第一篇：工商管理(農(nóng)大)

湖 南 農(nóng) 業(yè) 大 學

畢業(yè)論文（設計）

淺談中小企業(yè)的財務管理

學生姓名：

年級專業(yè)：級工商企業(yè)管理 指導教師及職稱:講師 學 院：繼續(xù)教育學院

湖南·長沙

提交日期：2014年3月

湖南農(nóng)業(yè)大學成人高等教育本科生畢業(yè)論文（設計）

誠 信 聲 明

本人鄭重聲明：所呈交的本科畢業(yè)論文（設計）是本人在指導老師的指導下，進行研究工作所取得的成果，成果不存在知識產(chǎn)權(quán)爭議。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品成果。對本文的研究做出重要貢獻的個人和集體在文中均作了明確的說明并表示了謝意。本人完全意識到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔。

畢業(yè)論文（設計）作者簽名：

年 月 日

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目 錄

摘要：...................................................................................................................3 關鍵詞：.................................................................................................................3

一、財務管理現(xiàn)狀分析.........................................................................................3(一)融資困難，周轉(zhuǎn)資金不足.......................................................................3(二)投資盲目，經(jīng)營風險及財務風險加大...................................................3(三)財務控制環(huán)節(jié)薄弱，缺乏科學性...........................................................3(四)管理模式疆化，管理觀念落后...............................................................4

二、重新設計財務管理模式.................................................................................4(一)政府制定并完善有利于中小企業(yè)發(fā)展的金融政策...............................4(二)強化資金管理，加強財務控制...............................................................4(三)提高資金使用率，使其產(chǎn)生最佳效果...................................................5(四)加強財產(chǎn)控制，健全財產(chǎn)管理制度.......................................................5(五)強化法律意識，提高財務人員業(yè)務素質(zhì)...............................................5

三、結(jié)束語.............................................................................................................6

四、參考文獻.........................................................................................................6 致 謝.................................................................................................................6

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淺談中小企業(yè)的財務管理

作

者：

指導老師：

（湖南農(nóng)業(yè)大學繼續(xù)教育學院，長沙 410128）

摘 要：在日益激烈的市場競爭中，中小企業(yè)因其對環(huán)境的應變能力較強，展現(xiàn)出了較強的生命力。中小企業(yè)經(jīng)營機制比較靈活，投資少、見效快，且具有產(chǎn)品品種豐富、涉及領域廣泛等特點，對我國經(jīng)濟的發(fā)展有著不可替代的作用。然而，對于如何加強企業(yè)財務管理這個問題，有相當一部分中小企業(yè)并未足夠重視，從而使企業(yè)財務管理的作用沒有得到充分發(fā)揮。

關鍵詞：中小企業(yè)、財務管理、財務控制

一、財務管理現(xiàn)狀分析

很多中小企業(yè)在財務管理方面都存在以下四方面問題：

(一)融資困難，周轉(zhuǎn)資金不足

究其原因，主要有以下幾個：負債過多，融資成本高，風險大，造成中小企業(yè)信用等級低，資信相對較差；一些銀行對中小貸款不夠熱心；中介機構(gòu)不健全，缺乏專門為中小企業(yè)貸款服務的金融中介機構(gòu)和貸款擔保機構(gòu)。

(二)投資盲目，經(jīng)營風險及財務風險加大

有些中小企業(yè)缺乏明確的產(chǎn)業(yè)發(fā)展方向?對項目投資缺乏科學論證。主要表現(xiàn)在：不顧客觀條件和自身能力片面追求熱門產(chǎn)業(yè)；對項目的投資規(guī)模、資金結(jié)構(gòu)、建設周期以及資金來源等缺乏科學的籌劃與部署，對項目建設和經(jīng)營過程中將要發(fā)生的現(xiàn)金流量缺乏準確的預測。

(三)財務控制環(huán)節(jié)薄弱，缺乏科學性

有些中小企業(yè)財務控制環(huán)節(jié)薄弱，對加強財務管理方面不夠重視，沒有真正理解財務管理在企業(yè)中的地位。主要表現(xiàn)在：資金管理不嚴，造成資金閑置或不足；應收賬款周轉(zhuǎn)緩慢，造成資金回收困難，沒有建立嚴格的賒銷政策，缺乏有力的摧收措施，應收款不能兌現(xiàn)或形成呆賬；存貨控制環(huán)節(jié)薄弱，造成資金呆滯，有些企業(yè)對原材料、半成品、固定資產(chǎn)等管理不到位，資產(chǎn)流失嚴重；財務會計

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工作流程不規(guī)范、不嚴格。

(四)管理模式疆化，管理觀念落后

有些中小企業(yè)領導層對財務管理理論缺乏應有的認識和研究，越權(quán)行事，造成財務管理混亂。部分中小企業(yè)沒有或無法建立內(nèi)部審計部門，即使有，也很難保證內(nèi)部審計的獨立性。另外，有些中小企業(yè)沒有將財務管理納入企業(yè)管理的有效機制中，缺乏現(xiàn)代財務管理觀念，使財務管理失去了在企業(yè)管理中應有的地位和作用。

二、重新設計財務管理模式

要解決中小企業(yè)財務管理中存在的問題，必須重新設計企業(yè)財務管理模式，筆者認為需要從以下五個方面著手：

(一)政府制定并完善有利于中小企業(yè)發(fā)展的金融政策

針對中小企業(yè)的融資困境，政府金融機構(gòu)要轉(zhuǎn)變觀念，充分認識到支持中小企業(yè)發(fā)展的重要意義。在實際金融支持工作中，進一步拓寬中小企業(yè)的融資渠道，發(fā)展適合中小企業(yè)特點的直接融資方式，盡快建立健全專門為中小企業(yè)服務的金融機構(gòu)體系。

(二)強化資金管理，加強財務控制

第一，財務部門應運用科學方法對投資項目進行可行性財務分析。運用現(xiàn)代管理方法參與新投資項目、資產(chǎn)重組項目的風險、成本與收益等論證考核評價工作，從財務管理角度提出改善投資管理，采取合并、轉(zhuǎn)讓、終止、撤銷、清理出售等建議，供企業(yè)領導決策參考。

第二，企業(yè)應注意分散資金投向，降低投資風險，在積累的資本達到了一定的規(guī)模之后，可嘗試搞多元化經(jīng)營。

第三，企業(yè)應建立科學合理的財務控制制度。例如，凡投資性支出和非經(jīng)常性大額貨幣資金支出須由業(yè)主（或董事長）或其授權(quán)指定的專人簽字審批；其余日常貨幣資金支出由分管財務副總或其授權(quán)指定的專人簽字審批。賬、款、物應設專人分管，財務人員參與制定企業(yè)的生產(chǎn)經(jīng)營計劃，把好資金支付審查關。

第四，強化財務監(jiān)督和內(nèi)部審計工作。企業(yè)對各部門的生產(chǎn)經(jīng)營活動應實行嚴格的事前、事中和事后財務監(jiān)督和內(nèi)部審計工作。內(nèi)部審計工作要從事后的財

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務收支審計向經(jīng)濟效益審計、管理審計、內(nèi)部控制制度評價、工程項目預（決）算審計、專項審計等領域發(fā)展。

(三)提高資金使用率，使其產(chǎn)生最佳效果

第一，要努力提高資金的使用率，使資金運用產(chǎn)生最佳的效果。首先要把資金的來源和動用有效結(jié)合起來。比如，決不能用短期借款來購買固定資產(chǎn)，以免導致資金周轉(zhuǎn)困難。其次，準確預測資金收回和支付的時間。比如，應收賬款什么時候可收回，什么時候可進貨等，都要做到心中有數(shù)，否則易造成收支失衡、資金拮據(jù)。最后，合理進行資金分配，使流動資金和固定資金的占用有效配合走。第二，加強資金管理要貫徹落實到企業(yè)內(nèi)部各個職能部門，因為資金的使用涉及到企業(yè)內(nèi)部的方方面面，企業(yè)經(jīng)營者要認識到，管好、用好、控制好資金不僅僅是財務部門的職責。

