第一篇：細(xì)胞死亡的分類題庫

綜述：細(xì)胞死亡的分類

呂冰峰

博士生資格考試綜述（2005年10月24日）

細(xì)胞死亡的分類

呂冰峰

北京大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)系分子免疫實驗室

北京大學(xué)人類疾病基因研究中心

摘要：細(xì)胞死亡是多細(xì)胞生物生命過程中重要的生理或病理現(xiàn)象。細(xì)胞死亡有很多種，基于不同的分類標(biāo)準(zhǔn)，其分類結(jié)果也不一樣。細(xì)胞死亡有程序性和非程序性之分，后者即壞死。程序性細(xì)胞死亡按其發(fā)生機制不同可以分為凋亡、自吞噬性程序性細(xì)胞死亡、Paraptosis、細(xì)胞有絲分裂災(zāi)難、脹亡等。也有很多學(xué)者按照死亡時細(xì)胞的形態(tài)特征進(jìn)行分類：按照細(xì)胞核形態(tài)可以分為凋亡、凋亡樣程序性細(xì)胞死亡、壞死樣程序性細(xì)胞死亡和壞死；按照Clarke形態(tài)學(xué)分類，程序性細(xì)胞死亡分為I、II、III類。形態(tài)學(xué)分類與機制分類有很大的重疊，我們總結(jié)了它們的對應(yīng)關(guān)系。

關(guān)鍵詞：程序性細(xì)胞死亡，凋亡，自吞噬，Paraptosis，細(xì)胞有絲分裂災(zāi)難，脹亡，壞死

一、前言

多細(xì)胞生物的發(fā)育及生存依賴于其細(xì)胞分裂增殖和死亡之間的平衡，一旦這種平衡被打破，就會發(fā)生胚胎發(fā)育異常、退行性疾病以及癌癥等。所以在進(jìn)化過程中，多細(xì)胞生物逐漸擁有了復(fù)雜而精密的調(diào)節(jié)機制維持這種平衡。

細(xì)胞的死亡形式多種多樣，在過去的150年其分類主要基于形態(tài)學(xué)[1]。而在最近的30年里，由于死亡分子機制方面的研究取得長足進(jìn)步，使得死亡的分類更加科學(xué)化。但是，由于認(rèn)識的局限性，細(xì)胞死亡分類的現(xiàn)狀是形態(tài)和機制并存，甚至給人一種混亂的感覺，本文將對現(xiàn)有的細(xì)胞死亡分類加以綜述，并盡量將形態(tài)學(xué)分類與機制分類聯(lián)系起來。

二、非程序性細(xì)胞死亡

程序性細(xì)胞死亡的共同點在于它們是細(xì)胞主動的死亡過程，能夠被細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的抑制劑阻斷，而非程序性細(xì)胞死亡則是細(xì)胞被動的死亡過程，不能被細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的抑制劑阻斷[2]。

非程序性細(xì)胞死亡即壞死，是指細(xì)胞在受到環(huán)境中的物理或化學(xué)刺激時所發(fā)生的細(xì)胞被動死亡[3]。其主要形態(tài)學(xué)特點是胞膜的破壞，細(xì)胞及細(xì)胞器水腫（胞2018-10-7

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呂冰峰

漿泡化），但染色質(zhì)不發(fā)生凝集。細(xì)胞死亡后，細(xì)胞內(nèi)容物及前炎癥因子釋放，趨化炎癥細(xì)胞浸潤引起炎癥，以去除有害因素及壞死細(xì)胞并進(jìn)行組織重建。哈佛大學(xué)醫(yī)學(xué)院的袁均英教授和她的研究小組通過高通量的篩選，找到了一種化學(xué)小分子Necrostatin-1，能夠抑制Fas/TNFR引起的壞死。該分子能專一性地阻斷細(xì)胞壞死，但對凋亡沒有抑制作用，這種死亡方式被他們命名為Necroptosis[4]。他們的研究還指出，壞死也能由細(xì)胞信號通路介導(dǎo)。所以說，壞死不都是非程序性的，很多信號通路介導(dǎo)壞死的發(fā)生，其原因可能是由于認(rèn)識的局限性，很多和壞死形態(tài)相似的死亡被誤認(rèn)為是壞死，因此應(yīng)該把傳統(tǒng)意義的壞死分為兩類，即壞死和壞死樣程序性細(xì)胞死亡[5]。

三、程序性細(xì)胞死亡

程序性細(xì)胞死亡的分類方式大致有兩種，即基于死亡機制的分類和基于形態(tài)學(xué)的分類。基于機制可以將程序性細(xì)胞死亡分為兩大類：Caspase依賴的和Caspase非依賴的。前者即典型的凋亡，后者包括自吞噬性程序性細(xì)胞死亡、Paraptosis、細(xì)胞有絲分裂災(zāi)難、脹亡等?；谛螒B(tài)學(xué)的分類又有兩種：一種將程序性細(xì)胞死亡分為凋亡、凋亡樣程序性細(xì)胞死亡和壞死樣程序性細(xì)胞死亡；另一種則分為I類、II類和III類程序性細(xì)胞死亡。

（一）基于機制的程序性細(xì)胞死亡分類

1.凋亡

1972年Kerr從形態(tài)學(xué)的角度描述了細(xì)胞的生理死亡，并將其命名為凋亡[6]。凋亡的形態(tài)學(xué)特征為染色質(zhì)凝集、邊緣化，細(xì)胞皺縮，細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)的磷脂酰絲氨酸外翻，細(xì)胞出泡形成凋亡小體。細(xì)胞凋亡受到一系列相關(guān)基因的嚴(yán)格調(diào)控。根據(jù)凋亡信號的來源可以將細(xì)胞凋亡信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路分成兩條：外源性通路（死亡受

[7]體通路）和內(nèi)源性通路（線粒體通路）。兩條信號通路匯集于下游的效應(yīng)Caspase。效應(yīng)Caspase在細(xì)胞凋亡的執(zhí)行階段能夠直接引起重要蛋白質(zhì)的降解和核酸酶的激活并最終導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。也有一些凋亡不依賴于Caspase，而是通過AIF等分子發(fā)揮效應(yīng)，其形態(tài)學(xué)變化屬于凋亡樣程序性細(xì)胞死亡。2.自吞噬性程序性細(xì)胞死亡

1966年Duve和Wattiaux在發(fā)現(xiàn)溶酶體的同時發(fā)現(xiàn)了細(xì)胞的自吞噬現(xiàn)象[8]，1977年Mortimore和Schworer發(fā)現(xiàn)肝細(xì)胞在處于饑餓狀態(tài)時，自吞噬對其維持自身的穩(wěn)態(tài)發(fā)揮著至關(guān)重要的作用[9]。自吞噬細(xì)胞形態(tài)學(xué)上最主要的特征是細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)大量泡狀結(jié)構(gòu)，即雙層膜自吞噬泡，吞噬泡內(nèi)為胞質(zhì)及細(xì)胞器。調(diào)控自吞噬的細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)信號有很多，其中相對比較清楚的是PI3K和mTOR。PI3K對于早期吞噬泡的形成至關(guān)重要，而mTOR則對吞噬泡的形成及成熟起抑制作用[10]。另2018-10-7

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外已知有十?dāng)?shù)種ATG分子參與了吞噬泡的形成。當(dāng)細(xì)胞處于氨基酸饑餓、營養(yǎng)缺乏或生長因子去除時，細(xì)胞的mTOR就會受到抑制，從而發(fā)生自吞噬。自吞噬是細(xì)胞在處于惡劣環(huán)境時的一種生存機制，但持續(xù)的自吞噬會導(dǎo)致程序性細(xì)胞死亡[5]。3.Paraptosis 2000年Sperandio等在293T細(xì)胞系中超表達(dá)胰島素樣生長因子1受體（IGFIR）時發(fā)現(xiàn)一種與經(jīng)典凋亡不同的死亡表型，并定義為Paraptosis[11]。Paraptosis的形態(tài)學(xué)特征是細(xì)胞漿空泡化，線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腫脹，但沒有核固縮現(xiàn)象。現(xiàn)在Paraptosis的文獻(xiàn)報道比較少，其機制有待于進(jìn)一步深入研究。高劑量的IGF或胰島素等營養(yǎng)因子可以通過IGFIR活化MAPK/ERK以及JNK通路引起Paraptosis的發(fā)生，并且可以被AIP1/Alix特異性地抑制[12]。我們實驗室的王鶯博士發(fā)現(xiàn)TNF受體超家族成員TAJ/TROY也可以誘導(dǎo)Paraptosis，并且可以被PDCD5加強[13]。4.細(xì)胞有絲分裂災(zāi)難

1989年，Lisa Molz等發(fā)現(xiàn)在酵母的一種對熱敏感的突變株中，細(xì)胞分裂時染色體分離發(fā)生異常[14]。相應(yīng)的一些學(xué)者便把這種在DNA發(fā)生損害時，細(xì)胞無法進(jìn)行完全的分裂從而導(dǎo)致四倍體或多倍體的現(xiàn)象稱為細(xì)胞有絲分裂災(zāi)難[15]。對于細(xì)胞有死分裂災(zāi)難的形態(tài)學(xué)特點描述并不是很完全，但主要是巨細(xì)胞的形成，內(nèi)有多個小核，染色質(zhì)凝聚[16]。有絲分裂災(zāi)難和凋亡的染色體固縮是否一樣，現(xiàn)在看法并不一致。DNA發(fā)生損害時，如果細(xì)胞不能有效地阻斷其細(xì)胞周期的進(jìn)行，會導(dǎo)致染色體的異常分離，這些非正常分裂的細(xì)胞在下一輪有絲分裂中會繼續(xù)導(dǎo)致細(xì)胞多倍體的形成從而成為癌變的基礎(chǔ)。而細(xì)胞有絲分裂災(zāi)難作為一種死亡機制可以使這種非正常分裂的細(xì)胞死亡。細(xì)胞有絲分裂災(zāi)難由多種分子調(diào)控，如CDK1，P53及Survivin等，其死亡信號傳遞有很大一部分與凋亡相重疊[17]。5.脹亡

