第一篇:論離體病理組織、病理切片和組織塊的歸屬
【摘要】 本文綜合圍內(nèi)外現(xiàn)有的醫(yī)療法律、法規(guī)規(guī)定和案例,對(duì)離體的病理組織、病理切片和組織塊的所有權(quán)及
其處分權(quán).以及研究這些材料產(chǎn)生可能的商業(yè)利益后的利益歸屬問題進(jìn)行概述,認(rèn)為生物性的材料一經(jīng)離體,按照相關(guān)
法規(guī)應(yīng)南醫(yī)院保管并遵守一定的保管時(shí)限:病人有權(quán)復(fù)閱作為其部分醫(yī)學(xué)記錄的病理資料,但是沒有這些離體的生物
材
料的直接所有權(quán)。病理學(xué)家及其實(shí)驗(yàn)室將這些病理組織、病理切片和組織塊用于研究或其他非治療目的時(shí)要保護(hù)病
人的隱私:獲得病人的知情同意和授權(quán)是保護(hù)患者隱私和病理學(xué)家利益的最好的辦法,也是解決由于研究這些材料產(chǎn)
生的商業(yè)利益的歸屬問題的可行辦法。盡快制定各相關(guān)行業(yè)的行為規(guī)范和法律法規(guī),予以法律的效力,是解決上述問題的根本措施。
【關(guān)鍵詞】病理組織;病理切片;所有權(quán);處理權(quán);利益歸屬
【中圖分類號(hào)】d913:r36
【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】b
【文章編號(hào)】 1007—9297(2005)01—0032—06
隨著我國(guó)醫(yī)學(xué)知識(shí)的普及和人們法律意識(shí)的逐
漸提高.醫(yī)療訴訟呈現(xiàn)越來越多的趨勢(shì),其范同涉及
醫(yī)學(xué)各個(gè)領(lǐng)域。在我國(guó)目前的醫(yī)療糾紛訴訟中,涉及
病理組織、病理切片和組織塊的所有權(quán)問題尚無案例
報(bào)道。當(dāng)患者要求到另一家病理研究機(jī)構(gòu)會(huì)診時(shí),他
有權(quán)獲得其病理資料及其原始組織嗎?這就引發(fā)了病
理組織、病理切片和組織塊這些離體的生物材料的所
有權(quán)的問題:(1)它們究竟歸屬患者本人還是病理實(shí)
驗(yàn)室?(2)病理學(xué)家及其實(shí)驗(yàn)室對(duì)處理這些離體生物
材料具有什么樣的權(quán)限?(3)在處理這些離體生物材
料時(shí)如何保護(hù)病人的隱私?(4)誰有權(quán)從研究切片、組
織中獲益?由于我國(guó)法制建設(shè)尚處于發(fā)展階段,有關(guān)
病理切片、組織等的保存也無統(tǒng)一的法規(guī)規(guī)定,本文
就我國(guó)目前的法規(guī)及規(guī)章制度,參考國(guó)外的相關(guān)立
法,對(duì)以上4個(gè)問題概述如下
一、關(guān)于離體的病理組織、病理切片和組織塊的歸屬問題
在2002年發(fā)布的《醫(yī)療機(jī)構(gòu)病歷管理規(guī)定》第2條規(guī)定:病歷是指醫(yī)務(wù)人員在醫(yī)療活動(dòng)過程中形成的文字、符號(hào)、圖表、影像、切片等資料的總和。由此可
見.病理切片等屬于病歷資料的一部分,理應(yīng)由醫(yī)院
歸檔保管。任何與治療和診斷相關(guān)聯(lián)的切片和組織塊
都是病人醫(yī)學(xué)記錄的一部分,按照該規(guī)定,醫(yī)院、實(shí)驗(yàn)
室或者制作這些記錄的科室都被要求保存并維護(hù)這
些醫(yī)學(xué)記錄.這表明患者對(duì)其病理組織、病理切片和
組織塊不具所有權(quán)。筆者認(rèn)為,這些離體的生物性的材料對(duì)患者而言毫無專業(yè)價(jià)值,它們是在病理學(xué)家的專業(yè)知識(shí)基礎(chǔ)上制備而成,是專業(yè)技術(shù)的產(chǎn)物,在病
理學(xué)家等專業(yè)技術(shù)人員從事專業(yè)研究的時(shí)候才具有
臨床價(jià)值。因此,由醫(yī)院保管更能體現(xiàn)其價(jià)值和實(shí)用
性.并且理應(yīng)由原制備單位進(jìn)行保管。
當(dāng)然,病人有獲知這些保存在醫(yī)學(xué)記錄中的信息的權(quán)利,包括會(huì)診中使用其組織塊和切片。我國(guó)允許
患者為求會(huì)診時(shí)可以復(fù)印或復(fù)制病歷資料。然而,在《醫(yī)療機(jī)構(gòu)病歷管理規(guī)定》第15條規(guī)定中,醫(yī)療機(jī)構(gòu)
可以為申請(qǐng)人復(fù)印或者復(fù)制的病歷資料包括:門(急)
診病歷和住院病歷中的住院志、體溫單、醫(yī)囑單、化驗(yàn)
單(檢驗(yàn)報(bào)告)、醫(yī)學(xué)影像檢查資料、特殊檢查(治療)
同意書、手術(shù)同意書、手術(shù)及麻醉記錄單、病理報(bào)告、護(hù)理記錄、出院記錄。在該條例中,僅有病理報(bào)告屬于
可復(fù)制的范疇,病理組織、病理切片和組織塊不包括
在內(nèi)。這意味著當(dāng)患者要求到另一家病理研究機(jī)構(gòu)會(huì)
診時(shí),他(她)也不能獲得其病理組織、病理切片和組
織塊 但現(xiàn)行的醫(yī)院工作制度允許患者可以憑會(huì)診單
位的借條用借病理切片,并規(guī)定借出切片應(yīng)于1個(gè)月
內(nèi)歸還:【1j而蠟塊原則上不能借出,如會(huì)診單位認(rèn)為切
片質(zhì)量不理想、影響診斷,而原單位又無法保證切片
質(zhì)量時(shí)應(yīng)予借出:如會(huì)診單位要求做特殊染色或免疫
組化等檢查時(shí),原單位不能完成或不能保證質(zhì)量時(shí),也應(yīng)予以借出。同意出借的蠟塊原則上只能做一次切
片,以不超過10張為宜,蠟塊用后應(yīng)及時(shí)歸還。[1
1因此,盡管病人所指定的會(huì)診單位、醫(yī)生可以從
i作者簡(jiǎn)介】謝英(1971一),女,四川省內(nèi)江市人,在讀碩士研究生,從事法醫(yī)病理學(xué)研究。
tel:+86—028—85446597:e—mail xieyingl 024@1 26 com
法律與醫(yī)學(xué)雜志2005年第12卷(第1期)
原醫(yī)療機(jī)構(gòu)中獲得原始切片.病人一般不可能直接擁
有這些離體材料。至于借 的這些生物材料的保管和
維
護(hù)職責(zé)限定,我國(guó)目前尚無具體規(guī)定。管理?xiàng)l例允
許醫(yī)院向借方收取一定的押金,如果逾期不還者,可
以沒收押金,并未限定保管和維護(hù)職責(zé),這可能導(dǎo)致
切片借出后的管理混亂。如果切片因此而丟失,誰承
擔(dān)責(zé)任呢?關(guān)于這點(diǎn),筆者認(rèn)為可以借鑒國(guó)外相關(guān)法
律,如美國(guó)康涅狄格f州)的法律要求,在有病人、病人的代理
人或病人指定的健康保護(hù)人的書面要求時(shí),醫(yī)
院或?qū)嶒?yàn)室應(yīng)“直接分送原始保存的組織切片或者碎
片給病人指定具有許可資格的機(jī)構(gòu)、醫(yī)生或?qū)嶒?yàn)室”;
l|“如果原始切片或組織塊不能提供或者他們的新切
部分能夠完全代替原始的切片或碎片組織塊”時(shí).允
許醫(yī)院或文驗(yàn)室分送新的切片給病人的健康保護(hù)人:
這些材料的接收者獨(dú)自對(duì)保護(hù)和返還給醫(yī)院或?qū)嶒?yàn)
室負(fù)責(zé),任何發(fā)出原始切片或碎片或者新切片的醫(yī)院
或?qū)嶒?yàn)室,這些材料損壞或者丟失承擔(dān)任何責(zé)任:它
們還允許醫(yī)療機(jī)構(gòu)收取“必要的費(fèi)用來支付這些材料的關(guān)于提供原始保存切片、原始組織塊或者保存的病
理組織碎片中新切的切片而產(chǎn)生的費(fèi)用”。
在該領(lǐng)域有一個(gè)案例可以明確地表達(dá)出上述觀
點(diǎn):在connelio v stamford醫(yī)院,一個(gè)同意進(jìn)行多張涂
片檢查的病人要求重新得到這些涂片,以作為誤診證
據(jù)向其醫(yī)師索賠,3康涅狄格的最高法院認(rèn)為該病人
不具備“直接擁有這些切片的”資格。該法庭認(rèn)為原告的這些涂片是她醫(yī)療記錄中的一部分.因此,當(dāng)然屬
于醫(yī)院擁有。法庭推斷醫(yī)院沒有被要求直接發(fā)出這些
原始切片給病人,而只能給被病人指定的健康保護(hù)
人?!耙粋€(gè)可假定的知道怎樣處理這些切片的人。
二、關(guān)于病理學(xué)家及其實(shí)驗(yàn)室對(duì)處理這些離體生
物材料的權(quán)限問題
病理學(xué)家及其實(shí)驗(yàn)室在保管這些病理組織、病理
切片和組織碎片應(yīng)該有什么樣的權(quán)、責(zé)呢?主要包括:
(1)保管的時(shí)限。(2)病理學(xué)家及其實(shí)驗(yàn)室是否可以隨
意分發(fā)這些生物材料給其他醫(yī)療機(jī)構(gòu)或者用于治療、診斷以外的其他目的(一)保管時(shí)限
某職_t二醫(yī)院一位60多歲的女性心包積液患者,(美)corm general statutes annotated§19a一49oh(a).(美)corm general statutes annotated§19a一49oh(a).
connelio、stamford hospital,246 corm 1 998;45.
connelio、stamf ord hospital,246 corm 1 998;45.
(美)42 code of federal regulations~493.1257—1259
(美)42 code of federal regulations~493.1257—1259
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其心包穿刺液檢查發(fā)現(xiàn)有“癌細(xì)胞”,1周后該患者出
院到另一家醫(yī)院診治.此時(shí)患者的病況不允許再進(jìn)行
心包穿刺,當(dāng)患者家屬要求原醫(yī)院提供細(xì)胞涂片會(huì)診
時(shí),原醫(yī)院病理科已將涂片丟棄。那么,這些生物性檢
材究竟該保存多長(zhǎng)時(shí)間呢?
