第一篇：譜峭度超全個人總結(jié)

譜峭度

1.譜峭度及其應(yīng)用

在滾動軸承的狀態(tài)監(jiān)測以及故障診斷中經(jīng)常會用到峭度。以前人們沒有考慮到對故障信息第一步進(jìn)行濾波操作再利用峭度可以獲得更準(zhǔn)確的結(jié)論。Dwyer由1983 年第一次提出了譜峭度的含義，譜峭度對信號中瞬態(tài)成分十分敏感，但是由于譜峭度的復(fù)雜性在當(dāng)時并沒有得到大多數(shù)人的認(rèn)可。Antoni 于2006 年提出了譜峭度的確切含義，他把譜峭度做了詳細(xì)的介紹指出了譜峭度的定義、算法及其應(yīng)用條件，自此以后國內(nèi)外普遍應(yīng)用譜峭度的方法進(jìn)行狀態(tài)監(jiān)測與故障診斷。

1.1譜峭度定義

對于非平穩(wěn)信號的 Wold-Cramer 分解，Y(t)是系統(tǒng)響應(yīng)，X(t)為信號，則Y(t)的表達(dá)式為：

Y(t)??????e2?fjtH(t,f;?)dX(f)（1）

式中，H(t,f;?)為系統(tǒng)的時變傳遞函數(shù)。

它是隨著時間t變化的，可以把它當(dāng)成信號Y(t)的復(fù)包絡(luò)。S2nY(t,f)為信號Y(t)的2n階瞬時矩，它的公式是這樣的：

S2nY(t,f)?EH(t,f)dX(f)?2n?/df?dX(f)2nS2nX(t,f)（2）

式中，S2nY(t,f)為2n 階瞬時矩； E 為期望操作符。定義Y(t)的2n階譜矩S2nY(t,f)的表達(dá)式如下：

S2nY(f)?ES2nY(t,f)?（3）

?四階譜累積量C4Y(f)的表達(dá)式如下：

2C4Y(f)?S4Y(f)?2S2Y(f)f?0（4）

因此譜峭度可以定義為：

CY(f)S4Y(f)KY(f)?4?2?2(5)2S2(f)S(f)Y2Y譜峭度的計(jì)算方法有很多如：短時傅立葉變換(STFT)計(jì)算、利用連續(xù)小波變換、以及基于濾波帶的快速譜峭度計(jì)算等。

1.2基于短時傅立葉變換(STFT)的計(jì)算

信號x(t)的短時傅立葉可用如下公式表示：

STFT(t,f)??x(n)w(n?t)e?j2?fn（6）

???式中，w(n)為長度為N w 的窗函數(shù)。定義STFT(t, f)的2n階譜距為：

?2nS2nY?STFT(t,f)（7）

k當(dāng)n 分別取1 和2 的時候，基于短時傅里葉變換的峭度譜可以表示為：

??s4Y(f)KY(f)???2（8）

s2Y(f)需要注意的是：在譜峭度的計(jì)算當(dāng)中，STFT 的窗長有著要求。

1.3基于小波變換的計(jì)算

小波的種類多種多樣，特點(diǎn)各有不同，據(jù)分析可知復(fù)Morlet 小波在應(yīng)用于 譜峭度的時候有著獨(dú)有的優(yōu)勢。其公式如下：

?t?j2?ft（9）u(t)?ee?220或者：

u(f)?u?(f)?e?(?2/?2)(f?f0)2（10）

式中，U(f)為u(t)的傅立葉變換；U*(f)為U(f)的共軛函數(shù)。

因?yàn)閁(f)是實(shí)函數(shù)，所以其共軛函數(shù)是其自身，假如復(fù) Morlet 小波具有濾波器的功能的話，f0就是濾波時的中心頻率，帶寬為?，其頻帶為?f0??f0????2,2?。

??復(fù)平移Morlet 小波是以Morlet 小波為基礎(chǔ)變化得來的即復(fù)Morlet 小波具有變化的中心頻率和帶寬，那么就可以利用不同的中心頻率和帶寬組成帶通濾波器組，公式如下：

u(?,fi,t)?或者

??t?j2?ftee（11）?22iu(?,fi)?u?(?,fi)?e?(?/?)(f?fi)（12）

以頻率和帶寬為變量的小波系數(shù)為：

W(?,fi,t)?F?1?Y(f)U(?,fi)?（13）由信號包絡(luò)理論可以知道，信號的包絡(luò)是由小波系數(shù)的模得來的。得到包絡(luò)信號那么譜峭度的公式如下：

222K(fi)?

E(W(?,fi,t))(E(W(?,fi,t)))224?2(14)

第二篇：英文面試超全總結(jié)

Q： Can you sell yourself in two minutes？ Go for it.（你能在兩分鐘內(nèi)自我推薦嗎？大膽試試吧！）A： With my qualifications and experience, I feel I am hardworking, responsible and diligent in any project I undertake.Your organization could benefit from my analytical and interpersonal skills.（依我的資格和經(jīng)驗(yàn)，我覺得我對所從事的每一個項(xiàng)目都很努力、負(fù)責(zé)、勤勉。我的分析能力和與人相處的技巧，對貴單位必有價值。)

（二）Good morning!It is really my honor to have this opportunity for an interview, I hope I can make a good performance today.I'm confident that I can succeed.Now I will introduce myself briefly.I am 26 years old,born in shandong province.(General Introduction)I was graduated from Qingdao university.my major is electronic.and I got my bachelor degree after my graduation in the year of 2003.During university, I spent most of my time on study so that I have passed CET4/6.and acquired basic knowledge of my major.(Education background)In July 2003, I began work for a small private company as a technical support engineer in QingDao.Because I'm capable of more responsibilities, so I decided to change my job.And in August 2004,I left QingDao to BeiJing and worked for a foreign enterprise as an automation software test engineer.Because I want to change my working environment, I'd like to find a job which is more challenging.Moreover Motorola is a global company, so I feel I can gain the most from working in this kind of company ennvironment.That is the reason why I come here to compete for this position.(Research experience and academic activity)I think I'm a good team player and I'm a person of great honesty to others.Also I am able to work under great pressure.That's all.Thank you for giving me the chance

（三）good morning, my name is jack, it is really a great honor to have this opportunity for an interview, I would like to answer whatever you may raise, and I hope I can make a good performance today, eventually enroll in this prestigious company in September.Now I will introduce myself briefly,I am 21 years old,born in heilongjiang province ,northeast of china,and I am curruently a senior student at Beijing XX University.My major is packaging engineering.and I will receive my bachelor degree after my graduation in June.In the past 4 years,I spend most of my time on study,I have passed CET4/6 with an ease.and I have acquired basic knowledge of packaging and publishing both in theory and in practice.Besides, I have attend several packaging exhibition held in Beijing, which is our advantage studying here, I have taken a tour to some big factories and companies.Through these I have a deeply understanding of domestic packaging industry.Compared to developed countries, unfortunately, although we have made extraordinary progress since 1978,our packaging industry are still underdeveloped, mess, unstable, the situation of employees in this field is awkward.But I have full confidence in a bright future if only our economy can keep the growth pace still.I would like to tell you that pursuing the major is one of my lifelong goal,I like packaging and I won't give up.If I can pursue my dream here, I will combine practice with my former education.I will work hard in these fields.I cannot describe my character well, but I know I am optimistic and confident.sometimes I prefer to stay alone, reading, listening to music, but i am not lonely, i like to chat with my classmates, almost talk everything ,my favorite pastime is valleyball,playing cards or surfing on line.Through college life,I learn how to balance between study and entertainment.By the way, i was a actor of our amazing drama club.I had a few glorious memories on stage.They are my pride.英語面試自我介紹常用句型

英語面試自我介紹并不需要花哨的語言，只需要用最準(zhǔn)確、簡練的句子和短語表達(dá)出來即可。

1.May I introduce myself? 我可以自我介紹一下嗎?

2.Let me introduce myself.讓我自我介紹一下。

3.Do you mind if I introduce myself? 讓我自我介紹一下好嗎?

6.I graduated three years ago.我已經(jīng)畢業(yè)三年了。

7.I am an economics major./ I major in economics.我主修經(jīng)濟(jì)學(xué)。

8.I enjoy singing and dancing.我喜愛唱歌和跳舞。

9.Let me do the introduction.讓我來介紹一下自己。

10.Which aspect do you want to know about me?/What do you want to know about myself? 您想知道我哪方面的情況?

11.I noticed that you advertised a job in this morning’s paper.我看到你們在今早的報紙上刊登的招聘廣告。

12.I’m coming for your advertisement for ….我是來應(yīng)聘你們廣告上的……職位的。

13.I have applied for the position of ….我申請了貴公司的……職位。

14.Do you have any jobs for a part-timer? 你們需要兼職嗎?

15.I’d like to know if you need a full-time secretary.我想知道你們是否需要全職秘書。

16.I’m looking for a job.Are there any vacancies? 我在找工作，請問你們有空缺嗎?

17.I got a degree in Literature and took a course in typing.我獲得了文學(xué)學(xué)士學(xué)位，還學(xué)過打字。

18.I think I’m quite fit for assistant’s job.我覺得我很適合做助理的工作。

19.I’m quite familiar with editing.我做過很多編輯工作。

20.I was thinking of a job in a school.我打算到學(xué)校找份工作。

21.I worked in the accounting section of a manufacturer of electrical products.我曾在電子產(chǎn)品制造商的會計(jì)組工作。

22.I haven’t done anything like that before.我以前沒有做過這種工作。

23.I used to work as a sale’s manager.我以前做銷售經(jīng)理。

24.Im a curious person, and I like learning new things.我是個充滿好奇心的人，喜歡學(xué)習(xí)新的事物。

25.I have been working as a computer programmer for five years.To be specific, I do system analysis, trouble shooting and

provide software support.我干了五年的電腦程序員。具體地說，我做系統(tǒng)分析，解決問題以及軟件供應(yīng)方面的支持。

26.Well, I am hoping to get an offer of a better position.If an opportunity knocks, I will take it.我希望能獲得一份更好的工作，如果機(jī)會來臨，我會抓住。

27.I feel I have reached the glass ceiling in my current job./ I feel there is no opportunity for advancement.我覺得目前的工作，已經(jīng)達(dá)到頂峰，即沒有升遷機(jī)會。

28.With my qualifications and experience, I feel I am hardworking, responsible and diligent in any project I undertake.Your organization could benefit from my analytical and interpersonal skills.依我的資格和經(jīng)驗(yàn)，我覺得我對所從事的每一個項(xiàng)目都很努力、負(fù)責(zé)、勤勉。我的分析能力和與人相處的技巧，對貴單位必有價值。

29.With my strong academic background, I am capable and competent.憑借我良好的學(xué)業(yè)背景，我可以勝任自己的工作，而且我認(rèn)為自己很有競爭力。

30.With my teaching experience, I am confident that I can get along with the students very well.依我的教學(xué)經(jīng)驗(yàn)，我相信能與學(xué)生相處得很好。

31.I feel I can make some positive contributions to your company in the future.我覺得我對貴公司能做些積極性的貢獻(xiàn)。

32.My school training combined with my practice in the factories should qualify me for this particular job.I am sure I will be successful.我在研究所的訓(xùn)練，加上實(shí)習(xí)工作，使我適合這份工作。我相信我能成功。

33.The trait is needed in my current(or previous)position and I know I can handle it well.這種特點(diǎn)就是我目前(先前)工作所需要的，我知道我能應(yīng)付自如。

34.I think Im reasonably optimistic by nature.我想我生性是相當(dāng)樂觀的。

35.Im quite hard-working, responsible, capable, and outgoing.我覺得自己是個工作勤奮、負(fù)責(zé)、能干，而且外向的人。英語自我介紹（面試培訓(xùn)機(jī)構(gòu)范文）

【世界經(jīng)理人學(xué)堂-訊】英語面試自我介紹范文

I am Sravani, I am from Secunderabad.My hobbies are listening to music most of the time and playing badminton, indoor games such as caroms , chess etc.My strengths are, I am optimistic in nature, and my parents.Coming to my family background we are four of us: me, my father, mother and a younger brother.My father is SCR employee, mom house wife and brother is perceiving his B.Pharm 3rd year.Moving on to my educational background: I have done my schooling from Keyes high school in the year 2002, I finished bipc from srichaitanya in the year 2004, i have completed B.Sc.Nursing from Yashoda institutions under NTR university in the year 2008.The whole of 2009 I was working as staff nurse in Yashoda hospital.Right now I am looking out for BPO because I got engaged last year, my in-laws are against me not to work in nursing department.So, i am looking out for BPO because as it provides good platform for freshers and more over it would welcome a person at any educational level with good communication skills and ability to handle customers.英文自我介紹范文一（中英文對照）

【世界經(jīng)理人學(xué)堂-訊】good morning, everyone!it is my great honor to attend the interview.My name is XX.I am from XX university，my majoy is biological engineering.I hope you can know more about me through the introduction of myself.I have served as the monitor in class and the vice-chairman of student union during the school time.And I have got honors such as national scholarship, the excellent student of school, outstanding student cadres, etc.I do well on work which are from teachers in school.i am also participate in various activities and social practice.and this provide me a good platform for contacting society in future.at the same time I trained to handle interpersonal relationships.in the spare time of studying and working，I have attended the training out of class and have passed the national senior nutritionists and middle band of jiangsu English oral test, got the social approval certificates.On Scientific research, I have finished the project of the “science and technology supermarket”in school.And the project imbursed by the jiangsu province college students innovation fund is performing now.besides，I have published two articles in core journals.In this four years, i have made great progress not only mastering the professional knowledge, but also cultivating various ability, I believe that these will benefit me significant in study as well as work in future.I think everything should be done with great enthusiasm.We should cherish every opportunity and be diligence!Hope you can give me this opportunity, I believe I will do better.Thank you!(下面是對應(yīng)的中文介紹)

各位導(dǎo)師早上好,非常榮幸能參加這次面試,我是來自XX大學(xué)生物工程專業(yè)的學(xué)生,我叫XX.希望通過介紹能讓各位老師對我有進(jìn)一步的認(rèn)識.在學(xué)校期間我曾擔(dān)任班長和校學(xué)生會副主席的職務(wù),同時取得過國家獎學(xué)金，校三好學(xué)生,優(yōu)秀團(tuán)員，優(yōu)秀學(xué)生干部等多項(xiàng)榮譽(yù).我能夠做好自己本職工作,把學(xué)校老師的工作落實(shí)到位,還參加各種組織活動和社會實(shí)踐,為我更快走向社會提供了良好的平臺,培養(yǎng)了我對人際關(guān)系的處理能力.在學(xué)習(xí)和工作之余，我還參加了校外的培訓(xùn)班，通過了國家高級營養(yǎng)師和江蘇省英語中級口語的考試，拿到了社會認(rèn)可的證書?？蒲蟹矫妫以趯W(xué)?？萍汲械捻?xiàng)目已結(jié)項(xiàng)，江蘇省大學(xué)生創(chuàng)新基金中的項(xiàng)目還在進(jìn)行，另外我在核心期刊也已發(fā)表論文兩篇。

在校四年即將結(jié)束,回顧四年的學(xué)習(xí)生活,感覺收獲很多 不僅掌握了專業(yè)知識,也培養(yǎng)了自己各方面的能力,我相信這些對今后的學(xué)習(xí)與工作都將產(chǎn)生重要的幫助.我覺得凡事從小事做起,珍惜每一次的機(jī)會,用萬分的熱情,堅(jiān)韌的性格和勤奮的態(tài)度,展示自我,挑戰(zhàn)自我!希望各位老師,能給我這個機(jī)會,相信我的努力一定不會讓大家失望

英文自我介紹地道表達(dá)自己的優(yōu)點(diǎn)

世界經(jīng)理人學(xué)堂-訊】Mature，dynamic and honest。思想成熟、精明能干、為人誠實(shí)。

Excellent ability of systematical management。有極強(qiáng)的系統(tǒng)管理能力。

Ability to work independent1y，mature and resourcefu1。能夠獨(dú)立工作、思想成熟、應(yīng)變能力強(qiáng)。

A person with ability plus flexibility should app1y。需要有能力及適應(yīng)力強(qiáng)的人。

A stable personality and high sense of responsibility are desirable。個性穩(wěn)重、具高度責(zé)任感。

Work well with a multi-cultural and diverse work force。能在不同文化和工作人員的背景下出色工作。

Bright，aggressive applicants。反應(yīng)快、有進(jìn)取心的應(yīng)聘者。

Ambitious attitude essential。有雄心壯志。

Initiative，independent and good communication skill。積極主動獨(dú)立能力強(qiáng)，并有良好交際技能。

Willing to work under pressure with leardership quality。愿意在壓力下工作，并具領(lǐng)導(dǎo)素質(zhì)。

Willing to assume responsibilities。應(yīng)聘者須勇于挑重?fù)?dān)。

Mature，self-motivated and strong interpersonal skills。思想成熟、上進(jìn)心強(qiáng)，并具極豐富的人際關(guān)系技巧。

Energetic，fashion-minded person。精力旺盛、思想新潮。

With a pleasant mature attitude。開朗成熟。

Strong determination to succeed。有獲得成功的堅(jiān)定決心。

Strong leadership skills。有極強(qiáng)的領(lǐng)導(dǎo)藝術(shù)。

Ability to work well with others。能夠同他人一道很好地工作。

Highly-motivated and reliable person with excellent health and pleasant personality。上進(jìn)心強(qiáng)又可靠者，并且身體健康、性格開朗。

The ability to initiate and operate independently。有創(chuàng)業(yè)能力，并能獨(dú)立地從業(yè)。

Strong leadership skill while possessing a great team spirit。有很高的領(lǐng)導(dǎo)藝術(shù)和很強(qiáng)的集體精神。

面試英文對話自我介紹

我們先來看一下下面的(de)英語格式對話：

A：Good morning.Im Lydia Shen, the manager of the company.Whats your name please?

B：How do you do, Miss Shen.My name is Penny Zhao.And Im coming for your advertisement for a trainee salesperson.A：How do you do, Penny? Well, for this job, we need people to work hard.Do you think youre suitable for this kind of job?

B：Oh, yes, I think so.A：Ok.Please talk something about yourself or introduce yourself.B：……

A：早上好。我是Lydia Shen,這個公司的(de)經(jīng)理。你叫什么名字。

B：你好，沈小姐。我叫Penny。我是來應(yīng)聘見習(xí)推銷員的(de)。

A：你好，Penny。對于這個工作，我們需要刻苦能干的(de)人，你覺得你能適應(yīng)這樣的(de)工作嗎?

B：恩，我想我能。

A：好吧。那就說說你的(de)情況吧，或者介紹一下自己。

B：……

該介紹自己了，那么在面試中怎么做自我介紹呢?先來看一些背景知識：

Background:

面試時需要做自我介紹，這個時候不要細(xì)致地談自己的(de)生活情況或者工作經(jīng)驗(yàn)，而是要想方設(shè)法地讓面試官對你有所了解，告訴他一些事情，這些事情應(yīng)該使你在招聘過程中具有優(yōu)勢?；蛟S你想選取一些有人情味的(de)故事講給他聽，但這么做，你要有把握與面試官的(de)想法吻合。或者可以概述一下最近你干的(de)工作和你正在申請的(de)工作有什么聯(lián)系，有怎樣的(de)幫助，以及你為什么要到這家公司工作等等。特別值得提的(de)是，要舉例子，這樣你的(de)回答才更具真實(shí)性，更容易被接受，才能給對方留下深刻的(de)印象。

或者當(dāng)面試經(jīng)理讓你做自我介紹的(de)時候，你可以主動問一下對方想知道自己哪方面的(de)情況，這樣也便于你的(de)回答更加有針對性。但是這種做法的(de)前提是你對面前的(de)這個面試官有一定的(de)把握，確信這樣追問不會引起對方的(de)反感才行。

有了這些背景知識，我們再掌握一些基本的(de)單詞和常用的(de)句型來幫助我們理解對方的(de)話和組織語言表達(dá)清楚自己的(de)意思就足夠了：

Words & Expressions:

part-time job: 兼職工作

full-time: 全職

position / vacancy: 職位，空缺

manager: 經(jīng)理

director: 主任

president: 董事長，總經(jīng)理

General Manager: 總經(jīng)理

saleperson: 推銷員

engineer: 工程師

accountant: 會計(jì)

degree: 學(xué)位

introduce:(動詞)介紹 introduction:(名詞)介紹

Let me introduce myself./ Let me do some introduction.讓我來介紹一下自己。

Which aspect do you want to know about me?

或者 What do you want to know about myself? 您想知道我哪方面的(de)情況?

