行細(xì)胞學(xué)檢查（宮頸刮片或液基薄層細(xì)胞學(xué)涂片TCT）和陰道鏡下多點(diǎn)活檢，病理檢查結(jié)果：CIN 2級(jí)367例，CIN 3級(jí)130例，原位癌2例，可疑原位

癌及浸潤(rùn)癌4例。

1.2 方法

月經(jīng)干凈后3～7 d，查陰道清潔度為1～2度，排除霉菌及滴蟲(chóng)感染，常規(guī)碘伏消毒，宮頸表面碘溶液顯示病變范圍，采取“Cowboy環(huán)at”的步驟，距離病變邊緣3～5 mm從9點(diǎn)處進(jìn)線圈，切除宮頸移行區(qū)，再用小號(hào)環(huán)形線圈切除頸管組織，使錐深達(dá)18～20 mm，術(shù)后創(chuàng)面呈圓錐形，球形電極點(diǎn)狀止血。切除標(biāo)本標(biāo)記后分為宮頸組織及宮頸管組織分袋送病理檢查。術(shù)后創(chuàng)面覆蓋呋喃西林粉，常規(guī)抗炎治療3～5 d。

1.3 隨訪

術(shù)后第1、第2、第4、第8周隨訪創(chuàng)面愈合情況，術(shù)后3個(gè)月宮頸光滑者行TCT檢查，有肉芽增生或切緣病理不確定或術(shù)后病理升級(jí)者行陰道鏡下活檢。如未發(fā)現(xiàn)異常，則每半年復(fù)查一次宮頸細(xì)胞學(xué)，如連續(xù)2次細(xì)胞學(xué)未見(jiàn)異常，則每年復(fù)查宮頸細(xì)胞學(xué)。術(shù)后療效參照錢德英[1]的LEEP療效判斷：術(shù)后切除標(biāo)本切緣發(fā)現(xiàn)CIN為手術(shù)殘留；術(shù)后半年無(wú)CIN病變?yōu)橹斡?；術(shù)后半年內(nèi)仍有CIN為病變持續(xù)存在；術(shù)后半年后發(fā)現(xiàn)CIN為病變復(fù)發(fā)。病變持續(xù)存在和復(fù)發(fā)均經(jīng)病理證實(shí)。隨訪滿12個(gè)月納入本資料。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法

采用x2檢驗(yàn)。

結(jié)果

2.1 手術(shù)情況

手術(shù)時(shí)間大多在2～15 min，12例時(shí)間超過(guò)20 min，均為術(shù)中出血，其中1例行宮頸縫合術(shù)。術(shù)中出血量大多在1～15 mL之間，超過(guò)20 mL有11例，最多達(dá)50 mL。所有病例均未使用麻醉及鎮(zhèn)痛藥，部分患者訴下腹墜痛，但均能忍受，本組無(wú)因疼痛而終止手術(shù)者。術(shù)后有2例患者出現(xiàn)迷走神經(jīng)反應(yīng)，給予肌注阿托品針后好轉(zhuǎn)。

2.2 陰道鏡下多點(diǎn)活檢與LEEP術(shù)后病理對(duì)照

見(jiàn)表1。367例CIN2級(jí)病變中術(shù)前術(shù)后病理一致者141例，占38.4%；術(shù)后病理診斷級(jí)別升高64例，占17.4%，檢出原位癌3例，浸潤(rùn)癌12例；術(shù)后病理診斷級(jí)別降低162例，占44.1%，其中退化為慢性宮頸炎的有100例，占27.2%。130例CIN 3級(jí)中術(shù)前、術(shù)后病理一致者49例，占37.7%；術(shù)后病理升級(jí)10例，占7.7%，其中原位癌4例，浸潤(rùn)癌6例；

術(shù)后病理降級(jí)71例，占54.6%，其中退化為慢性宮頸炎14例，占10.8%。CIN 3級(jí)患者LEEP術(shù)后病理退化為慢性宮頸炎的比例明顯低于CIN 2級(jí)患者比例（27.2%），差異有顯著性（P<0.05）。說(shuō)明LEEP術(shù)前CIN級(jí)別越高，術(shù)后退化為慢性炎的可能性越小。2例原位癌及4例可疑浸潤(rùn)癌患者，術(shù)后2例病理降級(jí)為CIN，2例仍為原位癌，2例升級(jí)為浸潤(rùn)癌。

2.3 LEEP術(shù)后再手術(shù)26例

367例LEEP術(shù)前病理為CIN 2的患者，有14例LEEP術(shù)后病理升級(jí)為原位癌或浸潤(rùn)癌，行相應(yīng)的全子宮切除或?qū)m頸癌根治術(shù)。術(shù)后病理結(jié)果顯示5例宮頸未見(jiàn)殘留病灶，僅為L(zhǎng)EEP術(shù)后肉芽增生及炎癥反應(yīng)；3例顯示有不同級(jí)別的CIN殘留；1例顯示原位癌累腺（LEEP術(shù)后病理為鱗癌）；1例顯示宮頸鱗癌累及深肌層伴淋巴轉(zhuǎn)移；其余4例在外院手術(shù)，病理不詳。2例術(shù)后病理未升級(jí)的患者因合并子宮肌瘤要求行全子宮切除，術(shù)后病理1例為宮頸原位癌累腺，1例為宮頸慢性炎。130例LEEP術(shù)前病理為CIN 3的患者，有7例術(shù)后病理升級(jí)行相應(yīng)的全子宮切除術(shù)或?qū)m頸癌根治術(shù)，術(shù)后病理提示2例為慢性炎伴肉芽形成，2例CIN殘留，3例鱗癌，其中1例伴淋巴轉(zhuǎn)移。2例原位癌患者行LEEP術(shù)后，1例病理升級(jí)為早期浸潤(rùn)癌行擴(kuò)大全子宮切除術(shù)，術(shù)后無(wú)病灶殘留；另1例病理仍為原位癌而行全子宮切除術(shù)，術(shù)后病理提示病灶殘留[2]。4例可疑浸潤(rùn)癌患者檢出1例浸潤(rùn)癌，行宮頸癌根治術(shù)。

2.4 術(shù)后隨訪

503例患者均隨訪滿12個(gè)月。術(shù)后CIN持續(xù)存在4例，行第2次LEEP，現(xiàn)已分別隨訪10、12、18及18個(gè)月無(wú)復(fù)發(fā)。術(shù)后復(fù)發(fā)3例，1例為術(shù)后16個(gè)月TCT提示不典型鱗狀上皮細(xì)胞（ASC-US），病理證實(shí)為CIN3累腺，行全子宮切除術(shù)。2例術(shù)后24個(gè)月復(fù)查細(xì)胞學(xué)異常，病理證實(shí)為CIN，CIN 1的患者行第2次LEEP，現(xiàn)術(shù)后8個(gè)月無(wú)復(fù)發(fā)；CIN 2的患者因合并子宮肌瘤行全子宮切除術(shù)，術(shù)后病灶殘留為CIN 3。LEEP術(shù)后病理升級(jí)為早浸的1例39歲患者及升級(jí)為原位癌的1例27歲患者拒絕進(jìn)一步手術(shù)，分別隨訪了18個(gè)月、26個(gè)月無(wú)復(fù)發(fā)。4例可疑原位癌或浸潤(rùn)癌患者中，LEEP術(shù)后2例為CIN 2，其中1例37歲患者，已隨訪30個(gè)月，無(wú)復(fù)發(fā)；另1例患者已72歲，患有糖尿病及高血壓病，已隨訪39個(gè)月無(wú)復(fù)發(fā)；原位癌1例，26歲，隨訪37個(gè)月，已妊娠足月分娩1子。本組LEEP治療HSIL的初次治愈率為95.8%（482/503），復(fù)發(fā)率為0.6%（3/482）。

