第一篇：微生物檢驗員考核指標及方案

微生物檢驗員考核指標及方案

一、對公司所有物料、產品的微生物檢驗工作，并作好記錄。

二、對所有微生物檢驗用儀器、設備的維護保養(yǎng)與清潔，并做好記錄。

三、負責對生產潔凈車間和無菌室潔凈度的測定，并做好記錄，出具檢驗報告。

四、負責對留樣樣品穩(wěn)定性考查中的微生物檢驗。

五、協(xié)助相關部門對生產工藝驗證、設備驗證及質量管理提供微生物檢測數據。

六、負責菌種的保管、傳代、接種工作，并作好記錄；負責微生物檢驗的準備工作及培養(yǎng)基的配制。

七、及時完成各項檢驗任務，并于規(guī)定的工作日內出具報告。

八、做好上級領導分配的臨時性工作。

九、每月至少做到80－90個檢品的微生物檢驗。

十、在車間沒有那么多檢品時加強學習新技術和新的檢驗方法。

十一、保證產品檢驗成功率95﹪。

十二、做好每月一次做好無菌室清潔、消毒滅菌；

十三、做好每月一次做好準備室、空調室、培養(yǎng)室清潔維護工作；

十四、做好每周一次做好無菌服、工作服、鞋清洗、消毒滅菌；

第二篇：微生物檢驗員培訓資料

一.基礎知識

（一）微生物基礎知識

1.培養(yǎng)基

培養(yǎng)基是供微生物生長、繁殖、代謝的混合養(yǎng)料。由于微生物具有不同的營養(yǎng)類型，對營養(yǎng)物質的要求也各不相同，加之實驗和研究的目的不同，所以培養(yǎng)基的種類很多，使用的原料也各有差異，但從營養(yǎng)角度分析，培養(yǎng)基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、無機鹽、生長素以及水分等。另外，培養(yǎng)基還應具有適宜的pH值、一定的緩沖能力、一定的氧化還原電位及合適的滲透壓。

瓊脂是從石花菜等海藻中提取的膠體物質，是應用最廣的凝固劑。加瓊脂制成的培養(yǎng)基在98～100℃下融化，于45℃以下凝固。但多次反復融化，其凝固性降低。

任何一種培養(yǎng)基一經制成就應及時徹底滅菌，以備純培養(yǎng)用。一般培養(yǎng)基的滅菌采用高壓蒸汽滅菌。

（二）消毒與滅菌知識 5.2滅菌方法

滅菌是指殺死或消滅一定環(huán)境中的所有微生物，滅菌的方法分物理和化學滅菌法兩大類。本實驗主要介紹物理方法的一種，即加熱滅菌。

加熱滅菌包括濕熱和干熱滅菌兩種。通過加熱使菌體內蛋白質凝固變性，從而達到殺菌目的。蛋白質的凝固變性與其自身含水量有關，含水量越高，其凝固所需要的溫度越低。在同一溫度下，濕熱的殺菌效力比干熱大，因為在濕熱情況下，菌體吸收水分，使蛋白質易于凝固；同時濕熱的穿透力強，可增加滅菌效力。

（三）潔凈室行為規(guī)范

（四）實驗室安全知識

二.基本操作

（一）培養(yǎng)基配制、滅菌、使用和保藏

1.配制

1.1 按照培養(yǎng)基瓶簽所示，準確稱量一定培養(yǎng)基干粉于合適的容器，加純化水溶解。

1.2 根據培養(yǎng)基對pH的要求，用5%NaOH或5%HC1溶液調至所需pH。1.3 如需分裝，應先加熱攪拌，待培養(yǎng)基完全溶解并均一后進行。分裝時注意不要使培養(yǎng)基沾染在管口或瓶口，以免污染。液體分裝高度以試管高度的1/4左右為宜。固體分裝裝量為管高的1/5，半固體分裝試管一般以試管高度的1/3為宜；分裝三角瓶，其裝量以不超過三角瓶容積的一半為宜。

1.4 培養(yǎng)基經滅菌后，如需要作斜面固體培養(yǎng)基，則滅菌后立即擺放成斜面，斜面長度一般以不超過試管長度的1/2為宜；半固體培養(yǎng)基滅菌后，垂直冷凝成半固體深層瓊脂。

2.滅菌

2.1 按照培養(yǎng)基瓶簽所示的滅菌條件（溫度和時間）對配制好的培養(yǎng)基進行高壓滅菌。配制好的培養(yǎng)基應在2小時內進行滅菌。3.保藏和使用 3.1 液體培養(yǎng)基管

置專用不銹鋼筒內，2～25℃避光保存，3周內使用。在不銹鋼筒貼標簽，標明培養(yǎng)基名稱、培養(yǎng)基配制日期、高壓滅菌編號等信息。不同批次培養(yǎng)基不得置于同一不銹鋼筒內。3.2平板和接觸皿

置專用不銹鋼筒，標明培養(yǎng)基名稱、制備日期、培養(yǎng)基的滅菌編號，用保鮮膜密封筒口后，2～25℃避光保存，3周內使用。不同批次平板和接觸皿不得置于同一容器內。

3.3 培養(yǎng)基使用之前應預培養(yǎng)，合格后方可使用。

營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基：25-35℃，預培養(yǎng)3天。硫乙醇酸鹽液體培養(yǎng)基：25-35℃，預培養(yǎng)2天。

