第一篇：無(wú)菌技術(shù)操作物品有效期說(shuō)明

無(wú)菌技術(shù)操作物品有效期說(shuō)明

1.無(wú)菌包：未開(kāi)包的有效期為7天，如有效期從2012年5月18日至2012年5月24日（無(wú)菌包標(biāo)簽上有注明）；包內(nèi)物品如一次未用完，剩下的物品24小時(shí)內(nèi)有效。

2.一次性投遞包：未開(kāi)包的有效期為7天，如有效期從2012年5月18日至2012年5月24日（一次性投遞包標(biāo)簽上有注明）。

3.無(wú)菌持物鑷（或鉗）：第一次使用時(shí)，從無(wú)菌包（未開(kāi)的有效期為7天）內(nèi)取出無(wú)菌持物鑷（或鉗）及罐。打開(kāi)后，4小時(shí)內(nèi)有效。

4.無(wú)菌貯槽：未開(kāi)之間有效期為7天，如有效期從2012年5月18日至2012年5月24日（貯槽標(biāo)簽上有注明）；貯槽內(nèi)物品如一次未用完，剩下的物品24小時(shí)內(nèi)有效。

5.無(wú)菌棉球罐（或紗布罐）：第一次使用時(shí)，從無(wú)菌包（未開(kāi)的有效期為7天）內(nèi)取出無(wú)菌棉球罐（或紗布罐），打開(kāi)后，24小時(shí)內(nèi)有效。

6.無(wú)菌溶液：有效期為某一特定時(shí)間，如有效期至2013年5月20日（瓶簽上有標(biāo)明）。打開(kāi)后，剩下的溶液不再作為無(wú)菌溶液使用，有效期24小時(shí)。7.一次性無(wú)菌手套：有效期為某一特定時(shí)間，如有效期至2013年5月20日（包裝袋上有標(biāo)明）。

8.無(wú)菌棉簽：有效期為某一特定時(shí)間，如有效期至2013年5月20日（包裝袋上有標(biāo)明）。打開(kāi)后，4小時(shí)內(nèi)有效。

9.安爾碘：有效期為某一特定時(shí)間，如有效期至2013年5月20日（瓶簽上有標(biāo)明）。打開(kāi)后，7天內(nèi)有效。10.鋪好的無(wú)菌盤(pán)：有效期為4小時(shí)。

所有的無(wú)菌物品打開(kāi)后要在合適的地方注明打開(kāi)的日期和時(shí)間。（如幾月幾日、幾點(diǎn)）

第二篇：無(wú)菌技術(shù)操作教案

《護(hù)理學(xué)基礎(chǔ)》實(shí)驗(yàn)教案

授課章節(jié)： 第三章 醫(yī)院內(nèi)感染的預(yù)防與控制 重 點(diǎn)： 無(wú)菌技術(shù)操作 難 點(diǎn)： 無(wú)菌技術(shù)操作 教學(xué)方法： 實(shí)習(xí)示教 練習(xí)教學(xué)目的：

1、掌握無(wú)菌技術(shù)操作的原則

2、掌握無(wú)菌持物鉗、無(wú)菌容器、無(wú)菌包的使用方法

3、掌握取無(wú)菌溶液的方法及穿脫無(wú)菌手套的方法

4、掌握鋪無(wú)菌盤(pán)的操作步驟

5、掌握正確的洗手方法

6、了解鋪無(wú)菌盤(pán)的目的 學(xué)時(shí)分配：

1.評(píng)估 2min 2.計(jì)劃 3min 3.示教 10min 4.評(píng)估 3min 5.注意事項(xiàng) 2min 6.學(xué)生回示 4min 7.教師指導(dǎo) 6min 8.分組練習(xí)60min 教學(xué)內(nèi)容：

實(shí)踐課 無(wú)菌技術(shù)

一、評(píng) 估

1、評(píng)估環(huán)境 無(wú)菌操作前評(píng)估環(huán)境是否清潔，干燥、寬敞，符合無(wú)菌技術(shù)要求。

2、評(píng)估用物 無(wú)菌巾包、無(wú)菌物品包、無(wú)菌容器及持物鉗、有蓋方盤(pán)、無(wú)菌手套、清潔治療盤(pán)、消毒液是否齊全及在有效期內(nèi)。

3、操作者自身評(píng)估 護(hù)士著裝、手指指甲是否符合無(wú)菌技術(shù)的要求。

二、計(jì) 劃

1、預(yù)期目標(biāo)：

（1）、操作符合無(wú)菌技術(shù)規(guī)范。

（2）、保證無(wú)菌物品、無(wú)菌溶液和無(wú)菌區(qū)域不被污染。

2、準(zhǔn)備

三、實(shí)施（教師示教，操作程序見(jiàn)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)）

四、評(píng)價(jià)

五、注意事項(xiàng)（口述）

六、學(xué)生回示

七、教師指導(dǎo)