討論

3.1 LEEP的診治價(jià)值

LEEP最早于20世紀(jì)80年代在英國(guó)發(fā)展起來(lái)，國(guó)內(nèi)從90年代中期開(kāi)始陸續(xù)應(yīng)用LEEP治療宮頸病變。本組503例HSIL患者接受LEEP治療后組織學(xué)檢查結(jié)果與陰道鏡下組織學(xué)符合率為38.2%（192/503），級(jí)別升高為14.9%（75/503），其中檢出20例浸潤(rùn)癌，占3.98%，這說(shuō)明陰道鏡下多點(diǎn)活檢不能檢出所有的宮頸浸潤(rùn)癌，而LEEP可將大塊組織送檢，避免了這部分宮頸癌患者的漏診，彌補(bǔ)了陰道鏡的不足，也給臨床醫(yī)生做出下一步合適的治療提供了更為可靠的依據(jù)。本資料中LEEP治療HSIL的初次治愈率為95.8%，與錢德英等[1]報(bào)道相似。本組資料中LEEP術(shù)后病理級(jí)別下降率比較高，占46.7%（235/503），可能與陰道鏡下病變已被去除有關(guān)，也可能與病理標(biāo)本取材有關(guān)，因LEEP標(biāo)本相對(duì)于冷刀錐切標(biāo)本而言比較細(xì)碎，因而定位比較困難。但是，LEEP術(shù)后病理的二次確診避免了相當(dāng)部分HSIL的過(guò)度治療。以往宮頸原位癌及重度不典型增生3級(jí)通常行全子宮切除術(shù)，近年隨著觀念的更新及患者的心理生理需求，越來(lái)越多的年長(zhǎng)患者要求保留子宮，LEEP的應(yīng)用為該類患者提供保留子宮的機(jī)會(huì)，也為有合并癥的患者提供了選擇機(jī)會(huì)。本組1例72歲的可疑早浸癌患者（合并糖尿病、高血壓?。┙邮芰薒EEP術(shù)，術(shù)后病理降級(jí)為CIN 2，未予進(jìn)一步處理，現(xiàn)隨訪39個(gè)月無(wú)復(fù)發(fā)，就是一個(gè)很好的例子。因此，作者認(rèn)為對(duì)于任何年齡的HSIL患者，術(shù)后如能很好隨訪，可以采用LEEP治療。

3.2 LEEP的操作要點(diǎn)及注意事項(xiàng)

LEEP的操作方法主要有Cowboy環(huán)at法和直線法。作者在臨床操作中認(rèn)為，對(duì)于宮頸病變面積大于1/2宮頸時(shí)，最好采用Cowboy環(huán)at法，從9點(diǎn)進(jìn)線圈，先逆時(shí)針環(huán)形切除宮頸轉(zhuǎn)化區(qū)，再換成小號(hào)線圈，切除宮頸管組織，分別標(biāo)記留作病理標(biāo)本。部分患者宮頸表面的病變并不嚴(yán)重，但宮頸管內(nèi)凹凸不平，可加行宮頸管搔刮，并將小號(hào)線圈自制成三角形線圈，切除宮頸管內(nèi)病變，使創(chuàng)面呈圓錐狀，術(shù)后創(chuàng)面易恢復(fù)為正常宮頸形態(tài)。由于宮頸上皮內(nèi)瘤變所指的病變僅局限于上皮層，不必切除過(guò)多的肌層，一則創(chuàng)面過(guò)深容易出血，本組有11例術(shù)中出血超過(guò)20 mL，最多達(dá)50 mL；二則易致創(chuàng)面呈圓柱狀，影響愈合。對(duì)于宮頸病變面積小于1/2宮頸時(shí)，可采用直線法，用大中號(hào)線圈直接從9點(diǎn)進(jìn)3點(diǎn)出，錐形切除病變區(qū)域。對(duì)于陰道壁過(guò)度松弛患者，可將剪去頭端的避孕套套于窺器外面，擋開(kāi)陰道側(cè)壁黏膜，避免傷及陰道壁（本院曾發(fā)生1例陰道壁損傷[2]）。

3.3 LEEP術(shù)后再處理方式的選擇

由于對(duì)剩余宮頸中殘存病變的檢出和程度難以預(yù)測(cè)，因而對(duì)術(shù)后病理升級(jí)或切緣不確定的患者進(jìn)一步采用何種處理方式目前尚有爭(zhēng)議。有作者提出對(duì)切緣陽(yáng)性的CIN 患者均施行子宮切除術(shù)，這明顯存在治療過(guò)度的問(wèn)題。Berck and Novak婦科學(xué)中提出切緣為CIN 3的患者，如合并其他婦科問(wèn)題需要切除子宮者可施行子宮切除術(shù)[3]。本組LEEP術(shù)后行子宮切除26例，除4例外院手術(shù)病理不詳外，22例中9例術(shù)后病理陰性，8例不同程度CIN殘留，5例浸潤(rùn)癌，說(shuō)明59.1%的患者的確需要進(jìn)一步處理；而有40.9%的患者經(jīng)LEEP治療切凈了病灶，這部分患者存在過(guò)度治療。切緣陽(yáng)性是否一定有病灶殘留？切緣陰性是否真的切凈了病灶？有作者報(bào)道稱，錐切切緣陽(yáng)性和陰性再次術(shù)后的宮頸殘存病灶分別為80%(8/10)和69.2%(9/13)[4]，還是相當(dāng)高的。一項(xiàng)meta分析顯示錐切切緣陰性再次發(fā)生宮頸高級(jí)別病變?yōu)?%（318/12493），而切緣陽(yáng)性復(fù)發(fā)率為18%（597/3335），認(rèn)為切緣CIN不凈是再次發(fā)生高級(jí)別病變的潛在高危因素，建議錐切術(shù)后至少隨訪10年[5]。本組資料顯示CIN復(fù)發(fā)率小于1%，且復(fù)發(fā)仍為CIN。因此，作者認(rèn)為L(zhǎng)EEP術(shù)后病理升級(jí)，宮頸管有累及，但排除浸潤(rùn)癌，可在創(chuàng)面愈合后8～12周行陰道鏡下再次活檢及宮頸管搔刮，視病理結(jié)果再作相應(yīng)的處理。此外，還可結(jié)合HPV檢測(cè)來(lái)隨訪。

3.4 LEEP用于治療宮頸原位癌的價(jià)值

本組共有10例宮頸原位癌患者，3例年輕患者LEEP術(shù)后做了隨訪，未見(jiàn)復(fù)發(fā)，最長(zhǎng)的已隨訪37個(gè)月；7例LEEP術(shù)后采用了子宮切除術(shù)，病理提示5例未見(jiàn)病灶殘留，2例殘留，其中1例殘留系64歲絕經(jīng)后婦女，可能與絕經(jīng)后宮頸萎縮，鱗柱交界內(nèi)移，導(dǎo)致切除范圍不足有關(guān)。本組LEEP治療原位癌的成功率為80%。但也有作者[6]報(bào)道LEEP術(shù)后病灶殘留率還是相當(dāng)高的。51例宮頸原位癌患者行LEEP術(shù)后再行子宮全切術(shù)，術(shù)后組織學(xué)顯示殘留病灶≥CIN 2級(jí)者占64.7%，并見(jiàn)1例早期浸潤(rùn)癌。因此，作者認(rèn)為對(duì)于年輕有生育要求、碘試驗(yàn)病變范圍小于整個(gè)宮頸的2/

3、陰道鏡檢查滿意者可行LEEP術(shù)，術(shù)后密切隨訪。對(duì)于絕經(jīng)婦女、或年齡大于40歲、或病變范圍大于整個(gè)宮頸的2/

3、無(wú)條件隨訪者以全子宮切除為宜。本組資料顯示LEEP術(shù)后殘留率比較低，但因例數(shù)少，尚待積累經(jīng)驗(yàn)。

總之，合理使用LEEP術(shù)彌補(bǔ)了陰道鏡下活檢的局限性，避免了一部分宮頸癌的漏診。另外，只要正確掌握LEEP治療的適應(yīng)證，規(guī)范手術(shù)操作，注意術(shù)前術(shù)后病理觀察，LEEP