虎紅瓊脂培養(yǎng)基和改良馬丁培養(yǎng)基：23-28℃，預培養(yǎng)3天。

（二）消毒劑配制和使用

1.0.1%新潔爾滅溶液的配制和使用

1.1基準處方：5%新潔爾滅溶液20ml ＋

注射用水980ml 1.2 作為手部和衣服浸泡消毒，設備、操作臺面和潔凈室六面擦洗消毒以及地漏消毒用，有效期為3個月。2.75%酒精的配制與使用

2.1 基準處方：95%乙醇790 ml ＋ 純化水210 ml 2.2 作為消毒雙手（手套），擦洗設備、操作臺等表面消毒劑，有效期為14天。

3.2%來蘇兒（甲酚皂）溶液的配制和使用

3.1 基準處方：50%來蘇兒（甲酚皂）溶液40 ml ＋ 純化水960 ml 3.2 拖擦地面用，臨用前配制。4.甲醛熏蒸 作為環(huán)境空氣和表面消毒劑。

操作步驟：關閉風機→無關人員撤出消毒區(qū)，操作人員戴防護手套和防毒面具→將設備及器具暴露于空氣中→將盛有甲醛溶液的不銹鋼飯盒置不銹鋼臺面→上層飯盒倒入需要體積的甲醛（10ml/m3，每只飯盒不得多于250ml），下層飯盒倒入300ml 95%或無水乙醇→點燃下層飯盒內乙醇，操作人員迅速離開→保留被消毒空間的甲醛氣體至少8小時→消毒結束后，開啟風機，直至消毒空間無甲醛刺激性氣味，方可進入工作。

5.臭氧消毒

5.1 作為環(huán)境空氣和表面消毒劑。

5.2 操作步驟：關閉風機→無關人員撤出消毒區(qū)，操作人員戴防護手套和防毒面具→將設備及器具暴露于空氣中→設定消毒時間，開啟臭氧法生器面→操作人員迅速離開→保留被消毒空間的臭氧氣體至少8小時→消毒結束后，開啟風機，直至消毒空間無臭氧氣味，方可進入工作。6.消毒劑交替使用

6.1 隔周交替使用0.1%新潔爾滅溶液和75%酒精進行手部消毒。6.2 隔周交替使用0.1%新潔爾滅溶液和2%來蘇爾溶液拖擦地面。6.3 潔凈區(qū)每月對空氣消毒一次，甲醛消毒6個月一次，其余時間采用臭氧消毒。

（三）微生物室設備與設施

1.高壓滅菌器

1.1原理：高壓蒸汽滅菌是將待滅菌的物品放在一個密閉的加壓滅菌鍋內，通過加熱，使滅菌鍋隔套間的水沸騰而產生蒸汽,待水蒸汽急劇地將鍋內的冷空氣從排氣閥中驅盡，然后關閉排氣閥，繼續(xù)加熱，此時由于蒸汽不能溢出，而增加了滅菌器內的壓力，從而使沸點增高，得到高于100℃的溫度。導致菌體蛋白質凝固變性而達到滅菌的目的。1.2 操作步驟：向高壓滅菌器滅菌艙內加水至排泄管口高度→放入待滅菌物品，關閉滅菌器蓋→開啟電源，設置滅菌溫度和時間以及排氣溫度→按start鍵開始滅菌（依次經歷：升溫—排氣—升壓—保壓—降壓—排氣—降溫）→滅菌結束后，取出滅菌物品，關閉電源→清潔滅菌艙。1.3 注意事項

待滅菌物品間應留適宜間隙，便于蒸汽穿透。

當溫度在80℃以上時，蓋將不會被打開；當溫度低于60℃時，即可開蓋。每次滅菌前應保持滅菌艙內水位在規(guī)定線以上。

干熱滅菌法常用于空玻璃器皿、金屬器具的滅菌。凡帶有膠皮的物品，液體及固體培養(yǎng)基等都不能用此法滅菌。

5.2.2.2干燥箱滅菌

將包扎好的物品放入干燥烘箱內，注意不要擺放太密，以免妨礙空氣流通；不得使器皿與烘箱的內層底板直接接觸。將烘箱的溫度升至160～170℃并恒溫1～2h，注意勿使溫度過高，超過170℃，器皿外包裹的紙張、棉花會被烤焦燃燒。如果是為了烤干玻璃器皿，溫度為120℃持續(xù)30分鐘即可。溫度降至60～70℃時方可打開箱門，取出物品，否則玻璃器皿會因驟冷而爆裂。

用此法滅菌時，絕不能用油、蠟紙包扎物品。

5.2.2.3火焰滅菌

直接用火焰灼燒滅菌，迅速徹底。對于接種環(huán)，接種針或其它金屬用具，可直接在酒精燈火焰上燒至紅熱進行滅菌。此外，在接種過程中，試管或三角瓶口，也采用通過火焰而達到滅菌的目的。

2.烘箱（干熱滅菌）

2.1 原理：通過使用干熱空氣殺滅微生物。一般是把待滅菌的物品放入電烘箱中烘烤，加熱至160～170℃維持2h（除熱原要求250℃維持1h）。2.2 操作步驟：將待滅菌物品正確包扎與加塞，以免滅菌后被外界污染→將包扎好的物品放入干燥烘箱內→ 3.超凈工作臺 4.培養(yǎng)箱 5.集菌儀 6.傳遞窗 7.潔凈室

（四）平板和接觸皿制備

將需倒平板的培養(yǎng)基，于水浴鍋中冷卻到45～50℃,立刻倒平板。

（五）微生物數量測定

三.檢驗項目

（一）微生物限度檢查

（二）無菌檢查

（三）環(huán)境監(jiān)控檢查

（四）模擬灌裝檢查

（五）培養(yǎng)基靈敏度檢查

（六）菌株傳代與保藏

四.其它

（一）微生物形態(tài)觀察（菌落形態(tài)、染色與鏡檢）

（二）微生物分離純化培養(yǎng)

