第一篇:第五章 微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基習(xí)題整理(最終版)
第五章 微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基
一、選擇題
1.大多數(shù)微生物的營(yíng)養(yǎng)類型屬于:()
A.光能自養(yǎng)
B.光能異養(yǎng)
C.化能自養(yǎng)
D.化能異養(yǎng) 2.藍(lán)細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)類型屬于:()
A.光能自養(yǎng)
B.光能異養(yǎng)
C.化能自養(yǎng)
D.化能異養(yǎng) 3.碳素營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的主要功能是:()
A.構(gòu)成細(xì)胞物質(zhì)
B.提供能量
C.A,B 兩者 4.占微生物細(xì)胞總重量70%-90% 以上的細(xì)胞組分是:()
A.碳素物質(zhì)
B.氮素物質(zhì)
C.水 5.能用分子氮作氮源的微生物有:()
A.酵母菌
B.藍(lán)細(xì)菌
C.蘇云金桿菌 6.大腸桿菌屬于()型的微生物。
A.光能無(wú)機(jī)自養(yǎng)
B.光能有機(jī)異養(yǎng)
C.化能無(wú)機(jī)自養(yǎng)
D.化能有機(jī)異養(yǎng) 7.自養(yǎng)型微生物和異養(yǎng)型微生物的主要差別是:()
A.所需能源物質(zhì)不同
B.所需碳源不同
C.所需氮源不同 8.基團(tuán)轉(zhuǎn)位和主動(dòng)運(yùn)輸?shù)闹饕顒e是:()
A.運(yùn)輸中需要各種載體參與
B.需要消耗能量
C.改變了被運(yùn)輸物質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu) 9.單純擴(kuò)散和促進(jìn)擴(kuò)散的主要區(qū)別是:()
A.物質(zhì)運(yùn)輸?shù)臐舛忍荻炔煌?/p>
B.前者不需能量,后者需要能量
C.前者不需要載體,后者需要載體
10.微生物生長(zhǎng)所需要的生長(zhǎng)因子(生長(zhǎng)因素)是:()
A.微量元素
B.氨基酸和堿基
C.維生素
D.B,C二者 11.培養(yǎng)基中使用酵母膏主要為微生物提供:()
A.生長(zhǎng)因素
B.C 源
C.N 源 12.細(xì)菌中存在的一種主要運(yùn)輸方式為:()
A.單純擴(kuò)散
B.促進(jìn)擴(kuò)散
C.主動(dòng)運(yùn)輸
D.基團(tuán)轉(zhuǎn)位 13.微生物細(xì)胞中的C素含量大約占細(xì)胞干重的:()
A.10%
B.30%
C.50%
D.70% 14.用牛肉膏作培養(yǎng)基能為微生物提供:()
A.C 源
B.N 源
C.生長(zhǎng)因素
D.A,B,C 都提供 15.下列物質(zhì)可用作生長(zhǎng)因子的是()。A.葡萄糖
B.纖維素
C.NaCl
D.葉酸 16.藍(lán)細(xì)菌和藻類屬于()型的微生物。
A.光能無(wú)機(jī)自養(yǎng)
B.光能有機(jī)異養(yǎng)
C.化能無(wú)機(jī)自養(yǎng)
D.化能有機(jī)異養(yǎng) 17.某種細(xì)菌可利用無(wú)機(jī)物為電子供體而以有機(jī)物為碳源屬于()型的微生物。A.兼養(yǎng)型
B.異養(yǎng)型
C.自養(yǎng)型
D.原養(yǎng)型
18.實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)細(xì)菌常用的培養(yǎng)基是(),培養(yǎng)放線菌的是(),培養(yǎng)真菌的是(A.牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基
B.馬鈴薯培養(yǎng)基
C.高氏一號(hào)培養(yǎng)基
D.查氏培養(yǎng)基
19.培養(yǎng)百日咳德氏菌的培養(yǎng)基中含有血液,這種培養(yǎng)基是()。A.基礎(chǔ)培養(yǎng)基
B.加富培養(yǎng)基
C.選擇培養(yǎng)基
D.鑒別培養(yǎng)基 20.下列培養(yǎng)基()是合成培養(yǎng)基
A.LB培養(yǎng)基
B.牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基
C.麥芽汁培養(yǎng)基 D.查氏培養(yǎng)基 21.用來(lái)分離固氮菌的培養(yǎng)基中缺乏氮源,這種培養(yǎng)基是一種()。A.基礎(chǔ)培養(yǎng)基
B.加富培養(yǎng)基
C.選擇培養(yǎng)基
D.鑒別培養(yǎng)基 22.水分子可以通過(guò)()進(jìn)入細(xì)胞。
A.主動(dòng)運(yùn)輸
B.擴(kuò)散
C.促進(jìn)擴(kuò)散
D.基團(tuán)轉(zhuǎn)位 23.需要載體但不能逆濃度運(yùn)輸?shù)氖牵ǎ?/p>
A.主動(dòng)運(yùn)輸
B.擴(kuò)散
C.促進(jìn)擴(kuò)散
D.基團(tuán)轉(zhuǎn)位 24.實(shí)驗(yàn)室常用的培養(yǎng)細(xì)菌的培養(yǎng)基是()
A牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 B.馬鈴薯培養(yǎng)基
C.高氏一號(hào)培養(yǎng)基
D.麥芽汁培養(yǎng)基 25.下列物質(zhì)屬于生長(zhǎng)因子的是()
A.葡萄糖
B.蛋白胨
C.NaCl
D.維生素
26.培養(yǎng)料進(jìn)入細(xì)胞的方式中運(yùn)送前后物質(zhì)結(jié)構(gòu)發(fā)生變化的是()A.主動(dòng)運(yùn)輸
B.被動(dòng)運(yùn)輸
C.促進(jìn)擴(kuò)散
D.基團(tuán)移位 27.E.coli屬于()型的微生物。
A.光能自養(yǎng).B.光能異養(yǎng)
C.化能自養(yǎng)
D.化能異養(yǎng) 28.實(shí)驗(yàn)室常用的培養(yǎng)放線菌的培養(yǎng)基是())。A 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 B.馬鈴薯培養(yǎng)基
C.高氏一號(hào)培養(yǎng)基
D.麥芽汁培養(yǎng)基 29.酵母菌適宜的生長(zhǎng)PH值為()A.5.0-6.0 B.3.0-4.0 C.8.0-9.0 D.7.0-7.5 30.細(xì)菌適宜的生長(zhǎng)PH值為()A 5.0-6.0 B.3.0-4.0 C.8.0-9.0 D.7.0-7.5 31.藍(lán)細(xì)菌屬于()型的微生物。
A.光能自養(yǎng)
B.光能異養(yǎng)
C.化能自養(yǎng)
D.化能異養(yǎng) 32.硝化細(xì)菌屬于()型的微生物。
A.光能自養(yǎng)
B.光能異養(yǎng)
C.化能自養(yǎng)
D.化能異養(yǎng) 33.培養(yǎng)硝化細(xì)菌的碳源、氮源、能源依次是()A.葡萄糖、氨、葡萄糖
B.葡萄糖、銨鹽、太陽(yáng)能 C.二氧化碳、硝酸鹽、氨
D.二氧化碳、氨、太陽(yáng)能 34.藍(lán)藻常利用的碳源、氮源依次為()A.CO2、氨基酸
B.氨基酸、葡萄糖 C.CO2、硝酸鹽
D.葡萄糖、蛋白胨
35.微生物需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)中需要量最大的是()A.碳源
B.氮源
C.生長(zhǎng)因子
D.無(wú)機(jī)鹽 36.下列有關(guān)碳源的敘述,不正確的是()
A.碳源主要用于構(gòu)成微生物的細(xì)胞物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物 B.某些碳源可以作為微生物的主要能源物質(zhì)
C.蛋白質(zhì)一定不能作碳源
D.不同種類的微生物的碳源可能不同 37.下列關(guān)于生長(zhǎng)因子的敘述不正確的是()
A.生長(zhǎng)因子是指微生物生長(zhǎng)不可缺少的微量有機(jī)物
B.一般是酶、核酸的組成部分 C.自身不能合成,必須由外界補(bǔ)充
D.主要包括維生素、氨基酸和堿基等 38.大腸桿菌屬于()型的微生物。
A.光能無(wú)機(jī)自養(yǎng)
B.光能有機(jī)異養(yǎng)
C.化能無(wú)機(jī)自養(yǎng) D.化能有機(jī)異養(yǎng) 39.硝化細(xì)菌屬于()型的微生物。
A.光能無(wú)機(jī)自養(yǎng)
B.光能有機(jī)異養(yǎng)
C.化能無(wú)機(jī)自養(yǎng) D.化能有機(jī)異養(yǎng) 40.某種細(xì)菌可利用無(wú)機(jī)物為電子供體而有賈稀為碳源,屬于()型的微生物。A.兼養(yǎng)型
B.異養(yǎng)型
C.自養(yǎng)型
D.原養(yǎng)型
41、化能無(wú)機(jī)自養(yǎng)微生物可利用()為電子供體。A.CO2
B.H2
C.O2
D.H2O 42.用來(lái)分離產(chǎn)胞外蛋白酶菌株的酪素培養(yǎng)基是一種()。A.基礎(chǔ)培養(yǎng)基
B.加富培養(yǎng)基
C.選擇培養(yǎng)基
D.鑒別培養(yǎng)基 43.固體培養(yǎng)基中瓊脂含量一般為()。A.0.5%
B.1.5%
C.2.5%
D.5% 44.用來(lái)分離固氮菌的培養(yǎng)基中缺乏氮源,這種培養(yǎng)基是一種()。A.基礎(chǔ)培養(yǎng)基
B.加富培養(yǎng)基
C.選擇培養(yǎng)基
D.鑒別培養(yǎng)基 45.水分子可通過(guò)()進(jìn)入細(xì)胞。
A.主動(dòng)運(yùn)輸
B.擴(kuò)散
C.促進(jìn)擴(kuò)散
D.基團(tuán)轉(zhuǎn)位 46.被運(yùn)輸物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞前后物質(zhì)結(jié)構(gòu)發(fā)生變化的是()。A.主動(dòng)運(yùn)輸
B.擴(kuò)散
C.促進(jìn)擴(kuò)散
D.基團(tuán)轉(zhuǎn)位 47.以下碳源中,微生物優(yōu)先利用的是()
A.葡萄糖
B.蔗糖
C.淀粉
D.纖維素
二、是非題
1.最常用的固體培養(yǎng)基的凝固劑是瓊脂。()