是治療宮頸HSIL安全有效的方法，它阻斷了CIN的進(jìn)一步發(fā)展。對(duì)合適的原位癌患者可嘗試LEEP治療，但術(shù)后必須嚴(yán)密隨訪。對(duì)LEEP術(shù)后病理升級(jí)的HSIL患者，只要排除浸潤(rùn)癌，可在術(shù)后8～12周再行陰道鏡檢查，視病理結(jié)果再作相應(yīng)處理。

晉升網(wǎng)簡(jiǎn)介

晉升網(wǎng)（004km.cnplete ex-cision of cervical

intraepithelial neoplasia and risk of treat-ment failure: a meta-analysis[J].Lancet Oncol, 2007, 8(11):985-993.[6]熊秀華，吳玉梅.高頻電波刀診治宮頸原位癌臨床價(jià)值的探討[J].北京醫(yī)學(xué),2005,27(5):313-315.申明：本論文版權(quán)歸原刊發(fā)雜志社所有，我們轉(zhuǎn)載的目的是用于

學(xué)術(shù)交流與討論，僅供參考不構(gòu)成任何學(xué)術(shù)建議。

第三篇：醫(yī)藥衛(wèi)生類之?huà)D產(chǎn)科論文 (6)

宮頸上皮內(nèi)瘤變和宮頸癌組織中Survivin與Bcl-2的表達(dá)及相關(guān)性

作者：朱華，施錚錚，張虎祥，萬(wàn)麗，楊孝軍，鄭飛云

作者單位：溫州醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院，浙江 溫州 325000，1.婦產(chǎn)科；2.病理科

【摘要】

目的 ：研究Survivin、Bcl-2在宮頸上皮內(nèi)瘤變及宮頸癌中的表達(dá)，探討兩者在宮頸癌發(fā)病機(jī)制中的作用。方法：采用原位雜交法檢測(cè)宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN）和宮頸癌中Survivin基因的表達(dá)，以正常宮頸組織為對(duì)照。同時(shí)采用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)Bcl-2蛋白在各組中的表達(dá)。結(jié)果 ：Survivin mRNA的陽(yáng)性率在宮頸癌、CIN和正常宮頸組織中分別為77.8%、44.6%和0%，Bcl-2蛋白在三者中的陽(yáng)性表達(dá)率分別為70.4%、39.2%和0，兩者差異均有顯著性。Survivin及Bcl-2陽(yáng)性表達(dá)在CINⅢ級(jí)中明顯高于CIN I/Ⅱ級(jí)，在宮頸癌Ⅱb～Ⅲ期中顯著高于Ⅰ～Ⅱa期，在低分化組中顯著高于高、中分化組。在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中Survivin的表達(dá)顯著高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組。在宮頸癌中Survivin與Bcl-2的表達(dá)呈正相關(guān)。結(jié)論：Survivin和Bcl-2的異常表達(dá)可能參與宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程，可能有協(xié)同促進(jìn)抗凋亡作用，并提示與腫瘤的惡性程度和不良預(yù)后有關(guān)。

【關(guān)鍵詞】

Survivin Bcl-2 宮頸癌 CIN

Expression and correlation between Survivin and Bcl-2 in cervical intraepithelial neoplasia and cervical carcinoma

ZHU Hua，SHI Zhengzheng，ZHANG Huxiang，WAN Li，YANG Xiaojun，ZHENG Feiyun.Department of Gynecology and Obstetrics，the First Affiliated Hospital of Wenzhou Medical College，Wenzhou，325000

Abstract:

Objective: To investigate the expression of Survivin and Bcl-2 in cervical intraepithelial neoplasia and cervical carcinoma，and to explore the role of them in cervical carcinoma pathogenesis.Methods: The expression of Survivin mRNA was detected with hybridiza-tion in situ in CIN and cervical carcionma，and the expression of Bcl-2 was detected with immunohistochemical method.Normal cervical tissues were acted as the control.Results: The positive rates of Survivin mRNA in cervical carcinoma，CIN and the normal cervical tissues were 77.8%，44.6% and 0%，respectively；while the expression of Bcl-2 was 70.4%，39.2% and 0% in the above three groups.There was significant difference among those groups.The

expression of Survivin and Bcl-2 in CINⅢ was obviously more significant than those in CIN I/Ⅱ.And the differences were obviously more significant in cervical carcinoma at stage Ⅱb～Ⅲ than those at stageⅠ～Ⅱa.The expressions of Survivin and Bcl-2 with poorly differentiation were also obviously more significantly different than those with good or moderated differentiation.The expression of Survivin in cervical carcinoma with lymphatic metastasis was more significant difference than those without lymphatic metastasis.In our study，positive correlation between Survivin mRNA and Bcl-2 was observed in cervical carcinoma.Conclusion: The abnormal expression of Survivin and Bcl-2 may participate in the occurrence and development of cervical carcinoma，they may have same effect in coordination with anti-apoptosis，and suggest malignant degree of tumor and patients’poor prognosis.Key words:

Survivin；Bcl-2；cervical carcinoma；CIN

凋亡抑制和增殖能力增強(qiáng)是腫瘤發(fā)生的兩大主要機(jī)制。存活素（Survivin）是新近發(fā)現(xiàn)的一種凋亡抑制基因，它是凋亡抑制蛋白（inhibition apoptosis protein，IAP）家族中結(jié)構(gòu)最簡(jiǎn)單的蛋白分子，也是至今發(fā)現(xiàn)抗凋亡作用最強(qiáng)的基因。Survivin基因在正常組織中不表達(dá)，而在幾乎所有被研究的腫瘤組織中呈陽(yáng)性表達(dá)[1]，這一特點(diǎn)為腫瘤的診斷和治療提供了新的靶點(diǎn)。本研究采用原位雜交法檢測(cè)Survivin在宮頸癌及宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN）中的表達(dá)，采用免疫組化法檢測(cè)Bcl-2蛋白的表達(dá)，探討兩者在宮頸癌發(fā)生、發(fā)展中的作用。

資料和方法

1.1 一般資料

宮頸浸潤(rùn)癌81例，CIN 74例，以同期20例正常宮頸組織作對(duì)照。均為取自本院2006年1月-2008年3月間經(jīng)病理證實(shí)的臨床資料較完整的宮頸標(biāo)本。患者年齡19～78歲，平均（40.1±11.2）歲。取材前未接受任何其他治療。所有標(biāo)本及時(shí)以4%多聚甲醛(含有1/1000 DEPC)固定，石蠟包埋，4μm連續(xù)切片。

1.2 臨床分期、病理分型及病理分級(jí)

74例CIN中包括CIN I級(jí)13例，CIN II級(jí)26例，CIN III級(jí)35例。81例宮頸浸潤(rùn)癌中包括70例鱗癌和11例腺癌，根據(jù)1970年再次修訂的FLGO臨床分期標(biāo)準(zhǔn)，分為Ia期9例，Ib期17例，IIa期33例，IIb期12例，III期10例；按組織病理學(xué)分級(jí)分為高分化1

4例，中分化29例，低分化38例；按照腫瘤生長(zhǎng)類型分為外生型39例，內(nèi)生型15例，潰瘍型16例，頸管型11例。81例宮頸癌患者中54例行廣泛性子宮切除術(shù)＋盆腔淋巴結(jié)清掃術(shù)（包括Ia期3例、Ib期17例、IIa期33例、IIb期1例），有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者33例，無(wú)轉(zhuǎn)移21例。