(四)加強財產(chǎn)控制，健全財產(chǎn)管理制度

第一，企業(yè)應建立健全財產(chǎn)物資管理內(nèi)部控制制度，在物資采購、領用、銷售及樣品管理上建立規(guī)范的操作程序。第二，對財產(chǎn)的管理與記錄必須分開，以形成有力的內(nèi)部牽制，決不能把資產(chǎn)管理、記錄、檢查核對等工作交由一個人來做。第三，定期檢查盤點財產(chǎn)，督促管理人員和記錄人員做好本職工作。第四，加強對存貨和應收賬款的管理。盡可能壓縮過時的庫存物資，避免資金呆滯，并以科學的方法來確保存貨資金的最佳結(jié)構(gòu)；對賒銷客戶的信用進行評定，定期核對應收賬款，制定完善的收款管理辦法。

(五)強化法律意識，提高財務人員業(yè)務素質(zhì)

第一，要強化民營企業(yè)法人法律意識，加強企業(yè)負責人對財務工作的領導。企業(yè)負責人的法律意識增強了，不僅可以有效避免財務人員違法行為的發(fā)生，還有利于財務人員依法提供完整的財務信息。

第二，要加強財務人員隊伍建設，提高財務人員業(yè)務素質(zhì)。努力提高廣大財務人員的工作水平，抓好財務人員的后繼教育工作，并在加強財務人員業(yè)務培訓的同時，開展好職業(yè)道德教育，建立和完善激勵機制，提高財務人員的工作極積性。

第三，要加強會計基礎工作，實現(xiàn)規(guī)范化管理。要按照統(tǒng)一的《企業(yè)會計制度》和《小企業(yè)會計制度》要求，規(guī)范設置賬簿和進行核算。建立健全財務人員的崗位責任制，使之分工科學合理，職責明確。

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第四，加快會計電算化和網(wǎng)絡建設，提高會計信息管理水平，避免因手工操作失誤而產(chǎn)生的會計信息失真情況。

三、結(jié)束語

隨著改革的不斷深入，中小企業(yè)的財務管理可能會出現(xiàn)新的情況，如融資范圍進一步擴大，風險投資比例將大幅度增加等。所以，及時有效地解決財務管理中存在的問題，增強中小企業(yè)的競爭力，仍然任重而道遠。

四、參考文獻

[1] 吳大紅.中小企業(yè)財務管理中存在的問題及對策[J].華東經(jīng)濟管理,2003(8):18-19.[2] 劉云芳.中小企業(yè)財務管理問題初探[J].山東經(jīng)濟,2003(7):7-8.[3] 彭善利.我國中小企業(yè)財務管理偵破的問題及對策[J].湖南商學院學報,2003(9):3.[4] 翟勝霞.淺析新形勢下中小企業(yè)財務管理存在的問題及對策[J].經(jīng)濟師,2003(5):17-19.[5] 張斌,劉云芳.中小企業(yè)財務管理問題初探[J].山東經(jīng)濟,2003(7):7-8.[6] 宋獻中等.大型企業(yè)與中小企業(yè)會計模式的比較研究[J].暨南學報(哲學社會科學),2002:16-17.[7] 孫喜平.論中小企業(yè)發(fā)展的財務戰(zhàn)略[J].事業(yè)財會,2001(4):9-10.[8] 蔣有緒,郭泉水,馬娟,等.中國森林群落分類及其群落學特征[M].北京:科學出版社,1998:45-48.[9] 楊啟先.認真搞好民營經(jīng)濟,促進經(jīng)濟持續(xù)快速發(fā)展[J].經(jīng)濟縱橫,2003(10):7-8.[10] 謝朝斌.中小企業(yè)融資問題研究[J].經(jīng)濟管理,2002(3):15-17.致 謝

本論文在xxx導師的悉心指導下完成的。導師淵博的專業(yè)知識、嚴謹?shù)闹螌W態(tài)度，精益求精的工作作風，誨人不倦的高尚師德，嚴于律己、寬以待人的崇高風范，樸實無法、平易近人的人格魅力對本人影響深遠。不僅使本人樹立了遠大的學習目標、掌握了基本的研究方法，還使本人明白了許多為人處事的道理。本次論文從選題到完成，每一步都是在導師的悉心指導下完成的，傾注了導師大量的心血。在此，謹向?qū)煴硎境绺叩木匆夂椭孕牡母兄x！在寫論文的過程中，遇到了很多的問題，在老師的耐心指導下，問題都得以解決。所以在此，再次對老師道一聲：老師，謝謝您！

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第二篇：【2014年中農(nóng)大】工商管理專業(yè)【畢業(yè)論文題目】

論文方向：管理學方向 論企業(yè)核心競爭力 現(xiàn)代管理理論熱點問題研究

消費者行為研究 現(xiàn)代商務談判 激勵理論的研究 領導理論的研究 組織發(fā)展與變革 企業(yè)文化模式研究 “擴展企業(yè)”運作研究 企業(yè)協(xié)同效應研究 企業(yè)智力資本研究 品牌延伸的問題與對策 克服“克隆公司”現(xiàn)象 大企業(yè)組織流程化設計 跨國經(jīng)營的價值鏈設計 產(chǎn)業(yè)鏈上的價值鏈分析

入世后黑色家電的產(chǎn)業(yè)分析與企業(yè)對策

企業(yè)競爭力問題探討

新形勢下我國經(jīng)濟安全的保障問題

網(wǎng)絡經(jīng)濟對現(xiàn)代企業(yè)的影響

論企業(yè)戰(zhàn)略聯(lián)盟

人力資源資本化——人力資源管理的新要求

西部大開發(fā)問題的探討 企業(yè)的跨文化管理

關于推行股票期權(quán)制若干問題的探討 企業(yè)如何應對“入世”的機遇與挑戰(zhàn) 對多元化經(jīng)營戰(zhàn)略的全方位思考

虛擬企業(yè) 企業(yè)核心競爭力

關于企業(yè)實施名牌戰(zhàn)略問題的研究

企業(yè)成長研究 知識管理研究 組織結(jié)構(gòu)及形態(tài)演變研究

我國上市公司的公司治理結(jié)構(gòu)完善

管理倫理與現(xiàn)代公司經(jīng)營 網(wǎng)絡經(jīng)濟時代的管理變革 風險資本與高新技術(shù)企業(yè)的公司治理 全球化背景下我國IT企業(yè)的發(fā)展戰(zhàn)略 面向新經(jīng)濟模式的企業(yè)管理信息系統(tǒng)

資本經(jīng)營方式研究 企業(yè)并購研究 管理者收購研究 戰(zhàn)略聯(lián)盟研究 租賃經(jīng)營研究

定制生產(chǎn)模式的系統(tǒng)設計與管理 全球化與企業(yè)生產(chǎn)戰(zhàn)略選擇

計算機集成制造系統(tǒng)（CIM）支持體系的設計與管理

JIT在我國企業(yè)的運用 MRP在我國企業(yè)的運用 企業(yè)生產(chǎn)計劃系統(tǒng)的研究 企業(yè)生產(chǎn)性資源的計劃管理 全面質(zhì)量管理方法在企業(yè)中的運用

企業(yè)系統(tǒng)質(zhì)量控制的應用 質(zhì)量管理標準的研究 先進制造技術(shù)條件下的質(zhì)量管理 公司治理中的股東權(quán)益保護問題研究 完善上市公司董事會功能的若干思考 我國利用跨國公司直接投資的戰(zhàn)略和策略分析

公司合并中關聯(lián)人的利益保護問題研究

企業(yè)購并戰(zhàn)略中的核心問題研究

論管理創(chuàng)新

試論市場經(jīng)濟條件下企業(yè)家的素質(zhì)