2.大多數(shù)微生物可以合成自身所需的生長(zhǎng)因子,不必從外界攝取。()3.培養(yǎng)基按其制成后的物理狀態(tài)可分固體.液體和半固體培養(yǎng)基。()4.碳源對(duì)微生物的主要作用是構(gòu)成細(xì)胞骨架和提供能源。()
5.實(shí)驗(yàn)室做固體培養(yǎng)基時(shí);常加1-2%的瓊脂作凝固劑;做半固體培養(yǎng)基時(shí),瓊脂加入量通常是0.5%。()
6.促進(jìn)擴(kuò)散必須借助于特異載體蛋白和能量。()
7.營(yíng)養(yǎng)物跨膜的主動(dòng)運(yùn)輸必需依靠載體和能量,而被動(dòng)擴(kuò)散不需要載體和能量。()8.微生物的碳源物質(zhì)既提供碳素營(yíng)養(yǎng),又提供微生物代謝能量。()9.微生物可以合成自身所需的生長(zhǎng)因子,不必從外界攝取。()
10.對(duì)含葡萄糖的培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌時(shí)可在121.3℃加熱20min即可。()11.半固體培養(yǎng)基常用來(lái)觀察微生物的運(yùn)動(dòng)特征。()
12.在用于分離G+細(xì)菌的選擇培養(yǎng)基中可加入結(jié)晶紫抑制G-細(xì)菌的生長(zhǎng)。()13.培養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)缺陷型微生物的培養(yǎng)基必須同時(shí)加入維生素、氨基酸、嘌呤及嘧啶。()14.為使微生物生長(zhǎng)旺盛,培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度越高越好。()15.伊紅美藍(lán)(EMB)培養(yǎng)基中,伊紅美藍(lán)的作用是促進(jìn)大腸桿菌的生長(zhǎng)。()16.在固體培養(yǎng)基中,瓊脂的濃度一般為0.5—1.0%.()
17.主動(dòng)運(yùn)輸是廣泛存在于微生物中的一種主要的物質(zhì)運(yùn)輸方式。()18.光能自養(yǎng)菌和化能自養(yǎng)菌都利用二氧化碳作碳源合成細(xì)胞有機(jī)物。()
19.基團(tuán)轉(zhuǎn)位運(yùn)輸方式中, 除了在運(yùn)輸過(guò)程中物質(zhì)發(fā)生化學(xué)變化這一特點(diǎn)外, 其它特征均與主動(dòng)運(yùn)輸方式相同。()
20.單純擴(kuò)散不能進(jìn)行逆濃度運(yùn)輸, 而促進(jìn)擴(kuò)散則能進(jìn)行逆濃度運(yùn)輸。()
三、填空題
1.實(shí)驗(yàn)室常用的有機(jī)氮源有____________和____________等, 培養(yǎng)基按其制成后的物理狀態(tài)可分為_(kāi)___________、____________和____________。
2.在營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)運(yùn)輸中需要載體參加的運(yùn)輸方式是__________、__________和__________,其中乳糖通過(guò)__________ 方式運(yùn)輸,3.光能異養(yǎng)菌以__________作能源,以__________為碳源,以__________作供H體將__________合成細(xì)胞有機(jī)物。
4.化能自養(yǎng)菌以__________取得能量,以__________作碳源合成細(xì)胞有機(jī)物。
5.根據(jù)微生物生長(zhǎng)所需要的碳源和能源的不同,可把微生物分為_(kāi)_______、______、______、_______ 四種營(yíng)養(yǎng)類型。
6.在營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的四種運(yùn)輸方式中,只有__________運(yùn)輸方式改變了被運(yùn)輸物質(zhì)的化學(xué)組成。7.微生物所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括__________、__________、_________、__________和另一種不可缺少的物質(zhì)__________。
8.化能自養(yǎng)型和化能異養(yǎng)型微生物,生長(zhǎng)所需的能量前者來(lái)自于__________的氧化放能、而后者則來(lái)自于__________的氧化放能,生長(zhǎng)所需的碳源前者以__________為主,后者則以__________為主要來(lái)源。
9.主動(dòng)運(yùn)輸運(yùn)送營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的方式主要存在于好氧細(xì)菌中,它能將________、_________、___________運(yùn)進(jìn)微生物細(xì)胞。
10.在營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)運(yùn)輸中,能逆濃度梯度方向進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)物運(yùn)輸?shù)倪\(yùn)輸方式是__________、__________。
11.在營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)運(yùn)輸中既消耗能量又需要載體的運(yùn)輸方式是____________________。12.光能自養(yǎng)型和光能異養(yǎng)型微生物的共同點(diǎn)是都能利用__________;不同點(diǎn)在于前者能以__________作唯一碳源或主要碳源,而后者則以__________作主要碳源,前者以__________作供氫體而后者則以__________作供氫體。
13.生長(zhǎng)因子主要包括__________、__________和__________,其主要作用是____________________、____________________。
14.根據(jù)__________,微生物可分為自養(yǎng)型和異養(yǎng)型;根據(jù)__________,微生物可分為光能營(yíng)養(yǎng)型和化能營(yíng)養(yǎng)型;根據(jù)__________,微生物可分為無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)型和有機(jī)營(yíng)養(yǎng)型。15.在營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)運(yùn)輸中, 能逆濃度梯度方向進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)物運(yùn)輸?shù)倪\(yùn)輸方式是 __________, __________。
16.在營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)運(yùn)輸中順濃度梯度方向運(yùn)輸營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入微生物細(xì)胞的運(yùn)輸方式是 __________ 和 __________。
17.根據(jù)碳源、能源和電子供體性質(zhì)的不同,微生物的營(yíng)養(yǎng)類型可分為_(kāi)_________、__________、__________ 和__________。
18.按用途劃分,培養(yǎng)基可分為_(kāi)_________、___
_______、__________和____ ______等4種類型。
19.常用的培養(yǎng)基凝固劑有__________、__________和__________。
20.11.實(shí)驗(yàn)室常用的有機(jī)氮源有__________ 和__ __等,無(wú)機(jī)氮源有__ __和__________ 等;為節(jié)約成本,工廠中常用___ __等作為有機(jī)氮源。21.在營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)運(yùn)輸中既消耗能量又需要載體的運(yùn)輸方式是__________, __________。22.微生物的營(yíng)養(yǎng)類型, 根據(jù)其所需C素營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同, 分為 __________ 和 _________; 根據(jù)其生長(zhǎng)所需的能量來(lái)源不同分為 __________ 和 __________。23.化能自養(yǎng)型和化能異養(yǎng)型微生物, 生長(zhǎng)所需的能量前者來(lái)自于 __________ 的氧化放能, 而后者則來(lái)自于 __________ 的氧化放能; 生長(zhǎng)所需的碳源前者以 __________ 為主, 后者則以 __________ 為主要來(lái)源。
四、解釋題
1.碳氮比; 2.光能自養(yǎng)型; 3.化能自養(yǎng)型; 4.化能異養(yǎng)型; 5.水活度; 6.培養(yǎng)基; 7.生長(zhǎng)因子; 8.單純擴(kuò)散; 9.主動(dòng)運(yùn)輸; 10.天然培養(yǎng)基 11.基團(tuán)移位; 12.選擇培養(yǎng)基; 13.基礎(chǔ)培養(yǎng)基; 14.合成培養(yǎng)基;
五、簡(jiǎn)答題
1.微生物需要哪些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),它們各有什么主要生理功能? 2.試述劃分微生物營(yíng)養(yǎng)類型的依據(jù),并各舉一例微生物說(shuō)明之。3.試比較營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入微生物細(xì)胞的幾種方式的基本特點(diǎn)。
4.舉例說(shuō)明微生物在生長(zhǎng)過(guò)程中培養(yǎng)基pH值可能發(fā)生的變化,并提出解決方法。5.簡(jiǎn)述固體培養(yǎng)基的配制和滅菌方法。
6.以EMB(伊紅美藍(lán)乳糖瓊脂培養(yǎng)基)為例,分析鑒別培養(yǎng)基的作用原理。
7.列表比較微生物的四大營(yíng)養(yǎng)類型。8.配制培養(yǎng)基的原則和方法是什么? 9.四種物質(zhì)運(yùn)輸方式的比較
10.何謂培養(yǎng)基?培養(yǎng)基有哪些類型?
