第一篇：組織病理切片的制作過程上

組織病理切片的制作過程上

1．取材組織取材的方法是制作切片的一個重要程序，根據(jù)教學(xué)、科研及外檢的具體要求取自人體（外科手術(shù)切除標(biāo)本、活檢標(biāo)本、尸檢標(biāo)本）或動物，并確定取材的部位和方法。取材者需要掌握解剖學(xué)、組織學(xué)、病理學(xué)的基本理論知識，還要掌握實際操作技術(shù)，每個組織器官的取材都有一定的部位和方法，不能任意切取組織作為制片材料，不然，無法達到教學(xué)、科研和臨床診斷的目的，具體要求如下：(1)材料新鮮：取材組織愈新鮮愈好，人體組織一般在離體后，動物組織在處死后迅速固定，以保證原有的形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)。(2)組織塊的大?。核〗M織塊較理想的體積為2.0cm×2.0cm×0.3cm，以使固定液能迅速而均勻地滲入組織內(nèi)部，但根據(jù)制片材料和目的不同，組織塊的較理想體積也不同，如制作病理外檢、科研切片，其組織塊可以薄取0.1～0.2cm即可，這樣可以縮短固定脫水透明的時間，若制作教學(xué)切片厚取0.3 ～0.5cm，這樣可以同一蠟塊制作出較多的教學(xué)切片。(3)勿擠壓組織塊: 切取組織塊用的刀剪要鋒利，切割時不可來回銼動。夾取組織時切勿過緊，以免因擠壓而使組織、細胞變形。(4)規(guī)范取材部位: 要準(zhǔn)確地按解剖部位取材，病理標(biāo)本取材按照各病變部位、性質(zhì)的不同，根據(jù)要求規(guī)范化取材。(5)選好組織塊的切面:根據(jù)各器官的組織結(jié)構(gòu)，決定其切面的走向。縱切或橫切往往是顯示組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的關(guān)鍵，如長管狀器官以橫切為好。(6)保持材料的清潔:組織塊上如有血液、污物、粘液、食物、糞便等，可用水沖洗干凈后再放入固定液中。(7)保持組織的原有形態(tài):新鮮組織固定后，或多或少會產(chǎn)生收縮現(xiàn)象，有時甚至完全變形。為此可將組織展平，以盡可能維持原形。

2．固定(1)小塊組織固定法：這是最常用的方法，從人體或動物體取下的小塊組織，須立即置入液態(tài)固定劑中進行固定，通常，標(biāo)本與固定液的比例為1:4～20，但組織塊不宜過大過厚，否則固定液不能迅速滲透。故取組織塊的大小一般為2.0cm×2.0cm×0.3cm。(2)注射、灌注固定法：某些組織塊由于體積過大或固定液極難滲入內(nèi)部，或需要對整個臟器或整個動物體進行固定。這時宜采用注射固定或灌注固定法。將固定液注入血管，經(jīng)血管分支到達整個組織和全身，從而得到充分的固定。(3)蒸汽固定法：比較小而厚的標(biāo)本，可采用鋨酸或甲醛蒸汽固定法。如血液涂片，則應(yīng)在血片未干燥前采用鋨酸或甲醛蒸汽接觸固定。最常用的固定液有10%甲醛固定液和95%乙醇固定液。2

3．脫水透明標(biāo)本經(jīng)過固定和沖洗后，組織中含有較多的水分，必須將組織塊內(nèi)的水分置換出來，這一過程叫做脫水。無論是用石蠟切片，還是用火棉膠切片，都必須除去組織中所含水分，因含水組織與石蠟、火棉膠等包埋材料不相容，常用的脫水劑為一系列不同濃度的乙醇。脫水的步驟是：80%、90%、95%、100%各種濃度乙醇2小時，此過程可用脫水機自控完成。丙酮也是一種脫水能力很強的脫水劑，但因其脫水能力很強，對組織有劇烈收縮作用，在制作科研、教學(xué)切片時一般不用該試劑。因乙醇、丙酮等不溶于石蠟，還要經(jīng)過一個能溶于石蠟的溶劑替代過程稱為透明。常用的透明劑有二甲苯、三氯甲烷、水楊酸甲酯等。

第二篇：組織病理切片的制作流程

組織病理切片的制作流程

1． 取材

組織取材的方法是制作切片的一個重要程序，根據(jù)教學(xué)、科研及外檢的具體要求取自人體（外科手術(shù)切除標(biāo)本、活檢標(biāo)本、尸檢標(biāo)本）或動物，并確定取材的部位和方法。取材者需要掌握解剖學(xué)、組織學(xué)、病理學(xué)的基本理論知識，還要掌握實際操作技術(shù)，每個組織器官的取材都有一定的部位和方法，不能任意切取組織作為制片材料，不然，無法達到教學(xué)、科研和臨床診斷的目的，具體要求如下：

(1)材料新鮮：取材組織愈新鮮愈好，人體組織一般在離體后，動物組織在處死后迅速固定，以保證原有的形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)。

(2)組織塊的大?。核〗M織塊較理想的體積為2.0cm×2.0cm×0.3cm，以使固定液能迅速而均勻地滲入組織內(nèi)部，但根據(jù)制片材料和目的不同，組織塊的較理想體積也不同，如制作病理外檢、科研切片，其組織塊可以薄取0.1～0.2cm即可，這樣可以縮短固定脫水透明的時間，若制作教學(xué)切片厚取0.3 ～0.5cm，這樣可以同一蠟塊制作出較多的教學(xué)切片。

(3)勿擠壓組織塊: 切取組織塊用的刀剪要鋒利，切割時不可來回銼動。夾取組織時切勿過緊，以免因擠壓而使組織、細胞變形。

(4)規(guī)范取材部位: 要準(zhǔn)確地按解剖部位取材，病理標(biāo)本取材按照各病變部位、性質(zhì)的不同，根據(jù)要求規(guī)范化取材。

