第一篇：微生物菌種、毒株的管理規(guī)定2013版

微生物菌種、毒株的管理規(guī)定

為加強(qiáng)可感染人類的高致病性病原微生物菌種、毒株的管理，保障人體健康和公共衛(wèi)生安全特制定本規(guī)定。

一、菌種、毒株的保藏和管理嚴(yán)格按《中華人民共和國傳染病防治法》、《病原微生物實驗室生物安全管理條例》、《可感染人類的高致病性病原微生物菌種、毒株管理規(guī)定》等法律、行政法規(guī)的規(guī)定執(zhí)行。

二、設(shè)立《微生物實驗室菌種登記表》，其內(nèi)容包括：菌種編號、菌種名稱、菌種來源、保存日期、數(shù)量、保存條件、存放位置、保管人。

三、嚴(yán)格的登記制度、建立詳細(xì)的總賬及分類賬。

四、根據(jù)菌種的特性選擇適宜的保存方式。采用雙人管理。

五、根據(jù)菌種情況，定期檢測菌種品質(zhì)，發(fā)現(xiàn)菌種變異或退化時應(yīng)及時報告，并查明原因。

六、菌種的發(fā)放需要雙保管人員同時在場的情況下才能進(jìn)行。每次使用標(biāo)準(zhǔn)菌株都應(yīng)做好使用記錄，包括標(biāo)準(zhǔn)品的名稱、編號、使用時間等。

七、購買的標(biāo)準(zhǔn)菌株初次復(fù)蘇使用時，應(yīng)批量保存在菌種管中，-20℃以下保存。

八、新的標(biāo)準(zhǔn)菌株復(fù)蘇后，傳代最多不超過3次，如超過3次將不再作為標(biāo)準(zhǔn)菌株使用。

九、標(biāo)準(zhǔn)菌株保存管一經(jīng)解凍使用后，不得再次凍存。

十、菌種必須裝在密封的專用容器內(nèi)高壓滅菌銷毀，并做好銷毀記錄。

十一、菌種、毒株失竊要及時報告處理，并有相應(yīng)的應(yīng)急預(yù)案。

微生物實驗室菌種、毒株管理者：

第二篇：病原微生物菌種及毒株樣品生物安全事件應(yīng)急預(yù)案

濟(jì)南市兒童醫(yī)院

病原微生物菌種及毒株樣品生物安全事件應(yīng)急預(yù)案

一、為保證發(fā)生生物安全事件時，做到應(yīng)急準(zhǔn)備充分，信息渠道暢通，指揮系統(tǒng)有效，反應(yīng)機(jī)制靈敏，有效遏制實驗室生物安全事件危害的進(jìn)一步擴(kuò)大，保證相關(guān)人員的健康，保證公眾健康和社會穩(wěn)定，根據(jù)《中華人民共和國傳染病防治法》、《病原微生物實驗室生物安全管理條例》、《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實驗室管理辦法》、《突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急條例》、《實驗室--生物安全通用要求》、和《可感染人類的高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本運(yùn)輸管理規(guī)定》等有關(guān)法律法規(guī)，結(jié)合本院實際情況，制定本預(yù)案。

二、本預(yù)案所稱病原微生物，是指能夠使人致病的微生物。本預(yù)案所稱實驗活動，是指從事與病原微生物菌（毒）種、樣本有關(guān)的研究、教學(xué)、檢測、診斷等活動。

三、本預(yù)案適用于本醫(yī)院病原微生物實驗室發(fā)生的生物安全事件。主要包括：

（一）病原微生物菌（毒）種或者樣本在運(yùn)輸、儲存中被盜、被搶、丟失、泄漏事件。

（二）病原微生物在實驗活動中由于采集和取用造成實驗室人員感染和向?qū)嶒炇彝庑孤痘驍U(kuò)散事件。

（三）由于不可預(yù)測因素所引起的實驗室病原微生物泄露或擴(kuò)散事件。第四條

工作原則為預(yù)防為主，常備不懈；設(shè)施規(guī)范，管理到位；主動監(jiān)測，反應(yīng)迅速；依法處理，措施果斷；機(jī)制通暢，遏制危害。

組織機(jī)構(gòu)及職責(zé)

醫(yī)院生物安全委員會全面負(fù)責(zé)微生物安全應(yīng)急事件的各項工作，生物安全辦公室負(fù)責(zé)微生物安全的日常管理工作，辦公地點設(shè)在醫(yī)院檢驗科。

醫(yī)院生物安全委員會職責(zé)：

（一）研究制定醫(yī)院微生物室生物安全突發(fā)事件應(yīng)急處理預(yù)案，并負(fù)責(zé)預(yù)案的相應(yīng)和終止；

（二）協(xié)同醫(yī)院實驗室生物安全管理委員會共同負(fù)責(zé)建立微生物室生物安全管理制度，指導(dǎo)和監(jiān)督微生物室的制度落實情況，同時負(fù)責(zé)生物安全事故的調(diào)查和處理工作；

（三）負(fù)責(zé)指揮醫(yī)院微生物室生物安全突發(fā)事件應(yīng)急處理工作，協(xié)調(diào)有關(guān)部門的關(guān)系，確保應(yīng)急處理工作快速有效開展，控制危害擴(kuò)大，最大限度地減少損失；并及時向區(qū)衛(wèi)生局和有關(guān)部門報告；

（四）負(fù)責(zé)醫(yī)院微生物室生物安全突發(fā)事件應(yīng)急處理專業(yè)隊伍的建設(shè)和培訓(xùn)；

（五）定期或不定期檢查微生物室的日常預(yù)防及預(yù)警工作，提高科室成員的應(yīng)急處臵能力。

預(yù)防預(yù)警報告

預(yù)防機(jī)制

（一）嚴(yán)格貫徹執(zhí)行《病原微生物實驗室生物安全管理條例》，抓緊做好病原微生物室備案登記工作。

（二）病原微生物室要加強(qiáng)實驗室標(biāo)準(zhǔn)化建設(shè)，對實驗室人員配備、設(shè)備配臵、個人防護(hù)和安全行為等必須按照《實驗室生物安全通用要求》嚴(yán)格執(zhí)行。

（三）病原微生物保藏要制定嚴(yán)格的安全保管制度，作好病原微生物菌（毒）種和樣本進(jìn)出和儲存的記錄，建立檔案制度，并指定專人負(fù)責(zé)。對高致病性病原微生物菌（毒）種和樣本要設(shè)專庫或者專柜單獨(dú)儲存。

（四）增強(qiáng)安全意識，進(jìn)一步完善實驗室生物安全的各項規(guī)章制度。把生物安全管理責(zé)任和措施落到實處，消除安全隱患。實驗室工作人員應(yīng)自覺遵守微生物室生物安全管理相關(guān)法律法規(guī)，嚴(yán)格按照操作規(guī)程和技術(shù)規(guī)范開展研究工作。

（五）加強(qiáng)安全防范，防止不法之徒盜竊病原微生物菌（毒）種和樣本用于對人群進(jìn)行生物化學(xué)恐怖攻擊，危害公眾健康和影響社會穩(wěn)定。預(yù)警機(jī)制

（一）建立有效的預(yù)警機(jī)制，為各種病原微生物菌（毒）種和樣本建立檔案和使用紀(jì)錄，每次使用后及時登記，發(fā)現(xiàn)遺失或被盜，立即報告。