在我國(guó)的相關(guān)條例中,關(guān)于病理組織、病理切片
和組織碎片保管時(shí)限的規(guī)定尚不明確。在1991年發(fā)
布的《醫(yī)藥衛(wèi)生檔案管理暫行辦法》中,僅提及病理切
片應(yīng)該歸檔管理,無時(shí)間限定:在一些醫(yī)院管理或制
度、職責(zé)或規(guī)范的書著中,對(duì)病理組織、病理切片的時(shí)
限有一些規(guī)定,但并不確切。如:活檢大體標(biāo)本一般保
存1個(gè)月.而后根據(jù)需要,分別保留或丟棄:凡有教學(xué)
研究?jī)r(jià)值或兇其他原因而必須保留的標(biāo)本,可制作永
久性的標(biāo)本保存:蠟塊應(yīng)長(zhǎng)期保存:切片等予以歸檔
存放。?又如:1982年衛(wèi)生部制定的《醫(yī)院] 作制度》
規(guī)定:病理切片應(yīng)編號(hào)長(zhǎng)期保存 有價(jià)值的病理標(biāo)本
要妥善保管?;顧z大體標(biāo)本一般保存半年,組織切片
和蠟片以及有科研、教學(xué)價(jià)值的標(biāo)本應(yīng)分類長(zhǎng)期保
存。這些規(guī)定不統(tǒng)一,時(shí)間限定模糊,病理學(xué)家及其實(shí)
驗(yàn)室實(shí)際操作起來有一定的肓目性 兇此,參考美國(guó)
1998年的臨床實(shí)驗(yàn)室提高修正案(clia)和美國(guó)病理
學(xué)學(xué)會(huì)(cap)制定的條款對(duì)我國(guó)相關(guān)法規(guī)的制定有
一定的指導(dǎo)作用。
美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室提高修正案(ci ia)規(guī)定:實(shí)驗(yàn)室
必須保存“被染色的切片至少10年(從被檢之日起).
而碎片標(biāo)本至少2年”: 濕組織應(yīng)該存放給出最后的報(bào)告結(jié)果后保存至少2周:[31保存所有的細(xì)胞切片制
本自檢查之日起.不管診斷與否,至少5年:
美國(guó)病理學(xué)學(xué)會(huì)(cap)提 實(shí)驗(yàn)室保存切片、組
織碎片和手術(shù)病理報(bào)告至少10年:濕組織應(yīng)該在被
給出最后的報(bào)告結(jié)果后保存至少2同;保存所有細(xì)胞
切片5年,好的針吸切片和細(xì)胞報(bào)告至少20年;cap
還推薦實(shí)驗(yàn)室應(yīng)該保存細(xì)胞遺傳學(xué)切片3年,任何診
斷影像(被數(shù)字化的資料或底片)和最后的報(bào)告至少
20年。[
21在美國(guó)不同的州法律和其他的聯(lián)邦法律還可能要
求將這些材料保存更長(zhǎng)的時(shí)間。例如,紐約要求“組織
病理切片應(yīng)保存20年”。另外.?丁學(xué)術(shù)或研究目的· 34 ·的切片可能值得被特別的實(shí)驗(yàn)室更長(zhǎng)時(shí)間的存儲(chǔ)。
f二)病理學(xué)家及其實(shí)驗(yàn)室是否可以隨意分發(fā)這些
生物材料給其他醫(yī)療機(jī)構(gòu)或者用于治療、診斷以外的其它目的在我國(guó)目前的病理機(jī)構(gòu)現(xiàn)狀中。病理組織會(huì)診是
一種常見的運(yùn)作方式。除此之外。病理組織還可能會(huì)
用于治療、診斷以外的其他目的而分送出原保管機(jī)
構(gòu),如研究、健康保險(xiǎn)、上報(bào)給國(guó)家醫(yī)療機(jī)構(gòu)等。由于
分發(fā)這些生物材料可能涉及患者的個(gè)人健康信息的隱私,原保管機(jī)構(gòu)能否隨意支配這些材料呢?在我國(guó)
目前的法律、法規(guī)中尚無任何明確規(guī)定。嚴(yán)格說來,原
醫(yī)療機(jī)構(gòu)理應(yīng)保護(hù)這些材料中包含的患者的隱私不
被泄露,在分發(fā)這些病理材料給其他機(jī)構(gòu)時(shí),不管出
于什么目的,原則上都應(yīng)得到患者本人的同意才能體
現(xiàn)出對(duì)患者隱私權(quán)的尊重。由于病理學(xué)家通常被認(rèn)為
是間接治療者,他們一般為其他醫(yī)生進(jìn)行檢測(cè)并且為
他們報(bào)告結(jié)果。因此。作為間接治療者,病理學(xué)家可能
會(huì)使用或公開帶有個(gè)人識(shí)別信息的病理組織、病理切
片和組織碎片用以治療、支付或健康照顧操作目的、質(zhì)量保險(xiǎn)計(jì)劃中使用而不經(jīng)過病人的任何允許。①因
此.限定其處理權(quán)責(zé)對(duì)保護(hù)患者隱私有重要意義。
筆者認(rèn)為,如何支配這些材料應(yīng)據(jù)他們分發(fā)病理
組織、病理切片和組織碎片的具體目的而定。例如在美國(guó),當(dāng)分發(fā)病理組織、組織碎片和病理切片用以研
究時(shí),以下情況可以不經(jīng)患者同意:(1)公開是被社會(huì)
公共機(jī)構(gòu)調(diào)查部門或有特別檢查明確保密要求的保
密部門所贊同的。(2)該個(gè)人健康信息將被用于發(fā)展
一個(gè)研究記錄。(3)公開的個(gè)人健康信息僅限于死者的信息。(4)公開局限于去除了可以識(shí)別個(gè)人健康信
息的數(shù)據(jù)且遵從數(shù)據(jù)使用協(xié)議。②除以上情況外,病
理學(xué)家及其實(shí)驗(yàn)室分發(fā)這些病理組織、病理切片和組
織碎片都應(yīng)該獲得病人的同意或授權(quán)后才可以實(shí)行。
三、在處理這些離體生物材料時(shí)如何保護(hù)病人的個(gè)人隱私
《中華人民共和國(guó)執(zhí)業(yè)醫(yī)師法》要求醫(yī)師在執(zhí)業(yè)
活動(dòng)中不得泄露病人的隱私.這要求病理學(xué)家及其實(shí)
驗(yàn)室分發(fā)這些病理組織、病理切片和組織碎片時(shí)要保
護(hù)病人的隱私。當(dāng)一名癌癥患者要求對(duì)他的癌癥診斷
法律與醫(yī)學(xué)雜志2005年第12卷(第1期)
進(jìn)行病理會(huì)診時(shí),必然會(huì)涉及其個(gè)人信息的轉(zhuǎn)移。原
保管機(jī)構(gòu)如何才能在這種操作環(huán)境下保護(hù)患者的隱
私呢?關(guān)于個(gè)人健康信息的隱私權(quán)標(biāo)準(zhǔn),我國(guó)尚未明
確界定。本文仍以美國(guó)的現(xiàn)行法案為參照。對(duì)這一領(lǐng)
域進(jìn)行概述,希望對(duì)國(guó)內(nèi)可能出現(xiàn)的類似情形起一定的借鑒作用。
美國(guó)1996年的健康保險(xiǎn)的可攜帶性和責(zé)任法
案,publ04—191(hipaa),建立的關(guān)于個(gè)人健康信息的隱私保護(hù)的權(quán)力標(biāo)準(zhǔn)可供我們參考。個(gè)人可識(shí)別的健康信息(phi)就是以下信息:(1)被健康提供者、健
康計(jì)劃、雇主或健康保護(hù)票據(jù)交換所建立或接受的信
息。(2)與一個(gè)人身心健康或狀態(tài)相關(guān)的、一個(gè)人健康
保護(hù)提供、或支付個(gè)人健康保護(hù)提供相關(guān)的信息。(3)
鑒別個(gè)人或提供一個(gè)合理的基礎(chǔ)以相信這些信息能
夠被用于個(gè)人識(shí)別。③具體而言,個(gè)人可識(shí)別的健康
信息既是攜帶有18個(gè)指定的識(shí)別符的信息,這些被
hipaa指定的識(shí)別符包括:名字、地點(diǎn)、日期(尤其是
年份)和年代早于1989年、電話號(hào)碼、傳真號(hào)碼、郵件
地址、社會(huì)保障號(hào)碼、醫(yī)學(xué)記錄號(hào)碼、健康計(jì)劃受益人
號(hào)碼、賬戶號(hào)碼、證書或執(zhí)照號(hào)碼、機(jī)動(dòng)車識(shí)別號(hào)碼和
連續(xù)號(hào)碼、設(shè)備識(shí)別號(hào)碼和連續(xù)號(hào)碼、統(tǒng)一資源土地、國(guó)際互聯(lián)網(wǎng)原始地址、生物統(tǒng)計(jì)識(shí)別符包括指紋、聲
紋、全臉的照片以及任何其他獨(dú)特的識(shí)別號(hào)碼或特
征。
按照hipaa.病理組織、組織碎片和病理切片本
身不是被保護(hù)的健康信息,但當(dāng)其被公開。與公開伴
隨的信息基于法律條款的規(guī)定則可能是受保護(hù)的健
康信息。例如,一個(gè)人提供細(xì)胞給研究者,并且告訴研
究者這些是可識(shí)別的個(gè)人的癌細(xì)胞,與之伴隨的情形
就是被保護(hù)的關(guān)于個(gè)人的健康信息。⑤因此如果一個(gè)
實(shí)驗(yàn)室分送切片用以會(huì)診。這個(gè)切片必然包括個(gè)人的可識(shí)別的數(shù)據(jù)。在這種場(chǎng)合下,實(shí)驗(yàn)室必須遵從關(guān)于
個(gè)人健康信息相關(guān)的hipaa條款。
獲得授權(quán)是保護(hù)和尊重患者隱私權(quán)的一種重要
且有效的手段。美國(guó)1996年的健康保險(xiǎn)的可攜帶性
和責(zé)任法案條例提出大量關(guān)于授權(quán)的要求。病理學(xué)家
和研究室為了研究目的,在分發(fā)帶有任何可識(shí)別信息的病理組織、組織碎片和病理切片前,必須從病人處
健康照顧操作包括品質(zhì)評(píng)價(jià)和改善活動(dòng)、委派證書、執(zhí)照,或委任行為、醫(yī)學(xué)檢查、法律服務(wù)、或?qū)徍斯δ躿或商業(yè)計(jì)劃、發(fā)展、管理、和一般的行
政活動(dòng)。see:(美)45 code of federal regulations§1 64.506(a)and 45 c f r§1 64.520(c)(2)(ii)
(美)conn general statutes annotated§1 64.5 14(e).
④(美)45 code of federal regulations§164.501—514.
(美)45 code of federal regulations§164.501—514.
(美)65 federal register 82462,82533(december 28,2ooo).