(5)選好組織塊的切面:根據(jù)各器官的組織結(jié)構(gòu)，決定其切面的走向?？v切或橫切往往是顯示組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的關(guān)鍵，如長管狀器官以橫切為好。

(6)保持材料的清潔:組織塊上如有血液、污物、粘液、食物、糞便等，可用水沖洗干凈后再放入固定液中。

(7)保持組織的原有形態(tài):新鮮組織固定后，或多或少會產(chǎn)生收縮現(xiàn)象，有時甚至完全變形。為此可將組織展平，以盡可能維持原形。2．固定

(1)小塊組織固定法：這是最常用的方法，從人體或動物體取下的小塊組織，須立即置入液態(tài)固定劑中進行固定，通常，標(biāo)本與固定液的比例為1:4～20，但組織塊不宜過大過厚，否則固定液不能迅速滲透。故取組織塊的大小一般為2.0cm×2.0cm×0.3cm。(2)注射、灌注固定法：某些組織塊由于體積過大或固定液極難滲入內(nèi)部，或需要對整個臟器或整個動物體進行固定。這時宜采用注射固定或灌注固定法。將固定液注入血管，經(jīng)血管分支到達整個組織和全身，從而得到充分的固定。

(3)蒸汽固定法：比較小而厚的標(biāo)本，可采用鋨酸或甲醛蒸汽固定法。如血液涂片，則應(yīng)在血片未干燥前采用鋨酸或甲醛蒸汽接觸固定。最常用的固定液有10%甲醛固定液和95%乙醇固定液。

3．脫水透明標(biāo)本經(jīng)過固定和沖洗后，組織中含有較多的水分，必須將組織塊內(nèi)的水分置換出來，這一過程叫做脫水。無論是用石蠟切片，還是用火棉膠切片，都必須除去組織中所含水分，因含水組織與石蠟、火棉膠等包埋材料不相容，常用的脫水劑為一系列不同濃度的乙醇。

脫水的步驟是：80%、90%、95%、100%各種濃度乙醇2小時，此過程可用脫水機自控完成。

丙酮也是一種脫水能力很強的脫水劑，但因其脫水能力很強，對組織有劇烈收縮作用，在制作科研、教學(xué)切片時一般不用該試劑。因乙醇、丙酮等不溶于石蠟，還要經(jīng)過一個能溶于石蠟的溶劑替代過程稱為透明。常用的透明劑有二甲苯、三氯甲烷、水楊酸甲酯等。

4．浸蠟、包埋

(1)使石蠟浸入組織中，取代組織中含有的透明劑。

(2)包埋：將浸蠟后的組織置于融化的固體石蠟中，石蠟?zāi)毯?，組織即被包在其中，稱蠟塊，此過程稱為包埋。5．切片和貼片

(1)修整蠟塊：可視其組織的大小，在組織邊緣約0.1～0.2cm處，切去余蠟部分，否則易造成組織皺縮不平。

(2)準(zhǔn)備好切片用具：切片刀、毛筆、眼科鑷子（彎）、漂烘溫控儀(3)安裝蠟塊：將修好的蠟塊安裝在金屬或木制持蠟器上。

(4)安裝切片刀：將切片刀安裝在切片機的刀臺上，把刀臺上的緊固螺絲旋緊，使切片時不產(chǎn)生振動，能保持一定的切片厚度。

(5)切片的厚度：切片機的厚度調(diào)節(jié)器上刻有0～50μm或0～25μm，可任意選擇其厚度，石蠟切片的厚度一般在4～6μm。(6)切片(7)鋪片：用眼科鑷子鑷起蠟帶輕輕平鋪在40～45℃的水面上，借水的張力和水的溫度，將略皺的蠟帶自然展平。

(8)貼片、烘片：待切片在恒溫水面上充分展平后，將蠟片撈到載玻片的中段處傾去載玻片上的余水，置入60～65℃恒溫箱內(nèi)或切片漂烘溫控儀的烘箱內(nèi)烤片15～30分鐘，脫去溶化組織間隙的石蠟。

6．染色和封片常用的染色方法是蘇木素-伊紅（Hematoxylin-Eosin）染色法，簡稱H.E染色法。這種方法對任何固定液固定的組織和應(yīng)用各種包埋法的切片均可使用。蘇木素是一種堿性染料,可使組織中的嗜堿性物質(zhì)染成藍色，如細胞核中的染色質(zhì)等；伊紅是一種酸性染料，可使組織中的嗜酸性物質(zhì)染成紅色，如多數(shù)細胞的胞質(zhì)、核仁等在H.E染色的切片中均呈紅色。

H.E染色程序如下:脫蠟、脫苯、復(fù)水、染色、脫水、透明、封固

常規(guī)蘇木素染色中的對比染色是用伊紅,近年來在英、美國家的一些實驗室則采用焰紅（phloxine）,此外也有用桔黃G（OrangeG）、比布里希猩紅(Biebrich scarlet)、波爾多紅(Bordeaux red)等作為對比染色。伊紅為染胞質(zhì)、膠原纖維、肌纖維、嗜酸性顆粒等常用的染料。1.取材