（三）API法鑒定微生物

（四）PCR法鑒定微生物

7思考

7.1制備培養(yǎng)基的一般程序是什么？

7.2做過本次實驗后，你認為在制備培養(yǎng)基時要注意些什么問題？

7.3滅菌在微生物學實驗操作中有何重要意義？

4試述高壓蒸汽滅菌的操作方法和原理。

5高壓蒸汽滅菌時應注意哪些事項？

標準菌種的保藏形式

我國提供的標準菌種通常是以凍干粉的形式包裝于熔封的厚玻璃容器中。在這種容器中，微生物通常與賦形劑共存，由于缺乏生長必須的環(huán)境條件，一般呈休眠狀態(tài)。

純培養(yǎng)

所謂微生物的純培養(yǎng)是指在一個微生物的菌落形成單位中，所有的微生物細胞或孢子都屬于生物學的同一個種。嚴格地說，純培養(yǎng)是在培養(yǎng)基上由一個細胞或孢子分裂、繁殖而產生的后代。在該細胞或孢子的生長過程種，不受其他微生物的侵犯，不會在培養(yǎng)物中產生另外微生物種的后代，在整個生長過程中不發(fā)生變異或死亡。獲取純培養(yǎng)的工作環(huán)境

1、潔凈工作室：環(huán)境潔凈度10000級下的局部100級的單向流空氣區(qū)域內，全過程必須無菌操作，防止微生物污染。

2、無菌隔離艙 獲取純培養(yǎng)的接種工具

1、接種環(huán)

2、接種針

3、接種鏟

4、接種鉤

5、其他玻璃器械 獲取純培養(yǎng)的其他器具

1、玻璃器皿：如各種規(guī)格培養(yǎng)皿。

2、微生物實驗室常用的設備，如高壓滅菌鍋、恒溫培養(yǎng)箱等 獲取純培養(yǎng)的主要技術－移植（又稱接種）

微生物的移植（或稱接種）是指將微生物接種在培養(yǎng)基上的操作。移植（又稱接種）的兩種方式－劃線 和穿刺

1、劃線法是指用接種工具將微生物細胞移植在固體培養(yǎng)基斜面或平板上的一種方法。

2、穿刺法是指用接種工具將微生物細胞移植到固體或半固體培養(yǎng)基內的一種方法。影響集菌培養(yǎng)效果的若干因素

?溫度 ?滲透壓 ?氧氣 ?光 ?pH值和氧化還原電位

?培養(yǎng)基 ?抗生素

驗證純培養(yǎng)的主要依據

1、用顯微鏡觀察時，全部的生物個體是相似的，如果是細菌，對革蘭氏染色反應應當是一致的。

2、將培養(yǎng)物制成懸液，重新傾注平板，或平板劃線培養(yǎng)后，所形成的全部菌落的形態(tài)應該是相似的。如果是細菌，將重新形成的菌落各作穿刺培養(yǎng)，其培養(yǎng)特征應當是一致的。

3、從重新分離的各菌落作生理特征觀測時，如對氮源的利用，對糖類的發(fā)酵或同化以及其他生理生化的測定，應呈現出一致性。定期移植保藏法

一般步驟為：將菌種接種在所要求的培養(yǎng)基上，置最適溫度下集菌培養(yǎng)。得到健壯的菌體（如有性孢子、無性孢子或細胞等）后，放于溫度較低、干燥處保藏，并且每隔一定時間重新移植培養(yǎng)一次。定期移植保藏法

1、細菌置4～6℃保藏，芽孢桿菌每3～6個月移植一次，其他細菌每月移植一次。

2、放線菌于4～6℃保藏，每3個月移植一次。

3、酵母菌于4～6℃保藏，每4～6個月移植一次。

4、絲狀真菌于4～6℃保藏，每3個月移植一次。

5、擔子菌于4～6℃保藏，每3個月移植一次。

6、保藏的濕度通常在50％～70％為宜。定期移植保藏法

1、需定期檢查

2、移植進行時，應仔細核對

3、集菌培養(yǎng)完成后，應比較培養(yǎng)特征

4、應注意觀察各代之間的變化 瓊脂斜面低溫保藏法

1、菌種的典型菌落接種至斜面，規(guī)定的溫度和時間培養(yǎng)，充分生長，硅膠塞換成無菌橡膠塞。4～6 ℃冰箱保藏

a:1～3個月移植一次，繼續(xù)保藏。

b:用半固體高層培養(yǎng)基穿刺培養(yǎng)，可保藏半年至一年。瓊脂斜面低溫保藏法

?適用細菌、霉菌、酵母菌及放線菌保藏 ?優(yōu)點：簡便、大多數微生物適用

?缺點：保藏期短；傳代次數多；容易發(fā)生變異及污染。

?生孢梭菌用硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基、乙型溶血性鏈球菌及肺炎球菌用血肉湯（瓊脂）培養(yǎng)基