（二）建立實驗室工作人員健康檔案，定期體檢。發(fā)現(xiàn)與實驗室生物安全有關(guān)的人員感染要立即報告。

（三）定期開展自查，發(fā)現(xiàn)安全隱患要迅速預(yù)警通報。

（四）預(yù)警分級標(biāo)準(zhǔn)。實驗室感染根據(jù)所操作的病原微生物致病性及其對周圍人群和環(huán)境危害的嚴(yán)重程度，可將實驗室生物安全事故劃分為三個等級。分別為一般性實驗室安全事故、嚴(yán)重實驗室安全事故和重大的實驗室安全事故。

Ⅰ級：一般性實驗室生物安全事故是指實驗室發(fā)生了三、四類病原微生物泄露或感染，導(dǎo)致1~5人的感染，并引起輕度的臨床癥狀，事故對實驗人員健康和公眾安全不產(chǎn)生明顯損害的。

Ⅱ級：嚴(yán)重實驗室生物安全事故是實驗室人員在實驗室中，1人感染了二類病原微生物或發(fā)生二類病原微生物泄露或菌株丟失等，感染者具有明顯的臨床表現(xiàn)，但未導(dǎo)致死亡；或尚未造成周圍人群和環(huán)境危害的或發(fā)生一般性實驗室感染達(dá)5人以上的。

Ⅲ級：重大的實驗室生物安全事故是指在實驗室中發(fā)生一類病原微生物泄露事件或1人及以上感染，且具有明顯的臨床表現(xiàn)的，并波及和危害到周圍人群健康，甚至危害到社會人群的安全；或二類病原微生物2人或以上感染的，或因感染導(dǎo)致人員死亡的；或有一、二類病源微生物菌（毒）種丟失、泄露或?qū)е颅h(huán)境污染等嚴(yán)重危害的。報告機(jī)制

（一）病原微生物菌（毒）種或者樣本在運(yùn)輸、儲存中被盜、被搶、丟失、泄漏的，承運(yùn)單位、護(hù)送人、保藏機(jī)構(gòu)要采取必要的控制措施，并在２小時內(nèi)分別向承運(yùn)單位的主管部門、護(hù)送人所在單位和保藏機(jī)構(gòu)的主管部門報告，同時向所在地的區(qū)衛(wèi)生行政主管部門報告。發(fā)生被盜、被搶、丟失的，還應(yīng)當(dāng)向公安機(jī)關(guān)報告。接到報告的衛(wèi)生行政主管部門要在２小時內(nèi)向本級人民政府報告，同時向上級衛(wèi)生行政主管部門和衛(wèi)生部報告。

（二）任何單位和個人發(fā)現(xiàn)高致病性病原微生物菌（毒）種或者樣本的容器或者包裝材料，要及時向附近的衛(wèi)生行政主管部門報告。接到報告的衛(wèi)生行政主管部門要及時組織調(diào)查核實，并依法采取必要的控制措施。

（三）微生物室工作人員出現(xiàn)與本實驗室從事的高致病性病原微生物相關(guān)實驗活動有關(guān)的感染臨床癥狀或者體征時，實驗室負(fù)責(zé)人應(yīng)當(dāng)向負(fù)責(zé)實驗室感染控制工作的機(jī)構(gòu)或者人員報告。

（四）微生物室發(fā)生高致病性病原微生物泄漏時，工作人員要立即采取控制措施，防止高致病性病原微生物擴(kuò)散，并同時向負(fù)責(zé)實驗室感染控制工作的機(jī)構(gòu)或者人員報告。

（五）醫(yī)療機(jī)構(gòu)及醫(yī)務(wù)人員發(fā)現(xiàn)由于實驗室感染而引起的與高致病性病原微生物相關(guān)的傳染病病人、疑似傳染病病人，診治的醫(yī)療機(jī)構(gòu)要在２小時內(nèi)報告所在地的區(qū)衛(wèi)生行政主管部門。接到報告的衛(wèi)生行政主管部門要在２小時內(nèi)通報實驗室所在地的區(qū)衛(wèi)生行政主管部門。接到通報的縣級衛(wèi)生行政主管部門要在２小時內(nèi)向本級人民政府報告，并向上級衛(wèi)生行政主管部門和衛(wèi)生部報告。同時采取相應(yīng)的預(yù)防、控制措施。

應(yīng)急響應(yīng)

應(yīng)急響應(yīng)：只要發(fā)生了意外，無論何時、何地，相關(guān)部門、人員有責(zé)任和義務(wù)立即作出響應(yīng)。響應(yīng)啟動：

一般情況下，有下列情形之一者，即可啟動實驗室感染應(yīng)急預(yù)案：(1)實驗人員在檢測高致病性病原微生物過程中，發(fā)生嚴(yán)重差錯或事故，導(dǎo)致病原微生物外溢，且數(shù)量較多或樣本中病原體濃度較高時，并有實驗人員防護(hù)不到位，造成直接暴露，極有可能導(dǎo)致感染時；(2)在操作高致病性病原微生物的實驗室，遇突發(fā)事件，如突然斷電，導(dǎo)致送排風(fēng)系統(tǒng)無法正常運(yùn)轉(zhuǎn)，或遇到火災(zāi)等自然災(zāi)害，導(dǎo)致病原體外泄，造成嚴(yán)重污染，使實驗人員直接暴露時；

(3)因違反操作規(guī)程和安全管理制度，安排未經(jīng)安全培訓(xùn)和不具備專業(yè)能力的進(jìn)修實習(xí)人員從事高致病性病原微生物檢測工作，發(fā)生嚴(yán)重差錯或事故，造成病原微生物擴(kuò)散，實驗操作人員個體防護(hù)措施存在缺陷時；

(4)實驗過程中，發(fā)生病原微生物容器破損外溢或擴(kuò)散，從事高致病性病原微生物檢測的人員，未經(jīng)預(yù)防接種，且所操作的病原微生物能夠?qū)е聡?yán)重疾病，甚至死亡的情況時；

(5)在操作能夠通過呼吸道傳播、擴(kuò)散的高致病性病原微生物時，實驗人員發(fā)現(xiàn)個體防護(hù)措施存在缺陷，并直接暴露，且實驗人員未經(jīng)預(yù)防接種時。分級響應(yīng)：

(1)發(fā)生一般感染事件時應(yīng)做好以下工作：

①生物安全委員會立即領(lǐng)導(dǎo)生物安全管理機(jī)構(gòu)（辦公室）組織有關(guān)部門，全面了解事故發(fā)生的情況，督促各有關(guān)科（所、室）履行各自的職責(zé)，落實各項防控措施，及時予以處臵和糾正。②發(fā)生感染或事故的實驗室應(yīng)暫停相關(guān)的實驗活動。③立即組織專家組進(jìn)入實驗室進(jìn)行調(diào)查。

④對污染區(qū)域開展消毒，并對污染和事故可能帶來的危害情況進(jìn)行評估。

(2)較大的實驗室感染，在一般實驗室事故措施的基礎(chǔ)上，應(yīng)該做好以下工作：

①停止發(fā)生事故的實驗室所有工作，組織專家進(jìn)行調(diào)查、評估。②感染人員立即送定點醫(yī)院隔離觀察或治療。

③對發(fā)生感染或泄露事件的實驗室的所有實相關(guān)人員進(jìn)行醫(yī)學(xué)觀察。④事件判定后的2小時內(nèi)報省衛(wèi)生行政部門。(3)重大實驗室感染，在較大實驗室事故措施的基礎(chǔ)上，應(yīng)該做好以下工作：