1.3 主要試劑

鼠抗人Bcl-2多克隆抗體和免疫組化試劑盒（即用型二步法）購(gòu)自北京中杉生物技術(shù)公司。Survivin原位雜交檢測(cè)試劑盒購(gòu)于武漢博士德生物技術(shù)有限公司，針對(duì)人Survivin靶基因的mRNA引物序列為：①5’-CCTGG CAGCC CTTTC TCAAG GACCA CCGCA-3’；②5’-AAGCA TTCGT CCGGT TGCGC TTTCC TTTCT-3’；③5’-AGAAA GTGCG CCGTG CCATC GAGCA GCTGG-3’。

1.4 測(cè)定方法

1.4.1 原位雜交法檢測(cè)Survivin mRNA表達(dá)：地高辛標(biāo)記的Survivin mRNA寡核苷酸探針檢測(cè)石蠟包埋組織的Survivin mRNA序列：切片脫蠟，0.5% H2O2室溫處理30 min，加3%檸檬酸稀釋的胃蛋白酶，37 ℃消化，暴露Survivin mRNA核酸片段，滴加預(yù)雜交液，42 ℃恒溫4 h，滴加雜交液，42 ℃恒溫箱過(guò)夜，梯度SSC洗滌，依次滴加封閉液，生物素化鼠抗地高辛，SABC，DAB顯色，復(fù)染，透明，封片鏡檢。以不加Survivin探針只加預(yù)雜交液作為陰性對(duì)照。

1.4.2 免疫組織化學(xué)法檢測(cè)Bcl-2蛋白表達(dá)：按常規(guī)免疫組化試劑盒即用型二步法操作步驟進(jìn)行。組織切片脫蠟，微波修復(fù)抗原，3% H2O2阻斷劑孵育10 min，PBS液沖洗。加入1:50 Bcl-2鼠抗人單克隆抗體，4 ℃冰箱過(guò)夜。PBS沖洗，加入即用型二抗PV-6000，37 ℃孵育20 min，PBS沖洗，DAB顯色，蘇木素復(fù)染，透明，封片鏡檢。用PBS液代替一抗作為陰性對(duì)照，用已知陽(yáng)性的乳腺癌作陽(yáng)性對(duì)照。所有切片均在相同條件下進(jìn)行。

1.5 結(jié)果評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

Survivin和Bcl-2陽(yáng)性表現(xiàn)為細(xì)胞漿中出現(xiàn)淡黃色至棕黃色顆粒。隨機(jī)觀察10個(gè)高倍鏡視野，按每高倍鏡視野陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)百分比記分：陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)小于5%為0分，5%～25%為1分，26%～50%為2分，51%～75%為3分，大于75%為4分。按著色強(qiáng)度記分：染色呈淡

黃色者記為1分，染色呈黃色者記為2分，染色呈棕黃色者記為3分。兩種記分的乘積即為陽(yáng)性強(qiáng)度：0分為陰性(-)，1～4分為弱陽(yáng)性(+)，5～8分為中度陽(yáng)性(++)，9～12分為強(qiáng)陽(yáng)性(+++)。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法

率的比較采用x2檢驗(yàn)或Fisher精確概率法，相關(guān)性檢驗(yàn)采用Spearman等級(jí)相關(guān)分析。

結(jié)果

2.1 Survivin mRNA，Bcl-2在正常子宮頸、CIN、宮頸癌中的表達(dá)（見(jiàn)表1及圖1～6）

Survivin，Bcl-2陽(yáng)性表達(dá)染色主要定位于細(xì)胞漿，呈淡黃色或棕黃色顆粒，局灶性或彌漫性分布。由表1可見(jiàn)，Survivin，Bcl-2在正常宮頸組織中不表達(dá)，在宮頸癌和CIN中表達(dá)的陽(yáng)性率顯著高于正常宮頸組織（P <0.01），且在宮頸癌中表達(dá)的陽(yáng)性率高于CIN（P <0.01）。

2.2 Survivin，Bcl-2表達(dá)與宮頸癌臨床病理特征的關(guān)系

Survivin，Bcl-2陽(yáng)性表達(dá)與腫瘤組織分化、臨床分期有關(guān)。Survivin的陽(yáng)性表達(dá)還與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān),隨著腫瘤組織分化程度的降低和臨床分期的升高，Survivin mRNA表達(dá)陽(yáng)性率逐漸上升。宮頸癌IIb～I(xiàn)II期組與I～I(xiàn)Ia期組間、低分化組與中～高分化組之間，兩者表達(dá)均有差異(分別為P <0.05或P <0.01)；Survivin在宮頸癌有盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中的陽(yáng)性表達(dá)高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組(P<0.01)，而B(niǎo)cl-2表達(dá)與宮頸癌的組織病理類型、腫塊生長(zhǎng)類型和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無(wú)相關(guān)性(P＞0.05)（見(jiàn)表2）。

討論

Survivin基因是于1997年由Altier利用效應(yīng)細(xì)胞蛋白酶受體1cDNA在人基因組庫(kù)中首次篩選克隆出，定位于17q25。它是活性最強(qiáng)的凋亡抑制蛋白，主要通過(guò)間接或直接抑制半胱氨酸蛋白酶caspase-3和caspase-7的活性而發(fā)揮抗凋亡作用[2-3]。

Saiton等[4]采用RT-PCR技術(shù)研究了7種宮頸癌細(xì)胞株和25例宮頸癌組織中Survivin mRNA的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)在所有的標(biāo)本中均可檢測(cè)到Survivin mRNA。在之后的定量測(cè)定中發(fā)現(xiàn)，Survivin mRNA的表達(dá)在宮頸癌細(xì)胞株中高于正常宮頸組織，而在88%的宮頸癌組織中其表達(dá)水平是正常組織的2倍。王梅等[5]又用免疫組化SP法從蛋白水平對(duì)宮頸癌中Survivin進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)59例宮頸癌組織中41例(占69.5%)有Survivin表達(dá)，而在10例正常宮頸組織

中未發(fā)現(xiàn)Survivin表達(dá)。本研究亦發(fā)現(xiàn)Survivin mRNA在正常宮頸組織中未表達(dá)，在CIN和宮頸癌組織中逐漸升高，差異有顯著性。隨著組織分化惡性程度的增高，或腫瘤臨床期別的增高，Survivin的陽(yáng)性表達(dá)率亦相應(yīng)上升，且其表達(dá)與淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移亦有顯著相關(guān)性。由此表明Survivin基因的表達(dá)與宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展有密切相關(guān)，它可能預(yù)示著腫瘤具有較高的侵襲性和不良預(yù)后[6]。Survivin可能通過(guò)抑制細(xì)胞凋亡、促進(jìn)細(xì)胞增殖而發(fā)揮其作用，因此Survivin基因是一個(gè)有潛在價(jià)值的腫瘤標(biāo)志物[7]。

Bcl-2基因是最早在B細(xì)胞白血病和濾泡性淋巴瘤的研究中被發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞凋亡抑制基因，定位于染色體18q21，它可通過(guò)封閉細(xì)胞核轉(zhuǎn)運(yùn)、抑制細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度升高、抗氧化而發(fā)揮抗凋亡作用。它是迄今為止研究較深入的抗凋亡基因之一[8]。在本研究中，發(fā)現(xiàn)Bcl-2蛋白同樣在正常宮頸組織、CIN和宮頸癌中有逐漸增高的表達(dá)，且兩兩之間差異有顯著性，表明Bcl-2基因亦參與了正常宮頸組織-CIN-宮頸癌的病變過(guò)程。