液體石蠟保藏法

一般步驟為：準備液體石蠟并滅菌去水備用。獲得需要保藏菌種的純培養(yǎng)，將液體石蠟注入培養(yǎng)容器中，并完全覆蓋培養(yǎng)基。

液體石蠟液面以高出培養(yǎng)基上端0.5～1cm為宜 4～6 ℃冰箱保藏

液體石蠟保藏法 甘油冷凍保藏法

?將保藏菌種接種瓊脂斜面上，適宜溫度下培養(yǎng)適宜時間，用無菌接種環(huán)輕輕刮取菌苔，并通過接種環(huán)與試管壁之間的輕輕摩擦使菌種充分擴散到無菌水中，調證菌液濃度，向已制備好的菌懸液加入等體積的20％無菌甘油，輕輕振試管管，使內容物充分混合，分裝于無菌小管。甘油冷凍管最好在-30 ℃貯存。沙管保藏法 ?制備沙管 ?培養(yǎng)接種 ?制備菌懸液 ?混菌 ?干燥 ?保藏

?適合保藏芽孢桿菌、梭菌、放線菌和一些絲狀真菌。

土壤保藏法

?用土壤替代沙管保藏法中的河沙，其余操作與沙管保藏法相同 ?適合保藏土壤細菌、放線菌和絲狀真菌，時間為

2～6年。

硅膠保藏法

?用硅膠替代沙管保藏法中的河沙，其余操作與沙管保藏法相同 ?適合保藏酵母菌和某些絲狀真菌

濾紙保藏法

?保藏微生物細胞或孢子的載體為濾紙。

?對細菌、酵母菌、絲狀真菌等都有一定的效果，有些菌種最長可達

17年明膠片保藏法

?制備無菌營養(yǎng)明膠 ?制備無菌石蠟濾紙

?微生物培養(yǎng)并制成濃厚的懸液 ?在懸液中加入營養(yǎng)明膠

?將含微生物細胞或孢子的營養(yǎng)明膠滴于石蠟濾紙表面 ?干燥

?將形成的明膠片密封保藏

麩皮保藏法

?我國歷史悠久的微生物保藏法

?適于保藏根霉、曲霉、青霉、紅曲霉等屬和赤霉菌

梭氏真空干燥保藏法

?在小試管中放置菌懸液

。?小試管在大試管中放置 ?大試管在真空狀態(tài)下干燥 ?密封大試管

液體直接干燥保藏法

?需要加入保護劑 ?干燥之前不需凍結

?在干燥過程中為增大蒸發(fā)面積，可加入多孔材料 ?干燥后的容器應熔封

蒸餾水保藏法

?最為簡便的微生物保藏法

?微生物細胞或孢子保藏在蒸餾水中 ?保藏的容器應密封

?適于保藏棒狀桿菌、土壤桿菌和假單孢菌等

液氮冰箱超低溫保藏法

?需專用設備－液氮超低溫冰箱 ?菌懸液密封于安瓿管內，控速凍結 ?國外已普遍采用 ?保藏時間長

凍結真空干燥保藏法

?歷史悠久，又稱凍干法

?不產生孢子只產生菌絲體的絲狀真菌不宜采用該法 ?適用面廣 ?保藏時間可達10年以上

?多為菌種保藏機構采用

凍結真空干燥保藏法

?密封性好，可避免保藏期間的污染 ?保藏容器體積小，方便攜帶和貯藏 ?保藏時間更長，變異概率更低

普通微生物實驗室適用的保藏技術

?瓊脂斜面低溫保藏法 液體石蠟保藏法 低溫冷凍保藏法 甘油冷凍保藏法 ???

瓊脂斜面低溫保藏法

?細菌置4～6℃保藏，芽孢桿菌每3～6個月移植一次，其他細菌每月移植一次。4～6℃保藏，每3個月移植一次。4～6℃保藏，每4～6個月移植一次。4～6℃保藏，每4個月移植一次。?放線菌于?酵母菌于?絲狀真菌于?擔子菌于4～6℃保藏，每3個月移植一次。

50％～70％為宜。?保藏的濕度通常在菌種保藏的一般規(guī)定

1、菌種“代”的確定：2005版藥典規(guī)定，以干燥菌種管為第“0”代，由此得到的第一批子代為第一代，以此類推。

2、菌種傳代次數規(guī)定：2005版藥典規(guī)定不超過5代。

3、菌種應專人保藏、專柜貯藏，認真做好登記，統(tǒng)一編號，按期傳代，并做好有關檢驗記錄。

4、保存菌種傳代或凍干均應填寫專用記錄，菌種管上應有標簽，表明菌種編號、代次、批號、日期。

5、過期菌種應及時處理、登記，經121 ℃30分鐘滅菌消毒。實驗室菌種傳代操作步驟

?

1、接種前用1：1000新潔爾滅擦拭工作臺面，然后開紫外燈消毒30分鐘。

2、自冰箱取出保存工作用菌種，室溫放置20分鐘；溫度平衡后才能傳代。

3、實驗人員進入緩沖間，換鞋、穿無菌衣、戴口罩，用1：1000新潔爾滅溶液??消毒雙手，并將培養(yǎng)基及菌種移入陽性菌接種室。

?

4、點燃酒精燈，將菌種管塞子，通過火焰轉動使稍稍松動，以免接種時粘著打不開。

?

5、接種操作：左手拿住菌種管，將管口靠近火焰旁，右手拿接種棒，將白金耳燒紅約30秒，桿部通過火焰滅菌。挑取少量菌苔；另取，照上述方法在火焰旁打開塞子，將白金耳伸入管內斜面培養(yǎng)基的底部，從下到上將白金耳輕貼斜面培養(yǎng)基的表面作曲折移動。

?

5、接種后，將斜面置規(guī)定溫度、時間培養(yǎng)。取出觀察，菌種生長良好，換橡皮塞，貼上標簽，放入冰箱保存。

?