法律與醫(yī)學(xué)雜志2005年第l2卷(第1期)
獲得有效的授權(quán)。病理學(xué)家可能會(huì)使用這些早年收集的材料用以研究,如果他們獲得病人的知情同意形式的表示,即使這個(gè)同意沒有符合現(xiàn)行的hipaa應(yīng)允
授權(quán)的要求,它們也可以被用于研究。然而,如果沒有
獲得知情同意.而病理學(xué)家又希望使用這些材料用于
研究,他們要么從病人處獲得授權(quán)(這可能是不切實(shí)
際甚至不可能的,有賴于這個(gè)材料獲得有多長(zhǎng)的時(shí)
間),要么在2003年4月14日以前(hipaa條例的應(yīng)用時(shí)間),通過社會(huì)公共機(jī)構(gòu)審查部門獲得一個(gè)明
確同意的棄權(quán)證書,以便使用這些材料。
在一些少見的場(chǎng)合下,病理學(xué)家是應(yīng)病人要求進(jìn)
行檢測(cè)并出報(bào)告結(jié)果給病人,此時(shí)實(shí)驗(yàn)室及病理學(xué)家
被認(rèn)為是直接的處理供體。在這種情況下,在使用病
人的個(gè)人可識(shí)別的健康信息用以治療、支付或健康照
顧操作前,病理學(xué)家必須獲得病人書面的保密準(zhǔn)則通
知的確認(rèn)書,該確認(rèn)書要按照hipaa條例羅列出提
供者的保密要點(diǎn)。②
美國(guó)1996年的健康保險(xiǎn)的可攜帶性和責(zé)任法案
規(guī)定的授權(quán)在以下情況可以不予實(shí)行:④(1)公開個(gè)
人可識(shí)別的健康信息是因?yàn)楣步】档脑?,如在?guó)
家法律要求下報(bào)告新癌癥病例給國(guó)家癌癥調(diào)查機(jī)構(gòu)。
(2)作為調(diào)查的一部分公開個(gè)人可識(shí)別的健康信息、發(fā)給許可證或紀(jì)律的行為或法律行政行為。(3)響應(yīng)
傳審或發(fā)現(xiàn)要求公開個(gè)人可識(shí)別的健康信息。
四、誰有權(quán)從研究切片、組織或組織碎片中獲益
隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)和病理學(xué)的快速發(fā)展,對(duì)病理組
織、切片進(jìn)行研究可能會(huì)與商業(yè)利益聯(lián)系起來,這時(shí)
勢(shì)必涉及利益的分配問題。在被美國(guó)醫(yī)學(xué)機(jī)構(gòu)提出的5個(gè)專利申請(qǐng)中,其中一個(gè)發(fā)明來自于病人的體液或
細(xì)胞。i4]如moore對(duì)加利福尼亞大學(xué)董事的訴訟案5_
中.一個(gè)細(xì)胞系的來源也是得益于對(duì)患者已切除的脾
臟組織的研究。由于醫(yī)學(xué)科學(xué)技術(shù)的發(fā)展和科研手段的提高,從研究切片、組織或組織碎片中獲益的事例
會(huì)越來越多,分清誰有權(quán)從研究切片、組織或組織碎
片中獲益顯得尤為重要,病理學(xué)家應(yīng)該怎樣做才能更
好地保護(hù)他們?cè)谑褂闷溆糜谘芯炕蚱渌侵委熌康臅r(shí)的利益呢?我國(guó)目前無相關(guān)規(guī)定,也無此類案例發(fā)
生。在國(guó)外,目前也只有很少法律、法規(guī)明確了病人具
有其組織的所有權(quán).如美國(guó)喬治亞州明確規(guī)定基因信
息是個(gè)人的財(cái)產(chǎn)。同但是,這些法律沒有直接陳述誰
有權(quán)從研究組織、切片和組織碎片中獲益的問題。在· 35 ·
這個(gè)問題上,分析moore對(duì)加利福尼亞大學(xué)董事的訴
訟這一典型案例對(duì)病理學(xué)家及其實(shí)驗(yàn)室以后的實(shí)際
操作有重要的示范和指導(dǎo)作用。
原告john moore,是加利福尼亞大學(xué)洛杉磯醫(yī)學(xué)
中心的一名多毛細(xì)胞白血病患者。兇為moore的病況
很少見且具有特征性,醫(yī)生確信其組織有著重要的研
究?jī)r(jià)值。醫(yī)生告知moore,切除他的睥臟是臨床治療
所必需的,并收集這些標(biāo)本進(jìn)行研究 moore不知道
他的醫(yī)生使用其脾臟并非用于治療目的.而他的醫(yī)生
和一名研究者用這些組織來發(fā)展出一個(gè)細(xì)胞系.他們
憑此取得淋巴因子產(chǎn)生方法的專利權(quán) 這些專利的市
場(chǎng)評(píng)估價(jià)值是l0億美元。而研究者,moore的醫(yī)生、加利福尼亞董事與一生物技術(shù)公司簽定了股份合同.
并且從來自moore的組織的研發(fā)產(chǎn)品中獲益 在法庭
上,moore辯稱他的組織以及由其組織產(chǎn)生的細(xì)胞系
是他的財(cái)產(chǎn),因此他有權(quán)從研究產(chǎn)品中獲益。moore
還起訴他的醫(yī)生沒有得到其本人的完全同意而使用
其組織進(jìn)行研究的欺詐行為。
受理訴訟的加利福尼亞法院認(rèn)為,財(cái)產(chǎn)法也適用
于組織內(nèi)容物及研究結(jié)果,moore有權(quán)提出訴訟。然
而,在上訴中,加利福尼亞的高等法院駁回財(cái)產(chǎn)訴訟,并因此推翻了初審法院的庭審結(jié)果。高等法院主要從
3個(gè)領(lǐng)域駁回初審法院財(cái)產(chǎn)權(quán)的裁決 第一,高等法
院認(rèn)為,缺乏條例或案例來支持moore對(duì)人類異常的組織成分的財(cái)產(chǎn)權(quán)的申訴。第二,根據(jù)加利福尼亞的法律,該州有權(quán)決定怎樣處理組織。盡管條例提到公
共健康和安全目的,加利福尼亞的高等法院解釋了這
個(gè)條例作為一個(gè)病人對(duì)離體組織的所有權(quán)力的普遍
性的縮減。第三,加利福尼亞高等法院發(fā)現(xiàn)這個(gè)細(xì)胞
系及其任何伴隨產(chǎn)品都不是moore的財(cái)產(chǎn),因?yàn)樗麄?/p>
不同于那些自然發(fā)生的細(xì)胞。當(dāng)然,發(fā)展自moore組
織的細(xì)胞系和方法的專利是“人類創(chuàng)造性”的產(chǎn)品。該
專利被當(dāng)作法律上的重要手段來區(qū)分來自moore原
始細(xì)胞的細(xì)胞系。因此,即使moore曾一度擁有他的細(xì)胞.但他的所有權(quán)不會(huì)擴(kuò)展到源自他的或這些細(xì)胞的細(xì)胞系和產(chǎn)品。加利福尼亞高等法院以強(qiáng)調(diào)公共政
策的正當(dāng)理由來駁回moore的財(cái)產(chǎn)訴訟,認(rèn)為通過阻
止令人心寒的責(zé)任承擔(dān)方向的影響,促進(jìn)研究是公共的最好利益。它認(rèn)為moore和其他潛在的原告應(yīng)該經(jīng)
由其他法理為這種違法類型尋求法律援助,例如,違
背信用職責(zé)(應(yīng)訴欺詐行為)和知情同意權(quán)法律(應(yīng)訴
①(美)45 code of federal regulations~164.501—514.
②(美)45 code of federal regulations~164.506(a)and 45 c f r~164.520(c)(2)(ii)
③(美)45 code of federal regulations~164.501—514.
· 36 ·
隱瞞使用moore的細(xì)胞的目的)。加利福尼亞高等法
院表達(dá)了他們的擔(dān)心:應(yīng)允這類類型的案件可能會(huì)在財(cái)產(chǎn)權(quán)力上擴(kuò)張得過多,而不是在有價(jià)值的研究的代
價(jià)上。因此,在該案例中,加利福尼亞高高等法院認(rèn)為
病人無權(quán)從用于研究的組織應(yīng)用中獲益。然而,加利
福尼亞高等法院也通過聲明把他的結(jié)論限制在具體的場(chǎng)合下,“我們并不支持持有這樣的觀點(diǎn):那些離體
細(xì)胞在任何情況下都不能作為財(cái)產(chǎn)”。
到目前為止,只有少數(shù)案例明確了諸如誰有權(quán)從
研究病人的組織中獲益等問題。它們多集中在移除的器官(如角膜)和生殖材料(如精子)的財(cái)產(chǎn)權(quán)上。盡管
這些案例引發(fā)了法律討論,他們還沒有直接應(yīng)用到最
近的涉及病理學(xué)家的問題上.即關(guān)于擁有組織、切片
和組織塊的權(quán)利和從研究它們而獲益的權(quán)利。
由于在這個(gè)領(lǐng)域里尚缺乏可解決的法律,一些職
業(yè)協(xié)會(huì)已經(jīng)尋求制定“從使用組織獲益的問題上和關(guān)
于組織所有權(quán)的一般法律及倫理關(guān)系”指導(dǎo)標(biāo)準(zhǔn)。這
些指導(dǎo)盡管沒有法定約束力,但可能會(huì)幫助病理學(xué)家
了解怎樣實(shí)際對(duì)付這些問題。美國(guó)醫(yī)學(xué)協(xié)會(huì)(ama)出
版了一個(gè)針對(duì)目前醫(yī)學(xué)問題的倫理守則和觀點(diǎn)——
《關(guān)于人類組織的商業(yè)使用》的倫理準(zhǔn)則規(guī)定:[刀(1)
在使用器官或組織進(jìn)行臨床研究時(shí),必須獲得病人的知情同意。(2)在利益被實(shí)現(xiàn)成生物源性材料的產(chǎn)品
之前,具潛在商業(yè)價(jià)值的應(yīng)用必須對(duì)病人公開。(3)沒
有得到提供原始細(xì)胞材料的病人的同意,人類組織及
其產(chǎn)品不得用于商業(yè)目的。(4)使用人類組織及其產(chǎn)
品獲得的商業(yè)利益可以被病人分享,要與法律合同協(xié)
議一致。(5)醫(yī)生提供給病人的診斷和治療的選擇應(yīng)
當(dāng)符合良好的醫(yī)學(xué)實(shí)踐標(biāo)準(zhǔn),而不應(yīng)當(dāng)受到病人組織的潛在商業(yè)價(jià)值的影響 雖然這些美國(guó)醫(yī)學(xué)協(xié)會(huì)的倫
理準(zhǔn)則還沒有直接地指明利益的歸屬權(quán).但它們強(qiáng)調(diào)
了當(dāng)從事具潛在商業(yè)價(jià)值的應(yīng)用性研究的時(shí)候.尊重
病人的知情同意權(quán)顯得尤其重要。美國(guó)病理學(xué)學(xué)會(huì)關(guān)