同時(shí)，在本實(shí)驗(yàn)中還發(fā)現(xiàn)Survivin的表達(dá)和Bcl-2有正相關(guān)性，目前兩者協(xié)同致病機(jī)制還不清楚。在CIN階段Survivin和Bcl-2即有表達(dá)，提示此兩基因在宮頸癌惡變的早期即有表達(dá)，且隨著疾病的發(fā)展而進(jìn)一步增強(qiáng)。宮頸癌IIb期以上患者的臨床標(biāo)本出現(xiàn)兩者的高表達(dá)率，低分化標(biāo)本出現(xiàn)高表達(dá)率等均提示兩者表達(dá)與此類患者的不良預(yù)后有關(guān)，對(duì)臨床治療有指導(dǎo)意義。有報(bào)道稱Survivin可在Bcl-2的下游阻斷半胱氨酸蛋白酶caspase-3和caspase-7凋亡調(diào)節(jié)通路[9]。

據(jù)推測(cè)兩者可能通過(guò)相似的啟動(dòng)序列，共同協(xié)調(diào)轉(zhuǎn)錄而導(dǎo)致宮頸癌的病變。也可能是由于Survivin基因所在的染色體不穩(wěn)定，導(dǎo)致t（14，18）易位，而引發(fā)Bcl-2基因轉(zhuǎn)錄激活，而細(xì)胞凋亡途徑的紊亂則有利于腫瘤的生長(zhǎng)和侵襲。兩基因的異常表達(dá)可能協(xié)調(diào)促進(jìn)細(xì)胞逃離正常的監(jiān)控機(jī)制，抑制腫瘤細(xì)胞凋亡，促進(jìn)異常增殖，參與宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展。但由于研究時(shí)間短，缺乏研究對(duì)象生存時(shí)間的隨訪資料，因此聯(lián)合檢測(cè)Survivin和Bcl-2表達(dá)是否為宮頸癌預(yù)后的客觀指標(biāo)還有待深入研究。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，Survivin和Bcl-2在CIN和宮頸癌組織中的異常表達(dá)與宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展有密切關(guān)系，兩者呈正相關(guān)，其機(jī)制還有待進(jìn)一步驗(yàn)證。

晉升網(wǎng)簡(jiǎn)介

晉升網(wǎng)（004km.cnmun,2004,315(3):562-567.[9] Deveraux QL,Takahashi R,Salvesen GS,et al.X-linked IAP is a direct inhibitor of cell-death proteases[J].ature,1997,388(6639):300-304.申明：本論文版權(quán)歸原刊發(fā)雜志社所有，我們轉(zhuǎn)載的目的是用于

學(xué)術(shù)交流與討論，僅供參考不構(gòu)成任何學(xué)術(shù)建議。

第四篇：醫(yī)藥衛(wèi)生類之?huà)D產(chǎn)科論文 (22)

Livin，Survivin及HPV16/18在宮頸癌及癌前病變中的表達(dá)和相關(guān)性研究

作者：施錚錚，朱華，鄭飛云，胡燕，張虎祥，萬(wàn)麗

作者單位：溫州醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院，浙江 溫州 325000，1.婦產(chǎn)科；2.病理科

【摘要】

目的 ：研究宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN）和宮頸癌中凋亡抑制因子Livin，Survivin的表達(dá)及HPV16/18感染情況，探討它們?cè)趯m頸癌及癌前病變中的意義及相關(guān)性。方法:采用免疫組織化學(xué)SP法對(duì)81例宮頸癌、74例CIN、20例正常宮頸組織進(jìn)行Livin的檢測(cè)，應(yīng)用原位雜交法進(jìn)行Survivin及HPV16/18的檢測(cè)。結(jié)果：Livin，Survivin在正常宮頸組織中幾乎不表達(dá)，在CIN和宮頸癌中表達(dá)上調(diào)，并隨CIN級(jí)別和腫瘤臨床分期的升高、腫瘤分化程度的降低、伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移而上升（P＜0.05）；而與宮頸癌的病理類型、腫塊生長(zhǎng)類型無(wú)相關(guān)性（P＞0.05）。HPV16/18在正常宮頸組織、CIN 和宮頸癌中感染率逐漸升高（P＜0.05），但與CIN級(jí)別、宮頸癌的臨床分期、組織分化、病理類型、腫塊類型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無(wú)關(guān)（P＞0.05）。Survivin的表達(dá)與HPV16/18感染呈正相關(guān)；Livin的表達(dá)與Survivin呈正相關(guān)，但與HPV16/18感染不存在相關(guān)性。結(jié)論：Livin與Survivin的表達(dá)相似，在宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展中可能有協(xié)同促進(jìn)抗凋亡作用，并提示與腫瘤的惡性程度及不良預(yù)后有關(guān)；Survivin與HPV16/18對(duì)宮頸癌發(fā)生可能起協(xié)同作用。

【關(guān)鍵詞】

凋亡抑制因子 Livin Survivin HPV16/18 CIN 宮頸癌

Expression and correlative research of Livin，Survivin and HPV16/18 in cervical carcinoma and precancerous lesion SHI Zheng-zheng*，ZHU Hua，ZHENG Fei-yun，HU Yan，ZHANG Hu-xiang，WAN Li.*Department of Gynaecology and Obstetrics，the First Affiliated Hospital of Wenzhou Medical College，Wenzhou，325000

Abstract: Objective: To investigate the expression of Livin and Survivin which are apoptosis-profilin in CIN and cervical carcinoma，and detect the infection of HPV16/18，explore their clinical significance and correlatiuity in cervical carcinoma and its precancerous lesion.Methods: The expressions of Livin in 81 cases of cervical carcinoma，74 cases of CIN and 20 cases of normal cervix were examined with SP immunohistochemistry.The expressions of Survivin mRNA and HPV16/18 DNA were examined with in situ hybridization.Results: Livin and Survivin were seldom expressed in normal cervical tissue，and were overexpressed

significantly in CIN and cervical carcinoma tissue.The increased expression of Livin and and Survivin were related to the higher grades of CIN，and also related to the higher clinical stages，the lower histodifferentiation，and lymphnode metastasis in cervical carcinoma(P <0.05).They were not associated with pathological type and tumor growth type(P >0.05).The infection ratio of HPV16/18 was significantly higher in CIN and cervical carcinoma than that in normal cervical tissue，and there was a significant difference between the three(P <0.05).But it was not associated with the grade of CIN，clinical stage，histodifferentiation，pathological type，tumor growth type and lymphnode metastasis(P >0.05).There was a correlation between Survivin and HPV16/18 in cervical carcinoma.So was between Livin and Survivin.But there was no correlation between Livin and HPV16/18.Conclusion: The expression of Livin is similar to Survivin.The coexpression of them suggests to play mutual promoting roles in the occurrence and development of cervical carcinoma and imply malignant degree of tumor and patients’poor prognosis.Survivin may participate in the occurrence of cervical carcinoma in coordination with HPV16/18.Key words: apoptosis-profilin；Livin；Survivin；HPV16/18；CIN；cervical carcinoma

宮頸癌是女性最常見(jiàn)的生殖道惡性腫瘤。流行病學(xué)調(diào)查顯示，人乳頭狀瘤病毒（HPV）感染、細(xì)胞癌基因的激活、抑癌基因的失活和細(xì)胞凋亡的抑制，均參與了宮頸上皮內(nèi)瘤變（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）和宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展。近年研究發(fā)現(xiàn)，凋亡抑制蛋白（Inhibitors of apoptosis proteins，IAPs）家族在細(xì)胞凋亡的基因調(diào)控中發(fā)揮重要作用[1]。目前，IAPs家族已發(fā)現(xiàn)有8個(gè)成員，即NAIP，XIAP，cIAP-1，cIAP-2，生存素（Survivin），apollon，ILP-2和活素（Livin），其中Survivin與Livin作為家族的新成員，由于發(fā)現(xiàn)晚、作用強(qiáng)而日益成為人們關(guān)注的癌癥治療的靶點(diǎn)。我們采用免疫組織化學(xué)檢測(cè)宮頸癌及其癌前病變組織中Livin的表達(dá)情況，采用原位雜交法檢測(cè)Survivin的表達(dá)及HPV16/18的感染情況，探討它們?cè)贑IN及宮頸癌發(fā)生、發(fā)展中的意義及相關(guān)性。