①對發(fā)生感染或泄露事件的實驗室進(jìn)行封鎖，組織專家進(jìn)入進(jìn)行調(diào)查、評估。

②事件判定后立即報市衛(wèi)生行政部門。④調(diào)查處理后，對實驗室進(jìn)行全面徹底消毒。先期處臵

發(fā)生感染或泄露事件的實驗室應(yīng)停止實驗活動，并按照相關(guān)程序做好現(xiàn)場應(yīng)急處臵，生物安全委員會辦公室接到報告后應(yīng)該對感染事件的基本情況和信息進(jìn)行核實，并負(fù)責(zé)召集單位生物安全委員會成員，對所發(fā)生的實驗室差錯或事故的嚴(yán)重程度與可能產(chǎn)生的危害進(jìn)行分析評估，以確定實驗室差錯或事故性質(zhì)可能造成的后果，并對受暴露的實驗人員采取醫(yī)學(xué)觀察或隔離治療等措施，最后根據(jù)所造成的后果的危害大小和嚴(yán)重程度進(jìn)行感染事件等級認(rèn)定。具體措施如下：

（一）封閉被病原微生物污染的實驗室或者可能造成病原微生物擴(kuò)散的場所；

（二）開展流行病學(xué)調(diào)查；

（三）對病人進(jìn)行隔離治療，對相關(guān)人員進(jìn)行醫(yī)學(xué)檢查；

（四）對密切接觸者進(jìn)行醫(yī)學(xué)觀察；

（五）進(jìn)行現(xiàn)場消毒；

（六）其他需要采取的預(yù)防、控制措施。具體應(yīng)急預(yù)案

1、刺傷、切割傷或擦傷處理：

1)立即停止工作。2)傷口擠血，水或消毒劑沖洗消毒。3)除去防護(hù)服并進(jìn)行醫(yī)學(xué)處理。4)去急診室診治，急診室對傷者進(jìn)行必要的檢查和處臵，填寫“職業(yè)暴露記錄單”并報質(zhì)量管理科，記錄受傷原因和相關(guān)的微生物，并應(yīng)保留完整適當(dāng)?shù)尼t(yī)療記錄。

2、潛在感染性物質(zhì)的食入處理：

1)立即停止工作。2)應(yīng)脫下防護(hù)服并進(jìn)行醫(yī)學(xué)處理。3)觀察和必要的預(yù)防治療，去急診室診治，對傷者進(jìn)行必要的檢查和處臵，填寫“異常事件報告單”并報質(zhì)量管理科，記錄受傷原因和相關(guān)的微生物。4)要報告食入材料的鑒定和事故發(fā)生的細(xì)節(jié)，并保留完整適當(dāng)?shù)尼t(yī)療記錄。

3、潛在危害性氣溶膠的釋放（在生物安全柜以外）處理： 1)所有人員必須立即撤離相關(guān)區(qū)域，任何暴露人員都應(yīng)接受醫(yī)學(xué)咨詢。2)應(yīng)當(dāng)立即通知實驗室負(fù)責(zé)人。3)為了使氣溶膠排出和使較大的粒子沉降，在一定時間內(nèi)嚴(yán)禁人員入內(nèi)。如果實驗室沒有中央通風(fēng)系統(tǒng)，則應(yīng)推遲進(jìn)入實驗室。4)應(yīng)張貼“禁止進(jìn)入”的標(biāo)志。過了相應(yīng)時間后，在實驗室負(fù)責(zé)人的指導(dǎo)下來清除污染。應(yīng)穿戴適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)服和呼吸保護(hù)裝備。5)填寫《職業(yè)暴露記錄單》。

4、容器破碎及感染性物質(zhì)的溢出處理：

1)做好個人防護(hù)，戴手套，穿防護(hù)服，必要時戴眼罩和護(hù)目鏡。2)用布或紙巾覆蓋受感染性物質(zhì)污染或受感染性物質(zhì)溢灑的破碎物品。3)然后在上面倒上消毒劑，通常用健之素。由外向內(nèi)進(jìn)行處理。4)并使其作用適當(dāng)時間（30分鐘），將布、紙巾以及破碎物品清理掉；玻璃碎片應(yīng)用鑷子清理。5)然后再用消毒劑擦拭污染區(qū)域。6)如果用簸箕清理破碎物，應(yīng)當(dāng)對他們進(jìn)行高壓滅菌或放在有效的消毒液內(nèi)浸泡。用于清理的布、紙巾和抹布等應(yīng)當(dāng)放在盛放污染性廢棄物的容器內(nèi)。7)如果實驗表格或其他打印或手寫材料被污染，應(yīng)將這些信息復(fù)制，并將原件臵于盛放污染性廢棄物的容器內(nèi)。8)填寫《職業(yè)暴露記錄單》。

5、未裝可封閉離心桶的離心機(jī)內(nèi)盛有潛在感染性物質(zhì)的離心管發(fā)生破裂處理：1)如果機(jī)器正在運(yùn)行時發(fā)生破裂或懷疑發(fā)生破裂，應(yīng)關(guān)閉機(jī)器電源，讓機(jī)器密閉（例如30min）使氣溶膠沉積。如果機(jī)器停止后發(fā)現(xiàn)破裂，應(yīng)立即將蓋子蓋上，并密閉（例如30min）。2)所有操作都應(yīng)戴厚實的手套（如厚橡膠手套），必要時可在外面戴一次性手套。當(dāng)清理玻璃碎片時應(yīng)當(dāng)使用鑷子，或用鑷子夾著的棉花來進(jìn)行。所有破碎的離心管、玻璃碎片、離心桶、十字軸和轉(zhuǎn)子都應(yīng)放在無腐蝕性的、已知對相關(guān)微生物具有殺滅活性的消毒劑內(nèi)。未破損的帶蓋離心管應(yīng)放在另一個有消毒劑的容器中，然后回收。3)離心機(jī)內(nèi)腔應(yīng)用適當(dāng)濃度的同種消毒劑擦拭，并再次擦拭，然后用水沖洗并干燥。清理時所使用的全部材料都應(yīng)按感染性廢棄物處理。4)填寫《職業(yè)暴露記錄單》。

6、在可封閉的離心桶（安全杯）內(nèi)離心管發(fā)生破裂處理： 1)所有密封離心桶都應(yīng)在生物安全柜內(nèi)裝卸。)如果懷疑在安全杯內(nèi)發(fā)生破損，應(yīng)該松開安全杯蓋子并將離心桶高壓滅菌。3)填寫《職業(yè)暴露記錄單》。

7、有腐蝕、有毒、含微生物樣品進(jìn)入眼睛、污染臺面處理： 1)若有上述樣品進(jìn)入眼睛，立即用護(hù)眼沖洗器仔細(xì)沖洗。2)沖洗后去眼科就診，對傷者進(jìn)行必要的檢查和處臵，填寫“異常事件報告單”并報質(zhì)量管理科，記錄受傷原因和相關(guān)的微生物，并應(yīng)保留完整適當(dāng)?shù)尼t(yī)療記錄。3)若污染臺面，即用0.1%健之素。

事件綜合評估

根據(jù)生物安全事件報告的具體情況，確定評估主體；領(lǐng)導(dǎo)小組組織專家小組對評估主體進(jìn)行危害評估。

（一）生物安全事件原因調(diào)查。對生物安全事件發(fā)生的具體原因、應(yīng)急處理情況、接觸人員的感染情況、引起疾病流行的可能性等進(jìn)行調(diào)查。