八、學(xué)生分十六組練習(xí)，教師輔導(dǎo) 課后小結(jié)： 參考資料：

1、基礎(chǔ)護(hù)理學(xué) 主編 李小寒 人民衛(wèi)生出版社

2、護(hù)理學(xué)基礎(chǔ) 主編 殷磊 人民衛(wèi)生出版社

3、常用護(hù)理技術(shù) 主編 陽(yáng)愛(ài)云 湖南科技出版社

4、與上書(shū)配套錄像

第三篇：無(wú)菌技術(shù)操作流程

無(wú)菌技術(shù)

用物準(zhǔn)備：治療推車(chē)、治療盤(pán)2個(gè)、彎盤(pán)1個(gè)、無(wú)菌持物鉗、無(wú)菌治療包、無(wú)菌治療碗、無(wú)菌手套、無(wú)菌紗布缸、無(wú)菌溶液、棉簽、啟蓋器、碘伏。操作臺(tái)清潔、干燥、操作前禁止打掃衛(wèi)生

操作步驟：“兩位老師好，我考試的項(xiàng)目是無(wú)菌技術(shù)，用物已經(jīng)準(zhǔn)備齊全，請(qǐng)問(wèn)可以開(kāi)始了嗎？”→洗手，戴口罩→攜用物至操作臺(tái)前→取治療盤(pán)放置于操作臺(tái)上→查看無(wú)菌持物鉗滅菌是否有效，包布有無(wú)破損、潮濕，是否在有效期內(nèi)，取出鑷子罐置于治療臺(tái)上，在罐底端注明使用日期及時(shí)間→查看無(wú)菌治療巾包滅菌是否有效，包布有無(wú)破損、潮濕，是否在有效期內(nèi)，解系帶放包布下，無(wú)菌包放置無(wú)障礙臺(tái)上依次打開(kāi)，查看滅菌指示卡→用鑷子夾取無(wú)菌巾放于治療盤(pán)內(nèi)→按原折痕包回?zé)o菌包包布，注明開(kāi)包日期、時(shí)間并放置治療車(chē)上→無(wú)菌巾鋪巾【①單巾：雙手打開(kāi)無(wú)菌巾雙層平鋪于治療盤(pán)內(nèi)呈扇形折疊→開(kāi)口邊向外；②雙巾：雙手持無(wú)菌巾近身一面兩角→由對(duì)側(cè)向近側(cè)平鋪于治療盤(pán)中，無(wú)菌面朝上→取另一塊無(wú)菌巾，用同樣的方法打開(kāi)無(wú)菌巾，無(wú)菌面朝下，由近側(cè)向?qū)?cè)覆蓋于第一塊無(wú)菌巾上→雙手持上層無(wú)菌巾外面的兩角呈扇形折疊于對(duì)側(cè)，開(kāi)口邊向外】→放無(wú)菌治療碗【查看無(wú)菌包滅菌是否有效，包布有無(wú)破損、潮濕，是否在有效期內(nèi)→在手中打開(kāi)無(wú)菌包布，查看滅菌指示卡→包布包裹手反放無(wú)菌治療碗至無(wú)菌盤(pán)中】→取無(wú)菌紗布【查看無(wú)菌容器有效期→打開(kāi)無(wú)菌容器時(shí)，其蓋子朝上放在穩(wěn)妥處或拿在手中→用鑷子夾取無(wú)菌紗布放于無(wú)菌治療碗內(nèi)→用畢及時(shí)蓋好】→倒無(wú)菌溶液【檢查藥液瓶簽、是否在有效期內(nèi)、瓶口有無(wú)松動(dòng)、藥液質(zhì)量是否符合要求→打開(kāi)瓶蓋，沖洗瓶口→倒液體于治療碗內(nèi)】→折無(wú)菌巾（寬邊向上雙折，窄邊向下單折）→注明鋪盤(pán)時(shí)間→消毒瓶口，注明開(kāi)瓶日期時(shí)間→開(kāi)啟無(wú)菌盤(pán)→戴無(wú)菌手套（先查對(duì)手套有效期及型號(hào)）→雙手取無(wú)菌治療碗→脫手套→整理用物，按院感要求分類(lèi)處理→洗手（完成時(shí)間：4分鐘）

第四篇：無(wú)菌操作技術(shù)流程（推薦）

無(wú)菌技術(shù)操作流程

1、尊敬的各位評(píng)委老師大家好，我今天操作的項(xiàng)目是：無(wú)菌操作技術(shù)

2、整理著裝、手消毒液已開(kāi)啟在有效期——七步洗手法——戴口罩

3、我準(zhǔn)備的用物是：清潔治療盤(pán)——無(wú)菌持物鉗——鑷子筒——無(wú)菌治療巾——無(wú)菌治療包——無(wú)菌手套——無(wú)菌生理鹽水——無(wú)菌治療缸——碘伏——棉簽——彎盤(pán)2個(gè)——抹布2塊——物品已備齊，操作開(kāi)始