1910年，von Reckling-hausen在骨軟化病中發(fā)現(xiàn)由于缺血而腫脹壞死的骨細(xì)胞，他把這種腫脹壞死叫做Oncosis。1995年Majno和Joris為與凋亡相區(qū)別，重新引入了Oncosis的概念[18]，把具有明顯腫脹特點的細(xì)胞死亡命名為Oncosis，中文一般翻譯為脹亡。脹亡的形態(tài)學(xué)特征是細(xì)胞腫脹，體積增大，胞漿空泡化，腫脹波及細(xì)胞核、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體等胞內(nèi)結(jié)構(gòu)，胞膜起泡，細(xì)胞膜完整性破壞[19]。脹亡細(xì)胞周圍有明顯炎癥反應(yīng)。對于脹亡發(fā)生的機制現(xiàn)有的文獻(xiàn)闡述較少，有研究者認(rèn)為脹亡只是壞死前的一個被動性死亡階段[18]。但是近年來的研究更傾向于脹亡是一個程序性的死亡方式，如抗Porimin的單抗可以引起Jurkat細(xì)胞的脹亡；解偶聯(lián)蛋白高表達(dá)的組織或細(xì)胞易發(fā)生脹亡，其原因是這些細(xì)胞缺乏ATP，故其膜上的離子泵功能喪失從而導(dǎo)致脹亡，而抑制解偶聯(lián)蛋白可以抵抗脹亡卻不能抵抗凋亡，提示脹亡可能有與凋亡不同的死亡機制[20]。

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（二）基于形態(tài)的程序性細(xì)胞死亡分類

1.基于細(xì)胞核改變的分類

細(xì)胞核在細(xì)胞死亡時變化比較明顯，所以很多人以此為標(biāo)準(zhǔn)將細(xì)胞死亡分為凋亡、凋亡樣程序性細(xì)胞死亡、壞死樣程序性細(xì)胞死亡和壞死，其中前三種是程序性細(xì)胞死亡，壞死是非程序性細(xì)胞死亡。

如前所述，凋亡細(xì)胞核的特點是染色質(zhì)凝聚，成球狀或半月狀。其它的形態(tài)學(xué)變化還有磷脂酰絲氨酸外翻、細(xì)胞皺縮、凋亡小體形成等。凋亡一般都會伴有Caspase尤其是Caspase3的活化。

凋亡樣程序性細(xì)胞死亡核的特征是染色質(zhì)凝聚的程度較低，比凋亡細(xì)胞的染色體疏松一些，同時可以有凋亡細(xì)胞其它方面的形態(tài)學(xué)的變化，多數(shù)文獻(xiàn)中描述的Caspase非依賴的凋亡歸于此類。

壞死樣程序性細(xì)胞死亡一般無染色質(zhì)的凝聚或者只有疏松的點狀分布，一些特殊的Caspase非依賴的死亡歸于此類[21]。

線粒體在細(xì)胞死亡中扮演著核心角色，其所釋放的促進(jìn)細(xì)胞死亡的分子大致有三類。第一類是細(xì)胞色素C，它與胞漿里的Apaf-1，ATP和Caspase-9前體分子形成Apoptosome，引起Caspase-9的激活，進(jìn)而激活Caspase-3，引起典型的凋亡[22]。第二類是超氧自由基，可以使細(xì)胞發(fā)生壞死樣程序性細(xì)胞死亡，且此效應(yīng)劑可以被抗氧化劑所拮抗[23]。第三類是AIF，AIF可以切割染色體產(chǎn)生大的DNA片段（約50kB），而Caspase激活的DNA酶切割DNA產(chǎn)生的片段則很?。◣资畟€堿基對），二者對細(xì)胞核形態(tài)的影響也不相同。AIF可以使細(xì)胞發(fā)生凋亡樣程序性細(xì)胞死亡[24]。2.Clarke分類

1990年Clarke等補充了Schweichel和Merker對于細(xì)胞死亡的分類，將程序性細(xì)胞死亡分為I類、II類和III類[25]，至今仍被廣泛引用。

I類程序性細(xì)胞死亡即是凋亡，形態(tài)學(xué)特征如上所述，這類死亡一般沒有溶酶體的參與，且死后會被吞噬細(xì)胞所吞噬[26]。

II類程序性細(xì)胞死亡即是自吞噬性程序性死亡，如上所述，其主要的形態(tài)學(xué)特征是自吞噬泡的形成，自吞噬泡和溶酶體融合后被消化，而細(xì)胞殘骸會被吞噬細(xì)胞吞噬。

III類程序性細(xì)胞死亡即是壞死樣程序性細(xì)胞死亡，其主要的形態(tài)學(xué)特征是各種細(xì)胞器的腫脹、胞膜的破壞等，這類細(xì)胞死亡沒有溶酶體的參與。III類程序性細(xì)胞死亡又分為兩個亞類IIIA和IIIB，其中IIIB亞類胞膜破壞比較輕微，各類細(xì)胞器的腫脹表現(xiàn)比較明顯，而且死亡后會被吞噬細(xì)胞吞噬[25]。

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上述兩種分類方法都涉及壞死性程序性細(xì)胞死亡，但是兩種方法所關(guān)注的形態(tài)學(xué)特征卻并不一致。Clarke分類中的II類程序性細(xì)胞死亡如果按照細(xì)胞核形態(tài)分類應(yīng)該屬于壞死樣程序性細(xì)胞死亡，因為它沒有發(fā)生染色質(zhì)凝聚[27]。

（三）形態(tài)學(xué)分類與機制分類的關(guān)系

上述程序性細(xì)胞死亡分類似乎有些復(fù)雜，因為形態(tài)學(xué)分類與機制分類具有很大的重疊；所以，如果能夠?qū)⒍呗?lián)系起來，找出它們的對應(yīng)關(guān)系，將有利于我們對于細(xì)胞死亡的理解（見表一）。

1、機制分類中的凋亡按核形態(tài)分類屬于凋亡或凋亡樣程序性細(xì)胞死亡；Clarke分類屬于I型程序性細(xì)胞死亡。

2、機制分類中的自吞噬性程序性細(xì)胞死亡按核形態(tài)分類應(yīng)該屬于壞死樣程序性細(xì)胞死亡，因為其沒有明顯的染色質(zhì)凝聚；Clarke分類屬于II型程序性細(xì)胞死亡。

值得注意的是，凋亡可以以自吞噬開始，而自吞噬可以以凋亡結(jié)束[28]，其機制為溶酶體的活化可以激活典型的內(nèi)源性凋亡通路[29]。所以，很多自吞噬性程序性細(xì)胞死亡結(jié)果表現(xiàn)為凋亡，但也有文獻(xiàn)報道有獨立的自吞噬性程序性細(xì)胞死亡，同時又沒有凋亡發(fā)生[30]。

3、機制分類的Paraptosis按核形態(tài)分類應(yīng)該屬于壞死樣程序性細(xì)胞死亡，因其核沒有明顯的變化；Clarke分類屬于III型程序性細(xì)胞死亡。

4、機制分類的細(xì)胞有絲分裂災(zāi)難嚴(yán)格來說應(yīng)該歸于凋亡，因為其表現(xiàn)出明顯的染色體凝聚。但由于其誘因比較特殊，所以習(xí)慣上把它單獨歸于一類。

5、機制分類的脹亡按核形態(tài)分類應(yīng)該屬于壞死樣程序性細(xì)胞死亡，因為其染色體可以形成散在的點狀分布[31]；Clarke分類屬于III型程序性細(xì)胞死亡。

表

一、形態(tài)學(xué)分類與機制分類的關(guān)系

基于機制的分類

凋亡

自吞噬性程序性細(xì)胞死亡

Paraptosis 細(xì)胞有絲分裂災(zāi)難

脹亡

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基于細(xì)胞核改變的分類 凋亡，凋亡樣程序性細(xì)胞死亡 壞死樣程序性細(xì)胞死亡 壞死樣程序性細(xì)胞死亡

凋亡

壞死樣程序性細(xì)胞死亡

Clarke分類

I型 II型 III型 I型 III型 綜述：細(xì)胞死亡的分類

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四、總結(jié)

隨著近年來對于細(xì)胞死亡的深入研究，經(jīng)典的“凋亡——壞死”的死亡分類模型已經(jīng)顯得過于簡單。一般來說，某一種死亡刺激可能引起細(xì)胞多個死亡通路的活化，細(xì)胞最終發(fā)生什么樣的死亡主要取決于被活化通路發(fā)揮作用的速度。多數(shù)情況下，Caspase通路發(fā)揮作用最快，因此程序性細(xì)胞死亡最常表現(xiàn)為凋亡。但是某些情況下，比如Caspase通路受阻時，Caspase通路不發(fā)揮作用或者速度慢于其它通路，細(xì)胞就會表現(xiàn)為凋亡樣或壞死樣程序性細(xì)胞死亡[32]。在某些Bcl-2高表達(dá)的腫瘤細(xì)胞系中，死亡刺激也往往引起凋亡樣或壞死樣程序性細(xì)胞死亡[33]。細(xì)胞具有多種死亡方式是有其進(jìn)化必然性的[34]。多細(xì)胞生物在生命過程中會有大量“多余的”或“生病的”細(xì)胞死掉，單一的死亡方式對于生命來說是十分危險的，因為一旦此通路受到抑制，后果將不可想象。多種死亡方式的存在就像一個多重保險，會“千方百計”地使應(yīng)該死亡的細(xì)胞死掉，即便是某些死亡通路受阻?，F(xiàn)在對于細(xì)胞死亡的分類還有一些混亂，隨著對于細(xì)胞死亡機制認(rèn)識的不斷深入，我們期待著一個更為合理的細(xì)胞死亡分類方法。

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第二篇：垃圾分類題庫

垃圾分類題庫

一、單選題

1.玻璃瓶、玻璃罐等玻璃制品在土壤中的降解速度為（D）

A.一個月

B.半年

C.500年

D.永遠(yuǎn)不會降解

2.焚燒處理生活垃圾，溫度要保持在（D）

A.300℃

B.450℃

C.800℃

D.850℃

3.未分類的混合垃圾含有（C）以上的廚余垃圾

A.30%

B.50%

C.60%

D.70%

4.紙巾、紙袋等在土壤中的降解速度為（B)