取材的好壞，直接影響切片的質(zhì)量。醫(yī)生在取材時，首先要有一把鋒利的取材刀，在切割組織時要避免取材刀來回拖拉，切取的組織塊厚薄要均勻，一般厚度以0.2 ～0.3cm為適，較容易發(fā)脆的組織如甲狀腺、肝臟、血塊、淋巴結(jié)、大塊癌組織等可適當(dāng)厚一點，而脂肪組織、肺組織、纖維性腫瘤、平滑肌瘤等致密的或試劑不易滲入的組織應(yīng)取薄一些；淋巴結(jié)應(yīng)修掉兩側(cè)球冠，并盡量剔除周圍的脂肪組織。在取材中還應(yīng)十分注意組織內(nèi)是否有縫線或骨組織，如碰到不可避免的鈣化組織，應(yīng)與技術(shù)室講明，在切取纖維組織、肌肉、組織、胃腸道時，應(yīng)注意纖維及肌肉的走向，取材時盡可能按與纖維平行走向切取為佳。2.固定

固定是技術(shù)室工作的第一步，也是在整個制片過程中無法補救的一步。所謂“固定”，就是組織離體后，用各種辦法使其細胞內(nèi)的物質(zhì)盡量接近其生活狀態(tài)時的形態(tài)結(jié)構(gòu)和位置的過程。固定的目的是為了防止組織細胞自溶與腐敗，防止了細胞內(nèi)的酶對蛋白質(zhì)的分解作用，使細胞內(nèi)的各和成分如蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物或酶類轉(zhuǎn)變?yōu)椴蝗苄晕镔|(zhì)，以保持原有的結(jié)構(gòu)與生活時相仿。另外，組織固定后，均呈一定的硬化狀態(tài)，增加組織 韌性，而且不易變形，有利于以后的組織處理。所以組織一旦離體必需及時固定，固定液的量應(yīng)為組織的5倍。固定的關(guān)鍵主要與固定的及時性、固定液的選擇、固定液的濃度、固定的溫度和時間有關(guān)。最常用的固定液為10％福爾馬林。筆者認為，10％福爾馬林由于受到福爾馬林的質(zhì)量、使用時的揮發(fā)和取材時帶入的水分影響，濃度被降低致組織固定不足，而高濃度的福爾馬林，降低了對組織的穿透性，形成周圍固定好而中央固定不到的現(xiàn)象。通過實踐，本人認為以酸性12～15％的福爾馬林最佳。大標(biāo)本（2cm厚）一般需要6～12個小時，小標(biāo)本一般需要3～6個小時；當(dāng)室溫低18℃時，可在37℃以下的溫箱內(nèi)加溫4～6個小時。由于HE染色最佳著色PH為3.5～4.5, 中性福爾馬林對蘇木素染色有一定影響,細胞核容易發(fā)灰,核染色質(zhì)不佳。所以, 盡管中性福爾馬林對抗原有很好的保存作用，但酸性福爾馬林對絕大多數(shù)抗原來說也有很好的保存作用，所以在沒有特別處理的情況下常規(guī)HE用12～15％酸性福爾馬林也可以（每100毫升12～15％福爾馬林液內(nèi)加5毫升冰醋酸）。骨髓、結(jié)締組織固定以Bouin液為佳，經(jīng)Bouin液固定后的組織必須流水沖洗4小時以上。有條件的單位可根據(jù)不同要求選用二種或二種以上的固定液；少數(shù)單位還可建立組織冷凍庫，以便適應(yīng)各種特殊的處理要求。3.水洗

固定后水洗（10～20分鐘），通常被很多人所忽視，而水洗不徹底，容易造成脫片和染色不鮮艷。對需做免疫組織化學(xué)的組織，更不應(yīng)當(dāng)忽視。福爾馬林不利于組織塊內(nèi)抗原的保存.脫水和透明

所謂脫水就是利用脫水劑將組織內(nèi)的水分置換出來，以利于有機溶劑的滲入，這一過程稱為脫水。脫水是否徹底，直接關(guān)系到組織是否能充分透明，而脫水過度（原因是組織在純酒精內(nèi)時間過久，發(fā)生組織質(zhì)地發(fā)生變化）容易造成組織發(fā)脆。造成組織發(fā)脆的原因還有加溫（溫度超過35℃）、脫水劑內(nèi)加有丙酮、浸蠟用的石蠟中二甲苯過多等等。一般我們總認為組織發(fā)脆跟高濃度酒精有關(guān)，而忽視了與低濃度的酒精關(guān)系，其實低濃度的酒精具有強大的穿透力，比純酒精更容易滲透到組織塊內(nèi)部使之脫水，組織如果在低濃度酒精里充分脫水，在高濃度酒精里只需脫去從低濃度到高濃度之間的水份，因此，僅需短時間就可完成，如果這時不縮短純酒精的時間，便會引起組織發(fā)脆；如果脫水時加溫，使用丙酮，還可引起組織收縮，并影響免疫組織化學(xué)的標(biāo)記。為了使石蠟浸入到組織塊內(nèi)，必須經(jīng)過一種既能與脫水劑混合，又能與石蠟相溶的媒介物質(zhì)，這個過程稱透明。目前最好的透明劑是二甲苯。很多人認為二甲苯極容易使組織發(fā)脆，這個 觀點很片面，在常溫下，如果不是時間過長（超過２4小時以上）二甲苯并不會引起組織過份發(fā)脆，相反會使某些組織結(jié)構(gòu)比較質(zhì)韌的組織：比如子宮肌瘤等相當(dāng)好切），但是當(dāng)二甲苯溫度超過35℃以后，極易引起組織發(fā)脆。所以本人認為，大小標(biāo)本最好分開脫水，一般情況下，大標(biāo)本脫水時間（室溫18℃）以80％酒精2小時、95％酒精（2道）各1個半小時至2小時、純酒精（3道）各1個半小時至2小時，二甲苯（2道）各30-60分鐘為宜；小標(biāo)本脫水時間應(yīng)相應(yīng)縮短。脫水時間長短，與室溫高低有密切的相關(guān)。我們在實踐中發(fā)現(xiàn)，室溫在12～15℃時，可作為一個臨界溫度范圍。當(dāng)室溫高于此溫度范圍時，組織容易脫水，可適當(dāng)縮短脫水時間；而室溫低于該溫度范圍時，應(yīng)適當(dāng)延長脫水時間（如能保證在一個恒定的溫度下最佳）。更換試劑，應(yīng)以量為基礎(chǔ)，定量更換，不能等到切片不好時再去更換。否則，至少會有2～3批組織切片不好。根據(jù)我科經(jīng)驗，如試劑用量為500ml，每500個蠟塊更換一次為宜。5.浸蠟