材料和方法

1.1 材料

選取2006年1月至2008年3月間因CIN或?qū)m頸癌在我院診治患者的宮頸標(biāo)本155例，包括81例宮頸癌[患者年齡22～78歲，平均（49.16±12.35）歲]和74例CIN[患

者年齡19～71歲，平均（46.16±8.75）歲]，均經(jīng)病理學(xué)診斷證實(shí)。獲取標(biāo)本前患者均未接受放、化療及其他輔助治療，無(wú)合并其他內(nèi)外科疾病。CIN分級(jí)：I級(jí)13例，II級(jí)26例，III級(jí)35例。宮頸癌患者根據(jù)2000年再次修訂后的國(guó)際婦產(chǎn)科聯(lián)盟(FLGO)提出的分期標(biāo)準(zhǔn)[2]進(jìn)行臨床分期：Ia期9例，I b期17例，II a期33例，II b期12例，III期10例；按照癌組織分化程度分為：高分化14例，中分化29 例，低分化38例；按照腫瘤生長(zhǎng)類型分為：外生型39例，內(nèi)生型15例，潰瘍型16例，頸管型11例；按照病理類型分為宮頸鱗狀細(xì)胞癌70例，宮頸腺癌11例。81例宮頸癌患者中有54例行廣泛性子宮切除術(shù)＋盆腔淋巴結(jié)清掃術(shù)（包括I a期3例、I b期17例、II a期33例、II b期1例），術(shù)后病理報(bào)告有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者21例，未發(fā)現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者33例；余27例患者中I a期6例行全子宮切除術(shù)，II b期11例和III期10例均行放射治療。另取20例正常宮頸組織（包括宮頸良性病變）作對(duì)照，患者年齡28～65歲，平均（44.15±6.16）歲。三組年齡相比差異無(wú)顯著性（P＞0.05）。

1.2 試劑與方法

采用SP免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)Livin蛋白。一抗為兔抗人Livin多克隆抗體，購(gòu)自武漢博士德生物工程有限公司，工作濃度為1:50。將已知的乳腺癌切片作為陽(yáng)性對(duì)照，用磷酸鹽緩沖液代替一抗，作為陰性對(duì)照。采用原位雜交法檢測(cè)Survivin mRNA的表達(dá)及HPV16/18 DNA的感染情況，前者試劑盒購(gòu)自武漢博士德生物工程有限公司，后者試劑盒購(gòu)自福建泰普生物科學(xué)有限公司。以不加Survivin寡核苷酸探針或HPV16/18寡核苷酸探針只加預(yù)雜交液作為陰性對(duì)照。實(shí)驗(yàn)步驟均按試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.3 結(jié)果判定

采用Olympus光學(xué)顯微鏡，用半定量積分法判斷結(jié)果：光鏡下，Livin蛋白和Survivin mRNA 陽(yáng)性表現(xiàn)為細(xì)胞漿中出現(xiàn)淡黃色至棕黃色顆粒。隨機(jī)觀察10個(gè)高倍鏡視野，按每高倍鏡視野陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)百分比記分：陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)小于5%為0分，5%～25%為1分，26%～50%為2分，51%～75%為3分，大于75%為4分。按著色強(qiáng)度記分：未染色記為0分，染色呈淡黃色記為1分，染色呈黃色記為2分，染色呈棕黃色記為3分。兩種記分的乘積即為陽(yáng)性強(qiáng)度：0分為陰性(-)，1～4分為弱陽(yáng)性(+)，5～8分為中度陽(yáng)性(++)，9～12分為強(qiáng)陽(yáng)性(+++)。+～+++視為陽(yáng)性表達(dá)。HPV16/18 DNA陽(yáng)性細(xì)胞表現(xiàn)為細(xì)胞核中出現(xiàn)淺黃至棕色不等的顆粒。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法

三組研究對(duì)象年齡的比較采用單因素方差分析；相關(guān)因素中各陽(yáng)性表達(dá)率的比較采用x2檢驗(yàn)；兩者相關(guān)性研究采用Spearman等級(jí)相關(guān)分析。結(jié)果

2.1 CIN和宮頸癌組織中Livin，Survivin的表達(dá)

Livin蛋白、Survivin mRNA表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞呈局灶性或彌漫性分布，胞核呈淺藍(lán)色，背景清晰。兩者在正常宮頸組織中不表達(dá)，而在宮頸癌和CIN中的陽(yáng)性表達(dá)率均顯著高于正常宮頸組織(P＜0.01)，且在宮頸癌中的陽(yáng)性表達(dá)率高于CIN(P＜0.05)，CIN III級(jí)中兩者的陽(yáng)性表達(dá)率高于CIN I～I(xiàn)I級(jí)(P＜0.05)。見(jiàn)表

1、圖1～4。

2.2 Livin，Survivin表達(dá)與宮頸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系

Livin蛋白、Survivin mRNA陽(yáng)性表達(dá)與腫瘤臨床分期、分化程度、淋巴結(jié)有無(wú)轉(zhuǎn)移有關(guān)。隨著腫瘤臨床分期的升高和分化程度的降低，兩者表達(dá)陽(yáng)性率逐漸上升。而Livin蛋白、Survivin mRNA的表達(dá)與宮頸癌的病理類型、腫塊生長(zhǎng)類型無(wú)相關(guān)性。見(jiàn)表1。

2.3 HPV16/18在CIN和宮頸癌中的感染情況及與宮頸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系

HPV16/18在正常宮頸組織中的陽(yáng)性表達(dá)率為5%（1/20），明顯低于在CIN和宮頸癌中的表達(dá)（均P＜0.01），而在宮頸癌中的表達(dá)明顯高于CIN。不同CIN分級(jí)及宮頸癌的臨床分期、組織分化、病理類型、腫塊類型、淋巴結(jié)有無(wú)轉(zhuǎn)移之間HPV16/18表達(dá)無(wú)差異。見(jiàn)表

1、圖5～6。

2.4 三者在宮頸癌中的相關(guān)性分析

在宮頸癌組織中Livin蛋白與Survivin mRNA的表達(dá)呈正相關(guān)（rs=0.269，P＜0.05）；Survivin mRNA的表達(dá)與HPV16/18感染呈正相關(guān)（rs=0.279，P＜0.05）；Livin蛋白的表達(dá)與HPV16/18感染無(wú)相關(guān)性（rs=0.160，P＞0.05）。

討論

Livin基因是2000年最新發(fā)現(xiàn)的人類IAPs家族的一個(gè)新成員。Lin等[3]從人類胚腎cDNA文庫(kù)中克隆得到，將其稱為腎臟凋亡抑制蛋白；Kasof等[4]根據(jù)同源檢索發(fā)現(xiàn)該基因并將之命名為L(zhǎng)ivin；Vucic等[5]發(fā)現(xiàn)該基因在人黑色素瘤細(xì)胞中高表達(dá)，又稱之為黑色素瘤凋亡抑制蛋白。Survivin是IAPs家族中結(jié)構(gòu)最簡(jiǎn)單的蛋白分子，但它是迄今發(fā)現(xiàn)作用最強(qiáng)的凋亡抑制因子，是由Ambrosini等[6]等于1997年發(fā)現(xiàn)并克隆的，其結(jié)構(gòu)和功能研究已較為透徹。

Han-seong等[7]研究表明，在宮頸癌及其癌前病變中，Survivin mRNA表達(dá)上調(diào)，其表達(dá)陽(yáng)性率與宮頸癌的組織分級(jí)程度和臨床分期呈正相關(guān)，提示Survivin基因表達(dá)發(fā)生在宮頸