于《使用人類組織用于研究、教育和質(zhì)量控制》的法規(guī)
也強(qiáng)調(diào)知情同意權(quán)的重要性,[81他們尤其建議承諾的形式應(yīng)該是書面的而非空白的承諾,以便病人明確地
表示接受或拒絕捐獻(xiàn)其組織用于教育或研究目的。
而病理學(xué)家能做些什么才能最好地保護(hù)他們?cè)谑褂媒M織、切片或碎片用于研究或其他非治療目的時(shí)的利益?正如moore對(duì)加利福尼亞大學(xué)董事的訴訟案
所提倡以及專業(yè)協(xié)會(huì)的觀點(diǎn),獲得病人的使用其組織的完整的知情同意.是病理學(xué)家和實(shí)驗(yàn)室回避職責(zé)和
保護(hù)病人在研究方面的利益的最好的方式 [5_對(duì)于已
經(jīng)被實(shí)驗(yàn)室擁有的組織標(biāo)本.得到知情同意可能太
法律與醫(yī)學(xué)雜志2005年第l2卷(第l期)
遲,然而,病理學(xué)家可能希望使標(biāo)本匿名化來保護(hù)捐
獻(xiàn)者的隱私.病理學(xué)家也應(yīng)該咨詢社會(huì)公共機(jī)構(gòu)審查
部門的公共機(jī)構(gòu)來決定怎樣處理這些材料。
為了尋求獲得標(biāo)本,病理學(xué)家應(yīng)決定適當(dāng)?shù)墓_
和承諾尺度,也就是真正的知情同意。例如,合適的公
開范圍可能依賴于:(1)組織標(biāo)本最初被用來治療還
是研究目的。(2)組織標(biāo)本是獨(dú)特的(也就是moore似的組織標(biāo)本),還是普通的(也就是做常規(guī)檢查的組織
標(biāo)本)。[61通過更多的向病人公開,病理學(xué)家和實(shí)驗(yàn)室
能夠更好地確保他們?cè)趯?shí)際操作中遵守知情同意的要求 例如,根據(jù)美國(guó)醫(yī)學(xué)協(xié)會(huì)指導(dǎo)準(zhǔn)則,醫(yī)生應(yīng)該公
開:(1)標(biāo)本將被用于研究,和(2)從研究中獲取的經(jīng)
濟(jì)利益的可能性的范圍。[7]
在類似moore對(duì)加利福尼亞大學(xué)董事的訴訟案
中,在病人的組織是特別的情況下,醫(yī)生可能希望向病
人揭示它的獨(dú)特性和他們組織潛在的價(jià)值和研究的特
別目的??赡艿慕?jīng)濟(jì)利益的公開,應(yīng)該小心地用詞,既
不夸大商業(yè)獲利的可能性,也不強(qiáng)制參與。醫(yī)生可能會(huì)
在利益的驅(qū)使下加入病人放棄所有關(guān)于他們組織離體
以后的權(quán)利的條款,這樣的解決方案應(yīng)當(dāng)避免,因?yàn)槿?/p>
果放棄的條款太寬廣(即病人放棄太多權(quán)利),法庭可
能會(huì)認(rèn)為他們是不能執(zhí)行的條款。[91另外,實(shí)驗(yàn)室可
能還希望考慮到一個(gè)可能的決定退出的策略。
在以上關(guān)于知情同意要求的建議內(nèi),病理學(xué)家應(yīng)
該做什么?病理學(xué)家可能希望得到以下保證:(1)病人
已被告知參與研究的可能的風(fēng)險(xiǎn)和利益。(2)病人已
經(jīng)同意使用其標(biāo)本進(jìn)行研究。(3)病人已被告知在其
研究中可能的任何商業(yè)利益。(4)已經(jīng)被實(shí)驗(yàn)室保存的組織是匿名制備的或被授予社會(huì)公共機(jī)構(gòu)審查部
門棄權(quán)的五、結(jié)論
綜上所述,筆者認(rèn)為,生物性的材料一經(jīng)離體,按
照相關(guān)法規(guī)應(yīng)由醫(yī)院保管并遵守一定的保管時(shí)限:病
人有權(quán)復(fù)閱作為其部分醫(yī)學(xué)記錄的病理資料,但是沒
有這些離體的生物材料的直接所有權(quán)。當(dāng)病人要求進(jìn)
行病理會(huì)診時(shí),醫(yī)院應(yīng)當(dāng)直接提供原始切片、組織塊
或者是足以代替原始切片的重新切片給病人指定的會(huì)診單位.而不應(yīng)交給患者本人;病理學(xué)家及其實(shí)驗(yàn)
室分發(fā)這些病理組織、病理切片和組織碎片用于研究
或其他非治療目的時(shí)要保護(hù)病人的隱私:獲得病人的知情同意和授權(quán)是保護(hù)患者隱私及病理學(xué)家利益的最好的辦法,也是解決由于研究這些材料產(chǎn)生的可能的商業(yè)利益后的利益歸屬問題的可行辦法。因?yàn)樵谶@
個(gè)領(lǐng)域尚無明確的法律法規(guī)規(guī)定,病理學(xué)家在實(shí)際操
法律與醫(yī)學(xué)雜志2005年第l2卷(第1期)
作中具有一定的盲目性,病理學(xué)家應(yīng)小心遵循我國(guó)的醫(yī)院工作制度、職責(zé)及規(guī)范,讓自己熟悉在其權(quán)限內(nèi)的法律要求,尋求專業(yè)協(xié)會(huì)的意見指導(dǎo),使之順從涉
及科學(xué)和商業(yè)研究目的之間的倫理關(guān)系。在處理實(shí)際
工作中謹(jǐn)慎行事,以免為自己帶來不必要的麻煩。同
時(shí),盡快制定各行業(yè)的行為規(guī)范,予以法律的效力,才
能最大限度地保護(hù)病理學(xué)家和患者雙方面的利益,推
動(dòng)我國(guó)醫(yī)學(xué)事業(yè)發(fā)展。
參考文獻(xiàn)
[1] 高世明,李旭,郭曉東主編,現(xiàn)代醫(yī)院診療常規(guī)[m].合肥:安徽科學(xué)
技術(shù)出版社.2003:1569~1571
[2]
[3]
college of american pathologists.rentention of laboratory
.
records
and materials[m] . adopted august 1995;and revised november
2o01
livolsi va.use of human tissue blocks for research[j].a(chǎn)m j clin
pathol,1996,105:260
· 37 ·
andrews lb:my body,my property[j].hastings center pep,1986,16:28
moore v regents of univerity of california,793 p.2d 479(cal 1990)
mohapatra s,kalogjera l:who owns these slides?overview of legal
issues facing pathologists an d laboratories when saving and senging
out tissues,slides,and tissue blocks[j].pstholo~-case reviews.2003
8(3):90~97
ama current opinions of the council on ethical and judicial affairs
§2.2002:08
college of american pathologists policy on uses of human tissue in
research,education,and quality control[c].a(chǎn)dopted august 1996;
reaffirmed august 20o0
greenberg w,kamin d.:property rights an d payment to patients for
cell lines derived from human tissues:an economic analysis[j].soc sci
med 1993;36:1071~1075.
(收稿:2004—06—17,修回:2004—09—22)
第二篇:病理組織工作站
快速石蠟切片病理診斷
我院病理科引進(jìn)的鈞鎰超聲組織處理儀(病理組織工作站),病理常規(guī)石蠟切片診斷報(bào)告一般需時(shí)3~5天,在病人病情危急或者是腫瘤病人的診斷中,臨床活檢,用常規(guī)石蠟制片法制作,病理報(bào)告如沒特殊情況,一般都需要三天才能發(fā)出。其程序基本是活檢當(dāng)天下午取材,晚上組織脫水及浸蠟,第二天上午包埋切片及染色,當(dāng)切片送達(dá)醫(yī)生手里時(shí),已是第二天的上午,下午看閱切片,至復(fù)檢醫(yī)生手里時(shí),已是第三天的時(shí)間了。這是一般的工作時(shí)間,可這對(duì)于急需獲得病理結(jié)果的患者來說,三天時(shí)間確實(shí)太長(zhǎng),尤其是門診病人,遠(yuǎn)道求醫(yī)的患者,或者外地的患者,三天的時(shí)間就意味著等待,住宿及消費(fèi)。為了解決上述的問題,減少患者的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān),為患者蠃來保貴的治療時(shí)間,超聲波快速石蠟制片法可勝任此項(xiàng)工作。最新超聲波快速石蠟制片機(jī),開展了快速石蠟切片病理檢查。
超聲波快速石蠟制片機(jī)能提高組織內(nèi)分子和溶劑分子的運(yùn)動(dòng)速度,它能使組織的蛋白質(zhì)迅速發(fā)生凝固并保持細(xì)胞原結(jié)構(gòu),因而能快速固定組織并保持組織的外形和柔韌性,有利于切片。超聲波快速石蠟制片具有操作簡(jiǎn)便,時(shí)間短不易誤診,病理切片資料可長(zhǎng)期保存等優(yōu)點(diǎn),目前病理科經(jīng)過一段時(shí)間的前期準(zhǔn)備及試驗(yàn)工作,該項(xiàng)目質(zhì)量可靠,結(jié)果穩(wěn)定,制片質(zhì)量近似于常規(guī)石蠟切片技術(shù),完全符合病理診斷的要求,大大地提高了工作效率。
應(yīng)用超聲波快速石蠟制片機(jī),一般可以在6小時(shí)工作時(shí)間內(nèi)發(fā)出常規(guī)病理診斷報(bào)告(上午11點(diǎn)前送檢標(biāo)本,當(dāng)天下午5點(diǎn)前發(fā)出報(bào)告;下午4點(diǎn)前送檢標(biāo)本,次日上午12點(diǎn)前發(fā)出報(bào)告)。該項(xiàng)目按淄博市物價(jià)收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)收費(fèi),如科室病人有需要做快速石蠟病理檢查,請(qǐng)醫(yī)生及時(shí)將其標(biāo)本送到病理科。