英語格式英語面試自我介紹

good morning, my name is jack, it is really a great honor to have this opportunity for a interview, i would like to answer whatever you may raise, and i hope i can make a good performance today, eventually enroll in this prestigious university in september.now i will introduce myself briefly,i am 21 years old,born in heilongjiang province ,northeast of china,and i am curruently a senior student at beijing XX uni.my major is packaging engineering.and i will receive my bachelor degree after my graduation in june.in the past 4 years,i spend most of my time on study,i have passed CET4/6 with a ease.and i have acquired basic knowledge of packaging and publishing both in theory and in practice.besides, i have attend several packaging exhibition hold in Beijing, this is our advantage study here, i have taken a tour to some big factory and company.through these i have a deeply understanding of domestic packaging industry.compared to developed countries such as us, unfortunately, although we have made extraordinary progress since 1978,our packaging industry are still underdeveloped, mess, unstable, the situation of employees in this field are awkard.but i have full confidence in a bright future if only our economy can keep the growth pace still.i guess you maybe interested in the reason itch to law, and what is my plan during graduate study life, i would like to tell you that pursue law is one of my lifelong goal,i like my major packaging and i wont give up,if i can pursue my master degree here i will combine law with my former education.i will work hard in thesefields ,patent ,trademark, copyright, on the base of my years study in department of p&p, my character? i cannot describe it well, but i know i am optimistic and confident.sometimes i prefer to stay alone, reading, listening to music, but i am not lonely, i like to chat with my classmates, almost talk everything ,my favorite pastime is valleyball,playing cards or surf online.through college life,i learn how to balance between study and entertainment.by the way, i was a actor of our amazing drama club.i had a few glorious memory on stage.that is my pride.英語面試實(shí)戰(zhàn)指南

I：Interviewer(面試者)A：Applicant(求職者)

介紹教育背景：簡明扼要，實(shí)話實(shí)說

盡管你在簡歷中對自己的教育背景作了介紹，但在面試時，面試官還有可能就此方面提問。還是事先做點(diǎn)準(zhǔn)備吧。

①Iwhat is your major﹖

AMy major is Business Administration.I am especially interested in″Marketing″.(不僅回答了問題，還順帶一句介紹了自己較為感興趣的方面，簡明扼要。)

②IWhich university are you attending﹖

AI am attending×××University.③IHave you received any degrees﹖

AYes.FirstI received my Bachelor degree in English Literatureand then an MBA degree.④IWhat course did you like best﹖

AProject Management.I was very interested in this course when I was a student.And I think its very useful for my present work.⑤IDo you feel that you have received a good general training﹖

AYesI have studied in an English train-ing program and a computer training program since I graduated from university.I am currently studying Finance at a training school.介紹工作經(jīng)驗(yàn)：顯露實(shí)力，避免炫耀

①IHave you ever been employed﹖

②IYour resume says you have had one-year experience working in a foreign representative office in Shanghaimay I ask why you left﹖

AI worked in a foreign rep.office for one year.HoweverI left there two years ago because the work they gave me was rather dull.I found another job that is more interesting.③IHave you done any work in this field﹖

④IWhat qualifications do you have that make you feel you will be successful in your field﹖

⑤IWhat have you learned from the jobs you have had﹖

AI have learned a lot about business know how and basic office skills.In additionI learned at my previous job show to cooperate with my colleagues.⑥IWhats you major weak point﹖

AI havent been involved in international businessso I dont have any experiencebut I have studied this course in the International Business Training Center of the×××Company.⑦IWhat are your greatest strengths﹖(實(shí)話實(shí)說好了，不必客氣，但應(yīng)注意語氣和表情，不要給人炫耀之感。)

⑧IPlease tell me about your working experience.⑨IDoes your present employer know you are looking for another job﹖

ANoI havent discussed my career plans with my present employerbut I am sure he will understand.性格愛好：表現(xiàn)積極、合作的一面

①IHow do you spend your spare time﹖

②IAre you interested in sports﹖

③IDo you think you are introverted or extroverted﹖

④IWhat kind of personality do you think you have﹖

AI always approach things very enthusiastically.When I beg in somethingI dont like to leave it halfdone.I cant concentrate on something new until the first thing is finished.⑤IWhat is the most important thing for you to be happy﹖

ADifferent people have different ideas.I think the most important thing for me is having a good relationship with my family members and my friends.My family has always been very closeknitand my friend sand I spend a lot of time together.Without that I would be much less happy than I am.⑥IWhat makes you angry﹖

ADishonesty.Its unacceptable.⑦IWhat are your personal weaknesses﹖

AIm afraid Im a poor talker.Im not comfortable talking with the people whom I have just met for the first time.That is not very good for businessso I have been studying public speaking.⑧IAre you more of a leader or a follower﹖

AI dont try to lead people.Id rather cooperate with everybodyand get the job done by working together.工作要求：我能勝任

①IDo you think you can make yourself easily understood in English﹖

AYesin most circumstances.②IAre you available for travel﹖

AYesI like traveling.I am youngand unmarried.Its no problem for me to travel frequently.③IHow about overtime work﹖

AOvertime work is very common in companies.I can work overtime if its necessarybut I dont think we will work overtime everyday.④IHow long do you think we can depend on your working here﹖

⑤IDo you like regular work﹖

ANoI dont like regular work.I am interested in different projects with new opport unities and new challengebut I can do regular work if the company needs me to do so.⑥IWhat salary do you expect﹖

AShall we discuss my responsibilities with your company first﹖I think salary is closely related to the responsibilities of the job.⑦IDo you work well under pressure﹖

AWorking under pressure is exciting and challenging.I dont mind working under pressure.I work well under the secircum stances.People canI Can.⑧IDo you have any particular conditions that you would like the company to take into consideration﹖

ANonothing in particular.⑨IHow soon can you begin working for us﹖

AI need about two to three weeks for necessary formalities.I will quit then transfer to your company.面試結(jié)束：禮貌道別

①IAny questions﹖

AWhen will I know your decision﹖

②IHow can we get in touch with you﹖

③IWe will notify you of our decision by mailis this convenient for you﹖

④IThank you for your interest in our company.AThank youMr.Smith.Goodbye.Thank you for your time.

⑤IYou will be hearing from us very soon.Please send the next applicantin on your way out.AOK.Thank you very much.此外，面試官還可能問及你的家庭情況，如家人對你的影響等，也應(yīng)事先有所準(zhǔn)備。

英語自我介紹中常用的英文

◆My salary requirement is in the $100,000-$120,000 range with appropriate benefits.I would be willingto relocate for the right opportunity.◆Thesalary required is 12,000 per month,living in the house.◆Iam quite willing to start with a small salary.◆Iam willing to serve on trial for some months at a smallsalary.◆I got five thousand and five hundred per month.學(xué)歷常用語

◆BROWN UNIVERSITY,Providence,RI

Ph.D.in Sociology,1974

CARNEGIE MELLON UNIVERSITY,Pittsburgh,PA

Master of Education-Counseling Major,1972

MIDDLEBURY COLLEGE,Middlebury,VT

Bachelor of Arts in Elementary Education-Art Minor,1968

◆Massasoit Junior College,Canton,MA

A.S.Management,1978

Honor society

◆Graduated Dave EricksonPublic Speakingcourse,1993

University of Dallas,Irvine,TX,1992,Graduated Summa Cum Laude

Bachelor of Science Degree in Education,Minor in English

● Member of Kappa Krappa Gamma Honor Society

● Dean’s List four years

◆Marquette University,College of Liberal Arts,Milwaukee,WI

Bachelor of Arts in Soviet Politics

GPA in major:3.5/4.0

Study Abroad:Hamburg,St.Petersburg,Moscow,Paris,1993

Five-week study of Soviet languages

◆Bronte College,New Castle,ME

Master of Science in Accountancy,expected completion August,1993

Carroll College,Helena,MT

Bachelor of Arts in Business Management,December,1986

◆University of Massachusetts-Boston

Course work in General Management Practices,Business & Finance,Accounting,1986-1987

Aquinas Junior College

A.S.Marketing,1981

◆Beijing University.I expect to receive my degree of Bachelor of Science in Metallurgical Engineering in June,2001 Major Courses

Studied:Fundamentals of Metallurgy、Metallurgy of Iron and Steel、Ferrous Alloys、Nonferrous Alloys

Other Courses that Would Prove Useful in this Position:Fundamentals of Writing、The History of Science、Creative Writing Psychology

Scholastic Record:For 3’/2 years I have been in the upper third of my class scholastically;during my first two years I earned approximately half of my college expenses working in the bookstore and library.個人特長常用語:

◆Over eleven years of extensive computer/electronics experience.Versed in both digital and analog electronicswith specific emphasis on computer hardware/software.Special expertise in system and component evaluation.Network supervisor responsible for installing/maintaining Arcnet LAN system.Proficient in assembly and C programming languagesL.Excellent communication skills including written,verbal and interpersonal.◆IBM:WordPerfect,Word for Windows;Maclntosh:Microsoft Word,FileMaker.◆AT&T and Compaq PC’s with Samna program;data entry,CRT,typing(55wpm)

◆Maclntosh:Pagemaker,Word.IBM and Macintosh.Lotus 1-2-3 and Microsoft Word.◆Maclntosh:Pagemaker,Word.IBM:WordPerfect,Excel and rBase.◆Proficientin Microsoft Word,WordPerfect,Lotus 1-2-3,and Quark.Working knowledge of the French language.◆Typing(60 wpm),Shorthand(60-70 wpm),WANG Word Processing,knowledge of other word processing systems.Fluency in German,good verbal and written communications skills.◆Systems:Lexitron,PTS100,IBM Personal Computer

Software:WordStar,Accounting Plus,Symphony,Lotus 1-2-3,WordPerfect,DOS,Microsoft Word

◆At school I won a scholarship and the first prize in speech contest.◆I have received an ordinary English education,and have a slight knowledge of Spanish.I took a Spanish course in college.◆I can write shorthand at the rate of 120 words per minute,and typewriting at 55 words English.◆At school I won a scholarship and the first prize in speech contest.愛好常用語

◆SINGING * PHOTOGRAPHY * CROSS-COUNTRY SKIING * SWIMMING

◆Travel,Tennis,Swimming,Drawing

◆Fishing,cooking,readingmysteries

◆Baking,Sailing,ReadingPoetry.◆Skiing,ScubaDiving,Mystery Novels.工作經(jīng)驗(yàn)常用語

◆Dunphy & Reilly,Inc.Senior Internal Auditor

Conducted operational and financial audits of manufacturingsubsidiaries.Designed and implemented audit programs to test theefficiency of all aspects of accounting controls.Recommended changes and improvements to corporate anddivisional management.Trained and supervised staff auditors in all aspectsof accounting controls.Trained and supervised staff auditors in all aspectsof the audit engagement.Involved with corporate management in areas of acquisitionand corporate development.◆DEVONSHIRE EQUIPMENT,INC,Loretto,PA

Staff Auditor

Plan,identify,and test controls;present findings and recommend actions to management.Assist in the audits of New England,Northwest,New Jersey,Washington,D.C.,Southeast,and Great Lakes Districts and U.S.Areas General Ledger Group.◆EMERSON ASSOCIATES,Wayne,NE

office Manager Arrange logistics for office expansion and relocation.Establish office procedures and systems.Actuate/implement filing system,client billing system and bookkeeping.Order supplies;maintain inventory.Handle word processing and receptionist responsibilities.◆Stevenson Data Systems,Los Angeles,CA

Components Evaluation Engineer

Responsible for the characterization and evaluation of,and approved vendors list for:Power supplies,oscillators,crystals,and programmable logic used in desktop and laptop computers.Evaluated and recommended quality components that increased product rofitability.Created and developed power supply test plan used for evaluating third party power supplies.Interacted with vendors to resolve problems associated with components qualification.Technical advisor for Purchasing.Promoted to Engineerll.◆Experience:

1.Previous job_____________________________________________________

Position________________________________From______________to_______

2.Present job________________________________________________________

Position________________________________From______________to________

Interests___________________________________________________________

Signature____________________________ Date _________________________

簡歷中個人情況常用語:

Position Desired:HR Manager

Name: ******** Sex: Male/Female

Date of birth:June2,1975 Address: *****

Marital Status:Single/Married Post Code: 100001

Height: 1.70M Weight: 50 kg

Health: Excellent E-mail Address:123456@sohu.com

Pager: 191-2222222 Tel: 12321456

Mobile phone:1391111111 Homepage：http://004km.cn/~1

Current AnnualSalary：50,000 RMB

英語面試考官最喜歡提問的6大問題

1.Tell me about yourself.這是面試問題中的經(jīng)典頭道“開胃菜”，主要考察求職者的個性是否符合公司的企業(yè)文化，所以回答時要盡量貼近這個公司的情況來推銷自己。比如這個公司屬于汽車行業(yè)，那么你就該回答：“Driving is my hobby.I really love the feeling of running on the road and I take cars as my best friends.”要找到自己跟這個公司的切合點(diǎn)，讓面試官了解你適合這個環(huán)境。

2.What are your three greatest strengths?

回答這個問題時不可以只是簡單回答：“I’m really organized, punctual and get along well with others.”簡潔、精煉找到這個公司所看重的特長，是回答這個問題的關(guān)鍵。像要應(yīng)聘金融行業(yè)，可以說：“I think my three strongest strengths are details-oriental, patient and cautious.”但如果應(yīng)聘者是一個銷售精英，可以說：“I think my strongest strengths are aggressive, hard working and communicative.”總之，需要考慮到應(yīng)聘公司及職務(wù)的需要來選擇表現(xiàn)自己的優(yōu)勢。

3.What are your three greatest weaknesses?

鐵蕓強(qiáng)調(diào)，老板都愿意找到一個了解、熱愛工作，并能夠?yàn)楣緞?chuàng)造價值的員工。所以不要很誠實(shí)地把自己的毛病都暴露出來，而是要有策略地選擇一些能夠?yàn)樽约杭臃值娜秉c(diǎn)。比如：“I am a perfectionist and I pay very much attention to details.Sometimes I am quite captious.”

4.Why are you interested in working for our company?

此問題主要考察應(yīng)聘者是否了解這個工作，或者是否真正有興趣，所以需要圍繞整個公司的具體情況，讓面試官知道你很清楚這個公司的運(yùn)營模式，以及對這項(xiàng)工作非常積極。建議不要以“It seemed like a good career move.”或是“I havent been able to find anything else interesting.”為開始。如果能有一些實(shí)際回答的話，加分會更多。應(yīng)聘者可以這樣回答：“I read an article in the newspaper and was very impressed by ……”但是前提是你必須真的對這家公司作了研究，同時也要注意，不要讓面試官覺得你是為了討好面試官而言過其實(shí)。

5.Why did you leave your last job?

跳槽的原因可能是因?yàn)樯弦环莨ぷ鞣浅Ｔ愀?，但面試并不是適合抱怨的場合，而且千萬不要對現(xiàn)有或是過去的雇主或同事進(jìn)行這樣的評論：“I didnt agree with the companys direction.”“I got no recognition for my work.”“My boss was totally unreasonable.”鐵蕓建議，要從自身發(fā)展的角度出發(fā)來回答：“I love my last job and really learned a lot from it, but I need a new platform and bigger space to make my career successful.”總之，要讓面試官知道，以前的公司在你的眼中并非一錢不值，你是懷著感激來評價他們的。

6.If we hire you，how long will you stay with us?

老板想知道你會不會像離開上一份工作那樣很快也離開這家公司，你可以回答：“As long as my position here allows me to learn and to advance at a pace with my abilities.”這樣就告訴老板，你是希望同公司一起成長，不會輕易地離開。

面試英語10問

英語面試時，很多應(yīng)答技巧其實(shí)和中文面試時并無二致，但往往因?yàn)檎Z言不熟練和過度緊張，使得應(yīng)聘者表現(xiàn)失常，這里我們總結(jié)了10個英語面試中的最常出現(xiàn)的問題，怎么樣，提前準(zhǔn)備準(zhǔn)備吧。

【問】Pleaseintroduceyourself.（請介紹你自己。）【問】Doyouhaveanyactualworkexperience？（你有實(shí)際的工作經(jīng)驗(yàn)嗎？）

【問】Howwereyourgradesatschool？（你在學(xué)校成績?nèi)绾?？?/p>

【問】Doyouthinkyoureanextrovertoranintro-vert？（你認(rèn)為你是個性外向的人還是個性內(nèi)向的人？）

【問】Whatisyourgreatestweakness？（你最大的缺點(diǎn)是什么？）

【問】Couldyoutellmewhatdoyouknowaboutourcompany？（可以談?wù)勀銓Ρ竟镜恼J(rèn)識嗎？）

【問】Haveyousentyourapplicationtoanyothercompanies？（你有沒有應(yīng)征其他公司嗎？）

【問】Whyareyouinterestedinthisjob？（你為什么會對這份工作感興趣？）

【問】Whatareyougoingtodoifyouareorderedtoworkovertime？（如果你被迫要加班，你會怎么辦？）

【問】Whatsalarywouldyouexpecttoget？（你希望拿多少薪水？）是不是覺得有些問題挺棘手的？下期，我們將就如何用英語回答這些問題，給你一些參考。當(dāng)然，也非常歡迎大家來信發(fā)表意見，把你們的求職英語心得和其他人分享一下。

這里還有幾個最簡單的要訣，說不定對你的臨場表現(xiàn)有幫助?！锒嘤脛釉~和簡單的短句。

除了可以直接、清楚地表達(dá)自己的想法，也會讓主考官覺得，你是個有行動力、做事明確的人?！锉苊夥钦接迷~，并注意禮節(jié)。

最好不要使用像“youguys”等非正式的字眼，讓主考官覺得不夠穩(wěn)重。另外，除非主考官請你直呼其名，例如“YoucancallmeJohn”，否則還是應(yīng)該尊稱對方的姓。★千萬不要為了準(zhǔn)備接下來要講的話，而顯得心不在焉。

在英語面試之前，應(yīng)該先準(zhǔn)備好自己要回答的內(nèi)容，面試當(dāng)中，才能專注聆聽主考官講的話，而不是在心里盤算下一句該講什么，讓主考官覺得你看起來沒有自信或準(zhǔn)備不足 向主考官提出的10個漂亮的問題

在面試結(jié)束前，大多數(shù)的主考官都會丟問題給求職者，最常見的就是：你有沒有什么問題或疑問，想要提出來的？無論求職者是否有提出問題，其實(shí)，這個問題背后的真正含意，通常是主考官用來測試你對這份工作有多大的企圖心、決心和熱情。

因此，如果你害怕發(fā)問不妥當(dāng)，或是不知道該從何問起，甚至回答沒有問題時，都很可能會讓主考官認(rèn)為，你想要這份工作的企圖心、決心還不夠強(qiáng)。

相反的，求職者應(yīng)該更積極、主動的利用面試最后一關(guān)的機(jī)會，適時的提出問題，這不但有助于主考官對你的印象能夠加深，而且你也能趁此機(jī)會進(jìn)一步了解這家公司的背景、企業(yè)文化是否適合你。

最重要的是，如果能夠在面試時，提出漂亮的問題，錄取的機(jī)率將會大大提高。所以，無論如何，前往面試前，先謹(jǐn)記10個可以反問主考官的問題，以便到時候可以提出。

1.貴公司對這項(xiàng)職務(wù)的工作內(nèi)容和期望目標(biāo)為和？有沒有什么部分是我可以努力的地方？

2.貴公司是否有正式或非正式教育訓(xùn)練？

3.貴公司的升遷管道如何？

4.貴公司的多角化經(jīng)營，而且在海內(nèi)外都設(shè)有分公司，將來是否有外派、輪調(diào)的機(jī)會？

5.貴公司能超越同業(yè)的最大利基點(diǎn)為何？

6.在項(xiàng)目的執(zhí)行分工上，是否有資深的人員能夠帶領(lǐng)新進(jìn)者，并讓新進(jìn)者有發(fā)揮的機(jī)會？

7.貴公司強(qiáng)調(diào)的團(tuán)隊(duì)合作中，其它的成員素質(zhì)和特性如何？

8.貴公司是否鼓勵在職進(jìn)修？對于在職進(jìn)修的補(bǔ)助辦法如何？

9.貴公司在人事上的規(guī)定和作法如何？

10.能否為我介紹一下工作環(huán)境，或者是否有機(jī)會能參觀一下貴公司？

至于薪水待遇、年假天數(shù)、年終獎金、福利措施等問題，有些公司的主考官在面試時，會直接向求職者提出。如果對方?jīng)]有提及，對社會新鮮人來說，在找第一份工作時，比較不適合提出，除非你有對方不得不錄取你的條件。

另外，也有人在結(jié)束前，謙虛的請教主考官：您認(rèn)為我今天的表現(xiàn)如何？錄取的機(jī)率有多大？通常，這個問題也會讓對方認(rèn)為，你對這份工作抱有很大的決心和企圖心，而你也可以試著從對方的回答中，約略猜測出自己成功的機(jī)率有多大，并且作為下一次面試時表現(xiàn)的參考！

英文求職信開頭結(jié)尾精彩語句匯總

求職信開頭處常用語

1、My interest in the position of Masonry Supply Manager has prompted me to forward my resume for your review an consideration.2、The sales Manager position advertised in the Chicago Tribune on October 12 intrigues me.I believe you will find me well-qualified.3、Your October 30 advertisement in The Jackson Review calls for an Administrative Assistant with a background rich in a variety of administrative skills ,such as mine.4、My desire to locate a responsible position in plant management has prompted me to forward the attached for your consideration.5、I am writing to inquire opportunities for computer programmers in your organization.6、Are you currently seeking a security specialist to maintain or upgrade the security of your organization?If so, I would like to apply for the position.7、My interest in joining Any Corporation as a licensed electrician had prompted me to forward my resume for your review.8、Having majored in mathematics at Rice University, where I also worked as a Research Assistant, I am confident that I would make a successful addition to your Economics Research Department.9、At the suggestion of Walter Durrane, I am enclosing my resume for your consideration pertaining to consulting or related assignments with Any Corporation.、I am forwarding my resume in regards to the opening we discussed in your Marketing Department.11、I want a job.Not any job with any company,but a particular job with your company.Here are my reasons:Your organization is more than just a company.It is an institution in the minds of the Chinese public.12、Attention of Human Resource Manager:Like many other young men, I am looking for a position.I want to get started.At the bottom,perhaps,but started.求職信結(jié)尾處常用語