試論中國加入WTO的對策 論組織怎樣做才能實現(xiàn)管理科學化 中國企業(yè)應建立獨立董事制度 國企法人治理結(jié)構(gòu)難在哪兒 中國股票市場應建立退市制度

中小企業(yè)發(fā)展：思考與對策 虛擬企業(yè)對我國管理組織的啟示

跨國并購企業(yè)的文化管理 CEO的激勵和監(jiān)督機制 企業(yè)的經(jīng)營與發(fā)展 人力資本的激勵機制 如何提升企業(yè)核心競爭能力 流通企業(yè)國際化經(jīng)營的不可控因素分析 企業(yè)國際化經(jīng)營的可控因素風險分析 中國流通企業(yè)的國際化經(jīng)營戰(zhàn)略

我國入世后，市場經(jīng)營面臨的主要風險及其預防 入世后如何增強我國服務業(yè)的國際競爭能力

中國企業(yè)如何實施“走出去”戰(zhàn)略

中國跨國公司的創(chuàng)建與發(fā)展

企業(yè)模式的比較研究 外國國有企業(yè)改革的啟迪與借鑒

論文方向：市場營銷方向 企業(yè)營銷網(wǎng)絡建設和管理問題 營銷組織設計和再造問題 商品房市場營銷策劃問題 客戶關系管理(CRM)問題 中外營銷管理創(chuàng)新的案例分析 網(wǎng)絡廣告理論與應用研究 客戶關系管理的應用研究 網(wǎng)絡營銷的應用研究 電子商務的應用與模式研究 高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)化問題探討

品牌策略探討 廣告創(chuàng)意策略探討 各種類型的市場營銷策劃方案 關于電子商務與網(wǎng)絡營銷 關于關系營銷與建立顧客忠誠 關于營銷行為中的職業(yè)道德 知識經(jīng)濟時代的企業(yè)營銷

中小企業(yè)的市場營銷戰(zhàn)略 中小企業(yè)電子商務發(fā)展戰(zhàn)略

網(wǎng)絡營銷芻議 WTO框架下的服務營銷 關于服務營銷文化 公關與品牌形象的塑造 關于品牌運營的幾個問題

試論城市營銷

當前國有企業(yè)改革現(xiàn)狀與對策 農(nóng)村產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)調(diào)整的特點和對策 經(jīng)濟全球化與中國加入WTO

新資本的成分在改變，資本的觀念在更新

試論發(fā)展中小企業(yè)的若干問題 知識就是財富，就是新資本 關于跨國公司發(fā)展問題的若干思考 關于中國就業(yè)的幾個問題的探討

企業(yè)戰(zhàn)略理論演變的研究 多元化戰(zhàn)略問題研究 戰(zhàn)略聯(lián)盟問題研究 核心能力問題研究

我國家電企業(yè)價格大戰(zhàn)的案例研究

中小企業(yè)發(fā)展戰(zhàn)略問題研究 戰(zhàn)略性資源外包問題研究

戰(zhàn)略轉(zhuǎn)型問題研究 企業(yè)并購問題研究 企業(yè)文化重建問題研究 市場營銷問題研究 企業(yè)營銷策劃 品牌戰(zhàn)略研究 國際市場營銷問題研究 國際貿(mào)易問題研究

關于提高我國商貿(mào)企業(yè)競爭能力的思考 關于提高我國企業(yè)競爭能力的思考 加入WTO對我國經(jīng)濟的影響和對策

實施品牌戰(zhàn)略，增強企業(yè)競爭能力 樹立現(xiàn)代市場營銷理念，贏得市場競爭優(yōu)勢 對加入WTO后中國流通產(chǎn)業(yè)發(fā)展的戰(zhàn)略思考 外資零售業(yè)市場準入與發(fā)展我國零售業(yè)的對策

零售業(yè)的業(yè)態(tài)創(chuàng)新與技術(shù)進步

論農(nóng)村市場的開拓

中國零售業(yè)連鎖經(jīng)營與國際接軌探索 第三方物流是中國現(xiàn)代物流產(chǎn)業(yè)發(fā)展的突破點

網(wǎng)絡廣告研究 定價策略與技巧 消費者行為研究

中小企業(yè)融資障礙及對策研究

品牌戰(zhàn)略與決策

中國上市公司的虧損問題與重組研究 綠色營銷中的渠道建設問題研究 入世對我國分銷業(yè)的影響分析 物流的電子商務化發(fā)展問題研究 我國批發(fā)業(yè)的發(fā)展轉(zhuǎn)型問題研究

市場營銷理論與實踐研究

公共關系管理研究 某企業(yè)整體營銷企劃方案 某企業(yè)營銷現(xiàn)狀診斷報告 某企業(yè)營銷計劃 論文方向：人力資源方向 新世紀人力資源管理的發(fā)展趨勢 人力資源管理模式比較研究

員工培訓與開發(fā)的理論、實踐和創(chuàng)新研究 企業(yè)人力資源的合理配置與使用研究 知識經(jīng)濟時代人才管理與企業(yè)家激勵機制研究

社會保障制度改革研究

某市各種成分企業(yè)人力資源管理現(xiàn)狀分析

論人力資源管理公正性意義

人力資源會計研究

人力資本投資與提高人力資源的質(zhì)量

我國勞動力市場的發(fā)育現(xiàn)狀及完善對策分析

工資理論——企業(yè)的薪酬管理 對“民工潮”現(xiàn)象的理性思考 中小企業(yè)發(fā)展與管理研究

家族企業(yè)管理研究 加入WTO與企業(yè)人力資源管理 21世紀企業(yè)人力資源管理研究

人力資源信息系統(tǒng)研究 企業(yè)績效考核研究 企業(yè)人才培養(yǎng)與使用研究 企業(yè)人才激勵與薪酬管理 顧客滿意與人力資源管理 跨世紀人力資源開發(fā)研究

企業(yè)財務管理研究 淺議企業(yè)財務分析 企業(yè)資本運營研究 入世對中國IT業(yè)的影響 中國風險企業(yè)發(fā)展戰(zhàn)略初探 試析企業(yè)人力資源管理創(chuàng)新 入世后中國企業(yè)的人力資源管理與開發(fā)

電子商務企業(yè)的客戶服務

企業(yè)文化的塑造

第三篇：2013年中國農(nóng)大工商管理碩士MBA招生簡章

004km.cn仔細閱讀報名網(wǎng)站的提示和要求后如實填寫報考信息，認真核對無誤后確認該報考信息，并牢記系統(tǒng)生成的報名號。請考生務必及時關注教育部及我校研究生招生信息網(wǎng)的有關通知，按時上網(wǎng)提交報名信息。（注意：報考我校MBA的考生必須選擇“中國農(nóng)業(yè)大學”為報考點，并于2012年10月10日至10月31日網(wǎng)上報名期間進行網(wǎng)上支付報名費，本考點不接收現(xiàn)場交費）。

（２）現(xiàn)場確認和電子照片采集：2012年11月（具體時間待定），考生憑報名號、有效身份證件(截至碩士生入學考試日期仍有效的身份證、軍官證）在規(guī)定時間內(nèi)至我校電子照相，并確認網(wǎng)上報名信息等工作（具體時間、地點請于網(wǎng)報結(jié)束后進入中國農(nóng)業(yè)大學MBA教育中心網(wǎng)站查詢最新通知）?？忌殞λ顚懶畔⒈ＷC其準確性。此信息將用于招生錄取、學籍管理等工作，因個人填寫錯誤造成的損失，責任由考生自負。３、考試