4、評(píng)估環(huán)境：治療室環(huán)境寬敞、光線充足，治療車(chē)、治療臺(tái)清潔干燥符合無(wú)菌操作

5、拿盤(pán)、擦盤(pán)——快速洗手——無(wú)菌持物鉗及鑷子筒在有效期、包布無(wú)潮濕、無(wú)破損、3m膠帶變色均勻，滅菌合格——去3m膠帶貼桌上——打包——鑷子筒放好夾出化學(xué)指示卡（化學(xué)指示卡變色均勻，滅菌合格）——寫(xiě)開(kāi)啟時(shí)間于3m膠帶上——貼標(biāo)簽于缸緣下2cm處（已開(kāi)啟的持物筒有效期為4個(gè)小時(shí)）——無(wú)菌治療巾在有效期、包布無(wú)潮濕、無(wú)破損、3m膠帶變色均勻——打開(kāi)治療巾——鑷子夾出化學(xué)指示卡（化學(xué)指示卡變色均勻，滅菌合格）——鑷子夾治療巾放入治療盤(pán)中——打開(kāi)——鋪巾——檢查無(wú)菌治療包——打包（化學(xué)指示卡變色均勻，滅菌合格）—夾治療碗放于無(wú)菌治療巾上——無(wú)菌治療缸已開(kāi)啟在有效期—夾取紗布——0.9%氯化鈉注射液250ml在有效期——清潔瓶身——快速洗手——檢查溶液——打開(kāi)鋁蓋——消毒瓶蓋（棉簽、碘伏已開(kāi)啟在有效期——消毒瓶蓋，打開(kāi)瓶蓋——瓶簽在掌心，沖洗瓶口——向碗內(nèi)倒入生理鹽水，蓋好瓶蓋，消毒瓶周2遍，記錄開(kāi)啟時(shí)間（已開(kāi)啟的生理鹽水有效期為24小時(shí)）——鋪好無(wú)菌盤(pán)——記錄鋪盤(pán)人及時(shí)間，已鋪好的無(wú)菌盤(pán)，有效期為4個(gè)小時(shí)——七步洗手法——選擇合適的無(wú)菌手套，檢查手套（無(wú)菌手套在有效期，包裝完好，擠壓無(wú)漏氣）——取出無(wú)菌手套——戴手套（按照規(guī)范方法戴手套）——手套戴好后雙手交叉（調(diào)整手套位置），雙手放于胸前——脫手套（按規(guī)范方法脫手套）——放入黃色垃圾袋中——醫(yī)療垃圾分類(lèi)處理——七步洗手法——操作結(jié)束。

無(wú)菌技術(shù)是指在醫(yī)療護(hù)理操作過(guò)程中，保持無(wú)菌物品不被污染，防止一切微生物侵入或傳播給他人的一系列操作技術(shù)和管理方法，是預(yù)防醫(yī)院內(nèi)感染的一項(xiàng)重要的基本措施。

無(wú)菌操作原則

1.環(huán)境清潔

進(jìn)行無(wú)菌技術(shù)操作前30分鐘，停止清掃工作，減少走動(dòng)，防止塵埃飛揚(yáng)。2.工作人員要求

修剪指甲、戴好口罩、帽子。必要時(shí)穿無(wú)菌衣，戴無(wú)菌手套。

3.物品保管

無(wú)菌物品和非無(wú)菌物品應(yīng)分別放置，并有明顯標(biāo)志。無(wú)菌物品必須存放在無(wú)菌容器或無(wú)菌包內(nèi)，不可暴露在空氣中，無(wú)菌包或無(wú)菌容器外要注明物品名稱(chēng)、滅菌日期，物品按有效期先后順序擺放。

4.操作時(shí)要求

工作人員面向無(wú)菌區(qū)，用無(wú)菌持物鉗取無(wú)菌物品，手臂須保持在腰部水平或治療臺(tái)以上，注意不可跨越無(wú)菌區(qū)。操作時(shí)不可面向無(wú)菌區(qū)講話、咳嗽、打噴嚏。無(wú)菌物品懷疑被污染時(shí)，給予更換。

5.一人一物 一份無(wú)菌物品，僅供一位患者使用，防止交叉感染。

一 無(wú)菌持物鉗的使用

目的：

用于取放或傳遞無(wú)菌物品

注意事項(xiàng)：1無(wú)菌持鉗使用時(shí)，取出和放入時(shí)必須垂直提起和放入，不可觸碰到筒壁 和邊緣。夾取物品時(shí)也是垂直夾取。不可倒置和橫置。