組織透明后，在熔化的石蠟內(nèi)浸漬的過程稱為浸蠟。用其他浸透劑（如火棉膠、明膠等）滲入組織內(nèi)部的過程可稱為浸透或透入。浸蠟溫度過高（超過60℃），在蠟內(nèi)加入二甲苯蠟或由于透明時帶進的二甲苯過多，都會導(dǎo)致組織發(fā)硬，還會使組織內(nèi)的抗原受到破壞；所以作者主張浸蠟用的石蠟熔點在56℃（三道），第一道：石蠟30分鐘；第二道：石蠟90分鐘；第三道：石蠟，90分鐘。浸蠟溫度控制在56～58℃左右。（第一道也可用硬脂酸石蠟1：3混合浸蠟，不僅可軟化組織，特別適用于比較韌、硬的組織，而且由于硬脂酸是弱酸性的，對細胞核有媒染作用，核漿比鮮明，但容易脫片；同時對疏松組織容易散片）。有條件的可以每天打開第一道石蠟的蓋子，讓二甲苯揮發(fā)。浸蠟所用的石蠟如有雜質(zhì)盡可能過濾，以防附在組織上，造成切片刀刀口受損，或切片破碎和劃痕增多。6.包埋

用包埋劑來支持組織的過程稱包埋。最常用的是石蠟包埋法。包埋的關(guān)鍵一是平整，二是方位。要求在包埋時，應(yīng)采用鑷子輕壓組織塊拱起部份，使之平貼于底部，通常采用組織的最大面包埋。囊壁、管腔組織應(yīng)豎直包埋。小塊多顆組織，應(yīng)盡量放在一起，并保證在一個平面上。修去兩邊的余蠟（所謂的兩邊，指切片時與切片刀垂直的兩側(cè)）。包埋時還應(yīng)注意有無縫線，紙絮，如有一定要去除。胃黏膜活檢標(biāo)本，不能按一般的規(guī)律取最大包埋面，應(yīng)采取窄面豎起包埋。包埋的蠟更應(yīng)過濾，留有雜質(zhì)的石蠟，容易造成污染或刀口受損。蠟的熔點應(yīng)在56～58℃之間選擇，不提倡在冬天使用軟蠟。因為用 軟蠟包埋的蠟塊，到了夏天，會粘在一起，不利于資料的保存，而且即使在冬天，用硬蠟包埋的蠟塊也比用軟蠟包埋的蠟塊要好切。7.磨刀

要想切好一張切片，首先要有一把鋒利的切片刀。磨刀是從事切片技術(shù)人員的一項最基本技術(shù)，刀磨的好壞，直接關(guān)系到切片的質(zhì)量。磨刀的手法各人不同，但都要求用力均勻，使刀口和磨刀石全面接觸，兩手的用力點應(yīng)在刀口上，而不是在刀背上。切片刀應(yīng)用一次磨一次，每次僅需10～15分鐘，過長時間的磨刀，容易把已經(jīng)磨出的鋒刃磨掉，檢查切片刀是否鋒利，用手試摸刀口的方法并不十分科學(xué)，不僅不能證明切片刀是否真正鋒利，而且容易損害刀口，最簡單的辦法是每次磨好后拿一個蠟塊試切一下。每次磨好刀后，應(yīng)將磨刀石用蓋子蓋好，以防灰塵掉在磨刀石上，用有灰的磨刀石磨刀，會使切片刀產(chǎn)生許多細小的缺口?，F(xiàn)在很多單位都買了磨刀機，磨刀機用來開刀鋒和磨缺口的確不錯，但由于磨刀的角度和時間不易精確掌握，故效果并不理想。根據(jù)我們的經(jīng)驗，真正的鋒刃很難用機器磨出來。一次性刀片在很大程度上解決了這個問題。如用一次性刀片，必須及時更換刀口。一個刀口切小標(biāo)本不應(yīng)超過20～25只蠟塊，切大標(biāo)本不應(yīng)超過10～15只蠟塊。8.切片