1、初試

（1）考試科目：管理類聯(lián)考綜合能力、英語二；

（2）考試方式：采用筆試方式，參加工商管理碩士（MBA）全國聯(lián)考；（3）考試時間：2013年1月份（具體時間以教育部發(fā)部的通知為準）；

（4）參考書目:《MBA聯(lián)考考試大綱及報考指南》、《MBA聯(lián)考考前輔導材料》（機械工業(yè)出版社最新版）；

（5）考試地點：中國農(nóng)業(yè)大學。２、復試

（１）面試資格：中國農(nóng)業(yè)大學MBA教育中心將根據(jù)報名考生的聯(lián)考成績確定復試分數(shù)線。成績達到分數(shù)線要求的考生可獲得中國農(nóng)大MBA正常批次復試資格。

（２）復試內(nèi)容：筆試、英語口語測試、個人綜合素質(zhì)面試，同時進行報考資格審核。（３）復試時間：獲得面試資格的考生在每年3月――4月在中國農(nóng)業(yè)大學參加復試。復試由

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2012年8月13日

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第四篇：農(nóng)大頒獎詞

獎學金 頒獎詞

他們秉承“明德篤志，勵學競業(yè)”的校訓，累積點滴收獲，鑄成自信高峰，凝聚星點能量，織就理想風帆，勇攀“書山”、暢游“學?！薄Ｋ麄冿栕x詩書、筆耕不輟，把積淀專業(yè)知識、提升學術(shù)修養(yǎng)作為理想；他們勤于思索、孜孜以求，將攻克道道難題、完善綜合素質(zhì)定為目標。他們用行動證明，在浩瀚的學海中并非總是充滿艱辛！他們是農(nóng)大的驕子，國家的未來。他們無愧于“獎學金”這一殊榮，他們成績背后的努力，更能激勵我們奮發(fā)圖強。篇二：頒獎開場詞結(jié)束語完成稿

2011年的日歷已經(jīng)翻過去很多頁了，可是在我們很多人的腦海里，在安徽農(nóng)業(yè)大學的這些日子里的各種收獲各種心得甚至各種坎坷依然留在心里，并因為擁有了一段距離，似乎變得更加清晰了。今天，“閃耀安農(nóng)，點亮青春”2011校園新聞人物頒獎禮隆重舉行。此刻，我們好像看見萬家燈火中，在茫茫人海里他們向我們走來，帶著2010年這一年的春夏秋冬的陽光和細雨，更帶著沉淀在心里的那一份感動。

作為本次活動的主辦方，原為安徽農(nóng)業(yè)大學大學生宣傳社，現(xiàn)改編組成的校大學生新聞中心，以服務《安徽農(nóng)大報》，農(nóng)大新聞網(wǎng)，農(nóng)大廣播臺，青禾bbs，大學生活動中心等宣傳陣地為己任，集記者、編輯、播音、論壇管理、輿論監(jiān)督、環(huán)境維護等多項職能為一身，及時捕捉校園熱點，反映師生思想動態(tài)，繁榮校園文化，我們希望擁有一雙明亮的眼睛，去發(fā)掘去追尋我們身邊的美。我們希望，通過對于這些美的人、事、物的追求，讓我們每一位農(nóng)大人有所感動，有所收獲。

這些閃耀安農(nóng)的年華，這些點亮青春的歌唱，我們用溫暖鋪路，用感動寫詩，我們相遇在這里，只為證明最初的感動；我們站在這個舞臺，只為見證這一場青春的盛宴,共賞這一篇屬于我們自己的最華美的篇章。

每一次付出都是一次旅行，每一個故事都是一道美麗的風景，每一位新聞人物都是農(nóng)大人心中的一桿路標。因為有他們，所以我們的大學才變得越來越美好，因為有他們，所以我們的生活充滿感動。平凡的他們卻做出了不平凡的事跡，我們是不是也應該像他們那樣，做出不平凡的事，讓自己的成長之路充滿色彩呢？

下面，讓我們在熱烈的掌聲中，走進第一位新聞人物的成長之旅—— 結(jié)束語：

他們，感動著我們。他們，就在我們身邊。每一次笑容，每一滴淚水，他們都欣然承受。每一縷風雨，每一抹霞光，他們都坦然面對。這不是結(jié)束，而是新的開始。這不是終點，而是新的起航。青春的花，夢想的花，讓我們悉心地去澆灌。年少的夢，大學的夢，讓我們激昂地唱響。相逢花下雨，同約月里人。今年，我們，不道別。明年，我們，再相見。篇三：內(nèi)農(nóng)大外語院2013年社會實踐活動表彰表格

關于評選表彰2013年暑期社會實踐活動的通知

今年暑期，各分團委按照《關于組織開展2013年內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學暑期文化、科技、衛(wèi)生“三下鄉(xiāng)”社會實踐活動的通知》精神的要求，深入開展了豐富多彩的社會實踐活動，為表彰先進，推動工作，學校決定在10月下旬召開總結(jié)表彰大會?，F(xiàn)將有關事宜通知如下：

一． 表彰項目及名額

1.優(yōu)秀組織獎（根據(jù)申報材料和綜合考核評定）2.優(yōu)秀社會實踐分隊（根據(jù)稿件數(shù)量、申報材料和總結(jié)匯報評定）3.優(yōu)秀指導教師（1個）4.優(yōu)秀組織者（1—2個）

5.優(yōu)秀志愿者服務隊員【學生數(shù)（新生除外）的1%】 6.優(yōu)秀掛職副村長（班級總數(shù)的25%）

7.優(yōu)秀論文作者【學生數(shù)（新生除外）的1%；結(jié)合論文成績和社會實踐情況登記表完成情況】 8.優(yōu)秀宣傳報道員（1—2個）二．要求

1.各表彰都要填寫各表彰項目都要填寫表格并附事跡材料（論文2000字），上交電子版。

2、各單位要至少選送5張有關社會實踐的照片。

3、各單位要將表格和材料于10月11日16:00之前上報到校團委。

附： 1、2013年內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學暑期“三下鄉(xiāng)”社會實踐優(yōu)秀分隊登記表。2、2013年內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學暑期“三下鄉(xiāng)”優(yōu)秀指導教師登記表。3、2013年內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學暑期“三下鄉(xiāng)”優(yōu)秀組織者登記表。4、2013年內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學暑期“三下鄉(xiāng)”優(yōu)秀志愿者服務隊員登記表。5、2013年內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學暑期“三下鄉(xiāng)”優(yōu)秀掛職副村長登記表。6、2013年內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學暑期“三下鄉(xiāng)”優(yōu)秀論文作者登記表。7、2013年內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學暑期“三下鄉(xiāng)”優(yōu)秀宣傳報道員登記表。

第五篇：農(nóng)大畢業(yè)論文

編號：

中國農(nóng)業(yè)大學現(xiàn)代遠程教育

畢業(yè)論文（設計）

論文題目 丙烯酰胺測定方法的研究進展

學 生 張進 指導教師 曹振彩 專 業(yè) 食品質(zhì)量與安全 層 次 專升本 批 次 122 學 號 w110501122010 學習中心 中國農(nóng)業(yè)大學網(wǎng)絡教育學院 工作單位 藥用植物研究所

2014年 8 月

中國農(nóng)業(yè)大學網(wǎng)絡教育學院制

I

獨 創(chuàng) 性 聲 明

本人聲明所呈交的畢業(yè)論文（設計）是我個人進行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文（設計）中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得中國農(nóng)業(yè)大學或其它教育機構(gòu)的學位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在畢業(yè)論文（設計）中作了明確的說明并表示了謝意。

學生簽名：張進

時間：

2014 年 8月 8 日

關于論文（設計）使用授權(quán)的說明

本人完全了解《中國農(nóng)業(yè)大學網(wǎng)絡教育學院本、?？飘厴I(yè)論文（設計）工作條例（暫行規(guī)定）》對：“成績?yōu)閮?yōu)秀畢業(yè)論文（設計），網(wǎng)絡教育學院將有權(quán)選取部分論文（設計）全文匯編成集或者在網(wǎng)上公開發(fā)布。如因著作權(quán)發(fā)生糾紛，由學生本人負責”完全認可，并同意中國農(nóng)業(yè)大學網(wǎng)絡教育學院可以以不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播畢業(yè)論文（設計）的全部或部分內(nèi)容。中國農(nóng)業(yè)大學網(wǎng)絡教育學院有權(quán)保留送交論文（設計）的復印件和磁盤，允許論文（設計）被查閱和借閱，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存、匯編論文（設計）。