（二）標(biāo)本、樣品采集和檢驗。對污染的物品、區(qū)域、接觸人員和可疑感染的生物進(jìn)行采樣和檢測，以評估確定事件的性質(zhì)和危害。

（三）生物安全事件危害范圍評估。根據(jù)引發(fā)生物安全事件的病原微生物具體種類、接觸人員和泄露范圍，評估確定生物安全事件危害范圍。

現(xiàn)場調(diào)查和取證人員要采取適宜的防護(hù)措施。疫情的解除

（四）解除封鎖的條件是：對污染區(qū)進(jìn)行必要的安全處理，如對病原體進(jìn)行徹底的消毒或銷毀；根據(jù)情況進(jìn)行必要的殺蟲、滅鼠；對小隔離區(qū)進(jìn)行終末消毒，并從最后一例病人算起，經(jīng)過一個最長潛伏期仍無新的病例發(fā)生，報請批準(zhǔn)封鎖的主管部門解除封鎖。

責(zé)任與獎懲

（一）突發(fā)事件應(yīng)急處臵工作實行責(zé)任追究制。

（二）對突發(fā)事件應(yīng)急管理工作中做出突出貢獻(xiàn)的集體和個人要給予表彰和獎勵。

（三）對應(yīng)急管理工作中出現(xiàn)的失職、瀆職行為，應(yīng)追究其責(zé)任

保障措施

（一）不斷完善實驗技術(shù)操作規(guī)程和技術(shù)規(guī)范，強(qiáng)化實驗室規(guī)范化建設(shè)。

（二）加強(qiáng)對涉及實驗室生物安全的監(jiān)測與預(yù)警、疫情分析評估、流行病學(xué)調(diào)查、消毒隔離技術(shù)等方面的業(yè)務(wù)培訓(xùn)。加強(qiáng)實驗室業(yè)務(wù)人員法制化管理和法律責(zé)任方面的。

（三）病原微生物實驗室設(shè)立單位要自覺遵守國家相關(guān)的法律法規(guī)，定期開展自查，不斷完善實驗室檢查制度。

第三篇：微生物菌種純度檢測技術(shù)規(guī)程

微生物菌種純度檢測技術(shù)規(guī)程范圍

本規(guī)程規(guī)定了古菌、細(xì)菌、真菌、病毒（種）純度檢測的程序和方法。

本規(guī)程適用于從事微生物菌種資源保藏及研究的機(jī)構(gòu)、大學(xué)、企業(yè)、個人等。術(shù)語、定義

下列術(shù)語和定義適用于本規(guī)程

2.1

純度檢測 purity check

指通過適當(dāng)?shù)姆椒z測菌種是否為純培養(yǎng)物。

2.2

純培養(yǎng)pure culture

由單個細(xì)胞的后代組成的培養(yǎng)物，即單細(xì)胞培養(yǎng)物或無性繁殖系。通常是由挑取單個菌落或利用單胞分離技術(shù)，移種繁殖獲得。菌種的純度檢測

3.1 古菌和細(xì)菌的純度檢測

3.1.1 菌落形態(tài)

在特定的培養(yǎng)基上，將待檢測培養(yǎng)物稀釋涂布或平板劃線，適宜培養(yǎng)后，同一平板上的單菌落的大小、形狀、顏色、質(zhì)地、光澤等是否相似；對于兩種或以上形態(tài)的出發(fā)菌株，應(yīng)再分別挑取單菌落劃線或稀釋涂布培養(yǎng)，檢測是否重復(fù)出現(xiàn)相同特征。

3.1.2 細(xì)胞形態(tài)

對數(shù)生長期的培養(yǎng)物革蘭氏染色反應(yīng)應(yīng)呈現(xiàn)一致性；細(xì)胞形狀、大小、莢膜等特征應(yīng)相似

3.1.3 芽孢大小、位置、形狀

宜檢測樣品是否形成芽孢，對形成芽孢的菌種，其芽孢大小、位置、形狀應(yīng)相似。

3.2 放線菌菌種純度檢測

3.2.1 菌落形態(tài)

在特定的培養(yǎng)基上，將待檢測培養(yǎng)物稀釋涂布或平板劃線,挑取單菌落，適宜培養(yǎng)后，在同一平板上單菌落形狀、大小、表面狀況、質(zhì)地、光澤、顏色等應(yīng)相似。如懷疑為細(xì)菌污染，則30℃液體培養(yǎng)24小時，培養(yǎng)液不應(yīng)渾濁，如渾濁則視為細(xì)菌污染。

3.2.2 培養(yǎng)特征

分別接種三種以上培養(yǎng)基，在三種以上培養(yǎng)基上的培養(yǎng)特征應(yīng)想同，包括氣生菌絲、基內(nèi)菌絲、可溶性色素的顏色等。

3.2.3 孢子絲及孢囊

在特定的培養(yǎng)基、培養(yǎng)溫度及培養(yǎng)時間等條件下，孢子著生方式、孢子絲形態(tài)及其顏色或孢囊著生位置（氣絲或基絲）、孢囊的形狀，大小應(yīng)呈現(xiàn)出一致性。

3.3 酵母菌種純度檢測

3.3.1 菌落形態(tài)

應(yīng)對菌落形態(tài)相似性進(jìn)行檢測。在特定的培養(yǎng)基上，通過對待檢測菌株進(jìn)行稀釋或劃線涂布平板獲取單菌落，一定的培養(yǎng)條件下，比較同一平板內(nèi)，菌落的大小、形狀、顏色、隆起、表面狀況、質(zhì)地、光澤等應(yīng)一致。

3.3.2 個體形態(tài)

應(yīng)對檢測樣品的個體形態(tài)進(jìn)行檢測。在指定的培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件下，細(xì)胞形狀、大小及細(xì)胞的增殖方式應(yīng)一致。

3.3.3 繁殖方式

酵母繁殖的方式應(yīng)一致，如是芽殖，出芽的方位、數(shù)量應(yīng)一致。

3.4 絲狀真菌菌種純度檢測

3.4.1 菌落特征

菌落的形態(tài)等表觀特征應(yīng)一致。

3.4.2 菌絲特征

在特定的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件下，菌絲分隔、菌絲形態(tài)等應(yīng)一致。

3.4.3 其他主要顯微特征應(yīng)一致

3.4.4 檢測是否有細(xì)菌污染

3.4.5 對于外觀上不能確定菌種純度的，利用單胞分離技術(shù)獲得純培養(yǎng)物進(jìn)行對比，其菌絲、孢子等特征應(yīng)與原始菌株的描述一致。

3.5 病毒的純度檢測

3.5.1 純粹檢查

應(yīng)將待檢病毒液直接接種含硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基（T.G）、酪蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基（G.A）、葡萄糖蛋白胨湯。通過一定溫度時間培養(yǎng)后，檢查結(jié)果應(yīng)無細(xì)菌生長為純粹。

3.5.2 支原體檢查

檢測由禽胚組織或其細(xì)胞所培養(yǎng)的病毒應(yīng)用改良Frey氏培養(yǎng)基。檢測其它培養(yǎng)方法所得病毒應(yīng)用支原體培養(yǎng)基。任何一次瓊脂平板上出現(xiàn)支原體菌落，判為陽性。陽性對照中至少有一個平板長菌落，而陰性對照中無菌落生長，則檢驗有效。