切片的第一步必需粗切。粗切的厚度大約在５0～100微米左右，質(zhì)地較硬的組織或較小的組織應(yīng)再薄一些，粗切致組織全部暴露后，才進行細切。細切至組織塊表面均勻一致，無白點后，再把切的蠟片放入溫水中。切片時要求用力均勻、柔和，搖速不易過快或過慢。過快會導(dǎo)致切片厚薄不均，機器磨損；過慢會使切片增厚。切片厚度一般為3～5微米。切片的要求是完整、薄、均勻。切下的片膜其大小形狀應(yīng)與組織塊一致，切片的不完整，常會將重要病變遺漏，導(dǎo)致誤診、漏診。在切片放蠟塊時，應(yīng)注意組織包埋的方向，組織的層次，纖維、肌肉等的走向應(yīng)與切片刀平行，較難切的部分應(yīng)放在上面，如皮膚的表皮，腫塊的包膜，胃腸道的漿膜等，這樣可以減少組織的斷裂現(xiàn)象。操作切片機時應(yīng)用力均勻，避免用力過重。對脫鈣組織、骨髓，以及已知的鈣化組織，應(yīng)選用固定的刀口，以減少其他部位出現(xiàn)缺口的可能性。在使用毛筆展片時要防止筆絲進入刀口，因為每切到一根筆絲，就會增加一個缺口。切片厚度一般為4～6微米，有人認為：只要切片機刻度標(biāo)著幾個微米，切出來的片子就是幾個微米。其實不然，當(dāng)切片刀不鋒利，或切片時速度不勻，或切的較慢時，切的片子都會變厚，只有在切片刀十分鋒利、切片勻速的情況下，才能真正保證其厚度。下面是切片時碰到的問題的原因及可 能處理的方法：(1)組織發(fā)脆：一般是脫水、透明、浸蠟時間過長、溫度過高，并與組織本身質(zhì)地也有關(guān)，在切片時，邊切邊用嘴向蠟片吹氣，可能會好些。(2)切片卷起，可能是刀不鋒利，或刀鋒在另一面，或刀角度過大，切片太厚等等。(3)蠟片彎曲：可能是刀鋒不均，切片刀未磨直，切片刀與蠟塊不平行。(4)透明、浸蠟時間過長、溫度過高，并與組織本身質(zhì)地也有關(guān)(5)厚薄不均：可能是刀、刀座及蠟塊未夾緊，組織太硬，或切片機主軸太向前，或切片機已磨損。(6)切片出現(xiàn)裂痕：可能是刀有缺口，石蠟內(nèi)有雜質(zhì)，組織內(nèi)有鈣化、骨片或有線結(jié), 也可能會有棉紙纖維等。(7)切片不連片，切不下片，切片很厚，或者切片后蠟塊發(fā)白，內(nèi)陷：組織脫水不佳。補救辦法：可先將蠟塊溶解，取出組織，放入加熱水浴的丙酮內(nèi)（80℃），30～60分鐘，再進行透明浸蠟包埋切片，也許會好一點。9.展片與撈片

展片水溫應(yīng)在42℃至47℃之間，這主要和包埋蠟的熔點有關(guān),水溫過高，會引起組織細胞散開，水溫過低，切片皺摺無法攤平。包埋蠟中如有二甲苯，也會造成石蠟溶解現(xiàn)象。而用一次性刀片切的片子，一碰到熱水，片子上的皺摺就無法再展開，這有二個方法可以解決：第一、可以在切片時邊切邊向蠟片吹氣，這樣的片子就會非常平整，放到熱水里就會自然展開，比較方便快捷，但這樣的片子會略微厚一點；第二、在切完片子后，先把切片放在30%酒精水溶液中，讓酒精的張力自動把皺摺展開，然后再將切片移到熱水，這樣的片子會較薄;如酒精濃度過高，容易引起切片破碎，出現(xiàn)裂隙，像脂肪之類細胞間粘附性較小的組織一碰到酒精就會散開，故不能用此法。最后撈片時玻片要干凈，要選擇那些完整、無皺摺的切片，粘貼于玻片中1/3和下1/3的中間。10.烤片和脫蠟

烤片，一般在60℃的溫箱內(nèi)烤片0.5～1小時左右，溫度過高，會引起切片細胞收縮；時間太短(少于20分鐘)，容易造成脫片。脫蠟也相當(dāng)重要，如果脫蠟不干凈，切片不易著色或著色不勻，所以，脫蠟用的二甲苯要經(jīng)常更換，一般用3道二甲苯，每500ml液體，處理500張切片后更換一次為宜。當(dāng)室溫低于18℃時，必須將切片從溫箱拿出后立即放入二甲苯中脫蠟，或?qū)⒍妆椒湃霚叵鋬?nèi)預(yù)熱（37℃左右）脫蠟，最高不得超過60℃。然后經(jīng)高濃度的酒精到低濃度的酒精洗去二甲苯，至水。11.染色

蘇木素染色時間要根據(jù)染料的新舊、溫度、切片的類型而定，一般為5－15分鐘。經(jīng)水略洗后，用鹽酸酒精分化，分化程度必須用顯微鏡控制。分化水洗后，可用溫水或 自來水藍化，并充分水洗（流水沖洗5分鐘以上），以防鹽酸殘留導(dǎo)致切片褪色。我們不提倡使用堿性溶液（釋氨水、肥皂水等）促藍，盡管藍化效果很好，但從實踐的結(jié)果來看，用堿性溶液促藍的切片不能長期保存，容易褪色。最后入伊紅復(fù)染（5－20秒）。HE染色的關(guān)鍵在于深淺適度，對比鮮明，一般有經(jīng)驗的，肉眼就能判斷，但偶而也會出現(xiàn)失誤，所以用顯微鏡控制是最保險的方法。其關(guān)鍵的步驟在于蘇木素染好后的分化及藍化過程，在藍化結(jié)束后，應(yīng)在顯微鏡下觀察細胞核著色是否合適，核結(jié)構(gòu)是否清晰，胞漿內(nèi)是否有殘留的蘇木素等等。染色理想的切片在顯微鏡下應(yīng)是：細胞核與細胞漿應(yīng)藍紅相映，鮮艷美麗；核漿對比明顯，核膜及核染色質(zhì)顆粒清晰可見。12.脫水和封片