[保密的畢業(yè)論文（設計）在解密后應遵守此協(xié)議]

學生簽名：張進

時間：2014 年月 8 日

密級：（請注明密級及保密期限）

II

摘要

2002年4月，瑞典國家食品管理局(NFA)和斯德哥爾摩大學的科研小組發(fā)現(xiàn)，許多含淀粉的食物在經(jīng)受高溫油炸或燒烤時會生成丙烯酰胺(Acrylamide，AA)[1-2]。丙烯酰胺是一種有毒化合物，長期暴露可導致人和動物的神經(jīng)系統(tǒng)損傷，并具有潛在的遺傳和生殖毒性，可誘發(fā)哺乳動物機體突變和癌變[3-5]，國際癌癥機構(gòu)(IARC)已將其列為“人類可能的致癌物”(Group 2A)[5]。同時發(fā)現(xiàn)除職業(yè)接觸外，人們還可通過日常飲食(如油炸薯片、薯條、高溫烤的面包等)攝入大量的丙烯酰胺[6-7]。目前食品中丙烯酰胺的測定方法主要采用色譜法進行定量檢測，尤其是色質(zhì)聯(lián)用技術(shù)大大提高了測定的靈敏度和準確度，已成為國際關注的檢測技術(shù)。為了解國內(nèi)外丙烯酰胺檢測技術(shù)，包括樣品凈化、檢測方法、存在問題和發(fā)展方向，本文對目前國內(nèi)外關于食品中的丙烯酰胺安全性及檢測技術(shù)的有關研究進展進行綜述。

關鍵詞:丙烯酰胺 食品 檢測方法 進展

III

目錄 前言........................................................................................................................1 2 丙烯酰胺的簡介................................................................................................1 3 丙烯酰胺檢測方法的研究進展....................................................................2 3.1 樣品前處理過程...............................................................................................2

3.1.1 提取.................................................................................................................2 3.1.2 凈化.................................................................................................................3 3.2 丙烯酰胺的檢測方法.......................................................................................4

3.2.1 氣相色譜、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析..................................................................4 3.2.2 高效液相色譜、高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析....................................................5 3.2.3 離子色譜法......................................................................................................5 3.2.4 紫外可見分光光度法........................................................................................6 3.2.5 微分脈沖伏安法..............................................................................................6 3.2.6 酶聯(lián)免疫法......................................................................................................6 3.2.7 流動注射化學發(fā)光法........................................................................................7 4 國外官方丙烯酰胺檢測方法簡介...............................................................7 5 小結(jié).......................................................................................................................8 6 致謝.......................................................................................................................8 參考文獻..................................................................................................................9

IV 1前言

上世紀50年代，聚丙烯酰胺在工業(yè)上得到廣泛應用，它是目前世界上應用最廣、效能最高的水處理絮凝劑，但是其前體物質(zhì)丙烯酰胺被國際癌癥研究中心（International Agency for Research on Cancer，IARC）列為“可能使人類致癌”物質(zhì)（IIA）。2002年4月，瑞典國家食品局（The Swedish National Food Administration: NFA）和斯德哥爾摩大學（Stockholm University）的科學家聯(lián)合公布了他們的研究結(jié)果：在油炸薯條、土豆片等淀粉類食物中，檢測出有致癌可能性的丙烯酰胺（Acrylamide）；其后英國食物標準局及其他國家的研究機構(gòu)也證實了這一研究成果。2005年世界衛(wèi)生組織和聯(lián)合國糧農(nóng)組織發(fā)布報告，警告某些非故意生成的丙烯酰胺污染物可能引起公共衛(wèi)生問題。中國衛(wèi)生部也于2005年4月發(fā)布公告稱：高溫加工的淀粉類食品中丙烯酰胺含量較高，應盡量避免連續(xù)長時間或高溫烹飪淀粉類食品，以減少丙烯酰胺可能導致的健康危害。食品中丙烯酰胺的形成引起了人們的廣泛關注。

綜上所述，食品是丙烯酰胺的主要暴露源，尤其是我國傳統(tǒng)的油炸、烘烤食品油條、燒餅等都含有相當高水平的丙烯酰胺，且消費群體廣。因此迫切需要加快對我國食品中丙烯酰胺的檢測和形成機理的研究，建立快速、高效、靈敏的檢測食品中丙烯酰胺含量的方法尤為重要。本次研究為深入探索食品中丙烯酰胺的形成機制、作用機制及代謝分布，對食品中丙烯酰胺的測定提出更高的要求，尋找更加快速、簡便、準確、靈敏度高、范圍寬實用性強的分析方法，提高效率降低成本為分析丙烯酰胺的發(fā)展方向提供參考。

2丙烯酰胺的簡介

丙烯酰胺(Acrylamide，AA)俗稱“丙毒”，分子式 CH2CHCONH2（見圖1），無色透明片狀晶體，無臭，有毒，常溫下能升華，比重1.122g/cm3，熔點84.5℃，沸點125℃，易溶于水、乙醇、丙酮，微溶于苯、甲苯[8]。丙烯酰胺分子中含有胺基和雙鏈，化學性質(zhì)相當活潑，可以發(fā)生霍夫曼反應、水解反應、邁克爾型加成反應和聚合反應等。大量動物實驗表明，丙烯酰胺具有生殖、神經(jīng)[9]、遺傳[10]等方面的毒性及潛在致癌性[11-13]?；谄淅鄯e效應，長期暴露于低濃度的丙烯酰胺尤其是食源性攝入對機體還是具有潛在危害的。

ONH2圖1.丙烯酰胺的結(jié)構(gòu)式 3我國丙烯酰胺檢測方法的研究進展

自從2002年發(fā)現(xiàn)淀粉類食品中含有丙烯酰胺以來，許多方法被用來分析各種不同類型食品中丙烯酰胺的含量。這些方法盡管在樣品前處理(提取、凈化步驟)不同，但大多采用氣相色譜(GC)或液相色譜(LC)分離，質(zhì)譜(MS)進行定性、定量分析，有良好的準確性和靈敏度。

3.1 樣品前處理過程

3.1.1 提取

丙烯酰胺為極性化合物，一般采用水或極性強的有機溶劑提取。常用的提取溶劑有水、甲醇、甲醇-水、丙酮-水、乙醇、乙酸乙酯、正丙醇、二氯甲烷-乙醇等。丙烯酰胺在水中的溶解度最大，且價格低廉，對于大多數(shù)食品樣品提取完全，是目前應用最為廣泛的提取溶劑。丙烯酰胺在酸性溶液中穩(wěn)定，堿性條件不穩(wěn)定，所以有人用酸性水溶液作為提取劑，如美國 FDA 建議的方法就用含0.1%的甲酸水溶液提取樣品[14]。Yong等[15]用高濃度氯化鈉溶液作為提取劑，可有效防止提取過程中的乳化現(xiàn)象并有效提高回收率。也有文獻報道用有機溶劑作為提取劑，如日本健康科學研究院和歐美聯(lián)合實驗室就采用丙酮-水混合溶劑提取食品中丙烯酰胺[16-17]。相對于水提法，有機溶劑提取體系具有以下2個優(yōu)點：同時提取包埋在脂肪微粒中的丙烯酰胺，使提取更完全；便于濃縮作進一步處理。提取過程中還需注意，加熱或超聲波震蕩可產(chǎn)生微小顆粒堵塞固相萃取柱（SPE 柱），降低凈化效率，縮短 SPE 柱使用壽命，若采用 SPE 柱凈化應避免使用。為保證前處理過程的回收率，通常會在樣品均質(zhì)化后向其中加入內(nèi)標化合物，常用的內(nèi)標物有13Ｃ3 標記的丙烯酰胺、13Ｃ1 標記的丙烯酰胺、2Ｈ3 標記的丙烯酰胺等。