第二篇:微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基制作個(gè)人總結(jié)
一.培養(yǎng)基的制備
儀器材料 微波爐、高壓滅菌器、玻璃器皿、三角瓶,PH試紙、牛肉膏、蛋白胨、瓊脂、氯化鈉、氫氧化鈉。操作方法
1. 肉湯培養(yǎng)基制作 ⑴成分
肉浸膏(0.3%牛肉膏)500ml 蛋白胨 5g 氯化鈉 2.5g 磷酸氫二鉀 0.5g ⑵準(zhǔn)備工作 配制調(diào)節(jié)PH用的0.1M氫氧化鈉和1M氫氧化鈉溶液。⑶操作
①稱取牛肉膏,放入玻璃皿中,另入適量蒸餾水配成0.3%。②按比例加入適量蛋白胨、氯化鈉、磷酸氫二鉀攪拌。③攪拌加熱至完全溶解。
④PH值調(diào)至7.8,煮沸10min,站足水分。
⑤待冷至40~50℃時(shí),過(guò)濾。濾液分裝于無(wú)菌試管內(nèi)(達(dá)試管的1/3)或每管加4-5ml。塞好棉塞。
⑥置高壓滅菌器內(nèi)高壓滅菌(121.3℃,20分鐘即可)2.普通瓊脂培養(yǎng)基制作
⑴成分 肉湯培養(yǎng)基 500ml 瓊脂 8-15g ⑵制法
①先矯正肉湯培養(yǎng)基PH值。
②加入適量瓊脂煮沸溶解,矯正PH值至7.4~7.6。③滅菌后使雜質(zhì)沉淀。
④取其上清液滅菌后分裝。倒入無(wú)菌平皿內(nèi)凝固即成普通瓊脂平板。
二、平板劃線接種法 【方法】
1. 在平板底面上用記號(hào)筆作好標(biāo)記,如菌種、班級(jí),姓名、接種日期等,并在平板底面邊緣作一原劃線標(biāo)記。
2.右手拿接種環(huán),燒灼滅菌并冷卻后,取混合菌液少許。3.左手斜持(45°角)瓊脂平板,略開(kāi)蓋,平板在乙醇燈火焰左前上方約5~6cm距離。右手持已取標(biāo)本的接種環(huán)在瓊脂平板表面之一側(cè)邊緣,作原劃線,見(jiàn)圖5-2A。
4.接種環(huán)燒灼滅菌,冷卻后自原劃線末端沾取少許標(biāo)本,使接種環(huán)與平板表面成30~40°角,運(yùn)用腕力將接種環(huán)在平板上來(lái)回劃線,見(jiàn)圖5-2B。劃線要密但不能重疊,充分利用平板的表面積,不要?jiǎng)澠骗傊砻?,并注意無(wú)菌技術(shù),避免空氣中細(xì)菌的污染。也可用分區(qū)劃線法,即從原劃線末端沾取標(biāo)本后只劃平板的1/5~1/4,劃畢燒灼滅菌接種環(huán),冷后同樣劃線,共計(jì)4~5次。接種環(huán)燒灼滅菌后方可放下(圖5-2C、D、E)。
三.細(xì)菌在培養(yǎng)基中生長(zhǎng)特性的觀察 1.瓊脂培養(yǎng)基 ⑴大小
⑵形狀:圓形、不整形、針尖狀、露滴狀、同心圓狀、顆粒狀。⑶邊緣:整齊、波浪狀、鋸齒狀、卷發(fā)狀。
⑷表面性狀:光滑、粗糙、同心圓狀、放射狀、皺狀、顆粒狀。⑸濕潤(rùn)度:濕潤(rùn)、干燥。
⑹隆起度:表面隆起、輕度隆起、中央隆起、扣狀扁平。
⑺色澤及透明度:無(wú)色、白色、黃色、橙色、紅色;透明、半透明、不透明。⑻質(zhì)地:堅(jiān)硬、柔軟、粘稠。
⑼溶血性:α型溶血 菌落周圍有透明溶血環(huán)。
β型溶血 半透明帶綠色溶血環(huán)。
γ型溶血 不溶血。
藥物敏感試驗(yàn)
基本原理
細(xì)菌對(duì)抗菌藥物的敏感試驗(yàn),通常簡(jiǎn)稱為細(xì)菌的藥敏試驗(yàn)。在給患傳染病動(dòng)物進(jìn)行治療時(shí),測(cè)定細(xì)菌對(duì)藥物的敏感性,不僅有助于選擇合適的藥物,而且可為藥物的用量提供依據(jù)。某種細(xì)菌對(duì)藥物的敏感度,是指抑制該細(xì)菌生長(zhǎng)所需的最低藥物濃度。細(xì)菌在體外的敏感度和臨床的療效大體是符合的,但也有不一致者。目前供藥敏試驗(yàn)的方法很多,可歸納為兩大類,即稀釋法和擴(kuò)散法。有的以抑制細(xì)菌生長(zhǎng)為評(píng)定結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn),有的則以殺滅細(xì)菌為標(biāo)準(zhǔn)。一般可報(bào)告為某菌對(duì)某抗菌藥物敏感、輕度敏感或耐藥。
稀釋法是將抗菌藥物稀釋為不同的濃度,作用于被檢菌株,定量測(cè)定藥物對(duì)細(xì)菌的最低抑菌濃度(minimal inhibition concentration, MIC)或最低殺菌濃度(minimal bacteriocidal concentration, MBC),可在液體培養(yǎng)基或固體培養(yǎng)基中進(jìn)行。
擴(kuò)散法(diffusion method)是將抗菌藥物置于已接種待測(cè)細(xì)菌的固體培養(yǎng)基上(或內(nèi)),抗菌藥物通過(guò)向培養(yǎng)基內(nèi)的擴(kuò)散,抑制敏感菌的生長(zhǎng),從而出現(xiàn)抑菌環(huán)(帶)。藥物擴(kuò)散的距離越遠(yuǎn),達(dá)到該距離的藥物濃度就越低,故可根據(jù)抑菌環(huán)的大小,判斷細(xì)菌對(duì)藥物的敏感度。抑菌環(huán)(帶)邊緣的藥物含量即該藥物的敏感度。此法操作簡(jiǎn)便,容易掌握,但只用于定性。因受紙片含藥量不均及接種量等多種因素影響,結(jié)果不夠準(zhǔn)確,因此試驗(yàn)時(shí)應(yīng)同時(shí)設(shè)立已知敏感度的標(biāo)準(zhǔn)菌株作為對(duì)照。
器材準(zhǔn)備
1.菌種 大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、炭疽桿菌。
2.藥敏試紙 含青霉素、鏈霉素、慶大霉素、氯霉素、磺胺嘧啶等藥敏試紙,分裝于滅菌平皿中。
3.培養(yǎng)基 普通肉湯、普通瓊脂平板培養(yǎng)基。
4.其他 95%酒精、小鑷子、麥?zhǔn)媳葷峁堋?mL刻度吸管、橡皮膠頭等。
實(shí)驗(yàn)步驟
1.試管雙倍稀釋法
(1)抗生素原液的配制及保存:將抗生素制劑無(wú)菌操作溶于適宜的溶劑如蒸餾水、磷酸鹽緩沖液中,稀釋至所需濃度??股氐淖畛跸♂寗┩ǔS谜麴s水,但是有些抗生素必須用其它溶劑作初步溶解。常用抗生素原液的溶劑和最初稀釋劑見(jiàn)表6-1。若制劑中可能含有雜菌,配制后宜用細(xì)菌濾器過(guò)濾除菌(可用玻璃濾器或微孔濾膜,孔徑0.22?m,但不可用纖維墊濾器)。分裝小瓶,在-20℃冷凍狀態(tài)下保存,可保存3個(gè)月或更久,每次取出一瓶保存于4℃冰箱,可用1周左右。
(2)培養(yǎng)基:一般采用普通肉湯培養(yǎng)基。如細(xì)菌生長(zhǎng)緩慢,可加入0.25%~1%葡萄糖或5%~10%血清。
(3)方法:被測(cè)菌種懸液的制備:將較多量的菌種移種于肉湯培養(yǎng)管中,置37℃溫箱中培養(yǎng)6h(生長(zhǎng)緩慢者可培養(yǎng)過(guò)夜),使生長(zhǎng)濁度達(dá)9×108個(gè)/mL(相當(dāng)于麥?zhǔn)媳葷峁艿?管)。
抗生素溶液的雙倍連續(xù)稀釋:取13×100mm滅菌帶棉塞試管13支(管數(shù)多少可依具體需要而定)。另將上述菌液作1︰10 000倍稀釋(生長(zhǎng)緩慢的細(xì)菌可稀釋1︰1 000或更少),除第1管加入稀釋菌液1.8mL外,其余各管均各加1.0mL。繼于第1管加入抗生素原液0.2mL,混合后吸出1.0mL加入第2管中,用同法依次稀釋至第12管,棄去1.0mL。第13管為生長(zhǎng)對(duì)照。
表6-1 抗生素原液的溶劑和稀釋劑
抗生素
丁胺卡那霉素 氯芐青霉素 桿菌肽 羧芐青霉素 頭孢羥唑 頭孢唑林 頭孢甲氧霉素 頭孢菌素I 氯霉素 氯潔霉素 多粘菌素B或E 紅霉素
溶劑 蒸餾水
0.1mol/L PBS(pH值8.0)
蒸餾水 蒸餾水 蒸餾水 蒸餾水 蒸餾水
0.1mol/L PBS(pH值8.0)
甲醇 蒸餾水 蒸餾水 甲醇
稀釋劑 蒸餾水
0.1mol/L PBS(pH值8.0)
蒸餾水 蒸餾水 蒸餾水 蒸餾水 蒸餾水 蒸餾水 蒸餾水 蒸餾水 蒸餾水
0.1mol/L PBS(pH值8.0)慶大霉素 卡那霉素
新青霉素I、II、III 青霉素G 萘啶酸 鏈霉素 四環(huán)素 妥布霉素 萬(wàn)古霉素
蒸餾水 蒸餾水 蒸餾水 蒸餾水 0.1mol/L NaOH
蒸餾水 蒸餾水 蒸餾水 蒸餾水
蒸餾水 蒸餾水 蒸餾水 蒸餾水 蒸餾水 蒸餾水 蒸餾水 蒸餾水 蒸餾水
培養(yǎng)及結(jié)果觀察:置37℃培養(yǎng)16~24h,觀察結(jié)果。凡藥物最高稀釋管中無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)者,該管的濃度即為MIC。
MBC的測(cè)定:從無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)的各管取材,分別劃線接種于瓊脂平板培養(yǎng)基,于37℃培養(yǎng)過(guò)夜(或48h),觀察結(jié)果。瓊脂平板上無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)而含抗生素最少的一管,即為MBC。也可將上述各管在37℃繼續(xù)培養(yǎng)48h,無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)的最低濃度即相當(dāng)于該抗生素的MBC。