切片脫水應(yīng)從低濃度的酒精到高濃度的酒精，80%酒精1道，95%酒精2道，純酒精2道，（正丁醇1道），二甲苯2道。濃度低的酒精比濃度高的酒精更容易脫水，但也容易使伊紅退色，故脫水時間可短一點，每道3－5分鐘，純酒精每道10分鐘。為增加酒精與二甲苯的相融性，可在二甲苯前面增加一道正丁醇；石碳酸－二甲苯液也有此效，但用石碳酸時如不洗凈，可引起切片退色，不利于切片久存，故不作推薦。切片經(jīng)二甲苯透明后，用中性樹膠封固。為增加切片的透明度，防止細胞收縮、龜裂或切片出現(xiàn)黑色結(jié)晶樣小點。所以我們規(guī)定切片必須濕封，不得用溫箱烤干或電吹風(fēng)吹干后干燥封片。在南方冬春、霉雨季節(jié)，封片時要防止口鼻呼出的氣體接觸到切片；在天氣較潮濕的日子里，不宜一次將多張切片取出待封，以免切片“還潮”，形成透明不佳,出現(xiàn)云霧狀水珠。脫水劑的更換也應(yīng)有一定的時間規(guī)定。一般是每500ml液體，處理500張切片后更換一次為宜。封片樹膠不能過稀，封片時樹膠要均勻充滿蓋玻片且樹膠不及外溢為佳。要將組織全部覆蓋，也不能有氣泡。最后，粘貼標(biāo)簽，標(biāo)簽必須貼于玻片左側(cè)，編號書寫清楚，最好能打印。

第三篇：簡歷制作過程

簡歷制作過程

1.什么是好簡歷

按照崗位需求提供優(yōu)勢，并不需要寫上自己所有的優(yōu)勢和獎勵，也并不要把自己所有的個人信息都寫上。

2.好簡歷的四個特點

1.2.3.4.針對崗位 突出優(yōu)勢 提供證據(jù) 簡潔明快

3.如何讓簡歷脫穎而出？

1.格式：簡潔明快，產(chǎn)生視覺沖擊力

2.內(nèi)容：陳述事實，言簡意賅，提供證據(jù)

3.結(jié)構(gòu)：符合人力資源招聘員的閱讀習(xí)慣

4.簡歷的制作小竅門：

優(yōu)勢強化，弱勢弱化。優(yōu)勢放前面。

（比如說你的學(xué)校沒啥名氣，那你就可以不寫自己的學(xué)校名，只寫專業(yè)就可。）一份簡歷一個崗位（切記）

5.簡歷小技巧：

1.郵箱你一定要有，而且要注冊一個專業(yè)性的個人郵箱，例如163之類的郵箱。千萬別用QQ郵箱。

2.電話號碼最好寫成這種形式：123-4564-0567

3.簡歷中的封面：寧缺毋濫（要想有封面，也得是自己制作設(shè)計的，能夠代表自己的風(fēng)格想法的封面，就怕到時候，HR問你為什么選擇這樣的封面，這是你要是說是這是我在百度上考下來的，這樣就不好了。所以我建議不要封面。）

4.照片：寧缺毋濫（如果要貼也一定是職業(yè)化的照片，不一定要是西裝。比如你要應(yīng)聘的是一名土木工程師，你可以選擇穿工作服的照片也行。因為有的面試者就是因為照片被淘汰了。如果你沒貼照片，你想你還挺特殊的，這樣可以勾起HR的好奇心，所以反而有好處呢。）

5.求職信：寧缺毋濫（要寫就得自己動手寫，要能打動HR的信，要真誠。千萬別百度。）

6.人力資源或者招聘者看重簡歷的什么

6.三小三大是HR關(guān)注的點，這些你基本都得寫

三小

1.你是誰

2.你來自哪個學(xué)校

3.需要做什么工作

三大

1.2.3.4.5.6.7.8.學(xué)了什么？（與你想干的工作是不適合）干的怎么樣?（這件事你做的怎么樣，或得了什么獎勵）你是個什么樣的人 簡歷中要突出什么優(yōu)勢? 這個得看你應(yīng)聘的崗位是什么類型的，大部分的崗位可以分為以下幾種 知識技能型崗位（計算機，軟件工程、金融、工程技術(shù)員、研發(fā)人員等）能力經(jīng)驗型崗位（教師、醫(yī)生、營銷、公關(guān)、行政、項目管理、人力資源等）態(tài)度素養(yǎng)型崗位（護士、文員、秘書、服務(wù)員、接待員、銀行柜臺員、前臺經(jīng)理等）

9.簡歷制作過程細化

建立個人信息檔案

就是把自己的各個方面都列出來，建立一個表。內(nèi)容大致包括：你學(xué)了什么，你會什么，你得過什么獎勵，你是個什么樣的人，你的特長是什么，你的愛好有哪些，你的性格等等。根據(jù)要求篩選信息

就是從上面你自己建立的庫中，把能與崗位需求相對應(yīng)的技能、特長、愛好、性格、獎勵、能體現(xiàn)你適合這份工作的經(jīng)歷等等都可以。

對信息進行深加工

就是把上一步選出來的各種技能特點進行語言的加工，利用特有的表達方式，做到簡潔明了。方法就是動詞開始,例如：獨立策劃了、、、、活動，在活動中我怎么樣了，我負責(zé)了什么，獲得了什么獎，或者得到了什么好的評價，在這個過程中培養(yǎng)了什么能力，體現(xiàn)了我的什么能力等等。采用這樣的格式寫故事。還有的動詞開始有例如:組織了什么、、、、；提高了、、、、；參與了、、、、等等。

制作高質(zhì)量的簡歷

上面進行加工后的語言和你的特點等等進行恰當(dāng)?shù)慕M合。做到簡潔明了，言簡意賅。

1.其中還有的小訣竅就是:要按要事優(yōu)先原則（按重要性優(yōu)先排序）

2.盡量用數(shù)字表達。例如：得了什么獎（本院2000得獎?wù)?人）

3.提供證據(jù)：用事實說話；用他人的評價說話;用數(shù)據(jù)說話；用結(jié)果說話；

4.如果實在是沒什么獎勵也可以從生活中尋找，能體現(xiàn)你是符合崗位要求的事或者愛好或者行為。例如崗位中要求是要有整理能力的，你可以說自己特變喜歡整理房間衣物等等。