1、I should appreciate the privilege of an intervies.I may be reached by letter at the address given above,or by telephone at 1234651.2、I feel that a personal meeting would give us the opportunity to discuss your shout-and long-term objectives and my ability to direct your organization towards successfully achieving those goals.3、I should be glad to have a personal interview,and can furmish references if desired.4、Thank you for your consideration.5、I will contact you in a few days to arrange a meeting for further discussion.In the interim,shold you require additional information,I may be reached at 6666666 between 11:00AM and 6:00PM.6、I welcome the opportunity to meet with you to further discuss my qualifications and your needs.Thank you for your time and consideration.7、I have enclosed a resume as well as a brief sample of my writing for your review.I look forward to meeting with you to discuss further how I could contribute to your organization.8、Thank you for your attention to this matter.I lood forward to speaking with you.9、The enclosed resume describles my qualifications for the position advertised.I would welcome the opportunity to personally discuss my qualifications with you at your convenience.10、I would welcome the opportunity for a personal intervies with you at your convenience.11、I feel confident that given the opportunity,I can make an immediate contribution to Any Corporation.I would appreciate the opportunity to meet with you to discuss your requirements.I will call your office on Friday,to schedule an appointment.Thank you for your consideration.12、I look forward to speaking with you.13、I can be reached at the telephone number listed above.I would appreciate any leads you could give me.Again,I very much enjoyed our conversation

應(yīng)聘公司招聘人員英文個人簡歷

Name/Detail address

OBJECTIVE

To contribute managerial skills to a challenging position as a recruiter.SUMMARY OF QUALIFICATIONS

Extensive public relations work,dealing with all levels of employment.Self-motivated;able to organize,analyze and meet operational deadlines.Respond well in high-pressure atmosphere.Capable of handing a diversity of responsibilities simultaneously.EXPERIENCE

NORMAN DEPARTMENT STORES,New London,CT

Manager of Executive Recruitment,6/87-1/94 Oversaw college recruiting process,annual budget $75,000.Presented campus recruitment workshops;developed internship program.Hired/recruited support and merchandising staff.Organized senior executive involvement.Received award for overall achievement and outstanding performance in Human Resources,3/92.Department Manager,9/85-6/87

Merchandised childrens clothing and accessories.Analyzed/marketed $2 million inventory.Coordinated inventory control.Trained/developed staff of 15 sales associates in customer services skills and selling techniques.Achieved 20% sales increase over one year period.Chosen manager of the year for excellence in execution of responsibilities,1986.SEINFELDS Redding,CT

Selling Supervisor Trainee,6/85-8/85

Coordinated merchandising and overall appearance of Mens Department.Evaluated sales data.Controlled inventory and placement of incoming merchandise.Executed price revisions.EDUCATION

CONNECTICUT COLLEGE,New London,CT

B.A.,Spanish Modified with Government Studies,May 1987

NOTICE

Specific contributions display candidates achievements and problem-solving abilities.Specific dates of employment(month and year)are ideal for candidates with no gaps in work history.保險公司人力資源專員英文個人簡歷

Name/Detail Address

SKILLS

Human Resource Development:

Articulate and effective communicator and trainer.Inspire a team commitment to company goals,management objectives and high quality performance standards.Computer systems:Skilled in use and development of data collection,and spreadsheet programs for accounting,statistical analysis and reporting functions.Assisted in computer systems installations and full training of employees.Troubleshooter:Analytical with and established track record for identifying complex problems;resourceful and inventive in developing and implementing creative solutions with enhanced sensitivity to cost,efficiency and deadlines.EXPERIENCE

1993-Present Silver Guard Insurance Agency

TRAINING COORDINATOR

Develop training curriculum,aids and materials to instruct staff in division operations,corporate policy and procedure,and to maintain on-going personnel development in knowledge of current practices,increase job performance skills and maintain quality assurance for al office operations.Conduct highly effective classroom sessions and hands-on training encompassing billing,benefits,insurance industry regulations and relevant legal issues.Specialize in investigating medical malpractice cases.1991-1993 Orange community medical center

MANAGER

Managed and supervised daily credit and collections operations with responsibility for client billing and managing free care peograms.Controlled operating budget and contributed to overall budget planning.Analyzed accounts status and implemented appropriate collections procedures;facilitated clear communications with service vendors;worked effectively with attorneys in cases involving legal proceedings.1987-1991 Contemporary Temps

ASSISTANT MANAGER

Collected insurance statistical data;implemented cost avoidance programs and conducted training of temporary employees in billing procedures,goverment benefits programs,health card benefits issues,and insurance industry regulations.EDUCATION

Bachelor of science in business administration,1988

Coker College-Hartsville,SC

Skills section draws attention to candidates acquired professional qualifications.Chrono-functional resume has the strength of chronological format and the flexibility of functional format.面試對話

面試時總要說上那么幾句，一般去了面試的公司以后，里面的接待人員都會主動問一些問題，先來看看下面這個對話吧：

A： Can I help you? 有什么事嗎？

B： Yes.Ive come to apply for the position as an office secretary.是的我是來應(yīng)聘辦公室秘書一職的。A： Im Smith, the clerk of Human Resources Department.Whats your name? 我是史密斯，人力資源部秘書。你叫什么名字？

B： My name is Wang Fang.Mr.Smith, how do you do? 我叫王芳，史密斯先生，您好。

A： Nice to meet you, Miss Wang.We have received your letter in answer to our advertisement.I would like to talk with you regarding your qualification for this interview.很高興認(rèn)識你王小姐。我們已經(jīng)收到你的應(yīng)聘信，我想和你談?wù)勱P(guān)于你應(yīng)聘的事情。

B： Im very happy that I am qualified for this interview.能有機(jī)會參加面試我感到很榮幸。A： Now, talk something about yourself, please.哦，現(xiàn)在請談?wù)勀愕膫€人情況吧。

B： Well, my name is Wang Fang.W-a-n-g Wang and F-a-n-g Fang.I was born on May 17, 1982.……好的。我叫王芳，W-a-n-g 王，F(xiàn)-a-n-g 芳。我出生于 1982年5月17日。…… Words & Expressions: interview: 面試 resume: 簡歷

office clerk: 辦公室秘書，即文員 birthday place: 出生地 graduated...from: 畢業(yè)于 domicile place: 戶口所在地

上一課我們講了面試英語中首先要進(jìn)行的開場白，那么接下來面試官就要聽聽你的自我介紹了。我們先來看一下下面的對話：

Ａ：Good morning.Im Lydia Shen, the manager of the company.Whats your name please? Ｂ：How do you do, Miss Shen.My name is Penny Zhao.And Im coming for your advertisement for a trainee salesperson.Ａ：How do you do, Penny? Well, for this job, we need people to work hard.Do you think youre suitable for this kind of job? Ｂ：Oh, yes, I think so.Ａ：Ok.Please talk something about yourself or introduce yourself.Ｂ：……

Ａ：早上好。我是Lydia Shen,這個公司的經(jīng)理。你叫什么名字。Ｂ：你好，沈小姐。我叫Penny。我是來應(yīng)聘見習(xí)推銷員的。

Ａ：你好，Penny。對于這個工作，我們需要刻苦能干的人，你覺得你能適應(yīng)這樣的工作嗎？ Ｂ：恩，我想我能。

Ａ：好吧。那就說說你的情況吧，或者介紹一下自己。Ｂ：……

該介紹自己了，那么在面試中怎么做自我介紹呢？先來看一些背景知識：

有了這些背景知識，我們再掌握一些基本的單詞和常用的句型來幫助我們理解對方的話和組織語言表達(dá)清楚自己的意思就足夠了： Words & Expressions: part-time job: 兼職工作 full-time: 全職

position / vacancy: 職位，空缺 manager: 經(jīng)理 director: 主任

president: 董事長，總經(jīng)理 General Manager: 總經(jīng)理 saleperson: 推銷員 engineer: 工程師 accountant: 會計(jì) degree: 學(xué)位

introduce:（動詞）介紹 introduction:（名詞）介紹

Let me introduce myself./ Let me do some introduction.讓我來介紹一下自己。Which aspect do you want to know about me? 或者 What do you want to know about myself? 您想知道我哪方面的情況？

通常自我介紹都要介紹自己的個人情況，家庭情況，工作經(jīng)驗(yàn)，個人能力等等，今天我們就來講講如何介紹自己的個人和家庭情況。先來看一些簡單的對話： I: Where is your birthplace? C: I was born in Xinjiang Uygur Autonomous Region.I: Where is your native place? C: My native place is Tianjin.I: Are you a resident of Beijing now? C: Yes.I have been living in Beijing since my childhood.I: Where is your domicile place? C: My domicile place is Taiyuan.I: What is your nationality? C: Im Chinese.I: What is your nation? C: My nation is the Han.I: How large is your family? C: There are four of us including my parents, a younger sister and me.I: Do you spend much time talking with your family? C: Yes.Its said theres a generation gap in the world today, but I dont think this is the case at our house.We all work at taking time to talk with each other.Especially at mealtime, we all eat and talk together.Meals are very lively at our house.I: Your application form said that you have a younger sister.How do you get along with each other? C: We get along well with each other.She is 6 years younger than me, and she is right now studying for college entrance exams.She asks me a lot for advice on how to study and things like that.Besides, we do many things together, such as going swimming, mountain climbing and soon.Words & Expressions: 在對話里出現(xiàn)了以下單詞： birthplace: 出生地 native place: 籍貫 resident: 居民

domicile place: 戶籍所在地

nationality: 國籍；如果是nation則是指民族 generation gap: 代溝

application form: 申請書，在這里指求職信 除此之外，還有很多詞，比如：

ability: 能力，才能，本領(lǐng)；aptitude: 天資，天賦；capability: 能力，才能； competence: 能力，勝任；facult: 能力，才能；genius: 天才 academic level: 業(yè)務(wù)水平

basic skill: 基本功； basic knowledge: 基本知識 professional titles: 職稱 doctoral supervisors: 博士生導(dǎo)師 a teacher in charge of a class: 班主任 postgraduates: 研究生 undergraduate: 本科生

college / university students: 大學(xué)生 students of arts: 文科學(xué)生 students of science: 理科學(xué)生 family: 家庭； relative: 親戚； be married: 結(jié)了婚的（狀態(tài)）

通常我們在寫完簡歷之后都會加注一些自己的性格和興趣愛好之類的內(nèi)容，而這些內(nèi)容也是進(jìn)行面試時經(jīng)常會提到的話題，尤其是在英語面試的時候，面試方通常會問：How do you spend your spare time?

性格和興趣能在面試的時候給你的面試官留下好的印象，為什么不努力來說好呢？今天我們就一起來學(xué)習(xí)面試英語的最后一講：如何表達(dá)自己的性格和興趣愛好。下面先來看一段對話吧： A：Do you have any hobbies? What is it or what are they? B：I am interested in watching TV or other relaxing games.A：How do you spend your spare time? B：I usually read or so some sports.A：What kind of book are you interested in? B：My favorite books are those about detectives.A：Well, those books are really good.I like them too.Do you think you are introverted or extroverted? B：In fact, I wouldnt call myself extroverted.Sometime I enjoy being by myself very much.But other times, I like sharing activities with others too, especially during these last few years.A：What kind of sports do you like? B：I like almost all sports, and I enjoy both playing and watching.I especially like tennis and mountain climbing.A：What kind of personality do you think you have? B：Well, I approach things very enthusiastically, I think, and I dont like to leave anything half-done.It makes me nervous-I cant concentrate on anything else until the first thing is finished.……

介紹自己的性格和興趣愛好肯定少不了這方面的詞匯和詞組，對話中也出現(xiàn)了不少，現(xiàn)在我們來學(xué)習(xí)一些相關(guān)的單詞和詞組吧： Words & Expression: Hobby: 愛好，尤其指業(yè)余愛好 Spare time: 空閑時間，業(yè)余時間 Be good at: 擅長

Favorite: 最喜歡的，特別喜歡的，中意的 Detective: 偵探，偵探的；在對話中指偵探小說 Performance: 表演，演出 Ballet: 芭蕾舞

Introverted: 內(nèi)向的，含蓄的，閉關(guān)自守的 Extroverted: 外向的，喜社交的

Personality / character / disposition / temperament: 個性，性格 Characteristic: 獨(dú)特的，特有的，表示特性的 Enthusiastically: 熱心地，狂熱地 Background:

個人能力集中表現(xiàn)在社會榮譽(yù)、工作業(yè)績、科研成果、著作等，這里最主要的是著作和工作成果。

著作包括所有出版過的書，發(fā)表過的論文。這一項(xiàng)對科研、學(xué)術(shù)工作者尤為重要。如果內(nèi)容與所申請的職位密切相關(guān)，作者不僅應(yīng)列入其中，而且可扼要介紹作品內(nèi)容、社會影響和效果。面試時，應(yīng)帶上作品的原件或復(fù)印件。

了解到到底什么是個人能力以后，我們再來看一段對話： A：Would you talk about your merits? B：Yes, sir.When I was the sales manager of Beijing Friendship Store, I succeeded in raising yearly sales volume by 25% at profit margins of from 50% to 80%.A：Have you received any honors or rewards? B：Yes.I got the title of “Advanced Worker” in 1992 and 1994.A：Do you have any publications? B：Yes.My book entitled A Preliminary Survey of Controlling Inflation was published by China Finance Publishing House in 1993.對話中出現(xiàn)了一些詞組用法和單詞： Words & Expressions: Beijing Friendship Store: 北京友誼商店 Succeed in: 成功 sales volume：銷售量

Advanced Worker：先進(jìn)工作者

A Preliminary Survey of Controlling Inflation：抑制通貨膨脹初探 China Finance Publishing House：中國金融出版社 如今各個用人單位的語言能力，尤其是外語能力，能懂得一門外語確實(shí)在應(yīng)聘時有一些優(yōu)勢。今天這一講我們就來講講在面試時如何表達(dá)自己的語言能力。看下面這段對話：

Ａ：You will mainly use English in this job.Do you think you can make yourself understood in English with ease? Ｂ：Yes, I think I speak English quite fluently.Ive often explained historical places in Xian to foreign tourists in English.They say my English is quite good.Ａ：How long have you been learning English? Ｂ：Oh, more than ten years.I started learning English when I was still in a primary school from a foreign teacher.Ａ：Well, perhaps thats the reason why you are so fluent in it.Ｂ：Thank you.常見英文面試問答：

Q: What practical experience do you have which would help you in this job?

A: I have worked for… as…to be responsible for… for…months/years.During this period, I have helped the company to solve…(Problems), and I learnt …(Skill/knowledge)which will be definitely be of use in this job I am applying now for.Q: What are your reasons for applying for this job?

A: I’ve always been interested in …/I’ve always wanted to …

Q: What are your reasons for wanting to work for our company?

A: Your company has an excellent reputation for …;I’m very impressed by …((Remarks: Mention something specific about the company – do your homework!)

Q: What makes you feel that you’re the right person for this job?

A: I’m loyal and hard-working, and very good at … If I’m given the chance, I think I can contribute to the company’s growth and development by …

Q: Well, thank you for coming in, Mr/Ms……;we’ll be in touch with you shortly.A: Thank you again for giving me the chance to meet you.I’ll look forward to hearing from you in due course.剛畢業(yè)的大學(xué)生，通常會因?yàn)闆]有什么工作經(jīng)驗(yàn)而受到質(zhì)疑，當(dāng)面試官提出這樣的問題時，你也不要為此過于緊張和擔(dān)心。你應(yīng)該巧妙地回避你的缺點(diǎn)、而著重挖掘你已有的能力，特別是你的個人學(xué)習(xí)能力。你也可以表明你的觀點(diǎn)：積極、快速、自主地去學(xué)習(xí)各種知識來充實(shí)自己，從而達(dá)到個人發(fā)展和工作上的要求。你可以這樣表達(dá)：

I taught myself to use Photoshop and Excel by buying the manuals, and I’m pretty proficient

或者是

When I was at university，I took the chance to study German as an extra subject, and reached a reasonable level.

第三篇：超全的論文格式總結(jié)

附件E1

唐山學(xué)院畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）撰寫規(guī)范

為加強(qiáng)畢業(yè)設(shè)計(jì)(論文)工作的規(guī)范化管理，保證畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）質(zhì)量，按照我院畢 業(yè)設(shè)計(jì)(論文)工作管理規(guī)定，根據(jù)實(shí)際情況，特制定畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）撰寫規(guī)范。

1.畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）結(jié)構(gòu)及要求

1.1畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）資料組成畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）資料由下列內(nèi)容組成：①題目申報表；②任務(wù)書；③開題報告；④中期檢查表；⑤畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）文本；⑥指導(dǎo)教師、評閱教師和答辯小組評議書；⑦答辯委員會意見；⑧指導(dǎo)記錄等。以上所列資料均應(yīng)按教務(wù)處設(shè)計(jì)的模版中所給定的格式，把項(xiàng)目填寫齊全。

1.2畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）文本的組成畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）文本由下列內(nèi)容組成：

①中、外文摘要；②目錄；③正文；④謝辭；⑤參考文獻(xiàn)；⑥附錄；⑦外文資料翻譯。

1.2.1中、外文摘要及關(guān)鍵詞

摘要是畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）的主要內(nèi)容和評論的簡短陳述，主要是說明研究工作的目的、方法和結(jié)論。摘要應(yīng)具有獨(dú)立性，應(yīng)排除在本學(xué)科領(lǐng)域已成為常識的內(nèi)容，要獨(dú)立成文，選詞用語要避免與全文尤其是前言和結(jié)論部分雷同。結(jié)構(gòu)要嚴(yán)謹(jǐn)，表達(dá)要簡明，語義要確切，要客觀陳述，不宜加主觀評價。摘要中通常不用圖表、化學(xué)結(jié)構(gòu)式以及非通用的符號和術(shù)語。

畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）的摘要包含中文摘要和外文摘要。

關(guān)鍵詞是從設(shè)計(jì)或論文中選取出來，用以表示全文主題內(nèi)容信息的單詞或術(shù)語。關(guān)鍵詞不宜用非通用的符號和分子式。

關(guān)鍵詞的個數(shù)為3-8個。中、外文關(guān)鍵詞應(yīng)一一對應(yīng)。

1.2.2目錄

目錄由畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）各部分內(nèi)容的順序號、名稱和頁碼組成，目錄應(yīng)該用“????”符號連接名稱與頁碼。要求標(biāo)題層次清晰，目錄中標(biāo)題應(yīng)與正文中標(biāo)題一致。

1.2.3正文

畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）的正文包括前言（引言）、主要內(nèi)容、結(jié)論三個部分。

正文內(nèi)容序號為：1；1.1；1.1.1；1.1.1.1等。

1.2.3.1前言（引言）

前言（引言）主要說明研究工作的目的、內(nèi)容，對前人工作的評述以及理論分析、研究設(shè)想、研究方法、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、預(yù)期結(jié)果和意義等。

1.2.3.2主要內(nèi)容

設(shè)計(jì)（論文）主要內(nèi)容是作者對研究工作的詳細(xì)表述。它占全文的絕大部分，其內(nèi)容包括：問題的提出，研究工作的基本前提、假設(shè)和條件；基本概念和理論基礎(chǔ)；模型及實(shí)驗(yàn)方案的擬定、實(shí)施和分析；設(shè)計(jì)計(jì)算的方法和內(nèi)容；理論論證，理論在課題中的應(yīng)用及課題得出的結(jié)果和討論等，具體要求如下：

(1)理論分析部分應(yīng)寫明所作的假設(shè)及其合理性，所用的分析方法、計(jì)算方法、實(shí)驗(yàn)方法等那些是他人用過的，那些是自己改進(jìn)的，那些是自己創(chuàng)造的，以便指導(dǎo)教師審查和糾正，篇幅不宜過多，應(yīng)以簡練的文字概略地表達(dá)。

(2)對于用實(shí)驗(yàn)方法研究的課題，應(yīng)具體說明實(shí)驗(yàn)用的裝置、儀器的性能，并應(yīng)對所用裝置、儀器做出檢驗(yàn)和標(biāo)定。對實(shí)驗(yàn)的過程和操作方法，力求敘述簡明扼要，對人所共知的內(nèi)容或細(xì)節(jié)內(nèi)容不必詳述。

(3)對于經(jīng)過理論推導(dǎo)達(dá)到研究目的的課題，內(nèi)容要精心組織，做到概念準(zhǔn)確，判斷推理符合客觀事物的發(fā)展規(guī)律，要做到言之有序，言之有理，以論點(diǎn)為中心，組成完整而嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膬?nèi)容整體。

正文中的圖、表格按下述要求處理：

正文中的圖主要包括曲線圖、示意圖、圖解、流程圖、記錄圖、照片等。

對于圖，要有圖號及簡短確切的題名，圖號按順序編號，并居中置于圖下。

對于圖紙，要求圖面整潔，布局合理，線條粗細(xì)均勻，圓弧連接光滑，尺寸標(biāo)注規(guī)范，文字注釋使用工程字書寫。提倡使用計(jì)算機(jī)繪圖。

表格的編排一般是內(nèi)容和測試項(xiàng)目由左向右橫讀，數(shù)據(jù)依序豎排。要有表格號、表格名及必要的說明，居中置于表格的上方，表格中文字符號的字體應(yīng)比正文小一號。