以水作為提取劑的方法測定的是水溶性游離丙烯酰胺。pH 是食品中丙烯酰胺形成的重要因素之一[18]，因此 pH 對提取效率的影響值得關注。Eriksson[19] 研究發(fā)現(xiàn)，高 pH 提取液相對于中性 pH 條件顯著提高了丙烯酰胺的回收率，表明當前測定方法可能低估了某些食品中丙烯酰胺的含量。而Goldmann等[20]通過丙烯酰胺形成的模擬實驗研究認為，堿性條件下丙烯酰胺含量的增加，是因為高 pH 使得食品釋放更多游離丙烯酰胺，而是強堿性條件下某些尚不明確的分解過程產(chǎn)生了額外的丙烯酰胺。

對于富含脂肪或蛋白質(zhì)的樣品，有時還需要采取去脂或去蛋白的步驟。通常采用正己烷、石油醚或環(huán)己烷等非極性的有機溶劑去除樣品中的脂肪。富含蛋白質(zhì)的樣品可采用甲醇、乙腈或高濃度鹽溶液等極性較強的溶劑進行去除。Delatour 等[21]在前處理過程中，加入1mL 0.68M 三水亞鐵氰化鉀溶液和1mL 2M 七水硫酸鋅溶液，并漩渦振蕩1~2min，即可使蛋白質(zhì)發(fā)生沉淀而被去除。在測定中國傳統(tǒng)油炸面粉類食品中的丙烯酰胺研究中，王海燕等[22]采用高速（14500 g）、低溫（0℃）離心15 min，沉淀、凝固水提取劑中脂溶性物質(zhì)，簡化了提取步驟，提高了提取效率。3.1.2 凈化

SPE 柱凈化是目前大多數(shù)研究者采用的方式，一般需要合并使用多根 SPE柱。一種方式是合并使用 Oasis HLB（填料為高分子聚合物）和 Bond Elut-Accucat（混合型填料:C8、SAX和SCX）固相萃取柱。Becalski等[23] 則合并使用了3種不同的SPE柱:Oasis MAX（混合陰離子交換樹脂），Oasis MCX（混合陽離子交換樹脂）和 ENVI-Carb（石墨化碳）。國內(nèi)研究者分別使用傳統(tǒng) C18、自制玻璃層析柱和石墨化炭黑 SPE 柱進行凈化處理[24-26]，被測物亦得到很好分離。也有將用硅藻土為填料的 ProElut LLE 串連液液萃取柱進行凈化處理[27]，且取樣量是 Oasis HLB 柱的5倍，可以得到更高的靈敏度。對于基質(zhì)復雜食品如咖啡、可可粉等的分析，不同于一般樣品的處理，不適用于多根非極性 SPE 柱聯(lián)合使用進行凈化，可以使用以硅膠為基質(zhì)的鍵合丙氨基固相萃取柱進行處理，該柱具有極性固定相和弱陰離子交換劑，運用正相萃取原理，適合強極性AA復雜樣品分離。

以高分子聚合物為填料的固相萃取柱是丙烯酰胺分析前處理過程中最常用的SPE 柱（以Oasis HLB為典型代表），其吸附劑是由親脂性二乙烯苯和親水性N-乙烯基吡咯烷酮兩種單體按一定比例聚合成的大孔共聚物。其保留機制為反相，通過一個“特殊的極性捕獲基團”來增加對極性物質(zhì)的保留并提供良好的水浸潤性，具有極性強、更好的吸附平衡性、滿足所有固相萃取柱通用需求的特點，克服了傳統(tǒng)硅膠基質(zhì)反相填料的對極性化合物保留不足、對堿性化合物回收不足、小柱跑干等缺點，因此被許多研究者廣泛應用。Oasis MCX是一種填充混合填料以陽離子交換和反相吸附為原理的固相萃取柱，對堿性化合物具有較高的選擇性，也常被用在丙烯酰胺分析的凈化過程中。

固相微萃?。⊿PME）是集采集、萃取、濃縮、進樣于一體的樣品處理新技術(shù)，可與GC、MS、HPLC、MS等聯(lián)用。近年來在食品中揮發(fā)性有機物的檢測方面得到了廣泛應用。SPME 也可用于提取食品中的丙烯酰胺，但是由于丙烯酰胺的極性較高，難以從液相中分離出來。楊秀培等[28] 用自制的十六醇/聚己二酸乙二醇酯（CA/PGA）固相微萃取探頭，對丙烯酰胺有較好的萃取性能，為油炸淀粉類食品中丙烯酰胺的定量測定提供了新的方法。

基質(zhì)固相分散（MSPD）技術(shù)也可用于丙烯酰胺樣品的凈化處理，樣品經(jīng)水提取后，用硫酸銨飽和沉淀蛋白和鹽析，取上清溶液10g 與 5g 硅藻土攪拌均勻后，裝入層析柱中。該柱為玻璃層析柱，填少許玻璃棉，壓緊，依次填裝無水硫酸鈉 10g、硅藻土 2g。先用 60mL 正己烷淋洗脫脂，控制流速2 mL/min，棄去淋洗液。再用 70mL 乙酸乙酯洗脫，收集洗脫溶液，并在45℃水浴下氮吹至近干，加入 1mL 超純水，渦旋振蕩。用氮吹吹去上層有機相后，加入 1mL 正己 烷，渦旋振蕩，滴管小心吸去上層有機相，下層水相直接進行分析或進一步衍生后分析。相對于 SPE 的方式而言，MSPD 方法使用了大容量的填料，增加了樣品的取樣量，提高了雜質(zhì)負載量，同時去除了樣品中的蛋白和脂肪，在洗脫時增加了絕對回收，但同時增加了有機溶劑的使用量。

大孔樹脂又稱全多孔樹脂，聚合物吸附劑，它是一類以吸附為特點，對有機物具有濃縮、分離作用的高分子聚合物，廣泛用于天然產(chǎn)物的分離純化、藥物制備、有機化合物分離等各領域。國內(nèi)學者江姍姍等[29]考察了7種不同極性的樹脂對酚類抗氧劑參與美拉德反應體系后的產(chǎn)物（綠原酸）靜態(tài)吸收研究發(fā)現(xiàn)，7種樹脂（D201、D301、D101、D4020、NKA-

9、AB-

8、D3520）中，D201 能近乎完全吸附實驗加入的綠原酸，而對丙烯酰胺的吸附率不足50%。同時將 D201 預處理加入了綠原酸反應后的美拉德體系樣品溶液，用 HPLC 法檢測，發(fā)現(xiàn)丙烯酰胺能完全與雜質(zhì)分離，具有較高的精密度和準確度，能成功應用于抗氧化劑抑制丙烯酰胺的研究中，也可用于檢測酚類物質(zhì)含量高的食品中的丙烯酰胺。

加速溶劑萃取技術(shù)（ASE）是一種在提高溫度（50~200℃）和壓力（10.3~20.6 MPa）的條件下，利用有機溶劑萃取固體或半固體的樣品前處理方法。其優(yōu)點是溶劑用量少、快速、基體影響小、選擇性好、萃取效率高。Cavalli[30]等人以水作為提取溶劑，采用加速溶劑萃取技術(shù)得到 MS 的檢測限為10~1000 μg/mL。同時瑞士公共安全部門也提出了采用 ASE 提取食品中的丙烯酰胺的方法。