6、細菌一個月傳代一次，枯草芽孢桿菌、短小芽孢桿菌、生孢梭菌、白色念珠菌、黑曲霉可三個月傳代一次。菌種管理

?

1、標準菌種必須從認可的菌種收集途經獲得；實驗室必須建立和保存所有菌種的收集、貯藏、保存、確認試驗的記錄。

?

2、實驗室應有文件管理標準菌種（從原始菌種到工作用菌種）。該程序應包括：

a:標準菌種必須定期傳代，并做確認試驗，包括實驗室在所需要關鍵診斷指標，實驗室必須記錄并保存。

b：每一子菌種都應以適當標簽、標記來表示名稱、標準號、接種日期和傳代日期。

C:每一子菌種都應以標記從原始菌種傳代到工作用菌種的代數；記錄菌種生長的培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件；菌種生存條件等。過期菌種處理

?過期菌種應及時清理、登記，并經

℃、30分鐘高壓消毒滅菌。

例1：金黃色葡萄球菌傳代保藏技術

?

1、購置金黃色葡萄球菌（如我所提供的菌種為第二代菌種），假定購置日期為5月21日。

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2、準備10支營養(yǎng)瓊脂斜面，其中2支用于保藏，其余8支用于當月實驗。

3、于5月22日打開菌種管，接種菌種至上述10支斜面，35 ℃培養(yǎng)16～18小時。

?

4、將10支第三代菌種管做好標簽，置適宜溫度保藏。???5、5月22日至6月22日，可以使用上述第三代菌種管。

6、至6月22日，重復步驟2，得第四代菌種管。

7、至8月22日前，重新購置原種管。

例2：黑曲霉的傳代技術

?

1、制備孢子懸液：取滅菌水或生理鹽水

3～5ml，分2～3次小心滴加至菌種管內（試管斜面），反復振搖。傾取孢子懸液置另一滅菌試管。

?

2、涂布接種：用滅菌滴管吸取懸液滴加至改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基斜面，每管滴加2～3滴，轉動試管，使懸液與斜面表面充分接觸 菌種確認試驗

?包括以下幾個方面：

1、菌落生長情況：目測

2、染色鏡檢：

3、生化試驗；(1)糖醇代謝試驗

（2）氨基酸和蛋白質代謝試驗

（3）碳源和氮源利用試驗

（4）酶類試驗

（5）其他試驗 短小芽孢桿菌

確認該菌未發(fā)生變異的主要方法為：

1、通過顯微鑒別，為不呈鏈狀排列的桿菌，革蘭氏染色為陽性。

2、營養(yǎng)瓊脂斜面上菌苔光滑，薄，閃光，蔓延，不粘著，常常是淺黃色。

3、生化試驗可選做明膠穿刺、淀粉水解和硝酸鹽還原，結果為明膠緩慢液化，淀粉水解陰性，硝酸鹽還原陰性。

枯草芽孢桿菌

確認該菌未發(fā)生變異的主要方法為：

1、通過顯微鑒別，為呈鏈狀排列的桿菌，不形成莢膜，革蘭氏染色為陽性。

2、營養(yǎng)瓊脂斜面上菌苔生長豐厚，粗糙，不透明，不閃光，蠟質，蔓延，奶油色至微褐色。

3、生化試驗可選做明膠穿刺、淀粉水解和硝酸鹽還原，結果明膠呈漏斗形至層狀液化，淀粉水解陽性，硝酸鹽還原陽性。大腸埃希菌

確認該菌未發(fā)生變異的主要方法為：

1、通過顯微鑒別，為成對和呈短鏈排列的近球形的桿菌，一般不形成莢膜，革蘭氏染色為陰性。

2、營養(yǎng)瓊脂斜面上菌苔通常白色，有時帶黃白色，濕潤，閃光，蔓延生長。

3、生化試驗可選做明膠穿刺和靛基質試驗、甲基紅試驗、V.P.試驗和檸檬酸鹽利用試驗，結果不液化明膠，靛基質試驗和甲基紅試驗陽性，V.P.和檸檬酸鹽利用試驗陰性。大腸埃希菌