開展快速石蠟切片病理診斷技術(shù),既能使患者得到盡早診斷,從而得到及時(shí)治療,減輕痛苦,同時(shí)又能使病人縮短就診時(shí)間及住院天數(shù),減輕醫(yī)療費(fèi)用,方便了病人,實(shí)為一種優(yōu)質(zhì)、簡(jiǎn)便、安全、快速的好方法。
醫(yī)生申請(qǐng)快速石蠟切片病理檢查的注意事項(xiàng):
1、如需做快速石蠟病理檢查,請(qǐng)?jiān)谏暾?qǐng)單上注明快速石蠟病理檢查。
2、如送檢標(biāo)本為少見疑難病例,需要進(jìn)一步做免疫組化檢查,在6小時(shí)內(nèi)發(fā)出初檢報(bào)告,免疫組化報(bào)告3工作日內(nèi)發(fā)出。
3、為保證工作順利進(jìn)行,請(qǐng)需做快速石蠟病理切片的標(biāo)本,離體后立即用福爾馬林固定,并由專人快速送到病理科檢查。
4、骨組織及淋巴結(jié)組織建議做常規(guī)石蠟病理切片檢查。
5、周六、日不做快速石蠟切片檢查。
計(jì)劃首先開放科室:胃腸鏡活檢,耳鼻喉活檢,宮頸活檢,子宮內(nèi)膜刮出組織。
第三篇:組織病理切片的制作流程
組織病理切片的制作流程
1. 取材
組織取材的方法是制作切片的一個(gè)重要程序,根據(jù)教學(xué)、科研及外檢的具體要求取自人體(外科手術(shù)切除標(biāo)本、活檢標(biāo)本、尸檢標(biāo)本)或動(dòng)物,并確定取材的部位和方法。取材者需要掌握解剖學(xué)、組織學(xué)、病理學(xué)的基本理論知識(shí),還要掌握實(shí)際操作技術(shù),每個(gè)組織器官的取材都有一定的部位和方法,不能任意切取組織作為制片材料,不然,無法達(dá)到教學(xué)、科研和臨床診斷的目的,具體要求如下:
(1)材料新鮮:取材組織愈新鮮愈好,人體組織一般在離體后,動(dòng)物組織在處死后迅速固定,以保證原有的形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)。
(2)組織塊的大?。核〗M織塊較理想的體積為2.0cm×2.0cm×0.3cm,以使固定液能迅速而均勻地滲入組織內(nèi)部,但根據(jù)制片材料和目的不同,組織塊的較理想體積也不同,如制作病理外檢、科研切片,其組織塊可以薄取0.1~0.2cm即可,這樣可以縮短固定脫水透明的時(shí)間,若制作教學(xué)切片厚取0.3 ~0.5cm,這樣可以同一蠟塊制作出較多的教學(xué)切片。
(3)勿擠壓組織塊: 切取組織塊用的刀剪要鋒利,切割時(shí)不可來回銼動(dòng)。夾取組織時(shí)切勿過緊,以免因擠壓而使組織、細(xì)胞變形。
(4)規(guī)范取材部位: 要準(zhǔn)確地按解剖部位取材,病理標(biāo)本取材按照各病變部位、性質(zhì)的不同,根據(jù)要求規(guī)范化取材。
(5)選好組織塊的切面:根據(jù)各器官的組織結(jié)構(gòu),決定其切面的走向??v切或橫切往往是顯示組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的關(guān)鍵,如長(zhǎng)管狀器官以橫切為好。
(6)保持材料的清潔:組織塊上如有血液、污物、粘液、食物、糞便等,可用水沖洗干凈后再放入固定液中。
(7)保持組織的原有形態(tài):新鮮組織固定后,或多或少會(huì)產(chǎn)生收縮現(xiàn)象,有時(shí)甚至完全變形。為此可將組織展平,以盡可能維持原形。2.固定
(1)小塊組織固定法:這是最常用的方法,從人體或動(dòng)物體取下的小塊組織,須立即置入液態(tài)固定劑中進(jìn)行固定,通常,標(biāo)本與固定液的比例為1:4~20,但組織塊不宜過大過厚,否則固定液不能迅速滲透。故取組織塊的大小一般為2.0cm×2.0cm×0.3cm。(2)注射、灌注固定法:某些組織塊由于體積過大或固定液極難滲入內(nèi)部,或需要對(duì)整個(gè)臟器或整個(gè)動(dòng)物體進(jìn)行固定。這時(shí)宜采用注射固定或灌注固定法。將固定液注入血管,經(jīng)血管分支到達(dá)整個(gè)組織和全身,從而得到充分的固定。
(3)蒸汽固定法:比較小而厚的標(biāo)本,可采用鋨酸或甲醛蒸汽固定法。如血液涂片,則應(yīng)在血片未干燥前采用鋨酸或甲醛蒸汽接觸固定。最常用的固定液有10%甲醛固定液和95%乙醇固定液。
3.脫水透明標(biāo)本經(jīng)過固定和沖洗后,組織中含有較多的水分,必須將組織塊內(nèi)的水分置換出來,這一過程叫做脫水。無論是用石蠟切片,還是用火棉膠切片,都必須除去組織中所含水分,因含水組織與石蠟、火棉膠等包埋材料不相容,常用的脫水劑為一系列不同濃度的乙醇。
脫水的步驟是:80%、90%、95%、100%各種濃度乙醇2小時(shí),此過程可用脫水機(jī)自控完成。
丙酮也是一種脫水能力很強(qiáng)的脫水劑,但因其脫水能力很強(qiáng),對(duì)組織有劇烈收縮作用,在制作科研、教學(xué)切片時(shí)一般不用該試劑。因乙醇、丙酮等不溶于石蠟,還要經(jīng)過一個(gè)能溶于石蠟的溶劑替代過程稱為透明。常用的透明劑有二甲苯、三氯甲烷、水楊酸甲酯等。
4.浸蠟、包埋
(1)使石蠟浸入組織中,取代組織中含有的透明劑。
(2)包埋:將浸蠟后的組織置于融化的固體石蠟中,石蠟?zāi)毯螅M織即被包在其中,稱蠟塊,此過程稱為包埋。5.切片和貼片
(1)修整蠟塊:可視其組織的大小,在組織邊緣約0.1~0.2cm處,切去余蠟部分,否則易造成組織皺縮不平。
(2)準(zhǔn)備好切片用具:切片刀、毛筆、眼科鑷子(彎)、漂烘溫控儀(3)安裝蠟塊:將修好的蠟塊安裝在金屬或木制持蠟器上。
(4)安裝切片刀:將切片刀安裝在切片機(jī)的刀臺(tái)上,把刀臺(tái)上的緊固螺絲旋緊,使切片時(shí)不產(chǎn)生振動(dòng),能保持一定的切片厚度。
(5)切片的厚度:切片機(jī)的厚度調(diào)節(jié)器上刻有0~50μm或0~25μm,可任意選擇其厚度,石蠟切片的厚度一般在4~6μm。(6)切片(7)鋪片:用眼科鑷子鑷起蠟帶輕輕平鋪在40~45℃的水面上,借水的張力和水的溫度,將略皺的蠟帶自然展平。
(8)貼片、烘片:待切片在恒溫水面上充分展平后,將蠟片撈到載玻片的中段處傾去載玻片上的余水,置入60~65℃恒溫箱內(nèi)或切片漂烘溫控儀的烘箱內(nèi)烤片15~30分鐘,脫去溶化組織間隙的石蠟。
6.染色和封片常用的染色方法是蘇木素-伊紅(Hematoxylin-Eosin)染色法,簡(jiǎn)稱H.E染色法。這種方法對(duì)任何固定液固定的組織和應(yīng)用各種包埋法的切片均可使用。蘇木素是一種堿性染料,可使組織中的嗜堿性物質(zhì)染成藍(lán)色,如細(xì)胞核中的染色質(zhì)等;伊紅是一種酸性染料,可使組織中的嗜酸性物質(zhì)染成紅色,如多數(shù)細(xì)胞的胞質(zhì)、核仁等在H.E染色的切片中均呈紅色。
H.E染色程序如下:脫蠟、脫苯、復(fù)水、染色、脫水、透明、封固
常規(guī)蘇木素染色中的對(duì)比染色是用伊紅,近年來在英、美國(guó)家的一些實(shí)驗(yàn)室則采用焰紅(phloxine),此外也有用桔黃G(OrangeG)、比布里希猩紅(Biebrich scarlet)、波爾多紅(Bordeaux red)等作為對(duì)比染色。伊紅為染胞質(zhì)、膠原纖維、肌纖維、嗜酸性顆粒等常用的染料。1.取材
取材的好壞,直接影響切片的質(zhì)量。醫(yī)生在取材時(shí),首先要有一把鋒利的取材刀,在切割組織時(shí)要避免取材刀來回拖拉,切取的組織塊厚薄要均勻,一般厚度以0.2 ~0.3cm為適,較容易發(fā)脆的組織如甲狀腺、肝臟、血塊、淋巴結(jié)、大塊癌組織等可適當(dāng)厚一點(diǎn),而脂肪組織、肺組織、纖維性腫瘤、平滑肌瘤等致密的或試劑不易滲入的組織應(yīng)取薄一些;淋巴結(jié)應(yīng)修掉兩側(cè)球冠,并盡量剔除周圍的脂肪組織。在取材中還應(yīng)十分注意組織內(nèi)是否有縫線或骨組織,如碰到不可避免的鈣化組織,應(yīng)與技術(shù)室講明,在切取纖維組織、肌肉、組織、胃腸道時(shí),應(yīng)注意纖維及肌肉的走向,取材時(shí)盡可能按與纖維平行走向切取為佳。2.固定
固定是技術(shù)室工作的第一步,也是在整個(gè)制片過程中無法補(bǔ)救的一步。所謂“固定”,就是組織離體后,用各種辦法使其細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)盡量接近其生活狀態(tài)時(shí)的形態(tài)結(jié)構(gòu)和位置的過程。固定的目的是為了防止組織細(xì)胞自溶與腐敗,防止了細(xì)胞內(nèi)的酶對(duì)蛋白質(zhì)的分解作用,使細(xì)胞內(nèi)的各和成分如蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物或酶類轉(zhuǎn)變?yōu)椴蝗苄晕镔|(zhì),以保持原有的結(jié)構(gòu)與生活時(shí)相仿。另外,組織固定后,均呈一定的硬化狀態(tài),增加組織 韌性,而且不易變形,有利于以后的組織處理。所以組織一旦離體必需及時(shí)固定,固定液的量應(yīng)為組織的5倍。固定的關(guān)鍵主要與固定的及時(shí)性、固定液的選擇、固定液的濃度、固定的溫度和時(shí)間有關(guān)。最常用的固定液為10%福爾馬林。筆者認(rèn)為,10%福爾馬林由于受到福爾馬林的質(zhì)量、使用時(shí)的揮發(fā)和取材時(shí)帶入的水分影響,濃度被降低致組織固定不足,而高濃度的福爾馬林,降低了對(duì)組織的穿透性,形成周圍固定好而中央固定不到的現(xiàn)象。通過實(shí)踐,本人認(rèn)為以酸性12~15%的福爾馬林最佳。大標(biāo)本(2cm厚)一般需要6~12個(gè)小時(shí),小標(biāo)本一般需要3~6個(gè)小時(shí);當(dāng)室溫低18℃時(shí),可在37℃以下的溫箱內(nèi)加溫4~6個(gè)小時(shí)。由于HE染色最佳著色PH為3.5~4.5, 中性福爾馬林對(duì)蘇木素染色有一定影響,細(xì)胞核容易發(fā)灰,核染色質(zhì)不佳。所以, 盡管中性福爾馬林對(duì)抗原有很好的保存作用,但酸性福爾馬林對(duì)絕大多數(shù)抗原來說也有很好的保存作用,所以在沒有特別處理的情況下常規(guī)HE用12~15%酸性福爾馬林也可以(每100毫升12~15%福爾馬林液內(nèi)加5毫升冰醋酸)。骨髓、結(jié)締組織固定以Bouin液為佳,經(jīng)Bouin液固定后的組織必須流水沖洗4小時(shí)以上。有條件的單位可根據(jù)不同要求選用二種或二種以上的固定液;少數(shù)單位還可建立組織冷凍庫(kù),以便適應(yīng)各種特殊的處理要求。3.水洗