A.半個月

B.一個月

C.半年

D.一年

5.使用過的藥盒屬于屬于什么垃圾（C）

A.廚余垃圾

B.可回收垃圾

C.有害垃圾

D.其他垃圾

6.污染紙張屬于什么垃圾（C）

A.有害垃圾

B.廚余垃圾

C.其他垃圾

D.可回收垃圾

7.學(xué)校產(chǎn)生的廚余垃圾要運到（B）處理

A.供銷再生資源有限公司

B.生態(tài)資源化利用中心

C.固廢處置中心

D.大件垃圾處理中心

8.紡織品屬于（A）

A.可回收垃圾

B.有害垃圾

C.其他垃圾

D.廚余垃圾

9.下列不屬于可回收的是（C）

A.可樂罐

B.牛奶盒

C.布料

D.衣架

10.過期食品屬于（C）

A.廚余垃圾

B.可回收垃圾

C.其他垃圾

D.有害垃圾

11.下列不屬于可回收垃圾的是（D）

A.筆記本

B.復(fù)印紙

C.玩具

D.煙頭

12.哪種垃圾，可以降解堆肥處理（A）

A.廚余垃圾

B.有害垃圾

C.可回收垃圾

D.其他垃圾

13.平常喝茶的茶葉渣應(yīng)扔進(jìn)哪個垃圾桶（C）

A.可回收垃圾

B.其他垃圾

C.廚余垃圾

D有害垃圾

14.榴蓮殼、瓜子殼等屬于什么垃圾（C）

A.有害垃圾

B.可回收垃圾

C.廚余垃圾

D.其他垃圾

15.（B）可進(jìn)行資源再利用

A.廚余垃圾

B.可回收垃圾

C.有害垃圾

D.其他垃圾

16.保鮮膜屬于（C）

A.廚余垃圾

B.其他垃圾

C.可回收垃圾

D.有害垃圾

17.過期化妝品屬于（A）

A.有害垃圾

B.可回收垃圾

C.其他垃圾

D.廚余垃圾

18.大骨頭屬于什么垃圾（C）

A.可回收垃圾

B.廚余垃圾

C.其他垃圾

D.可回收垃圾

19.干果果殼屬于（B）

A、廚余垃圾

B、其他垃圾

C、有害垃圾

D、可回收垃圾

20.其他垃圾是指（A）

A.紙尿褲、煙蒂

B.玻璃瓶、玻璃杯

C.紙箱

D.茶葉渣、貝殼

21.下列哪個是廚余垃圾（B）

A.干果果殼

B.瓜皮果殼

C.大骨頭

D.過期藥品

22.廢棄的食用油屬于（B）

A.有害垃圾

B.廚余垃圾

C.可回收垃圾

D.其他垃圾

23.用完的殺蟲噴霧瓶屬于（D）

A.可回收垃圾

B.廚余垃圾

C.其他垃圾

D.有害垃圾

24.廢棄塑料包裝物屬于（C）

A.可回收垃圾

B.廚余垃圾

C.其他垃圾

D.有害垃圾

25.生活垃圾中，占比重最大的是（A）

A.廚余垃圾

B.有害垃圾

C.金屬

D.塑料袋

26.有害垃圾應(yīng)投入（A）顏色的垃圾分類桶。

A.紅色

B.藍(lán)色

C.綠色

D.灰色

27.可回收物應(yīng)投入（B）顏色的垃圾分類桶。

A.紅色

B.藍(lán)色

C.綠色

D.灰色

28.其他垃圾應(yīng)投入（D）顏色的垃圾分類桶。

A.紅色

B.藍(lán)色

C.綠色

D.灰色

29.廚余垃圾應(yīng)投入（C）顏色的垃圾分類桶。

A.紅色

B.藍(lán)色

C.綠色

D.灰色

30.舊衣服屬于（D）。

A.可回收垃圾

B.有害垃圾

C.廚余垃圾

D.其他垃圾

31.金華市城市生活垃圾分為（A）。

A.可回收物、其他垃圾、有害垃圾、廚余垃圾

B.可回收物、不可回收物、廚余垃圾、玻璃垃圾

C.可降解垃圾、可回收垃圾、有害垃圾

D.有害垃圾、可回收垃圾、玻璃垃圾、其他垃圾

32.學(xué)校投放垃圾時間為（B）

A.6：00-7：20

B.10：30-12：30

C.16：30-18：30

D.7：00-8：30

33.垃圾分類可以阻止對（A）的污染

A.空氣

B.食物

C.動物

D.植物

34.垃圾分類可以促使資源循環(huán)和（D）

A.大氣循環(huán)

B.健康發(fā)展

C.水循環(huán)

D.可持續(xù)發(fā)展

35.紙巾降解速度為（B）

A.5天

B.一個月

C.半個月

D.半年

36.廚余垃圾和其他垃圾混合焚燒，會產(chǎn)生致癌物（A）

A.二噁英

B.苯并芘

C.亞硝酸銨

D.三聚氰胺

37.混合垃圾在收集、運輸和處理時容易（B），產(chǎn)生甲硫酸，甲硫醚等

A.發(fā)臭

B.發(fā)酵

C.發(fā)霉

D.混合38.未分類的混合垃圾由于含有（D）以上廚余垃圾，極易產(chǎn)生滲瀝液。

A.30%

B.40%

C.50%

D.60%

39.回收一噸廢塑料可節(jié)省（B）石油。

A.5噸

B.6噸

C.6千克

D.5千克

40.泥土是什么垃圾？（A）

A.不是垃圾

B.其他垃圾

C.可回收垃圾

D.廚余垃圾

41.快餐盒屬于（D)垃圾

A.有害垃圾

B.廚余垃圾

C.可回收垃圾

D.其他垃圾

42.難以辨識類別的生活垃圾投應(yīng)應(yīng)投入（B)

A.有害垃圾

B.其他垃圾

C.可回收垃圾D.廚余垃圾

43.哪種垃圾可以作為肥料滋養(yǎng)土壤、莊稼？（A）

A.廚余垃圾

B.可回收垃圾

C.有害垃圾

D.其他垃圾

44.擦鼻涕的紙應(yīng)放入哪類垃圾桶里？（D）

A.廚余垃圾

B.可回收垃圾

C.有害垃圾

D.其他垃圾

45.以下哪種做法是錯誤的？（D）

A．廢舊的單面打印稿紙，另一面可以打草稿、畫畫

B．廢舊的宣傳廣告紙可以做成手工制品

C．舊書、舊玩具可以義賣、送給山區(qū)孩子或放在班級的圖書角

D．過期藥品可以放入可回收垃圾箱內(nèi)

46.垃圾分類是指按照垃圾的（C）分成屬性不同的若干種類

A、不同成分、屬性

B、利用價值和處置方式

C、不同成分、屬性、利用價值以及對環(huán)境的影響，并根據(jù)不同的處置方式

47.垃圾分類有什么好處？（B）

A.麻煩多

B.減少垃圾處理量和處理設(shè)備,降低處理成本,減少土地資源的消耗,具有社會、經(jīng)濟(jì)、生態(tài)三方面的效益

C.垃圾桶多，垃圾占用地方多

D.跟我沒關(guān)系

48.垃圾投放時哪個做法是正確的？（C）

A.隨地亂丟棄

B.將多種垃圾用袋子包在一起投入垃圾桶

C.按垃圾種類投放入相對應(yīng)的垃圾分類桶中

D.隨便投入一個垃圾桶即可

49.打印墨盒屬于（C）?

A.可降解垃圾

B.其他垃圾

C.有害垃圾

D.可回收垃圾

50.廢舊熒光燈管屬于（D)。

A.可回收垃圾B.餐廚垃圾C.其他垃圾D.有害垃圾

二、多選題

1.廚余垃圾有哪些（ACDE）

A.骨骼內(nèi)臟

B.大骨頭

C.瓜皮果殼

D.過期食品

E.茶葉渣

2.下列屬于有害垃圾的是（ABCD）

A.過期藥品

B.化學(xué)用品

C.血壓計

D.電子產(chǎn)品

E.紙尿片

3.下列屬于可回收垃圾的是（ABE）

A.紙張

B.玻璃

C.一次性餐具

D.污染紙張

E.金屬

4.下列屬于其他垃圾的是（ABDE）

A.大骨頭

B.干果果殼

C.牛奶盒

D.破碎的碗片

E.煙蒂

5.我國城市生活垃圾末端處理方式主要采用哪幾種（ABC）

A.填埋

B.焚燒

C.堆肥

D.資源利用

6.推動生活垃圾分類是為了提高生活垃圾中哪些材料的回收利用率（ABC）

A.廢紙

B.廢塑料

C.廢金屬

D.舊衣服

7.下列（AB）物質(zhì)在自然界中很難降解

A.玻璃瓶

B.塑料袋

C.廢紙

D.果皮

8.下列屬于有害垃圾的是（ABE）

A.節(jié)能燈

B.熒光燈管

C.金屬罐頭

D.鎢絲燈泡

E.電子產(chǎn)品

9.下列屬于可回收垃圾的是（ABC）

A.牙刷

B.牛奶盒

C.布料

D.衛(wèi)生間廢紙

10.可回收垃圾主要包括以下幾大類（ABCD）

A.廢紙

B.塑料

C.玻璃

D.金屬

11.下列選項中哪些在土壤中降解速度為一個月的有（AC）

A.紙巾

B.玻璃瓶

C紙袋

D塑料瓶

12.下列選項中哪些在土壤中降解的速度為永遠(yuǎn)不會降解（AB）

A.玻璃瓶

B.玻璃杯

C.薯片包裝袋

D.塑料瓶

13.下列說法錯誤的是（AD）

A.所有物品都能循環(huán)再造

B.不同的可循環(huán)物料是由不同的回收廠收回，先分類有助于回收

C.避免可循環(huán)物料遭受其它廢物污染，影響其回收的價值

D.無需對有毒垃圾做特別的處理

14.下列屬于屬于廚余垃圾的是（ABCD）

A.蝦殼

B.瓜子殼

C.過期食品

D.動物內(nèi)臟

15.下列屬于屬于可回收垃圾的是（BC）

A.大骨頭

B.紡織品

C.玻璃

D.廢舊燈管

16.我國環(huán)境保護(hù)的基本原則（ABCD)

A.經(jīng)濟(jì)建設(shè)與環(huán)境保護(hù)相協(xié)調(diào)

B.預(yù)防為主,防治結(jié)合C.誰開發(fā)誰保護(hù),誰污染誰治理

D.依靠群眾保護(hù)環(huán)境

17.下列（AD)生活行為不利于環(huán)保。

A.使用一次性餐具

B.用布袋子購物

C.用消毒筷子就餐

D.電器不用時保持待機狀態(tài)

18.下列（AB)物質(zhì)在自然界中很難降解。

A、玻璃瓶

B、塑料袋

C、廢紙

D、果皮

19.以下（AB)是正確的環(huán)保節(jié)能習(xí)慣

A.用電子郵件代替紙質(zhì)信函

B.紙張雙面打印,復(fù)印

C.使用塑料袋用品

20.我國城市生活垃圾末端處理方式主要采用哪幾種?（ABC）

A.填埋

B.焚燒

C.堆肥

D.資源利用

21.理論上講，可以回收的生活垃圾有幾種（BCD）

A.嚴(yán)重玷污的文字用紙和包裝用紙

B.金屬

C.塑料

D.玻璃

22.下列廢棄的瓶罐,哪種不屬于可回收物?