5.就是他有什么要求，你都盡量往這方面去套，去靠。

第一步：了解崗位需求（就是知道這個崗位需要什么技能，什么能力，什么樣的素質(zhì)等等）

方法：

上個中網(wǎng)站了解。例如;

招聘網(wǎng)

中國人才網(wǎng)

應(yīng)屆大學(xué)生就業(yè)網(wǎng)

中華人才網(wǎng)

國家人才網(wǎng)

我的工作網(wǎng)

北京大學(xué)生就業(yè)網(wǎng)等

職業(yè)訪談（就是像在這個職業(yè)里面有威望的人，或者是很厲害的人，準(zhǔn)備好問題去問他，解答你心中的疑問。）

查看有關(guān)方面的書籍

第二步提取這個崗位中的重點要求，然后列出來。再與自己的信息庫區(qū)對照，看看自己的那些愛好獎項，或者自己做了什么事能與崗位的要求對應(yīng)。把這些內(nèi)容提取出來。

第三步把提取來的內(nèi)容進行動詞開始式的加工。

第四步整合成完整的簡歷

1.2.3.4.5.6.7.投遞簡歷 投遞簡歷的分類 網(wǎng)投 郵寄 現(xiàn)場 熟人遞送 上門

10、遞簡歷的小技巧

網(wǎng)投:

1.2.3.4.5.恰當(dāng)時間每天上午8:30，下午1:30，你可以每天都發(fā)，在他的應(yīng)聘時間段里。網(wǎng)投的簡歷一定要放在正文里 別用word文檔，用圖片文檔jpg 別群發(fā)給很多公司 主題：寫一句高度概括的話，千萬別寫簡歷。你可以下，具有強大溝通能力的某某（HR）求職人某某。

郵寄：

1.如果你要寄簡歷和求職信一起，那你的郵寄一定得寫成私人信件的形式，上面可以寫上尊敬的某某（HR姓名）親啟。（切記信封上不可以寫上簡歷這樣的字）

2.郵寄以掛號信或快遞的形式寄出

現(xiàn)場：

1.如果你是去招聘現(xiàn)場去找工作，首先你得帶著自己建立的簡歷庫，或者電腦（筆記本）或U盤，方便自己隨時改動。

2.別上去就給人遞簡歷，你得先看看他們的要求，一點一點的對應(yīng)看看，是不是和你做的簡歷相對應(yīng)不。要是不對應(yīng)，不符合，那你就馬上改正（根據(jù)你的簡歷庫里的內(nèi)容，找到和現(xiàn)在他們要求相符的條件的時間，你的特點等等，馬上改正。）

3.千萬不要拿著一大堆的簡歷一個一個發(fā)過去，他們對這樣的簡歷一般都是不看的，直接扔了的。

熟人遞送

1.這是最好的方式，也是成功率很高的方式。因為公司里面一般在要招人時先是考慮自己的公司里有沒有人可以頂替，然后是考慮公司內(nèi)部的人的推薦，再然后就是去招人了，2.熟人遞送，可以讓他給你寫一份推薦信，這個人最好在這個公司內(nèi)部工作而且最好是高官要員，3.還有一個方法就是直接上門去找這個部門的部長或者是領(lǐng)導(dǎo)。當(dāng)然你得帶著點禮物去，這個禮物不是賄賂的禮物而是指你在沒進入這個部門時就開始為這個公司工作了的證據(jù)。比如，你要進入的是這個公司的設(shè)計部門，你可以帶著自己的設(shè)計去。

4.還有一個就是當(dāng)你沒投遞一份簡歷出去后，最好在手機上把那個公司負責(zé)面試那人的姓名弄清楚，在手機上做好備份，接電話時要是人家來電了，你一下就能叫出人家的名字。那說明你狠關(guān)心這個公司，你的態(tài)度很好?？梢粤粝乱粋€好的印象。

5.總之投遞簡歷要有誠意，要堅持有時，不要招到了拒絕你就放棄了。要放得下面子，在沒工作前，面子你是沒有的。有句話叫做，要想當(dāng)爺爺，先得當(dāng)孫子。

11、答問題的要點小結(jié)

1.在面試前你得做好一些功課，比如你的公司的老板是誰，公司的發(fā)展歷史等等。

2.要能聽得出問題背后的問題。比如他問你你是不是獨生，你應(yīng)該這樣回答：是的，領(lǐng)導(dǎo)，雖然我是獨生，但是我有很好的團隊協(xié)作能力，比如我參加了什么團隊性的活動社團等等。

3.還有就是自我介紹，千萬別只說我叫什么名字，我來自哪里。就完了，你得多說點，你可以介紹自己的性格，愛好等等。

4.在最后就是當(dāng)面試官對你說，你還有什么問題嗎？你千萬別什么問題都不提。你可

以問問

5.公司的保險，五險一金啊以及公司的提供的比例啊。也可以問問自己以后得發(fā)展啊，等等

6.你還可以直接問領(lǐng)導(dǎo)我表現(xiàn)怎么樣，有什么地方不滿的嗎？你就直接問他，放下面

子，或者說不要臉了這一回。表現(xiàn)出自己的誠意，這樣他會理解為你對這個工作很有興趣。

7.你也可以直接問問，我還有機會可以見到您嗎領(lǐng)導(dǎo)？

8.還有就是一定要表現(xiàn)出對這個工作的興趣。表現(xiàn)出自己的自信，不知道你就是不好

意思，領(lǐng)導(dǎo)我不知道，不過領(lǐng)導(dǎo)我的學(xué)習(xí)能力很強，只要你給我機會，我一定會盡快學(xué)會。你要表現(xiàn)出自己的欲望。