1.2.3.3結(jié)論

結(jié)論是對整個研究工作進(jìn)行歸納和綜合而得出的總結(jié)，應(yīng)包括所得結(jié)果與已有結(jié)果的比較和本課題尚存在的問題，以及進(jìn)一步開展研究的見解與建議。結(jié)論集中反映作者的研究成果，表達(dá)作者對所研究的課題的見解，是全文的思想精髓，是文章價值的體現(xiàn)，結(jié)論要寫得概括、簡短。撰寫時應(yīng)注意以下幾點(diǎn)。

(1)結(jié)論要簡潔、明確，措辭應(yīng)嚴(yán)密，且又容易被人領(lǐng)會；

(2)結(jié)論應(yīng)反映個人的研究工作，屬于他人已有過的結(jié)論要少提；

(3)要實(shí)事求是地介紹自己研究的成果，切忌言過其實(shí)，在無充分把握時應(yīng)留有余地，因?yàn)榭茖W(xué)問題的探索是永無止境的。

1.2.4謝辭（致謝）

謝辭（致謝）是對給予幫助、指導(dǎo)和協(xié)助完成研究工作以及提供各種條件的單位和個人表示的感謝，也是對他人勞動的尊重。

1.2.5 參考文獻(xiàn)

參考文獻(xiàn)，是論文的重要組成部分。所列出的文獻(xiàn)，應(yīng)當(dāng)是作者親自閱讀或引用過的，不應(yīng)轉(zhuǎn)錄他人文后的文獻(xiàn)。在寫資料出處時一定要親自核實(shí)，不要出現(xiàn)差錯。指導(dǎo)者與評閱者應(yīng)進(jìn)行核實(shí)查對，以保證其真實(shí)可靠。所引用的文獻(xiàn)，應(yīng)是公開出版的刊物，內(nèi)部刊物一般不引用。

參考文獻(xiàn)的著錄，按著者/題名/出版事項(xiàng)等順序排列：

期刊——著者，題名，期刊名稱，出版年，卷號（期號），起始頁碼。

書籍——著者，書名，版次（第一版不標(biāo)注），出版地，出版者，出版年，起始頁碼。

1.2.6附錄

為了材料的完整性，編入正文有顯過繁，而又能比正文提供更多信息的內(nèi)容可考慮編寫附錄。

附錄主要包括以下內(nèi)容：正文中所使用公式的推導(dǎo)；研究方法和技術(shù)的更深入敘述；以備查讀所需的輔助性工具或表格；使用的主要符號、意義、單位、縮寫、程序全文及說明等。

1.2.7外文資料翻譯

外文資料翻譯要求表述準(zhǔn)確，語言通順，要有標(biāo)題、署名、正文、著錄等項(xiàng)目。

2.畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）打印格式

2.1打印及紙張

根據(jù)教務(wù)處提供的模版格式，畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）原則上使用A4規(guī)格的紙張打印。

2.2字號及字體

論文題目???????????黑體二號

“摘要”字樣?????????黑體三號

摘要正文???????????宋體小四

關(guān)鍵詞????????????宋體小四

論文正文

第一層次的題序和標(biāo)題???黑體三號

第二層次的題序和標(biāo)題???黑體小三

第三層次的題序和標(biāo)題???黑體四號

正文???????????宋體小四

頁碼???????????五號居中

3.畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）裝訂順序

畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）裝訂順序依次為封面、任務(wù)書、指導(dǎo)教師及評閱教師評閱書、答辯委員會成績評定書、畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）文本、封底等。

教務(wù)處

2010年1月16日

第四篇：中藥鑒定總結(jié)(超全)[范文]

采收加工總結(jié)

(一)采挖時間有異于一般規(guī)律的品種

1綿馬貫眾：夏秋采挖根莖，祛除雜質(zhì)，曬干。

2皇太子參：夏季采收

3附子：夏至至立秋間采挖

4白芍：夏、秋兩季采挖

5延胡索：5-7月植株枯萎后采挖

6白芷：夏、秋間、葉黃時、挖取根部。

7芎藭：夏季當(dāng)莖上的節(jié)盤顯著凸起，并略帶紫色時采挖，祛除莖葉土壤，曬至半干后再炕干，撞去須根。

8中夏：夏、秋兩季都可采挖

9四川的貝母母：因地而異，西北地域、一般在6-7月雪融后采挖。

10浙貝母：初夏植株枯萎后采挖。

11麥冬：浙江小滿至夏季采收，四川清明至谷雨采挖。

(二)產(chǎn)地加工需發(fā)汗的中藥品種有：

1玄參：曬至半干，堆放發(fā)汗至內(nèi)部變黑色，再曬干或烘焙。

2杜仲：使之“發(fā)汗”至內(nèi)皮呈紫褐色時，取出曬干。

3厚樸

4茯苓：“發(fā)汗”陰干5 廣藿香麥冬： 杜玄茯，麥厚汗。

(三)加工時需用硫磺熏的品種

1牛膝草：捆成小把曬至干皺后用硫磺熏數(shù)次，將頂端切齊曬干。2云連 硫熏附，牛豆山，3澤瀉：用硫磺熏白曬干。澤云連，貝母川。

4(白)豆蔻曬干或用硫磺熏，使果皮漂白。

5四川的貝母母

６ 山藥

７ 附子（白附片）硫磺熏后曬干

(四)產(chǎn)地加工需煮的品種。(或蒸或燙的)

1狗脊：熟狗脊片、沸水煮或蒸后曬至六、七成干再切片曬干。

2皇太子參：夏季莖葉大部門枯萎時，采挖，祛除須根，曬干或沸水中略燙后曬干。

3白芍：祛除頭尾及須根，刮去外皮，置沸水煮至透心立即撈出，放入冷水中浸泡，取出曬干(有的先煮后刮皮，再干燥)

4延胡索：放入開水中略煮至內(nèi)部中心有芝麻樣小白點(diǎn)時為度，立即撈出曬干。

5紅參：(人參的一種規(guī)格，95藥典已列為一新的品種)取洗凈的參，祛除根莖部的不定根及支根或僅祛除細(xì)支根及須根，蒸3小時左右，取出曬干或烘焙。

6附子：黑順片，煮，復(fù)用調(diào)色液染成濃茶色，烘至半干，再曬干；白附片，先煮，剝皮，切成縱薄片，水浸漂，蒸，曬至半干，再硫磺熏后曬干。

7百部：蒸或在沸水中煮至無白心，取出曬干。

8天麻：用凈水漂洗，蒸透心，低溫干燥(60℃以下)。

9厚樸：置沸水中微煮后，堆置土坑里，上蓋綠色的草使之“發(fā)汗”待水分自內(nèi)部滲出后，內(nèi)外貌變紫褐色或棕褐色時再蒸軟，取出，卷成筒狀，曬干或烘焙。根皮及枝皮剝下后可直接陰干。木瓜：也有入沸水中約燙5分鐘，外皮全部轉(zhuǎn)色時，撈擺攤曬、日曬夜露，光彩變紅，皮有皺紋兒，干燥即可。

11連翹：青翹加工時，祛除雜質(zhì)蒸熟，曬干。

12梔子：入沸水燙隨即撈出曬干，也可蒸熟后曬干。

13五倍子：置沸水中略煮或蒸至外外貌釀成灰色，以殺死內(nèi)部的膩蟲為度。取出曬干。

14全蝎：入鹽水鍋中煮了3-4小時煮至身能挺直豎立，違面抽溝，腹癟時撈出，置通風(fēng)處陰干。

15螞蟥：置沸水中燙死，曬干或低溫烘焙。

16斑蝥：悶死或燙死，曬干。

17鹿茸：鋸茸、立即舉行燙炸等加工、陰干或烘焙。郁金：蒸至透心，取出曬干（浙江用郁金葉燒灰后，與塊根拌以及，即能使根顏色變黑，又容易曬干。

蒸人天，厚郁連。煮黑附，芍延胡，鹽蝎煮。燙梔木，太蝥土，還有鹿。蒸或煮，狗脊五。煮后蒸，片白附。

(五)干燥特殊的品種

1肉桂：陰干或放置陰涼處2-3天后，于弱光下曬干。

2番瀉葉：陰干

3辛夷：陰干

4忍冬：通風(fēng)處陰干或攤成薄層曬干。陰干辛細(xì)牛麝款，5款冬花：陰干 金銀茯苓肉蒿番。6商陸：曬干或陰干

7檳榔：用水煮后低溫烘焙，剝?nèi)スと〕雠咧椤?/p>

8砂仁：連殼低溫焙干。

9細(xì)辛：陰干

10薄荷：曬干或涼干

11青蒿：陰干

12茯苓：陰干 烏蛇木柴熏，13烏梢蛇：木柴熏至發(fā)黑，曬干。低溫焙砂仁，1４麝香：陰干或用干燥器密閉干燥。薄商曬或陰。

1５牛黃：陰干

一、兒茶、含兒茶素以及表兒茶素的總含量不少于21.0%。

2、蟾酥：含華蟾酥基以及脂蟾毒配基總量不少于6.0%。

3、何首烏：含2，3，5，4ˊ-四羥基二苯乙烯-2-0-β-D蒲萄糖苷不得少于1.0%。

四、大黃：大黃素以及大黃酚的總量不得少于0.5%。

5、白芍：含芍藥苷不得少于0.8%。

6、甘草：苷草酸不得少于2.0%。

7、西洋參：人參皂苷Rb1不得少于1.0%。

八、人參：生曬參、生曬山參、人參皂苷Rg1以及人參皂苷Re的總量不得少于0.25%；紅參

總量不得少于0.20%。

九、防風(fēng)：含升麻苷以及5-O-甲基維斯阿米醇苷總量不得少于0.24%。

10、杜仲：含松脂醇二蒲萄糖苷不得少于0.1%。

1一、蓼大青葉：含深藍(lán)色不得少于0.5%。

12、田七：人參皂苷Rb1以及人參皂苷Rg1的總量不得少于3.8%。

13、厚樸：厚樸酚與以及厚樸酚總量不得少于2.0%。

1四、天麻：天麻素不得少于0.10%。

15、龍膽：龍膽苦苷不得少于1.0%。

16、丹參：丹參酮ⅡA不得少于0.20%。

17、黃芩：藥材黃芩苷不得少于9.0%，黃芩片不得少于8.0%，酒黃芩不得少于8.0%。

1八、木香：木香烴內(nèi)酯不得少于0.60%。

1九、吳茱萸：含吳茱萸胺，吳茱萸次堿的總量不得少于0.20%。20、連翹：連翹苷不得少于0.15%。

2一、血竭：含血竭素不得少于1.0%。

22、冬蟲夏草：含腺苷不得少于0.010%。

23、馬錢子：含士的寧（番木鱉堿）應(yīng)為1.20-2.20%。

一、丁香：丁香酚不得少于11.0%。

2、斑蝥：斑蝥素不得少于0.35%。

3、麝香：麝香酮不得少于2.0%。

一、紫草：羥基萘醌總色素以左旋紫草素計(jì)算不得少于0.80%。

2、槐花：含蘆丁槐花不得少于8.0%，槐米不得少于20.0%。

3、番瀉葉：總番瀉苷以番瀉苷B計(jì)不得少于2.5%。

四、制川烏：含烏頭堿不得少于0.20%。

5、牛黃：膽紅素不得少于35.0%。

6、青黛：在610nm波長處測定吸收度，含深藍(lán)色不得少于2.0%。

7、防己：含粉防己堿不得少于0.70%。

八、紅牡丹皮：單皮酚不得少于1.20%。

水溶性浸出物：

一、黃芪（冷）不得少于17.0%。

2、地黃（冷浸）不得少于65.0%

3、百部（熱浸）不得少于50.0%。

四、麥冬（冷浸）不得少于60%。

乙醇浸出物測定

一、板藍(lán)根：熱浸法不得少于25.0%。

2、柴胡：熱浸法不得少于11.0%

3、黨參：熱浸法不得少于55.0%。

四、杜仲：熱浸法藥材不得少于11.0%，鹽杜仲不的少于12.0%。

5、連翹：（冷浸）（65%乙醇）青翹不得少于30.0%老翹不得少于16.0%。

6、雙黃連（熱浸），不得少于8.0%。

7、全蝎（熱浸），不得少于20.0%。

八、款項(xiàng)白花蛇（熱浸），不得少于15.0%。

九、五步蛇（熱浸），不得少于10.0%。

10、烏梢蛇（熱浸），不得少于12%。殺蟲藥殘毒及有毒事物查抄：

一、甘草：六六六（總BHC）不得過萬極其之二；滴滴涕（總DDT）不得過萬極其之二；五氯硝基苯(PCNB)不得過萬極其之一。

2、黃芪：六六六（總BHC）不得過萬極其之二；滴滴涕（總DDT）不得過萬極其之二；五氯硝基苯(PCNB)不得過萬極其之一。

3、生石膏：含重金屬不得過百極其之十；砷鹽不得過百極其之二。

三、入藥部位總結(jié)

(一)根入藥的品種

何首烏(塊根)懷牛膝草 川牛膝草 商陸銀柴胡 皇太子參(塊根)川烏(母根)附子(側(cè)根)白芍 赤芍 防己板藍(lán)根 地榆 葛根 黃芪 人參(帶有根莖，但藥用時去掉)西洋參田七 白芷 當(dāng)歸 前胡 防風(fēng)柴胡 北沙參 秦艽 紫草 黃芩玄參 巴戟天 續(xù)斷 栝樓根花粉 桔梗黨參 南沙參 木香 百部(塊根)天冬(塊根)麥冬(塊根)郁金(塊根)遠(yuǎn)志 地黃(塊根)草烏(塊根)苦參 紅參 川木香

注意：其中塊根入藥的8種 何首烏、皇太子參、草烏、地黃、百部、天冬、麥冬、郁金。何太草塊根、二冬百地金。

(二)根莖入藥物的品種 雙子葉植物根為主，根莖芎黃北豆二術(shù)。

狗脊 錦馬貫眾（帶葉柄的根莖）芎藭 黃連胡黃連 北豆根 白術(shù) 蒼術(shù) 延胡索(塊莖)三棱(塊莖)澤瀉(塊莖)香附天南草(塊莖)中夏(塊莖)石菖蒲四川的貝母母(鱗莖)浙貝母(鱗莖)黃精玉竹 知母 山藥(塊莖)莪術(shù)姜黃 天麻(塊莖)白及(塊莖)

注意：其中以塊莖入藥的有8種 延胡索、三棱、澤瀉、天南草、中夏、山藥、天麻、白及。延胡三澤是塊莖，其中以鱗莖入藥的2種：四川的貝母、浙貝。天麻山半及南星，(三)根與根莖入藥的品種： 四川的貝母浙貝是鱗莖。

1大黃(根與根莖)2威靈仙(根與根莖)3甘草(根與根莖)4龍膽(根與根莖)5徐長卿(根及根莖)6丹參(根及根莖)7茜草(根及根莖)8紫菀(根與根莖)9 山豆根(根與根莖)

注意：威靈仙、龍膽、徐長卿、茜草、紫菀為馬尾狀根類。根及根莖馬尾根（5種），剩下：大黃、丹參、甘草、山豆根不是馬尾狀根類。再加山甘大丹參，(四)根莖及根入藥的品種 虎藁羌活根莖根。

1虎杖(根莖與根)2藁本(根莖與根)3羌活(根莖與根)中藥鑒定隨筆總結(jié)筆記一

中藥鑒定隨筆總結(jié) 1 中藥鑒定的依據(jù)：中國藥典以及部頒藥品標(biāo)準(zhǔn)金井玉欄：黃芪，板蘭根，桔梗 解離組織片的三種要領(lǐng)：銷鉻酸法，氯酸鉀法以及氰氧化鉀法，詳細(xì)到每個的適答對像飲片的規(guī)格：如極蒲片是0.5mm以下，薄片是1-2mm，厚片是2-4，斜片也是2-4mm，塊為8-12mm，皮類藥材寬為2-3mm；葉類藥材寬為5-10mm，段長為5-10mm等等膨脹度測定的藥材有：南（北）葶藶子，蝦蟆油 我國共刊行了8部藥典，為53 63 77 85 90 95 2000 2005，其中53只有一部，而05有三部門別是什么重點(diǎn)記第三部？其它的只有兩部 白術(shù)：是執(zhí)業(yè)測驗(yàn)書中唯逐一個可以用色度查抄的藥材。（聯(lián)系記含有針晶，白色以及大夫注射聯(lián)系記）。重金屬查抄：甘草，黃芪，白芍，西洋參，忍冬，分別是要查抄砷，鉛，銅，汞，鎘，分別是百極其之二，之五，之二十，萬極其之二，萬極其之五，有那一些藥材要記，但后面的注體查抄什么以及含量可以不記 中藥鑒定最經(jīng)常使用的要領(lǐng)是薄層色譜法 揮發(fā)油測定要領(lǐng)分甲法以及乙法，甲法相對疏密程度在1.0以下，乙法相對疏密程度在1.0以上（如丁香）草酸鈣方晶以及含有鞘纖維的：苦參，甘草，黃柏 瀉葉 雞血藤細(xì)辛：以前用的全草，現(xiàn)在改用地下部門，也就是根及根莖 含有蒽醌類及游離蒽醌類：大黃，虎杖，何首烏，茜草，巴戟天，大血藤，番瀉葉，決明子，注意既然有蒽醌就一般都有蒽醌類的反映 川烏：具有后生皮層，來源記住是毛茛科烏頭的母根，附子為它的側(cè)根的加工品，而草烏是北烏頭的塊根 北豆根：防已科本物蝙蝠葛干燥根莖

山豆根：豆科越南槐的根莖 西洋參含有：擬人參F11,而人參無，含Rf 田七：又稱銅皮鐵骨，主產(chǎn)云南紋山，含止血成份主要為田七氨酸，又名田七素含有香豆素：白芷，前胡，北沙參，南沙參，防風(fēng)，秦皮，羌活，肉桂，補(bǔ)骨脂，小茴香，茵陳，青蒿，甘草，桑白皮，連翹，含有這種極其的藥基本都有香豆素類的反映，如加鹽酸以及三氯化鐵顯紫紅色。注主身分含量較高反映才明顯（yuan）鳶尾科的藥就只兩個，一個是西紅花（柱頭）記住主產(chǎn)地是西班牙而不是xizang，一個是射干。所以把只有一到兩個科屬的建議各人一定要記住 20 銀柴胡有真珠盤；商陸有羅經(jīng)紋，何首烏有云錦狀花紋防風(fēng)有油頭，注意川木香也有油頭辰砂點(diǎn)：羌活中的竹節(jié)羌，蒼術(shù)中的蒼術(shù)等 知母有金包頭，玄參有羊角，松貝懷中抱月，杜仲雪白色膠絲，可以適當(dāng)記一下他的松脂醇二B-D蒲萄糖甘為降壓有用身分，聯(lián)系在記鹽炒的降壓效用強(qiáng)，而生用偏于補(bǔ)益肝腎，因?yàn)槲視r常聽見有的人說生的降壓效用強(qiáng)，所以多補(bǔ)充了一下。白鮮皮是所學(xué)過中藥中唯一具有羊腥氣息的藥材同心環(huán)狀紋：牛膝草，川牛膝草，商陸狗脊：木質(zhì)莖有一明顯凸起的棕黃色木質(zhì)大黃：髓部有星點(diǎn) 柴胡：有皂甘，含有蘆丁，聯(lián)系記蘆丁為黃酮醇類化合物，基本母查對3苯基色原酮注意蘆丁在進(jìn)修化課時怎么提取是重點(diǎn)，在聯(lián)系記黃酮基本母核是2苯基色原酮等等。含環(huán)烯醚萜甘：龍膽，地黃，玄參，胡黃連，梔子，杜仲 徐長卿：蘿摩科，聯(lián)系登記功績能以及需要后下，這個藥執(zhí)藥中等考，功能以執(zhí)業(yè)的標(biāo)準(zhǔn)，以前的課本上的不完全。

丹參：從飛人喬丹中記到含菲醌類化合物，別名有一個是紫丹參，因?yàn)樗幕ㄓ悬S色，但請記住，紫參是拳參而不是丹參。

來源得起碼要記住四大懷藥，浙八味，從其中聯(lián)系記二母是知母以及浙貝母，在記浙貝母芯芽在3.5cm以上并去芯芽加工的是大貝，而在3.5cm以下不去芯芽者為珠貝，不要認(rèn)為珠貝就是四川的貝母，還在記一些經(jīng)常使用藥的主產(chǎn)地，如東北三寶，云南產(chǎn)的木香，茯苓，田七等

貴州主產(chǎn)：天麻，天冬，杜仲，辰砂，黃精等，呵呵，是貴州的就記兩個了。

廣藥：砂仁，霍香，款項(xiàng)草，地龍，蛤蚧，肉桂

巴戟天：茜草科，皮部橫向斷離露出木質(zhì)莖形似連珠

玄參以及瓜萎具有特殊的焦糖味

莪術(shù)，姜黃，郁金的來源區(qū)別與聯(lián)系

大血藤：木通科，橫斷面皮部呈現(xiàn)紅棕色有數(shù)處向內(nèi)嵌入木部

雞血藤：3-8個偏疼性半環(huán)形，髓部偏向一側(cè)