癌惡性轉(zhuǎn)化的早期，并且其可成為判斷宮頸癌預(yù)后的有價(jià)值指標(biāo)。Livin與宮頸癌的研究始于2001年，Kasof等[4]用含有Livin基因的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染人宮頸腺癌細(xì)胞系HeLa細(xì)胞并予以相應(yīng)的抗體檢測(cè)其表達(dá)產(chǎn)物，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞核及胞質(zhì)內(nèi)同時(shí)呈纖維絲樣染色。而對(duì)CIN和宮頸癌的臨床研究，國(guó)內(nèi)外鮮有報(bào)道。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，Livin與Survivin相似，在正常宮頸組織中兩者不表達(dá)，在CIN和宮頸癌組織中兩者的陽(yáng)性表達(dá)率逐漸升高，表明與宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展有一定作用；兩者在CIN III級(jí)的陽(yáng)性表達(dá)率高于CIN I～I(xiàn)I級(jí)，提示可能是宮頸癌前病變進(jìn)一步惡化的早期信號(hào)。宮頸癌臨床分期越晚、組織分化程度越低、存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，兩者的陽(yáng)性表達(dá)率則越高。在宮頸癌IIb～I(xiàn)II期中的表達(dá)率高于I～I(xiàn)Ia期，低分化癌中的表達(dá)率高于中高分化癌，盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組，表明Livin和Survivin的高表達(dá)能早期預(yù)測(cè)并反映宮頸癌的惡性侵襲和轉(zhuǎn)移能力，預(yù)示此類患者的不良預(yù)后，對(duì)臨床治療有指導(dǎo)意義。Livin和Survivin在多數(shù)腫瘤組織中均呈高表達(dá)，兩者可能存在相似性。兩者在腫瘤中共同表達(dá)的相關(guān)性僅見(jiàn)于胃癌、乳腺癌、腦膠質(zhì)瘤組織的相關(guān)研究[8-10]，未見(jiàn)兩者在宮頸癌中的相關(guān)性研究。本研究表明Livin和Survivin在宮頸癌中表達(dá)呈正相關(guān)，提示兩者均參與了CIN及宮頸癌發(fā)生、發(fā)展中的不同階段，具有協(xié)同促進(jìn)抗凋亡作用。

大量流行病學(xué)和生物學(xué)資料顯示，高危型HPV感染是誘發(fā)宮頸癌的重要原因。90%以上的宮頸癌組織攜帶高危型HPV DNA，主要為HPV16、HPV18等亞型，可導(dǎo)致CIN II、III級(jí)病變和宮頸癌的發(fā)生。本研究結(jié)果顯示，HPV16/18在正常宮頸組織、CIN和宮頸癌中感染率逐漸升高，但與CIN級(jí)別、宮頸癌臨床分期、組織分化、病理類型、腫塊類型、淋巴轉(zhuǎn)移無(wú)關(guān)，提示HPV16/18是宮頸癌致病的首要啟動(dòng)因子，并需與其他細(xì)胞因子、致癌基因共同作用。劉鳳英等[11]研究結(jié)果顯示，在宮頸癌組織中，HPV16E6 mRNA的表達(dá)水平與Survivin蛋白的陽(yáng)性表達(dá)呈顯著正相關(guān)，由此推測(cè)HPV可能直接或間接調(diào)節(jié)Survivin蛋白的表達(dá)和細(xì)胞分布，兩者對(duì)宮頸癌發(fā)生可能起著協(xié)同作用。本研究結(jié)果亦提示宮頸癌中Survivin mRNA的表達(dá)與HPV16/18感染呈正相關(guān)，由此推測(cè)前者可能通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡過(guò)程參與HPV介導(dǎo)的宮頸癌變過(guò)程。而Livin蛋白的表達(dá)與HPV16/18感染無(wú)相關(guān)性，其機(jī)制還有待進(jìn)一步驗(yàn)證。

晉升網(wǎng)簡(jiǎn)介

晉升網(wǎng)（004km.cnmun,2000,279(3):820-831.[4] Kasof GM,Gomes BC.Livin,a novel inhibitor of apoptosisprotein family member[J].J Biol Chem,2001,276(5):3238-3246.[5] Vucic D,Stennicke HR,Pisabarro MT,et al.ML-IAP,a novelinhibitor of apoptosisthat is preferentially expressed in hu-man melanomas [J].Curr Biol,2000,10(21):1359-1366.[6] Ambrosini G,Adida DC,Altieri DC.A novel anti-apoptosisgene,survivin,expressed in cancer and lymphoma[J].Nat Med,1997,3(8):917-921.[7] Han-seong K,Katsuya S,Suang-hye P.Expression of survivinin CIN and invasive squamoua cell carcinoma of uterinecervix[J].Anticancer Res, 2002,22(2A):805-808.[8] 魯祥石,劉彥龍,王滌,等.凋亡抑制蛋白 Livin和 Survivin在乳腺癌中的表達(dá)及意義[J].中國(guó)癌癥雜志,2007,17(7):542-545.[9] 王同杉,游思洪,葛紅梅,等.凋亡抑制蛋白livin 在人胃癌中的表達(dá)以及和survivin 表達(dá)的關(guān)系[J].南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2006,26(1):39-43.[10] 劉效鋒.Survivin、Livin在腦膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)及意義[J].數(shù)理醫(yī)藥學(xué)雜志,2008, 21(3):280-282.[11] 劉鳳英,徐曉明,劉毅智,等.子宮頸癌組織中人乳頭狀瘤病毒16E6mRNA表達(dá)與survivin蛋白表達(dá)的相關(guān)性[J].中華婦產(chǎn)科雜志,2005,40(9):627-630.申明：本論文版權(quán)歸原刊發(fā)雜志社所有，我們轉(zhuǎn)載的目的是用于

學(xué)術(shù)交流與討論，僅供參考不構(gòu)成任何學(xué)術(shù)建議。

第五篇：醫(yī)藥衛(wèi)生類之?huà)D產(chǎn)科論文 (20)

232例陰道分泌物細(xì)菌培養(yǎng)及耐藥性分析

作者：余甜女，黃萃，陳曉方

作者單位：(1.麗水學(xué)院醫(yī)學(xué)院 藥理教研組，浙江 麗水 323000;2.麗水市中心醫(yī)院 檢驗(yàn)科;3.麗水市中心醫(yī)院 婦產(chǎn)科)

【摘要】

目的 ：分析陰道分泌物培養(yǎng)中病原菌分布與耐藥情況，為臨床合理選擇抗生素治療陰道炎癥提供依據(jù)。方法：對(duì)2008年1月至2008年12月，麗水市中心醫(yī)院婦科門診送檢232例陰道分泌物進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)和藥敏試驗(yàn)，并對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析。結(jié)果：232例陰道分泌物中共檢出病原菌194株，其中假絲酵母菌39株，革蘭陽(yáng)性菌85株，革蘭陰性菌70株。假絲酵母菌對(duì)臨床抗真菌藥物耐藥率低，葡萄球菌對(duì)多種抗生素高耐藥及多重耐藥，腸球菌對(duì)四環(huán)素、林可霉素、慶大霉素有較高耐藥率，超廣譜β-內(nèi)酰胺酶陽(yáng)性的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對(duì)頭孢菌素、左氧氟沙星、復(fù)方新諾明、氨曲南耐藥率為100%。結(jié)論：陰道分泌物中病原菌種類較多，病原菌檢查和藥敏試驗(yàn)對(duì)臨床診斷和治療具有重要作用。