結(jié)果報(bào)告:一般以MIC作為細(xì)菌對(duì)藥物的敏感度,如第1~8管無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng),第9管開(kāi)始有細(xì)菌生長(zhǎng),則把第8管抗生素的濃度報(bào)告為該菌對(duì)這種抗生素的敏感度;如全部試管均有細(xì)菌生長(zhǎng),則報(bào)告該菌對(duì)這種抗生素的敏感度大小為第1管中的濃度或?qū)υ撍幠退?;如除?duì)照管外,全部都不生長(zhǎng)時(shí),則報(bào)告為細(xì)菌對(duì)該抗生素的敏感度等于或小于第12管的濃度,或高度敏感。
2.?dāng)U散法(K-B法)
(1)含藥濾紙片的制備:含有各種抗菌藥物的濾紙片是擴(kuò)散法中應(yīng)用最多的。目前,我國(guó)生產(chǎn)含藥濾紙片的單位不多,購(gòu)買(mǎi)較為困難,即使購(gòu)買(mǎi)也易過(guò)期失效,所以一般可應(yīng)用自制的藥敏濾紙片。其方法如下:
濾紙片:選用新華1號(hào)定性濾紙,用打孔機(jī)打成直徑為6mm的小圓片,根據(jù)需要將數(shù)片包成一紙包或放入帶棉塞的小瓶或小平皿內(nèi),121℃滅菌15min,置100℃干燥箱內(nèi)烘干備用。
藥液的配制:常用藥物的配制方法及所用濃度見(jiàn)表6-2。
表6-2 藥敏紙片的制備及含藥濃度
藥 物 青霉素 劑 量 注射用粉劑
制備方法
20mg加pH值6.0 PB緩沖液15.5mL,取1mL加PB緩沖液9mL
20mg加pH值6.0 PB緩沖液20mL 20mg加pH值7.8 PB緩沖液 8mL 以pH值7.8 PB緩沖液作100倍稀釋 以pH值6.0 PB緩沖液稀釋 20mg加水20mL溶解
藥液濃度(?g/mL)
200 1 000 2 500 2 500 1 000 1 000
紙片含量(?g)10 25 25 10 10 新青霉素 注射用粉劑
注射用粉劑
鏈霉素
注射用針劑 注射用針劑
氯霉素
口服粉劑 土霉素 口服粉劑或片劑
25mg粉末,加2.5mol/L HCl 15mL 溶解后,以pH值6.0 PB緩沖液或水稀釋 000 1 000 1 000 1 000 1 000 1 000 1 500 3 000 3 000 1 000 3 000 1 000 1 000 1 000 1 000 10 000 10 000 1 000 10 000 10 000 10 000 125 10 10 10 10 10 10 30 30 10 300 10 10 10 10 100 100 100 100 100 100 1.25 四環(huán)素 口服粉(片)
同土霉素
劑
注射用粉劑 口服片劑
以生理鹽水稀釋 同土霉素
以pH值3.0 PB緩沖液溶解后以pH值6.0 PB緩沖液稀釋
以pH值8.2 PB緩沖液溶解后稀釋 以水溶解,以pH值7.8 PB緩沖液稀釋 同紅霉素
以pH值7.8 PB緩沖液稀釋 以pH值7.8 PB緩沖液稀釋 以pH值7.2 PB緩沖液稀釋 以pH值7.8 PB緩沖液稀釋
以1mol/L NaOH 1mL溶解1片,用pH6.0 PB緩沖液稀釋 以1mol/L NaOH 1mL溶解1片,用pH6.0 PB緩沖液稀釋
以二甲基酰胺或丙酮溶解 以水稀釋
以水或pH值8.2 PB緩沖液稀釋 100mg加2.5mol/L HCl 1.25mL,加水至5mL,以pH值6.0 PB緩沖液稀釋 100mg加水1mL,濃HCl 0.7mL溶解,以pH8.2 PB緩沖液稀釋
100mg加水2mL,濃HCl 0.5mL溶解,以pH8.2 PB緩沖液稀釋
100mg加濃HCl 1mL,溶解后以pH6.0 PB緩沖液稀釋
1片研碎后加水2mL,濃HCl 0.25mL,以pH值6.0及7.8 PB緩沖液稀釋 金霉素
口服粉劑
新霉素 紅霉素 口服片劑 注射用粉劑 注射用粉劑
卡那霉素
注射用針劑
慶大霉素 注射用針劑 多粘菌素 注射用粉劑 萬(wàn)古霉素 注射用粉劑 呋喃妥因 粉劑或片劑 呋喃西林 粉劑或片劑 痢特靈 磺胺嘧啶片劑
粉劑或針劑
鈉
磺胺二甲基針劑
嘧啶
長(zhǎng)效磺胺 片劑 周效磺胺 片劑 磺胺甲基異惡唑
磺胺5-甲氧嘧啶
磺胺增效劑
片劑 片劑 片劑
含藥紙片的制備:將滅菌濾紙片用無(wú)菌鑷子攤布于滅菌平皿中,以每張濾紙片飽和吸水量為0.01mL計(jì),每50張濾紙片加入藥液0.5mL,不時(shí)翻動(dòng)濾紙片,使濾紙片將藥液均勻吸凈,一般浸泡30min即可。然后取出含藥紙片置于一紗布袋中,以真空抽氣使之干燥?;蛑苯訉V紙片攤于37℃溫箱中烘干,烘烤的時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),以免某些抗生素失效。對(duì)青霉素、金霉素等紙片的干燥宜用低溫真空干燥法。干燥后,立即裝入無(wú)菌的小瓶中加塞,置于干燥器內(nèi)保存,也可將紙片貯藏于-20℃或家用冰箱冰凍。少量供工作用的紙片從冰箱中取出后應(yīng)在室溫中放置1h,使紙片溫度和室溫平行,防止冷的紙片遇熱產(chǎn)生凝結(jié)水。
藥敏紙片的鑒定:取制好的紙片3張,以標(biāo)準(zhǔn)敏感菌株測(cè)其抑菌環(huán),大小符合標(biāo)準(zhǔn)者則為合格。紙片的有效期一般為4~6個(gè)月。
(2)操作方法:K-B法是用含有一定量抗生素的藥敏紙片,貼在已接種試驗(yàn)細(xì)菌的瓊脂平板上,經(jīng)37℃培養(yǎng)后,抗生素濃度梯度通過(guò)紙片上彌散作用而形成,在敏感抗生素的有效范圍內(nèi),細(xì)菌的生長(zhǎng)受到抑制,在有效范圍外,細(xì)菌能夠生長(zhǎng),故能形成一個(gè)明顯的抑菌環(huán)。以抑菌環(huán)的大小來(lái)判定試驗(yàn)菌對(duì)某一抗生素是否敏感及敏感程度。
用接種環(huán)挑取菌落4~5個(gè),接種于肉湯培養(yǎng)基中,置37℃培養(yǎng)4~6h。
菌液稀釋:用滅菌生理鹽水稀釋培養(yǎng)液使?jié)岫认喈?dāng)于硫酸鋇標(biāo)準(zhǔn)管(配制方法:1.175%氯化鋇0.5mL、1%硫酸溶液99.5mL,充分混勻,將此溶液置于與肉湯培養(yǎng)基相同的試管中,用前充分振搖)。
用無(wú)菌棉拭子蘸取上述肉湯培養(yǎng)液,在管壁上擠壓,除去多余的液體,用棉拭子涂滿瓊脂表面,蓋好平皿,在室溫下干燥5min,待平板表面稍干即可放置含藥紙片。
用滅菌鑷子以無(wú)菌操作取出含藥紙片貼在涂有細(xì)菌的平板培養(yǎng)基表面。一個(gè)直徑9cm的平皿最多只能貼7張紙片,6張紙片均勻地貼在離平皿邊緣15mm處,一張位于中心。貼紙片時(shí)要輕輕按壓,以保證與培養(yǎng)基密切接觸。將平皿放37℃恒溫箱,培養(yǎng)16~18h,觀察結(jié)果(如圖6-1)。結(jié)果判定:觀察含藥紙片周圍有無(wú)抑菌環(huán),量取其直徑(包括紙片直徑)大小,用毫米數(shù)記錄,按抑菌環(huán)直徑的大小報(bào)告敏感、中度敏感和耐藥,具體標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)表6-3。
表6-3 抗菌藥物的抑菌環(huán)與敏感標(biāo)準(zhǔn)
抗菌藥物 丁胺卡那霉素 腸桿菌、腸球菌 葡萄球菌和青霉素敏感細(xì)菌 嗜血桿菌 桿菌肽 腸桿菌科 綠膿桿菌 先鋒霉素I 氯霉素 氯林可霉素 粘菌素
復(fù)方甲氧異惡唑 紅霉素 每片含藥量(?g)
耐藥 10 10 10 10 100 100 30 30 2 10 25 15
≤11 ≤11 ≤10 ≤19 ≤8 ≤17 ≤13 ≤14 ≤12 ≤14 ≤8 ≤10 ≤13
抑菌環(huán)的直徑(mm)
中等敏感 12~13 12~13 12~23
9~12 18~22 14~16 15~17 13~17 15~16 9~10 11~15 14~17
敏感 ≥14 ≥14 ≥24 ≥20 ≥13 ≥23 ≥17 ≥18 ≥18 ≥17 ≥11 ≥16 ≥18 慶大霉素 卡那霉素 甲氧苯青霉素 萘啶酸 新霉素 呋喃妥因 苯唑青霉素 青霉素G 葡萄球菌 其他細(xì)菌 30 5 30 30 300 1 10 10 300 10 300 300 10 30 2
≤12 ≤13 ≤9 ≤13 ≤12 ≤14 ≤10 ≤20 ≤11 ≤8 ≤11 ≤12 ≤12 ≤11 ≤9 ≤14
13~14 14~17 10~13 14~18 13~16 15~16 11~12 21~28 12~21 9~11 12~14 13~16 13~18 12~13 10~11 15~16
≥15 ≥18 ≥14 ≥19 ≥17 ≥17 ≥13 ≥29 ≥22 ≥12 ≥15 ≥17 ≥19 ≥14 ≥12 ≥17 多粘菌素B 鏈霉素 磺胺 四環(huán)素 妥布霉素 萬(wàn)古霉素 氯潔霉素
注意事項(xiàng)
1.稀釋法