2取遠(yuǎn)處物品時(shí)，應(yīng)當(dāng)連同容器一起移至物品旁進(jìn)行操作。

3無(wú)菌持物鉗不能夾取未滅菌的物品，也不能夾取油紗布（條、球）。

4無(wú)菌鉗使用時(shí)不能低于腰部。

5打開(kāi)包后的干持物筒、持物鉗使用的有效期，≤4小時(shí)。

6不可直接從蓋孔中取、放無(wú)菌持物鉗。

7避免無(wú)菌持物鉗在空氣中暴露過(guò)久。

二無(wú)菌容器的使用

目 的：

無(wú)菌容器是用于盛放無(wú)菌物品并保持其無(wú)菌狀態(tài)的容器。

注意事項(xiàng)：1.夾取無(wú)菌容器內(nèi)物品時(shí)，無(wú)菌持物鉗及無(wú)菌物品不可觸及容器的邊緣

2.移動(dòng)無(wú)菌容器時(shí)，應(yīng)托住底部，手不可觸及無(wú)菌容器邊緣 3.從無(wú)菌容器內(nèi)取出的無(wú)菌物品，雖未使用，也不得在放回?zé)o菌容器內(nèi)。4.無(wú)菌容器應(yīng)定期滅菌，一般有限期為7天。

三.無(wú)菌包的使用

目 的：

用無(wú)菌包布包裹無(wú)菌物品，使無(wú)菌物品保持無(wú)菌狀態(tài)。

注意事項(xiàng)：1.一般無(wú)菌包布的有效期：夏季為7天，冬季為14天，如超過(guò)有效期則

不可使用。

2.開(kāi)包時(shí)手不可觸及無(wú)菌區(qū)域，且包布的任何一角不能到操作臺(tái)面以下。3.如包布內(nèi)有剩余物品，其有效期為24h。

四 無(wú)菌溶液取用法

目 的：

供無(wú)菌操作使用

注意事項(xiàng)：1.檢查溶液質(zhì)量時(shí)要倒轉(zhuǎn)瓶體，對(duì)光檢查。

2.翻開(kāi)瓶蓋時(shí)，手不可觸及瓶口。

3.倒無(wú)菌液時(shí)，瓶簽置于掌心，瓶口不可觸及無(wú)菌容器。4.已倒出的溶液雖未使用，也不可倒回瓶?jī)?nèi)。5.剩余的溶液如繼續(xù)使用，有效期為24h。

五.鋪無(wú)菌盤(pán)法

目 的：

通過(guò)鋪無(wú)菌治療巾，形成以無(wú)菌區(qū)域，放置無(wú)菌物品，供治療護(hù)理使用。

注意事項(xiàng)：1.操作時(shí)，非無(wú)菌物品及身體應(yīng)與無(wú)菌盤(pán)保持適當(dāng)?shù)木嚯x，身體部位不可跨域無(wú)菌區(qū)。

2.無(wú)菌盤(pán)應(yīng)保持干燥，避免潮濕污染。

3.已鋪好的無(wú)菌盤(pán)應(yīng)盡早使用，保留時(shí)間不得超過(guò)4h。

六.戴無(wú)菌手套法

目 的：

在某些醫(yī)療護(hù)理操作時(shí)為確保無(wú)菌效果操作者需戴無(wú)菌手套。

注意事項(xiàng)：1.未戴手套的手不可觸及無(wú)菌手套的外面，已戴手套的手不可觸及未戴手套的手及手套的內(nèi)面。

2.戴手套后如發(fā)現(xiàn)手套有破損或不慎污染，應(yīng)立即更換。

3.戴手套后，手臂不可下垂，應(yīng)保持在腰以上，肩以下，兩側(cè)腋中線之間 的范圍內(nèi)活動(dòng)。

第五篇：無(wú)菌物品檢討書(shū)

篇一：使用違禁物品檢討書(shū) 使用違禁物品檢討書(shū) 尊敬的老師：

對(duì)于今天被學(xué)校組織沒(méi)收了違禁物品一事，我感到萬(wàn)分的慚愧。學(xué)校一再?gòu)?qiáng)調(diào)遵守校紀(jì)校規(guī)，老師也時(shí)刻提醒我們，尤其是不要私用電器這方面。為此，我必須做出深刻的檢討。

今天下午，學(xué)校保衛(wèi)處對(duì)宿舍樓進(jìn)行了安全檢查，我們寢室的電水壺被沒(méi)收了。當(dāng)老師拿走水壺時(shí)，我意識(shí)到了事情的嚴(yán)重性，除了擔(dān)心、害怕，更多的是深深的懊惱與后悔。作為學(xué)生，不觸犯校規(guī)，不違反紀(jì)律，做好自己的事是最基本的責(zé)任與義務(wù)。作為預(yù)備黨員，在學(xué)習(xí)、生活中起帶頭模范作用也是最基本的義務(wù)。作為星級(jí)宿舍成員，我們更要以身作則，嚴(yán)格遵守校紀(jì)校規(guī)。想想這些，更加覺(jué)得羞愧萬(wàn)分，我犯了最基本的錯(cuò)誤，更不要說(shuō)起帶頭作用了。