（BD）

A.玻璃瓶罐

B.陶瓷瓶罐

C.塑料瓶罐

D.廢舊衣物

23.城市生活垃圾去哪了?

（AC）

A.填埋場

B.中轉(zhuǎn)站

C.焚燒廠

D.垃圾桶

24.茶葉渣和家庭盆裁綠植廢棄物屬于哪類垃圾?

（BC）

A.不可回收垃圾

B.可回收垃圾

C.廚余垃圾

D.餐廚垃圾

25.我國城市生活垃圾中占比較多的有下列哪幾類?

（ABD）

A.廚余類有機垃圾，B.塑料包裝垃圾

C.家具類大件垃圾

D.家庭.E.有毒有害垃圾

26.城市生活垃圾處理的基本原則是。（ABCD）

A.全民動員,科學(xué)引導(dǎo)

B.綜合利用,變廢為寶

C.統(tǒng)籌規(guī)劃,合理布局

D.政府主導(dǎo),社會參與

27.目前，國際上對城市生活垃圾處理的方案主要有。（BCD）

A.簡單堆放

B.焚燒

C.衛(wèi)生填埋

D.生化處理

28.可回收物是指適宜回收和資源利用的垃圾，下列屬于可回收物的有。（ABD）

A.報紙

B.塑料玩具

C.廢舊電池

D.平板玻璃

29.根據(jù)我市生活垃圾分類的方法，能放置在紅色垃圾桶內(nèi)的廢棄垃圾有哪些?

（ABCD）

A.體溫表

B.衣領(lǐng)凈

C.洗面奶

D.油漆

30.下列屬于其他垃圾的是。(AB)

A.灰土

B.衛(wèi)生間廢紙

C.熒光燈管

D.織物

三、判斷題

1.大骨頭是廚余垃圾（×）

2.家庭用的洗發(fā)水和沐浴露的塑料瓶是可回收垃圾（√）

3.干殼果殼和果皮果殼都是廚余垃圾（×）

4.方便面盒屬于可回收垃圾（√）

5.平時我們提倡使用一次性筷子（×）

6.廚余垃圾是指賓館、飯店、單位食堂、供餐單位等產(chǎn)生的高水分垃圾，居民日常產(chǎn)生的剩菜剩飯等。（√）

7.垃圾回收有利于資源的循環(huán)利用（√）

8.垃圾分類，把廚余垃圾和可回收垃圾分出來，可減少35%以上的垃圾處理需求量，有效降低處理設(shè)施建設(shè)與可持續(xù)發(fā)展（√）

9.塑料瓶在土壤中的降解速度是70-80年（×）

10.灰塵塵土、衛(wèi)生間廢紙、金屬都屬于其他垃圾（×）

11.有害垃圾是指對人體或者環(huán)境造成危害的生活垃圾（√）

12.其他垃圾是除可回收垃圾、有害垃圾、廚房垃圾之外所有垃圾的總稱（√）

13.垃圾是一種很有很有開發(fā)價值的資源（√）

14.混合垃圾在收集、運輸和處理過程中容易發(fā)酵，產(chǎn)生甲硫醇、甲硫醚等氣體（√）

15.一次性餐具屬于有害垃圾（×）

16.被油污污染了的舊報紙是否是可回收物（×)

17.舊鞋子屬于可回收物（×)

18.泡沫屬于可回收物（√)

19.廢扣子電池屬于有害垃圾（√)

20.廢舊的球類屬于其他垃圾（√)

21.瓜果皮核、菜根菜頭屬于其他垃圾（×)

22.雞、鴨、魚等動物廢棄內(nèi)臟屬于其他垃圾

（×)

23.牛奶盒以及飲料盒也叫利樂包，利樂包屬于可回收物（√)

24.枯菱的水培植物和鮮花屬于其他垃圾（×)

25.產(chǎn)生的碎發(fā)、落發(fā)，屬于可回收垃圾（×）

26.快遞包裝需要把膠帶全撕下來，和紙箱分開投放（√）

27.包了口香糖、擦了鼻涕的紙巾是廚余垃圾（×）

28.裝咖啡、奶茶的紙杯，屬于可回收物（×）

29.被污染的塑料袋清洗干凈后是否屬于可回收物（√）

30.廢化妝品及其包裝物屬于其他垃圾（×）

31.32.

第三篇：17版高考生物分類題庫 知識點4 細(xì)胞呼吸與光合作用

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知識點4

細(xì)胞呼吸與光合作用

1.(2017·全國卷丙·T3)植物光合作用的作用光譜是通過測量光合作用對不同波長光的反應(yīng)(如O2的釋放)來繪制的。下列敘述錯誤的是()

A.類胡蘿卜素在紅光區(qū)吸收的光能可用于光反應(yīng)中ATP的合成B.葉綠素的吸收光譜可通過測量其對不同波長光的吸收值來繪制

C.光合作用的作用光譜也可用CO2的吸收速率隨光波長的變化來表示

D.葉片在640～660

nm波長光下釋放O2是由葉綠素參與光合作用引起的【解析】選A。類胡蘿卜素主要吸收藍(lán)紫光,不能吸收紅光,A項錯誤;通過測量葉綠素對不同波長光的吸收值,可以繪制其吸收光譜,B項正確;CO2的吸收速率反映光合作用速率的變化,光合作用的作用光譜也可用CO2的吸收速率隨光波長的變化來表示,C項正確;640～660

nm波長的光屬于紅光,葉綠素可以吸收紅光,將水分解成氧和[H],氧直接以分子的形式釋放出去,D項正確。

【易錯警示】本題易判斷A選項正確,錯因在于審題不仔細(xì),只注意了A選項的后半句“可用于光反應(yīng)中ATP的合成”,而忽略了前半句“類胡蘿卜素在紅光區(qū)吸收的光能”。

2.(2017·天津高考·T5)葉綠體中的色素為脂溶性,液泡中紫紅色的花青苷為水溶性。以月季成熟的紫紅色葉片為材料,下列實驗無法達(dá)到目的的是()

A.用無水乙醇提取葉綠體中的色素

B.用水做層析液觀察花青苷的色素帶

C.用質(zhì)壁分離和復(fù)原實驗探究細(xì)胞的失水與吸水

D.用光學(xué)顯微鏡觀察表皮細(xì)胞染色體的形態(tài)和數(shù)目

【解析】選D。葉綠體中的色素易溶于有機溶劑,可以用無水乙醇提取葉綠體中的色素;花青苷為水溶性,用水做層析液可以觀察花青苷的色素帶;月季成熟葉片具有紫紅色的大液泡,可以用于質(zhì)壁分離和復(fù)原實驗,探究細(xì)胞的失水與吸水;表皮細(xì)胞高度分化,不再進(jìn)行有絲分裂,不能用光學(xué)顯微鏡觀察染色體的形態(tài)和數(shù)目。

3.(2017·天津高考·T6)某突變型水稻葉片的葉綠素含量約為野生型的一半,但固定CO2酶的活性顯著高于野生型。下圖顯示兩者在不同光照強度下的CO2吸收速率。敘述錯誤的是()

A.光照強度低于P時,突變型的光反應(yīng)強度低于野生型

B.光照強度高于P時,突變型的暗反應(yīng)強度高于野生型

C.光照強度低于P時,限制突變型光合速率的主要環(huán)境因素是光照強度

D.光照強度高于P時,限制突變型光合速率的主要環(huán)境因素是CO2濃度

【解析】選D。題圖中光照強度低于P時,突變型CO2吸收速率低于野生型,原因是突變型葉綠素含量較低,吸收光的能力較弱,光反應(yīng)強度低于野生型,A項正確;光照強度高于P時,突變型CO2吸收速率大于野生型,原因是突變型固定CO2酶的活性顯著高于野生型,導(dǎo)致暗反應(yīng)強度高于野生型,B項正確;光照強度低于P時,突變型光合速率隨光照強度增加而增加,限制突變型光合速率的主要環(huán)境因素是光照強度,C項正確;光照強度高于P時,在達(dá)到光飽和點以前,突變型光合速率仍隨光照強度增加而增加,此時限制突變型光合速率的主要環(huán)境因素仍是光照強度,D項錯誤。

【方法規(guī)律】曲線圖中限制因素的判斷方法

(1)曲線上升階段:縱坐標(biāo)隨橫坐標(biāo)增加而增加,限制因素為橫坐標(biāo)代表的物理量(橫坐標(biāo)為時間時,限制因素不是時間,而是隨時間變化而變化的溫度或光照等環(huán)境因素)。

(2)曲線水平階段:縱坐標(biāo)不再隨橫坐標(biāo)增加而增加,限制因素為橫坐標(biāo)以外的物理量。

4.(2017·北京高考·T2)某植物光合作用、呼吸作用與溫度的關(guān)系如圖。據(jù)此,對該植物生理特性理解錯誤的是()

A.呼吸作用的最適溫度比光合作用的高

B.凈光合作用的最適溫度約為25℃

C.在0～25℃范圍內(nèi),溫度變化對光合速率的影響比對呼吸速率的大

D.適合該植物生長的溫度范圍是10～50℃

【解題指南】解答本題時需要關(guān)注兩點:

(1)圖解中曲線最高點對應(yīng)的溫度表示最適溫度。

(2)植物生長的必需條件是凈光合速率大于0。

【解析】選D。由圖分析知,呼吸作用的最適溫度是55℃左右,光合作用的最適溫度是30℃左右,A項正確。當(dāng)溫度約為25℃時,CO2的凈吸收量最大,所以該溫度為凈光合作用的最適溫度,B項正確。根據(jù)總光合速率、呼吸速率與溫度關(guān)系圖可知,0～25℃范圍內(nèi),總光合速率增加程度比呼吸速率大,溫度對光合速率影響比呼吸速率大,C項正確。超過45℃時凈光合速率為負(fù)值,沒有有機物積累,植物不能正常生長,D項錯誤。