(1)接種量:接種細(xì)菌量的多少與MIC有一定關(guān)系。如用敏感的葡萄球菌對(duì)氯芐青霉素進(jìn)行檢測(cè)時(shí),接種量增加1 000倍,MIC只略有增加,但對(duì)甲氧苯青霉素的敏感度則因接種量的不同而有較大變化,即使同一菌株,接種量小時(shí)為敏感,接種量增大時(shí),其MIC則增加許多倍。
(2)培養(yǎng)基成分及培養(yǎng)條件:培養(yǎng)基的組成成分應(yīng)保持恒定,外觀清晰透明,pH值適宜。為了觀察方便,還可向各管中加入葡萄糖及指示劑,以指示劑顏色的改變判定其是否生長(zhǎng)。同時(shí)要注意選擇適宜的培養(yǎng)溫度,一般在12~18h觀察藥敏試驗(yàn)結(jié)果。如時(shí)間過(guò)長(zhǎng),細(xì)菌將會(huì)在高濃度的藥物中生長(zhǎng)。其原因,一是由于被輕度抑制的細(xì)菌開(kāi)始繁殖,另一方面則是因?yàn)橛行┛股卦?7℃情況下不穩(wěn)定,在其被破壞之后,受抑制的細(xì)菌也會(huì)再次生長(zhǎng)繁殖。
(3)對(duì)于一些色澤深或本身呈混濁的中草藥,其試管培養(yǎng)后不易觀察細(xì)菌的生長(zhǎng)情況。可從培養(yǎng)管移至平板培養(yǎng)基上,觀察各管中的細(xì)菌是否被殺死。這種方法只能測(cè)定藥物的最低殺菌濃度。
抑菌圈圖示
含藥紙片
抑菌圈
細(xì)菌菌苔(4)稀釋時(shí),每一個(gè)稀釋度均應(yīng)更換吸管。菌液及抗生素的加量要準(zhǔn)確。
2.?dāng)U散法
(1)K-B紙片擴(kuò)散法必須使用Mueller-Hintion(MHA)培養(yǎng)基,因其解釋度的數(shù)據(jù)是用此培養(yǎng)基積累的,MHA培養(yǎng)基普通冰箱可保存2~3周,用前須放37℃10min,以使形成的水霧干燥。此培養(yǎng)基適合于快速生長(zhǎng)的細(xì)菌,生長(zhǎng)緩慢的細(xì)菌或厭氧菌,不宜采用K-B技術(shù)及其解釋標(biāo)準(zhǔn)。
(2)接種用的菌液濃度必須標(biāo)準(zhǔn)化,以細(xì)菌在平板上的生長(zhǎng)恰呈融合狀態(tài)為標(biāo)準(zhǔn),接種后應(yīng)及時(shí)貼含藥紙片和放入35℃(或37℃)培養(yǎng)。
(3)培養(yǎng)的溫度要恒定,時(shí)間為16~18h,結(jié)果不宜判讀過(guò)早。因培養(yǎng)過(guò)久,細(xì)菌能恢復(fù)生長(zhǎng),使抑菌環(huán)變小。培養(yǎng)時(shí)不應(yīng)增加CO2,以防某些抗菌藥物形成的抑菌圈大小發(fā)生改變及影響培養(yǎng)基的pH值。
第三篇:微生物歷年習(xí)題
2006——2010年微生物試題整理(微生物實(shí)驗(yàn)切片,圖文皆有,大家寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告可以參照)
【試題】2010-6-20/山東大學(xué)/口腔醫(yī)學(xué)院{五年制)、公衛(wèi)、臨五/2008級(jí)/微生物
名詞解釋:3分×10個(gè)
1,非細(xì)胞型微生物
2,溶原性轉(zhuǎn)換
3,敗血癥
4,BCG
5,衣原體
6,刺突
7,IFN
8,潛伏感染
9,HBeAg
10,HIVgp120
簡(jiǎn)答題:共50分
1,比較革蘭氏陽(yáng)性菌和革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁的不同
2,簡(jiǎn)述外毒素的特征
3,簡(jiǎn)述霍亂腸毒素的致病機(jī)制
4,簡(jiǎn)述病毒感染的致病機(jī)制
5,簡(jiǎn)述流感病毒分型依據(jù)及抗原變異的形成6,簡(jiǎn)述HIV的復(fù)制過(guò)程
【試題】2009-12-26/山東大學(xué)/藥學(xué)院/2007級(jí)/微生物
一、名詞解釋九個(gè)每個(gè)三分
細(xì)菌L型、熱原質(zhì)、消毒、SPA、Cholera Toxin、感染性核酸、IFN、gp120、prion
三、簡(jiǎn)答
1.外毒素與內(nèi)毒素區(qū)別
2.病毒對(duì)宿主細(xì)胞致病作用
3.乙肝傳染源、傳染途徑、致病機(jī)制
4.結(jié)核菌素試驗(yàn)原理 結(jié)果判斷 意義
【試題】2009-12-26/山東大學(xué)/醫(yī)學(xué)院/臨床七年制/07級(jí)/醫(yī)學(xué)微生物學(xué)/A卷
名解
adsorption
antigenic drift
BCG
Mycoplasma
bacteria L form
normal flora
slow virus infection
HBeAg
大題(36分)
1.virulence factors of G+bacteria(10)
2.What is IFN refer to ? mechanism? properties of anti-virus effect?(8)
3.pathogenicity of Staphylococci aureus?(8)
4.what is gp120?co-receptor of HIV?HIV infective sources and transmission route?(10)
【試題】2009-01-04 /山東大學(xué)/藥學(xué)院/2006級(jí)/ 藥學(xué)/微生物試題
名解9個(gè)
LPS肥達(dá)實(shí)驗(yàn) 病毒體 垂直傳播 轉(zhuǎn)化潛伏感染 BCG消毒 HBsAg
問(wèn)答4個(gè)
細(xì)菌的致病機(jī)制
葡萄球菌的致病物質(zhì)和所致疾病
IFN是什么?其抗病毒的特點(diǎn)?
腸道病毒的共同特征
【試題】2009-01-04/山東大學(xué)/醫(yī)學(xué)院/2006級(jí)/臨床口腔藥學(xué)七年制/醫(yī)學(xué)微生物學(xué)/微生物 名解8*3‘
pyrogen
transformation
defective virus
CPE
SPA
chlamydia
prion
HBsAg
簡(jiǎn)答
1,細(xì)菌特殊結(jié)構(gòu)的作用
2,什么是重配,以流感為例說(shuō)明其可能出現(xiàn)的結(jié)果及臨床價(jià)值
3,描述A群鏈球菌的致病因素及可導(dǎo)致的疾病
4,HIV的致病機(jī)制
對(duì)這次考試的總結(jié):細(xì)菌對(duì)氧的情況一道沒(méi)考很詭異啊
總論細(xì)菌病毒真菌的選擇題比例是10:13:16:1
細(xì)菌病毒部分致病考的比較多
選擇題都是那本書(shū)上的沒(méi)講的菌或毒基本不考,貌似有一兩個(gè)選擇吧
病毒注意大重點(diǎn)還是肝炎和HIV,小重點(diǎn)容易忽略的是蟲(chóng)媒和腸道的共
同特點(diǎn),注意先天和性傳播
【試題】2008—01—07/山東大學(xué)/醫(yī)學(xué)院/05級(jí)/七年制/醫(yī)學(xué)微生物(英文原版)
名詞解釋
1.bacterial L form
2.Sterilization
3.slow virus infection
4.virion
5.Mycoplasm
6.SPA
7.a(chǎn)ntigenic shift
8.HIV gp120
簡(jiǎn)答題:
1.Please compare the characteristic of bacterial exotoxins with endotoxins.9/
2.What kind of viral vaccine are in common used at present ? Please try to give an example for each kind and explain their characteristics.9/
3.How dose IFN exert its antivirus function? What characteristics dose this function have ? 8/
【試題】2008-01-07/山東大學(xué)/藥學(xué)院/05級(jí)/藥學(xué)/微生物
一、名詞解釋 細(xì)菌L型 CPE抗原性轉(zhuǎn)變 支原體 朊粒 毒性噬菌體 BCG頓挫感染
二、簡(jiǎn)答
1、細(xì)菌的致病機(jī)制
2、細(xì)菌耐藥性的遺傳機(jī)制
3、IFN的定義?生物學(xué)活性。
4、血清中能檢出與HBV相關(guān)成分有哪些?其意義何在?
5、霍亂弧菌的致病機(jī)制。
【試題】2007-01/山東大學(xué)/藥學(xué)專業(yè)/微生物試題
名解:
菌群失調(diào)癥
類毒素
AVP
SPA
外斐反應(yīng)
抗原性轉(zhuǎn)變
Dane顆粒
簡(jiǎn)答:
什么是正常菌群?簡(jiǎn)述正常菌群對(duì)機(jī)體的生理作用
簡(jiǎn)述病毒感染的致病機(jī)制(包括細(xì)胞水平的感染、機(jī)體水平的感染)
簡(jiǎn)述A群鏈球菌的致病物質(zhì)和所致疾病
試述結(jié)核菌素試驗(yàn)原理、結(jié)果判斷及意義
何謂人畜共患?。磕男┰思?xì)胞型微生物可引起人畜共患???