我這次違反紀(jì)律的錯(cuò)誤行為，首先是自己的思想、紀(jì)律意識(shí)太過(guò)薄弱。在做出錯(cuò)誤行為之前完全沒(méi)有清楚認(rèn)識(shí)到自己所作所為將產(chǎn)生的不良后果，以為這種隨波逐流的做法是一種無(wú)關(guān)緊要的行為，卻不知就是這種錯(cuò)誤的想法給學(xué)校，更是給老師的管理工作帶來(lái)了巨大的麻煩與影響。

其次，我覺(jué)得我對(duì)自己的紀(jì)律要求不嚴(yán)格，各方面的約束能力還有所欠缺，安全觀念也很薄弱。學(xué)校制定的校紀(jì)校規(guī)，老師的三令五申無(wú)非都是從我們學(xué)生的角度出發(fā)，想為我們創(chuàng)造一個(gè)安全的學(xué)習(xí)、生活環(huán)境。一旦脫離學(xué)校、老師的監(jiān)督管理，大肆使用違禁電器，后果將不堪設(shè)想。由于自身的種種不全面的錯(cuò)誤意識(shí)，導(dǎo)致了這次事件的發(fā)生。我們的行為不僅給我們自己帶來(lái)了麻煩，在同學(xué)中也會(huì)造成不良影響，還會(huì)產(chǎn)生安全隱患，也破壞了老師的管理制度，更是傷害了老師對(duì)我們的期望與信任。

在此，我真的深刻意識(shí)到了自己犯了嚴(yán)重的錯(cuò)誤，我知道我必須為自己犯的錯(cuò)誤付出代價(jià)，承擔(dān)責(zé)任。我會(huì)以這次的錯(cuò)誤行為作為警示，時(shí)時(shí)反省、批評(píng)和教育自己，自覺(jué)接受同學(xué)、老師的監(jiān)督。

我也要通過(guò)這次事件，提高我的思想認(rèn)識(shí)，強(qiáng)化責(zé)任措施。今后，我必須進(jìn)一步深刻學(xué)習(xí)各種規(guī)范紀(jì)律，查找自己思想以及行為上的不足。更要對(duì)自己的言行舉止做嚴(yán)格要求，加強(qiáng)自己的規(guī)范紀(jì)律意識(shí)，遵守校紀(jì)校規(guī)，絕不違反。

通過(guò)這份檢討，我會(huì)讓自己牢記老師的教誨，讓自己時(shí)刻敲響警鐘。希望老師能認(rèn)可我的悔過(guò)態(tài)度，對(duì)于這一切我將繼續(xù)深刻反省，希望老師能夠我們一個(gè)改過(guò)的機(jī)會(huì)，我們能保證今后絕不再犯。今后，我會(huì)嚴(yán)格遵守學(xué)校的各項(xiàng)規(guī)章制度，我們會(huì)相互督促，不會(huì)再讓老師以及學(xué)校的各位領(lǐng)導(dǎo)失望，不會(huì)再做出任何給年級(jí)抹黑的行為。請(qǐng)老師相信并監(jiān)督。篇二：倉(cāng)庫(kù)丟失物品的檢討書(shū) 倉(cāng)庫(kù)丟失物品的檢討書(shū) 尊敬的老板：

對(duì)于倉(cāng)庫(kù)丟失物品的事情，我感到非常遺憾，這很明顯就是我的過(guò)錯(cuò)。我不應(yīng)該這樣的馬虎懈怠工作，導(dǎo)致工作當(dāng)中丟失掉這么多物品，給公司造成了巨大損失。

面對(duì)錯(cuò)誤，我感到非常痛苦，我真的感覺(jué)非常對(duì)不起您。深刻地研究錯(cuò)誤，我發(fā)現(xiàn)我自身存在這三方面問(wèn)題：1，我太粗心了。2，我太不小心了。3，我沒(méi)有對(duì)工作有足夠重視。

現(xiàn)如今，我的錯(cuò)誤已經(jīng)發(fā)生，而且無(wú)法挽回，我覺(jué)得自己愧對(duì)公司，愧對(duì)于你，我真的是大錯(cuò)特錯(cuò)?，F(xiàn)在，我只有進(jìn)行徹底的悔改，才能贖清我的錯(cuò)誤啊。

在此，我向您保證，從今往后我一定要嚴(yán)肅認(rèn)真地對(duì)待這個(gè)倉(cāng)庫(kù)管理工作。再也不在工作當(dāng)中肆意粗心大意，一定要好好地做好這份倉(cāng)管員的工作。此致!篇三：無(wú)菌檢測(cè)操作規(guī)程 無(wú)菌檢測(cè)作業(yè)指導(dǎo)書(shū) 1目的 規(guī)范公司產(chǎn)品的無(wú)菌檢測(cè)的工作流程和內(nèi)容。2 適用范圍