“QuEChERS 凈化方法”（quick，easy，cheap，effective，rugged and safe），此方法使用乙腈提取蔬菜中的農(nóng)藥，同時加入硫酸鎂（除去水分）和氯化鈉（提高提取效率），利用丙基乙二胺（PSA）吸附劑除去提取液中的基質(zhì)。PSA 中含有伯胺和仲胺基團，具有弱的陽離子交換能力，對食品中脂肪酸、其它有機酸、糖及色素的保留能力好，其凈化效果優(yōu)于中性氧化鋁，活性碳等吸附劑。劉燕偉等[31]對 QuEChERS 前處理方法進行了改進，沒有引入有機溶劑，采用純水替代乙腈提取油炸食品中的 AA，消除樣品基底的影響；并與 HPLC-UV 聯(lián)用，對油炸食品中 AA 進行快速測定?；?QuEChERS 方法對樣品前處理無需衍生化，直接使用純水提取 AA，同時使用 PSA 吸附劑取代傳統(tǒng)的固相萃取柱凈化提取液，具有快速、簡便、可靠、廉價和無污染等特點。

3.2 丙烯酰胺的檢測方法

3.2.1 氣相色譜（GC）、氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）聯(lián)用分析

目前已發(fā)表的有關食品中的丙烯酰胺測定的氣相色譜方法多采用溴化衍生，測定的終產(chǎn)物包括2, 3-二溴丙酰胺[32-34]和2-溴丙烯酰胺[35-36]，不通過衍生直接分析丙烯酰胺也是可行的，但由于丙烯酰胺可以在進樣口人為形成，直接氣相色譜-質(zhì)譜分析法(GC-MS)獲得的丙烯酸胺結(jié)果可能會高于衍生化GC-MS或LC-MS。另外，必須避免在萃取過程中，尤其是在低水分(如甲醇)、長時間回流條件下丙 烯酞胺的人為形成。目前有幾種不經(jīng)衍生的氣相色譜法用于丙烯酰胺測定，包括GC/ MS、GC/ MS/ MS和GC-FID[38]。

氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)使氣相色譜的分離能力和質(zhì)譜的定性能力有機結(jié)合，為氣相色譜開辟了新的途徑。郭志峰[39]建立了一種測定市售鍋巴中的丙烯酰胺含量的方法。該法樣品前處理不必經(jīng)過溴化衍生，樣品脫脂后用水提取丙烯酰胺，提取液過活性炭柱，再用乙酸乙酯將活性炭柱中吸附的丙烯酰胺洗脫，洗脫液濃縮后經(jīng)氣相色譜-質(zhì)譜定量分析，檢測限（LOD）為 0.06 mg/kg。3.2.2 高效液相色譜（HPLC）、高效液相色譜-質(zhì)譜（HPLC-MS、HPLC-MS/MS）聯(lián)用分析

高效液相色譜法引入了氣相色譜理論，在技術(shù)上采用高壓泵、高效固定相和高靈敏度檢測器，實現(xiàn)了分離速度快、效率高和操作自動化。幾乎所有的化合物包括高極性離子型待測物和大分子物質(zhì)均可用 HPLC 進行測定。HPLC 對儀器設備要求不如 GC/MS、LC/MS 且成本較低。德國聯(lián)邦消費者健康與動物用藥保護學會（BgW）公布了液體食物模擬物中丙烯酰胺液相色譜直接測定法[40]，適合于丙烯酰胺含量在 0.01~ 0.10mg/kg 的脂肪類食物如葵花籽油等的檢測。國內(nèi)學者茅力等[41]建立了針對淀粉類食品中丙烯酰胺的高效液相色譜法的檢測方法。采用純水提取食品中丙烯酰胺，經(jīng)化學凈化、固相萃取對樣品液進行純化，高效液相色譜法測定。該法丙烯酰胺在 0.02~10.00μg/ml 濃度范圍內(nèi)線性良好，相關系數(shù) R=0.9993，方法的檢測限為 0.005μg/ml，樣品加標回收率為87.1% ~ 102.2%，樣品測定值日內(nèi)相對標準偏差 RSD 為1.45%（n=5），日間相對標準偏差 RSD 為1.63%（n=5）。

相對于氣相色譜-質(zhì)譜分析法而言，液相色譜-質(zhì)譜分析法是更好的選擇，可以利用丙烯酰胺易溶于水，在水溶液中可以充分萃取的特點，潛在的缺點是，樣品萃取液雜質(zhì)干擾多以及在常規(guī)固定相中丙烯酰胺的保留時間不理想，這一點對于基質(zhì)復雜的樣品尤其顯著。要獲得理想的靈敏度和準確性，大量繁瑣、耗時的樣品前處理工作是必要的。美國 FDA 2003-02公布了采用HPLC-MS/MS 以13C3 AA 為內(nèi)標的同位素稀釋技術(shù)測定食品中丙烯酰胺的方法[42]。國內(nèi)張珙等[38]用水溶液振蕩提取樣品，硅藻土凈化，采用 HPLC-MS/ MS和同位素稀釋定量技術(shù)，以選擇反應監(jiān)測方式測定目標化合物。方法檢出限和定量限分別為 4μg/kg，線性范圍 10~3000μg/L，不同食品基質(zhì)的不同加標水平（20~2000μg/kg）回收率90%~105%，RSD<10%，該法定量準確可靠。3.2.3 離子色譜（IC）分析

離子色譜法是由經(jīng)典的離子交換色譜發(fā)展而成的新的液相色譜分析技術(shù)，不僅靈敏度高，分析速度快，能進行多種離子的同時分析，而且還能將一些非離子 性物質(zhì)變成離子性物質(zhì)后測定，在化工、環(huán)境化學、食品化學、生物醫(yī)藥等許多領域都得到廣泛的應用。王海波[43]建立了使用離子色譜串聯(lián)質(zhì)譜測定食品中丙烯酰胺離子的檢測方法。樣品經(jīng)過前處理后，通過離子排斥色譜進行分離，質(zhì)譜進行定性并進行定量計算。以 IonPac AS1 分析柱進行離子排斥分離。ESI-MS 以選擇離子模式對目標離子進行監(jiān)控，以 SIM 離子72的峰面積進行定量計算。該方法對丙烯酰胺的檢出限（S/N=3）為 5μg/L，丙烯酰胺在 2~100μg/L 質(zhì)量濃度范圍內(nèi)具有良好的線性，線性相關系數(shù) R=0.9996。程喜明[44]通過使用離子色譜測定油炸食品中丙烯酰胺，樣品前處理方法與 FDA 提供的方法大致相同。經(jīng)超聲、離心后上清液用離子色譜-紫外檢測器檢測，通過 IonPac ICEAS1（4mm×250mm）分離柱，IonPac NG1（2mm×250mm）保護柱，紫外檢測波長為202nm。結(jié)果表明其對3種樣品的加標回收率在80%以上，RSD < 5%，最低檢出限（LOD）為 0.010mg/kg，相對偏差< 20%。3.2.4 紫外可見分光光度法

紫外可見分光光度法是根據(jù)物質(zhì)分子對波長為200-760nm這一范圍的電磁波的吸收特性所建立起來的一種定性、定量和結(jié)構(gòu)分析方法。操作簡單、準確度高、重現(xiàn)性好。郝亞楠等[45]探討了用紫外分光光度法測定不同食品樣品中丙烯酰胺含量的新方法。試驗結(jié)果表明：丙烯酰胺的吸光度與其濃度在0.25~6.0μg/L的范圍內(nèi)呈良好的線性關系，回歸方程為：Y=0.0958x +0.0294，（R=0.9875），回收率為90.07%~104.8%，RSD 為0.5%。LOD 為0.1μg/L，該方法的優(yōu)點在于操作簡便，提取后可直接測定，不需其他復雜處理，所需時間較短。此外，該法對設備要求小，價格低廉易操作，可用于快速檢測。3.2.5 微分脈沖伏安法