固定后水洗(10~20分鐘),通常被很多人所忽視,而水洗不徹底,容易造成脫片和染色不鮮艷。對(duì)需做免疫組織化學(xué)的組織,更不應(yīng)當(dāng)忽視。福爾馬林不利于組織塊內(nèi)抗原的保存.脫水和透明
所謂脫水就是利用脫水劑將組織內(nèi)的水分置換出來,以利于有機(jī)溶劑的滲入,這一過程稱為脫水。脫水是否徹底,直接關(guān)系到組織是否能充分透明,而脫水過度(原因是組織在純酒精內(nèi)時(shí)間過久,發(fā)生組織質(zhì)地發(fā)生變化)容易造成組織發(fā)脆。造成組織發(fā)脆的原因還有加溫(溫度超過35℃)、脫水劑內(nèi)加有丙酮、浸蠟用的石蠟中二甲苯過多等等。一般我們總認(rèn)為組織發(fā)脆跟高濃度酒精有關(guān),而忽視了與低濃度的酒精關(guān)系,其實(shí)低濃度的酒精具有強(qiáng)大的穿透力,比純酒精更容易滲透到組織塊內(nèi)部使之脫水,組織如果在低濃度酒精里充分脫水,在高濃度酒精里只需脫去從低濃度到高濃度之間的水份,因此,僅需短時(shí)間就可完成,如果這時(shí)不縮短純酒精的時(shí)間,便會(huì)引起組織發(fā)脆;如果脫水時(shí)加溫,使用丙酮,還可引起組織收縮,并影響免疫組織化學(xué)的標(biāo)記。為了使石蠟浸入到組織塊內(nèi),必須經(jīng)過一種既能與脫水劑混合,又能與石蠟相溶的媒介物質(zhì),這個(gè)過程稱透明。目前最好的透明劑是二甲苯。很多人認(rèn)為二甲苯極容易使組織發(fā)脆,這個(gè) 觀點(diǎn)很片面,在常溫下,如果不是時(shí)間過長(zhǎng)(超過24小時(shí)以上)二甲苯并不會(huì)引起組織過份發(fā)脆,相反會(huì)使某些組織結(jié)構(gòu)比較質(zhì)韌的組織:比如子宮肌瘤等相當(dāng)好切),但是當(dāng)二甲苯溫度超過35℃以后,極易引起組織發(fā)脆。所以本人認(rèn)為,大小標(biāo)本最好分開脫水,一般情況下,大標(biāo)本脫水時(shí)間(室溫18℃)以80%酒精2小時(shí)、95%酒精(2道)各1個(gè)半小時(shí)至2小時(shí)、純酒精(3道)各1個(gè)半小時(shí)至2小時(shí),二甲苯(2道)各30-60分鐘為宜;小標(biāo)本脫水時(shí)間應(yīng)相應(yīng)縮短。脫水時(shí)間長(zhǎng)短,與室溫高低有密切的相關(guān)。我們?cè)趯?shí)踐中發(fā)現(xiàn),室溫在12~15℃時(shí),可作為一個(gè)臨界溫度范圍。當(dāng)室溫高于此溫度范圍時(shí),組織容易脫水,可適當(dāng)縮短脫水時(shí)間;而室溫低于該溫度范圍時(shí),應(yīng)適當(dāng)延長(zhǎng)脫水時(shí)間(如能保證在一個(gè)恒定的溫度下最佳)。更換試劑,應(yīng)以量為基礎(chǔ),定量更換,不能等到切片不好時(shí)再去更換。否則,至少會(huì)有2~3批組織切片不好。根據(jù)我科經(jīng)驗(yàn),如試劑用量為500ml,每500個(gè)蠟塊更換一次為宜。5.浸蠟
組織透明后,在熔化的石蠟內(nèi)浸漬的過程稱為浸蠟。用其他浸透劑(如火棉膠、明膠等)滲入組織內(nèi)部的過程可稱為浸透或透入。浸蠟溫度過高(超過60℃),在蠟內(nèi)加入二甲苯蠟或由于透明時(shí)帶進(jìn)的二甲苯過多,都會(huì)導(dǎo)致組織發(fā)硬,還會(huì)使組織內(nèi)的抗原受到破壞;所以作者主張浸蠟用的石蠟熔點(diǎn)在56℃(三道),第一道:石蠟30分鐘;第二道:石蠟90分鐘;第三道:石蠟,90分鐘。浸蠟溫度控制在56~58℃左右。(第一道也可用硬脂酸石蠟1:3混合浸蠟,不僅可軟化組織,特別適用于比較韌、硬的組織,而且由于硬脂酸是弱酸性的,對(duì)細(xì)胞核有媒染作用,核漿比鮮明,但容易脫片;同時(shí)對(duì)疏松組織容易散片)。有條件的可以每天打開第一道石蠟的蓋子,讓二甲苯揮發(fā)。浸蠟所用的石蠟如有雜質(zhì)盡可能過濾,以防附在組織上,造成切片刀刀口受損,或切片破碎和劃痕增多。6.包埋
用包埋劑來支持組織的過程稱包埋。最常用的是石蠟包埋法。包埋的關(guān)鍵一是平整,二是方位。要求在包埋時(shí),應(yīng)采用鑷子輕壓組織塊拱起部份,使之平貼于底部,通常采用組織的最大面包埋。囊壁、管腔組織應(yīng)豎直包埋。小塊多顆組織,應(yīng)盡量放在一起,并保證在一個(gè)平面上。修去兩邊的余蠟(所謂的兩邊,指切片時(shí)與切片刀垂直的兩側(cè))。包埋時(shí)還應(yīng)注意有無縫線,紙絮,如有一定要去除。胃黏膜活檢標(biāo)本,不能按一般的規(guī)律取最大包埋面,應(yīng)采取窄面豎起包埋。包埋的蠟更應(yīng)過濾,留有雜質(zhì)的石蠟,容易造成污染或刀口受損。蠟的熔點(diǎn)應(yīng)在56~58℃之間選擇,不提倡在冬天使用軟蠟。因?yàn)橛?軟蠟包埋的蠟塊,到了夏天,會(huì)粘在一起,不利于資料的保存,而且即使在冬天,用硬蠟包埋的蠟塊也比用軟蠟包埋的蠟塊要好切。7.磨刀
要想切好一張切片,首先要有一把鋒利的切片刀。磨刀是從事切片技術(shù)人員的一項(xiàng)最基本技術(shù),刀磨的好壞,直接關(guān)系到切片的質(zhì)量。磨刀的手法各人不同,但都要求用力均勻,使刀口和磨刀石全面接觸,兩手的用力點(diǎn)應(yīng)在刀口上,而不是在刀背上。切片刀應(yīng)用一次磨一次,每次僅需10~15分鐘,過長(zhǎng)時(shí)間的磨刀,容易把已經(jīng)磨出的鋒刃磨掉,檢查切片刀是否鋒利,用手試摸刀口的方法并不十分科學(xué),不僅不能證明切片刀是否真正鋒利,而且容易損害刀口,最簡(jiǎn)單的辦法是每次磨好后拿一個(gè)蠟塊試切一下。每次磨好刀后,應(yīng)將磨刀石用蓋子蓋好,以防灰塵掉在磨刀石上,用有灰的磨刀石磨刀,會(huì)使切片刀產(chǎn)生許多細(xì)小的缺口?,F(xiàn)在很多單位都買了磨刀機(jī),磨刀機(jī)用來開刀鋒和磨缺口的確不錯(cuò),但由于磨刀的角度和時(shí)間不易精確掌握,故效果并不理想。根據(jù)我們的經(jīng)驗(yàn),真正的鋒刃很難用機(jī)器磨出來。一次性刀片在很大程度上解決了這個(gè)問題。如用一次性刀片,必須及時(shí)更換刀口。一個(gè)刀口切小標(biāo)本不應(yīng)超過20~25只蠟塊,切大標(biāo)本不應(yīng)超過10~15只蠟塊。8.切片
切片的第一步必需粗切。粗切的厚度大約在50~100微米左右,質(zhì)地較硬的組織或較小的組織應(yīng)再薄一些,粗切致組織全部暴露后,才進(jìn)行細(xì)切。細(xì)切至組織塊表面均勻一致,無白點(diǎn)后,再把切的蠟片放入溫水中。切片時(shí)要求用力均勻、柔和,搖速不易過快或過慢。過快會(huì)導(dǎo)致切片厚薄不均,機(jī)器磨損;過慢會(huì)使切片增厚。切片厚度一般為3~5微米。切片的要求是完整、薄、均勻。切下的片膜其大小形狀應(yīng)與組織塊一致,切片的不完整,常會(huì)將重要病變遺漏,導(dǎo)致誤診、漏診。在切片放蠟塊時(shí),應(yīng)注意組織包埋的方向,組織的層次,纖維、肌肉等的走向應(yīng)與切片刀平行,較難切的部分應(yīng)放在上面,如皮膚的表皮,腫塊的包膜,胃腸道的漿膜等,這樣可以減少組織的斷裂現(xiàn)象。操作切片機(jī)時(shí)應(yīng)用力均勻,避免用力過重。對(duì)脫鈣組織、骨髓,以及已知的鈣化組織,應(yīng)選用固定的刀口,以減少其他部位出現(xiàn)缺口的可能性。在使用毛筆展片時(shí)要防止筆絲進(jìn)入刀口,因?yàn)槊壳械揭桓P絲,就會(huì)增加一個(gè)缺口。切片厚度一般為4~6微米,有人認(rèn)為:只要切片機(jī)刻度標(biāo)著幾個(gè)微米,切出來的片子就是幾個(gè)微米。其實(shí)不然,當(dāng)切片刀不鋒利,或切片時(shí)速度不勻,或切的較慢時(shí),切的片子都會(huì)變厚,只有在切片刀十分鋒利、切片勻速的情況下,才能真正保證其厚度。下面是切片時(shí)碰到的問題的原因及可 能處理的方法:(1)組織發(fā)脆:一般是脫水、透明、浸蠟時(shí)間過長(zhǎng)、溫度過高,并與組織本身質(zhì)地也有關(guān),在切片時(shí),邊切邊用嘴向蠟片吹氣,可能會(huì)好些。(2)切片卷起,可能是刀不鋒利,或刀鋒在另一面,或刀角度過大,切片太厚等等。(3)蠟片彎曲:可能是刀鋒不均,切片刀未磨直,切片刀與蠟塊不平行。(4)透明、浸蠟時(shí)間過長(zhǎng)、溫度過高,并與組織本身質(zhì)地也有關(guān)(5)厚薄不均:可能是刀、刀座及蠟塊未夾緊,組織太硬,或切片機(jī)主軸太向前,或切片機(jī)已磨損。(6)切片出現(xiàn)裂痕:可能是刀有缺口,石蠟內(nèi)有雜質(zhì),組織內(nèi)有鈣化、骨片或有線結(jié), 也可能會(huì)有棉紙纖維等。(7)切片不連片,切不下片,切片很厚,或者切片后蠟塊發(fā)白,內(nèi)陷:組織脫水不佳。補(bǔ)救辦法:可先將蠟塊溶解,取出組織,放入加熱水浴的丙酮內(nèi)(80℃),30~60分鐘,再進(jìn)行透明浸蠟包埋切片,也許會(huì)好一點(diǎn)。9.展片與撈片
展片水溫應(yīng)在42℃至47℃之間,這主要和包埋蠟的熔點(diǎn)有關(guān),水溫過高,會(huì)引起組織細(xì)胞散開,水溫過低,切片皺摺無法攤平。包埋蠟中如有二甲苯,也會(huì)造成石蠟溶解現(xiàn)象。而用一次性刀片切的片子,一碰到熱水,片子上的皺摺就無法再展開,這有二個(gè)方法可以解決:第一、可以在切片時(shí)邊切邊向蠟片吹氣,這樣的片子就會(huì)非常平整,放到熱水里就會(huì)自然展開,比較方便快捷,但這樣的片子會(huì)略微厚一點(diǎn);第二、在切完片子后,先把切片放在30%酒精水溶液中,讓酒精的張力自動(dòng)把皺摺展開,然后再將切片移到熱水,這樣的片子會(huì)較薄;如酒精濃度過高,容易引起切片破碎,出現(xiàn)裂隙,像脂肪之類細(xì)胞間粘附性較小的組織一碰到酒精就會(huì)散開,故不能用此法。最后撈片時(shí)玻片要干凈,要選擇那些完整、無皺摺的切片,粘貼于玻片中1/3和下1/3的中間。10.烤片和脫蠟