奇南香：以沉水者為好，但并不暗示必需沉入水

肉桂味甜而微辛，錫蘭肉桂，味辛而涼

香加皮特殊香氣，地骨皮味苦有非常刺激感 43 桑白皮:撕裂時粉塵飛揚(yáng)

蓼大青葉為異面葉，基部漸狹，全緣

大青葉基部漸狹至基柄成翼狀

紫花地?。悍止甏?/p>

蒲公英：又稱黃花地丁，基部下延成柄狀

番瀉葉為等面葉，葉類少有，氣孔平軸式，46 花蕾入藥：丁香，忍冬，辛夷花，槐米

粟米須花柱入藥，蓮須雄蕊入藥

蒲黃：花粉粒網(wǎng)狀雕紋，周邊大概輪廓平滑，呈現(xiàn)凸波狀或齒輪狀，具有單萌生孔

丁香：花粉粒極面觀三角學(xué)形，赤道面觀呈雙凸鏡形，具3副合溝，角端各一個萌生孔，主含揮發(fā)油，油中主要身分為丁香酚

洋金花：花粉粒外貌觀點(diǎn)狀條形條紋，自兩極向四向呈現(xiàn)放射狀擺列

忍冬：花粉粒細(xì)刺狀突起，具萌生孔3個

紅花：花粉粒有齒狀寄信起，具3個萌生孔

款冬花：有三連朵，記住不是枇杷花，有的人認(rèn)為是，只要知道科屬就知道不是，款冬是菊科，而枇杷葉屬于薔薇科

黃酮類：葛根，黃芪，忍冬，羅布麻葉，地榆，菊花，淫羊霍，虎杖，皇太子參，苦參，甘草，田七，柴胡，麥冬，桑白皮，槐花，款冬花，黃芩，兒茶，青蒿，穿心連，款項(xiàng)草，紫花地丁，枳殼，小茴香，菟絲了，砂仁，槲寄生，紅花，蒲黃，木瓜，山查等具有黃酮一般有它的反映，但要含量高的身分明顯

有生命的物質(zhì)堿：川烏，草烏，益母草，元胡，附子，牽?；ㄗ樱S連{異喹啉類結(jié)構(gòu)含有特征性身分，黃連堿以及表小壁堿），防已，菊花，吳芋，馬錢子（吲哚類結(jié)構(gòu)），淫羊霍，石斛，蟲草，靈芝，蛤蚧，甘草，北沙參，靈芝，苦參，黨參，黃柏，秦皮，地骨皮，天南草，中夏，百部，四川的貝母，浙貝，鉤藤，厚樸，辛夷花，菊花

皂甘：牛膝草，沙菀子，木通，山查，商陸，皇太子參，威靈仙，白芍，赤芍，地榆，黃芪，木瓜，金櫻子，棗仁，棗皮，連召，梔子，瓜萎，砂仁，白豆蔻，槲寄生，紫花地丁，板蘭根，葛根，西洋參，田七，柴胡，南沙參，麥冬，知母，具有皂甘類化合物反映

含鞣質(zhì)：地榆，五倍子，木瓜，山查，棗皮，款項(xiàng)草，綿馬貫眾，大黃，虎杖，白芍，赤芍，大血藤，雞血藤，厚樸，秦皮，金櫻子，兒茶

含揮發(fā)油：川（木香），細(xì)辛，前胡，防風(fēng)，柴胡，補(bǔ)骨脂，吳芋，小茴香，砂仁，白豆蔻，仙靈脾，款項(xiàng)草，廣霍香，荊芥，薄荷，茵陳，青蒿，乳香，沒藥，蜂蜜，綿馬貫眾，甘草，人參，田七，白芷，當(dāng)歸，羌活，肉桂，厚樸，郁金，姜黃，莪術(shù)，石昌蒲，中夏（微量），澤瀉，丹參，白術(shù)，蒼術(shù)，香附

有機(jī)酸：金櫻子，山查，木瓜，棗皮，梔子，大黃，黃芪，人參，當(dāng)歸，羌活，五味子，胡黃連，石韋，忍冬，菊花，一般抗菌消炎的藥中藥及酸味的藥以及收斂都具有有機(jī)酸

多糖：金櫻子，枸杞子，瓜萎，苡米，靈芝，茯苓，豬苓，銀耳，蟲草，牛膝草，商陸，板蘭根，甘草，黃芪，人參，西洋參，田七，當(dāng)歸，羌活，柴胡，北沙參，地黃，栝樓根花粉，黨參，澤瀉，中夏，天南草，麥冬，知母，五味子，山查

萜類：雙黃連，青蒿，靈芝，茯苓，豬苓，地榆，葛根，甘草，遠(yuǎn)志，南沙參，黨參，雞血藤，棗仁，澤瀉，杜仲，款冬花

西紅花入水，水染成黃色

紅花入水，水染成金黃色

秦皮入水在紫外光下顯青藍(lán)色色熒光

丁香入水萼管鉛直下沉

乳香與水研成白色或者黃白色乳狀液，遐想到母乳喂養(yǎng)

沒藥與水研成黃棕色乳狀液

蟾酥與水即成乳白色隆起

假種皮入藥：肉豆蔻衣，桂圓肉

錯入組織：檳榔（大理石樣花紋），肉豆蔻

五葉子起白霜，遐想到化學(xué)身分，聯(lián)苯環(huán)辛烯類，分南北五味子，要是考專一時記一下各自的效用

葶藶子：十字花科，獨(dú)行菜的是北葶藶子，從儒醫(yī)的獨(dú)白，自言自語記，另外一個南葶藶子就是播娘蒿的來源，她們遇水黏發(fā)性非常強(qiáng)

苦杏仁：分解后產(chǎn)生氯氰酸，苯甲醛，屬于氧甘中的氰甘，一般考特殊情況只問到屬于什么甘，作為出題者來說對這個是非常認(rèn)識的，所以前面兩個只會出現(xiàn)一個答案。不會同時出現(xiàn)上述兩個

補(bǔ)骨脂：多孔平軸式氣孔

款項(xiàng)草：氣孔不等式或不定式

廣霍香；直軸式氣孔

益母草：氣孔多數(shù)直軸式，少量不定式

青蒿：氣孔不定式

大青葉：氣孔不等式 這個要求有點(diǎn)高，一般可以不掌握,還有就是什么藥材含有什么身分,不用記得太多,我只是做個總結(jié),這方面考的不多.中藥鑒定隨記總結(jié)筆記二

木脂素：補(bǔ)骨脂，五味子，連召，秦皮，仙靈脾，杜仲，辛夷花，對于含什么身分了解就行了，只要記住主要的幾個就行了

麻黃：草麻黃，裂2稀3，葉先端反曲

中麻黃，裂3稀2，微反曲，可以以及孫中山聯(lián)系，3在前，因?yàn)樗齻儙讉€都是3以及2的數(shù)碼

木賊麻黃，裂2稀3，葉先端不反曲，記住這個以及草區(qū)別點(diǎn)是葉先端不反曲

廣款項(xiàng)草:豆科廣款項(xiàng)草的地上部門

款項(xiàng)草：是報春花科聚花過路花的全草

枳殼：翻口似盆狀

小茴香：違面有5條微隆起的縱棱線

巴豆：外貌有6條縱線

蛇床子：分果馮面有小而明顯突起的果木棱5條

連召：有2條縱溝，兩面條有一條

菟絲了：有黏*，加熱煮至種皮破裂時露出白色卷旋狀的胚形如吐絲，所以可以記成吐絲子，諧音。

槲寄生：切面髓部常偏向一邊兒

款項(xiàng)草：葉片水浸后對光透視可見黑色或褐色條紋

肉蓯蓉：密被覆瓦狀擺列，列當(dāng)科

具腺毛與非腺毛：忍冬，薄何，款項(xiàng)草，廣霍香

青蒿：含有的蒿屬香豆素需要成熟的藥材才有，而幼時采擷的商品（綿茵陳）就無，而秋季茵陳蒿有，注意多項(xiàng)時

石斛：分類，以及以耳環(huán)石斛為佳

子實(shí)體：馬勃，靈芝

菌核：豬苓，茯苓，雷丸（沖服）可以遐想記琥珀，要是考專一遐想在記琥珀在粉碎時過多少目

海藻：馬尾菌科；海蒿子的來源的稱為大葉海藻，遐想記一首歌名叫滄海

而羊棲菜來源的稱為小葉海藻，遐想記小樣，諧音

蟲草的來源以及元胡的來源要重點(diǎn)記下，蟲草的性狀鑒別要端，及含有的身分

茯苓：只在次聚糖才有抗腫瘤活*，而茯苓聚糖則無 主產(chǎn)地云南，湖北，安微，而豬苓是陜西以及云南

香樹脂類：蘇合香，安眠香

油樹脂：松油脂，加拿大樹脂 油膠樹脂：乳香，沒藥，阿魏

蒲黃的顏色是鮮黃色，而海金沙則是黃棕色，記住不要混了

血竭：來源，猩紅色，火燃嗆鼻，苯甲醛樣香氣，及簡略鑒別要端.中藥鑒定隨記總結(jié)筆記三

海金沙：火試爆明聲及明亮火苗

青黛：火試紫紅色煙霧產(chǎn)生

兒茶：火試深紅色

麝香：火試初則迸裂起泡似珠，香氣深裂四溢，溶融成紅紫色液體，火苗為藍(lán)色并天生黃白色煙有強(qiáng)列蒜臭味

冰片：火試濃煙并有帶光的火苗

五倍子形成的三要素：宿主鹽膚木類植物，五倍子膩蟲，過冬宿主提燈蘚類植物

螞蟥素是現(xiàn)當(dāng)代界是最強(qiáng)的凝血酶殊效按捺劑

動物的入藥部位一定要記，89 地龍：只有廣地龍才有白頸，受精孔2對，另外三種稱為滬地龍無白頸受精孔3對

螞蟥：來源的兩種，兩端條有一吸盤，前小后大

真珠：結(jié)構(gòu)特征，真珠虹光環(huán)以及真珠結(jié)構(gòu)環(huán)是其特有，并可以不被丙酮洗脫

在紫外光下，天然真珠顯淺藍(lán)紫色，而養(yǎng)殖真珠顯亮黃綠色

海螵蛸：墨魚骨，干燥內(nèi)殼

全蝎有毒刺，蜈蚣全體有2二個環(huán)節(jié)，地鱉蟲藥用的是雌蟲的干燥體

斑蝥：芫青科，半合成品羥基斑蝥胺用于療治疾病比斑蝥素毒性小500倍

升華：丹皮，斑蝥，大黃（微量升華）大青葉（微量升華）冰片可以揮發(fā)

蜂蜜放冷吸出的結(jié)晶管為：蒲萄糖，相對疏密程度在1.349以上，用滴定法側(cè)定，還原糖不得少于百分之64，小粉酶值為8以上

海馬：分類中有馬頭蛇尾瓦欏身的是線紋海馬

刺海馬：有刺

三斑海馬：1.4.7節(jié)有黑斑

滄海馬：黑褐色，不好記的話記上邊三個就行了，剩下這個就是滄海馬的98 靛玉紅治慢性粒細(xì)胞白血病有一定療效 99 白花蛇：眼睛兒蛇科，記住粉末特征鑒別以及烏梢蛇區(qū)分的是什么？

烏梢蛇，游蛇科，有外形術(shù)語，劍脊

白花蛇粉末鑒別：鱗片無色或呈黃白色具眾從縱直條紋間距1.1-1.7um沿鱗片基部先規(guī)矩向徑向擺列

而烏梢蛇的是以及上邊大致相同，只是皮鱗片是黃棕色，間距為13.7-27.4um

麝香：雄體香囊中干燥分泌物，其中含有的術(shù)語有：冒槽，當(dāng)門子，云皮，銀皮，記住可手試，火試等

牛黃：?？疲稍锬懡Y(jié)石，有穿金衣，掛甲的描寫，主含膽汁素72-76%，不是主含膽汁酸

羚羊角：?？瀑惣恿缪?，主產(chǎn)于俄羅斯，描寫：血絲，骨塞，通天眼

鹿茸：鹿科分二類：梅花鹿又稱花鹿茸，黃鹿茸 記成黃花丫頭戀慕梅花

赤鹿茸又稱青毛茸，其中又分東赤鹿茸以及西赤鹿茸，以東馬為佳

花鹿茸：有1分枝稱為二杠，二個分枝稱為三岔，描寫的術(shù)語有：門莊，大挺，虎牙

赤鹿茸；有一個分枝稱為單門，二個分枝為蓮花，三個為三岔，4個為四岔，述語中有一個捻頭(這個藥是重點(diǎn),所以說得細(xì)一點(diǎn)兒)

飲片中均含有血片，蠟片，老角片，但花鹿茸中還含卵黃片，而赤鹿茸中則是粉片

礦物的厚度標(biāo)準(zhǔn)為0.03mm，記一下條痕色，解理，斷口

礦物類藥基本上用偏振光目鏡研究透明礦物，而蛇類鑒別是一般用的要領(lǐng)是聚丙烯酰胺凝膠蛋白電泳法

硫化類礦物：辰砂，天然酮，雞冠石

硫酸鹽類礦物：硭硝，生石膏

硅酸鹽類礦物：滑石

碳酸酸鹽類礦物：爐甘石

氧化物類：代赫石

條痕白色：爐甘石，滑石，硭硝（璃樣光澤）生石膏（遇水變?yōu)轲ば缘墓腆w特有的反映），生石膏還具有絹絲樣光澤

辰砂：鏡面砂，朱寶砂，豆瓣砂，加鹽酸以及在銅片上可以產(chǎn)生雪白色，加熱后消失。含硫化汞不少于98%

雞冠石： 二硫化二砷不得少于90% 111 天然銅： 二硫化鐵

代赭石：主含三氧化二鐵 不得少于45% 113 信石：主含三氧化二砷 白的毒性比紅的大，因?yàn)榘椎陌凳颈攘?/p>

爐甘石：主含碳酸鋅分解后為氧化鋅

滑石：含水硅酸鎂，含的是一種結(jié)構(gòu)水，可能遐想一下細(xì)胞中沒事了還有什么水已什么形式存在于植物體內(nèi)？

生石膏：含水硫酸鈣

硭硝：硫酸鈉不得少于99%這個在所有礦物中含量最高

辰砂：條痕色紅色至褐紅色

雞冠石：條痕色橘紅色，還具有金剛樣光澤

天然銅：綠黑色或棕紅色，還肯具有相領(lǐng)面上條紋彼此鉛直的獨(dú)特之處

代赫石：條痕色櫻紅色或紅棕色，具有釘角，碎后斷面層疊狀

以是是小我私人筆記,僅供參考,不全的請各人本身補(bǔ)充, 中藥鑒定學(xué)的來源總結(jié)一

中藥鑒定學(xué)的來源

鱗毛蕨科：綿馬貫眾

商陸科：商陸

遠(yuǎn)志科：遠(yuǎn)志

莎草科：香附

蚌殼蕨科：金毛狗

蒲萄科：白蘞

樟科：肉桂

紫草科：紫草

蘿摩科：徐長卿，香加皮

杜仲科：杜仲

川續(xù)斷科：續(xù)斷

黑三棱科黑三棱的干燥塊根：三棱

澤瀉科：澤瀉（塊根）

?？疲荷０灼?，桑枝

瑞香科：奇南香

夾竹桃科：羅布麻葉

桃金娘科：丁香

列當(dāng)科：大蕓 香蒲科：蒲黃

百部科：百部

水龍骨科：石韋科

柏科；側(cè)柏葉 忍冬科：忍冬

鼠李科：棘棗仁

山茱萸科：棗皮

馬錢科：馬錢子

禾本科；苡米

麻黃科：麻黃

桑寄生科：槲寄生

三白草科：魚腥草

小壁科：淫羊霍

堇堇菜科：紫花地丁

爵床科：雙黃連，青黛

車前科：車前草

漆樹科：五倍子

海金沙科：海金沙

橄欖科：乳香，沒藥

女蘿科：女蘿棕

馬尾藻科：海藻分二個來源 海蒿子遐想記為滄海，羊棲菜聯(lián)系記為小樣。

報春花科：款項(xiàng)草，區(qū)別于廣款項(xiàng)草，豆科。

麥角菌科：蟲草

大戟科：巴豆

馬兜鈴科：細(xì)辛，關(guān)木通（現(xiàn)已不做為藥用）

多孔菌科：靈芝，茯苓，豬苓

旋花科：菟絲子，牽牛花子

桂花科：連召，女貞子，秦皮

茄科：地骨皮，枸杞子，洋金花

蕓香科：枳殼，吳芋，黃柏，關(guān)黃柏，白蘚皮

蘭科：天麻、白及（塊莖），石斛 鳶尾科：西紅花（柱頭），射干

木通科：木通，大血藤均為騰莖

天南草科：天南草、中夏均為塊莖，石昌蒲

葫蘆科：栝樓根花粉，瓜蔞

玄參科：玄參，地黃，胡黃連

五加科：人參，西洋參，田七，通草，注意大多數(shù)人都不知道

十字花科：板蘭根，大青葉，葶藶子注意南北的區(qū)分

嬰粟科：元胡，嬰粟殼

石竹科：皇太子參，銀材胡

防已科；防已，北豆根

莧科：牛膝草，川牛膝草

蓼科：大黃，虎杖，何首烏，蓼大青葉

毛茛科：威靈仙，川烏，草烏，附子，白芍，赤芍，黃連，丹皮

薔薇科：地榆，枇杷葉，木瓜，山查，桃仁，苦杏仁，酸梅，金櫻子

豆科：苦參，山豆根，甘草，葛根，黃芪，蘇方，雞血騰，降香，番瀉葉，槐花，槐米，沙菀子，決明子，補(bǔ)骨脂，廣款項(xiàng)草，兒茶

茜草科：茜草，巴戟天，鉤藤，梔子

傘形科：白芷，當(dāng)歸，羌活，前胡，芎藭，蒿本，防風(fēng)，柴胡，北沙參，小茴香，蛇床子

唇形科：丹參，黃芩，紫蘇，廣藿香，益母草，薄何，荊芥

桔?？疲航酃?，黨參，南沙參 共性是都以根為藥，含乳汁管，菊糖，皂甘等。

菊科：（川）木香，白術(shù)，蒼術(shù)，紫菀，菊花，鶴虱，牛蒡子，蒲公英，茵陳，青蒿 含有的共性一般含菊糖，香氣濃，含揮發(fā)油，含揮發(fā)油的藥材一般有辛味，分泌組織

百合科：四川的貝母，浙貝，均為鱗莖，麥冬，天冬為塊根，知母，黃精，玉竹，聯(lián)系記二母中含多的很知母以及浙貝母。

姜科：姜黃根莖，郁金塊金，莪術(shù)根莖，聯(lián)系記這個藥材來源的區(qū)別，砂仁，白豆蔻，益智仁

環(huán)節(jié)動物門：地龍，螞蟥

software動物門：石決明，真珠，牡蠣，海螵蛸，節(jié)肥動物門：全蝎，蜈蚣（全體含有2二個環(huán)節(jié)），地鱉蟲（雌體），桑螵蛸，斑蝥，僵蠶，蜂蜜

脊索動物門：海馬，疥蝦蟆，龜甲，鱉甲，蛤蚧，白花蛇，五步蛇，烏梢蛇（劍脊），雞內(nèi)金，麛香，鹿茸，牛黃，羚羊角

這是考執(zhí)中時的藥物來源，實(shí)在并不多，最起碼要能記住只有一個科屬的，一些經(jīng)常使用的要記住，如浙八味，四大懷藥，東北三寶等等，也許我總結(jié)的不全，但愿列位有時候間也能夠本身總結(jié)一下，記時最佳把整個來源看下，因?yàn)檫@只是純一的科，但許多考的是藥用部位，所以我只是把前面的大類給各人做一個總結(jié)，這一方面的分不會少于5分左右。

中藥顯微特征以及經(jīng)脈系統(tǒng)一、中藥鑒定總結(jié)二

1油管：白芷，防風(fēng)，柴胡，前胡，小茴香，補(bǔ)骨脂（缺刻處皮面下有浩繁橢圓形壁內(nèi)腺，含有油滴）

2油室：蒼術(shù)，白術(shù)，木香，川木香，當(dāng)歸，芎藭，吳芋，枳殼，澤瀉，丁香

3樹脂道：人參，西洋參，田七，多數(shù)五加科的植物都有，測驗(yàn)中屬五加科的藥不多，前面我已總結(jié)五加科的有那一些

4乳管：桔梗，黨參，桑白皮，多數(shù)菊科植物都有

5菊糖：桔梗，黨參，木香，川木香，白術(shù)，蒼術(shù)，多數(shù)為菊科植物含有

6草酸鈣簇晶：梔子，大黃，何首烏，人參，西洋參，田七，白芷，芎藭，蓼大青葉，苦楝皮，鉤藤，丹皮，槲寄生，小茴香，棗皮，決明子，山查，丁香，忍冬，洋金花，番瀉葉，五加科植物一般都含有簇晶