【關(guān)鍵詞】

陰道分泌物;病原菌;耐藥性

陰道炎癥是婦科最常見(jiàn)疾病，各年齡組均可發(fā)病[1]。為了解陰道炎癥中病原菌的分布與耐藥情況，給臨床合理選擇抗生素，提高療效，減低耐藥菌株的產(chǎn)生提供依據(jù)，我們對(duì)2008年1月至2008年12月，麗水市中心醫(yī)院婦科門診送檢的232例陰道分泌物標(biāo)本進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)和藥敏試驗(yàn)，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

材料和方法

1.1 一般資料 標(biāo)本來(lái)自2008年1月至2008年12月麗水市中心醫(yī)院婦科門診送檢的232例陰道分泌物?；颊吣挲g17～83歲，平均(39±14.8)歲，臨床癥狀均表現(xiàn)為陰道分泌物增多或呈膿性，外陰瘙癢。

1.2 儀器和試劑 VITEK2-compact細(xì)菌鑒定儀：法國(guó)生物梅里埃公司;藥敏紙片、藥敏M-H培養(yǎng)基購(gòu)自英國(guó)Oxoid公司。質(zhì)量控制菌株金黃色葡萄球菌ATCC25 923，大腸ATCC25 922。

1.3 取材 患者取膀胱截石位，已婚者用未涂抹潤(rùn)滑劑的無(wú)菌窺陰器擴(kuò)開(kāi)陰道，無(wú)菌棉簽涂取陰道后穹窿處分泌物;未婚者用無(wú)菌生理鹽水消毒外陰后，無(wú)菌長(zhǎng)棉簽深入陰道取材，標(biāo)本立即置入無(wú)菌培養(yǎng)試管中送檢。

1.4 細(xì)菌分離鑒定 采取標(biāo)本后立即送微生物實(shí)驗(yàn)室細(xì)菌培養(yǎng)，經(jīng)37 ℃孵育24 h，培養(yǎng)

到菌落，利用VITEK2-compact細(xì)菌鑒定儀對(duì)分離的細(xì)菌進(jìn)行鑒定。

1.5 藥物敏感試驗(yàn) 配置分離細(xì)菌0.5麥?zhǔn)蠞岫鹊木鷳乙?，無(wú)菌棉簽浸取菌懸液均勻涂布于M-H瓊脂平板，置室溫3～5 min。用無(wú)菌鑷子將藥敏紙片貼于平板表面，然后置35 ℃孵育18～24 h后量取抑菌環(huán)直徑。

結(jié)果

2.1 病原菌分離情況 232例標(biāo)本中，177例共分離出病原菌194株，其中假絲酵母菌39株(白色假絲酵母菌36例，光滑假絲酵母菌2例，葡萄牙假絲酵母菌1例)，革蘭陽(yáng)性菌85株，革蘭陰性菌70株，見(jiàn)表1。有13例2種菌株混合感染，2例3種菌株混合感染，其中5例白色假絲酵母菌合并其他細(xì)菌感染，大腸埃希菌合并糞腸球菌感染4例，混合感染病例中有14例就診前有抗生素使用史。

2.2 細(xì)菌耐藥率 假絲酵母菌對(duì)制霉菌素、克霉唑、氟康唑、伊曲康唑的耐藥率分別為0%、5.1%、7.7%和7.7%，對(duì)制霉菌素的中介率為5.1%，對(duì)氟康唑和兩性霉素B 100%敏感。葡萄球菌屬、糞腸球菌、大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌的耐藥率見(jiàn)表2。所檢葡萄球菌中，β-內(nèi)酰胺酶陽(yáng)性者39例，耐甲氧西林的葡萄球菌22例。超廣譜β-內(nèi)酰胺酶陽(yáng)性者大腸埃希菌6株，肺炎克雷伯菌1株。

討論

從本組陰道分泌物細(xì)菌培養(yǎng)的結(jié)果來(lái)看，232例標(biāo)本中177例培養(yǎng)出致病菌197株，培養(yǎng)的陽(yáng)性率達(dá)76.3%。革蘭氏陽(yáng)性菌中白色假絲酵母菌的感染率最高，其次是表皮葡萄球菌和糞腸球菌，革蘭氏陰性菌以大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌為主，說(shuō)明陰道炎癥中病原菌種類較多。

外陰陰道假絲酵母菌病為常見(jiàn)的婦科疾病，易復(fù)發(fā)，約75%生育年齡的婦女至少有一次發(fā)病[2]。部分婦女因經(jīng)常發(fā)作，且久治不愈，對(duì)其身心健康造成很大影響。本結(jié)果顯示，婦女感染的假絲酵母菌對(duì)制霉菌素、克霉唑、酮康唑、兩性霉素B、氟康唑、伊曲康唑的耐藥率均在10%以下，故臨床可在以上藥物中選用相對(duì)價(jià)廉、使用方便、副作用小者進(jìn)行治療。

葡萄球菌中β-內(nèi)酰胺酶陽(yáng)性及耐甲氧西林的葡萄球菌各占76.5%、43.1%，對(duì)多種抗生素高耐藥及多重耐藥，而對(duì)利福平有88.2%敏感，對(duì)萬(wàn)古霉素、替考拉寧100%敏感。說(shuō)明

臨床常用抗生素治療效果差，糖肽類抗生素應(yīng)為首選。

不同標(biāo)本來(lái)源的糞腸球菌對(duì)常用抗生素的耐藥率明顯不同。即使近年來(lái)臨床應(yīng)用較少，各類標(biāo)本中分離的腸球菌對(duì)四環(huán)素耐藥率仍然高達(dá)70%[3]，與本組研究中的87.5%相符合。糞腸球菌對(duì)左氧氟沙星、青霉素、氨芐西林耐藥率不超過(guò)12.5%，對(duì)萬(wàn)古霉素、替考拉寧耐藥率為0%。所以對(duì)一般的腸球菌感染選用左氧氟沙星、青霉素或氨芐青霉素治療，耐藥菌株可選用萬(wàn)古霉素或替考拉寧。

本研究顯示，陰道炎癥中感染的革蘭陰性菌主要為大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌。其中超廣譜β-內(nèi)酰胺酶陽(yáng)性的大腸埃希菌占15.8%，低于國(guó)內(nèi)20%～40%的發(fā)生率[4]。產(chǎn)酶菌株對(duì)左氧氟沙星、復(fù)方新諾明、氨曲南及多數(shù)頭孢菌素的耐藥率達(dá)100%，所有菌株對(duì)氨芐西林高耐藥，對(duì)亞胺培南、頭孢西丁、哌拉西林/舒巴坦耐藥率為0%。大腸埃希菌對(duì)左氧氟沙星的耐藥率為34.2%，低于刁蔚欣[5]報(bào)道的71.6%。以上結(jié)果考慮與本地區(qū)抗生素使用程度有關(guān)，另外，在麗水市中心醫(yī)院，臨床抗生素使用有嚴(yán)格的管理制度，并定期檢查監(jiān)督醫(yī)生執(zhí)行情況，一定程度上減少了耐藥菌株的產(chǎn)生。

因此，對(duì)于陰道炎癥患者，有必要進(jìn)行陰道分泌物的細(xì)菌培養(yǎng)和藥敏試驗(yàn)，合理選用抗生素進(jìn)行治療。臨床抗生素的使用亦需嚴(yán)格管理，避免無(wú)目的性用藥，減少耐藥菌株產(chǎn)生。

晉升網(wǎng)簡(jiǎn)介

晉升網(wǎng)（004km.cnmittee for Clinical Laboratory Standards.Performance Standards for Antimicrobial

SusceptibilityTesting,Fourteentsh

Informational Supplement[S].NCCLSdocument,2004,M100-S14.[5]刁蔚欣,葉曉光.大腸埃希菌耐藥譜六年動(dòng)態(tài)觀察和分析[J].國(guó)際醫(yī)藥衛(wèi)生導(dǎo)報(bào),2008,14(17):66-68.申明：本論文版權(quán)歸原刊發(fā)雜志社所有，我們轉(zhuǎn)載的目的是用于

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