9.還有就是當(dāng)他問你的未來打算時，你要有一個具體的計劃。例如：我要幾年內(nèi)買房，幾年內(nèi)把父母接過來等等。你要表現(xiàn)出你的報復(fù)。（領(lǐng)導(dǎo)會喜歡你這種有企圖心的員工。）

10.還有就是當(dāng)你在面試的過程中，你得學(xué)會用start的原則來講故事，start是以下四

個單詞的首字母，situation、task、action、result。依次是情景、任務(wù)、行動、結(jié)果。一定要按照這樣的格式來講述故事，其中情景和任務(wù)用一兩句話來概括，具體要講行動和結(jié)果。因為，面試官關(guān)注的是你負責(zé)了什么，你做的怎么樣了。

11.在大二時我獨自一人策劃了我們院的什么什么活動。（情景、任務(wù)交代）我負責(zé)了

整個活動的設(shè)備選擇，人員調(diào)配，等等（行動）。（具體點，細致點。）活動開展的很成功，引起了多家有名的報刊記者的報道。（結(jié)果）

12.講故事時最好都按照這樣的格式來講述效果會很好。

還有一些你可以去上網(wǎng)查查看的東西，一個是心理學(xué)方面的。好像叫什么霍蘭德心理學(xué)。這個可以幫助你了解自己。

這些都是我自己整理的，排版有點亂。你看看吧。找點事做，嗯嗯。

第四篇：制作過程心得體會

制作過程心得體會

在利用刻衣制作筆袋的過程中，讓我感觸頗深，也讓我體會到許多動手的樂趣，將自己的想法付諸于實踐。

首先，是各種材料的收集與拼接，在綜合原因的基礎(chǔ)上，添加了許多自己的創(chuàng)新元素，制作過程中并非地么簡單，也能驗生活中的發(fā)現(xiàn)與心靈手巧。

其次，通過這次活動充分的開發(fā)我們的思維能力和動手能力，還使我常聯(lián)想到在不同學(xué)科中學(xué)到的知識和方法，無形中提升了自己的知識遷移和靈活運用能力。

隨著研究的深入，我越來越發(fā)現(xiàn)自己原來不懂的東西很多很多，根本不應(yīng)該滿足于知道的那一點點，即應(yīng)確立不斷學(xué)習(xí)的信念，這次活動帶給我們最大財富是一種追求永無止境的精神。在今后的生活中，我應(yīng)該時刻提醒自己，學(xué)無止境！我相信，這次課題研究活動會給我們一生留下永恒而珍貴的記憶！

結(jié)題心得體會

通過這次的結(jié)題報告，讓我收獲頗多，且受益匪淺，因為此次的項目設(shè)計不僅讓我明白了團結(jié)協(xié)作的小組重要性，而且更讓我知道和認識了創(chuàng)新、環(huán)保的重要，對于我們現(xiàn)在的學(xué)生來說是必不可少的。

制作成功后，我看到成品心里很高興，通過動手和思考不僅鍛煉了我們的大腦，還鍛煉了我們的動手能力。

開題報告心得體會

我們研究性學(xué)習(xí)開題報告主題廢衣成筆袋，我們?yōu)槭裁磿运鼮楸敬窝芯啃詫W(xué)習(xí)的主題呢？通過我們組員的調(diào)查，廢衣在每個家里面最普遍的，并且人們不要的衣服都是完好無損，沒有一點破爛，隨著社會經(jīng)濟的發(fā)展，人們生活水平不斷提高，在物質(zhì)方面和精神享受都有很大的改變，人們在環(huán)保方面意識比較薄弱，在經(jīng)濟發(fā)展的同時，環(huán)境保護成了人們熱議的話題，很多人都沒有想到把舊衣服利用起來，這樣也有利于我們環(huán)境的環(huán)保和資源的有效利用，所以環(huán)保成為了我們主題的目的。

我相信通過我們組員的團結(jié)協(xié)辦，一定會把廢衣成筆袋制做出來，展現(xiàn)給大家看。

調(diào) 查 問 卷

1、家中有大量舊衣物？

是約占90%

否約占10%

2、家中有廢舊衣物的是否放置家中無用？

是約占70%

否約占30%

3、是否覺得廢舊衣物放置家中浪費？

是約占90%

否約占10%

4、對廢物利用是否覺得有利于保護環(huán)境？

是約占100%

否約占0%

5、是否贊同我們此次廢衣成筆袋活動？

是約占80%

否約占20%

第五篇：魚缸制作過程

魚缸制作過程

第一步：底柜框架

材料：40*40*3mm鍍鋅方管 尺寸：150cm*60cm*75cm

第二步：木板包架

材料：16mm木渣板

第三步：底柜貼皮

材料：波音軟片（網(wǎng)購）

第四步：粘底缸

材料：8mm普通浮法玻璃 尺寸：120cm*40cm*40cm

第五步：制作干濕分離盒

材料：亞克力(網(wǎng)購)尺寸：41cm*25cm*12cm

第六步：粘主缸

材料：12mm超白玻璃，15mm普通浮法玻璃 尺寸：150cm*60cm*70cm

第七步：粘拉筋

材料：15mm普通浮法玻璃

第八步：柜門+上包邊

第九步：洗缸、鋪沙、造景、養(yǎng)水、闖缸魚

洗缸：新缸不用消毒，洗干凈就行了。鋪沙：河沙，洗沙真的很痛苦。造景：沒有理想的石頭，湊合看吧。

養(yǎng)水：加鹽、加硝化細菌、開泵循環(huán)、充氧、加熱。

第十步：進魚

幾條小魚不敢和大魚混養(yǎng)，單獨放一個小缸里養(yǎng)。

亞克力三重溢流（水位60）

沉木： 打磨前

打磨后