脈沖伏安法于1960年由巴克爾（G.C.Barker）等提出的。在普通伏安法中，影響靈敏度的主要因素是充電電流，而此法是在研究消除充電電流的基礎上發(fā)展起來的一種新的極譜技術(shù)。這種技術(shù)具有靈敏度高，分辨力強等特點。張文玲等[46]應用微分脈沖伏安法快速測定油炸食品中丙烯酰胺，對分析條件進行了優(yōu)化，最佳條件為：脈沖幅度 50mV；靈敏度 100μA；電解質(zhì)為 0.1mol/L的 LiCl 溶液(含2mmol/L H2SO4)，在此條件下丙烯酰胺的氧化還原峰電流較顯著；丙烯酰胺的還原峰電流與其濃度在3.0×10-8~9.0×10-8 mol/L范圍內(nèi)呈良好的線性關系，線性方程為 y=440.95x-1.4893(r=0.9954)，檢測下限為1.0×10-8 mol/L，回收率為94.4%~103.2%。利用該方法對一些油炸食品中的丙烯酰胺含量進行了測定，測定結(jié)果與 HPLC 法測得的結(jié)果一致。3.2.6 酶聯(lián)免疫法 酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)（ELISA）是將抗原抗體反應的高度特異性和酶的高效催化作用相結(jié)合的一種免疫分析方法，具有操作簡便、快速、有效、特異性強等特點，能批量檢測食品中的藥物殘留、病原微生物以及轉(zhuǎn)基因食品等。付云潔等[47]建立了熱加工食品中丙烯酰胺的間接ELISA檢測方法，檢測范圍為50μg/L~1280μg/L，加樣回收率為92.6%~95.5%，適用于檢測熱加工食品中的丙烯酰胺，具有良好的應有價值。3.2.7 流動注射化學發(fā)光法

流動注射分析（Flow Injection Analysis 簡稱FIA）是1975年由丹麥技術(shù)大學的 Ruzicka 和 Hanse 提出的新型分析技術(shù)。流動注射作為一種強有力的樣品處理技術(shù)只有特定的檢測技術(shù)相結(jié)合才能形成一個完整的分析體系。化學發(fā)光具有儀器簡單、靈敏度高等特點，但是由于在通常情況下所使用的發(fā)光反應速度很快，所以必須保證樣品與發(fā)光試劑能夠快速有效高度重現(xiàn)地混合。流動注射技術(shù)滿足了這一要求，它與化學發(fā)光分析相結(jié)合產(chǎn)生的流動注射化學發(fā)光分析（FI-CL）集兩者的優(yōu)點于一身，不僅靈敏度高、線性范圍寬，而且快速、重現(xiàn)性好、自動化程度高，目前已在農(nóng)業(yè)藥物和環(huán)境分析等許多領域得到了迅速的發(fā)展。高向陽等[48]建立一種分析油炸食品中痕量丙烯酰胺的靈敏準確、快速簡便、成本低廉的新型流動注射化學發(fā)光分析方法。樣品中的丙烯酰胺經(jīng)提取后，利用其對魯米諾-過氧化氫化學發(fā)光體系的增強作用進行測定。該法測定丙烯酰胺的線性范圍為1.0×10-6~1.0×10-3 mol/L，相關系數(shù)R=0.9993，方法檢出限為3.95×10-8 mol/L，加標回收率為91%~107%，樣品測定的相對標準偏差（RSD）為1.3%(n=9)。國外官方丙烯酰胺檢測方法簡介

美國FDA方法[14] 取 1g 均質(zhì)化樣品，加入 9mL 水和 1mL 13C3標記的丙烯酰胺內(nèi)標物(200ng/mL，0.1%蟻酸配制)，漩渦震蕩 10min，然后 9000r/min離心 30min；吸取 5mL上清液放到帶有 0.45μm濾膜的過濾管上并離心（9000r/min，4min）。采用 6mL Osis HLB和 3mL Bond Elute-Accuat 固相萃取柱進行凈化，先用 5mL甲醇和 5mL水活化 Osis HLB柱，取 2mL提取液上樣，2mL水洗脫并收集洗脫液，再用 3mL甲醇和 3mL水活化 Bond Elute-Accuat 柱，將洗脫液過柱并收集。樣品最后使用LC-MS/MS(ESI+)進行測定，色譜柱為 Aqua C18柱（250 mm×2 mm，5μm），色譜條件為流動相，0.5%甲醇和0.1%乙酸水溶液；流速為0.2mL/min；進樣量為 20μL；柱溫為26℃。MS檢測器溫度為240℃，離子源溫度為120℃，碰撞氣壓為1Torr.瑞士公共衛(wèi)生聯(lián)邦事務所方法 取均質(zhì)化樣品 5g，加入 50μL 2Ｈ3 標記的丙烯酰胺內(nèi)標溶液（含量5μg），與 4g硅藻土充分混勻，裝入 22mL PLE柱，通過加速溶劑提?。ˋSE）儀進行凈化。在凈化過程中，先用正己烷脫脂3次，然 后用乙腈/水（v:v，85:15）提取3次，每次 20min。取提取液 20mL旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至1~2mL，加入 15mL水，并用 0.1M 磷酸三納緩沖溶液進行堿化，超聲震蕩 1min，將此混合液過 20mL Chemelut 柱，棄去前 15min流出液，然后用 100mL乙酸乙酯洗脫，收集洗脫液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)定容至 0.5mL，進樣前 0.45μm過濾。樣品用LC-MS/MS(ESI+)進行測定，色譜柱為石墨炭黑柱(125 mm×2.1 mm，5μm)，色譜條件:梯度洗脫，0.01 M蟻酸水溶液在 10min內(nèi)由100%變?yōu)?5%，再恢復至100%維持 5min；流速為0.2mL/min；進樣量為10μL；柱溫為20℃。MS檢測器離子源溫度為350℃。

路易斯-巴斯德公共衛(wèi)生科學研究院方法 該方法與美國 FDA 測定方法相似，但用2Ｈ3 標記的丙烯酰胺作為內(nèi)標，色譜柱為 u-Bondapak RP18柱(300 mm ×3.9 mm，10μm)，色譜條件為流動相，0.1%乙酸水溶液；流速為 0.2mL/min；進樣量為 100μL；柱溫為室溫。小結(jié)

不同的前處理技術(shù)有其各自的適用范圍和優(yōu)缺點，在實際工作中，應根據(jù)待測樣品的種類和基質(zhì)、測定結(jié)果要求和檢測儀器的不同，并結(jié)合實際條件選用合適的樣品前處理方法。固相微萃取、加速溶劑萃取、基質(zhì)固相分散等新技術(shù)具有廣泛的應用空間。目前食品中丙烯酰胺的衛(wèi)生標準尚未建立，各國正廣泛開展食品中丙烯酰胺的研究，嘗試了多種方法測定食品中丙烯酰胺，見諸報道的有氣相色譜法（GC），液相色譜法（LC），氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（GC-MS），液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（LC-MS/MS）等，但是這些方法在分析時間、成本及普及性方面各有長短，其最大的問題在于儀器昂貴，樣品前處理方法復雜繁瑣，成本高，不利于在我國普及。食源性接觸丙烯酰胺對人類健康的影響與分析方法和分析數(shù)據(jù)的可靠性有直接的關系，食品中痕量丙烯酰胺的檢驗重點是做好樣品前處理和檢測方法的選擇。鼓勵新型的檢測方法，諸如靶細胞分析定量，DNA損傷測定等生物傳感技術(shù)應用于丙烯酰胺的定量和定性分析檢測中。致謝

感謝指導老師曹振彩老師在論文完成過程中給予的鼓勵、指導和幫助，曹老師認真嚴謹?shù)闹螌W理念和求真務實的科學思想是我學習的榜樣，在此表示誠摯的感謝！另外，學習中心楊建軍老師和薛宏偉老師在我學習期間給予了真摯熱情的關心和幫助；論文在設計寫作過程中還得到了藥用植物研究所資源中心全體師生的幫助和支持，生活中我的家人和好友也給予了不懈的支持，在此，對以上支持幫助我順利完成論文的同事及親友表示感謝。參考文獻

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