5.(2017·全國卷甲·T29)下圖是表示某植物葉肉細(xì)胞光合作用和呼吸作用的示意圖。

據(jù)圖回答下列問題:

(1)圖中①、②、③、④代表的物質(zhì)依次是、、、,[H]代表的物質(zhì)主要是。

(2)B代表一種反應(yīng)過程,C代表細(xì)胞質(zhì)基質(zhì),D代表線粒體,則ATP合成發(fā)生在A過程,還發(fā)生在(填“B和C”“C和D”或“B和D”)。

(3)C中的丙酮酸可以轉(zhuǎn)化成酒精,出現(xiàn)這種情況的原因是。

【解析】(1)據(jù)題圖分析可知,①為水光解的產(chǎn)物之一,應(yīng)為O2;②為NADPH還原C3后的產(chǎn)物,應(yīng)為NADP+;③為ATP的水解產(chǎn)物,應(yīng)為ADP和Pi;④為CO2固定的反應(yīng)物,應(yīng)為C5;[H]所表示的物質(zhì)為還原型輔酶Ⅰ,即NADH。

(2)題圖中A過程為光反應(yīng),B過程為暗反應(yīng),ATP合成發(fā)生在A過程;在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中進(jìn)行有氧呼吸第一階段,線粒體內(nèi)進(jìn)行有氧呼吸第二、三階段,這三個階段都有ATP的合成。

(3)在無氧條件下,植物細(xì)胞進(jìn)行無氧呼吸,第一階段葡萄糖分解為丙酮酸,第二階段丙酮酸分解為酒精和CO2。

答案:(1)O2　NADP+　ADP+Pi　C5　NADH(或答:還原型輔酶Ⅰ)

(2)C和D(3)在缺氧條件下進(jìn)行無氧呼吸

6.(2017·全國卷乙·T30)植物的CO2補償點是指由于CO2的限制,光合速率與呼吸速率相等時環(huán)境中的CO2濃度。已知甲種植物的CO2補償點大于乙種植物的?；卮鹣铝袉栴}:

(1)將正常生長的甲、乙兩種植物放置在同一密閉小室中,適宜條件下照光培養(yǎng)。培養(yǎng)后發(fā)現(xiàn)兩種植物的光合速率都降低,原因是。甲種植物凈光合速率為0時,乙種植物凈光合速率(填“大于0”“等于0”或“小于0”)。

(2)若將甲種植物密閉在無O2、但其他條件適宜的小室中,照光培養(yǎng)一段時間后,發(fā)現(xiàn)植物的有氧呼吸增加,原因是。

【解題指南】(1)關(guān)鍵信息:“甲種植物的CO2補償點大于乙種植物的”“密閉小室中,適宜條件下照光”。

(2)關(guān)鍵知識:CO2濃度變化對光合作用的影響;光合作用與有氧呼吸的關(guān)系。

【解析】本題主要考查了影響光合作用、有氧呼吸因素的相關(guān)知識。

(1)將正常生長的甲、乙兩種植物放入同一密閉小室中,適宜條件下給予光照,甲、乙兩種植物都進(jìn)行光合作用,當(dāng)光合作用吸收的CO2大于呼吸作用釋放的CO2量時,密閉小室中的CO2濃度逐漸下降,受CO2濃度的制約,光合作用速率也隨之降低。當(dāng)密閉小室中CO2濃度下降到CO2補償點時,植物的光合速率等于呼吸速率,凈光合速率為0。因為甲種植物CO2補償點大于乙種植物,所以當(dāng)密閉小室中CO2濃度達(dá)到甲種植物CO2補償點時,乙種植物光合速率大于呼吸速率,即凈光合速率大于0。

(2)若將甲種植物密閉在無O2、但其他條件適宜的小室中,給予光照,甲種植物可進(jìn)行光合作用,通過光合作用釋放了O2,O2與NADH反應(yīng)生成水,這是有氧呼吸的第三階段。故光合作用產(chǎn)生O2增多時,使細(xì)胞的有氧呼吸增加。

答案:(1)植物在光下光合作用吸收CO2的量大于呼吸作用釋放CO2的量,使密閉小室中CO2濃度降低,光合速率也隨之下降　大于0

(2)甲種植物在光下光合作用釋放的O2使密閉小室中O2增加,而O2與有機物分解產(chǎn)生的NADH發(fā)生作用形成水是有氧呼吸的一個環(huán)節(jié),所以當(dāng)O2增多時,有氧呼吸會增加

7.(2017·江蘇高考·T29)科研人員對獼猴桃果肉的光合色素、光合放氧特性進(jìn)行了系列研究。圖1為光合放氧測定裝置示意圖,圖2為不同光照條件下果肉隨時間變化的光合放氧曲線。請回答下列問題:

(1)取果肉薄片放入含乙醇的試管,并加入適量　　　　　　,以防止葉綠素降解。長時間浸泡在乙醇中的果肉薄片會變成白色,原因是。

(2)圖1中影響光合放氧速率的因素有。氧電極可以檢測反應(yīng)液中氧氣的濃度,測定前應(yīng)排除反應(yīng)液中　　　　　的干擾。

(3)圖1在反應(yīng)室中加入NaHCO3的主要作用是。若提高反應(yīng)液中NaHCO3濃度,果肉放氧速率的變化是(填“增大”、“減小”、“增大后穩(wěn)定”或“穩(wěn)定后減小”)。

(4)圖2中不同時間段曲線的斜率代表光合放氧的速率,對15～20

min曲線的斜率幾乎不變的合理解釋是;若在20

min后停止光照,則短時間內(nèi)葉綠體中含量減少的物質(zhì)有(填序號:①C5　?、贏TP　　③[H]　?、蹸3),可推測20

～25

min曲線的斜率為(填“正值”、“負(fù)值”或“零”)。

【解析】(1)提取色素時,加入CaCO3可防止葉綠素降解。由于色素能溶解在乙醇中,所以長時間浸泡在乙醇中的果肉薄片會變成白色。(2)影響光合作用的因素主要有光照、溫度、二氧化碳濃度、水和礦質(zhì)元素含量,而圖中含水豐富,所以圖中影響光合放氧速率的因素有光照、溫度、CO2(NaHCO3)濃度。要檢測反應(yīng)液中氧氣的濃度,應(yīng)排除反應(yīng)液中溶解氧的干擾,所以測定前應(yīng)排出反應(yīng)液中的溶解氧。(3)裝置中的NaHCO3可為果肉提供CO2,提高反應(yīng)液中NaHCO3濃度,CO2濃度就增大,在一定范圍內(nèi)果肉放氧速率增大,當(dāng)達(dá)到CO2飽和點后,果肉放氧速率不再隨CO2濃度增大而變化。(4)圖2中不同時間段曲線的斜率代表光合放氧的速率,而15～20

min曲線的斜率幾乎不變,說明這個時間段內(nèi)凈光合速率為0,即該時間段內(nèi)的光合產(chǎn)氧量與呼吸耗氧量相等。若在20

min后停止光照,光反應(yīng)停止,因此沒有②ATP和③[H]的產(chǎn)生。短時間內(nèi)C5與CO2反應(yīng)生成C3的速率不變,由于②ATP和③[H]的含量減少,C3被還原成C5的速率下降,導(dǎo)致C5含量減少。停止光照后,只有呼吸作用消耗氧氣,沒有光合作用產(chǎn)生氧氣,所以可推測20～25

min曲線的斜率為負(fù)值。

答案:(1)CaCO3　光合色素溶解在乙醇中(2)光照、溫度、CO2(NaHCO3)濃度　溶解氧(3)提供CO2　增大后穩(wěn)定(4)光合產(chǎn)氧量與呼吸耗氧量相等?、佗冖邸∝?fù)值

第四篇：中科院上海細(xì)胞庫各種細(xì)胞分類總結(jié)

中科院上海細(xì)胞庫 1.肝癌細(xì)胞

BEL-7402 TCHu 10 人肝癌細(xì)胞 450元

HCCC-9810 TCHu 17 人膽管細(xì)胞型肝癌細(xì)胞 450元 QGY-7701 TCHu 42 人肝癌細(xì)胞 450元 QGY-7703 TCHu 43 人肝癌細(xì)胞 450元 SMMC-7721 TCHu 52 人肝癌細(xì)胞 450元 BEL-7404 TCHu 64 人肝癌細(xì)胞 450元 BEL-7405 TCHu 65 人肝癌細(xì)胞 450元 Hep G2 TCHu 72 人肝癌細(xì)胞 800元

HCCLM3(人高轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞)TCHu 94 人高轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞 面議 Hep 3B2.1-7 TCHu106 人肝癌細(xì)胞 800元 SK-HEP-1 TCHu109 人肝癌細(xì)胞 1000元

PLC/PRF/5 TCHu119 人肝癌亞力山大細(xì)胞 1000元 Hepa 1-6 TCM30 小鼠肝癌細(xì)胞 450元 CBRH-7919 TCR 2 大鼠肝癌細(xì)胞 450元 RH-35 TCR 4 大鼠肝癌細(xì)胞 450元

2.腎癌細(xì)胞

786-O [786-0] TCHu 3 人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞 450元

KP-N-NS TCHu 30 人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞(腦轉(zhuǎn)移)450元 OS-RC-2 TCHu 40 人腎癌細(xì)胞 450元

SW-13 TCHu 54 人腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞 450元 PC-12 TCR 3 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞 800元

3.膀胱癌細(xì)胞

5637 TCHu 1 人膀胱癌細(xì)胞 450元 T24 TCHu 55 人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞 450元 SCaBER TCHu 76 人膀胱鱗癌細(xì)胞 450元

4.胃癌細(xì)胞

AGS TCHu 7 人胃腺癌細(xì)胞 450元

BGC-823 TCHu 11 人胃腺癌細(xì)胞（低分化）450元 HGC-27 TCHu 22 人胃癌細(xì)胞（未分化）450元 SGC-7901 TCHu 46 人胃腺癌細(xì)胞 450元 MGC80-3 TCHu 84 人胃癌細(xì)胞 450元