生化實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的無(wú)菌室。3職責(zé)

生化實(shí)驗(yàn)室：無(wú)菌檢驗(yàn)專(zhuān)員：負(fù)責(zé)公司產(chǎn)品的無(wú)菌檢測(cè)。4 定義

4.1 成 品：環(huán)氧乙烷（eog）滅菌后的產(chǎn)品。4.2 滅菌批：成品環(huán)氧乙烷（eog）滅菌的批次。5 工作流程圖

實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備——實(shí)驗(yàn)——實(shí)驗(yàn)后整理 6 程序內(nèi)容

6.1 檢測(cè)環(huán)境的要求

潔凈度10000級(jí)以下局部100級(jí)的超凈工作臺(tái)單向流空氣環(huán)境下，并且環(huán)境 潔凈度檢驗(yàn)合格。

6.2培養(yǎng)基和稀釋液、沖洗液的制備 6.2.1培養(yǎng)基的制備：

依照《中國(guó)藥典》2010版第二部“無(wú)菌檢查法”中“培養(yǎng)基”一欄中的方 法準(zhǔn)備，見(jiàn)附頁(yè)1。

6.2.2提取液，沖洗液的制備：

依照《中國(guó)藥典》2010版第二部“無(wú)菌檢查法”中“稀釋液、沖洗液及其 制備方法”一欄中的方法準(zhǔn)備，見(jiàn)附頁(yè)1。6.3 無(wú)菌檢查方法的驗(yàn)證

在第一次進(jìn)行試驗(yàn)或者檢驗(yàn)因素發(fā)生變化時(shí)，應(yīng)依照《中國(guó)藥典》2010版 第二部“無(wú)菌檢查法”中“方法驗(yàn)證試驗(yàn)”一欄中的方法進(jìn)行，見(jiàn)附頁(yè)2。6.4 產(chǎn)品的檢驗(yàn)

6.4.1 檢驗(yàn)對(duì)象：環(huán)氧乙烷（eog）滅菌后的成品 6.4.2 檢驗(yàn)頻次：按滅菌批次進(jìn)行無(wú)菌檢驗(yàn)。6.4.3 抽檢數(shù)量：

產(chǎn)品≤100件，10%或4件（取較大者）100件<產(chǎn)品≤500，10件

產(chǎn)品>500件，2%或20件（取較小者）6.4.4 檢驗(yàn)方法：

具體方法依照《中國(guó)藥典》2010版第二部“無(wú)菌檢查法”中“供試品的無(wú)

菌檢查”一欄中的方法進(jìn)行，采用薄膜過(guò)濾法，做陰性、陽(yáng)性對(duì)照試驗(yàn)，培養(yǎng)14天，祥見(jiàn)附頁(yè)2。

6.5結(jié)果判定：

依照《中國(guó)藥典》2010版第二部“無(wú)菌檢查法”中“結(jié)果判斷”一欄中的 方法進(jìn)行，見(jiàn)附頁(yè)2。

一、培養(yǎng)基的制備

1.硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基(用于培養(yǎng)好氧菌、厭氣菌)酪胨（胰酶水解）15g 氯化鈉 2.5g 葡萄糖 5g 新配制的0.1％刃天青溶液 1.0ml l-胱氨酸 0.5g(或新配制的0.2％亞甲藍(lán)溶液0.5ml)硫乙醇酸鈉0.5g(或硫乙醇酸0.3ml)瓊脂0.75g 水 1000ml 酵母浸出粉5g 除葡萄糖和刃天青溶液外，取上述成分混合，微溫溶解后，調(diào)節(jié)ph為弱堿性，煮沸，濾清，加入葡萄糖和刃天青溶液，搖勻，調(diào)節(jié)ph值使滅菌后為7.1±0.2，分裝至適宜的器 中，其裝量與容器高度的比例應(yīng)符合培養(yǎng)結(jié)束后培養(yǎng)基氧化層（粉紅色）不超過(guò)培養(yǎng)基深度 的1/2。滅菌。在供試品接種前, 培養(yǎng)基氧化層的高度不得超過(guò)培養(yǎng)基深度的1/5，否則,須

經(jīng)100℃水浴加熱至粉紅色消失（不超過(guò)20分鐘）迅速冷卻, 只限加熱一次，并應(yīng)防止被污 染。硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基置30~35℃培養(yǎng)。2.改良馬丁培養(yǎng)基（用于培養(yǎng)真菌）胨 5g 磷酸氫二鉀 1g 酵母浸出粉 2g 硫酸鎂0.5g 葡萄糖20g 水 1000ml 除葡萄糖外，取上述成分混合，微溫溶解，調(diào)節(jié)ph值約為6.8，煮沸,加入葡萄糖溶解 后，搖勻，濾清，調(diào)節(jié)ph值使滅菌后為6.4±0.2，分裝，滅菌。改良馬丁培養(yǎng)基置23~28℃培養(yǎng)。