試述乙肝病毒的抗原組成及意義
試述HIV的傳播途徑及致病機(jī)制
何謂Prion?可導(dǎo)致人和動(dòng)物哪些疾?。?/p>
何謂質(zhì)粒?簡(jiǎn)述其特征
【試題】2007-01-16/山東大學(xué)/醫(yī)學(xué)院/2004級(jí)/七年制/微生物
一.名解:1.pyrogen;2.defective virus:3.prion:4.lysogenic phage:5.transformation:
6.DPT:7.HBsAg:8.chlamydia:9.opportunistic pathogen:
二,大題:
1。鏈球菌的致病物質(zhì)和疾病。
2。BCG的定義、應(yīng)用、檢測(cè)。
3。IFN的定義、特點(diǎn)。
4。重配定義,以流感病毒說(shuō)明。
5。HBcAg,gp120,HA的功能或臨床意義。
【試題】2006-06-21/山東大學(xué)/醫(yī)學(xué)院/2003級(jí)/六年制/微生物
名詞3*10:LPS,SPA,滅菌,基因工程疫苗,朊粒,AVP,前噬菌體,基因重配,選擇都是白皮書(shū)上的,比較簡(jiǎn)單,問(wèn)答7*5:
1.質(zhì)粒是什么,有何特點(diǎn)
2.潛伏感染,并以HSV-1為例,描述其特點(diǎn)
3.正常菌落的作用和解剖位置
4.結(jié)核分枝桿菌的傳播途徑和致病因子
5.HBV基因組及其編碼的蛋白
第四篇:微生物檢測(cè)課后習(xí)題
緒論:
1.食品的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容包括那些?感官指標(biāo)、理化指標(biāo)、微生物指標(biāo)
2.對(duì)食品進(jìn)行微生物檢驗(yàn)具有何意義?是衡量食品衛(wèi)生質(zhì)量的終于指標(biāo),也是判斷被檢食品是否能食用的科學(xué)依據(jù);可以判斷食品加工環(huán)境及食品衛(wèi)生的情況,為衛(wèi)生管理工作提供科學(xué)依據(jù);可以有效地防止人畜共患病的發(fā)生;保證產(chǎn)品質(zhì)量,避免不必要的損失
3.食品微生物檢驗(yàn)的范圍包括那些?生產(chǎn)環(huán)境的檢驗(yàn);原輔料的檢驗(yàn);食品加工、儲(chǔ)藏、銷售等環(huán)節(jié)的檢驗(yàn);食品的檢驗(yàn)
4.食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)中的微生物指標(biāo)有那些?菌落總數(shù);大腸菌群;致病菌;霉菌及其毒素;其他指標(biāo) 菌落總數(shù)概念和測(cè)定意義
1.什么是菌落總數(shù)?是指食品檢驗(yàn)經(jīng)過(guò)處理,在一定條件下培養(yǎng)后,所得1mL(g)或1cm2面積檢樣中所含菌落的總數(shù)
2.測(cè)定食品、飲料等產(chǎn)品的菌落總數(shù)有什么意義?(1)判定食品被細(xì)菌污染的程度及衛(wèi)生質(zhì)量(2)預(yù)測(cè)食品存用的期限長(zhǎng)短(3)了解細(xì)菌在食品中的繁殖動(dòng)態(tài)
3.畫(huà)出平板傾注法測(cè)定菌落總數(shù)的示意圖:步驟:檢樣—稀釋處理—選擇3個(gè)適宜稀釋度—倒平板—培養(yǎng)—菌落計(jì)數(shù)—報(bào)告結(jié)果
4.在測(cè)定菌落總數(shù)時(shí),如何選擇菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)?(1)選取菌落數(shù)在30-300之間的平板,若有兩個(gè)稀釋度均在30-300之間時(shí),比值小于或等于2取平均數(shù),比值大于2則取稀釋度較低平板菌落數(shù)(2)如均大于300,則取最高稀釋度的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告(3)如均小于30,則以最低稀釋度的平均菌落數(shù)乘稀釋倍數(shù)報(bào)告(4)如菌落數(shù)有的大于300,有的又小于30,不再30-300之間,以最接近300或30的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告(5)如所有稀釋度均無(wú)菌落生長(zhǎng),則應(yīng)按小于1乘以最低稀釋倍數(shù)報(bào)告
5.在菌落總數(shù)的檢驗(yàn)中,要注意哪些事項(xiàng)?(1)對(duì)照平板出現(xiàn)幾個(gè)菌落時(shí),要追加對(duì)照平板(2)吸管進(jìn)出瓶子或試管時(shí),吸管口不得觸及瓶口、管口的外圍部分(3)吸管插入試樣液內(nèi)的深度不得小于2.5cm,調(diào)整時(shí)要使管尖與容器內(nèi)壁緊貼(4)進(jìn)行稀釋時(shí),吸管口不得與稀釋液接觸(5)檢驗(yàn)從開(kāi)始稀釋到傾注最后一個(gè)平皿所用時(shí)間不宜超過(guò)20min(6)稀釋倍數(shù)越高菌落數(shù)越少,如出現(xiàn)逆反現(xiàn)象,不可作為檢樣計(jì)數(shù)報(bào)告的依據(jù)。
6.在菌落總數(shù)的檢驗(yàn)中,如何根據(jù)樣品的特性選擇培養(yǎng)溫度和時(shí)間?普通食品37℃48h倒放平板;清涼飲料、調(diào)味品、糕點(diǎn)、酒類:37℃24h;水產(chǎn)品:30℃48h 大腸菌群測(cè)定
1.什么是大腸菌群?大腸菌群由那些微生物組成?指一群需氧及兼性厭氧,在37℃能分解乳糖,產(chǎn)酸產(chǎn)氣的革蘭氏染色陰性無(wú)芽孢桿菌;組成:大腸埃希氏菌屬、檸檬酸桿菌屬、產(chǎn)氣克雷伯氏菌屬、陰溝腸桿菌
2.測(cè)定食品、飲料等產(chǎn)品的大腸菌群數(shù)有什么意義?(1)判斷食品是否受到糞便的污染(2)有利于控制腸道傳染病的發(fā)生和流行(3)有利于控制食品在生產(chǎn)加工、運(yùn)輸、保存等過(guò)程中的衛(wèi)生狀況
3.大腸菌群具有那些生物學(xué)特性?形態(tài)與染色:革蘭氏陰性,無(wú)芽孢桿菌,發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣;培養(yǎng)特性:在EMB瓊脂平板上的典型菌落:呈深紫黑色或中心深紫黑色,圓形,稍凸起,邊緣整齊,表面光滑,常有金屬光澤
4.在大腸菌群數(shù)的檢驗(yàn)中,要注意哪些事項(xiàng)?(1)抑菌劑(2)菌落特征(3)產(chǎn)氣量(4)MPN檢索表
5.在水的大腸菌群數(shù)檢驗(yàn)中,如何進(jìn)行水樣的采集?自來(lái)水(未含氟):龍頭火燒滅菌,暢流5-10秒后取樣;地面水源水,江湖河,水庫(kù),水池等浸入水下20cm下取樣,水井50cm下取樣;漂白粉處理的水樣:自來(lái)水,游泳池水,應(yīng)在瓶?jī)?nèi)加入0.03g硫代硫酸鈉/500,或2ml1.5%硫代硫酸鈉液/500ml,除氯;運(yùn)送:2小時(shí)內(nèi)送檢.6-10℃<6h立即檢驗(yàn);檢驗(yàn)前將水樣震蕩5-10min 病原性球菌檢測(cè)
1.金黃色葡萄球菌可產(chǎn)生哪些毒素和酶?溶血毒素;殺白細(xì)胞素;血漿凝固酶;脫氧核糖核酸酶;腸毒素;溶纖維蛋白酶;透明質(zhì)酸酶
2.金黃色葡萄球菌在B-P平板上的菌落特征如何?說(shuō)明其原理?特征:圓形,光滑凸起,濕潤(rùn),成灰色至黑色,邊緣色淡周圍為渾濁帶,在其外層有一透明帶;原理:氯化鋰、甘氨酸:抑制非致病性葡萄球菌的生長(zhǎng);丙酮酸鈉:促進(jìn)葡萄球菌生長(zhǎng);亞碲酸鉀:抑制G-桿菌生長(zhǎng),可被金黃色葡萄球菌還原為碲鹽呈黑色。
3.金黃色葡萄球菌在血平板上的菌落特征如何?菌落呈金黃色,大而突起,圓形,不透明,表面光滑,周圍有透明溶血圈(β型)
4.確認(rèn)葡萄球菌為金黃色葡萄球菌的依據(jù)至少應(yīng)該包括那幾個(gè)試驗(yàn)? 5.金黃色葡萄球菌的形態(tài)與染色、培養(yǎng)特征如何?形態(tài)與染色:革蘭氏陽(yáng)性球形菌,排列呈葡萄狀。無(wú)芽孢、鞭毛,大多數(shù)無(wú)莢膜,可分解葡萄糖、麥芽糖、乳糖、蔗糖,產(chǎn)酸不產(chǎn)氣;培養(yǎng)特征:需氧或兼性厭氧,最適生長(zhǎng)溫度37℃、PH7.4;對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求不高,在普通培養(yǎng)基中生長(zhǎng)良好,加少量葡萄糖或血液生長(zhǎng)更旺盛;耐鹽性強(qiáng),在含NaCL7.5-15%培養(yǎng)基中能生長(zhǎng);在肉湯中是渾濁生長(zhǎng),時(shí)間過(guò)長(zhǎng),有少量沉淀;在普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng),可形成圓形凸起,表面光滑,邊緣整齊,不透明,直徑1—2mm的菌落能產(chǎn)生黃色色素;血瓊脂平板:菌落大、產(chǎn)生完全溶血圈;BP平板:灰色到黑色邊緣淡,菌落周圍有一渾濁帶,在其外有一透明帶
食品中溶血性鏈球菌的檢驗(yàn)
1.鏈球菌的溶血現(xiàn)象有那幾個(gè)類型,各類型的溶血特征如何?甲型α-溶血性鏈球菌(菌落周圍有1-2mm寬的草綠色溶血環(huán),也稱甲型溶血,這類鏈球菌多為條件致病菌。)、乙型β-溶血性鏈球菌(菌落周圍形成一個(gè)2-4mm寬、界限分明、完全透明的無(wú)色溶血環(huán),也稱乙型溶血,該菌的致病力強(qiáng),常引起人類和動(dòng)物的多種疾病,與人類疾病有關(guān)的血清型90%屬于A族鏈球菌)、丙型γ-鏈球菌(不產(chǎn)生溶血素,菌落周圍無(wú)溶血環(huán),也稱為丙型或不溶血性鏈球菌,該菌無(wú)致病性,常存在于乳類和糞便中,偶爾也引起感染。)
2.溶血性鏈球菌在血平板和葡萄糖肉湯中生長(zhǎng)有何特征?在血平板上形成灰白色,半透明、表面光滑、有乳光圓形突起的細(xì)小菌落,直徑0.5-0.75mm,針尖大小,菌落周圍出現(xiàn)溶血環(huán);在葡萄糖肉湯中:
3.溶血性鏈球菌能產(chǎn)生什么毒素和酶?溶血毒素、致熱外毒素、透明質(zhì)酸酶、鏈激酶、鏈道酶、殺白細(xì)胞素
4.寫(xiě)出鏈球菌的檢驗(yàn)程序,并說(shuō)明鏈激酶的反應(yīng)原理。檢驗(yàn)程序:固體檢驗(yàn)—樣品處理—增菌培養(yǎng)—分離培養(yǎng)—純化培養(yǎng)—生化鑒定—報(bào)告;原理: 腸道致病菌
1.腸道致病菌具有那些生物性特性?均為革蘭氏陰性桿菌,中等大小,無(wú)芽孢,多數(shù)具有周鞭毛能運(yùn)動(dòng);需氧或兼性厭氧,菌落中等大小,表面光滑,液體培養(yǎng)基渾濁生長(zhǎng);腸道致病菌一般不分解乳糖,而非致病菌多能分解乳糖、葡萄糖產(chǎn)酸或產(chǎn)酸產(chǎn)氣;可還原硝酸鹽為亞硝酸鹽
2.腸道致病菌具有那些抗原?又稱為什么?有什么特點(diǎn)?O抗原:也稱菌體抗原,細(xì)胞壁脂多糖,耐熱100℃不被破壞
H抗原:也稱鞭毛抗原,鞭毛蛋白,不耐熱,60℃30’可破壞
K抗原:也稱表面抗原(莢膜抗原),多糖,具有阻抑O抗原發(fā)生凝集的現(xiàn)象,加熱60℃30’可消除抑阻作用 菌毛抗原: 3.寫(xiě)出腸道致病菌檢驗(yàn)的基本程序?檢樣—處理—增菌培養(yǎng)—分離培養(yǎng)—生化實(shí)驗(yàn)—血清學(xué)鑒定—報(bào)告 沙門(mén)氏菌
1.典型沙門(mén)氏菌的五項(xiàng)生化試驗(yàn)結(jié)果如何?