5.結(jié)腸癌細(xì)胞

COLO-320 TCHu 14 人結(jié)腸腺癌細(xì)胞 450元 CW-2 TCHu 15 人結(jié)腸腺癌細(xì)胞 450元 LS 174T TCHu 32 人結(jié)腸腺癌細(xì)胞 450元 Caco-2 TCHU 66 人結(jié)腸腺癌細(xì)胞 450元 HCT-8 [HRT-18] TCHu 18 人回盲腸癌細(xì)胞 450元

6.胰腺癌細(xì)胞

AsPC-1 TCHu 8 人轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細(xì)胞 450元 BxPC-3 TCHu 12 人原位胰腺腺癌細(xì)胞 450元 PANC-1 TCHu 98 人胰腺癌細(xì)胞 1000元 CFPAC-1 TCHu112 人胰腺癌細(xì)胞 1000元

7.骨

U-2 OS TCHu 88 人骨肉瘤細(xì)胞 450元 Saos-2 TCHu114 人成骨肉瘤細(xì)胞 1000元 MG-63 TCHu124 人骨肉瘤細(xì)胞 1000元 SW 1353 TCHu128 人骨肉瘤細(xì)胞 1000元 P3X63Ag8 TCM 9 小鼠骨髓瘤細(xì)胞 450元 P3X63Ag8.653 TCM10 小鼠骨髓瘤細(xì)胞 450元 SP2/0 TCM18 小鼠骨髓瘤細(xì)胞 450元

P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] TCM25 小鼠骨髓瘤細(xì)胞 450元 FO TCM31 小鼠骨髓瘤細(xì)胞 1000元

8.白血病細(xì)胞

6T-CEM TCHu 2 人T細(xì)胞白血病細(xì)胞 450元 HL-60 TCHu 23 人原髓細(xì)胞白血病細(xì)胞 1000元 HuT 78 TCHu 27 人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞 450元 K-562 TCHu 29 人慢性髓原白血病細(xì)胞 450元

MOLT-4 TCHu 37 人急性淋巴母細(xì)胞白血病細(xì)胞 450元 THP-1 TCHu 57 人單核細(xì)胞白血病 800元 Dami TCHu 68 人巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞 450元 HEL TCHu 71 人紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞 450元 MEG-01 TCHu 83 人成巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞 450元 A3 TCHu 96 人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞 1000元 KG-1 TCHu105 人白血病細(xì)胞 800元 L6565 TCM 6 小鼠白血病克隆細(xì)胞系 450元

RAW 264.7 TCM13 小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞 1000元 L1210 TCM22 小鼠白血病細(xì)胞 800元 RBL-2H3 TCR 7 大鼠 嗜堿性細(xì)胞白血病細(xì)

9.前列腺癌細(xì)胞

LNCaP clone FGC [LNCaP.FGC] TCHu 31 人前列腺癌細(xì)胞 450元 PC-3 TCHu 41 人前列腺癌細(xì)胞 450元 DU 145 TCHu 80 人前列腺癌細(xì)胞 450元 22RV1 TCHu100 人前列腺癌細(xì)胞 800元 RM-1 TCM14 小鼠前列腺癌細(xì)胞 450元

10.乳腺癌細(xì)胞 Bcap-37 TCHu 9 人乳腺癌細(xì)胞 450元 MDA-MB-453 TCHu 35 人乳腺癌細(xì)胞 450元 MDA-MB-435S TCHu 36 人乳腺導(dǎo)管癌 1000元 SK-BR-3 TCHu 49 人乳腺腺癌細(xì)胞 450元 ZR-75-30 TCHu 60 人乳腺癌細(xì)胞 450元 MCF7 [MCF-7] TCHu 74 人乳腺癌細(xì)胞 800元 T-47D TCHu 87 人乳腺管癌細(xì)胞 450元 BT-549 TCHu 93 人乳腺管癌細(xì)胞 450元 MDA-MB-231 TCHu104 人乳腺癌細(xì)胞 800元 MDA-MB-468 TCHu120 人乳腺癌細(xì)胞 1000元 ZR-75-1 TCHu126 人乳腺癌細(xì)胞 1000元 Hs 578T TCHu127 人乳腺癌細(xì)胞 1000元

10.卵巢癌細(xì)胞

HO-8910 TCHu 24 人卵巢癌細(xì)胞 450元 HO-8910 TCHu 24 人卵巢癌細(xì)胞 450元

HO-8910PM TCHu 25 人高轉(zhuǎn)移卵巢癌細(xì)胞 450元 SK-OV-3 TCHu107 人卵巢癌細(xì)胞 450元 NIH:OVCAR-3 TCHu108 人卵巢癌細(xì)胞 450元 ES-2 TCHu111 人卵巢透明細(xì)胞癌 1000元

11.腦

Neuro-2a [N2a;Neuro-2a] TCM29 小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞 800元 C6 TCR 1 大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞 1000元 SHG-44 TCHu 48 人膠質(zhì)瘤細(xì)胞 450元 U251 TCHu 58 人膠質(zhì)瘤細(xì)胞 450元 A172 TCHu 95 人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 450元

12.絨毛癌細(xì)胞

JAR TCHu 28 人胎盤絨毛癌細(xì)胞 450元

13.鼻咽癌細(xì)胞

CNE TCHu 13 人鼻咽癌細(xì)胞 450元 FaDu TCHu130 人 咽鱗癌細(xì)胞 1000元

14.膽囊癌

GBC-SD TCHu 16 人膽囊癌細(xì)胞 450元

HCCC-9810 TCHu 17 人膽管細(xì)胞型肝癌細(xì)胞 450元

15.黑色素瘤細(xì)胞

A-375 [A375] TCHu 4 人惡性黑色素瘤細(xì)胞 450元 B16 TCM 2 小鼠黑色素瘤細(xì)胞 450元

16.宮頸癌 HeLa TCHu 19 人宮頸癌細(xì)胞 800元 HeLa 229 TCHu 20 人宮頸癌細(xì)胞 450元

HCC 94 [HCC941122] TCHu 81 人子宮鱗癌細(xì)胞（高分化）450元 SiHa TCHu113 人子宮頸鱗癌細(xì)胞 1000元 HEC-1-B TCHu115 人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞 1000元

17.食管癌

Eca-109 TCHu 69 人食管癌細(xì)胞 450元 TE-10 TCHu 90 人食管癌細(xì)胞 450元 TE-11 TCHu 91 人食管癌細(xì)胞 450元

18.淋巴瘤

Raji TCHu 44 人Burkitt''s淋巴瘤細(xì)胞 450元 U-937 TCHu 59 人組織細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞 1000元 NAMALWA TCHu 75 人Burkitt''s淋巴瘤細(xì)胞 450元 EL4 TCM 3 小鼠淋巴瘤細(xì)胞 450元 P388D1 TCM11 小鼠淋巴樣瘤細(xì)胞 450元 EL4.IL-2 TCM21 小鼠淋巴瘤細(xì)胞 450元 YAC-1 TCM28 小鼠淋巴瘤細(xì)胞 450元

19.舌癌

Tca-8113 TCHu 77 人舌鱗癌細(xì)胞 450元 TE-1 TCHu 89 人舌鱗癌細(xì)胞 450元

20.甲狀腺癌

TT TCHu 78 人甲狀腺導(dǎo)管癌細(xì)胞 1000元

SW579 [SW 579;SW-579] TCHu125 人甲狀腺鱗癌細(xì)胞 1000元

21.胸腺

SMC-1 TCHu 85 人胸膜瘤細(xì)胞 450元

22.睪丸

MLTC-1 TCM 8 小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞 450元

22.肺癌

A549 [A-549] TCHu 5 人肺癌細(xì)胞 800元 LTEP-a-2 TCHu 33 人肺腺癌細(xì)胞 450元 Lu-165 TCHu 34 人肺腺癌細(xì)胞 450元

NCI-H446 [H446] TCHu 38 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 450元 NCI-H460 [H460] TCHu 39 人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞 450元 SPC-A-1 TCHu 53 人肺腺癌細(xì)胞 450元 95-D TCHu 61 人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞 450元 Calu-3 TCHu 67 人肺腺癌(胸膜滲出液)450元 QG-56 TCHu 92 人肺扁平上皮癌細(xì)胞 450元 SK-MES-1 TCHu110 人肺鱗癌細(xì)胞 1000元 NCI-H661 TCHu121 人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞 1000元 NCI-H292 TCHu122 人肺癌細(xì)胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移)1000元 LLC TCM 7 小鼠肺癌細(xì)胞 450元

第五篇：細(xì)胞原理總結(jié)題庫

1細(xì)胞培養(yǎng)：從活的機體中取出組織或細(xì)胞，分散成單個細(xì)胞，模擬機體內(nèi)的生長條件，在體外建立無菌、適溫和一定營養(yǎng)條件等，使其在體外環(huán)境中繼續(xù)生長繁殖的過程，并維持其結(jié)構(gòu)和功能的技術(shù)。2凈化工作間設(shè)計標(biāo)準(zhǔn)為萬級

3消毒：殺死病原微生物，但不一定能殺死細(xì)菌芽孢的方法，通常用化學(xué)的方法來達(dá)到消毒的作用，用于消毒的化學(xué)藥物叫做消毒劑。

4滅菌：把物理上所有的微生物全部殺死的方法，通常用物理的方法來到達(dá)滅菌的目的。

5貼壁依賴型細(xì)胞分為4型：成纖維細(xì)胞型、上皮細(xì)胞型、游走細(xì)胞型、多型細(xì)胞型

6傳代培養(yǎng)：體外生長的培養(yǎng)細(xì)胞受營養(yǎng)條件、生長空間等因素的限制，當(dāng)細(xì)胞增殖達(dá)到一定密度后，則需要分離出一部分細(xì)胞和更新培養(yǎng)液進(jìn)行擴大培養(yǎng)的過程。

7細(xì)胞活力：活細(xì)胞占總細(xì)胞的百分比 8凍存和復(fù)蘇的原則：慢凍快融

9細(xì)胞凍存常用保護(hù)劑為DMSO，它是一種滲透性保護(hù)劑

10細(xì)胞污染和檢測方法：肉眼直接觀察法、培養(yǎng)檢查法、顯微鏡觀察法、PCR檢測

11支原體污染的處理：用MRA處理細(xì)胞、清洗純化法、藥物輔助加溫處理、使用支原體特異性血清

12原代培養(yǎng)：從體內(nèi)取出組織接種培養(yǎng)到第一次傳代階段，完成了從體內(nèi)環(huán)境到體外環(huán)境的過渡和適應(yīng)過程，恢復(fù)了分裂增殖和生長發(fā)育的能力