二、提取液、沖洗液的制備

1.ph7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液取磷酸二氫鉀3.56g、磷酸氫二鈉7.23 g、氯化鈉 4.30g、蛋白胨1.0g，加水1000ml，微溫溶解，濾清，分裝，滅菌。2.0.9%氯化鈉溶液 取氯化鈉9g，加水1000ml，溶解，分裝，滅菌。

一、培養(yǎng)基的適用性檢查

1.無(wú)菌性檢查 取滅菌后的兩種培養(yǎng)基各5支，按規(guī)定溫度培養(yǎng)14天，均應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng) 2.靈敏度檢查 2.1.所需菌種

金黃色葡萄球菌[cmcc(b)26 003] 枯草芽孢桿菌[cmcc(b)63 501]生孢梭菌[cmcc(b)64 941] 白色念珠菌[cmcc（f）98001]黑曲霉[cmcc(f)98 003] 2.2菌液制備

2.2.1 將金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌的新鮮培養(yǎng)物分別接種至營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中，35 ℃培養(yǎng)24小時(shí)，分別用0.9%無(wú)菌氯化鈉溶液稀釋成每毫升含50-100cfu的菌液。2.2.2 接種生孢梭菌的新鮮培養(yǎng)物至硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基中，35℃培養(yǎng)24h，用0.9% 無(wú)菌氯化鈉溶液稀釋成每毫升含50-100cfu的菌液。

2.2.3 將白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物接種至改良馬丁培養(yǎng)基上，24℃培養(yǎng)48小時(shí)，用0.9% 無(wú)菌氯化鈉溶液稀釋成每毫升含50-100cfu的菌液。

2.2.4 將黑曲霉菌的孢子接種至改良馬丁瓊脂斜面培養(yǎng)基上，24℃培養(yǎng)5天，加入5毫 升0.9%無(wú)菌氯化鈉溶液，將孢子洗脫。然后用一支管口包有無(wú)菌棉花且能過(guò)濾菌絲的10毫 升吸管吸出孢子懸液至無(wú)菌試管內(nèi)，用0.9%無(wú)菌氯化鈉溶液制成每毫升含孢子數(shù)50-100cfu 的孢子懸液。2.3 培養(yǎng)基接種

取每管裝量為12ml的硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基9支，分別接種確定好稀釋級(jí)的金黃 色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌、生孢梭菌各2支，另1支不接種作為空白對(duì)照，培養(yǎng)3天；取每管裝量為9ml的改良馬丁培養(yǎng)基5支，分別接種確定好稀釋級(jí)的白色念珠 菌、黑曲霉各2支，另1支不接種作為空白對(duì)照，培養(yǎng)5天，逐日觀察結(jié)果。2.4 結(jié)果判斷

空白對(duì)照管應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)，若加菌的培養(yǎng)基管均生長(zhǎng)良好，判該培養(yǎng)基的靈敏度檢 查符合規(guī)定。

二、方法認(rèn)證 1.所需菌種

大腸埃希菌[cmcc(b)44 102] 金黃色葡萄球菌[cmcc(b)26 003] 枯草芽孢桿菌[cmcc(b)63 501]生孢梭菌[cmcc(b)64 941] 白色念珠菌[cmcc（f）98001]黑曲霉[cmcc(f)98 003] 2.菌液制備

2.1 將大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌的新鮮培養(yǎng)物分別接種至營(yíng)養(yǎng)肉湯 培養(yǎng)基中，35 ℃培養(yǎng)24小時(shí)，分別用0.9%無(wú)菌氯化鈉溶液稀釋成每毫升含50-100cfu的菌 液。

2.2 接種生孢梭菌的新鮮培養(yǎng)物至硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基中，35℃培養(yǎng)24h，用0.9%無(wú) 菌氯化鈉溶液稀釋成每毫升含50-100cfu的菌液。

2.3 將白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物接種至改良馬丁培養(yǎng)基上，24℃培養(yǎng)48小時(shí)，用0.9% 無(wú)菌氯化鈉溶液稀釋成每毫升含50-100cfu的菌液。

2.4 將黑曲霉菌的孢子接種至改良馬丁瓊脂斜面培養(yǎng)基上，24℃培養(yǎng)5天，加入5毫升 0.9%無(wú)菌氯化鈉溶液，將孢子洗脫。然后用一支管口包有無(wú)菌棉花且能過(guò)濾菌絲的10毫升 吸管吸出孢子懸液至無(wú)菌試管內(nèi)，用0.9%無(wú)菌氯化鈉溶液制成每毫升含孢子數(shù)50-100cfu的孢子懸液。3.薄膜過(guò)濾法：