該菌為微生物限度檢查規(guī)定不得檢出的控制菌，有一整套完整的鑒定手段，也可參考該方法用于判斷所保藏的菌種有無發(fā)生變異。

該鑒定方法主要內容即為經典的IMViC試驗，結果為++--。

銅綠假單孢菌

確認該菌未發(fā)生變異的主要方法為：

1、通過顯微鑒別，為單個，成對或呈短鏈排列的桿菌，有運動性，革蘭氏染色為陰性。

2、營養(yǎng)瓊脂斜面上菌苔生長旺盛，薄，白色，閃光，培養(yǎng)基變?yōu)榫G色至暗褐色或黑色，發(fā)熒光。

3、生化試驗可選做明膠穿刺、吲哚和硝酸鹽還原試驗，結果迅速液化明膠，液體呈淺黃綠色或淺藍綠色，吲哚試驗陰性，硝酸鹽還原試驗陽性。

銅綠假單孢菌

該菌為微生物限度檢查規(guī)定不得檢出的控制菌，可利用氧化酶試驗和綠膿菌素試驗迅速判斷所保藏的菌種有無發(fā)生變異。乙型副傷寒沙門菌

確認該菌未發(fā)生變異的主要方法為：

1、通過顯微鑒別，為單個出現的桿菌，有運動性，革蘭氏染色為陰性。

2、營養(yǎng)瓊脂斜面上菌苔淺灰色，濕潤，光滑，半透明。

3、生化試驗可選做明膠穿刺、吲哚、硫化氫和硝酸鹽還原試驗，結果不液化明膠，吲哚試驗陰性，硫化氫陽性，硝酸鹽還原試驗陽性。

乙型副傷寒沙門菌

該菌為微生物限度檢查規(guī)定不得檢出的控制菌，可利用三糖鐵瓊脂斜面和血清試驗迅速判斷所保藏的菌種有無發(fā)生變異。藤黃微球菌

確認該菌未發(fā)生變異的主要方法為：

1、通過顯微鑒別，為呈堆團排列的球菌，革蘭氏染色為陽性。

2、營養(yǎng)瓊脂斜面上菌苔硫黃色到酪黃色，光滑，軟。

3、生化試驗可選做明膠穿刺、硫化氫和硝酸鹽還原試驗，結果緩慢液化明膠成漏斗形，硫化氫陽性，硝酸鹽還原試驗陽性。

金黃色葡萄球菌

確認該菌未發(fā)生變異的主要方法為：

1、通過顯微鑒別，為單個或成對呈短鏈和不規(guī)則堆團狀排列的球菌，革蘭氏染色為陽性。

2、營養(yǎng)瓊脂斜面上菌苔生長茂盛，半透明，光滑，平坦，濕潤，白色至淺黃色或橙色。

3、生化試驗可選做明膠穿刺、硝酸鹽還原和過氧化氫酶試驗，結果明膠呈囊狀液化，硝酸鹽還原試驗陽性，過氧化氫酶試驗陽性。金黃色葡萄球菌

該菌為微生物限度檢查規(guī)定不得檢出的控制菌，可利用血漿凝固酶試驗迅速判斷所保藏的菌種有無發(fā)生變異。生孢梭菌

確認該菌未發(fā)生變異的主要方法為：

1、通過顯微鑒別，菌體粗大單獨存在或呈短鏈排列，芽孢比菌體寬，芽孢呈梭形，革蘭氏染色為陽性。

2、過氧化氫酶試驗陽性。白色念珠菌

確認該菌未發(fā)生變異的主要方法為：

1、通過顯微鑒別，可見卵形細胞，有多邊芽殖現象，有假菌絲。

2、改良馬丁瓊脂斜面上菌苔生長茂盛，光滑，濕潤，菌落呈乳白色。黑曲霉

確認該菌未發(fā)生變異的主要方法為：

1、通過顯微鑒別，可見分隔菌絲體，分生孢子穗球形，黑色。

2、改良馬丁瓊脂斜面上菌苔呈黑褐色厚絨狀，色澤均一，無雜色，菌落呈黑色。

第三篇：微生物檢驗員崗位職責

1.負責微生物限度檢驗并出具檢驗報告。

2.負責包裝材料質量檢査并出具檢驗報告。

3.負責工藝用水監(jiān)測、潔凈度監(jiān)控。

4.負責衛(wèi)檢室現場管理。

5.負責相關崗位操作規(guī)程等文件的起草。

6.完成主管臨時交辦的工作。

第四篇：檢驗員的考核方案

檢驗員的考核方案

1.目的：

1.1 為了保證來料、生產過程、最終產品的質量，對各過程的質量進行有效

控制，制定本考核方案。

2.適用范圍：

適用于公司的所有質量檢驗人員。

3.職責：

本制度由質量部編制，并由質量經理或主管組織考評；

人事行政部負責執(zhí)行考評結果；

總經理負責審批。

4.檢驗員的組成：

質量部的檢驗員包括進廠檢驗（IQC）、過程檢驗（IPQC）、最終檢驗

（FQC）。

5.考核方法

考核指標及權重比：安全（10%）、工作態(tài)度（20%）、工作任務（20%）、工作質量（20%）、出勤率（10%）、顧客滿意度（20%）

考核標準：滿分100分

安全性（10分）：

考核目標：安全性目標為0；

考核方法：每發(fā)生一次違紀事件減5分，發(fā)生安全事故或安全事故隱患該項為0分。

工作態(tài)度（20分）：

考核目標：工作努力認真，做事積極勤快，責任感強，與本部門同事和相關部門溝通配合良好；周會、晨會正常進行，并按照計劃實施；

考核方法：工作態(tài)度不符要求一次減5分；每周沒有召開例會，減5分；沒有召開晨會，減2分；每月計劃完成率減少10%，降低2分，少于60% 0分。工作任務（20分）：

考核目標：按時按量按要求完成；

考核方法：未完成部門安排的工作一次減5分；直至該項為0分。

工作質量（20分）：

考核目標：（客戶退貨、各種檢查結果以及現場問題的報告和控制等）；考核方法：每發(fā)生一起錯檢或漏檢，減5分；每周沒有信息的及時反饋或溝通減5分；檢驗或各項報告不及時和不正確減5分，直至該項為0分。

出勤率（10分）：

考核目標：每月出勤率要求達到96%；

考核方法：出勤率未達96%時，每降低一個百分點減2分，直至該項為0分。顧客滿意度（20分）

考核目標：內部顧客投訴為0，外部顧客投訴為1；

考核方法：因工作態(tài)度造成內部顧客投訴每起發(fā)生減5分，直至該項為0分；外部顧客投訴超出本月目標后，每起發(fā)生減5分，直至該項為0分。

強調每月檢驗員的考核需結合質量人員的工作技能評估結果作參考，最終由質量部主管或經理組織考評，人事執(zhí)行考評結果，總經理負責審批。

6.相關處罰的規(guī)定

進廠檢驗：在生產使用過程中，發(fā)現物料出現異常質量問題，而且此異常問題是檢驗規(guī)范中要求的，實際未檢測到或漏檢的，由部門經理及總經理酌情給予XX～XXX元的處罰，同時由質量工程師和檢驗組共同制定糾正和預防措施。