3.5.3 外源病毒檢查

病毒類制品在毒種選育和生產(chǎn)過程中，經(jīng)常使用動物或細(xì)胞基質(zhì)培養(yǎng)，因此，有可能造成外源因子（特別是外源病毒因子）的污染。為了保證制品質(zhì)量，需要對毒種和細(xì)胞進(jìn)行外源因子檢測。

3.5.3.1 病毒種子批外源因子檢查

對病毒主種子批或工作種子批，應(yīng)抽取足夠檢測試驗需要量的供試品進(jìn)行病毒外源因子檢測。在試驗前應(yīng)用特異性抗體（血清）中和本病毒（或單克隆抗體），所用的抗體免疫源應(yīng)采用與生產(chǎn)疫苗（或制品）不同種而且無外源因子污染的細(xì)胞（或動物）制品。如果病毒曾在禽類組織或細(xì)胞中繁殖過，則抗體不能用禽類來制備。若用雞胚，應(yīng)來自SPF雞群。以下方法可以選擇一種或多種進(jìn)行。

3.5.3.1.1 動物試驗法

3.5.3.1.1.1 小鼠試驗法

取15－20g小鼠至少10只，用經(jīng)抗血清中和后的病毒懸液，每只腦內(nèi)接種0.03ml，同時腹腔接種0.5ml。至少觀察21天。在觀察期內(nèi)至少有80％最初接種的小鼠存活，試驗才有效。如果沒有小鼠出現(xiàn)病毒感染，為符合要求。解剖所用在試驗24小時后死亡或有患病體征的小鼠，直接觀察期病理改變，并將有病變的相應(yīng)的組織懸液通過腦內(nèi)和顱腔接種另外至少5只15－20g小鼠，并觀察21天，如果沒有小鼠出現(xiàn)病毒感染，則符合要求。

3.5.3.1.1.2 乳鼠試驗法

取出生后24小時內(nèi)的乳鼠至少10只，用經(jīng)抗血清中和后的病毒懸液，腦內(nèi)接種0.01ml，同時腹腔接種至少0.1ml。每天觀察，至少14天。在觀察內(nèi)至少有80％最初接種的乳鼠存活，試驗才有效。如果沒有小鼠出現(xiàn)病毒感染，為符合要求。解剖所有在試驗24小時后死亡或有患病體征的乳鼠，直接肉眼觀察其病理改變，并取有病變的相應(yīng)的組織和腦、脾制備成懸液通過腦內(nèi)和腹腔接種另外至少5只出生后24小時內(nèi)乳鼠，并每天觀察至接種第14天，如果沒有小鼠出現(xiàn)病毒感染，則符合要求。

3.5.3.1.2 細(xì)胞培養(yǎng)法

3.5.3.1.2.1 非血吸附檢查

用經(jīng)抗血清中和后的病毒懸液，接種于生產(chǎn)用的同種的細(xì)胞。細(xì)胞至少接種6瓶，每瓶病毒懸液接種量不少于培養(yǎng)液總量的25％。于36±1℃培養(yǎng)，觀察14天，必要時可更換細(xì)胞培養(yǎng)液，未見細(xì)胞病變（CPE）為陰性，符合要求。

3.5.3.1.2.2 血吸附病毒檢查

上述接種病毒的各個細(xì)胞于第6－8天后和第14天，取出2瓶進(jìn)行血吸附病毒檢查。用0.2％－0.5%雞和豚鼠紅細(xì)胞混合菌懸液覆蓋于細(xì)胞表面，分別置于2－8℃，20－25℃，30分鐘后顯微鏡下觀察，未見血球吸附現(xiàn)象為陰性，符合要求。

3.5.3.1.3 雞胚檢查法

在禽類組織或細(xì)胞中繁殖過的病毒種子需用雞胚檢查禽類病毒的污染。選用9－11日和5－7日齡兩組SPF雞胚，每組至少5只，分別于尿囊腔和卵黃囊接種經(jīng)抗體血清中和后的病毒懸液，每胚0.5ml。孵育7日后，取尿囊液用豚鼠和雞血細(xì)胞混合懸液做血球凝集試驗應(yīng)為陰性。被接種的雞胚至少80％存活7天，試驗有效。

3.5.3.2 生產(chǎn)用細(xì)胞外源因子檢查

3.5.3.2.1 細(xì)胞直接觀察

每批生產(chǎn)用細(xì)胞應(yīng)留取5％（或不少于500ml）,細(xì)胞懸液不接種病毒，作為對照細(xì)胞加入與疫苗生產(chǎn)相同的細(xì)胞維持液，置于與疫苗生產(chǎn)相同的條件下培養(yǎng)，觀察14天，在顯微鏡下觀察是否有細(xì)胞病變（CPE）出現(xiàn)，無細(xì)胞病變（CPE）出現(xiàn)者為陰性，符合要求。在觀察期末至少有80％的對照細(xì)胞培養(yǎng)物存活，試驗有效。

3.5.3.2.2 血清吸附病毒檢查

對生產(chǎn)用細(xì)胞外源因子檢查的（1）項細(xì)胞培養(yǎng)物在觀察期末取至少25％的細(xì)胞培養(yǎng)瓶進(jìn)行血吸附病毒檢查。（方法同病毒種子批外源因子檢查的血吸附病毒檢查）

參考文獻(xiàn)

[1] 劉志恒，姜成林主編.放線菌現(xiàn)代生物學(xué)與生物技術(shù).北京：科學(xué)出版社,Pp1-353.2004

[2] 楊蘇聲主編.細(xì)菌分類學(xué).北京：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社,Pp1-145.1997

[3] 沈萍，彭珍榮主譯.《微生物學(xué)》，第五版，中文版,高等教育出版社，2004

[4] 中國科學(xué)院微生物研究所《常見與常用真菌》編寫組.常見與常用真菌.北京：科學(xué)出版社,P1-317，1978

[5] 中國科學(xué)院微生物研究所《菌種保藏手冊》編著組.菌種保藏手冊.北京：科學(xué)出版社,P1-839，1980

[6] David R.Boone et al.Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology.Second Edition.Volume One.Springer.2001

[7] Kirk P.M., P.F.Cannon, J.C.David and J.A.Stalpers(ed).Dictionary of the Fungi.9th edition.CABI Publishing.2001

第四篇：病原微生物菌種及毒株樣品生物安全事件應(yīng)急預(yù)案

病原微生物菌種及毒株樣品生物安全事件應(yīng)急預(yù)案

總則

第一條

為保證發(fā)生生物安全事件時，做到應(yīng)急準(zhǔn)備充分，信息渠道暢通，指揮系統(tǒng)有效，反應(yīng)機(jī)制靈敏，有效遏制實驗室生物安全事件危害的進(jìn)一步擴(kuò)大，保證相關(guān)人員的健康，保證公眾健康和社會穩(wěn)定，根據(jù) 《 中華人民共和國傳染病防治法 》、《 病原微生物實驗室生物安全管理條例））、《 醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實驗室管理辦法））、《 突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急條例 》、《 實驗室一生物安全通用要求 》、和 《 可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運(yùn)輸管理規(guī)定 》 等有關(guān)法律法規(guī)，結(jié)合本院實際情況，制定本預(yù)案。