對(duì)于二回路和注射器，用10ml注射器按10cm2：1ml吸取提取液，以10ml/min速度沖洗產(chǎn)品內(nèi)壁；對(duì)于導(dǎo)管、導(dǎo)鞘，按作用部位剪成幾段（每段大約3cm），放入提取液中（按10cm2：1ml），提取30min，收集沖洗液（提取液）于無(wú)菌三角瓶中，將收集液倒于濾膜上，過(guò)濾，再用提取液沖洗濾膜，反復(fù)三次，在最后一次沖洗液中加入確定好稀釋級(jí)的試驗(yàn)菌，過(guò)濾，取出濾膜接種至相應(yīng)的培養(yǎng)基中，另取一裝有同體積培養(yǎng)基的平皿，加入等量的試驗(yàn)菌，作為對(duì)照。按規(guī)定溫度培養(yǎng)3—5天。各試驗(yàn)菌同法操作。4.直接接種法：（適用于麻醉針）

取裝有20ml硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基的試管8個(gè)，分別接入確定好稀釋級(jí)的金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌、生孢梭菌各2個(gè)；取裝有15ml改良馬丁培養(yǎng)基的試管4個(gè)，分別接入確定好稀釋級(jí)的白色念株菌、黑曲霉各2個(gè)。其中1個(gè)接入供試品，另1個(gè)作為對(duì)照品，按規(guī)定的溫度培養(yǎng)3~5天。5.結(jié)果判斷

與對(duì)照管比較，如含供試品各容器中的試驗(yàn)菌均生長(zhǎng)良好，則供試品的該檢驗(yàn)條件下無(wú)抑菌作用或其抑菌作用可以忽略不計(jì)，照此檢查法和檢查條件進(jìn)行供試品的無(wú)菌檢查。如含供試品的任一容器中微生物生長(zhǎng)微弱、緩慢或不生長(zhǎng)，則供試品的該檢驗(yàn)量在該檢驗(yàn)條件下有抑菌作用，可采用增加沖洗量，或增加培養(yǎng)基的用量，更換濾膜品種等方法，消除供試品的抑菌作用，并重新進(jìn)行方法驗(yàn)證。

三、產(chǎn)品檢查

1.取規(guī)定量產(chǎn)品，對(duì)于二回路和注射器，用10ml注射器按10cm2：1ml吸取提取液，以10ml/min速度沖洗產(chǎn)品內(nèi)壁；對(duì)于導(dǎo)管、導(dǎo)鞘，按作用部位剪成幾段（每段大約3cm），放入提取液中（按10cm2：1ml），提取30min，收集提取液于無(wú)菌三角瓶中，將沖洗液（提取液）分成三份，分別將其倒于三張濾膜上，過(guò)濾，再用沖洗液（提取液）沖洗濾膜，反復(fù)三次，取出濾膜，分別置于含20ml硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基及改良馬丁培養(yǎng)基的試管中，其中一份做陽(yáng)性對(duì)照用。對(duì)于麻醉針，按作用部位剪成幾段（每段大約3cm），并分成3份，分別置于含20ml硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基及改良馬丁培養(yǎng)基的試管中，其中一份做陽(yáng)性對(duì)照用。

3.陰性對(duì)照：方法同上，只是直接將沖洗液或提取液倒于濾膜上或直接加入培養(yǎng)基中。其上不得有菌生長(zhǎng)。4.培養(yǎng)及觀察

上述含培養(yǎng)基的容器按規(guī)定的溫度培養(yǎng)14天。培養(yǎng)期間應(yīng)逐日觀察并記錄是否有菌生長(zhǎng)。如在加入供試品后、或在培養(yǎng)過(guò)程中，培養(yǎng)基出現(xiàn)渾濁，培養(yǎng)14天后，不能從外觀上判斷有無(wú)微生物生長(zhǎng)，可取該培養(yǎng)基液適量轉(zhuǎn)種至同種新鮮培養(yǎng)基中或劃線接種于斜面培養(yǎng)基上，細(xì)菌培養(yǎng)2天、真菌培養(yǎng)3天，觀察接種的同種新鮮培養(yǎng)基是否再出現(xiàn)渾濁或斜面是否有菌生長(zhǎng)；或取培養(yǎng)液涂片，染色，鏡檢，判斷是否有菌。

5、結(jié)果判斷

若供試品均澄清，或雖顯渾濁但經(jīng)確證無(wú)菌生長(zhǎng)，判供試品符合規(guī)定；若供試品管中任何一管顯渾濁并確證有菌生長(zhǎng)，判供試品不符合規(guī)定，除非能充分證明試驗(yàn)結(jié)果無(wú)效。當(dāng)符合下列至少一個(gè)條件時(shí)，方可判試驗(yàn)結(jié)果無(wú)效：

（1）無(wú)菌檢查試驗(yàn)所用的設(shè)備及環(huán)境的微生物監(jiān)控結(jié)果不符合無(wú)菌檢查法的要求；