過程檢驗：在成品檢驗過程中，發(fā)現因質量異常而批量返工的，其異常原因是規(guī)范中明確規(guī)定而實際又超出本目標的，由部門經理和總經理酌情給予XX～XXX元的處罰，同時由質量工程師和檢驗組共同制定糾正和預防措施。

最終檢驗：經證實屬于最終檢驗責任（檢驗規(guī)范中規(guī)定的，我們也能夠檢測到的產品要求，實際未檢測出來或漏檢的）的客戶投訴，其次數超過考核目標，由部門經理和總經理酌情給予XX～XXX元的處罰，同時由質量工程師和檢驗組共同制定糾正和預防措施。

第五篇：考核指標

一、項目經濟承包合同中安全生產文明施工指標分解（月指標）：

（1）杜絕死亡事故和重傷事故，月輕傷頻率 ＜0.5‰。

（2）確保每月施工安全檢查和評價達優(yōu)良等級。

（3）確保每月文明施工檢查和評價達優(yōu)良標準，確保市級文明工地。

二、獎懲辦法

（1）獎勵辦法

①按每月考核實現文明施工及安全目標時，獎勵項目經理300 元，項目班子其他成員按80％計?。?/p>

②年終考核實現項目文明施工及安全目標指標時，獎勵項目經理年收入的30%，項目班子的其他成員按 20%計取。

③最終考核實現項目文明施工及安全目標指標時，獎勵項目經理年收入的40%，項目班子的其他成員按30%計取。

（2）懲罰辦法

①施工生產缺少防護設施、存在事故隱患

a.對隨意拆毀生產施工設備設施、安全防護設施的責任者不采取處罰措施的項目管理人員，罰款 100-200元； b.工程已開工無施工組織設計或施工組織設計中無安全措施，對工程項目技術負責人罰款 200元；

c.對存在重大事故隱患，且接到《停工通知書》逾期不解決的，對工程項目經理罰款300-500元；對事故隱患整改不徹底的，對工程項目工長罰款100-200 元；

d.對現場有毒有害產品無防護措施，并未提供技術指導或協(xié)助解決防護措施的，對工程項目經理處以 200-500元罰款。

②.現場管理及檢查

a.對不戴安全帽，電氣人員不穿絕緣鞋，高處作業(yè)不掛安全帶等違紀者，不采取制止糾正措施的，項目經理及管理人員罰款 50元。

2、加強項目考核的建議

針對項目考核中存在的一些現象和問題，筆者認為我們的項目考核應該在以下一些方面重點加強。

2.1科學的制定考核指標

目前，我們的項目考核指標主要是：目標成本、目標利潤、進度控制、質量指標、安全指標、項目部管理費等六項指標。其中質量、安全指標的制定都有完整的體系文件支持，形成了完整了定性考評體系。進度控制指標在項目合同或者授標文件內也有約定。目標利潤指標實際上受制于目標成本指標，如果明確了目標成本，那利潤指標也就相應的確定了。所以，只有目標成本、項目部管理費指標構成考核體系中的關鍵指標。隨著管道施工形勢的變化及我局項目管理的發(fā)展，我們的考核指標也要相應的進行科學調整。

2.1.1增加施工組織設計考核指標

施工組織設計是對項目施工的全過程實行科學管理的重要手段。通過施工組織設計的編制，可以全面考慮項目的各種具體施工條件，揚長避短地擬定合理的施工方案，確定施工順序、施工方法、勞動組織和技術經濟的組織措施，合理地統(tǒng)籌安排擬定施工進度計劃，保證項目按期投產或交付使用；也為項目的設計方案在經濟上的合理性，在技術上的科學性和在實施工程上的可能性進行論證提供依據；還為我們制定項目目標成本提高依據。設立施工組織設計考核指標，加強對施工組織設計的考核管理，是推進項目考核工作的重要環(huán)節(jié)。

2.1.2以定額為基礎確定目標成本指標

項目管理的出發(fā)點和落腳點是實現項目效益最大化，使項目達到質量優(yōu)、效率高、工期短、消耗低、安全好等目標，而項目的成本就是這些目標經濟效果的一個綜合性指標。作為項目運作最高成本控制額的目標成本指標，決定著項目的貢獻、企業(yè)的收益，牽動著項目管理者和參與者的神經，所以這一指標的制定最值得研究。有人說，最完美的指標體系應該是跳起來能夠摘到蘋果的水平。如果指標制定的太高，怎么跳也夠不到，那么他就喪失了跳起來的熱情；如果指標制定的太低，他不跳就能輕易的摘到，那無形中就形成了一種浪費。所以最完美的指標應該是能夠完成但是必須付出一定的努力才能實現的目標。

為了減少人為因素，公平、公正、公開的制定項目成本指標，最重要的就是編制、出臺一套完整的局內部施工定額，包括長輸管道敷設工程、儲罐安裝工程、定向鉆穿越工程、盾構穿越工程、大型場站安裝、地下儲庫等施工的勞動定額、機械定額、物資定額、工期定額和費用定額等。有了內部定額，也就有了統(tǒng)一的制定項目目標成本的標準，這對加大成本管理力度，建立科學的成本考核體系，把項目考核管理做精做細起到至關重要的作用。有了全局性的內部定額，我們核定單位產品（標段成本或者單臺儲罐成本等）就做到了有法可依，可以更加清晰的掌握項目以及項目中各公司的收益。