第二條

本預(yù)案所稱病原微生物，是指能夠使人致病的微生物。

本預(yù)案所稱實驗活動，是指從事與病原微生物菌（毒）種、樣本有關(guān)的研究、教學(xué)、檢測、診斷等活動。

第三條

本預(yù)案適用于本醫(yī)院病原微生物實驗室發(fā)生的生物安全事件。主要包括：

（一）病原微生物菌（毒）種或者樣本在運(yùn)輸、儲存中被盜、被搶、丟失、泄漏事件。

（二）病原微生物在實驗活動中由于采集和取用造成實驗室人員感染和向?qū)嶒炇彝庑孤痘驍U(kuò)散事件。

（三）由于不可預(yù)測因素所引起的實驗室病原微生物泄露或擴(kuò)散事件。

第四條

工作原則為預(yù)防為主，常備不懈；設(shè)施規(guī)范，管理到位；主動監(jiān)測，反應(yīng)迅速；依法處理，措施果斷；機(jī)制通暢，遏制危害。

組織機(jī)構(gòu)及職責(zé)

醫(yī)院生物安全委員會全而負(fù)責(zé)微生物安全應(yīng)急事件的各項工作，生物安全辦公室負(fù)責(zé)微生物安全的日常管理工作，辦公地點設(shè)在醫(yī)院檢驗科。

醫(yī)院生物安全委員會職責(zé)：

（一）研究制定醫(yī)院微生物室生物安全突發(fā)事件應(yīng)急處理預(yù)案，并負(fù)責(zé)預(yù)案的相應(yīng)和終止；

（二）協(xié)同醫(yī)院實驗室生物安全管理委員會共同負(fù)責(zé)建立微生物室生物安全管理制度，指導(dǎo)和監(jiān)督微生物室的制度落實情況，同時負(fù)責(zé)生物安全事故的調(diào)查和處理工作；

（三）負(fù)責(zé)指揮醫(yī)院微生物室生物安全突發(fā)事件應(yīng)急處理工作，協(xié)調(diào)有關(guān)部門的關(guān)系，確保應(yīng)急處理工作快速有效開展，控制危害擴(kuò)大，最大限度地減少損失；并及時向區(qū)衛(wèi)生局和有關(guān)部門報告；

（四）負(fù)責(zé)醫(yī)院微生物室生物安全突發(fā)事件應(yīng)急處理專業(yè)隊伍的建設(shè)和培訓(xùn)；

（五）定期或不定期檢查微生物室的日常預(yù)防及預(yù)警工作，提高科室成員的應(yīng)急處置能力。

預(yù)防預(yù)警報告

預(yù)防機(jī)制

（一）嚴(yán)格貫徹執(zhí)行 《 病原微生物實驗室生物安全管理條例 》，抓緊做好病原微生物室備案登記工作。

（二）病原微生物室要加強(qiáng)實驗室標(biāo)準(zhǔn)化建設(shè)，對實驗室人員配備、設(shè)備配置、個人防護(hù)和安全行為等必須按照 《 實驗室生物安全通用要求 》 嚴(yán)格執(zhí)行。

（三）病原微生物保藏要制定嚴(yán)格的安全保管制度，作好病原微生物菌（毒）種和樣本進(jìn)出和儲存的記錄，建立檔案制度，并指定專人負(fù)責(zé)。對高致病性病原微生物菌（毒）種和樣本要設(shè)專庫或者專柜單獨(dú)儲存。

（四）增強(qiáng)安全意識，進(jìn)一步完善實驗室生物安全的各項規(guī)章制度。把生物安全管理責(zé)任和

措施落到實處，消除安全隱患。實驗室工作人員應(yīng)自覺遵守微生物室生物安全管理相關(guān)法律法規(guī)，嚴(yán)格按照操作規(guī)程和技術(shù)規(guī)范開展研究工作。

（五）加強(qiáng)安全防范，防止不法之徒盜竊病原微生物菌（毒）種和樣本用于對人群進(jìn)行生物化學(xué)恐怖攻擊，危害公眾健康和影響社會穩(wěn)定。

預(yù)警機(jī)制

（一）建立有效的預(yù)警機(jī)制，為各種病原微生物菌（毒）種和樣本建立檔案和使用紀(jì)錄，每次使用后及時登與發(fā)現(xiàn)遺失或被盜，立即報告。

（二）建立實驗室工作人員健康檔案，定期體檢。發(fā)現(xiàn)與實驗室生物安全有關(guān)的人員感染要立即報告。

（三）定期開展自查，發(fā)現(xiàn)安全隱患要迅速預(yù)警通報。

（四）預(yù)警分級標(biāo)準(zhǔn)。實驗室感染根據(jù)所操作的病原微生物致病性及其對周圍人群和環(huán)境危害的嚴(yán)重程度，可將實驗室生物安全事故劃分為三個等級。分別為一般性實驗室安全事故、嚴(yán)重實驗室安全事故和重人的實驗室安全事故。

I 級：一般性實驗室生物安全事故是指實驗室發(fā)生了三、四類病原微生物泄露或感染，導(dǎo)致 1~5人的感染，并引起輕度的臨床癥狀，事故對實驗人員健康和公眾安全不產(chǎn)生明顯損害的。II級：嚴(yán)重實驗室生物安全事故是實驗室人員在實驗室中，1 人感染了二類病原微生物或發(fā)生二類病原微生物泄露或菌株丟失等，感染者具有明顯的臨床表現(xiàn)，但未導(dǎo)致死亡；或尚未造成周圍人群和環(huán)境危害的或發(fā)生一般性實驗室感染達(dá) 5 人以上的。

III級：重大的實驗室生物安全事故是指在實驗室中發(fā)生一類病原微生物泄露事件或 1 人及以上感染，且具有明顯的臨床表現(xiàn)的，并波及和危害到周圍人群健康，甚至危害到社會人群的安全；或二類病原微生物 2 人或以上感染的，或因感染導(dǎo)致人員死亡的；或有一、二類病源微生物菌（毒）種丟失、泄露或?qū)е颅h(huán)境污染等嚴(yán)重危害的。

報告機(jī)制

（一）病原微生物菌（毒）種或者樣本在運(yùn)輸、儲存中被盜、被搶、丟失、泄漏的，承運(yùn)單位、護(hù)送人、保藏機(jī)構(gòu)要采取必要的控制措施，并在 2 小時內(nèi)分別向承運(yùn)單位的主管部門、護(hù)送人所在單位和保藏機(jī)構(gòu)的主管部門報告，同時向所在地的區(qū)衛(wèi)生行政主管部門報告。發(fā)生被盜、被搶、丟失的，還應(yīng)當(dāng)向公安機(jī)關(guān)報地的區(qū)衛(wèi)生行政主管部門報告。發(fā)生被盜、被搶、丟失的，還應(yīng)當(dāng)向公安機(jī)關(guān)報告。接到報告的衛(wèi)生行政主管部門要在 2 小時內(nèi)向本級人民政府報心，同時向上級衛(wèi)生行政主管部門和衛(wèi)生部報告。

（二）任何單位和個人發(fā)現(xiàn)高致病性病原微生物菌（毒）種或者樣本的容器或者包裝材料，要及時向附近的衛(wèi)生行政主管部門報告。接到報告的衛(wèi)生行政主管部門要及時組織調(diào)查核實，并依法采取必要的控制措施。

（三）微生物室工作人員出現(xiàn)與本實驗室從事的高致病性病原微生物相關(guān)實驗活動有關(guān)的感染臨床癥狀或者體征時，實驗室負(fù)責(zé)人應(yīng)當(dāng)向負(fù)責(zé)實驗室感染控制工作的機(jī)構(gòu)或者人員報告。

（四）微生物室發(fā)生高致病性病原微生物泄漏時，工作人員要立即采取控制措施，防止高致病性病原微生物擴(kuò)散，并同時向負(fù)責(zé)實驗室感染控制工作的機(jī)構(gòu)或者人員報告。