2.沙門(mén)氏菌的形態(tài)特征,培養(yǎng)特性是什么?形態(tài)特征:革蘭氏染色陰性,無(wú)莢膜,無(wú)芽孢,多數(shù)有鞭毛,有動(dòng)力,短小桿菌;培養(yǎng)特性:需氧或兼性厭氧,最適溫37,PH7.2-7.4;對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求不高,在普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好,37,24h能形成菌落中等大小,直徑2-3mm,圓形或卵圓形,表面光滑濕潤(rùn),無(wú)色半透明,邊緣整齊的菌落;在液體培養(yǎng)基中,呈均勻渾濁性生長(zhǎng),無(wú)菌膜。3.沙門(mén)氏菌檢驗(yàn)時(shí)為什么要進(jìn)行前增菌和增菌?
4.沙門(mén)氏菌有哪些抗原?各有何特點(diǎn)?O、H抗原如何表示,A-F群沙門(mén)氏菌中,代表每群O特異性抗原的獨(dú)特因子是什么?O抗原(主要抗原OA~OZ,O51~63,O65~67)、H抗原、表面抗原(K抗原)、菌毛抗原。
5.沙門(mén)氏菌哪幾個(gè)菌型具有Vi抗原,Vi抗原對(duì)O抗原血清連實(shí)驗(yàn)有何影響,對(duì)含Vi抗原菌,如何做O抗原血清學(xué)實(shí)驗(yàn)?含有Vi 抗原的沙門(mén)氏菌:傷寒沙門(mén)氏菌、丙型副傷寒沙門(mén)氏菌、都柏林沙門(mén)氏菌。Vi抗原位于菌體的最表層,包圍了O抗原,可阻礙O抗原的血清學(xué)凝集試驗(yàn)。破壞Vi抗原:60℃30秒,100℃5秒,石炭酸處理或人工培養(yǎng)后消失。
6.沙門(mén)氏菌在SS平板,TSI培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的現(xiàn)象如何,說(shuō)明其原理
7.分離純化后怎樣選用最少的生化試驗(yàn)方法初步鑒定檢驗(yàn)菌是否是沙門(mén)氏菌屬的細(xì)菌
8.如何進(jìn)行沙門(mén)氏菌的血清學(xué)試驗(yàn) 志賀氏菌 1.志賀氏菌分幾個(gè)群各稱為什么?抗原結(jié)構(gòu)如何?K抗原對(duì)O抗原試驗(yàn)有何影響?A群痢疾志賀氏菌、B群福氏志賀氏菌、C群鮑氏志賀氏菌、D群宋內(nèi)氏志賀氏菌;抗原結(jié)構(gòu):ABCD均是O抗原;A群、C群具有K抗原;影響:K抗原可阻礙O抗原的血清學(xué)凝集實(shí)驗(yàn),煮沸處理即可。
2.寫(xiě)出志賀氏菌、沙門(mén)氏菌、大腸桿菌在SS、EMB平板上生長(zhǎng)的菌落特征?志賀氏菌:無(wú)色透明,不發(fā)酵乳糖,中等大小,光滑圓形菌落;沙門(mén)氏菌:SS圓形或卵圓形,表面光滑濕潤(rùn),無(wú)色半透明,邊緣整齊的菌落;大腸桿菌:EMB呈深紫黑色或中心深紫色,圓形,稍凸起,邊緣整齊,表面光滑,常有金屬光澤
3.志賀氏菌在三糖鐵培養(yǎng)基上生長(zhǎng)結(jié)果如何?斜面產(chǎn)堿仍為紅色或粉紅色;底層產(chǎn)酸不產(chǎn)氣,變黃色;不產(chǎn)硫化氫,不出現(xiàn)黑色。
4.在志賀氏菌中,接種三糖尿病鐵培養(yǎng)基和葡萄糖半固體培養(yǎng)基后,那些培養(yǎng)物可認(rèn)為不屬于本菌生長(zhǎng)現(xiàn)象的范圍而可棄去?在TSI表面上呈現(xiàn)蔓延生長(zhǎng)的培養(yǎng)物;在18h-24h發(fā)酵乳糖、蔗糖的培養(yǎng)物;不分解葡萄糖,只在半固體培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的培養(yǎng)物;產(chǎn)氣的培養(yǎng)物;有動(dòng)力的培養(yǎng)物;產(chǎn)硫化氫的培養(yǎng)物。5.如何用生化反應(yīng)來(lái)區(qū)分志賀氏菌各群?用4中志賀氏菌多價(jià)血清檢查,如果呈現(xiàn)凝集,則用A1,A2、B群多價(jià)和D群血清分別試驗(yàn);如是B群,則喲個(gè)群和型因子血清分別檢查;4中志賀氏菌多價(jià)血清不凝集的菌株用鮑氏多價(jià)1、2、3分別檢查,并進(jìn)一步用1-15各型因子血清檢查。如果鮑氏多價(jià)血清不凝集,可用痢疾志賀氏菌3-12型多價(jià)血清及各型因子血清檢查。
6.寫(xiě)出沙門(mén)氏菌、志賀氏菌的檢驗(yàn)程序及其所用培養(yǎng)基。沙門(mén)氏菌:檢驗(yàn)—增菌(前增菌)--分離培養(yǎng)—生化實(shí)驗(yàn)初步鑒定—血清學(xué)反映最后鑒定—報(bào)告;培養(yǎng)基:BS瓊脂平板和XLD瓊脂平板;志賀氏菌:檢驗(yàn)—樣品處理—增菌培養(yǎng)—SS、EMB平板分離培養(yǎng)—初步生化鑒定—最后血清學(xué)鑒定—報(bào)告。培養(yǎng)基:強(qiáng)選擇性(SS或HE)、弱選擇性(EMB或麥康凱)副溶血性弧菌
1.副溶血性弧菌的形態(tài)與染色有和特點(diǎn)?革蘭氏陰性無(wú)芽孢多形態(tài)桿菌,單端鞭毛、兩端濃染。桿狀、棒狀、甚至球狀、絲狀等;需氧或兼性厭氧,生長(zhǎng)最好;在2~3%NaCL培養(yǎng)基中生長(zhǎng)最好,無(wú)鹽或食鹽>10%不能生長(zhǎng);最適溫度36℃,PH7.5-7.8;在專用選擇性平板上,菌落呈圓形凸起,渾濁不透明,表面光滑,較濕潤(rùn),邊緣不整齊;血平板:可見(jiàn)溶血環(huán)
2.副溶血性弧菌的生化特性中最有特點(diǎn)的是那個(gè)項(xiàng)目,如何利用這個(gè)項(xiàng)目,診斷某細(xì)菌是否是副溶血性弧菌?
3.副溶血性弧菌在TSI,Nacl蔗糖,嗜鹽選擇性平板上培養(yǎng)特征如何?Nacl蔗糖平板:圓形,半透明或不透明,無(wú)粘性,綠藍(lán)色;嗜鹽性平板:圓整或不齊,隆起混濁,無(wú)粘性,無(wú)色,濕潤(rùn)。鏡檢:兩端濃染 蠟樣芽孢桿菌
1.引起蠟樣芽孢桿菌事物中毒的常見(jiàn)食物有那些?什么條件下可引起蠟樣芽孢桿菌食中毒?乳類、肉類、米飯、淀粉類、甜點(diǎn)心、涼拌蔬菜,水果,色拉 2.蠟樣芽孢桿菌的形態(tài)與染色特性如何?革蘭氏陽(yáng)性大桿菌,芽孢不突出菌體,菌體兩端較平整,多數(shù)呈鏈狀排列,周身鞭毛,有動(dòng)力
3.蠟樣芽孢桿菌在普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂和甘露醇卵黃多粘菌瓊脂平板上生長(zhǎng)的菌落特征如何?普通:菌落灰白色,不透明,邊緣不整齊,表面粗糙,呈毛玻璃狀或白蠟狀;甘露醇卵黃多粘菌素平板:菌落呈粉紅色,具有白色渾濁環(huán)。血平板:菌落呈淺灰色,不透明,似白色毛玻璃狀,有溶血環(huán)。4.寫(xiě)出蠟樣芽孢桿菌檢驗(yàn)的基本程序?檢驗(yàn)—稀釋處理—平板分離—證實(shí)實(shí)驗(yàn)—培養(yǎng)特性觀察—生化實(shí)驗(yàn)—報(bào)告結(jié)果 霉菌、酵母菌數(shù)測(cè)定
列表說(shuō)明霉菌、酵母菌數(shù)的測(cè)定與菌落總數(shù)的測(cè)定有什么不同的地方和相同的地方?