13實體組織形成細(xì)胞懸液的方法：機械分散法、消化分離法（上皮細(xì)胞和肝細(xì)胞）、貼塊培養(yǎng)法（血管平滑肌細(xì)胞）

14懸浮細(xì)胞分離方法（淋巴細(xì)胞）：密度梯度離心

15原代細(xì)胞的純化：自然純化和人工純化（酶消化法、反復(fù)貼壁法、培養(yǎng)及限定方法、流式分選）

16動物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)方式：分批式培養(yǎng)、流加式培養(yǎng)、半連續(xù)式培養(yǎng)、連續(xù)式培養(yǎng)

17流式細(xì)胞術(shù)：高能量激光照射高速流動狀態(tài)下被熒光色素染色的單細(xì)胞或顆粒，測量其產(chǎn)生的散射光和發(fā)射熒光的強度，從而對細(xì)胞進(jìn)行快速多參數(shù)定性或定量檢測和分選的一種細(xì)胞分析技術(shù)。

18流式細(xì)胞儀：以流式細(xì)胞術(shù)為理論基礎(chǔ)，是集流體力學(xué)、激光技術(shù)、電子工程學(xué)、單克隆抗體技術(shù)、細(xì)胞熒光化學(xué)和計算機等學(xué)科知識為一體的高科技細(xì)胞分析儀。

19流式細(xì)胞儀特點：單個細(xì)胞分析、同時多參數(shù)分析、速度快（10000個/S）、統(tǒng)計學(xué)意義（提供細(xì)胞群體的均值和分布情況）、分選感興趣的細(xì)胞 20流式細(xì)胞術(shù)對照的設(shè)置：

空白對照（自發(fā)熒光/本底熒光）：未染色細(xì)胞

同型/獨特型對照：抗原抗體之間是否特異性結(jié)合，排除非特異結(jié)合 補償對照：多色分析時做每種熒光素單獨染色的細(xì)胞 陽性對照：確定操作過程的正確性

21熒光補償：利用電子技術(shù)活計算機軟件等方法將串入相鄰熒光通道的信號加以扣除的技術(shù) 22流式細(xì)胞儀數(shù)據(jù)顯示方式：單參數(shù)直方圖、雙參數(shù)二維點圖、等高線圖、密度圖

23細(xì)胞增殖檢測技術(shù)：

直接計數(shù)：優(yōu)點：不需要特定的試劑和儀器、準(zhǔn)確。缺點：不適合樣品數(shù)量多的情況、不適合評估特定的亞群

胸腺嘧啶核苷摻入法（3H—TdR）：優(yōu)點：敏感性高、客觀性好、重復(fù)性好。缺點：但需要一定設(shè)備條件，存在放射性核素污染的問題

5溴脫氧尿嘧啶核苷（Brdu）檢測法：優(yōu)點：不僅能用于體外實驗，還能用于活體實驗。缺點：Brdu需要變性DNA后才能與抗體結(jié)合，破壞DNA雙鏈結(jié)構(gòu)，影響其它染料結(jié)合染色，導(dǎo)致染色彌散，準(zhǔn)確性降低等問題

羥基熒光素二醋酸鹽琥珀酰亞胺脂（CFSE）檢測法：進(jìn)入細(xì)胞后不可逆地與氨基結(jié)合偶聯(lián)到細(xì)胞蛋白質(zhì)上，當(dāng)細(xì)胞分裂時，CFSE標(biāo)記熒光可平均分配至兩個子代細(xì)胞，其熒光強度是親代的一半，在一個增殖的細(xì)胞群中，各連續(xù)代細(xì)胞的熒光強度呈對遞減。

MTT檢測法：線粒體內(nèi)的脫氫酶可將黃色的MTT分解成紫色的水不溶性的甲瓚，并沉積在細(xì)胞中，死細(xì)胞無此功能，MTT結(jié)晶形成的量與細(xì)胞數(shù)和細(xì)胞活力呈正比

CCK8：優(yōu)點：a使用方便，省去了洗滌細(xì)胞，不需要放射性同位素和有機溶劑b快速檢測c靈敏度很高d重復(fù)性優(yōu)于MTT法e細(xì)胞毒性小f檢測試劑無需預(yù)制，即開即用。缺點：a價格比較貴b CCK8試劑為淡紅色，與含酚紅的培養(yǎng)基顏色相近，容易漏加或多加

Ki67（增殖細(xì)胞核抗原）：核增殖標(biāo)志物，無組織特異性，可靠、迅速反映增殖率

24細(xì)胞凋亡檢測技術(shù)：

形態(tài)學(xué)檢測：吉姆薩染色、瑞氏染色、Hoechst33342、Hoechst33258、DAPI Annexin V：凋亡細(xì)胞磷脂酰絲氨酸外翻到細(xì)胞膜外，Annexin V是一種鈣離子依賴的磷脂結(jié)合蛋白

PI（碘化丙啶）染色：溴化乙錠的類似物，嵌入雙鏈DNA后釋放紅色熒光，DNA染色的細(xì)胞核染色試劑，常用于細(xì)胞凋亡檢測，能穿過破損的細(xì)胞膜而對核染色。DNA Fragmentation：凋亡細(xì)胞DNA在核小體間發(fā)生有規(guī)律的斷裂，出現(xiàn)180—200bp的DNA片段，壞死細(xì)胞DNA斷裂為無特征的DNA片段，進(jìn)行瓊脂糖電泳可區(qū)分凋亡和壞死。

TUNEL（脫氧核糖核酸酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法）：細(xì)胞凋亡染色體DNA雙鏈或單鏈斷裂產(chǎn)生大量的粘性3—OH末端，可在脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶的作用下，將脫氧核糖核苷酸和熒光素、過氧化物酶、堿性磷酸酶或生物素形成的衍生物標(biāo)記到DNA的3末端，從而進(jìn)行凋亡細(xì)胞的檢測。線粒體膜電位：親脂性陽離子熒光染料可結(jié)合到線粒體基質(zhì)，其熒光的增強和減弱說明線粒體內(nèi)膜電負(fù)性的增高和降低（熒光顯微鏡檢測、FACS檢測）細(xì)胞色素C釋放：凋亡細(xì)胞中細(xì)胞色素C從線粒體向胞質(zhì)釋放（分別抽提線粒體組分和細(xì)胞質(zhì)組分，用抗細(xì)胞色素C的抗體進(jìn)行western-blot分析，可發(fā)現(xiàn)細(xì)胞色素C由線粒體向細(xì)胞質(zhì)轉(zhuǎn)位）Caspase活性：Caspase3正常以酶原形式存在于胞漿中，在凋亡的早期階段被激活，可經(jīng)western-blot分析

25組織工程：應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)和工程學(xué)原理，將人體某部分的組織細(xì)胞種植和吸附在一種生物材料的支架上進(jìn)行人工培養(yǎng)繁殖、擴增，然后移植到人體內(nèi)所需要的部位，從而達(dá)到器官修復(fù)或再造的治療目的的一種技術(shù)。26組織工程3個支柱：種子細(xì)胞、生長因子、生長支架。27組織構(gòu)建主要有3種方式：

體內(nèi)構(gòu)建：種子細(xì)胞與生物材料復(fù)合后，組織尚未完全形成時即植入體內(nèi)，組織形成與生物材料降解在體內(nèi)完成。

體外構(gòu)建：在體外模擬體內(nèi)環(huán)境，應(yīng)用生物反應(yīng)器形成組織和器官。原位組織構(gòu)建：單純植入生物材料支架于體內(nèi)組織缺損部位，依靠周圍組織細(xì)胞遷移并粘附于生物材料支架，形成并再生組織，這種方式并非經(jīng)典的組織工程概念。

28干細(xì)胞的主要特征：圓形或橢圓形、較高的端粒酶活性、增殖緩慢（機體需要時進(jìn)入分化）、穩(wěn)定增殖（維持自身數(shù)目）29干細(xì)胞維持自穩(wěn)性的機制：不對稱分裂

30胚胎干細(xì)胞：從胚胎著床前胚胎的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)經(jīng)體外分化抑制培養(yǎng)分離的一種全能性細(xì)胞，可以分化成任何一種組織類型的細(xì)胞。

31胚胎干細(xì)胞的分離方法：免疫法、組織培養(yǎng)法、顯微分離法 32 iPS細(xì)胞與ES細(xì)胞的異同：

相同：表達(dá)相同的多能性marker、全基因組比對幾乎相同、都可以培育出小鼠個體

不同：定向分化能力有強弱

iPS細(xì)胞的優(yōu)勢：不用破壞胚胎，無倫理爭議、不需卵細(xì)胞，來源廣泛、無免疫排斥、可作為研究疾病的模型。

34轉(zhuǎn)染：將外源分子（DNA、RNA）導(dǎo)入真核細(xì)胞的技術(shù)。

35轉(zhuǎn)染的方法：磷酸鈣共沉淀法、DEAE—葡聚糖法、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法、納米顆粒作為載體的轉(zhuǎn)染、電穿孔法、顯微注射法、病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染。36轉(zhuǎn)染方法優(yōu)缺點比較： 電穿孔法：

優(yōu)點：轉(zhuǎn)染效率較高。缺點：需要昂貴的儀器，對細(xì)胞的損傷較大（需要更多的細(xì)胞和DNA）顯微注射法：

優(yōu)點：轉(zhuǎn)外源基因沒有長度上的限制，目前已證明數(shù)百kb DNA片段均能成功。缺點：設(shè)備昂貴、操作技術(shù)需要長時間練習(xí)、每次只能注射有限的細(xì)胞、不適合大量轉(zhuǎn)染細(xì)胞的需要。磷酸鈣共沉淀法：

優(yōu)點：便宜、對某些細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率高。缺點：細(xì)胞有限制性、重復(fù)性不佳、微小pH改變會導(dǎo)致轉(zhuǎn)染的失敗 DEAE—葡聚糖法：