按階段分解成本考核指標，為加強過程考核做好準備。根據施工組織設計中確定的工程進度及階段性施工方案等對成本指標進行階段分解?？梢钥紤]開工準備階段、項目主體完成一半階段、項目主體完工階段、項目竣工階段等。成本考核指標分解后對于分階段進行成本考核打下基礎，對縮短考評時間，及時地反饋成本控制情況，促進項目部調整成本管理重點，提高項目收益起到很好的作用。

2.2及早出臺考核指標

項目考核指標在某種意義上說是項目管理的奮斗目標，目標明確，項目管理才有努力方向。在這個層面說，我們考核指標的出臺應該在項目啟動前。但是，當前我們的管道施工卻存在著一些自身的特點，那就是我們的建設項目多是由集團公司（股份公司）投資建設，事關國家能源安全的戰(zhàn)略性、政治性工程，工期安排短，準備時間短，建設周期短，帶有很強的指令性色彩。這在一定程度上造成了我們邊設計、邊采辦、邊施工的局面，同時也出現了項目合同的簽訂滯后于工程進展，我們的項目已經進行一段時間了但合同還沒有簽訂的現象。這給我們項目指標的出臺制造了極大地障礙，也增加了我們項目考核的難度。

面對這種特殊的局面，我們的項目考核也要與時俱進。我們可以根據項目初設的相關信息以及預期合同額進行事前規(guī)劃，盡早出臺項目考核指標。在項目運行的過程中，我們再根據實際項目情況對考核指標進行修正，這樣有了大的方向，我們的項目管理也就有的放矢了。

2.3強化過程考核

施工過程中的成本控制是成本管理的最主要階段，也是成本目標能否實現的關鍵環(huán)節(jié)，工程項目的一次性特點，決定了工程項目成本管理也是一次性的行為，因此，在施工過程中，項目成本能否降低，項目能否獲得最好的經濟效益，都取決于成本控制的好壞。由于影響項目成本的因素很多，在不同的情況下，采取不同的控制方法，將會產生不同的效果。因此，項目考核執(zhí)行的關鍵是過程考核。光布置，不檢查，什么工作也不能落實。圍繞考核指標，強化考核過程，對項目階段性管理過程及成果進行監(jiān)督、檢查和指導，是確保項目設定目標實現的保證，是決定項目考核能否收到實效的最重要環(huán)節(jié)。項目考核過程不是消極的限制與監(jiān)督，而是要積極創(chuàng)造條件，著眼于工作的指導?？己说倪^程是加強局本部與項目部的工作職能，促進項目管理團隊的團結協(xié)作，提高項目運作水平的過程。項目的考核過程也會使項目進展中每個參與的個人、單位、部門都更加明晰自己責任、權力和義務，以保證項目按照運作計劃運轉，實現預定的目標。

強化考核過程首先要得到上層領導的重視支持與各部門的配合。項目考核參與單位要把考核的監(jiān)督職能與服務職能結合起來，營造出良好的考核環(huán)境。

強化考核過程應明確考核時間表，不同的考核指標考核時間應該有所不同。我們的項目考核應該按照項目的計劃工期，在下達考核指標的同時非常明確的下達考核時間表，而不用模糊的、變數較大的考核時間。這一方面?zhèn)鬟f給被考核方一個準確的檢查、衡量的時間表，提醒、督促項目參與人員關注考核的相關內容，自覺地為目標的實現積極的努力。另外一方面?zhèn)鬟f給考核方一個信息，就是在既定的時間去查驗自己設定的指標完成情況，盡自己的職責或者說是能力去幫助項目完成相關的考核任務。對于不同的考核指標，考核時間應該不同。比如，施工組織設計的考核應該在項目開工之初進行，安全、質量等考核應該每月都有等。強化考核過程應提高對考核人員的要求?？己巳藛T不但要熟悉自己所負責的考核指標的相關知識，還要加強對工程預算、工程施工、工程技術等基本知識的學習，要加強對企業(yè)管理知識的學習。只有不斷增加各方面的知識，才能在項目考核工作中得心應手，取得好的考核效果。由于施工現場一般都遠離局所在地，項目考核人員就要經常深入現場，了解具體情況，平時注意積累考核材料，這樣到了既定考核時才會縮短考核時間，提高考核質量。

2.4嚴格兌現考核結果

當設定的考核期限到達的時候，我們就要對項目考核實施后所獲得的成果進行考評。認真做好考核成果的考評工作，客觀公正地評價項目部及項目經理，及時地反饋、通報考核結果并嚴格兌現考核承諾，對于提高員工士氣、加強團結、總結經驗、改進工作、促進項目考核管理工作的循環(huán)和提高都具有十分重要的意義。

考核結果的兌現要嚴格。堅決兌現既定的承諾，包括風險抵押金、效益工資、成本節(jié)余、利潤超額等的獎勵數額或者是出現成本超支、質量問題、安全問題等的懲罰措施都不能含糊，要讓人看到項目考核的剛性。

考核結果的兌現要講究實效性。在項目考核體系中要對項目考核結果的兌現時間做出明確規(guī)定，每次考核都要有相應的明確考核結果兌現時間。及時兌現考核結果，一方面讓項目考核的激勵作用適時發(fā)揮，提高項目參與人員的工作熱情、工作積極性以至最終提高項目效益。另一方面讓項目考核的監(jiān)督管理作用及時發(fā)揮效能，以改進項目管理，堵塞管理漏洞?？傊?，考核結果兌現的實效性是項目考核作用發(fā)揮的重要影響因素。