檢驗(yàn)程序:檢驗(yàn)—處理—稀釋—平板分離培養(yǎng)—菌落計(jì)數(shù)—報(bào)告 罐頭類
1.罐頭食品的商業(yè)無(wú)菌檢驗(yàn)中,保溫的目的是什么?目的:觀察是否胖聽(tīng)或泄漏 2.在罐頭食品的商業(yè)無(wú)菌檢驗(yàn)中,開(kāi)罐前要做好那些準(zhǔn)備工作?用75%酒精稀球擦試無(wú)代號(hào)端,并點(diǎn)燃滅菌(胖聽(tīng)不能燒),然后開(kāi)罐,但不能傷及卷邊結(jié)構(gòu)。3.如何判斷罐頭為商業(yè)無(wú)菌?該批罐頭食品經(jīng)審查生產(chǎn)記錄,屬于正常,抽取樣品經(jīng)保溫試驗(yàn)未見(jiàn)胖聽(tīng)或泄漏,保溫后開(kāi)罐,經(jīng)感官檢查PH測(cè)定,涂片鏡檢,或接種培養(yǎng),確證無(wú)M增殖現(xiàn)象。
第五篇:微生物的營(yíng)養(yǎng) 講課稿
第四章
微生物的營(yíng)養(yǎng)
前幾節(jié)課,我們把微生物它的形態(tài)、結(jié)構(gòu)還有功能作為一個(gè)很大的部分已經(jīng)講完了。那從這節(jié)課開(kāi)始,我們會(huì)講到微生物的一些生理過(guò)程,包括微生物的營(yíng)養(yǎng),微生物的代謝以及微生物的生長(zhǎng)這幾大生理過(guò)程。那我們今天主要講第四章微生物的營(yíng)養(yǎng)。在這一章里面,我們將會(huì)講到微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)的需求,也就是說(shuō)微生物要吃什么物質(zhì)才能進(jìn)行它的生長(zhǎng)、繁殖、代謝等等這些活動(dòng)。這些營(yíng)養(yǎng)給它準(zhǔn)備了,它怎樣去做獲得這些營(yíng)養(yǎng)。形象地說(shuō)就是我們?nèi)绾谓o它做飯來(lái)讓它吸收這些營(yíng)養(yǎng),也就是我們第二節(jié)要講到的培養(yǎng)微生物所需要的培養(yǎng)基。第三節(jié)呢,你有了這些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),也給它做好了,它怎么去吃這些營(yíng)養(yǎng),怎樣去轉(zhuǎn)化到它自身的細(xì)胞內(nèi),去吸收這些營(yíng)養(yǎng),在生長(zhǎng)過(guò)程中還會(huì)產(chǎn)生一些代謝產(chǎn)物,它如何排出體外,這就是我們第三節(jié)要講的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)是如何進(jìn)入細(xì)胞的。這一章,我們主要是講第三部分。
首先,我們來(lái)看兩個(gè)概念,什么是營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)呢? 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(nutrient):那些能夠滿足微生物機(jī)體生長(zhǎng)、繁殖和完成各種生理活動(dòng)所需的物質(zhì)。什么是營(yíng)養(yǎng)呢?
雖然只差兩個(gè)字,但它們是截然不同的兩個(gè)概念。營(yíng)養(yǎng)(nutrition):微生物獲得、吸收和利用營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的過(guò)程。
所以,可以說(shuō)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)是微生物生存的物質(zhì)基礎(chǔ),沒(méi)有這些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),微生物無(wú)法生存,就更談不上它的一些生理活動(dòng)了;而營(yíng)養(yǎng)是生物維持和延續(xù)其生命形式的一種生理過(guò)程。這兩個(gè),一個(gè)是基礎(chǔ),一個(gè)是生理過(guò)程。
接下來(lái),我們看一下第一節(jié),微生物的營(yíng)養(yǎng)要求。我們先看一下微生物的化學(xué)組成,為什么要先看一下微生物的化學(xué)組成呢,因?yàn)樗芊磻?yīng)出微生物對(duì)一些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需求。那我們來(lái)看,對(duì)于微生物細(xì)胞來(lái)說(shuō),水是占比重最大的,占了70%-90%這個(gè)比例。另外一部分,就是它的干物質(zhì),干物質(zhì)里面又包括有機(jī)物和無(wú)機(jī)物(鹽)。有機(jī)物里面又包括像是蛋白質(zhì)、糖、脂、核酸、維生素等及其降解產(chǎn)物。那無(wú)機(jī)鹽主要是由這些化學(xué)元素所組成,這里面有大量的元素,還有微量元素。大量的主要元素是碳?xì)溲醯龋⒘吭厥卿\錳鈉氯等。所以,我們從微生物的這些化學(xué)組成就能看出微生物所需要的這些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)?,F(xiàn)在,我們分別講一下微生物所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及其在體內(nèi)的一些生理功能。我們可以根據(jù)這些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)它們?cè)跈C(jī)體中的生理作用不同進(jìn)行劃分。一般來(lái)說(shuō),微生物所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括六大元素。第一大元素,就是碳源。第二大元素,就是氮源。第三是能源,另外一種是生長(zhǎng)因子,第五種是無(wú)機(jī)鹽,我們把水作為第六大元素。所以,微生物所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括這六大元素,我們分別來(lái)看一下。
1、碳源(carbon source)
定義:凡能提供微生物營(yíng)養(yǎng)所需碳元素的營(yíng)養(yǎng)源。也就是說(shuō)這種物質(zhì)能夠滿足微生物對(duì)碳源的這種需要。不同種類的微生物對(duì)碳源的需要是不一樣的,微生物所需要的碳源范圍是非常廣的。對(duì)于自養(yǎng)微生物,它需要的碳源是二氧化碳,作為它唯一或最主要碳源。另外,像碳酸氫鈉也可以作為自養(yǎng)微生物的碳源,絕大多數(shù)自養(yǎng)微生物都是把二氧化碳作為唯一碳源。對(duì)于異樣微生物來(lái)講,它所需要的碳源范圍就更多。自然界所有有機(jī)物如:糖類、蛋白質(zhì)、脂類、烴類、天然或人工合成有毒的有機(jī)物等皆可作相應(yīng)微生物的碳源。所以它包含范圍是非常廣的。所以我們可以用異樣微生物來(lái)對(duì)一些有毒物質(zhì)進(jìn)行處理,在實(shí)際的生存生活中是非常有用的。不同的微生物對(duì)碳源的喜好是不一樣的。Glc是一般異養(yǎng)微生物最喜愛(ài)利用的碳源。像葡萄糖對(duì)微生物來(lái)說(shuō),是最為喜愛(ài)的。若給微生物加入葡萄糖,它是最容易吸收的。對(duì)單糖的吸收要好于多糖,對(duì)多糖的吸收,要先分解然后才能吸收。微生物利用的碳源的范圍,我們稱作碳源譜。像微生物如果碳源譜非常廣,則說(shuō)明這種微生物利用的碳源種類非常多。舉個(gè)例子,像Pseudomonas spp 可利用90種以上碳源,所以它的碳源就非常廣。還有一種叫甲烷氧化菌,它利用的碳源就比較窄,它就只能利用甲烷或者甲醇這一類作為它的碳源,所以說(shuō)不同的微生物它所利用的碳源的種類是不一樣的。微生物碳源譜的寬或窄主要取決于其體內(nèi)酶體系的差異。
2、氮源(nitrogcn sourcc)
定義:凡能提供微生物營(yíng)養(yǎng)所需氮元素的營(yíng)養(yǎng)源。
氮源又包括無(wú)機(jī)氮源和有機(jī)氮源。無(wú)機(jī)氮又包括氣態(tài)氮、銨鹽、硝酸鹽、碳化物等。有機(jī)氮包括種類比較多,包括蛋白胨、牛肉浸膏、酵母粉、豆粉餅、魚(yú)粉、玉米漿等。有機(jī)氮源這一部分我們?cè)诤竺娴呐囵B(yǎng)基那一部分還會(huì)重點(diǎn)講到。微生物對(duì)氮源的利用都是偏向于有機(jī)氮源,一般優(yōu)先利用有機(jī)氮源。對(duì)氮源利用有選擇性,優(yōu)先利用有機(jī)氮,有機(jī)氮源物質(zhì)同時(shí)也可提供碳源。
3、能源(energy source)
定義:能為微生物生命活動(dòng)提供最初能量來(lái)源的物質(zhì)。這些物質(zhì)可以是化學(xué)物質(zhì),還有一種可以是光能。對(duì)于化能異養(yǎng)微生物來(lái)說(shuō)能量來(lái)源是有機(jī)物(同碳源),對(duì)于化能自養(yǎng)微生物來(lái)說(shuō)能量來(lái)源是無(wú)機(jī)物(不同于碳源),主要是還原態(tài)的無(wú)機(jī)物,這里面包括硫化氫、氫、二價(jià)鐵等。對(duì)于光能自養(yǎng)和光能異養(yǎng)微生物來(lái)說(shuō),它們的能量來(lái)源是光能。有的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)既可以作為碳源,又可以作為氮源或者能源,這不是截然不同的,有的物質(zhì)是可以作為多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的。
4、無(wú)機(jī)鹽(inorganic salt)
定義:以鹽的形式提供主要元素與微量元素。
無(wú)機(jī)鹽是微生物在成長(zhǎng)過(guò)程里所需要的元素與微量元素的鹽的形式,它是必不可少的,這些無(wú)機(jī)鹽它的功能主要是維持細(xì)胞滲透壓、調(diào)節(jié)ph、作酶的輔基、激活劑。我們根據(jù)微生物對(duì)這些無(wú)機(jī)鹽需要量的大小做一個(gè)劃分,分為大量元素和微量元素。鈉鎂鈣這一類在10的-3次到10的-4次 mol/L,稱大量元素;銅鋅錳這一類在10的-6次到10的-8次
mol/L,稱微量元素。
5、生長(zhǎng)因子(growth factor)
定義:微生物生長(zhǎng)所必需,其需要量很少,微生物自身不能合成或合成量不足,難以滿足微生物生長(zhǎng)需要,只有在培養(yǎng)基加入才能使其生長(zhǎng)的有機(jī)化合物。狹義生長(zhǎng)因子:維生素
廣義生長(zhǎng)因子:還有氨基酸、嘌呤、嘧啶、脂肪酸等
腸膜狀明串珠菌需要17種氨基酸作生長(zhǎng)因子,所以它的培養(yǎng)需要給它加足了生長(zhǎng)因子才能生長(zhǎng)。某些人體寄生菌以血清作生長(zhǎng)因子。生長(zhǎng)因子的來(lái)源一般是酵母膏、玉米漿、麥芽汁等,還有復(fù)合維生素。所以在培養(yǎng)微生物時(shí),我們加入酵母膏,不僅加入了氮源,也加入了生長(zhǎng)因子。
6、水
再一類是水,可以說(shuō)是非常重要的,萬(wàn)物離不開(kāi)水,它不僅提供了微生物生長(zhǎng)所需要的膠態(tài)的這樣一個(gè)環(huán)境,而且是物質(zhì)代謝的一個(gè)原料。