8草酸鈣方晶：洋金花，梔子，苦參，葛根，枳殼，甘草，補(bǔ)骨脂，石昌蒲，紅花，桑白皮，黃柏，苦楝皮，合歡皮

9草酸鈣針晶：龍膽，巴戟天，白術(shù)，蒼術(shù)，中夏，麥冬，天麻，山藥，肉桂，廣霍香

10草酸鈣砂晶：枸杞，洋金花，麻黃，鉤藤，地骨皮，秦皮,牛膝草

11草酸鈣棱晶：番瀉葉，桔梗，木通，五倍子，枳殼

12草酸鈣柱晶：奇南香，補(bǔ)骨脂

13油細(xì)胞：石草蒲，胡金，干姜，厚樸，肉桂，五味子

14石細(xì)胞的藥才我已說過，測驗(yàn)方面這些個分?jǐn)?shù)不是很高但含有一些油室或油管以及一些少的都要能記住，這方面有失身份不劃算，可能還有些遺漏的藥材，各人可以本身在補(bǔ)上。

二、最后在說一下十二經(jīng)脈的流注秩序序，因?yàn)闀r常會有人記不住。

1起首知道十二經(jīng)脈的走向：手三陰經(jīng)從臟走手

手三陽經(jīng)從手走頭

足三陽經(jīng)重新走足

足三陰經(jīng)從足走腹 2在明確知道在外側(cè)為陽，陽經(jīng)分前，中，后，分別是：陽明，少陽，太陽

在內(nèi)側(cè)為陰，陰經(jīng)分前，中，后，分別是：太陰，厥陰，少陰

注意足少陰以及足厥陰在分布時有一些變更就行了。

3記住相為表里的陰陽經(jīng)在四體交代，重名家足陽經(jīng)在頭面交代，手足陰經(jīng)在胸中交代。

4只要理解了，如許就非常好記了。

5要是是為了測驗(yàn)要是出現(xiàn)如許的題什么經(jīng)下交于什么或者上毗連的是什么？有一簡略的要領(lǐng)，到時直接推出來就行了。

要是是考執(zhí)藥的人都買了書的吧，或者在學(xué)校的書冊都有十二經(jīng)脈的流注圖，你看前面的全部都是手足陰經(jīng)并且是交互的，遵循的規(guī)律都是手陰經(jīng)前后中三條經(jīng)脈，足陰經(jīng)也是一樣的規(guī)律，前后中的擺列，我上邊講過怎么分前,后,中，后面的全部都是手足陽經(jīng)并且是交互的，遵循的規(guī)律都是手陽經(jīng)前后中三條經(jīng)脈，足陽經(jīng)也是一樣的規(guī)律，前后中的擺列，我上邊講過怎么分前,后.中，只要你知道熬頭豎排熬頭個是手太陰肺經(jīng),后面的熬頭個是手陽明結(jié)腸經(jīng).如許手足依次按前后中的秩序序擺列就行了,不要忘記箭頭所指的方向.要是你如許開具來后在推也一定不會錯。

6要注意脈像的主治病以及舌態(tài)是什么的先兆，五行中惡馬惡人騎最佳只記兩條線，不要按五角星的記法，那樣容易搞錯。其它的就重點(diǎn)看上成藥以及調(diào)劑以及診斷學(xué)，中成藥增效或者影響及含有什么身分，這幾門加起來有70分左右的題（包括儒醫(yī)根蒂根基意見），另外的就是我前面文章中的分值分布，如許5分，那樣3分的2分。

以上僅供列位參考，復(fù)習(xí)以你本身的習(xí)氣為準(zhǔn)

果實(shí)與胚珠的分類

果實(shí)：山查，金櫻子，補(bǔ)骨，枳殼，巴豆，小茴香，蛇床子，棗皮，連召，女貞子，枸杞子，梔子，瓜蔞，鶴虱，牛蒡子，薏仁，砂仁，白豆蔻，益智仁

五味子。木瓜，酸梅（嚴(yán)酷來說這個藥是果實(shí)胚珠一路入藥），吳茱萸這幾個用的是近成熟果實(shí)，枳實(shí)用的是幼果。

果實(shí)存貯胚珠入藥：巴豆，砂仁

半果皮放藥：橘絡(luò)，絲瓜

果穗：桑椹

全果皮：陳皮，大腹皮

胚珠：葶藶子，苦杏仁，桃仁，棗仁，牽?；ㄗ?，馬錢子，沙菀子，決明子，檳榔，菟絲子

有個名叫葶藶子的山人（三仁：注意不是三仁湯中的三仁），牽著一匹馬在沙灘上吃檳榔，看見了一只菟子后決議去追它。順序我上邊已排好了。

這只是考執(zhí)藥時有的內(nèi)容，也的果實(shí)或者胚珠沒有出現(xiàn)在測驗(yàn)的教材上的是不會考的。我一般只記胚珠類的藥有下那一些就知道上邊的了。

1吳茱萸水泡后有粘液滲出

2梔子入水使水染成鮮黃色

3降香火燒有黑煙及油冒出遺留白色灰燼

4間隙腺毛：綿馬貫眾，廣霍香

5味極苦：山豆根，苦參，龍膽，胡黃連，馬錢子，雙黃連

6主要說一下白附子以及附子的區(qū)別，注意不是一個藥材很多人容易混合

附子：來源于毛茛科烏頭的側(cè)根的加工品，一般用量為3-15g，性大熱，味辛，甘，有毒

白附子：天南草科獨(dú)角蓮的干燥塊莖，一般用量為3-6g，生品里服慎用

附子：回陽救逆，補(bǔ)火助陽，逐風(fēng)寒濕邪，不宜與烏頭類以及瓜萎同用

白附子：祛風(fēng)痰，定驚搐，解毒散結(jié)止痛。

來源記憶隨筆

比如植物里傘形科的有13味中藥（北沙參、小茴香、當(dāng)歸、南鶴虱、蛇床子、防風(fēng)、羌獨(dú)活、柴胡、前胡、白芷、藁本、芎藭），一會兒很難全部記住。我編了首詩“北回歸、南蛇風(fēng)，兩活兩胡芷藁芎”，馬上就記住了，到現(xiàn)在還忘不掉。

還有河南的四大懷藥（即懷牛膝草、懷山藥、懷菊花、懷地黃），我也編了首詩“四大懷藥在河南，牛山菊花各處黃”，非常形象的記住了這四味藥。

還有藥用部位為塊莖的藥材，（即天南草、天麻、三棱、澤瀉、元胡、中夏、白及），“兩天三瀉胡半白”。遐想起：“快禁（塊莖），兩天瀉了三回胡子都白了一半?！保▋商欤ㄌ炷喜?、天麻）三（三棱）瀉（澤瀉）胡（元胡）半（中夏）白（白及），用一個風(fēng)趣的故事記住了教材里藥用部位為塊莖的藥。

還有藥用部位為根及根莖的藥材，如紫菀、茜草、虎仗、大黃、龍膽、山豆根、藁本、甘草、徐長卿、羌（搶）活、威靈仙、丹參，怎么記呢？且看“宛西虎仗黃龍膽，山高草長搶靈藥”，宛西的山君仗著黃龍的膽，在山高草長之處居然敢搶靈藥。用一個小故事，形象活潑地記住了上述的藥材。

轉(zhuǎn)石細(xì)胞藥材并補(bǔ)充

一.在《中藥鑒定學(xué)》中，含有石細(xì)胞的藥材有26種，恁地多該怎么記呢？咱們可以遐想成一個故事：（由于作者編的不完全，我前次看到后據(jù)原文加了10味藥上來，就釀成了36味． 從前，有個大地主叫吳茱萸。他的大老婆為人厚樸，沒人逢迎（巴戟天）她。新討的二房（防己、防風(fēng)），人稱辛姨（辛夷），有死后不能使用打藥栝樓根花粉，但喜歡吃酸的山查以及棗皮，但是氣血比力虧所以用用黨參以及地黃，因生了兩個兒子，叫梔子以及杞子，就備受痛愛，有五個丫環(huán)（叫黃芩、黃連（雅連）、黃柏、黃芪，連召）照顧她。她每天要吃五味東西：1.豆砂包（豆蔻、砂仁）；2.炒三香肉，當(dāng)時肉貴（川木香、肉桂）(可以想到吳三桂)，就殺了兩豬（蒼白術(shù)）；3.雞血藤上長出的木瓜以及元胡，（因質(zhì)地都比力堅(jiān)硬）；4.寄生在杜仲以及秦皮樹上的檳榔；5.玄參麥冬湯葛根湯。

這26味中藥即：吳茱萸、厚樸、巴戟天、防己、防風(fēng)、辛夷、梔子、杞子、黃芩、黃連、黃柏、黃芪、五味子、豆蔻、砂仁、肉桂、蒼術(shù)、白術(shù)、雞血藤、木瓜、槲寄生、杜仲、檳榔、黨參、玄參、麥冬。

新加的10味藥是栝樓根花粉，山查，棗皮，黨參，地黃，連召，川木香，元胡，秦皮，葛

中藥鑒定浸出物總結(jié)

1水溶性浸出物：熱浸法：玄參，枸杞子，靈芝，地龍，地鱉蟲，百部 杷葉

2水溶性浸出物：冷浸法：商陸，地黃，巴戟天，麥冬，紅花 黃芪

3丹參特殊記：水溶性浸出物冷浸法不得少于35%，醇溶性浸出物熱浸

法用乙醇作溶劑不得少于15%

4醇溶性浸出物冷浸法：連翹(65%的乙醇)乙醇：牽?；ㄗ?，廣藿香

稀乙醇：仙靈脾

無水乙醇：青蒿

5醇溶性浸出物熱浸法

乙醇為溶劑：威靈仙，芎藭，防風(fēng)，柴胡，徐長卿，胡黃連，大血騰，奇南香，紅牡丹皮，大青葉，洋金花，山查，槲寄生，秦皮

稀乙醇為溶劑：狗脊，前胡，黃芩，南沙參，四川的貝母，浙貝，蘇方，黃柏，石葦，螞蟥，全蝎，蜈蚣，雞內(nèi)金，款項(xiàng)白花蛇，五步蛇，烏梢蛇，元胡，白芷（動物藥除開地龍以及地鱉蟲外只要測驗(yàn)出現(xiàn)都記成是用醇溶性浸出物熱浸法以稀乙醇為溶劑）

45%的乙醇：黨參

75%的乙醇：杜仲，款項(xiàng)草

水達(dá)到最高限度正丁醇：牛膝草

甲醇：田七，防己 30%的甲醇：槐花，槐米考

無水乙醇：薏苡仁

第五篇：超全干細(xì)胞重點(diǎn)知識總結(jié)

第九章干細(xì)胞 第一節(jié)干細(xì)胞概述

一、干細(xì)胞(stem cells)與個體發(fā)育

正常生物個體發(fā)育的過程是按嚴(yán)格的時空程序進(jìn)行的一系列細(xì)胞分裂、分化和細(xì)胞凋亡相互協(xié)調(diào)作用的結(jié)果。從一個受精卵、全能胚胎干細(xì)胞或組織譜系干細(xì)胞最終分化為具有獨(dú)特功能體細(xì)胞所組成的組織器官,這是一個彼此協(xié)調(diào)而又制約的復(fù)雜過程,這一過程通常被稱為發(fā)育的遺傳程序(genetic program),被記錄在細(xì)胞基因組的結(jié)構(gòu)中。不同物種有不同的遺傳程序,這可能是物種在長期進(jìn)化過程中逐漸形成的。

在哺乳動物個體發(fā)育的不同階段,包括胚胎、幼年和成年個體的各個發(fā)育時期,都存在著發(fā)育潛能參差不同的干細(xì)胞。干細(xì)胞最終演變?yōu)楠?dú)特結(jié)構(gòu)和功能的體細(xì)胞或成熟生殖細(xì)胞,這過程即是所謂細(xì)胞分化。從分子水平而言,可以認(rèn)為細(xì)胞分化是部分基因選擇性地被激活或差異性表達(dá),從而控制專一性蛋白質(zhì)的合成和排布的結(jié)果。對正常細(xì)胞分化來說,最重要的是多個基因表達(dá)過程在數(shù)量和時空上的精確聯(lián)系和密切配合,并受不同層次的基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)精確無誤地調(diào)節(jié)和控制。干細(xì)胞在胚胎和成體組織內(nèi)部的活動,包括干細(xì)胞基本特性的分子機(jī)制和調(diào)節(jié)控制、胚胎細(xì)胞的遷移活動、時空程序與相鄰胚胎細(xì)胞的相互作用,對細(xì)胞增殖和分化的關(guān)系等,雖已有所了解,但由于技術(shù)上的原因,直接證據(jù)還很少,因此,干細(xì)胞增殖和分化問題仍是今天發(fā)育生物學(xué)研究的主題內(nèi)容之一.二、干細(xì)胞的定義和分類

因干細(xì)胞是指一類具有自我更新和產(chǎn)生分化后代這兩種基本特性的細(xì)胞。一個充滿生命力的雌雄兩性機(jī)體都是由兩類不同的組織和器官構(gòu)成的。一類是全部由體細(xì)胞組成的,另一類是以生殖細(xì)胞為主的,也包括一些由體細(xì)胞組成的組織和器官構(gòu)成的。前者是執(zhí)行機(jī)體生命活動各種生理功能的;后者一切都為了保證生殖系統(tǒng)的卵巢和辜丸中的卵子和精子的發(fā)育和成熟并延續(xù)生命的。對人類來講,從一個受精卵的單細(xì)胞要產(chǎn)生200多種不同類別的細(xì)胞來構(gòu)成各種組織和器官,必然要靠全能性的早期胚胎干細(xì)胞通過自我更新和產(chǎn)生分化后代來實(shí)現(xiàn)的。

自我更新是指干細(xì)胞可進(jìn)行均等分裂,產(chǎn)生兩個遺傳特性上完全一樣的干細(xì)胞,均等分裂是大多數(shù)細(xì)胞的特性,而產(chǎn)生分化后代指的是干細(xì)胞還可進(jìn)行不均等分裂,產(chǎn)生的兩個子代細(xì)胞中一個仍是干細(xì)胞,而另一個是遺傳特性有所不同的,要開始走上分化道路的定向祖細(xì)胞。早期胚胎細(xì)胞是全能的,它既可產(chǎn)生體細(xì)胞,又能產(chǎn)生生殖細(xì)胞,這包括從早期的卵裂球和囊胚期的ICM細(xì)胞以及后來胚胎的3個胚層已分化后的生殖嵴區(qū)的原始生殖細(xì)胞;而分化的后代細(xì)胞可從包括全能細(xì)胞向多能細(xì)胞和細(xì)胞譜系的各級祖細(xì)胞發(fā)展,這些細(xì)胞仍舊可通過均等和不均等兩種分裂方式進(jìn)行繁殖,一直到最后的終未分化體細(xì)胞。

干細(xì)胞可分為兩類:一類干細(xì)胞包括從早期囊胚ICM(inner cell mass)細(xì)胞分離并在體外培養(yǎng)和建系的胚胎干細(xì)胞(embryonic stem cells,簡稱ES細(xì)胞)和從胚胎生殖嵴原始生殖細(xì)胞(primordial germ cells, PGC)分離建系的胚胎生殖細(xì)胞(embryonic germ cells,簡稱EG細(xì)胞);另一類是先在成年組織和器官,以后在胎兒組織被證明其存在,隨后個別也在體外培養(yǎng)和建系成功的干細(xì)胞, 稱為組織干細(xì)胞(tissue stem cells),又稱成體干細(xì)胞(adult stem cells)。

三、胚胎干細(xì)胞研究簡史

哺乳動物早期胚胎體積小,又在母體子宮內(nèi)發(fā)育,因此,要在體內(nèi)對各類干細(xì)胞的分化及其機(jī)制進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究幾乎不可能。從20世紀(jì)50年代開始,人們一直在致力于尋找一個既能在體外增殖,又具有胚胎細(xì)胞全能性(totipotency)或多能性的(pluripotency)并通過適當(dāng)條件能被誘導(dǎo)分化為各種類型分化細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?0世紀(jì)50年代末美國發(fā)育生物學(xué)家Stevens(1967)將著床前發(fā)育階段的小鼠胚胎(包括受精卵)或12天胚齡的胚胎生殖嵴異位移植到同系成年小鼠辜丸或腎臟被膜下,移植后7天,發(fā)現(xiàn)有80%接種灶出現(xiàn)并發(fā)展為畸胎瘤。從中分離、培養(yǎng)和建立了胚胎性癌細(xì)胞(embryonal carcinoma cell, EC)系,揭開了胚胎性干細(xì)胞早期研究的序幕。EC細(xì)胞既具有惡性生長又具有早期胚胎細(xì)胞發(fā)育多潛能性的雙重性質(zhì)。在20 世紀(jì)70年代, EC細(xì)胞常用作研究哺乳動物發(fā)育遺傳以及細(xì)胞分化的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?并取得了一些重要結(jié)果。后因EC細(xì)胞核型異常,分化細(xì)胞類型有限等缺點(diǎn)而不再被使用。

20世紀(jì)80年代初,英國Evans和Kaufman以及美國Martin 2家實(shí)驗(yàn)室獨(dú)立地從小鼠囊胚成功地建立了能在體外不斷增殖,并維持不分化狀態(tài)的多潛能胚胎干(ES)細(xì)胞系,開創(chuàng)了ES細(xì)胞生物學(xué)研究的新時代。但此后ES細(xì)胞在其他動物上的分離和建系卻頗受挫折,直到20世紀(jì)80年代后期才有所突破,見表 19.1。20世紀(jì)90年代初,美國Matsui等從小鼠9天胚胎生殖嵴建立了多潛能的胚胎生殖細(xì)胞系,同一時期,少數(shù)其他動物也相繼建立了ES或EG細(xì)胞系。1998年美國威斯康星大學(xué)Thomson等人利用36枚新鮮或凍存的人工體外受精胚胎,獲得人ICM細(xì)胞,經(jīng)體外培養(yǎng)后,首次成功地建立了5株人類ES細(xì)胞系,同年, John Hopkins醫(yī)學(xué)院Shamblott等人從5-9周人流胚胎的生殖嵴和腸系膜首次培養(yǎng)出人EG細(xì)胞系。第二節(jié)胚胎干細(xì)胞

胚胎干細(xì)胞又稱ES細(xì)胞主要是指從早期胚胎的卵裂球、囊胚ICM細(xì)胞分離培養(yǎng)和建系的細(xì)胞。而從胚胎生殖嵴中PGC分離培養(yǎng)建成的稱胚胎生殖細(xì)胞簡稱EG細(xì)胞。這2類干細(xì)胞統(tǒng)稱為胚胎性干細(xì)胞,其最基本的重要特性是具有穩(wěn)定地在體外自我更新并保持不分化和發(fā)育的多能性,即可以在體外分化為屬于3個胚層的各種細(xì)胞。

一、ES和EG細(xì)胞培養(yǎng)、建系技術(shù)

體外培養(yǎng)建系ES和EG細(xì)胞的技術(shù)以小鼠的最為成熟,成功率最高,其基本原則是有賴于獲得全能性胚胎細(xì)胞或細(xì)胞團(tuán)并建立體外適合其增殖和抑制分化的培養(yǎng)系統(tǒng)。由于早期胚胎細(xì)胞離體后極易發(fā)生分化,首先要解決阻止其分化、確保維持其全能性或多能性這一關(guān)鍵問題。目前常用的細(xì)胞分化抑制物主要有3種:飼養(yǎng)層細(xì)胞(feeder layer cells)、特殊細(xì)胞的條件培液(conditioned medium),如BRL(Buffalo rat liver)細(xì)胞條件培液,分化抑制因子(differentiation inhibitory factor, DIF),如白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor, LIF)。此外,也有添加通過gp130信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的細(xì)胞因子,例如,白介素6(lL一6)、Oncostatin M和睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(ciliary neurotrophic factor, CNTF)等同樣可達(dá)到維持小鼠ES細(xì)胞的不分化狀態(tài)。因此,體外培養(yǎng)ES和EG細(xì)胞可劃分為兩大類:飼養(yǎng)層培養(yǎng)法和無飼養(yǎng)層培養(yǎng)法。(一)飼養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)法

不論ES細(xì)胞或EG細(xì)胞,原代或初期培養(yǎng)階段一般都需依賴于能分泌使它們在體外存活和增殖所必需生長因子的飼養(yǎng)層細(xì)胞。

不同類型的飼養(yǎng)層細(xì)胞分泌的生長因子略有不同。但都要求在ES或EG細(xì)胞培養(yǎng)過程中的飼養(yǎng)層細(xì)胞保持不分裂增殖,而仍然保持細(xì)胞的代謝活性。常用的飼養(yǎng)層細(xì)胞有下列兩種:一種是取自各種品系小鼠交配后12 dpc(days post coitum)的胚胎成纖維細(xì)胞(embryonic fibroblast, MEF)。經(jīng)絲裂霉素C(mitomycin C)處理以終止細(xì)胞分裂后,用作ES細(xì)胞培養(yǎng)的飼養(yǎng)層。另一種是來自SIM小鼠(S)胚胎的對硫代鳥嘌嶺(thioguanine, T)和烏本苷(ouabain, O)有抗性的成纖維STO細(xì)胞系,主要分泌干細(xì)胞生長因子(stem cell factor, SCF)和白血病抑制因子(LIF)。此外,SLCM)。一般以2-3份上述細(xì)胞條件培養(yǎng)液加120%胎牛血清,共同組合成無飼養(yǎng)層的ES 細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)。但往往在胚胎干細(xì)胞原代和建系初期缺乏飼養(yǎng)層時,用這種條件培養(yǎng)液培養(yǎng)ES和EG細(xì)胞成功率不高,因此,正確使用飼養(yǎng)層細(xì)胞和條件培養(yǎng)液在ES/EG細(xì)胞建系初期仍是成功的一個關(guān)鍵因素。(三)ES和EC細(xì)胞的體外培養(yǎng) 1.ES細(xì)胞