烤片,一般在60℃的溫箱內(nèi)烤片0.5~1小時(shí)左右,溫度過高,會(huì)引起切片細(xì)胞收縮;時(shí)間太短(少于20分鐘),容易造成脫片。脫蠟也相當(dāng)重要,如果脫蠟不干凈,切片不易著色或著色不勻,所以,脫蠟用的二甲苯要經(jīng)常更換,一般用3道二甲苯,每500ml液體,處理500張切片后更換一次為宜。當(dāng)室溫低于18℃時(shí),必須將切片從溫箱拿出后立即放入二甲苯中脫蠟,或?qū)⒍妆椒湃霚叵鋬?nèi)預(yù)熱(37℃左右)脫蠟,最高不得超過60℃。然后經(jīng)高濃度的酒精到低濃度的酒精洗去二甲苯,至水。11.染色
蘇木素染色時(shí)間要根據(jù)染料的新舊、溫度、切片的類型而定,一般為5-15分鐘。經(jīng)水略洗后,用鹽酸酒精分化,分化程度必須用顯微鏡控制。分化水洗后,可用溫水或 自來水藍(lán)化,并充分水洗(流水沖洗5分鐘以上),以防鹽酸殘留導(dǎo)致切片褪色。我們不提倡使用堿性溶液(釋氨水、肥皂水等)促藍(lán),盡管藍(lán)化效果很好,但從實(shí)踐的結(jié)果來看,用堿性溶液促藍(lán)的切片不能長(zhǎng)期保存,容易褪色。最后入伊紅復(fù)染(5-20秒)。HE染色的關(guān)鍵在于深淺適度,對(duì)比鮮明,一般有經(jīng)驗(yàn)的,肉眼就能判斷,但偶而也會(huì)出現(xiàn)失誤,所以用顯微鏡控制是最保險(xiǎn)的方法。其關(guān)鍵的步驟在于蘇木素染好后的分化及藍(lán)化過程,在藍(lán)化結(jié)束后,應(yīng)在顯微鏡下觀察細(xì)胞核著色是否合適,核結(jié)構(gòu)是否清晰,胞漿內(nèi)是否有殘留的蘇木素等等。染色理想的切片在顯微鏡下應(yīng)是:細(xì)胞核與細(xì)胞漿應(yīng)藍(lán)紅相映,鮮艷美麗;核漿對(duì)比明顯,核膜及核染色質(zhì)顆粒清晰可見。12.脫水和封片
切片脫水應(yīng)從低濃度的酒精到高濃度的酒精,80%酒精1道,95%酒精2道,純酒精2道,(正丁醇1道),二甲苯2道。濃度低的酒精比濃度高的酒精更容易脫水,但也容易使伊紅退色,故脫水時(shí)間可短一點(diǎn),每道3-5分鐘,純酒精每道10分鐘。為增加酒精與二甲苯的相融性,可在二甲苯前面增加一道正丁醇;石碳酸-二甲苯液也有此效,但用石碳酸時(shí)如不洗凈,可引起切片退色,不利于切片久存,故不作推薦。切片經(jīng)二甲苯透明后,用中性樹膠封固。為增加切片的透明度,防止細(xì)胞收縮、龜裂或切片出現(xiàn)黑色結(jié)晶樣小點(diǎn)。所以我們規(guī)定切片必須濕封,不得用溫箱烤干或電吹風(fēng)吹干后干燥封片。在南方冬春、霉雨季節(jié),封片時(shí)要防止口鼻呼出的氣體接觸到切片;在天氣較潮濕的日子里,不宜一次將多張切片取出待封,以免切片“還潮”,形成透明不佳,出現(xiàn)云霧狀水珠。脫水劑的更換也應(yīng)有一定的時(shí)間規(guī)定。一般是每500ml液體,處理500張切片后更換一次為宜。封片樹膠不能過稀,封片時(shí)樹膠要均勻充滿蓋玻片且樹膠不及外溢為佳。要將組織全部覆蓋,也不能有氣泡。最后,粘貼標(biāo)簽,標(biāo)簽必須貼于玻片左側(cè),編號(hào)書寫清楚,最好能打印。
第四篇:組織病理切片的制作過程上
組織病理切片的制作過程上
1.取材組織取材的方法是制作切片的一個(gè)重要程序,根據(jù)教學(xué)、科研及外檢的具體要求取自人體(外科手術(shù)切除標(biāo)本、活檢標(biāo)本、尸檢標(biāo)本)或動(dòng)物,并確定取材的部位和方法。取材者需要掌握解剖學(xué)、組織學(xué)、病理學(xué)的基本理論知識(shí),還要掌握實(shí)際操作技術(shù),每個(gè)組織器官的取材都有一定的部位和方法,不能任意切取組織作為制片材料,不然,無法達(dá)到教學(xué)、科研和臨床診斷的目的,具體要求如下:(1)材料新鮮:取材組織愈新鮮愈好,人體組織一般在離體后,動(dòng)物組織在處死后迅速固定,以保證原有的形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)。(2)組織塊的大?。核〗M織塊較理想的體積為2.0cm×2.0cm×0.3cm,以使固定液能迅速而均勻地滲入組織內(nèi)部,但根據(jù)制片材料和目的不同,組織塊的較理想體積也不同,如制作病理外檢、科研切片,其組織塊可以薄取0.1~0.2cm即可,這樣可以縮短固定脫水透明的時(shí)間,若制作教學(xué)切片厚取0.3 ~0.5cm,這樣可以同一蠟塊制作出較多的教學(xué)切片。(3)勿擠壓組織塊: 切取組織塊用的刀剪要鋒利,切割時(shí)不可來回銼動(dòng)。夾取組織時(shí)切勿過緊,以免因擠壓而使組織、細(xì)胞變形。(4)規(guī)范取材部位: 要準(zhǔn)確地按解剖部位取材,病理標(biāo)本取材按照各病變部位、性質(zhì)的不同,根據(jù)要求規(guī)范化取材。(5)選好組織塊的切面:根據(jù)各器官的組織結(jié)構(gòu),決定其切面的走向??v切或橫切往往是顯示組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的關(guān)鍵,如長(zhǎng)管狀器官以橫切為好。(6)保持材料的清潔:組織塊上如有血液、污物、粘液、食物、糞便等,可用水沖洗干凈后再放入固定液中。(7)保持組織的原有形態(tài):新鮮組織固定后,或多或少會(huì)產(chǎn)生收縮現(xiàn)象,有時(shí)甚至完全變形。為此可將組織展平,以盡可能維持原形。
2.固定(1)小塊組織固定法:這是最常用的方法,從人體或動(dòng)物體取下的小塊組織,須立即置入液態(tài)固定劑中進(jìn)行固定,通常,標(biāo)本與固定液的比例為1:4~20,但組織塊不宜過大過厚,否則固定液不能迅速滲透。故取組織塊的大小一般為2.0cm×2.0cm×0.3cm。(2)注射、灌注固定法:某些組織塊由于體積過大或固定液極難滲入內(nèi)部,或需要對(duì)整個(gè)臟器或整個(gè)動(dòng)物體進(jìn)行固定。這時(shí)宜采用注射固定或灌注固定法。將固定液注入血管,經(jīng)血管分支到達(dá)整個(gè)組織和全身,從而得到充分的固定。(3)蒸汽固定法:比較小而厚的標(biāo)本,可采用鋨酸或甲醛蒸汽固定法。如血液涂片,則應(yīng)在血片未干燥前采用鋨酸或甲醛蒸汽接觸固定。最常用的固定液有10%甲醛固定液和95%乙醇固定液。2
3.脫水透明標(biāo)本經(jīng)過固定和沖洗后,組織中含有較多的水分,必須將組織塊內(nèi)的水分置換出來,這一過程叫做脫水。無論是用石蠟切片,還是用火棉膠切片,都必須除去組織中所含水分,因含水組織與石蠟、火棉膠等包埋材料不相容,常用的脫水劑為一系列不同濃度的乙醇。脫水的步驟是:80%、90%、95%、100%各種濃度乙醇2小時(shí),此過程可用脫水機(jī)自控完成。丙酮也是一種脫水能力很強(qiáng)的脫水劑,但因其脫水能力很強(qiáng),對(duì)組織有劇烈收縮作用,在制作科研、教學(xué)切片時(shí)一般不用該試劑。因乙醇、丙酮等不溶于石蠟,還要經(jīng)過一個(gè)能溶于石蠟的溶劑替代過程稱為透明。常用的透明劑有二甲苯、三氯甲烷、水楊酸甲酯等。
第五篇:論組織
論組織、強(qiáng)迫、引誘、容留、介紹賣淫案件的執(zhí)法理念
論組織、強(qiáng)迫、引誘、容留、介紹賣淫案件的執(zhí)法理念
[摘要]組織、強(qiáng)迫、引誘、容留、介紹賣淫案件具有復(fù)雜性高、牽連面廣、社會(huì)危害大等特點(diǎn)。這些特點(diǎn)需要偵辦此類案件偵查人員具有較高的業(yè)務(wù)素質(zhì)和法律意識(shí),能夠全面了解辦案的具體程序,熟練掌握運(yùn)用偵辦類似案件的具體措施。同時(shí)能夠注意辦案過程中的各類問題。本文根據(jù)對(duì)偵辦組織、強(qiáng)迫、引誘、容留、介紹賣淫案件的辦案程序、注意問題、啟示等方面對(duì)其執(zhí)法理念進(jìn)行分析、探究。
關(guān)鍵詞:賣淫案件 執(zhí)法理念 辦案程序
引言:隨著我國(guó)社會(huì)經(jīng)濟(jì)的高速發(fā)展,中國(guó)夢(mèng)理念的提出,人民群眾對(duì)于精神文明建設(shè)迫切要求。公安機(jī)關(guān)對(duì)賣淫嫖娼類案件急需新的指導(dǎo)思想和解決辦法。盡快樹立此類案件的執(zhí)法理念以應(yīng)對(duì)具體辦案過程的各種問題。
一,組織、強(qiáng)迫、引誘、容留、介紹賣淫案件的內(nèi)容
我國(guó)刑法第六章第八節(jié)規(guī)定了組織賣淫、強(qiáng)迫賣淫、協(xié)助組織賣淫、引誘、容留、介紹賣淫、引誘幼女賣淫、傳播性病、嫖宿幼女等七個(gè)賣淫相關(guān)聯(lián)的犯罪行為。七個(gè)罪名涉及的行為都侵犯了社會(huì)風(fēng)尚這一共同客體。但在罪質(zhì)、量刑情節(jié)和幅度等方面又存在很大差異。
二,組織、強(qiáng)迫、引誘、容留、介紹賣淫案件的特點(diǎn)
首先,組織、強(qiáng)迫、引誘、容留、介紹賣淫案件具有組織嚴(yán)密的特點(diǎn)。其表現(xiàn)在三個(gè)方面。第一,涉案人員數(shù)較多,但幕后組織者往往是少數(shù)的幾個(gè)人甚至一個(gè)人。第二,內(nèi)部分工細(xì)致,相互之間上通下達(dá),銜接無縫。第三,管理規(guī)范,制度健全,運(yùn)行機(jī)制流暢。
其次,組織、強(qiáng)迫、引誘、容留、介紹賣淫案件具有活動(dòng)隱蔽的特點(diǎn)。第一,招工方式隱蔽,多以招聘普通職員為旗號(hào),以高薪吸引應(yīng)招者。第二,招嫖方式以網(wǎng)絡(luò)、移動(dòng)通信、即時(shí)聊天工具為主。第三,賣淫活動(dòng)分地、分時(shí)間進(jìn)行,流動(dòng)性較大。
然后,組織、強(qiáng)迫、引誘、容留、介紹賣淫案件具有暴利性的特點(diǎn)。賣淫活動(dòng),投入低,獲益多,并且往往能夠帶活其他經(jīng)營(yíng)活動(dòng)。