（五）醫(yī)療機(jī)構(gòu)及醫(yī)務(wù)人員發(fā)現(xiàn)由于實驗室感染而引起的與高致病性病原微生物相關(guān)的傳染病病人、疑似傳染病病人，診治的醫(yī)療機(jī)構(gòu)要在 2 小時內(nèi)報告所在地的區(qū)衛(wèi)生行政主管部門。接到報告的衛(wèi)生行政主管部門要在 2 小時內(nèi)通報實驗室所在地的區(qū)衛(wèi)生行政主管部門。接到通報的縣級衛(wèi)生行政主管部門要在 2 小時內(nèi)向本級人民政府報告，并向上級衛(wèi)生行政主管部門和衛(wèi)生部報告。同時采取相應(yīng)的預(yù)防、控制措施。

應(yīng)急響應(yīng)

應(yīng)急響應(yīng)：只要發(fā)生了意外，無論何時、何地，相關(guān)部門、人員有責(zé)任和義務(wù)立即作出響

應(yīng)。

響應(yīng)啟動：

一般情況下，有下列情形之一者，即可啟動實驗室感染應(yīng)急預(yù)案：

(l）實驗人員在檢測高致病性病原微生物過程中，發(fā)生嚴(yán)重差錯或事故，導(dǎo)致病原微生物外溢，且數(shù)量較多或樣本中病原體濃度較高時，并有實驗人員防護(hù)不到位，造成直接暴露，極有可能導(dǎo)致感染時；

(2）在操作高致病性病原微生物的實驗室，遇突發(fā)事件，如突然斷電，導(dǎo)致送排風(fēng)系統(tǒng)無法正常運(yùn)轉(zhuǎn)，或遇到火災(zāi)等自然災(zāi)害，導(dǎo)致病原體外泄，造成嚴(yán)重污染，使實驗人員直接暴露時；

(3）因違反操作規(guī)程和安全管理制度，安排未經(jīng)安全培訓(xùn)和不具備專業(yè)能力的進(jìn)修實習(xí)人員從事高致病性病原微生物檢測工作，發(fā)生嚴(yán)重差錯或事故，造成病原微生物擴(kuò)散，實驗操作人員個體防護(hù)措施存在缺陷時；

(4）實驗過程中，發(fā)生病原微生物容器破損外溢或擴(kuò)散，從事高致病性病原微生物檢測的人員，未經(jīng)預(yù)防接種，且所操作的病原微生物能夠?qū)е聡?yán)重疾病，甚至死亡的情況時；(5）在操作能夠通過呼吸道傳播、擴(kuò)散的高致病性病原微生物時，實驗人員發(fā)現(xiàn)個體防護(hù)措施存在缺陷，并直接暴露，且實驗人員未經(jīng)預(yù)防接種時。

分級響應(yīng)：

(1）發(fā)生一般感染事件時應(yīng)做好以下工作：

① 生物安全委員會立即領(lǐng)導(dǎo)生物安全管理機(jī)構(gòu)（辦公室）組織有關(guān)部門，全面了解事故發(fā)

生的情況，督促各有關(guān)科（所、室）履行各自的職責(zé)，落實各項防控措施，及時予以處置和糾正。

② 發(fā)生感染或事故的實驗室應(yīng)暫停相關(guān)的實驗活動。

③ 立即組織專家組進(jìn)入實驗室進(jìn)行調(diào)查。

④ 對污染區(qū)域開展消毒，并對污染和事故可能帶來的危害情況進(jìn)行評估。

(2）較大的實驗室感染，在一般實驗室事故措施的基礎(chǔ)上，應(yīng)該做好以下工作：① 停止發(fā)生事故的實驗室所有工作，組織專家進(jìn)行調(diào)查、評估。

② 感染人員立即送定點醫(yī)院隔離觀察或治療。

③ 對發(fā)生感染或泄露事件的實驗室的所有實相關(guān)人員進(jìn)行醫(yī)學(xué)觀察。

④ 事件判定后的 2 小時內(nèi)報省衛(wèi)生行政部門。

(3）重大實驗室感染，在較大實驗室事故措施的基礎(chǔ)上，應(yīng)該做好以下工作：

① 對發(fā)生感染或泄露事件的實驗室進(jìn)行封鎖，組織專家進(jìn)入進(jìn)行調(diào)查、評估。② 事件判定后立即報市衛(wèi)生行政部門。

④ 調(diào)查處理后，對實驗室進(jìn)行全面徹底消毒。

先期處置

發(fā)生感染或泄露事件的實驗室應(yīng)停止實驗活動，并按照相關(guān)程序做好現(xiàn)場應(yīng)急處置，生物安全委員會辦公室接到報告后應(yīng)該對感染事件的基本情況和信息進(jìn)行核實，并負(fù)責(zé)召集單位生物安全委員會成員，對所發(fā)生的實驗室差錯或事故的嚴(yán)重程度與可能產(chǎn)生的危害進(jìn)行分析評估，以確定實驗室差錯或事故性質(zhì)可能造成的后果，并對受暴露的實驗人員采取醫(yī)學(xué)觀察或隔離治療等措施，最后根據(jù)所造成的后果的危害大小和嚴(yán)重程度進(jìn)行感染事件等級認(rèn)定。具體措施如下：

（一）封閉被病原微生物污染的實驗室或者可能造成病原微生物擴(kuò)散的場所；

（二）開展流行病學(xué)調(diào)查；

（三）對病人進(jìn)行隔離治療，對相關(guān)人員進(jìn)行醫(yī)學(xué)檢查；

（四）對密切接觸者進(jìn)行醫(yī)學(xué)觀察；

（五）進(jìn)行現(xiàn)場消毒；

（六）其他需要采取的預(yù)防、控制措施。

具體應(yīng)急預(yù)案、刺傷、切割傷或擦傷處理： l）立即停止工作。2）傷口擠血，水或消毒劑沖洗消毒。3）除去防護(hù)服并進(jìn)行醫(yī)學(xué)處理。4）去急診室診治，急診室對傷者進(jìn)行必要的檢查和處置，填寫“異常事件報告單”并報質(zhì)最管理科，記錄受傷原因和相關(guān)的微生物，并應(yīng)保留完整適當(dāng)?shù)尼t(yī)療記錄、潛在感染性物質(zhì)的食入處理：

l）立即停止工作。2）應(yīng)脫下防護(hù)服并進(jìn)行醫(yī)學(xué)處理。3）觀察和必要的預(yù)防治療，去急診室診治，對傷者進(jìn)行必要的檢查和處置，填寫“異常事件報告單”并報質(zhì)量管理科，記錄受傷原因和相關(guān)的微生物。4）要報告食入材料的鑒定和事故發(fā)生的細(xì)節(jié)，并保留完核適當(dāng)?shù)尼t(yī)療記錄。、潛在危害性氣溶膠的釋放（在生物安全柜以外）處理：

l）所有人員必須立即撤離相關(guān)區(qū)域，任何暴露人員都應(yīng)接受醫(yī)學(xué)咨詢。2）應(yīng)當(dāng)立即通知實驗室負(fù)責(zé)人。3）為了使氣溶膠排出和使較大的粒子沉降，在一定時間內(nèi)嚴(yán)禁人員入內(nèi)。如果實驗室沒有中央通風(fēng)系統(tǒng)，則應(yīng)推遲進(jìn)入實驗室。4）應(yīng)張貼“禁止進(jìn)入”的標(biāo)志。過了相應(yīng)時間后，在實驗室負(fù)責(zé)人的指導(dǎo)下來清除污染。應(yīng)穿戴適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)服和呼吸保護(hù)裝備。5）填寫 《 異常事件報告單 》。、容器破碎及感染性物質(zhì)的溢出處理：