不同動物,甚至同種不同品系動物的胚胎發(fā)育速度和方式存在著較大差異,例如,豬ICM細(xì)胞生長與小鼠的不一樣,其生長速率很慢,且有一個休眠(quiescent)時期。因此,ES細(xì)胞培養(yǎng)建系需根據(jù)各個物種而選擇不同發(fā)育階段的早期胚胎。例如,一般小鼠多選用3-4 d的囊胚或210 d 的囊胚,綿羊取8-9 d的囊胚,人和牛取7-8 d的囊胚。同時,經(jīng)體外受精的胚胎或由核移植獲得的重構(gòu)胚胎在體外培養(yǎng)至所需適當(dāng)?shù)陌l(fā)育階段也是選取ES細(xì)胞培養(yǎng)的有效材料來源。

基本培養(yǎng)液為含15%4.5 dpc的小鼠囊胚主要由己分化的滋養(yǎng)外胚層(trophectoderm)和未分化的ICM細(xì)胞組成,前者細(xì)胞表面一般已表達(dá)主要組織相容性復(fù)合體(major histocompatibility complex, MHC),能識別其相應(yīng)抗體和形成免疫復(fù)合物,在補(bǔ)體存在時可導(dǎo)致細(xì)胞發(fā)生免疫溶解。囊胚去除透明帶,直接暴露于稀釋的兔抗JCR小鼠脾細(xì)胞抗血清(抗H10.5 dpc小鼠胚胎,在解剖鏡下用鑷子剖取包含原始生殖細(xì)胞(PGC)的生殖嵴組織，以0.02% EDTA液孵育含PGC細(xì)胞的生殖嵴組織, 37 0C , 15 min。吸管輕吹打散,接種于鋪有MEF或STO飼養(yǎng)層細(xì)胞的4孔培養(yǎng)板內(nèi)。接種細(xì)胞首先出現(xiàn)貼壁生長,每天或隔天更換培養(yǎng)液。生殖嵴組織培養(yǎng)物在飼養(yǎng)層細(xì)胞上分裂增殖,480和GCTM-2抗體均可起反應(yīng)。人與猴是近親,因此,人與猴的ES細(xì)胞都表達(dá) TRA分子,而嚙齒動物小鼠卻缺(見表19.2),推測TRA可能是靈長類多能胚胎干細(xì)胞特異性的分子標(biāo)記。

Oct-4是生殖系專一性轉(zhuǎn)錄因子,在小鼠胚胎發(fā)育早期、生殖細(xì)胞譜系以及體外培養(yǎng)的多能胚胎干細(xì)胞中特異地表達(dá),被認(rèn)為是全能和多能性的一種標(biāo)志基因。小鼠、豬和包括人類在內(nèi)的靈長類動物的ES和 EG細(xì)胞都表達(dá)Oct3 d更換培養(yǎng)液,50 d后,這種擬胚體發(fā)育成軟骨細(xì)胞,經(jīng)Alcian blue液染色,顯示出明確的軟骨細(xì)胞特征,細(xì)胞間存在著11型膠原。小鼠ES細(xì)胞經(jīng)過擬胚體階段,結(jié)合無血清和多種生長因子、有絲分裂原處理,可被誘導(dǎo)分化為分泌胰島素的、類似胰島的結(jié)構(gòu)。近來利用人ES細(xì)胞經(jīng)過懸浮培養(yǎng)獲得胚體,再經(jīng)如bFGF等生長因子誘導(dǎo)可分化為以產(chǎn)生胰島素為特征的胰島β樣細(xì)胞,為臨床糖尿病的細(xì)胞治療提供了β細(xì)胞來源打下基礎(chǔ)。

ES細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化為肝細(xì)胞已有少數(shù)幾篇報道。國內(nèi)蒯小玲等成功地用RA、肝細(xì)胞生長因子(HGF)、β-神經(jīng)生長因子(β-NGF)共同添加至細(xì)胞培養(yǎng)液,被誘導(dǎo)分化細(xì)胞從形態(tài)學(xué)、生化和肝細(xì)胞功能性標(biāo)記等指標(biāo)都證明是具有功能性的肝細(xì)胞。但僅使用RA,雖能分化為上皮樣細(xì)胞,可是并不表達(dá)各種肝功能的生化指標(biāo),例如,白蛋白、AFP、G-6-P、α1-AT、肝核因子-4和SAPK/ERK激酶-1(SEK1)等,表明 HGF和β-NGF是誘導(dǎo)小鼠ES細(xì)胞分化為功能性肝細(xì)胞的重要因子。在現(xiàn)階段,通過不同的誘導(dǎo)途徑可將ES細(xì)胞誘導(dǎo)成肝細(xì)胞。但體外誘導(dǎo),體內(nèi)誘導(dǎo)以及體內(nèi)外相結(jié)合的誘導(dǎo)分化,總的來看, ES細(xì)胞定向分化為肝細(xì)胞的分化率和在體內(nèi)與正常肝的嵌合率都還不高,這是一個急需解決的問題。

由于ES細(xì)胞易進(jìn)行遺傳操作,近年日本科學(xué)家Toyooka將標(biāo)記基因GFP或lacZ定點(diǎn)敲人(knock in)ES細(xì)胞Mvh基因(在生殖細(xì)胞分化中特異表達(dá)的基因)位點(diǎn),用以ES細(xì)胞體外分化期間追蹤生殖細(xì)胞的產(chǎn)生。體外ES細(xì)胞形成擬胚體時,出現(xiàn)Mvh陽性的生殖細(xì)胞,與分泌骨形態(tài)發(fā)生蛋白(BMP4)的細(xì)胞共培養(yǎng)下,可促進(jìn)這種Mvh陽性生殖細(xì)胞分化。將這種Mvh陽性生殖細(xì)胞接種人CD-1(ICR)裸鼠辜丸被膜下,可進(jìn)一步分化成熟為精子。同年早些時候,美國Hubner等人也報道了小鼠ES細(xì)胞在體外可發(fā)育為進(jìn)入減數(shù)分裂期的卵原細(xì)胞(oogonia),在體外觀察了卵子發(fā)生(oogenesis)過程。第三節(jié)成體干細(xì)胞

20世紀(jì)初, Pappenheim根據(jù)對骨髓中的造血細(xì)胞發(fā)生過程的形態(tài)學(xué)觀察,提出了骨髓中存在著未分化干細(xì)胞的設(shè)想,認(rèn)為未分化的干細(xì)胞通過各個中間階段的前體細(xì)胞最終生成成熟的多種類型血細(xì)胞。第一次提出了成體干細(xì)胞(adult stem cell)的概念。成體干細(xì)胞是指一群分布在成體組織中尚未分化的、具有自我更新潛能并負(fù)有構(gòu)建和補(bǔ)充某種組織的各種類型細(xì)胞的干細(xì)胞,故又名組織干細(xì)胞。實(shí)際上,成體組織中存在干細(xì)胞是個體發(fā)育進(jìn)化史的產(chǎn)物, 涉及組織器官的再生能力和創(chuàng)傷修復(fù)等基本特性。例如,骨髓組織的造血干細(xì)胞可分裂、分化為血液系統(tǒng)的各種細(xì)胞,定期補(bǔ)充細(xì)胞成分或失血。小腸和皮膚中的干細(xì)胞也分別能分化、補(bǔ)充和更新小腸和皮膚組織的一些細(xì)胞。傳統(tǒng)的觀點(diǎn)曾認(rèn)為,干細(xì)胞一旦分化成熟,就不再分裂增殖了;人體除了血液、皮膚、消化管上皮和肝臟的組織干細(xì)胞有一定的再生能力外,其他組織器官例如神經(jīng)組織基本上不再具有再生能力。同時也認(rèn)為在成體中存在的、屬于某組織器官的成體干細(xì)胞是專能或限能的,例如造血干細(xì)胞只能分化為血液系統(tǒng)的各種細(xì)胞等。但是,新近的研究表明,這些成體干細(xì)胞的發(fā)育潛能可跨越組織或胚層的界限。例如,從成年小鼠腦組織分離的神經(jīng)干細(xì)胞移植入經(jīng)X射線照射過的小鼠骨髓部位,則分化出血液細(xì)胞。此后,發(fā)現(xiàn)人和小鼠的神經(jīng)干細(xì)胞具有分化為肌細(xì)胞和胚胎多種組織細(xì)胞的潛能?？磥?神經(jīng)干細(xì)胞隨著微環(huán)境條件的改變,其分化潛能會有所變化。因此,神經(jīng)干細(xì)胞同樣具有可塑性,能分化為非神經(jīng)類型的細(xì)胞。人們把成體干細(xì)胞具有跨越組織或胚層分化的這一特性稱為干細(xì)胞的可塑性(plasticity)或跨越分化(transdifferentiation).這些新概念從根本上動搖了早先經(jīng)典的關(guān)于組織干細(xì)胞分化的胚層限制理論。成體干細(xì)胞分化的多能性表明：當(dāng)機(jī)體需要的時候,細(xì)胞的命運(yùn)不是一成不變的。成體干細(xì)胞可以“多向分化”的多潛能性的發(fā)現(xiàn),不僅從理論上改寫了“組織特異性干細(xì)胞只能向特定方向分化”的傳統(tǒng)概念,而且還為許多疾病的細(xì)胞治療提供了新的思路和有希望的前景。

目前,比較一致的看法是：成體干細(xì)胞是一種處于尚未終末分化的、處于干/祖或前體細(xì)胞狀態(tài)的成體細(xì)胞,它來源于成年和未成年個體的組織干細(xì)胞。在正常生理?xiàng)l件下,傾向于分化成并更新所在組織的各種細(xì)胞。但在特定的外界條件誘導(dǎo)下,一種組織的成體干細(xì)胞能超越該特定組織、胚層分化成其他組織的功能性細(xì)胞,補(bǔ)充參與其他組織損傷的修復(fù)等。

一、成體干細(xì)胞具分化可塑性

在成體干細(xì)胞的研究中,近年來最重要的發(fā)現(xiàn)是干細(xì)胞具有可塑性(plasticity)。證據(jù)大多數(shù)來自小鼠的實(shí)驗(yàn),人們確信機(jī)體中成體干細(xì)胞的可塑性現(xiàn)象具有普遍性。(一)骨髓干細(xì)胞

骨髓是由不同類型多種細(xì)胞成分組成的組織,除了分化的血細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞外,其中主要有二類成體干細(xì)胞：一類是造血干細(xì)胞(hematopoietic stem cell, HSC),能生成各種血細(xì)胞;另一類是間質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cell, MSC),能生成內(nèi)皮細(xì)胞、脂肪細(xì)胞和成纖維細(xì)胞等。一些實(shí)驗(yàn)室通過全骨髓移植實(shí)驗(yàn)證明,骨髓中的細(xì)胞在不同微環(huán)境的位點(diǎn),除了形成各種血細(xì)胞和衍生于間質(zhì)干細(xì)胞的各類細(xì)胞外,還可以被誘導(dǎo)分化為神經(jīng)細(xì)胞、肌細(xì)胞、骨和肝細(xì)胞等外、中、內(nèi)3個胚層的不同類型的分化細(xì)胞(表19.4)。證明骨髓組織中含有的干細(xì)胞具有多潛能性,在特定的條件下可跨越組織或胚層分化的能力,能夠分化為內(nèi)皮、神經(jīng)元、膠質(zhì)細(xì)胞和肝細(xì)胞等。

目前已知道骨髓中存在著造血干細(xì)胞(HSC)和間質(zhì)干細(xì)胞(MSC)兩類干細(xì)胞,為區(qū)別這兩類干細(xì)胞在分化潛能上的不同,便把骨髓干細(xì)胞分離和純化。體外培養(yǎng)的骨髓細(xì)胞,HSC細(xì)胞呈懸浮集落生長;而MSC細(xì)胞則貼壁生長,通過換液很容易把兩者分開。發(fā)現(xiàn)兩者也都具有多潛能性。

1.間質(zhì)干細(xì)胞

從骨髓組織分離的MSC細(xì)胞在體外單獨(dú)培養(yǎng)時,經(jīng)證明具有分化為包括骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、腱、脂肪細(xì)胞和肌細(xì)胞等潛能,也能分化成內(nèi)皮細(xì)胞和內(nèi)胚層的肝細(xì)胞。MSC細(xì)胞移植至腦中,可分化為非間質(zhì)細(xì)胞性質(zhì)的神經(jīng)細(xì)胞,特別是神經(jīng)元、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞。當(dāng)MSC細(xì)胞注射入早期囊胚,然后移植入假孕母鼠,分析嵌合體動物,發(fā)現(xiàn)MSC細(xì)胞可參與大多數(shù)(但不是所有)體細(xì)胞類型的分化;當(dāng)MSC細(xì)胞移植入正常宿主時,則除了肝、肺和腸的上皮外,主要分化為造血細(xì)胞的譜系世代。當(dāng)MSC細(xì)胞移植入小量射線照射的宿主,則造血系統(tǒng)和胃腸道組織有所增加。

2.造血干細(xì)胞

在成體干細(xì)胞中,HSC細(xì)胞是研究得最早和最多的一種異質(zhì)性很強(qiáng)的干細(xì)胞。由于已知HSC細(xì)胞表面存在著一些標(biāo)志,可用流式細(xì)胞儀或免疫磁性分選技術(shù)從骨髓細(xì)胞中分離和純化出HSC細(xì)胞。經(jīng)移植至不同的體內(nèi)微環(huán)境,可分化為三胚層的各種類型細(xì)胞,包括心肌、骨骼肌、血管內(nèi)皮系統(tǒng),肝細(xì)胞、肺泡、食管、腸道、胃、膽管以及皮膚和神經(jīng)細(xì)胞等。因此,骨髓中的HSC與MSC一樣,分化潛能具有很大的可塑性,可分化為跨越胚層的各種類型細(xì)胞。HSC細(xì)胞在體外培養(yǎng)時,發(fā)現(xiàn)血細(xì)胞系之間,即淋巴細(xì)胞系與髓性細(xì)胞系之間和系內(nèi)也存在分化方向的轉(zhuǎn)變。

(二)神經(jīng)干細(xì)胞

受經(jīng)典的造血發(fā)生和無脊椎動物神經(jīng)發(fā)育研究的啟示,發(fā)現(xiàn)了神經(jīng)干細(xì)胞。起初,把神經(jīng)發(fā)育過程中未成熟的、增殖中的各類細(xì)胞稱為神經(jīng)前體細(xì)胞(progenitor cell)。因此,神經(jīng)干細(xì)胞是神經(jīng)系統(tǒng)中一類能自我更新并產(chǎn)生神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的前體細(xì)胞。早期研究是從哺乳動物胚胎的中樞神經(jīng)系統(tǒng)和周圍神經(jīng)系統(tǒng)開始的,確證了胚胎的神經(jīng)系統(tǒng)中普遍存在著這類神經(jīng)干細(xì)胞。其后,進(jìn)行成體神經(jīng)干細(xì)胞分離,發(fā)現(xiàn)成體神經(jīng)干細(xì)胞主要存在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的2個神經(jīng)發(fā)生區(qū)域：即腦的海馬區(qū)(hippocampus)和次腦窒區(qū)(subventricular zone, SVZ)以及包括脊髓等其他一些非神經(jīng)性的區(qū)域。

總而言之,神經(jīng)干細(xì)胞或神經(jīng)前體細(xì)胞在個體發(fā)育過程中,經(jīng)受發(fā)育上的時空變化,成體神經(jīng)干細(xì)胞的可塑性受到限制。通過個體不同發(fā)育階段的神經(jīng)干細(xì)胞移植至宿主不同部位,可以發(fā)現(xiàn),神經(jīng)干細(xì)胞移植物分化為神經(jīng)細(xì)胞的潛能具有發(fā)育階段的依賴性,成體中的神經(jīng)干細(xì)胞分化潛能隨發(fā)育遂受到限制。用成體中樞神經(jīng)系統(tǒng)的干細(xì)胞經(jīng)體外培養(yǎng)擴(kuò)增的移植實(shí)驗(yàn)表明,其在成體微環(huán)境中尚有一定的可塑性。例如,成體脊髓衍生的干細(xì)胞通常不產(chǎn)生神經(jīng)元,若注人成體腦的海馬區(qū),則能產(chǎn)生神經(jīng)元;成年海馬衍生的干細(xì)胞移植入SVZ,則能產(chǎn)生嗅球神經(jīng)元。然而,至今卻沒有直接證據(jù)表明成體神經(jīng)干細(xì)胞分化為如在胚胎中正常產(chǎn)生的有突觸的神經(jīng)元。當(dāng)然,移植的神經(jīng)干細(xì)胞或神經(jīng)前體細(xì)胞在宿主不同部位也會受到所在微環(huán)境各種因素的相互影響;神經(jīng)干細(xì)胞經(jīng)體外不同方式處理后移植至宿主體內(nèi),也可能會改變其分化行為和表型。

倘若神經(jīng)干細(xì)胞分化潛能被限制,這些限制能否撤消?即成體干細(xì)胞能否重新獲得如在胚胎正常所產(chǎn)生各類細(xì)胞的能力?現(xiàn)有的研究資料表明,把體外培養(yǎng)的SVZ干細(xì)胞生長成神經(jīng)球通過注射入雞胚神經(jīng)嵴(neural crest)途徑,其分化潛能有所擴(kuò)大,可產(chǎn)生周圍神經(jīng)系統(tǒng)。另外,神經(jīng)干細(xì)胞的子代也有可能恢復(fù)發(fā)育多潛能性。例如,通常唯一產(chǎn)生神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的視神經(jīng)O2A中樞前體細(xì)胞在體外可恢復(fù)其多能的、產(chǎn)生中樞神經(jīng)系統(tǒng)的干細(xì)胞。表明環(huán)境因子能改變神經(jīng)干細(xì)胞的命運(yùn)或增加其可塑性。(三)肝干細(xì)胞

由于肝干細(xì)胞本身缺乏特異性標(biāo)志,給肝干細(xì)胞分離和鑒定帶來了困難。人們對肝干細(xì)胞存在與否一直有爭論,直到最近才得以確認(rèn)。早在1958年, Wilson JW等人認(rèn)為“肝組織中存在著干細(xì)胞”,其依據(jù)是肝組織因營養(yǎng)損傷或部分切除時仍能再生,但已存在的肝細(xì)胞不能分裂和再生,因而,新生的肝細(xì)胞只能來源于肝干細(xì)胞。肝癌發(fā)生的研究也支持了肝干細(xì)胞存在的假設(shè)。化學(xué)致癌實(shí)驗(yàn)時,位于門管周圍的小細(xì)胞發(fā)生增殖,這種具有卵圓形細(xì)胞核、少細(xì)胞質(zhì)的細(xì)胞稱為卵圓形細(xì)胞(oval cell)。在人的肝組織中,同樣發(fā)現(xiàn)這種卵圓形細(xì)胞。對發(fā)育中的肝具有自我更新能力的細(xì)胞進(jìn)行單克隆培養(yǎng)和分析,證明這種卵圓形細(xì)胞在體外能大量增殖,細(xì)胞移植后在形態(tài)和功能上可分別分化為肝細(xì)胞和膽管上皮細(xì)胞,表明肝卵圓形細(xì)胞是肝干細(xì)胞,具有分化為肝細(xì)胞和膽管上皮細(xì)胞的雙潛能性。近來發(fā)現(xiàn),骨髓和血液中的細(xì)胞能分化為肝細(xì)胞,因此,肝干細(xì)胞來源可能有兩條途徑：一是肝組織外的來源,近年越來越多的資料證明,骨髓和血液是卵圓形細(xì)胞的來源,人的骨髓細(xì)胞也能分化為肝細(xì)胞和膽管上皮細(xì)胞;二是肝組織內(nèi)處于休眠期的肝干細(xì)胞。雙潛能的肝干細(xì)胞同時表達(dá)肝細(xì)胞和膽上皮細(xì)胞的標(biāo)志物,細(xì)胞角蛋白CK7 和CK19為膽上皮細(xì)胞的特異性標(biāo)志;白蛋白和肝代謝酶細(xì)胞色素P450可作為肝細(xì)胞的特異性標(biāo)志物;而細(xì)胞角蛋白CK8和CK18在肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞和膽上皮細(xì)胞都有表達(dá)。角蛋白CK14可區(qū)分單層和復(fù)層上皮細(xì)胞。OV-6抗體是嚙齒類卵圓形細(xì)胞的特異性標(biāo)志物,但不是人肝干細(xì)胞的標(biāo)志,原因不清楚。肝干細(xì)胞一般除了其特有的形態(tài)學(xué)外,常結(jié)合上述特有標(biāo)志通過免疫組織化學(xué)、流式細(xì)胞檢測和原位雜交等方法予以鑒定。