并且,組織、強(qiáng)迫、引誘、容留、介紹賣淫案件往往是“案中案”。該類案件一般會(huì)牽連出強(qiáng)奸、非法拘禁、傳播淫穢物品、涉黑案件、故意殺人、故意傷害等案件。
最后,組織、強(qiáng)迫、引誘、容留、介紹賣淫案件具有腐蝕性的特點(diǎn)
在此類案件中組織賣淫行為人為了更順利地實(shí)施犯罪、逃避法律制裁,會(huì)收買一些國(guó)家工作人員給予保護(hù),特別是向公安民警行賄,為自己尋求“保護(hù)傘”
三,組織、強(qiáng)迫、引誘、容留、介紹賣淫案件的具體辦案程序
(一)線索搜集
隨著經(jīng)濟(jì)的不斷發(fā)展,賣淫嫖娼現(xiàn)象也是日益嚴(yán)重,分布廣泛。犯罪“黑數(shù)”十分巨大。公安機(jī)關(guān)發(fā)現(xiàn)、打擊的知識(shí)很少的一部分。很多賣淫嫖娼的組織和活動(dòng)都還未發(fā)現(xiàn)。因此要注重對(duì)于賣淫嫖娼案件的線索搜集。
為此,可以通過場(chǎng)所管理進(jìn)行搜集,對(duì)酒吧、洗浴中心、旅館、飯店等敏感場(chǎng)所 1
加強(qiáng)日常管理,規(guī)范這些場(chǎng)所的日常管理制度。還應(yīng)該對(duì)城鄉(xiāng)結(jié)合部、公園等地區(qū)進(jìn)行巡查管理。同時(shí),注重群眾的舉報(bào),實(shí)地調(diào)查發(fā)現(xiàn)。并且,發(fā)揮好治安聯(lián)防組織和治保組織的作用,了解轄區(qū)的治安狀況。還有可以通過以案尋案,依靠之前辦理的案件進(jìn)行線索搜集。最后結(jié)合網(wǎng)監(jiān)部門、秘密力量搜集到有效的信息。
(二)認(rèn)真受案
受案記錄要清晰,關(guān)于案件的要素盡可能問全、問細(xì)。全面把握案件的具體情況。其次詢問其他涉案人員或知情人。記下舉報(bào)人、控告人、報(bào)案人的通訊方式等聯(lián)系方式以及家庭地址。
還要注意案件的管轄,此類案件歸案件發(fā)生地管轄。
(三)初查(明查暗訪)
1,暗訪。
(1)暗訪需要經(jīng)過公安機(jī)關(guān)領(lǐng)導(dǎo)的批準(zhǔn)。
(2)同時(shí)制定暗訪工作的預(yù)案。包括任務(wù)、時(shí)間、地點(diǎn)、參加人員、取證工具、經(jīng)費(fèi)預(yù)算等。
(3)宣布和遵守暗訪紀(jì)律,包括暗訪人數(shù)的要求、人員性別年齡要求、化妝的標(biāo)準(zhǔn)。以及暗訪人員心理素質(zhì)、身體素質(zhì)、業(yè)務(wù)素質(zhì)的要求。還有暗訪工作中的具體分工以及行動(dòng)流程。
(4)暗訪后及時(shí)形成暗訪報(bào)告、反饋意見。并且詳細(xì)繪制現(xiàn)場(chǎng)平面圖。
(5)走訪證人,做好證人及其親屬的保護(hù)工作。
(6)調(diào)查涉案場(chǎng)所和組織行為人的資產(chǎn)和賬戶。
2,明查(擴(kuò)大初查戰(zhàn)果)
(1)制定預(yù)案,行動(dòng)方案。
(2)部署充分、精干的警力。包括警力的人數(shù)、性別、職能。
(3)通信聯(lián)絡(luò)器材、移動(dòng)終端、聯(lián)絡(luò)暗號(hào)。一定要保障高效暢通。
(4)參加清查、搜查隊(duì)伍自身要強(qiáng)化自身防范意識(shí)、安全意識(shí)。責(zé)任意識(shí)。準(zhǔn)備充分。
(5)隨身攜帶的武器要鎖好保險(xiǎn),防止發(fā)生意外。
(6)準(zhǔn)備好搜查場(chǎng)所、人身的法律工具、行動(dòng)要走法律程序。符合法律的相關(guān)規(guī)定。包括適用法律的條件、法律的相關(guān)手續(xù)以及法定程序。要亮明身份、不許異性搜身??垩何锲芬?jīng)過指揮員決定,開具《扣押物品清單》同時(shí)要有見證人見證。
(7)及時(shí)收集賣淫行為發(fā)生的證據(jù)和組織、強(qiáng)迫、引誘、容留、介紹賣淫刑事犯罪的證據(jù)。取證方向是,控制涉案人員、控制重點(diǎn)位置、控制重點(diǎn)物品以及凍結(jié)賬戶。重點(diǎn)的位置包括服務(wù)臺(tái)客房?jī)?nèi)的“暗門”和“暗鈴”。重點(diǎn)人物是指“媽咪”和“領(lǐng)班”
(8)慎用技術(shù)偵查措施,使用技術(shù)偵查手段要嚴(yán)格履行審批手續(xù)。音像資料要避開化妝偵查人員的身影和聲音。注意暗訪資料向合法證據(jù)的合理轉(zhuǎn)化。
3,證據(jù)的收集。
(1)收集關(guān)于犯罪主體方面的證據(jù),包括犯罪嫌疑人的居民身份證和旅店的營(yíng)業(yè)執(zhí)照
(2)收集關(guān)于組織賣淫的客觀方面的證據(jù),包括現(xiàn)場(chǎng)勘查筆錄和現(xiàn)場(chǎng)照片(暗道、報(bào)警設(shè)備等)廣告、宣傳冊(cè)(服務(wù)項(xiàng)目表,價(jià)格表)發(fā)票、收據(jù)、賬單。參與嫖娼人員的證人證言。聯(lián)系的電話記錄、通信記錄。犯罪嫌疑人的口供。押金和票據(jù)。
(3)訊問犯罪嫌疑人,首先要制定訊問提綱、確定訊問戰(zhàn)術(shù)。其次,告知犯罪嫌疑人的法律權(quán)利。堅(jiān)決禁止任何方式的刑訊逼供。問清犯罪嫌疑人是否屬于未成年人、精神病人和懷孕或正在哺乳自己的未滿一周歲嬰兒的婦女。為聾啞人、外國(guó)人、需要翻譯的配備啞語翻譯、外語翻譯和方言翻譯。必要時(shí)可以要求犯罪嫌疑人自行書寫供詞或犯罪嫌疑人自己提出書寫供詞。
4,偵查終結(jié)。
(1)偵查終結(jié)的條件。首先,偵查終結(jié)的條件有案件事實(shí)清楚,主要事實(shí)查清,包括犯罪嫌疑人的身份、具體實(shí)施組織、策劃、指揮行為的組織賣淫犯罪的首要分子、在賣淫犯罪中起協(xié)助作用的保鏢、打手、管賬人等。賣淫行為是否存在、時(shí)間、地點(diǎn)和手段以及造成的嚴(yán)重后果。其次,證據(jù)確實(shí)充分。要把關(guān)于賣淫案件的書證、物證、證人證言等各項(xiàng)證據(jù)收起。保證證據(jù)量,形成足夠證明力的證據(jù)鏈。再而,案件性質(zhì)和罪名認(rèn)定正確。區(qū)分好此罪彼罪,這樣偵查部門對(duì)案件作出的處理才能具有實(shí)體法的依據(jù)。最后,法律手續(xù)完備。即對(duì)法律規(guī)定的辦案程序和應(yīng)履行的法律手續(xù)必須完備,在適應(yīng)技術(shù)偵查手段時(shí)要經(jīng)過必要的審批程序。
(2)對(duì)偵查終結(jié)的案件處理。首先,對(duì)案件的處理。對(duì)偵查終結(jié)的案件,偵查人員應(yīng)提起訴訟意見,并制作起訴意見書,經(jīng)縣級(jí)公安機(jī)關(guān)負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)后,連同案卷材料。證據(jù),一并移送同級(jí)人民檢察院審查起訴。其次,對(duì)扣押武平的處理。對(duì)能夠證明犯罪事實(shí)的物品,淫穢器具、收入賬目等書證、視聽資料等,應(yīng)當(dāng)移送檢察機(jī)關(guān)。移送時(shí),偵查人員應(yīng)當(dāng)制作隨案移交物品清單,注明物品的名稱、數(shù)量、特征等。不宜移送的犯罪嫌疑人的財(cái)物,可以進(jìn)行沒收后上交國(guó)庫(kù),違禁物品應(yīng)當(dāng)拍照隨卷后進(jìn)行銷毀。與案件無關(guān)的物品應(yīng)當(dāng)發(fā)還給當(dāng)事人。
四,組織、強(qiáng)迫、引誘、容留、介紹賣淫案件偵辦中應(yīng)該注意的問題
(一)在賣淫案件中,要注意組織他人賣淫,情節(jié)嚴(yán)重;強(qiáng)迫不滿十四周歲的幼女賣淫;強(qiáng)迫多人賣淫或者多次強(qiáng)迫他人賣淫;強(qiáng)奸后迫使賣淫;造成被強(qiáng)迫賣淫的人重傷、死亡或者其他嚴(yán)重后果。這幾種情節(jié)特別嚴(yán)重的情況。
(二)在協(xié)助組織賣淫案件中要注意伴有的其他犯罪行為。如搶劫、強(qiáng)奸、傷害、介紹賣淫等犯罪行為。以配合、呼應(yīng)、協(xié)助組織賣淫者的組織、策劃、指揮活動(dòng)。
(三)在引誘、容留、介紹賣淫案件中要注意與拐賣人口販毒賣淫嫖娼案件之間的聯(lián)系。
(四)在引誘幼女賣淫案件中。其罪的主觀方面是否以牟利為目的,不影響罪的成立。
(五)在傳播性病案件中,經(jīng)查是賣淫嫖娼的再進(jìn)行性病檢查。其中,犯罪嫌疑人必須是明知自己有性病的。認(rèn)定“明知”一是有證據(jù)證明曾到醫(yī)院就醫(yī),被診斷為患有嚴(yán)重性病的。二是根據(jù)本人的知識(shí)和經(jīng)驗(yàn),能夠知道自己患有嚴(yán)重性病的。三是通過其他方法能夠證明犯罪嫌疑人是明知的。
(六)在嫖宿幼女案件中,主觀上必須是知道或可能是不滿十四周歲幼女而嫖宿的。
五,組織、強(qiáng)迫、引誘、容留、介紹賣淫案件的執(zhí)法理念的啟示。
在近年來,公安部門所發(fā)現(xiàn)的組織、強(qiáng)迫、引誘、容留、介紹賣淫案件,如東莞打丑、北京“天上人間”鄭州的“皇家一號(hào)”等案件。都呈現(xiàn)出規(guī)模大,隱蔽強(qiáng),管理企業(yè)化,經(jīng)營(yíng)產(chǎn)業(yè)化,有高官充當(dāng)保護(hù)傘的特點(diǎn)。這就需要我們公安機(jī)關(guān)能
夠建立相對(duì)應(yīng)的警務(wù)決策機(jī)制、執(zhí)行機(jī)制、監(jiān)督機(jī)制、反饋機(jī)制。建立專門的隊(duì)伍。開展各項(xiàng)專項(xiàng)行動(dòng)。對(duì)此類犯罪行為預(yù)防打擊。
結(jié)語,組織、強(qiáng)迫、引誘、容留、介紹賣淫案件的執(zhí)法理念應(yīng)該緊隨時(shí)代潮流。打擊此類案件刻不容緩,不僅是建設(shè)社會(huì)主意法治社會(huì)的要求,也是人民群眾的共同期待。
參考文獻(xiàn)
《治安部門管轄刑事案件偵查教程》 商小平主編
《治安案件查處》 商小平主編
《中華人民共和國(guó)刑事訴訟法注釋本》 夏紅主編
《治安部門管轄刑事案件偵查》 彭文主編
《偵查理論與實(shí)務(wù)研究》 程小白主編