l）做好個人防護(hù)，戴手套，穿防護(hù)服，必要時戴眼罩和護(hù)目鏡。2）用布或紙巾覆蓋受感染性物質(zhì)污染或受感染性物質(zhì)溢灑的破碎物品。3）然后在上面倒上消毒劑，通常用施康。由外向內(nèi)進(jìn)行處理。4）并使其作用適當(dāng)時間（30 分鐘），將布、紙巾以及破碎物品清理掉；玻璃碎片應(yīng)用鑷子清理。5）然后再用消毒劑擦拭污染區(qū)域。6）如果用簸箕清理破碎物，應(yīng)當(dāng)對他們進(jìn)行高壓滅菌或放在有效的消毒液內(nèi)浸泡。用于清理的布、紙巾和抹布等應(yīng)當(dāng)放在盛放污染性廢棄物的容器內(nèi)。7)如果實驗表格或其他打印或手寫材料被污染，應(yīng)將這些信息復(fù)制，并將原件置于盛放污染性廢棄物的容器內(nèi)。8）填寫 《 異常事件報告單 》。、未裝可封閉離心桶的離心機(jī)內(nèi)盛有潛在感染性物質(zhì)的離心管發(fā)生破裂處理：

l）如果機(jī)器正在運(yùn)行時發(fā)生破裂或懷疑發(fā)生破裂，應(yīng)關(guān)閉機(jī)器電源，讓機(jī)器密閉（例如 3Omin）使氣溶膠沉積。如果機(jī)器停止后發(fā)現(xiàn)破裂，應(yīng)立即將蓋子蓋上，并密閉（例如 30min）。2）所有操作都應(yīng)戴厚實的手套（如厚橡膠手套），必要時可在外面戴一次性手套。當(dāng)清理玻璃碎片時應(yīng)當(dāng)使用鑷子，或用攝子夾著的棉花來進(jìn)行。所有破碎的離心管、玻璃碎片、離心桶、十字軸和轉(zhuǎn)子都應(yīng)放在無腐蝕 J 性的、己知對相關(guān)微生物具有殺滅活性的消毒劑內(nèi)。未破損的帶蓋離心管應(yīng)放在另一個有消毒劑的容器中，然后回收。3）離心機(jī)內(nèi)腔應(yīng)用適當(dāng)濃度的同種消毒劑擦拭，并再次擦拭，然后用水沖洗并干燥。清理時所使用的全部材料都應(yīng)按感染性廢棄物處理。4）填寫 《 異常事件報告單 》。、在可封閉的離心桶（安全杯）內(nèi)離心管發(fā)生破裂處理：

l）所有密封離心桶都應(yīng)在生物安全柜內(nèi)裝卸。）如果懷疑在安全杯內(nèi)發(fā)生破損，應(yīng)該松開安全杯蓋子并將離心桶高壓滅菌。3）填寫 《 異常事件報告單 》。、有腐蝕、有毒、含微生物樣品進(jìn)入眼睛、污染臺面處理：

l）若有上述樣品進(jìn)入眼睛，立即用護(hù)眼沖洗器仔細(xì)沖洗。2）沖洗后去眼科就診，對傷者進(jìn)行必要的檢查和處置，填寫“異常事件報告單”并報質(zhì)量管理科，記錄受傷原因和相關(guān)的微生物，并應(yīng)保留完整適當(dāng)?shù)尼t(yī)療記錄。3）若污染臺面，即用 1 : 100 施康或 0.5 ％過氧乙酸消毒。

事件綜合評估

根據(jù)生物安全事件報告的具體情況，確定評估主體；領(lǐng)導(dǎo)小組組織專家小組對評估主體進(jìn)行危害評估。

（一）生物安全事件原因調(diào)查。對生物安全事件發(fā)生的具體原因、應(yīng)急處理情況、接觸人員的感染情況、引起疾病流行的可能性等進(jìn)行調(diào)查。

（二）標(biāo)本、樣品采集和檢驗。對污染的物品、區(qū)域、接觸人員和可疑感染的生物進(jìn)行采樣和檢測，以評估確定事件的性質(zhì)和危害。

（三）生物安全事件危害范圍評估。根據(jù)引發(fā)生物安全事件的病原微生物具體種類、接觸人員和泄露范圍，評估確定生物安全事件危害范圍?，F(xiàn)場調(diào)查和取證人員要采取適宜的防護(hù)措施。疫情的解除

（四）解除封鎖的條件是：對污染區(qū)進(jìn)行必要的安全處理，如對病原體進(jìn)行徹底的消毒或銷毀；根據(jù)情況進(jìn)行必要的殺蟲、滅鼠；對小隔離區(qū)進(jìn)行終末消毒，并從最后一例病人算起，經(jīng)過一個最長潛伏期仍無新的病例發(fā)生，報請批準(zhǔn)封鎖的主管部門解除封鎖。

責(zé)任與獎懲

（一）突發(fā)事件應(yīng)急處置工作實行責(zé)任迫究制。

（二）對突發(fā)事件應(yīng)急管理工作中做出突出貢獻(xiàn)的集體和個人要給予表彰和獎勵。

（三）對應(yīng)急管理工作中出現(xiàn)的失職、讀職行為，應(yīng)追究其責(zé)任

保障措施

（一）不斷完善實驗技術(shù)操作規(guī)程和技術(shù)規(guī)范，強(qiáng)化實驗室規(guī)范化建設(shè)。

（二）加強(qiáng)對涉及實驗室生物安全的監(jiān)測與預(yù)警、疫情分析評估、流行病學(xué)調(diào)查、消毒隔離技術(shù)等方面的業(yè)務(wù)培訓(xùn)。加強(qiáng)實驗室業(yè)務(wù)人員法制化管理和法律責(zé)任方面的。

（三）病原微生物實驗室設(shè)立單位要自覺遵守國家相關(guān)的法律法規(guī)，定期開展自查，不斷完善實驗室檢查制度。

第五篇：微生物室菌種管理及應(yīng)急程序

檢驗科微生物室菌種管理規(guī)定及應(yīng)急預(yù)案

1.0目的

為確保微生物實驗室菌種保管安全，避免微生物實驗室菌種生物安全事故的發(fā)生。2.0范圍

適用于微生物實驗室所有工作人員及管理人員。3.0職責(zé)

3.1微生物室組長負(fù)責(zé)微生物實驗室菌種管理。3.2科室主任為生物菌種保管安全 狀立即去急診科治療。

5.3 當(dāng)發(fā)現(xiàn)菌株丟失時，立即報告實驗室負(fù)責(zé)人，經(jīng)調(diào)查，若確定丟失時，由實驗室負(fù)責(zé)人上報科室負(fù)責(zé)人，并上報醫(yī)院感染管理科進(jìn)一步調(diào)查處理。6.0支持文件

其它未盡事項嚴(yán)格按照下列文件執(zhí)行：《中華人民共和國傳染病防治法》、《病原微生物實驗室生物安全管理條例》、《中國醫(yī)學(xué)微生物菌種保藏管理辦法》、《人間傳染的病原微生物菌（毒）種保藏機(jī)構(gòu)管理辦法》。