雙潛能卵圓形細(xì)胞不僅能分化為肝細(xì)胞和膽管上皮細(xì)胞,當(dāng)分別移植到胰腺和十二指腸時,還能跨越組織各自分化為胰腺細(xì)胞和腸上皮細(xì)胞。表明肝干細(xì)胞在適當(dāng)?shù)奈h(huán)境能被誘導(dǎo)分化為仍是內(nèi)胚層其他組織的細(xì)胞。但還未見有跨胚層分化的直接例證。但是,利用胚胎的肝組織在體外培養(yǎng)則大量生成血細(xì)胞,但很難說明這些血細(xì)胞就是來自肝干細(xì)胞,很可能這些血細(xì)胞是來自胚胎肝組織中混雜的造血干細(xì)胞。卵圓形細(xì)胞異常分化或分化突然停止有可能發(fā)生肝細(xì)胞癌。國內(nèi)外曾有報道,在培養(yǎng)液添加適當(dāng)?shù)姆只T導(dǎo)劑,如丁酸鈉或二甲基亞砜,可誘導(dǎo)和促進(jìn)肝干細(xì)胞分化為肝細(xì)胞。在培養(yǎng)液中添加轉(zhuǎn)化生長因子β(TGFβ)或肝細(xì)胞生長因子(HGF),可誘導(dǎo)肝干細(xì)胞分化為膽管上皮細(xì)胞。因此,結(jié)合細(xì)胞分化誘導(dǎo)物等培養(yǎng)條件,有可能使肝干細(xì)胞定向分化為肝細(xì)胞或膽管上皮細(xì)胞。(四)骨骼肌干細(xì)胞 肌肉的生長、更新和修復(fù)是與肌纖維周圍的衛(wèi)星細(xì)胞(satellite cells)有關(guān),故一般認(rèn)為這就是骨骼肌干細(xì)胞。近年證明,從肌肉分離的干細(xì)胞不僅能分化出肌肉,還能產(chǎn)生血液細(xì)胞成分。Jiang等人從3天齡的新生小鼠前后肢近端分離和體外培養(yǎng)骨骼肌細(xì)胞,得到一類被稱為多能成年前體細(xì)胞(multipotent adult progenitor cells, MAPC)的細(xì)胞。這種細(xì)胞具有類似于小鼠骨髓MAPC的表型和特征,能在體外增殖。肌肉來源的MAPC在體外特定的細(xì)胞因子條件下可被誘導(dǎo)分化成內(nèi)皮、肝細(xì)胞樣細(xì)胞和包括進(jìn)一步分化為神經(jīng)元及神經(jīng)膠質(zhì)樣細(xì)胞的神經(jīng)外胚層細(xì)胞。表明骨骼肌組織中確實(shí)存在著干細(xì)胞,并具有分化的可塑性。

二、成體干細(xì)胞研究中的問題(一)異質(zhì)性

實(shí)際上,成體干細(xì)胞在組織中的所含數(shù)量極少,又缺乏特異性檢測標(biāo)志,很難從組織中將其分離純化出來。因此,在一些成體干細(xì)胞“可塑性”的實(shí)驗(yàn)中,人們質(zhì)疑所謂“可塑性”可能是組織中混雜著幾種或一群不同類型的干細(xì)胞而分化的結(jié)果,這在骨髓組織的干細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中更為明顯。在肝細(xì)胞譜系分化的各類祖細(xì)胞中,就發(fā)現(xiàn)存在著異質(zhì)性(heterogeneity)和可塑性。干細(xì)胞的異質(zhì)性在遺傳學(xué)中是指由于不同遺傳機(jī)制而產(chǎn)生相同或類似的表型。異質(zhì)性在某種程度上是干細(xì)胞固有的特性。造血干細(xì)胞異質(zhì)性早已被證明。從骨髓肌干細(xì)胞的研究中發(fā)現(xiàn),這類所謂的肌干細(xì)胞在特定環(huán)境下分別分化出肌肉和血細(xì)胞,其實(shí)這是由含有兩類分化方向完全不同的干細(xì)胞所致。這一實(shí)驗(yàn)結(jié)果使得成體干細(xì)胞“可塑性”理論受到質(zhì)疑和動搖。

人們也曾設(shè)想成體組織中存在著類似胚胎干細(xì)胞那樣的多能性干細(xì)胞。Zuk等人(2001)發(fā)現(xiàn),從人體脂肪組織來源的干細(xì)胞可分化為肌肉、骨和軟骨。但該作者指出不排除該組織中混入了諸如隨血流循環(huán)進(jìn)人脂肪組織的造血干細(xì)胞(HSC)或其他類型干細(xì)胞的可能性。因此,無法確證這類分化為肌肉、骨和軟骨的就是“脂肪干細(xì)胞”。也有人相信“來源于肌肉組織的多能干細(xì)胞”其實(shí)就是隨血液循環(huán)遷移或過客(itinerate)而停留在肌肉的造血干細(xì)胞。因?yàn)楫?dāng)這些細(xì)胞被移植入動物體內(nèi),在內(nèi)皮細(xì)胞生長因子等細(xì)胞因子的剌激下,會被重新激活而分化為血細(xì)胞。甚至估計(jì)小鼠體內(nèi)有100-400個HSC細(xì)胞處于這種狀態(tài)。目前還不能確定成體干細(xì)胞的可塑性是否因干細(xì)胞異質(zhì)性直接所致,因此,要明確一種干細(xì)胞與其組織來源及歸宿之間的確切關(guān)系,還得進(jìn)行大量的研究。(二)干細(xì)胞所處的環(huán)境

小鼠造血干細(xì)胞和胰腺干細(xì)胞都能分化出肝細(xì)胞并能修復(fù)小鼠受損的肝組織。但是,移植造血干細(xì)胞和胰腺干細(xì)胞對修復(fù)小鼠受損肝組織的效果遠(yuǎn)遠(yuǎn)不如移植成熟肝細(xì)胞本身。看來干細(xì)胞所處環(huán)境的信號對于細(xì)胞分化有重要影響。特殊穩(wěn)定的微環(huán)境可以控制造血干細(xì)胞生長和分化,這種微環(huán)境在早期被稱為壁鑫(niche)。現(xiàn)在微環(huán)境定義為能容納一個或多個干細(xì)胞并能控制其自我更新和分化的組織細(xì)胞和胞外基質(zhì)的組合。它是由各種調(diào)控活性成分組成的空間,細(xì)胞間保持的距離以及局部的近距離調(diào)控正適合于細(xì)胞間相互作用。從視網(wǎng)膜再生研究中發(fā)現(xiàn)一個很有趣的現(xiàn)象。將視網(wǎng)膜祖細(xì)胞分離出來在體外培養(yǎng)一些時間后,分化為視網(wǎng)膜感受器細(xì)胞。如果從小鼠眼中分離的干細(xì)胞移植入正常小鼠視網(wǎng)膜,它們將不能分化和被整合入正常視網(wǎng)膜;而當(dāng)移植入損傷的視網(wǎng)膜中,則分化為感受器細(xì)胞,并整合入該受損組織,盡管尚未確證這類整合入的細(xì)胞是否具有正常細(xì)胞的功能,但組織環(huán)境確實(shí)對干/祖細(xì)胞的命運(yùn)有決定性的作用;同時,也不可忽視干/祖細(xì)胞本身對所處環(huán)境信號的反應(yīng)能力。眾所周知,脊髓產(chǎn)生的運(yùn)動神經(jīng)元具有對來自各組織的信號具有反應(yīng)的能力;從鼠腦中獲取的神經(jīng)干細(xì)胞在體外因中斷了來自大腦的信號刺激,故在體外培養(yǎng)條件下,只能一過性地分化為多巴膠能神經(jīng)元,不能維持長久的多巴膠能神經(jīng)元的功能。因此,干細(xì)胞與所處的細(xì)胞環(huán)境之間精巧而默契的協(xié)調(diào)作用可能是干細(xì)胞“可塑性”的重要原因之一。(三)成體干細(xì)胞可塑性的調(diào)控

目前認(rèn)為,人們對成體干細(xì)胞“可塑性”現(xiàn)象的解說有4種：①機(jī)體中存在著多種來源和不同分化方向的成體干細(xì)胞群體,分別能定向地向各自的組織來源的細(xì)胞分化。②機(jī)體中存在著一種多潛能的成體干細(xì)胞,在不同的微環(huán)境信號的刺激下,可向不同組織的細(xì)胞方向分化。③某特定組織來源的成體干細(xì)胞,除了向該組織的細(xì)胞成分分化外,在特殊信號的剌激下,可重新編程(reprogramming),繼續(xù)分化為其他類型的細(xì)胞。④某種成體干細(xì)胞與特定組織來源的干細(xì)胞發(fā)生融合,成為具有來自2種細(xì)胞的遺傳物質(zhì),染色體數(shù)量也是正常2倍的“雜交細(xì)胞”。但使前者具有了后者的分化潛能,因此,成熟的干細(xì)胞也許無法變成不同類型的細(xì)胞,但它們可自動與現(xiàn)有的干細(xì)胞融合,形成其他組織類型的細(xì)胞。例如神經(jīng)干細(xì)胞與造血干細(xì)胞融合,從而“變性”為血液干細(xì)胞,分化為各類血細(xì)胞。

正如上所述,干細(xì)胞的“可塑性”一方面與其所處微環(huán)境密切相關(guān),即受到外源性因素調(diào)控;另一方面也受到成體干細(xì)胞本身對這類外來信號做出反應(yīng)的固有特性即內(nèi)源性因子調(diào)控。外源性因素通常指各種體液因子、鄰近同種或異種細(xì)胞的直接接觸、細(xì)胞外基質(zhì)等的作用。至今大多數(shù)干細(xì)胞的可塑性研究是基于組織損傷而造成的微環(huán)境,因而人們正把注意力集中在組織損傷后的微環(huán)境對干細(xì)胞的調(diào)控作用。

在內(nèi)源性調(diào)控機(jī)制中,一般認(rèn)為轉(zhuǎn)錄因子在其中起著重要的作用。細(xì)胞分化中,一個已明確定向分化程序的譜系特異性轉(zhuǎn)錄因子過表達(dá)會致使該譜系特異性轉(zhuǎn)錄因子功能發(fā)生頡頑作用,并使原有的基因程序活性保持沉默。這樣,這類細(xì)胞對微環(huán)境中特定細(xì)胞因子的反應(yīng)是分化成另一類新細(xì)胞。例如,在成肌細(xì)胞分化中,轉(zhuǎn)錄因子MyoD和Myf5起著調(diào)控成肌細(xì)胞調(diào)控因子(myogenic regulatory factor, MRF)網(wǎng)絡(luò)中的頡頑作用。在成纖維細(xì)胞中, MyoD的過表達(dá)可致使這類細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)槌杉〖?xì)胞,同時, Myf 5又抑制成肌細(xì)胞的分化活性。然而,在某些情況下,這一過程卻是可逆的。在轉(zhuǎn)基因C2C12細(xì)胞的肌管形成中,同源異形框基因的異位表達(dá)降低了成肌細(xì)胞調(diào)控因子MRF和MyoD表達(dá)水平,致使多核的肌管去分化而轉(zhuǎn)變成單核的細(xì)胞, 進(jìn)一步再分化為軟骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞等中胚層類型的細(xì)胞。(四)分化細(xì)胞的功能

目前成體干細(xì)胞包括“可塑性”的研究的結(jié)果大多數(shù)是基于檢測新生組織中終末分化細(xì)胞的特定蛋白或標(biāo)記的表達(dá),很少直接論及到終未分化細(xì)胞的生理功能。然而,有的不同類型的細(xì)胞卻具有相同的標(biāo)記, 例如,內(nèi)皮細(xì)胞與成熟血細(xì)胞亞群表面標(biāo)志都有CD31,甚至HSC表面也有CD31,因此,選用CD31作為進(jìn)行分析HSC能否分化為內(nèi)皮細(xì)胞時,顯然是不合適的。不少人對僅僅檢測到某種標(biāo)志就證明該細(xì)胞或組織具有正常細(xì)胞功能的做法常持有質(zhì)疑;特別是干細(xì)胞的異質(zhì)性和類型以及環(huán)境的復(fù)雜性使得人們對體外培養(yǎng)的干細(xì)胞移植入體內(nèi)能否發(fā)揮預(yù)期功能表示懷疑。確實(shí),目前在技術(shù)學(xué)上還無法適當(dāng)?shù)刈C明成體干細(xì)胞在所移植的組織或器官中產(chǎn)生出來的細(xì)胞具有功能性,例如,在研究帕金森氏病的動物實(shí)驗(yàn)中,體外培養(yǎng)的多巴膠能神經(jīng)元移植入腦內(nèi),可觀察到被整合入動物腦組織,但不能證明這些新的神經(jīng)元是否具有完整的功能。因此,欲要確定供體干細(xì)胞的終末分化狀態(tài)應(yīng)該包括細(xì)胞表面標(biāo)志鑒別和細(xì)胞功能確定這2方面因素。例如,神經(jīng)干細(xì)胞移植后，“可塑”為血細(xì)胞,既要鑒定出分化細(xì)胞具有血細(xì)胞的表面標(biāo)志,又要肯定使已接受致死輻射劑量照射過的受體小鼠存活并使造血功能恢復(fù)。只有這樣,才能完整地確定干細(xì)胞的分化細(xì)胞特性和功能。(五)體外增殖

成體干細(xì)胞從某一組織分離、純化后,目前,尚未有現(xiàn)成的能較長期在體外維持其未分化狀態(tài)并大量增殖的方法。因大多數(shù)成體干細(xì)胞研究是用于再生醫(yī)學(xué)作細(xì)胞治療的目的,常設(shè)計(jì)使用兩種手段:其一是將分離的成體干細(xì)胞直接移植入動物或患者的損害組織器官,以期在受損組織原位分化出該組織中成熟的功能性的細(xì)胞;其二是在體外將干細(xì)胞誘導(dǎo)分化為所需要的成熟細(xì)胞,而后將細(xì)胞移植入損害組織或器官。鑒于成體干細(xì)胞很難分離、純化和體外培養(yǎng),因而,目前這兩種手段都不能奏效。一個典型的例子是將燙傷患者的、含有皮膚干細(xì)胞的健康皮膚切取下來,進(jìn)行短暫體外培養(yǎng),再重新植回患者的皮膚損害部位,發(fā)現(xiàn)盡管皮膚可愈合,但不能產(chǎn)生汗腺和毛孔,無法行使正常功能。由于在體內(nèi)觀察組織行為極為困難,而且得到的結(jié)果不確定因素較多,因而,繼續(xù)探索成體干細(xì)胞體外培養(yǎng)和增殖的條件和方法,將是一項(xiàng)極為重要的課題。

第四節(jié)干細(xì)胞在再生醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用

干細(xì)胞(包括胚胎干細(xì)胞)生物學(xué)研究的最新進(jìn)展,使人們對干細(xì)胞獨(dú)特的生物學(xué)特性有新的了解。成體干細(xì)胞的“可塑性”或“跨越分化”潛能的發(fā)現(xiàn)具有重要的理論意義和應(yīng)用價值。不僅向傳統(tǒng)的細(xì)胞分化和細(xì)胞周期理論提出了挑戰(zhàn),而且成體干細(xì)胞在細(xì)胞生物學(xué)行為上與癌細(xì)胞很相似,成了研究癌癥發(fā)生機(jī)制新的生長點(diǎn)。在再生醫(yī)學(xué)中可望利用成體干細(xì)胞修復(fù)創(chuàng)傷、疾病的細(xì)胞治療并介入整形外科學(xué)和組織工程學(xué)等方面,其中除了神經(jīng)干細(xì)胞作為腦損害的細(xì)胞治療研究有較多的報道外,大部分工作集中在組織工程學(xué)領(lǐng)域,干細(xì)胞在生物和再生醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用主要有下列4方面。

一、哺乳類發(fā)育的體外模型

如前所述,體內(nèi)研究哺乳動物胚胎發(fā)育和各類細(xì)胞分化極為困難。干細(xì)胞,特別是ES細(xì)胞因其富具獨(dú)特的發(fā)育全能或多能性質(zhì),在嵌合體動物中,ES細(xì)胞又能參與個體發(fā)育,并產(chǎn)生包括生殖系在內(nèi)的各種類型細(xì)胞,表明ES細(xì)胞類似胚胎的ICM細(xì)胞,不僅具有完整的發(fā)育潛能性,而且也持有對調(diào)節(jié)正常發(fā)育所有信號的應(yīng)答能力。在特定的體外培養(yǎng)條件和誘導(dǎo)劑共同作用下,ES細(xì)胞在體外可被誘導(dǎo)分化屬于3個胚層譜系的各種高度分化的體細(xì)胞,例如神經(jīng)細(xì)胞、肌肉、血細(xì)胞、上皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞等。同時,在這些細(xì)胞分化過程中,必然先經(jīng)過一定的前體細(xì)胞階段。因此,ES細(xì)胞不僅是研究特定類型細(xì)胞分化的模型,而且也是研究某些前體細(xì)胞起源和細(xì)胞譜系演變較理想的實(shí)驗(yàn)體系?？赡蹺S細(xì)胞體外分化途徑和機(jī)制與在體胚胎的不完全相同,但在分子水平包括發(fā)育的遺傳程序仍有共同或相似之處。小鼠的卵受精后的卵裂期較長,約 3天才到達(dá)16細(xì)胞期,進(jìn)一步分裂,約在4.5 dpc時形成囊胚。這時胚胎出現(xiàn)第一次分化,產(chǎn)生以后參與胚外結(jié)構(gòu)的滋養(yǎng)外胚層和原始內(nèi)胚層。胚泡內(nèi)約由20個左右細(xì)胞組成內(nèi)細(xì)胞團(tuán)(ICM)。胚胎進(jìn)一步增殖和空腔化(cavitation),約在5.0 dpc時逐形成原始外胚層或上胚層(epiblast),后者在原腸期除了主要發(fā)育成胎兒本體的3個胚層組織外,還有部分細(xì)胞將來參與胚外中胚層的發(fā)育。懸浮生長的體外細(xì)胞擬胚體在結(jié)構(gòu)排列上與在體胚體的有些不同,但一些類型的細(xì)胞分化秩序和方式卻非常類似于在體的胚體。因此小鼠ES 細(xì)胞已被公認(rèn)為是研究哺乳類發(fā)育較理想的模型。人ES細(xì)胞建系后,一些國家的法律和道德倫理禁止用于人體胚胎研究。但近來認(rèn)識到,ES細(xì)胞本身缺乏胚外組織,不可能產(chǎn)生完整的胚胎。因此,許多國家在法律上禁止以克隆或復(fù)制人為目的的前提下,已允許將人ES細(xì)胞類似于小鼠ES細(xì)胞的體外實(shí)驗(yàn)?zāi)菢?用于研究人類胚胎在體內(nèi)所不能分析的發(fā)育、分化和調(diào)節(jié)信號等事件。這無疑將豐富、充實(shí)和完善人們對人類早期發(fā)育或畸胎發(fā)生等認(rèn)識。

二、介導(dǎo)改造動物的基因

ES細(xì)胞介導(dǎo)的轉(zhuǎn)基因優(yōu)點(diǎn)明顯超過常規(guī)如逆轉(zhuǎn)錄病毒載體整合至早期胚胎或顯微注射DNA至受精卵原核等一般轉(zhuǎn)基因方法,主要是因?yàn)樵诤笠煌緩街?導(dǎo)人的多拷貝DNA存在著隨意整合的問題,產(chǎn)生的轉(zhuǎn)基因動物效果一般不太理想。利用ES細(xì)胞技術(shù)學(xué)的優(yōu)點(diǎn)是在于產(chǎn)生一種新的經(jīng)生殖系傳遞的轉(zhuǎn)基因動物以前,可以通過在體外ES細(xì)胞系統(tǒng)中,研究和篩選外源DNA表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建、整合和表達(dá)。從而可提高產(chǎn)生轉(zhuǎn)基因動物的效率;同時,ES細(xì)胞在體外增殖迅速,可作為重組ES細(xì)胞取之不盡的來源;ES細(xì)胞的基因改造技術(shù),如剔除(knock out)、敲入(knock in)能夠精確地改造細(xì)胞內(nèi)存在的基因,克服位置效應(yīng)、插入失活和特殊內(nèi)源性基因失活等弊病。重組ES細(xì)胞的基因組經(jīng)生殖系傳遞途徑,可不斷地提供和產(chǎn)生同樣基因型的、豐富的轉(zhuǎn)基因動物的種子細(xì)胞來源。近年來,在制備轉(zhuǎn)基因動物出現(xiàn)了一個新的策略利用體外培養(yǎng)的體細(xì)胞經(jīng)外源基因轉(zhuǎn)染后,取其細(xì)胞核顯微注射至去核卵細(xì)胞,從而獲得轉(zhuǎn)基因動物,這一技術(shù)路線顯然比直接顯微注射DNA至去核卵細(xì)胞效果更好,特別是對那些至今還未建立ES細(xì)胞系但核移植已獲成功的那些動物。

三、人體的基因和細(xì)胞治療

干細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)和理論的發(fā)展,促使醫(yī)學(xué)產(chǎn)生了一門新的學(xué)科分支,即再生醫(yī)學(xué)(regenerative medicine)。它是一門探索人體組織和器官自身所具有的構(gòu)建、更新和修復(fù)的能力,并使用多種修復(fù)術(shù)手段使人體的組織器官功能得以改善或恢復(fù)新興學(xué)科。干細(xì)胞的基因和細(xì)胞治療則是再生醫(yī)學(xué)的重要組成部分之一。這里基因治療是指用遺傳改造過的人體細(xì)胞直接移植或輸入患者體內(nèi),達(dá)到控制和治愈疾病為目的的治療手段,又稱細(xì)胞治療。人ES細(xì)胞經(jīng)遺傳操作后一般能穩(wěn)定地在體外增殖傳代,克服了目前基因治療中需大量靶細(xì)胞來源的主要問題。

四、組織工程的種子細(xì)胞來源