優(yōu)點：簡單、重復(fù)性比磷酸鈣共沉淀法好、可轉(zhuǎn)染貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞。缺點：濃度高時有一定細(xì)胞毒性、不適用于穩(wěn)定轉(zhuǎn)染、轉(zhuǎn)染時要除掉血清。脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法： 優(yōu)點：適用于把DNA轉(zhuǎn)入懸浮和貼壁培養(yǎng)細(xì)胞，可用于瞬轉(zhuǎn)和穩(wěn)轉(zhuǎn)、轉(zhuǎn)入效率高，比磷酸鈣法高5—100倍、能夠轉(zhuǎn)染DNA和RNA、轉(zhuǎn)染的穩(wěn)定性好，可重復(fù)性高。缺點：價格較貴，不適合大批量轉(zhuǎn)染、陽離子脂質(zhì)體對細(xì)胞毒性較高，可能干擾細(xì)胞代謝。病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染： 腺病毒載體：

優(yōu)點：插入DNA片段較長、宿主范圍廣，可感染分裂細(xì)胞和非分裂細(xì)胞、對人致病性低、不整合到染色體上，無插入致突變性、能同時表達(dá)多個基因、與人類基因同源，蛋白產(chǎn)物能有效折疊和修飾、能有效進(jìn)行增殖，滴度高，外源基因表達(dá)效率高、病毒顆粒穩(wěn)定，易于濃縮和純化。缺點：表達(dá)時間短，需反復(fù)刺激、具有免疫原性，可能刺激宿主。逆轉(zhuǎn)錄病毒載體：

優(yōu)點：能夠整合到宿主細(xì)胞、產(chǎn)生假病毒。

缺點：只能感染能夠分裂的細(xì)胞、整合的時候會導(dǎo)致宿主基因組突變、有潛在致瘤性。

慢病毒載體：

優(yōu)點：分裂細(xì)胞和非分裂細(xì)胞均能感染、能夠整合到基因組、免疫原性弱 缺點：整合時同樣有可能導(dǎo)致宿主基因組突變。

37轉(zhuǎn)染效率檢測方法：免疫熒光、流式、western、PCR 38瞬時轉(zhuǎn)染：外源基因進(jìn)入受體細(xì)胞后，存在于游離的載體上，不整合到細(xì)胞的染色體上。外源基因?qū)爰?xì)胞1-2天后收獲細(xì)胞進(jìn)行檢測和分析，一個宿主細(xì)胞可同時存在多個拷貝數(shù)，產(chǎn)生高水平的表達(dá)。39穩(wěn)定轉(zhuǎn)染：DNA整合到宿主細(xì)胞的染色體，外源DNA整合到染色體上的概率很小，大約1/104轉(zhuǎn)染細(xì)胞能整合。通常需要一些選擇性標(biāo)記反復(fù)篩選，得到穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的同源細(xì)胞系。

40穩(wěn)定轉(zhuǎn)染常用的篩選藥物：G418、zeocin、Puromycin 41影響細(xì)胞轉(zhuǎn)染的主要因素：細(xì)胞狀態(tài)、血清、DNA質(zhì)量、轉(zhuǎn)染技術(shù)

42同源重組：將外源基因轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞染色體上的方法，因為在該座位有與導(dǎo)入基因同源的序列，通過單一或雙交換，新基因片段可替換有缺陷的基因片段，達(dá)到修正缺陷基因的目的。

43位點特異性重組：發(fā)生在兩條DNA鏈特異位點上的重組，重組的發(fā)生需要一段同源序列即特異性位點（又稱附著點att）和位點特異性的蛋白因子即重組酶參與催化。

44基因打靶技術(shù)：利用DNA同源重組的原理，在基因組中某一特定部位進(jìn)行定點的基因重組，是研究基因功能的有效手段。包括基因敲除和基因敲入。

45反義核苷酸技術(shù)：經(jīng)人工合成和構(gòu)建的反義表達(dá)載體表達(dá)的寡核苷酸片段，長度多為15-30個核苷酸，通過堿基互補配對原理，與目的基因DNA或mRNA結(jié)合。

46鋅指核酸酶技術(shù)：識別并結(jié)合指定的位點，高效且精確地切斷靶DNA。隨后細(xì)胞利用天然的DNA修復(fù)過程—同源定向修復(fù)或非同源末端連接來治愈靶DNA的斷裂，就能夠進(jìn)行基因組編輯，包括基因修復(fù)、基因刪除和定向的基因添加。（效率高、可構(gòu)建knockout細(xì)胞、周期短、價格上沒有優(yōu)勢）47 TALEN（轉(zhuǎn)錄激活子樣效應(yīng)因子核酸酶）：一種人工核酸酶，是用于定向基因打靶的一種新技術(shù)，由轉(zhuǎn)錄激活子樣效應(yīng)因子和核酸酶構(gòu)成。

TALEN基因敲除基本流程：a確定靶點b TAL靶點識別域的克隆構(gòu)建c將TAL靶點識別域克隆入特定的真核表達(dá)載體以表達(dá)重組核酸酶d將重組真核表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)入細(xì)胞e篩選突變體。

RNA干擾技術(shù)：細(xì)胞利用外源或內(nèi)源小干擾RNA激發(fā)相關(guān)的酶復(fù)合物，對同源性mRNA進(jìn)行切割、降解，從而在轉(zhuǎn)錄后水平阻斷基因的表達(dá)。

RNA干擾現(xiàn)象的幾個重要特征：轉(zhuǎn)錄后水平基因沉默機制、很高的特異性、只有dsRNA才能誘導(dǎo)產(chǎn)生、只有針對編碼區(qū)的dsRNA才能產(chǎn)生有效和特異性的干擾、作用迅速、連續(xù)產(chǎn)生dsRNA才能有長期效應(yīng)。

siRNA制備的方法：化學(xué)合成、體外轉(zhuǎn)錄、長片段dsRNAs經(jīng)RNaseⅢ降解、siRNA表達(dá)載體在細(xì)胞中表達(dá)形成shRNAs、siRNA表達(dá)框架 52 siRNA轉(zhuǎn)染細(xì)胞的方法：磷酸鈣共沉淀法、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法、DNA載體轉(zhuǎn)染、電穿孔法、顯微注射法、病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染

siRNA效果檢測：從mRNA和蛋白質(zhì)兩方面進(jìn)行： mRNA：RT—PCR、實時定量PCR、Northern雜交 蛋白質(zhì)：Western雜交、ELISA、免疫熒光

siRNA應(yīng)用：探索基因功能、基因治療領(lǐng)域、整形外科領(lǐng)域、藥物篩選 55 RNA干擾存在的問題：

A siRNA導(dǎo)入體內(nèi)的效率低下，如何有效地將siRNA轉(zhuǎn)入體內(nèi)成為RNAi應(yīng)用的最大障礙

B體內(nèi)RNA遞送的靶向性

C如何在目的基因的序列上選擇21-23nt左右的序列作為siRNA的模板，從目前的研究來看，序列的選擇原則尚不清楚 D siRNA的穩(wěn)定性

E脫靶效應(yīng)，尤其在多基因家族中的非特異性問題。

56熒光漂白恢復(fù)（FRAP）：用來測定活細(xì)胞的動力學(xué)參數(shù)，借助于高強度脈沖激光來照射細(xì)胞某一區(qū)域，造成該區(qū)域熒光分子的光淬滅，該區(qū)域周圍的非淬滅熒光分子會以一定的速率向受照射區(qū)域擴散，這個擴散速率可通過低強度激光掃描探測，因而可得到活細(xì)胞的動力學(xué)參數(shù)。

57熒光共振能量轉(zhuǎn)移（FRET）：分子可以看作一個正負(fù)電荷分離的偶極子，受激發(fā)以一定的頻率振動，如果其附近有一個振動頻率相同的另一個分子存在，則通過這兩個分子的偶極—偶極相互作用，能量可以非輻射方式從前者轉(zhuǎn)移到后者。

58共聚焦顯微鏡（LSCM）應(yīng)用實例：組織光學(xué)切片、三維圖像重建、細(xì)胞物理與生物化學(xué)測定、熒光的定性定量分析、細(xì)胞內(nèi)離子的動態(tài)測量 59共聚焦顯微鏡的局限：

標(biāo)記染料的光漂白：為了獲得足夠的信噪比，必須提高激光的強度，高強度的激光會使染料在連續(xù)掃描過程中迅速褪色。光毒作用：在激光照射下，許多熒光染料分子會產(chǎn)生單態(tài)氧和自由基等細(xì)胞毒素。60活細(xì)胞成像技術(shù)的優(yōu)點：

實時觀測、自動聚焦、單細(xì)胞追蹤、多位點成像、成像速度快、圖像清晰度高。

61發(fā)光強度與熒光素的濃度、ATP濃度、和熒光素酶的濃度呈正相關(guān)（檢測熒光素酶、檢測ATP、檢測以熒光素）

62理想報告基因特點：沒有內(nèi)源性表達(dá)、易于定量、高靈敏度、線性范圍寬、反應(yīng)迅速

63表面等離子共振技術(shù)（SPR）與等溫滴定微量熱技術(shù)（ITC）的相同點：無需標(biāo)記、實時監(jiān)測、都適用于混濁、不透明或有色液體的檢測。

64胚胎工程內(nèi)容：胚胎分割、胚胎嵌合、細(xì)胞核移植、基因?qū)?、胚胎干?xì)胞、體外受精與胚胎移植。

65胚胎工程目的：輔助生育、生育保險、優(yōu)生優(yōu)育、治療疾病

66女性不孕原因：卵巢功能紊亂、輸卵管因素、子宮內(nèi)膜異位癥、宮頸及子宮因素

67體外受精與胚胎移植技術(shù)：將卵子取出體外，和精子共培養(yǎng)，形成受精卵，受精卵卵裂，形成早期胚胎后移植入宮腔的過程。

68男性不育原因：精子數(shù)少、精子活力低、精子畸形率高、阻塞性無精子 69單精子卵胞漿注射技術(shù)（ICSI）：利用顯微操作設(shè)備，將單個精子直接注射入成熟的卵細(xì)胞胞漿中完成受精的過程，然后進(jìn)行體外培養(yǎng)，待受精分裂成4-8細(xì)胞時移植入宮腔（第二代試管嬰兒技術(shù)）

70生育保險：將人的精子、卵子和早期胚胎使用特殊的保護(hù)劑和降溫措施，使其長期保存在超低溫環(huán)境下。

71胚胎種植前遺傳學(xué)診斷方法：單細(xì)胞熒光原位雜交、單細(xì)胞PCR